CN101748188A - 一种细菌性***病的联合检测试剂 - Google Patents

一种细菌性***病的联合检测试剂 Download PDF

Info

Publication number
CN101748188A
CN101748188A CN201010100450A CN201010100450A CN101748188A CN 101748188 A CN101748188 A CN 101748188A CN 201010100450 A CN201010100450 A CN 201010100450A CN 201010100450 A CN201010100450 A CN 201010100450A CN 101748188 A CN101748188 A CN 101748188A
Authority
CN
China
Prior art keywords
detection reagent
proline
neuraminidase
active detection
acetyl
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201010100450A
Other languages
English (en)
Inventor
王则宇
杨红云
付光宇
吴学炜
李晟磊
郑业焕
杨静静
杨洋
郝许峰
谢媛媛
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
ZHENGZHOU AUTOBIO DIAGNOSTICS CO Ltd
Original Assignee
ZHENGZHOU AUTOBIO DIAGNOSTICS CO Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by ZHENGZHOU AUTOBIO DIAGNOSTICS CO Ltd filed Critical ZHENGZHOU AUTOBIO DIAGNOSTICS CO Ltd
Priority to CN201010100450A priority Critical patent/CN101748188A/zh
Publication of CN101748188A publication Critical patent/CN101748188A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Landscapes

  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明涉及一种细菌性***病的联合检测试剂，它包括唾液酸苷酶活性检测试剂和脯氨酸氨肽酶活性检测试剂；所述唾液酸苷酶活性检测试剂由下列物质组成：酶底物A：0.5～2.5g/l，糖：30～60g/l，柠檬酸：1～2g/l；所述酶底物A为5-溴-4-氯-3-吲哚-N-乙酰-α-唾液酸苷、硝基苯-N-乙酰-α-唾液酸苷或萘酚-N-乙酰-α-唾液酸苷；所述脯氨酸氨肽酶活性检测试剂由下列物质组成：酶底物B：2～5g/l，Tris-盐酸缓冲溶液：0.1～0.3mol/l，N-甘氨酰甘氨酸：10～20g/l；所述酶底物B为L-脯氨酸-对硝基苯胺、L-脯氨酸-α-萘胺或L-脯氨酸-β-萘胺。本发明试剂使用方便，检测时不需要显微镜等特殊设备，检测速度快，且具有很高的灵敏度和特异性，有效避免了单纯检测一种酶活性而导致的BV漏检，易于推广。

Description

一种细菌性***病的联合检测试剂
技术领域
本发明涉及一种细菌性***病的联合检测试剂，特别是用于检测***分泌物中唾液酸苷酶活性和脯氨酸氨肽酶活性的试剂。
背景技术
细菌性***病(bacterial vaginosis，简称BV)是妇产科最常见的疾病之一，感染率较高，且易复发。患BV的妇女中有50％的人易早产或分娩低体重儿，她们所生下的孩子也很可能会带有各种后遗症。越来越多的证据表明，BV是导致组织性绒毛膜炎、羊水感染、剖腹产术后子***及其他妊娠不良和妊娠并发症的危险因素。另外在妇科中，BV主要与输卵管炎、***、***、***症、***、术后感染及妇科肿瘤有关。
BV于1955年被Gardner确认为一种独立疾病，并提出4项临床检查指标：(1)呈均匀致稀薄的***分泌物；(2)***pH值＞5.0-5.2；(3)***分泌物氨味；(4)有线索细胞存在。1983年Amsel等经过多年的研究及临床观察，提出新的四项综合临床征指标作为诊断BV的依据，即①异常***分泌物；②***分泌物pH值＞4.5；③***分泌物加一滴10％氢氧化钾溶液，产生氨味或鱼腥样异味；④在***液湿片中发现线索细胞。这4项指标存在其中3个，且必须有最后一项中的线索细胞才能确诊为BV。该方法被认为是诊断BV的“金标准”，习惯上称为Amsel法。但是Amsel法在临床实践中操作较为繁琐，影响因素较多，国内目前较少推广使用。
随着科技的发展，形成了将产品应用于BV临床检测的新技术，如(1)改良胺试验法：以郑州安图绿科生物工程有限公司为代表，其把目前检测细菌性***病的常规胺试验试剂与包被有颜色指示剂的膜有机结合(膜技术具有微量放大作用)，有效克服了常规胺试验的缺点，可有效提高胺试验的灵敏度，检测操作更客观，使胺试验独立应用于BV检测成为可能。但该法可能存在本地显色，对临床检测结果的判断有一定影响。(2)唾液酸酶法：该法的试剂以美国INVERNESS公司的试剂为代表。唾液酸苷酶又称神经氨酸苷酶，是一种存在于溶酶体、细胞质和细胞膜上的酶蛋白。研究表明，在***环境中，唾液酸苷酶活性与BV密切相关，与Amsel法有较高的符合率，国内外在相关试剂的研发上都做了大量工作，并已有产品用于临床检测。但是***微生态菌群中，普雷沃菌和拟杆菌是唾液酸苷酶活性增加的主要病原菌，部分加特纳氏菌有此酶活性，而动弯杆菌、消化球菌以及人型支原体的此酶活性基本不能检出。因此，虽然细菌性***病不是由单一而是多种厌氧细菌增多引起的，但是单纯依靠检测分泌物中唾液酸苷酶的活性，必然漏检唾液酸苷酶活性低的厌氧细菌增多引起的细菌性***病。(3)脯氨酸氨肽酶法：与脯氨酸氨肽酶相关细菌在***环境中包括加德纳菌和动弯杆菌，可以说是BV相关病原体所分泌的特异性标志物，因此可以通过脯氨酸氨肽酶活性的增加来指示BV。虽然没有文献指出普雷沃菌和拟杆菌的脯氨酸氨肽酶活性如何，但研究表明，解肝素普雷沃菌(P.heparinolytica)、动胶普雷沃菌(P.zoogleoformans)和隐蔽拟杆菌(B.tectum)无脯氨酸氨肽酶活性。因此对于单纯由于普雷沃菌和拟杆菌增多引起BV来说，则不能通过检测脯氨酸氨肽酶活性来指示BV，即该方法从原理上来说存在灵敏度缺陷。上述方法虽然有各自的优势，但是仍存在着不同程度的缺陷，从而在临床使用上受到一定的限制。
细菌性***病是***菌群失调引起，即***加德纳菌、普雷沃菌、拟杆菌、动弯杆菌、消化球菌、支原体等厌氧生物增多引起的疾患。普雷沃菌和拟杆菌是唾液酸苷酶活性增加的主要病原菌，部分加德纳菌有此酶活性，而动弯杆菌、消化球菌以及人型支原体的此酶活性基本不能检出。加德纳菌和动弯杆菌有脯氨酸氨肽酶，没有资料证明普雷沃菌有此酶活性。因此通过联合检测唾液酸苷酶和脯氨酸氨肽酶的活性，可以检测由绝大多数BV病原菌增多引起的细菌性***病，极大程度上避免了单纯检测一种酶活性而导致的BV漏检，提高了检测的可靠性和准确度。
发明内容
本发明目的在于提供一种灵敏度和特异性均高的细菌性***病联合检测试剂。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种细菌性***病的联合检测试剂，包括唾液酸苷酶活性检测试剂和脯氨酸氨肽酶活性检测试剂；
所述唾液酸苷酶活性检测试剂由下列物质组成：酶底物A：0.5～2.5g/l，糖：30～60g/l，柠檬酸：1～2g/l；所述酶底物A为5-溴-4-氯-3-吲哚-N-乙酰-α-唾液酸苷、硝基苯-N-乙酰-α-唾液酸苷或萘酚-N-乙酰-α-唾液酸苷；所述脯氨酸氨肽酶活性检测试剂由下列物质组成：酶底物B：2～5g/l，Tris-盐酸缓冲溶液：0.1～0.3mol/l，N-甘氨酰甘氨酸：10～20g/l；所述酶底物B为L-脯氨酸-对硝基苯胺、L-脯氨酸-α-萘胺或L-脯氨酸-β-萘胺。
所述糖为葡萄糖、蔗糖、乳糖或果糖。
优选地，所述唾液酸苷酶活性检测试剂由下列物质组成：酶底物A：1～2g/l，糖：40～50g/l，柠檬酸：1.5g/l；所述酶底物A为5-溴-4-氯-3-吲哚-N-乙酰-α-唾液酸苷或萘酚-N-乙酰-α-唾液酸苷；所述脯氨酸氨肽酶活性检测试剂由下列物质组成：酶底物B：3～4g/l，Tris-盐酸缓冲溶液：0.2mol/l，N-甘氨酰甘氨酸：13～17g/l；所述酶底物B为L-脯氨酸-对硝基苯胺或L-脯氨酸-α-萘胺。
更进一步，所述糖为葡萄糖或蔗糖。
使用时可将上述唾液酸苷酶活性检测试剂和脯氨酸氨肽酶活性检测试剂直接配成液体或者固化在边长为5mm的方形固相载体上，干燥过夜后即可使用。固相载体可以为棉浆纸、滤纸、玻璃纤维或塑料等。
测试前准备工作：
(1)显色剂：浓度为2g/l的固紫B溶液。
(2)配制唾液酸苷酶活性检测试剂：
称取定量酶底物A、糖和柠檬酸，溶于蒸馏水，混合均匀，溶液PH值为2～4，按15μl/片的剂量固化在边长为5mm的方形滤纸上(下称纸片1)，干燥备用。
(3)配制脯氨酸氨肽酶活性检测试剂：
称取定量酶底物B、N-甘氨酰甘氨酸加入到适量Tris-盐酸缓冲溶液(即三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液)中，混合均匀，溶液PH值为7～8，按15μl/片的剂量固化在边长为5mm的方形滤纸上(下称纸片2)，干燥备用。
测试方法：
(1)唾液酸苷酶活性检测：取***分泌物标本，用0.5～1ml的生理盐水稀释后，取一滴(25-50μl)加在纸片1上，再加一滴显色剂后，将纸片1在37℃放置15min后，读出活性结果。无色为阴性，红色或紫色为阳性。
(2)脯氨酸氨肽酶活性检测：取***分泌物标本用0.5～1ml的生理盐水稀释后，取一滴(25-50μl)加在纸片2上，再加一滴显色剂后，将纸片2在37℃放置15min后，读出活性结果。无色为阴性，黄色为阳性。
(3)判定标准：联合唾液酸苷酶、脯氨酸氨肽酶的活性检测结果来判断妇科BV，即这两种酶活性均呈阴性则判定BV为阴性，任何一种酶活性呈阳性则判定BV为阳性。
本发明试剂应用于临床的情况：
郑州大学第三附属医院妇科门诊2009年收治212例患者，通过扩阴器，用无菌拭子取两份***后穹窿分泌物，一份用Amsel法检测BV，另一份采用本发明试剂检测唾液酸苷酶和脯氨酸氨肽酶活性来判断BV，以Amsel法为金标准。
临床统计表如下：
(注：镜检指用Amsel法检测BV；唾酶指唾液酸苷酶的活性检测结果，脯酶指脯氨酸氨肽酶的活性检测结果。“-”指为阴性，“+”指为阳性，“±”指为阳性。)
  序号   镜检   唾酶   脯酶   序号   镜检   唾酶   脯酶   序号   镜检   唾酶   脯酶   序号   镜检   唾酶   脯酶
  1   无   -   -   54   BV   +   +   107   BV   +   +   160   BV   -   +
  2   BV   +   +   55   BV   +   -   108   BV   +   ±   161   无   -   -
  3   BV   ±   ±   56   BV   -   +   109   无   -   -   162   无   -   -
  4   无   -   -   57   BV   ±   -   110   BV   +   +   163   BV   +   +
  5   无   -   -   58   无   -   -   111   无   -   -   164   无   -   -
  6   无   -   +   59   无   -   -   112   无   -   -   165   无   -   -
  7   BV   +   +   60   无   -   -   113   无   -   -   166   BV   ±   ±
  序号   镜检   唾酶   脯酶   序号   镜检   唾酶   脯酶   序号   镜检   唾酶   脯酶   序号   镜检   唾酶   脯酶
  8   无   +   -   61   无   -   -   114   无   -   -   167   BV   ±   ±
  9   无   +   +   62   BV   +   +   115   BV   +   ±   168   无   -   -
  10   BV   +   +   63   无   -   -   116   BV   +   +   169   无   -   -
  11   BV   ±   ±   64   无   -   -   117   无   -   -   170   无   -   -
  12   无   -   -   65   BV   +   -   118   无   -   -   171   BV   ±   +
  13   无   -   -   66   无   -   -   119   BV   +   ±   172   无   -   -
  14   BV   +   ±   67   BV   -   +   120   无   -   -   173   无   -   -
  15   无   -   -   68   BV   ±   +   121   无   -   -   174   BV   +   ±
  16   无   -   +   69   无   -   -   122   BV   ±   +   175   无   -   -
  17   BV   +   +   70   无   -   -   123   BV   ±   +   176   无   -   -
  18   无   -   -   71   无   -   -   124   BV   +   ±   177   BV   -   +
  19   无   -   -   72   BV   ±   +   125   无   -   -   178   无   -   -
  20   BV   ±   +   73   BV   +   ±   126   无   -   -   179   无   -   -
  21   无   -   -   74   无   -   -   127   无   -   -   180   BV   +   -
  序号   镜检   唾酶   脯酶   序号   镜检   唾酶   脯酶   序号   镜检   唾酶   脯酶   序号   镜检   唾酶   脯酶
  22   BV   +   ±   75   无   -   -   128   无   -   -   181   BV   ±   +
  23   无   -   -   76   BV   ±   +   129   BV   ±   +   182   无   -   -
  24   无   +   +   77   BV   -   +   130   无   -   -   183   无   -   -
  25   BV   +   +   78   无   -   -   131   无   -   -   184   无   -   -
  26   无   +   +   79   无   -   -   132   无   -   -   185   BV   +   +
  27   无   -   -   80   无   -   -   133   BV   ±   -   186   BV   +   -
  28   BV   -   +   81   BV   -   -   134   无   -   -   187   BV   +   +
  29   BV   ±   ±   82   BV   +   ±   135   BV   +   ±   188   无   -   -
  30   BV   +   +   83   无   -   -   136   BV   +   +   189   BV   ±   ±
  31   BV   +   +   84   无   -   -   137   BV   +   ±   190   无   -   -
  32   BV   +   ±   85   无   -   -   138   BV   +   ±   191   无   -   -
  33   无   -   -   86   无   -   -   139   BV   +   +   192   BV   +   +
  34   无   -   -   87   BV   +   ±   140   无   -   -   193   无   -   -
  35   无   -   +   88   无   -   -   141   无   -   -   194   无   -   -
  36   BV   +   +   89   无   -   -   142   无   -   -   195   无   -   -
  37   BV   ±   +   90   无   -   -   143   无   -   -   196   BV   +   -
  序号   镜检   唾酶   脯酶   序号   镜检   唾酶   脯酶   序号   镜检   唾酶   脯酶   序号   镜检   唾酶   脯酶
  38   无   -   -   91   无   -   -   144   无   -   -   197   无   +   +
  39   无   -   -   92   BV   +   +   145   无   -   -   198   BV   +   +
  40   无   -   -   93   无   -   -   146   无   -   -   199   BV   +   ±
  41   BV   -   +   94   无   -   -   147   无   -   -   200   无   -   -
  42   BV   +   +   95   无   -   -   148   BV   +   -   201   BV   +   -
  43   无   -   -   96   无   -   -   149   无   -   -   202   无   -   -
  44   无   -   -   97   BV   ±   +   150   无   -   -   203   BV   +   +
  45   BV   +   -   98   无   -   -   151   无   -   -   204   无   -   -
  46   无   -   -   99   BV   +   ±   152   BV   ±   +   205   BV   +   ±
  47   无   -   -   100   无   +   +   153   BV   ±   ±   206   BV   ±   +
  48   BV   ±   +   101   无   -   -   154   无   -   ±   207   无   -   -
  49   无   -   -   102   BV   +   ±   155   无   -   -   208   BV   +   ±
  50   无   +   +   103   无   -   -   156   无   -   -   209   无   -   -
  51   无   -   -   104   无   -   -   157   BV   ±   +   210   无   -   -
  52   BV   ±   +   105   BV   ±   +   158   无   -   -   211   BV   ±   +
  53   无   -   -   106   BV   -   +   159   无   -   -   212   BV   ±   +
临床诊断结果汇总见下表：
Figure GSA00000011332400041
结果表明：本发明试剂检测BV的灵敏度为98.85％，特异性为91.20％；单纯用唾液酸苷酶检测BV的灵敏度为89.60％，特异性为94.80％；而单纯用脯氨酸氨基肽酶检测BV的灵敏度为87.30％，特异性为92.00％。和单纯检测一种酶活性相比，本发明联合检测试剂的灵敏度大幅度提高，有效避免了单纯检测一种酶活性而导致的BV漏检，提高了检测的可靠性和准确度，可以满足临床检测的需要，易于推广。
本发明试剂配制简单，使用方便，容易操作，检测时不需要显微镜等特殊设备，十五分钟即可出结果，检测速度快，且具有很高的灵敏度和特异性，有效避免了单纯检测一种酶活性而导致的BV漏检，可以满足临床检测需要，易于推广。
具体实施方式
实施例1
一种细菌性***病的联合检测试剂，包括唾液酸苷酶活性检测试剂和脯氨酸氨肽酶活性检测试剂；所述唾液酸苷酶活性检测试剂由下列物质组成：5-溴-4-氯-3-吲哚-N-乙酰-α-唾液酸苷：1g/l，葡萄糖：45g/l，柠檬酸：1.5g/l。所述脯氨酸氨肽酶活性检测试剂由下列物质组成：L-脯氨酸-对硝基苯胺：3.5g/l，Tris-盐酸缓冲溶液：0.2mol/l，N-甘氨酰甘氨酸：15g/l。配制及测试方法如前文所述。
实施例2
一种细菌性***病的联合检测试剂，包括唾液酸苷酶活性检测试剂和脯氨酸氨肽酶活性检测试剂；所述唾液酸苷酶活性检测试剂由下列物质组成：5-溴-4-氯-3-吲哚-N-乙酰-α-唾液酸苷：2g/l，葡萄糖：40g/l，柠檬酸：1.5g/l。所述脯氨酸氨肽酶活性检测试剂由下列物质组成：L-脯氨酸-α-萘胺：3g/l，Tris-盐酸缓冲溶液：0.2mol/l，N-甘氨酰甘氨酸：13g/l。配制及测试方法如前文所述。
实施例3
一种细菌性***病的联合检测试剂，包括唾液酸苷酶活性检测试剂和脯氨酸氨肽酶活性检测试剂；所述唾液酸苷酶活性检测试剂由下列物质组成：5-溴-4-氯-3-吲哚-N-乙酰-α-唾液酸苷：1g/l，葡萄糖：50g/l，柠檬酸：1g/l。所述脯氨酸氨肽酶活性检测试剂由下列物质组成：L-脯氨酸-α-萘胺：4g/l，Tris-盐酸缓冲溶液：0.2mol/l，N-甘氨酰甘氨酸：17g/l。配制及测试方法如前文所述。
实施例4
一种细菌性***病的联合检测试剂，包括唾液酸苷酶活性检测试剂和脯氨酸氨肽酶活性检测试剂；所述唾液酸苷酶活性检测试剂由下列物质组成：5-溴-4-氯-3-吲哚-N-乙酰-α-唾液酸苷：2g/l，蔗糖：40g/l，柠檬酸：2g/l。所述脯氨酸氨肽酶活性检测试剂由下列物质组成：L-脯氨酸-对硝基苯胺：3g/l，Tris-盐酸缓冲溶液：0.2mol/l，N-甘氨酰甘氨酸：13g/l。配制及测试方法如前文所述。
实施例5
一种细菌性***病的联合检测试剂，包括唾液酸苷酶活性检测试剂和脯氨酸氨肽酶活性检测试剂；所述唾液酸苷酶活性检测试剂由下列物质组成：萘酚-N-乙酰-α-唾液酸苷：2g/l，葡萄糖：50g/l，柠檬酸：1.5g/l。所述脯氨酸氨肽酶活性检测试剂由下列物质组成：L-脯氨酸-对硝基苯胺：3.5g/l，Tris-盐酸缓冲溶液：0.2mol/l，N-甘氨酰甘氨酸：17g/l。配制及测试方法如前文所述。
实施例6
一种细菌性***病的联合检测试剂，包括唾液酸苷酶活性检测试剂和脯氨酸氨肽酶活性检测试剂；所述唾液酸苷酶活性检测试剂由下列物质组成：萘酚-N-乙酰-α-唾液酸苷：1g/l，葡萄糖：45g/l，柠檬酸：1.5g/l。所述脯氨酸氨肽酶活性检测试剂由下列物质组成：L-脯氨酸-α-萘胺：4g/l，Tris-盐酸缓冲溶液：0.2mol/l，N-甘氨酰甘氨酸：15g/l。配制及测试方法如前文所述。
实施例7
一种细菌性***病的联合检测试剂，包括唾液酸苷酶活性检测试剂和脯氨酸氨肽酶活性检测试剂；所述唾液酸苷酶活性检测试剂由下列物质组成：萘酚-N-乙酰-α-唾液酸苷：1g/l，蔗糖：40g/l，柠檬酸：1.5g/l。所述脯氨酸氨肽酶活性检测试剂由下列物质组成：L-脯氨酸-α-萘胺：3g/l，Tris-盐酸缓冲溶液：0.2mol/l，N-甘氨酰甘氨酸：13g/l。配制及测试方法如前文所述。
实施例8
一种细菌性***病的联合检测试剂，包括唾液酸苷酶活性检测试剂和脯氨酸氨肽酶活性检测试剂；所述唾液酸苷酶活性检测试剂由下列物质组成：萘酚-N-乙酰-α-唾液酸苷：2g/l，蔗糖：45g/l，柠檬酸：1g/l。所述脯氨酸氨肽酶活性检测试剂由下列物质组成：L-脯氨酸-对硝基苯胺：4g/l，Tris-盐酸缓冲溶液：0.2mol/l，N-甘氨酰甘氨酸：15g/l。配制及测试方法如前文所述。
实施例9
一种细菌性***病的联合检测试剂，包括唾液酸苷酶活性检测试剂和脯氨酸氨肽酶活性检测试剂；所述唾液酸苷酶活性检测试剂由下列物质组成：萘酚-N-乙酰-α-唾液酸苷：2g/l，蔗糖：50g/l，柠檬酸：2g/l。所述脯氨酸氨肽酶活性检测试剂由下列物质组成：L-脯氨酸-对硝基苯胺：4g/l，Tris-盐酸缓冲溶液：0.2mol/l，N-甘氨酰甘氨酸：17g/l。配制及测试方法如前文所述。
实施例10
一种细菌性***病的联合检测试剂，包括唾液酸苷酶活性检测试剂和脯氨酸氨肽酶活性检测试剂；所述唾液酸苷酶活性检测试剂由下列物质组成：硝基苯-N-乙酰-α-唾液酸苷：0.5g/l，乳糖：30g/l，柠檬酸：1g/l。所述脯氨酸氨肽酶活性检测试剂由下列物质组成：L-脯氨酸-β-萘胺：2g/l，Tris-盐酸缓冲溶液：0.1mol/l，N-甘氨酰甘氨酸：10g/l。配制及测试方法如前文所述。
实施例11
一种细菌性***病的联合检测试剂，包括唾液酸苷酶活性检测试剂和脯氨酸氨肽酶活性检测试剂；所述唾液酸苷酶活性检测试剂由下列物质组成：硝基苯-N-乙酰-α-唾液酸苷：2.5g/l，蔗糖：60g/l，柠檬酸：2g/l。所述脯氨酸氨肽酶活性检测试剂由下列物质组成：L-脯氨酸-α-萘胺：5g/l，Tris-盐酸缓冲溶液：0.3mol/l，N-甘氨酰甘氨酸：20g/l。配制及测试方法如前文所述。
实施例12
一种细菌性***病的联合检测试剂，包括唾液酸苷酶活性检测试剂和脯氨酸氨肽酶活性检测试剂；所述唾液酸苷酶活性检测试剂由下列物质组成：硝基苯-N-乙酰-α-唾液酸苷：2g/l，果糖：50g/l，柠檬酸：1.8g/l。所述脯氨酸氨肽酶活性检测试剂由下列物质组成：L-脯氨酸-α-萘胺：4g/l，Tris-盐酸缓冲溶液：0.1mol/l，N-甘氨酰甘氨酸：18g/l。配制及测试方法如前文所述。
实施例13
一种细菌性***病的联合检测试剂，包括唾液酸苷酶活性检测试剂和脯氨酸氨肽酶活性检测试剂；所述唾液酸苷酶活性检测试剂由下列物质组成：萘酚-N-乙酰-α-唾液酸苷：0.5g/l，果糖：30g/l，柠檬酸：1.2g/l。所述脯氨酸氨肽酶活性检测试剂由下列物质组成：L-脯氨酸-对硝基苯胺：3.5g/l，Tris-盐酸缓冲溶液：0.3mol/l，N-甘氨酰甘氨酸：12g/l。配制及测试方法如前文所述。
实施例14
一种细菌性***病的联合检测试剂，包括唾液酸苷酶活性检测试剂和脯氨酸氨肽酶活性检测试剂；所述唾液酸苷酶活性检测试剂由下列物质组成：萘酚-N-乙酰-α-唾液酸苷：1.5g/l，乳糖：40g/l，柠檬酸：1.6g/l。所述脯氨酸氨肽酶活性检测试剂由下列物质组成：L-脯氨酸-对硝基苯胺：2g/l，Tris-盐酸缓冲溶液：0.1mol/l，N-甘氨酰甘氨酸：10g/l。配制及测试方法如前文所述。
实施例15
一种细菌性***病的联合检测试剂，包括唾液酸苷酶活性检测试剂和脯氨酸氨肽酶活性检测试剂；所述唾液酸苷酶活性检测试剂由下列物质组成：5-溴-4-氯-3-吲哚-N-乙酰-α-唾液酸苷：0.5g/l，葡萄糖：30g/l，柠檬酸：1g/l。所述脯氨酸氨肽酶活性检测试剂由下列物质组成：L-脯氨酸-α-萘胺：2g/l，Tris-盐酸缓冲溶液：0.1mol/l，N-甘氨酰甘氨酸：10g/l。配制及测试方法如前文所述。
实施例16
一种细菌性***病的联合检测试剂，包括唾液酸苷酶活性检测试剂和脯氨酸氨肽酶活性检测试剂；所述唾液酸苷酶活性检测试剂由下列物质组成：5-溴-4-氯-3-吲哚-N-乙酰-α-唾液酸苷：2.5g/l，果糖：60g/l，柠檬酸：2g/l。所述脯氨酸氨肽酶活性检测试剂由下列物质组成：L-脯氨酸-对硝基苯胺：5g/l，Tris-盐酸缓冲溶液：0.3mol/l，N-甘氨酰甘氨酸：20g/l。配制及测试方法如前文所述。

Claims (4)

1.一种细菌性***病的联合检测试剂，其特征在于，它包括唾液酸苷酶活性检测试剂和脯氨酸氨肽酶活性检测试剂；
所述唾液酸苷酶活性检测试剂由下列物质组成：
酶底物A：0.5～2.5g/l，糖：30～60g/l，柠檬酸：1～2g/l；所述酶底物A为5-溴-4-氯-3-吲哚-N-乙酰-α-唾液酸苷、硝基苯-N-乙酰-α-唾液酸苷或萘酚-N-乙酰-α-唾液酸苷；
所述脯氨酸氨肽酶活性检测试剂由下列物质组成：
酶底物B：2～5g/l，Tris-盐酸缓冲溶液：0.1～0.3mol/l，N-甘氨酰甘氨酸：10～20g/l；所述酶底物B为L-脯氨酸-对硝基苯胺、L-脯氨酸-α-萘胺或L-脯氨酸-β-萘胺。
2.如权利要求1所述细菌性***病的联合检测试剂，其特征在于，所述糖为葡萄糖、蔗糖、乳糖或果糖。
3.如权利要求1或2所述细菌性***病的联合检测试剂，其特征在于，
所述唾液酸苷酶活性检测试剂由下列物质组成：
酶底物A：1～2g/l，糖：40～50g/l，柠檬酸：1.5g/l；所述酶底物A为5-溴-4-氯-3-吲哚-N-乙酰-α-唾液酸苷或萘酚-N-乙酰-α-唾液酸苷；
所述脯氨酸氨肽酶活性检测试剂由下列物质组成：
酶底物B：3～4g/l，Tris-盐酸缓冲溶液：0.2mol/l，N-甘氨酰甘氨酸：13～17g/l；所述酶底物B为L-脯氨酸-对硝基苯胺或L-脯氨酸-α-萘胺。
4.如权利要求3所述细菌性***病的联合检测试剂，其特征在于，所述糖为葡萄糖或蔗糖。
CN201010100450A 2010-01-25 2010-01-25 一种细菌性***病的联合检测试剂 Pending CN101748188A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201010100450A CN101748188A (zh) 2010-01-25 2010-01-25 一种细菌性***病的联合检测试剂

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201010100450A CN101748188A (zh) 2010-01-25 2010-01-25 一种细菌性***病的联合检测试剂

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN101748188A true CN101748188A (zh) 2010-06-23

Family

ID=42475800

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201010100450A Pending CN101748188A (zh) 2010-01-25 2010-01-25 一种细菌性***病的联合检测试剂

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN101748188A (zh)

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102251021A (zh) * 2011-06-23 2011-11-23 泰普生物科学（中国）有限公司 一种细菌性***病检测试剂盒及唾液酸酶检测方法
CN102253206A (zh) * 2011-06-23 2011-11-23 泰普生物科学（中国）有限公司 一种***炎联合检测试剂盒
CN102251022A (zh) * 2011-06-23 2011-11-23 泰普生物科学（中国）有限公司 一种***炎快速检测试剂盒
CN103060423A (zh) * 2012-12-20 2013-04-24 刘和录 一种唾液酸酶法测细菌性***病的临界质控物的配制方法
CN106442989A (zh) * 2016-09-30 2017-02-22 广州鸿琪光学仪器科技有限公司 一种脯氨酸氨基肽酶检测试剂、反应垫、其制备方法及试剂盒

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102251021A (zh) * 2011-06-23 2011-11-23 泰普生物科学（中国）有限公司 一种细菌性***病检测试剂盒及唾液酸酶检测方法
CN102253206A (zh) * 2011-06-23 2011-11-23 泰普生物科学（中国）有限公司 一种***炎联合检测试剂盒
CN102251022A (zh) * 2011-06-23 2011-11-23 泰普生物科学（中国）有限公司 一种***炎快速检测试剂盒
CN103060423A (zh) * 2012-12-20 2013-04-24 刘和录 一种唾液酸酶法测细菌性***病的临界质控物的配制方法
CN106442989A (zh) * 2016-09-30 2017-02-22 广州鸿琪光学仪器科技有限公司 一种脯氨酸氨基肽酶检测试剂、反应垫、其制备方法及试剂盒

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Holst et al. Bacterial vaginosis: microbiological and clinical findings
Bump et al. The prevalence, six-month persistence, and predictive values of laboratory indicators of bacterial vaginosis (nonspecific vaginitis) in asymptomatic women
Fan et al. Aerobic vaginitis and mixed infections: comparison of clinical and laboratory findings
CN110940646B (zh) 一种***微生物检测双重荧光染色液及其应用
CN102253206A (zh) 一种***炎联合检测试剂盒
Alli et al. Detection and prevalence of Candida isolates among patients in Ibadan, Southwestern Nigeria
WO2018001215A1 (zh) 检测细菌性***病的试剂盒
Davis et al. Correlation between cervical cytologic results and Gram stain as diagnostic tests for bacterial vaginosis
CN101748188A (zh) 一种细菌性***病的联合检测试剂
Kampan et al. Evaluation of BV® Blue Test Kit for the diagnosis of bacterial vaginosis
EP2407549B1 (en) Detection of trichomonas and candida
CN113030076B (zh) 一种***分泌物多联检测试纸、制备方法及其测试方法
CN102321731A (zh) 一种***炎检测试剂盒及其制备方法
CN103266163B (zh) 一种检测鉴别念珠菌和滴虫的联检试剂盒
CN102321730A (zh) 一种***炎联合检测试剂盒
CN201514383U (zh) 一种***炎快速检测装置
Voytik et al. Cytolytic vaginosis: a critical appraisal of a controversial condition
CN109060798A (zh) 一种用于***内感染的诊断试剂
CN102690861A (zh) 一种细菌性***病系列妇检试剂盒及其应用方法
CN102251021A (zh) 一种细菌性***病检测试剂盒及唾液酸酶检测方法
Bro The diagnosis of candida vaginitis in general practice
JP2003503009A (ja) 診断試験
CN101863929A (zh) 一种检测细菌性***病的方法
CN1405562A (zh) 一种唾液酸酶测定试剂
Eckert et al. Histologic endometritis in asymptomatic human immunodeficiency virus–infected women: characterization and effect of antimicrobial therapy

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C02 Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001)
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20100623