CN102417545B

CN102417545B - 一种高等植物或食药用真菌类中活性多糖的提取方法

Info

Publication number: CN102417545B
Application number: CN 201110342660
Authority: CN
Inventors: 张劲松; 李明天; 许磊; 刘志宇
Original assignee: SHENZHEN CONSYS SCIENCE TECHNOLOGY Co Ltd
Current assignee: Zhang Jinsong
Priority date: 2011-11-03
Filing date: 2011-11-03
Publication date: 2013-07-24
Anticipated expiration: 2031-11-03
Also published as: CN102417545A

Abstract

本发明涉及一种高等植物或食药用真菌类中活性多糖的提取方法，具体为：在原料中加入有机酸或有机\无机混酸溶液;加热物料,利用有机酸分子将活性多糖从原料上分离下来，并适度切断植物高分子活性多糖的糖苷键，实现其部分降解；采用蒸馏、过滤或离心方法，排除物料中大部分酸溶液,然后用有机溶剂洗涤除去少量残余的酸液；经有机酸处理的原料，加入约5-15倍体积水进行提取，提取液浓缩后醇沉可得活性粗多糖；粗多糖溶于5-15倍体积去离子水中，调节溶液的pH至中性，离心，上清液经透析或膜分离后，浓缩，干燥得到平均分子量低、多糖分子量分布窄、水溶性好的活性多糖产品，同时克服现有工艺耗水、耗能、产物收率低等诸多缺点。

Description

一种高等植物或食药用真菌类中活性多糖的提取方法

技术领域

本发明涉及天然产物有效成分的提取领域，具体地来说是一种高等植物或食药用真菌类中活性多糖的高效提取方法。

背景技术

多糖是由多个单糖分子以糖苷键结合而成的天然大分子化合物，是构成生命的基本物质之一。近二十年来，随着分子生物学和细胞生物学的发展，人们发现多糖具有多种生物学功能，多糖及其缀合物参与了细胞中的各种生命活动，如细胞特异性识别，组成细胞表面各种抗原和药物的受体，激活免疫细胞等，因此，多糖研究引起了人们极大的兴趣。多糖按其来源一般可分为真菌多糖、高等植物多糖、动物多糖、藻类多糖、细菌多糖等。其中食药用真菌多糖和高等植物多糖在我国有着悠久的应用历史，而且资源十分丰富，现已成为关注和研究的热点。现代药理学研究表明，这两类多糖具有非常重要与特殊的生理活性，在促进机体免疫力、抗菌、抗病毒、抗寄生虫、抗肿瘤、抗辐射、抗血栓、抗凝血、抗衰老、抗炎、降低血脂及改善动物生产性能等方面都有明确的作用。而且，大多数多糖没有直接细胞毒性，许多甚至可以长期服用。高等植物和食药用真菌类活性多糖已成为目前最具发展前途的医疗保健资源之一。

多糖的生物活性在很大程度上决定了多糖的利用价值。多糖的构成组分、构成方式及空间构象、多糖的分子量大小与分布范围以及多糖的水溶性等是影响多糖生物活性的主要因素。大量的研究表明，活性多糖分子量大小是其具备生物活性的必要条件。活性多糖分子量越大，分子表观体积越大，不利于多糖跨越多重细胞膜障碍进入生物体内发挥生物学活性。而多糖的水溶性是其发挥生物学活性的另一个重要条件。

由于多糖的结构十分复杂，致使其合成异常困难，目前活性多糖全部由天然产物提取而得。高等植物多糖和食药用真菌多糖就是从不同的植物或同种植物的不同部位以及食用真菌与药用真菌的子实体、菌丝体与菌丝发酵液中提取分离而来。多糖的提取分离纯化目前尚无公认、有效、统一的方法，现有的工艺一般可概括为水提法、酸提法、碱提法、盐提法以及酶法辅助提取等。这些方法无论在多糖提取效率、生产过程的清洁性、能耗与物耗，还是在多糖活性控制等方面存在着明显不足，所得多糖产品的科技含量也不高，具体表现在：多糖物质纯度低、水溶性差、分子量过于分散而难以得到均一组分等方面，制约了多糖的高附加值应用。具体地说，现有方法主要有以下问题：

水浸提法一般耗时长，能耗高、浸提溶剂使用量大、多糖提取率低；

酸碱提取所用无机强酸、强碱的用量和反应时间都不好掌控，极易破坏多糖分子的活性，甚至会使多糖分解成分子量更小的色素分子，加重了后续的脱色工作。而且，在反应结束后还要对酸液碱液做到迅速中和或迅速透析，否则会造成产品污染，增加产品用于食品和医药保健品的不安全性。另外，使用不能降解的无机酸碱，大规模生产时容易造成严重的环境污染。

酶法辅助提取中的酶一般价格昂贵，往往还存在容易失活，寿命短，纯度不够等缺点。在酶解过程中酶的最佳温度往往在一个很小的范围内，反应条件的微小波动，都可能使酶的活性大大降低，因此酶法提取对实验条件要求较高，甚至要求对提取原料进行十分复杂的预处理。酶法提取技术要用于工业化的多糖提取，尚需进一步的深入研究。

造成这些困难的原因有很多。一般来说，高等植物、真菌活性多糖分子量都很大，水溶性也较差。其在植物原料中含量较低，而且分布状态及分布情况复杂，有些呈游离状态，有些与蛋白质、半纤维素等其他高分子结合成复杂的缀合物，有些存在于细胞质中，有些裹夹在细胞壁中。植物细胞壁的主要成分是纤维素，另外还包括半纤维素、果胶质、木质素等物质。纤维素具有高度结晶区的超分子稳定结构，很难水解。常用的提取法只能通过大量溶剂进行长时间的浸渍，使植物细胞壁充分胀膨，其致密构造变得松散，减少有效成分从胞内向提取介质扩散的传质阻力。因此传统的提取方法需要大量的溶剂和较长的时间。简单的溶剂浸渍只能溶出胞内游离的多糖，对于胞壁多糖无能为力，所以提取率一般不高。

假如在高等植物或食药用菌活性多糖的提取中使用酸度适中的有机酸体系，就有可能通过控制工艺条件，使原料中纤维素、半纤维素、果胶质等物质发生部分降解，从而改变植物细胞壁的结构层，使胞内多糖迅速溶出的同时，细胞壁多糖也得以尽快释放。

发明内容

本发明正是涉及这样一种高效提取高等植物、食药用真菌类活性多糖的方法，即通过控制反应条件，利用有机酸体系对高等植物、食药用真菌细胞壁纤维素、半纤维素、果胶质等高分子物质的作用，实现胞内多糖和胞壁多糖的高效提取，并适度切断目标多糖分子中的糖苷键，获得性能、结构独特的活性多糖产物，同时实现工艺过程的节水、节能目的。

为了实现上述的目的，本发明采用的技术方案如下：

一种高等植物或食药用真菌类中活性多糖的提取方法，采用有机酸体系对高等植物、食药用真菌类原料处理，然后再采用水提醇沉工艺，获得水溶性活性多糖；具体为：

1)将预处理后的原料置入提取容器中，加入有机酸或有机\无机混酸溶液，充分搅拌使均匀润湿；

2)加热物料，物料重量配比为原料/有机酸溶液或有机-无机混酸溶液为5/1-1/5，加热温度为50～150℃，保温时间为10-180min，提取容器工作压力为20mmHg-760mmHg，利用有机酸分子和高等植物、食药用真菌细胞壁有机高分子物质之间的作用，将活性多糖从原料上分离下来，并适度切断高分子多糖的糖苷键，实现其部分降解；

3)采用有机溶剂洗涤除去少量残余的酸液，完成原料的有机酸处理；

4)经有机酸处理的原料，加入约5-15倍体积水进行提取，提取液浓缩后醇沉，即在浓缩后的提取液中加入乙醇，使溶于水但不溶于乙醇的多糖沉淀出来，乙醇的加入量是使多糖沉淀完全，一般为水溶液体积的3到6倍，收集沉淀部分可得到活性粗多糖；

5)活性粗多糖溶于5-15倍体积的去离子水中，调节溶液的pH至中性，离心处理，上清液经透析或膜分离后，浓缩，干燥，得到活性多糖。透析采用半透膜，半透膜的选择根据多糖产品的分子量大小而定。

有机酸溶液选自质量百分比浓度为5％-50％的草酸、质量百分比浓度为10％-99％的甲酸、质量百分比浓度为10％-99％的乙酸和质量百分比浓度为10％-99％的丙酸水溶液中一种。

无机酸选自盐酸、硫酸、硝酸和磷酸中的一种。无机酸的加入量是使有机-无机混酸中无机酸的质量百分比浓度达到0.1％-15％。

当有机酸为草酸或者有机-无机混酸中的有机酸为草酸时，步骤3)中处理后采用有机溶剂洗涤去除残留的草酸或混酸；有机酸为甲酸、乙酸、丙酸溶液或者有机-无机混酸中的有机酸为甲酸、乙酸、丙酸溶液时，处理后先采用蒸馏、抽率或离心方式去除大部分的酸液，然后采用有机溶剂进行充分洗涤除去少量残余的酸。

所述有机溶剂选自C1-C3的醇、丙酮的一种。

步骤1)中所述预处理的方法可以是将原料干燥、除杂、机械粉碎后，采用乙醇、石油醚、C1-C3的醇或乙酸乙酯进行抽提，获取其中的挥发油类、黄酮类、三萜类、皂苷类脂溶性活性物质，抽提残渣经干燥后作为下步原料。

预处理方法还可以是将原料干燥、除杂、机械粉碎后作为下步原料。对机械粉碎的目数没有要求，采用这种方法后，原料中的脂溶性活性物质可以在步骤3)的有机溶剂处理时获取。

本发明中高等植物包括黄芪、枸杞、银杏叶、木瓜、金银花、当归、陈皮、草麻黄、川穹、石菖蒲、大蒜、益智仁、白芷、艾叶、细辛、肉苁蓉、沙枣、桉叶、鱼腥草、女贞子、羌活、人参、三七、草珊瑚、车前子、水红花子、芫花、佛手、桑白皮、桑寄生、黄芩、淫羊藿、茶叶、红景天、芦荟、燕麦、魔芋、山药、天麻、柴胡、刺五加等的花、叶、种子、皮、果实、根、茎类原料；所述食药用真菌选自灵芝、木耳、香菇、猪苓、银耳、灰树花、茯苓、云芝、猴头菇、冬虫夏草的真菌子实体或菌丝体等。本发明仅仅是列举了上述的植物，但是不限于所列出的植物，对于其他高等植物，本发明的方法依然适用，并能取得本发明所取得的效果。

高等植物、食药用真菌中除了含有活性多糖外，还含有许多其他类活性物质，如三萜类、黄酮类、皂苷类等。本方法实施过程中，特别制定了针对性的工艺步骤，即根据这些活性成分与多糖在溶解性上的差别，在有机酸处理前或有机酸处理后分别用极性不同的溶剂提取，例如在预处理中选用的有机溶剂如石油醚、乙酸乙酯、或低分子量的醇都分别具有不同的极性。如实施例中用极性小的石油醚来提取挥发油，用极性稍大的醇来提取黄酮等，用极性最大的水来提取多糖，从而实现高等植物活性成分的综合利用。

本发明原理是：在一定工艺条件下，适当的有机酸体系能与高等植物的花、叶、果实、种子、皮、根茎类以及药用真菌子实体或菌丝体原料细胞壁的有机大分子物质(包括纤维素、半纤维素以及果胶)之间产生作用，将目标多糖与植物原料基体分离开来，再利用水将水溶性多糖抽提出来。另外，利用有机酸体系，还可以在相对温和的条件下，适度的断裂多糖分子中的糖苷键，将那些分子量过大、水溶性较差的目标多糖的分子结构进行适当降解，改善其固有的结构及理化性质，获得高附加值活性多糖。同时，由于原料细胞壁结构层发生变化，提取耗水量显著降低。这样，不仅显著提高了植物多糖的提取率，而且减少了提取用水，降低了浓缩提取液时的能耗，简化了工艺过程。新工艺中使用有机酸体系代替原来工艺中的无机强酸溶液和无机强碱溶液，使得反应条件变得温和、容易操控，减少了对高分子多糖活性片段的破坏。所用有机溶液容易从物料分离而且可以反复使用，减少了对多糖产物以及对周围环境的污染。同时，产物分子量的可控降低，有利其生物活性的表达。因此，本发明提供了一种高等植物或食药用真菌类中活性多糖的高效提取方法。

与现有技术相比，本发明更具有如下优点：

1.节水、减排、节能效果显著；使用有机酸体系代替原来工艺中的无机强酸溶液和无机强碱溶液，对多糖分子的活性片段破坏小，且溶剂回收简单，对环境污染小。

2.相比较于传统工艺，新工艺多糖产物收率得到显著提高，多糖含量也有明显提高。

3.提取过程中直接实现多糖分子适度降解，获得平均分子量低、多糖分子量分布窄、水溶性好的多糖产品。新工艺多糖产物作为药品和保健产品开发具有独特的优势。

附图说明

图1为本发明实施例1的工艺过程示意图。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步详细说明。

实施例1

如图1所示的工艺过程示意图所示，具体过程如下：

1)取1.5kg干燥、除杂、机械粉碎后的黄芪置于中草药提取容器中，加入10L乙醇，加热回流提取1小时，重复上述过程一次；

2)过滤，合并两次滤液并减压蒸馏回收乙醇，得富含黄酮、皂苷、香豆素等脂溶性活性成分的醇浸膏，滤渣部分烘干备用；

3)取步骤2)中烘干后的滤渣部分置于提取容器中；

4)取草酸180g，加水2.0L配成草酸溶液；

5)取上述步骤4)中的草酸溶液2L，加到步骤3)中的提取容器中，充分搅拌使滤渣均匀润湿得到混合物料；

6)步骤5)的混合物料加热至100℃，保温20min后，进行减压蒸馏，至提取容器中无液体。

7)步骤6)中提取容器中加入无水乙醇5L，充分搅拌，过滤。滤液蒸馏回收乙醇和草酸，滤渣干燥后即为有机酸处理黄芪。

8)取步骤7)中有机酸处理黄芪100克，放入1L的烧杯中，加入500ml蒸馏水，于70℃的热水浴中提取40min，过滤，重复上述过程1次，合并两次滤液。

9)步骤8)中滤液浓缩后醇沉，加入乙醇至沉淀完全析出，沉淀分离后进行干燥，得到活性粗多糖产品。

10)步骤9)活性粗多糖产品加入蒸馏水1L溶解，用氢氧化钠溶液调节pH至中性，用截留分子量为1000的半透膜进行透析。

11)步骤10)中透析后多糖溶液冷冻干燥，得活性多糖产品。

计算活性多糖提取率并测定多糖含量。多糖提取率为产物与高等植物原料的质量比的百分数，多糖含量采用硫酸-苯酚法进行测定。多糖分子量分布采用凝胶色谱仪进行测定。多糖提取率、多糖含量、多糖分子量分布以及提取用水量等数据见表1。

实施例2

与实施例1不同之处在于：

1)1.5kg经干燥、除杂、机械粉碎后木瓜置于提取容器中；

2)取无水乙酸0.8L，加水0.15L，加质量百分比浓度为5％的稀盐酸0.05L，配成乙酸\盐酸混酸溶液1L；

3)取步骤2)中混酸溶液1L，加到步骤1)的提取容器中，充分搅拌使均匀润湿得到混合物料；

4)将步骤3)的混合物料加热至80℃，保温60min后，进行减压蒸馏，至提取容器中无液体。

5)将步骤4)中的提取容器中加入5L的质量百分比浓度为95％乙醇溶液，充分搅拌，过滤，滤液蒸馏回收乙醇可得富含木瓜黄酮的醇浸膏，滤渣部分干燥后即为有机酸处理木瓜。

6)取有机酸预处理木瓜100克，放入1L的烧杯中，加入500ml蒸馏水，于70℃的热水浴中提取40min，过滤，重复上述过程1次，合并两次滤液。

7)步骤6)中滤液浓缩后醇沉，加入乙醇至沉淀完全析出，沉淀分离后进行干燥，得到活性粗多糖产品。

8)步骤7)活性粗多糖产品加入蒸馏水1L溶解，用氢氧化钠溶液调节pH至中性，用截留分子量为3000的半透膜进行透析。

9)步骤8)中透析后多糖溶液冷冻干燥，得活性多糖产品。

实施例3

与实施例1不同之处在于：

1)1.5kg经干燥、除杂、粉碎后的当归置于提取容器中，加入7L石油醚，加热回流提取1小时，重复上述过程一次；

2)过滤，合并两次滤液并减压蒸馏回收石油醚，可得当归挥发油，当归滤渣部分烘干后备用；

3)步骤2)中干燥后的当归滤渣部分置于提取容器中，加入10L乙醇，加热回流提取1小时，重复上述过程一次；

4)过滤，合并两次滤液并减压蒸馏回收乙醇，得富含当归黄酮的醇浸膏，滤渣部分烘干备用；

5)取步骤4)中烘干的当归滤渣置于提取容器中；

6)取无水丙酸0.85L，加水0.15L配成丙酸溶液1L；

7)取步骤6)中丙酸溶液1L，加到步骤5)的提取容器中，充分搅拌使均匀润湿形成混合物料；

8)步骤7)的混合物料热至130℃，保温100min后，冷却物料至室温，离心去除大部分丙酸溶液，固体部分放回提取容器中。

9)步骤8)中提取容器中加入质量百分比浓度为90％乙醇溶液5L，充分搅拌洗涤，过滤，滤液回收乙醇，滤渣部分干燥后即为有机酸处理当归。

10)取步骤9)中有机酸处理当归100克，放入1L的烧杯中，加入500ml蒸馏水，于70℃的热水浴中提取40min，过滤，重复上述过程1次，合并两次滤液。

11)步骤10)中滤液浓缩后醇沉，加入乙醇至沉淀完全析出，沉淀分离后进行干燥，得到活性粗多糖产品。

12)步骤11)活性粗多糖产品加入蒸馏水1L溶解，用氢氧化钠溶液调节pH至中性，用截留分子量为3000的半透膜进行透析。

13)步骤12)中透析后多糖溶液冷冻干燥，得活性多糖产品。

实施例4

1)取1.5kg干燥除杂、机械粉碎后的灵芝子实体置于提取容器中，加入10L无水乙醇，加热回流提取1小时，重复上述过程一次；

2)过滤，合并两次滤液并减压蒸馏回收乙醇，得富含灵芝三萜的醇浸膏，滤渣部分烘干备用；

3)取草酸100g，加水2.0L配成草酸溶液；

4)取草酸溶液2L，加到提取容器中，充分搅拌使滤渣均匀润湿形成物料；

5)步骤4)的物料加热至100℃，保温20min后，进行减压蒸馏，至提取容器中无液体，完成灵芝子实体的有机酸预处理。

6)经过预处理后的灵芝子实体1.5kg中加入无水乙醇5L，充分搅拌，过滤。滤液蒸馏回收乙醇和草酸，滤渣干燥后即为有机酸处理灵芝子实体。

7)取步骤6)中有机酸处理灵芝子实体100克，放入1L的烧杯中，加入500ml蒸馏水，于70℃的热水浴中提取40min，过滤，重复上述过程1次，合并两次滤液。

8)步骤7)中滤液浓缩后醇沉，具体是加入乙醇，加入乙醇的量至溶液中多糖沉淀完全析出，沉淀分离后进行干燥，得到活性粗多糖产品。

9)步骤10)活性粗多糖产品加入蒸馏水1L溶解，用氢氧化钠溶液调节pH至中性，用截留分子量为2000的半透膜进行透析。

10)步骤9)中透析后多糖溶液冷冻干燥，得活性多糖产品。

实施例5

与实施例1不同之处在于：

1)取1.5kg经干燥除杂、粉碎后的黑木耳子实体置于提取容器中；

2)取无水甲酸1L，加水0.45L，加质量百分比浓度为10％的硫酸溶液配成甲酸-硫酸混酸溶液1.5L；

3)取上述溶液1.5L，加到上述提取容器中，充分搅拌使均匀润湿；

4)上述物料加热至110℃，保温20min后，进行减压蒸馏，排除有机酸溶液，至提取容器中无液体，完成黑木耳子实体的有机酸预处理。

5)经过预处理后的黑木耳子实体1.5kg中加入无水乙醇5L，充分搅拌，过滤。滤液蒸馏回收乙醇和草酸，滤渣干燥后即为有机酸预处理黑木耳子实体。

6)取上述预处理黑木耳子实体100克，放入1L的烧杯中，加入500ml蒸馏水，于70℃的热水浴中提取40min，过滤，重复上述过程1次，合并两次滤液。

8)步骤7)活性粗多糖产品加入蒸馏水1L溶解，用氢氧化钠溶液调节pH至中性，用截留分子量为15000的半透膜进行透析。

9)步骤8)中透析后多糖溶液冷冻干燥，得活性多糖产品。

实施例6

与实施例1不同之处在于：

1)取1.5kg经干燥除杂、粉碎后的香菇子实体置于提取容器中；

2)取无水乙酸0.8L，加水0.2L配成乙酸溶液1L；

3)取步骤2)的乙酸溶液1L，加到步骤1)的提取容器中，充分搅拌使物料均匀润湿；

4)将步骤3)的物料加热至80℃，保温60min后，进行减压蒸馏，排除有机酸溶液，至提取容器中无液体，完成香菇子实体的有机酸预处理。

5)经过预处理后的香菇子实体1.5kg中加入无水甲醇5L，充分搅拌，过滤。滤液蒸馏回收甲醇，滤渣干燥后即为有机酸预处理灵芝子实体。

6)取步骤5)有机酸预处理香菇子实体100克，放入1L的烧杯中，加入500ml蒸馏水，于70℃的热水浴中提取40min，过滤，重复上述过程1次，合并两次滤液。

8)步骤7)活性粗多糖产品加入蒸馏水1L溶解，用氢氧化钠溶液调节pH至中性，用截留分子量为8000的半透膜进行透析。

9)步骤8)中透析后多糖溶液冷冻干燥，得活性多糖产品。

计算活性多糖提取率并测定多糖含量。多糖提取率为产物与高等植物原料的质量比的百分数，多糖含量采用硫酸-苯酚法进行测定。多糖分子量分布采用凝胶色谱仪进行测定。多糖提取率、多糖含量和提取用水量等数据见表1。

实施例7

与实施例1不同之处在于：

1)1.5kg经干燥除杂、粉碎后的猪苓子实体置于提取容器中；

2)取无水甲酸0.85L，加水0.15L配成甲酸溶液1L；

3)取步骤2)甲酸溶液1L，加到步骤1)提取容器中，充分搅拌使均匀润湿物料；

5)步骤3)物料加热至130℃，保温100min后，停止加热，并冷却至室温，压滤，排除有机酸溶液，固体部分放回提取容器中，完成猪苓子实体的有机酸预处理。

6)经过步骤5)的猪苓子实体1.5kg中加入无水乙醇5L，充分搅拌，过滤。滤液蒸馏回收乙醇，滤渣干燥后即为有机酸预处理猪苓子实体。

7)取步骤6)的有机酸预处理猪苓子实体100克，放入1L的烧杯中，加入500ml蒸馏水，于70℃的热水浴中提取40min，过滤，重复上述过程1次，合并两次滤液。

8)步骤7)中滤液浓缩后醇沉，加入乙醇至沉淀完全析出，沉淀分离后进行干燥，得到活性粗多糖产品。

9)步骤7)活性粗多糖产品加入蒸馏水1L溶解，用氢氧化钠溶液调节pH至中性，用截留分子量为3000的半透膜进行透析。

10)步骤9)中透析后多糖溶液冷冻干燥，得活性多糖产品。

计算活性多糖提取率并测定多糖含量。多糖提取率为产物与高等植物原料的质量比的百分数，多糖含量采用硫酸-苯酚法进行测定。多糖分子量分布采用凝胶色谱仪进行测定。多糖提取率、多糖含量(所得到的固体多糖的纯度)和提取用水量(物料和所用水的质量比)等数据见表1。

表1为实施例1-5中多糖产物提取率、多糖含量、多糖分子量分布以及多糖提取耗水量比较情况

结果与分析

根据已有的资料以及我们以往的对照实验结果，高等植物和食药用真菌类活性多糖采用常规水提取方法时，一般多糖产物的提取率在4wt％以下，有的甚至更低，比如黑木耳多糖，水提取时其多糖提取率＜1wt％，提取耗水量一般在30倍左右甚至更大，黑木耳耗水量要达到50倍，多糖产品的分子量一般从几万到几十万不等，比如香菇多糖，采用常规水提取方法时，所得产品的分子量在60000-110000，黄芪多糖分子量在10000-80000，黑木耳多糖的分子量也在100000左右，另外，多糖产物的纯度也较低，比如灵芝多糖采用常规水提取时，多糖含量仅为30-40％。而从本专利上述实施例中可看出，通过本发明的方法提取耗水量得到极大的降低，起到节能减排的目的；多糖产物平均分子量低、分子量分布较窄，多糖产物收率得到显著提高，多糖含量也有明显提高。

Claims

1.一种高等植物或食药用真菌类中活性多糖的提取方法，其特征在于：采用有机酸体系对高等植物、食药用真菌类原料处理,然后再采用水提醇沉工艺，获得水溶性活性多糖；具体为：

1)将预处理后的原料置入提取容器中，加入有机酸或有机\无机混酸溶液,充分搅拌使均匀润湿;

所述有机-无机混酸中无机酸的质量百分比浓度为0.1%-15%；

所述无机酸选自盐酸、硫酸、硝酸和磷酸中的一种；

所述有机酸溶液选自质量百分比浓度为5％-50％的草酸、质量百分比浓度为10％-99％的甲酸、质量百分比浓度为10％-99％的乙酸和质量百分比浓度为10％-99％的丙酸水溶液中的一种；

有机酸为草酸溶液时，处理后采用有机溶剂洗涤去除残留的草酸或混酸；所述有机酸为甲酸、乙酸、丙酸溶液时,处理后采用蒸馏、抽滤或离心方式去除大部分的酸液，然后采用有机溶剂进行充分洗涤除去少量残余的酸；

2)加热物料, 物料重量配比为原料/有机酸溶液或有机-无机混酸溶液为5/1-1/5，加热温度为50-150℃，保温时间为10-180min，利用有机酸分子和高等植物、食药用真菌细胞壁有机高分子物质之间的作用，将活性多糖从原料上分离下来，并切断高分子多糖的糖苷键，实现其部分降解；

3）有机溶剂洗涤除去残余的酸液，完成原料的有机酸处理；

4）经有机酸处理的原料，加入5-15倍体积水进行提取，提取液浓缩后醇沉，分离沉积物可得到活性粗多糖；

5）活性粗多糖溶于5-15倍体积去离子水中，调节溶液的pH至中性，离心处理，上清液经透析或膜分离后，浓缩，干燥，得到活性多糖。

2.按权利要求1所述高等植物或食药用真菌类中活性多糖的提取方法，其特征在于，所述有机溶剂选自C1-C3的醇或丙酮。

3.按权利要求1 所述高等植物或食药用真菌类中活性多糖的提取方法，其特征在于：所述预处理方法为将原料干燥、除杂、机械粉碎,采用石油醚、C1-C3的醇或乙酸乙酯进行抽提，获取其中的挥发油类、黄酮类、三萜类、皂苷类脂溶性活性物质，抽提残渣经干燥后作为下步原料。

4.按权利要求1所述高等植物或食药用真菌类中活性多糖的提取方法，其特征在于：所述预处理方法为将原料干燥、除杂、机械粉碎作为下步原料,此时脂溶性活性物质可在步骤3）中有机溶剂洗涤时获取。

5.按权利要求1 所述高等植物或食药用真菌类中活性多糖的提取方法，其特征在于：所述高等植物选用黄芪、枸杞、银杏叶、木瓜、金银花、当归、陈皮、草麻黄、川穹、石菖蒲、大蒜、益智仁、白芷、艾叶、细辛、肉苁蓉、沙枣、桉叶、鱼腥草、女贞子、羌活、人参、三七、草珊瑚、车前子、水红花子、芫花、佛手、桑白皮、桑寄生、黄芩、淫羊藿、茶叶、红景天、芦荟、燕麦、魔芋、山药、天麻、柴胡、刺五加的花、叶、种子、皮、果实、根、茎类作为原料；所述食药用真菌选用灵芝、木耳、香菇、猪苓、银耳、灰树花、茯苓、云芝、猴头菇、冬虫夏草的真菌子实体或菌丝体作为原料。