CN102268006A - 一种复合酶提取斑蝥素的方法 - Google Patents

一种复合酶提取斑蝥素的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN102268006A
CN102268006A CN2011101606354A CN201110160635A CN102268006A CN 102268006 A CN102268006 A CN 102268006A CN 2011101606354 A CN2011101606354 A CN 2011101606354A CN 201110160635 A CN201110160635 A CN 201110160635A CN 102268006 A CN102268006 A CN 102268006A
Authority
CN
China
Prior art keywords
volume ratio
chloroform
hydrochloric acid
cantharidin
medicinal material
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN2011101606354A
Other languages
English (en)
Other versions
CN102268006B (zh
Inventor
葛喜珍
杜晓霞
田平芳
林强
王路
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
College of Biochemical Engineering of Beijing Union University
Original Assignee
College of Biochemical Engineering of Beijing Union University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by College of Biochemical Engineering of Beijing Union University filed Critical College of Biochemical Engineering of Beijing Union University
Priority to CN2011101606354A priority Critical patent/CN102268006B/zh
Publication of CN102268006A publication Critical patent/CN102268006A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN102268006B publication Critical patent/CN102268006B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Landscapes

  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明涉及一种复合酶提取斑蝥素的方法，其是将斑蝥药材用纤维素酶和果胶酶复合酶酶解，将酶解产物用体积比为1-2:1-2:1-2的氯仿-无水乙醇-浓盐酸混合液浸提，将浸提产物趁热抽滤后再向残渣中加入体积比为1-2:1-2:1-2的氯仿-无水乙醇-浓盐酸浸提，合并两次滤液并旋蒸干，将所得固体用体积比为1-2:1-2的水-氯仿混合液溶解，萃取下层有机相后再将下层有机相旋蒸干，向所得固体中加入体积比为1-2:1-2的无水乙醇-石油醚混合液溶解，最后用丙酮重结晶，得到斑蝥素。本发明与传统提取法比较具有提取速度快、成本低、省时省力、提取率高、杂质含量少、易于纯化等优点，适宜大规模工业化生产。

Description

一种复合酶提取斑蝥素的方法
技术领域
本发明属于中药制药或原料加工领域，具体涉及一种复合酶法提取斑蝥素的方法。
背景技术
斑蝥，包括芫青科昆虫南方大斑蝥（大斑芫青）Mylabris phalerata Pallas或黄黑小斑蝥（眼斑芫青）M.cichorii Linnaeus，是一种用途极广的中药材，临床及药理研究表明斑蝥临床应用除抗癌外，尚有抗病毒、抑真菌、壮阳、升高白细胞等多种活性。斑蝥含斑蝥素、脂肪、蜡质、蚁酸和色素等物质，其中斑蝥素是主要有效成份。斑蝥素作为应用价值极高的抗癌药，对其应用的研究越来越引起世人的关注。
目前采用的斑蝥素的提取方法有酸法、碱法、渗辘法、混合提取法等，以上方法存在着提取不彻底、含量较低、产品中杂质多、品质不好等问题。在水提法和加热回流法提取过程中，由于操作温度高，斑蝥中的斑蝥素易发生分解；而在渗辘法提取过程中，虽然避免了高温带来的影响，但要达到较高的萃取效率需时间较长。新发展的技术如超声波提取、微波提取、高压提取和超临界萃取等方法，不但设备成本高，新工艺也尚不成熟。
发明人通过大量实验，提出了一种斑蝥素的酶法提取方法，该方法经济、环保、低能耗，且能最大程度地提取出斑蝥中的有效物质，并能应用于工业化生产。本发明的制备斑蝥素的新方法，在国内外尚未见报道。
发明内容
本发明的主要目的是提供一种简单易行、成本低廉、适于大规模生产的斑蝥素提取工艺。为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：
一种复合酶提取斑蝥素的方法，所述方法是将斑蝥药材用复合酶酶解，将酶解产物用体积比为1-2:1-2:1-2的氯仿-无水乙醇-浓盐酸混合液浸提，将浸提产物趁热抽滤后再向残渣中加入体积比为1-2:1-2:1-2的氯仿-无水乙醇-浓盐酸浸提，合并两次滤液并旋转蒸发干，将所得固体用体积比为1-2:1-2的水-氯仿混合液溶解，萃取下层有机相后再将下层有机相旋转蒸发干，向所得固体中加入体积比为1-2:1-2的无水乙醇-石油醚混合液溶解，最后用丙酮重结晶，得到斑蝥素；所述复合酶为纤维素酶和果胶酶的混合物；所述浓盐酸为37wt%的盐酸水溶液。
如上所述的方法，所述方法的步骤如下：
a. 称取斑蝥药材，粉碎至10-20目；
b. 将粉碎后的斑蝥药材加入水中，浸泡半小时，每500g药材加入纤维素酶0.8-2g，果胶酶1.6-4g；
c. 调pH至5.0-6.0，在40-50℃下水浴酶解2-4h，后煮沸2-5min使酶失活；
d. 将酶灭活后，加入体积比为1-2:1-2:1-2的氯仿-无水乙醇-浓盐酸混合溶液，加溶液总量为药材重量的4-9倍；
e. 在40-70℃水浴中浸提20-26小时，趁热抽滤；
f. 滤毕，向残渣中加入体积比为1-2:1-2:1-2的氯仿-无水乙醇-浓盐酸混合液600-6000mL浸提，趁热抽滤；
g. 将上述两次提取的滤液合并后旋转蒸发干；
h. 将蒸干后所得固体用体积比为1-2:1-2的水-氯仿共400-4000mL溶解，萃取下层有机相；
i. 将萃取的下层有机相旋转蒸发干；
j. 向蒸干后所得固体中加入体积比为1-2:1-2的无水乙醇-石油醚混合液共200-2000mL溶解；
k. 所得溶液用丙酮重结晶，即得斑蝥素。
如上所述的方法，其中，所述各酶的比活力为：纤维素酶60万U/g、果胶酶80万U/g。
如上所述的方法，其中优选地，步骤b中，所加水重量为斑蝥药材重量的1-2.5倍。
如上所述的方法，其中，所述斑蝥药材为芫青科昆虫南方大斑蝥（大斑芫青） Mylabris phalerata Pallas或黄黑小斑蝥（眼斑芫青） M.cichorii Linnaeus的干燥体。
本发明的有益效果为：
1、斑蝥素具有明显的抗病毒、抑菌、壮阳、升高白细胞等多种活性，用于制药，用途广泛，本发明提供了一种提取制备斑蝥素的新方法。
2、本发明的提取方法采用复合酶对原料进行酶解处理，成本低、对环境友好、产量高、纯度高，适宜工业化生产。本发明制得的斑蝥素提取率较普通的混合提取法提高50%以上。
3、本发明的提取方法操作简便，避免了反复重结晶带来的耗时。
4、本发明方法中未使用氨水等碱化措施，提取液澄清，粘度低，产品杂质少，后续处理方便。
附图说明
图1为斑蝥素酶标准品的HPLC图谱。
图2为斑蝥药材未加酶提取的HPLC图谱。
图3为斑蝥药材加酶提取的HPLC图谱。
具体实施方式
实施例1 
（1）取南方大斑蝥（Mylabris phalerata Pallas）药材500g，粉碎，过10-20目筛。
（2）用水浸润，每500g药材加入纤维素酶0.8g、果胶酶1.6g。
（3）HCl调pH至5.0，温度为50℃酶解2.5h，而后煮沸3min，使酶失活。
（4）将酶解产物用氯仿-无水乙醇-浓盐酸（体积比1.5:1:1）于66℃水浴中浸提24小时，将浸提产物热抽滤，向残渣中再加入氯仿-无水乙醇-浓盐酸（体积比1:2:1）浸提，热抽滤。
（5）合并两次滤液旋蒸干，所得固体用水-氯仿（体积比2:1）溶解，萃取下层有机相。
（6）再将下层有机相旋蒸近干，所得固体中加入无水乙醇-石油醚（体积比1:2）溶解，最后用丙酮重结晶，得斑蝥素。
经复合酶处理后，用氯仿-无水乙醇-浓盐酸提取斑蝥素，斑蝥素提取量比单纯的氯仿-无水乙醇-浓盐酸提取提高了50%。
实施例2 
（1）取南方大斑蝥药材500g，粉碎，过10-20目筛。
（2）用水浸润，每500g药材加入纤维素酶1g、果胶酶1.8g。
（3）HCl调pH至5.8，温度为48℃酶解3h，而后煮沸4min，使酶失活。
（4）将酶解产物用氯仿-无水乙醇-浓盐酸（体积比1.5:1.5:1）于57℃水浴中浸提23小时，将浸提产品热抽滤，向残渣中再加入氯仿-无水乙醇-浓盐酸（体积比1:2:1.5）浸提，热抽滤。
（5）合并两次滤液旋蒸干，所得固体用水-氯仿（体积比2:1.5）溶解，萃取下层有机相。
（6）再将下层有机相旋蒸近干，所得固体中加入无水乙醇-石油醚（体积比1.5:2）溶解，最后用丙酮重结晶，得斑蝥素。
经复合酶处理后，用氯仿-无水乙醇-浓盐酸提取斑蝥素，斑蝥素提取量比单纯的氯仿-无水乙醇-浓盐酸提取提高了56%。
实施例3 
（1）取黄黑小斑蝥（M.cichorii Linnaeus）药材500g，粉碎，过10-20目筛。
（2）用水浸润，每500g药材加入纤维素酶1.5g、果胶酶2.0g。
（3）HCl调pH至6.0，温度为45℃酶解2.5h，而后煮沸2min，使酶失活。
（4）将酶解产物用氯仿-无水乙醇-浓盐酸（体积比1.5:1:1）于70℃水浴中浸提25小时，将浸提产品热抽滤，向残渣中再加入氯仿-无水乙醇-浓盐酸（体积比1:2:1.5）浸提，热抽滤。
（5）合并两次滤液旋蒸干，所得固体用水-氯仿（体积比2:1.5）溶解，萃取下层有机相。
（6）再将下层有机相旋蒸近干，所得固体中加入无水乙醇-石油醚（体积比1.5:2）溶解，最后用丙酮重结晶，得斑蝥素。
经复合酶处理后，用氯仿-无水乙醇-浓盐酸提取斑蝥素，斑蝥素提取量比单纯的氯仿-无水乙醇-浓盐酸提取提高了59%。
实施例4 
（1）取黄黑小斑蝥药材500g，粉碎，过10-20目筛。
（2）用水浸润，每500g药材加入纤维素酶1.4g、果胶酶2.2g。
（3）HCl调pH至5.7，温度为48℃酶解2h，而后煮沸5min，使酶失活。
（4）将酶解产物用氯仿-无水乙醇-浓盐酸（体积比1:2:1）于50℃水浴中浸提25小时，将浸提产品热抽滤，向残渣中再加入氯仿-无水乙醇-浓盐酸（体积比1:2:1.5）浸提，热抽滤。
（5）合并两次滤液旋蒸干，所得固体用水-氯仿（体积比2.5:1.5）溶解，萃取下层有机相。
（6）再将下层有机相旋蒸近干，所得固体中加入无水乙醇-石油醚（体积比1.5:2.5）溶解，最后用丙酮重结晶，得斑蝥素。
经复合酶处理后，用氯仿-无水乙醇-浓盐酸提取斑蝥素，斑蝥素提取量比单纯的氯仿-无水乙醇-浓盐酸提取提高了53%。
实施例5 
（1）取黄黑小斑蝥药材500g，粉碎，过10-20目筛。
（2）用水浸润，每500g药材加入纤维素酶1.6g、果胶酶3.2g。
（3）HCl调pH至5.4，温度为47℃酶解2h，而后煮沸3min，使酶失活。
（4）用氯仿-无水乙醇-浓盐酸（体积比1:2:1.5）于42℃水浴中浸提23小时，将浸提产品热抽滤，向残渣中加入氯仿-无水乙醇-浓盐酸（体积比1:2.5:1.5）浸提。
（5）合并两次滤液旋蒸干，所得固体用水-氯仿（体积比2.0:1.0）溶解，萃取下层有机相。
（6）再将下层有机相旋蒸近干，所得固体中加入无水乙醇-石油醚（体积比1.5:2.0）溶解，最后用丙酮重结晶，得斑蝥素。
经复合酶处理后，用氯仿-无水乙醇-浓盐酸提取斑蝥素，斑蝥素提取量比单纯的氯仿-无水乙醇-浓盐酸提取提高了59%。
斑蝥素的含量检测
（1）称取斑蝥素标准品，采用高效液相色谱（HPLC）检测，色谱条件：柱型：C18；流动相：乙腈-水（体积比40:60）；流速：1mL/min；柱温：25℃。在273nm处测定峰面积，标准品的HPLC图谱见图1（斑蝥素保留时间t=7.2min）。
（2）斑蝥药材未加酶提取的HPLC图谱，见图2（斑蝥素保留时间t=7.2min）。
（3）斑蝥药材加酶提取的HPLC图谱，见图3（斑蝥素保留时间t=7.2min）。
（4）斑蝥药材未加酶提取和加酶提取斑蝥素的结果见表1。
表 1 酶法提取结果
提取方法 保留时间（min） 峰面积 斑蝥素含量（mg/mL）
酶解混合提取法 7.210 452193 2.727
未加酶混合提取法 7.231 11109 1.734
（5）结论
采用本发明的酶解混合提取法斑蝥素含量远较未加酶的混合提取法为高，可达2.727mg/mL，比药典提取法增加了（2.727-1.304）%/0.404=57.3%。

Claims (4)

1. 一种复合酶提取斑蝥素的方法，其特征在于，所述方法是将斑蝥药材用复合酶酶解，将酶解产物用体积比为1-2:1-2:1-2的氯仿-无水乙醇-浓盐酸混合液浸提，将浸提产物趁热抽滤后再向残渣中加入体积比为1-2:1-2:1-2的氯仿-无水乙醇-浓盐酸浸提，合并两次滤液并旋转蒸发干，将所得固体用体积比为1-2:1-2的水-氯仿混合液溶解，萃取下层有机相后再将下层有机相旋转蒸发干，向所得固体中加入体积比为1-2:1-2的无水乙醇-石油醚混合液溶解，最后用丙酮重结晶，得到斑蝥素；所述复合酶为纤维素酶和果胶酶的混合物；所述浓盐酸为37wt%的盐酸水溶液。
2. 如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法的步骤如下：
a. 称取斑蝥药材，粉碎至10-20目；
b. 将粉碎后的斑蝥药材加入水中，浸泡半小时，每500g药材加入纤维素酶0.8-2g，果胶酶1.6-4g；
c. 调pH至5.0-6.0，在40-50℃下水浴酶解2-4h，后煮沸2-5min使酶失活；
d. 将酶灭活后，加入体积比为1-2:1-2:1-2的氯仿-无水乙醇-浓盐酸混合溶液，加溶液总量为药材重量的4-9倍；
e. 在40-70℃水浴中浸提20-26小时，趁热抽滤；
f. 滤毕，向残渣中加入体积比为1-2:1-2:1-2的氯仿-无水乙醇-浓盐酸混合液600-6000mL浸提，趁热抽滤；
g. 将上述两次提取的滤液合并后旋转蒸发干；
h. 将蒸干后所得固体用体积比为1-2:1-2的水-氯仿共400-4000mL溶解，萃取下层有机相；
i. 将萃取的下层有机相旋转蒸发干；
j. 向蒸干后所得固体中加入体积比为1-2:1-2的无水乙醇-石油醚混合液共200-2000mL溶解；
k. 所得溶液用丙酮重结晶，即得斑蝥素。
3. 如权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤b中，所加水重量为斑蝥药材重量的1-2.5倍。
4. 如权利要求1至3中任意一项所述的方法，其特征在于，所述斑蝥药材为芫青科昆虫南方大斑蝥或黄黑小斑蝥的干燥体。
CN2011101606354A 2011-06-15 2011-06-15 一种复合酶提取斑蝥素的方法 Expired - Fee Related CN102268006B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2011101606354A CN102268006B (zh) 2011-06-15 2011-06-15 一种复合酶提取斑蝥素的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2011101606354A CN102268006B (zh) 2011-06-15 2011-06-15 一种复合酶提取斑蝥素的方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN102268006A true CN102268006A (zh) 2011-12-07
CN102268006B CN102268006B (zh) 2013-08-14

Family

ID=45050483

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN2011101606354A Expired - Fee Related CN102268006B (zh) 2011-06-15 2011-06-15 一种复合酶提取斑蝥素的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN102268006B (zh)

Cited By (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102796794A (zh) * 2012-08-31 2012-11-28 哈尔滨工业大学 斑蝥类毒素的制备方法
CN106674247A (zh) * 2016-12-06 2017-05-17 广西壮族自治区兽医研究所 一种超临界二氧化碳提取斑蝥素的方法
JP2018506034A (ja) * 2015-01-20 2018-03-01 ヴェリカ ファーマシューティカルズ, インコーポレイテッドVerrica Pharmaceuticals, Inc. 医薬品グレードカンタリジンの定量および調製
CN110779999A (zh) * 2019-10-30 2020-02-11 河南普华基因科技有限公司 一种斑蝥粉中斑蝥素的含量检测方法
US10745413B2 (en) 2014-12-17 2020-08-18 Verrica Pharmaceuticals, Inc. Commercially viable synthesis of cantharidin and bioactive cantharidin derivatives
USD900312S1 (en) 2017-06-15 2020-10-27 Verrica Pharmaceuticals, Inc. Applicator
US11052064B2 (en) 2013-08-21 2021-07-06 Verrica Pharmaceuticals Inc. Compositions, methods and systems for the treatment of cutaneous disorders
US11147790B2 (en) 2017-06-06 2021-10-19 Verrica Pharmaceuticals Inc. Treatment of cutaneous disorders
CN113624887A (zh) * 2021-08-20 2021-11-09 江苏四环生物制药有限公司 一种斑蝥素的含量测定方法

Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1374310A (zh) * 2002-03-20 2002-10-16 贵州君之堂制药有限公司 斑蝥酸钠的制备工艺
CN1966508A (zh) * 2006-08-18 2007-05-23 芜湖天远科技开发有限责任公司 一种提取斑蝥素的方法
CN101012230A (zh) * 2007-02-13 2007-08-08 北京世纪博康医药科技有限公司 斑蝥酸钠的制备工艺
WO2007149543A2 (en) * 2006-06-20 2007-12-27 Biobotanic Corp. Scar treatment using protein phosphatase inhibitors
CN101108854A (zh) * 2007-07-27 2008-01-23 贵州大学 一种斑蝥素分离纯化方法
WO2008030617A2 (en) * 2006-09-07 2008-03-13 Stemline Therapeutics, Inc. Cancer therapy with cantharidin and cantharidin analogs
CN101633661A (zh) * 2007-02-13 2010-01-27 北京世纪博康医药科技有限公司 制备斑蝥酸钠的工艺
CN101962386A (zh) * 2010-10-15 2011-02-02 肖文中 生物复合酶法提取青蒿素的工艺

Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1374310A (zh) * 2002-03-20 2002-10-16 贵州君之堂制药有限公司 斑蝥酸钠的制备工艺
WO2007149543A2 (en) * 2006-06-20 2007-12-27 Biobotanic Corp. Scar treatment using protein phosphatase inhibitors
CN1966508A (zh) * 2006-08-18 2007-05-23 芜湖天远科技开发有限责任公司 一种提取斑蝥素的方法
WO2008030617A2 (en) * 2006-09-07 2008-03-13 Stemline Therapeutics, Inc. Cancer therapy with cantharidin and cantharidin analogs
CN101012230A (zh) * 2007-02-13 2007-08-08 北京世纪博康医药科技有限公司 斑蝥酸钠的制备工艺
CN101633661A (zh) * 2007-02-13 2010-01-27 北京世纪博康医药科技有限公司 制备斑蝥酸钠的工艺
CN101108854A (zh) * 2007-07-27 2008-01-23 贵州大学 一种斑蝥素分离纯化方法
CN101962386A (zh) * 2010-10-15 2011-02-02 肖文中 生物复合酶法提取青蒿素的工艺

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
WILBERT G.，等: "Isolation of Cantharidin from Epicata pestifera", 《JOURNAL OF PHARMACEUTICAL SCIENCE》, vol. 56, no. 2, 28 February 1967 (1967-02-28) *
冯钦忠: "关于斑蝥素1H NMR和UV测定结果的商榷", 《波普学杂志》, vol. 27, no. 1, 31 March 2010 (2010-03-31) *
方宇凌，等: "芜菁科不同种类成虫体内斑蝥素的含量", 《昆虫学报》, vol. 44, no. 2, 31 May 2001 (2001-05-31) *

Cited By (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102796794A (zh) * 2012-08-31 2012-11-28 哈尔滨工业大学 斑蝥类毒素的制备方法
US11052064B2 (en) 2013-08-21 2021-07-06 Verrica Pharmaceuticals Inc. Compositions, methods and systems for the treatment of cutaneous disorders
US10745413B2 (en) 2014-12-17 2020-08-18 Verrica Pharmaceuticals, Inc. Commercially viable synthesis of cantharidin and bioactive cantharidin derivatives
JP2018506034A (ja) * 2015-01-20 2018-03-01 ヴェリカ ファーマシューティカルズ, インコーポレイテッドVerrica Pharmaceuticals, Inc. 医薬品グレードカンタリジンの定量および調製
US11168091B2 (en) 2015-01-20 2021-11-09 Verrica Pharmaceuticals Inc. Quantification and preparation of pharmaceutical grade cantharidin
CN106674247A (zh) * 2016-12-06 2017-05-17 广西壮族自治区兽医研究所 一种超临界二氧化碳提取斑蝥素的方法
US11147790B2 (en) 2017-06-06 2021-10-19 Verrica Pharmaceuticals Inc. Treatment of cutaneous disorders
USD900312S1 (en) 2017-06-15 2020-10-27 Verrica Pharmaceuticals, Inc. Applicator
USD1036656S1 (en) 2017-06-15 2024-07-23 Verrica Pharmaceuticals Inc. Applicator
CN110779999A (zh) * 2019-10-30 2020-02-11 河南普华基因科技有限公司 一种斑蝥粉中斑蝥素的含量检测方法
CN113624887A (zh) * 2021-08-20 2021-11-09 江苏四环生物制药有限公司 一种斑蝥素的含量测定方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN102268006B (zh) 2013-08-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN102268006B (zh) 一种复合酶提取斑蝥素的方法
CN1935820B (zh) 无患子总皂苷的制备方法
CN101829164B (zh) 一种贯叶连翘提取物的生物制备方法
CN101974043B (zh) 一种从石榴皮中制备安石榴苷和鞣花酸的方法
CN102219824B (zh) 甘草酸的酶解生产方法
CN101747388A (zh) 一种同时从石榴皮提取安石榴苷和鞣花酸的方法
CN105130939A (zh) 一种从花生壳中提取木犀草素的方法
CN102746362A (zh) 从黄芪中提取精制黄芪甲苷的方法
CN102351939A (zh) 一种从女贞中联合制备高纯度熊果酸和齐墩果酸的方法
CN102731592A (zh) 一种从橄榄叶提取橄榄苦甙和穗花杉双黄酮的方法
CN103356740B (zh) 黄芩素和黄芩黄酮总苷元提取物的制备方法
CN107118253A (zh) 茶皂素的制备方法
CN101759731B (zh) 亚麻籽胶和开环异落叶松树脂酚二葡萄糖苷的提取方法
CN100577676C (zh) 6-o-咖啡酰基熊果苷提取方法
CN108640956A (zh) 一种从油茶籽中制备黄酮苷的方法
CN102351782B (zh) 一种从桑叶中提取1-脱氧野尻霉素和白藜芦醇的方法
CN101880303A (zh) 一种从苦瓜中提取苦瓜皂苷的方法
CN102028724A (zh) 黄麻叶中总黄酮提取物的制备方法
CN101468062A (zh) 一种制备冬凌草浓缩丸的方法
CN104592322A (zh) 一种从仙茅属植物提取分离仙茅苷的方法
CN103588832B (zh) 从常春藤叶中分离常春藤苷c及苷元的方法
CN101891729B (zh) 一种从青天葵中提取高纯度鼠李秦素的方法
CN104119410B (zh) 一种从杜仲果中制备桃叶珊瑚苷单体的工艺方法
CN102241656A (zh) 一种苜蓿素的制备方法
CN102649821A (zh) 一种从松塔中提取多糖和萜类化合物的方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20130814

Termination date: 20150615

EXPY Termination of patent right or utility model