CN101869828A - 一种温度刺激-响应型智能色谱柱的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种温度刺激-响应型智能色谱柱的制备方法，其步骤在于：A、将N-异丙基丙烯酰胺、N，N′-亚甲基双丙烯酰胺、聚乙二醇-20000、10％ w/v过硫酸铵、去离子水超声混匀；B、上步反应产物除氧后加入10％ v/v N，N，N′，N′-四甲基乙二胺，充分混匀；C、上步反应产物倾入不锈钢色谱柱管中，于-18～60℃中反应10～100h，柱管两端安装色谱柱柱头，然后连接于高压输液泵上，以超纯水为流动相冲洗色谱柱体，即得。本发明工艺简单，所制备的整体住具有优良的孔结构、机械强度高、柱效高，使用时以水为流动相，能够避免因使用大量有机溶剂所造成的浪费和污染，分离过程只要改变温度就能控制药物和整体柱之间的作用力，简单易行分离效果好。
Description
技术领域
本发明涉及分离材料制备领域，尤其是一种温度刺激-响应型智能色谱柱的制备方法。
背景技术
目前，色谱柱通常为有机聚合物整体柱，其是由单体、交联剂、引发剂、致孔剂等原位制备生成的棒状整体，具有制备简单、重现性好、多孔性优越的优点，能实现对目标物的快速、高效分离。但其仍然存在孔径大小及孔径分布难以控制、内部结构不均一、分离小分子物质柱效低等缺点；尤其是，用此类色谱柱分离药物，流动相必须为有机溶剂，成本很高且容易对环境造成污染。
刺激-响应型聚合物是指自身能够对外界环境的细微变化做出响应并产生相应的物理结构和化学性质变化、甚至是突变的一类高分子物质；其中，外界刺激可以是温度、pH、离子强度、电场、光等。在现有技术条件下，智能型水凝胶虽然从理论上来说可以避免有机溶剂的使用，具有很广泛的应用前景，但由于其存在机械性能差、响应速度慢等缺点，实际应用又受到了很大的限制。
针对这些不足，Ayano[Eri Ayano，Kyoko Nambu，ChikakoSakamoto，Hideko Kanazawa，Akihiko Kikuchi，Teruo Okano.Aqueous chromatography system using pH- and temperature-responsive stationary phase with ion-exchange groups.Journalof Chromatography A，2006，1119：58-65]和张荣月[Rongyue Zhang，Gengliang Yang，Peiyong Xin，Li Qi，Yi Chen.Preparation ofpoly(N-isopropylacrylamide)-grafted polymer monolith forhydrophobic interaction chromatography of proteins.Journal ofChromatography A，2009，1216(12)：2404-2411]等将智能型凝胶键合在硅胶或聚合物整体柱上作为高效液相色谱固定相用于激素类药物的分离，其以水作为流动相，只要改变流动相水的温度就能控制药物和固定相之间的作用力，从而实现分离，避免了因使用大量有机溶剂造成的浪费和污染。但是，该方法仍然存在很多缺点：键合过程操作繁琐，需要先制备好智能型凝胶后再键合在载体上，而其中凝胶的制备、所用的载体及键合条件等因素都会影响分离能力，实施起来较为困难，分离效果难以保证。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种温度刺激-响应型智能色谱柱的制备方法，工艺简单，所制备的整体住具有优良的孔结构、机械强度高、柱效高，使用时以水为流动相，能够避免因使用大量有机溶剂所造成的浪费和污染，分离过程只要改变温度就能控制药物和整体柱之间的作用力，简单易行分离效果好。
为解决上述技术问题，本发明所采取的技术方案是：
一种温度刺激-响应型智能色谱柱的制备方法，其步骤是：
A、将N-异丙基丙烯酰胺、N，N′-亚甲基双丙烯酰胺、聚乙二醇-20000、10％ w/v过硫酸铵、去离子水超声混匀；
B、上步反应产物除氧后加入10％ v/v N，N，N′，N′-四甲基乙二胺，充分混匀；
C、上步反应产物倾入不锈钢色谱柱管中，于-18～60℃中反应10～100h，柱管两端安装色谱柱柱头，然后连接于高压输液泵上，以超纯水为流动相冲洗色谱柱体，即得；
其中各组分的用量比例为：N-异丙基丙烯酰胺0.1～0.3g，N，N′-亚甲基双丙烯酰胺0.1～0.2g，聚乙二醇-20000 0.01～0.08g，10％ w/v过硫酸铵1.4～100μL，去离子水1.4mL，10％ v/v N，N，N′，N′-四甲基乙二胺1.4～14μL。
本发明中，步骤C中流动相流速为1mL/min，色谱柱体背压为18bar。
本发明中各组分的用量比例可以为：N-异丙基丙烯酰胺0.3g，N，N′-亚甲基双丙烯酰胺0.2g，聚乙二醇-20000 0.08g，10％ w/v过硫酸铵10μL，去离子水1.4mL，10％ v/v N，N，N′，N′-四甲基乙二胺10μL；步骤C中的反应温度为-18℃，反应时间为24h。
本发明中各组分的用量比例还可以为：N-异丙基丙烯酰胺0.3g，N，N′-亚甲基双丙烯酰胺0.2g，聚乙二醇-20000 0.08g，10％ w/v过硫酸铵10μL，去离子水1.4mL，10％ v/v N，N，N′，N′-四甲基乙二胺10μL；步骤C中的反应温度为25℃，反应时间为24h。
本发明中各组分的用量比例还可以为：N-异丙基丙烯酰胺0.3g，N，N′-甲基双丙烯酰胺0.2g，聚乙二醇-20000 0.01g，10％ w/v过硫酸铵100μL，去离子水1.4mL，10％ v/v N，N，N′，N′-四甲基乙二胺14μL；步骤C中的反应温度为60℃，反应时间为100h。
本发明中各组分的用量比例还可以为：N-异丙基丙烯酰胺0.2g，N，N′-亚甲基双丙烯酰胺0.15g，聚乙二醇-20000 0.045g，10％w/v过硫酸铵50μL，去离子水1.4mL，10％ v/v N，N，N′，N′-四甲基乙二胺7.9μL；步骤C中的反应温度为39℃，反应时间为55h。
本发明中各组分的用量比例还可以为：N-异丙基丙烯酰胺0.1g，N，N′-亚甲基双丙烯酰胺0.1g，聚乙二醇-20000 0.01g，10％ w/v过硫酸铵1.4μL，去离子水1.4mL，10％ v/v N，N，N′，N′-四甲基乙二胺1.4μL；步骤C中的反应温度为-18℃，反应时间为10h。
采用上述技术方案所产生的有益效果在于：本发明工艺简单，易于操作，重现性好，条件温和，原料价格低廉，污染性小，对环境友好；本发明所制备的色谱柱具有微米级的通孔和三维连续骨架，与传统方法制备的色谱柱相比具有结构均一、孔径小等优点；参看附图，本发明所制备的整体色谱柱以水为流动相，通过对温度的控制，实现了对六种具有不同疏水性的类固醇药物及三种苯系物的高效分离，其中分离小分子物质的柱效明显高于传统有机聚合物整体柱，图7、8中，按照出峰顺序依次为：1：氢化可的松；2：醋酸可的松；3：醋酸氢化***；4：氟氢松；5：醋酸倍他米松；6：丙酸倍氯米松，图9、10中，按照出峰顺序依次为：1：苯乙酮；2：苯丙酮；3：苯丁酮；色谱条件为：流动相为水，流速为1mL/min，检测波长为254nm。
附图说明
下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步详细的说明。
图1为实施例1所制备的色谱柱内部形貌扫描电镜图I；
图2为实施例1所制备的色谱柱内部形貌扫描电镜图II；
图3为实施例2所制备的色谱柱内部形貌扫描电镜图；
图4为实施例3所制备的色谱柱内部形貌扫描电镜图；
图5为实施例4所制备的色谱柱内部形貌扫描电镜图；
图6为实施例5所制备的色谱柱内部形貌扫描电镜图；
图7为利用本发明所制备的色谱柱在疏水模式下分离类固醇类药物的色谱图，其中柱温为25℃；
图8为利用本发明所制备的色谱柱在疏水模式下分离类固醇类药物的色谱图，其中柱温为55℃；
图9为利用本发明所制备的色谱柱在疏水模式下分离苯系物的色谱图，其中柱温为：25℃；
图10为利用本发明所制备的色谱柱在疏水模式下分离苯系物的色谱图，其中柱温为55℃。
具体实施方式
以下实施例详细的说明了本发明。
实施例1
一种温度刺激-响应型智能色谱柱的制备方法，其步骤在于：
A、将0.3g N-异丙基丙烯酰胺、0.20g N，N′-亚甲基双丙烯酰胺、0.08g聚乙二醇-20000、10μL 10％ w/v过硫酸铵、1.4mL去离子水超声混匀；
其中，N-异丙基丙烯酰胺作为聚合单体、N，N′-亚甲基双丙烯酰胺作为聚合交联剂、聚乙二醇-20000作为致孔剂、10％ w/v过硫酸铵作为引发剂；
B、上步反应产物除氧后加入10μL 10％ v/v N，N，N′，N′-四甲基乙二胺，充分混匀；
其中，10％ v/v N，N，N′，N′-四甲基乙二胺作为催化剂；
C、上步反应产物倾入不锈钢色谱柱管中，于-18℃中反应24h，柱管两端安装色谱柱柱头，然后连接于高压输液泵上，以200mL超纯水为流动相冲洗色谱柱体，即得；其中流动相流速为1mL/min，色谱柱体背压为18bar。
图1、2为本实施例制备的色谱柱内部形貌扫描电镜图，可以看出，本实施例所制备的色谱柱具有微米级的通孔和三维连续骨架，与传统方法制备的色谱柱相比具有结构均一、孔径小等优点。
参看附图7、8、9、10，本实施例所制备的整体色谱柱以水为流动相，通过对温度的控制，实现了对六种具有不同疏水性的类固醇药物及三种苯系物的高效分离，其中分离小分子物质的柱效明显高于传统有机聚合物整体柱；图7、8中，按照出峰顺序依次为：1：氢化可的松；2：醋酸可的松；3：醋酸氢化***；4：氟氢松；5：醋酸倍他米松；6：丙酸倍氯米松；图9、10中，按照出峰顺序依次为：1：苯乙酮；2：苯丙酮；3：苯丁酮；色谱条件为：流动相为水，流速为1mL/min，检测波长为254nm。
实施例2
本发明第二实施例与第一实施例的差别是：其中各组分的用量为：N-异丙基丙烯酰胺0.3g，N，N′-亚甲基双丙烯酰胺0.2g，聚乙二醇-20000 0.08g，10％ w/v过硫酸铵10μL，去离子水1.4mL，10％ v/vN，N，N′，N′-四甲基乙二胺10μL；步骤C中的反应温度为25℃，反应时间为24h。
图3为本实施例制备的色谱柱内部形貌扫描电镜图，可以看出，本实施例所制备的色谱柱同样具有微米级的通孔和三维连续骨架。
以水为流动相，通过对温度的控制，利用本实施例所制备的整体色谱柱同样能够实现对实施例1中六种类固醇药物及三种苯系物的高效分离，分离条件亦同。
实施例3
本发明第三实施例与第一实施例的差别是：其中各组分的用量为：N-异丙基丙烯酰胺0.3g，N，N′-亚甲基双丙烯酰胺0.2g，聚乙二醇-20000 0.01g，10％ w/v过硫酸铵100μL，去离子水1.4mL，10％ v/vN，N，N′，N′-四甲基乙二胺14μL；步骤C中的反应温度为60℃，反应时间为100h。
图4为本实施例制备的色谱柱内部形貌扫描电镜图，可以看出，本实施例所制备的色谱柱同样具有微米级的通孔和三维连续骨架。
以水为流动相，通过对温度的控制，利用本实施例所制备的整体色谱柱同样能够实现对实施例1中六种类固醇药物及三种苯系物的高效分离，分离条件亦同。
实施例4
本发明第四实施例与第一实施例的差别是：其中各组分的用量为：N-异丙基丙烯酰胺0.2g，N，N′-亚甲基双丙烯酰胺0.15g，聚乙二醇-20000 0.045g，10％ w/v过硫酸铵50μL，去离子水1.4mL，10％ v/vN，N，N′，N′-四甲基乙二胺7.9μL；步骤C中的反应温度为39℃，反应时间为55h。
图5为本实施例制备的色谱柱内部形貌扫描电镜图，可以看出，本实施例所制备的色谱柱同样具有微米级的通孔和三维连续骨架。
以水为流动相，通过对温度的控制，利用本实施例所制备的整体色谱柱同样能够实现对实施例1中六种类固醇药物及三种苯系物的高效分离，分离条件亦同。
实施例5
本发明第五实施例与第一实施例的差别是：其中各组分的用量为：N-异丙基丙烯酰胺0.1g，N，N′-亚甲基双丙烯酰胺0.1g，聚乙二醇-20000 0.01g，10％ w/v过硫酸铵1.4μL，去离子水1.4mL，10％ v/vN，N，N′，N′-四甲基乙二胺1.4μL；步骤C中的反应温度为-18℃，反应时间为10h。
图6为本实施例制备的色谱柱内部形貌扫描电镜图，可以看出，本实施例所制备的色谱柱同样具有微米级的通孔和三维连续骨架。
以水为流动相，通过对温度的控制，利用本实施例所制备的整体色谱柱同样能够实现对实施例1中六种类固醇药物及三种苯系物的高效分离，分离条件亦同。
上述描述仅作为本发明可实施的技术方案提出，不作为对其技术方案本身的单一限制条件。
Claims (7)
1.一种温度刺激-响应型智能色谱柱的制备方法，其特征步骤在于：
A、将N-异丙基丙烯酰胺、N，N′-亚甲基双丙烯酰胺、聚乙二醇-20000、10％ w/v过硫酸铵、去离子水超声混匀；
B、上步反应产物除氧后加入10％ v/v N，N，N′，N′-四甲基乙二胺，充分混匀；
C、上步反应产物倾入不锈钢色谱柱管中，于-18～60℃中反应10～100h，柱管两端安装色谱柱柱头，然后连接于高压输液泵上，以超纯水为流动相冲洗色谱柱体，即得；
其中各组分的用量比例为：N-异丙基丙烯酰胺0.1～0.3g，N，N′-亚甲基双丙烯酰胺0.1～0.2g，聚乙二醇-20000 0.01～0.08g，10％ w/v过硫酸铵1.4～100μL，去离子水1.4mL，10％ v/v N，N，N′，N′-四甲基乙二胺1.4～14μL。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤C中流动相流速为1mL/min，色谱柱体背压为18bar。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：其中各组分的用量比例为：N-异丙基丙烯酰胺0.3g，N，N′-亚甲基双丙烯酰胺0.2g，聚乙二醇-20000 0.08g，10％ w/v过硫酸铵10μL，去离子水1.4mL，10％ v/v N，N，N′，N′-四甲基乙二胺10μL；步骤C中的反应温度为-18℃，反应时间为24h。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：其中各组分的用量比例为：N-异丙基丙烯酰胺0.3g，N，N′-亚甲基双丙烯酰胺0.2g，聚乙二醇-20000 0.08g，10％ w/v过硫酸铵10μL，去离子水1.4mL，10％ v/v N，N，N′，N′-四甲基乙二胺10μL；步骤C中的反应温度为25℃，反应时间为24h。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：其中各组分的用量比例为：N-异丙基丙烯酰胺0.3g，N，N′-亚甲基双丙烯酰胺0.2g，聚乙二醇-20000 0.01g，10％ w/v过硫酸铵100μL，去离子水1.4mL，10％ v/v N，N，N′，N′-四甲基乙二胺14μL；步骤C中的反应温度为60℃，反应时间为100h。
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：其中各组分的用量比例为：N-异丙基丙烯酰胺0.2g，N，N′-亚甲基双丙烯酰胺0.15g，聚乙二醇-20000 0.045g，10％ w/v过硫酸铵50μL，去离子水1.4mL，10％ v/v N，N，N′，N′-四甲基乙二胺7.9μL；步骤C中的反应温度为39℃，反应时间为55h。
7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：其中各组分的用量比例为：N-异丙基丙烯酰胺0.1g，N，N′-亚甲基双丙烯酰胺0.1g，聚乙二醇-20000 0.01g，10％ w/v过硫酸铵1.4μL，去离子水1.4mL，10％ v/v N，N，N′，N′-四甲基乙二胺1.4μL；步骤C中的反应温度为-18℃，反应时间为10h。
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| CN (1) | CN101869828B (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103111258A (zh) * | 2013-02-22 | 2013-05-22 | 山东大学 | 一种填充河沙负载氧化石墨烯/二氧化钛填料的反应柱 |
| JP2021525880A (ja) * | 2018-06-06 | 2021-09-27 | ブリンク アーゲー | 懸濁物サンプルを分画するためのデバイス |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1589045A1 (en) * | 2004-04-20 | 2005-10-26 | Rohm And Haas Company | Polymeric adsorbent, and method of preparation and use |
| CN101519474A (zh) * | 2008-12-11 | 2009-09-02 | 淮阴师范学院 | 高溶胀性双重响应水凝胶及合成方法 |
| CN101745968A (zh) * | 2008-11-27 | 2010-06-23 | 郑州东方三力耐火材料有限公司 | 一种特异型锆英石砖的凝胶注模成型工艺 |
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Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1589045A1 (en) * | 2004-04-20 | 2005-10-26 | Rohm And Haas Company | Polymeric adsorbent, and method of preparation and use |
| CN101745968A (zh) * | 2008-11-27 | 2010-06-23 | 郑州东方三力耐火材料有限公司 | 一种特异型锆英石砖的凝胶注模成型工艺 |
| CN101519474A (zh) * | 2008-12-11 | 2009-09-02 | 淮阴师范学院 | 高溶胀性双重响应水凝胶及合成方法 |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103111258A (zh) * | 2013-02-22 | 2013-05-22 | 山东大学 | 一种填充河沙负载氧化石墨烯/二氧化钛填料的反应柱 |
| JP2021525880A (ja) * | 2018-06-06 | 2021-09-27 | ブリンク アーゲー | 懸濁物サンプルを分画するためのデバイス |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
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