CN101394862A - Hiv的治疗 - Google Patents

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Abstract

本发明描述了利用阿黑皮素原(POMC)和促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)肽及其产物治疗HIV的方法，以及所述肽在制备药物中的用途。

Description

HIV的治疗
发明领域
本发明涉及治疗HIV的方法，和POMC和/或CRF肽在制备用于治疗HIV的药物中的用途。
发明背景
人类免疫缺陷病毒/获得性免疫缺陷综合征(HIV/AIDS)的蔓延已经在全世界导致了超过两千万例的死亡，并且目前影响着大约4千万人。这对于特别是发展中国家具有严重的社会-经济影响。到目前为止，针对HIV和AIDS的唯一有效武器是治疗，特别是高活性的抗反转录病毒治疗(HAART)。然而，这不是在全世界可用的，具有毒性副作用，且经常是最需要的那些人不能得到治疗。因此，对有效治疗性HIV疫苗或预防性治疗的需要日益变得非常紧迫。
国际专利申请PCT/GB2005/050108描述了促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)和/或阿黑皮素原(POMC)肽在治疗患者一定范围病症中的用途。读者参考PCT/GB2005/050108，以获得一系列可以治疗的病症。国际专利申请WO03/004049和WO03/064472中描述了山羊血清产品的制备；现在我们相信该血清产品可以是可用于本发明的CRF和POMC肽的有用来源。
目前我们还发现CRF和/或POMC肽在治疗HIV，尤其是在患者中减少病毒负荷和/或增加CD4+和CD8细胞计数中是有用的。
CRF是在下丘脑中产生的肽，并且相信其参与压力反应。人CRF详细记述在OMIM的目录122560中(人的在线孟德尔遗传，可通过http://www.ncbi.nlm.nih.gov/进入)。人CRF的核苷酸和氨基酸序列也是已知的，且具有GENBANK登记号BC011031。人CRF序列和大小数据的知识容许技术人员确定关于非人CRF的对等信息，所述非人CRF包括山羊CRF。CRF还已知为促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)。
“CRF肽”意指任何具有相应序列、结构或功能的肽。对于技术人员应该清楚的是上文提及的GENBANK目录号中对于人CRF给出的规范核苷酸和/或氨基酸序列可以被改变到一定程度而不影响所述肽的结构或功能。特别地，等位基因的变体和功能突变体包含在该定义中。突变体可以包括保守的氨基酸取代；以及CRF的片段和衍生物。
据信向患者施用CRF刺激内源CRF的产生，内源CRF又刺激阿黑皮素原(POMC)及其相关成分肽的产生。
POMC是脑垂体(以及大量其他器官，某些肿瘤诸如黑素瘤，和正常皮肤细胞)中产生的肽(激素原)，其为一组对宿主施加许多影响的促肾上腺皮质激素的前体。POMC是下列各项的前体：α，β，γ促黑激素(MSH)；促皮质素(ACTH)；β和γ促脂解素(LPH)；和β内啡肽。这些激素全部是从一个单一的大前体POMC切割而成，且在本文中称为“POMC产物”。
人POMC详细记述在OMIM的目录176830中(人的在线孟德尔遗传，可通过http://www.ncbi.nlm.nih.gov/进入)。人POMC的核苷酸和氨基酸序列也已知，且具有GENBANK登记BC065832。人POMC产生具有分子量为31kDa的糖基化蛋白质前体。
“POMC肽”意指任何具有相应序列、结构或功能的肽。对于技术人员应该清楚的是上文提及的GENBANK目录号中对于人POMC给出的规范核苷酸和/或氨基酸序列可以被改变到一定程度而不影响肽的结构或功能。特别地，等位基因的变体和功能突变体包含在该定义中。突变体可以包括保守的氨基酸取代。“POMC肽”用于本文时，指任何起到下列各项的前体作用的肽：至少一种形式的MSH，ACTH，至少一种形式的LPH，β内啡肽，met-脑啡肽和leu-脑啡肽；和优选地所有α，β和γMSH；ACTH；β和γLPH；和β内啡肽，met-脑啡肽和leu-脑啡肽。
发明概述
按照本发明的第一个方面，提供了一种治疗HIV的方法，该方法包括向患者施用促肾上腺皮质素释放因子(CRF)肽。
该治疗可以用于获得下列效果中的一种或多种：病毒负荷的减少；CD4细胞的增多；或CD8细胞的增多。
我们相信该治疗能够成功地用于对抗人类患者中的HIV和AIDS。在不希望受到理论束缚的情形中，我们相信该治疗通过降低病毒复制和传播所必需的高活性免疫反应的水平，而限制并控制病毒在体内的传播。另外，能够控制由机会感染和随之发生的促炎细胞因子的生成所引起的炎症，所述机会感染和随之发生的促炎细胞因子的生成支持和刺激病毒复制和传播。同样地，它减少HIV患者中病毒的负荷，增加血液中CD4和CD8的计数，改善***，刺激食欲并显著改善HIV/AIDS患者的生活品质。
CRF可以是非人CRF；便利地是有蹄动物的CRF；且最优选地是山羊的CRF。已经令人惊讶地鉴定出山羊血清含有CRF，尤其是当山羊受到生理应力如放血或免疫的刺激时。这为本发明的药物组合物提供了便利的CRF来源。还认为CRF在患者中可能具有自身维持功效，因为施用最初量的CRF在患者体内导致CRF的内源生成；因此，最初施用的低水平CRF可能对患者具有显著作用，包括POMC肽水平的增高。当然，可以使用获自除山羊以外的动物的肽，以及重组体或肽的其他来源。
用于本发明时，肽的施用可以通过口服或肠胃外实现。肠胃外递送的方法包括局部、动脉内、肌内、皮下、髓内、鞘内、心室内、静脉内、腹膜内或鼻内施用。除活性成分外，施用的组合物可以包括适合的药用载体，其包括赋形剂和其他促进将所述活性化合物加工成为适于药物施用的制剂的成分。
利用在适于口服施用的剂量中的本领域已知药用载体可以配制用于口服施用的药物组合物。所述载体能将该组合物配制成为适于患者摄入的片剂、丸剂、糖锭剂、胶囊、液体、凝胶、糖浆、结晶浆液，混悬液等。
可以通过将活性化合物与固体赋形剂组合，在如果需要添加合适的另外的化合物以获得片剂或糖锭剂核之后，任选研磨得到的混合物，加工颗粒的混合物，获得用于口服应用的药物制剂。合适的赋形剂包括碳水化合物或蛋白质填料，如糖，包括乳糖，蔗糖，甘露醇，山梨糖醇，来自玉米、小麦、水稻、马铃薯、或其它植物的淀粉；纤维素，如甲基纤维素，羟丙基甲基纤维素，或羧甲基纤维素钠；和树胶包括***树胶和黄芪胶；以及蛋白质明胶和胶原蛋白。如果需要，可以添加崩解剂或增溶剂，如交联的聚乙烯吡咯烷酮，琼脂，褐藻酸或其盐。
可对糖锭剂核提供合适的包衣，如浓缩的糖溶液，其还可包含***树胶，滑石，聚乙烯吡咯烷酮，卡波普凝胶，聚乙二醇，二氧化钛，漆溶液，和合适的有机溶剂或溶剂混合物。可将染料或颜料添加到片剂或糖锭剂包衣，以用于产品识别或表征活性化合物的量。
可以口服使用的药物制剂包括由明胶制备的压入配合(push-fit)胶囊，以及由明胶和包衣如甘油或山梨糖醇制备的软的、密封的胶囊。压入配合胶囊可包含与下列各项混合的活性成分：填料或粘结剂如乳糖或淀粉，润滑剂如滑石或硬脂酸镁，和任选的稳定剂。在软胶囊中，所述活性化合物可被溶解或悬浮在合适的液体中，如脂肪油，液体石蜡，或液体聚乙二醇中，具有或不具有稳定剂。
用于肠胃外施用的药物制剂包括活性化合物的水溶液。对于注射，可将本发明的药物组合物配制在水溶液中，优选地在生理相容的缓冲液如Hank’s溶液，林格溶液或生理盐水中。水性混悬液注射液可包含增加所述混悬液粘度的物质，如羧甲基纤维素钠，山梨糖醇或葡聚糖。另外，活性化合物的混悬液可被制备为适当的油性注射混悬液。合适的亲脂性溶剂或赋形剂包括脂肪油如芝麻油；或合成的脂肪酸酯，如油酸乙酯或甘油三酯；或脂质体。任选的，混悬液还可包括合适的稳定剂或增加化合物的溶解度以允许制备高度浓缩的溶液的试剂。
对于局部或鼻内施用，可在制剂中使用适于穿透特定屏障的渗透剂。
基本上依据本领域已知的标准制备方法可以制备用于本发明的药物组合物。
用于本发明的肽或组合物可以被冻干。这提高产物的储存期和稳定性，并改善可运输能力。这尤其有利于在温暖的气候和不容易获得冷藏设备的地方使用。冻干的产物能够在施用前重建。
本方法可以进一步包括施用一种或多种肽调节或释放因子，其可诱导患者的各种细胞对另外的肽的级联释放。这类另外的因子优选源自与CRF相同的来源，特别是山羊血清。其中，合适的因子包括α-HLA，TGF-β，和IL-10。
在优选的实施方案中，本方法可包括施用血管升压素，β内啡肽和脑啡肽中的一种或多种。在某些实施方案中，本方法可包括施用CRF结合蛋白，CRF-BP。它结合CRF并且可作为存储库用于对患者进行CRF的随后释放。
本方法还可包括施用POMC肽或POMC产物；某些POMC产物可以有效施用给患者刺激进一步的生产，或其可有效用于在产生内源POMC前获得理想的应答。
本发明另一方面提供治疗HIV的方法，其包括向患者施用POMC肽和/或POMC产物。
优选地，POMC是非人POMC；适宜地是有蹄动物POMC；最优选地是山羊POMC。尽管POMC在脑垂体中产生，因而没有预测其存在于血清中，至少是以显著的水平存在，然而，令人惊讶地鉴定到山羊血清包括POMC，POMC-相关的肽，和与POMC级联相关的分子，特别是当山羊受到生理应力如放血或免疫所刺激的时候。这为本发明的药物组合物提供了便利的POMC来源。还认为POMC在患者中具有自身维持功效，因为施用最初量的POMC后导致患者中内源POMC的产生；因此，最初施用的低水平POMC对患者具有显著作用。如同CRF肽一样，当然可以使用除山羊外的其他POMC肽来源，包括重组的POMC。
据信，通过对受试者施用POMC及其相关分子，肽被蛋白酶水解，以提供一种或多种以受试者易于利用的形式的POMC的产物；还存在对刺激下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA)的分子级联的诱导。
依照本发明的其它方面，提供了一种治疗HIV的方法，其包括施用两种或多种α、β和γ促黑激素(MSH)；促皮质素(ACTH)；β和γ促脂解素(LPH)；和β内啡肽。考虑到在施用时POMC可能的蛋白水解，可能通过施用两种或多种衍生自POMC的个体激素可以实现相似的作用。可提供所列举的激素作为个体肽，或作为一种或多种前体分子(例如，POMC的部分分解产物)。优选地，在药物组合物中包括三种、四种、五种、六种或七种激素，其(任选地与CRF一起)诱导持续产生这类分子的级联反应。可以以与一种或多种载体分子的组合来提供各种成分，所述载体分子结合一种或多种成分，并且因而作为释放所述成分的贮存库或贮存池。载体分子还可与POMC和其相关肽组合使用。
POMC或CRF肽的最佳剂量尚未确定；然而可以适宜地对受试者施用0.01-10mg/kg的剂量；更优选0.01-5mg/kg，0.025-2mg/kg，并且最优选0.05-1mg/kg的剂量。
施用的精确剂量可根据因素如患者的年龄、性别和体重，施用的方法和剂型，以及待治疗的疾病的性质和严重性而变化。可以考虑其它因素如饮食，施用时间，患者的状态，药物组合和反应灵敏性。通过负责治疗的临床医师可确定有效的治疗方案。可进行一次或多次施用，并且典型地，在一系列至少三次、五次或更多次施用后观察益处。对于维持所述组合物的有益功效而言重复施用可以是理想的。
尽管可以使用的备选途径包括肌内或损害内注射，口服，气雾剂，肠胃外或局部途径，治疗可以通过任何有效途径，优选通过皮下注射而进行。
尽管可使用其它制剂，治疗优选作为液体制剂来进行。该液体制剂可以从冻干制剂重建。例如，所述治疗可以与适当的药用载体混合，并且可以配制成在适当的组合物中的固体(片剂，丸剂，胶囊，颗粒等)用于口服、局部或肠胃外施用。
本发明还提供了CRF在制备用于治疗HIV的药物中的应用。本发明还提供了POMC中制备用于治疗HIV的药物中的应用。CRF或POMC可以是被分离的、纯化的CRF或POMC，尽管优选地，它们与上文所讨论的多种其它成分组合施用。具体地，可使用生物活性载体蛋白和血管升压素。
附图简述
现在，将仅仅通过参考附图的举例方式来描述本发明的这些和其方面，在附图中：
图1-4显示血清成分的胰蛋白酶消化的质谱分析；
图5-9显示在用所述组合物治疗后，关于在患者的炎症模式(profile)中转换的证据。
发明详述
国际专利公布WO03/004049和WO03/064472描述了山羊血清组合物的生成。以下给出该生产方法的概括。
血清组合物的制备
通过利用肌内注射浓度为109病毒颗粒/ml的HIV 3b，肌内注射混悬于正常商业上清液中的裂解的HIV-3b病毒来接种山羊。预先在60℃对该病毒进行了30分钟的热杀死。在最佳程序中，每周注射该山羊，注射4周，然后在第6周时，对该动物进行采血，从而获得该试剂。
在无菌技术下从山羊采取约400cc的血液。典型地，一旦血液的体积得到补充，动物可以在10—14天后再次采血。预采血的方案对于刺激血清的活性组分的产生是有用的。除非另外指明，全部后继制备步骤优选地在4℃进行。然后将所述血液离心以分离血清，然后将血清过滤以去除大的凝块和特定的物质。然后将血清用过饱和的硫酸铵(47％的溶液，于4℃，处理，以沉淀抗体和其它物质。将得到的溶液在Beckman J6M/E离心机中于3500rpm离心45分钟，之后去除上清液。将沉淀的免疫球蛋白和其它固体物质重悬浮于足以再溶解该沉淀的PBS缓冲液(磷酸盐缓冲液)中。
然后将溶液针对PBS缓冲液于4℃进行渗滤，截留分子量为10,000道尔顿。渗滤后，将产品经过0.2微米的滤器过滤到无菌的容器中，并将蛋白质浓度调整至4-5mg/ml。将溶液置于小瓶中，以提供1ml的单一剂量，并在使用前贮存于-22℃。
血清组合物的分析
PCT/GB2005/050108报道了以该方法制备的血清组合物含有POMC和CRF肽，并提示了这些肽在该血清的功效中的积极作用。以下给出了血清分析的概括。
将组合物样品在凝胶上进行大小分级，并且利用针对β内啡肽的抗体进行蛋白印迹分析。检测到强烈的信号，表明存在β内啡肽，尽管表观分子量接近31kDa，远大于β内啡肽的预期大小。这提示β内啡肽作为较大肽的一部分存在于样品中；所述大小与POMC的大小相一致。
我们还对组合物进行了质谱分析，并且已经检测到至少两种POMC-衍生的肽，β内啡肽和促肾上腺皮质激素相关的分子。也已鉴定了CRH-BP(促肾上腺皮质激素释放激素结合蛋白)。
图1-4
通过Thermofinnegan LCQ质谱已在产品中鉴定了POMC肽和CRF-BP。CRF主要调节ACTH在垂体前叶中的合成和分泌。认为除了CRF和CRF-BP外施用POMC和/或其组分肽启动了级联效应，因而增加了合成的和持续升高浓度的POMC肽的产生。CRF-BP具有作为CRF的贮存库的能力。
图1-4显示获自产物的胰蛋白酶消化物的质谱分析的采样数(hits)，所述产物通过SDS-PAGE从污染蛋白分离。如上所述，这些分子的一些是POMC级联的诱导剂和调节剂。利用更多的焦点分析的进一步研究(如肽分馏，免疫沉淀和浓缩)将揭示存在更多的肽。图1显示存在POMC-衍生的促肾上腺皮质激素，图2显示存在CRF-BP，图3显示存在脑啡肽原A，图4显示存在脑啡肽原B。CRF-BP的存在提示所述产物中包括一些CRF，同时POMC和相关的肽也清楚地存在。
我们还研究了用所述血清组合物治疗对患者自身的血清的影响。下文描述这些影响。
在治疗的患者中，从促炎性TH-1模式到抗炎性TH-2细胞因子模式转换的 证据
图5显示在用上述制备的山羊血清产品治疗前后两组患者(健康的志愿者)血清中TGF-β的水平。两组患者(每组n＝3)表现出对于产生的TGF-β浓度的不同反应，但所有患者都响应治疗而表现出血清水平的增高(前血清＝治疗前患者的血清水平；第2次后和第5次后＝第2次和第5次施用后)。该数据显示治疗诱导增加浓度的抗炎细胞因子TGF-β。
图6显示在治疗前(前血清)和治疗后在一组患者血清中IL-4的水平。可见治疗后(第2次施用后)，在患者血清(n＝5)中IL-4水平显著增加。然而，在第5次施用后，在所有患者中IL-4水平下降，但相比于治疗前还是较高。已知IL-4下调TH-1细胞的促炎细胞因子产生。可能是在所有患者中所见到的浓度的一致变化与IL-4在TH-1至TH-2转换中的作用相一致。
图7显示在治疗前后在一组患者血清中的IL-6水平。可见在治疗后(第2次施用后和第5次施用后)，患者血清(n＝4)中IL-6的水平降低。
图8显示在治疗前后在一组患者血清中的IFN-γ水平。可见在治疗后(第2次施用后和第5次施用后)，在患者血清中IFN-γ的水平降低。
图9显示人外周血细胞(PBMCs)的治疗在单核亚群中诱导抗炎细胞因子IL-10的产生。T和B淋巴细胞和单核细胞分离自从人志愿者获得的PBMC。将所有细胞类型用等剂量的产物处理16小时，并且利用ELISA对它们的上清液分析IL-10含量。可见由T细胞群产生的IL-10水平不受治疗的影响，并且在B细胞中仅诱导了IL-10的少量增加，然而，通过所述治疗在单核细胞群中诱导了IL-10浓度的显著增加。所有的测定重复三次，并+/-标准偏差来进行。这些数据是至少三次独立实验的代表。
总结和结论
我们在上文和PCT/GB2005/050108中显示了如上所述的山羊血清产品含有POMC肽和产物，和CRF肽。我们还显示了该血清产品的施用诱导患者炎性模式的转换。
WO03/004049描述了如上所述制备的山羊血清产品用于治疗患有HIV的患者的应用。该公布中提示了该血清对HIV的有益效果是由于抗-FAS和抗-HLA分子的存在而产生的；没有可能存在POMC或CRF的提示。该公布观察到经该血清给药的患者经历了CD4和CD8细胞计数的增多，病毒负荷的减少和P24值的降低。
WO02/07760还描述了制备和使用相同的山羊血清产品以治疗患有HIV的患者。该公布报道了显示出体外SIV中和作用的试验数据。该公布的实施例3描述了以如上所述的相同方法制备山羊血清产品。该血清的施用导致HIV病毒负荷的减少(定义为HIV-1RNA拷贝数/ml血浆)，和CD4与CD8细胞计数的增多。再一次，没有作出这些特性可以由POMC或CRF肽的存在而产生的提示。
考虑到PCT/GB2005/050108的发现，以及本文中所提出的数据，所述数据是所述山羊血清产品含有POMC肽和产物，和CRF肽，且这些肽和产物是有活性的生物试剂，所以我们相信这些肽和产物在治疗人类患者中的HIV和/或AIDS可以是有效的，从而除其他效果以外获得病毒负荷的减少，CD4细胞计数的增多和CD8细胞计数的增多中的一种或多种效果。
还已知HIV诱导多种中枢神经***(CNS)损伤，其引起神经变性和一定范围的神经病理。这些包括HIV脑炎、HIV脑白质病，轴突损伤，和弥散性脑灰质萎缩，其与不同严重度的神经元损失相关。认为后者是由程序性细胞死亡过程所引起的。这些病症导致认知功能的丧失和痴呆。考虑到所述的POMC/CRF肽对神经变性病症的作用(见PCT/G2005/050108)，这样的肽很可能可以用于减轻HIV/AIDS的这些症状以及HIV/AIDS本身。
还报道了在感染了HIV的人中的下丘脑垂体肾上腺(HPA)轴有功能障碍。细胞因子网络的操作对控制HIV感染可能具有有益效果。刺激炎性细胞上的黑皮质素受体可能是改变HIV感染过程的有效治疗方法。在本文所述的血清产品中存在的源自阿黑皮素原的肽包括促肾上腺皮质素[ACTH(1-39)]，α-黑素细胞-刺激激素[α-MSH(1-13)]，和相关的氨基酸序列。黑皮质素肽具有有力的抗炎/抗细胞因子活性。
在感染了HIV的患者体内，细胞因子诸如细胞白介素1(IL-1)和肿瘤坏死因子(TNF)可能是有害的。已经研究了黑皮质素对IL-1和TNF-α在HIV患者血液中的产生的作用。当在存在或缺乏α-MSH(1-13)，α-MSH(11-13)，ACTH(1-24)，或ACTH(1-39)的条件下，在受到LPS刺激的全血样品中测量细胞因子的产生时，发现了黑皮质素以浓度依赖的方式减少这两种细胞因子的产生。在对正常外周血单核细胞(PBMC)的独立试验中，发现α-MSH(1-13)抑制IL-1β和TNF-α的产生，所述IL-1β和TNF-α是由HIV包膜糖蛋白gp120所诱导的。这些结果提示刺激炎性细胞中的黑皮质素受体可能是减少促进HIV复制的细胞因子产生的新型方法。
POMC和CRF肽及产物，单独地或者组合地，提供新型药品，该药品具有调节HPA轴和起到黑皮质素来源和产生黑皮质素的调节剂作用的能力。具体地，似乎将高活性促炎性TH1细胞因子转换为抗炎性TH2模式。由此调节炎性细胞因子的产生和释放。
存在支持这样的观念的证据，所述观念是单核细胞-巨噬细胞的感染通过多种途径促进HIV的感染。在AIDS中由机会感染引起的NF-kB活化增加CCR5受体的表达和TNF-α的表达，这二者容许持续的HIV感染。另外，发现病毒负荷的减少与对感染的和/或发炎的组织的治疗相关；这进一步支持免疫活化和病毒复制之间的联系。因此，用POMC/CRF肽和/或产物治疗患者会减少患者内细胞的传染性，并可能减少感染向身体器官如脑的传播，所述POMC/CRF肽和/或产物减少组织炎症和促炎细胞因子水平和巨噬细胞活化水平。

Claims (13)

1.一种治疗HIV的方法，其包括向患者施用促肾上腺皮质素释放因子(CRF)肽。
2.权利要求1的方法，其中获得了下列效果中的一种或多种：病毒负荷的减少；CD4细胞的增多；或CD8细胞的增多。
3.权利要求1的方法，其中所述CRF是非人CRF。
4.权利要求3的方法，其中所述CRF是山羊CRF。
5.权利要求1至4中任一项的方法，其进一步包括施用一种或多种肽调节或释放因子。
6.权利要求5的方法，其中所述因子选自包括α-HLA，TGF-β，和IL-10的组。
7.前述权利要求中任一项的方法，其包括施用血管升压素，β内啡肽和脑啡肽中的一种或多种。
8.前述权利要求中任一项的方法，其包括施用CRF结合蛋白，CRF-BP。
9.前述权利要求中任一项的方法，其包括施用POMC肽或POMC产物。
10.一种治疗HIV的方法，其包括向患者施用POMC肽和/或POMC产物。
11.一种治疗HIV的方法，其包括施用α，β和γ促黑激素(MSH)；促皮质素(ACTH)；β和γ促脂解素(LPH)；和β内啡肽中的两种或更多种。
12.CRF肽在制备用于治疗HIV的药物中的用途。
13.POMC肽和/或POMC产物在制备用于治疗HIV的药物中的用途。
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Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2010054446A1 (en) * 2008-11-11 2010-05-20 Ademovic Zlatko Combination of two or more peptides in a single stable lyophilized pharmaceutical compound
EP2420563A4 (en) * 2009-02-24 2013-02-20 Kanazawa Medical University METHOD FOR DEUCTING NUCLEIC ERYTHROCYTE AND INDUCING NUCLEUS
AU2013282995B2 (en) 2012-06-25 2018-10-04 Aimsco Limited Formulation comprising CRH and alpha - 2 - immunoglobulin
US20130344102A1 (en) * 2012-06-25 2013-12-26 Aimsco Limited Formulation
GB201617175D0 (en) * 2016-10-10 2016-11-23 Iconic Intellectual Property Limited Assay
US11285192B2 (en) * 2019-03-13 2022-03-29 Adamis Pharmaceuticals Corporation Formulation including a combination of beta-endorphin and adrenocorticotropic hormone
AU2020237248A1 (en) * 2019-03-13 2021-10-28 Adamis Pharmaceuticals Corporation Formulation including a combination of beta-endorphin and adrenocorticotropic hormone

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4801612A (en) * 1986-07-03 1989-01-31 Regents Of The University Of California Method of inhibiting inflammatory response
US5137871A (en) * 1989-07-28 1992-08-11 Regents Of The University Of California Treatment to reduce edema for brain and musculature injuries
CN1301729A (zh) * 1999-12-24 2001-07-04 上海博德基因开发有限公司 一种新的多肽——促肾上腺皮质激素释放因子13和编码这种多肽的多核苷酸
AU2001275696A1 (en) * 2000-07-21 2002-02-05 Ice Biologics Limited Therapeutic agent
CN1361180A (zh) * 2000-12-26 2002-07-31 上海博德基因开发有限公司 一种新的多肽——促肾上腺皮质激素释放因子8.8和编码这种多肽的多核苷酸
WO2002067996A2 (de) * 2001-02-24 2002-09-06 Mologen Forschungs-, Entwicklungs- Und Vertriebs Gmbh Beta-endorphin / crf - gentherapie zur lokalen schmerzbekämpfung
US20100291102A1 (en) * 2001-07-02 2010-11-18 Ice Biologics Limited Therapeutic Agent
AU2003202093B2 (en) * 2001-07-02 2010-05-13 Aimsco Limited Treatment of MS with goat serum
WO2006021814A2 (en) * 2004-07-08 2006-03-02 Aimsco Limited Medicament
GB0509052D0 (en) * 2005-05-04 2005-06-08 Aimsco Ltd Combination therapy

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WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

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