CN102242093A - 高附加值鸡蛋活性成分综合开发方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种高附加值鸡蛋活性成分综合开发方法。步骤如下：1)将鸡蛋洗净，分离主要组分蛋壳、蛋清和蛋黄。2)将鸡蛋壳烘干、粉碎得蛋壳粉。3)将蛋清加水稀释，丙烯酸型大孔弱阳离子交换树脂进行离子交换，剩余液喷雾干燥得去除溶菌酶的蛋清粉。4)树脂加入10％硫酸铵溶液洗脱，洗脱液超滤、喷雾干燥得溶菌酶。5)将蛋黄加含NaCl的溶液稀释，离心得到蛋黄清液和蛋黄固体物。6)蛋黄清液通过3次盐析、超滤、喷雾干燥得卵黄抗体粗品。7)蛋黄固体物加入无水乙醇，超声辅助溶解，过滤得到蛋黄油。8)滤液进行减压蒸馏，加入丙酮，过滤、烘干得卵磷脂。9)滤液进行减压蒸馏浓缩，烘干得蛋黄胆固醇。本发明所开发的高附加值鸡蛋活性成分综合开发方法具有工艺合理、简单，各种高附加值产品活性高，能将鸡蛋有效成分充分利用，适用于工业化生产。
Description
技术领域
本发明涉及一种高附加值鸡蛋活性成分综合开发方法，属于天然活性成分工业化提取技术领域。
背景技术
近年来，国内外对蛋制品的深加工越来越重视。许多发达国家投入大量的资金和科技力量进行研究和开发，产品除传统的蛋白粉、蛋黄粉、全蛋粉等初级蛋制品外，出现了高附加值天然产物，如溶菌酶、蛋黄卵磷脂、蛋黄免疫球蛋白等60多个品种。
鸡蛋是人类最好的营养来源之一，含有大量高生物价值的蛋白质、脂类、微生物和矿物质，因此是一个巨大的宝库。鸡蛋的蛋白主要为卵白蛋白和卵球蛋白，同时含有3.4％-3.5％的溶菌酶。溶菌酶是一种天然的天然、无毒、安全性高的酶蛋白，在食品工业上的可用做食品防腐剂，在医药临床上具有抗感染、抗细菌、抗病毒的作用，在生物工程上可用于溶解菌体细胞壁。蛋黄中含有丰富的卵磷脂、胆固醇、蛋黄油和蛋黄素。卵磷脂是一种天然乳化剂，广泛应用于食品、化妆品、医药、纺织、皮革等工业。蛋黄油中的甘油三酯是人类重要的营养物质，其中的亚油酸、亚麻酸、花生四烯酸等是营养上不可缺少的脂肪酸。蛋壳中壳膜又称凤凰衣，有润肺、止咳、止血之功效，蛋壳本身也是含钙量高的材料，可用于饲料和化工原料。
我国是世界禽蛋产量最多的国家，有丰富禽蛋的资源，但由于禽蛋制品加工起步较晚，禽蛋中高附加值天然产物高效提取制备技术与产品开发技术不成熟，其产业化程度较低。因此，深入研究禽蛋产品中高附加值天然产物高效开发技术是目前十分迫切的需要。
从鸡蛋中提取单一或几种产品的专利和文献已经出现不少，但是这些制备方法往往只考虑单一产品的收率，而将鸡蛋中其他有效成分舍弃。本发明开发了一种综合利用鸡蛋的方法，充分发挥鸡蛋的价值，通过合理的工艺方法，获得高附加值的溶菌酶、卵磷脂、卵黄抗体、胆固醇和蛋黄油，以及副产物蛋清粉和蛋壳粉。
发明内容
本发明的目的是提供一种高附加值鸡蛋活性成分综合开发方法，产品包括溶菌酶、卵磷脂、卵黄抗体、胆固醇、蛋黄油、蛋清粉和蛋壳粉。
一种高附加值鸡蛋活性成分综合开发方法，其步骤如下：
1)鸡蛋主要组分的分离
a，将鸡蛋洗净，打开，取出蛋清和蛋黄，得到鸡蛋壳。
b，利用鸡蛋分离器将蛋清和蛋黄分离，获得蛋清和蛋黄。
c，将蛋黄按照1∶2～1∶4的体积比加0.1M的NaCl溶液稀释，充分搅拌均匀，用HCl调节稀释液的pH为5.2，边加HCl边搅拌，4℃静置过夜，8000rpm离心，得到蛋黄清液，和蛋黄固体物。
2)将鸡蛋壳在60℃下烘干，然后用粉碎机粉碎至300目，得到用于动物饲料的蛋壳粉。
3)溶菌酶和蛋清粉的提取和制备
a，将蛋清按照1∶0.5～1∶2的体积比加水稀释，充分搅拌均匀，搅拌速度以不起泡为宜。
b，将上述蛋清稀释液用HCl调pH至6～7，待作离子交换的样液。
c，将丙烯酸型大孔弱阳离子交换树脂分别用0.1M HCl、0.1M NaOH进行预处理，最后交换成Na型。
d，按样液和丙烯酸型大孔弱阳离子交换树脂质量比5∶1～3∶1进行混合，室温下搅拌2h，过滤。收集滤液，喷雾干燥机进行干燥，得到去除溶菌酶的白色粉末状的蛋清粉。
e，将树脂用pH6～7的去离子水清洗3次，去除杂质和杂蛋白。
f，按树脂等体积的量，加入10％硫酸铵溶液，室温下缓慢搅拌0.5h，过滤树脂，得洗脱液。清洗树脂3次，并将3次洗脱液合并。
g，将合并后的洗脱液进入超滤机超滤，进行脱盐和浓缩。
h，超滤后的液体进人喷雾干燥机进行干燥，得到白色粉末状的溶菌酶。溶解酶活性在12000～20000U/mg。
4)卵黄抗体的提取
a，将步骤1)c中获得的蛋黄清液，加入硫酸铵，配成40％饱和浓度，并调pH到5.2，4℃静置过夜，离心得到沉淀。
b，将沉淀加入水中溶解，水的用量与原蛋黄清液的比例为1∶2～1∶3。过滤去除不溶物，滤液中加入硫酸铵，配置成32％饱和浓度，并调pH到5.2，4℃静置过夜，离心得到沉淀。
c，将沉淀加入水中溶解，水的用量与原蛋黄清液的比例为1∶5～1∶6。过滤去除不溶物，滤液中加入硫酸铵，配置成30％饱和浓度，并调pH到5.2，4℃静置过夜，离心得到沉淀。
d，将沉淀加入水中溶解，水的用量与原蛋黄清液的比例为1∶8～1∶10。溶液进入超滤机超滤，进行脱盐和浓缩。
e，超滤后的液体进人喷雾干燥机进行干燥，得到白色略带黄色粉末状的卵黄抗体，纯度为60％～80％
5)卵磷脂、胆固醇和蛋黄油的提取
a，将步骤1)c中获得的蛋黄固体物按照1∶12～1∶16的质量比加入35～45℃的无水乙醇，放入超声仪中边搅拌边超声，超声频率为80～150Hz，时间为0.5～1h。
b，静止冷却到20～25℃，300～500目纱布过滤，得到的固体物为含有少量蛋白质的蛋黄油。
c，滤液进行减压蒸馏，浓缩到原体积的1/6～1/8，加入2～3倍的丙酮，搅拌均匀，300～500目纱布过滤，固体物在45℃烘箱中烘干，得到卵磷脂。
d，上述滤液进行减压蒸馏浓缩，45℃烘箱中烘干，得到蛋黄胆固醇。
附图说明
图1，高附加值鸡蛋活性成分综合开发方法的工艺路线图。
具体实施方式
以下通过实施例对本发明作进一步的描述：
实例1
将鸡蛋洗净，打开，取出蛋清和蛋黄，得到鸡蛋壳。将鸡蛋壳在60℃下烘干，然后用粉碎机粉碎至300目，得到用于动物饲料的蛋壳粉。
利用鸡蛋分离器将蛋清和蛋黄分离，获得蛋清和蛋黄。
将蛋清按照1∶1的体积比加水稀释，充分搅拌均匀，搅拌速度以不起泡为宜。将上述蛋清稀释液用HCl调pH至6，待作离子交换的样液。将丙烯酸型大孔弱阳离子交换树脂分别用0.1M HCl、0.1M NaOH进行预处理，最后交换成Na型。按样液和丙烯酸型大孔弱阳离子交换树脂质量比3∶1进行混合，室温下搅拌2h，过滤。收集滤液，喷雾干燥机进行干燥，得到去除溶菌酶的白色粉末状的蛋清粉。将树脂用pH 6的去离子水清洗3次，去除杂质和杂蛋白。按树脂等体积的量，加入10％硫酸铵溶液，室温下缓慢搅拌0.5h，过滤树脂，得洗脱液。清洗树脂3次，并将3次洗脱液合并。将合并后的洗脱液进入超滤机超滤，进行脱盐和浓缩。超滤后的液体进人喷雾干燥机进行干燥，得到白色粉末状的溶菌酶。
将蛋黄按照1∶3的体积比加0.1M的NaCl溶液稀释，充分搅拌均匀，用HCl调节稀释液的pH为5.2，边加HCl边搅拌，4℃静置过夜，8000rpm离心，得到蛋黄清液，和蛋黄固体物。
在蛋黄清液中加入硫酸铵，配成40％饱和浓度，并调pH到5.2，4℃静置过夜，离心得到沉淀。将沉淀加入水中溶解，水的用量与原蛋黄清液的比例为1∶2。过滤去除不溶物，滤液中加入硫酸铵，配置成32％饱和浓度，并调pH到5.2，4℃静置过夜，离心得到沉淀。将沉淀加入水中溶解，水的用量与原蛋黄清液的比例为1∶5。过滤去除不溶物，滤液中加入硫酸铵，配置成30％饱和浓度，并调pH到5.2，4℃静置过夜，离心得到沉淀。将沉淀加入水中溶解，水的用量与原蛋黄清液的比例为1∶8。溶液进入超滤机超滤，进行脱盐和浓缩。超滤后的液体进人喷雾干燥机进行干燥，得到白色略带黄色粉末状的卵黄抗体。
将蛋黄固体物按照1∶14的质量比加入45℃的无水乙醇，放入超声仪中边搅拌边超声，超声频率为120Hz，时间为1h。静止冷却到20℃，300～500目纱布过滤，得到的固体物为含有少量蛋白质的蛋黄油。滤液进行减压蒸馏，浓缩到原体积的1/6，加入2倍的丙酮，搅拌均匀，300～500目纱布过滤，固体物在45℃烘箱中烘干，得到卵磷脂。滤液进行减压蒸馏浓缩，45℃烘箱中烘干，得到蛋黄胆固醇。
实例2
将鸡蛋洗净，打开，取出蛋清和蛋黄，得到鸡蛋壳。将鸡蛋壳在60℃下烘干，然后用粉碎机粉碎至300目，得到用于动物饲料的蛋壳粉。
利用鸡蛋分离器将蛋清和蛋黄分离，获得蛋清和蛋黄。
将蛋清按照1∶1.5的体积比加水稀释，充分搅拌均匀，搅拌速度以不起泡为宜。将上述蛋清稀释液用HCl调pH至6.5，待作离子交换的样液。将丙烯酸型大孔弱阳离子交换树脂分别用0.1M HCl、0.1M NaOH进行预处理，最后交换成Na型。按样液和丙烯酸型大孔弱阳离子交换树脂质量比4∶1进行混合，室温下搅拌2h，过滤。收集滤液，喷雾干燥机进行干燥，得到去除溶菌酶的白色粉末状的蛋清粉。将树脂用pH6.5的去离子水清洗3次，去除杂质和杂蛋白。按树脂等体积的量，加入10％硫酸铵溶液，室温下缓慢搅拌0.5h，过滤树脂，得洗脱液。清洗树脂3次，并将3次洗脱液合并。将合并后的洗脱液进入超滤机超滤，进行脱盐和浓缩。超滤后的液体进人喷雾干燥机进行干燥，得到白色粉末状的溶菌酶。
将蛋黄按照1∶2的体积比加0.1M的NaCl溶液稀释，充分搅拌均匀，用HCl调节稀释液的pH为5.2，边加HCl边搅拌，4℃静置过夜，8000rpm离心，得到蛋黄清液，和蛋黄固体物。
在蛋黄清液中加入硫酸铵，配成40％饱和浓度，并调pH到5.2，4℃静置过夜，离心得到沉淀。将沉淀加入水中溶解，水的用量与原蛋黄清液的比例为1∶2.5。过滤去除不溶物，滤液中加入硫酸铵，配置成32％饱和浓度，并调pH到5.2，4℃静置过夜，离心得到沉淀。将沉淀加入水中溶解，水的用量与原蛋黄清液的比例为1∶6。过滤去除不溶物，滤液中加入硫酸铵，配置成30％饱和浓度，并调pH到5.2，4℃静置过夜，离心得到沉淀。将沉淀加入水中溶解，水的用量与原蛋黄清液的比例为1∶10。溶液进入超滤机超滤，进行脱盐和浓缩。超滤后的液体进人喷雾干燥机进行干燥，得到白色略带黄色粉末状的卵黄抗体。
将蛋黄固体物按照1∶16的质量比加入35℃的无水乙醇，放入超声仪中边搅拌边超声，超声频率为150Hz，时间为1h。静止冷却到20℃，300～500目纱布过滤，得到的固体物为含有少量蛋白质的蛋黄油。滤液进行减压蒸馏，浓缩到原体积的1/7，加入3倍的丙酮，搅拌均匀，300～500目纱布过滤，固体物在45℃烘箱中烘干，得到卵磷脂。滤液进行减压蒸馏浓缩，45℃烘箱中烘干，得到蛋黄胆固醇。
实例3
将鸡蛋洗净，打开，取出蛋清和蛋黄，得到鸡蛋壳。将鸡蛋壳在60℃下烘干，然后用粉碎机粉碎至300目，得到用于动物饲料的蛋壳粉。
利用鸡蛋分离器将蛋清和蛋黄分离，获得蛋清和蛋黄。
将蛋清按照1∶0.5的体积比加水稀释，充分搅拌均匀，搅拌速度以不起泡为宜。将上述蛋清稀释液用HCl调pH至6，待作离子交换的样液。将丙烯酸型大孔弱阳离子交换树脂分别用0.1M HCl、0.1MNaOH进行预处理，最后交换成Na型。按样液和丙烯酸型大孔弱阳离子交换树脂质量比5∶1进行混合，室温下搅拌2h，过滤。收集滤液，喷雾干燥机进行干燥，得到去除溶菌酶的白色粉末状的蛋清粉。将树脂用pH6的去离子水清洗3次，去除杂质和杂蛋白。按树脂等体积的量，加入10％硫酸铵溶液，室温下缓慢搅拌0.5h，过滤树脂，得洗脱液。清洗树脂3次，并将3次洗脱液合并。将合并后的洗脱液进入超滤机超滤，进行脱盐和浓缩。超滤后的液体进人喷雾干燥机进行干燥，得到白色粉末状的溶菌酶。
将蛋黄按照1∶2的体积比加0.1M的NaCl溶液稀释，充分搅拌均匀，用HCl调节稀释液的pH为5.2，边加HCl边搅拌，4℃静置过夜，8000rpm离心，得到蛋黄清液，和蛋黄固体物。
在蛋黄清液中加入硫酸铵，配成40％饱和浓度，并调pH到5.2，4℃静置过夜，离心得到沉淀。将沉淀加入水中溶解，水的用量与原蛋黄清液的比例为1∶2。过滤去除不溶物，滤液中加入硫酸铵，配置成32％饱和浓度，并调pH到5.2，4℃静置过夜，离心得到沉淀。将沉淀加入水中溶解，水的用量与原蛋黄清液的比例为1∶5。过滤去除不溶物，滤液中加入硫酸铵，配置成30％饱和浓度，并调pH到5.2，4℃静置过夜，离心得到沉淀。将沉淀加入水中溶解，水的用量与原蛋黄清液的比例为1∶8。溶液进入超滤机超滤，进行脱盐和浓缩。超滤后的液体进人喷雾干燥机进行干燥，得到白色略带黄色粉末状的卵黄抗体。
将蛋黄固体物按照1∶12的质量比加入35℃的无水乙醇，放入超声仪中边搅拌边超声，超声频率为80Hz，时间为0.5h。静止冷却到20℃，300～500目纱布过滤，得到的固体物为含有少量蛋白质的蛋黄油。滤液进行减压蒸馏，浓缩到原体积的1/6，加入2倍的丙酮，搅拌均匀，300～500目纱布过滤，固体物在45℃烘箱中烘干，得到卵磷脂。滤液进行减压蒸馏浓缩，45℃烘箱中烘干，得到蛋黄胆固醇。
实例4
将鸡蛋洗净，打开，取出蛋清和蛋黄，得到鸡蛋壳。将鸡蛋壳在60℃下烘干，然后用粉碎机粉碎至300目，得到用于动物饲料的蛋壳粉。
利用鸡蛋分离器将蛋清和蛋黄分离，获得蛋清和蛋黄。
将蛋清按照1∶2的体积比加水稀释，充分搅拌均匀，搅拌速度以不起泡为宜。将上述蛋清稀释液用HCl调pH至7，待作离子交换的样液。将丙烯酸型大孔弱阳离子交换树脂分别用0.1M HCl、0.1M NaOH进行预处理，最后交换成Na型。按样液和丙烯酸型大孔弱阳离子交换树脂质量比3∶1进行混合，室温下搅拌2h，过滤。收集滤液，喷雾干燥机进行干燥，得到去除溶菌酶的白色粉末状的蛋清粉。将树脂用pH 7的去离子水清洗3次，去除杂质和杂蛋白。按树脂等体积的量，加入10％硫酸铵溶液，室温下缓慢搅拌0.5h，过滤树脂，得洗脱液。清洗树脂3次，并将3次洗脱液合并。将合并后的洗脱液进入超滤机超滤，进行脱盐和浓缩。超滤后的液体进人喷雾干燥机进行干燥，得到白色粉末状的溶菌酶。
将蛋黄按照1∶4的体积比加0.1M的NaCl溶液稀释，充分搅拌均匀，用HCl调节稀释液的pH为5.2，边加HCl边搅拌，4℃静置过夜，8000rpm离心，得到蛋黄清液，和蛋黄固体物。
在蛋黄清液中加入硫酸铵，配成40％饱和浓度，并调pH到5.2，4℃静置过夜，离心得到沉淀。将沉淀加入水中溶解，水的用量与原蛋黄清液的比例为1∶3。过滤去除不溶物，滤液中加入硫酸铵，配置成32％饱和浓度，并调pH到5.2，4℃静置过夜，离心得到沉淀。将沉淀加入水中溶解，水的用量与原蛋黄清液的比例为1∶6。过滤去除不溶物，滤液中加入硫酸铵，配置成30％饱和浓度，并调pH到5.2，4℃静置过夜，离心得到沉淀。将沉淀加入水中溶解，水的用量与原蛋黄清液的比例为1∶10。溶液进入超滤机超滤，进行脱盐和浓缩。超滤后的液体进人喷雾干燥机进行干燥，得到白色略带黄色粉末状的卵黄抗体。
将蛋黄固体物按照1∶16的质量比加入45℃的无水乙醇，放入超声仪中边搅拌边超声，超声频率为150Hz，时间为1h。静止冷却到25℃，300～500目纱布过滤，得到的固体物为含有少量蛋白质的蛋黄油。滤液进行减压蒸馏，浓缩到原体积的1/8，加入3倍的丙酮，搅拌均匀，300～500目纱布过滤，固体物在45℃烘箱中烘干，得到卵磷脂。滤液进行减压蒸馏浓缩，45℃烘箱中烘干，得到蛋黄胆固醇。
Claims (11)
1.一种高附加值鸡蛋活性成分综合开发方法，产品包括溶菌酶、卵磷脂、卵黄抗体、胆固醇、蛋黄油、蛋清粉和蛋壳粉。其特征在于包括以下步骤：
(1)鸡蛋主要组分的分离：
a，将鸡蛋洗净，打开，取出蛋清和蛋黄，得到鸡蛋壳；
b，利用鸡蛋分离器将蛋清和蛋黄分离，获得蛋清和蛋黄；
c，将蛋黄加0.1M的NaCl水稀释，充分搅拌均匀，用HCl调节稀释液的pH为5.2，边加HCl边搅拌，4℃静置过夜，8000rpm离心，得到蛋黄清液，和蛋黄固体物；
(2)将鸡蛋壳在60℃下烘干，然后用粉碎机粉碎至300目，得到用于动物饲料的蛋壳粉；
(3)溶菌酶和蛋清粉的提取和制备：
a，将蛋清加水稀释，充分搅拌均匀，搅拌速度以不起泡为宜；
b，将上述蛋清稀释液用HCl调上样pH，待作离子交换的样液；
c，将丙烯酸型大孔弱阳离子交换树脂分别用0.1M HCl、0.1M NaOH进行预处理，最后交换成Na型；
d，按样液和丙烯酸型大孔弱阳离子交换树脂进行混合，室温下搅拌2h，过滤。收集滤液，喷雾干燥机进行干燥，得到去除溶菌酶的白色粉末状的蛋清粉；
e，将树脂用上样pH的去离子水清洗3次，去除杂质和杂蛋白；
f，按树脂等体积的量，加入10％硫酸铵溶液，室温下缓慢搅拌0.5h，过滤树脂，得洗脱液。清洗树脂3次，并将3次洗脱液合并；
g，将合并后的洗脱液进入超滤机超滤，进行脱盐和浓缩；
h，超滤后的液体进人喷雾干燥机进行干燥，得到白色粉末状的溶菌酶；
(4)卵黄抗体的提取：
a，将步骤1)c中获得的蛋黄清液，加入硫酸铵，配成40％饱和浓度，并调pH到5.2，4℃静置过夜，离心得到沉淀；
b，将沉淀加入水中溶解。过滤去除不溶物，滤液中加入硫酸铵，配置成32％饱和浓度，并调pH到5.2，4℃静置过夜，离心得到沉淀；
c，将沉淀加入水中溶解。过滤去除不溶物，滤液中加入硫酸铵，配置成30％饱和浓度，并调pH到5.2，4℃静置过夜，离心得到沉淀；
d，将沉淀加入水中溶解。溶液进入超滤机超滤，进行脱盐和浓缩；
e，超滤后的液体进人喷雾干燥机进行干燥，得到白色略带黄色粉末状的卵黄抗体；
(5)卵磷脂、胆固醇和蛋黄油的提取：
a，将步骤1)c中获得的蛋黄固体物加入无水乙醇，放入超声仪中边搅拌边超声；
b，静止冷却，300～500目纱布过滤，得到的固体物为含有少量蛋白质的蛋黄油；
c，滤液进行减压蒸馏浓缩，加入丙酮，搅拌均匀，300～500目纱布过滤，固体物在45℃烘箱中烘干，得到卵磷脂；
d，上述滤液进行减压蒸馏浓缩，45℃烘箱中烘干，得到蛋黄胆固醇。
2.根据权利要求1所述的高附加值鸡蛋活性成分综合开发方法，其特征在于步骤(1)c中蛋黄与0.1M的NaCl的体积比为1∶2～1∶4。
3.根据权利要求1所述的高附加鸡蛋活性成分综合开发方法，其特征在于步骤(3)a中蛋清与水的体积比为1∶0.5～1∶2。
4.根据权利要求1所述的高附加鸡蛋活性成分综合开发方法，其特征在于步骤(3)b中上样pH为6～7。
5.根据权利要求1所述的高附加鸡蛋活性成分综合开发方法，其特征在于步骤(3)c中样液和丙烯酸型大孔弱阳离子交换树脂质量比5∶1～3∶1。
6.根据权利要求1所述的高附加鸡蛋活性成分综合开发方法，其特征在于步骤(4)b中水的用量与原蛋黄清液的比例为1∶2～1∶3。
7.根据权利要求1所述的高附加鸡蛋活性成分综合开发方法，其特征在于步骤(4)c水的用量与原蛋黄清液的比例为1∶5～1∶6。
8.根据权利要求1所述的高附加鸡蛋活性成分综合开发方法，其特征在于步骤(4)d水的用量与原蛋黄清液的比例为1∶8～1∶10。
9.根据权利要求1所述的高附加鸡蛋活性成分综合开发方法，其特征在于步骤(5)a中蛋黄固体物与无水乙醇的质量比为1∶12～1∶16，无水乙醇的温度为35～45℃，超声频率为80～150Hz，超声时间为0.5～1h。
10.根据权利要求1所述的高附加鸡蛋活性成分综合开发方法，其特征在于步骤(5)b中冷却的温度为20～25℃。
11.根据权利要求1所述的高附加鸡蛋活性成分综合开发方法，其特征在于步骤(5)c中浓缩的体积到原体积的1/6～1/8，丙酮的用量为浓缩后滤液体积的2～3倍。
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