CN102199056A - 一种延长复合微生物肥料保存期的方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及的是微生物领域，具体的说是一种延长复合微生物肥料保存期的方法。具体为将糖蜜和麸皮添加到复合微生物肥料中，进而延长复合微生物肥料的保存期；其中，糖蜜和麸皮的添加量为复合微生物肥料总重量的2%~5%。本发明复合微生物肥料保存期的延长方法是将糖蜜和麸皮添加到复合微生物肥料中，可以使微生物的活力均有维持作用，通过添加和配合使用，可在保存过程中延长复合微生物肥料的保存期。

Description

一种延长复合微生物肥料保存期的方法

技术领域

本发明涉及的是微生物领域，具体的说是一种延长复合微生物肥料保存期的方法。

背景技术

微生物肥料是一类含有活微生物的特定制品，目前的研究表明，固氮菌、芽孢杆菌、光合细菌以及纤维分解菌、乳酸菌、酵母菌、放线菌等均在植物生产中具有功能作用。微生物肥料应用于农业生产中，能够获得特定的肥料效应，其中活微生物起到关键作用，由于微生物肥料中含有活的微生物活动因素，可促进植物生长。因此，微生物肥料中有效微生物活力的长期保持是维持微生物肥料长期有效性的关键所在。

目前，制约微生物肥料推广的主要因素是微生物肥料的有效微生物数量低，长期保存条件下效果愈加下降。开发延长微生物肥料保存期的保护剂是解决这一问题的有效手段之一。

发明内容

本发明的目的是提供一种延长复合微生物肥料保存期的方法。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：

一种延长复合微生物肥料保存期的方法：将糖蜜和麸皮添加到复合微生物肥料中，进而延长复合微生物肥料的保存期；其中，糖蜜和麸皮的添加量为复合微生物肥料总重量的2%~5%。

所述糖蜜和麸皮的质量比为1∶5-1∶4。所述糖蜜为甜菜制糖后的浓缩糖蜜。

所述复合微生物肥料为：

1）复合菌种的增殖培养：将产朊假丝酵母、乳酸链球菌、嗜酸乳杆菌、枯草芽孢杆菌、慢生大豆根瘤菌、生脂固氮螺菌、嗜沼泽红假单孢菌、巨大芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌和圆褐固氮菌分别按重量百分比1%-4%的接种量分别在各自的培养基中进行增殖培养，直至对数生长期；

2）将产朊假丝酵母、乳酸链球菌、嗜酸乳杆菌、枯草芽孢杆菌共同发酵培养至总菌数达到10⁹以上，与分别培养至对数生长期的慢生大豆根瘤菌、生脂固氮螺菌、嗜沼泽红假单孢菌、巨大芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌和圆褐固氮菌，按照共同发酵物占40%，单一培养细菌分别占10%的比例混合，得到复合微生物；

3）复合微生物肥料：将上述分别增值培养的菌种混合，而后将混合后菌种按照重量百分比4%接种于液体发酵培养基中，在30℃下，发酵培养70h，发酵物pH值为4.5-7.5，每毫升培养基中的有益菌总量达到30亿以上，得到复合微生物肥料。

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1.本发明复合微生物肥料保存期的延长方法是将糖蜜和麸皮添加到复合微生物肥料中，可以使微生物的活力均有维持作用，通过添加和配合使用，可在保存过程中延长复合微生物肥料的保存期；

2.本发明中添加糖蜜和麸皮可使复合微生物肥料的保存期可延长到12个月以上；并且本发明添加的物质易于获取，成本低廉。

具体实施方式

实施例1

1）复合菌种的增值培养：将产朊假丝酵母、乳酸链球菌、嗜酸乳杆菌和枯草芽孢杆菌分别按重量百分比3%的接种量分别在各自的培养基中进行增殖培养，直至对数生长期；

2）将上述分别增殖培养的产朊假丝酵母、乳酸链球菌、嗜酸乳杆菌、枯草芽孢杆菌按体积比1∶1∶1∶1混合，而后将混合后菌种按照重量百分比4%接种于液体发酵培养基中，在30℃下，发酵培养70h，发酵物pH值为4.5-7.5（培养过程中还有其他要求烦请写清楚），每毫升培养基中的有益菌总量达到30亿以上，其中液体发酵培养基为葡萄糖2%，蛋白胨1%，牛肉膏1%，酵母膏0.5%，余量为蒸馏水，然后将发酵产物分别与慢生大豆根瘤菌、生脂固氮螺菌、沼泽红假单孢菌和巨大芽孢杆菌混合，发酵产物占40%、慢生大豆根瘤菌占10%、生脂固氮螺菌占10%、沼泽红假单孢菌占10%、巨大芽孢杆菌占10%，胶质芽孢杆菌占10%和圆褐固氮菌占10%混合后得到复合微生物的发酵物。

上述菌株均可分别按照常规方法培养，本实施例给出的知识众多培养条件中的一种，分别为：

产朊假丝酵母的培养基：马铃薯浸粉3g，葡萄糖20g，琼脂粉15g，蒸馏水加至1000mL，121℃高压灭菌20分钟。产朊假丝酵母增殖培养条件28℃培养24-48h。

乳酸链球菌的培养基：葡萄糖2%，蛋白胨1%，牛肉膏1%，酵母膏0.5%，磷酸氢二钾0.2%，乙酸钠0.5%，柠檬酸铵0.2%，硫酸镁0.058%，硫酸锰0.025%，琼脂1.5-2%，pH6.5。121℃高压灭菌20分钟。乳酸链球菌增殖培养条件30℃培养48-72h。

嗜酸乳杆菌的培养基：葡萄糖2%，蛋白胨1%，牛肉膏1%，酵母膏0.5%，磷酸氢二钾0.2%，乙酸钠0.5%，柠檬酸铵0.2%，硫酸镁0.058%，硫酸锰0.025%，琼脂1.5-2%，pH6.5。121℃高压灭菌20分钟。嗜酸乳杆菌增殖培养条件37℃培养48-72h。

枯草芽孢杆菌的培养基：蛋白胨10g，琼脂20g，氯化钠5g，肉浸粉10g，水加至1000mL，pH7.2。121℃高压灭菌20分钟。枯草芽孢杆菌增殖培养条件30℃培养48-72h。

慢生大豆根瘤菌的培养基：甘露醇10g、K₂HPO₄0.5g、酵母粉0.4g、MgSO₄·7H₂O0.2g、NaCl0.1g、CaCl₂·6H₂O0.1g、蒸馏水1000mL、pH6.8-7.0。121℃高压灭菌20分钟。慢生大豆根瘤菌增殖培养条件28℃培养48-72h。

生脂固氮螺菌的培养基：蔗糖10g，K₂HPO₄0.5g，NaCl0.1g，酵母膏1g，柠檬酸铁（1%）1mL，CaSO₄0.2g，MgSO₄·7H2O0.2g，MnSO₄（1%）1mL，NaMoO₄（1%）1mL，硼酸（1%）1mL，蒸馏水1000mL，pH6.8-7.0；121℃高压灭菌20分钟。生脂固氮螺菌增殖培养条件在25-30℃条件下，培养48-72h。

嗜沼泽红假单孢菌的培养基：酵母粉0.3%，蛋白胨0.3%，硫酸镁0.05%，氯化钙0.03%，蒸馏水1000mL，pH6.8-7.0；121℃高压灭菌20分钟。嗜沼泽红假单孢菌增殖培养条件在30℃条件下，培养72-96h。

巨大芽孢杆菌的培养基：蛋白胨0.5%，牛肉膏0.3%，氯化钠0.5%，蒸馏水1000mL，pH7.0；121℃高压灭菌20分钟。巨大芽孢杆菌增殖培养条件在30℃条件下，培养24-48h。

胶质芽孢杆菌培养基：蔗糖10g，酵母膏0.2g，(NH₄)SO₄0.5g，MgSO₄0.1g，KCl0.1g，Na₂HPO₄0.1g，CaCO₃1.0g，蒸馏水1000mL ，pH7.0。121℃高压灭菌20分钟；增殖培养条件在32-36℃条件下，培养20-40h。

圆褐固氮菌培养基：葡萄糖10g，KH₂PO₄0.2g，MgSO₄·7H₂O0.2g，NaCl0.2g，CaSO₄·7H₂O0.2g，CaCO₃5.0g，蒸馏水1000mL，pH7.0-7.2，113℃灭菌30分钟。增殖培养条件在28-36℃条件下，培养24-48h。

上述菌株均购自中国农业微生物菌种保藏中心，并根据本领域普通技术人员所熟知的现有技术进行各自培养，其产朊假丝酵母于中国农业微生物菌种保藏中心的编号为ACCC20060；乳酸链球菌于中国农业微生物菌种保藏中心的编号为ACCC10653；嗜酸乳杆菌于中国工业微生物菌种保藏中心的编号为CICC6005；枯草芽孢杆菌于中国工业微生物菌种保藏中心的编号为CICC20037；慢生大豆根瘤菌于中国农业微生物菌种保藏中心的编号为ACCC15402；生脂固氮螺菌于中国农业微生物菌种保藏中心的编号为ACCC10481；沼泽红假单孢菌于中国农业微生物菌种保藏中心的编号为ACCC10649；巨大芽孢杆菌于中国农业微生物菌种保藏中心的编号为ACCC02991；胶质芽孢杆菌于中国农业微生物菌种保藏中心的编号为ACCC02983；圆褐固氮菌于中国农业微生物菌种保藏中心的编号为ACCC10098。

3）将糖蜜和麸皮添加到复合微生物肥料中，混合均匀，加入载体，20-40℃低温干燥（可适当选择20℃、30℃、35℃或40℃），进而延长复合微生物肥料的保存期；糖蜜和麸皮的添加量为复合微生物肥料总重量的5%，其中所述糖蜜和麸皮的质量比为1∶5，其中，糖蜜为甜菜制糖的副产品，是一种粘稠、黑褐色、呈半流动的物体。

将上述添加有糖蜜和麸皮的复合微生物肥料于25℃恒温保存，平板计数法测定保存不同时期的复合微生物肥料中的菌数（参见表1）。

表1添加保护剂对复合微生物肥料保存期的影响

实施例2

1)复合菌种的增值培养：将产朊假丝酵母、乳酸链球菌、嗜酸乳杆菌和枯草芽孢杆菌分别按重量百分比1％的接种量分别在各自的培养基中进行增殖培养，直至对数生长期；

2)将产朊假丝酵母、乳酸链球菌、嗜酸乳杆菌、枯草芽孢杆菌共同发酵培养至总菌数达到10⁹以上，与分别培养至对数生长期的慢生大豆根瘤菌、生脂固氮螺菌、嗜沼泽红假单孢菌、巨大芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌和圆褐固氮菌，按照共同发酵物占40％，单一培养细菌分别占10％的比例混合，得到复合微生物肥料。

3）将糖蜜和麸皮添加到复合微生物肥料中，混合均匀，加入载体，20-40℃低温干燥，进而延长复合微生物肥料的保存期；糖蜜和麸皮的添加量为复合微生物肥料总重量的2%，其中，所述糖蜜和麸皮的质量比为1∶4。

Claims (4)

1.一种延长复合微生物肥料保存期的方法，其特征在于：将糖蜜和麸皮添加到复合微生物肥料中，进而延长复合微生物肥料的保存期；其中，糖蜜和麸皮的添加量为复合微生物肥料总重量的2%~5%。

2.按权利要求1所述的延长复合微生物肥料保存期的方法，其特征在于：所述糖蜜和麸皮的质量比为1∶5-1∶4。

3.按权利要求1所述的延长复合微生物肥料保存期的方法，其特征在于：所述糖蜜为甜菜制糖后的浓缩糖蜜。

4.按权利要求1所述的延长复合微生物肥料保存期的方法，其特征在于：所述复合微生物肥料为：

1）复合菌种的增殖培养：将产朊假丝酵母、乳酸链球菌、嗜酸乳杆菌、枯草芽孢杆菌、慢生大豆根瘤菌、生脂固氮螺菌、嗜沼泽红假单孢菌、巨大芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌和圆褐固氮菌分别按重量百分比1%-4%的接种量在各自的培养基中进行增殖培养，直至对数生长期；

2）将产朊假丝酵母、乳酸链球菌、嗜酸乳杆菌、枯草芽孢杆菌共同发酵培养至总菌数达到10⁹个/mL以上，与分别培养至对数生长期的慢生大豆根瘤菌、生脂固氮螺菌、嗜沼泽红假单孢菌、巨大芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌和圆褐固氮菌，按照共同发酵物占40%，单一培养细菌分别占10%的比例混合，得到复合微生物;

3）复合微生物肥料：将上述分别增值培养的菌种混合，而后将混合后菌种按照重量百分比4%接种于液体发酵培养基中，在30℃下，发酵培养70h，发酵物pH值为4.5-7.5，每毫升培养基中的有益菌总量达到30亿以上，得到复合微生物肥料。