CN101337060A - 宫炎康颗粒的质量控制方法 - Google Patents
宫炎康颗粒的质量控制方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101337060A CN101337060A CNA2008100737296A CN200810073729A CN101337060A CN 101337060 A CN101337060 A CN 101337060A CN A2008100737296 A CNA2008100737296 A CN A2008100737296A CN 200810073729 A CN200810073729 A CN 200810073729A CN 101337060 A CN101337060 A CN 101337060A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- solution
- methanol
- need testing
- water
- medicinal material
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 title claims abstract description 26
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 135
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 claims abstract description 72
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims abstract description 61
- YKRGDOXKVOZESV-WRJNSLSBSA-N Paeoniflorin Chemical compound C([C@]12[C@H]3O[C@]4(O)C[C@](O3)([C@]1(C[C@@H]42)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)C)OC(=O)C1=CC=CC=C1 YKRGDOXKVOZESV-WRJNSLSBSA-N 0.000 claims abstract description 57
- 210000000582 semen Anatomy 0.000 claims abstract description 23
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims abstract description 9
- YKRGDOXKVOZESV-UHFFFAOYSA-N paeoniflorin Natural products O1C(C)(C2(CC34)OC5C(C(O)C(O)C(CO)O5)O)CC3(O)OC1C24COC(=O)C1=CC=CC=C1 YKRGDOXKVOZESV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 9
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims abstract description 4
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 456
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 269
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 245
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical class CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 97
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 97
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 97
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 96
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 88
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 66
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 63
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 59
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 claims description 56
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 54
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 52
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 48
- 239000007921 spray Substances 0.000 claims description 46
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 42
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 40
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims description 36
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 claims description 36
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 33
- DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;sodium Chemical compound [Na].CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 31
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 claims description 31
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 claims description 31
- PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N aluminium oxide Inorganic materials [O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 31
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 claims description 31
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 31
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 31
- 235000019812 sodium carboxymethyl cellulose Nutrition 0.000 claims description 31
- 229920001027 sodium carboxymethylcellulose Polymers 0.000 claims description 31
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 28
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 27
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- FZRCKLPSHGTOAU-UHFFFAOYSA-N 6-amino-1,4-dimethylcyclohexa-2,4-diene-1-carbaldehyde Chemical compound CC1=CC(N)C(C)(C=O)C=C1 FZRCKLPSHGTOAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 23
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 claims description 23
- 239000003480 eluent Substances 0.000 claims description 20
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims description 20
- 239000012567 medical material Substances 0.000 claims description 19
- 101100433727 Caenorhabditis elegans got-1.2 gene Proteins 0.000 claims description 18
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 claims description 17
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims description 17
- 239000008101 lactose Substances 0.000 claims description 17
- 229940099352 cholate Drugs 0.000 claims description 16
- BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N cholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N 0.000 claims description 16
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 15
- 238000012856 packing Methods 0.000 claims description 15
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 12
- SIHHLZPXQLFPMC-UHFFFAOYSA-N chloroform;methanol;hydrate Chemical compound O.OC.ClC(Cl)Cl SIHHLZPXQLFPMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 claims description 12
- 239000004952 Polyamide Substances 0.000 claims description 11
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 11
- 229920002647 polyamide Polymers 0.000 claims description 11
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 11
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 10
- 238000007689 inspection Methods 0.000 claims description 10
- 238000007747 plating Methods 0.000 claims description 10
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims description 10
- 238000005303 weighing Methods 0.000 claims description 10
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 9
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 9
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 9
- YTJSFYQNRXLOIC-UHFFFAOYSA-N octadecylsilane Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC[SiH3] YTJSFYQNRXLOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 claims description 9
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- IBPFZCOJYVDKGN-UHFFFAOYSA-N OC.OC=O.ClC(Cl)Cl.CCOC(C)=O Chemical compound OC.OC=O.ClC(Cl)Cl.CCOC(C)=O IBPFZCOJYVDKGN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 238000003556 assay Methods 0.000 claims description 8
- 238000010992 reflux Methods 0.000 claims description 8
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 claims description 7
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 claims description 7
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 7
- 238000012850 discrimination method Methods 0.000 claims description 7
- -1 ethyl acetate-ethanol-formic acid-water Chemical compound 0.000 claims description 7
- 239000000945 filler Substances 0.000 claims description 7
- 230000003760 hair shine Effects 0.000 claims description 7
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 7
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 238000011003 system suitability test Methods 0.000 claims description 7
- MWOOGOJBHIARFG-UHFFFAOYSA-N vanillin Chemical compound COC1=CC(C=O)=CC=C1O MWOOGOJBHIARFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- FGQOOHJZONJGDT-UHFFFAOYSA-N vanillin Natural products COC1=CC(O)=CC(C=O)=C1 FGQOOHJZONJGDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 235000012141 vanillin Nutrition 0.000 claims description 7
- ROAYSRAUMPWBQX-UHFFFAOYSA-N ethanol;sulfuric acid Chemical compound CCO.OS(O)(=O)=O ROAYSRAUMPWBQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 230000002879 macerating effect Effects 0.000 claims description 5
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 claims description 4
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 4
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 4
- PQLVXDKIJBQVDF-UHFFFAOYSA-N acetic acid;hydrate Chemical compound O.CC(O)=O PQLVXDKIJBQVDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- DDNRNCSGIYDEMC-UHFFFAOYSA-N ethanol;formic acid Chemical compound CCO.OC=O DDNRNCSGIYDEMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- UREBWPXBXRYXRJ-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;methanol Chemical compound OC.CCOC(C)=O UREBWPXBXRYXRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000005374 membrane filtration Methods 0.000 claims 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 18
- 241000218176 Corydalis Species 0.000 abstract description 14
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 8
- 239000008187 granular material Substances 0.000 abstract description 7
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 abstract description 4
- 241000234314 Zingiber Species 0.000 abstract description 3
- 235000006484 Paeonia officinalis Nutrition 0.000 abstract 3
- 241001106477 Paeoniaceae Species 0.000 abstract 3
- 241000202726 Bupleurum Species 0.000 abstract 2
- 235000006886 Zingiber officinale Nutrition 0.000 abstract 2
- 235000008397 ginger Nutrition 0.000 abstract 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 17
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 15
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 13
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 12
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 10
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 241000228245 Aspergillus niger Species 0.000 description 8
- 241000222122 Candida albicans Species 0.000 description 8
- 229940095731 candida albicans Drugs 0.000 description 8
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 8
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 7
- 239000006153 eosin methylene blue Substances 0.000 description 7
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 7
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 6
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 6
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 6
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 6
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 description 5
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 5
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 5
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 5
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 5
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 4
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 4
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 4
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 4
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 4
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000628997 Flos Species 0.000 description 3
- 241000195474 Sargassum Species 0.000 description 3
- 241000489357 Sonchus brachyotus Species 0.000 description 3
- AEQDJSLRWYMAQI-UHFFFAOYSA-N Tetrahydropalmatine Natural products C1CN2CC(C(=C(OC)C=C3)OC)=C3CC2C2=C1C=C(OC)C(OC)=C2 AEQDJSLRWYMAQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- ONPSRCNNSZSSMH-UHFFFAOYSA-N chloroform;hexane;methanol Chemical compound OC.ClC(Cl)Cl.CCCCCC ONPSRCNNSZSSMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- 238000013112 stability test Methods 0.000 description 3
- AEQDJSLRWYMAQI-KRWDZBQOSA-N tetrahydropalmatine Chemical compound C1CN2CC(C(=C(OC)C=C3)OC)=C3C[C@H]2C2=C1C=C(OC)C(OC)=C2 AEQDJSLRWYMAQI-KRWDZBQOSA-N 0.000 description 3
- 239000000052 vinegar Substances 0.000 description 3
- 235000021419 vinegar Nutrition 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101000856746 Bos taurus Cytochrome c oxidase subunit 7A1, mitochondrial Proteins 0.000 description 2
- 235000008495 Chrysanthemum leucanthemum Nutrition 0.000 description 2
- 244000192528 Chrysanthemum parthenium Species 0.000 description 2
- 235000000604 Chrysanthemum parthenium Nutrition 0.000 description 2
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000961970 Plantago depressa Species 0.000 description 2
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 2
- 241000264279 Sargassum fusiforme Species 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 238000010812 external standard method Methods 0.000 description 2
- 235000008384 feverfew Nutrition 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 238000003808 methanol extraction Methods 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- QGPGUZIKJKOKRF-UHFFFAOYSA-M potassium;acetonitrile;dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].CC#N.OP(O)([O-])=O QGPGUZIKJKOKRF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 239000000341 volatile oil Substances 0.000 description 2
- 241001290610 Abildgaardia Species 0.000 description 1
- 241000382455 Angelica sinensis Species 0.000 description 1
- 241000510654 Bupleurum chinense Species 0.000 description 1
- 241000213015 Bupleurum scorzonerifolium Species 0.000 description 1
- 244000020518 Carthamus tinctorius Species 0.000 description 1
- 235000003255 Carthamus tinctorius Nutrition 0.000 description 1
- 241000830532 Corydalis yanhusuo Species 0.000 description 1
- 241000125183 Crithmum maritimum Species 0.000 description 1
- 244000075634 Cyperus rotundus Species 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 206010019133 Hangover Diseases 0.000 description 1
- 241000244365 Ligusticum sinense Species 0.000 description 1
- 241000729196 Lycopus lucidus Species 0.000 description 1
- 244000236658 Paeonia lactiflora Species 0.000 description 1
- 235000008598 Paeonia lactiflora Nutrition 0.000 description 1
- 241000124464 Paeonia veitchii Species 0.000 description 1
- 208000029082 Pelvic Inflammatory Disease Diseases 0.000 description 1
- 241000013557 Plantaginaceae Species 0.000 description 1
- 241001499733 Plantago asiatica Species 0.000 description 1
- 241000218201 Ranunculaceae Species 0.000 description 1
- 241000220317 Rosa Species 0.000 description 1
- 241000220690 Sargassum pallidum Species 0.000 description 1
- 241000238370 Sepia Species 0.000 description 1
- 244000111146 Sonchus arvensis Species 0.000 description 1
- 235000006731 Sonchus arvensis Nutrition 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 206010053615 Thermal burn Diseases 0.000 description 1
- 208000006374 Uterine Cervicitis Diseases 0.000 description 1
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 1
- PBCJIPOGFJYBJE-UHFFFAOYSA-N acetonitrile;hydrate Chemical compound O.CC#N PBCJIPOGFJYBJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 210000000941 bile Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 238000007664 blowing Methods 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 206010008323 cervicitis Diseases 0.000 description 1
- 239000012846 chemical reference substance Substances 0.000 description 1
- 229940126678 chinese medicines Drugs 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- UWBXIFCTIZXXLS-UHFFFAOYSA-L disodium;2,3,4,5-tetrachloro-6-(2,4,5,7-tetraiodo-3-oxido-6-oxoxanthen-9-yl)benzoate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)C1=C(Cl)C(Cl)=C(Cl)C(Cl)=C1C1=C2C=C(I)C(=O)C(I)=C2OC2=C(I)C([O-])=C(I)C=C21 UWBXIFCTIZXXLS-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 238000002481 ethanol extraction Methods 0.000 description 1
- INCWELKXTZCRSA-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;methanol;hydrate Chemical compound O.OC.CCOC(C)=O INCWELKXTZCRSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OAMZXMDZZWGPMH-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;toluene Chemical compound CCOC(C)=O.CC1=CC=CC=C1 OAMZXMDZZWGPMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009654 indole test Methods 0.000 description 1
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N methanol;hydrate Chemical compound O.OC GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000401 methanolic extract Substances 0.000 description 1
- 239000006916 nutrient agar Substances 0.000 description 1
- DHRLEVQXOMLTIM-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;trioxomolybdenum Chemical compound O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.OP(O)(O)=O DHRLEVQXOMLTIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 238000000611 regression analysis Methods 0.000 description 1
- 229960003138 rose bengal sodium Drugs 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 229960004793 sucrose Drugs 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 1
- 238000003809 water extraction Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明公开了一种宫炎康颗粒的质量控制方法。增订了柴胡、车前子和炮姜的薄层色谱鉴别，对赤芍特征成分芍药苷含量测定和薄层鉴别的供试品提取方法进行了纯化，同时增订了微生物的检查方法。本发明质量控制方法的车前子和赤芍薄层鉴别供试品溶液制备方法与柴胡一致，延胡索鉴别供试品溶液制备方法与炮姜一致，是一种检测项目更全面、含量测定方法分离度更好、赤芍薄层鉴别更清晰、质量控制指标更科学、合理、操作更简化、能进一步确保药品疗效的宫炎康颗粒的质量控制方法。
Description
技术领域
本发明属于中药技术领域，具体涉及宫炎康颗粒的质量控制方法。
背景技术
宫炎康颗粒处方收载于***药品标准中药成方制剂第二十册228页，标准代号为WS3-B-3921-98，具有活血化瘀，解毒消肿，用于慢性***的治疗。在临床上应用多年，取得比较令人满意的疗效。本品处方由当归90g、赤芍90g、北败酱240g、香附(醋制)90g、炮姜90g、泽兰90g、川芎60g、红花60g、柴胡90g、海藻90g、车前子(盐炙)120g、延胡索60g共12味药材，按以下工艺制备而成：延胡索粉碎成细粉，过筛；当归、香附、川芎、柴胡提取挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集，药渣与赤芍、炮姜、海藻、车前子加水煎煮二次，第一次2小时，第二次1小时，合并煎液，滤过，滤液与上述水溶液合并，药液备用，其余北败酱等三味加水煮沸后，于80℃温浸二次，第一次2小时，第二次1小时，滤过，合并以上各药液，浓缩至相对密度1.35(60℃)的清膏，取清膏1份、糊精1份、蔗糖粉2份与上述延胡索粉混匀，加乙醇适量，制成颗粒，干燥，喷入上述当归等挥发油，混匀，制成900g。处方中当归，为伞形科植物当归Angelica sinensis(Oliv.)Diels的干燥根；赤芍，为毛茛科植物芍药Paeonia lactiflora Pall.或川赤芍Paeonia veitchii Lynch的干燥根；北败酱，为菊科植物苣荬菜Sonchus arvensis L.的干燥全草；香附，为莎草科植物莎草Cyperus rotundus L.的干燥根茎，醋制香附炮制方法为，取香附粒(片)，照醋炙法(中华人民共和国药典2005年版附录II D)炒干；炮姜，为干姜的炮制加工品，干姜，为姜科植物姜Zingber officinale Rose.的干燥根茎，炮姜炮制方法为，取净干姜，照烫法(中华人民共和国药典2005年版附录II D)用沙烫至鼓起，表面棕褐色；泽兰，为唇形科植物毛叶地瓜儿苗Lycopus lucidus Turcz.var.hirtus Regel的干燥地上部分；川芎，为伞形科植物川芎Ligusticum chuanxiong Hort.的干燥根茎；红花，为菊科植物红花Carthamustinctorius L.的干燥花；柴胡，为伞形科植物柴胡Bupleurum chinense DC.或狭叶柴胡Bupleurum scorzonerifolium Willd.的干燥根；车前子，为车前科植物车前Plantagoasiatica L.或平车前Plantago depressa Willd.的干燥成熟种子。车前子(盐炙)，取净车前子，照盐水炙法(中华人民共和国药典2005年版附录II D)炒至起爆裂声时，喷洒盐水，炒干；海藻，为马尾藻科植物海蒿子Sargassum pallidum(Turn.)C.Ag.或羊栖菜Sargassum fusiforme(Harv.)Setch.的干燥藻体；延胡索，为罂粟科植物延胡索Corydalisyanhusuo W.T.Wang的干燥块茎。
原质量标准仅对处方中药味赤芍的特征成分——芍药苷进行了薄层色谱鉴别，但其鉴别图谱背景较深，鉴别效果不理想，供试品溶液需要进一步纯化。至今为止，也已有多篇文献公开了处方中药味赤芍特征成分——芍药苷的含量测定方法，但公开的供试品溶液纯化仍不够，杂质多，测定时色谱柱易受污染，色谱峰易受杂峰干扰，分离度不够好。文献《宫炎康颗粒质量标准研究黑龙江医药2005.3》和《宫炎康颗粒的薄层鉴别研究黑龙江中医药2006.5》分别公开了处方中药味当归、延胡索的薄层色谱鉴别和处方中药味当归、川芎的薄层鉴别和延胡索的薄层色谱鉴别，但发现当归和川芎鉴别斑点不圆整，重现性不好，阴性背景较深。综上所述，现有的宫炎康质量控制方法仅对处方12味药材中的4味建立了质量检验方法，不仅检验项目不够全面，且方法没有达到理想效果，因此需要寻求更全面更好的质量控制方法。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种检验项目更全面，含量测定分离度更好，赤芍薄层鉴别更清晰，质量控制指标更科学、合理，操作更简化、可进一步确保药品疗效的宫炎康颗粒的质量控制方法。
本发明以如下技术方案解决上述技术问题：
宫炎康颗粒的质量控制方法，该方法包括以下步骤中的一种或多种：
1、用薄层色谱法对药物中的柴胡进行定性鉴别：取本品9g，研细，加甲醇或乙醇20～40ml，超声处理或加热回流或温浸10～60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加热水10～30ml分次溶解，置分液漏斗中，放冷，用***或甲苯或三氯甲烷振摇提取1～4次，每次15～30ml，弃去(***或甲苯或三氯甲烷)提取液，水溶液用水饱和的正丁醇振摇提取2～4次，每次15～30ml，合并(正丁醇)提取液，用正丁醇饱和的水或水洗涤1～4次，每次10～40ml，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1～3ml使溶解，加中性氧化铝1～3g(100～200目)，拌匀，蒸干，加于中性氧化铝柱(2～6g，100～200目，内径9mm，干法装柱)上，用50～80％的甲醇20～50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇或乙醇1～3ml使溶解，作为供试品溶液。取柴胡对照药材1g，同供试品溶液制备方法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述供试品溶液和对照药材溶液各3～10ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(12～18∶3～6∶0.3～0.8)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以含2％～4％对二甲氨基苯甲醛的40％硫酸溶液或10％硫酸乙醇溶液，在100～105℃加热至斑点显色清晰，分别置日光及紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，日光下显相同颜色的斑点，紫外光下显相同颜色的荧光斑点。
2、用薄层色谱法对药物中的车前子进行定性鉴别：取车前子对照药材2g，照1项下供试品溶液制备方法，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年一部附录VI B)试验，吸取对照药材溶液及1项下的供试品溶液各3～10ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷或乙酸乙酯-甲醇或乙醇-甲酸或冰乙酸-水(8～20∶2～4∶1∶0.5～0.8)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以含2％对二甲氨基苯甲醛的40％硫酸溶液或10％硫酸乙醇，在60～85℃加热或用热风吹至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显一个相同颜色的荧光主斑点。
3、用薄层色谱法对药物中的炮姜进行定性鉴别：取本品9g，研细，加甲醇或乙醇20～40ml，超声处理或加热回流或浸泡10～60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水15～30ml使溶解，用浓氨试液或1～3％NaOH溶液或2～5％的Na2CO3溶液调pH值至7～9，用***或甲苯或三氯甲烷振摇提取1～3次，每次15～30ml，合并(***或甲苯或三氯甲烷)提取液，挥干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取炮姜对照药材1g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述供试品溶液5～10ul，对照药材溶液1～3ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-丙酮(10～15∶2～3∶0.3～0.8)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液或硫酸乙醇溶液(2→10)，在100～105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
4、用薄层色谱法对药物中的赤芍特征成分——芍药苷进行定性鉴别：取芍药苷对照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取1项下供试品溶液和上述对照品溶液各3～10ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(16～20∶1～2.5∶3～5∶0.1～0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液或10％硫酸乙醇溶液或含2％～4％对二甲氨基苯甲醛的40％硫酸溶液，在100～105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
5、用高效液相色谱法测定该药物中赤芍特征成分——芍药苷的含量：
照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定。
色谱条件与***适应性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.1％磷酸溶液(12.5～16∶84～87.5)为流动相；检测波长为230nm。理论板数按芍药苷计算应不低于5000。
对照品溶液的制备精密称取芍药苷对照品适量，加50％甲醇制成每1ml中含40μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备：本品研细，取2g，精密称定，置100ml具塞锥形瓶中，精密加入水/30％甲醇/50％甲醇/甲醇50ml，称定重量，超声处理10～30min，放冷，称定重量，用水/30％甲醇/50％甲醇/甲醇补足损失的重量，摇匀，滤过，取续滤液10ml，水浴蒸干，残渣加水10ml使溶解，上大孔树脂/氧化铝/聚酰胺柱，用水/10％甲醇/20％甲醇/30％甲醇80ml洗脱，收集流出液和洗脱液，蒸干，残渣加50％甲醇使溶解并转移至10ml量瓶内，加50％甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液20μl、供试品溶液10～20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品每袋含赤芍以芍药苷(C23H28O11)计，不得少于7.0mg。
6、按以下方法检查本品的微生物：
取本品10g，加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，混匀，作为1∶10的供试液。
细菌数取1∶10的供试液1ml注入平皿中，平行制备2个平皿，按平皿法测定。
霉菌和酵母菌数取1∶10的供试液1ml注入平皿中，平行制备2个平皿，按平皿法测定。
大肠埃希菌取1∶10的供试液10ml接种至100ml胆盐乳糖培养基中，依法检查。
大肠菌群取10ml的胆盐乳糖发酵培养基管3支，分别加入1∶10、1∶100、1∶1000的供试液1ml，依法检查。
本品细菌数每1g不得过10000个，霉菌和酵母菌数每1g不得过100个，大肠埃希菌每1g不得检出，大肠菌群每1g应小于100个。
优选的技术方案包括下列步骤中的一种或多种：
1、用薄层色谱法对药物中的柴胡进行定性鉴别：取本品9g，研细，加甲醇40ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加热水20ml分次溶解，置分液漏斗中，放冷，用***振摇提取3次，每次20ml，弃去***提取液，水溶液用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇提取液，用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次20ml，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，加中性氧化铝1g(100～200目)，拌匀，蒸干，加于中性氧化铝柱(3g，100～200目，内径9mm，干法装柱)上，用80％的甲醇30ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。取柴胡对照药材1g，照供试品溶液制备方法，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取对照药材溶液及供试品溶液各6ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(15∶4.5∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以含4％对二甲氨基苯甲醛的40％硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，分别置日光及紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，日光下显相同颜色的斑点，紫外光下显相同颜色的荧光斑点。
2、用薄层色谱法对药物中的车前子进行定性鉴别：取车前子对照药材2g，照1项下供试品溶液制备方法，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年一部附录VIB)试验，吸取对照药材溶液及1项下的供试品溶液各6ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-乙醇-甲酸-水(16∶3∶1∶0.8)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以含2％对二甲氨基苯甲醛的40％硫酸溶液，在80～85℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显一个相同颜色的荧光主斑点。
3、用薄层色谱法对药物中的炮姜进行定性鉴别：取本品9g，研细，加甲醇40ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用浓氨试液调pH值至8，用***振摇提取2次，每次20ml，合并***提取液，挥干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取炮姜对照药材1g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述供试品溶液10ul、对照药材溶液2ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-丙酮(15∶3∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以硫酸乙醇溶液(2→10)，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
4、用薄层色谱法对药物中的赤芍特征成分——芍药苷进行定性鉴别：取芍药苷对照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述对照品溶液和1项下的供试品溶液各6ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(20∶2.5∶5∶0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
5、用高效液相色谱法测定该药物中赤芍特征成分——芍药苷的含量：
照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定。
色谱条件与***适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.1％磷酸溶液(12.5∶87.5)为流动相；检测波长为230nm。理论板数按芍药苷计算应不低于5000。
对照品溶液的制备精密称取芍药苷对照品适量，加50％甲醇制成每1ml中含40μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备本品研细，取2g，精密称定，置100ml具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇50ml，称定重量，超声处理10分钟，放冷，再称定重量，用50％甲醇补足损失的重量，摇匀，滤过，取续滤液10ml，蒸干，残渣加水10ml使溶解，加于聚酰胺柱(3g，30～60目，内径1cm，干法装柱)上，用水80ml洗脱，收集流出液与洗脱液，蒸干，残渣加50％甲醇使溶解并转移至10ml量瓶内，加50％甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45um)滤过，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液20μl、供试品溶液10～20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品每袋含赤芍以芍药苷(C23H28O11)计，不得少于7.0mg。
6、按以下方法检查本品的微生物：
取本品10g，加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，混匀，作为1∶10的供试液。
细菌数取1∶10的供试液1ml注入平皿中，平行制备2个平皿，按平皿法测定。
霉菌和酵母菌数取1∶10的供试液1ml注入平皿中，平行制备2个平皿，按平皿法测定。
大肠埃希菌取1∶10的供试液10ml接种至100ml胆盐乳糖培养基中，依法检查。
大肠菌群取10ml的胆盐乳糖发酵培养基管3支，分别加入1∶10、1∶100、1∶1000的供试液1ml，依法检查。
本品细菌数每1g不得过10000个，霉菌和酵母菌数每1g不得过100个，大肠埃希菌每1g不得检出，大肠菌群每1g应小于100个。
本发明主要特点在于车前子和赤芍薄层鉴别供试品溶液制备方法与柴胡一致，延胡索鉴别供试品溶液制备方法与炮姜一致。本发明宫炎康颗粒的质量控制方法，是一种检测项目更全面，含量测定方法分离度更好，赤芍薄层鉴别更清晰，质量控制指标更科学、合理，操作更简化的能进一步确保药品疗效的宫炎康颗粒的质量控制方法。
具体实施方式：
本发明的质量控制方法是经过大量的筛选得到的最佳方案，以下试验研究为本发明的筛选过程。
一、柴胡的薄层色谱鉴别
供试品溶液的制备方法比较：
方法一：取本品9g，研细，加乙醇30ml，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml溶解，加以水饱和的正丁醇提取二次，每次25ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水提取二次，每次10ml，弃去水液，正丁醇层蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。
方法二：取本品9g，研细，加甲醇40ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加热水20ml分次溶解，置分液漏斗中，放冷，用***振摇提取3次，每次20ml，弃去***提取液，水溶液用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇提取液，用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次20ml，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，加中性氧化铝1g(100～200目)，拌匀，蒸干，加于中性氧化铝柱(3g，100～200目，内径9mm，干法装柱)上，用80％的甲醇30ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。
方法三：取本品9g，研细，加甲醇40ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml微热分次溶解，置分液漏斗中，放冷，用***提取3次，每次20ml，弃去***提取液，分取水溶液层，用水饱和的正丁醇提取2次，每次20ml，合并正丁醇提取液，用水洗涤2次，每次20ml，弃去水洗涤液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，加1g中性氧化铝，拌匀，蒸干，加在中性氧化铝柱(100～200目，3g，内径9mm，干法装柱)上，用甲醇30ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。
方法四：接方法三，再用75％甲醇30ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。
方法五：取本品9g，研细，加甲醇20ml，温浸60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml微热分次溶解，置分液漏斗中，放冷，用三氯甲烷提取4次，每次15ml，弃去三氯甲烷提取液，分取水溶液层，用水饱和的正丁醇提取4次，每次15ml，合并正丁醇提取液，用正丁醇饱和的水洗涤4次，每次10ml，弃去水洗涤液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇3ml使溶解，加3g中性氧化铝，拌匀，蒸干，加在中性氧化铝柱(100～200目，6g，内径9mm，干法装柱)上，用50％甲醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。
方法六：将温浸60分钟提取换成超声处理10分钟，将三氯甲烷换成甲苯，将洗脱剂50％甲醇用量换成20ml，其它同方法五。
结果：方法一(原质量标准赤芍的鉴别方法)杂质较多，方法三无特征斑点，方法四、五、六及方法二均有特征斑点，但方法二背景最浅，特征斑点最清晰，因此选择其为最佳的方法。
展开***曾比较：1)三氯甲烷-甲醇-水(8∶2∶0.2)；2)三氯甲烷-甲醇-水(15∶4∶0.5)；
3)乙酸乙酯-甲醇-水(8∶2∶1)；4)三氯甲烷-甲醇-水(9∶3∶0.4)；
5)三氯甲烷-甲醇-水(4∶1∶0.1)；6)三氯甲烷-甲醇-水(15∶4.5∶0.5)。结果***1)、2)Rf值偏低，***3)Rf值偏高，***4)、5)斑点不够圆整，***6)Rf值适中，斑点圆整，因此选为最佳方案。
显色方法：对比了：1)喷以10％磷钼酸乙醇液，105℃加热至斑点显色清晰；2)喷以5％香草醛硫酸溶液，105℃加热至斑点显色清晰；3)喷以含2％对二甲氨基苯甲醛的10％硫酸溶液，在100～105℃加热至斑点显色清晰；4)喷以含4％对二甲氨基苯甲醛的40％硫酸溶液，在100～105℃加热至斑点显色清晰检视方法，结果方法1)和2)斑点不够清晰，方法3)加热显色时间长，方法4)为最佳显色方法。
二、车前子的薄层色谱鉴别
是在研究柴胡鉴别时发现其供试品可同时鉴别车前子，因此供试品的筛选同柴胡。另外对车前子的展开条件进行了研究：①硅胶G薄层板，乙酸乙酯-乙醇-甲酸-水(8∶2∶1∶0.5)；②1％NaOH制备的硅胶G薄层板，乙酸乙酯-乙醇-甲酸-水(20∶4∶1∶0.8)；③硅胶G薄层板，三氯甲烷∶甲醇∶冰乙酸∶水(15∶3∶1∶0.6)；④硅胶G薄层板，氯仿∶甲醇∶水(15∶5∶0.4)；⑤硅胶G薄层板，乙酸乙酯-乙醇-甲酸-水(16∶3∶1∶0.8)，其中①、③、④斑点不够圆整，②拖尾较为严重，方法⑤最好，因此选为最佳方法。
显色方法对比了：1)喷以含2％对二甲氨基苯甲醛的40％硫酸溶液，60℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视；2)喷以含2％对二甲氨基苯甲醛的40％硫酸溶液，80～85℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视；3)喷以含2％对二甲氨基苯甲醛的40％硫酸溶液，90℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视；4)喷以含2％对二甲氨基苯甲醛的40％硫酸溶液，用热风吹至斑点显色清晰；5)喷以10％硫酸乙醇，60℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视；6)喷以10％硫酸乙醇，90℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视；7)喷以10％硫酸乙醇，80～85℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视；结果方法1)显色时间太长，方法3)、6)易被烤焦，方法4)、5)、7)斑点没有方法2)明亮，因此选2)为最佳显色条件。
三、炮姜的薄层色谱鉴别
供试品溶液的制备方法比较：
方法一：取本品9g，研细，加甲醇40ml，浸泡60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水15ml使溶解，用1％NaOH溶液调pH值至7，用三氯甲烷30ml振摇提取1次，三氯甲烷提取液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。
方法二：取本品9g，研细，加乙醇20ml，加热回流60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，用3％NaOH溶液调pH值至9，用甲苯振摇提取3次，每次15ml，合并二氯甲烷提取液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。
方法三：取本品9g，研细，加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用浓氨试液溶液调pH值至8，用***振摇提取2次，每次20ml，合并***提取液，挥干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。
结果方法一和二背景较深，方法三效果最好，因此选为最佳方案。
对比了展开剂：(1)甲苯-乙酸乙酯-丙酮(15∶3∶0.5)，(2)甲苯-乙酸乙酯(8∶3)，(3)甲苯-乙酸乙酯-丙酮(10∶2∶0.3)，(4)甲苯-乙酸乙酯-丙酮(15∶3∶0.8)，结果均可检出炮姜(2)Rf值偏高，以(1)为最优；对比喷以10％硫酸乙醇溶液显色剂，显色慢，改用浓度大的硫酸乙醇溶液(2→10)为显色剂，显色较快，且斑点较清晰。
四、赤芍特征成分——芍药苷的薄层色谱鉴别
是在研究柴胡鉴别时发现其供试品可同时鉴别赤芍特征成分——芍药苷，因此供试品的筛选同柴胡。
试用了不同的展开***：①氯仿∶甲醇∶醋酸乙酯∶浓氨(50∶20∶10∶2.5)；②氯仿∶甲醇∶醋酸乙酯(10∶5∶6)；③醋酸乙酯∶乙醇∶水(8∶2∶1)；④三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(20∶2.5∶5∶0.1)。结果①、②、③分离效果均不好，斑点不够圆整，比移值不太适合，④分离效果好，斑点圆整，比移值适中。
检视方法对比了1)喷以5％香草醛硫酸溶液，100～105℃加热至斑点显色清晰；2)喷以含2％对二甲氨基苯甲醛的40％硫酸溶液，在100～105℃加热至斑点显色清晰；3)喷以含4％对二甲氨基苯甲醛的40％硫酸溶液，在100～105℃加热至斑点显色清晰检视方法；4)喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰。结果1)～4)均可检出芍药苷，以1)斑点最清晰，效果最好。
五、赤芍特征成分——芍药苷的含量测定方法研究
1、仪器与试药
仪器：日本岛津LC-10ATvp高效液相色谱仪；检测器：日本岛津SPD-10Avp紫外检测器；十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱(岛津VP-ODS C18柱，4.6×150mm)
试药：芍药苷化学对照品；乙腈(色谱纯)，磷酸(分析纯)，水(自制双蒸水)样品：宫炎康颗粒(批号：031101)及缺赤芍的阴性对照样品
2、供试品溶液制备方法选择
方法一：本品研细，取2g，精密称定，置100ml具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，超声处理10min，放冷，称定重量，用甲醇补足损失的重量，摇匀，滤过，取续滤液10ml，水浴蒸干，残渣加水10ml使溶解，上聚酰胺柱，用水80ml洗脱，收集流出液和洗脱液，蒸干，残渣加50％甲醇使溶解并转移至10ml量瓶内，加50％甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。
方法二：取本品2g，加甲醇40ml，超声处理30min，静置至室温，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
方法三：取本品2g，加甲醇50ml，超声处理30min，滤过，取续滤液25ml，蒸干，水溶解，氯仿振摇提取，弃去，水层用水饱和正丁醇振摇提取5次，合并正丁醇提取液，蒸干，甲醇溶解。
进样后发现，不上柱的供试品提取方法二和三色谱峰杂质多，色谱峰易被杂峰干扰，分离度不够好，且易污染色谱柱。故选用方法一做供试品溶液。
2.1供品提取溶剂选择
对比了水、30％甲醇、50％甲醇、70％甲醇、甲醇和乙醇五种溶解作为供试品提取溶剂，结果发现用甲醇和乙醇提取的供试品色谱峰形较差，70％甲醇色谱峰形不好，水和30％甲醇提取的供试品溶液含杂质较多，故采用50％甲醇作为提取溶剂。
2.2色谱柱选择
试用大孔树脂、氧化铝、聚酰胺三种色谱柱对50％甲醇提取液进行纯化，经聚酰胺柱纯化制备的供试液色谱图中杂质峰较少，芍药苷峰形较好，测定值之间波动小，稳定性较好，故采用聚酰胺柱纯化。同时对聚酰胺柱的装柱量进行了研究，发现(3g，30～60目，内径1cm，干法装柱)装柱方法即可达到理想效果。
2.3洗脱溶剂选择
采用水、10％甲醇、20％甲醇、30％甲醇和40％甲醇洗脱，结果以水洗脱杂质最少，选择水为最佳的洗脱溶剂。
2.4提取时间的选择：通过采用50％甲醇作为溶剂分别超声处理5min、10min、20min、30min、40min，滤过后进样，经比较，超声处理10min已提取完全，故10min为最优超声时间。
3、测定波长的选择
精密称取芍药苷对照品12.7mg，置25ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密吸取1ml至10ml量瓶中，加50％甲醇稀释至刻度，摇匀，用紫外分光光度计于200～400nm范围内扫描，记录吸收光谱图。结果芍药苷在230.20nm处有最大吸收峰，故选择230nm为检测波长。
4、色谱条件
以十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱为填充柱，乙腈-0.1％磷酸溶液(12.5∶87.5)为流动相，检测波长为230nm。理论板数按赤芍计算应不低于5000。
流动相比较了：(1)乙腈-0.1％磷酸溶液(12.5∶87.5)；(2)乙腈-0.1％磷酸溶液(15∶85)(3)乙腈-0.1％磷酸溶液(14∶86)(4)0.05mol/L磷酸二氢钾-乙腈(75∶15)；(5)甲醇-水(17∶38)；(6)乙腈-水(16∶84)；(7)0.05mol/L磷酸二氢钾-乙腈(85∶15)。
结果流动相(1)-(3)均可分离芍药苷，以(1)为最优，(4)(5)(6)峰形不佳。
5、阴性样品溶液的测定
不含赤芍的阴性样品研细，取2g，精密称定，置100ml具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇50ml，称定重量，超声处理10min，放冷，称定重量，用50％甲醇补足损失的重量，摇匀，滤过，取续滤液10ml，水浴蒸干，残渣加水10ml使溶解，上聚酰胺柱(3g，30～60目，内径1cm，干法装柱)，用水80ml洗脱，收集流出液和洗脱液，蒸干，残渣加50％甲醇使溶解并转移至10ml量瓶内，加50％甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。
取阴性样品溶液20μl，注入液相色谱仪，结果在芍药苷的位置处无相应色谱峰，表明对样品测定无干扰。
6、线性关系考察
精密称取芍药苷对照品11.1mg，置50ml量瓶中，加50％甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，分别精密吸取0.5ml、1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml，置10ml量瓶中，加50％甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。按上述色谱条件分别进样20μl，测定，以芍药苷峰面积积分y对芍药苷进样量x(μg)进行回归分析，得回归方程：y＝-10255+663154x，r＝0.9999，表明芍药苷进样量在0.222～2.220μg范围内，线性关系良好，并且直线通过原点，可用单点外标法进行测定和计算见表1。
表1 线性关系考察数据
7、精密度试验
取芍药苷对照品溶液(44.4μg/ml)，按上述色谱条件，依法操作测定，重复进样5次，计算芍药苷峰面积A的相对标准偏差，结果见表2，表明精密度较好。
表2 精密度试验
8、稳定性试验
取供试品溶液(批号031101)，分别在放置0、2、4、6、8h及24、48、72h后，依法操作，测定芍药苷峰面积A，计算相对标准偏差，结果见表3、表4，表明稳定性较好。
表3 稳定性试验(日内差)
表4 稳定性试验(日间差)
9、重复性试验
取同一样品(批号：031101)，按供试品溶液的制备方法制备5份供试品溶液，依法测定，计算芍药苷的含量及相对标准偏差，结果见表5，表明方法重复性较好。
表5 方法重复性试验
10、加样回收率试验
精密吸取已测知含量的样品(批号031101含量1.226mg/g)1g，再分别精密加入1.0ml(1.17mg/ml，精密称取芍药苷对照品11.7mg，置10ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度)的芍药苷对照品溶液，挥去溶剂，按样品测定项下操作，依法测定，计算回收率，结果见表6，表明方法回收率较好。
表6 加样回收率试验
11、样品测定
按选定的含测条件测定031102、031103两批样品，以峰面积按外标一点法计算样品中芍药苷的含量，结果见表7。
表7 样品测定结果(n＝3)
六、微生物检查方法
1仪器与样品
1.1实验菌种
大肠埃希菌[CMCC(B)44102]、金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26003]、枯草芽孢杆菌[CMCC(B)63501]、白色念珠菌[CMCC(F)98001]、黑曲霉[CMCC(F)98003]，均由广西食品药品检验所提供。
1.2样品
宫炎康颗粒，批号：060601、060701、060702，广西博科药业有限公司提供。
1.3培养基及稀释剂
营养琼脂培养基、玫瑰红钠琼脂培养基、胆盐乳糖增菌液、营养肉汤、改良马丁培养基、曙红亚甲蓝琼脂、MUG培养基、胆盐乳糖发酵培养基、0.9％无菌氯化钠溶液、pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液。
1.4仪器
PYX-DHS-60×75-B-II隔水式电热恒温培养箱、HH.B11.600-S-II电热恒温培养箱、SPX-300B型生化培养箱，均购于上海跃进医疗器械厂；SW-CJ-2FD型净化工作台，上海浦东荣丰科学仪器有限公司、上海圣欣科学仪器有限公司制造；BSC-1300-II-A2型生物安全柜，购于苏州市华宇净化设备有限公司。
2细菌、霉菌及酵母菌试验方法的建立及验证
2.1菌液制备
大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌菌液的制备：接种大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至营养肉汤中，30～35℃培养18～24小时，用0.9％无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数为50～100cfu的菌悬液，备用。
白色念珠菌菌液的制备：接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁培养基中，23～28℃培养24～48小时，用0.9％无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数为50～100cfu的菌悬液，备用。
黑曲霉菌液的制备：接种黑曲霉的新鲜培养物至改良马丁琼脂斜面培养基中，培养5～7天，加入3～5ml 0.9％无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱，然后吸出孢子悬液至无菌试管内，用0.9％无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数为50～100cfu的菌悬液，备用。
2.2供试液的制备方法
为确定细菌数、霉菌及酵母菌数的测定方法，对以下供试液的制备方法分别进行预试验：
取样品10g，加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液稀释至100ml，制备成溶解均匀的1∶10的供试液。
常规法：取1∶10的供试液1ml注皿。
2.3回收率试验
试验组：同2.2，另分别取各试验菌50～100cfu，分别注入同一平皿中，立即倾注琼脂培养基，待凝固后，置规定温度，细菌培养24～28小时，白色念珠菌和黑曲霉培养48～72小时。
菌液组：取试验菌50～100cfu注入平皿中，立即倾注琼脂培养基，待凝固后，置规定温度，细菌培养24～28小时，白色念珠菌和黑曲霉培养48～72小时，测定所加入的试验菌数，平行制备2个平皿。
供试品对照组：同2.2，立即倾注琼脂培养基，待凝固后，置规定温度，细菌培养24～28小时，白色念珠菌和黑曲霉培养48～72小时，测定供试品本底菌数。
2.4方法的确定
2.4.1常规法
预试验用大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉进行试验，结果见表8。
表8 常规法验证预试验结果
结果，大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉的回收率均大于70％，表明宫炎康颗粒对细菌、真菌没有抑制作用，采用常规法进行细菌、霉菌及酵母菌数测定检验应可行。
2.5细菌、霉菌及酵母菌计数方法验证
取3个批号宫炎康颗粒样品，细菌、霉菌及酵母菌均按常规法进行加菌回收率试验，结果见表9。
表9 三批宫炎康颗粒回收率试验结果
三个批号样品的验证试验结果表明，宫炎康颗粒常规法进行细菌、霉菌及酵母菌微生物限度检验，五种规定试验菌的回收率均大于70％，符合《中国药典》的规定，方法可行。
确定宫炎康颗粒细菌、霉菌及酵母菌计数方法均为常规法。
3.控制菌检验方法的建立及验证
菌液制备同2.1。
3.1大肠埃希菌
3.1.1常规法
试验组：取1∶10的供试液10ml接种至100ml胆盐乳糖培养基(BL)，同时加入大肠埃希菌10～100cfu，35℃培养24～48小时。取培养物0.2ml接种至含5mlMUG培养基的试管中，35℃培养24小时左右，366nm紫外光下观察荧光，然后进行靛基质试验，观察结果；另取培养物划线接种于曙红亚甲蓝(EMB)平板，35℃培养18～24小时，观察其菌落形态。
阴性菌对照组：取金黄色葡萄球菌作为阴性对照试验菌，方法同试验组。
3.2大肠菌群
3.2.1常规法
试验组：取1∶10的供试液1ml接种至含10ml胆盐乳糖发酵管培养基管1支，同时加入大肠埃希菌10～100cfu，35℃培养18～24小时，观察是否有产酸产气现象；取培养物划线接种于曙红亚甲蓝(EMB)平板，35℃培养18～24小时，观察其菌落形态。
阴性菌对照组：取金黄色葡萄球菌作为对照试验菌，方法同试验组。
3.3试验结果
3.3.1大肠埃希菌
常规法试验结果
经胆盐乳糖培养基(BL)培养后，试验组与阴性对照组相比较有明显的变化，试验组有明显产酸产气现象，结果见表10。
表10 大肠埃希菌检查常规法试验结果
| 大肠埃希菌 | 试验组 | 阴性菌对照组 |
| BL | + | - |
| MUG、靛基质 | +、+ | -、- |
| EMB平板 | + | - |
表明，采用常规法进行大肠埃希菌检验，方法成立。
3.3.2大肠菌群
常规法试验结果
经胆盐乳糖(BL)发酵管培养基培养后，试验组有明显产酸产气现象，阴性对照组没有明显变化，试验结果见表11。
表11 大肠菌群检查常规法试验结果
| 大肠菌群 | 试验组 | 阴性菌对照组 |
| 胆盐乳糖发酵管培养基 | + | - |
| EMB平板 | + | - |
表明，采用常规法进行大肠菌群检验，方法成立。
根据上述验证结果，确定大肠埃希菌、大肠菌群检查方法为常规法。
4.结果
根据上述实验结果及2005年版《中国药典》一部附录VIIIC微生物限度检查规定，拟定宫炎康颗粒微生物限度检查法标准正文如下：
微生物限度照微生物限度检查法(《中国药典》2005年版一部附录VIIIC)。
取本品10g，加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液稀释至100ml，混匀，作为1∶10的供试液。
细菌数取1∶10的供试液1ml注入1个平皿中，平行制备2个平皿，按平皿法测定。
霉菌及酵母菌数取1∶10的供试液1ml注入1个平皿中，平行制备2个平皿，按平皿法测定。
大肠埃希菌取1∶10的供试液10ml接种至100ml胆盐乳糖培养基中，依法检查。
大肠菌群取10ml胆盐乳糖发酵管培养基管3支，分别加入1∶10、1∶100、1∶1000的供试液1ml，依法检查。
细菌数每1g不得过10000个，霉菌及酵母菌数每1g不得过100个，大肠埃希菌每1g不得检出，大肠菌群每1g应小于100个。
5三批宫炎康颗粒的微生物限度检查
按上述建立的宫炎康颗粒微生物限度检查法，对三批样品进行了检验，结果详见表12。
表12 三批宫炎康颗粒微生物限度检查结果表
上述步骤并不需要按照先后顺序进行，而且同时还可以进行常规检测和延胡索的薄层色谱鉴别，其中延胡索鉴别参考现有文献5和6进行研究后确定了其的鉴别方法，本发明的主要特点是赤芍、车前子和柴胡薄层鉴别采用同一供试品溶液，延胡索和炮姜鉴别采用同一供试品溶液，极大地简化了操作。常规检查如性状，该成品性状为棕黄色的颗粒；味甜、微苦。此外，该成品还应符合中国药典2005年版一部附录IC颗粒剂项下有关的各项规定。
实施例1：
【鉴别】(1)——柴胡的薄层色谱鉴别：取本品9g，研细，加甲醇40ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加热水20ml分次溶解，置分液漏斗中，放冷，用***振摇提取3次，每次20ml，弃去***提取液，水溶液用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇提取液，用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次20ml，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，加中性氧化铝1g(100～200目)，拌匀，蒸干，加于中性氧化铝柱(3g，100～200目，内径9mm，干法装柱)上，用80％的甲醇30ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。取柴胡对照药材1g，照供试品溶液制备方法，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各6ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(15∶4.5∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以含4％对二甲氨基苯甲醛的40％硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，分别置日光及紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，日光下显相同颜色的斑点，紫外光下显相同颜色的荧光斑点。
【鉴别】(2)——车前子的薄层色谱鉴别：取车前子对照药材2g，照【鉴别】(1)项下供试品溶液制备方法，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年一部附录VI B)试验，吸取对照药材溶液及【鉴别】(1)项下的供试品溶液各6ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-乙醇-甲酸-水(16∶3∶1∶0.8)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以含2％对二甲氨基苯甲醛的40％硫酸溶液，在80～85℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显一个相同颜色的荧光主斑点。
【鉴别】(3)——炮姜的薄层色谱鉴别：取本品9g，研细，加甲醇40ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用浓氨试液调pH值至8，用***振摇提取2次，每次20ml，合并***提取液，挥干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取炮姜对照药材1g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述供试品溶液10ul、对照药材溶液2ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-丙酮(15∶3∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以硫酸乙醇溶液(2→10)，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
【鉴别】(4)——赤芍特征成分芍药苷的薄层色谱鉴别：另取芍药苷对照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述对照品溶液及【鉴别】(1)项下各6ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(20∶2.5∶5∶0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
【鉴别】(5)——延胡索特征成分——延胡索乙素的薄层色谱鉴别：取延胡索乙素对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年一部附录VI B)试验，吸取对照品溶液及【鉴别】(3)项下的供试品溶液各5ul，分别点于同一用1％氢氧化钠制备的以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷-三氯甲烷-甲醇(7∶3∶0.5)为展开剂，置以展开剂预饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，以碘蒸气熏至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
【检查】微生物限度照微生物限度检查法(中国药典2005年版一部附录XIII C)检验。
取本品10g，加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，混匀，作为1∶10的供试液。
细菌数取1∶10的供试液1ml注入平皿中，平行制备2个平皿，按平皿法测定。
霉菌和酵母菌数取1∶10的供试液1ml注入平皿中，平行制备2个平皿，按平皿法测定。
大肠埃希菌取1∶10的供试液10ml接种至100ml胆盐乳糖培养基中，依法检查。
大肠菌群取10ml的胆盐乳糖发酵培养基管3支，分别加入1∶10、1∶100、1∶1000的供试液1ml，依法检查。
本品细菌数每1g不得过10000个，霉菌和酵母菌数每1g不得过100个，大肠埃希菌每1g不得检出，大肠菌群每1g应小于100个。
其他应符合颗粒剂项下有关的各项规定(中国药典2005年版一部附录IC)。
【含量测定】照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定。
色谱条件与***适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.1％磷酸溶液(12.5∶87.5)为流动相；检测波长为230nm。理论板数按芍药苷计算应不低于5000。
对照品溶液的制备精密称取芍药苷对照品适量，加50％甲醇制成每1ml中含40μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备本品研细，取2g，精密称定，置100ml具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇50ml，称定重量，超声处理10分钟，放冷，再称定重量，用50％甲醇补足损失的重量，摇匀，滤过，取续滤液10ml，蒸干，残渣加水10ml使溶解，加于聚酰胺柱(3g，30～60目，内径1cm，干法装柱)上，用水80ml洗脱，收集流出液与洗脱液，蒸干，残渣加50％甲醇使溶解并转移至10ml量瓶内，加50％甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45um)滤过，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液20μl、供试品溶液10～20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
实施例2：
【鉴别】(1)——柴胡的薄层色谱鉴别：取本品9g，研细，加乙醇30ml，加热回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加热水20ml分次溶解，置分液漏斗中，放冷，用甲苯摇提取2次，每次20ml，弃去甲苯提取液，水溶液用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次15ml，合并正丁醇提取液，用正丁醇饱和的水洗涤3次，每次25ml，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，加中性氧化铝2g(100～200目)，拌匀，蒸干，加于中性氧化铝柱(6g，100～200目，内径9mm，干法装柱)上，用50％的甲醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。取柴胡对照药材1g，同供试品溶液制备方法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述供试品溶液和对照药材溶液各3ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(12∶3∶0.3)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在100～105℃加热至斑点显色清晰，分别置日光及紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，日光下显相同颜色的斑点，紫外光下显相同颜色的荧光斑点。
【鉴别】(2)——车前子的薄层色谱鉴别：取车前子对照药材2g，照【鉴别】(1)项下供试品溶液制备方法，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年一部附录VI B)试验，吸取对照药材溶液及【鉴别】(1)项下的供试品溶液各3ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-冰乙酸-水(20∶2∶1∶0.8)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇，在用热风吹至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显一个相同颜色的荧光主斑点。
【鉴别】(3)——炮姜的薄层色谱鉴别：取本品9g，研细，加乙醇40ml，加热回流40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水15ml使溶解，用1％NaOH溶液调pH值至9，用甲苯振摇提取3次，每次15ml，合并甲苯提取液，挥干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取炮姜对照药材1g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述供试品溶液5ul，对照药材溶液3ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-丙酮(10∶2∶0.3)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在100～105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
【鉴别】(4)——赤芍特征成分芍药苷的薄层色谱鉴别：取芍药苷对照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取【鉴别】(1)项下供试品溶液和上述对照品溶液各10ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(16∶1.5∶3∶0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在100～105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
【鉴别】(5)——延胡索特征成分——延胡索乙素的薄层色谱鉴别：取延胡索乙素对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年一部附录VI B)试验，吸取对照品溶液及【鉴别】(3)项下的供试品溶液各5ul，分别点于同一用1％氢氧化钠制备的以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷-三氯甲烷-甲醇(7∶3∶0.5)为展开剂，置以展开剂预饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，以碘蒸气熏至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
微生物限度检查同实施例1。
其他应符合颗粒剂项下有关的各项规定(中国药典2005年版一部附录IC)。
【含量测定】照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定。
色谱条件与***适应性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.1％磷酸溶液(16∶84)为流动相；检测波长为230nm。理论板数按芍药苷计算应不低于5000。
对照品溶液的制备精密称取芍药苷对照品适量，加50％甲醇制成每1ml中含40μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备本品研细，取2g，精密称定，置100ml具塞锥形瓶中，精密加入水50ml，称定重量，超声处理30min，放冷，称定重量，用水补足损失的重量，摇匀，滤过，取续滤液10ml，水浴蒸干，残渣加水10ml使溶解，上大孔树脂柱(长度10～20cm)，用10％甲醇80ml洗脱，收集流出液与洗脱液，蒸干，残渣加50％甲醇使溶解并转移至10ml量瓶内，加50％甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液20μl、供试品溶液10～20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品每袋含赤芍以芍药苷(C23H28O11)计，不得少于7.0mg。
实施例3：
【鉴别】(1)——柴胡的薄层色谱鉴别：取本品9g，研细，加甲醇20ml，超声处理10分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加热水30ml分次溶解，置分液漏斗中，放冷，用三氯甲烷振摇提取1次，每次30ml，弃去三氯甲烷提取液，水溶液用水饱和的正丁醇振摇提取4次，每次30ml，合并正丁醇提取液，用水40ml洗涤1次，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，加中性氧化铝1g(100～200目)，拌匀，蒸干，加于中性氧化铝柱(2g，100～200目，内径9mm，干法装柱)上，用70％的甲醇20ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。取柴胡对照药材1g，同供试品溶液制备方法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述供试品溶液和对照药材溶液各10ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(18∶6∶0.8)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以含2％对二甲氨基苯甲醛的40％硫酸溶液，在100～105℃加热至斑点显色清晰，分别置日光及紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，日光下显相同颜色的斑点，紫外光下显相同颜色的荧光斑点。
【鉴别】(2)——车前子的薄层色谱鉴别：取车前子对照药材2g，照【鉴别】(1)项下供试品溶液制备方法，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年一部附录VI B)试验，吸取对照药材溶液及【鉴别】(1)项下的供试品溶液各10ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-乙醇-甲酸-水(8∶2∶1∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以含2％对二甲氨基苯甲醛的40％硫酸溶液，在60℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显一个相同颜色的荧光主斑点。
【鉴别】(3)——炮姜的薄层色谱鉴别：取本品9g，研细，加甲醇40ml，浸泡60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，用2～5％的Na2CO3溶液调pH值至7，用三氯甲烷振摇提取3次，每次15ml，合并三氯甲烷提取液，挥干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取炮姜对照药材1g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述供试品溶液10ul，对照药材溶液3ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-丙酮(12∶2∶0.6)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以硫酸乙醇溶液(2→10)，在100℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
【鉴别】(4)——赤芍特征成分芍药苷的薄层色谱鉴别：取芍药苷对照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取【鉴别】(1)项下供试品溶液和上述对照品溶液各10ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(16∶2∶3∶0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以含4％对二甲氨基苯甲醛的40％硫酸溶液，在100～105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
【鉴别】(5)——延胡索特征成分——延胡索乙素的薄层色谱鉴别：取延胡索乙素对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年一部附录VI B)试验，吸取对照品溶液及【鉴别】(3)项下的供试品溶液各5ul，分别点于同一用1％氢氧化钠制备的以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷-三氯甲烷-甲醇(7∶3∶0.5)为展开剂，置以展开剂预饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，以碘蒸气熏至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
微生物限度检查同实施例1。
其他应符合颗粒剂项下有关的各项规定(中国药典2005年版一部附录IC)。
【含量测定】照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定。
色谱条件与***适应性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.1％磷酸溶液(14∶86)为流动相；检测波长为230nm。理论板数按芍药苷计算应不低于5000。
对照品溶液的制备精密称取芍药苷对照品适量，加50％甲醇制成每1ml中含40μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备本品研细，取2g，精密称定，置100ml具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，超声处理10min，放冷，称定重量，用甲醇补足损失的重量，摇匀，滤过，取续滤液10ml，水浴蒸干，残渣加水10ml使溶解，上氧化铝(内径1cm，3～6g)，用30％甲醇80ml洗脱，收集流出液和洗脱液，蒸干，残渣加50％甲醇使溶解并转移至10ml量瓶内，加50％甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液20μl、供试品溶液10～20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品每袋含赤芍以芍药苷(C23H28O11)计，不得少于7.0mg。
Claims (11)
1、一种宫炎康颗粒的质量控制方法，其特征是该方法包括以下柴胡的薄层色谱鉴别：
取本品9g，研细，加甲醇或乙醇20～40ml，超声处理或加热回流或温浸10～60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加热水10～30ml分次溶解，置分液漏斗中，放冷，用***或甲苯或三氯甲烷振摇提取1～4次，每次15～30ml，弃去***或甲苯或三氯甲烷提取液，水溶液用水饱和的正丁醇振摇提取2～4次，每次15～30ml，合并正丁醇提取液，用正丁醇饱和的水或水洗涤1～4次，每次10～40ml，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1～3ml使溶解，加1～3g、100～200目的中性氧化铝拌匀，蒸干，加于2～6g、100～200目、内径9mm、干法装柱的中性氧化铝柱上，用50～80％的甲醇20～50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇或乙醇1～3ml使溶解，作为供试品溶液；取柴胡对照药材1g，同供试品溶液制备方法制成对照药材溶液；照中国药典2005年版一部附录VI B的薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液和对照药材溶液各3～10ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水12～18∶3～6∶0.3～0.8为展开剂，展开，取出，晾干，喷以含2％～4％对二甲氨基苯甲醛的40％硫酸溶液或10％硫酸乙醇溶液，在100～105℃加热至斑点显色清晰，分别置日光及波长为365m的紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，日光下显相同颜色的斑点，紫外光下显相同颜色的荧光斑点。
2、如权利要求1所述的宫炎康颗粒的质量控制方法，其特征是柴胡的薄层鉴别方法为：
取本品9g，研细，加甲醇40ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加热水20ml分次溶解，置分液漏斗中，放冷，用***振摇提取3次，每次20ml，弃去***提取液，水溶液用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇提取液，用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次20ml，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，加100～200目的中性氧化铝1g，拌匀，蒸干，加于3g、100～200目、内径9mm、干法装柱的中性氧化铝柱上，用80％的甲醇30ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；取柴胡对照药材1g，照供试品溶液制备方法，同法制成对照药材溶液；照中国药典2005年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取对照药材溶液及供试品溶液各6ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水15∶4.5∶0.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以含4％对二甲氨基苯甲醛的40％硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，分别置日光及波长为365nm的紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，日光下显相同颜色的斑点，紫外光下显相同颜色的荧光斑点。
3、如权利要求1所述的宫炎康颗粒的质量控制方法，其特征是车前子的薄层色谱鉴别方法是：
取车前子对照药材2g，照权利要求1项下供试品溶液制备方法，同法制成对照药材溶液；照中国药典2005年一部附录VI B的薄层色谱法试验，吸取对照药材溶液及权利要求1项下的供试品溶液各3～10ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷或乙酸乙酯-甲醇或乙醇-甲酸或冰乙酸-水8～20∶2～4∶1∶0.5～0.8为展开剂，展开，取出，晾干，喷以含2％对二甲氨基苯甲醛的40％硫酸溶液或10％硫酸乙醇，在60～85℃加热或用热风吹至斑点显色清晰，置波长为365nm的紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显一个相同颜色的荧光主斑点。
4、如权利要求3所述的宫炎康颗粒的质量控制方法，其特征是车前子的薄层鉴别方法为：
取车前子对照药材2g，照权利要求2项下供试品溶液制备方法，同法制成对照药材溶液；照中国药典2005年一部附录VI B的薄层色谱法试验，吸取对照药材溶液及权利要求2项下的供试品溶液各6ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-乙醇-甲酸-水16∶3∶1∶0.8为展开剂，展开，取出，晾干，喷以含2％对二甲氨基苯甲醛的40％硫酸溶液，在80～85℃加热至斑点显色清晰，置波长为365nm的紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显一个相同颜色的荧光主斑点。
5、如权利要求1所述的宫炎康颗粒的质量控制方法，其特征是该方法还包括以下炮姜的薄层色谱鉴别：
取本品9g，研细，加甲醇或乙醇20～40ml，超声处理或加热回流或浸泡10～60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水15～30ml使溶解，用浓氨试液或1～3％NaOH溶液或2～5％的Na2CO3溶液调pH值至7～9，用***或甲苯或三氯甲烷振摇提取1～3次，每次15～30ml，合并***或甲苯或三氯甲烷提取液，挥干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取炮姜对照药材1g，同法制成对照药材溶液；照中国药典2005年版一部附录VI B的薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液5～10ul，对照药材溶液1～3ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-丙酮10～15∶2～3∶0.3～0.8为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2→10的硫酸乙醇溶液或10％硫酸乙醇溶液，在100～105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
6、如权利要求5所述的宫炎康颗粒的质量控制方法，其特征是炮姜的薄层鉴别法方法为：
取本品9g，研细，加甲醇40ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用浓氨试液调pH值至8，用***振摇提取2次，每次20ml，合并***提取液，挥干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取炮姜对照药材1g，同法制成对照药材溶液；照中国药典2005年版一部附录VI B的薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液10ul、对照药材溶液2ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-丙酮15∶3∶0.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2→10的硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
7、如权利要求1所述的宫炎康颗粒的质量控制方法，其特征是该方法还包括以下微生物的检查方法：
取本品10g，加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，混匀，作为1∶10的供试液；
细菌数 取1∶10的供试液1ml注入平皿中，平行制备2个平皿，按平皿法测定；
霉菌和酵母菌数 取1∶10的供试液1ml注入平皿中，平行制备2个平皿，按平皿法测定；
大肠埃希菌 取1∶10的供试液10ml接种至100ml胆盐乳糖培养基中，依法检查；
大肠菌群 取10ml的胆盐乳糖发酵培养基管3支，分别加入1∶10、1∶100、1∶1000的供试液1ml，依法检查；
本品细菌数每1g不得过10000个，霉菌和酵母菌数每1g不得过100个，大肠埃希菌每1g不得检出，大肠菌群每1g应小于100个。
8、如权利要求1所述的宫炎康颗粒的质量控制方法，其特征是还包括以下赤芍特征成分芍药苷的含量测定方法：
照中国药典2005年版一部附录VI D的高效液相色谱法测定；
色谱条件与***适应性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.1％磷酸溶液12.5～16∶84～87.5为流动相；检测波长为230nm；理论板数按芍药苷计算应不低于5000；
对照品溶液的制备精密称取芍药苷对照品适量，加50％甲醇制成每1ml中含40μg的溶液，即得；
供试品溶液的制备本品研细，取2g，精密称定，置100ml具塞锥形瓶中，精密加入水/30％甲醇/50％甲醇/甲醇50ml，称定重量，超声处理10～30min，放冷，称定重量，用水/30％甲醇/50％甲醇/甲醇补足损失的重量，摇匀，滤过，取续滤液10ml，水浴蒸干，残渣加水10ml使溶解，上大孔树脂/氧化铝/聚酰胺柱，用水/10％甲醇/20％甲醇/30％甲醇80ml洗脱，收集流出液和洗脱液，蒸干，残渣加50％甲醇使溶解并转移至10ml量瓶内，加50％甲醇稀释至刻度，摇匀，即得；
测定法分别精密吸取对照品溶液20μl、供试品溶液10～20μl，注入液相色谱仪，测定，即得；
本品每袋含赤芍以芍药苷C23H28O11计，不得少于7.0mg。
9、如权利要求8所述的宫炎康颗粒的质量控制方法，其特征是芍药苷的含量测定方法为：
照中国药典2005年版一部附录VI D的高效液相色谱法测定；
色谱条件与***适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.1％磷酸溶液12.5∶87.5为流动相；检测波长为230nm；理论板数按芍药苷计算应不低于5000；
对照品溶液的制备 精密称取芍药苷对照品适量，加50％甲醇制成每1ml中含40μg的溶液，即得；
供试品溶液的制备本品研细，取2g，精密称定，置100ml具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇50ml，称定重量，超声处理10分钟，放冷，再称定重量，用50％甲醇补足损失的重量，摇匀，滤过，取续滤液10ml，蒸干，残渣加水10ml使溶解，加于3g、30～60目、内径1cm、干法装柱的聚酰胺柱上，用水80ml洗脱，收集流出液与洗脱液，蒸干，残渣加50％甲醇使溶解并转移至10ml量瓶内，加50％甲醇稀释至刻度，摇匀，用0.45um的微孔滤膜滤过，即得；
测定法 分别精密吸取对照品溶液20μl、供试品溶液10～20μl，注入液相色谱仪，测定，即得；
本品每袋含赤芍以芍药苷C23H28O11计，不得少于7.0mg。
10、如权利要求1所述的宫炎康颗粒的质量控制方法，其特征是该方法还包括以下赤芍特征成分芍药苷的薄层色谱鉴别方法：
取芍药苷对照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VI B的薄层色谱法试验，吸取权利要求1项下供试品溶液和上述对照品溶液各3～10ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸16～20∶1～2.5∶3～5∶0.1～0.2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液或10％硫酸乙醇溶液或含2％～4％对二甲氨基苯甲醛的40％硫酸溶液，在100～105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
11、如权利要求10所述的宫炎康颗粒的质量控制方法，其特征是芍药苷的薄层鉴别方法是：
取芍药苷对照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VI B的薄层色谱法试验，吸取上述对照品溶液和权利要求2项下的供试品溶液各6ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸20∶2.5∶5∶0.1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2008100737296A CN101337060B (zh) | 2008-08-08 | 2008-08-08 | 宫炎康颗粒的质量控制方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2008100737296A CN101337060B (zh) | 2008-08-08 | 2008-08-08 | 宫炎康颗粒的质量控制方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN101337060A true CN101337060A (zh) | 2009-01-07 |
| CN101337060B CN101337060B (zh) | 2012-08-22 |
Family
ID=40211326
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN2008100737296A Expired - Fee Related CN101337060B (zh) | 2008-08-08 | 2008-08-08 | 宫炎康颗粒的质量控制方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN101337060B (zh) |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102279235A (zh) * | 2011-08-01 | 2011-12-14 | 吉林省中研药业有限公司 | 一种妇炎康片的检测方法 |
| CN104459005A (zh) * | 2014-11-21 | 2015-03-25 | 四川中方制药有限公司 | 一种清脑复神液的质量控制方法 |
| CN105424833A (zh) * | 2015-11-23 | 2016-03-23 | 江苏康缘药业股份有限公司 | 一种fkⅳ号颗粒成分检测方法 |
| CN106841500A (zh) * | 2017-03-03 | 2017-06-13 | 四川德成动物保健品有限公司 | 一种益母生化合剂中炮姜的薄层色谱检测方法 |
| CN107102093A (zh) * | 2017-05-23 | 2017-08-29 | 四川逢春制药有限公司 | 复方丹茵膏的检测方法 |
| CN114792213A (zh) * | 2022-06-23 | 2022-07-26 | 辰欣佛都药业（汶上）有限公司 | 一种颗粒药品质量稽查方法 |
-
2008
- 2008-08-08 CN CN2008100737296A patent/CN101337060B/zh not_active Expired - Fee Related
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102279235A (zh) * | 2011-08-01 | 2011-12-14 | 吉林省中研药业有限公司 | 一种妇炎康片的检测方法 |
| CN104459005A (zh) * | 2014-11-21 | 2015-03-25 | 四川中方制药有限公司 | 一种清脑复神液的质量控制方法 |
| CN104459005B (zh) * | 2014-11-21 | 2016-02-03 | 四川中方制药有限公司 | 一种清脑复神液的质量控制方法 |
| CN105424833A (zh) * | 2015-11-23 | 2016-03-23 | 江苏康缘药业股份有限公司 | 一种fkⅳ号颗粒成分检测方法 |
| CN106841500A (zh) * | 2017-03-03 | 2017-06-13 | 四川德成动物保健品有限公司 | 一种益母生化合剂中炮姜的薄层色谱检测方法 |
| CN107102093A (zh) * | 2017-05-23 | 2017-08-29 | 四川逢春制药有限公司 | 复方丹茵膏的检测方法 |
| CN107102093B (zh) * | 2017-05-23 | 2018-05-22 | 四川逢春制药有限公司 | 复方丹茵膏的检测方法 |
| CN114792213A (zh) * | 2022-06-23 | 2022-07-26 | 辰欣佛都药业（汶上）有限公司 | 一种颗粒药品质量稽查方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN101337060B (zh) | 2012-08-22 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN101850070B (zh) | 中药唐草片的检测方法 | |
| CN101337060B (zh) | 宫炎康颗粒的质量控制方法 | |
| CN101422563A (zh) | 治疗小儿咽喉炎的中药组合物及其制备方法和质量控制方法 | |
| CN101028388B (zh) | 一种治疗眼疾近视及视疲劳中药制剂的质量检测方法 | |
| CN101513467A (zh) | 皮肤病血毒制剂的质量控制方法 | |
| CN101204434A (zh) | 一种消栓滴丸质量标准及检验方法 | |
| CN103285306A (zh) | 益气补肾的中药组合物的制备方法及检测方法 | |
| CN114689774B (zh) | 一种当归补血汤标准煎液的制备工艺及其质量控制方法 | |
| CN102645493B (zh) | 五味甘露制剂的检测方法 | |
| CN102590431B (zh) | 一种治疗咳嗽的中药药物组合物检测方法 | |
| CN106370756A (zh) | 一种防治鸡传染性支气管炎的中药制剂的检测方法 | |
| CN101884746B (zh) | 一种治疗咳喘病的胶囊剂的检测方法 | |
| CN102068627A (zh) | 一种中药制剂心脑静片的质量控制方法 | |
| CN102145146A (zh) | 一种治疗泌尿***疾病的药物组合物的检测方法 | |
| CN100388940C (zh) | 一种小儿高热不退的中药制剂质量控制方法 | |
| CN101926889A (zh) | 芍杞颗粒剂的检测方法 | |
| CN101703610A (zh) | 清脑降压片质量检测方法 | |
| CN100372563C (zh) | 治疗支气管炎的复方制剂及其制备方法、质量控制方法 | |
| CN101647903B (zh) | 一种治疗银屑病的中药的检测方法 | |
| CN101181563B (zh) | 橘红痰咳制剂及制备方法和检测方法 | |
| CN1939472B (zh) | 一种治疗糖尿病的复方制剂的检测方法 | |
| CN101700306A (zh) | 一种乳癖消制剂的质量控制方法 | |
| CN101411836A (zh) | 一种治疗感冒后咳嗽的中药制剂质量标准及其检验方法 | |
| CN112578055B (zh) | 藕节及藕节炭对照提取物的制备工艺及其质量控制方法 | |
| CN100432670C (zh) | 一种中药制剂金嗓开音丸的质量检测方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| C56 | Change in the name or address of the patentee | ||
| CP01 | Change in the name or title of a patent holder |
Address after: 530003, 56 Garden Avenue, Nanning, the Guangxi Zhuang Autonomous Region Patentee after: GUANGXI HOUDE DAJIANKANG INDUSTRY Co.,Ltd. Address before: 530003, 56 Garden Avenue, Nanning, the Guangxi Zhuang Autonomous Region Patentee before: Guangxi Boke Pharmaceutical Co.,Ltd. |
|
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20120822 |