CN102175823A

CN102175823A - 一种用于中药体外溶出分析的评价方法

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Publication number: CN102175823A
Application number: CN201010613644XA
Authority: CN
Inventors: 顾景凯; 盖芸芸; 刘万卉; 杨艳; 张超; 张继稳; 李海燕
Original assignee: Jilin University
Current assignee: Jilin University
Priority date: 2010-12-30
Filing date: 2010-12-30
Publication date: 2011-09-07

Abstract

本发明的一种用于中药体外溶出分析的评价方法属于中药评价的技术领域。本发明的评价方法，有A步骤标准溶液的配制、B步骤分析测定方法建立、C步骤中药口服制剂溶出试验、D步骤计算相对累积溶出率。本发明将多组分原料药作为“标准品”，标定释放介质中各成分的浓度，克服了中药多组分没有标准品无法进行体外溶出试验的困难，利用本发明的评价方法可以制定出包含工艺特性的中药口服制剂的质量新标准，对中药口服制剂体外溶出进行全面的评价，为更复杂中药制剂体外溶出评价提供了定量分析的新思路。

Description

一种用于中药体外溶出分析的评价方法

技术领域

本发明属于中药评价的技术领域，尤其是将多组分原料药作为“标准品”，标定释放介质中各成分的浓度，可全面评价多组分中药体外溶出特征。

背景技术

药物溶出度检查是评价制剂质量和工艺水平的一种有效手段，可以在一定程度上反映主药的晶型、粒度、处方组、辅料品种和性质以及生产工艺等的差异，也是评价制剂活性成分生物利用度和制剂均匀度的一种有效手段，在某种度上能预示和区分同一种药物不同制剂间生物利用度的差异，因此药溶出度是药品质量控制必须检查的项目之一。传统的复方中药制剂多以汤剂为主，不存在溶出度问题。而经过现代工艺技术制成的现代中药多以片剂、胶囊剂、滴丸剂等固体制剂为主，其有效成分的溶出是体内吸收的必要前提，也必将影响其发挥药效。因此，中药固体制剂的溶出度检查也是中药质量表征的重要参数。但由于中药制剂的特性，化学成分多样且复杂，某些有效成分含量较低，有部分化学成分水溶性不好，这给其溶出度检查带来了一定的难度。增加中药溶出度的测定项目，可以更好地控制中药的质量，为合理、有效用药提供依据。目前已有有关中药体外溶出度测定的报道，但只选择1-2个指标成分测定。从传统的中医药观点来看，指标成分的控制难以真正控制中药的功效，尤其是复方制剂，检测任何一种指标成分均不能反映其所体现的整体疗效。对一些指标成分进行含量测定，很难说能通过“量”达到控制“质”的目的，并且许多指标成分并非某一药材独有，通过单一指标成分控制质量，其专属性也较差，无法全面反映中药制剂的实际质量状况。

发明内容

本发明提供的中药体外溶出与评价方法，是一种将中药原料药作为“标准品”，对溶出介质中的各成分进行含量测定，进而获得各成分的溶出速率。

本发明分以下几个步骤：

(1)标准溶液的配制；

(2)分析测定方法建立；

(3)中药口服制剂溶出试验；

(4)测定体外溶出样品；

(5)计算中药体外溶出速率。

具体技术方案如下：

一种用于中药体外溶出分析的评价方法，有A步骤标准溶液的配制、B步骤分析测定方法建立、C步骤中药口服制剂溶出试验、D步骤计算相对累积溶出率，具体过程如下：

所述的A步骤标准溶液的配制，以中药原料药为标准品，配制原料药溶液；再以同样的溶剂分别稀释成不同浓度，作为系列标准溶液，以原料药溶液的总浓度作为标示量，计量各系列标准溶液中各组分的相对浓度；

所述的B步骤分析测定方法建立，利用质谱的Q1采用全扫描的方式，获得中药原料药物质组的m/z数据；建立色谱-质谱分析条件、选择内标，按现有通用的分析方法确证的要求，建立中药原料药物质组的定量分析方法；

所述的C步骤中药口服制剂溶出试验，按照中国药典2010年版规定的溶出度测定法进行，中药口服制剂溶出试验方法采用桨法、转篮法或小杯法；中药口服制剂溶出试验的溶出介质采用去离子水、不同浓度的酸、碱溶液、表面活性剂或助溶剂；

所述的D步骤计算相对累积溶出率，测定体外溶出样品，是将单位制剂重量为W的中药口服制剂溶解于溶出介质中，得溶出液，将溶出液在B步骤的液相色谱-质谱条件下测定各组分的峰面积A；另取精密称定重量为W_i的中药口服制剂，按照C步骤中药口服制剂溶出试验进行，不同时间采集得到的溶出液在B步骤的液相色谱-质谱条件下测定各组分的峰面积A_i，按公式

计算相对累积溶出百分率。

本发明所用溶剂可以采用甲醇、乙腈、或混合溶剂等合适的溶剂。

本发明样品的测定分析方法可以采取光谱法(红外光谱、紫外光谱、荧光光谱、导数光谱、核磁共振)、色谱(气相、液相、毛细管电泳、薄层扫描)以及色谱联用技术(LC-MS、LC-MS/MS、GC-MS、GS-MS/MS)等分析方法，获取能表征样品化学特征的组分群体分析图谱或图像。

本发明将多组分原料药作为“标准品”，标定释放介质中各成分的浓度，克服了中药多组分没有标准品无法进行体外溶出试验的困难，实现了对中药多组分的溶出特征的评价，为更复杂中药制剂体外溶出评价提供了定量分析的新思路。

本发明所提供的中药体外溶出分析与评价方法与传统的以指标成分含量高低评判中药质量的方法相比，其优势在于更专属、全面，能科学地反映中药这一复杂体系制剂的整体质量。利用本发明的中药体外溶出评价方法可以制定出包含工艺特性的中药口服制剂的质量新标准，可对中药口服制剂体外溶出进行全面的评价。

附图说明

图1.希明婷片溶出曲线图。

具体实施方式

实施例1：希明婷片体外溶出研究

1仪器

三重四极杆串联质谱仪；高效液相色谱。

2药物溶液配制

升麻原料药标准系列溶液的配制：准确称取升麻原料药10.0mg，甲醇定容至10mL，作为储备液，用甲醇-水(80∶20，v/v)溶剂逐步稀释至0.5，2.0，10，50，200，800μg/mL，作为标准系列溶液。

3建立升麻总皂苷LC-MS/MS多组分测定方法

以升麻原料药作为物质组的“标准品”，用甲醇-水(80∶20，v/v)将其稀释到适当倍数：

(1)用注射泵(FIA)进样，质谱的Q1采用全扫描的方式，获得响应较高的升麻物质组的m/z数据；

(2)将这些数据分别作为LC-MS/MS的SIM监测的离子，输入质谱工作站；

(3)色谱采用梯度洗脱的方式，质谱选择[M-H]-信号稳定的准分子离子；

(4)采用MS2扫描方式，寻找母离子相对应的子离子，并对质谱参数进行优化，选择灵敏度高、专属性强的离子对进行定量，输入质谱工作站；十四种组分质谱条件见表1。

表1测定溶出介质中十四种成分的质谱条件

(5)优化色谱分析条件，选择内标，按现有国际通用的分析方法确证的要求，建立升麻物质组的定量分析方法。色谱柱：C18柱，4.6μm，50×2.1mmI.D.；流动相：有机相(B相)为甲醇，0.2mM NH4F(A相)，采用梯度洗脱方式，T＝0(min)：60％A；T＝0.5：25％A；T＝2.5：5％A；T＝7.5：60％A；T＝10.5：60％A；流速为0.4mL/min；柱温：40℃；进样量：10μL。

4建立标准曲线

精密称取希明婷原料药对照品10mg，加水甲醇定容于10mL量瓶中，用甲醇-水(80∶20，v/v)溶液逐步稀释至原料药总浓度为0.5，2.0，10，50，200，800μg/mL的标准系列溶液，以此浓度为“标示浓度”以标记标准溶液中各组分的浓度，取10μL溶液，进行LC-MS/MS定量分析，以浓度对峰面积作图得十四组分标准曲线。

5百分之百溶出量测定

取同一批号希明婷片20片，研细，精密称取相当于平均片重的样品量(W)，置100ml溶出介质中，37℃水浴，转速为100r·min^-1，6h后，取适量，过滤，取续滤液在上述LC-MS/MS条件下测定十四种组分的峰面积A，作为希明婷片百分之百溶出时各组分的量。此值作为百分之百的含量代入下式，计算相对累积溶出百分率。

6体外溶出试验

照溶出度测定法[中国药典2010年版(二部)溶出度测定法中的第三法]，以水溶液为溶出介质，取溶出介质各250mL，分别置于各溶出杯内，待温度平衡后，保持在37±0.5℃，调整转速为75转/分钟。选取希明婷溶出标准片6片，精密称重(Wi)后同时置于6个溶出杯中，自溶出标准片接触溶出介质时开始计时，经3，6，12，18，24，36和48h时取样5mL，同时补加同温度介质5ml，用0.18μm微孔滤膜过滤，并LC-MS/MS进样，得十四组分峰面积(Ai)，由标准曲线求有效成份的溶出度。累计溶出度见表2。

表2希明婷片的不同时间累积溶出度

综上所述，各组分的含量在溶出度计算中消除，所以本发明以原料药法计算各组分的溶出是科学准确的。另外，从十四组分的溶出度结果可以看出，由于不同组分的溶解度差异，造成各组分的溶出度及溶出速率存在一定差异，故仅用一种或几种化合物对多组分中药进行体外溶出考察是不能体现制剂整体品质的。中药为多组分的协同作用，保证中药口服制剂疗效的前提就是药物必须先从制剂中溶出。多组分测定方法更适合中药多组分的特点，能整体体现中药口服制剂体外评价和质量控制。

Claims

1.一种用于中药体外溶出分析的评价方法，有A步骤标准溶液的配制、B步骤分析测定方法建立、C步骤中药口服制剂溶出试验、D步骤计算相对累积溶出率，具体过程如下：

所述的C步骤中药口服制剂溶出试验，按照中国药典2010年版规定的溶出度测定法进行，中药口服制剂溶出试验方法采用桨法、转篮法或小杯法；中药口服制剂溶出试验的溶出介质采用去离子水、酸或碱溶液、表面活性剂或助溶剂；

计算相对累积溶出百分率。

2.根据权利要求1所述的用于中药体外溶出分析的评价方法，其特征在于，所述配制标准溶液的溶剂，采用甲醇或乙腈。