CN101791371B - 芦笋皂苷提取制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种芦笋皂苷的提取制备方法，芦笋药材乙醇提取液浓缩后经萃取、大孔吸附树脂分离即可得到芦笋总皂苷，本发明方法安全度高、适宜工业化生产、操作简便，所得芦笋总皂苷含量高。
Description
技术领域
本发明涉及一种芦笋皂苷的提取制备方法，属于天然药物成分制备领域。
背景技术
芦笋(Asparagus officinalis linn.)，学名石刁柏，又名龙须菜、文山竹、露笋等，是百合科天门冬属多年生宿根性草本植物。芦笋已有两千多年的栽培历史，原产于地中海沿岸和小亚细亚一带，20世纪由欧洲传入我国，现在全国各地蔬菜产区都有栽培，芦笋是一种质地优良、营养丰富的保健型蔬菜，含有人体不可缺少的氨基酸、矿物质和其它多种营养元素，也含有皂苷类化合物及黄酮类等多种活性成分，其营养价值高于一般蔬菜水果，在国际市场上被成为蔬菜之王。
皂苷是一类具有复杂化学结构的糖甙化合物，具有溶血、降胆固醇、抗炎和对肿瘤的抑制作用等多方面的药理活性，Goryanu Gm(Goryanu Gm，Nistryan AK.Steroid glycoside from Asparagus officinalis and their biological activity.Nauka FarmPrakt，1984，38：39)研究发现芦笋皂苷能抑制胰腺癌、乳腺癌、子***等癌细胞的生长；Magota Hiromi等(Magota Hiromi SHM，Okubok，Shimoyamada M et al.Isolation of steroidal saponin as antifungal agent.Jpn Kokai Tokkyo Koho JP，1991，48：694)发现芦笋皂苷具有抗菌作用。李长秀等(Li CX，Zhang TH，Chen WJ.Gaschromatographic determination of sarsasapogenin in the root of Aspar.Officinalis L.Chinese Journal of Instrumental Analysis，1995，14(5)：61-65)从芦笋根中分离得到菝契皂苷。从70年代，，随着分离技术及结构研究手段的迅速发展，对于芦笋皂苷的化学研究越来越引起人们的重视，尤其是对极性较大、糖链较长、结构复杂的皂苷的研究有了突破性进展。
目前，我国对芦笋皂苷的提取、纯化的研究还处于起步阶段，中国专利CN100365011C公开了一种芦笋皂甙的生产方法，该方法中，由于在制备芦笋皂苷时，沉淀剂用***和石油醚，而***和石油醚是一种易挥发、易燃烧的物质，产业化时条件控制不当，容易引发事故，造成难以弥补的损失，不适合工业化生产。中国专利CN101474350A公开了一种芦笋总皂苷的提取方法，该方法采用醇水溶剂***提取后直接用大孔吸附树脂处理，所得的皂苷提取物中，总皂苷含量较低。
发明内容
本发明的目的在于提供一种安全度高、适宜工业化生产、操作简便、所得提取物皂苷含量高的芦笋皂苷制备新方法。
本发明用的原料芦笋是指鲜芦笋、干品芦笋或芦笋下脚。
本发明的制备方法为：将原料药芦笋粉碎，在经粉碎的原料药中，加入60％～95％的乙醇，调节使提取溶媒中乙醇的浓度为55％～70％，加热保持提取温度为60-90℃，提取2-4次，每次提取溶媒的用量为原料药的6-10倍(重量比)，提取时间为1-2小时，过滤，合并各次提取滤液，滤液减压浓缩至相对密度为1.05-1.15、浓缩液无醇味，所得浓缩液用水饱和的正丁醇萃取，至正丁醇萃取液颜色变淡，合并正丁醇萃取液，萃取液以正丁醇饱和的水洗涤2-4次，弃水洗液，正丁醇部分减压浓缩，蒸去有机溶剂正丁醇，所得浓缩液加入到大孔吸附树脂上，进行进一步的分离静置，即可得精制的芦笋皂苷提取物。
本发明中，当选用的原料为鲜芦笋时，加入乙醇应用95％的乙醇，调节使芦笋提取溶媒的含醇量在55％-70％之间，而当所选用的原料为芦笋干品时，宜用60％至70％的乙醇，调节芦笋提取溶媒中乙醇的浓度。当然，具体选用多大浓度的乙醇去调节，可以视原料中水分的含量而定，最终保持芦笋中提取溶媒乙醇的浓度在55％至70％即可。
本发明中，正丁醇萃取所得的提取物中仍然含有部分多糖、黄酮类等非皂苷类成分，因此在进行大孔吸附树脂柱层析时，应尽量多地将这些非皂苷类成分除去，因多糖类成分在大孔吸附树脂中可以用蒸馏水洗脱，基本上可以将糖类成分除尽，但黄酮类成分因含有较多的酚羟基，在大孔吸附树脂中吸附相对较为牢固，用浓度较高的乙醇可以将其解析，但在研究中发现，当提高洗脱剂乙醇的浓度时，皂苷类成分也随着部分被解析，导致最终产物皂苷得率减少。因此在选择洗脱机时，研究人员用浓度为0.05％-0.5％的碱溶液进行洗脱，用以解析黄酮类等含酚羟基的酚酸类化合物，取得了较好的效果。
因此，在大孔吸附分离精制步骤中，洗脱机的选择及使用顺序为：先用蒸馏水作为洗脱剂，以除去提取物中多糖类及其它一些小分子水溶性杂质成分，洗脱剂蒸馏水的用量为柱体积的3-6倍；蒸馏水洗后，用浓度为0.05％-0.5％的碱水洗脱，以除去黄酮等一些酚酸性杂质成分，洗脱液碱的用量为柱体积的3-6倍；碱洗后，再用30％-40％的乙醇洗脱，脱色，至30％-40％的乙醇洗脱部分颜色变淡，最后用65％-85％的乙醇洗脱5-8个柱体积，收集65％-85％的乙醇洗脱部分，减压浓缩，干燥即得精制后的芦笋皂苷提取物，总皂苷含量为85％-90％。
本发明中，所用的大孔吸附树脂可以是AB-8、D101、NKA-9、HPD100中的任意一种。
本发明中，洗脱液0.05％-0.5％的碱水是指NaOH、Na2CO3、NaHCO3、KOH、K2CO3、KHCO3的水溶液中的任意一种。
附图说明
图1为薯蓣皂苷的标准曲线图
具体实施例
实施例1
取鲜芦笋2kg，捣碎，加95％的乙醇，调节使芦笋中提取溶媒乙醇的浓度为60％，在80℃下提取1小时，过滤，滤渣再用60％的乙醇提取两次，每次0.5小时，过滤，合并滤液，滤液减压浓缩至相对密度为1.10，浓缩液用水饱和过的正丁醇萃取(药液与正丁醇的体积比为1∶3)，至正丁醇层颜色变淡，合并正丁醇萃取部分，正丁醇萃取部分以正丁醇饱和过的水洗2次，弃水洗液，正丁醇部分减压浓缩，蒸去有机溶剂正丁醇液，至浓缩液中无正丁醇，将浓缩液加入到AB-8型大孔吸附树脂柱上，先用蒸馏水洗脱4个柱体积，弃水洗液；改用0.05％的NaOH洗脱3个柱体积，弃碱洗液；然后用30％的乙醇洗脱4个柱体积，弃30％的乙醇洗脱部分，最后用80％的乙醇洗脱6个柱体积，收集80％的乙醇洗脱部分，减压浓缩，干燥，得芦笋皂苷提取物16.5g。
实施例2
取芦笋干品1000g，粉碎，加6倍量的65％的乙醇在80℃下提取2小时，过滤，滤渣再用65％的乙醇提取两次，每次1小时，过滤，合并滤液，滤液减压浓缩至相对密度为1.05，浓缩液用水饱和过的正丁醇萃取(药液与正丁醇的体积比为1∶3)，至正丁醇层颜色变淡，合并正丁醇萃取部分，正丁醇萃取部分以正丁醇饱和过的水洗2次，弃水洗液，正丁醇部分减压浓缩，蒸去有机溶剂正丁醇液，至浓缩液中无正丁醇，将浓缩液加入到NKA-9型大孔吸附树脂柱上，先用蒸馏水洗脱4个柱体积，弃水洗液；改用0.5％的NaHCO3洗脱3个柱体积，弃碱洗液；然后用40％的乙醇洗脱3个柱体积，弃40％的乙醇洗脱部分，最后用85％的乙醇洗脱6个柱体积，收集85％的乙醇洗脱部分，减压浓缩，干燥，得芦笋皂苷提取物26.7g。
实施例3
含量测定
供试品溶液的制备：取实施例1、实施例2、CN100365011C方法下制得的芦笋皂苷提取物、CN101474350A方法下制备得到的芦笋提取物各20mg，置100ml容量瓶中，加甲醇溶解，定溶至刻度，备用；
对照品溶液的制备；精密称取60℃减压干燥至恒重的薯蓣皂苷对照品适量，加甲醇配置成每ml含0.531mg的溶液；
测定波长的选择：分别精密吸取对照品溶液0.1ml，供试品溶液1ml至10ml试管中，水浴蒸干，加高氯酸5ml，摇匀，与70℃水浴加热15min，取出，立即置冰水浴中冷却2-3min，摇匀，以试剂做空白，在200-760nm波长范围内进行扫描，对照品溶液与供试品溶液在405-409nm处有最大吸收，选择波长为407nm。
线性关系：精密吸取对照品溶液0.05、0.1、0.15、0.20、0.25ml，置具塞试管中，水浴挥干溶剂，精密加入高氯酸5ml，摇匀后同上法显色，以试剂做空白，于407nm处测定吸光度，以薯蓣皂苷量(mg)为横坐标，吸光度A为纵坐标，经线性回归，回归方程为Y＝3.80X-0.013，r＝0.9998(见附图1)，薯蓣皂苷在0.03-0.13mg范围内成良好的线性关系。
供试品含量测定：各自精密吸取供试品溶液1.0ml，以上法显色，407nm下测定吸收值，计算含量，结果见表1。
表1本发明方法所得芦笋提取物总皂苷含量
Claims (3)
1.一种芦笋皂苷制备方法，其特征在于包括如下步骤：
(1)取芦笋，粉碎，粉末中加入60％-95％的乙醇，调节使提取溶媒中的乙醇含量为55％-70％，加热，保持提取温度为60-90℃，提取2-4次，过滤，合并滤液；
(2)将所得滤液减压浓缩至无醇味，相对密度为1.05-1.15，以水饱和的正丁醇萃取，至萃取液颜色变淡，合并正丁醇萃取液，正丁醇萃取液以正丁醇饱和的水洗2-3次，弃水洗液，正丁醇萃取部分减压浓缩，蒸去正丁醇，浓缩液备用；
(3)将所得浓缩液加入到大孔吸附树脂柱上，进一步分离纯化，其中所述的大孔吸附树脂分离纯化中，洗脱剂的选择及先后顺序为先用蒸馏水洗去糖类及小分子水溶性成分，改用0.05-0.5％的碱水液洗脱3-6个柱体积量，再用30％-40％的乙醇洗脱3-6个柱体积量洗脱脱碱脱色，再以65％-85％的乙醇洗脱5-8个柱体积量，收集65％-85％的乙醇洗脱部分，减压浓缩，干燥，得芦笋皂苷提取物精制品，总皂苷含量为85％-90％。
2.根据权利要求1所述的芦笋皂苷制备方法，其特征在于所述的大孔吸附树脂为AB-8、D101、NKA-9、HPD100中的任意一种。
3.根据权利要求1所述的芦笋皂苷制备方法，其特征在于所述的碱水液为氢氧化钠液、氢氧化钾液、碳酸钠液、碳酸氢钠液、碳酸钾液、碳酸氢钾液中的任意一种。
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Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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| CN101559157A (zh) * | 2009-05-18 | 2009-10-21 | 华东师范大学 | 一种利用芦笋渣分级提取芦笋皂苷和芦笋多糖的方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 季宇彬等.芦笋多糖提取、单糖组分分析及定量测定.《中草药》.2006,第37卷(第08期), * |
| 方幼兰.芦笋皂苷的提取纯化及其糖基组成.《生物工程学报》.2005,第3卷(第03期), * |
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