CN101926834B - 尖顶羊肚菌颗粒冲剂及其制备方法和用途 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种尖顶羊肚菌颗粒冲剂及其制备方法和用途。该颗粒冲剂以尖顶羊肚菌胞外多糖提取物为主要原料,再添加适量的辅料制成。其制备方法为:将尖顶羊肚菌胞外多糖提取物与β-环糊精、糊精、可溶性淀粉、甜蜜素按质量比0.5∶0.5~5∶0.1~4∶0.1~2∶0.01~0.08混合搅匀,用75%乙醇制成软材,用14目筛粒55℃干燥,得颗粒,过筛整粒。本发明的颗粒冲剂制备过程简单,条件易控制,其储存时间明显延长,且易溶于水;制成颗粒冲剂与含糖冲剂相比,具有溶解性好、防潮、去其味和提高疗效等特点,可适用于糖尿病人和肥胖患者,扩大了使用范围,且具有良好的延缓衰老作用。
Description
技术领域
本发明属于生物技术和药学领域,具体涉及一种尖顶羊肚菌(Morchella conica)颗粒冲剂以及其制备方法;还涉及该产品在延缓衰老方面的新用途。
背景技术
尖顶羊肚菌多糖是一种重要的抗衰老功能产品素材,但其多糖的生理效应不明确,产品开发也较迟缓,将多糖制成胶囊产品,有较高的现实意义和实践价值。宋娟娜等在颗粒成型工艺研究中加入一定的辅料发现颗粒的成型性、溶解性及抗湿性都有所增强(宋娟娜等,2008),表明对多糖添加一定辅料,可提高多糖稳定性,降低其吸湿性。尖顶羊肚菌粗多糖通常具有较强的吸湿性,易吸收空气中的水分,结块、甚至霉变,从而影响药品的质量和疗效,为了降低其吸湿性而便于储藏,一般加入适量的辅料与之混合。
发明内容
本发明目的在于提供一种制作简单、成本低且吸湿率小、稳定性好的尖顶羊肚菌颗粒冲剂。
本发明的另一个目的在于提供上述尖顶羊肚菌颗粒冲剂的制备方法。
本发明的再一个目的在于提供上述尖顶羊肚菌颗粒冲剂在延缓衰老药物或保健食品中的应用。
本发明的上述目的通过以下方案予以实现:
一种尖顶羊肚菌颗粒冲剂,以尖顶羊肚菌胞外多糖提取物为主要原料,并添加~定的辅料,其中辅料应具有良好的流动性,吸湿性低、易成型,有润湿性,有利于崩解与溶出,不影响指标成分的溶出,不与指标成分相互作用,且不影响疗效,以可溶性淀粉、糊精等为辅料效果较好,该颗粒冲剂乳白色,易溶于水。通过测定配方的成型性、吸湿率、休止角和溶解度等,确定原料的质量配比为:尖顶羊肚菌胞外多糖提取物:β-环糊精:糊精:可溶性淀粉:甜蜜素=0.5∶0.5~5∶0.1~4∶0.1~2∶0.01~0.08。
优选地,所述原料质量配比为,尖顶羊肚菌胞外多糖提取物∶β-环糊精∶糊精∶可溶性淀粉∶甜蜜素=0.5∶1∶4∶1∶0.04。在外观、融化性具有良好的效果,加入糊精的处方所制颗粒成型性好,溶解后无沉淀产生,单独用糊精制得的颗粒成型性一般,不易完全溶解;可溶性淀粉的粘合性大,在形成颗粒有较大的作用。
上述尖顶羊肚菌颗粒冲剂的制备方法,其步骤如下:
(1)将尖顶羊肚菌胞外多糖提取物与β-环糊精、糊精、可溶性淀粉、甜蜜素按质量比0.5∶0.5~5∶0.1~4∶0.1~2∶0.01~0.08混合搅匀;
(2)用乙醇制成软材;
(3)55~60℃干燥,过筛整粒,制得尖顶羊肚菌颗粒冲剂。
优选地,步骤(1)所述尖顶羊肚菌胞外多糖提取物∶β-环糊精∶糊精∶可溶性淀粉∶甜蜜素=0.5∶1∶4∶1∶0.04。
优选地,步骤(2)所述乙醇的体积分数为75%。
优选地,步骤(3)所述过筛是过14目筛;所述干燥温度为55℃。
所述尖顶羊肚菌胞外多糖提取物的制备方法,包括如下步骤:
(1)将尖顶羊肚菌液体发酵液浓缩至原体积的1/3~1/6,得到浓缩液,浓缩温度为50~70℃;
(2)浓缩液采用Sevage法去蛋白、离心,得到去蛋白后的活性提取液;
(3)去蛋白后的活性提取液用1~5倍体积的95%乙醇在0~10℃透析沉降浓缩液中的多糖12~25小时,pH值为4~8,静置析出絮状白色物质,再离心分离得到白色沉淀,冷冻干燥,制得尖顶羊肚菌胞外多糖提取物。
所述步骤(2)servge法去蛋白、离心:在浓缩液中加入0.2倍体积的氯仿正丁醇混合液(氯仿、正丁醇体积比为5∶1),在恒温磁力搅拌器上剧烈搅拌30分钟,温度25℃,用Sigma台式冷冻离心机,温度4℃,以4000rpm的转速离心10分钟,回收上清液,弃去蛋白层及有机溶液。
所述步骤(3)离心条件为:转速4000-5000rpm、时间20-30min,其中优选:转速4000rpm、时间20min。
最佳醇提条件:发酵液浓缩至原体积的1/5,浓缩温度为60℃,用4倍体积的95%乙醇进行醇析,醇析时间25小时,pH值为6。
所述尖顶羊肚菌液体发酵液是经过尖顶羊肚菌(Morchella conica)液体发酵培养,得到发酵物,再通过离心和真空抽滤分离菌丝体,获得的发酵液。所述离心条件优选:转速4000rpm、时间10min。
所述尖顶羊肚菌(Morchella conica)液体发酵培养是将尖顶羊肚菌(Morchella conica)接种到液体发酵培养基中发酵培养,其液体发酵培养基配方为:葡萄糖150g,硝酸铵6g,KH2PO43.0g,MgSO4·7H2O 3.0g,维生素B10.3g,加蒸馏水定容至3000ml。
所述发酵培养的步骤是:(1)取100ml所述液体发酵培养基,经灭菌后,在其中接入3个直径约为4mm的尖顶羊肚菌菌丝块,在25~28℃,转速130~160rpm,避光恒温振荡培养6~8天,得到液体菌种;(2)将上述液体菌种接入3L灭菌后的所述液体发酵培养基中,培养温度为25~28℃,转速为130~160rpm,培养5~9天,得到发酵物,备用。
由上述方法制备得到的尖顶羊肚菌胞外多糖提取物,经苯酚硫酸法测定含总糖84.0%左右,经DNS比色法测定含还原糖25.7%左右,经考马斯亮兰法测定含蛋白507%左右。
上述尖顶羊肚菌颗粒冲剂可以用于延缓衰老方面,其使用剂量为1962mg/kg·d(含150mg/kg·d尖顶羊肚菌胞外多糖提取物)。
本发明对上述制备所得尖顶羊肚菌颗粒冲剂进行小鼠延缓衰老功效测试。用该提取物对D-半乳糖所致衰老模型小鼠进行灌胃,观察其对小鼠大脑超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)含量的影响。结果表明:654mg/kg·d的颗粒冲剂使雄性小鼠血清中的SOD、GSH-Px含量分别提高了60.71%(P<0.01)和66.62%(P<0.01),使雌性衰老小鼠脑组织中的MDA含量降低了32.67%(P<0.01);1962mg/kg·d的多糖颗粒冲剂使雌性衰老小鼠血清中的SOD和GSH-Px含量增加了99.66%(P<0.01)和89.99%(P<0.01);165mg/kg·d和55mg/kg·d的多糖胶囊可显著增加雄性小鼠血清中的SOD、GSH-Px含量(P<0.01),使雌性衰老小鼠脑组织中的MDA含量分别降低了27.58%(P<0.01)和34.29%(P<0.01)。
与现有的技术相比,本发明具有如下优点和有益效果:
本发明的尖顶羊肚菌胞外多糖颗粒冲剂,通过多糖提取物与各辅料按适当比例制得,此法制得的多糖冲剂为无糖型冲剂,它以多糖为功能成分,以可溶性淀粉为稀释剂,以甜蜜素为甜味剂。甜蜜素具有高甜度、低热能、无毒性以及无副作用等特点,且热量仅为蔗糖的1/1000,甜度为蔗糖的40倍。制备过程简单,条件易控制。此多糖颗粒的储存时间明显延长,且易溶于水;本发明制成无糖颗粒剂与含糖冲剂相比,具有溶解性好、防潮、无异味、高疗效等特点,可适用于糖尿病人和肥胖患者,扩大了使用范围,且具有良好的延缓衰老作用。
附图说明
图1为尖顶羊肚菌颗粒冲剂对小鼠SOD、GSH-Px和MDA生化指标的影响图(注:Y轴表示各组与模型组比较,SOD、GSH-Px增加的百分比以及MDA减少的百分比)。
具体实施方式
下面结合具体实施例及附图对本发明作进一步具体详细描述,但本发明的实施方式不限于此,对于未特别注明的工艺参数,可参照常规技术进行。
尖顶羊肚菌胞外多糖提取物的制备方法如下:
(1)尖顶羊肚菌GIM5.70(Morchella conica)(广东省微生物菌种保藏中心购买),经斜面或平板菌种培养、液体振荡培养和液体发酵培养,得到发酵液。
具体的培养基配方和培养条件如下:
①斜面或平板菌种培养:培养基配方为,马铃薯200g,葡萄糖20g,蛋白胨1g,(NH4)2SO42g,MgSO4·7H2O 1g,KH2PO41g,琼脂20g,加蒸馏水定容至1000ml,pH调至6.5;然后接入1个直径约为4mm的尖顶羊肚菌菌丝块,26℃培养14天,置于4℃保存备用。
②液体振荡培养:以NH4NO3作为氮源,葡萄糖或可溶性淀粉作为碳源,以及初始pH和接种量作为考察因素最终确定合成培养基配方为:葡萄糖50g,硝酸铵2g,KH2PO41.0g,MgSO4·7H2O 1.0g,维生素B 10.1g,加蒸馏水定容至1000mL,自然pH值;培养条件为:取100mL上述合成培养基装入250mL三角瓶,在121℃灭菌30分钟,并接入3个直径约为4mm的尖顶羊肚菌菌丝块在25℃,转速160rpm,避光恒温振荡培养7天,得到液体菌种。
③液体发酵培养:将液体培养基3L(葡萄糖150g,硝酸铵6g,KH2PO43.0g,MgSO4·7H2O 3.0g,维生素B 10.3g,加蒸馏水定容至3000ml)转入5L发酵罐培养,再接入100mL上述液体菌种,培养温度为25℃,转速为130rpm,培养7天,即可得到菌丝体丰富,菌球丰富、均匀,颜色微黄的发酵物,备用。
(2)将发酵物通过离心和真空抽滤分离菌丝体,获得澄清的发酵液。
①离心:Sigma台式冷冻离心机,以4000rpm的转速离心10分钟。
②真空抽滤:真空抽滤,使菌丝体与发酵液分离,得发酵液,备用。
(3)浓缩发酵液:用旋转蒸发仪将发酵液在60℃的恒温水浴锅中减压浓缩至原体积的1/5。
(4)去蛋白、离心:Sevage法去蛋白,加入0.2倍体积的氯仿正丁醇混合液(氯仿、正丁醇体积比为5∶1),在恒温磁力搅拌器上剧烈搅拌30分钟,温度25℃;用Sigma台式冷冻离心机,温度4℃,以4000rpm的转速离心10分钟,回收上清液,弃去蛋白层及有机溶液,重复多次。
(5)将去蛋白后的活性提取液加入其4倍体积的95%乙醇在4℃透析沉降25h,调pH值为6,静置过夜,析出絮状白色物质,以4000rpm、20分钟离心分离得到白色沉淀,冷冻干燥,即制得目标产物尖顶羊肚菌胞外多糖提取物。
尖顶羊肚菌胞外多糖提取物,经苯酚硫酸法测定含总糖84.0%,经DNS比色法测定含还原糖25.7%,经考马斯亮兰法测定含蛋白5.07%。
实施例1
一种尖顶羊肚菌颗粒冲剂的制备方法,取尖顶羊肚菌胞外多糖提取物0.5g、β-环糊精1g、糊精4g、可溶性淀粉2g、甜蜜素0.04g混合搅匀,用75%乙醇制成软材,用14目筛粒,55℃干燥,得颗粒,再过14目筛整粒,分装每袋5g,即得到尖顶羊肚菌颗粒冲剂,该颗粒冲剂乳白色,易溶于水。
实施例2
一种尖顶羊肚菌颗粒冲剂的制备方法,取尖顶羊肚菌胞外多糖提取物0.5g、β-环糊精1g、糊精4g、可溶性淀粉1g、甜蜜素0.04g混合搅匀,用75%乙醇制成软材,用14目筛粒,55℃干燥,得颗粒,再过14目筛整粒,分装每袋5g,即得到尖顶羊肚菌颗粒冲剂。该颗粒冲剂为乳白色,易溶于水,总糖含量为:7.65%(折算成多糖含量为3.81%),与多糖提取物相比,能明显降低多糖的吸湿性。同时在溶解性和流动性方面也具有良好的效果。
实施例1、2的对照试验如下,对照1、2及实施例1、2的原料配方参见表1。
表1原料配方
(1)颗粒冲剂的溶解性、粒度(成型性)、外观及口感试验
颗粒剂的质量检查标准(应符合《中国药典》2005版I部附录IC颗粒剂顶下规定)。颗粒粒度不能通过一号筛(10目)与能通过五号筛(80目)的总和不得超过供试量的15%。实验得到的颗粒在15-28目之间的颗粒多于50%者,为成型性好;颗粒80%在15-60目之间者,为成型性一般。溶解性标准:好是指易溶于水;较好是指可溶于水;较差是指较难溶于水。表1中四种配方配制的颗粒冲剂的试验结果参见表2。
表2尖顶羊肚菌颗粒冲剂的外观、成型性、溶解性及口感
由表2可见,多糖提取物、β-环糊精、糊精、可溶性淀粉、甜蜜素按照0.5∶1∶4∶1∶0.04的比例混合搅匀后,在外观、粒度(成型性)、溶解性和口感方面都具有良好的效果,实施例2的效果最好,性质稳定,口感适中,服用携带方便。实施例1的效果较好,能达到要求的标准。而对照1和2中分别缺少糊精和可溶性淀粉,效果均较差,不符合标准。
(2)休止角的测定
休止角用固定漏斗法来测定。将3只漏斗自下而上串联固定于水平放置的坐标纸上方,使最下面的漏斗的下口距坐标纸的距离控制在0.5~1.5cm。小心将颗粒冲剂沿漏斗壁倒入最上面的漏斗,直到漏斗下形成的圆锥体的尖端接触到漏斗的出口为止。由直尺测出高度,坐标纸测出圆锥底部的直径,按此法反复定测定3次,计算出休止角tanα=h/r。表1中四种配方配制的颗粒冲剂的休止角参见表3。
表3颗粒冲剂的休止角
休止角越小,摩擦力越小,流动性越好。由表3可见,实施例2的休止角在四个处方中平均值最小,说明按照多糖、β-环糊精、糊精、可溶性淀粉、甜蜜素=0.5∶1∶4∶1∶0.04的比例混合搅匀后,其流动性相对较大,对照2不加入淀粉,休止角最大,说明可溶性淀粉会一定程度的增大休止角,反而使流动性变差。
(3)吸湿百分率的测定
将烧杯烘至恒重,冷却后准确称重,加入混匀后的颗粒,使烧杯底部匀摊厚2mm的颗粒冲剂,105℃烘约5h,使其至恒重,取出,干燥器冷却,准确称量。将烘至恒重的药粉瓶放在相对湿度为78%,温度为22℃的人工气候箱内,于1、2、3、5、15h定时称量。按下式计算吸湿百分率,每个处方平行做2份,吸湿率(%)=(吸湿后药粉重量-吸湿前药粉重量)/吸湿前药粉重量×100%。
表1中四种配方配制的颗粒冲剂及纯多糖的吸湿百分率参见表4。
表4颗粒冲剂的吸湿百分率
由表4可见,随着时间的延长,吸湿率增大。结果表明15小时期间里,实施例2的吸湿率最低;实施例1的吸湿率在前四组颗粒冲剂中最大,15小时期间内吸湿率达到14.32%。多糖提取物放置在相同外界条件下,15小时的吸湿率为20.08%,明显高于前四组颗粒冲剂的吸湿率,从而说明加入辅料后能有效降低多糖的吸湿率,有利于多糖的储存。
实施例3
一种尖顶羊肚菌颗粒冲剂的制备方法,取尖顶羊肚菌胞外多糖提取物0.5g、β-环糊精4g、糊精0.1g、可溶性淀粉0.3g、甜蜜素0.04g混合搅匀,用75%乙醇制成软材,用14目筛粒,55℃干燥,得颗粒,再过14目筛整粒,分装每袋5g,即得到尖顶羊肚菌颗粒冲剂,该颗粒冲剂乳白色,易溶于水。
实施例4
一种尖顶羊肚菌颗粒冲剂的制备方法,取尖顶羊肚菌胞外多糖提取物0.5g、β-环糊精1g、糊精0.8g、可溶性淀粉0.1g、甜蜜素0.04g混合搅匀,用75%乙醇制成软材,用14目筛粒,55℃干燥,得颗粒,再过14目筛整粒,分装每袋5g,即得到尖顶羊肚菌颗粒冲剂,该颗粒冲剂乳白色,易溶于水。
实施例5
一种尖顶羊肚菌颗粒冲剂的制备方法,取尖顶羊肚菌胞外多糖提取物0.5g、β-环糊精0.5g、糊精2g、可溶性淀粉1g、甜蜜素0.01g混合搅匀,用75%乙醇制成软材,用14目筛粒,55℃干燥,得颗粒,再过14目筛整粒,分装每袋5g,即得到尖顶羊肚菌颗粒冲剂,该颗粒冲剂乳白色,易溶于水。该颗粒冲剂在成型性、溶解性、流动性、外观及口感方面均较好,吸湿率与实施例3相近。
实施例6
一种尖顶羊肚菌颗粒冲剂的制备方法,取尖顶羊肚菌胞外多糖提取物0.5g、β-环糊精5g、可溶性淀粉0.5g、甜蜜素0.08g混合搅匀,用75%乙醇制成软材,用14目筛粒,55℃干燥,得颗粒,再过14目筛整粒,分装每袋5g,即得到尖顶羊肚菌颗粒冲剂,该颗粒冲剂乳白色,易溶于水。该颗粒冲剂在成型性、溶解性、流动性、外观及口感方面均较好,吸湿率与实施例2相近。
实施例7
尖顶羊肚菌颗粒冲剂延缓衰老作用的实验(所用尖顶羊肚菌颗粒冲剂是由实施例2制备的)
尖顶羊肚菌颗粒冲剂延缓衰老作用的实验(高剂量)
(1)昆明种小鼠,SPF级,体重20±2克,由广州中医药大学实验动物中心购买,合格证号:SCXK(粤)2008-0020。将小鼠随机分为空白对照组、造模组、阳性对照组、尖顶羊肚菌多糖提取物高剂量组,每组10只,雌雄各半,自由进食和饮水,造模组、阳性对照组、高剂量组每天腹腔注射剂量为120mg/kg.d的D-半乳糖溶液0.2mL,空白对照组注射等量的生理盐水,连续注射42天。高剂量组分别灌胃尖顶羊肚菌多糖提取物浓度为1962mg/kg·d的颗粒冲剂(含150mg/kg·d多糖提取物),阳性对照组灌胃浓度为800mg/kg·d的维生素E,空白对照组和造模组分别灌胃生理盐水,各组小鼠的灌胃量均为0.2mL。
(2)实验周期42天,实验结束后,用黄嘌呤氧化酶法测定小鼠脑的SOD活性,硫代巴比妥酸法测定小鼠脑MDA含量,谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)法测GSH-Px活力。
尖顶羊肚菌颗粒冲剂延缓衰老作用的实验(低剂量)
(1)昆明种小鼠,SPF级,体重20±2克,由广州中医药大学实验动物中心购买,合格证号:SCXK(粤)2008-0020。将小鼠随机分为空白对照组、造模组、阳性对照组、尖顶羊肚菌多糖提取物高剂量组,每组10只,雌雄各半,自由进食和饮水,造模组、阳性对照组、高剂量组每天腹腔注射剂量为120mg/kg·d的D-半乳糖溶液0.2mL,空白对照组注射等量的生理盐水,连续注射42天。高剂量组分别灌胃尖顶羊肚菌多糖提取物浓度为654mg/kg·d的颗粒冲剂(含50mg/kg·d多糖提取物),阳性对照组灌胃浓度为800mg/kg·d的维生素E,空白对照组和造模组分别灌胃生理盐水,各组小鼠的灌胃量均为0.2mL。
(2)实验周期42天,实验结束后,用黄嘌呤氧化酶法测定小鼠脑的SOD活性,硫代巴比妥酸法测定小鼠脑MDA含量,谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)法测GSH-Px活力。
上述实验数据如表5和图1所示。
与模型组比较:*:P<0.05;**:P<0.01;与空白组比较,△:P<0.05;△△:P<0.01(P是指几组数据之间的差异性)。
从表5可知,1962mg/kg·d的颗粒冲剂可增加雌、雄衰老小鼠血清的SOD、GSH-Px的含量,雄性小鼠血清SOD、GSH-Px的含量的增加率分别为52.24%(P<0.05)和29.37%(P<0.01),雌性小鼠血清SOD、GSH-Px的含量的增加率分别为99.66%(P<0.01)和89.99%(P<0.01);654mg/kg·d的颗粒冲剂可增加雌、雄衰老小鼠SOD、GSH-Px的含量,使雄性衰老小鼠SOD、GSH-Px的含量分别提高了60.71%(P<0.01)和66.62%(P<0.01),使雌性衰老小鼠脑组织中的MDA含量降低了32.67%(P<0.01)。
由图1可见,尖顶羊肚菌颗粒冲剂能增加衰老小鼠血清中的SOD和GSH-Px活力,能起到延缓小鼠衰老的作用。试验组对小鼠血清中SOD的活力影响较为显著。总体上分析,高颗粒组的抗衰老能力强于低颗粒组,发现具有性别的差异,就血清中的抗氧化效果而言,尖顶羊肚菌颗粒冲剂对雄性小鼠的延缓衰老作用较强;脑组织中MDA含量的影响而言,则雌性优于雄性。
实施例8
尖顶羊肚菌颗粒冲剂急性毒理试验,所用尖顶羊肚菌颗粒冲剂是由实施例2制备的。
(1)给药途径使用灌胃方式
(2)根据多糖提取物的小鼠实验结果和给药最大浓度,最大体积的具体量及分组,每只灌胃量为:为0.4ml/只,分两次灌胃。尖顶羊肚菌颗粒冲剂的浓度为0.5g/mL,即每只小鼠的灌胃剂量为20g/kg·d。
(3)昆明种小鼠,SPF级,体重20±2克,由中山医科大学动物实验中心购买,合格证号:SCXK(粤)2009-0011。小鼠20只,、♀各半,以最大浓度,最大体积,一日二次灌胃,灌胃前禁食不禁水12h,分两次灌胃给药,中间间隔4h,给药组分别灌胃多糖溶液,空白对照组灌胃蒸馏水,体积皆为0.4ml/只,观察两周。
(4)配制药液溶剂:生理盐水。
(5)详细记录动物异常反应,写出动物死亡原因,病理变化。
每次试验灌胃给药后,详细记录小鼠行为、活动、摄食、饮水、体重、死亡等客观反应,给药14日后结束实验,进行小鼠解剖,病理检查重要脏器(心、肝、脾、肺、肾),观察脏器组织变化,如有死亡和解剖发现异常病变需作组织形态学检查。
20g/kg·d进行小鼠最大耐受量实验,灌胃尖顶羊肚菌颗粒冲剂后,小鼠活动、行为未见异常,摄食量无明显差异。从表6可见,各项指数无异常,各鼠14日内无死亡及其他异常发生。实验结束后对小鼠进行检测,小鼠心、肝、脾、肺、肾等器官经肉眼观察未见异常改变。因此尖顶羊肚菌颗粒冲剂在20g/kg·d和10g/kg·d的剂量下对小鼠无毒或毒性很低,小鼠经口给药的最大安全剂量在20g/kg·d以上,折算为人的口服剂量为:11.08g,小鼠的最大耐受量为人口服剂量的126倍。尖顶羊肚菌颗粒冲剂在小鼠实验中发挥良好的抗衰老效果,此研究说明该功能食品具有很好的开发生产价值。
表6尖顶羊肚菌颗粒冲剂对小鼠脾指数、脑指数和胸腺指数的影响
上述实施例为本发明较佳的实施方式,但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制,其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化,均应为等效的置换方式,都包含在本发明的保护范围之内。
Claims (8)
1.一种尖顶羊肚菌颗粒冲剂,其特征在于,所述尖顶羊肚菌颗粒冲剂的原料质量配比为,尖顶羊肚菌胞外多糖提取物∶β-环糊精∶糊精∶可溶性淀粉∶甜蜜素=0.5∶0.5~5∶0.1~4∶0.1~2∶0.01~0.08;
所述尖顶羊肚菌胞外多糖提取物是由如下方法制备的:
(1)将尖顶羊肚菌液体发酵液浓缩至原体积的1/3~1/6,得到浓缩液,浓缩温度为50~70℃;
(2)浓缩液采用Sevage法去蛋白、离心,得到去蛋白后的活性提取液;
(3)去蛋白后的活性提取液用1~5倍体积的95%乙醇在0~10℃透析沉降浓缩液中的多糖12~25小时,pH值为4~8,静置析出絮状白色物质,再离心分离得到白色沉淀,冷冻干燥,制得尖顶羊肚菌胞外多糖提取物。
2.根据权利要求1所述的尖顶羊肚菌颗粒冲剂,其特征在于,所述尖顶羊肚菌颗粒冲剂的原料质量配比为,尖顶羊肚菌胞外多糖提取物∶β-环糊精∶糊精∶可溶性淀粉∶甜蜜素=0.5∶1∶4∶1∶0.04。
3.一种尖顶羊肚菌颗粒冲剂的制备方法,其特征在于,其包括如下步骤:
将尖顶羊肚菌胞外多糖提取物与β-环糊精、糊精、可溶性淀粉、甜蜜素按质量比0.5∶0.5~5∶0.1~4∶0.1~2∶0.01~0.08混合搅匀;用乙醇制成软材;55~60℃干燥,过筛整粒,制得尖顶羊肚菌颗粒冲剂;
所述尖顶羊肚菌胞外多糖提取物是由如下方法制备的:
(1)将尖顶羊肚菌液体发酵液浓缩至原体积的1/3~1/6,得到浓缩液,浓缩温度为50~70℃;
(2)浓缩液采用Sevage法去蛋白、离心,得到去蛋白后的活性提取液;
(3)去蛋白后的活性提取液用1~5倍体积的95%乙醇在0~10℃透析沉降浓缩液中的多糖12~25小时,pH值为4~8,静置析出絮状白色物质,再离心分离得到白色沉淀,冷冻干燥,制得尖顶羊肚菌胞外多糖提取物。
4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,所述乙醇的体积分数为75%。
5.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,所述过筛是过14目筛。
6.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,所述干燥温度为55℃。
7.权利要求1或2所述的尖顶羊肚菌颗粒冲剂在延缓衰老药物或保健食品中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述尖顶羊肚菌颗粒冲剂的使用剂量为1962mg/kg·d。
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