CN102068520A - 一种治疗心脑血管疾病的中药组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种治疗心脑血管疾病的中药组合物，该中药组合物由下述重量份配比的原料制成：川芎9～18、银杏叶20～40、山楂叶18～30。本发明中药组合物具有活血化瘀、化浊降脂等作用，药理试验表明本发明具有显著的有抗血小板聚集、抗血栓形成，降血脂，抗动脉粥样硬化，抗脑缺血或心肌缺血等药理作用，可用于脑动脉粥样硬化或血栓引起的脑供血不足或脑缺血，也可用于冠脉粥样硬化或血栓引起心肌缺血性疾病。本中药组合物发明在临床应用取得良好疗效。

Description

一种治疗心脑血管疾病的中药组合物及其制备方法 

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种治疗心脑血管疾病的中药组合物及其制备方法。 

背景技术

心脑血管疾病是一种严重威胁人类特别是中老年人健康的常见病，具有“发病率高、死亡率高、致残率高、复发率高、并发症多”，“四高一多”的特点。心脑血管疾病主要是高血压、冠心病、心肌梗死、脑血栓、脑栓塞和脑出血等11种疾病。它是由动脉硬化、高血压、高血脂、高血糖、高粘血症及微循环障碍所引起的。目前治疗心脑血管的药物主要有两大类：一类是单纯的扩血管药，长期用药会使血管失去弹性，导致血管硬化，病情更加严重，甚至血管破裂危及生命；一类是溶脂溶栓类，主要通过药物溶解动脉硬化斑块，并将其排出体外。此类药物无法防止血管内脂质等垃圾再次沉积，形成新的斑块，溶解速度低于沉积速度，患者只能常年服药。一些病情严重的患者，不得不做支架、搭桥，但往往会出现血管再狭窄、再闭塞、再损伤现象。尽管支架、搭桥使一些重症患者暂时度过危险期，但五年内患者平均死亡率却分别上升13％～21.3％，并且治疗价格昂贵，一般家庭难以接受。 

发明内容

本发明的目的是提供一种成分明确、质量可控、安全性好、纯度较高的治疗心脑血管疾病的中药组合物。 

本发明的另一目的是提供上述治疗心脑血管疾病的中药组合物的制备方法。 

本发明的治疗心脑血管疾病的中药组合物由下述重量份配比的原料制成：川芎9～18、银杏叶20～40、山楂叶18～30。 

上述原料的重量份配比优选：川芎12～16、银杏叶25～35、山楂叶22～26。 

银杏叶，为银杏科植物银杏Ginkgo biloba L.的干燥叶。功能与主治：活血化瘀，通络止痛，敛肺平喘，化浊降脂；用于淤血阻络，胸痹心痛，中风偏瘫，肺虚咳喘，高脂血症。银杏叶主要成分为黄酮苷和二萜内酯及有机酸。银杏叶主 要具有增加脑血流量，改善脑细胞代谢，降低脑血管阻力，保护脑组织，降低脑缺血造成的脑组织损伤，稳定脑细胞膜，改善脑功能多方面的效应。国内外十分广泛的将其用于治疗心脑血管疾病。 

山楂叶，为蔷薇科植物山里红Cratagus pinnatifida Bge.var.majorN.E.Br.或山楂Cratagus pinnatifida Bge.的干燥叶。功能与主治：活血化瘀，理气通脉，化浊降脂。用于气滞血瘀，胸痹心痛，胸闷憋气，心悸健忘，眩晕耳鸣，高脂血症。研究表明山楂叶中的主要活性成分为山楂叶总黄酮，主要是槲皮素、芦丁、金丝桃苷、金丝桃素及牡荆素等。现代药理研究表明山楂叶中的黄酮类化合物具有降压、增加冠脉血流量、降低血脂、降低甘油三酯及胆固醇、耐缺氧、抑制或清除氧自由基、抗脂质过氧化、改善肝微循环及抗炎症损伤等作用，在心脑血管***方面具有较大的临床价值。 

川芎，为伞形科植物川芎Ligusticum chuanxiong Hort.的干燥根茎。功能与主治：活血行气，祛风止痛。用于胸痹心痛，胸胁刺痛，跌扑肿痛，***，经闭经痛，癥瘕腹痛，头痛，风湿痹痛。现代研究表明川芎的有效成分川芎嗪和阿魏酸等具有清除氧自由基、钙拮抗、扩血管、抗血小板聚集和血栓形成等多种作用。 

上述治疗心脑血管疾病的中药组合物的制备方法，包括以下步骤： 

(1)取川芎饮片，加入8～14倍量体积比为60％～90％的乙醇回流提取1～2小时，提取1～3次，收集乙醇液，减压回收乙醇至无醇味的浸膏； 

(2)将川芎提取液浓缩为相对密度1.20～1.30(50℃)的稠膏，加体积比为70％～90％的乙醇至含醇量为40％～60％醇沉，12～36小时后取上清液减压回收乙醇，加入辅料，干燥，得提取物A； 

(3)取银杏叶、山楂叶药材粗粉，加入6～10倍量体积比为60％～90％的乙醇回流或加热至60～75℃提取1～2小时，提取2～3次，收集乙醇提取液，减压回收乙醇至无醇味的浓缩液； 

(4)将银杏叶、山楂叶浓缩液加水溶解至每毫升溶液含生药0.15～0.30g，过大孔树脂吸附，先用水洗除杂，再用3～6倍柱体重的体积比为30％～80％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压回收乙醇，浓缩，真空干燥，得提取物B； 

(5)将提取物A和提取物B混合，加入药学可接受辅料制成制剂。 

上述药学可接受辅料为甘露醇、微晶纤维素、淀粉、乳糖、糊精、聚乙烯吡 咯烷酮、吐温80、磷酸钙、聚乙二醇、二氧化硅或硬脂酸镁。 

上述制剂为片剂、胶囊、颗粒剂、口服液、滴丸、贴剂或丸剂。 

本发明处方配比优化和作用确证研究 

本发明由银杏叶、山楂叶和川芎三味药材组成，具化痰通络，行气止痛作用。用于脉络瘀阻所致头痛，眩晕眼花，心烦易怒，失眠多梦，慢性脑供血不足、动脉硬化、缺血性脑中风和冠心病。临床医生会因患者不同阶段病情对处方用量比例进行调整，为更加科学合理确定最佳比例，根据功能主治试验拟采用小鼠急性脑缺血、抗血栓形成和常压耐缺氧试验进行最佳处方配比筛选，观察本发明不同处方比例活性，以期取得最佳比例。并能过脑缺血模型、心肌缺血模型及相关病理试验进一步确定药理作用。 

一、试验材料 

1.试剂药物与仪器器械 

1.1受试药物：本发明提取物，本发明人提供，批号：20091201、20091202到20091209；本发明片剂，批号20100322，0.36g/片(相当于2.33g生药)。化痰通络，行气止痛。用于脉络瘀阻所致头痛，眩晕眼花，心烦易怒，失眠多梦，慢性供血不足、脑动脉硬化及缺血性脑中风、心肌缺血。一日三次，一次两片(约相当于5g生药)。银杏叶提取物，规格：每克提取物相当于23.2g生药，批号：20091201Y；山楂叶提取物，规格：每克提取物相当于17.0g生药，批号：20091201S由本发明人根据相同工艺提取制备。 

1.2阳性对照药物 

1.2.1华佗再造丸：广州奇星药业有限公司生产，批号：9146。主要成分有川芎、吴茱萸、冰片等。功能：活血化瘀，化痰通络，行气止痛。用于痰瘀阻络之中风恢复期和后遗症，症见半身不遂、拘挛麻木、口眼歪斜、言语不清。临床用量为8g/次，2次/日，30天为一疗程。 

1.2.2阿司匹林肠溶片：拜耳医药保健有限公司，生产批号：BTA7WH3。 

1.3主要试剂 

水合氯醛，国药集团化学试剂有限公司；ADP，瑞士罗氏(分装)；枸橼酸钠广州市齐云生物技术有限公司；苦味酸，广州化学试剂厂。 

1.4仪器及器械 

QX-200全血血小板聚集仪：上海医大仪器厂；毛细玻璃管(内径1mm，直径100mm)：华西医科大学仪器修造厂；电子天平(Mettler Toledo)：瑞士mettler-toledo group公司；电热恒温干燥箱，长沙医疗器械厂等。 

2.实验动物和饲养条件 

2.1实验动物 

昆明小鼠，SPF级，体重：18～22g，雌雄兼用，合格证号：SCXK(粤)2008-0020。SPF级大鼠，许可证号：SCXK(粤)2009-0011。以上动物由中山大学实验动物中心提供。 

2.2饲养条件 

饲养管理：所有实验动物在中山大学实验动物中心SPF级动物房饲养，由专人饲养管理，小鼠、大鼠每笼5只。 

设施条件：动物室通风和空调设备良好，室温控制在22～25℃，相对湿度为50～70％。饲养室按照常规定期消毒。 

饲料和饮水：动物食用标准配方生产许可饲料，饮用经高压灭菌的蒸馏水。 

三、处方配比筛选试验 

(一)试验与剂量设计 

本发明由银杏叶、山楂叶和川芎三味药材组成，为更加科学合理确定最佳比例，根据功能主治试验拟采用小鼠急性脑缺血、抗血栓形成和常压耐缺氧试验进行最佳处方配比筛选。试验采用正交试验对三味药材的比例进行研究，以日用生药量为15g计，则小鼠等效剂量约2.5g生药/kg。 

表1  分组与剂量设计 

表2  组方试验给药剂量与分组正交设计 

(二)试验方法与结果 

1.对小鼠常压耐缺氧的影响 

方法  昆明种小鼠88只，体重18～22g，随机分成11组，每组8只。受试药组分别为本发明处方1到处方9，给药剂量均为2.5g生药/kg，阳性药华佗再造丸2.1g/kg；对照组给予等容量的蒸馏水。口服灌胃给药，给药体积：0.2ml/10g小鼠，共3次，每天1次，末次给药后30min逐只将小鼠放入容量为250ml的缺氧瓶内，盖上涂有凡士林的瓶塞，造成密闭性缺氧。记录密闭瓶口时间，不断观察小白鼠呼吸频率、深度、皮肤和***颜色的变化，直到动物停止呼吸，记下死亡时间，从盖瓶塞到动物停止呼吸的持续时间作为缺氧条件下小鼠的存活时间。 

结果由表3试验结果表明给各组小鼠灌服9个处方比较药物和华陀再造丸三次后观察常压耐缺氧能力均有不同程度提高，其中以处方3和阳性对照作用最为明显，具有统计学差异(p＜0.05)。 

表3  各处方对小鼠常压耐缺氧时间的影响(n＝8， 

) 

注：与对照组比较*P＜0.05 

2.小鼠急性脑缺氧的影响 

方法  昆明种小鼠110只，体重18～22g，随机分成11组，每组10只。受试药组分别为本发明处方1到处方9，给药剂量均为2.5g生药/kg，阳性药华佗再造丸2.1g/kg；对照组给予等容量的蒸馏水。口服灌胃给药，每天1次，共3次，末次给药后30min将小鼠逐只断头，立即按秒表记录小鼠断头后至张口喘气停止时间及张口次数作为耐缺氧指标。 

结果  由表4试验结果表明给各组小鼠灌服9个处方比药物和华陀再造丸三次后对急性脑缺小鼠呼吸次数均没明显影响，除处方1和处方9外均不同程度延 长呼吸时间，其中处方2、处方6、处方7和华陀再造丸可显著延长小鼠的呼吸时间(p＜0.05)。 

表4  各处方对小鼠急性脑缺氧的影响(n＝9， 

) 

注：与对照组比较*P＜0.05 

3.对小鼠血栓形成的影响 

方法昆明种小鼠110只，体重18～22g，随机分成11组，每组10只。受试药组分别为本发明处方1到处方9，给药剂量均为2.5g生药/kg，阳性药华佗再造丸2.1g/kg；对照组给予等容量的蒸馏水。口服灌胃给药，每天1次，共3次，末次给药后30min将给小鼠尾部皮下注射0.2ml/10g体重1.0％的角叉菜胶溶液，观察注射角叉菜胶复制模型后72h内各组小鼠血栓的情况，计算血栓发生率(发生血栓的鼠数/组内动物数×100％)，测量发生血栓鼠鼠尾形成血栓的长度，计算血栓长度占整个鼠尾的百分比。 

结果由表5试验结果表明给小鼠皮下注射角叉菜胶后空白对照组小鼠100％出现血栓，给各组小鼠灌服9个处方比的药物或阿斯匹林三次后除处方2、处方5和处方7外均对血栓形成抑制不明显外，处方4、处方8、处方9和阿斯匹林组造模型48h、72h可显著延抑制血栓形成(p＜0.05)，处方3和处方4也可明显抑制血栓的形成。 

表4  各处方对小鼠急性脑缺氧的影响(n＝10， 

) 

注：与对照组比较*P＜0.05 

(三)试验结果分析 

对9种处方比例组成的药物，采用小鼠急性脑缺血、常压耐缺氧和抗血栓形成三个试验，对试验结果进行加权评分和单个试验结果综分析确定最佳比较。由表5正交试验分析结果可知，小鼠急性脑缺氧、常压耐缺氧和抗血栓形三个试验结果直观分析最佳配比分别是A₂B₂C₃、A₁B₃C₃、A₃B₃C₁，提示处方中银杏叶比例增大疗效不一定增强，山楂叶处方量增加疗效也增加，呈正相相关性，川芎的处量与疗效没有明确相关性。由三个试验加权评分直观分析最佳配比是A₂B₃C₁，C1表示川芎处量为1g，不符合中医用药习惯，方差分析结果表明三味药材的处量变化均无显著差异常，取C2，故最值处方配比优选为A₂B₃C₂，即银杏叶6g，山楂叶5g，川芎3g。 

表5  正交试验结果分析 

三、最佳处方配比疗效验证 

根据确定比例，按本发明制备工艺，制备试验样品，进一步通过药理试验验证疗效。 

1.对小鼠常压耐缺氧的影响 

方法  昆明种小鼠70只，体重18～22g，随机分成7组，每组10只。受试药组分别银杏叶提取物4.0g/kg，山楂叶提取物4.0g/kg，为本发明1.94g/kg、3.88g/kg、5.80g/kg，阳性药华佗再造丸2.1g/kg；空白对照组给予等容量的蒸馏水。口服灌胃给药，给药体积0.2ml/10g小鼠，每天1次，共3次，末次给药后30min逐只将小鼠放入容量为250ml的缺氧瓶内，盖上涂有凡士林的瓶塞，造成密闭性缺氧。记录密闭瓶口时间，不断观察小白鼠呼吸频率、深度、皮肤和***颜色的变化，直到动物停止呼吸，记下死亡时间，从盖瓶塞到动物停止呼吸的持续时间作为缺氧条件下小鼠的存活时间。 

结果  试验结果显示，本发明各剂量组小鼠在常压缺氧条件下的存活时间较 对照组均有延长，且呈剂量相关性，其中本发明剂量大于1.94g/kg(制剂0.2g/kg)与正常对照组比较有显著差异(P＜0.05或P＜0.01)，阳性药物也有差异但用药剂量明显大于本发明，单给予大剂量的银杏叶或山楂叶提取物作用不明显，提示本发明能提高小鼠的耐缺氧能力，且作用明显强于等量的单一药材。结果见表6。 

表6  对小鼠常压耐缺氧时间的影响(n＝10， 

) 

组别	剂量(g/kg)	耐缺氧时间(min)
			正常对照组	-	29.30±5.50
银杏叶提取物	4.00	32.97±4.04
			山楂叶提取物	4.00	34.77±3.60
本发明	1.94	34.92±4.08*
			本发明	3.88	38.02±4.68**
本发明	5.80	35.27±4.13*
			华佗再造丸	2.10	36.86±4.51**

注：与正常对照组比较：*P＜0.05，**P＜0.01 

2.本发明小鼠急性脑缺氧的影响 

方法昆明种小鼠70只，体重18～22g，随机分成7组，每组10只。。受试药组分别银杏叶提取物4.0g/kg，山楂叶提取物4.0g/kg，为本发明1.94g/kg、3.88g/kg、5.80g/kg，阳性药华佗再造丸2.1g/kg；对照组给予等容量的蒸馏水。口服灌胃给药，给药体积0.2ml/10g小鼠，每天1次，共3次，末次给药后30min将小鼠逐只断头，立即按秒表记录小鼠断头后至张口喘气停止时间及张口次数作为耐缺氧指标。 

结果  试验结果显示，本发明各剂量组给药后均能延长小鼠张口次数和喘息时间，且呈剂量相关性，其中本发明3.88g/kg、5.80g/kg两个剂量、阳性药物组、山楂叶提取物与正常对照组比较有显著异常(P＜0.05或P＜0.01)，提示本发明能通过血脑屏障，提高小鼠脑耐急性缺氧的能力，改善脑能量代谢，且本发明的药理作用明显强于单的成分。结果见表7。 

表7  对小鼠急性脑缺氧的影响( n＝10) 

组别

剂量(/kg)

张口次数

连续喘息时间(s)

正常对照组	-	7.33±2.90	19.67±1.83
				银杏叶提取物	4.00	7.50±2.11	20.78±1.61
山楂叶提取物	4.00	7.17±2.44	21.45±1.92*

本发明	1.94	7.25±2.22	21.05±2.45
				本发明	3.88	8.08±2.54*	25.33±2.82**
本发明	5.80	7.56±2.51*	22.97±2.64**
				华佗再造丸	2.10	7.62±2.37*	23.12±1.97**

注：与正常对照组比较：*P＜0.05，**P＜0.01 

3.本发明对小鼠凝血时间和血栓形成的影响 

方法  昆明种小鼠70只，体重18-22g，雌雄兼用，按体重和性别随机分成7组，每组10只。受试药组分别银杏叶提取物4.0g/kg，山楂叶提取物4.0g/kg，为本发明1.94g/kg、3.88g/kg、5.80g/kg，阳性药华佗再造丸2.1g/kg；对照组给予等容量的蒸馏水。口服灌胃给药，给药体积0.2ml/10g小鼠，每天1次，共3次，末次给药后30min用毛细玻璃管自眼球取血，每15s截断一节毛细管，观察记录毛细管内出现凝血丝的时间，此即为凝血时间。小鼠用毛细玻璃管自眼球取血后，立刻止血，用10％水合氯醛腹腔注射麻醉，自下腔静脉抽血0.5ml，加3.4％的枸橼酸钠抗凝(血与抗凝剂之比为9∶1)，用QX-200全血血小板聚集仪(阻抗法)测量血小板聚集度，取0.5ml抗凝全血加0.5ml全血稀释缓冲液，再加试验样品或蒸馏水对照液100ul，37℃温育5min，加镍芯搅拌后***铂丝电极，启动“搅拌”“测量”键，调零定标，然后，加人诱导剂2mmol/L ADP 5ul(终浓度10nmol/L)，同时按“定时”键，记录5min时最大聚集度欧姆值，并计算抑制聚集百分率。 

结果  抗凝试验结果显示本发明1.30g/kg、3.88g/kg、5.80g/kg三个剂量及阳性药组与正常对照组比较凝血时间明显延长(P＜0.05或P＜0.01)，结果见表8。 

抗血小板聚集试验结果显示，本发明各个组均有降低血小板聚集的作用，且呈剂量相关性，其中1.94g/kg、3.88g/kg、5.80g/kg三个剂量及阳性药组与正常对照组比较凝血时间明显延长(P＜0.01)。提示本发明有明显的活血化瘀作用，且本发明的药理作用明显强于单的成分。结果见表8和表9。 

表8  对小鼠凝血时间的影响(n＝10， 

) 

组别	剂量(g/kg)	凝血时间(s)
			正常对照组	-	210.0±76.68
银杏叶提取物	4.00	284.3±39.85*
			山楂叶提取物	4.00	269.8±43.87*
本发明	1.94	268.1±43.43
			本发明	3.88	303.0±41.04**
本发明	5.80	304.3±57.86**
			阿司匹林	0.019	308.4±42.85**

注：与正常对照组比较：*P＜0.05，**＜P0.01 

表9  对ADP诱导大鼠全血血小板聚集的影响(n＝10， 

) 

注：与正常对照组比较：*P＜0.05，**P＜0.01 

5.对大鼠大脑中动脉栓线法局灶性脑缺血(MCAO)损伤模型的影响 

方法 

分组及给药  取雄性SD大鼠，按随机分组原则分成6组，分别为假手术组(蒸馏水)、模型组(蒸馏水)、本发明低0.5g/kg)、中(1.0g/kg)、高(2.0g/kg)剂量组和华佗再造丸(1.0g/kg)组。 

药物用蒸馏水配制成相应的浓度，使给药体积均为1ml/100g大鼠。预先灌胃给药两次，分两天，一天各一次。造模前0.5h再灌胃给药1次；造模后4h再次给药。模型组和假手术组大鼠给予蒸馏水，给药时间及体积同上。 

造模方法  将大鼠用10％水合氯醛3.5ml/kg腹腔注射麻醉，颈正中切口，分离、结扎左侧颈总动脉、颈外动脉，并分离翼额动脉。在颈内动脉近端备线、远端放置动脉夹，颈总动脉分叉处切口，***4-0尼龙线，其深度为17～20mm，栓线进入颈内动脉，入颅至大脑前动脉，阻断大脑中动脉所有血流来源，伤口以碘伏消毒，缝合皮肤。然后回笼饲养。假手术组除不插线外，其余步骤同上。其余各组大鼠按上述手术方法造模。 

造模成功的标准：每只取手术侧脑小片进行TTC染色，变白色者为模型成功；动物手术后有明显手术侧(即左侧)Horner症(左侧眼睑下垂，眼球凹陷)及手术侧(即左侧)偏瘫体症(不能完全伸展左前肢，行走时向左侧倾倒或转圈)。依上述标准将能够存活24h的大鼠确定为最后的实验对象，并进行行为学评分及快速断头取脑。术后死亡及造模不成功者不纳入实验统计，随机补充动物保证每组至少10只。 

标本采集：麻醉动物抽取下腔静脉血，以3000转/分离心10分钟后，吸取上清液作为待测血清。采用断头法处死动物，断头后立即取脑组织，分离并去除嗅球、小脑和低位脑干，保留大脑部分。 

观察指标 

(1)行为学评分  存活24h大鼠，观察大鼠行为学变化，进行神经病学评分。参考Zea Longa的4分制评分标准： 

0分，无神经损伤症状； 

1分，不能完全伸展对侧前爪； 

2分，向外侧转圈； 

3分，向对侧倾倒； 

4分，不能自发行走，意识丧失。 

(2)脑含水量测定  神经病学评分后，快速断头取鼠大脑。取左侧半脑后半部分分别称湿重，置120℃烤箱烘干至恒重，按以下公式计算脑组织含水量，脑组织含水量(％)＝(湿重-干重)/湿重×100％。 

(3)脑梗塞范围的测定  造模后24h大鼠，快速取全脑，去掉嗅球、小脑和低位脑干，冰冻25分钟。然后行冠状切面取大脑中间一片，迅速置1％红四氮唑(TTC)中，避光，37℃温孵20分钟，其间每隔7～8min翻动一次，染色后以 4％多聚甲醛固定。染色结果：正常组织呈红色，损伤梗死组织呈白色。拍照后以称重法计算脑梗死面积百分比。 

结果 

(1)行为学评分结果 

结果显示，经过脑梗塞缺血再灌注后的大鼠麻醉清醒后即有偏瘫样症状出现。主要表现为不同程度的手术对侧前肢内收，肩内旋，肌张力降低，推右肩向对侧移动，抵抗阻力降低，还出现不停地向一侧转圈，甚至有些动物出现向对侧倾倒或不能自主活动现象。由表10，与模型组比较，术后24h的行为评分本发明中、高剂量(1.0g/kg、2.0g/kg)组和阳性药华佗再造丸组均有明显降低MCAO大鼠的行为学评分，统计分析有显著差异(P＜0.05)。术后模型组动物的一般状态较差，活动减少。 

表10  对MCAO大鼠神经行为学的影响 

注：与模型组比较：*P＜0.05，**P＜0.01；与假手术比较：##P＜0.01 

(2)对脑组织含水量的影响 

结果显示，假手术组大鼠脑含水量较低，模型组脑含水量显著高于假手术组；本发明中、高剂量(1.0g/kg、2.0g/kg)组均显著低于模型对照组(P＜0.01)，阳性对照华佗再造丸组也能显著降低脑含水量(与模型组比较P＜0.01))。结果见表11。 

表11  对MCAO大鼠脑含水量的影响 

组别

剂量(mg/kg)

动物数(只)

脑含水量(％)

假手术组

-

10

77.9±1.24**

[0120] 

模型对照组	-	11	80.2±1.15
				本发明低剂量	0.5	10	79.4±1.30
本发明中剂量	2.0	10	78.6±0.87**
				本发明高剂量	2.0	11	78.1±1.10**
阳性药物组	1.0	10	78.5±0.95**

注：与模型组比较：*P＜0.05，**P＜0.01；与假手术比较：##P＜0.01 

(3)对大鼠脑梗塞范围的影响 

本实验是脑梗塞后24h利用TTC染色技术检查脑梗塞程度。脑缺血24h后大鼠脑组织梗塞程度明显，梗塞面积占总脑面积的23.49±4.36％。本发明和华佗再造丸给药后，使脑梗塞面积百分比明显下降。假手术组动物未见脑梗塞发生。结果见表12。 

表12  对MCAO大鼠脑梗死面积的影响 

组别	剂量(mg/kg)	动物数(只)	脑梗死面积(％)
				假手术组	-	10	0##
模型对照组	-	11	23.49±4.36
				本发明低剂量	250	10	19.81±7.47
本发明中剂量	500	10	18.37±3.94*
				本发明高剂量	750	11	16.40±3.69**
阳性药物组	1440	10	18.30±5.49**

注：与模型组比较：*P＜0.05，**P＜0.01；与假手术比较：##P＜0.01 

6对大鼠冠脉结扎所致心肌缺血的影响 

方法  大鼠60只随机分成6组，每组10只，雌雄各半，分别为假手术组(给予蒸馏水)、阴性对照组(即模型组)给予蒸馏水，本发明低(0.5g/kg)、中(1.0g/kg)、高(2.0g/kg)剂量组和华佗再造丸(1.0g/kg)。连续灌胃3天，最后一天灌胃30min后麻醉(20％乌拉坦0.5ml/100g腹腔注射)并固定于手术板上。插气管接人工呼吸机，胸部去毛消毒，沿着锁骨中线纵行切开皮肤约2cm，在第三或第四肋间钝性分离肌层，打开胸腔，剪开心包，轻压右侧胸廓，挤出心脏。在动脉圆锥与左心耳之间冠状动脉处结扎左冠状动脉前降支后，把心脏放回胸腔，迅速缝合胸腔，停止人工呼吸。该实验在大白鼠开胸之前先描记一段时间的正常II导联心电图，再结扎冠脉前降支。记录扎后心电图指标(手术控制在30分钟以内)。手术后检测以下指标。 

观察指标 

(1)心电图的变化：结扎前与结扎后60min的心率、J点位移(mv)及T波幅值(mv)。 

(2)心肌梗死面积：240min后处死大鼠，摘取心脏，放-20℃冰箱中冷冻30分钟，横向切成5片、放TTC液中37℃水浴保温15分钟，将各片心肌非兰染区(梗塞区)切下，称湿重，计算与总心脏重之比为心肌梗塞范围(梗死区/心脏重×100％)。 

结果 

(1)对心肌缺血大鼠心电图的的影响 

开胸结扎大鼠冠状动脉前降支后动物很快出现心肌缺血改变，表现为心电图T波高耸，J点抬高，一个小时后改变基本稳定在一个水平。与蒸馏水组对比，本发明各剂量组均有对抗冠脉结扎所致的心肌缺血的心电图改变，下表13、14可见本发明高、中剂量组与华佗再造丸组可显著阻止冠脉结扎大鼠心电图J点与T波的变化(P＜0.01)，本发明低剂量也表现有一定的作用。可见本发明对结扎性心肌缺血有明显保护作用。结果详见表13～15。 

表13  对结扎性心肌缺血所致大鼠心电J点位移(mv)变化值的影响(x±SD) 

与模型组对比，*P＜0.05，**P＜0.01 

表14  对结扎性心肌缺血所致大鼠心电T波位移(mv)变化值的影响(x±SD) 

与模型组对比，*P＜0.05，**P＜0.01 

表15  对结扎性心肌缺血所致大鼠心电心率变化值的影响(x±SD) 

与模型组对比，*P＜0.05，**P＜0.01 

(2)对心肌梗死范围的影响 

试验结果显示模型组心肌梗塞围为20.17％，给药各组梗塞范围显著减小(P＜0.05或P＜0.01)。表明本发明有显著缩小心肌梗塞范围的作用，同时看到随剂量增加作用增强的量效关系。表明本发明对冠脉结扎大鼠有良好保护作用。结果见表16。 

表16  对心肌缺血大鼠心肌梗死范围的影响(X±SD) 

与模型组比较，**P＜0.01 

上述试验研究结果表明本发明三味中药银杏叶、山楂叶和川芎三味药材质量比为6∶5∶3疗效较好，通过本发明制备工艺制成成品片剂给予脑缺血大鼠、心肌缺血大鼠及相关病理模型动物服用一定剂量的，结果进一步确证本发明对脑动 脉粥样硬化或血栓引起的脑供血不足或脑缺血性疾病，冠脉粥样硬化或血栓引起心肌缺血性等疾病有较好治疗作用。 

本发明的治疗心脑血管疾病的中药组合物的处方先进，方法工艺简单，操作容易，所获得的中药组合物对心脑血管疾病有显著的疗效。本发明以传统中医药理论为指导精心组方而成，祖国医学认为，心脑血管疾病的发生发展，或因本虚，或因饮食不节，或因情志内伤，以至脏腑功能失常，瘀血内生，出现心脑血管疾病的各种临床表现，在此阶段若病情不能得到有效控制，就会发展形成脉络痹阻，发生脑卒中、心梗等危重病症。心脑血管疾病病因各异，但其关键环节在于“瘀血”。本发明中川芎，味辛，性温，归肝、胆、心包经，有活血行气，祛风止痛的功效，既能活血祛瘀以通脉，又能行气化滞以止痛，无论气滞、血瘀疼痛均可使用，故为君药；银杏叶味甘、苦、涩，性平，归心、肺经，有敛肺平喘，活血化瘀止痛的功效，可治疗中风或及胸痹；山楂叶，活血化瘀，理气通脉，化浊降脂，归肝经，用于气滞血瘀，胸痹心痛，眩晕耳鸣，高血脂症，脑动脉供血不足者，银杏叶、山楂叶均为活血化瘀、通脉止痛之药，同为臣药，以助川芎化瘀功效。三药同用，活血化瘀作用增强，且既能行气，又能活血，还可除浊，使气行血畅，切中心脑血管疾病之病机。通过临床应用和药理实验证实，本发明中药组合物作用明显，疗效确切，特别是对于老年人慢性脑供血不足引起的头痛头晕。 

本发明的治疗心脑血管疾病的中药组合物，具有药物纯度高，疗效显著，并且有提取率高、药物损失少，工艺简单的优点，比单用同剂量银杏叶或山楂叶的效果大大提高，经药效学试验证明其疗效显著，为临床提供了一种疗效更好、更加方便的中药组合物及其制剂。 

具体的实施方式 

下面结合最佳的实施例对本发明作进一步说明，但本发明的保护范围并不仅限于以下实施例。 

实施例1 

取银杏叶1000g、山楂叶835g和川芎500g，银杏叶、山楂叶加60％乙醇分别加热至80℃提取两次，滤过，合并滤液，滤液减压回收乙醇至无醇味，浓缩液加水溶解，静置后过滤，滤液上D101大孔树脂，用75％乙醇洗脱，收集洗脱液，将洗脱液减压回收乙醇，减压干燥得到银杏叶、山楂叶干膏。川芎加80％乙醇分别 加热回流两次，每次2小时，滤过，合并滤液，将滤液减压回收乙醇至无醇味，醇沉，静置，倾出上清液，将上清液减压回收乙醇，加入辅料干燥微晶纤维素，得到川芎干膏。用加入微晶纤维素50g、乳糖24g，淀粉20g，硬脂酸镁适量，混和均匀，压片，制成片剂1000片。 

实施例2 

取银杏叶900g、山楂叶885g和川芎580g，银杏叶加70％乙醇分别加热至60℃提取两次，滤过，合并滤液，滤液减压回收乙醇至无醇味，浓缩液加水溶解，静置后过滤，滤液上FL-2大孔树脂，用85％乙醇洗脱，收集洗脱液，将洗脱液减压回收乙醇，减压干燥得到银杏叶干膏。山楂叶加65％乙醇分别回流提取两次，滤过，合并滤液，滤液减压回收乙醇至无醇味，浓缩液加水溶解，静置后过滤，滤液上ADS-17大孔树脂，用70％乙醇洗脱，收集洗脱液，将洗脱液减压回收乙醇，减压干燥得到山楂叶干膏。川芎加75％乙醇分别加热回流两次，每次1.5小时，滤过，合并滤液，将滤液减压回收乙醇至无醇味，醇沉，静置，倾出上清液，将上清液减压回收乙醇，减压干燥，得到川芎干膏。加入微晶纤维素120g、乳糖30g，淀粉20g，混和均匀，用95％药用乙醇制软材，过24目筛制粒，60℃条件下干燥4小时，过筛整粒，薄膜包衣，制成颗粒剂100袋。 

实施例3 

取银杏叶750g、山楂叶725g和川芎350g，银杏叶、山楂叶加70％乙醇加热至75℃提取两次，滤过，合并滤液，滤液减压回收乙醇至无醇味，浓缩液加水溶解，静置后过滤，滤液上FL-2大孔树脂，用85％乙醇洗脱，收集洗脱液，将洗脱液减压回收乙醇，减压干燥得到银杏叶、山楂叶干膏。川芎加70％乙醇分别加热回流两次，每次2小时，滤过，合并滤液，将滤液减压回收乙醇至无醇味，醇沉，静置，倾出上清液，将上清液减压回收乙醇，加入微晶纤维素减压干燥，得到川芎干膏。银杏叶、山楂叶干膏和川芎干膏混和均匀，加入微晶纤维素20g，淀粉30g，羧甲基淀粉钠10g，混合均匀，用50％药用乙醇制软材，过24目筛制粒，60℃条件下干燥4小时，20目筛整粒，加入适量微粉硅胶，填充胶囊，得胶囊500粒。 

实施例4 

取银杏叶950g、山楂叶880g和川芎580g，银杏叶加70％乙醇分别加热至 60℃提取两次，滤过，合并滤液，滤液减压回收乙醇至无醇味，浓缩液加水溶解，静置后过滤，滤液上D101大孔树脂，用80％乙醇洗脱，收集洗脱液，将洗脱液减压回收乙醇，减压干燥得到银杏叶干膏。山楂叶加70％乙醇分别回流提取两次，滤过，合并滤液，滤液减压回收乙醇至无醇味，浓缩液加水溶解，静置后过滤，滤液上ADS-17大孔树脂，用70％乙醇洗脱，收集洗脱液，将洗脱液减压回收乙醇，减压干燥得到山楂叶干膏。川芎加75％乙醇分别加热回流两次，每次2小时，滤过，合并滤液，将滤液减压回收乙醇至无醇味，醇沉，静置，倾出上清液，将上清液减压回收乙醇，加入微晶纤维素减压干燥，得到川芎干膏。三种干膏混合，粉碎，加入糊精10g，微晶纤维素15g，制团，制丸条，制丸，即得药丸500丸。 

临床应用 

张某某，女，65岁，2年前起，经常无明显诱因突发眩晕，严重时有如天旋地转，不能睁目，同时伴有恶心呕吐，经用中西药物治疗效果均不明显，症状间歇性发作，以至不能自理日常生活，行走步态不稳。现见头晕眼花，耳鸣，恶心欲吐，唇、舌紫暗，苔薄白，脉涩。作血液流变学检查示血浆粘度、血小板聚附率高于正常值，脑血流图示双侧椎动脉供血不足，CT检查无异常发现。西医诊断：双侧椎动脉供血不足，中医诊断：眩晕(瘀阻清窍)予本发明实施例1所得的片剂，2片/次，3次/日，2个星期后，症状缓解，眩晕发作次数减少，自觉情况改善。半月后痊愈。随访半年，眩晕未再复发。 

李某，女，60岁。患者有冠心病史3年.常在劳累或情绪忧郁时诱发心绞痛，服消心痛***等药物，效果欠佳。诊见：表情痛苦，胸闷胸痛.面色晦滞，头晕心悸，舌紫黯、苔薄白，脉弦涩。心电圈提示：S-T段明显下降，T波倒置.心肌供血不足西医诊断：冠心病心绞痛。中医诊断：胸痹：证属心脉瘀滞。予本发明，2片/次，3次/日，一个月后胸闷、胸痛减轻，仍头晕心悸。继予本发明，2片/次，3次/日，两个星期后胸闷痛消失，时有心悸头晕，继续予本发明实施例1所得的片剂，2片/次，3次/日，2个星期后诸症消除，心电图复查恢复正常.随访2年未见复发。 

龙某，女性，60岁。眩晕10余年，平时间断服用美托洛尔，血压持续在160/105mmHg，近2周来因情绪波动，眩晕加剧，视物模糊，兼有胸闷、心悸等症。现 头晕时作，目眩且花，视物旋转，胸闷心悸，舌紫黯，有瘀点，苔薄白，脉细涩。西医诊断：高血压(2级)，中医诊断：眩晕(瘀阻清窍)。予本发明实施例1所得的片剂，2片/次，3次/日，3个星期后，心悸渐消，眩晕减轻，视物清楚，物旋已止，胸闷依旧，血压140/90mmHg，诸症消失。 

Claims (7)

1.一种治疗心脑血管疾病的中药组合物，其特征在于，由下述重量份配比的原料制成：川芎9～18、银杏叶20～40、山楂叶18～30。

2.根据权利要求1所述的治疗心脑血管疾病的中药组合物，其特征在于，各原料的重量份配比是：川芎12～16、银杏叶25～35、山楂叶22～26。

3.根据权利要求1或2所述的治疗心脑血管疾病的中药组合物，其特征在于，所述中药组合物的剂型为片剂、胶囊、颗粒剂、口服液、滴丸、贴剂或丸剂。

4.根据权利要求3所述的治疗心脑血管疾病的中药组合物，其特征在于，所述心脑血管疾病是指脑动脉粥样硬化或血栓引起的脑供血不足或脑缺血性疾病以及冠脉粥样硬化或血栓引起心肌缺血性疾病。

5.权利要求1所述的治疗心脑血管疾病的中药组合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)取川芎饮片，加入8～14倍量体积比为60％～90％的乙醇回流提取1～2小时，提取1～3次，收集乙醇液，减压回收乙醇至无醇味的浸膏；

(2)将川芎提取液浓缩为相对密度1.20～1.30的稠膏，加体积比为70％～90％的乙醇至含醇量为40％～60％醇沉，12～36小时后取上清液减压回收乙醇，加入辅料，干燥，得提取物A；

(3)取银杏叶、山楂叶药材粗粉，加入6～10倍量体积比为60％～90％的乙醇回流或加热至60～75℃提取1～2小时，提取2～3次，收集乙醇提取液，减压回收乙醇至无醇味的浓缩液；

(4)将银杏叶、山楂叶浓缩液加水溶解至每毫升溶液含生药0.15～0.30g，过大孔树脂吸附，先用水洗除杂，再用3～6倍柱体重的体积比为30％～80％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压回收乙醇，浓缩，真空干燥，得提取物B；

(5)将提取物A和提取物B混合，加入药学可接受辅料制成制剂。

6.根据权利要求5所述的治疗心脑血管疾病的中药组合物的制备方法，其特征在于，所述大孔树脂的型号为D101、FL-2、ADS-17、D102、AB-8或SA-1。

7.根据权利要求5所述的治疗心脑血管疾病的中药组合物的制备方法，其特征在于，所述药学可接受辅料为甘露醇、微晶纤维素、淀粉、乳糖、糊精、聚乙烯吡咯烷酮、吐温80、磷酸钙、聚乙二醇、二氧化硅或硬脂酸镁。