CN102165995A

CN102165995A - 一种猪用复合预混料

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Publication number: CN102165995A
Application number: CN2010105555431A
Authority: CN
Inventors: 张玳华; 曾正清; 任建波; 宋维平; 贠桂玲; 刘永宏; 李勇
Original assignee: SICHUAN DABEINONG AGRICULTURE AND ANIMAL HUSBANDRY CO Ltd; Beijing Dabeinong Technology Group Co Ltd
Current assignee: Fujian Dabei Nonghuayou Aquatic Technology Group Co ltd; Liangping Dabeinong Feed Technology Co ltd; Beijing Dabeinong Biotechnology Co Ltd
Priority date: 2010-11-23
Filing date: 2010-11-23
Publication date: 2011-08-31
Anticipated expiration: 2030-11-23
Also published as: CN102165995B

Abstract

本发明涉及一种猪用复合预混料，属于预混料领域。本发明的预混料主要成分为：维生素A，维生素D3，维生素E，维生素K3，维生素B1g，维生素B2，维生素B6，维生素B12，烟酸，D-泛酸钙，生物素，氯化胆碱，硫酸铜，硫酸亚铁，硫酸锌，硫酸锰，碘化钾预混剂，***钠预混剂，抗氧化剂，复合微生态制剂、膨润土和稻糠。本发明的预混料配方合理，未添加抗生素，包含多种益生菌，活菌含量高，动物饲养实验证实饲喂效果理想，能使猪成活率高、增重快、肉料比高。本发明的复合预混料对猪只生长和健康状况有良好的促进作用，能满足目前广大养殖户的需求，且适合用于发展绿色健康养殖，生产无公害畜牧产品。

Description

一种猪用复合预混料

技术领域

本发明涉及一种猪用复合预混料，属于预混料领域。

背景技术

复合预混料目前国内外研究和生产的种类较多，但多数预混料动物饲喂效果不理想，且大多添加有抗生素，其弊端日益显著，也不符合人类绿色、安全的需求。微生态制剂是目前研究较多的一种绿色、安全的饲料添加剂，此类制剂是由动物有益菌经工业化发酵生产得到的，包含有很多有益微生物及其代谢产物构成的活菌制剂。但目前，市场上用于预混料的微生态制剂存在以下几个方面的主要质量问题：(1)菌株种类单一；(2)活菌含量低；(3)水分含量偏高，这是影响微生态制剂质量的重要因素之一；(4)不耐抗生素；(5)对胃酸和胆盐不稳定等。

粪肠球菌、地衣芽孢杆菌属于农业部批准的微生物饲料添加剂的菌种之一，但扣囊覆膜孢酵母尚不属于农业部批准的微生物饲料添加剂的菌种，因此，扣囊覆膜孢酵母作为饲料添加剂并添加于预混料中尚未见研究及应用报导。

发明内容

本发明的目的是提供一种饲喂效果理想，能使猪增重快、成活率高，可以提高猪机体免疫力、提高饲料转化率、稳定性好、安全的绿色预混料。该预混料配方合理、通过微生物饲料添加剂的添加平衡肠道微生态环境抑制有害细菌的生长繁殖，保证动物的肠道健康，降低动物肠道的发病率，又能促进动物生长，且适合用于发展绿色健康养殖，生产无公害畜禽产品。

本发明的目的是通过如下技术方案实现的：

本发明提供一种猪用复合预混料，它主要成分为下述重量配比的原料，每千克预混料中有：维生素A 3-5g，维生素D3 0.8-1g，维生素E 15-25g，维生素K3 0.8-1.2g，维生素B10.8-1.2g，维生素B2 1.8-2.6g，维生素B6 0.7-1.0g，维生素B12 0.7-1.0g，烟酸8-10g，D-泛酸钙4-8g，生物素0.4-0.7g，氯化胆碱80-100g，硫酸铜100-140g，硫酸亚铁80-130g，硫酸锌60-80g，硫酸锰40-50g，碘化钾预混剂10-16g，***钠预混剂4-10g，抗氧化剂1.5g，复合微生态制剂200-260g，膨润土100-180g，余量为稻糠。

进一步，它主要成分为下述重量配比的原料，每千克预混料中有：维生素A 4g，维生素D3 0.9g，维生素E 20g，维生素K3 1g，维生素B1 1g，维生素B2 2.2g，维生素B6 0.8g，维生素B12 0.9g，烟酸9g，D-泛酸钙6g，生物素0.6g，氯化胆碱90g，硫酸铜120g，硫酸亚铁110g，硫酸锌70g，硫酸锰45g，碘化钾预混剂13g，***钠预混剂7g，抗氧化剂1.5g，复合微生态制剂230g，膨润土160g，余量为稻糠。

其中，所述的硫酸铜为五水硫酸铜，所述的硫酸亚铁为一水硫酸亚铁，所述的硫酸锌为一水硫酸锌，所述的硫酸锰为一水硫酸锰。

本发明的猪用复合预混料中所用的复合微生态制剂主要成分由粪肠球菌(Enterococcusfaecium)CGMCC No.2386菌粉、地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)CGMCC No.2383菌粉、扣囊覆膜孢酵母(Saccharomycopsis fibuligera)CGMCC No.2387菌粉和葡萄糖组成，葡萄糖为载体，上述各成分的重量配比为：1∶1∶2∶16。

其中，本发明所述的粪肠球菌(Enterococcus faecium)CGMCC No.2386、地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)CGMCC No.2383、扣囊覆膜孢酵母(Saccharomycopsis fibuligera)CGMCC No.2387具有良好的耐胃酸、耐胆盐、耐高温、耐受常用抗生素等抗逆性能和产酸、产酶、抑制病原菌等益生功能，为申请人从健康动物肠道或粪便中分离、选育得到，经中国农业微生物菌种保藏管理中心鉴定，并于2008年3月3日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏(简称CGMCC)，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏号分别为：CGMCC No.2386(保藏证明见申请人于2008年申请的中国专利，申请号为200810106520.5)、CGMCC No.2383(保藏证明见申请人于2008年申请的中国专利，申请号为200810106520.5)、CGMCC No.2387。

本发明的预混料配方合理，动物饲养实验证实饲喂效果理想，能使猪成活率高、增重快、肉料比高；预混料添加的复合微生态制剂菌种多样，活菌含量高、水分含量低，具有耐胃酸、耐胆盐、耐高温及耐受常用抗生素等抗逆性能和产酸、产酶及抑制病原菌等益生功能，可以替代抗生素，可以耐抗生素，可以提高猪机体免疫力、提高饲料转化率、稳定性好，从而保证了动物的肠道健康，降低动物肠道的发病率，又能促进动物生长。本发明的复合预混料对猪只生长和健康状况有良好的促进作用，能满足目前广大养殖户的需求，且适合用于发展绿色健康养殖，生产无公害畜牧产品。

通过下列实施例将更具体的说明本发明，但是应理解所述实施例仅是为了说明本发明，而不是以任何方式限制本发明的范围。

具体实施方式

实施例1 3株菌种的抗逆性和生物学性能测定

3株菌种：粪肠球菌CGMCC No.2386、地衣芽孢杆菌CGMCC No.2383、扣囊覆膜孢酵母CGMCC No.2387为申请人从健康动物肠道或粪便中分离、选育得到，保藏于4℃冰箱中。

1)地衣芽孢杆菌CGMCC No.2383培养物的制备：将冰箱保藏的斜面菌种接种到BPY种子培养基中活化，37℃、200rpm培养18h，得到芽孢率在95％以上的培养物；

2)粪肠球菌CGMCC No.2386培养物的制备：将冰箱保藏的斜面菌种接种到MRS种子培养基中活化，35℃、100rpm培养16h，即得；

3)扣囊覆膜孢酵母CGMCC No.2387培养物的制备：将冰箱保藏的斜面菌种接种到98号种子培养基中活化，30℃、150rpm培养16h，即得；

4)耐酸性测定：将上述制备的培养物按5％接种量分别接种于pH值2.0、3.0、4.0的人工模拟胃液中，0h计数作对照，2h、6h取样用磷酸缓冲液按10倍系列稀释，进行平板活菌计数，计算存活率。

本发明选育的3株菌种：地衣芽孢杆菌CGMCC No.2383、粪肠球菌CGMCC No.2386、扣囊覆膜孢酵母CGMCC No.2387在胃酸中存活率结果见表1。

人工模拟胃液的制备：量取9.5％～10.5％浓盐酸16.4毫升，加蒸馏水至1000毫升，做基础人工胃液，用盐酸或氢氧化钠调pH值2.0、3.0、4.0，各取10mL(9mL)，分装于试管中，100℃下蒸汽灭菌15分钟，在无菌条件下，每10mL液体中加入0.100g胃蛋白酶。

表1 3株菌种在人工模拟胃液中的存活率

5)耐胆盐测定：将上述制备的3株菌种的培养物，按5％接种量分别接种于0.03％、0.1％、0.2％、0.3％不同浓度的猪胆盐溶液中，0h计数作对照，2h、6h取样用生理盐水按10倍系列稀释计数，进行平板活菌计数，计算存活率。

本发明所选育的3株菌种：地衣芽孢杆菌CGMCC No.2383、粪肠球菌CGMCC No.2386、扣囊覆膜孢酵母CGMCC No.2387在胆盐中存活率结果见表2。

胆盐的制备：0.85％生理盐水中各9mL，分装于试管中，121℃下蒸汽灭菌30分钟，在无菌条件下，制成0.03％、0.1％、0.2％、0.3％不同浓度的猪胆盐溶液。

表2 3株菌种在不同浓度猪胆盐中处理6h的存活率

6)耐高温测定：将上述制备的3株菌种的培养物，分别于50℃、60℃、70℃、80℃水浴处理15min、30min，计算存活率。

表3 3株菌种在不同高温下处理不同时间的存活率(％)

7)耐药性测定：采用药敏纸片法。

表4 3株菌种的耐药性测定结果

8)产酶测定：采用中华人民共和国轻工业行业标准，工业用α-淀粉酶制剂(QB/T1805.1-1993)，工业酶制剂通用试验方法(QB/T1803-1993)对地衣芽孢杆菌进行淀粉酶活力测定；采用行业标准：工业用蛋白酶制剂(QB/T1805.3-1993)，对地衣芽孢杆菌进行蛋白酶活力测定。

地衣芽孢杆菌CGMCC No.2383淀粉酶活力为：800u/ml；蛋白酶活力为1000u/ml。

9)产酸测定：采用离子色谱法对粪肠球菌CGMCC No.2386发酵液进行了产酸测定。

产酸结果表明，粪肠球菌CGMCC No.2386总有机酸量为4.2g/L，其中乳酸量为3.76g/L，乙酸量为0.39g/L，还有少量的异丁酸。

10)抑菌试验：采用牛津杯法对常见致病菌进行抑菌测定。

a、在装有10mL营养肉汁培养基的试管中活化三株致病菌：K99、金黄色葡萄球菌、鸡白痢沙门氏菌，37℃恒温培养20h；

b、双层平板的制备：取直径90mm的平板，注入灭菌的营养琼脂15～20mL，水平放置使之凝固，作为底层，另取营养琼脂(冷至50℃左右)与37℃240h培养的指示菌液适量(50mL培养基加8mL左右)混匀，吸取10mL浇在底层培养基上，水平放置使之凝固，作为菌层；

c、加样品：用无菌镊子夹取已灭菌的牛津杯，打开皿盖，放在培养基上。在牛津杯中加满相同量的发酵液上清液(约200uL)，每个样品2个重复。将加完样的双碟小心放入37℃恒温箱内，培养16-18h后，取出测量抑菌圈大小。

表5 3株菌种对常见致病菌的抑菌结果

实施例2、复合微生态制剂的制备

1、地衣芽孢杆菌CGMCC No.2383菌粉的制备

1)平板培养复壮：将地衣芽孢杆菌菌种接种于BPY平板培养基上，于37℃培养24h，使地衣芽孢杆菌复壮，并形成单菌落，挑取单菌落于接种于斜面培养基上，于37℃培养36h；

2)一级种子的制备：将步骤1)培养的地衣芽孢杆菌菌种转接茄子瓶斜面培养基上，于37℃培养12h，使其处于对数中后期，得一级种子；

所述的斜面培养基为BPY固体培养基；

3)二级种子的制备：将步骤2)制备的一级种子用无菌水制成菌悬液，接种到装有1.6M³BPY种子培养基的2M³种子罐中，温度37℃，转速200rpm，罐压0.05Mpa，通风比：1∶0.6～0.8(14.4～19.2M³/h)，培养10～14h，为二级种子液；

4)地衣芽孢杆菌发酵液的制备：将步骤3)制备的二级种子液按照10％的接种量接种到装有16M³发酵培养基的发酵罐中，温度37℃，转速220rpm，罐压0.05Mpa，通风比：1∶0.6～0.8，培养20h，至芽孢形成率90％以上，活菌数为1～2×10¹⁰cfu/ml，则中止发酵，得地衣芽孢杆菌发酵液；

所述的发酵培养基为：麸皮2％，豆粕1％，氯化钠0.8％，硫酸镁0.01％。

5)地衣芽孢杆菌菌粉的制备：在步骤4)制备的发酵液中加入25％的填充物米糠，混匀，进行喷雾干燥，进风温度120～130℃，排风温度40～50℃，雾化器转速15000～18000rpm，得到水分含量＜5％的地衣芽孢杆菌菌粉。

所述的填充物为：米糠、沸石粉、稻壳粉中的任一种。

2、粪肠球菌CGMCC No.2383菌粉的制备

1)平板培养复壮：将粪肠球菌菌种接种于MRS平板培养基上，于37℃培养24h，使粪肠球菌菌复壮，并形成单菌落；挑取单菌落接种于斜面培养基上，于37℃培养24h；

2)一级种子的制备：将步骤1)培养的粪肠球菌斜面菌种转接到装有300ml MRS培养基的500mL三角瓶中，于37℃培养12h，转速100rpm，使其处于对数中后期，为一级种子；

3)二级种子的制备：将步骤2)培养的粪肠球菌一级种子转接到装有1.6L MRS培养基的2.0L三角瓶中，于37℃静止培养12h，为二级种子液；

4)发酵液的制备：将步骤3)制备的二级种子液按照3％的接种量接种到装有16M³发酵培养基的发酵罐中，温度37℃，转速120rpm，罐压0.05Mpa，培养16h，至活菌数为2×10⁹cfu/ml，中止发酵；

所述的发酵培养基为：葡萄糖2％，大豆蛋白胨1％，硫酸铵0.5％，氯化钠0.2％，硫酸镁0.05％。

5)粪肠球菌菌粉的制备：将步骤4)制备的发酵液，5000rpm离心，得到菌泥，加入与菌泥的重量/体积百分比为20％的冻干保护剂，混匀，于-45℃冷冻干燥，得到水分含量＜5％的粪肠球菌菌粉；

所述的冻干保护剂为：脱脂奶粉、甘油、蔗糖、麦芽糊精和谷氨酸钠的混合物，按照：脱脂奶粉∶甘油∶蔗糖∶麦芽糊精∶谷氨酸钠＝2∶1.0∶1.0∶1.5∶1.0的比例混合而成。3、扣囊覆膜孢酵母CGMCC No.2387菌粉的制备

1)平板培养复壮：将冰箱保藏的扣囊覆膜孢酵母斜面菌种采用划线接种的方法在98号平板培养基上划线接种，于30℃培养46h，使扣囊覆膜孢酵母复壮，并形成单菌落；挑取单菌落于新鲜的98号斜面培养基上，于30℃培养36h，放置冰箱备用；

2)一级种子的制备：将步骤1)培养好的扣囊覆膜孢酵母新鲜斜面菌种转接到装有200ml98号培养基的500mL三角瓶中，于30℃培养12～16h，转速150rpm，使其处于对数中后期，为一级种子；

3)二级种子的制备：将步骤2)培养好的扣囊覆膜孢酵母种子液转接到装有1.2L 98号培养基的2.0L三角瓶中，于30℃静止培养12h，为二级种子液；

4)发酵液的制备：将步骤3)制备的二级种子按照10％的接种量接种到装有15～16M³发酵培养基的发酵罐中，温度30℃，转速200rpm，罐压0.05Mpa，培养16h中止发酵，此时活菌数为1.5×10⁹cfu/ml；

所述的发酵培养基为：红糖1％，大豆蛋白胨1％，酵母膏0.2％，氯化钠0.5％，硫酸镁0.01％，磷酸氢二钾0.2％。

5)扣囊覆膜孢酵母菌粉的制备：将步骤4)制备的发酵液，2000pm离心，得到菌泥，加入与菌泥的重量/体积百分比为10～15％的冻干保护剂，混匀后于-25℃冷冻干燥，得到水分含量＜5％的扣囊覆膜孢酵母菌粉；

所述的冻干保护剂为脱脂奶粉、甘油、麦芽糊精按照：2∶0.5∶1比例混合而成。

4、复合微生态制剂的制备

将1、2、3制备的粪肠球菌CGMCC No.2386菌粉、地衣芽孢杆菌CGMCC No.2383菌粉、扣囊覆膜孢酵母CGMCC No.2387菌粉和新称取的葡萄糖，上述各成分的重量配比为：1∶1∶2∶16混合，得复合微生态制剂。

实施例3预混料的制备

1、复合维生素预混料的制备

复合维生素预混料的配方如下：维生素A 3g，维生素D3 0.8g，维生素E 15g，维生素K3 0.8g，维生素B1 0.8g，维生素B2 1.8g，维生素B6 0.7g，维生素B12 0.7g，烟酸8g，D-泛酸钙4g，生物素0.4g，抗氧化剂0.2g，稻糠(载体)63.8g，混合制成复合维生素预混料；

2、复合微量元素预混料的制备

复合微量元素预混料的配方如下：硫酸铜100g，硫酸亚铁80g，硫酸锌60g，硫酸锰40g，碘化钾预混剂10g，***钠预混剂4g，膨润土106g，混合制成复合微量元素预混料；

3、预混料的制备

预混料配方如下：将上述制备的复合维生素预混料100g，复合微量元素预混料400g，实施例2制备的复合微生态制剂200g，氯化胆碱80g，抗氧化剂1.3g，膨润土54g，稻糠补足到1000g。

实施例4预混料的制备

1、复合维生素预混料的制备

复合维生素预混料的配方如下：维生素A 5g，维生素D3 1g，维生素E 25g，维生素K31.2g，维生素B1 1.2g，维生素B2 2.6g，维生素B6 1.0g，维生素B12 1.0g，烟酸10g，D-泛酸钙8g，生物素0.7g，抗氧化剂0.2g，稻糠(载体)43.1g，混合制成复合维生素预混料；

2、复合微量元素预混料的制备

复合微量元素预混料的配方如下：硫酸铜140g，硫酸亚铁130g，硫酸锌80g，硫酸锰50g，碘化钾预混剂16g，***钠预混剂10g，膨润土74g，混合制成复合微量元素预混料；

3、预混料的制备

预混料配方如下：将上述制备的复合维生素预混料100g，复合微量元素预混料500g，实施例2制备的复合微生态制剂260g，氯化胆碱100g，抗氧化剂1.3g，膨润土26g，稻糠(载体)补足到1000g。

实施例5预混料的制备

1、复合维生素预混料的制备

复合维生素预混料的配方如下：维生素A 2kg，维生素D3 0.45kg，维生素E 10kg，维生素K3 0.5kg，维生素B1 0.5kg，维生素B2 1.1kg，维生素B6 0.4kg，维生素B12 0.45kg，烟酸4.5kg，D-泛酸钙3kg，生物素0.3kg，抗氧化剂0.1kg，稻糠(载体)26.7kg，混合制成复合维生素预混料；

2、复合微量元素预混料的制备

复合微量元素预混料的配方如下：硫酸铜65kg，硫酸亚铁55kg，硫酸锌35kg，硫酸锰 22.5kg，碘化钾预混剂6.5kg，***钠预混剂3.5kg，膨润土62.5kg，混合制成复合微量元素预混料；

3、预混料的制备

预混料配方如下：将上述制备的复合维生素预混料50kg，复合微量元素预混料250kg，实施例2制备的复合微生态制剂100kg，氯化胆碱45kg，抗氧化剂0.65kg，膨润土17.5kg，稻糠补足到500kg。

实施例6预混料的饲喂效果试验

1材料和方法

1.1本发明实施例5制备的复合预混料

1.2试验地点：唐山大北农猪育种有限责任公司

1.3试验时间：2009年3月14日开始，共23天

1.4试验设计

试验为商品肉猪饲养试验，采用对照试验设计，分对照组A、试验组B、试验组C。每组设3个重复，每个重复10头28日龄断奶仔猪，体重在7kg左右。

A组饲喂基础日粮+不含抗生素和微生态制剂的预混料，B组饲喂基础日粮中添加本发明实施例5制备的预混料，C组饲喂基础日粮+添加抗生素的预混料(硫酸粘杆菌素20g/T，杆菌肽锌40g/T)，在商品肉猪15kg左右时进行体重称量。

1.5试验日粮及营养组成：如表6。

表6商品肉猪基础日粮配方组成

1.6饲养管理

按照常规程序和方法进行编号、驱虫、去势和免疫等管理，各组饲养密度相同，商品肉猪自由采食和自由饮水，各组间除日粮不同外，其它条件完全一致。

1.7测定项目

商品肉猪记录指标：初始体重、期末体重、耗料总量，便秘情况、乳猪成活率，来计算料肉比与日增重。

料肉比＝消耗饲料总量/(期末体重-初始体重)

日增重＝(期末体重-初始体重)/饲喂天数

1.8统计分析

使用SPSS10.0软件对试验数据进行统计分析。

2.试验结果

表7试验仔猪的生产性能

3结论

试验结果表明本发明的复合预混料饲喂效果非常理想，肉猪仔猪平均日增长达357.8克，较A、C组均有显著差异；料肉比1.35∶1，与抗生素C组相当，与对照A组差异显著；从断奶至15kg只需23天，乳猪成活率高，腹泻率低，腹泻率甚至低于抗生素C组，较对照A组有极显著差异，也说明了本发明的预混料中因添加了复合微生态制剂，可不添加抗生素。

Claims

1.一种猪用复合预混料，其特征在于它主要成分为下述重量配比的原料，每千克预混料中有：维生素A 3-5g，维生素D3 0.8-1g，维生素E 15-25g，维生素K3 0.8-1.2g，维生素B10.8-1.2g，维生素B2 1.8-2.6g，维生素B6 0.7-1.0g，维生素B12 0.7-1.0g，烟酸8-10g，D-泛酸钙4-8g，生物素0.4-0.7g，氯化胆碱80-100g，硫酸铜100-140g，硫酸亚铁80-130g，硫酸锌60-80g，硫酸锰40-50g，碘化钾预混剂10-16g，***钠预混剂4-10g，抗氧化剂1.5g，复合微生态制剂200-260g，膨润土100-180g，余量为稻糠。

2.如权1所述的猪用复合预混料，其特征在于它主要成分为下述重量配比的原料，每千克预混料中有：维生素A 4g，维生素D3 0.9g，维生素E 20g，维生素K3 1g，维生素B1 1g，维生素B2 2.2g，维生素B6 0.8g，维生素B12 0.9g，烟酸9g，D-泛酸钙6g，生物素0.6g，氯化胆碱90g，硫酸铜120g，硫酸亚铁110g，硫酸锌70g，硫酸锰45g，碘化钾预混剂13g，***钠预混剂7g，抗氧化剂1.5g，复合微生态制剂230g，膨润土160g，余量为稻糠。

3.如权2所述的猪用复合预混料，其特征在于所述的硫酸铜为五水硫酸铜，所述的硫酸亚铁为一水硫酸亚铁，所述的硫酸锌为一水硫酸锌，所述的硫酸锰为一水硫酸锰。

4.如权1或2所述的猪用复合预混料，其特征在于所述的复合微生态制剂主要成分由粪肠球菌CGMCC No.2386菌粉、地衣芽孢杆菌CGMCC No.2383菌粉、扣囊覆膜孢酵母CGMCC No.2387菌粉和葡萄糖组成，上述各成分的重量配比为：1∶1∶2∶16。