CN101144825A - 一种测量烟草中蛋白质的方法 - Google Patents

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瞿先中
舒俊生
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Abstract

本发明公开了一种测量烟草中蛋白质的方法，包括烟草总氮的提取，消化，连续流动分析，本发明与现有技术相比，操作简便，快速，且测定结果更为准确。利用该方法测定蛋白质，可以节省大量的劳动力。目前流动分析仪在烟草行业已经普及，因此该方法在行业内可以推广应用。

Description

一种测量烟草中蛋白质的方法
技术领域：
本发明属于测量烟草中蛋白质的方法，特别涉及用分析连续流动分析法测定烟草中蛋白质的方法。
背景技术：
蛋白质是烟草中的重要化合物，但烟叶中蛋白质含量过高，则会使烟气强度过大，香气和吃味变差，产生辛辣味、苦味和刺激性，还会产生一种如同燃烧羽毛的蛋白臭味。因此，蛋白质含量已成为评价烟草品质的重要指标，快速准确测定烟叶中蛋白质含量有重要意义。国际上常采用经典的克达尔法或改良的凯氏定氮法测定蛋白质含量，国内烟草行业主要采用克达尔法。这些方法的检测结果比较准确，但操作繁琐、费时，且不能进行批量检测。
发明内容：
本发明所要解决的技术问题是提供一种操作简单的测量烟草中蛋白质方法。
本发明解决技术问题的技术方案为：一种测量烟草中蛋白质的方法，称取0.3g(精确至0.0001g)烟末于锥形瓶，加入30mL0.5％醋酸，加热煮沸15min，趁热抽滤，并用0.5％醋酸溶液冲洗锥形瓶和沉淀物至滤液无色，然后转移滤纸和沉淀于75mL消化管，加入0.1g HgO，1.0gK2SO4，5mL重量浓度为98％硫酸，摇匀后置于消化器消化，消化器工作参数：150℃消化1小时,370℃消化4小时；消化结束后稍冷，加入少量水，摇匀，冷却至室温，用水定容至刻度，摇匀，利用连续流动分析仪测定样品中总氮含量，将测量出的总氮含量，换算成蛋白质含量即可，同时做空白实验做为对照，烟草中蛋白质的含量按下式计算：
Figure A20071002603600031
式中G1——样品不溶性氮检测值(％)；
G0——空白样品检测值(％)；
m——烟叶样品的重量(g)；
w——样品的水分含量；
6.25——总氮与蛋白质的转换系数。
所述的消化器及消化管由德国布朗卢比公司制造。
所述的连续流动分析仪的型号为AA3，由德国布朗卢比公司制造。
申请人认为：目前连续流动分析仪在烟草行业已经普及，利用流动分析仪测定总氮的方法也已经非常成熟，而经典的克达尔法测定蛋白质与流动分析仪法测定总氮在原理上是相同的。
由于烟草中含氮化合物可分为能溶于水及不溶于水两大类，不溶于水的含氮化合物主要是蛋白质类的大分子化合物，当抽提液pH为4左右较为适合，其不溶性氮和可溶性氮分离得较好即利用0.5％醋酸将烟叶中的蛋白质沉淀，洗去可溶性氮，然后测定样品中的不溶性氮，换算成蛋白质含量，通过比对实验发现，检测结果更为准确。
本发明与现有技术相比，操作简便，快速，且测定结果更为准确。利用该方法测定蛋白质，可以节省大量的劳动力。目前流动分析仪在烟草行业已经普及，因此该方法在行业内可以推广应用。
具体实施方式：
下面结合实施例对本发明做详细的说明。
器与试剂：
AA3连续流动分析仪，消化器及消化管(德国布朗卢比公司)；SHB-III循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司)；电子万用电炉(浙江省上虞市道墟宝民仪器设备厂)；AG204电子天平(感量：0.0001g，瑞士)；抽滤装置(直径120mm布氏漏斗，真空抽滤装置)及实验室常用玻璃仪器。
冰醋酸、硫酸钾、水杨酸钠、亚硝基铁***、硫酸铵(国药集团化学试剂有限公司)；98％浓硫酸、次氯酸钠、氢氧化钠、氯化钠(上海实意化学试剂有限公司)；红色***(泰兴市化学试剂厂)；四水合酒石酸钾钠、磷酸氢二钠(合肥工业大学化学试剂厂)；以上试剂均为分析纯；酪蛋白(含氮量13％，生化试剂，Sigma公司)。2003年云南、福建生产的复烤烟叶。
实施例1：
准确称取0.3g烟末(精确至0.0001g)于250ml锥形瓶，加入30mL0.5％醋酸，加热煮沸15min，迅速用定量滤纸在真空抽滤装置上抽滤，并用0.5％醋酸溶液冲洗锥形瓶和沉淀物至滤液无色，然后转移滤纸和沉淀于75mL消化管，加入0.1gHg0，1.0gK2SO4，5mL浓硫酸，摇匀后置于消化器消化，消化器工作参数：150℃消化1小时，370℃消化4小时。消化结束后稍冷，加入少量水，摇匀，冷却至室温，用水定容至刻度，摇匀，利用连续流动分析仪按YC/T161-2002的方法测定总氮含量，换算成蛋白质含量。同时做空白实验。
蛋白质含量计算：
Figure A20071002603600051
式中G1——样品不溶性氮检测值(％)；
GO——空白样品检测值(％)；
m——烟叶样品的重量(g)；
w——样品的水分含量；
6.25——总氮与蛋白质的转换系数。
1、标准曲线
除称取经110℃干燥2小时的硫酸铵0.943g，于烧杯中，用水溶解，转入100mL容量瓶中，用水定容至刻度，此溶液氮含量为2mg/mL。分别移取2.5mL，2.0mL，1.5mL，1.0mL，0.5mL上述溶液于消化管中，外，其余与实施例1相同，测量出标准样品的相关系数为0.9998。
2、重复性试验
称取5份陆良B2F样品，按实施例1的方法测定蛋白质含量。结果见表1：
    表1：
    1     2     3     4     5
    蛋白质(％)     5.10     5.04     5.17     5.07     5.15
由表1可得，样品的相对标准偏差RSD为1.1％，重复性较好。
3、回收率试验
称取5份陆良B2F样品，加入不同量的酪蛋白标准样品，按实施例1方法处理后，测定蛋白质含量。结果见表2：
    表2酪蛋白的回收率
    样品重量(g)     酪蛋白加入量(mg)     测定值(mg)     回收量(mg)     回收率(％)
    0.3005     0     15.3     0
    0.3007     5.0     20.3     5.0     100.0
    0.3001     7.5     22.9     7.6     101.3
    0.3004     10.0     25.2     9.9     99.0
    0.3010     12.5     28.0     12.7     101.6
    0.3009     15.0     30.0     14.7     98.0
4、流动分析仪法与克达尔法的比对：
准确称取两份以下六种样品，一份按实施例1方法测定蛋白质含量，一份按处理克达尔法检测。结果如表3：
    表3：
    样品名称     实施例1方法测定蛋白质含量(％)     克达尔法测定的蛋白质含量(％)
    陆良B2F     5.10     4.88
    陆良C3F     4.89     4.69
    陆良X2F     4.62     4.49
    龙岩B3F     6.15     5.97
    龙岩C4F     5.64     5.50
    龙岩X2F     5.54     5.39
表3结果显示，两种方法的测定结果差别较小，克达尔法测得的结果总体上小于流动分析仪法。可能有以下原因：克达尔法检测，操作步骤较多，样品在操作过程中的损失比流动分析仪法多；克达尔法消化时，不能准确控温，有部分消化产生的氨挥发，使检测结果偏低。而流动分析法检测，操作步骤少，样品损失小，消化器温度控制准确且可以程序升温，硝化过程产生的氨损失较小。因此，流动分析仪法测定烟草中的蛋白质含量，结果更为准确。

Claims (3)

1.一种测量烟草中蛋白质的方法，其特征在于：称取0.3g烟末于锥形瓶，加入30mL0.5％醋酸，加热煮沸15-20min，趁热抽滤，并用0.5％醋酸溶液冲洗锥形瓶和沉淀物至滤液无色，然后转移滤纸和沉淀于75mL消化管，加入0.1gHgO，1.0gK2SO4，5mL重量浓度为98％硫酸，摇匀后置于消化器消化，消化器工作参数：150℃消化1-1.5小时，370℃消化4-6小时；消化结束后稍冷，加入少量水，摇匀，冷却至室温，用水定容至刻度，摇匀，将样品送进连续流动分析仪，按YC/T161-2002的方法测定总氮含量，将测量出的总氮含量，换算成蛋白质含量即可，同时做空白实验做为对照，烟草中蛋白质的含量按下式计算：
式中G1——样品不溶性氮检测值(％)；
    G0——空白样品检测值(％)；
    m——烟叶样品的重量(g)；
    w——样品的水分含量；
    6.25——总氮与蛋白质的转换系数。
2.根据权利要求1所述的一种测量烟草中蛋白质的方法，其特征在于：所述的消化器及消化管由德国布朗卢比公司制造。
3.根据权利要求1所述的一种测量烟草中蛋白质的方法，其特征在于：所述的连续流动分析仪的型号为AA3，由德国布朗卢比公司制造。
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Cited By (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103822918A (zh) * 2014-02-26 2014-05-28 安徽中烟再造烟叶科技有限责任公司 烟草或其制品中可溶性蛋白质含量的测定方法
CN104459021A (zh) * 2014-12-24 2015-03-25 江苏中烟工业有限责任公司 自动水蒸气蒸馏滴定仪测定烟草及烟草制品中总氮的方法
CN105651773A (zh) * 2016-02-29 2016-06-08 云南同创检测技术股份有限公司 采用重铬酸钾氧化-连续流动分析仪测定烟草中纤维素含量的方法
CN106442848A (zh) * 2016-10-19 2017-02-22 中国农业科学院烟草研究所 一种自动定氮仪测定烟草及制品中蛋白质的方法
CN107741378A (zh) * 2017-10-18 2018-02-27 湖北中烟工业有限责任公司 一种再造烟叶涂布液纯净度的检测方法
CN108303344A (zh) * 2017-12-20 2018-07-20 红云红河烟草(集团)有限责任公司 一种评判卷烟燃烧锥掉落的方法
CN111474290A (zh) * 2020-04-29 2020-07-31 上海烟草集团有限责任公司 一种测定烟草中蛋白质含量的方法
CN114414513A (zh) * 2022-01-24 2022-04-29 甘肃烟草工业有限责任公司 一种快速检测烟叶中蛋白质含量的方法

Cited By (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103822918A (zh) * 2014-02-26 2014-05-28 安徽中烟再造烟叶科技有限责任公司 烟草或其制品中可溶性蛋白质含量的测定方法
CN104459021A (zh) * 2014-12-24 2015-03-25 江苏中烟工业有限责任公司 自动水蒸气蒸馏滴定仪测定烟草及烟草制品中总氮的方法
CN105651773A (zh) * 2016-02-29 2016-06-08 云南同创检测技术股份有限公司 采用重铬酸钾氧化-连续流动分析仪测定烟草中纤维素含量的方法
CN106442848A (zh) * 2016-10-19 2017-02-22 中国农业科学院烟草研究所 一种自动定氮仪测定烟草及制品中蛋白质的方法
CN107741378A (zh) * 2017-10-18 2018-02-27 湖北中烟工业有限责任公司 一种再造烟叶涂布液纯净度的检测方法
CN108303344A (zh) * 2017-12-20 2018-07-20 红云红河烟草(集团)有限责任公司 一种评判卷烟燃烧锥掉落的方法
CN108303344B (zh) * 2017-12-20 2020-04-17 红云红河烟草(集团)有限责任公司 一种评判卷烟燃烧锥掉落的方法
CN111474290A (zh) * 2020-04-29 2020-07-31 上海烟草集团有限责任公司 一种测定烟草中蛋白质含量的方法
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