CN101732332B - 20(S)-人参皂苷Rg3作为制备治疗非小细胞肺癌的药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及的是一种20(S)-人参皂苷Rg3的药物应用，具体地，本发明涉及的是20(S)-人参皂苷Rg3作为制备治疗人非小细胞肺癌的药物中的应用。本发明选用人非小细胞肺癌细胞株(A549肺腺癌、H460大细胞肺癌及LTEP-78肺鳞癌)接种于裸鼠皮下，观察了SPG-Rg3对非小细胞肺癌的影响；并取肿瘤组织进行CD34免疫组织化学染色及TUNEL免疫荧光染色，观察SPG-Rg3对肿瘤血管生成及对细胞凋亡的影响；结论是20(S)-人参皂苷Rg3能明显抑制非小细胞肺癌的生长，其作用机制与其促进肿瘤细胞凋亡及抑制肿瘤血管生成有关，与环磷酰胺联合应用的协同作用不明显，可用于临床非小细胞肺癌的化学治疗。

Description

20(S)-人参皂苷Rg3作为制备治疗非小细胞肺癌的药物中的应用

技术领域

本发明属于药物研究领域，具体的说，涉及20(S)-人参皂苷Rg3作为制备治疗非小细胞肺癌的药物中的应用。

背景技术

肺癌是临床常见恶性肿瘤，通常分为小细胞肺癌及非小细胞肺癌两大类，其发病率与死亡率均列恶性肿瘤之首，其中非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)占绝大多数，最为普遍，占肺癌发病总数的80％以上。非小细胞肺癌在全世界的发病率逐年上升，严重威胁着人类健康。目前治疗NSCLC的方法主要有以下几种：

(一)NSCLC外科治疗

目前治疗NSCLC最理想的方法仍是外科手术治疗。手术治疗的目的是切除肺癌病灶和区域***，并尽可能保留健康肺组织。目前氩氦刀冷冻消融术作为微创手术，适用于病灶较小、体质较差、难以耐受开胸手术或不同意行开胸手术的肺癌患者。

但外科手术是早期NSCLC治疗的主要措施，且单纯手术长期生存仍然不能令人满意，IA期患者5年生存率只有70％，而到ШA期则降为17％，分析手术失败的原因，多数为远处转移，提示需要全身治疗。

(二)放化疗

目前，放射治疗NSCLC是除手术治疗之外最常见、有效的局部治疗手段。它受解剖、病期、体力等方面的限制比手术小，容易被患者接受。

化疗在肺癌的治疗中应用广泛，可以单独应用于晚期肺癌病例，起姑息治疗作用，更多是作为综合治疗的一部分与放疗、手术等联合治疗。化疗可以防止癌肿转移、复发，提高长期生存率。以顺铂(DDP)为基础的化疗可以为完全切除术后患者带来生存获益，尤其是∏期与Ш期患者；老年患者也可从辅助化疗中获得生存期的改善。但对于IA期患者普遍不主张辅助化疗；在IB期患者，术后辅助化疗的地位目前尚存在争议；对于4cm以上IB期患者临床上通常采用辅助化疗。对于局部晚期NSCLC(ШA-ШB)的标准治疗措施仍为同步放化疗。术前化疗可降低肿瘤分期和提高手术切除率，联合化疗是目前治疗NSCLC较常用的一种手段，药物的组合方式也有多种，以铂类联合新药是目前治疗的首选方案，这些新药包括吉西他滨、长春瑞滨、紫杉醇等。Hanna等发现局部晚期NSCLC接受EP方案化疗联合同步放疗(54.9Gy)，多烯紫杉醇巩固化疗组PFS和MST分别为12.3月与21.6月，均较单纯同步化放疗组的12.9月与24.2月有所下降，且观察到5.5％的毒性相关死亡，住院率也明显增高，提示同步化放疗后巩固化疗只增加毒性反应，不改善总体生存。

(三)分子靶向治疗

分子靶向治疗是指利用肿瘤细胞与正常细胞之间分子细胞生物学上的差异，采用封闭受体、抑制血管生成、阻断信号传导通路等方法，作用于肿瘤细胞特定的靶点，特异性地抑制肿瘤细胞的生长，促使肿瘤细胞凋亡。分子靶向治疗比传统的化疗具有更高的选择性，因此毒副作用小，是今后肿瘤治疗的新趋势，有待于更进一步的研究和发展。

(四)免疫治疗

免疫治疗主要分为主动免疫治疗和被动免疫治疗。

(五)介入治疗

介入支气管学近年来日益成熟，腔内治疗方法逐步完善，经纤支镜行激光、微波、冷冻、内置支架、后装内放疗及高频电刀、氩气等离子、球囊扩张等，***导致的中心气道狭窄或阻塞。对继发于肺癌的上腔静脉综合症患者，血管内置支架是较好的方法。经支气管动脉灌注化疗能提高肿瘤局部药物浓度，同时能提高抗癌药物的解毒作用。

(六)基因治疗

基因治疗是指将人的正常基因或有治疗作用的基因通过一定方式导入人体靶细胞，以纠正基因缺陷或者发挥治疗作用，从而达到治疗疾病目的的生物医学技术。

但上述NSCLC治疗方法尚存在一些缺点，如技术还不够成熟，其疗效难以确认；治疗的过程苦不堪言、患者难以承受；有些药物在治疗的同时还存在一些较大的毒副作用，增加患者的痛苦等。

中医中药的治疗特点为整体观和辩证论治，强调局部治疗与全身治疗相结合，扶正治疗与抗癌治疗相结合，既可作为综合治疗的手段之一，又可作为一种多因素结合基础上的组方治疗，具有多靶点全面兼顾和个体化治疗的优势，是一种综合治疗，且相对于其他治疗方案，具有安全、无毒副作用、治疗期间患者无需承受巨大的痛苦等优点。

人参是我国名贵的中草药，被誉为草药珍品，目前已从人参中分离出40余种人参皂苷单体成分，其中人参皂苷Rg3属原人参二醇型皂苷，存在两种同型异构体，即20(S)-人参皂苷Rg3(SPG-Rg3)和20(R)-人参皂苷Rg3(RPG-Rg3)。研究表明，20(S)-人参皂苷Rg3有抗肿瘤转移的作用{参见辛颖，倪劲松，王心蕊，等.20(S)-人参皂苷Rg3抗B16黑色素瘤转移的作用【J】.吉林大学学报；医学版，2004，30(4)：540-543.}，同时20(S)-人参皂苷Rg3还有抗肿瘤生长的作用{参见辛颖，倪劲松，姜新，王心蕊，等.20(S)-人参皂苷Rg3抑制肿瘤生长的作用【J】.吉林大学学报；医学版，2006，32(1)：61-63，81.}。

ZL98103433.0的中国专利公开了20(S)—人参皂甙Rg3的半合成方法及其医药用途。该专利公开了通过从人参皂甙二醇组作为半合成原料，采用化学方法，经半合成及提纯得到20(S)-人参皂甙Rg3纯品，并公开该物质特别适合在制备治疗肺癌、黑色素瘤、S₁₈₀肉瘤、结肠癌及抗病毒的药物中的应用。

申请号为200310114432.7的中国专利申请公开了一种以20(S)-人参皂苷-Rg3为有效成分，用于增强抗癌药物疗效，降低抗癌药物毒性、预防和治疗放化疗引起的白细胞降低的药物；同时还提供了20(S)-人参皂苷-Rg3用于增强抗癌药物疗效，降低抗癌药物毒性、预防和治疗放化疗引起的白细胞降低的用途。

虽然现有技术中已有关于20(S)-人参皂苷-Rg3抑制肿瘤转移及抑制肿瘤生长的相关报道，但对于非小细胞肺癌的研究还未见报道。直到目前为止也未发现一种药物能够有效地治疗非小细胞肺癌。本发明人在进行20(S)-人参皂苷-Rg3对人非小细胞肺癌的生长是否具有抑制作用的研究中发现，20(S)-人参皂苷-Rg3具有明显抑制人非小细胞肺癌生长的作用，从而完成了本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供20(S)-人参皂苷Rg3作为制备治疗非小细胞肺癌的药物中的应用。

由于20(S)-人参皂苷Rg3的提取工艺和其他的一些药物用途在现有技术中已经公开，而本发明的主要技术内容是验证20(S)-人参皂苷Rg3在本发明所述的适应症上的效果，因此，本发明的20(S)-人参皂苷Rg3的提取工艺可参见ZL98103433.0所公开的内容。本发明选取人非小细胞肺癌瘤株(NCI-H460人大细胞肺癌、A549人肺腺癌及LTEP-78人肺鳞癌)分别接种于BALB/C-nu纯系裸鼠制成荷瘤模型，将接种动物随即分为空白对照组、阳性对照组(环磷酰胺，40mg/kg/次，连续给药5天)、SPG-Rg3治疗组(3.0mg/kg、1.0mg/kg、0.3mg/kg，连续给药，直至试验结束前)及联合用药组[环磷酰胺+SPG-Rg3(20mg/kg+0.5mg/kg)/次，连续给药5次]。实验结束后测量肿瘤体积、重量，计算抑瘤率，观察了20(S)-人参皂苷Rg3对人非小细胞肺癌的抑制作用，具体可见以下的实施例；通过实施例，可以进一步的理解本发明。

通过动物试验，表明20(S)-人参皂苷Rg3能够明显抑制非小细胞肺癌的生长，为将20(S)-人参皂苷Rg3开发成一种治疗人非小细胞肺癌的药物提供了较充分的依据。

同时，临床试验表明，非小细胞肺癌患者采用20(S)-人参皂苷Rg3治疗后，能够明显抑制非小细胞肺癌的生长，提高患者的生活质量，延长患者的生命周期等。

附图说明

图1为SPG-Rg3对A549肺腺癌移植瘤生长的影响

图2为SPG-Rg3对H460大细胞肺癌移植瘤体积的影响

图3为SPG-Rg3对LTEP-78肺鳞癌移植瘤生长的影响

图4为SPG-Rg3对A549肺腺癌生长的抑制作用

图5为SPG-Rg3对NCI-H460肺大细胞癌生长的抑制作用

图6为SPG-Rg3对肺鳞状细胞癌生长的抑制作用

图7为NCI-H460肺大细胞癌CD34免疫组化染色(400×)空白对照组

图8为NCI-H460肺大细胞癌SPG-Rg3治疗组CD34免疫组化染色(400×)

图9为A549肺腺癌空白对照组CD34免疫组化染色(400×)

图10为彩图7A549肺腺癌SPG-Rg3治疗组CD34免疫组化染色(400×)

图11-A为A549空白对照组TUNEL免疫荧光染色结果

图11-B为A549 SPG-Rg3治疗组TUNEL免疫荧光染色结果

图11-C为H460空白对照组TUNEL免疫荧光染色结果

图11-D为H460 SPG-Rg3治疗组免疫荧光染色结果

具体实施方式

以下为本发明的具体实施方式，所述的实施例是为了进一步描述本发明，而不是限制本发明。

实施例1

本实施例涉及的是20(S)-人参皂苷Rg3抑制非小细胞肺癌生长作用的研究。一、实验材料与方法

(一)主要材料

1.实验动物：BALB/C-nu纯系裸鼠，雌性，4-6周龄，体重18～22克。分别购于中国医学科学院实验动物研究所及北京维通利华实验动物技术有限公司。合格证号：SCXK(京)205-0013和2007-0001。实验和饲养均在SPF条件下的超净层流架中进行，灭菌处理的水和饲料供给动物自由摄入，所有操作均在无菌超净工作台中进行。

2.选用瘤株：NCI-H460人大细胞肺癌细胞株，购于中科院上海细胞库A549人肺腺癌  由北京大学基础所免疫教研室馈赠LTEP-78人肺鳞癌细胞株  由北京肺部肿瘤研究所建立

3.实验试剂：(1)20(S)-人参皂苷Rg3，无色溶液，浓度为3g·L-1。由吉林大学白求恩医学院新药研究室提供，批号980301。使用时用无菌氯化钠注射液(0.9％)稀释为所需浓度。

(2)阳性对照药——环磷酰胺，200mg/瓶，沪卫药准字(1995)第012034号，上海华联制药有限公司。

(3)阴性对照药——无菌氯化钠注射液(0.9％)，国药准字H22022845，吉林科伦康乃尔制药有限公司。0.2ml/次。

(4)细胞培养液——H-DMEM培养液(购于GIBCO公司)，标准胎牛血清(天津灏洋)。

4.主要仪器：SW-CJ-1F超净工作台(苏州安泰空气技术有限公司)；CO2孵箱(三洋公司)。

(二)试验方法

1.动物接种：取体外培养对数生长期之所选人瘤细胞株细胞，接种于BALB/C-nu纯系裸鼠右腋皮下，每只小鼠接种2×10⁷个细胞。接种肿瘤细胞后，待可触及明确瘤结节时(直径约0.5cm，瘤结节不明显者淘汰)，将小鼠随机分成6组，每组8只。开始腹腔注射连续给药，停药24小时后处死动物。环磷酰胺隔天给药，共给5次。

1.2肺鳞状细胞癌：

2.实验动物分组：裸鼠接种瘤细胞后随机分为6组：

①空白对照组：腹腔注射生理盐水0.2ml/次。

②阳性对照组：腹腔注射环磷酰胺40mg/kg/次，连续5天。

③SPG-Rg3低剂量组：0.3mg/kg，容积：0.1ml/kg。

④SPG-Rg3中剂量组：1.0mg/kg，容积：0.1ml/kg。

⑤SPG-Rg3高剂量组：3.0mg/kg，容积：0.1ml/kg。

⑥联合用药组：环磷酰胺+SPG-Rg3(20mg/kg+0.5mg/kg)。

3.给药途径：腹腔注射，每日一次，连续给药，直至实验结束前一天。

4.观测指标：

4.1定期测量小鼠体重并记录一般情况变化。

4.2接种肿瘤后每周用游标卡尺测量肿瘤的长度(a)及宽度(b)，按公式(参见Sawaoka H，Tsuji S，Tsujii M，et al.Cyclooxygenase inhibitors sup-pressangiogenesis and reduce tumor growth in vivo[J].Lab Invest，1999，79(12)：1469-77.)求出肿瘤近似体积(V)，或V＝1/2ab²，单位为cm。

4.3试验结束后采用脱臼断颈处死动物，取瘤称重；留取部分瘤组织用10％中性***固定、备用。

4.4计算抑瘤率(％)

4.5进行药物联合作用的评价，两药相互作用指数(CDI)按下公式计算：

(当CDI<1时两药有协同作用；CDI<0.7时，协同作用显著)。

5.统计学处理：实验数据用均数±标准差(x±s)形式表示，采用SPSS11.5统计软件，计量资料采用t检验，计数资料采用方差分析，以P<0.05为差异均有显著性。

二、实验结果

1.SPG-Rg3对A549肺腺癌生长的抑制作用

SPG-Rg3用药各组荷瘤重量均明显低于空白对照组，其抑瘤率三组均在30％以上(见表1及图4)。SPG-Rg3在实验第三周(给药第二周)后，中剂量及大剂量组即出现明显的抑瘤作用，使肿瘤的生长明显慢于空白对照组(详见表2及图1)。结果显示，SPG-Rg3能够明显抑制A549肺腺癌的生长，各剂量组间的作用效果差别无显著性(P>0.05)，说明SPG-Rg3的抑瘤作用无明显的剂量依赖性。SPG-Rg3与环磷酰胺联合用药组与单纯环磷酰胺组作用无明显差异(P>0.05)，两药相互作用指数(CDI)>1，说明SPG-Rg3与环磷酰胺在抑制A549肺腺癌方面的无明显协同增效作用。

表1.SPG-Rg3对A549肺腺癌生长的抑制作用

P值为各组与空白对照组比较；^▲各剂量组间比较，P>0.05；^*P值为与阳性对照组比较

表2.SPG-Rg3对A549肺腺癌瘤体积(cm³)的影响(x±s，n＝8)

^*P值<0.05，^**P<0.01，^***P<0.001，各用药组不同接种时间与相应空白对照组比较

2.SPG-Rg3对NCI-H460大细胞肺癌生长的抑制作用

SPG-Rg3用药各组荷瘤重量明显低于空白对照组，其抑瘤率用药三个剂量组均在50％以上。(见表3及图5)。NCI-H460大细胞肺癌荷瘤生长快于A549肺腺癌荷瘤，SPG-Rg3在实验第三周(给药第二周)后，中剂量及大剂量组即出现明显的抑瘤作用，且以大剂量作用更明显。使肿瘤生长明显慢于空白对照组(表4及图2)。结果显示SPG-Rg3具有明显抑制NCI-H460大细胞肺癌生长的作用，大剂量组作用效果明显高于中剂量组(P<0.01)。SPG-Rg3与环磷酰胺联合应用具有协同增效趋势，但无统计学意义(P>0.05)，两药相互作用指数(CDI)>1。说明SPG-Rg3与环磷酰胺在抑制NCI-H460大细胞肺癌方面的协同作用不显著。见表2及图2。

表3.SPG-Rg3对NCI-H460大细胞肺癌生长的抑制作用

P值为各组与空白对照组比较；^▲各剂量组间比较，P>0.05；^#P值为与阳性对照组比较

表4.SPG-Rg3对NCI-H460大细胞肺癌瘤体积的影响(x±s，n＝8)

^*P值<0.05，^**P<0.01，^***P<0.001，各用药组不同接种时间与相应空白对照组比较。

^▲P值<0.05，^▲▲P<0.01，Rg3各用药组间比较。

3.SPG-Rg3对肺鳞癌的抑制作用

SPG-Rg3用药各组荷瘤重量均明显低于空白对照组，其抑瘤率三个剂量组均在30％以上(见表5及图6)。SPG-Rg3在实验第三周(给药第二周)后，中剂量及大剂量组即出现明显的抑瘤作用，使肿瘤的生长明显变缓慢(表6及图3)，且从结果中看出，肺鳞癌荷瘤的生长类似于A546肺腺癌荷瘤，肿瘤在接种第四周生长明显，且肺鳞癌的成瘤率低于A549肺腺癌及H460肺大细胞癌。结果显示SPG-Rg3能够明显抑制肺鳞癌的生长，用药各剂量组间作用无显著性差异(P>0.05)，说明SPG-Rg3的抑瘤作用无明显的剂量依赖性。SPG-Rg3与环磷酰胺联合应用具有协同增效趋势，但无统计学意义(P>0.05)，两药相互作用指数(CDI)>1。说明SPG-Rg₃与环磷酰胺在抑制肺鳞癌方面的协同作用不显著。

表5.SPG-Rg3对肺鳞癌的抑制作用

P值为各组与空白对照组比较；^▲各剂量组间比较，P>0.05；^#P值为与阳性对照组比较

表6.SPG-Rg3对LTEP-78肺鳞癌瘤体积(cm³)的影响(x±s，n＝5)

^*P值<0.05，^**P<0.01，^***P<0.001，各用药组不同接种时间与相应空白对照组比较

实施例2

本实施例涉及的是SPG-Rg3对非小细胞肺癌组织的CD34表达及非小细胞肺癌细胞凋亡基因表达的影响

一、实验材料与实验方法

1.主要试剂：CD34单克隆抗体及SP试剂盒(均购于福州迈新)；TUNEL凋亡试剂盒(罗氏公司)

2.实验仪器：FV500激光共聚焦显微镜(OLYMPUS)；石蜡切片机(德国LEICA公司，RM 2245)；免疫组化染色孵育盒，显微镜(OLYMPUS BX51，日本)。

3.免疫组化染色方法：分别取空白对照组及SPG-Rg3(1.0mg/kg)治疗组的肿瘤组织(H460大细胞肺癌及A549肺腺癌)于10％中性缓冲甲醛中固定24h，石蜡包埋，连续切片(4μm)，CD34染色均采用SP法，按试剂盒说明逐步操作。各组标本同一批染色，以PBS代替一抗作阴性对照。步骤如下：

(1)脱蜡：I二甲苯30min→II二甲苯30min→100％I酒精5min→100％II酒精5min→95％I酒精5min→95％II酒精5min→80％酒精5min→水洗

(2)热修复抗原：将切片侵入0.01M枸橼酸盐缓冲液(pH6.0)，电炉或微波炉加热至沸腾后断电，间隔5-10min后，反复1-2次，冷却后PBS洗涤1-2次。

(3)蛋白酶K(20μg/ml)消化石蜡切片5min，PBS洗。

(4)滴加3％H₂O₂阻断剂，阻断30min。PBS洗3次×5min。

(5)滴加5％正常山羊血清，封闭30min。

(6)甩去正常山羊血清，滴加适当稀释(1：50-1：100)一抗4℃孵育过夜。PBS洗3次×2min。

(7)滴加生物素化山羊抗小鼠IgG(或兔、人IgG)，室温20min，PBS洗涤2×3min。

(8)滴加SABC(链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物)20min PBS洗涤4×5min。

(9)DAB显色，使用DAB显色试剂盒。取1ml蒸馏水，加试剂盒中A，B，C试剂各1滴，混匀后加至切片，室温显色，镜下控制反应时间，蒸馏水终止反应。

(10)半氧化苏木素复染，盐酸酒精分化，流水冲洗返蓝1分钟，梯度酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封片，多功能显微镜观察并采集图像。

4.肿瘤细胞凋亡检测步骤：

(1)在室温下将片子浸入二甲苯30min组织脱蜡。重复一次。

(2)室温下按次序将片子浸入到100％I酒精5min→100％II酒精5min→95％I酒精5min→95％II酒精5min→80％酒精5min→0.85％NaCl5min。

(3)在室温下浸入片子到PBS5min冲洗样本。

(4)在室温下将片子到4％游离甲醇甲醛溶液中15min固定组织块。

(5)在室温下浸入片子到PBS5min冲洗样本。重复一次。

(6)除去组织中的液体，把片子放平，用蛋白酶K(20ug/ml)，室温下孵育15min。

(7)在室温下浸入片子到PBS5min冲洗样本。

(8)在室温下将片子到4％游离甲醇甲醛溶液在PBS中5min固定组织块。

(9)在室温下浸入片子到PBS5min冲洗样本。重复一次。

(10)去除片子上多余的液体，用100微升平衡液覆盖组织。在室温下平衡5-10min。

(11)在组织平衡时，在冰上溶解核苷酸混合物。为所有的实验准备充足的rTdT培养液。

(12)在组织上滴加孵育液，用塑料盖盖住组织，避光孵育片子在37℃1h。

(13)移去塑料盖，在室温下把片子浸入到2×SSC的染缸中终止反应。

(14)在室温下浸入片子到PBS5min冲洗样本。重复二次。

(15)PI复染5min，PBS洗涤3×5min

(16)甘油封片，在激光共聚焦显微镜下观察。

4.结果判定：

4.1 CD34判断标准：CD34标记微血管，阳性细胞胞浆呈棕黄色，计算肿瘤内着色的毛细血管和微小血管来计数肿瘤微血管密度(MVD)。按照Weidner(参见WeidnerN，Semple JP，Welch WR，et al.Tumor angiogenesis andmetastasis：correlation in invasivebreast carcinoma[J].New Eng J Med，1991，324(1)：1-8)的评判标准，凡呈现棕黄色单个内皮细胞或内皮细胞簇均作为1个血管计，但肌层较厚及管腔面积大于8个红细胞直径的血管不计数。计数方法，首先用低倍镜(100×)扫视整张切片，确定微血管最密集的3个视野(新生血管热点区)，然后在高倍镜(400×)视野范围内计数所有染色的微血管。取3个视野计数结果的均数为该切片的微血管数。

4.2 TUNEL染色结果观察：荧光显微镜下(400×)随机选取5个视野拍照，用Image-ProPlus v 5.1软件进行图片处理后计数每张图片的总细胞数及凋亡细胞数，并计算凋亡率(％)。

4.3统计学处理

数据应用SPSS 10.0统计软件分析。两组均数比较分别采用Studentst’s t-est，用Spearman相关系数表示两指标的相关性。实验结果用x±s表示。

二、实验结果

1、SPG-Rg3对非小细胞肺癌组织的CD34表达的影响

CD34标记血管内皮细胞，肿瘤组织均有阳性表达(图7～图10)。内皮细胞被染成棕黄色，微血管有的形成管腔，有的仅为单个内皮细胞或内皮细胞簇，肿瘤边缘组织的MVD高于中央。SPG-Rg3治疗组瘤组织中MVD明显少于对照组(P<0.01)，详见表7。

表7.SPG-Rg3对A549肺腺癌及H406大细胞肺癌瘤组织血管密度及细胞凋亡的影响

SPG-Rg3组与空白对照组比较，^*P<0.001，^**P<0.0001

2、SPG-Rg3对非小细胞肺癌细胞凋亡基因表达的影响

免疫荧光结果显示，凋亡的细胞表现为细胞核内出现绿色颗粒；空白对照组瘤细胞凋亡细胞较少见或不见，而SPG-Rg3治疗组显示较多的凋亡细胞出现(图4～6)，凋亡率明显高于空白对照组(见表7及图11-A～图11-D)，说明SPG-Rg3能够促进肿瘤细胞的凋亡。

20(S)-人参皂苷Rg3能明显抑制非小细胞肺癌的生长，其作用机制与其促进肿瘤细胞凋亡及抑制肿瘤血管生成有关，与环磷酰胺联合应用的协同增效作用不明显。20(S)-人参皂苷Rg3能明显抑制非小细胞肺癌生长的作用属首次发现，为将20(S)-人参皂苷Rg3开发成一种治疗人非小细胞肺癌的药物提供了较充分的依据。

Claims (1)

1.20(S)-人参皂苷Rg3作为制备治疗LTEP-78肺鳞癌型非小细胞肺癌的药物中的应用。

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