CN101336705A - 保健食品及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种具有减肥、降血压、降血脂、降血糖功效的保健食品及其制备方法。本发明保健食品包括以下重量份的原料制成:黑木耳5-40份、魔芋5-10份和茯苓1-6份。本发明是在保持黑木耳的天然风味、色泽及营养成分含量的基础上,将传统食疗养生配方和现代生物科技相结合,充分利用中医药独有的双向调节技术研制而成。人体同时服用本发明生产的黑木耳饮料和黑木耳胶囊,能有效清理人体心血管***和胃肠道***的代谢物,调节内分泌***,增强人体内环境的稳定能力,预防营养和代谢类疾病的发生,在预防和辅助治疗胰岛素抵抗等代谢类慢性疾病方面具有独特的功效,对腹型肥胖效果尤其明显。
Description
技术领域
本发明涉及一种保健食品,尤其涉及一种主要以黑木耳为有效成分的具有减肥,降血压,降血脂,降血糖等功效的保健食品,本发明还涉及该保健食品的制备方法,属于保健食品领域。
背景技术
肥胖作为一种全身内分泌代谢疾病,不仅影响体态和活动,而且与高脂血症、动脉粥样硬化、冠心病、糖尿病、痛风、脂肪肝、内分泌失调、肺泡低换气综合症、胆囊炎等疾病密切相关,肥胖已经成为医学界和生物学界迫切需要解决的问题,传统中医药在这方面优势明显。肥胖也是中老年的常见病和多发病,是出现胰岛素抵抗的一个重要标志,也是世界卫生组织确定的疑难性疾病之一。
腹型肥胖是人体2型糖尿病、心血管疾病和代谢综合症发生的主要因素之一。以代谢综合症(MS)为例:在1988年-1994年的美国第三次国家健康及营养调查(NHNESIII)证实,随着年纪的增长,患病率也迅速上升,60-69岁的患病率达到了43.5%。中国人群尽管肥胖度不及西方人群,但MS的患病率也达到14%以上,且中国人群以腹部肥胖更加明显。对上海、北京、青岛等城市的调查表明,男性MS患病率较女性更高(男/女:上海18.36%/15.82%、北京30%/18%、青岛16.1%/9.4%)。
人体内环境恒定是细胞外液具有相对恒定的理化特性,保持人体体温、血压、血糖、血脂等各种生理指标相对恒定水平是维持正常生命活动所必需的基本条件。人体内外环境的理化和生物学因素(如温度的剧变、射线、噪音、强光、电击、低压、低氧、中毒、创伤、感染等)以及机体的内在因素(血液温度或成分的改变、心功能低下、心律失常、器官功能紊乱及性压抑等)所导致的内环境紊乱或自稳态失衡是当前人体健康的最大危害之一。人体“内环境稳定”和“细胞应激反应”是20世纪现代医学研究领域的一个重大突破,它将是21世纪人体健康领域一个全新的亮点,其中有关细胞环境与应激的研究已成为当今生命科学研究的热点之一。
细胞环境与应激研究的主要发展历程如下:1929年,Connon首先提出用内环境稳定(homeostasis)一词描述机体维持其稳定的现象。他发现动物在格斗-逃跑反应(fight and fight response)时,血中sympathin(以后证实是去甲肾上腺素和肾上腺素的混和物)增多,提出交感神经***在机体紧急情况下起重要平衡作用的紧急学说(emergency theory)。1936年,Selye是第1个在医学领域中提出“应激”和应激原概念的人。Selye在Nature杂志发表的论文中描述了一种可由细菌感染、中毒、X线、外伤等多种刺激引起的病理三联症(肾上腺肿大、胃肠道溃疡、胸腺***退化)。他认为这些变化是机体遭受有害刺激时的一种适应性反应,将其称之为全身适应综合症(general adaption syndrome)或应急综合症(stress syndrome),并将能引起应急反应的刺激称为应急原。20世纪80年代Sterling和Eyer提出了非稳态(allostasis)一词,将其定义为通过变化来维持内环境稳态的一种能力。1993年McEwen将非稳态引入到了应激研究领域,其非稳态负荷概念比较好地解释了应激与疾病发生、发展间的关系。
“阴阳”和“虚实”是中国传统中医药的两个核心概念。现代人体“内环境稳定”和“应激”的概念与中国传统中医中“阴平阳秘”和“去实补虚”的理论体系具有相似性。《皇帝内经.素问.阴阳应象大论》指出“阴阳者,天地之道也,万物之纲纪,变化之父母,生杀之本始,神明之府也。”“阴阳者,血气之男女也”。“善诊者,察色按脉,先别阴阳”。《皇帝内经.素问.阴阳别论》进而提出中医的诊断纲要“别于阳者,知病忌时,别于阴者,知死生之期。谨熟阴阳,无与众谋”。《皇帝内经.素问.通评虚实论》中指出“邪气盛者实,精气夺则虚”。《中藏经》中载:“其本实者,得宣通之性必延其寿;其本虚者,得补虚之情必长其年。”
迄今为止,医学上主要通过以下几种方式来进行减肥:
(1)采用食欲抑制剂,如芬氟拉明右等,但因其潜在的心血管不良反应,现已少用。
(2)代谢增强剂,如甲状腺激素制剂,因其心血管副作用而逐步少用。
(3)血清素和去甲肾上腺素再摄取抑制剂,如***,但副作用大,主要表现为恶心、口干、食欲不振、心跳、快紧张 便秘、失眠。
(4)脂肪酶抑制,如奥利司他,主要副作用为脂肪肝、恶臭。
(5)手术治疗:吸脂、切脂、空肠回肠分流术、小胃手术和垂直结扎胃成型术,费用较大,患者需要承受有一定的风险和痛苦。
上述方式对于减肥虽然都有一定的效果,但都不程度的存在着副作用大,容易反弹,治疗费用高等缺陷,有待改进。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是克服现有技术的不足,提供一种具有确切减肥功效的保健食品,该保健食品无毒副作用,还具有降血压,降血脂、降血糖等保健功效。
本发明所要解决的技术问题是通过以下技术方案来实现的:
一种具有减肥、降血压、降血脂、降血糖功效的保健食品,包括以下重量份的各原料制成:黑木耳5-40份、魔芋粉5-10份和茯苓1-6份;
优选的,各原料的重量份是:黑木耳20-30份、魔芋粉6-9份和茯苓2-4份;
更优选的,各原料的重量份是:黑木耳25份、魔芋粉8份和茯苓3份;
为了达到更好的效果,上述保健食品的原料中还可加入4-20重量份的大枣,优选为加入8重量份的大枣;
更进一步的,上述保健食品的原料中还可加入1-6重量份的生姜和1-5重量份的甘草,更优选的,加入3重量份的生姜和2重量份的甘草。
黑木耳:真菌类担子菌纲木耳科木耳属植物木耳Auricularia auricula(L.)Underw.,以子实体入药。夏秋采收,晒干。黑木耳口感细腻清脆,滑嫩可口,味道鲜美,营养丰富,不但蛋白质丰富,而且富含多种维生素和矿物质,特别是铁元素含量极高,每100克干木耳含铁达185毫克,是肉类的100倍。有益气、充饥、轻身强智、止血止痛、补血活血等功效。黑木耳富含多糖胶体,有良好的清滑作用,还具有一定的抗癌和治疗心血管疾病功能。黑木耳中的胶质可把残留在人体消化***内的灰尘、杂质吸附集中起来排出体外,从而起到清胃涤肠的作用。同时,它还有帮助消化纤维类物质功能,对无意中吃下的难以消化的头发、谷壳、木渣、沙子、金属屑等异物有溶解与烊化作用,因此,它是矿山、化工和纺织工人不可缺少的保健食品。黑木耳对胆结石、肾结石等内源性异物也有比较显著的化解功能。黑木耳中的腺嘌呤核苷有显著的抑制血栓形成的作用,能减少血液凝块,预防血栓等病的发生,有防治动脉粥样硬化和冠心病的作用。
茯苓:性甘、淡、平、归肺、胃、肾经,有利水化饮、健脾宁心,益脾和胃之功效。
大枣:又名红枣、干枣、枣子。富含蛋白质、脂肪、糖类、胡萝卜素、B族维生素、维生素C、维生素P以及钙、磷、铁和环磷酸腺苷等营养成分。其中维生素C的含量在果品中名列前茅,有维生素王之美称。所含有的环磷酸腺苷,是人体细胞能量代谢的必需成分,能够增强肌力、消除疲劳、扩张血管、增加心肌收缩力、改善心肌营养,对防治心血管***疾病有良好的作用。
中医中药理论认为,红枣具有补虚益气、养血安神、健脾和胃等作用,是脾胃虚弱、气血不足、倦怠无力、失眠多梦等患者良好的保健营养品。大枣中的维生素P含量为所有果蔬之冠,其具有维持毛细血管通透性,改善微循环从而预防动脉硬化的作用,还可促进维生素C在人体内积蓄。另外,大枣中所含的皂类物质,具有调节人体代谢、增强免疫力、抗炎、抗***反应、降低血糖和胆固醇含量等作用;所含芦丁有保护毛细血管通畅、防止血管壁脆性增加的功能,对高血压、动脉粥样硬化等病有疗效;所含的黄酮类物质可用于高血压和动脉硬化的治疗和预防。大枣中含有丰富的维生素C、维生素P,对健全毛细血管、维持血管壁弹性,抗动脉粥样硬化很有益;大枣中含有cAMP,其药理作用表现为改善人体微循环,扩张冠状动脉,增加脑和心脏的供血量,减慢心律,降低心肌耗氧量而改善缺血心肌的代谢,故可防治心脑血管病。
魔芋:味辛、性寒,具有解毒、消肿、行於、化痰、散积等多种功能。主要成份葡甘露糖富含食物纤维,多种氨基酸和微量元素,经常食用对人体好处很多。其一,魔芋中含量最大的葡萄甘露聚糖具有强大的膨胀力,有超过任何一种植物胶的粘韧度,即可填充胃肠,消除饥饿感,又因所含热量微乎其微,故可控制体重,达到减肥健美的目的;其二,有降脂的作用。魔芋中含有一些化学物质,能降低血清胆固醇和甘油三酯,可有效地减轻高血压和心血管疾病;其三,魔芋能使小肠酶分泌增加,加快清除肠壁上沉积物,使其尽快排出体外。所以魔芋既能开胃化食,又能清除肠道垃圾,具有防治肥胖,延年益寿的作用;其四,魔芋还含有对人体有利的果胶、生物碱、17种氨基酸和微量元素,对于糖尿病也具有明显的保健功效。
生姜:为姜属植物姜Zingiber officinale Rosc.的新鲜根茎,性味辛、微温,为芳香性辛辣健胃药,有温暖、兴奋、发汗、止呕、解毒等作用。
上述保健食品中还可加入适量的矫味剂、调色剂等,其中所述的矫味剂优选为木糖醇等。
木糖醇是一种五碳糖醇,是木糖代谢的正常中间产物,外形为结晶性白色粉末,作为一种功能性甜味剂,能参与人体代谢,进入血液后,不需胰岛素就能透入细胞而且代谢速度快,不会引起血糖升高,是最适合于糖尿病患者食用的营养型食糖替代品。
本发明中所用的甘草还能增加饮料的香味,提高其稠度和色泽。
本发明所要解决的另一个技术问题是提供一种制备上述保健食品的方法。
本发明所要解决的另一个技术问题是通过以下技术方案来实现的:
一种制备上述具有减肥,降血压、降血脂、降血糖等功效的保健食品的方法,包括:
(1)按所述重量份称取各原料;
(2)将黑木耳充分复水后用水浸提,将浸提液过滤,得黑木耳水溶性物质的提取液备用;将浸提后的黑木耳水不溶性物质与魔芋粉混合,制粒、灌装,得胶囊剂;
(3)将茯苓、生姜、大枣和甘草用水煎煮,煎煮液过滤,收集滤液与步骤(2)所制备的黑木耳水溶性物质的提取液混合均匀,加入矫味剂、调色剂,真空干燥后制备成固体饮料;或将固体饮料调配加水,灭菌,灌装,得软饮料。
优选的,步骤(2)中所述的浸提是向复水后的黑木耳中加入80倍重量的水,在80℃的温度条件下煎煮2小时;
步骤(2)中将干燥后的黑木耳水不溶性物质与魔芋粉优选按照1∶3的重量比例混合,制粒、灌装,得胶囊剂;
步骤(3)中所述的煎煮优选是加入80-120倍重量的水,烧开后,在80℃的温度条件下保温30-120分钟。
黑木耳含有丰富的纤维素和一种特殊的植物胶质,能促进胃肠蠕动,促使肠道脂肪食物的***,减少食物脂肪的吸收;茯苓具有利尿作用功能,能增加尿中钾、钠、氯等电解质的排出(用于治疗各种水肿,国外实验证明它具有增强胰岛素活性的显著效果),两者合用具有“开鬼门,洁净府”的功能,能够快速清除人体内环境代谢物,排除人体代谢障碍,增强人体对内环境紊乱的自我修正能力,辅助治疗腹型肥胖,有效预防营养和代谢类疾病的发生,具有一减三降功能(减少腹部脂肪,降血压、降血脂、降血糖)。
此外,魔芋也具有较强的减肥、降血压、降血脂、降血糖等功效;大枣中含有丰富的维生素C、维生素P,对健全毛细血管、维持血管壁弹性,抗动脉粥样硬化非常有益。
本发明保健食品将传统中医“肝肾同源”理论和“内环境稳定”和“细胞应激反应”等现代医学研究成果相结合,以黑木耳为主要成分,辅助以药用真菌茯苓以及药食同源植物大枣、生姜和甘草组成,通过“去实补虚”达到“平衡阴阳”目的,有效清理人体代谢物和内分泌***的调节,增强人体内环境的快速稳定能力,预防营养和代谢类疾病的发生,是一种预防代谢综合症(MS)和辅助治疗腹型肥胖的功能食品,在预防和辅助治疗胰岛素抵抗等代谢类慢性疾病方面具有独特的作用,对腹型肥胖效果尤其明显。
实验结果和药理分析结论均证明本发明保健食品是辅助治疗和预防肥胖的有效方式,具有洁净脏腑、推陈致新的良好效果,对营养不良和营养过剩具有双向调节功能,从排除代谢障碍的角度解决肥胖问题。
本发明保健食品口感好,风味独特,可为各类消费人群所喜爱或接受,营养丰富,无毒副作用,可长期食用。
具体实施方式
下面结合具体实施例来进一步描述本发明,本发明的优点和特点将会随着描述而更为清楚。但这些实施例仅是范例性的,并不对本发明的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是,在不偏离本发明的精神和范围下可以对本发明技术方案的细节和形式进行修改或替换,但这些修改和替换均落入本发明的保护范围内。
实施例1
(1)按以下重量称取各原料(单位:kg):黑木耳25,茯苓3,魔芋粉8;
(2)将黑木耳挑选去杂,清洗干净,充分复水后置入提取罐中,按1∶80的重量比例加水进行提取,提取温度控制为80℃,提取时间为180分钟;将浸提液过滤,得黑木耳提取液备用;将浸提后的黑木耳水不溶性物质放在铺垫有魔芋粉的托盘上真空干燥,混合均匀,制粒、灌装,制成胶囊剂;
(3)向茯苓中加入100倍重量的水,烧开后,在80℃的温度条件下保温90分钟;煎煮液过滤,收集滤液与步骤(2)所制备的黑木耳提取液混合均匀,加入适量的木糖醇,真空干燥得固体饮料;或者将固体饮料调配加水,灭菌,灌装,制成口服液。
实施例2
(1)按以下重量称取各原料(单位:kg):黑木耳5,茯苓1,魔芋粉5;
(2)将黑木耳挑选去杂,清洗干净,充分复水后置入提取罐中,按1∶80的重量比例加水进行提取,提取温度控制为80℃,提取时间为150分钟;将浸提液过滤,得黑木耳提取液备用;将浸提后的黑木耳水不溶性物质放在铺垫有魔芋粉的托盘上真空干燥,混合均匀,制粒、灌装,得胶囊剂;
(3)向茯苓中加入80倍重量的水,烧开后,在80℃的温度条件下保温90分钟;煎煮液过滤,收集滤液与步骤(2)所制备的黑木耳提取液混合均匀,加入木糖醇以及适量的矫味剂、调色剂,真空干燥得固体饮料;或者将固体饮料调配加水,灭菌,灌装,制成软饮料。
实施例3
(1)按以下重量称取各原料(单位:kg):黑木耳40,茯苓6,魔芋粉10;
(2)将黑木耳挑选去杂,清洗干净,充分复水后置入提取罐中,按1∶80的重量比例加水进行提取,提取温度控制为80℃,提取时间为180分钟;将浸提液过滤,得黑木耳提取液备用;将浸提后的黑木耳水不溶性物质放在铺垫有魔芋粉的托盘上真空干燥,混合均匀,制粒、灌装,得胶囊剂;
(3)向茯苓中加入100倍重量的水,烧开后,在80℃的温度条件下保温90分钟;煎煮液过滤,收集滤液与步骤(2)所制备的黑木耳提取液混合均匀,加入木糖醇以及适量的矫味剂、调色剂,真空干燥得固体饮料;或者将固体饮料调配加水,灭菌,灌装,制成软饮料。
实施例4
(1)按以下重量称取各原料(单位:kg):黑木耳25,茯苓3,魔芋粉8,生姜3,大枣8,甘草2;
(2)将黑木耳挑选去杂,清洗干净,充分复水后置入提取罐中,按1∶80的重量比例加水进行提取,提取温度控制为80℃,提取时间为180分钟;将浸提液过滤,得黑木耳提取液备用;将浸提后的黑木耳水不溶性物质放在铺垫有魔芋粉的托盘上真空干燥,混合均匀,制粒、灌装,得胶囊剂;
(3)向茯苓、生姜、大枣和甘草中加入100倍重量的水,烧开后,在80℃的温度条件下保温60-90分钟;煎煮液过滤,收集滤液与步骤(2)所制备的黑木耳提取液混合均匀,加入木糖醇以及适量的矫味剂、调色剂,真空干燥得固体饮料;或者将固体饮料调配加水,灭菌,灌装,得软饮料。
实施例5
(1)按以下重量称取各原料(单位:kg):黑木耳5,茯苓1,魔芋粉5,生姜1,大枣4,甘草1;
(2)将黑木耳挑选去杂,清洗干净,充分复水后置入提取罐中,按1∶80的重量比例加水进行提取,提取温度控制为80℃,提取时间为180分钟;将浸提液过滤,得黑木耳提取液备用;将浸提后的黑木耳水不溶性物质放在铺垫有魔芋粉的托盘上真空干燥,混合均匀,制粒、灌装,得胶囊剂;
(3)向茯苓、生姜、大枣和甘草中加入100倍重量的水,烧开后,在80℃的温度条件下保温90分钟;煎煮液过滤,收集滤液与步骤(2)所制备的黑木耳提取液混合均匀,加入木糖醇以及适量的矫味剂、调色剂,真空干燥得固体饮料;或者将固体饮料调配加水,灭菌,灌装,得软饮料。
实施例6
(1)按以下重量称取各原料(单位:kg):黑木耳40,茯苓6,魔芋粉10,生姜6,大枣20;
(2)将黑木耳挑选去杂,清洗干净后充分复水置入提取罐中,按1∶80的重量比例加水进行提取,提取温度控制为80℃,提取时间为180分钟;将浸提液过滤,得黑木耳提取液备用;将浸提后的黑木耳水不溶性物质放在铺垫有魔芋粉的托盘上真空干燥,混合均匀,制粒、灌装,得胶囊剂;
(3)向茯苓、生姜和大枣中加入100倍重量的水,烧开后,在80℃的温度条件下保温90分钟;煎煮液过滤,收集滤液与步骤(2)所制备的黑木耳提取液混合均匀,加入木糖醇以及适量的矫味剂、调色剂,真空干燥得固体饮料;或者将固体饮料调配加水,灭菌,灌装,得软饮料。
试验例1 本发明保健食品的减肥功效试验
1、材料与方法
1.1.(1)受试样品:本发明实施例1-3所制备的胶囊剂和饮料;(2)对照样品1:黑木耳提取液(按照本发明实施例1-3所公开的方法进行制备);(3)对照样品2:茯苓用水提取所得到的提取物(按照本发明实施例1-3的方法进行制备);
1.2.实验动物:由黑龙江省肿瘤研究所实验动物中心提供的Wister大白鼠(批准号为医动字第09-0-33),出生第二天健康白鼠130只,随机分为13组,每组10只,其中一组作为对照组(正常饲养),其余120只经38天饲养造模后,随机分为12组,每组10只,一组作为观察组(不给予任何减肥药物或食品进行治疗),其中9组分别饲喂实施例1-3所制备的胶囊剂和饮料(分别分为高、中、低三个剂量),其余的两个组分别饲喂对照样品1和对照样品2(剂量与受试样品相同)。
1.3剂量设计:人体推荐剂量为每人每口4g,如成人体重以60公斤计,则相当于660mg/日/kg体重。小鼠的等效剂量为人体推荐剂量的1倍,即每日660mg/kg体重(低剂量),上,下各设一个剂量组1980mg/kg体重(高剂量)和330mg/kg体重(低剂量)。
1.4试验仪器和试剂:
光学显微镜,日本奥林巴斯;730型半自动生化仪,日本岛津;
甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL_C)、卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LACT)检测试剂盒,南京建成生物工程研究所出品;瘦素(Leptin)检测试剂盒,Linco出品。
1.5实验方法:
1.5.1实验性肥胖大鼠模型制备:新生雄性大白鼠,自出生第二天起。每只皮下注射谷氨基酸(MSG)生理盐水溶液,连续6天,自出生后第22天起,每日按体重灌胃给予脂肪乳(10%胆固醇,20%猪油,1%甲基硫氧嘧啶,2%胆酸钠)10ml/kg,连续10天。随后按李氏指数(Lee Sindex)分层随机分为9组,分别给予不同剂量的受试样品,连续28天,同时继续给与脂肪乳。末次给药后禁食24h,检量体重、体长,随后***麻醉,颈总动脉插管取血,分离血清。
1.5.2形态学观察根据上述体重,体长,计算李氏指数;取动物睾丸周围全部脂肪,称重;称重后取一小块脂肪,常规固定,切片,400倍显微镜下计数全视野的细胞个数。
1.5.3血脂、HDL_C及LACT测定,按试剂盒方法(均为酶法)测定血清TC、TG、HDL_C含量及LACT活性。
1.5.4血清瘦素(Lcptin)水平测定按试剂盒方法(放免法)测定血清瘦素(Lcptin)水平。
1.5.5统计各组分别与对照组在SAS中行T-TEST程序。
2、试验结果
2.1.对动物肥胖的干预作用 试验结果显示受试样品对MSG和脂肪乳所致的实验性肥胖确有明显的抑制作用,受试样品中剂量时就能抑制大鼠体重增加,抑制睾周脂肪重量和脂肪细胞增大,能明显降低李氏指数。受试样品对动物肥胖的干预的总体效果要明显优于对照样品1和对照样品2。
2.2对血清素(leptin)水平的影响
试验结果显示受试样品中剂量、高剂量均能降低MSG和脂肪乳所致的实验性肥胖大鼠的血清素水平,与其对李氏指数的影响相符,对照样品1和对照样品2对其无明显影响。
2.3.对血清TG,TC,HDL_C含量及LACT的影响
受试样品中剂量、高剂量均能降低高血脂动物的血脂(TG/TC)增高HDL_C含量,且显示剂量依赖关系。对照样品1和对照样品2有一定的降脂作用,但其效果要明显弱于受试样品,且对HDL_C无明显影响。
从试验结果可以看出,受试样品能够显著抑制实验性肥胖大鼠的体重增加,降低李氏指数,抑制睾周脂肪垫重量、脂肪细胞体积,表现出显著的减肥功效,同时,动物的血脂、脂蛋白的变化与减肥的强度基本对应,其整体减肥功效要明显优于对照样品1和对照样品2的减肥功效,
试验例2 本发明保健食品的安全性试验
1材料和方法
1.1受试样品:本发明实施例1-6所制备的胶囊剂和饮料。
1.2试验动物:昆明种小白鼠(批准证号,医动学第09-2-1号),Wister品系大白鼠(批准证号为:医动学第09-3-2)购自黑龙江省肿瘤研究所实验动物中心。
1.3大、小白鼠经口急性毒性试验:选用昆明种小白鼠40只,雌雄各半,体重20.0-22.0g,按性别、体重随机分成4组,每组5只。Wister大鼠4只,雌雄各半,体重180-220g,按性别、体重随机分成4组,每组5只。
按霍恩氏法进行剂量设计,4个剂量分别为:1.0g/kg体重、2.15g/kg体重、4.64g/kg体重、10.0g/kg体重(此剂量相当于推荐人用量的150倍)。检样按所设剂量以蒸馏水制成均匀混悬液,备用。
大、小鼠禁食16h后,按动物体重2%(每100g灌胃2ml)容积经口1次灌胃,观察大、小鼠的中毒表现和死亡情况,观察时间为14天。
1.4遗传毒性试验
1.4.1 Ames试验TA97 TA98 TA100和TA1024个菌株均由美国加州大学Ames实验室提供,将检样以DMSO配成5mg/0.1ml、15mg/0.1ml、0.2mg/0.1ml、0.04mg/0.1ml、0.008mg/0.1ml共5个浓度。除上述5个浓度组外,又设有自发回变对照和限性对照(加S9用1-AF(TA102用1,8-二羟醌),不加S9用DEXON,采用平板掺入法试验,每皿加入量为0.1m。每个剂量做3皿,并重复一次,最后以3皿平均值fenbie报告两次的试验结果。
1.4.2小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验:昆明种小白鼠,体重25-30g,共50只,雌雄各半,设3个剂量组,剂量设计依据为:厂家推荐剂量为4g人/日,成人体重以60.0kg计,则为0.066g/kg体重,高剂量设为6.7g/kg体重(相当于推荐人口用剂量的50倍),低剂量组为1.7g/kg体重(相当于推荐人日用剂量的25倍)。各组均按20ml/kg体重灌胃,其中阳性对照组经口灌胃剂量为60.0mg/kg体重的环磷酰胺;阴性对照组以等体积的清洁水经口灌胃,采用间隔24h两次给受试物法,即第一次给受试物24h后,再次给受试物。6h后颈椎脱臼处死小鼠,取股骨常规制片。显微镜下每只小鼠观察1000个嗜多染红细胞(PCE),记录有微核的细胞数,计算出微核细胞率。
1.4.3小鼠***畸形试验:选用昆明种雄性小白鼠25只,体重25.0-30.0g,随机分成5组,每组5只,设3个剂量组,剂量设计同小鼠骨髓微核实验,即高剂量为6.7g/kg体重(相当于推荐人日用剂量的50倍),低剂量组为1.7g/kg体重(相当于推荐人日用剂量的25倍)阴性对照组给与蒸馏水,阳性对照组给与环磷酰胺,剂量为60mg/kg体重,所有各组均按20ml/kg体重灌胃,每日一次,连续5天,各组动物均于首次投与检样后35天处死,按常规方法制片固定2%伊红溶液染色,每只小鼠镜检1000个完整***,计算***畸形率。
1.5喂养试验
断乳的wistar大鼠80只,体重60-80g,随机分成4组,每组20只,雌雄一半,其中三组为试验组,一组为对照组。
样品处理同微核试验,剂量设计如下:高剂量为6.7g/kg体重,相当于推荐用量的100倍,中剂量为3.3g/kg体重,相当于人推荐用量的50倍,低剂量为1.7g/kg体重,相当于人推荐用量的25倍。灌胃容积按20ml/kg体重进行,阴性对照灌等容积的清洁水,每天灌胃一次,连续灌胃30天。
每天观察并记录动物的一般状况,中毒症状及死亡情况。每周称一次体重,记录每组动物的总的摄食量,并根据30天增重和摄食量,计算食物利用率。实验结束后,采血检测血液学指标,并检测生化指标,如谷丙转氨酶(ALT),谷草转氨酶(AST),总蛋白(TP),白蛋白(ALB),尿素(BUN),血糖(GLU),甘油三脂(TG),胆固醇(TC)和胆苷。同时剖开大鼠腹部,取出肝、肾、脾、睾丸、卵巢称重,计算脏体比,并进行病理学检查。
1.6传统致畸试验
Wistar大鼠,体重220-250g,雌雄大鼠头晚按2∶1同笼后,次日早做大鼠***涂片检查,以查到***记为受精鼠,并将当日作为“受孕“的第0天,共查出受精鼠60只,随机分成4组,每组15只,其中3组为试验组,1组为阴性对照组,经口灌胃,时间为妊娠第7天至第16天。
样品处理及剂量设计同30天喂养试验。高剂量组为6.7g/kg体重,相当于人推荐剂量的100倍;中剂量组为3.3g/kg体重,相当于人推荐剂量的50倍;低剂量组为1.7g/kg体重,相当于人推荐剂量的25倍,灌胃容积为20ml/kg体重。阴性对照组给等容积蒸馏水。
在受孕的第0、7、12、、16、20天称母鼠体重,观察体重变动情况,于受孕的第20天断头处死动物,立刻剖腹检查,称量胎仔窝重,记录活胎,死胎及吸收胎数。然后逐个检查活胎的外观有无畸形,做胎仔发育测量,将活胎的1/2用BOUIN氏液固定,备作内脏检查;另外1/2经红S染色,做骨骼染色标本,进行骨骼发育和畸形等检查。
1.7根据处理对试验数据选用SYSTAT统计软件进行泊松分布、方筹分析检验和均数t检验等统计学分析。
2试验结果
2.1良性毒性试验
在14天的观察期间内,受试大小鼠一般状态良好,均未出现中毒症状,亦未有死亡发生。根据试验所设计的剂量、观察到的结果及大、小鼠良性毒性判断标准,可以认为受试样品属实际无毒物质。
2.2遗传毒性试验
2.2.1 AMES试验
试验结果表明,受检样品在加与不加S(肝微粒体)活化条件下,对Ames试验均呈阴性结果,即Ames试验结果为致突变阴性。
2.2.2鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验
对试验结果进行泊松分布检验,结果两个性别小鼠除阳性对照组外,各剂量组与阴性对照组微核率相比,均无明显差异,说明受试物的小鼠骨髓嗜多染微核试验为阴性结果。
2.2.3小鼠***畸形试验
各组小鼠均可见到一定数量的畸形***,但给予环磷酰胺的阳性对照组***畸形率与阴性对照组相比,有极显著差异,而各试验组小鼠的***畸形率与阴性对照组相比,均无显著性(P>0.05),说明受试物对***畸形发生率无影响。
2.3 30天喂养试验
(1)在整个试验过程中,各组动物一般状况良好,仅雌性中‘低剂量组各有一只意外死亡(灌胃操作失误(其他各组动物均未见有任何明显的不良放映,更无中毒致死发生。
(2)除高剂量组雌性动物第一、二周平均体重显著低于对照组(P<0.05=外,其余各组动物的平均体重在各期与阴性对照组相比均无显著性差别(方差分析,P>0.05)。
(3)对大鼠总食物利用率的影响
除高剂量组雄性动物的体重增重和食物利用率明显低于中剂量组外,各剂量组的食物利用率与对照组无显著性差异,另外还见到高剂量组雌性动物的进食量和体重增重显著低于对照组,胆食物利用率各组无差异。
(4)血液学检查结果
各剂量组动物白细胞总数、白细胞分类和血红蛋白含量均在正常范围内,且个剂量组与对照组相比无显著性差别,说明受检样品对大鼠上述血液学指标无明显影响。
(5)末期生化检验结果
试验结束后处死动物,分离大鼠血清,进行了血清谷-草转氨酶、谷一丙转氨酶的活性、总蛋白、白蛋白‘尿素氮’血清、甘油三脂、胆固醇和肌苷含量等指标的检测,试验结果表明,各项指标均在正常值范围内,且与阴性对照组相比,无显著性差异,说明受检样品对大鼠上述血生化指标无明显影响。
(6)对大鼠脏体化的影响
对试验结果进行方差分析,结果表明,各组动物脏体化无显著性差异(P>0.05)。药理组织学检查,各组大鼠主要脏器的病理组织学检查,均未见有与对照组不同的病异组织学改变,说明受试样品对大鼠肝、脾、肾、睾丸等主要脏器无损害作用。
2.4传统致畸试验
2.4.1对孕鼠体重的影响
对各组动物ide总增重进行统计分析,各剂量组与阴性对照相比,无显著性差异,说明受试样品对孕鼠体重无明显影响。
2.4.2对胎鼠一般发育的影响
试验结果表明,各组动物的吸收胎、死胎和平均胎仔数与阴性对照组相比无统计学差别(P>0.05);胎仔平均体重,除高剂量组明显低于其他各组外,(方差分析,Q检验,P<0.01),其余各组与阴性对照组相比,无显著性差别,可能是由于高剂量组母体摄入过多受试物(为人推荐用量的100倍)致胎鼠营养不足所致。
2.4.3对胎鼠骨髓发育的影响
骨骼检查结果发现,受试样品各剂量组胎鼠骨骼发育迟缓指标与阴性对照组相比,无显著性差异(X2检验,P>0.05).此外,各剂量组均为见到骨骼畸形。
2.4.4对胎鼠内脏的影响
受试样品各剂量组均未见到外观畸形的胎鼠,内脏徒手切片检查亦未见到内脏有异常改变。
受试样品经口急性毒性属实际无毒物质,AMES试验小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验,小鼠***急性试验等三项遗传毒性试验检测均为阴性结果;30天喂养试验亦未见其对受试动物有任何毒性损害作用,传统致畸试验检测未见其对胎鼠致畸效应或其他胎鼠毒性作用。
Claims (9)
1、一种具有减肥、降血压、降血脂、降血糖功效的保健食品,包括以下重量份的各原料制成:黑木耳5-40份、魔芋粉5-10份和茯苓1-6份。
2、按照权利要求1的保健食品,其特征在于,各原料的重量份是:黑木耳20-30份、魔芋粉6-9份和茯苓2-4份。
3、按照权利要求2的保健食品,其特征在于,各原料的重量份是:黑木耳25份、魔芋粉8份和茯苓3份。
4、按照权利要求1所述的保健食品,其特征在于,所述的原料中还含有4-20重量份的大枣。
5、按照权利要求5所述的保健食品,其特征在于,所述的原料中还含有1-6重量份的生姜和1-5重量份的甘草。
6、一种制备权利要求1、4或5所述的保健食品的方法,包括:
(1)按所述重量份称取各原料;
(2)将黑木耳充分复水后用水浸提,将浸提液过滤,得黑木耳水溶性物质的提取液备用;将浸提后的黑木耳水不溶性物质与魔芋粉混合,制粒、灌装,得胶囊剂;
(3)将茯苓、生姜、大枣和甘草用水煎煮,煎煮液过滤,收集滤液与步骤(2)所制备的黑木耳水溶性物质的提取液混合均匀,加入矫味剂、调色剂,真空干燥后制备成固体饮料;或将固体饮料调配加水,灭菌,灌装,得软饮料。
7、按照权利要求6的方法,其特征在于:步骤(2)中所述的浸提是向复水后的黑木耳中加入80倍重量的水,在80℃的温度条件下煎煮2小时。
8、按照权利要求6的方法,其特征在于:步骤(2)中将干燥后的黑木耳水不溶性物质与魔芋粉按照1∶3的重量比例混合,制粒、灌装,得胶囊剂。
9、按照权利要求6的方法,其特征在于:,步骤(3)中所述的煎煮是:加入80-120倍重量的水,将水烧开后,在80℃的温度条件下保温30-120分钟。
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