CN102187787A - 一种利用葡萄蔓屑栽培金福菇、大杯蕈珍稀食用菌的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种利用葡萄蔓屑栽培金福菇、大杯蕈两种珍稀食用菌的方法，其步骤包括：A、发酵培养液的制备；B、液体菌种的制备；C、颗粒菌种的制备；D、培养基的制备：按重量比取葡萄蔓屑68～72%、棉籽皮8～12%、经揉碎的干燥阔叶树落叶8～12%、麸皮8%、蔗糖1%、生石灰1%，然后按料水比1：1.4进行拌料，装袋，常规扎口，灭菌，待用；E、接种培养；F、采收。本发明将葡萄蔓处理开发为珍稀食用菌金福菇、大杯蕈的栽培原料，为菌类栽培产业提供一种天然培养基质，实现葡萄蔓的生物转化利用，降低金福菇、大杯蕈的栽培成本。
Description
技术领域
本发明涉及一种食用菌的栽培方法，尤其是一种利用葡萄蔓屑栽培金福菇、大杯蕈两类珍稀食用菌的组合技术方法。
背景技术
葡萄是世界性栽培果树之一。我国葡萄栽培面积已达438.4千公顷，居世界第五位。在葡萄园管理中，修剪出的枝条（即葡萄蔓）越来越多。据计算，我国葡萄园每年的冬剪枝条鲜重至少有402万吨。葡萄蔓中含有丰富的有机质和作物生长所需的营养元素，具有重要的利用价值。但目前，葡萄蔓作为林业废弃物基本没有得到开发利用，而是被随意堆放或焚烧，造成严重的资源浪费和环境污染。
另一方面，食用菌含有人体必须的多种氨基酸和维生素，具有较高的营养价值和一定的药用价值。现代医学研究表明，食用菌具有高蛋白、低脂肪、低热量的特点，因而被***粮农组织誉为21世纪的健康食品。金福菇（TricholomPLobPyensc Heim），又称为巨大口蘑、大白口蘑、洛巴伊口蘑，属于伞菌目、口蘑料、白蘑属，是一种正处于开发中的珍稀食用菌；金福菇属中高温型品种，菌丝生长温度为15～35℃，以20～28℃为最适，子实体生长温度15～31℃，以20～28℃为宜。大杯蕈（Clitocybe maxima）属真菌门、担子菌亚门、层菌纲、伞菌目、口蘑科、杯伞属，大杯蕈又名大杯伞，因为其子实体形状似漏斗或杯形而得名，是一种自然分布较多的木腐性土生菌，大杯蕈菌丝生长适温15～35℃,最适25～28℃,子实体的生长温度为23～32℃，属于中高温型。金福菇、大杯蕈目前主要是利用棉籽壳、木屑或稻草先堆制发酵后，采用装袋熟料覆土出菇，栽培成本相对较高。
综上所述，一方面葡萄蔓屑作为营养价值丰富的农业资源利用率几乎为零，另一方面金福菇、大杯蕈作为珍稀的食用菌栽培成本较高。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种利用葡萄蔓屑栽培金福菇、大杯蕈珍稀食用菌的方法，将葡萄蔓处理开发为珍稀食用菌金福菇、大杯蕈的栽培原料，为菌类栽培产业提供一种天然培养基质，实现葡萄蔓的生物转化利用，降低金福菇、大杯蕈的栽培成本。
为解决上述技术问题，本发明所采取的技术方案如下。
一种利用葡萄蔓屑栽培金福菇、大杯蕈珍稀食用菌的方法，其步骤包括：
A、发酵培养液的制备：取葡萄蔓屑和经揉碎的干燥阔叶树落叶，用自来水浸泡1小时后，加入玉米粉、豆饼粉，共煮微沸15分钟，过滤去渣得浸煮液，再加入葡萄糖、酵母膏、KH2PO4、MgSO4·7H2O，pH自然，即得发酵培养液,高压灭菌,待用；其中，上述各物料按重量份数比的用量为：葡萄蔓屑5，经揉碎的干燥阔叶树落叶5，自来水80～90，玉米粉0.5，豆饼粉0.5，葡萄糖2，酵母膏0.1，KH2PO4 0.1，MgSO4·7H2O 0.1；
B、液体菌种的制备：上步所得发酵培养液分装到摇瓶中，然后将此摇瓶和食用菌的试管种放到接种箱中进行灭菌，然后无菌操作，利用接种针挑取菌种一次或两次将食用菌的试管种接种到摇瓶中，静置培养20～30h后上摇床，160rpm、26℃培养90～100h，生物量达25g/100ml以上,镜检合格后待用；
C、颗粒菌种的制备：按重量比取麦粒79%、葡萄蔓屑20%、石膏1%；将麦粒用水浸泡过夜后，煮沸至将其掰开后无白芯为止，滤去水分，摊开并晾干其表面；然后加入葡萄蔓屑和石膏，搅拌均匀，pH自然，用细口瓶或双层聚丙烯塑料袋装至瓶/袋肩，高压灭菌；然后通过无菌操作, 将步骤B所得液体菌种接种到细口瓶或双层聚丙烯塑料袋中，接种量如下，液体菌种用量∶细口瓶容积或双层聚丙烯塑料袋容积=1∶45～55，26℃培养7～15天至满瓶／袋，备用；
D、培养基的制备：按重量比取葡萄蔓屑68～72%、棉籽皮8～12%、经揉碎的干燥阔叶树落叶8～12%、麸皮8%、蔗糖1%、生石灰1%，然后按料水比1：1.4进行拌料，装袋，常规扎口，灭菌，待用；
E、接种培养：无菌操作，按重量比5～10%的接种量将步骤C所得颗粒菌种接种到步骤D所得培养基中，26℃避光培养至满袋，覆土；覆土后减少通风换气，提高二氧化碳浓度，保持土壤湿润；待菌丝爬上土壤表面并均匀分布于土表时，加强通风换气或喷水促使菌丝倒伏，防止气生菌丝徒长影响出菇；菌丝体由营养阶段转入生殖阶段，菌丝扭结形成原基发生菇蕾，当菇蕾成长至米粒大小时，停止直接向菇蕾喷水，干燥天可向空中轻喷水雾，将空气湿度提高到80～85%，同时加强通风换气和光照强度，避免产生柄长盖薄的劣质菇；当子实体有3厘米长时，增加喷水次数，每天喷水两次，保障有足够的新鲜空气，提高覆土层含水量为20%左右，保持空气湿度85～90%，控制环境温度保持在20～35℃；
F、采收：当子实体成熟、菌盖尚未完全平展时采收。
作为本发明的一种优选技术方案，所述葡萄蔓屑为将葡萄蔓粉碎至木屑状制备。
作为本发明的一种优选技术方案，步骤A中，对发酵培养液进行高压灭菌的具体操作为，将发酵培养液分装完毕后，瓶口加盖四层棉布，棉布上再加盖两层报纸，0.145～0.155MPa、121℃，保持30min。
作为本发明的一种优选技术方案，步骤B中，将食用菌的试管种接种到摇瓶中后，静置培养24h后上摇床，160rpm、26℃培养96h，生物量达25g/100ml以上,镜检合格后待用。
作为本发明的一种优选技术方案，步骤C中，小麦要颗料饱满、无破损、无霉变，清水淘洗2次，去除秕粒及杂质，用1%石灰水温水浸泡12～36h后再进行煮沸。
作为本发明的一种优选技术方案，步骤C中，所述高压灭菌的具体参数为，0.145～0.155MPa、121～126℃，保持2～2.5h。
作为本发明的一种优选技术方案，步骤D中，所述灭菌的具体参数为，0.145～0.155MPa、121～126℃，保持2～2.5h。
作为本发明的一种优选技术方案，步骤F中，采收时，用刀片切下菇的基部，保留较小的菇；采收后，清理料面剔除老化菌丝和残留菌柄，将料面整干，防止积水，停水5天后，进行补水；2周内形成第二批原基；总计可采收3潮菇。
采用上述技术方案所产生的有益效果在于：
①本发明的栽培方法，材料易得且成本很低，实现了葡萄蔓的生物转化，经济效益高且生态意义重大；
②本发明的颗粒菌种当中包含20％的葡萄蔓屑，能够诱导菌种在葡萄蔓屑主体培养基上快速发菌，提高菌菇成长速度；下表显示了金福菇、大杯蕈通过不同颗粒菌种转接到本发明的培养基上之后的萌发、满肩和满袋时间（单位：d）：
| 颗粒菌种 | 萌发时间 | 满肩时间 | 满袋时间 |
| 纯麦粒种 | 9 | 18 | 38 |
| 麦粒＋葡萄蔓+石膏 | 7 | 15 | 33 |
可见，含有葡萄蔓的颗粒菌种明显缩短了菌种接入主培养基后菌丝生长的周期，究其原因，主要是由于麦粒种中加入一定量的葡萄蔓，菌丝生长的底物中有葡萄蔓，这样麦粒种接入葡萄蔓栽培袋后，菌丝能够更快适应生长底物，长速明显快于纯麦粒种直接接入栽培料的长速，因此，采用“麦粒+葡萄蔓+石膏”组合配方比单纯麦粒种接种具有明显的优势；
③本发明栽培培养基的配方中，经揉碎的干燥阔叶树落叶能够增加培养基的透气性，蔗糖能够增加速效碳源从而有利于早期发菌，麸皮作为氮源使用，配方合理，营养均衡；
④生产试验显示，以本发明的栽培方法，金福菇、大杯蕈平均产量为176g/袋和157g/袋(实验装量200g/袋)，生物转化率可达到88%和78.55%，其中生物转化率（%）=（子实体鲜重/培养料干重）×100%；
⑤表1为棉子壳、葡萄蔓、经揉碎的干燥阔叶树落叶栽培培养基的不同组合配方；
表1. 以棉籽壳、葡萄蔓为主料的栽培培养基配方（干料，%）
| 编号 | 葡萄蔓 | 棉籽壳 | 阔叶树落叶 | 麸皮 | 生石灰 | 蔗糖 |
| P7 | 70 | 10 | 10 | 8 | 1 | 1 |
| P10 | 0 | 85 | 10 | 8 | 1 | 1 |
配制时准确称取各种成分，混合拌匀，含水量以紧握培养基时指缝间有水但不下滴为宜，把已配置好的培养基装入试管和出菇袋，每个配方重复3次，121℃灭菌2h，然后将金福菇、大杯蕈菌种分别接种于上述已灭菌的试管和出菇袋培养基中，试管实验每隔5天观察一次菌株的长势、形态，用游标卡尺(精确度0.02 mm)测定菌株的长速，并记录实验数据，以考察其营养生长情况；菌丝的长速结果见表2和表3；
表2. 金福菇菌丝的长速（mm/d）
注：+表示生长稀疏，++表示生长较致密，+++表示生长致密
表3. 大杯蕈菌丝的长速（mm/d）
注：+表示生长稀疏，++表示生长较致密，+++表示生长致密
由表2和表3可见，本发明培养基的配方（p7）与传统纯棉籽壳配方（p10）相比，在菌菇长速和长势方面的数据均十分相近，且本发明略优于棉籽壳配方，说明借助本发明的技术方案完全可以利用葡萄蔓代替棉籽壳进行食用菌的栽培和培养，以降低栽培成本，提高效益；
⑥上述对比栽培试验中，金福菇、大杯蕈的平均产量和平均生物效率情况如表4和表5所示；
表4. 金福菇平均产量和平均生物效率
| 编号 | 平均产量（g） | 平均生物效率（%） |
| P7 | 175.89 | 87.95 |
| P10 | 181.95 | 90.98 |
注：生物转化率=子实体鲜重／培养基干重；每袋培养基干重为200g
表5. 大杯蕈平均产量和平均生物效率
| 编号 | 平均产量（g） | 平均生物效率（%） |
| P7 | 157.10 | 78.55 |
| P10 | 160.40 | 80.20 |
注：生物转化率=子实体鲜重／培养基干重；每袋培养基干重为200g
从表4、5可以看出，本发明培养基配方p7的生物转化率尽管未达到纯棉籽壳配方p10的生物转化率,但具有可比性；说明葡萄蔓可以完全代替棉籽壳栽培金福菇、大杯蕈,也就是说,葡萄蔓作为一种可循环利用的生物资源,可以用于珍稀菌类金福菇、大杯蕈的产业化开发；
⑦在本发明技术方案的步骤B中，液体菌种上摇床后的培养时间对菌菇的后继培养具有很大的影响，下表给出了几种不同培养时间的液体菌种之间的差异；
根据这些试验数据，本发明的技术方案确定以96h为最佳培养时间。
具体实施方式
以下实施例详细说明了本发明。发明所使用的各种原料及各项设备均为常规市售产品，均能够通过市场购买直接获得；其中，干燥阔叶树落叶可采用栎树叶、栲树叶等；金福菇、大杯蕈的试管种可引自国内食用菌技术单位，如上海农科院食用菌研究所等。
实施例1
一种利用葡萄蔓屑栽培金福菇的方法，其步骤包括：
A、发酵培养液的制备：取粉碎至木屑状的葡萄蔓屑和经揉碎的干燥阔叶树落叶，用自来水浸泡1小时后，加入玉米粉、豆饼粉，共煮微沸15分钟，过滤去渣得浸煮液，再加入葡萄糖、酵母膏、KH2PO4、MgSO4·7H2O，pH自然，即得发酵培养液,然后将此发酵培养液分装完毕，瓶口加盖四层棉布，棉布上再加盖两层报纸，0.145～0.155MPa、121℃，保持30min进行灭菌，待用；其中，上述各物料按重量份数比的用量为：葡萄蔓屑5，经揉碎的干燥阔叶树落叶5，自来水86.7，玉米粉0.5，豆饼粉0.5，葡萄糖2，酵母膏0.1，KH2PO4 0.1，MgSO4·7H2O 0.1；
B、液体菌种的制备：上步所得发酵培养液分装到摇瓶中，然后将此摇瓶和食用菌的试管种放到接种箱中进行灭菌，然后无菌操作，利用接种针挑取菌种一次或两次将食用菌的试管种接种到摇瓶中，静置培养24h后上摇床，160rpm、26℃培养96h，生物量达25g/100ml以上,镜检合格后待用；
C、颗粒菌种的制备：按重量比取麦粒79%、葡萄蔓屑20%、石膏1%，其中，小麦要颗料饱满、无破损、无霉变，清水淘洗2次，去除秕粒及杂质，用1%石灰水温水浸泡12～36h，然后煮沸至将其掰开后无白芯为止，滤去水分，摊开并晾干其表面；然后加入葡萄蔓屑和石膏，搅拌均匀，pH自然，用细口瓶或双层聚丙烯塑料袋装至瓶/袋肩，高压灭菌，0.145～0.155MPa、121～126℃，保持2～2.5h；然后通过无菌操作, 将步骤B所得液体菌种接种到细口瓶或双层聚丙烯塑料袋中，接种量如下，液体菌种用量∶细口瓶容积或双层聚丙烯塑料袋容积=1∶45～55，26℃培养7～15天至满瓶／袋，备用；
D、培养基的制备：按重量比取葡萄蔓屑70%、棉籽皮10%、经揉碎的干燥阔叶树落叶10%、麸皮8%、蔗糖1%、生石灰1%，然后按料水比1：1.4进行拌料，装袋，常规扎口，灭菌，0.145～0.155MPa、121～126℃，保持2～2.5h，待用；
E、接种培养：无菌操作，按重量比5～10%的接种量将步骤C所得颗粒菌种接种到步骤D所得培养基中，26℃避光培养至满袋，覆土；覆土后减少通风换气，提高二氧化碳浓度，保持土壤湿润；待菌丝爬上土壤表面并均匀分布于土表时，加强通风换气或喷水促使菌丝倒伏，防止气生菌丝徒长影响出菇；菌丝体由营养阶段转入生殖阶段，菌丝扭结形成原基发生菇蕾，当菇蕾成长至米粒大小时，停止直接向菇蕾喷水，干燥天可向空中轻喷水雾，将空气湿度提高到80～85%，同时加强通风换气和光照强度，避免产生柄长盖薄的劣质菇；当子实体有3厘米长时，增加喷水次数，每天喷水两次，保障有足够的新鲜空气，提高覆土层含水量为20%左右，保持空气湿度85～90%，控制环境温度保持在20～35℃；
F、采收：当子实体成熟、菌盖尚未完全平展时采收，采收时，用刀片切下菇的基部，保留较小的菇；采收后，清理料面剔除老化菌丝和残留菌柄，将料面整干，防止积水，停水5天后，进行补水；2周内形成第二批原基；总计可采收3潮菇。
实施例2
一种利用葡萄蔓屑栽培大杯蕈的方法，其步骤及工艺参数均与实施例1相同。
实施例3
一种利用葡萄蔓屑栽培金福菇的方法，其与实施例1的不同之处在于：步骤D中制备培养基时，按重量比取葡萄蔓屑68%、棉籽皮10%、经揉碎的干燥阔叶树落叶12%、麸皮8%、蔗糖1%、生石灰1%。
实施例4
一种利用葡萄蔓屑栽培大杯蕈的方法，其步骤及工艺参数均与实施例3相同。
实施例5
一种利用葡萄蔓屑栽培金福菇的方法，其与实施例1的不同之处在于：步骤D中制备培养基时，按重量比取葡萄蔓屑72%、棉籽皮8%、经揉碎的干燥阔叶树落叶10%、麸皮8%、蔗糖1%、生石灰1%。
实施例6
一种利用葡萄蔓屑栽培大杯蕈的方法，其步骤及工艺参数均与实施例5相同。
实施例7
一种利用葡萄蔓屑栽培金福菇的方法，其与实施例1的不同之处在于：步骤D中制备培养基时，按重量比取葡萄蔓屑70%、棉籽皮12%、经揉碎的干燥阔叶树落叶8%、麸皮8%、蔗糖1%、生石灰1%。
实施例8
一种利用葡萄蔓屑栽培大杯蕈的方法，其步骤及工艺参数均与实施例7相同。
上述描述仅作为本发明可实施的技术方案提出，不作为对其技术方案本身的单一限制条件。
Claims (8)
1.一种利用葡萄蔓屑栽培金福菇、大杯蕈珍稀食用菌的方法，其特征步骤包括：
A、发酵培养液的制备：取葡萄蔓屑和经揉碎的干燥阔叶树落叶，用自来水浸泡1小时后，加入玉米粉、豆饼粉，共煮微沸15分钟，过滤去渣得浸煮液，再加入葡萄糖、酵母膏、KH2PO4、MgSO4·7H2O，pH自然，即得发酵培养液,高压灭菌,待用；其中，上述各物料按重量份数比的用量为：葡萄蔓屑5，经揉碎的干燥阔叶树落叶5，自来水80～90，玉米粉0.5，豆饼粉0.5，葡萄糖2，酵母膏0.1，KH2PO4 0.1，MgSO4·7H2O 0.1；
B、液体菌种的制备：上步所得发酵培养液分装到摇瓶中，然后将此摇瓶和食用菌的试管种放到接种箱中进行灭菌，然后无菌操作，利用接种针挑取菌种一次或两次将食用菌的试管种接种到摇瓶中，静置培养20～30h后上摇床，160rpm、26℃培养90～100h，生物量达25g/100ml以上,镜检合格后待用；
C、颗粒菌种的制备：按重量比取麦粒79%、葡萄蔓屑20%、石膏1%；将麦粒用水浸泡过夜后，煮沸至将其掰开后无白芯为止，滤去水分，摊开并晾干其表面；然后加入葡萄蔓屑和石膏，搅拌均匀，pH自然，用细口瓶或双层聚丙烯塑料袋装至瓶/袋肩，高压灭菌；然后通过无菌操作, 将步骤B所得液体菌种接种到细口瓶或双层聚丙烯塑料袋中，接种量如下，液体菌种用量∶细口瓶容积或双层聚丙烯塑料袋容积=1∶45～55，26℃培养7～15天至满瓶／袋，备用；
D、培养基的制备：按重量比取葡萄蔓屑68～72%、棉籽皮8～12%、经揉碎的干燥阔叶树落叶8～12%、麸皮8%、蔗糖1%、生石灰1%，然后按料水比1：1.4进行拌料，装袋，常规扎口，灭菌，待用；
E、接种培养：无菌操作，按重量比5～10%的接种量将步骤C所得颗粒菌种接种到步骤D所得培养基中，26℃避光培养至满袋，覆土；覆土后减少通风换气，提高二氧化碳浓度，保持土壤湿润；待菌丝爬上土壤表面并均匀分布于土表时，加强通风换气或喷水促使菌丝倒伏，防止气生菌丝徒长影响出菇；菌丝体由营养阶段转入生殖阶段，菌丝扭结形成原基发生菇蕾，当菇蕾成长至米粒大小时，停止直接向菇蕾喷水，干燥天可向空中轻喷水雾，将空气湿度提高到80～85%，同时加强通风换气和光照强度，避免产生柄长盖薄的劣质菇；当子实体有3厘米长时，增加喷水次数，每天喷水两次，保障有足够的新鲜空气，提高覆土层含水量为20%左右，保持空气湿度85～90%，控制环境温度保持在20～35℃；
F、采收：当子实体成熟、菌盖尚未完全平展时采收。
2.根据权利要求１所述的利用葡萄蔓屑栽培金福菇、大杯蕈珍稀食用菌的方法，其特征在于：所述葡萄蔓屑为将葡萄蔓粉碎至木屑状制备。
3.根据权利要求1所述的利用葡萄蔓屑栽培金福菇、大杯蕈珍稀食用菌的方法，其特征在于：步骤A中，对发酵培养液进行高压灭菌的具体操作为，将发酵培养液分装完毕后，瓶口加盖四层棉布，棉布上再加盖两层报纸，0.145～0.155MPa、121℃，保持30min。
4.根据权利要求1所述的利用葡萄蔓屑栽培金福菇、大杯蕈珍稀食用菌的方法，其特征在于：步骤B中，将食用菌的试管种接种到摇瓶中后，静置培养24h后上摇床，160rpm、26℃培养96h，生物量达25g/100ml以上,镜检合格后待用。
5.根据权利要求1所述的利用葡萄蔓屑栽培金福菇、大杯蕈珍稀食用菌的方法，其特征在于：步骤C中，小麦要颗料饱满、无破损、无霉变，清水淘洗2次，去除秕粒及杂质，用1%石灰水温水浸泡12～36h后再进行煮沸。
6.根据权利要求5所述的利用葡萄蔓屑栽培金福菇、大杯蕈珍稀食用菌的方法，其特征在于：步骤C中，所述高压灭菌的具体参数为，0.145～0.155MPa、121～126℃，保持2～2.5h。
7.根据权利要求1所述的利用葡萄蔓屑栽培金福菇、大杯蕈珍稀食用菌的方法，其特征在于：步骤D中，所述灭菌的具体参数为，0.145～0.155MPa、121～126℃，保持2～2.5h。
8.根据权利要求1所述的利用葡萄蔓屑栽培金福菇、大杯蕈珍稀食用菌的方法，其特征在于：步骤F中，采收时，用刀片切下菇的基部，保留较小的菇；采收后，清理料面剔除老化菌丝和残留菌柄，将料面整干，防止积水，停水5天后，进行补水；2周内形成第二批原基；总计可采收3潮菇。
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