CN102302549B - 一种治疗心脑血管疾病的药物组合物及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种丹参川芎嗪药物组合物及其制备方法和应用，经过大量实验研究，将丹参和川芎用超临界流体萃取法提取，丹参与川芎的药材重量比为5∶1，以丹参素、丹参酮II A和川芎嗪为指标成分，实验结果显示本发明的制备方法能够显著提高有效成分的含量，川芎嗪的含量大于100μg/g，动物实验表明本发明制备方法提取的丹参川芎嗪药物组合物药理作用显著。
Description
所属技术领域
本发明属于医药技术领域，具体涉及一种丹参川芎嗪药物组合物及其制备方法和应用。
背景技术
随着生活水平的提高和生活节奏的改变，被称为“富贵病”的“三高症”(即高血压、高血糖和高血脂)一直严重威胁着人类，是中老年人常见的健康病。即使在医学治疗手段高速发展的今天，仍有一半以上的脑血管意外幸存者生活不能完全自理。心脑血管疾病居各种死因首位，已成为人类死亡病因最高的头号杀手，也是人们健康的“无声凶煞”。心脑血管疾病具有“发病率高、致残率高、死亡率高、复发率高和并发症多”的特点，因此心脑血管疾病应该防患于未然，否则一旦遭遇这类病，家庭会因此背上沉重的经济负担和心理压力。
心脑血管疾病的原因是由于长时间饮食***升高，使血脂中的低密度脂蛋白胆固醇氧化后沉积在血管壁，久之使毛细血管堵塞，随着时间的推移，脂类醇类物质容易和体内游离的矿物质离子结合，形成血栓。血栓容易在血管的拐角处，或者瓶颈处堆积，钙化。同时血栓越来越多，使血管直径缩小。心脏为了保持足够的供血量，就增加血压，造成高血压疾病。如果血压过高，可能导致血管崩裂，于是产生出血性心脑血管疾病。如果由于堵塞供血不足，即为缺血性心脑血管疾病。
全世界每年死于心脑血管疾病的人数高达1500万人，居各种死因首位，仅在我国每年就有300万人死于心脑血管疾病，对于心脑血管疾病的患者具有重复用药、持续用药的特点。中医药在心脑血管疾病的预防和治疗中发挥着重要的作用，尤其是以丹参为主要原料的单方或中西复方制剂均有着确切的疗效，如丹参川芎嗪注射液、复方丹参片、乐麦胶囊等这些制剂中丹参发挥主要作用。
丹参川芎嗪注射液，其组分为盐酸川芎嗪(化学名称为：2，3，5，6-四甲基吡嗪盐酸盐)；丹参素(化学名称为：β-(3，4-二羟基苯基)乳酸)。丹参川芎嗪注射液为复方制剂，其作用为活血化瘀，通脉养心，有抗血小板聚集、扩张冠状动脉，降低血液粘度，加速红细胞的流度，改善微循环并具有抗心肌缺血和心肌梗死的作用。川芎嗪是由川芎的根茎提取的有效成分，具有活血化瘀、抗血小板凝聚、扩张小动脉、改善微循环、抗氧化、拮抗钙离子及抗纤维化等作用；丹参具有活血祛瘀，通经止痛，清心除烦，凉血消痈的功效。
本发明研究人员经过长期的实验研究，将丹参和川芎用超临界流体萃取法提取，以丹参素、丹参酮II A和川芎嗪为指标成分，CO2超临界流体萃取法提取具有较高的丹参素、丹参酮II A和川芎嗪三种有效成分，本提取方法在室温条件下进行，防止某些对热不稳定的成分被破坏，萃取过程中几乎不用有机溶剂，萃取物中无有机溶剂残留，对环境无公害，提取效率高，节约能耗。
发明内容
本发明研究人员经过大量实验研究，将丹参和川芎用超临界流体萃取法提取，丹参与川芎的药材重量比为5∶1，以丹参素、丹参酮IIA和川芎嗪为指标成分，实验结果显示本发明的制备方法能够显著提高有效成分的含量，川芎嗪的含量大于100μg/g。
本发明的目的在于提供一种丹参川芎嗪的药物组合物。
本发明的目的在于进一步提供丹参川芎嗪药物组合物的提取方法。
本发明的目的还在于提供丹参川芎嗪药物组合物在医药领域中的应用
本发明是通过以下技术方案实现的：
丹参川芎嗪的制备方法：
取丹参、川芎药材，粉碎成粉末过24目筛，放入萃取池中，浓度为75±5％的乙醇作为夹带剂，CO2与夹带剂分别由CO2泵和夹带剂泵打入各泵的泵体中，经流体混合器混合后，流入萃取器腔中的集流腔，当萃取压力达到24-30MPa，萃取温度达到50±10℃后，进入萃取池中开始萃取，萃取时间为1-2h后，减压排放并收集萃取液，用旋转蒸发浓缩至干，即得丹参川芎嗪提取物，川芎嗪的含量大于100μg/g。
具体实施方式
实施例1
取丹参100g、川芎20g药材，粉碎成粉末过24目筛，放入萃取池中，浓度为80％的乙醇作为夹带剂，CO2与夹带剂分别由CO2泵和夹带剂泵打入各泵的泵体中，经流体混合器混合后，流入萃取器腔中的集流腔，当萃取压力达到24MPa，萃取温度达到50℃后，进入萃取池中开始萃取，萃取时间为1h后，减压排放并收集萃取液，用旋转蒸发浓缩至干，即得丹参川芎嗪提取物，川芎嗪的含量为105μg/g。
实施例2
取丹参50g、川芎10g药材，粉碎成粉末过24目筛，放入萃取池中，浓度为75％的乙醇作为夹带剂，CO2与夹带剂分别由CO2泵和夹带剂泵打入各泵的泵体中，经流体混合器混合后，流入萃取器腔中的集流腔，当萃取压力达到25MPa，萃取温度达到40℃后，进入萃取池中开始萃取，萃取时间为1.2h后，减压排放并收集萃取液，用旋转蒸发浓缩至干，即得丹参川芎嗪提取物，川芎嗪的含量为101μg/g。
实施例3
取丹参25g、川芎5g药材，粉碎成粉末过24目筛，放入萃取池中，浓度为70％的乙醇作为夹带剂，CO2与夹带剂分别由CO2泵和夹带剂泵打入各泵的泵体中，经流体混合器混合后，流入萃取器腔中的集流腔，当萃取压力达到26MPa，萃取温度达到45℃后，进入萃取池中开始萃取，萃取时间为1.5h后，减压排放并收集萃取液，用旋转蒸发浓缩至干，即得丹参川芎嗪提取物，川芎嗪的含量为102μg/g。
实施例4
取丹参30g、川芎6g药材，粉碎成粉末过24目筛，放入萃取池中，浓度为80％的乙醇作为夹带剂，CO2与夹带剂分别由CO2泵和夹带剂泵打入各泵的泵体中，经流体混合器混合后，流入萃取器腔中的集流腔，当萃取压力达到30MPa，萃取温度达到60℃后，进入萃取池中开始萃取，萃取时间为2h后，减压排放并收集萃取液，用旋转蒸发浓缩至干，即得丹参川芎嗪提取物，川芎嗪的含量为103μg/g。
实施例5
取丹参20g、川芎4g药材，粉碎成粉末过24目筛，放入萃取池中，浓度为75％的乙醇作为夹带剂，CO2与夹带剂分别由CO2泵和夹带剂泵打入各泵的泵体中，经流体混合器混合后，流入萃取器腔中的集流腔，当萃取压力达到28MPa，萃取温度达到55℃后，进入萃取池中开始萃取，萃取时间为1.8h后，减压排放并收集萃取液，用旋转蒸发浓缩至干，即得丹参川芎嗪提取物，川芎嗪的含量为101μg/g。
实施例6
取丹参35g、川芎7g药材，粉碎成粉末过24目筛，放入萃取池中，浓度为70％的乙醇作为夹带剂，CO2与夹带剂分别由CO2泵和夹带剂泵打入各泵的泵体中，经流体混合器混合后，流入萃取器腔中的集流腔，当萃取压力达到24MPa，萃取温度达到50℃后，进入萃取池中开始萃取，萃取时间为1h后，减压排放并收集萃取液，用旋转蒸发浓缩至干，即得丹参川芎嗪提取物，川芎嗪的含量为100μg/g。
用以上实施例中制备方法得到的丹参川芎嗪对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤组织中的一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)变化的影响，以验证用本发明制备方法提取得到的丹参川芎嗪的药理作用。
1.材料和方法
1.1仪器与试剂752C型紫外分光光度计；丹参川芎嗪(用本发明制备方法研制而成，使用时用无菌生理盐水溶解配制成1g/L注射液)；测定NO、NOS的试剂盒(南京建成生物工程研究所)。
1.2分组：7天龄SD大鼠，性别不限，体质量10～15g，随机平均分成3组，每组10只：空白对照组；缺氧缺血模型组；丹参川芎嗪治疗组。
1.3NO、NOS测定：动物分别在缺氧缺血后6，24，48h断头处死，取结扎侧脑组织称重，用无菌生理盐水作为匀浆介质，按1g∶10mL在冰浴中充分匀浆制成10％组织匀浆，离心后取上清液，测定NO、NOS。NO采用硝酸还原酶法测定；NOS应用比色法测定。
1.4统计学方法：应用SAS 8.0软件进行统计分析；经方差齐性检验后，多组均数比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用q检验。
2.结果
2.1丹参川芎嗪对新生大鼠脑组织NO的影响
新生大鼠经缺氧缺血造模后6，24，48h，与空白对照组相比，模型组脑组织各相应时点NO含量升高，差异有显著性(P＜0.05)。与模型组相应时点比较，丹参川芎嗪治疗组相应时点NO含量回降，且呈一定的量效关系，差异有显著性(P＜0.05)。
2.2丹参川芎嗪对新生大鼠脑组织NOS的影响
新生大鼠经缺氧缺血造模后6，24，48h与空白对照组相比，模型组脑组织各时点NOS含量升高，差异有显著性(P＜0.05)。与模型组相应时点比较，丹参川芎嗪组相应时点NOS含量回降，且呈一定的量效关系，差异有显著性(P＜0.05)。
将丹参川芎嗪与甘油混合均匀，加入注射用水，用盐酸溶液调节溶液的pH值，共制成1000ml，过滤、灌封于5ml安瓶中，115℃，30分钟灭菌。用丹参川芎嗪注射液治疗冠心病，临床疗效观察如下：
1.对象与方法
1.1对象
将符合诊断标准的50例冠心病住院患者随机分为对照组25例和治疗组25例，均有典型的临床表现或经心电图、超声心动图、冠状动脉造影等检查，均已明确诊断。
1.2治疗方法
两组病例均根据病情服用硝酸酯类药物或/和钙拮抗剂、G-受体阻滞剂，治疗组在常规疗法基础上静脉滴注丹参川芎嗪注射液(贵州拜特制药有限责任公司研制，规格5mI/支)，1次/天，10mI/次)注入生理盐水中，21天为1个疗程，共2个疗程。
1.3观察指标
(1)每天定时询问症状，不适反应，观察指标治疗前后作常规心电图检测
(2)观察其心绞痛、发作次数、血压、心率等症状的变化及血脂、血糖、血液流变学等检查。
1.4两组心绞痛改善比较
两组治疗后心绞痛发作情况均明显减轻，但治疗组优于对照组(P＜0.05)，两组心绞痛改善比较
注：★与对照组比较，P＜0.05。
1.5两组心电图治疗前后比较
两组患者心电图明显改善，但治疗组优于对照组(P＜0.05)，两组心电图疗效比较
注：●与对照组比较，P＜0.01。
2.结果
两组治疗后心绞痛发作情况均明显减轻，但治疗组优于对照组，由本研究结果可知，治疗组疗效显著优于对照组，且能较好地纠正血液流变学的异常改变，提示丹参川芎嗪注射液可降低血液黏稠度，使血流速度加快，从而避免微栓塞及心血管痉挛的发生，从而保护血管内皮，减轻冠状动脉硬化的进展。
Claims (2)
1.一种丹参川芎嗪药物组合物的制备方法，其特征在于包括如下步骤：
取重量比为5∶1的丹参、川芎药材，粉碎成粉末过24目筛，放入萃取池中，浓度为75±5％的乙醇作为夹带剂，CO2与夹带剂分别由CO2泵和夹带剂泵打入各泵的泵体中，经流体混合器混合后，流入萃取器中的集六腔，当萃取压力达到24-30Mpa，萃取温度达到50±10℃ 后，进入萃取池中开始萃取，萃取时间为1-2h，减压排放并收集萃取液，用旋转蒸发浓缩至干，得丹参川芎嗪提取物，川芎嗪含量大于100μg/g。
2.根据权利要求1的丹参川芎嗪药物组合物的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：
取重量比为5∶1的丹参、川芎药材，粉碎成粉末过24目筛，放入萃取池中，浓度为80％的乙醇作为夹带剂，CO2与夹带剂分别由CO2泵和夹带剂泵打入各泵的泵体中，经流体混合器混合后，流入萃取器中的集六腔，当萃取压力达到24Mpa，萃取温度达到50℃后，进入萃取池中开始萃取，萃取时间为1h，减压排放并收集萃取液，用旋转蒸发浓缩至干，得丹参川芎嗪提取物，川芎嗪含量大于105μg/g。
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