CN101277661A - 基于邻苯二甲酸乙酸纤维素的抗感染卫生用品 - Google Patents

Abstract

用于维持低***pH、防止月经期间中毒性休克综合征毒素(1)的产生、防止疱疹病毒的散发和传播以及治疗疱疹损伤的方法，其包括对人施用包含药物有效量的不溶性微粒化形式邻苯二甲酸乙酸纤维素或邻苯二甲酸乙酸纤维素膜或邻苯二甲酸乙酸纤维素多孔海绵的制剂。还提供治疗白色念珠菌(Candida albicans)感染的方法，其包括对女性施用药物有效量的组合物，该组合物包含微粒化邻苯二甲酸乙酸纤维素和硝酸咪康唑。

Description

基于邻苯二甲酸乙酸纤维素的抗感染卫生用品

相关申请的交叉参考

本申请根据35 USC 119(e)要求2005年10月6日提交的临时申请序列号60/724,625的优先权，其全部内容通过参考并入本文。

政府权利

本发明得到来自国立卫生研究院的资助Grant 1U19HD048957的美国政府支持。美国政府可拥有本发明的某些权利。

背景技术

发明领域

本发明涉及邻苯二甲酸乙酸纤维素(“cellulose acetate phthalate，CAP”)不溶性微粒化形式(如凝胶形式)或者可分散于水中并产生微粒化CAP颗粒的CAP固体剂型(如膜或海绵体)，其在旨在长期重复使用的抗感染/卫生用品中作为活性成分。

本发明还涉及联合使用邻苯二甲酸乙酸纤维素和乳杆菌(Lactobacilli)以维持正常的酸性***环境。

本发明还涉及预防月经期间产生中毒性休克综合征毒素1。

本发明还用于防止疱疹病毒、尤其是2型疱疹病毒的散发(shedding)和传播，以及用于治疗疱疹损伤。

本发明还涉及维持低***pH。

本发明还涉及治疗白色念珠菌(Candida albicans)感染的方法。

背景信息

a.邻苯二甲酸乙酸纤维素

已在医药工业中广泛用作片剂和胶囊的肠溶衣(Goskonda SR，Lee JC，“Cellulose acetate phthalate，”Handbook of Pharmaceutical Excipients，A.H.Kibbe编辑.第三版，American PharmaceuticalAssociation/Pharmaceutical Press，Washington，D.C./London，U.K.，99-101页，(2000))的1，2-苯二羧酸乙酸纤维素(醋酞纤维素(Cellacephate)、邻苯二甲酸乙酸纤维素(cellulose acetate phthalate)、邻苯二甲酸乙酸纤维素(Cellulosi acetas phthalas)、纤维醋法酯(Cellacefate)；CAP)也是候选杀微生物剂独特配方中的活性成分，所述配方预期用于预防数种性传播疾病(sexually transmitted disease，STD)病原体(包括人免疫缺陷病毒(HIV-1)、疱疹病毒和数种细菌性STD病原体)的传播(Neurath AR，Debnath AK，Jiang S，Strick N，Dow GJ，“Method for decreasing thefrequency of transmission of viral infections using cellulose acetatephthalate or hydroxypropyl methylcellulose phthalate excipients”，USP5,985,313；Neurath AR，Jiang S，Debnath AK，Strick N，Dow GJ，“Methodsand compositions for decreasing the frequency of HIV，herpesvirus andsexually transmitted bacterial infections”，USP 6,165,493；Neurath AR，“Method for inactivating bacteria associated with bacterial vaginosis usingcellulose acetate phthalate and/or hydroxypropyl methylcellulosephthalate”，USP 6,462,030；Neurath AR，Strick N，“Biodegradablemicrobicidal vaginal barrier device”，USP 6,572,875；Neurath AR，Strick N，“Biodegradable microbicidal vaginal barrier device”，USP 6,596,297；Neurath AR，Strick N，Li YY，“Water dispersible film，”美国专利申请公开号2005/0070501 A1(2005年3月21日公开))。

b.乳杆菌的作用

定殖在人粘膜部位的适当的乳杆菌菌株对于健康具有有益作用，并抑制不希望的病原细菌(包括细菌性STD病原体)的定殖(Hughes V L，HillierSL，“Microbiologic characteristics of Lactobacillus products used forcolonization of the vagina，”Obstetrics & Gynecology，75：244-48(1990)；(Reid G，“Microbial adhesion to biomaterials and infections of theurogenital tract，”Colloids and Surfaces B：Biointerfaces，2：377-385(1994)；Reid G，“The scientific basis for probiotic strains of Lactobacillus”Appl.Environ，Microbiol.6：3763-3766(1999)；Reid G，Bruce AW，Bussher HJ，Van der Mei HC，“Lactobacillus therapies，”USP 6,051,552；Bruce AW，Reid G，“Lactobacillus compositions and methods for treating urinary tractinfections，”USP 6,180,100；Cavaliere Ved.Vesely RMA，De Simone C，“Pharmaceutical compositions containing lactobacilli for treatment ofvaginal infections and related method，”USP 6,277,370；Reid G，Bruce AW，Oral adinistration of lactobacillus for the treatment and prevention ofurogenital infection，”美国专利申请号2002/0044926(2002年4月18日公开)；Bruce AW，Reid G，“Oral administration of lactobacillus for thetreatment and prevention of urogenital infection，”USP 6,479,051；Mercenier A，Pavan S，Pot B，“Probiotics as biotherapeutic agents：Presentknowledge and future prospects，”Curr.Pharm.Des.，9：99-110(2002)；Chrisope GL，“Vaginal lactobacillus medicant，”USP 6,468,526；Reid G，BruceAW，“Oral administration of lactobacillus for the maintenance ofhealth in women during pregnancy and at other life stages，to reduce therisk of urogenital diseases，”美国专利申请号2003/00118671(2003年6月26日公开)；Hakansson EG，Forsgren-Brusk U，Anderson R，Holm SE，Hakansson S，“Strain of Lactobacillus plantarum and uses thereof，”USP6,761,885))。

先前已确定，CAP制剂在5或15分钟时间内使几种性传播细菌失活，但对卷曲乳杆菌(Lactobacillus crispatus)没有影响(Neurath AR，Jiang S，Debnath AK，Strick N，Dow GJ，“Methods and compositions for decreasingthe frequency of HIV，herpesvirus and sexually transmitted bacterialinfections”，USP 6,165,493)。这些短期失活实验的结果并没有确定乳杆菌是否仅在失活动力学方面分别与STD和细菌性***病相关细菌(NeurathAR，“Method for inactivating bacteria associated with bacterial vaginosisusing cellulose acetate phthalate and/or hydroxypropyl methylcellulosephthalate”，USP 6,462,030)有所不同，或者确定乳杆菌在微粒化邻苯二甲酸乙酸纤维素存在下是否维持长期的生存力。

c.中毒性休克综合征毒素1(TSST-1)的产生

育龄妇女的***环境为酸性(pH 3-5)。在经期中，由于月经液和血的存在，***环境的pH有所提高。这可引起存在于***环境中的微生物组成发生变化，并引起乳杆菌水平降低以及病原微生物定殖可能性提高(Brzezinski A，Stern T，Arbel R，Rahav G，Benita S，“Efficacy of a novelpH-buffering tampon in preserving the acidic vaginal pH duringmenstruation，”Internat J.Gynecology，85：298-300(2004))。可能的后果之一与金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的感染和定殖以及所伴随的TSST-1产生有关。为了解决这个问题，已设计和开发了包含可抑制金黄色葡萄球菌(S.aureus)复制的成分的吸收产品如卫生棉条、卫生巾、创伤敷料等，例如已开发了包含多羟基脂肪醇与脂肪酸的酯的卫生棉条(Brown-Skrobot SK，“Additives to tampons”，USP 5,705,182)。关于使用卫生棉条与TSST-1的关系以及发现预期防止TSST-1形成的卫生棉条添加剂的信息概括于上述美国专利文本中，并且也包括在本文中。

在将中毒性休克综合征与使用卫生棉条相联系的报告发表之后，许多研究者进行了研究，这些研究设计用于评估卫生棉条对金黄色葡萄球菌生长的影响，以及卫生棉条对这些细菌产生TSST-1的影响。阐明卫生棉条对TSS影响的早期工作得到了相互矛盾的数据。Schlievert等(SchlievertPM，Blomster DA，Kelly JA，“Toxic shock syndrome Staphylococcusaureus：Effect of tampons on toxic shock syndrome toxin 1 production，”Obstet.Gynecol.，64：666-671(1984))研究了卫生棉条对金黄色葡萄球菌的影响，从而评价卫生棉条组分是否促进金黄色葡萄球菌的生长以及中毒性休克综合征毒素-1的产生。得到结论是：在其研究的测试条件下，卫生棉条组分既不提供用于中毒性休克综合征金黄色葡萄球菌生长的营养物，也不提供诱导中毒性休克综合征毒素-1的产生高于对照水平的因素。孵育6小时后，所检测的某些市售卫生棉条抑制细菌生长并抑制毒素产生。另一些抑制毒素产生但不抑制细胞生长。一种卫生棉条抑制细胞生长但增加了产生的毒素量。另一方面，Tierno PM Jr，Hanna BA，“In vitro amplificationof toxic shock syndrome toxin-1 by intravaginal devices，”Contraception，31：185-194(1985)报道，在他们的实验中卫生棉条确实刺激金黄色葡萄球菌产生TSST-1。

Reiser等(Reiser RF，Hinzman SJ，Bergdoll MS，“Production of toxicshock syndrome toxin 1 by Staphylococcus aureus restricted to endogenousair in tampons，”J.Clin.Microbiol.，25：1450-1452(1987))其后报道了他们为确定四种品牌卫生棉条对中毒性休克综合征毒素-1产生的影响而进行的测试的结果。所检测卫生棉条可用的空气量限制在测试时封装该卫生棉条的囊(以截留分子量在小于10,000的纤维素肠衣为原料制得)中所含的空气量。据认为该方法的优势在于，认为有限的可用空气量较之先前使用的方法更近似地模拟了月经期间已置入卫生棉条的***中的体内条件，并且在测试前没有改变所检测的卫生棉条。Reiser等所进行测试的结果表明，卫生棉条为金黄色葡萄球菌的生长提供了增大的表面积并为毒素产生提供了足够的氧气。注意到所测试的任何卫生棉条对金黄色葡萄球菌的生长或TSST-1的产生均没有显著抑制。

与Reiser等同时，Robbins等(Robbins RN，Reiser RF，Hehl GL，Bergdoll MS，“Production of toxic shock syndrome toxin 1 byStaphylococcus aureus as determined by tampon disk-membrane-agarmethod，”J.Clin.Microbiol.，25：1446-1449(1987))报道了17种市售卫生棉条对TSST-1毒素产生的影响，其中使用“盘-膜-琼脂”(disk-membrane-agar，DMA)法，在CO₂为5体积％的空气中在37℃下孵育19小时。用产生TSST-1的金黄色葡萄球菌菌株接种覆盖于小培养皿中覆盖了滤膜的琼脂培养基(含有或不含血)。Robbins等推断，卫生棉条对TSS的主要作用可能是为大量定殖提供纤维表面以及为TSST-1的产生提供足够的空气。另外，他们发现添加剂(如市售的除臭卫生棉条中使用的除臭剂/表面活性剂)抑制TSST-1产生的证据，并在其他不同市售卫生棉条中观察到抑制金黄色葡萄球菌的生长使TSST-1的产生下降。认为抑制TSST-1产生以及抑制金黄色葡萄球菌生长对于降低TSS风险可能均是重要的。

Auerbach的美国专利USP 4,405,323(“卫生巾”)公开了为消除中毒性休克综合征和痛经的危害而设计的卫生棉条，其全部内容通过参考并入本文中。所述卫生棉条中掺入了抗菌剂，据称该抗菌剂在与体液接触时即分散，并阻碍产生导致中毒性休克综合征的毒素的生物发育。所公开的可用抗菌材料有聚维酮-碘化合物、汞、锌、青霉素、红霉素和呋喃西林。

Kass的WO 86/05388(公开于1986年9月25日)教导，在使用吸收垫时，在该吸收垫(例如月经卫生棉条)中包含无毒二价阳离子的盐可抑制中毒性休克综合征毒素-1及其它葡萄球菌产物的产生。合适的盐包括镁盐、钡盐、钙盐或锶盐(优选)或者其它二价阳离子的盐如锌盐、锰盐、铜盐、铁盐、镍盐等。所述盐的阴离子部分不是关键的。硬脂酸镁和乙酸镁是该发明中特别优选使用的盐。

在Olevsky的USP 4,374,522(“带有中央贮液器的卫生棉条”)中提到，使用月经卫生棉条的方式似乎表明，某些卫生棉条的高吸收能力以及伴随的使用时间的延长是导致中毒性休克综合征形成的因素，该文献通过参考整体并入本文。Olevsky的专利提出这一理论：吸收能力有限并需要相对更频繁更换的卫生棉条可能是理想的。Olevsky的专利提供由常规纤维素材料(如人造丝纤维)制成的卫生棉条，其被压制成具有开放底面的子弹形状，所述开放底面由流体不透性片密封。所述流体不透性底部和传统的子弹形纱布限定据称可作为过量月经液的贮液器的空心中央贮液器区。

Lefren等的USP 4,431,427(“卫生棉条及其制造”)公开了包含单体、寡聚体或多聚体形式的生理安全性水溶性酸的月经卫生棉条，其通过参考整体并入本文。公开了柠檬酸、乙醇酸、苹果酸、酒石酸和乳酸可用于实施该发明。据称在卫生棉条中存在一种或多种上述的酸可抑制导致中毒性休克的细菌的生长。当酸以其多聚体形式使用时，所述卫生棉条可另外包括用于将该多聚体酸水解为单体形式的酶。

Sipos的加拿大专利号1,123,155(“月经卫生棉条”)公开了用于在月经期间防止中毒性休克综合征的月经卫生棉条，其通过参考整体并入本文。该卫生棉条的主体在***端是开放的而抽出端是闭合的，在其展开状态下被阻隔流体的薄柔性膜紧密包围。可由聚乙烯片制成的这种膜在使用该卫生棉条时背向***壁，其对***黏膜为中性，并且完全不渗透细菌、病毒以及月经的毒性分解产物。

Bardhan的加拿大专利号1,192,701(“含有对抗细菌有害作用的手段的卫生棉条”)公开了用于吸收月经的卫生棉条，该卫生棉条包括液体吸收材料的内层以及包围并封装所述内层的外层。月经排出物可流进所述内层，而所述外层不允许内层的月经液流出。许多液体吸收性洗液芯从内层伸出穿过外层中形成的孔，作为月经排出物从卫生棉条外部流向其内层的导管。该已公开结构据称可使卫生棉条外排出物的可用性降至最低，从而降低金黄色葡萄球菌生长以及由此导致其产生毒素的可能性。该专利还公开了，在所述内层中可包括对金黄色葡萄球菌具有杀菌或抑菌作用的抗微生物化合物。所述抗微生物剂可以采用抗生素(如青霉素、红霉素、四环素或新霉素)、化学治疗剂(如磺酰胺)或消毒剂(如苯酚)的形式。该专利提到，由于卫生棉条被其外层保护从而免于与***壁接触，因此对抗微生物剂的变应性或其它不良反应的风险降至最低，并且因为所述抗微生物剂还被外层保护从而免于与月经排出物接触，所以几乎没有破坏***中共生生物的风险或者***外任何月经排出物中金黄色葡萄球菌产生针对该抗微生物剂的抗性的风险。

Notermans et al.，“Effect of glyceryl monolaurate on toxin productionby Clostridium botulinum in meat slurry，”J.Food Safety，3：83-88(1981)报道了，当以5g/kg肉浆(pH 6.0-6.2)的比例使用时，单月桂酸甘油酯抑制A型、B型和E型肉毒梭菌(Clostridium botulinum)产生毒素。该文未提及金黄色葡萄球菌或其产生的任何毒素，也未提及吸收性产品或中毒性休克综合征。

Jacob等的USP 4,585,792(“***用品和月经用品的保护性添加剂”)公开了：当局部应用到经期女性***区域时，L-抗坏血酸会使已知促进中毒性休克综合征的毒素失活，其通过参考整体并入本文。该抗坏血酸化合物可包含在***卫生棉条中。USP 4,722,937的公开内容提到了同样的效果，其通过参考整体并入本文。

Jacobs的美国专利USP 4,413,986(“包含无菌***手段的卫生棉条组装物”)公开了用于将卫生棉条无菌******的无菌包装卫生的棉条组装物，其具有套在***管周围的导管，以及附着在该导管内部端并折回***管内部端的柔性套管，其通过参考整体并入本文。在使用时，随着所述***管被推过导管并推入***中，所述柔性套管沿着***管的内部端被拉开，并沿其外部伸展。***管被******中的部分自始至终完全被所述柔性套管套住。

预期抑制TSST-1产生的其他卫生棉条添加剂是烷基多苷(alkylpolyglycoside)(Resheski-Wedepohl KL，Syverson RE，“Compositions forthe inhibition of exoprotein production from gram positive bacteria，”USP6,531,435，其由此通过参考整体并入本文；Resheski-Wedepohl KL，Syverson RE，Potts DC，Young MD，Yahiaoui A，“Absorbent articles for theinhibition of exoprotein production from gram postivie bacteria，”USP6,599,521，其由此通过参考整体并入本文；Resheski-Wedepohl KL，Syverson RE，“Inhibition of exoprotein production from gram positivebacteria，”USP 6,656,913；Resheski-Wedepohl KL，Syverson RE，“Methodof producing a tampon capable of inhibiting exoprotein production fromgram positive bacteria，”其由此通过参考整体并入本文，美国专利申请号2004/0053856 A1(2004年3月18日公开))、类异戊二烯(Syverson RE，Proctor RA，“Isoprenoid compostions for the inhibition of exoproteinproduction from gram positive bacteria，”USP 6,534,548)、硫乳霉素(thiolactomycin)或硫代丙二酸盐/酯(thiomalonate)(Syverson RE，Proctor RA，“Methods for inhibiting the production of TSST-1，”USP6,821,999；Syverson RE，Proctor RA，“Methods of inhibiting the TSST-1production in gram positive bacteria，”美国专利申请号2005/0113448 A1(2005年5月26日公开)；Syverson RE，Proctor RA，“Methods forinhibiting the production of TSST-1，”美国专利申请号2003/0157148 A1(2003年8月21日公开))、萜和类萜(Syverson RE，Proctor RA，“Inhibition of exoprotein production in absorbent articles usingisoprenoids，”美国专利申请号2003/0105439 A1(2003年6月5日公开))、浅蓝菌素、三氯生或六氯酚(Syverson RE，Proctor RA，“Absorbent articlescontaining additives，”美国专利申请号2003/0157149 A1(2003年8月21日公开))、氧抑制剂(Deresiewicz RL，Kasper DL，“Absorbent article，particularly a tampon having additives that reduce toxic shock syndrometoxin production，”USP 6,548,552，其由此通过参考整体并入本文)以及多种芳族组合物(Syverson RE，Proctor RA，“Inhibition of exoproteinproduction in absorbent articles using aromatic compositions，”美国专利申请号2003/0135173 A1(2003年7月17日公开))。

d.HSV感染的局部治疗

疱疹病毒包括分离自人的以下病毒：

(1)单纯疱疹病毒(“HSV-1”)

(2)单纯疱疹病毒(“HSV-2”)

(3)人巨细胞病毒(“HCMV”)

(4)水痘带状疱疹病毒(“VZV”)

(5)EB病毒(“EBV”)

(6)人疱疹病毒6(“HHV6”)

(7)单纯疱疹病毒7(“HSV-7”)

(8)单纯疱疹病毒8(“HSV-8”)

单纯疱疹病毒引起的损伤可出现在皮肤上或黏膜上的任何部位，但最常见于脸(尤其是口或唇周围)、结膜和角膜上或者生殖器。在短暂的麻刺感不适或瘙痒的前驱期之后，在红斑性基部出现小的紧绷小泡。单个聚簇的大小可以为0.5～1.5cm，但几个组可以合并在一起。在皮肤上紧密附着在基础结构(例如鼻、耳或手指)的单纯疱疹可引起疼痛。小泡可持续几天，然后开始变干，并形成浅黄色薄痂。通常在发病后10天内痊愈。在潮湿的身体部位中，痊愈可能较慢，并有继发性炎症。单个疱疹损伤的通常完全痊愈，但在同一位置复发的损伤可导致萎缩和瘢痕。

在感染HSV-2的女性中，可以没有皮肤损伤，感染可以完全维持在***内部。常常波及宫颈，并且越来越多的证据表明这可能是***发生的一种因素。

角膜损伤通常由复发性疱疹性角膜炎组成，表现为浅层上不规则的树状溃疡。随后可发生瘢痕并继而损害视力。

在感染个体(包括无症状的感染个体)中经常发生疱疹病毒(HSV)的散发。HSV可从多个解剖学部位散发，并且这种散发(类似于直接暴露于病毒)是HSV传播的重要风险(Cherpes TL，Melan MA，Kant JA，Cosentino LA，Meyn LA，Hillier SL，“Genital tract shedding of herpessimplex virus type 2 in women：Effects of hormonal contraception，bacterial vaginosis，and vaginal group B Streptococcus colonization，”Clin.Infect.Dis.，40：1422-1428(2005)；Sacks SL，Griffiths PD，Corey L，CohenC，Cunningham A，Dusheiko GM，Self S，Spruance S，Stanberry LR，WaldA，Whitley RJ，“HSV shedding，”Antiviral Res.，63：S19-S26(2004)；KoelleDM，Wald A，“Herpes simplex virus：The importance of asymptomaticshedding，”J.Antimicrob.Chemother.，45：1-8(2000))。由于约20％的美国妇女(包括孕妇)已感染2型HSV(HSV-2)，因此新生儿感染(包括分娩期间感染)HSV的风险很高(Rudnick CM，Hoekzema GS，“Neonatalherpes simplex virus infections，”Am.Fam.Physician，65：1138-1142(2002))。可通过全身性使用抗HSV药物(例如，阿昔洛韦和伐昔洛韦)抑制HSV的散发和传播(Scott LL，Hollier LM，McIntire D，Sanchez PJ，Jackson GL，Wendel GD Jr，“Acyclovir suppression to prevent clinicalrecurrences at delivery after first episode genital herpes in pregnancy：Anopen-label trial，”Infect.Dis.Obstet.Gynecol.，9：75-80(2002)；Gupta R，Wald A，Krantz E，Selke S，Warren T，Vargas-Cortes M，Miller G，Corey L，“Valacyclovir and acyclovir for suppression of shedding of herpes simplexvirus in the genital tract，”J.Infect.Dis.，190：1374-1381(2004)；Corey L，Ashley R，“Valaciclovir HSV Transmission Study Group，”Herpes，11：170A-174A(2004)；Corey L，Wald A，Patel R，Sacks SL，Tyring SK，Warren T，Douglas JM Jr，Paavonen J，Morrow RA，Beutner KR，Stratchounsky LS，Mertz G，Keene ON，Watson HA，Tai，D，Vargas-CortesM，“Valacyclovir HSV Transmission Study Group，”N.Engl.J.Med.，35：11-20(2004))。然而，频繁使用这些抗病毒药物可导致抗药性病毒变体的出现(Gershengorn HB，Blower SM，“Impact of antivirals andemergence of drug resistance：HSV-2 epidemic control，”AIDS PatientCare STDs，14：133-142(2000))。用于治疗和预防疱疹损伤和相关病毒散发的方法是通过局部施用某些化合物，例如香草素(vanilloid)(O’Neill TP，Kasting GB，Cupps TL，“Use of vanilloids for the prevention of lesions dueto herpes simplex infections，”USP 5,461,075)、四乙铵盐及其它季铵化合物(Docherty J，Tsai CC，“Methods for treating subjects infected with aherpes virus，”USP 6,599,945；Johnson BR，“Anti-infective compositions，methods and systems for treating disordered tissue”，USP 6,759,434；Baldone JA，“Treatment of diseases caused by herpes viruses”，USP5,158,980)、吡拉西坦(Centifanto Y，“Methods of prophylaxis andtreatment of herpes simplex lesions utilizing piracetam as the activeingredient，”USP 5,232,700)、1H-咪唑-4-乙胺磷酸盐(IEP)(Jack BA，White BT，“Composition for treatment of cold sores，”USP 5,294,440)、咖啡因(Potts M，“Caffeine in the treatment of herpes simplex virusinfections，”USP 5,382,436)以及锌盐(Godfrey HR，“Topical zinccompositions and methods of use，”USP 6,558,710)。

上述抗病毒化合物均有引起产生抗性病毒突变体的可能。所有均对应于这些人类反复使用的安全性尚未严格确定的化合物。相比而言，微粒化CAP(其以片剂和胶囊包衣材料的形式用于人类已将近50年)的安全性已得到证明(见上文)。因为微粒化CAP每单位重量有极大的表面积，提示其具有高吸附能力，所以本发明人认为研究微粒化CAP是否可以从环境去除疱疹病毒并由此阻断病毒散发是很重要的。本文所述的实验结果对此提供了支持性证据。

双室施用器

DE 20 2005 004 135 U1(WO 2006/094483)公开了一种双室施用器。

Cole的USP 5,089,606公开了用于***手术的双室***。

Barney的USP 5,462,526公开了在分配混合物前，将两个室挤压在一起，以混合置于其中的药物(也参见Rolf的USP 6,620,436)。

其它公开了双室分配器的美国专利包括：Higuchi的3,760,805；Sneider的USP 4,180,072；Pearson等的USP 4,410,321；Lyons的USP4,458,733；Kriesel等的USP 5,531,683；Meyer的USP 5,569,191；Fowles等的USP5,989,237、Fowles等的USP 6,090,092以及Wirt等的USP 6,648,852。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种卫生棉条，以在月经期间预防金黄色葡萄球菌的繁殖和中毒性休克综合征毒素1的产生。

本发明的另一目的是维持低***pH。

本发明的另一目的是预防疱疹病毒尤其是2型疱疹病毒的散发和传播，以及治疗疱疹损伤并预防疱疹病毒传播。

本发明的另一目的是应用与乳杆菌组合的邻苯二甲酸乙酸纤维素制剂以维持健康的酸性***环境。

本发明的另一目的是提供规律性(例如每天)应用邻苯二甲酸乙酸纤维素制剂，以维持正常的酸性***环境以及降低***中有害微生物和病毒的复制。

本发明的另一目的是使用双室施用器(分配器)提供含水凝胶形式的微粒化邻苯二甲酸乙酸纤维素。

本发明的另一目的是提供用于治疗白色念珠菌感染的方法。

本发明实现了上述目的以及其它目的、目标和优势。

本发明涉及在其上(或其中)掺入了不溶性微粒化邻苯二甲酸乙酸纤维素(“CAP”)粉的卫生棉条或与CAP膜组合的卫生棉条，所述CAP为足够的量，并且位于卫生棉条(如包在CAP膜中的卫生棉条)上(或其内部)，以预防月经期间金黄色葡萄球菌的繁殖和中毒性休克综合征毒素1的产生。

本发明还涉及防止月经期间金黄色葡萄球菌繁殖和中毒性休克综合征毒素1产生的方法，其包括对有此需要的女性***施用本文所述的卫生棉条，所述卫生棉条上(或其中)含有不溶性微粒化邻苯二甲酸乙酸纤维素或者在其周围置有邻苯二甲酸乙酸纤维素膜包层。

本发明还涉及用于维持低***pH的方法，其包括以凝胶或CAP固体剂型的形式对女性***施用药物有效量的不溶性微粒化形式邻苯二甲酸乙酸纤维素，所述固体剂型可分散于水中并且产生微粒化CAP颗粒，并且为CAP膜或CAP海绵的形式。

本发明还涉及用于预防疱疹病毒(尤其是生殖道散发的2型疱疹病毒)散发和传播的方法，其包括以凝胶或CAP固体剂型的形式对女性***施用药物有效量的不溶性微粒化形式邻苯二甲酸乙酸纤维素，所述固体剂型可分散于水中并且产生微粒化CAP颗粒，并且为CAP膜的形式。

本发明还涉及用于治疗疱疹损伤的方法，其包括以凝胶形式对有此需要的人(女性或男性)局部施用药物有效量的不溶性微粒化形式的邻苯二甲酸乙酸纤维素，或者在预先润湿的应用部位向有此需要的人局部施用CAP膜。

本发明还涉及维持酸性健康***环境的方法，其包括对女性***施用药物有效量的(i)不溶性微粒化形式邻苯二甲酸乙酸纤维素和(ii)乳杆菌。

本发明还涉及规律性(例如每天)维持正常酸性的***环境以及减少***中有害微生物和病毒复制的方法，包括以含有CAP的凝胶或CAP膜的形式对女性施用药物有效量的不溶性微粒化形式邻苯二甲酸乙酸纤维素。

本发明的一个实施方案涉及包含微粒化邻苯二甲酸乙酸纤维素和2～5％(以重量计)硝酸咪康唑的组合物。

本发明还涉及用于提供低***pH、治疗疱疹病毒、治疗***细菌感染、阻断经期中毒性休克综合征的发生或治疗白色念珠菌的方法，其包括对女性施用药物有效量的微粒化形式邻苯二甲酸乙酸纤维素和2～5％(以重量计)的硝酸咪康唑。

附图说明

图1是显示CAP膜的溶解速率作为pH函数的图。

图2是显示CAP溶解度对pH的依赖性的图。

图3是显示使pH达到CAP溶解度开始增加的水平则每克CAP需要多于30ml血液的图。

图4是显示阴离子聚合物对ACD血浆凝固的影响的图。

图5是显示HSV-2与微粒化CAP(Aquateric

(含有约67％(以重量计)CAP))结合的图。

图6是显示向180mg Aquateric

中添加***时pH的变化的图。

图7A是德国专利申请DE 20 2005 00 4 135 U1的图1中所示的双室施用器装置的截面图。

图7B是德国专利申请DE 20 2005 00 4 135U1的图1中所示的双室施用器装置的俯视图。

图8A和8B是显示CAP抑制金黄色葡萄球菌生长和中毒性休克综合征毒素1产生的图。

发明详述

本发明涉及不溶性微粒化形式邻苯二甲酸乙酸纤维素或邻苯二甲酸乙酸纤维素固体剂型作为活性成分的应用，例如用于可长期重复使用的抗感染/妇女卫生用品中。本发明涉及使用微粒化的邻苯二甲酸乙酸纤维素以维持低***pH，以及联合使用微粒化CAP和乳杆菌以维持正常的酸性***环境。本发明还提供应用微粒化邻苯二甲酸乙酸纤维素来预防月经期间金黄色葡萄球菌的繁殖和中毒性休克综合征毒素1的产生。本发明还使用微粒化邻苯二甲酸乙酸纤维素来预防疱疹病毒的散发和传播以及治疗疱疹损伤。本发明还应用微粒化邻苯二甲酸乙酸纤维素与硝酸咪康唑的组合来治疗白色念珠菌感染。

本发明的活性成分(CAP)的有效性仅需要人组织与活性成分之间短暂接触。这种应用由于CAP(尤其是其微粒化形式)的安全性、其在生理性流体存在下的低pH值缓冲能力及其极大的单位重量吸附能力而成为可能。

可溶且为微粒化形式的CAP的安全性迄今已详细确定，如已发表的论文和来自CAP及微粒化形式CAP(Aquateric

)生产商(EastmanChemical Company Chemical Company，Kingsport，TN；FMCCorporation，Philadelphia，PA)的安全性数据所分别显示的。

单剂量和重复剂量的毒性及致癌性研究

单剂量的毒性研究

CAP可见于“非活性成分指南”中，其中它被定义为获准以经口剂型用于人类用途的在售的药物赋形剂。CAP的安全性已得到广泛研究，并且已显示其无不良作用(Neurath AR，Strick N，Li YY，Lin K，Jiang S，“Design of a‘microbicide’for prevention of sexually transmitted diseasesusing‘inactive’pharmaceutical excipients，”Biologicals，17：11-21(1999))。

FMC Corporation(Philadelphia，PA)(U.S.PharmacopeialConvention Inc.The U.S.Pharmacopeia；pp.780-781，(2000))已对微粒化形式的CAP(即Aquateric

(含有66-73％(以重量计)微粒化CAP、聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物和经蒸馏的乙酰化单酸甘油酯)进行了广泛的毒性测试。以下的表1和2包括来自FMC Corporation材料安全性数据表的Aquateric

的毒理学信息。

表1.Aquateric

的毒理学信息

研究类型	结果	动物模型
			眼刺激	无刺激	兔
皮肤刺激	无刺激	兔
			皮肤致敏	无过敏	豚鼠
皮肤吸收	皮肤的LD50＞2,000mg/kg	兔
			吸入	LC50＞5.21mg/L/4小时(可达到的最大浓度，无死亡)	大鼠
摄入	经口LD50＞5,000mg/kg	大鼠

重复剂量的毒性和致癌性研究

大鼠(经口研究)

Kotkoskie等(Kotkoskie LA，Freeman C，Palmieri MA，“Subchronictoxicity and developmental toxicity studies in rats with Aquateric

aqueous enteric coating，”Internat J.Toxicology，18：109-116(1999))在每组为20只雄性和20只雌性大鼠的4组(其在90天中每天饲喂0、5,000、25,000或50,000ppm的Aquateric

)中检查了Aquateric

(含有66-73％微粒化纤维素乙酸1，2-苯二羧酸酯(邻苯二甲酸乙酸纤维素：CAP))的亚慢性毒性。在研究期间未发生死亡，并且未观察到与处理有关的临床体征。临床化学研究未得到毒理学显著发现，并且所有的偶然发现均在生理可接受的历史参照范围之内。同样，对器官重量或器官/体重比率也没有与处理有关的影响。基于这些研究结果，“未观察到副作用的水平”[No-Observed-Adverse-Effect-Level，NOAEL；通过实验或观察发现在所定义的接触条件下不导致靶生物发生可检测的形态学、功能、生长、发育或寿命不良变化的物质用量最高浓度；IUPAC Compendium of ChemicalTerminology，第二版1997，65：2076(1993)，http://www.iupac.org/goldbook/N04208.pdf]可超过每天饮食中50,000ppmAquateric

。这对于雄性和雌性大鼠分别代表3,604或4,094mg/kg/天的平均剂量，约为用作杀微生物剂的Aquateric

的预期临床局部剂量的200倍。

在Hodge的长期经口给药实验(Hodge H，“The chronic toxicity ofcellulose acetate phthalate in rats and dogs，”J.Pharmacol.Exp.Therapeutics，80，250-255(1944))中，对各为20只雌性大鼠的4个组用0、5、20和30％CAP随意饲喂一年。所述食物由Purina fox狗粮组成，其中混入CAP并随意喂食。大量摄入CAP的大鼠显示生长速率的下降，其随剂量而提高。尸检中未观察到异常。组织学检查未显示一致的病理变化。总之，在大鼠中未发现CAP的毒效应。

狗(经口研究)

每天用1、4或16克的CAP饲喂各两条狗的三个组一年。所述狗在整个实验期间保持良好的健康和状态，并在尸检中未发现一致的病理变化。在该研究中没有CAP相关毒效应的迹象(Hodge H，“The chronic toxicityof cellulose acetate phthalate in rats and dogs，”J.Pharmacol.Exp.Therapeutics，80，250-255(1944))。向大鼠或狗饲喂CAP一年未显示出靶器官毒性的迹象。在该亚慢性研究中，大鼠组在连续90天中在食物中接受0(对照)、5,000、25,000或50,000ppm(3600至4100mg/kg/天的剂量范围)的Aquateric

(含有67％的CAP)。在任何处理组中均未观察到死亡、中毒的临床体征或者对血液或血清化学参数、体重、摄食量、眼科检查或者组织的组织学评价的不良毒理学影响。

以下的表3是CAP重复给药的毒性和致癌性研究的总结：

诱变性

Batt和Kotkoski(Batt KJ，Kotkoskie LA，“An evaluation ofgenotoxicity tests with Aquateric aqueous enteric coating”，Internal J.Toxicology，18：117-122(1999))在埃姆斯试验、小鼠淋巴瘤突变测定和小鼠微核测试中探寻了微粒化CAP的诱变潜能。所有三种测试的结果均为阴性，提示微粒化CAP在该标准测试组合中没有诱变性或遗传毒性(参见以下表4)。

生殖和发育毒性

Kotkoskie等(Kotkoskie LA，Freeman C，Palmieri MA，“Subchronictoxicity and developmental toxicity studies in rats with Aquateric

aqueous enteric coating，”Internat J.Toxicology，18：109-116(1999))研究了微粒化CAP在大鼠中的发育毒性。使25只的怀孕Sprague-Dawley大鼠组在妊娠的第6天至第15天随意在其食物中接受0、5,000、25,000或50,000ppm的微粒化CAP。在第20天处死时，未观察到死亡以及体重或妊娠子宫重量的显著差异。另外，在剖腹产参数或观察到的肉眼可见损伤方面均没有与处理有关的显著差异。只发现一例胎鼠畸形(小颌)，这被认为是假象，并与处理无关。没有胚胎的外部变化，胎鼠或幼仔的内脏或骨骼变异的发生率也没有统计学显著差异。

Kotkoskie等(Kotkoskie LA，Freeman C，Palmieri MA，“Subchronictoxicity and developmental toxicity studies in rats with Aquateric

aqueous enteric coating，”Internat.J.Toxicology，18：109-116(1999))还在20只雄性Sprague-Dawley CD大鼠中检查了亚慢性毒性。连续90天在食物中对大鼠施用浓度为0、5,000、25,000或50,000ppm微粒化CAP。接受50,000ppm微粒化CAP的雄性的睾丸绝对重量降低；然而，睾丸相对重量(睾丸与脑重量的比率)未受影响。未出现与睾丸重量绝对下降相关的组织学变化。

以下的表5是CAP生殖毒性研究的总结：

局部致敏和光致敏

豚鼠(皮肤研究)

AquatericCD-910(含有66-73重量％的微粒化纤维素乙酸1，2-苯二羧酸酯(邻苯二甲酸乙酸纤维素：CAP))(FMC Corporation)的生产商对Hartley豚鼠进行了皮肤致敏研究以及随后的诱导处理。用Aquateric

对皮肤进行各间隔一周的三次诱导处理后，确定了当局部应用到Hartley豚鼠时Aquateric

是非致敏的。在诱导或施加攻击后，在测试动物中未观察到应答。在攻击期间，在任何攻击对照豚鼠中均未发现刺激。在施加攻击后阳性对照组的动物表现出明确的致敏反应。CAP的溶解度在pH 7及更高pH时颇高。CAP在pH 6时仅最低限度地可溶；低于pH 6时，溶解度进一步降低(参见图1)。使用新开发的用于CAP分光光度测定的灵敏方法(Neurath AR，Strick N，“Quantitation of cellulose acetate phthalate inbiological fluids as a complex with ruthenium red，”Anal.Biochem，288：102-04(2001))进行的更详细研究表明，在pH 5.5时CAP的溶解度约为7μg/ml，并且随pH的降低而进一步降低(参见图2)。来自大鼠的90天研究(Kotkoskie LA，Freeman C，Palmieri MA，“Subchronic toxicity anddevelopmental toxicity studies in rats with Aquateric

aqueous entericcoating，”Internat.J.Toxicology，18：109-116(1999))的NOAEL约为2,450mg可溶性CAP/kg/天。如果环境pH水平维持在≤5.5，则使用不溶性微粒化形式CAP时实际上不可能达到这一CAP安全剂量(参见图2)。

本发明人的实验已证明，在低pH时微粒化CAP的缓冲能力出人意料的高。图3显示的结果表明，使pH达到CAP溶解度开始增加(至＞7μg/ml)的水平需要每克CAP＞30ml血。每克CAP所需月经液的量将比所需血的量高得多(图3)。在这些实验中使用了可在水中分散的膜形式的448mgCAP(Neurath AR，Stride N，Li YY，“Water dispersible microbicidalcellulose acetate phthalate film，”BMC Infect.Dis.，3：27(2003)，http/www.biomedcentral.com/content/pdf/1471-2334-3-27.pdf：Neurath AR，Strick，Li YY，“Water dispersible film，”美国专利申请号2005/0070501 A1(2005年3月21日公开))。在这些实验中使用与人血缓冲能力相似的兔血。如Geshnizgani AM，Onderdonk AB，“Defined medium simulatinggenital tract secretions for growth of vaginal microflora，”J.Clin.Microbiol.，30：1323-132，(1992)所述制备模拟月经液。

CAP可以安全地以微粒化形式用于许多生理环境中。由于其高缓冲能力，CAP将提供低pH。这项新发现对于以特有的形式和配方应用微粒化CAP作为抗感染/普通卫生用品而言是必需的。

微粒化CAP的安全性还如下进一步确定。进行一项14天的兔刺激研究，其中每天对兔***施用含有130mg微粒化CAP的1ml制剂。这些研究确定，在使用的浓度和体积下CAP可认为可用于人。相反，用“CONCEPTROL”***凝胶(一种市售的***避孕产品)处理兔时在所有兔中均引起***刺激，这被视作是人用的边界，或者不可用于人类用途。

还对恒河猴***施用微粒化CAP的凝胶制剂(130mg/g)。在施用CAP制剂之后，确定血清化学、***活检、细菌培养和***pH在正常范围内。未检测到血浆和***液中外周CD4∶CD8比率或炎性细胞因子/趋化因子水平的明显变化。***镜检查确定CAP制剂没有刺激性(Boadi T，SchneiderE，Chung S，Tsai L，Gertie A，Ratterree M，Blanchard J，Neurath AR，Cheng-Mayer C，“Cellulose acetate 1，2-benzenedicarboxylate protectsagainst challenge with pathogenic X4 and R5 simian-humanimmunodeficiency viruses，”(2005年1月27日交稿至AIDS))。

CAP膜与人***上皮的生物相容性

抗感染/卫生用品的潜在毒性通常在体外分别使用活性成分稀释液或终产物稀释液来评估。未稀释的制剂通常不用该方法测试。来自马萨诸塞州波士顿布瑞根妇女医院的Raina N.Fichorova博士已开发出用于评估未稀释制剂的新方法。

上皮屏障的破坏和炎性途径的活化可导致对病毒感染的易感性提高。在这方面很少注意到非处方药(OTC)***用品。然而，近期开发的新***用品已提出了黏膜完整性的重要性。只有不引起上皮炎症毒性时，它们才是有效的。使用新的器官型宫颈***模型(VEC100；MatTek Corp.，Ashland MA)对卫生用品或杀***非处方药(“OTC”)产品与CAP进行比较。CAP膜和凝胶制剂在MTT和LDH生存力测定中表现为无毒性，并且与对照相比不诱导促炎介质(例如IL-1、IL-6和IL-8)的释放。相反，市售的含有壬苯醇醚-9的***清洁膜(Apothecus PharmaceuticalCorporation，Oyster Bay，NY)有促炎性作用。该研究证明了VEC组织模型对于评价***用品的免疫炎性特征和安全性的有用性。它证明膜和凝胶形式的CAP可以用作安全的***用品(Trifonova RT，Pasicznyk JM，Fichorova RN，“Vaginal formulations-how innocuous are they to thevaginal epithelial immune function？”American Journal of ReproductiveImmunology，25^th Anniversary Meeting，June 16-18，2005，Providence，RI，(2005))。

与兔的***刺激结果一样，这些新结果还证实，微粒化CAP和CAP膜与一些OTC产品相比不具有毒性，这些OTC产品比微粒化CAP制剂的安全性低得多，并且毒性更高。

微粒化CAP(pH＜6.0)的另一个独特性质是极大的单位重量表面积(参见以下表6)。

基于这些颗粒的表面是光滑的这一推测来计算总表面积。表面上的凹陷会增加颗粒的表面积。这表明，微粒化的CAP颗粒预计对病毒和/或微生物具有高吸附能力。

由于已知肝素及其它硫酸化聚合物抑制血液凝固(de Raucourt E，Mauray S，Chaubet F，Maiga-Revel O，Jozefowicz M，Fischer AM，“Anticoagulant activity of dextran derivatives，”J.Biomed.Mater.Res.，41：49-57(1998))，所以分别测量了硫酸化及羧化聚合物对血液凝固的影响。所测试化合物的终浓度是100μg/ml和1mg/ml(参见图4)。从这些结果可明显看出，可溶性CAP不增加凝固时间，这与任何其他聚合物不同，因此预计不会延长出血的持续时间。在这方面，由于使用了微粒化CAP，因此可溶性CAP的水平比在这些实验中测试的水平(＝1mg/ml)至少低2个数量级。这些结果对于应用微粒化CAP作为抗感染/卫生用品是很重要的。因此，向可能偶尔发生出血(伤口愈合)的部位或者出血为生理过程(月经)一部分的部位应用是可能的，而不是被禁忌。

在本发明的一个实施方案中，卫生棉条中含有掺入其上(或其中)的不溶性微粒化邻苯二甲酸乙酸纤维素粉。或者，卫生棉条可以包裹在邻苯二甲酸乙酸纤维素膜中。

卫生棉条是主要设计用于妇女在经期佩戴以吸收月经、血及其它体液的吸收装置。卫生棉条包括条体和抽出线。条体通常被压制成圆柱形，并且可具有钝形、圆形或成形的前端。条体具有在使用卫生棉条时接近宫颈的前端或远端。条体还具有在使用卫生棉条时接近***开口的近端。

卫生棉条通常具有与近端牢固结合的抽出线，作为从妇女的***抽出卫生棉条的手段。抽出线可通过横向穿过条体形成的孔而结成环。另外，抽出线可具有在该绳的自由端形成的结，以确保线不会与条体分离。

本发明中适用的月经卫生棉条包括吸收剂。该吸收剂可由装配成吸收性片或带的纤维形成。或者，所述吸收剂可由装配和压缩成长形和/或圆柱形的吸收性纤维形成。理想地，该吸收剂由纤维素纤维如棉和人造丝形成。例如，该吸收剂可以是100％棉、100％人造丝、棉和人造丝纤维的混合物或者已知适用于卫生棉条的其它材料，包括人造纤维(如聚酯、聚丙烯、尼龙或其混合物)。吸收剂还可包括可降解纤维。还可以使用其它类型的材料或结构，如纤维素海绵或由弹性体材料形成的海绵。在成形时，吸收剂通常在纤维或其它材料之间包含间隙或孔隙。

适用于本发明的卫生棉条通常由吸收性纤维(包括天然和合成纤维之一或二者皆有)制成，其压制成一个整体，其大小可容易地******中。纤维取向通常为线性或辐射状卷绕结构。卫生棉条通常制成长圆柱形，以使其可以包含足够大的材料体以提供所需的吸收能力，然而也可以制成多种形状。卫生棉条通常经过压缩。压缩可主要通过轴向或径向施加压力来实现。卫生棉条可以由多种混合纤维制成，包括吸收性和非吸收性纤维，其可以具有或不具有合适的覆盖物或包装。用于吸收性产品(如卫生棉条和卫生巾)的覆盖物或包装常以纺粘纤维片(例如，纺粘聚丙烯层)为原料制得。卫生棉条还可以包括多种改善卫生棉条性能的处理中的一种或多种，包括减少摩擦和增强吸收，递送治疗剂，或者二者兼有。

卫生棉条还描述于USP 6,860,874；USP 6,888,043和USP 7,087,045，均通过参考整体并入本文。

CAP的独特配方可用于本文讨论的适应症。这包括CAP膜(NeurathAR，Strick N，Li YY，“Water dispersible microbicidal cellulose acetatephthalate film，”BMC Infect.Dis.，3：27(2003)，http://www.biomedcentral.com/content/pdf/1471-2334-3-27.pdf：NeurathAR，Strick N，Li YY，“Water dispersible film，”美国专利申请号2005/0070501 A1(2005年3月21日公开)，通过参考整体并入本文)、特别适于抑制金黄色葡萄球菌和TSST-1产生的CAP膜与卫生棉条的组合、快速分散片剂形式的CAP以及CAP/Aquateric凝胶，所述凝胶在将Aquateric粉与具有生物粘附特性的无活性凝胶混合之后以凝胶形式递送，所述两种不同的组分在双室施用器内部彼此分开，如公开于德国专利申请DE 20 2005 004 135 U1(WO 2006/094483)，受让人：KlockeVerpackungs-Service GmbH，Weingarten，Germany(参见本申请的图7A和7B)。

参考其中相同附图标记对应于相同或相似元件的图7A和7B，描绘了双室施用器装置10。双室施用器装置10包括作为基本元件的管状包装元件11和施用器部分13。

管状包装元件11可由塑料、铝或其复合材料的柔性膜(也可使用能以管状形式挤出的部分)制成，该膜可以被层压或进行涂敷，这取决于目的用途。

管状包装元件11可以通过膜的长边搭接形成。该膜可进行涂敷以在其两侧均提供密封能力，从而在接触面获得持久性或可剥离的结合，这取决于具体参数，如在膜的搭接或压层期间所施加的热或压力)。

因此，管状包装元件11可以由单一的扁平膜制得，其通过沿其主要方向的持久性结合区(密封32)而制成管状形式。

通过密封12，该管状包装元件11与双室施用器装置10的后端持久性结合。

双室施用器装置10前端的施用器部分12具有持续递送(挤出)通道30，该通道优选置于装置10的中心。该挤出通道30形成了通向贮液器26的通路，贮液器26置于管状包装元件11的前端区域。密封28置于挤出通道30的面向贮液器26的末端。

该管状包装元件11的后端区域被密封12持久性密闭。包含凝胶16的凝胶腔室14在一端被密封12所密封，并在相对的一端被可剥离的密封18可剥离地密封。所述可剥离的密封18用于在凝胶16和粉22混合之前将凝胶16与粉腔室24中的粉22分隔开。

粉腔室20和贮液器26之间设置了可剥离的密封24。该可剥离的密封24形成了粉室20的边界部分，因此确保防止粉20不慎逸出。

为了混合凝胶16和粉22，经由管状包装元件11从组分之一向另一组分的方向施加压力，因此剥离两个组分(凝胶16和粉22)之间的可剥离密封20。通过交替地在所述组分的区域中挤压管状包装元件11而将凝胶16和粉22混合。

通过进一步向施用器部分12的方向按压或铺展所述混合组分来剥离可剥离密封24。内容物经过施用器13的挤出通道30到达外部，并借助施用器10置于预定的位置。

在保存时将双室施用器内部的Aquateric

粉末与水凝胶分隔开的原因是：Aquateric

(CAP)为湿敏性，因此不能以含水凝胶的形式提供。

在双室施用器的一个优选实施方案中，最靠近向******递送的室中包含Aquateric

(例如，0.36g)，而较远的室包含生物粘附凝胶(例如，1.64g)。所述凝胶含有适当量的胶凝剂和水。

胶凝剂至少为以下其一：羟乙基纤维素(“HEC”)、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、瓜尔胶、明胶、乙基纤维素、藻酸、角叉藻聚糖、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、泊洛沙姆、聚乙二醇、聚甲基丙烯酸酯、聚乙烯醇、丙二醇藻酸盐、藻酸钠、淀粉(预糊化)、黄芪胶或黄原胶。

该凝胶还可包含适当的防腐剂以防止存贮期间的细菌污染，如一般使用水平的山梨酸或对羟基苯甲酸酯类。

在本发明上下文中，“凝胶”定义为具有通过组合溶剂与聚合物而产生的高粘性。

微粒化CAP与水基凝胶的混合物能够完全吸附HIV和疱疹病毒，也就是说，病毒与该组合物结合。

因此，本发明还涉及方法，其包括使用双室施用器，以在存贮期间保持微粒化CAP粉末在一个室中并保持水基凝胶在另一室中，并且在使用前将来自两个室中每一个的材料进行预混合(如通过指压破坏两个室之间的密封)。

因此，所述凝胶可从双室施用器中递送，在所述双室施用器中微粒化形式CAP与水基凝胶在保存时分隔开，并且两室的内容物在释放前混合。然后，该混合组合物可对女性***施，以防止疱疹病毒的散发和传播，治疗或防止细菌性***病，维持低***pH或者降低HIV(HIV-1或HIV-2)、疱疹病毒或人巨细胞病毒的传播频率。

与细菌性***病有关的细菌可以是人型支原体(Mycoplasmahominis)、山羊支原体(Mycoplasma capricolum)、柯氏动弯杆菌(Mobiluncus curtisii)或人体普雷沃氏菌(Prevotella corporis)。

上述方法用于结合不相容的药物。因此，微粒化CAP的室中可包括水敏性成分，而水基凝胶的室中可包括水溶性成分或药物。

上述方法还可用于施用所述施用器一个室中的邻苯二甲酸乙酸纤维素和施用器另一室中的乳杆菌的组合，用于将该组合引入妇女的***以维持酸性健康***环境。或者，CAP和乳杆菌可以处于同一室中并与另一室中的水基凝胶分隔开。

本文使用的术语“微粒化”是指颗粒大小约为1微米的颗粒。

邻苯二甲酸乙酸纤维素对***酵母感染(白色念珠菌，Candidaalbicans)没有影响。(Neurath AR，StrickN，Li Y-Y，Lin K and Jiang S(1999)Design of a“microbicide”for prevention of sexually transmitted diseaseusing“inactive”pharmaceutical excipients.Biologicals 27：11-21)。为了克服该问题，可将微粒化邻苯二甲酸乙酸纤维素与硝酸咪康唑(2至5重量％)组合。得到的组合物通过以下作用而用作维持***健康的理想制剂：提供低pH、治疗疱疹病毒和***传播或性传播的细菌性感染(例如，梅毒、淋病、沙眼衣原体(chlamydia trachomatis)、软下疳和细菌性***病)，从而阻断月经期间中毒性休克综合征毒素的产生以及治疗白色念珠菌感染。

本文讨论的CAP组合物通常***施用，然而对于本发明的某些方面来说，可以对皮肤或生殖器局部施用。

本发明中使用的活性成分(CAP)的量(剂量)通常小于1,000毫克，优选在200至800毫克之间。

就本发明防止疱疹病毒的散发和传播而言，该CAP制剂可作为凝胶或膜应用。就规律性(例如每天)应用CAP以维持正常的酸性***环境而言，该CAP制剂可以是凝胶、膜、可分散片剂或可分散于水的海绵(其在使用后转变为凝胶)(参见USP 6,572,875和USP 6,596,297，每个所述专利的全部内容均通过参考并入本文)。为了治疗疱疹损伤，可对该损伤及其部位局部应用预先润湿的邻苯二甲酸乙酸纤维素膜。

粘膜粘附性可迅速分散(可分散于水的)片剂可以由不溶性微粒化形式邻苯二甲酸乙酸纤维素和羟丙基甲基纤维素(“HPMC”)、“PHARMABURST”(具有0.450的松密度，0.536的紧密度和16.0％的卡尔指数的速溶递送平台，由SPI Pharma制造))的组合来制备。

根据本发明使用的组合物还可包含其它活性成分，如杀***剂、抗微生物剂、防腐剂或抗病毒剂。

本发明中使用的药物组合物还可包含添加剂，如防腐剂和芳香剂。这些添加剂可以任何理想的浓度存在。这些添加剂的浓度将取决于所期望的性质、待释放的试剂、效力、所期望的剂量、溶解时间等。

实施例

本发明将参考以下非限制的性实施例进行描述。

实施例1：HSV-2与微粒化CAP(Aquateric)结合

为了研究微粒化CAP(＝Aquateric

)的吸附能力，将该材料以分级的量(0.74～180mg/ml)加入包含牛血清白蛋白(BSA)和明胶各100μg/ml的0.14M NaCl中含有10μg/ml纯化的2型疱疹病毒(HSV-2)(Advanced Biotechnologies，Inc.，Columbia，MD)的悬液中，并在37℃下混合5分钟。将该混合物置于冰上，以10,000rpm离心，并通过0.45μ的滤器过滤上清液，所述滤器已预先用包含牛血清白蛋白(BSA)和明胶各100μg/ml的0.14M NaCl洗涤。通过酶联免疫吸附测定(ELISA)对上清液的稀释液以及原始病毒悬液的稀释液检测HSV-2含量。所述稀释液在含有1重量％BSA和0.25重量％明胶以及0.1重量％TWEEN-20，pH 7.2的TRIS缓冲盐溶液(TBS)中制得。将该稀释液加入96孔聚苯乙烯板的孔中，该孔包被有100ng抗HSV-2包膜糖蛋白gE的单克隆抗体(目录号CC65901M Biodesign International，Saco，MN，USA)。在25℃孵育过夜之后，用含有0.1重量％TWEEN-20的TBS洗涤孔5次，并加入10重量％山羊血清、0.1重量％TWEEN-20的TBS中2,000倍稀释的辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗HSV-2抗体(目录号_B65124S；BiodesignInternational，Saco，MN)。37℃2小时后，洗涤孔，使用来自Kierkegaardand Perry Laboratories，Inc.(Gaithersburg，MD)的检测试剂盒按照生产商的方案定量结合的HRP，并在450nm读取吸光度。

图5所示结果表明，HSV-2完全吸附至Aquateric

，即使在使用的最低浓度(0.74mg.ml)下也是如此。在Aquateric

浓度为69mg/ml时，在过量蛋白质(如62％***)存在下也观察到HSV-2的完全吸附(未测试其它浓度；数据未显示)。

实施例2：乳杆菌组合

在微粒化CAP存在下培养乳杆菌。出人意料地，乳杆菌确实在微粒化CAP存在下复制。因此，微粒化CAP不仅不影响乳杆菌的生存力，而且还提供乳杆菌可以生长的环境。基于这个惊人的发现，微粒化CAP可以与乳杆菌组合，以通过使有益的乳杆菌定殖于粘膜部位并抑制不良细菌定殖而维持并增进健康的产品，所述不良细菌还被存在的微粒化CAP失活。

最近的研究仅使用基于基因的方法以及聚合酶链式反应(PCR)扩增，有可能精确地鉴定个体妇***道上皮中的微生物(Hyman RW，Fukushima M，Diamond L，Kumm J，Giudice LC，Davis，RW，“Microbeson the human vaginal epithelium，”Proceedings of the National Academy ofSciences of the USA，102：7952-7957(2005))。该结果已证明，已知为维持健康***环境所必需的乳杆菌并非在所有妇女中都存在，乳杆菌含量在0-100％之间变化。在这些研究中，百分之四十的健康妇女没有乳杆菌，而是主要为不想要的微生物双歧杆菌属(Bifidobacterium)、加德纳菌属(Gardnerella)、普雷沃氏菌属(Prevotella)、假单胞菌属(Pseudomonas)和链球菌属(Streptococci)。在后述微生物存在下乳杆菌的缺乏与酸性较弱的***环境有关，这易于发生其它细菌性和病毒性感染，包括HIV-1感染。为了改正健康妇女中这种不理想的状况，需要简单和持续使用的预防措施。这包括施用乳杆菌以及通过简单的药物介入维持低的酸性pH，包括规律地(例如每天)施用CAP制剂。

由于***而产生的男性和女性生殖道分泌物之间的物理化学相互作用可以调节其后HIV-1和其它STD病原体的性传播。其重要的影响因素是：***包含碱如精胺和磷酸胆碱及在体内导致中和酸性宫颈***pH、导致pH提高以及针对STD传播的天然防御降低的其他组分(Tevi-Benissan C，Belec L，Levy M，Schneider-Fauveau V，Mohamed AS，Hallouin MC，Matta M，Gresenguet G，“In vivo semen-associated pHneutralizaiton of cervicovaginal secretions，”Clin.Diagnostic LaboratoryImmunol.，4：367-374(1997))。这种影响可相对长期地持续。这种状况可通过施用CAP制剂来改善，因为当与***混合时，微粒化形式的CAP提供强的低pH缓冲能力(参见图6)。在这些实验中，将分级体积的***加至含有180mg Aquateric

的悬液中。这一Aquateric

量对应于1mlAquateric

制剂，并对应于约50％的建议人用剂量。结果表明，Aquateric

明显地有助于维持酸性的pH环境。

实施例3：预防中毒性休克综合征毒素1(TSST-1)的产生

申请人设计了实验，以确定掺入微粒化CAP尤其是基于CAP的可分散膜(Neurath AR，Strick N，Li YY，“Water dispersible microbicidalcellulose acetate phthalate film，”BMC Infect.Dis.，3：27(2003)，http://www.biomedcentral.com/content/pdf/1471-2334-3-27.pdf；NeurathAR，Strick N，Li YY，“Water dispersible film，”美国专利申请号2005/0070501 A1(2005年3月21日公开))是否产生具有抑制金黄色葡萄球菌和TSST-1产生的改善特性的卫生棉条。相应的实验及其结果描述如下。

对分别包进可分散于水的CAP膜中的市售非处方Tampax S+和o.b.super卫生棉条(Neurath AR，Strick N，Li YY，“Water dispersiblemicrobicidal cellulose acetate phthalate film，”BMC Infect.Dis.，3：27(2003)，http://www.biomedcentral.eom/content/pdf/1471-2334-3-27.pdf：Neurath AR，Strick N，Li YY，“Water dispersible film，”美国专利申请号2005/0070501 A1(2005年3月21日公开))(每个卫生棉条1.12g膜)评估其金黄色葡萄球菌和中毒性休克综合征1(TSST-1)的产生，所述评估利用卫生棉条袋方法进行(Reiser RF，Denzin LK，Bergdoll MS，“Effects ofblood and different media on the production of toxic shock syndrome toxin1 by Staphylococcus aureus in the tampon sac method，”J.Clin.Microbiol.，26：2672-2674(1988))。通过用少量乙醇密封边缘将膜包装牢固地附着在卫生棉条上。将原始的卫生棉条和包装有CAP膜的卫生棉条储存在室温直至检测。一式五份地将样品从其包装中无菌取出，必要时转移至施用器。记录每个卫生棉条的重量。所有测试均在Toxin Technology，Inc.，Sarasota，FL进行。在所有的测试中使用毒素技术标准操作程序(SOP)。

卫生棉条袋法：用约5×10⁵个集落形成单位(colony forming unit，CFU)/0.1ml金黄色葡萄球菌菌株FRI-1169野生型用接种透析管，所述菌株是产生TSST-1的黄色菌株。用0.9重量％的盐水(NaCl，未调整pH)洗涤的金黄色葡萄球菌制得接种物。对袋进行接种后，将测试样品从施用器中注入袋中。然后，在45℃下将含有样品的透析袋放入管中，所述管中包含脑心浸液培养液和1.5重量％琼脂。然后，将检测单元放入冷水浴中以促使琼脂硬化。在琼脂凝固之后，将检测单元移至37℃培养箱中18～20小时。

孵育后，将样品从透析袋取出并转移至预先称重的无菌Whirl-Pac

袋，再次称量以确定增加的重量。然后，用含有0.5重量％Tween-20的0.9重量％盐水(NaCl，未调pH)提取样品用于毒素分析和CFU评估。此时，对使用过的施用器进行称重从而可以测定真实的样品重量。

CFU评估：使用Toxin Technology SOP进行平板计数来测定CFU。简言之，由提取物制备以10为底的对数稀释液并使用平板计数琼脂倒板。测试10^-7、10^-8和10^-9稀释液，将平板在37℃孵育约40小时直至菌落可目测计数。然后，对合适的平板进行计数(有20-200个可见菌落的平板)并记录数目。

TSST-1测定：将每种样品的两毫升提取物离心，以去除细胞并制备用于酶联免疫吸附测定(ELISA)的样品。然后，将样品冷冻以保存它们用于第二天的测定。在分析的当天，将样品在室温下解冻。对样品进行用于ELISA的Toxin Technology SOP。简言之，在测定前一天，用抗TSST-1俘获抗体包被96孔聚苯乙烯板。在测定当天，进行以下步骤：

1.洗涤已包被平板以除去过量的俘获抗体。

2.由解冻样品制得适当的稀释液，1∶1,000和1∶10,000。

3.在以下浓度下由纯化的TSST-1制备标准曲线：0.32、0.63、1.25、2.5、5.0和10ng/ml。

4.在已包被平板上一式三份的孔中测试稀释样品、标准品和阴性对照。

5.在37℃孵育之后，将平板清空并重复洗涤。

6.应用缀合了辣根过氧化物酶的抗TSST-1第二抗体，并在37℃孵育。

7.然后再次清空平板并重复洗涤。

8.使用底物溶液ABTS

溶液[2，2’-连氮基双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)](Boehringer Mannheim，Germany)，并观察显色。

9.孵育15分钟之后终止反应。在ELISA平板读数器上对平板读数，并记录数据。

数据分析：

集落形成单位：通过用适当稀释度的倒数乘以菌落数来测定CFU，例如，71个菌落的10^-9稀释度平板等于7.1×10¹⁰CFU。通过将总体积乘以CFU来计算总CFU。使用装有Microsoft Excel(版本5.0)的IBM PC计算一式三份样品数据的平均值和标准差并记录。

毒素产生：用以下的方法评估毒素产生：计算一式三份的ELISA结果的平均值。在Casio X-4000P科学计算器上使用来自标准曲线的数据对样品平均值进行线性回归分析。记录结果并计算数据的平均值和标准差。通过将每毫升的毒素量乘以总体积来估计产生的总毒素量。通过将总毒素量除以样品的克数来计算每克样品中的毒素量。使用装有Microsoft Excel(版本5.0)的IBM PC对总毒素量和每克样品中的毒素量计算平均值和标准偏差。

图8显示的结果表明，在卫生棉条中掺入CAP显著抑制金黄色葡萄球菌和TSST-1的产生。在卫生棉条中掺入CAP膜还显著提高其吸收能力(约70％)，并使环境pH降低约1pH单位(参见图8)。总之，在卫生棉条中掺入CAP膜通过以下作用而显著提高其品质：提供提高的吸收能力以及提供发生以下情况的可能性远小得多的环境：金黄色葡萄球菌繁殖和TSST-1形成以及与酸性环境不相容的其他女性生殖道感染。

本说明书以说明性而非限制性方式公开，可以进行多种解释和改变，而不脱离本发明的构思和范围。

Claims (19)

1.包括吸收材料的卫生棉条，其中改进包括在所述卫生棉条上或所述卫生棉条中掺入了不溶性微粒化邻苯二甲酸乙酸纤维素粉，或者该卫生棉条包裹在邻苯二甲酸乙酸纤维素膜中，所述邻苯二甲酸乙酸纤维素为充足的量，并且位于该卫生棉条或其它女性卫生用品上，以预防月经期间金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的繁殖和中毒性休克综合征毒素1的产生。

2.用于预防月经期间金黄色葡萄球菌繁殖和中毒性休克综合征毒素1产生的方法，其包括向有此需要的女性***施用权利要求1所述的卫生棉条。

3.用于维持低***pH的方法，其包括向女性***施用药物有效量的(i)凝胶形式的不溶性微粒化形式邻苯二甲酸乙酸纤维素，或者(ii)可分散于水中的邻苯二甲酸乙酸纤维素固体剂型，其产生微粒化邻苯二甲酸乙酸纤维素颗粒，并为膜或海绵体的形式。

4.根据权利要求3的方法，其中所述不溶性微粒化形式的邻苯二甲酸乙酸纤维素以凝胶形式施用。

5.根据权利要求4的方法，其中所述凝胶从双室施用器中递送，在所述施用器中微粒化形式的邻苯二甲酸乙酸纤维素与水基凝胶在贮存期间被分隔开，并在递送前将两个室中的内容物混合。

6.根据权利要求3的方法，其中所述可分散于水中的邻苯二甲酸乙酸纤维素固体剂型以膜或海绵体的形式施用。

7.用于预防疱疹病毒散发和传播的方法，其包括向女性***施用药物有效量的(i)凝胶形式的不溶性微粒化形式邻苯二甲酸乙酸纤维素，或者可分散于水中的邻苯二甲酸乙酸纤维素固体剂型，其产生微粒化邻苯二甲酸乙酸纤维素颗粒，并为膜的形式。

8.根据权利要求7的方法，其中所述不溶性微粒化形式的邻苯二甲酸乙酸纤维素以凝胶形式施用。

9.根据权利要求8的方法，其中所述凝胶从双室施用器中递送，在所述施用器中微粒化形式的邻苯二甲酸乙酸纤维素与水基凝胶在贮存期间被分隔开，并在递送前将两个室中的内容物混合。

10.根据权利要求7的方法，其中所述可分散于水中的邻苯二甲酸乙酸纤维素固体剂型以膜的形式施用。

11.根据权利要求7的方法，其中所述疱疹病毒是2型疱疹病毒。

12.根据权利要求8的方法，其中所述疱疹病毒是2型疱疹病毒。

13.根据权利要求10的方法，其中所述疱疹病毒是2型疱疹病毒。

14.用于治疗疱疹损伤的方法，其包括以凝胶的形式对有此需要的人局部施用药物有效量的不溶性微粒化形式邻苯二甲酸乙酸纤维素。

15.用于治疗疱疹损伤的方法，其包括向有此需要的人局部施用药物有效量的邻苯二甲酸乙酸纤维素膜至预先润湿的应用部位。

16.用于维持正常的酸性***环境的方法，其包括向女性***施用药物有效量的(i)不溶性微粒化形式的邻苯二甲酸乙酸纤维素，以及(ii)乳杆菌(Lactobacilli)。

17.规律性维持正常酸性***环境并降低***中有害微生物和病毒复制的方法，其包括以凝胶、膜或海绵的形式向女性施用药物有效量的微粒化邻苯二甲酸乙酸纤维素。

18.一种组合物，其包含微粒化邻苯二甲酸乙酸纤维素和2～5重量％的硝酸咪康唑。

19.用于提供低***pH、治疗疱疹病毒、治疗***细菌性感染、阻断月经期间中毒性休克综合征的产生或者治疗白色念珠菌(Candida albicans)感染的方法，其包括向女性施用药物有效量的权利要求18所述组合物。

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