CN101390984B - 蓝花药的检测方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种由硼砂、冰片、青黛、玄明粉、滑石粉、琥珀、枯矾、石膏、儿茶、胡黄连10味中药材制成的蓝花药的检测方法，是用高效液相色谱法测定青黛含量、用气相色谱法测定冰片含量以及用薄层色谱法对冰片、儿茶进行定性鉴别的蓝花药的检测方法。弥补了现有技术的不足，完善的质量控制标准能够保证药品质量的可靠性和均一性，简单易行，具有可操作性。

Description

蓝花药的检测方法

技术领域：

本发明涉及一种由硼砂、冰片、青黛、玄明粉、滑石粉、琥珀、枯矾、石膏、儿茶、胡黄连10味中药材制成的蓝花药的检测方法，尤其是一种用高效液相色谱法测定青黛含量、用气相色谱法测定冰片含量以及用薄层色谱法对冰片、儿茶进行定性鉴别的蓝花药的检测方法。 

背景技术：

蓝花药是一种用于治疗急慢性扁桃腺炎、齿龈红肿、咽喉疼痛及小儿疳症的中成药，该产品收载于部颁标准中药成方制剂第三册(WS₃-B-0647-91)，由硼砂、冰片、青黛、玄明粉、滑石粉、琥珀、枯矾、石膏、儿茶和胡黄连十味药材制成。在其质量标准中，具体规定了蓝花药的处方、制法、性状及鉴别方法，但是仅有青黛、硼砂、冰片的化学鉴别法，专属性不强，尚无所含药味的薄层鉴别及含量测定方法，局限性很大，难以较全面地控制该药物的质量。对此，《时珍国医国药》第2006年第17卷第5期所公开的“蓝花药的质量标准研究”对该药物的质量控制方法作了补充，但是也只有采用显微鉴别法对蓝花药中石膏(偏光)、青黛、儿茶、琥珀、滑石、冰片(升华产物)进行显微鉴别；采用薄层色谱法对处方中的青黛、冰片进行定性鉴别；采用滴定法测定硼砂中Na₂B₄O₇的含量，还是没有测定青黛、冰片的含量，所述的对冰片进行定性鉴别是用***超声提取。***属于低沸点溶剂，在超声提取时极易挥发，在实际应用中难以操作。 

发明内容：

本发明是为了克服现有技术的不足，提供一种用高效液相色谱法测定青黛含量、用气相色谱法测定冰片含量以及用薄层色谱法对冰片、儿茶进行定性鉴别，简单易行，具有可操作性的蓝花药的检测方法。 

本发明的技术解决方案是：一种蓝花药的检测方法，其特征在于是用高效液相色谱法对青黛含量进行测定，操作步骤如下： 

色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂； 

          以体积比73∶27的甲醇-水为流动相； 

检测波长为289nm； 

理论板数按靛玉红峰计算应不低于7000； 

对照品溶液的制备：精密称取靛玉红对照品5mg，置25ml量瓶中，加三氯甲烷使靛玉红溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml置10ml量瓶中用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得每1ml中含靛玉红20μg的对照品溶液； 

供试品溶液的制备：取蓝花药研细，精密称取0.25g，置具塞锥形瓶中，精密加入三氯甲烷25ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用三氯甲烷补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液； 

测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，每1g蓝花药含青黛以靛玉红计，不得少于80μg。 

本发明的特征是用气相色谱法对冰片含量进行测定，操作步骤如下： 

色谱条件：聚乙二醇(PEG)-20M毛细管柱(柱长30m，内径0.32mm，膜厚度0.5μm)，柱温为140℃；理论板数按龙脑峰计算应不低于30000； 

校正因子测定：精密称取水杨酸甲酯对照品加无水乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为内标溶液；精密称取冰片对照品，加内标溶液制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；吸取对照品溶液0.5μl，注入气相色谱仪，计算校正因子； 

供试品溶液的制备：取蓝花药研细，精密称取0.5g置锥形瓶中，精密加入内标溶液5ml，称定重量，超声处理5分钟，再称定重量，用无水乙醇补充减失的重量，滤过，准确吸取续滤液0.5ml，再精密加0.5ml内标溶液，混匀作为供试品溶液； 

测定法：精密吸取对照品溶液和供试品溶液各0.5μl，注入气相色谱仪，测定，以龙脑、异龙脑峰面积之和计算，即得冰片含量，每1g蓝花药含冰片(C₁₀H₁₈O)不得少于15mg。 

本发明的特征是用薄层色谱法对冰片进行定性鉴别，操作步骤如下： 

取蓝花药1.5g研细，加三氯甲烷15ml摇匀，浸渍2小时，滤过，滤液作为供试品溶液；取冰片对照品，加三氯甲烷制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法，吸取上述二种溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为9：1的苯-丙酮为展开剂展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，于105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上显相同颜色的主斑点。

本发明的特征是用薄层色谱法对儿茶进行定性鉴别，操作步骤如下： 

取蓝花药8g研细，加乙酸乙酯40ml，超声处理10分钟，滤过，滤液蒸干后的残渣加甲醇3ml使其溶解，作为供试品溶液；另取儿茶对照药材50mg，加甲醇10ml，浸渍20分钟，滤过，滤液作为对照药材溶液。照薄层色谱法，吸取供试品溶液6μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为20：5：2的三氯甲烷-甲醇-甲酸为展开剂展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 

本发明弥补了现有技术的不足，完善的质量控制标准能够保证药品质量的可靠性和均一性。 

①增加青黛的定量测定方法，靛玉红是青黛中的一种的主要有效成分，具有良好的抗菌活性，本发明利用高效液相色谱法测定该药物中靛玉红的含量，结果准确，重现性好； 

②增加冰片的定量测定方法，本发明利用高效气相色谱法测定该药物中冰片的含量，方法简便，结果准确，重现性好； 

③改变冰片的薄层色谱定性鉴别方法，是用三氯甲烷作为提取溶剂，其挥发性远低于***，具有易于操作、安全性高的优点。并经方法学试验确认方法专属、可行、阴性无干扰； 

④增加儿茶的薄层色谱定性鉴别方法，并经方法学试验确认方法专属、可行、阴性无干扰。 

具体实施方式：

实施例1： 

按照标准制法，制成蓝花药(由大连美罗中药厂有限公司提供，批号：20070502)。 

对照品及对照药材均由中国药品生物制品检定所提供。 

照中国药典2005年版一部附录VID高效液相色谱法对青黛含量进行测定，操作步骤如下： 

色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂； 

以体积比73：27的甲醇—水为流动相； 

检测波长为289nm； 

理论板数按靛玉红峰计算应不低于7000；

对照品溶液的制备：精密称取靛玉红对照品5mg，置25ml量瓶中，加三氯甲烷使靛玉红溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取1ml置10ml量瓶中用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得每1ml中含靛玉红20μg的对照品溶液； 

供试品溶液的制备：取蓝花药研细，精密称取0.25g，置具塞锥形瓶中，精密加入三氯甲烷25ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用三氯甲烷补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液； 

测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，每1g蓝花药含青黛以靛玉红计，为110μg。 

实施例2： 

在实施例1的基础上，照中国药典2005年版一部附录VIE气相色谱法对冰片含量进行测定，操作步骤如下： 

色谱条件：聚乙二醇(PEG)-20M毛细管柱(柱长30m，内径0.32mm，膜厚度0.5μm)，柱温为140℃；理论板数按龙脑峰计算应不低于30000； 

校正因子测定：精密称取水杨酸甲酯对照品加无水乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为内标溶液；精密称取冰片对照品，加内标溶液制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；吸取对照品溶液0.5μl，注入气相色谱仪，计算校正因子； 

供试品溶液的制备：取蓝花药研细，精密称取0.5g置锥形瓶中，精密加入内标溶液5ml，称定重量，超声处理5分钟，再称定重量，用无水乙醇补充减失的重量，滤过，准确吸取续滤液0.5ml，再精密加0.5ml内标溶液，混匀作为供试品溶液； 

测定法：精密吸取对照品溶液和供试品溶液各0.5μl，注入气相色谱仪，测定，以龙脑、异龙脑峰面积之和计算，即得冰片含量，每1g蓝花药含冰片(C₁₀H₁₈O)为21.7mg。 

实施例3： 

在实施例1或实施例2的基础上，照中国药典2005版一部附录VIB中薄层色谱法对冰片进行定性鉴别，操作步骤如下： 

取蓝花药1.5g研细，加三氯甲烷15ml摇匀，浸渍2小时，滤过，滤液作为供试品溶液；取冰片对照品，加三氯甲烷制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；吸取上述二种溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为9：1的苯-丙酮为展开剂展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，于 105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上显相同颜色的主斑点。 

实施例4： 

在实施例3的基础上，照中国药典2005版一部附录VIB中薄层色谱法对儿茶进行定性鉴别，操作步骤如下： 

取蓝花药8g研细，加乙酸乙酯40ml，超声处理10分钟，滤过，滤液蒸干后的残渣加甲醇3ml使其溶解，作为供试品溶液；另取儿茶对照药材50mg，加甲醇10ml，浸渍20分钟，滤过，滤液作为对照药材溶液。吸取供试品溶液6μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为20：5：2的三氯甲烷-甲醇-甲酸为展开剂展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

Claims (2)

1.一种蓝花药的检测方法，其特征在于是用高效液相色谱法对青黛含量进行测定，操作步骤如下：

色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；

以体积比73∶27的甲醇-水为流动相；

检测波长为289nm；

理论板数按靛玉红峰计算应不低于7000；

对照品溶液的制备：精密称取靛玉红对照品5mg，置25ml量瓶中，加三氯甲烷使靛玉红溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml置10ml量瓶中用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得每1ml中含靛玉红20μg的对照品溶液；

供试品溶液的制备：取蓝花药研细，精密称取0.25g，置具塞锥形瓶中，精密加入三氯甲烷25ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用三氯甲烷补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；

测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，每1g蓝花药含青黛以靛玉红计，不得少于80μg；

所述蓝花药由硼砂、冰片、青黛、玄明粉、滑石粉、琥珀、枯矾、石膏、儿茶和胡黄连制成。

2.一种蓝花药的检测方法，其特征在于是用气相色谱法对冰片含量进行测定，操作步骤如下：

色谱条件：聚乙二醇PEG-20M毛细管柱，柱长30m，内径0.32mm，膜厚度0.5μm，柱温为140℃；理论板数按龙脑峰计算应不低于30000；

校正因子测定：精密称取水杨酸甲酯对照品加无水乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为内标溶液；精密称取冰片对照品，加内标溶液制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；吸取对照品溶液0.5μl，注入气相色谱仪，计算校正因子；

供试品溶液的制备：取蓝花药研细，精密称取0.5g置锥形瓶中，精密加入内标溶液5ml，称定重量，超声处理5分钟，再称定重量，用无水乙醇补充减失的重量，滤过，准确吸取续滤液0.5ml，再精密加0.5ml内标溶液，混匀作为供试品溶液；

测定法：精密吸取对照品溶液和供试品溶液各0.5μl，注入气相色谱仪，测定，以龙脑、异龙脑峰面积之和计算，即得冰片含量，每1g蓝花药含冰片C₁₀H₁₈O不得少于15mg；

所述蓝花药由硼砂、冰片、青黛、玄明粉、滑石粉、琥珀、枯矾、石膏、儿茶和胡黄连制成。