CN102232922A - 一种人参皂苷Rg1注射制剂的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种人参皂苷Rg1注射制剂的制备方法，属于医药技术领域，其特征在于以人参皂苷Rg1物理化学性质为基础，结合注射制剂研究方法，在制备注射剂时(水针剂、粉针剂或冻干粉针剂)，调整适当的浓度和pH值，以保证产品的质量。稳定性实验表明，本发明制备方法得到注射制剂具有很好的稳定性。
Description
技术领域
本发明涉及医药技术领域，具体涉及一种人参皂苷Rg1注射制剂的制备方法。
背景技术
人参皂苷Rg1主要来源于五加科人参属人参、三七、西洋参、越南人参、竹节参，葫芦科绞股蓝属绞股蓝、缘果绞股蓝等植物的根、茎、叶、花蕾中，具有很好的药理活性：(1)对心肌缺血再灌注的保护作用，研究表明，人参皂苷Rg1可减少SD乳鼠心肌缺血细胞的损伤，发挥对心肌缺血再灌注的保护作用；(2)对脑缺血的保护作用，人参皂苷Rg1可通过改善动物微循环而增加脑血流量，发挥改善脑缺血的作用；(3)具有抗血栓作用，人参皂苷Rg1可明显降低实验性血栓形成，能够抑制凝血酶诱导的血小板聚集；(4)具有抗突变和抗肿瘤作用，人参皂苷Rg1对体细胞和生殖细胞的DNA损伤均有保护作用，对小鼠移植性肿瘤也有一定的抑瘤作用；(5)具有抗疲劳和耐缺氧作用，人参皂苷Rg1对小鼠抗疲劳和耐缺氧有明显的效果；(6)具有抗失血性休克的作用；等等。综上所述，人参皂苷Rg1具有显著而广泛的药理活性，成药基础优良。人参皂苷Rg1不适合制备成肠道给药制剂，制备成注射制剂具有很好的作用。
人参皂苷Rg1注射剂有望成为创制新药，但人参皂苷Rg1物理化学性质很复杂，将其制备成注射制剂，需要通过大量的创造性的实验才能确定，查阅文献，未有制备人参皂苷Rg1注射制剂研究的详细报道。
发明内容
基于上述原因，本院的科研人员通过多次研究，以人参皂苷Rg1物理化学性质为基础，结合注射制剂研究方法，通过大量的创造性实验确定了本发明制备方法：人参皂苷Rg1在制备注射剂时(水针剂、粉针剂或冻干粉针剂)，需调整适当的浓度和pH值，才能保证产品的质量，因此，我们通过实验确定了浓度值和pH值，确保人参皂苷Rg1注射剂质量。
本发明通过下述技术方案实现的。
一种人参皂苷Rg1注射制剂的制备方法，取人参皂苷Rg1，加入注射用水溶解完全，加入或不加入药用辅料，加入活性炭吸附，过滤，滤液加注射用水使溶液人参皂苷Rg1浓度为5mg/ml-20mg/ml，加入pH调节剂，使溶液pH值为7.0-8.5，灭菌，制备成注射制剂。
其中pH调节剂为氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸氢钠、碳酸氢钾、磷酸氢钾、磷酸氢钠、枸橼酸钠、枸橼酸钾、琥珀酸钠、琥珀酸钾中的一种或几种。
其中注射制剂中水针剂灭菌包括但不限于为121℃30分钟；也可以使用115℃灭菌60分钟以上；使用132℃灭菌10分钟等，最终使制剂F0大于8。
其中注射制剂中粉针剂或冻干粉针剂灭菌包括但不限于为0.22μm滤芯过滤；也可以使用0.10μm滤芯过滤；也可以使用截取分子量不小于1000超滤膜超滤。
其中药用辅料为甘露醇、蔗糖、乳糖、右旋糖酐中的一种或几种。
一、检测分析方法
采用高效液相色谱法进行含量测定；
色谱柱：C18反相色谱柱；
色谱条件与***适用性实验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流速1.0ml/min；柱温25℃；检测波长203nm；理论板数按人参皂苷Rg1计应不低于2500；以水∶乙腈为流动相，按下述梯度洗脱条件进行梯度洗脱；
0-40分钟，水的比例由80％降至50％，乙腈的比例由20％升至50％；
对照品溶液的配制：精密称取人参皂苷Rg1对照品到容量瓶中，加甲醇溶解摇匀，并稀释至刻度；
供试品溶液的配制：精密称取或量取样品，经过处理后，放到容量瓶中，加甲醇溶解摇匀，并稀释至刻度；
测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，采用按外标法以峰面积计算，即得。
二、工艺参数对比实验
1、水针剂稳定性实验
方案1：取人参皂苷Rg1，加入注射用水溶解完全，加入活性炭吸附，过滤，滤液加注射用水使溶液人参皂苷Rg1浓度为4mg/ml，加入pH调节剂氢氧化钠，使溶液pH值为6.5，121℃灭菌30分钟，制备成水针剂。
方案2：取人参皂苷Rg1，加入注射用水溶解完全，加入活性炭吸附，过滤，滤液加注射用水使溶液人参皂苷Rg1浓度为5mg/ml，加入pH调节剂氢氧化钠，使溶液pH值为7.0，121℃灭菌30分钟，制备成水针剂。
方案3：取人参皂苷Rg1，加入注射用水溶解完全，加入活性炭吸附，过滤，滤液加注射用水使溶液人参皂苷Rg1浓度为10mg/ml，加入pH调节剂氢氧化钠，使溶液pH值为6.5，121℃灭菌30分钟，制备成水针剂。
方案4：取人参皂苷Rg1，加入注射用水溶解完全，加入活性炭吸附，过滤，滤液加注射用水使溶液人参皂苷Rg1浓度为10mg/ml，加入pH调节剂氢氧化钠，使溶液pH值为7.0，121℃灭菌30分钟，制备成水针剂。
方案5：取人参皂苷Rg1，加入注射用水溶解完全，加入活性炭吸附，过滤，滤液加注射用水使溶液人参皂苷Rg1浓度为20mg/ml，加入pH调节剂氢氧化钠，使溶液pH值为6.5，121℃灭菌30分钟，制备成水针剂。
方案6：取人参皂苷Rg1，加入注射用水溶解完全，加入活性炭吸附，过滤，滤液加注射用水使溶液人参皂苷Rg1浓度为20mg/ml，加入pH调节剂氢氧化钠，使溶液pH值为7.0，121℃灭菌30分钟，制备成水针剂。
方案7：取人参皂苷Rg1，加入注射用水溶解完全，加入活性炭吸附，过滤，滤液加注射用水使溶液人参皂苷Rg1浓度为10mg/ml，加入pH调节剂氢氧化钠，使溶液pH值为7.5，121℃灭菌30分钟，制备成水针剂。
方案8：取人参皂苷Rg1，加入注射用水溶解完全，加入活性炭吸附，过滤，滤液加注射用水使溶液人参皂苷Rg1浓度为15mg/ml，加入pH调节剂氢氧化钠，使溶液pH值为8.0，121℃灭菌30分钟，制备成水针剂。
方案9：取人参皂苷Rg1，加入注射用水溶解完全，加入活性炭吸附，过滤，滤液加注射用水使溶液人参皂苷Rg1浓度为20mg/ml，加入pH调节剂氢氧化钠，使溶液pH值为8.5，121℃灭菌30分钟，制备成水针剂。
实验方法：将上述人参皂苷Rg1原料按照上述检测分析方法，检测其纯度和相关物质的含量，制备成制剂后，再按照所述检测分析方法，检测其纯度和相关物质的含量。
实验结果：见表1。
表1不同工艺得到水针剂稳定性结果
| 组别 | 相关物质三七皂苷R1％ | 人参皂苷Rg1 | 相关物质中较大杂质1(19分钟左右出峰) | 相关物质中较大杂质2(26分钟左右出峰) |
| 原料 | 0.650 | 98.784 | 0.170 | 0.369 |
| 方案1 | 0.526 | 90.153 | 5.904 | 2.993 |
| 方案2 | 0.623 | 97.982 | 0.713 | 1.203 |
| 方案3 | 0.561 | 92.283 | 5.147 | 1.241 |
| 方案4 | 0.628 | 97.996 | 0.965 | 0.409 |
| 方案5 | 0.567 | 92.405 | 4.821 | 0.969 |
| 方案6 | 0.637 | 98.012 | 0.182 | 0.844 |
| 方案7 | 0.641 | 98.681 | 0.176 | 0.486 |
| 方案8 | 0.644 | 98.724 | 0.174 | 0.428 |
| 方案9 | 0.648 | 98.762 | 0.172 | 0.402 |
注：上述实验是在多次实验基础上的验证实验。
实验结论：通过上述实验表明，在制备人参皂苷Rg1水针剂时，应保持溶液的浓度为5mg/ml-20mg/ml，调整pH为7-8.5，灭菌后注射制剂具有很好的稳定性。
2、冻干粉针剂稳定性实验
方案1：取人参皂苷Rg1，加入注射用水溶解完全，加入活性炭吸附，过滤，滤液加注射用水使溶液人参皂苷Rg1浓度为4mg/ml，加入pH调节剂氢氧化钠，使溶液pH值为6.5，0.22μm滤芯过滤，冷冻干燥，制备成冻干粉针剂。
方案2：取人参皂苷Rg1，加入注射用水溶解完全，加入活性炭吸附，过滤，滤液加注射用水使溶液人参皂苷Rg1浓度为5mg/ml，加入pH调节剂氢氧化钠，使溶液pH值为7.0，0.22μm滤芯过滤，冷冻干燥，制备成冻干粉针剂。
方案3：取人参皂苷Rg1，加入注射用水溶解完全，加入活性炭吸附，过滤，滤液加注射用水使溶液人参皂苷Rg1浓度为10mg/ml，加入pH调节剂氢氧化钠，使溶液pH值为6.5，0.22μm滤芯过滤，冷冻干燥，制备成冻干粉针剂。
方案4：取人参皂苷Rg1，加入注射用水溶解完全，加入活性炭吸附，过滤，滤液加注射用水使溶液人参皂苷Rg1浓度为10mg/ml，加入pH调节剂氢氧化钠，使溶液pH值为7.0，0.22μm滤芯过滤，冷冻干燥，制备成冻干粉针剂。
方案5：取人参皂苷Rg1，加入注射用水溶解完全，加入活性炭吸附，过滤，滤液加注射用水使溶液人参皂苷Rg1浓度为20mg/ml，加入pH调节剂氢氧化钠，使溶液pH值为6.5，0.22μm滤芯过滤，冷冻干燥，制备成冻干粉针剂。
方案6：取人参皂苷Rg1，加入注射用水溶解完全，加入活性炭吸附，过滤，滤液加注射用水使溶液人参皂苷Rg1浓度为20mg/ml，加入pH调节剂氢氧化钠，使溶液pH值为7.0，0.22μm滤芯过滤，冷冻干燥，制备成冻干粉针剂。
方案7：取人参皂苷Rg1，加入注射用水溶解完全，加入活性炭吸附，过滤，滤液加注射用水使溶液人参皂苷Rg1浓度为10mg/ml，加入pH调节剂氢氧化钠，使溶液pH值为7.5，0.22μm滤芯过滤，冷冻干燥，制备成冻干粉针剂。
方案8：取人参皂苷Rg1，加入注射用水溶解完全，加入活性炭吸附，过滤，滤液加注射用水使溶液人参皂苷Rg1浓度为15mg/ml，加入pH调节剂氢氧化钠，使溶液pH值为8.0，0.22μm滤芯过滤，冷冻干燥，制备成冻干粉针剂。
方案9：取人参皂苷Rg1，加入注射用水溶解完全，加入活性炭吸附，过滤，滤液加注射用水使溶液人参皂苷Rg1浓度为20mg/ml，加入pH调节剂氢氧化钠，使溶液pH值为8.5，0.22μm滤芯过滤，冷冻干燥，制备成冻干粉针剂。
实验方法：将上述人参皂苷Rg1原料按照上述检测分析方法，检测其纯度和相关物质的含量，制备成制剂后，加速实验(温度40℃±2，湿度75％±5％，6各月)后，再按照所述检测分析方法，检测制剂人参皂苷Rg1纯度和相关物质的含量。
实验结果：见表2。
表2不同工艺得到冻干粉针剂稳定性结果
| 组别 | 相关物质三七皂苷R1％ | 人参皂苷Rg1 | 相关物质中较大杂质1 | 相关物质中较大杂质2 |
| 原料 | 0.650 | 98.784 | 0.170 | 0.369 |
| 方案1 | 0.275 | 88.259 | 8.423 | 3.039 |
| 方案2 | 0.641 | 98.264 | 0.547 | 0.512 |
| 方案3 | 0.307 | 89.452 | 7.891 | 2.31 |
| 方案4 | 0.645 | 98.347 | 0.481 | 0.375 |
| 方案5 | 0.381 | 89.742 | 7.241 | 2.617 |
| 方案6 | 0.637 | 98.527 | 0.348 | 0.37 |
| 方案7 | 0.645 | 98.697 | 0.217 | 0.381 |
| 方案8 | 0.643 | 98.743 | 0.199 | 0.374 |
| 方案9 | 0.648 | 98.751 | 0.187 | 0.372 |
注：上述实验是在多次实验基础上的验证实验。
实验结论：通过上述实验表明，在制备人参皂苷Rg1冻干粉针剂时，应保持溶液的浓度为5mg/ml-20mg/ml，调整pH为7-8.5，加速实验后注射制剂具有很好的稳定性。
注：按照上述实验方法，进行粉针剂(将冻干变为普通干燥)，所得实验结论与上述实验结论相同。
制备实施例
实施例1
一种人参皂苷Rg1注射制剂的制备方法，取人参皂苷Rg1，加入注射用水溶解完全，加入活性炭吸附，过滤，滤液加注射用水使溶液人参皂苷Rg1浓度为5mg/ml，加入pH调节剂氢氧化钠，使溶液pH值为7.0，121℃灭菌30分钟，按照水针剂常规制备方法制备成水针剂。
实施例2
一种人参皂苷Rg1注射制剂的制备方法，取人参皂苷Rg1，加入注射用水溶解完全，加入活性炭吸附，过滤，滤液加注射用水使溶液人参皂苷Rg1浓度为20mg/ml，加入pH调节剂氢氧化钾，使溶液pH值为8.5，121℃灭菌30分钟，按照水针剂常规制备方法制备成水针剂。
实施例3
一种人参皂苷Rg1注射制剂的制备方法，取人参皂苷Rg1，加入注射用水溶解完全，加入活性炭吸附，过滤，滤液加注射用水使溶液人参皂苷Rg1浓度为10mg/ml，加入pH调节剂碳酸氢钾，使溶液pH值为8.0，115℃灭菌60分钟，按照水针剂常规制备方法制备成水针剂。
实施例4
一种人参皂苷Rg1注射制剂的制备方法，取人参皂苷Rg1，加入注射用水溶解完全，加入活性炭吸附，过滤，滤液加注射用水使溶液人参皂苷Rg1浓度为8mg/ml，加入pH调节剂碳酸氢钾，使溶液pH值为7.5，132℃灭菌5分钟，按照水针剂常规制备方法制备成水针剂。
实施例5
一种人参皂苷Rg1注射制剂的制备方法，取人参皂苷Rg1，加入注射用水溶解完全，加入活性炭吸附，过滤，滤液加注射用水使溶液人参皂苷Rg1浓度为12mg/ml，加入pH调节剂磷酸氢钾，使溶液pH值为7.5，121℃灭菌30分钟，按照水针剂常规制备方法制备成水针剂。
实施例6
一种人参皂苷Rg1注射制剂的制备方法，取人参皂苷Rg1，加入注射用水溶解完全，加入药用辅料甘露醇，加入活性炭吸附，过滤，滤液加注射用水使溶液人参皂苷Rg1浓度为5mg/ml，加入pH调节剂枸橼酸钾，使溶液pH值为8.0，0.22μm滤芯过滤，干燥，制备成粉针剂。
实施例7
一种人参皂苷Rg1注射制剂的制备方法，取人参皂苷Rg1，加入注射用水溶解完全，加入药用辅料蔗糖和乳糖，加入活性炭吸附，过滤，滤液加注射用水使溶液人参皂苷Rg1浓度为20mg/ml，加入pH调节剂氢氧化钾，使溶液pH值为8.5，为0.22μm滤芯过滤灭菌，干燥，制备成粉针剂。
实施例8
一种人参皂苷Rg1注射制剂的制备方法，取人参皂苷Rg1，加入注射用水溶解完全，加入药用辅料右旋糖酐，加入活性炭吸附，过滤，滤液加注射用水使溶液人参皂苷Rg1浓度为15mg/ml，加入pH调节剂琥珀酸钾，使溶液pH值为7.5，0.22μm滤芯过滤灭菌，干燥，制备成粉针剂。
实施例9
一种人参皂苷Rg1注射制剂的制备方法，取人参皂苷Rg1，加入注射用水溶解完全，加入药用辅料甘露醇、蔗糖、右旋糖酐，加入活性炭吸附，过滤，滤液加注射用水使溶液人参皂苷Rg1浓度为17.5mg/ml，加入pH调节剂琥珀酸钠，使溶液pH值为7.0，0.10μm滤芯过滤灭菌，冷冻干燥，制备成冻干粉针剂。
实施例10
一种人参皂苷Rg1注射制剂的制备方法，取人参皂苷Rg1，加入注射用水溶解完全，加入药用辅料乳糖，加入活性炭吸附，过滤，滤液加注射用水使溶液人参皂苷Rg1浓度为12.5mg/ml，加入pH调节剂枸橼酸钠，使溶液pH值为7.5，截取分子量为1000超滤膜超滤灭菌，冷冻干燥，制备成冻干粉针剂。
注：本发明所要求保护的具体技术方案，不限于上述实施例所表达的技术方案的具体组合。
Claims (5)
1.一种人参皂苷Rg1注射制剂的制备方法，其特征在于：取人参皂苷Rg1，加入注射用水溶解完全，加入或不加入药用辅料，加入活性炭吸附，过滤，滤液加注射用水使溶液人参皂苷Rg1浓度为5mg/ml-20mg/ml，加入pH调节剂，使溶液pH值为7.0-8.5，灭菌，制备成注射制剂。
2.根据权利要求1所述的一种人参皂苷Rg1注射制剂制备方法，其中pH调节剂为氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸氢钠、碳酸氢钾、磷酸氢钾、磷酸氢钠、枸橼酸钠、枸橼酸钾、琥珀酸钠、琥珀酸钾中的一种或几种。
3.根据权利要求1所述的一种人参皂苷Rg1注射制剂制备方法，其中注射制剂中水针剂灭菌为121℃30分钟。
4.根据权利要求1所述的一种人参皂苷Rg1注射制剂制备方法，其中注射制剂中粉针剂灭菌为0.22μm滤芯过滤。
5.根据权利要求1所述的一种人参皂苷Rg1注射制剂制备方法，其中药用辅料为甘露醇、蔗糖、乳糖、右旋糖酐中的一种或几种。
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