CN101137372A

CN101137372A - 有丝***驱动蛋白抑制剂

Info

Publication number: CN101137372A
Application number: CNA2006800080688A
Authority: CN
Inventors: P·J·科尔曼; C·D·科克斯; G·D·哈特曼
Original assignee: Merck and Co Inc
Current assignee: Merck and Co Inc
Priority date: 2005-03-16
Filing date: 2006-03-10
Publication date: 2008-03-05
Also published as: WO2006101780A1; AU2006227787A1; CA2599390A1; US20080207693A1; EP1861097A1; EP1861097A4; JP2008533144A

Abstract

本发明涉及二氢吡唑化合物，其可用于治疗细胞增殖性疾病，用于治疗与KSP驱动蛋白活性有关的病症，以及用于抑制KSP驱动蛋白。本发明还涉及包含这些化合物的组合物，以及使用它们治疗哺乳动物中癌症的方法。

Description

有丝***驱动蛋白抑制剂

发明背景

技术领域

本发明涉及2，5-二氢吡咯衍生物，它们是有丝***驱动蛋白(kinesins)，特别是有丝***驱动蛋白KSP的抑制剂，并且可用于治疗细胞增殖性疾病，例如癌症、增生、再狭窄、心脏肥大、免疫疾病和炎症。

背景技术

在用于治疗癌症的治疗剂中有紫杉烷类和长春花生物碱。紫杉烷类和长春花生物碱对存在于各种细胞结构中的微管起作用。微管是有丝***纺锤体的主要结构元件。有丝***纺锤体负责将基因组的复制拷贝分布至因细胞***产生的两个子细胞中的每一个。据推定这些药物使有丝***纺锤体破裂导致癌细胞***的抑制并诱导癌细胞死亡。然而，微管形成其它类型的细胞结构，包括神经过程中胞内运输的轨道。因为这些药剂无法特异性靶向有丝***纺锤体，所以它们存在限制其有用性的副作用。

用于治疗癌症的药剂的特异性改善因治疗有益性而相当引人关注，如果与给药这些药剂有关的副作用可以得到减少，那么就可以实现这些治疗有益性。传统上，治疗癌症中的显著改善与鉴定通过新机理起作用的治疗剂有关。此实例不仅包括紫杉烷类，而且包括喜树碱类拓扑异构酶I抑制剂。从这两种观点来看，有丝***驱动蛋白是新抗癌药的有吸引力的靶标。

有丝***驱动蛋白是有丝***纺锤体装配和功能所必需的酶，但是不是通常例如神经过程中的其它微管结构的组成部分。有丝***驱动蛋白在有丝***的全部阶段过程中起必需的作用。这些酶是将ATP水解释放的能量转化成驱动细胞货物沿微管定向运动的机械力的″分子发动蛋白(motors)″。足以进行该任务的催化域是约340个氨基酸的致密结构。在有丝***期间，驱动蛋白组织微管到有丝***纺锤体的双极结构中。驱动蛋白介导染色体沿纺锤体微管运动，以及与有丝***特定阶段有关的有丝***纺锤体的结构变化。

有丝***驱动蛋白功能的实验性干扰导致有丝***纺锤体畸形或功能障碍，经常导致细胞周期停滞和细胞死亡。

在有丝***驱动蛋白当中已经鉴定的是KSP。KSP属于正端定向的微管发动蛋白的进化保守的驱动蛋白亚族，所述的正端定向的微管发动蛋白装配成由反向平行的同型二聚体组成的双极同型四聚体。在有丝***期间，KSP与有丝***纺锤体的微管结合。将针对KSP的抗体显微注射入人体细胞可以防止前中期过程中的纺锤体极分离，从而产生单极纺锤体并导致有丝***停滞和诱导程序性细胞死亡。KSP和在其它非人的生物体中的相关驱动蛋白捆扎反向平行微管，并且使它们可以相对于彼此滑动，由此促使两个纺锤体极分开。KSP还可以介导后期中的B纺锤体延长和纺锤体极上的微管集中。

已经描述了人KSP(也称为HsEg5)[Blangy等，Cell，83：1159-69(1995)；Whitehead等，Arthritis Rheum.，39：1635-42(1996)；Galgio等，J.Cell Biol.，135：339-414(1996)；Blangy等，J Biol.Chem.，272：19418-24(1997)；Blangy等，Cell Motil Cytoskeleton，40：174-82(1998)；Whitehead and Rattner，J.Cell Sci.，111：2551-61(1998)；Kaiser等，JBC274：18925-31(1999)；GenBank accession numbers：X85137，NM004523and U37426]，并且描述了KSP基因的片段(TRIP5)[Lee等，Mol Endocrinol.，9：243-54(1995)；GenBank accession number L40372]。已经报道了Xenopus KSP同源物(Eg5)以及Drosophila K-LP61F/KRP130。

最近，某些二氢吡唑类化合物和二氢吡咯类化合物被描述成是KSP的抑制剂(PCT公开日2003年10月2日的WO2003/079973，2003年12月24日的WO2003/106417，2003年12月24日的WO2003/105855，2004年5月6日的WO2004/037171和2004年7月15日的WO2004/058148)。

发明内容

有丝***驱动蛋白对于发现和开发新的有丝***化疗药物是有吸引力的靶标。因此，本发明的目的是提供用于抑制有丝***驱动蛋白KSP的化合物、方法和组合物。

发明概述

本发明涉及2，5-二氢吡咯衍生物，其可用于治疗细胞增殖性疾病，用于治疗与KSP驱动蛋白活性有关的病症，以及用于抑制KSP驱动蛋白。本发明的化合物可以用式I表示：

发明的详细描述

本发明的化合物用于抑制有丝***驱动蛋白并且表示为式I的化合物或其药学上可接受的盐或立体异构体：

其中

a是0或1；

b是0或1；

m是0、1或2；

n是0或1；

p是0、1、2或3；

q是0、1或2；

R¹选自：

1)(C₁-C₆亚烷基)_n(C＝X)O_bC₁-C₁₀烷基，

2)(C₁-C₆亚烷基)_n(C＝X)O_b芳基，

3)(C₁-C₆亚烷基)_n(C＝X)O_bC₂-C₁₀链烯基，

4)(C₁-C₆亚烷基)_n(C＝X)O_bC₂-C₁₀炔基，

5)(C₁-C₆亚烷基)_n(C＝X)O_bC₃-C₈环烷基，

6)(C₁-C₆亚烷基)_n(C＝X)O_b杂环基，

7)(C₁-C₆亚烷基)_n(C＝X)O_bC₁-C₁₀全氟烷基，

8)(C₁-C₆亚烷基)_n(C＝X)NR^cR^c′，

9)(C₁-C₆亚烷基)_nSO₂NR^cR^c′，

10)(C₁-C₆亚烷基)_nSO₂C₁-C₁₀烷基，

11)(C₁-C₆亚烷基)_nSO₂C₂-C₁₀链烯基，

12)(C₁-C₆亚烷基)_nSO₂C₂-C₁₀炔基，

13)(C₁-C₆亚烷基)_nSO₂-芳基，

14)(C₁-C₆亚烷基)_nSO₂-杂环基，

15)(C₁-C₆亚烷基)_nSO₂-C₃-C₈环烷基，

16)芳基；

17)杂环基；和

18)C₁-C₁₀烷基；

所述的烷基、芳基、链烯基、炔基、环烷基、杂芳基和杂环基任选被一个或多个选自R⁷的取代基取代；

R²独立地选自：

1)(C＝O)_aO_bC₁-C₁₀烷基，

2)(C＝O)_aO_b芳基，

3)CO₂H，

4)卤素，

5)CN，

6)OH，

7)O_bC₁-C₆全氟烷基，

8)O_a(C＝O)_bNR⁹R¹⁰，

9)S(O)_mR^a，

10)S(O)₂NR⁹R¹⁰，和

11)Si(R^c)₃；

所述的烷基、芳基、链烯基、炔基、杂环基和环烷基任选被一个、两个或三个选自R⁷的取代基取代；

R³选自：

1)H，

2)C₁-C₁₀烷基，

3)芳基，

4)C₂-C₁₀链烯基，

5)C₂-C₁₀炔基，

6)C₁-C₆全氟烷基，

7)C₁-C₆芳烷基，

8)C₃-C₈环烷基，和

9)杂环基，和

10)Si(R^c)₃；

所述的烷基、芳基、链烯基、炔基、环烷基、芳烷基和杂环基任选被一个或多个选自R⁷的取代基取代；或

R⁵选自：

1)H，

2)C₁-C₁₀烷基，

3)芳基，

4)C₂-C₁₀链烯基，

5)C₂-C₁₀炔基，

6)C₁-C₆全氟烷基，

7)C₁-C₆芳烷基，

8)C₃-C₈环烷基，

9)杂环基，和

10)Si(R^c)₃；

所述的烷基、芳基、链烯基、炔基、环烷基、芳烷基和杂环基任选被一个或多个选自R⁷的取代基取代；

R⁶选自：

1)氢；

2)(C＝O)_aO_bC₁-C₁₀烷基，

3)(C＝O)_aO_b芳基，

4)CO₂H，

5)卤素，

6)CN，

7)OH，

8)O_bC₁-C₆全氟烷基，

9)O_a(C＝O)_bNR⁹R¹⁰，

10)S(O)_mR^a，

11)S(O)₂NR⁹R¹⁰，和

12)Si(R^a)₃；

R⁷是：

1)(C＝O)_aO_bC₁-C₁₀烷基，

2)(C＝O)_aO_b芳基，

3)C₂-C₁₀链烯基，

4)C₂-C₁₀炔基，

5)(C＝O)_aO_b杂环基，

6)CO₂H，

7)卤素，

8)CN，

9)OH，

10)O_bC₁-C₆全氟烷基，

11)O_a(C＝O)_bNR⁹R¹⁰，

12)S(O)_mR^a，

13)S(O)₂NR⁹R¹⁰，

14)氧代，

15)CHO，

16)(N＝O)R⁹R¹⁰，

17)(C＝O)_aO_bC₃-C₈环烷基，或

18)Si(R^c)₃；

所述的烷基、芳基、链烯基、炔基、杂环基和环烷基任选被一个或多个选自R⁸的取代基取代；

R⁸选自：

1)(C＝O)_rOs(C₁-C₁₀)烷基，其中r和s独立地是0或1，

2)O_r(C₁-C₃)全氟烷基，其中r是0或1，

3)(C₀-C₆)亚烷基-S(O)_mR^a，其中m是0、1或2，

4)氧代，

5)OH，

6)卤素，

7)CN，

8)(C＝O)_rO_s(C₂-C₁₀)链烯基，

9)(C＝O)_rO_s(C₂-C₁₀)炔基，

10)(C＝O)_rO_s(C₃-C₆)环烷基，

11)(C＝O)_rO_s(C₀-C₆)亚烷基-芳基，

12)(C＝O)_rO_s(C₀-C₆)亚烷基-杂环基，

13)(C＝O)_rO_s(C₀-C₆)亚烷基-NR⁹R¹⁰，

14)C(O)R^a，

15)(C₀-C₆)亚烷基-CO₂R^a，

16)C(O)H，

17)(C₀-C₆)亚烷基-CO₂H，

18)C(O)N(R^b)₂，

19)S(O)_mR^a，

20)S(O)₂NR⁹R¹⁰，

21)C(NH)NH₂；和

22)Si(R^c)₃；

所述的烷基、链烯基、炔基、环烷基、芳基和杂环基任选被最高达三个取代基取代，所述的取代基选自R^b、OH、(C₁-C₆)烷氧基、卤素、CO₂H、CN、O(C＝O)C₁-C₆烷基、氧代和NR⁹R¹⁰；

R⁹和R¹⁰独立地选自：

1)H，

2)(C＝O)O_bC₁-C₁₀烷基，

3)(C＝O)O_bC₃-C₈环烷基，

4)(C＝O)O_b芳基，

5)(C＝O)O_b杂环基，

6)C₁-C₁₀烷基，

7)芳基，

8)C₂-C₁₀链烯基，

9)C₂-C₁₀炔基，

10)杂环基，

11)C₃-C₈环烷基，

12)SO₂R^a，和

13)(C＝O)N^Rb₂，

所述的烷基、环烷基、芳基、杂环基、链烯基和炔基任选被一个或多个选自R⁸的取代基取代；或

R⁹和R¹⁰可以与它们相连的氮一起形成一个在每个环中具有3-7元的单环或双环杂环，并且所述的单环或双环杂环除氮外，任选含有一个或两个选自N、O和S的其它杂原子，所述的单环或双环杂环任选被一个或多个选自R⁸的取代基取代；

R^a是(C₁-C₆)烷基、(C₃-C₆)环烷基、芳基或杂环基；

R^b是H、(C₁-C₆)烷基、芳基、杂环基、(C₃-C₆)环烷基、(C＝O)OC₁-C₆烷基、(C＝O)C₁-C₆烷基或S(O)₂R^a；所述的烷基、环烷基、芳基、杂环基、链烯基和炔基任选被一个或多个选自R⁷的取代基取代，

R^c是(C₁-C₆)烷基、(C₃-C₆)环烷基、芳基、杂环基、OH或OR^a；所述的烷基、环烷基、芳基、杂环基、链烯基和炔基任选被一个或多个选自R⁷的取代基取代，

X选自O、NR^e和S；和

W选自：一条键、C＝O、C＝S和CH(OH)；

条件是至少一个硅原子存在于该化合物中，并且进一步的条件是

-W-R⁵不是-(C₁-C₆)烷基-O-Si[(C₁-C₆)烷基]₃。

在本发明的一个实施方案中，用于抑制有丝***驱动蛋白的化合物或其药学上可接受的盐或立体异构体由式II表示：

其中

a是0或1；

b是0或1；

m是0、1或2；

n是0或1；

p是0、1、2或3；

q是0或1；

R¹′选自：CF₃、NH₂、O_b(C₁-C₁₀)烷基、O_b(C₂-C₁₀)链烯基、O_b(C₂-C₁₀)炔基、O_b(C₃-C₈)环烷基、O_b(C₀-C₆)亚烷基-芳基、O_b(C₀-C₆)亚烷基-杂环基、O_b(C₀-C₆)亚烷基-NR⁹R¹⁰、O_b(C₁-C₃)全氟烷基、(C₀-C₆)亚烷基-CO₂R^a和(C₀-C₆)亚烷基-CO₂H；

所述的烷基、芳基、链烯基、炔基、环烷基、杂芳基和杂环基任选被一至三个选自R⁷的取代基取代；

R²独立地选自：

1)(C＝O)_aO_bC₁-C₁₀烷基，

2)(C＝O)_aO_b芳基，

3)CO₂H，

4)卤素，

5)CN，

6)OH，

7)O_bC₁-C₆全氟烷基，

8)O_a(C＝O)_bNR⁹R¹⁰，

9)S(O)_mR^a，

10)S(O)₂NR⁹R¹⁰，和

11)Si(R^c)₃；

R⁵选自：

1)H，

2)C₁-C₁₀烷基，

3)芳基，

4)C₂-C₁₀链烯基，

5)C₂-C₁₀炔基，

6)C₁-C₆全氟烷基，

7)C₁-C₆芳烷基，

8)C₃-C₈环烷基，

9)杂环基，和

10)Si(R^c)₃；

所述的烷基、芳基、链烯基、炔基、环烷基、芳烷基和杂环基任选被一至三个选自R⁷的取代基取代；

R⁶选自：

1)氢；

2)(C＝O)_aO_bC₁-C₁₀烷基，

3)(C＝O)_aO_b芳基，

4)CO₂H，

5)卤素，

6)CN，

7)OH，

8)O_bC₁-C₆全氟烷基，

9)O_a(C＝O)_bNR⁸R⁹，

10)S(O)_mR^a，

11)S(O)₂NR⁸R⁹，和

12)Si(R^c)₃；

R⁷是：

1)(C＝O)_aO_bC₁-C₁₀烷基，

2)(C＝O)_aO_b芳基，

3)C₂-C₁₀链烯基，

4)C₂-C₁₀炔基，

5)(C＝O)_aO_b杂环基，

6)CO₂H，

7)卤素，

8)CN，

9)OH，

10)O_bC₁-C₆全氟烷基，

11)O_a(C＝O)_bNR⁹R¹⁰，

12)S(O)_mR^a，

13)S(O)₂NR⁹R¹⁰，

14)氧代，

15)CHO，

16)(N＝O)R⁹R¹⁰，

17)(C＝O)_aO_bC₃-C₈环烷基，或

18)Si(R^c)₃；

所述的烷基、芳基、链烯基、炔基、杂环基和环烷基任选被一至三个选自R⁸的取代基取代；

R⁸选自：

1)(C＝O)_rO_s(C₁-C₁₀)烷基，其中r和s独立地是0或1，

2)O_r(C₁-C₃)全氟烷基，其中r是0或1，

3)(C₀-C₆)亚烷基-S(O)_mR^a，其中m是0、1或2，

4)氧代，

5)OH，

6)卤素，

7)CN，

8)(C＝O)_rO_s(C₂-C₁₀)链烯基，

9)(C＝O)_rO_s(C₂-C₁₀)炔基，

10)(C＝O)_rO_s(C₃-C₆)环烷基，

11)(C＝O)_rO_s(C₀-C₆)亚烷基-芳基，

12)(C＝O)_rO_s(C₀-C₆)亚烷基-杂环基，

13)(C＝O)_rO_s(C₀-C₆)亚烷基-N(R^b)₂，

14)C(O)R^a，

15)(C₀-C₆)亚烷基-CO₂R^a，

16)C(O)H，

17)(C₀-C₆)亚烷基-CO₂H，

18)C(O)N(R^b)₂，

19)S(O)_mR^a，

20)S(O)₂NR⁹R¹⁰，

21)C(NH)NH₂，和

22)Si(R^c)₃；

所述的烷基、链烯基、炔基、环烷基、芳基和杂环基任选被最高达三个取代基取代，所述的取代基选自R^b、OH、(C₁-C₆)烷氧基、卤素、CO₂H、CN、O(C＝O)C₁-C₆烷基、氧代和N(R^b)₂；

R⁹和R¹⁰独立地选自：

1)H，

2)(C＝O)O_bC₁-C₁₀烷基，

3)(C＝O)O_bC₃-C₈环烷基，

4)(C＝O)O_b芳基，

5)(C＝O)O_b杂环基，

6)C₁-C₁₀烷基，

7)芳基，

8)C₂-C₁₀链烯基，

9)C₂-C₁₀炔基，

10)杂环基，

11)C₃-C₈环烷基，

12)SO₂R^a，和

13)(C＝O)NR^b ₂，

所述的烷基、环烷基、芳基、杂环基、链烯基和炔基任选被一至三个选自R⁸的取代基取代；或

R⁹和R¹⁰可以与它们相连的氮一起形成一个在每个环中具有3-7元的单环或双环杂环，并且所述的单环或双环杂环除氮外，任选含有一个或两个选自N、O和S的其它杂原子，所述的单环或双环杂环任选被一至三个选自R⁸的取代基取代；

R^a是(C₁-C₆)烷基、(C₃-C₆)环烷基、芳基或杂环基；

R^b是H、(C₁-C₆)烷基、芳基、杂环基、(C₃-C₆)环烷基、(C＝O)OC₁-C₆烷基、(C＝O)C₁-C₆烷基或S(O)₂R^a；所述的烷基、芳基、环烷基和杂环基任选被一至三个选自R⁷的取代基取代；

R^c是(C₁-C₆)烷基、(C₃-C₆)环烷基、芳基、杂环基、OH或OR^a；所述的烷基、芳基、环烷基和杂环基任选被一至三个选自R⁷的取代基取代；

W选自：一条键和CH(OH)；

-W-R⁵不是-(C₁-C₆)烷基-O-Si[(C₁-C₆)烷基]₃。

在本发明的一个实施方案中，所述的化合物由式III的化合物或其药学上可接受的盐或立体异构体表示：

其中：

a是0或1；

b是0或1；

m是0、1或2；

p是0、1或2；

r是0或1；

s是0或1；

R²独立地选自：

1)卤素，

2)OH，

3)O_bC₁-C₆全氟烷基，和

4)Si(R^c)₃；

R⁵选自：

1)C₁-C₆-亚烷基-Si(R^c)₃，和

2)C₁-C₆-亚烷基-OH，

R⁶选自：

1)氢，

2)卤素，

3)OH，

4)O_bC₁-C₆全氟烷基，和

5)Si(R^c)₃；

R⁷是：

1)(C＝O)_aO_bC₁-C₁₀烷基，

2)(C＝O)_aO_b芳基，

3)C₂-C₁₀链烯基，

4)C₂-C₁₀炔基，

5)(C＝O)_aO_b杂环基，

6)CO₂H，

7)卤素，

8)CN，

9)OH，

10)O_bC₁-C₆全氟烷基，

11)O_a(C＝O)_bNR⁹R¹⁰，

12)S(O)_mR^a，

13)S(O)₂NR⁹R¹⁰，

14)氧代，

15)CHO，

16)(N＝O)R⁹R¹⁰，

17)(C＝O)_aO_bC₃-C₈环烷基，或

18)Si(R^c)₃；

R⁷′选自：

1)氢，

2)C₁-C₆-亚烷基-NR⁹R¹⁰，

3)C₁-C₆-烷基，

4)C₁-C₆-亚烷基-Si(R^c)₃，和

5)C₁-C₆-亚烷基-OH；

R⁸选自：

1)(C＝O)_rO_s(C₁-C₁₀)烷基，其中r和s独立地是0或1，

2)O_r(C₁-C₃)全氟烷基，其中r是0或1，

3)(C₀-C₆)亚烷基-S(O)_mR^a，其中m是0、1或2，

4)氧代，

5)OH，

6)卤素，

7)CN，

8)(C＝O)_rO_s(C₂-C₁₀)链烯基，

9)(C＝O)_rO_s(C₂-C₁₀)炔基，

10)(C＝O)_rO_s(C₃-C₆)环烷基，

11)(C＝O)_rO_s(C₀-C₆)亚烷基-芳基，

12)(C＝O)_rO_s(C₀-C₆)亚烷基-杂环基，

13)(C＝O)_rO_s(C₀-C₆)亚烷基-N(R^b)₂，

14)C(O)R^a，

15)(C₀-C₆)亚烷基-CO₂R^a，

16)C(O)H，

17)(C₀-C₆)亚烷基-CO₂H，

18)C(O)N(R^b)₂，

19)S(O)_mR^a，

20)S(O)₂NR⁹R¹⁰，

21)C(NH)NH₂；和

22)Si(R^c)₃；

R⁹和R¹⁰独立地选自：

1)H，

2)(C＝O)O_bC₁-C₁₀烷基，

3)(C＝O)O_bC₃-C₈环烷基，

4)(C＝O)O_b芳基，

5)(C＝O)O_b杂环基，

6)C₁-C₁₀烷基，

7)芳基，

8)C₂-C₁₀链烯基，

9)C₂-C₁₀炔基，

10)杂环基，

11)C₃-C₈环烷基，

12)SO₂R^a，和

13)(C＝O)NR^b ₂，

R^a是(C₁-C₆)烷基、(C₃-C₆)环烷基、芳基或杂环基；

R^b是H、(C₁-C₆)烷基、芳基、杂环基、(C₃-C₆)环烷基、(C＝O)OC₁-C₆烷基、(C＝O)C₁-C₆烷基或S(O)₂R^a；所述的烷基、环烷基、芳基、杂环基、链烯基和炔基任选被一个或多个选自R⁷的取代基取代，和

R^c和R^c′独立地选自：(C₁-C₆)烷基、(C₃-C₆)环烷基、芳基、杂环基和OH；所述的烷基、环烷基、芳基、杂环基、链烯基和炔基任选被一个或多个选自R⁷的取代基取代；

条件是至少一个硅原子存在于该化合物中，并且进一步的条件是-R⁵不是-(C₁-C₆)烷基-O-Si[(C₁-C₆)烷基]₃。

本发明化合物的具体实例包括：

(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-{(3R，4S)-3-氟-1-[3-(三甲基甲硅烷基)丙基]哌啶-4-基}-2-(羟甲基)-N-甲基-2-苯基-2，5-二氢-1H-吡咯-1-羧酰胺或其药学上可接受的盐或立体异构体。

本发明的化合物可以具有不对称中心、手性轴和手性面(如：E.LEliel和S.H.Wilen，Stereochemistry of Carbon Compounds，John Wiley&Sons，New York，1994，1119-1190页中所述)，并且作为外消旋物、外消旋混合物和各非对映体存在，所有可能的异构体及其混合物，包括旋光异构体，所有这些立体异构体都包括在本发明中。此外，在此公开的化合物可以作为互变异构体并且两种互变异构形式都包括在本发明的范围中，即使仅描述了一种互变异构体结构。

当任何变量(例如R⁷、R⁸、R⁹等)在任何成分上出现一次以上时，其在每次出现时的定义与另一次出现时的定义彼此独立。此外，取代基和变量的组合是允许的，条件是这些组合产生稳定的化合物。从取代基上拉入环系的线表示所示的键可以与可取代的环原子中的任意一个连接。如果所述的环系为多环的，那么其含义是键仅与相邻环上的合适的碳原子中的任意一个连接。

可以理解，本领域普通熟练技术人员可以选择本发明化合物上的取代基和取代模式，以便提供化学上稳定的并且可以通过本领域已知的技术和本文中下述的那些方法从易获得的起始原料容易地合成的化合物。如果取代基自身被一个以上基团取代，那么应理解这些多个基团可以位于同一碳或不同的碳上，只要产生稳定的结构。术语“任选被一个或多个取代基取代”应与短语“任选被至少一个取代基取代”等同，并且在这类情况中，优选的实施方案为带有0-3个取代基。

在此所使用的″烷基″用以包括具有给定数目的碳原子的支链和直链饱和脂族烃基。例如，″C₁-C₁₀烷基″中的C₁-C₁₀定义为包括在线性或分枝排列中的具有1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个碳的基团。例如，″C₁-C₁₀烷基″具体包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基等。术语″环烷基″是指具有指定数目碳原子的单环饱和脂族烃基。例如，″环烷基″包括环丙基、甲基环丙基、2，2-二甲基-环丁基、2-乙基-环戊基、环己基等。

当在短语″C₁-C₆芳烷基″和″C₁-C₆杂芳烷基″中使用时，术语″C₁-C₆″是指该部分的烷基部分并且不描述该部分的芳基和杂芳基部分中的原子数目。

″烷氧基″表示通过氧桥连接的指定数目碳原子的环状或非环状烷基。因此，″烷氧基″包括上面烷基和环烷基的定义。

如果碳原子的数目没有指定，则术语″链烯基″是指含有2-10个碳原子和至少一个碳碳双键的直链、分枝或环状的非芳香族烃基。优选存在一个碳碳双键并且可以存在最高达四个非芳香族的碳-碳双键。因此，″C₂-C₆链烯基″是指具有2-6个碳原子的链烯基。链烯基包括乙烯基、丙烯基、丁烯基、2-甲基丁烯基和环己烯基。链烯基的直链、分枝或环状部分可以含有双键，并且如果表明是取代的链烯基，那么可以被取代。

术语″炔基″是指含有2-10个碳原子和至少一个碳碳三键的直链、分枝或环状烃基。至多可以存在三个碳-碳三键。因此，″C₂-C₆炔基″是指具有2-6个碳原子的炔基。炔基包括乙炔基、丙炔基、丁炔基、3-甲基丁炔基等。炔基的直链、分枝或环状部分可以含有三键，并且如果表明是取代的炔基，那么可以被取代。

在某些情况中，取代基可以用碳的范围进行限定，包括0，例如(C₀-C₆)亚烷基-芳基。如果将芳基定为苯基，那么该定义包括苯基本身以及-CH₂Ph、-CH₂CH₂Ph、CH(CH₃)CH₂CH(CH₃)Ph等。

在此所使用的″芳基″是指每个环中至多7个原子的任何稳定的单环或双环碳环，其中至少一个环是芳香族的。这些芳基要素的实例包括苯基、萘基、四氢萘基、茚满基和联苯基。在芳基取代基是双环的并且一个环是非芳香族的情况中，可以理解，连接是通过芳环的。

在此所使用的术语杂芳基表示每个环中至多7个原子的稳定的单环或双环，其中至少一个环是芳香族的并且含有1-4个选自O、N和S的杂原子。此定义范围内的杂芳基包括，但不局限于：吖啶基、咔唑基、噌啉基、喹喔啉基、吡唑基、吲哚基、苯并***基、呋喃基、噻吩基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、喹啉基、异喹啉基、噁唑基、异噁唑基、吲哚基、吡嗪基、哒嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、四氢喹啉。如下面杂环的定义，″杂芳基″还被理解为包括任何含氮杂芳基的N-氧化物衍生物。在杂芳基取代基是双环的并且一个环是非芳香族的或不含有杂原子的情况中，可以理解，分别通过芳环或通过含有杂原子的环连接的。

在此所使用的术语″杂环″或″杂环基″是指含有1-4个选自O、N和S的杂原子的3-至10-元芳香族的或非芳香族的杂环，并且包括双环基团。因此，″杂环基″包括上述的杂芳基及其二氢和四氢类似物。″杂环基″的其它例子包括，但不局限于下列：氮杂环丁烷基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并呋咱基、苯并吡唑基、苯并***基、苯并噻吩基、苯并噁唑基、咔唑基、咔啉基、噌啉基、呋喃基、咪唑基、二氢吲哚基、吲哚基、indolazinyl、吲唑基、异苯并呋喃基、异吲哚基、异喹啉基、异噻唑基、异噁唑基、萘啶基、噁二唑基、噁唑基、噁唑啉、异噁唑啉、氧杂环丁烷基、吡喃基、吡嗪基、吡唑基、哒嗪基、吡啶并吡啶基、哒嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、喹喔啉基、四氢吡喃基、四唑基、四唑并吡啶基、噻二唑基、噻唑基、噻吩基、***基、氮杂环丁烷基、1，4-二噁烷基、六氢氮杂地_基、哌嗪基、哌啶基、吡啶-2-酮基、吡咯烷基、吗啉基、硫代吗啉基、二氢苯并咪唑基、二氢苯并呋喃基、二氢苯并噻吩基、二氢苯并噁唑基、二氢呋喃基、二氢咪唑基、二氢吲哚基、二氢异噁唑基、二氢异噻唑基、二氢噁二唑基、二氢噁唑基、二氢吡嗪基、二氢吡唑基、二氢吡啶基、二氢嘧啶基、二氢吡咯基、二氢喹啉基、二氢四唑基、二氢噻二唑基、二氢噻唑基、二氢噻吩基、二氢***基、二氢氮杂环丁烷基、亚甲基二氧基苯甲酰基、四氢呋喃基和四氢噻吩基，及其N-氧化物。可以通过碳原子或通过杂原子连接杂环基取代基。

在一种实施方案中，在此所使用的术语″杂环″或″杂环基″是指含有1-4个选自O、N和S的杂原子的5-至10-元芳香族的或非芳香族的杂环，并且包括双环基团。因此，在此实施方案中，″杂环基″包括上述的杂芳基及其二氢和四氢类似物。″杂环基″的其它例子包括，但不局限于下列：苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并呋咱基、苯并吡唑基、苯并***基、苯并噻吩基、苯并噁唑基、咔唑基、咔啉基、噌啉基、呋喃基、咪唑基、二氢吲哚基、吲哚基、indolazinyl、吲唑基、异苯并呋喃基、异吲哚基、异喹啉基、异噻唑基、异噁唑基、萘啶基(naphthpyri dinyl)、噁二唑基、噁唑基、噁唑啉、异噁唑啉、氧杂环丁烷基、吡喃基、吡嗪基、吡唑基、哒嗪基、吡啶并吡啶基、哒嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、喹喔啉基、四氢吡喃基、四唑基、四唑并吡啶基、噻二唑基、噻唑基、噻吩基、***基、氮杂环丁烷基、1，4-二噁烷基、六氢氮杂_基、哌嗪基、哌啶基、吡啶-2-酮基、吡咯烷基、吗啉基、硫代吗啉基、二氢苯并咪唑基、二氢苯并呋喃基、二氢苯并噻吩基、二氢苯并噁唑基、二氢呋喃基、二氢咪唑基、二氢吲哚基、二氢异噁唑基、二氢异噻唑基、二氢噁二唑基、二氢噁唑基、二氢吡嗪基、二氢吡唑基、二氢吡啶基、二氢嘧啶基、二氢吡咯基、二氢喹啉基、二氢四唑基、二氢噻二唑基、二氢噻唑基、二氢噻吩基、二氢***基、二氢氮杂环丁烷基、亚甲基二氧基苯甲酰基、四氢呋喃基和四氢噻吩基，及其N-氧化物。

在一种实施方案中，杂环选自2-吖庚因酮、苯并咪唑基、2-二吖庚因酮(diaza pinone)、咪唑基、2-咪唑烷酮、吲哚基、异喹啉基、吗啉基、哌啶基、哌嗪基、吡啶基、吡咯烷基、2-哌啶酮、2-嘧啶酮、2-吡咯烷酮、喹啉基、四氢呋喃基、四氢异喹啉基和噻吩基。

正如本领域熟练技术人员可以理解的，在此所使用的″卤代(halo)″或″卤素(halogen)″是用来包括氯、氟、溴和碘。

除非另有说明，所述的烷基、链烯基、炔基、环烷基、芳基、杂芳基和杂环基取代基可以是取代或未取代的。例如，(C₁-C₆)烷基可以被一个、两个或三个选自OH、氧代、卤素、烷氧基、二烷基氨基或杂环基如吗啉基、哌啶基等的取代基取代。在这种情况下，如果一个取代基是氧代，而另一个是OH，那么定义中包括如下基团：-C＝O)CH₂CH(OH)CH₃，-(C＝O)OH，-CH₂(OH)CH₂CH(O)等。

在某些情况中，R⁹和R¹⁰如此定义，以致于它们可以与它们相连的氮一起形成一个在每个环中具有5-7元并且任选含有除氮外的一个或两个其它的选自N、O和S的杂原子的单环或双环杂环，所述的杂环任选被一个或多个选自R⁸的取代基取代。由此能够形成的杂环的实例包括，但不局限于下列，记住该杂环任选被一个或多个(并且并且优选一个、两个或三个)选自R⁸的取代基取代：

在一种实施方案中，R¹选自：(C＝O)C₁-C₁₀烷基、(C＝O)芳基、SO₂C₁-C₁₀烷基、(C＝O)OC₁-C₁₀烷基、(C＝O)NR^cR^c′和SO₂芳基，任选被一至三个选自R⁷的取代基取代。在另一种实施方案中，R¹是乙酰基、硫代乙酰基、磺酰氨基、(C＝O)NR^cR^c′或甲基磺酰基。

在一种实施方案中，R²独立地选自卤素、C₁-C₆烷基、OH和Si(R^c)₃。在另一种实施方案中，n是2以及R²独立地选自卤素。

在一种实施方案中，R³是H。

在一种实施方案中，R⁵选自H和C₁-C₁₀烷基，其任选被一至三个选自R⁷的取代基取代。在另一种实施方案中，R²选自任选被一至三个选自R⁷的取代基取代的C₁-C₁₀烷基。

在式I和II的化合物的一种实施方案中，W是一条键。

在一种实施方案中，q是0。

在一种实施方案中，q是1以及R⁵选自卤素、C₁-C₆烷基、OH和Si(R^c)₃。在另一种实施方案中，q是1以及R⁵选自卤素、C₁-C₆烷基和OH。

本发明包括式I化合物的游离形式及其药学上可接受的盐和立体异构体。在此示范的一些具体化合物是胺化合物的质子化盐。术语“游离形式”是指非盐形式的胺化合物。包括的药学上可接受的盐不仅包括在此所述的具体化合物的示范性盐，而且包括式I化合物的游离形式的所有典型的药学上可接受的盐。可以使用本领域已知的技术分离所述具体盐化合物的游离形式。例如，盐可以通过用合适的稀碱水溶液如NaOH、碳酸钾、氨和碳酸氢钠的稀水溶液进行处理，可以再生得到游离碱形式。游离形式在某种程度上在某些物理特性方面可能不同于其相应的盐形式，例如在极性溶剂中的溶解度，但是对本发明目的来说，所述的酸式盐和碱式盐在其它方面在药物上与它们各自的游离形式等效。

本发明化合物的药学上可接受的盐可以由含碱性或酸性部分的本发明化合物通过常规化学方法合成。通常，通过离子交换色谱法或通过使游离碱与化学计算量或过量的所希望的成盐无机酸或有机酸在合适的溶剂或不同的溶剂组合中反应来制备碱性化合物的盐。类似地，通过与合适的无机碱或有机碱反应形成酸性化合物的盐。

因此，本发明化合物的药学上可接受的盐包括通过使本发明碱性化合物与无机酸或有机酸反应形成的本发明化合物的常规无毒盐。例如，常规无毒盐包括那些来源于无机酸的盐，所述的无机酸例如是盐酸、氢溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸、硝酸等，以及由有机酸制备的盐，所述的有机酸例如是乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、扑酸、马来酸、羟基马来酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水杨酸、对氨基苯磺酸、2-乙酰氧基苯甲酸、富马酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙二磺酸、草酸、羟乙磺酸、三氟乙酸等。

当本发明的化合物是酸性时，合适的“药学上可接受的盐”是指由药学上可接受的无毒碱包括无机碱和有机碱制得的盐。来源于这些无机碱的盐包括铝、铵、钙、铜、铁、亚铁、锂、镁、锰盐、亚锰、钾、钠、锌等。特别优选的是铵、钙、镁、钾和钠盐。来源于药学上可接受的有机无毒碱的盐包括如下化合物的盐：伯、仲和叔胺类，取代胺类，包括天然存在的取代胺类，环胺和碱性离子交换树脂，例如精氨酸、甜菜碱、咖啡因、胆碱、N，N¹-二苄基乙二胺、二乙胺、2-二乙氨基乙醇、2-二甲氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基吗啉、N-乙基哌啶、葡糖胺(glucamine)、葡萄糖胺(glucosamine)、组氨酸、哈胺、异丙胺、赖氨酸、甲基葡糖胺、吗啉、哌嗪、哌啶、聚胺树脂、普鲁卡因、嘌呤类、可可碱、三乙胺、三甲胺、三丙胺、氨基丁三醇等。

如上所述的药学上可接受的盐以及其它典型的药学上可接受的盐的制备由Berg等，“Pharmaceutical Salts，”J.Pharm.Sci.，1977：66：1-19更全面地进行了描述。

还应注意到，本发明的化合物是潜在的内盐或两性离子，因为在生理条件下，化合物中去质子化酸性部分，例如羧基，可以为阴离子，并且这种电荷随后可能在内部与质子化或烷基化碱性部分，如季氮原子的阳离子电荷抵消。

可以通过使用如下文方案中所示的反应，以及其它文献中已知或实验操作步骤中列举的标准操作制备本发明的化合物。因此，下文的说明性方案并不限于所列的化合物或任何用于解释目的的特定的取代基。如方案中所示的取代基编号不一定与权利要求书中使用的编号相关，并且通常为了清楚起见，在上文式I的定义允许多个取代基时，显示单一取代基与化合物连接。

方案

如方案A所示，关键二氢吡咯中间体A-4可以由容易得到的适当取代的苯胺类和N-保护的二氢吡咯获得。接着将所述环氮脱保护，使得用适当取代的亲电试剂官能化，例如所示的二烷基氨基甲酰氯，得到化合物A-6。方案A-1表示A-4中间体的另一种合成。三烷基甲硅烷基部分结合到化合物A-6可以通过在所示的反应中选择一种硅(silica)取代的苯胺来实现。

如方案B所示，使用具有合适位置羟基部分的单个苯基吡咯对映异构体可以制备对映异构体纯的中间体B-5，然后，其可以类似于在方案A所示的方法中进行脱保护和官能化。

方案C说明合适取代的氨基酸残基与中间体A-5的连接。基团R^sc表示取代基侧链，优选氨基酸的侧链。

如方案D和F中所示，氨基羰基部分与二氢吡咯环氮的连接还可以通过两步合成法进行，由此将各种取代胺结合到本发明的化合物中。

方案E说明本发明化合物的合成，其将苯基部分和烷基部分结合到二氢吡咯环的2-位上。

如方案G所示，关键的2，2-二取代二氢吡咯中间体G-8可以容易地从可用的合适取代的α-苯基甘氨酸中获得。按照由Van Betsbrugge等，(Tetrahedron，1997，53，9233-9240)所述的操作，制得α-烯丙基-α-苯基甘氨酸G-3。酯的还原以及与羰基二咪唑成环，得到中间体G-4。烯丙基烯烃的钌氧化，接着酯形成和氮的烷基化，得到中间体G-5。成环和脱羧，产生中间体G-6。然后，可以使用环羰基以引入合适取代的苯基部分。随后的皂化反应和氧保护，得到保护的中间体G-8。G-8的对映异构体可以通常利用手性色谱技术进行分离。然后，所述的环氮可以与三光气反应，制备活化的碳酰氯G-9。

方案H说明氟化氨基哌啶H-5的制备，从N-保护的哌啶酮开始。顺式和反式非对映体对通常可以用硅胶色谱分离，并且所述的对映异构体通常可以利用手性色谱技术进行分离。

如方案I所示，然后，这样一种氟化氨基哌啶可以与二氢吡咯中间体G-9反应，得到本发明化合物I-1。

如方案J和K所示，G-9的羟基部分可以用各种试剂进行烷基化。特别地，方案K说明将硅(silica)原子结合到2-位侧链上。

如在方案L中所示，通过相应的醛L-1，进行硅(silica)原子的另一种结合方法，得到本发明的化合物L-2。

方案M说明本发明化合物的合成，其在哌啶基胺侧链上的取代基中结合一个硅(silica)原子。

方案A

方案A-1

方案B

方案C

方案D

方案E

方案E(续)

方案F

方案G

方案H

方案I

方案J

方案K

方案L

方案M

应用

本发明的化合物可应用于各种应用。正如本领域熟练技术人员可以理解的那样，可以按照各种方式改变有丝***；即，可以通过增加或减少有丝***途径中的成分的活性来影响有丝***。换句话说，可以通过打破平衡，即通过抑制或激活某些成分来影响(例如，破坏)有丝***。类似方法可以用来改变减数***。

在一种实施方案中，本发明的化合物用来调节有丝***纺锤体形成，由此导致有丝***中的细胞周期停滞延长。在此的″调节″是指改变有丝***纺锤体形成，包括增加和减少纺锤体形成。在此的″有丝***纺锤体形成″是指通过丝***驱动蛋白使微管组织为双极结构。在此的″有丝***纺锤体功能障碍″是指有丝***停滞和单极纺锤体形成。

本发明的化合物用于结合和/或调节有丝***驱动蛋白活性。在一种实施方案中，有丝***驱动蛋白为有丝***驱动蛋白bimC亚家族中的成员(如美国专利号6,284,480第5栏中所述)。在另一种实施方案中，所述的有丝***驱动蛋白为人KSP，虽然还可以用本发明的化合物调节来自其它生物体的有丝***驱动蛋白活性。在本文中，调节是指增加或减少纺锤体极分离，造成有丝***纺锤体极的畸形，即展开，或者造成有丝***纺锤体形态紊乱。在用于这些目的的KSP定义内还包括KSP的变体和/或片段。此外，可以用本发明的化合物抑制其它有丝***驱动蛋白。

本发明的化合物用于治疗细胞增殖性疾病。可以用在此提供的方法和组合物治疗的疾病状态包括，但不局限于，癌症(在下面进一步讨论)，自身免疫性疾病，关节炎，移植排斥，炎性肠病，医疗操作，包括，但不限于手术、血管成形术等后引起的增殖。可以理解，在一些情况中，细胞可能不处于增殖过度或增殖低下状态(异常状态)，但仍然需要治疗。例如，在创伤愈合期间，细胞可能″正常″增殖，但是增殖增强可能是所需的。类似地，如上所述，在农业领域中，细胞可能处于″正常″状态，但是可能希望增殖调节以便通过直接促进农作物生长或通过抑制对农作物不利影响的植物或生物体的生长生长来提高农作物的产量。因此，在一种实施方案中，本发明包括施用到患有或可能最终患有这些病症或状态的任意一种的细胞或个体中。

在此提供的化合物、组合物和方法特别认为可用于治疗癌症，包括实体瘤，例如皮肤癌、乳腺癌、脑癌、***、睾丸癌等。在此提供的化合物、组合物和方法还特别认为可用于治疗癌症，包括乳腺癌、血癌、肺癌、结肠癌、***癌、睾丸癌和脑癌。特别地，可以用本发明的化合物、组合物和方法治疗的癌症包括，但不局限于：心脏：肉瘤(血管肉瘤、纤维肉瘤、横纹肌肉瘤、脂肉瘤)，粘液瘤，横纹肌瘤，纤维瘤，脂肪瘤和畸胎瘤；肺：支气管癌(鳞状上皮细胞、未分化的小细胞、未分化的大细胞、腺癌)，肺泡(细支气管)癌，支气管腺瘤，肉瘤，淋巴瘤，软骨错构瘤，间皮瘤；胃肠：食道(鳞状细胞癌、腺癌、平滑肌肉瘤、淋巴瘤)，胃(癌，淋巴瘤，平滑肌肉瘤)，胰腺(导管腺癌、胰岛素瘤、胰高血糖素瘤、胃泌素瘤、类癌瘤、血管活性肠肽肿瘤)，小肠(腺癌、淋巴瘤、类癌瘤、卡波西肉瘤、平滑肌瘤、血管瘤、脂肪瘤、神经纤维瘤、纤维瘤)，大肠(腺癌、管状腺瘤、绒毛状腺瘤、错构瘤、平滑肌瘤)；泌尿生殖道：肾(腺癌、韦母氏瘤[肾母细胞瘤]、淋巴瘤、白血病)，膀胱和尿道(鳞状细胞癌、移行细胞癌、腺癌)，***(腺癌、肉瘤)，睾丸(***瘤、畸胎瘤、胚胎癌、畸胎癌、绒毛膜癌、肉瘤、***癌、纤维瘤、纤维腺瘤、腺瘤样瘤、脂肪瘤)；肝：肝癌(肝细胞癌)，肝胆管型肝癌，肝胚细胞瘤，血管肉瘤，肝细胞性腺瘤，血管瘤；骨：骨原性肉瘤(骨肉瘤)，纤维肉瘤，恶性纤维组织细胞瘤，软骨肉瘤，尤因氏肉瘤，恶性淋巴瘤(网状细胞肉瘤)，多发性骨髓瘤，恶性巨细胞瘤，脊索瘤，骨软骨瘤(骨软骨性外生骨疣)，良性软骨瘤，成软骨细胞瘤，软骨粘液纤维瘤，骨样骨瘤和巨细胞瘤；神经***：颅骨(骨瘤、血管瘤、肉芽瘤、黄色瘤、畸形性骨炎)，脑膜(脑膜瘤、脑膜肉瘤、神经胶质瘤病)，脑(星形细胞瘤、成神经管细胞瘤、神经胶质瘤、室管膜瘤、生殖细胞瘤[松果体瘤]、多形成恶性胶质瘤、少突神经胶质瘤、神经鞘瘤、视网膜母细胞瘤、先天性肿瘤)，脊髓神经纤维瘤，脑膜瘤，神经胶质瘤，肉瘤)；妇科：子宫(子宫内膜癌)，子宫颈(***、肿瘤前期子宫颈非典型增生)，卵巢(卵巢癌[浆液性囊腺癌、粘液性囊腺癌、未分类的癌症]、粒层-鞘细胞瘤、卵巢塞-莱二氏细胞瘤、无性细胞瘤、卵巢未成熟畸胎瘤)，外阴(鳞状细胞癌、上皮内癌、腺癌、纤维肉瘤、黑色素瘤)，***(明细胞癌、鳞状细胞癌、葡萄样肉瘤(胚胎性横纹肌肉瘤)，输卵管(癌症)；血液学：血液(骨髓性白血病[急性和慢性]、急性淋巴母细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、骨髓增殖性疾病、多发性骨髓瘤、骨髓发育异常综合征)，何杰金病，非何杰金淋巴瘤[恶性淋巴瘤]；皮肤：恶性黑色素瘤，基底细胞癌，鳞状细胞癌，卡波西肉瘤，发育不良痣，脂肪瘤，血管瘤，皮肤纤维瘤，瘢痕瘤，牛皮癣；和肾上腺：成神经细胞瘤。因此，在此提供的术语″癌细胞″包括患有上文所列的病症中任意一种的细胞。

本发明的化合物还可以用于制备用于治疗上面的细胞增殖性疾病的药物，特别是癌症。

正如美国专利号6,284,480中所述，本发明的化合物还可通过调节bimC驱动蛋白亚群中的真菌成员的活性而用作抗真菌药。

本发明的化合物还可以用于制备用于治疗如上所述的疾病，特别是癌症的药物。

本发明的化合物可以单独或按照标准药物实践与药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂组合以药物组合物的形式给予哺乳动物，优选人。所述的化合物可以以口服给药或胃肠外给药的形式给药，给药途径包括静脉内、肌内、腹膜内、皮下、直肠和局部给药途径。

含有所述活性成分的药物组合物可以以适于口服应用的形式，例如片剂、含片、锭剂、含水或含油悬浮液、可分散性粉剂或粒剂、乳剂、硬或软胶囊、或糖浆或酏剂的形式存在。口服应用组合物可以根据本领域已知的制备药物组合物的任何方法进行制备，并且这些组合物可以含有一种或多种选自甜味剂、调味剂、着色剂和防腐剂的试剂以便提供药学上精美的和可口的制剂。片剂含有与适于制备片剂的无毒药学上可接受的赋形剂掺合的活性成分。这些赋形剂例如可以是惰性稀释剂如碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；造粒剂和崩解剂如微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠、玉米淀粉或褐藻酸；粘合剂，例如淀粉、明胶、聚乙烯-吡咯烷酮或***胶，以及润滑剂，例如，硬脂酸镁、硬脂酸或滑石粉。这些片剂可以是未包衣的或者用已知技术进行包衣以屏蔽药物的不愉快的味道或延迟在胃肠道中的崩解和吸收，并由此在一个较长时间内提供一种持续作用。例如，可以使用水溶性掩蔽味道的物质，例如羟丙基-甲基纤维素或羟丙基纤维素，或延时物质例如乙基纤维素、乙酸丁酸纤维素。

口服应用制剂还可以是硬明胶胶囊，其中活性成分与惰性固体稀释剂如碳酸钙、磷酸钙或高岭土混合，或者可以是软明胶胶囊，其中活性成分与水溶性的载体例如聚乙二醇或油介质如花生油、液体石蜡或橄榄油混合。

水混悬液含有与适于制备水混悬液的赋形剂混合在一起的活性物质。这些赋形剂是悬浮剂，例如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、海藻酸钠、聚乙烯-吡咯烷酮、黄蓍胶和***胶；分散剂或润湿剂可以是天然存在的磷脂，例如卵磷脂，或烯化氧与脂肪酸的缩合产物，例如聚氧乙烯硬脂酸酯，或环氧乙烷与长链脂族醇的缩合产物，例如十七亚乙基氧基鲸蜡醇，或环氧乙烷与来源于脂肪酸和己糖醇偏酯的缩合产物，例如聚氧乙烯山梨糖醇单油酸酯，或环氧乙烷与来源于脂肪酸和己糖醇酸酐的偏酯的缩合产物，例如聚乙烯去水山梨糖醇单油酸酯。所述的水混悬液还可以含有一种或多种防腐剂，例如对羟基苯甲酸乙酯或对羟基苯甲酸正丙酯，一种或多种着色剂，一种或多种调味剂，以及一种或多种甜味剂，例如蔗糖、糖精或阿司帕坦。

含油悬浮液可以通过如下配制：将活性成分悬浮在植物油如花生油、橄榄油、芝麻油或椰子油中，或将活性成分悬浮在矿物油如液体石蜡中。含油悬浮液可以含有增稠剂如蜂蜡、硬石蜡或鲸蜡醇。可以加入如上所述的甜味剂和调味剂，以提供一种可口的口服制剂。这些组合物可以通过加入抗氧化剂如叔丁基化对羟基茴香醚或α-生育酚进行保存。

适于通过加入水制备水悬浮液的可分散性粉剂和粒剂如下提供：将活性成分与分散剂或润湿剂、悬浮剂和一种或多种防腐剂掺合。合适的分散剂或润湿剂和悬浮剂是上述已经举例说明的那些。还可以存在其它的赋形剂，例如甜味剂、调味剂和着色剂。这些组合物可以通过加入抗氧化剂如抗坏血酸进行保存。

本发明的药物组合物还可以以水包油乳化剂的形式存在。所述的油相可以是植物油如橄榄油或花生油或矿物油如液体石蜡或这些的混合物。合适的乳化剂可以是天然存在的磷脂，例如大豆卵磷脂，以及来源于脂肪酸和己糖醇酸酐的酯或偏酯，例如去水山梨糖醇单油酸酯，以及所述的偏酯与环氧乙烷的缩合产物，例如聚氧乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯。乳液还可以含有甜味剂、调味剂、防腐剂和抗氧化剂。

糖浆和酏剂可以用甜味剂如甘油、丙二醇、山梨糖醇或蔗糖配制。这些制剂还可以含有湿润剂、防腐剂、调味剂、着色剂和抗氧化剂。

所述的药物组合物可以以无菌可注射水溶液的形式存在。在可接受的赋形剂和溶剂当中，可以使用的是水、林格溶液以及等渗氯化钠溶液。

无菌可注射制剂还可以是无菌可注射水包油微乳剂，其中所述的活性组分溶于油相中。例如，首先将活性组分溶于大豆油和卵磷脂的混合物中。然后，将该油溶液导入到水和甘油混合物中并加工成微乳剂。

可以通过局部快速浓注将可注射溶液或微乳剂导入到患者的血流中。或者，可能有利的是以维持本发明化合物的恒定循环浓度的方式给予所述溶液或微乳剂。为了维持这样的恒定浓度，可以使用连续静脉内释放装置。这种装置的实例是Deltec CADD-PLUS^TM型5400静脉泵。

所述的药物组合物可以以无菌可注射含水悬浮液或油悬浮液的形式用于肌内和皮下给药。根据已知技术使用那些上面已经提及的合适的分散剂或润湿剂以及悬浮剂，可以配制这种悬浮液。无菌可注射制剂还可以是在无毒胃肠外可接受稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液或悬浮液，例如作为在1，3-丁二醇中的溶液。此外，无菌不挥发油通常用作溶剂或悬浮介质。为此，可以使用任何温和的不挥发油，包括合成的甘油一酯或甘油二酯。此外，可以在可注射制剂中使用脂肪酸例如油酸。

式I的化合物还可以以栓剂的形式给药用于直肠给药药物。这些组合物可以通过将药物与合适的无刺激性赋形剂混合进行制备，这些组合物在常温下为固体，但其在肛温下为液体，因此在直肠中融化以释放药物。这些物质包括可可脂、甘油化明胶、氢化植物油、各种分子量的聚乙二醇和聚乙二醇的脂肪酸酯的混合物。

对于局部应用，可以使用含式I化合物的乳剂、软膏、果冻、溶液或悬浮液等(对这种应用目的来说，局部施用应该包括漱口剂和洗口药)。

通过局部应用合适的鼻内载体和释放装置以鼻内形式或通过使用那些本领域常规熟练技术人员公知的经皮的皮肤贴片的那些形式经皮途径给予本发明的化合物。为了以经皮释放体系的形式给药，在整个剂量方案，当然以连续而不是间断剂量给药。本发明的化合物还可以作为栓剂，使用基质如可可脂、甘油化明胶、氢化植物油、各种分子量的聚乙二醇和聚乙二醇的脂肪酸酯的混合物。

当将本发明的化合物给予人受试者时，日剂量通常由开处方的医生确定，其中所述的剂量一般根据个体患者的年龄、体重、性别和反应以及患者症状的严重程度而改变。

在一种示范性应用中，对进行癌症治疗的哺乳动物给予适量的化合物。给药量约为0.1mg/kg体重-约60mg/kg体重每日，优选0.5mg/kg体重-约40mg/kg体重每日。

本发明的化合物还与已知的治疗剂和抗癌剂联合用药。例如，本发明的化合物与已知的抗癌剂连用。目前披露的化合物与其它抗癌药或化疗剂的联合用药在本发明的范围之内。这些药剂的实例可以在CancerPrinciples and Practice of Oncology by V.T.Devita and S.Hellman(editors)，6^th edition(February15，2001)，Lippincott Williams & Wilkins Publishers中找到。本领域普通熟练技术人员将能够基于涉及的药物和癌症的特定特征确定哪些药剂的组合将是有用的。这些抗癌药剂包括，但不局限于，下列：***受体调节剂、雄激素受体调节剂、类视色素受体调节剂、细胞毒性/细胞抑制剂、抗增殖药剂、异戊二烯基-蛋白质转移酶抑制剂、HMG-CoA还原酶抑制剂以及其它血管生成抑制剂、细胞增殖和存活信号抑制剂、编程性细胞死亡诱导剂和干扰细胞周期关卡的药剂。当与放射治疗共同用药时，本发明的化合物是特别有用的。

在一种实施方案中，本发明的化合物还与已知的抗癌药联合用药，所述的已知抗癌药包括下列：***受体调节剂、雄激素受体调节剂、类视色素(retinoid)受体调节剂、细胞毒性剂、抗增殖剂、异戊二烯基-蛋白质转移酶抑制剂、HMG-CoA还原酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、逆转录酶抑制剂以及其它血管生成抑制剂。

“***受体调节剂”是指干扰或抑制***与受体结合的化合物，而与机理无关。***受体调节剂的实例包括，但不局限于，他莫昔芬、雷洛昔芬、碘昔芬、LY353381、LY117081、托瑞米芬、氟维司群、4-[7-(2，2-二甲基-1-氧代丙氧基-4-甲基-2-[4-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯基]-2H-1-苯并吡喃-3-基]-苯基-2，2-二甲基丙酸酯、4，4′-二羟基二苯酮-2，4-二硝基苯基-腙和SH646。

“雄激素受体调节剂”其指干扰或抑制雄激素与受体结合的化合物，而与机理无关。雄激素受体调节剂的实例包括非那司提以及其它5α-还原酶抑制剂、尼鲁米特、氟他米特、比卡鲁胺、利阿唑和醋酸阿比特龙。

“类视色素受体调节剂”其指干扰或抑制类视色素与受体结合的化合物，而与机理无关。这些类视色素受体调节剂的实例包括贝沙罗汀、维甲酸、13-顺-维甲酸、9-顺-维甲酸、α-二氟甲基鸟氨酸、ILX23-7553、反-N-(4′-羟基苯基)维胺(retinamide)和N-4-羧基苯基维胺。

“细胞毒性/细胞抑制剂”是指主要通过直接干扰细胞的功能作用而导致细胞死亡或抑制细胞增殖或抑制或干涉细胞有丝***的化合物，包括烷基化试剂、肿瘤坏死因子、嵌入剂、低氧可活化化合物、微管抑制剂/微管稳定剂、有丝***驱动蛋白抑制剂、组蛋白脱乙酰基酶抑制剂、涉及有丝***进程的激酶抑制剂、抗代谢物；生物响应调节物；激素/抗激素治疗剂、造血生长因子、单克隆抗体靶标的治疗剂、拓扑异构酶抑制剂、蛋白酶体抑制剂和泛激素连接酶抑制剂。

细胞毒性剂的的实例包括，但不局限于，sertenef、恶病质素、异环磷酰胺、他索纳明、氯尼达明、卡铂、六甲蜜胺、泼尼莫司汀、二溴卫矛醇、雷莫司汀、福莫司汀、奈达铂、奥沙利铂、替莫唑胺、heptaplatin、雌氮芥、甲苯磺酸英丙舒凡、氯乙环磷酰胺、尼莫司丁、二溴螺氯铵、嘌嘧替派、洛铂、沙铂、甲基丝裂霉素、顺铂、伊罗夫文、dexifosfamide、顺-胺二氯(2-甲基-吡啶)铂、苄基鸟嘌呤、葡磷酰胺、GPX100、(反式，反式，反式)-二-mu-(己烷-1，6-二胺)-mu-[二胺-铂(II)]二[二胺(氯)铂(II)]四氯化物、二氮丙啶基精胺、三氧化二砷、1-(11-十二烷基氨基-10-羟基十一烷基)-3，7-二甲基黄嘌呤、佐柔比星、伊达比星、柔红霉素、比生群、米托蒽醌、吡柔比星、吡萘非特、戊柔比星、氨柔比星、抗瘤酮、3′-脱氨基-3′-吗啉代-13-脱氧代-10-羟基去甲柔红霉素、annamycin、加柔比星、伊利奈法德、MEN10755和4-脱甲氧基-3-脱氨基-3-氮丙啶基-4-甲磺酰基-柔红霉素(参见WO00/50032)。

低氧可活化化合物的一个实例是替拉扎明。

蛋白酶体抑制剂的实例包括，但不局限于，乳胞素和保特佐米。

微管抑制剂/微管-稳定剂的实例包括紫杉醇、硫酸长春地辛、3′，4′-双脱氢-4′-脱氧-8′-norvincaleukoblastine、多西他赛、根霉素、多拉司他汀、羟乙基磺酸米伏布林、auristatin、西马多丁、RPR109881、BMS184476、长春氟宁、cryptophycin、2，3，4，5，6-五氟-N-(3-氟-4-甲氧基苯基)苯磺酰胺、脱水长春碱、N，N-二甲基-L-缬氨酰基-L-缬氨酰基-N-甲基-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基-L-脯氨酸-叔丁酰胺、TDX258、埃博霉素(例如参见美国专利号6,284,781和6,288,237)和BMS188797。

拓扑异构酶抑制剂的某些实例是托泊替康、hycaptamine、伊立替康、卢比替康、6-乙氧基丙酰基-3′，4′-O-外型-亚苄基-教酒菌素、9-甲氧基-N，N-二甲基-5-硝基吡唑并[3，4，5-kl]吖啶-2-(6H)丙胺、1-氨基-9-乙基-5-氟-2，3-二氢-9-羟基-4-甲基-1H，12H-苯并[de]吡喃并[3′，4′：b，7]-吲嗪并[1，2b]喹啉-10，13(9H，15H)二酮、勒托替康、7-[2-(N-异丙氨基)乙基]-(20S)喜树碱、BNP1350、BNPI1100、BN80915、BN80942、磷酸依托泊苷、替尼泊苷、索布佐生、2′-二甲氨基-2′-脱氧-依托泊苷、GL331、N-[2-(二甲氨基)乙基]-9-羟基-5，6-二甲基-6H-吡啶并[4，3-b]咔唑-1-羧酰胺、asulacrine、(5a，5aB，8aa，9b)-9-[2-[N-[2-(二甲氨基)乙基]-N-甲基氨基]乙基]-5-[4-羟基-3，5-二甲氧基苯基]-5，5a，6，8，8a，9-六氢呋喃并(3′，4′：6，7)萘并(2，3-d)-1，3-间二氧杂环戊烯-6-酮、2，3-(亚甲基二氧基)-5-甲基-7-羟基-8-甲氧基苯并[c]-菲啶鎓、6，9-二[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]isoguinoline-5，10-二酮、5-(3-氨基丙基氨基)-7，10-二羟基-2-(2-羟基乙基氨基甲基)-6H-吡唑并[4，5，1-de］吖啶-6-酮、N-[1-[2(二乙氨基)乙基氨基]-7-甲氧基-9-氧代-9H-噻吨-4-基甲基]甲酰胺、N-(2-(二甲氨基)乙基)吖啶-4-羧酰胺，6-[[2-(二甲氨基)乙基]氨基]-3-羟基-7H-茚并[2，1-c]喹啉-7-酮和地美司钠。

有丝***驱动蛋白且特别是人有丝***驱动蛋白KSP的抑制剂的实例，描述在PCT出版物WO01/30768、WO01/98278、WO03/050，064、WO03/050,122、WO03/049,527、WO03/049,679、WO03/049,678和WO03/39460和待审PCT申请号US03/06403(2003年3月4日提交)、US03/15861(2003年5月19日提交)、US03/15810(2003年5月19日提交)、US03/18482(2003年6月12日提交)和US03/18694(2003年6月12日提交)中。在一个实施方案中，有丝***驱动蛋白的抑制剂包括，但不限于，KSP抑制剂、MKLP1抑制剂、CENP-E抑制剂、MCAK抑制剂、Kifl4抑制剂、Mphosph1抑制剂和Rab6-KIFL抑制剂。

“组蛋白脱乙酰基酶抑制剂”的实例包括，但不局限于，SAHA、TSA、oxamflatin、PXD101、MG98和scriptaid。其它的组蛋白脱乙酰基酶抑制剂可以在下面文稿中找到：Miller，T.A.等J.Med.Chem.46(24)：5097-5116(2003)。

“涉及有丝***进程的激酶的抑制剂”包括，但不限于aurora激酶抑制剂、Polo-类激酶抑制剂(PLK，特别是PLK-1抑制剂)、bub-1抑制剂和bub-R1抑制剂。“aurora激酶抑制剂”的实例是VX-680。

“抗增殖剂”包括反义RNA和DNA寡核苷酸，例如G3139、ODN698、RVASKRAS、GEM231和INX3001；和抗代谢物，例如依诺他滨、卡莫氟、替加氟、喷司他丁、去氧氟尿苷、三甲曲沙、氟达拉滨、卡培他滨、加洛他滨、cytarabine ocfosfate、fosteabine sodium hydrate、雷替曲塞、paltitrexid、乙嘧替氟、噻唑呋林、地西他滨、诺拉曲塞、培美曲塞、nelzarabine、2′-脱氧-2′-亚甲基胞苷、2′-氟亚甲基-2′-脱氧胞苷、N-[5-(2，3-二氢-苯并呋喃基)磺酰基]-N′-(3，4-二氯苯基)脲，N6-[4-脱氧-4-[N2-[2(E)，4(E)-十四烯酰基]甘氨酰氨基]-L-甘油基-B-L-甘露-吡喃庚糖基]腺嘌呤、aplidine、海鞘素、曲沙他滨、4-[2-氨基-4-氧代-4，6，7，8-四氢-3H-嘧啶并[5，4-b][1，4]噻嗪-6-基-(S)-乙基]-2，5-噻吩酰基-L-谷氨酸、氨基蝶呤、5-氟脲嘧啶、阿拉诺新、11-乙酰基-8-(氨基甲酰基氧基甲基)-4-甲酰基-6-甲氧基-14-氧杂-1，11-二氮杂四环(7.4.1.0.0)-十四-2，4，6-三烯-9-基乙酸酯、苦马豆碱、洛美曲索、右雷佐生、甲硫氨酸酶、2′-氰基-2′-脱氧-N4-棕榈酰基-1-B-D-***呋喃糖基胞嘧啶和3-氨基吡啶-2-甲醛缩氨基硫脲。

单克隆抗体靶向的治疗剂的实例包括那些具有与癌细胞特异性或靶细胞特异性单克隆抗体连接的细胞毒性剂或放射性同位素的治疗剂。实例包括Bexxar。

“HMG-CoA还原酶抑制剂”是指3-羟基-3-甲基戊二酰-CoA还原酶的抑制剂。可以使用的HMG-CoA还原酶抑制剂的实例包括，但不局限于洛伐他汀(MEVACOR^_；参见美国专利号4,231,938、4,294,926和4,319,039)、辛伐他汀(ZOCOR^_；参见美国专利号4,444,784、4,820,850和4,916,239)、帕伐他汀(PRAVACHOL^_；参见美国专利号4,346,227、4,537,859、4,410,629、5，030,447和5,180,589)、氟伐地汀(LESCOL^_；参见美国专利号5,354,772、4,911,165、4,929,437、5,189,164、5,118,853、5,290,946和5,356,896)和阿伐他汀(LIPITOR^_；参见美国专利号5,273,995、4,681,893、5,489,691和5,342,952)。可以用于本发明方法的这些和其它HMG-CoA还原酶抑制剂的结构式描述在M.Yalpani，″Cholesterol Lowering Drugs″，Chemistry & Industry，pp.85-89的第87页(1996年2月5日)和美国专利号4,782，084和4,885,314中。在此所使用的术语HMG-CoA还原酶抑制剂包括所有药学上可接受的内酯和开环的酸形式(即，其中内酯环开环而形成游离酸)以及具有HMG-CoA还原酶抑制活性的化合物的盐和酯形式，且由此这类盐、酯类、开环的酸和内酯形式的应用包括在本发明范围内。

“异戊二烯基-蛋白转移酶抑制剂”是指抑制异戊二烯基-蛋白转移酶中任意一种或任意组合的化合物，所述的异戊二烯基-蛋白转移酶包括法尼基-蛋白转移酶(FPTase)、忙牛儿基忙牛儿基-蛋白转移酶I型(GGPTase-I)和忙牛儿基忙牛儿基-蛋白转移酶II型(GGPTase-II，也称为Rab GGPTase)。

可以在下面出版物和专利中找到异戊二烯基-蛋白转移酶抑制剂的实例：WO96/30343、WO97/18813、WO97/21701、WO97/23478、WO97/38665、WO98/28980、WO98/29119、WO95/32987、美国专利号5,420,245、美国专利号5,523,430、美国专利号5,532,359、美国专利号5,510,510、美国专利号5,589,485、美国专利号5,602，098、欧洲专利公开号0618221、欧洲专利公开号0675112、欧洲专利公开号0604181、欧洲专利公开号0696593、WO94/19357、WO95/08542、WO95/11917、WO95/12612、WO95/12572、WO95/10514、美国专利号5,661,152、WO95/10515、WO95/10516、WO95/24612、WO95/34535、WO95/25086、WO96/05529、WO96/06138、WO96/06193、WO96/16443、WO96/21701、WO96/21456、WO96/22278、WO96/24611、WO96/24612、WO96/05168、WO96/05169、WO96/00736、美国专利号5,571,792、WO96/17861、WO96/33159、WO96/34850、WO96/34851、WO96/30017、WO96/30018、WO96/30362、WO96/30363、WO96/31111、WO96/31477、WO96/31478、WO96/31501、WO97/00252、WO97/03047、WO97/03050、WO97/04785、WO97/02920、WO97/17070、WO97/23478、WO97/26246、WO97/30053、WO97/44350、WO98/02436和美国专利号5,532,359。就异戊二烯基-蛋白转移酶抑制剂对血管生成的作用的实例而言，参见European J.ofCancer，Vol.35，No.9，pp.1394-1401(1999)。

“血管生成抑制剂”是指抑制新血管形成的化合物，而与机理无关。血管生成抑制剂的实例包括，但不局限于，酪氨酸激酶抑制剂，例如酪氨酸激酶受体Flt-1(VEGFR1)和F1k-1/KDR(VEGFR2)的抑制剂，表皮-衍生的、成纤维细胞-衍生的或血小板源性生长因子的抑制剂，MMP(基质金属蛋白酶)抑制剂，整联蛋白阻滞剂，干扰素-α，白细胞介素-12，多硫酸戊聚糖，环加氧酶抑制剂，包括非甾体抗炎药(NSAIDs)如阿斯匹林和和布洛芬以及选择性环加氧酶-2抑制剂如塞来考昔和罗非考昔(PNAS，Vol.89，p.7384(1992)；JNCI，Vol.69，p.475(1982)；Arch.Opthalmol.，Vol.108，p.573(1990)；Anat.Rec.，Vol.238，p.68(1994)；FEBSLetters，Vol.372，p.83(1995)；Clin，Orthop.Vol.313，p.76(1995)；J.Mol.Endocrinol.，Vol.16，p.107(1996)；Jpn.J.Pharmacol.，Vol.75，p.105(1997)；Cancer Res.，Vol.57，p.1625(1997)；Cell，Vol.93，p.705(1998)；Intl.J.Mol.Med.，Vol.2，p.715(1998)；J.Biol.Chem.，Vol.274，p.9116(1999))，甾体抗炎药(例如皮质类固醇、盐皮质激素、***、***、***龙、甲泼尼龙、倍他米松)，羧基酰氨基***、考布他汀A-4、角鲨胺、6-O-氯乙酰基-羰基)-烟曲霉醇、沙利度胺、angio statin、troponin-1、血管紧张素II拮抗剂(参见Fernandez等，J.Lab.Clin.Med.105：141-145(1985))，和针对VEGF的抗体(参见，Nature Biotechnology，Vol.17，pp.963-968(October1999)；Kim等，Nature，362,841-844(1993)；WO00/44777和WO00/61186)。

调节或抑制血管生成并且还可以用于与本发明化合物联用的其它治疗剂包括调节或抑制凝血和纤维蛋白溶解***的活性剂(参见Clin.Chem.La.Med.38：679-692(2000)中的综述)。调节或抑制凝血和纤维蛋白溶解途径的这些活性剂的实例包括，但不局限于，肝素(参见Thromb.Haemost.80：10-23(1998))、低分子量肝素和羧肽酶U抑制剂(亦称为活性凝血酶可活化的纤维蛋白溶解抑制剂[TAFIa])(参见Thrombosis Res.101：329-354(2001))。PCT出版物WO03/013,526和美国序列号60/349,925(2002年1月18日提交)中已经描述了TAFIa抑制剂。

“干扰细胞周期关卡的活性剂”是指抑制转导细胞周期关卡信号的蛋白激酶，由此使癌细胞对DNA损伤剂敏感的化合物。这些活性剂包括ATR、ATM、Chk1和Chk2激酶的抑制剂以及cdk和cdc激酶抑制剂并且特别以7-羟基星型孢菌素、flavopiridol、CYC202(Cyclacel)和BMS-387032为典型。

“细胞增殖和存活信号途径的抑制剂”是指抑制细胞表面受体和那些表面受体的信号转导级联下游的药物活性剂。这些活性剂包括EGFR的抑制剂(例如吉非替尼和erlotinib)、ERB-2的抑制剂(例如曲妥单抗)、IGFR的抑制剂、细胞因子受体的抑制剂、MET的抑制剂、PI3K的抑制剂(例如LY294002)、丝氨酸/苏氨酸激酶的抑制剂(包括，但不局限于，例如在(WO03/086404、WO03/086403、WO03/086394、WO03/086279、WO02/083675、WO02/083139、WO02/083140和WO02/083138)中所述的Akt的抑制剂，Raf激酶的抑制剂(例如BAY-43-9006)、MEK的抑制剂(例如CI-1040和PD-098059)和mTOR的抑制剂(例如Wyeth CCI-779和Ariad AP23573)。这些活性剂包括小分子抑制剂化合物和抗体拮抗剂。

“细胞程序死亡诱导剂”包括TNF受体家族成员的激活剂(包括TRAIL受体)。

本发明还包括与是选择性COX-2抑制剂的NSAID′s的联合用药。就本说明书的目的而言，将是选择性COX-2抑制剂的NSAID′s定义为那些具有对COX-2的抑制特异性超过对COX-1的抑制特异性至少100倍的活性剂，正如根据通过细胞或微粒体试验评估的COX-2的IC₅₀与COX-1的IC₅₀之比所确定的。这些化合物包括，但不局限于在如下中公开的那些：美国专利5,474,995、美国专利5,861,419、美国专利6,001,843、美国专利6,020,343、美国专利5,409,944、美国专利5,436,265、美国专利5,536,752、美国专利5,550,142、美国专利5,604,260、美国专利5,698,584、美国专利5,710,140、WO94/15932、美国专利5,344,991、美国专利5,134,142、美国专利5,380,738、美国专利5,393,790、美国专利5,466,823、美国专利5,633,272和美国专利5,932,598、所有的在此整个引入作为参考。

特别用于本发明治疗方法的COX-2抑制剂是：3-苯基-4-(4-(甲基磺酰基)苯基)-2-(5H)-呋喃酮；和5-氯-3-(4-甲基磺酰基)苯基-2-(2-甲基-5-吡啶基)吡啶；或其药学上可接受的盐。

已经描述为COX-2特异性抑制剂且由此用于本发明的化合物包括，但不局限于：帕瑞考昔、CELEBREX^_和BEXTRA^_或其药学上可接受的盐。

血管生成抑制剂的其它实例包括，但不局限于，内皮他丁、ukrain、豹蛙酶、IM862、5-甲氧基-4-[2-甲基-3-(3-甲基-2-丁烯基)氧杂环丙烷基]-1-氧杂螺[2，5]辛-6-基(氯乙酰基)氨基甲酸酯、acetyldinanaline、5-氨基-1-[[3，5-二氯-4-(4-氯苯甲酰基)苯基]甲基]-1H-1，2，3-***-4-羧-酰胺、CM101、角鲨胺、考布他汀、RPI4610、NX31838、硫酸化甘露戊糖磷酸酯、7，7-(羰基-二[亚氨基-N-甲基-4，2-吡咯并羰基亚氨基[N-甲基-4，2-吡咯]-羰基亚氨基]-二-(1，3-萘二磺酸酯)和3-[(2，4-二甲基吡咯-5-基)亚甲基]-2-吲哚满酮(SU5416)。

如上所用的那样，“整联蛋白阻滞剂”是指：选择性拮抗、抑制或阻碍生理配体与α_vβ₃整联蛋白结合的化合物；选择性拮抗、抑制或阻碍生理配体与αvβ5整联蛋白结合的化合物；拮抗、抑制或阻碍生理配体与αvβ3整联蛋白和αvβ5整联蛋白两者结合的化合物；和拮抗、抑制或阻碍在毛细血管内皮细胞上表达的特定整联蛋白(们)活性的化合物。该术语还指αvβ6、αvβ8、α1β1、α2β1、α5β1、α6β1和α6β4整联蛋白的拮抗剂。该术语还指αvβ3、αvβ5、αvβ6、αvβ8、α1β1、α2β1、α5β1、α6β1和α6β4整联蛋白的任意组合的拮抗剂。

一些酪氨酸激酶抑制剂的具体实例包括N-(三氟甲基苯基)-5-甲基异噁唑-4-羧酰胺、3-[(2，4-二甲基吡咯-5-基)亚甲基)二氢吲哚-2-酮、17-(烯丙基氨基)-17-脱甲氧基格尔德霉素、4-(3-氯-4-氟苯基氨基)-7-甲氧基-6-[3-(4-吗啉基)丙氧基]喹唑啉、N-(3-乙炔基苯基)-6，7-二(2-甲氧基乙氧基)-4-喹唑啉胺、BIBX1382、2，3，9，10，11，12-六氢-10-(羟基甲基)-10-羟基-9-甲基-9，12-环氧-1H-二吲哚并[1，2，3-fg：3′，2′，1′-k1]吡咯并[3，4-i][1，6]苯并二氮芳辛-1-酮、SH268、染料木黄酮、STI571、CEP2563、4-(3-氯苯基氨基)-5，6-二甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶甲磺酸酯、4-(3-溴-4-羟基苯基)氨基-6，7-二甲氧基喹唑啉、4-(4′-羟基苯基)氨基-6，7-二甲氧基喹唑啉、SU6668、STI571A、N-4-氯苯基-4-(4-吡啶基甲基)-1-酞嗪胺和EMD121974。

与非抗癌化合物的化合物联合用药也包括在本发明的方法中。例如，本发明要求保护的化合物与PPAR-γ(即，PPAR-gamma)激动剂和PPAR-δ(即，PPAR-delta)激动剂的联合用药用于治疗某些恶性肿瘤。PPAR-γ和PPAR-δ是核过氧化物酶体增殖物激活的受体γ和δ。在文献中已经报导了PPAR-γ在内皮细胞的表达及其涉及血管生成(参见J.Cardiovasc.Pharmacol.1998；31：909-913；J.Biol.Chem.1999；274：9116-9121；Invest.Ophthalmol Vis.Sci.2000；41：2309-2317)。新近，已经证实PPAR-γ激动剂在体外抑制对VEGF的生成血管反应；曲格列酮和马来酸罗格列酮抑制小鼠的视网膜新血管形成的发展(Arch.Ophthamol.2001；119：709-717)。PPAR-γ激动剂和PPAR-γ/α激动剂的实例包括，但不局限于，噻唑烷二酮类(例如DRF2725、CS-011、曲格列酮、罗格列酮和匹格列酮)，非诺贝特，吉非贝齐，氯贝丁酯，GW2570，SB219994，AR-H039242，JTT-501，MCC-555，GW2331，GW409544，NN2344，KRP297，NP0110，DRF4158，NN622，GI262570，PNU182716，DRF552926，2-[(5，7-二丙基-3-三氟甲基-1，2-苯并异噁唑-6-基)氧基]-2-甲基丙酸(在USSN09/782,856中公开)和2(R)-7-(3-(2-氯-4-(4-氟苯氧基)苯氧基)丙氧基)-2-乙基色满-2-羧酸(在USSN60/235,708和60/244,697中公开)。

本发明的另一个实施方案是目前披露的化合物与基因疗法的组合在治疗癌症中的应用。就治疗癌症的基因策略综述而言，参见Hall等(AmJ Hum Genet61：785-789，1997)和Kufe等(Cancer Medicine，5th Ed，pp876-889，BC Decker，Hamilton2000)。基因疗法可以用于递送任意肿瘤抑制基因。这类基因的实例包括，但不限于：可以通过重组病毒-介导的基因转移递送的p53(参见，例如美国专利号6,069,134)；uPA/uPAR拮抗剂(″uPA/uPAR拮抗剂的腺病毒-介导的递送抑制小鼠中血管发生-依赖性肿瘤生长和传播″-Gene Therapy，August1998；5(8)：1105-13)；和干扰素γ(J.Immunol.2000；164：217-222)。

还可以将本发明的化合物与内在多药物抗性(MDR)，特别是与高水平转运蛋白表达相关的MDR的抑制剂联合给药。这类MDR抑制剂包括p-糖蛋白(P-gp)的抑制剂，例如LY335979、XR9576、OC144-093、R101922、VX853和PSC833(伐司朴达)。

可以将本发明的化合物与止吐药联用以便治疗恶心或呕吐，包括急性、延迟、晚期、和可能因单独或与放疗联用本发明的化合物产生的预想中的呕吐。为了预防或治疗呕吐，可以将本发明的化合物与其它止吐药联用，尤其是神经激肽-1受体拮抗剂；5HT3受体拮抗剂，例如昂丹司琼、格拉司琼、托烷司琼和扎托司琼；GABAB受体激动剂，例如巴氯芬；皮质类固醇，例如地卡特隆(***)、Kenalog、Aristocort、Nasalide、Preferid、Benecorten或其它药物，例如公开于美国专利号2,789,118、2,990,401、3,048,581、3,126,375、3,929,768、3,996,359、3,928,326和3,749,712中；抗多巴胺能药，例如吩噻嗪类(例如丙氯拉嗪、氟奋乃静、硫利达嗪和美索达嗪)、甲氧氯普胺或屈***酚。在一种实施方案中，将选自神经激肽-1受体拮抗剂、5HT3受体拮抗剂和皮质类固醇的止吐药作为佐剂给予以便治疗或预防可能在本发明化合物给药时产生的呕吐。

与本发明化合物联用的神经激肽-1受体拮抗剂充分地描述在如下文献中，例如在U.s.Pat.Nos.5,162,339，5,232,929，5,242,930，5,373,003，5,387,595，5,459,270，5,494,926，5,496,833，5,637,699，5,719,147；欧洲专利公开号EP0360390，0394989，0428434，0429366，0430771，0436334，0443132，0482539，0498069，0499313，0512901，0512902，0514273，0514274，0514275，0514276，0515681，0517589，0520555，0522808，0528495，0532456，0533280，0536817，0545478，0558156，0577394，0585913，0590152，0599538，0610793，0634402，0686629，0693489，0694535，0699655，0699674，0707006，0708101，0709375，0709376，0714891，0723959，0733632和0776893；PCT国际专利公开号WO90/05525，90/05729，91/09844，91/18899，92/01688，92/06079，92/12151，92/15585，92/17449，92/20661，92/20676，92/21677，92/22569，93/00330，93/00331，93/01159，93/01165，93/01169，93/01170，93/0609993/09116，93/10073，93/14084，93/14113，93/18023，93/19064，93/21155，93/21181，93/23380，93/24465，94/00440，94/01402，94/02461，94/02595，94/03429，94/03445，94/04494，94/04496，94/05625，94/07843，94/08997，94/10165，94/10167，94/10168，94/10170，94/11368，94/13639，94/13663，94/14767，94/15903，94/19320，94/19323，94/2050094/26735，94/26740，94/29309，95/02595，95/04040，95/04042，95/06645，95/07886，95/07908，95/08549，95/11880，95/14017，95/15311，95/16679，95/17382，95/18124，95/18129，95/19344，95/20575，95/21819，95/22525，95/23798，95/26338，95/28418，95/30674，95/30687，95/33744，96/05181，96/05193，96/05203，96/06094，96/07649，96/10562，96/16939，96/18643，96/20197，96/21661，96/29304，96/29317，96/29326，96/29328，96/31214，96/32385，96/37489，97/01553，97/01554，97/03066，97/08144，97/14671，97/17362，97/18206，97/19084，97/19942和97/21702；和美国专利公开号2266529，2268931，2269170，2269590，2271774，2292144，2293168，2293169，和2302689中。这些化合物的制备充分地描述在上述专利和出版物中，其在此引入本文作为参考。

在一种实施方案中，与本发明化合物联用的神经激肽-1受体拮抗剂选自：2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟苯基)-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-***并)甲基)吗啉，或其药学上可接受的盐，其描述在美国专利号5,719,147中。

还可以将本发明的化合物与用于治疗贫血的活性剂一起给药。这类贫血治疗剂例如是连续的红细胞生成受体激活剂(例如阿法依伯汀)。

还可以将本发明的化合物与用于治疗中性白细胞减少的活性剂一起给药。这类中性白细胞减少治疗剂例如是调节嗜中性白细胞产生和功能的造血生长因子，例如人粒细胞集落刺激因子(G-CSF)。G-CSF的实例包括非格司亭。

还可以将本发明的化合物与免疫-增强药物一起给药，例如左旋咪唑、异丙肌苷和日达仙。

本发明的化合物还可与双膦酸盐(应理解为包括双膦酸盐、二膦酸盐、双膦酸和二膦酸)联合用于治疗或预防癌症，包括骨癌。双膦酸盐的实例包括，但不局限于：依替膦酸盐(Didronel)、帕米膦酸盐(Aredia)、阿仑膦酸盐(Fosamax)、利塞膦酸盐(Actonel)、唑来膦酸盐(Zometa)、伊班膦酸盐(Boniva)、伊卡膦酸盐或cimadronate、氯膦酸盐、EB-1053、米诺膦酸盐、奈立膦酸盐、吡膦酸盐和替鲁膦酸盐，包括其任意和所有的药学上可接受的盐、衍生物、水合物及混合物。

本发明的化合物还可与芳香酶抑制剂联合用于治疗或预防乳腺癌。芳香酶抑制剂的实例包括，但不局限于：阿那曲唑、来曲唑和依西美坦。

本发明的化合物还可与siRNA疗法联合用于治疗或预防癌症。

因此，本发明的范围包括本发明要求保护的化合物与第二种化合物的联合应用，所述的第二种化合物选自：***受体调节剂、雄激素受体调节剂、类视色素受体调节剂、细胞毒性/细胞抑制剂、抗增殖药、异戊二烯基-蛋白质转移酶抑制剂、HMG-CoA还原酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、逆转录酶抑制剂、血管生成抑制剂、PPAR-γ激动剂、PPAR-δ激动剂；内在多药物抗性的抑制剂、止吐药、用于治疗贫血的活性剂、用于治疗中性白细胞减少的活性剂、免疫-增强药物、细胞增殖和存活信号抑制剂、细胞程序死亡诱导剂、双膦酸盐、芳香酶抑制剂、siRNA治疗和干扰细胞周期关卡的活性剂。

在涉及本发明化合物中的术语″给药″及其变化形式(例如，″给予″化合物)是指将化合物或化合物的前体药物加入到需要治疗的动物***。当将本发明的化合物或其前体药物与一种或多种其它活性剂(例如，细胞毒性剂等)联合提供时，将″给药″及其变化形式各自理解为包括化合物或其前体药物和其它活性剂的同时和依次加入。

在此所使用的术语″组合物″是指包括含有指定数量的特定成分的产品，以及任何直接或间接来自指定数量的特定成分的联合的产品。

在此所使用的术语″治疗有效量″是指在组织、***、动物或人体内引起研究人员、兽医、医务人员或其它临床医生寻找的生物或医学反应的活性化合物或药物活性剂的量。

术语“治疗癌症”或“癌症的治疗”是指对患有癌性病症的哺乳动物给药并且是指通过杀伤癌细胞缓解癌性病症的作用，还是指导致癌症生长和/或转移受到抑制的作用。

在一种实施方案中，用作第二种化合物的血管生成抑制剂选自酪氨酸激酶抑制剂、表皮-衍生的生长因子抑制剂、成纤维细胞-衍生的生长因子抑制剂、血小板源性生长因子抑制剂、MMP(基质金属蛋白酶)抑制剂、整联蛋白阻滞剂、干扰素-α、白细胞介素-12、多硫酸戊聚糖、环加氧酶抑制剂、羧基酰氨基***、考布他汀A-4、角鲨胺、6-O-氯乙酰基-羰基)-烟曲霉醇、沙利度胺、血管他丁、肌钙蛋白-1或针对VEGF的抗体。在一种实施方案中，所述的***受体调节剂是他莫昔芬或雷洛昔芬。

权利要求书的范围还包括治疗癌症的方法，包括给予治疗有效量的式I的化合物与放射治疗的联合和/或与选自如下的化合物的联合：***受体调节剂、雄激素受体调节剂、类视色素受体调节剂、细胞毒性/细胞抑制剂、抗增殖剂、异戊二烯基-蛋白转移酶抑制剂、HMG-CoA还原酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、逆转录酶抑制剂、血管生成抑制剂、PPAR-γ激动剂、PPAR-δ激动剂、内在多药物抗性的抑制剂、止吐药、用于治疗贫血的活性剂、用于治疗中性白细胞减少的活性剂、免疫-增强药物、细胞增殖和存活信号抑制剂、细胞程序死亡诱导剂、双膦酸盐、芳香酶抑制剂、siRNA治疗和干扰细胞周期关卡的活性剂。

本发明的还有另一种实施方案是治疗癌症的方法，其包括给予治疗有效量的式I的化合物与紫杉醇或曲妥单抗的组合。

本发明进一步包括治疗或预防癌症的方法，其包括给予治疗有效量的式I的化合物与COX-2抑制剂的组合。

本发明还包括可用于治疗或预防癌症的药物组合物，其包含治疗有效量的式I的化合物和选自如下的化合物：***受体调节剂、雄激素受体调节剂、类视色素受体调节剂、细胞毒性/细胞抑制剂、抗增殖药、异戊二烯基-蛋白质转移酶抑制剂、HMG-CoA还原酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、逆转录酶抑制剂、血管生成抑制剂、PPAR-γ激动剂、PPAR-δ激动剂；细胞增殖和和存活信号抑制剂、干扰细胞周期关卡的药剂、编程性细胞死亡诱导剂和双膦酸盐。

本发明的这些和其它方面从其中包含的教导中将会变得明显。

在化学过程和实施例的描述中使用下列缩写：9-BBN(9-硼杂双环[3.3.1]壬烷)；AcOH(乙酸)；DCE(二氯甲烷)；Dess-MartinPeriodinane(1，1，1-三(乙酰氧基(aceteloxy))-1.1-苯碘酰(benziodoxol)-3-(1H)-酮)；DIBAL-H(二异丁基氢化铝)；DIEA(二异丙基乙胺)；DME(乙二醇二甲醚)；DMF(二甲基甲酰胺)；DMSO(二甲亚砜)；DTT(二硫苏糖醇)；EDC(1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐)；EtOAc(乙酸乙酯)；FACS(荧光激活的细胞分选)；FITC(异硫氰酸荧光素)；HOBt(1-羟基苯并***)；IPTG(异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷)；LDA(二异丙基氨基化锂)；LHMDS(六甲基二硅氮烷(hexamethyldisilazide)锂盐)；mCPBA(m-氯过氧苯甲酸)；MS(质谱)；NaHMDS(双三甲基甲硅烷基氨基化钠)；NMR(核磁共振)；PMSF(苯甲基磺酰氟)；PyBop(六氟磷酸(1H-1，2，3-苯并***-1-基氧基)(三吡咯烷-1-基)鏻)；罗谢尔(氏)盐(酒石酸钠钾)；SiO2(硅胶))；TBAI(碘化四-正丁基铵)；TEA(三乙胺)；THF(四氢呋喃)；TFA(三氟乙酸)；TMSCN(三甲基甲硅烷基氰化物)；TsCl(p-甲苯磺酰氯)和Weinreb酰胺(N-甲基-N-甲氧基酰胺)。

试验

通过下述试验测试实施例中所述的本发明化合物并且发现它们具有驱动蛋白抑制活性。在文献中已知其它试验并且它们易于由本领域熟练技术人员实施(例如，参见，PCT出版物WO01/30768，2001年5月3日公开，第18-22页)。

I.驱动蛋白ATPase体外试验

人聚-组氨酸标记的KSP发动蛋白域(KSP(367H)的克隆和表达

通过PCR，使用pBluescript全长人KSP构建体(Blangy等，Cell，vol.83，pp1159-1169，1995)作为模板克隆用于表达人KSP发动蛋白域构建体的质粒。N-末端引物5′-GCAACGATTAATATGGCGTCGCAGCCAAATTCGTCTGCGAAG(SEQ.ID.NO.：1)和C-末端引物5′-GCAACGCTCGAGTCAGTGATGATGGTGGTGATGCTGATTCACTTCAGGCTTATTCAATAT(SEQ.ID.NO.：2)用来扩增发动蛋白域和颈连接区。用AseI和XhoI消化PCR产物，将其连入pRSETa(Invitrogen)的NdeI/XhoI消化产物并且转化入大肠杆菌BL21(DE3)。

使细胞在37℃下生长至OD₆₀₀为0.5。在将培养物冷却至室温后，用100μM IPTG诱导KSP表达并且将培养继续过夜。通过离心使细胞沉淀并且用冰冷的PBS洗涤一次。将沉淀物(pellets)快速冷冻并且贮存在-80℃下。

蛋白质纯化

使细胞沉淀物在冰上融化并且重新悬浮于裂解缓冲液(50mM K-HEPES，pH8.0，250mM KCl，0.1％Tween，10mM咪唑，0.5mM Mg-ATP，1mM PMSF，2mM benzimidine，1x完全蛋白酶抑制剂鸡尾酒混合物(Roche))。将细胞混悬液与1mg/ml溶菌酶和5mMβ-巯基乙醇一起在冰上孵育10分钟，随后进行超声处理(3x30秒)。在4℃下进行所有随后的操作步骤。将裂解物以40,000x g离心40分钟。稀释上清液并且上在缓冲液A(50mM K-HEPES，pH6.8，1mM MgCl₂，1mM EGTA，10μM Mg-ATP，1mM DTT)中的SP琼脂糖柱(Pharmacia，5ml柱)上，且用缓冲液A中的0-750mM KCl梯度洗脱。汇集含有KSP的级分并且与Ni-NTA树脂(Qiagen)一起温育1小时。用缓冲液B(除去PMSF和蛋白酶抑制剂鸡尾酒混合物的裂解缓冲液)将树脂洗涤三次，随后进行三次15分钟-温育并且用缓冲液B洗涤。最后，温育树脂并且用缓冲液C(与缓冲液B相同，但pH为6.0)洗涤三次各15分钟，并且倾入柱中。用洗脱缓冲液(与缓冲液B相同，所不同的是150mM KCI和250mM咪唑)洗脱KSP。汇集含有KSP的级分，在蒸糖中制成10％并且贮存在-80℃下。

由分离自牛脑的微管蛋白制备微管。在37℃下和在BRB80缓冲液(80mM K-PIPES，1mM EGTA，1mM MgCl₂，pH6.8下)中的10μM紫杉醇、1mM DTT、1mM GTP存在下聚合1mg/ml的纯化的微管蛋白(>97％不含MAP)。通过超离心并且除去上清液从未聚合的微管蛋白中分离所得微管。将含有微管的沉淀物温和地重新悬浮于在BRB80中的10μM紫杉醇、1mM DTT、50μg/ml氨苄西林和5μg/ml氯霉素中。

将驱动蛋白发动蛋白域与微管、1mM ATP(1∶1MgCl₂：Na-ATP)和化合物在23℃下和含有80mM K-HEPES(pH7.0)、1mM EGTA、1mMDTT、1mM MgCl₂和50mM KCl的缓冲液中一起温育。通过用80mMHEPES和50mM EDTA的最终缓冲液组合物稀释2-10倍终止反应。通过喹哪啶红/钼酸铵试验，通过添加含有2∶1比例的猝灭物A：猝灭物B的150μl猝灭物C缓冲液测定来自ATP水解反应的游离磷酸盐。猝灭物A含有0.1mg/ml喹哪啶红和0.14％聚乙烯醇；猝灭物B含有在1.15M硫酸中的12.3mM四水合钼酸铵。将该反应在23℃下温育10分钟，并且在540nm处测定磷酸-钼酸盐复合物的吸收度。

在上述试验中测试实施例中的化合物11-1并且发现它们具有的IC₅₀≤50μM。

II.细胞增殖试验

将细胞涂布在96-孔组织培养皿中，其密度允许细胞在24、48和72小时过程中成对数增长并且使其粘附过夜。在第二天，以10-点二分之一log滴度(in a10-point，one-half log titration)向所有平板加入化合物。每个滴度系列均按照一式三份进行，并且在整个试验过程中维持0.1％的恒定DMSO浓度。还包括单独的0.1％DMSO对照。在不含血清的培养基中制备每种化合物的稀释系列。本试验中的血清终浓度为在200μL培养基体积中5％。在添加药物后24、48或72小时时向滴定板上的每个样品和对照孔中加入20微升Alamar蓝染色试剂，并且使该体系返回至37℃下温育。在6-12小时后，在CytoFluorII平板读出器上使用530-560纳米的激发波长、590纳米的发射波长分析Alamar蓝荧光。

通过将x-轴上的化合物浓度与y-轴上的每一滴定点的细胞生长抑制平均百分比绘图来得到细胞毒性EC₅₀。将已经用载体单独处理的对照孔中的细胞生长定义为在本试验中100％的生长，并且将用化合物处理的细胞生长与该值进行比较。将专卖的内部软件(proprietary in-housesoftware)用于计算细胞毒性值的百分比并且使用对数4-参数曲线拟合计算拐点。将细胞毒性百分比定义为：

％细胞毒性：(荧光_对照)-(荧光_样品)x100x(荧光_对照)^-1

将拐点报导为细胞毒性EC₅₀。

III.通过FACS评价有丝***停滞和编程性细胞死亡

FACS分析用于通过测定处理的细胞群中的DNA含量评价化合物抑制有丝***中的细胞并且诱导编程性细胞死亡的能力。以1.4x10⁶个细胞/6cm²组织培养皿的密度接种细胞并且使其粘附过夜。然后细胞用载体(0.1％DMSO)或滴度系列(titration series)的化合物处理8-16小时。在处理后，通过在指定时间时进行胰蛋白酶消化收集细胞并且通过离心沉淀。在PBS中冲洗细胞沉淀物并且固定在70％乙醇中且贮存在4℃下过夜或更长时间。

为了进行FACS分析，沉淀至少500,000个固定的细胞并且通过抽吸除去70％乙醇。然后将细胞在4℃下与RNase A(50kunitz个单位/ml和碘化丙啶(50μg/ml)一起孵育30分钟并且使用Becton DickinsonFACSCaliber分析。使用Modfit细胞周期分析模拟软件(Verity Inc.)分析数据(来自10,000个细胞)。

通过x-轴上的化合物浓度和y-轴上每一滴度点的细胞周期的G2/M期中的细胞百分比(如通过碘化丙啶荧光测定的)绘图来获得有丝***停滞的EC₅₀。使用SigmaPlot程序进行数据分析以便使用对数4-参数曲线拟合计算拐点。拐点报导为有丝***停滞的EC₅₀。类似的方法用于测定编程性细胞死亡的化合物EC₅₀。此处，将在每一滴度点(如通过碘化丙啶荧光测定的)处的凋亡细胞百分比绘制在y-轴上并且如上所述进行类似的分析。

IV.检测单极纺锤体的免疫荧光显微技术

用于对DNA、微管蛋白和粒周蛋白进行兔疫荧光染色的方法基本上如kapoor等(2000)在J.Cell Biol.150：975-988中所述。为了进行细胞培养研究，将细胞涂布在组织培养物处理的玻璃室载玻片上并且使其粘附过夜。然后将细胞与所关注的化合物一起孵育4-16小时。在孵育完成后，抽吸培养基和药物并且从载玻片上除去室(chamber)和垫片。然后按照参考的方案透化细胞，固定，洗涤并且封闭以便进行非特异性抗体结合。用二甲苯将石蜡-包埋的肿痛切片去石蜡化并且通过乙醇系列进行再水化，此后进行封闭。在4℃下在初级抗体(小鼠单克隆抗-α-微管蛋白抗体，来自Sigma的按照1∶500稀释的克隆DM1A；来自Covance的按照1∶2000稀释的兔多克隆抗-粒周蛋白抗体)中将载玻片温育过夜。在洗涤后，在室温下将载玻片与稀释至15μg/ml的缀合的二级抗体(微管蛋白的FITC-缀合的驴抗-小鼠IgG；粒周蛋白的德克萨斯红-缀合的驴抗-家兔IgG)一起温育1小时。然后洗涤载玻片并且使用Hoechst33342复染色以便使DNA显影。在使用Metamorph去卷积和成像软件的Nikon落射荧光显微镜上用100x油浸物镜使免疫染色的样品成像。

具体实施方式

实施例

提供的实施例有助于进一步理解本发明。使用的具体物质、种类和条件用于解释本发明，但不是用来限定本发明的合理范围。

方案1

步骤1：4-烯丙基-4-苯基-1，3-噁唑烷-2-酮(1-4)

向15.8g(416mmol)LAH粉末在600mL***中的悬浮液中加入在75mL***中的18.3g(90mmol)α-烯丙基-α-苯基甘氨酸乙酯(1-3)(根据：Van Betsbrugge et.al.Tetrahedron，1997，53，9233-9240制备)，控制加入速度，以便保持温和的回流。在室温下搅拌过夜后，反应小心地用27mL水、接着27mL15％NaOH以及最后82mL水淬灭。加入一定量的Na₂SO₄，接着将混合物搅拌1h。然后，滤出固体，接着将溶液浓缩。将残余物溶于300mL CH₂Cl₂中，在Na₂SO₄中干燥，浓缩，得到无色油形式的氨基醇。将该氨基醇(4.5g，25mmol)溶于50mL CH₂Cl₂中，接着冷却至0℃。加入5.4mL(53mmol)三乙胺和4.5g(28mmol)1，1′-羰基二咪唑后，将混合物温热至室温并搅拌4h。然后，将反应倒到分液漏斗中，用1M HCl、水洗涤两次，在Na2SO4中干燥，浓缩，获得无色油形式的噁唑烷酮1-4。1-4数据：

¹HNMR(500MHz，CDCl₃)δ7.4-7.2(m，5H)，6.6(s，1H)，5.6-5.5(m，1H)，5.2(m，2H)，4.5(d，1H)，4.35(d，1H)，2.8(m，1H)，2.6(m，1H)ppm.

步骤2：二酯(1-5)

将68g(334.6mmol)的1-4在500mL CH₂Cl₂中的溶液冷却至-78℃，接着向溶液中鼓入臭氧，直到持续出现浅蓝色为止。然后，向该溶液中鼓入O₂ 15分钟，接着鼓入N₂ 30分钟。此时，加入491mL(6.7moles)的二甲硫醚，接着将溶液搅拌过夜，同时缓慢地达到室温。通过旋转蒸发除去挥发物，得到一种褐色油。将此物质悬浮在1L tBuOH中，接着加入200mL(1.9moles)的2-甲基-2-丁烯。然后，向此溶液中滴加160g(1.33moles)的NaH₂PO₄和70g(774mmol)的NaClO₂在800mL H₂O中的混合物。加毕后，将混合物再搅拌4h。分离层后，有机层通过旋转蒸发浓缩，将残余物溶于EtOAc中，接着与反应的水相一起放置于分液漏斗中。分层后，水相用EtOAc萃取3x，在Na₂SO₄中干燥，浓缩，得到～90g的黄色胶。将此残余物悬浮在500mL的MeOH中，向该溶液中鼓入HCl气体，直到它接近回流为止。然后，封上烧瓶并将其搅拌过夜，同时冷却至室温。通过旋转蒸发除去挥发物，将残余物装载到在CH₂Cl₂中的硅胶柱上，用EtOAc/己烷洗脱，得到浅橙色胶形式的甲酯。将此残余物溶于500mL THF中，冷却至0℃，接着加入32.6mL(220.5mmol)的溴乙酸叔丁基酯，然后加入10.6g的NaH(264.6mmol的60％悬浮液)。将混合物温热至室温并搅拌过夜后，将它用饱和NH₄Cl溶液淬灭，接着用EtOAc萃取两次。然后，合并的有机层用盐水洗涤，在Na₂SO₄中干燥，浓缩，残余物用硅胶色谱提纯，用EtOAc/己烷洗脱，得到稠浅黄色胶形式的1-5。1-5数据：

¹HNMR(500MHz，CDCl₃)δ7.4-7.3(m，5H)，4.65(d，1H)，4.55(d，1H)，3.9(d，1H)，3.65(s，3H)，3.5(d，1H)，3.35(d，1H)，3.2(d，1H)，1.4(s，9H)ppm.HRMS(ES)计算值M+Na for C₁₈H₂₃NO₆：372.1423.实测值：372.1412.

步骤3：7a-苯基二氢-1H-吡咯并[1，2-c][1，3]噁唑-3，6(5H)-二酮(1-6)

在-78℃下，向18.6g(53mmol)的1-5在150mL THF中的溶液中滴加58.6mL(58.6mmol)的在THF中的LiHMDS的1M溶液。在该温度下搅拌1h后，除去冷却浴，接着将反应温热至室温并搅拌过夜。将混合物用饱和NH₄Cl溶液淬灭，接着用EtOAc萃取两次，用盐水洗涤两次，在Na₂SO₄中干燥并浓缩。将残余物溶于60mL甲酸中，接着在100℃加热24h。在真空中除去挥发物，残余物用CH₂Cl₂/己烷/Et₂O研制，得到米黄色固体形式的1-6。1-6数据：

¹MR(500MHz，CDCl₃)δ7.5-7.3(m，5H)，4.7(d，1H)，4.3(d，1H)，4.2(d，1H)，3.5(d，1H)，3.1(d，1H)，2，95(d，1H)，2.9(d，1H)ppm.

步骤4：6-(2，5-二氟苯基)-7a-苯基-5，7a-二氢-1H-吡咯并[1，2-c][1，3]噁唑- 3-酮(1-7)

在-78℃下，向2.2g(10mmol)的1-7在150mL THF中的悬浮液中滴加12.2mL(12.2mmol)在THF中的NaHMDS的1M溶液。搅拌30min后，将溶液温热至0℃并在0℃保持1h。然后，将溶液再次冷却回至-78℃，加入4.35g(12.2mmol)N-苯基二(三氟-甲烷磺酰亚胺)在10mL THF中的溶液。除去冷却浴，将混合物温热至室温并搅拌过夜。将混合物用饱和NH₄Cl溶液淬灭，接着用EtOAc萃取两次，用盐水洗涤两次，在Na₂SO₄中干燥并浓缩。将残余物溶于75mL DME和18mL水中。向此混合物中加入1.29g(30mmol)LiCl、3.2g(30mmol)Na₂CO₃和4.8g(30mmol)2，5-二氟苯基硼酸。然后，溶液用N₂脱气1分钟，接着加入630mg(0.5mmol)四(三苯基膦)钯(0)。反应在90℃加热3h，冷却至室温，用饱和NaHCO₃稀释，接着用EtOAc萃取两次。合并的有机层用盐水洗涤，在Na₂SO₄中干燥，浓缩，残余物用硅胶色谱提纯，用CH₂Cl₂/己烷洗脱，得到白色固体形式的1-7。1-7数据：

¹HNMR(500MHz，CDCl₃)δ7.5-7.3(m，5H)，7.1-6.9(m，3H)，6.8(s，1H)，4.9(d，1H)，4.75(d，1H)，4.5(d，1H)，4.25(d，1H)ppm.HRMS(ES)计算值M+H forC₁₈H₁₃F₂NO₂：314.0987.实测值：314.0993.

步骤5：2-({[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}甲基)-4-(2，5-二氟苯基)-2- 苯基-2，5-二氢-1H-吡咯(1-8)

将1.75g(5.6mmol)1-7在15mL EtOH和10mL3M NaOH中的悬浮液在60℃加热3h，冷却至室温，接着与EtOAc和盐水一起倒到分液漏斗中。分离层，水相用EtOAc萃取两次，合并的有机相用盐水洗涤两次，在Na₂SO₄中干燥，浓缩，得到一种白色固体。向此烧瓶中加入30mLCH₂Cl₂、1.5g(22.3mmol)咪唑和1.76g(11.7mmol)TBSCl，接着将所得悬浮液搅拌过夜。反应用CH₂Cl₂稀释，用水洗涤两次，在Na₂SO₄中干燥，浓缩，残余物用硅胶色谱提纯，用EtOAc/己烷洗脱，得到白色固体形式的1-8。1-8数据：

¹HNMR(500MHz，CDCl₃)δ7.6-7.3(m，5H)，7.1-6.9(m，3H)，6.75(s，1H)，4.25(d，1H)，4.1(d，1H)，3.95(d，1H)，3.75(d，1H)，0.9(s，9H)，0.1(s，3H)，0.05(s，3H)ppm.

步骤6：中间体1-8的对映异构体拆分

对映异构体的拆分使用Chiralpak AD^_10x50cm柱，含1％异丙醇的己烷(含0.1％二乙胺)以150mL/min的流速色谱进行。洗脱液在4x250mm Chiralpak AD^_柱子上用含1％异丙醇的己烷(含0.1％二乙胺)以1mL/min进行分析性HPLC分析，表明第一种洗脱，活性对映异构体具有R_t＝5.5min，第二种对映异构体具有R_t＝6.9min。

步骤7：(2S)-2-({[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}甲基)-4-(2，5-二氟苯基)-2-苯基-2，5-二氢-1H-吡咯-1-碳酰氯1-9

在0℃下，向1.95g(6.6mmol)三光气在25mL THF中的溶液中加入1.31g(3.3mmol)1-8的第一种洗脱对映异构体和915μL(6.6mmol)三乙胺在10mL THF中的溶液。除去冰浴，将反应温热至室温并搅拌3h。然后，反应在水和EtOAc之间进行分配，有机溶液在Na₂SO₄中干燥，浓缩，得到褐色油形式的1-9。1-9数据：

HRMS(ES)计算值M+H for C₂₄H₂₈ClF₂NO₂Si：464.1619.实测值：464.1625.

方案1A

二酯1-5的另一种合成

向14.8g(73mmol)1-4和110mL CH₂Cl₂、110mL CH₃CN和320mL水的双相混合物中加入约200mg钌(III)氯化物水合物。然后，在快速搅拌下在1h内分批加入高碘酸钠(85.6g，400mmol)。加毕后，反应在室温下搅拌4h以上。混合物用500mL水和1.5L EtOAc稀释，接着过滤除去固体。将滤液放于分液漏斗中，分离相，水相用EtOAc萃取两次，合并的有机相用盐水洗涤两次，接着在Na₂SO₄中干燥。浓缩后，将暗褐色固体溶于250mL MeOH中，将HCl(g)以这样的速度缓慢通过该溶液，以便使溶液的温度升高不超过35℃。5min后，反应封闭，并在室温下搅拌过夜。然后，在旋转蒸发仪上除去挥发物，残余物用硅胶色谱提纯，用EtOAc/己烷洗脱，得到稠油形式的13.6g(58mmol)甲酯。然后，将此残余物溶于200mL THF中，冷却至0℃，接着加入10.3mL(70mmol)的溴乙酸叔丁基酯，然后加入2.8g的NaH(70mmol的60％悬浮液)。将混合物温热至室温并搅拌过夜后，将它用饱和NH₄Cl溶液淬灭，接着用EtOAc萃取两次。然后，合并的有机层用盐水洗涤，在Na₂SO₄中干燥，浓缩，残余物用硅胶色谱提纯，用EtOAc/己烷洗脱，得到无色油形式的1-5。

方案1B

步骤1：4-亚甲基-2-苯基脯氨酸甲酯(1B-2)

苯基甘氨酸甲酯-HCl(100g)的含水溶液(300mL)用10N NaOH中和至pH8。该含水溶液用EtOAc(3X200mL)萃取。将合并的有机萃取液在MgSO₄中干燥，过滤，浓缩。将残余物(56.7g，344mmol)溶于三甲基原甲酸酯(100mL)中，接着用苯甲醛(34.9mL，36.4g，344mmol)处理。搅拌2h后，反应用Et₂O(200mL)稀释并用水(3X50mL)洗涤。将有机溶液在MgSO₄中干燥，过滤，浓缩。将一部分亚胺残余物(26.8g，100mmol)溶于二氯甲烷(240mL)中，接着用160mL10N NaOH、甲代烯丙基二氯化物(50.0g，400mmol)和Bu₄NHSO₄(3.59g)处理。在RT下搅拌10h后，反应用二氯甲烷稀释，接着分离有机溶液，在MgSO₄中干燥，过滤，浓缩。将残余物再溶解在Et₂O/lN HCl(200mL/200mL)中并搅拌2h。分离水相，接着用10N NaOH中和(至pH8)。该含水混合物用EtOAc(3X200mL)萃取。将合并的有机溶液在MgSO₄中干燥，过滤，浓缩。将残余物溶于水中并中和(至pH8)。此混合物用EtOAc(X3)萃取，接着在MgSO₄中干燥，过滤，浓缩，得到粗1B-2。将此残余物通过快速色谱法(SiO₂；30％EtOAc/己烷)提纯，得到纯的1B-2。

1B-2数据：

¹HNMR(500MHz，CDCl₃)δ7.51(m，2H)，7.42(m，3H)，5.03(s，1H)，4.95(s，1H)，3.71(m，5H)，3.41(m，1H)，2.80(m，1H)ppm.

步骤2：7a-苯基二氢-1H-吡咯并[1，2-c][1，3]噁唑-3，6(5H)-二酮(1-6)

将LiAlH₄(7.14g，188mmol)在THF(500mL)中的悬浮液冷却至0℃，接着在20min内用酯1B-2(10.2g，47mmol)在THF(50mL)中的溶液处理。在0℃下搅拌30min后，反应通过加入水(7.1mL)、15％含水NaOH(7.1mL)和H₂O(21.3mL)小心地猝灭。加入固体Na₂SO₄，接着将混合物搅拌40min。将混合物过滤并浓缩。将残余物(8.2g，43.3mmol)溶于二氯甲烷(300mL)中，接着用三乙胺(9.0mL，6.5g，65.0mmol)和羰基二咪唑(9.14g，56.4mmol)处理。在RT下搅拌48h后，反应用二氯甲烷稀释并用1N HCl和盐水洗涤。将有机溶液浓缩，并且不再进行进一步提纯。将残余物1B-3(9.2g，42.8mmol)在二氯甲烷(200mL)中的溶液冷却至-78℃，接着将臭氧通过该溶液，直到持续出现蓝色为止。将溶液清洗并用二甲硫醚(35mL)处理。逐渐温热至rt过夜后，将溶液浓缩至一种黄色固体。将此固体用Et₂O研制，得到纯的1-6。1-6数据：

¹HNMR(500MHz，CDCl₃)δ7.5-7.3(m，5H)，4.7(d，1H)，4.3(d，1H)，4.2(d，1H)，3.5(d，1H)，3.1(d，1H)，2.95(d，1H)，2.9(d，1H)ppm.

方案1C

步骤1：(2R)-[(乙氧羰基)氨基](苯基)乙酸(1C-2)

在1h内，在保持内部温度低于10℃的情况下，向在0℃下的(R)-(-)-2-苯基甘氨酸(1C-1，4kg)在THF和5N NaOH(10.6L)中的混合物中加入氯甲酸乙酯。加毕后，将反应在0-10℃熟化15min，接着测试反应是否完成。反应用37％HCl淬灭(直到pH＝1为止，2.3L)，同时保持内部温度<25℃。加入甲苯(20L)，在搅动/沉降后，除去水层。有机层分析收率，接着将溶剂转化为甲苯。1C-2的淤浆直接用于下一反应中。(2R)-[(乙氧羰基)氨基]-(苯基)乙酸：mp154-156℃；¹H NMR(CDCl₃，400MHz)表明是～11∶1的旋转异构体的混合物：

δ＝12.12(bs，2H)，7.99(d，J＝5.3Hz，1H)，7.45-7.32(m，10H)，5.78(d，J＝6.2Hz，1H)，5.41(d，J＝7.1Hz，1H)，5.25(d，J＝5.7Hz，1H)，4.12(m，2H)，4.05(m，2H)，1.24(t，J＝6.9Hz，3H)，1.06(t，J＝7.0Hz，3H)；¹³C NMR(CDCl₃，100MHz)：δ＝175.1，173.6，157.3，155.8，137.4，136.1，129.0，128.7，128.6，128.2，127.2，127.1，62.1，61，5，58.3，57.7，14.4，14.1；MSm/z224([M+H]⁺，C₁₁H₁₄NO₄，计算值224.09).

步骤2：(2S，4R)-5-氧代-2，4-二苯基-1，3-噁唑烷-3-甲酸乙酯(1C-3)

在1-2h内，向在减压(350托)下的1C-2和PhSO₃H(42.7gm)在甲苯中的85℃溶液中加入苯甲醛二甲基缩醛(3L)在甲苯(5mL/g)中的溶液。通过反应过程蒸出甲苯/MeOH。反应结束时，将溶液冷却至室温并用THF(36L)稀释，直到均质为止。将有机溶液用10％NaHSO₃(7.5L)洗涤，接着用饱和NaHCO₃(9L)洗涤。然后，将溶剂转换为甲苯，并当结束时用甲苯稀释至7.5mL/g的总体积(对分析收率)。将淤浆加热至75℃并熟化直到均质为止。当缓慢冷却时，结晶析出1C-3。当淤浆到达40℃时，加入庚烷(2.5mL/g)。将该淤浆冷却至室温，过滤，收集固体。将该固体用1∶1甲苯/庚烷(5mL/g)洗涤，在氮气流中干燥至恒重。(2S，4R)-5-氧代-2，4-二苯基-1，3-噁唑烷-3-甲酸乙酯：mp197-199℃；

¹H NMR(CDCl₃，400Hz)δ＝7.46-7.37(m，10H)，6.77(bs，1H)，5.45(bs，1H)，3.96(m，2H)，3.86(m，2H)，0.84(t，J＝7.1Hz，3H)；¹³C NMR(CDCl₃，100MHz)：δ＝130.2，129.1，129.0，218.8，126.7，90.3，61.9，60.3，13.8；MSm/z312([M+H]⁺，C₁₈H₁₈NO₄，计算值312.12).

步骤3：(2S，4S)-4-烯丙基-5-氧代-2，4-二苯基-1，3-噁唑烷-3-甲酸乙酯(1C- 4)

在1h内，向1C-3和烯丙基-Br(1.67L)在THF(40L)中的-10℃溶液中加入双(三甲基甲硅烷基)氨基化钠在THF(7L)中的2M溶液，同时保持温度<5℃。5min后，试验反应是否已经完成。反应用1N HCl(22.5L)淬灭，接着用庚烷(20L)稀释。分离水层，有机层用饱和盐水(12L)洗涤。将溶剂转换为MeOH，共沸除去水，直到达到KF<900ppm为止。1C-4的溶液直接用于下一反应中。(2S，4S)-4-烯丙基-5-氧代-2，4-二苯基-1，3-噁唑烷-3-甲酸乙酯：

¹H NMR(CDCl₃，400Hz)δ＝7.60-7.52(m，2H)，7.39-7.33(m，8H)，6.55(m，1H)，5.84(m，1H)，5.38(m，2H)，4.16(m，2H)，3.72-3.12(m，2H)，1.17(t，J＝7.0Hz，3H)；¹³C NMR(CDCl₃，100MHz)：δ＝172.5，164.0，137.5，131.0，130.5，129.7，128.3，128.1，127.4，126.2，122.0，89.5，62.0，42.2，40.4，14.2；MS m/z352([M+H]⁺，C₂₁H₂₂NO₄，计算值352.15).

步骤4：(2S)-2-[(乙氧羰基)氨基]-2-苯基戊-4-烯酸甲酯(1C-5)

在0.25h内，向1C-4在MeOH(20L)中的23℃溶液中加入在MeOH(535mL)中的30％NaOMe，同时保持温度<30℃。4h后，试验反应是否已经完成。反应用5％NaHSO₃(40L)淬灭，接着用IPAc(20L)稀释。分离水层，有机层用10％KH₂PO₄(12L)洗涤。将溶剂转换为MeCN并直接用于下一反应中。(2S)-2-[(乙氧羰基)氨基]-2-苯基戊-4-烯酸甲酯：

¹H NMR(CDCl₃，400Hz)δ＝7.46-7.43(m，2H)，7.39-7.27(m，3H)，6.23(bs，1H)，5.76-5.66(m，1H)，5.20-5.14(m，2H)，4.10-4.00(m，2H)，3.68(s，3H)，3.53(bs，1H)，3.20(dd，J＝13.7，7.6Hz，1H)1.27-1.15(m，3H)；¹³C NMR(CDCl₃，100MHz)：δ＝172.6，154.3，139.8，132.3，128.4，127.8，125.9，119.4，65.0，60.6，53.1，37.8，14.4；MSm/z300([M+Na]⁺，C₁₅H₁₉NNaO₄，计算值300.12).

步骤5：4-[(乙氧羰基)氧基]-2-苯基-D-脯氨酸甲酯(1C-6)

向1C-5在MeCN(42L)中的23℃溶液中加入水(12L)，接着加入I2(8kg)。6h后，试验反应是否已经完成。反应用10％Na₂SO₃(35L)淬灭，用50wt％NaOH(4L)碱化并用IPAc(35L)萃取。分离水层并弃去，有机层用6N HCl(35L)萃取。弃去有机层。将水层冷却至-10℃，加入IPAc(35L)，接着缓慢地用22L10N NaOH中和。分离水层并弃去，接着存储1C-6的溶液。4-[(乙氧羰基)氧基]-2-苯基-D-脯氨酸甲酯：¹H NMR(CDCl₃，400Hz)表明非对映异构体的2∶1混合物：

δ＝7.55-7.47(m，5H)，7.34-7.22(m，5H)，5.18-5.11(m，2H)，4.22-4.11(m，4H)，3.68(s，6H)，3.33-3.24(m，4H)，3.10(d，J＝14.1Hz，2H)，3.05(b，2H)，2.34(dd J＝14.3，5.5Hz，1H)，2.22(dd J＝14.3，4.1Hz，1H)，1.31-1.23(m，6H)；¹³C NMR(CDCl₃，100MHz)：δ＝175.2，175.1，154.7，154.4，142.0，141.5，128.3，128.2，127.5，127.4，126.0，125.7，78.5，77.6，71.7，71.0，63.8，52.9，52.8，52.7，52.0，51.8，43.2，42.9，14.1，14.0；MS m/z294([M+H]⁺，C₁₅H₂₀NOx，计算值294.13).

步骤6：(5S)-5-(羟甲基)-5-苯基吡咯烷-3-醇(1C-7)

在-50℃下，向碳酸酯1C-6(5.0g，17.0mmol)在THF(50mL)中的溶液中加入在甲苯中的Red-Al 3.5M溶液(17.0mL，59.7mmol，3.5moleq.)。将反应混合物温热至室温并熟化2h。反应通过在0℃下2.0M罗谢尔盐溶液(45mL，约1.5moleq至Red-Al)猝灭，接着在5h内在室温下剧烈熟化。分离水相后，将混合有机溶液通过在减压下共沸蒸馏(约20托，60℃)转到n-BuOAc。加入200mL n-BuOAc后，在GC中检测THF、甲苯和甲氧基乙醇小于0.1％，KF表明为0.11％。MS m/z194([M+H]⁺，C11H15NO2，计算值193.11)。

步骤7：(7aS)-6-羟基-7a-苯基四氢-1H-吡咯并[1，2-c][1，3]噁唑-3-酮(1C-8)

向在步骤6中所述的n-BuOAc溶液中分批加入CDI(3.46g，21.3mmol，1.25moleq.)，接着在温度下熟化1h。将30mL2N HCl溶液加入到该反应混合物中并熟化1h。分离水相，接着加入6.0g NaCl，然后用30mL n-BuOAc萃取。向合并的有机层中加入150mg活性炭(DarcoKB)，接着将混合物熟化过夜。通过Solka-Floc垫过滤碳。数据：

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.47-7.28(m，7H)，4.65(d，J＝8.3Hz，1H)，4.64-4.59(m，0.4H)，4.57-4.51(m，1H)，4.51(d，J＝8.8Hz，0.4H)，4.33(d，J＝8.3Hz，1H)，4.28(dd，J＝13.1，6.7Hz，0.4H)，4.15(d，J＝8.8Hz，0.4H)，3.92(d，J＝12.7Hz，1H)，3.28(dd，J＝12.7，3.9Hz，1H)，3.18(dd，J＝13.1，2.7Hz，0.4H)，2.63(d，J＝13.6Hz，0.4H)，2.50(dd，J＝13.7，5.1Hz，1H)，2.40(brd，J＝13.7Hz，1H)，2.25(dd，J＝13.6，6.8Hz，0.4H).

步骤8：(7aS)-7a-苯基二氢-1H-吡咯并[1，2-c][1，3]噁唑-3，6(5H)-二酮(1C- 9)

将在n-BuOAc中的1C-8(粗，上面溶液的一部分1.40g试验，6.38mmol)在减压下浓缩，接着将14mL MeCN加入到该粗晶体中。在GC中的溶剂比为n-BuOAc：MeCN＝8∶92。在RT下，在30min内，向这种溶液中滴加AcOH(1.10mL，19.2mmol，3.0moleq.)、TPAP(33.6mg，0.095mmol，1.5mol％)和NaOCl(9.5mL，19.2mmol，3.0moleq.)的2.0M溶液。(在HPLC中观察到约5％的氯化产物)。30min后，反应混合物用12mL AcOEt稀释，接着分离水相。有机相用饱和Na₂S₂O₃水溶液和盐水洗涤。将有机溶剂转换为MTBE，接着过滤所得沉淀并用MTBE洗涤。获得的酮1C-9；78％(1.08g，4.97mmol，99.4面积％，97.0w/w％，0.5面积％的氯化产物)。

方案1D

(2S)-2-({[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}甲基)-4-(2，5-二氟苯基)-2-苯基- 2，5-二氢-1H-吡咯-1-碳酰氯1-9

在一个装备有悬吊搅拌器、热电偶和氮气/真空进口的烧瓶中装入S-TBS吡咯啉固体1-8(180gms)，接着加入IPAC(1.26L)。继续搅拌，直到该溶液变成均匀为止，大约30分钟。

在一个装备有悬吊搅拌器、热电偶和氮气/真空进口的单独烧瓶中加入IPAC(1.26L)，接着将该溶液冷却至-5℃。加入三光气(67gms)，然后缓慢加入卢剔啶(173ml)。然后，将所述的S-TBS吡咯啉的溶液缓慢地加入到此溶液中。反应通过HPLC监测，当在200nm通过HPLC监测得到胺转化为产物的转化率>99A％时，被认为反应已经完成。通过向反应混合物中加入1.8L10wt％的柠檬酸水溶液猝灭反应。分离层，有机层用水(240mL)洗涤两次。然后，将有机层浓缩至900ml(水含量为105ug/ml)并将其直接用于偶合反应中。HPLC分析表明99.96％转化为氨基甲酰(carbamyl)氯。

方案1E

2-({[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}甲基)-4-(2，5-二氟苯基)-2-苯基-2，5- 二氢-1H-吡咯(1-8)

步骤1：6-(2，5-二氟苯基)-7a-苯基-5，7a-二氢-1H-吡咯并[1，2-c][1，3]噁唑- 3-酮(1-7)

将在一个20L夹套反应器中的231g(1.06moles)1-6在11L THF中的悬浮液用悬吊搅拌器剧烈搅拌1h，然后冷却至-70℃。向此悬浮液中滴加1.28L(1.28moles)在THF中的NaHMDS的1M溶液。搅拌3h后，加入478.9g(1.28moles)固体N-苯基双(三氟甲烷磺酰亚胺)，接着再搅拌1.5h，然后通过加入2L饱和NH₄Cl水溶液猝灭。溶液到达室温后，加入2L水和2L EtOAc，分离层，水层用2L EtOAc萃取。合并的有机层用盐水洗涤，在Na₂SO₄中干燥，通过旋转蒸发浓缩。在一个带悬吊搅拌的20L夹套反应器中，将残余物溶于6L DME和1.2L水中，接着将溶液用N₂强气流脱气1h。然后，向反应器中加入201.6g(1.28moles)2，5-二氟苯基硼酸、134g(3.19moles)LiCl、338g(3.19moles)Na₂CO₃和24.6g(21mmol)四(三苯膦)钯(O)，接着将反应在90℃加热2h。一段时间后，蒸出约4.5L DME，将剩余的溶液冷却至室温，接着倾倒到6L水和8L CH₂Cl₂之中。分离层，水层用2L CH₂Cl₂萃取，合并有机层，用4L水洗涤，在Na₂SO₄中干燥，通过旋转蒸发浓缩，得到暗红色固体物质。将此残余物用500mL CHCl₃洗涤，接着过滤，得到一种褐色固体。将滤液浓缩至～300mL，收集第二茬固体，与第一茬合并，然后将合并后的物质用500mL EtOAc洗涤过夜。将此悬浮液过滤，得到一种灰白色固体，将滤液浓缩至～250mL并收集第二茬物质，与第一茬合并，然后将合并后的物质(～205g)用1.6L EtOAc重结晶，得到白色固体形式的1-7。1-7数据：

¹HNMR(500MHz，CDCl₃)δ7.5-7.3(m，5H)，7.1-6.9(m，3H)，6.8(s，1H)，4.9(d，1H)，4.75(d，1H)，4.5(d，1H)，4.25(d，1H)ppm.HRMS(ES)计算值M+H for C₁₈H₁₃F₂NO₂：314.0987.实测值：314.0993.

步骤2：2-({[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}甲基)-4-(2，5-二氟苯基)-2- 苯基-2，5-二氢-1H-吡咯(1-8)

在10L圆底烧瓶中，将109.4g(349mmol)1-7在2.2L EtOH和105mL(1.05moles)10M NaOH中的悬浮液在60℃加热4h，冷却至室温，接着熟化过夜。向此混合物中加入90.2mL(1.08moles)浓HCl，接着通过旋转蒸发除去溶剂。将残余物悬浮在2L乙腈中，再次通过旋转蒸发至干。将所述的固体悬浮在3.8L CH₂Cl₂和200mL DMF中，加入118.7g(1.75moles)咪唑，接着加入110.5(733mmol)的TBSCl。在温和的N₂气流中搅拌15h后，将反应倾倒到4L水和2L CH₂Cl₂中，分离层，水层用2L CH₂Cl₂萃取。然后，合并的有机萃取液用4x4L水洗涤，在Na₂SO₄中干燥，通过旋转蒸发浓缩。将残余物溶于500mL MeOH和在MeOH中的500mL2M MeNH₂中，搅拌4h，然后通过旋转蒸发浓缩。将残余物置于高真空中，直到获得恒重为止，接着用研钵和杵将物质粉碎，得到米黄色固体形式的1-8。1-8数据：

方案2

步骤1：3-氟-4-氧代哌啶-1-甲酸苄基酯(2-2)

向10.0g(43mmol)苄基-4-氧代-1-哌啶甲酸酯在25mL DMF中的溶液中加入14.3mL(103mmol)三乙胺，然后加入6.53mL(52mmol)TMSCl。将反应在80℃加热过夜，冷却至室温，然后倾倒到分液漏斗中的己烷中。将混合物用饱和NaHCO₃水溶液分配，分离，用盐水洗涤，在MgSO₄中干燥，通过旋转蒸发浓缩。将残余物溶于500mLCH₃CN中，接着用16.7g(47mmol)Selectfluor处理。90min后，将反应浓缩至约一半原始体积，在EtOAc和盐水之间进行分配，分离，在MgSO₄中干燥，过滤，接着通过旋转蒸发浓缩。将残余物装载到硅胶柱上并用EtOAc/己烷洗脱，得到无色油形式的2-2。

步骤2：3-氟-4-(甲基氨基)哌啶-1-甲酸苄基酯(2-2a)

向9.4g(37.5mmol)2-2在150mL1，2-二氯乙烷中的溶液中加入37.5mL(74.9mmol)甲胺在THF中的2M溶液和11.9g(56.2mmol)Na(OAc)₃BH。搅拌2h后，反应用饱和K₂CO₃水溶液淬灭，用EtOAc分配，分离，水相用3x EtOAc萃取。将合并的有机萃取液用盐水洗涤，在MgSO₄中干燥，过滤，通过旋转蒸发浓缩。将残余物装载到硅胶柱上并用80∶10∶10CHCl₃/EtOAc/MeOH洗脱，得到无色油形式的2-2a的两种顺式和反式异构体。2-2a的反式异构体的数据，首先洗脱(通过NOE分析证实)：

¹HNMR(600MHz，CD₂Cl₂)δ7.4-7.3(m，5H)，5.1(m，2H)，4.4-4.1(m，2H)，3.9(m，1H)，3.15-3.05(m，2H)，2.75(m，1H)，2.4(s，3H)，2.0(m，1H)，1.25(m，1H)ppm.2-2a的顺式异构体的数据，其次洗脱(通过N0E分析证实)： ¹HNMR(600MHz，CD₂Cl₂)δ7.4-7.2(m，5H)，5.1(m，2H)，4.9-4.7(m1H)，4.4(m，1H)，4.15(m，1H)，3.1-2.9(m，2H)，2.6(m，1H)，2.4(s，3H)，1.8(m，1H)，1.6(m，1H)ppm.HRMS(ES)计算值M+H for C₁₄H₁₉F₁N₂O₂：267.1504.实测值：267.1500.

步骤3：(3R，4S)-4-[(叔丁氧羰基)(甲基)氨基]-3-氟哌啶-1-甲酸苄基酯(2- 3)

向7.67g(28.8mmol)顺-2-2a在150mL CH₂Cl₂中的溶液中加入12.1mL(86.5mmol)三乙胺和9.44g(43.3mmol)二碳酸二叔丁酯。搅拌1h后，反应在CH₂Cl₂和H₂O之间进行分配，有机相用盐水洗涤，在MgSO₄中干燥，过滤并通过旋转蒸发浓缩。将残余物装载到硅胶柱上并用EtOAc/己烷洗脱，得到白色固体形式的外消旋顺式-2-3。对映异构体的拆分使用Chiralpak AD_10x50cm柱，含20％异丙醇的己烷(含0.1％二乙胺)以150mL/min的流速色谱进行。洗脱液在4x250mm Chiralpak AD^_柱上用含20％异丙醇的己烷(含0.1％二乙胺)以1mL/min进行分析性HPLC分析，表明第一种洗脱的对映异构体(2-3的对映异构体)具有R_t＝5.90min，和第二种对映异构体(2-3)具有R_t＝6.74min。2-3的数据：HRMS(ES)计算值M+Na for C₁₉H₂₇F₁N₂O₄：389.1847.实测值：389.1852.

步骤4：[(3R，4S)-3-氟-1-甲基哌啶-4-基]甲基氨基甲酸叔丁酯(2-4)

向4.6g(12.6mmol)第二洗脱对映异构体2-3在150mL EtOH中的溶液中加入29.7mL(314mmol)1，4-环已二烯和催化量的10％Pd/碳。搅拌过夜后，反应通过硅藻土过滤，接着通过旋转蒸发浓缩。将残余物溶于75mL MeOH中，加入2mL AcOH和3.1mL(38mmol)的37％含水甲醛，接着将混合物搅拌1h。此时，加入在10mL MeOH中的1.58g(25.1mmol)的NaCNBH₃，接着将反应熟化2h以上，然后倾倒到饱和NaHCO₃水溶液中。用3x CH₂Cl₂萃取后，有机相用水洗涤，在MgSO₄中干燥，过滤，通过旋转蒸发浓缩，得到无色油形式的2-4。2-4的数据：HRMS(ES)计算值M+HforC₁₂H₂₃FN₂O₂：247.1817.实测值：247.1810.

步骤5：(3R，4S)-3-氟-N，1-二甲基哌啶-4-胺(2-5)

向3.0g(12.2mmol)2-4在100ml EtOAc中的溶液中鼓入HCl气体，直到溶液温热至可触摸为止。然后，盖上烧瓶并搅拌4h。通过旋转蒸发除去挥发物，残余物用Et₂O研制，接着放置于高真空中，得到一种白色固体。将此物质与25mL15％Na₂CO₃水溶液混合，接着用5x50mL2∶1CHCl₃/EtOH萃取。有机液在非常温和加热下通过旋转蒸发浓缩，将残余物溶于200mL CHCl₃中，在Na₂SO₄中干燥，浓缩，得到无色油形式的2-5。2-5的数据：

¹HNMR(500MHz，CDCl₃)δ4.8(m，1H)，3.15(m，1H)，2.85(m，1H)，2.5(s，3H)，2.45(m，1H)，2.3(s，3H)，2.2-2.0(m，2H)，1.9-1.7(m，2H)ppm.HRMS(ES)计算值M+H for C₇H₁₅FN₂：147.1292.实测值：147.1300.

方案2A

步骤1：3-氟-4-氧代哌啶-1-甲酸苄基酯(2-2)

在带有机械搅拌器的22-L圆底烧瓶中装入Cbz-酮2-1(2.5kg，10.7mol)、5.0L二甲基乙酰胺、三乙胺(3.0L，21.5mol)。加入三甲基甲硅烷基氯(2.0L，15.7mol)。将混合物加热到60℃并熟化4小时。冷却至10℃后，将混合物猝灭到10L5％的碳酸氢钠和10L正庚烷中，同时保持内部温度低于20℃。有机层用10L2.5％碳酸氢钠洗涤两次。将最终的有机层用硫酸钠干燥，过滤，在减压下浓缩，然后将溶剂转化为10LMeCN。

在一个50-L夹套式容器中装入7.5L MeCN和Selectfluor(4.1kg，11.5mol)。将所述的淤浆冷却至10℃，接着加入碳酸钾(0.37kg，2.68mol)。在MeCN中的甲硅烷基醚溶液分批转移，保持内部温度在10-15℃。最终的淤浆在10-15℃熟化2小时。将反应猝灭到含有20L2N盐酸和30L乙酸乙酯的100L萃取器中。有机层用20L2N盐酸、10L20wt％氯化钠洗涤，在硫酸钠中干燥，接着过滤。滤液浓缩，用干燥EtOAc在减压下冲洗至KF＝16000μg/mL，然后在减压下将溶剂转换为～10LTHF。

步骤2：3-氟-4-(甲基氨基)哌啶-1-甲酸苄基酯(2-2a)

在一个圆底烧瓶中，将Cbz氟酮(10.3mol)溶于四氢呋喃(30L)中。加入在四氢呋喃中的2M甲胺(2.00当量；20.6moles；10.3L)，接着将混合物在室温下搅拌30min。将混合物冷却至0℃，加入乙酸(20.6moles；1.17L；1.236kg)，接着在0℃下再搅拌30分钟。在15分钟内，向该溶液中分批加入乙酰氧基硼氢化钠(12.36moles；2.62kg)，接着将反应混合物在0℃下熟化，直到HPLC分析判断反应完成为止。

将反应混合物缓慢地转移到含有在水中的12M盐酸(30.9moles，2.575L)、水(30L)和甲苯(140mol，15L)的100L圆柱形萃取器中。剧烈搅拌15分钟后，分离层，甲苯层进一步用水(10L)洗涤。将合并的水层转移回萃取器中。加入在水中的10M氢氧化钠(82.4moles，8.24L)，接着将混合物用IPAC(30L)萃取一次。

有机层用硫酸钠(3kg)干燥，接着浓缩。将残余物溶于8∶2(vol∶vol)乙醇∶水(23kg乙醇与7.2kg水混合)中，将85％磷酸(9.83mol，952g，667mL)加入到溶液中，接着加入晶种。将混合物在室温下搅拌过夜。沉淀出结晶固体，接着过滤收集。固体用8∶2乙醇∶水洗涤，在真空箱中干燥，得到2.1kg固体。

将固体悬浮在36L EtOH和4L水的混合物中，接着将混合物加热至70℃-80℃，直到全部固体溶解为止。除去热源，透明溶液用顺式异构体混合物2-2a接种。在室温下搅拌过夜后，沉淀出结晶固体，接着过滤收集。固体产品在真空箱中干燥，得到白色固体。

步骤3：(3R，4S)-4-[(叔丁氧羰基)(甲基)氨基]-3-氟哌啶-1-甲酸苄基酯2-3

在50L萃取器中加入20L水和1.06kg Na₂CO₃，接着将混合物搅拌，直到全部的固体溶解为止。加入IPAC(20L)和CBZ胺羧酸酯(1.85kg，5.3mol)。混合后，分离层。水层再用5L IPAC萃取。将合并的有机层用硫酸钠干燥。滤出干燥剂后，将所述的批料加入到72L圆底烧瓶中，接着加入Boc₂O溶液(1.0M，4.8L)。45min后，HPLC分析表明转化率为98％。加入额外的Boc₂O溶液(50mL)。所述的批料再熟化15小时后，将其在真空中浓缩至最小体积，用MeOH(10L-15L)冲洗。所述的批料用甲醇稀释至总重量约为14.3kg。HPLC分析表明得到约1.9kg的所需产物。

所述的氟哌啶通过在20微米Chiralpak AD(Diacel ChemicalIndustries，Ltd.)手性固定相柱(30ID x25cm)上色谱分离解析分。每次注射用量54g的外消旋体用甲醇洗脱。收集最小停留时间对映异构体，得到45g(85％回收率)所需的(3R，4S)对映异构体，98％ee。重复此分离过程，合并从不同的注射中所需的级分，接着浓缩。

方案10

步骤1：(3R，4S)-4-[{[(2S)-2-({[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}甲基)-4- (2，5-二氟苯基)-2-苯基-2，5-二氢-1H-吡咯-1-基]羰基}(甲基)氨基]-3-氟哌啶-1-甲酸苄基酯(10-1)：

在0℃下，向885mg(2.4mmol)2-3(从色谱洗脱出的第一个异构体)在12mL EtOAc中的溶液中加入12mL(48mmol)HCl在二噁烷中的4M溶液。除去冰浴，继续搅拌2h，然后通过旋转蒸发除去挥发物。残余物在EtOAc和含5mL1M NaOH的饱和NaHCO₃水溶液之间进行分配，分离，接着水相用2x EtOAc萃取。合并的有机萃取液再次用NaHCO₃、盐水洗涤，用Na₂SO₄干燥，浓缩，得到590mg(2.2mmol)的胺。向在5mLTHF中的215mg(0.81mmol)此物质中加入340mg(0.73mmol)的1-9、306μL(2.2mmol)三乙胺和催化量的DMAP。搅拌过夜后，反应通过LC/MS判断仅完成了～40％，因此加入额外部分的DMAP并继续搅拌过夜。然后，反应在EtOAc和饱和NaHCO₃水溶液之间进行分配，有机相用NaHCO₃、H₂O、盐水洗涤，用Na₂SO₄干燥，浓缩。残余物用硅胶色谱提纯，用EtOAc/己烷洗脱，得到无色油形式的10-1。10-1的数据：

LRMS(ES)计算值M+H for C₃₈H₄₆F₃N₃O₄Si：694.4.实测值：694.3.

步骤2：(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-[(3R，4S)-3-氟哌啶-4-基]-2-(羟甲基)-N- 甲基-2-苯基-2，5-二氢-1H-吡咯-1-甲酰胺(10-2)：

向405mg(0.58mmol)10-1在4mL EtOH中的溶液中加入1.38mL(14.6mmol)1，4-环已二烯、100mg10％钯/碳，然后搅拌过夜。反应通过硅藻土过滤，浓缩，接着将残余物溶于3mL CH₂Cl₂中。向此溶液中加入3mL三氟乙酸，保持搅拌1h，然后将混合物在EtOAc和饱和NaHCO₃水溶液加25mL5％Na₂CO₃水溶液之间进行分配，有机相再次用NaHCO₃、H₂O、盐水洗涤，用Na₂SO₄干燥，接着通过旋转蒸发浓缩。将残余物装载到硅胶柱上并用EtOAc-20∶1∶1EtOH/NH₄OH/H₂O洗脱，得到白色固体形式的10-2。存在～5％的杂质，该杂质随后通过反相色谱除去，用95∶5-5∶95 H₂O/CH₃CN(两者均含有0.1％TFA)洗脱。级分用NaHCO₃碱化，得到白色固体形式的纯的B-2。10-2的数据：

¹HNMR(500MHz，CDCl₃)δ7.4-7.2(m，5H)，7.1-6.9(m，3H)，6.3(s，1H)，5.2(bs，1H)，4.9(m，1H)，4.8-4.6(m，2H)，4.45(m，1H)，4.2-4.1(m，1H)，4.0(m，1H)，3.3-3.2(m，2H)，3.1(s，3H)，2.85-2.7(m，2H)，2.1(m，1H)，1.7(m，2H)ppm.HRMS(ES)计算值M+Hfor C₂₄H₂₆F₃N₃O₂：446.2050.实测值：446.2059.

方案11

步骤1：(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-{(3R，4S)-3-氟-1-[3-(三甲基甲硅烷基)丙基]哌啶-4-基}-2-(羟甲基)-N-甲基-2-苯基-2，5-二氢-1H-吡咯-1-甲酰胺(11- 1)：

向50mg(0.112mmol)10-2在1mL甲苯中的溶液中加入17mg(0.112mmol)3-氯丙基三甲基硅烷和3.4mg(0.022mmol)碘化钠。将反应混合物在密封管中在80℃加热24h，然后冷却至室温。将额外的51mg(0.336mmol)3-氯丙基三甲基硅烷和10mg(0.06mmol)碘化钠加入反应混合物中，其在60℃下加热72小时。将反应冷却至室温，倾倒到含有EtOAc的分液漏斗中，依次用饱和NaHCO₃水溶液、水、盐水洗涤，用MgSO₄干燥并浓缩。残余物用硅胶色谱提纯，用EtOAc/己烷洗脱，得到白色固体形式的11-1。11-1的数据：

¹HNMR(500MHz，CDCl₃)δ7.3(s，3H)，7.2(s，2H)，7.0(m，1H)，6.9(m，2H)，6.2(s，1H)，5.2(m，1H)，4.85-4.55(m，3H)，4.35(m，1H)，4.05-3.9(m，2H)，3.15(m，1H)，3.05-3.0(m，4H)，2.4-2.05(m，5H)，1.7-1.4(m，3H)，0.4(m，2H)，-0.1(s，9H)ppm.HRMS(ES)计算值M+H forC₃₀H₄₀F₃N₃O₂Si：560.2915.实测值：560.2890.

序列表

<110>Merck&Co.，Inc.

Coleman，Paul J.

Cox，Christopher D.

Hartman，George D.

<120>有丝***驱动蛋白抑制剂

<130>21835

<160>2

<170>FastSEQ for Windows Version4.0

<210>1

<211>42

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>完全合成核苷酸序列

<400>1

gcaacgatta atatggcgtc gcagccaaat tcgtctgcga ag42

<210>2

<211>60

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>完全合成核苷酸序列

<400>2

gcaacgctcg agtcagtgat gatggtggtg atgctgattc acttcaggct tattcaatat 60

Claims

1.式I的化合物或其药学上可接受的盐或立体异构体：

其中

a是0或1；

b是0或1；

m是0、1或2；

n是0或1；

p是0、1、2或3；

q是0、1或2；

R¹选自：

1)(C₁-C₆亚烷基)_n(C＝X)O_bC₁-C₁₀烷基，

2)(C₁-C₆亚烷基)_n(C＝X)O_b芳基，

3)(C₁-C₆亚烷基)_n(C＝X)O_bC₂-C₁₀链烯基，

4)(C₁-C₆亚烷基)_n(C＝X)O_bC₂-C₁₀炔基，

5)(C₁-C₆亚烷基)_n(C＝X)O_bC₃-C₈环烷基，

6)(C₁-C₆亚烷基)_n(C＝X)O_b杂环基，

7)(C₁-C₆亚烷基)_n(C＝X)O_bC₁-C₁₀全氟烷基，

8)(C₁-C₆亚烷基)_n(C＝X)NR^cR^c′，

9)(C₁-C₆亚烷基)_nSO₂NR^cR^c′，

10)(C₁-C₆亚烷基)_nSO₂C₁-C₁₀烷基，

11)(C₁-C₆亚烷基)_nSO₂C₂-C₁₀链烯基，

12)(C₁-C₆亚烷基)_nSO₂C₂-C₁₀炔基，

13)(C₁-C₆亚烷基)_nSO₂-芳基，

14)(C₁-C₆亚烷基)_nSO₂-杂环基，

15)(C₁-C₆亚烷基)_nSO₂-C₃-C₈环烷基，

16)芳基；

17)杂环基；和

18)C₁-C₁₀烷基；

R²独立地选自：

1)(C＝O)_aO_bC₁-C₁₀烷基，

2)(C＝O)_aO_b芳基，

3)CO₂H，

4)卤素，

5)CN，

6)OH，

7)O_bC₁-C₆全氟烷基，

8)O_a(C＝O)_bNR⁹R¹⁰，

9)S(O)_mR^a，

10)S(O)₂NR⁹R¹⁰，和

11)Si(R^c)₃；

R³选自：

1)H，

2)C₁-C₁₀烷基，

3)芳基，

4)C₂-C₁₀链烯基，

5)C₂-C₁₀炔基，

6)C₁-C₆全氟烷基，

7)C₁-C₆芳烷基，

8)C₃-C₈环烷基，和

9)杂环基，和

10)Si(R^c)₃；

R⁵选自：

1)H，

2)C₁-C₁₀烷基，

3)芳基，

4)C₂-C₁₀链烯基，

5)C₂-C₁₀炔基，

6)C₁-C₆全氟烷基，

7)C₁-C₆芳烷基，

8)C₃-C₈环烷基，

9)杂环基，和

10)Si(R^c)₃；

R⁶选自：

1)氢；

2)(C＝O)_aO_bC₁-C₁₀烷基，

3)(C＝O)_aO_b芳基，

4)CO₂H，

5)卤素，

6)CN，

7)OH，

8)O_bC₁-C₆全氟烷基，

9)O_a(C＝O)_bNR⁹R₁₀，

10)S(O)_mR^a，

11)S(O)₂NR⁹R¹⁰，和

12)Si(R^a)₃；

R⁷是：

1)(C＝O)_aObC₁-C₁₀烷基，

2)(C＝O)_aO_b芳基，

3)C₂-C₁₀链烯基，

4)C₂-C₁₀炔基，

5)(C＝O)_aO_b杂环基，

6)CO₂H，

7)卤素，

8)CN，

9)OH，

10)O_bC₁-C₆全氟烷基，

11)O_a(C＝O)_bNR⁹R¹⁰，

12)S(O)_mR^a，

13)S(O)₂NR⁹R¹⁰，

14)氧代，

15)CHO，

16)(N＝O)R⁹R¹⁰，

17)(C＝O)_aO_bC₃-C₈环烷基，或

18)Si(R^c)₃；

R⁸选自：

1)(C＝O)_rOs(C₁-C₁₀)烷基，其中r和s独立地是0或1，

2)O_r(C₁-C₃)全氟烷基，其中r是0或1，

3)(C₀-C₆)亚烷基-S(O)_mR^a，其中m是0、1或2，

4)氧代，

5)OH，

6)卤素，

7)CN，

8)(C＝O)_rO_s(C₂-C₁₀)链烯基，

9)(C＝O)_rO_s(C₂-C₁₀)炔基，

10)(C＝O)_rO_s(C₃-C₆)环烷基，

11)(C＝O)_rO_s(C₀-C₆)亚烷基-芳基，

12)(C＝O)_rO_s(C₀-C₆)亚烷基-杂环基，

13)(C＝O)_rO_s(C₀-C₆)亚烷基-NR⁹R¹⁰，

14)C(O)R^a，

15)(C₀-C₆)亚烷基-CO₂R^a，

16)C(O)H，

17)(C₀-C₆)亚烷基-CO₂H，

18)C(O)N(R^b)₂，

19)S(O)_mR^a，

20)S(O)₂NR⁹R¹⁰，

21)C(NH)NH₂；和

22)Si(R^c)₃；

R⁹和R¹⁰独立地选自：

1)H，

2)(C＝O)O_bC₁-C₁₀烷基，

3)(C＝O)O_bC₃-C₈环烷基，

4)(C＝O)O_b芳基，

5)(C＝O)O_b杂环基，

6)C₁-C₁₀烷基，

7)芳基，

8)C₂-C₁₀链烯基，

9)C₂-C₁₀炔基，

10)杂环基，

11)C₃-C₈环烷基，

12)SO₂R^a，和

13)(C＝O)NR^b ₂，

R^a是(C₁-C₆)烷基、(C₃-C₆)环烷基、芳基或杂环基；

R^b是H、(C₁-C₆)烷基、芳基、杂环基、(C₃-C₆)环烷基、(C＝O)OC₁-C₆烷基、(C＝O)C₁-C₆烷基或S(O)₂R^a；所述的烷基、环烷基、芳基、杂环基、链烯基和炔基是任选被一个或多个选自R⁷的取代基取代，

R^c是(C₁-C₆)烷基、(C₃-C₆)环烷基、芳基、杂环基、OH或OR^a；所述的烷基、环烷基、芳基、杂环基、链烯基和炔基是任选被一个或多个选自R⁷的取代基取代，

X选自O、NR^e和S；和

W选自：一条键、C＝O、C＝S和CH(OH)；

条件是至少一个硅原子存在于该化合物中，并且进一步的条件是-W-R⁵不是-(C₁-C₆)烷基-O-Si[(C₁-C₆)烷基]₃。

2.权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐或立体异构体，所述化合物具有式II结构，

其中

a是0或1；

b是0或1；

m是0、1或2；

n是0或1；

p是0、1、2或3；

q是0或1；

R²独立地选自：

1)(C＝O)_aO_bC₁-C₁₀烷基，

2)(C＝O)_aO_b芳基，

3)CO₂H，

4)卤素，

5)CN，

6)OH，

7)O_bC₁-C₆全氟烷基，

8)O_a(C＝O)_bNR⁹R¹⁰，

9)S(O)_mR^a，

10)S(O)₂NR⁹R¹⁰，和

11)Si(R^c)₃；

R⁵选自：

1)H，

2)C₁-C₁₀烷基，

3)芳基，

4)C₂-C₁₀链烯基，

5)C₂-C₁₀炔基，

6)C₁-C₆全氟烷基，

7)C₁-C₆芳烷基，

8)C₃-C₈环烷基，

9)杂环基，和

10)Si(R^c)₃；

R⁶选自：

1)氢；

2)(C＝O)_aO_bC₁-C₁₀烷基，

3)(C＝O)_aO_b芳基，

4)CO₂H，

5)卤素，

6)CN，

7)OH，

8)O_bC₁-C₆全氟烷基，

9)O_a(C＝O)_bNR⁸R⁹，

10)S(O)_mR^a，

11)S(O)₂NR⁸R⁹，和

12)Si(R^c)₃；

R⁷是：

1)(C＝O)_aO_bC₁-C₁₀烷基，

2)(C＝O)_aO_b芳基，

3)C₂-C₁₀链烯基，

4)C₂-C₁₀炔基，

5)(C＝O)_aO_b杂环基，

6)CO₂H，

7)卤素，

8)CN，

9)OH，

10)O_bC₁-C₆全氟烷基，

11)O_a(C＝O)_bNR⁹R¹⁰，

12)S(O)_mR^a，

13)S(O)₂NR⁹R¹⁰，

14)氧代，

15)CHO，

16)(N＝O)R⁹R¹⁰，

17)(C＝O)_aO_bC₃-C₈环烷基，或

18)Si(R^c)₃；

R⁸选自：

1)(C＝O)_rO_s(C₁-C₁₀)烷基，其中r和s独立地是0或1，

2)O_r(C₁-C₃)全氟烷基，其中r是0或1，

3)(C₀-C₆)亚烷基-S(O)_mR^a，其中m是0、1或2，

4)氧代，

5)OH，

6)卤素，

7)CN，

8)(C＝O)_rO_s(C₂-C₁₀)链烯基，

9)(C＝O)_rO_s(C₂-C₁₀)炔基，

10)(C＝O)_rO_s(C₃-C₆)环烷基，

11)(C＝O)_rO_s(C₀-C₆)亚烷基-芳基，

12)(C＝O)_rO_s(C₀-C₆)亚烷基-杂环基，

13)(C＝O)_rO_s(C₀-C₆)亚烷基-N(R^b)₂，

14)C(O)R^a，

15)(C₀-C₆)亚烷基-CO₂R^a，

16)C(O)H，

17)(C₀-C₆)亚烷基-CO₂H，

18)C(O)N(R^b)₂，

19)S(O)_mR^a，

20)S(O)₂NR⁹R¹⁰，

21)C(NH)NH₂，和

22)Si(R^c)₃；

R⁹和R¹⁰独立地选自：

1)H，

2)(C＝O)O_bC₁-C₁₀烷基，

3)(C＝O)O_bC₃-C₈环烷基，

4)(C＝O)O_b芳基，

5)(C＝O)O_b杂环基，

6)C₁-C₁₀烷基，

7)芳基，

8)C₂-C₁₀链烯基，

9)C₂-C₁₀炔基，

10)杂环基，

11)C₃-C₈环烷基，

12)SO₂R^a，和

13)(C＝O)NR^b ₂，

R^a是(C₁-C₆)烷基、(C₃-C₆)环烷基、芳基或杂环基；

W选自：一条键和CH(OH)；

3.式III的化合物或其药学上可接受的盐或立体异构体：

其中：

a是0或1；

b是0或1；

m是0、1或2；

p是0、1或2；

r是0或1；

s是0或1；

R²独立地选自：

1)卤素，

2)OH，

3)O_bC₁-C₆全氟烷基，和

4)Si(R^c)₃；

R⁵选自：

1)C₁-C₆-亚烷基-Si(R^c)₃，和

2)C₁-C₆-亚烷基-OH，

R⁶选自：

1)氢，

2)卤素，

3)OH，

4)O_bC₁-C₆全氟烷基，和

5)Si(R^c)₃；

R⁷是：

1)(C＝O)_aO_bC₁-C₁₀烷基，

2)(C＝O)_aO_b芳基，

3)C₂-C₁₀链烯基，

4)C₂-C₁₀炔基，

5)(C＝O)_aO_b杂环基，

6)CO₂H，

7)卤素，

8)CN，

9)OH，

10)O_bC₁-C₆全氟烷基，

11)O_a(C＝O)_bNR⁹R¹⁰，

12)S(O)_mR^a，

13)S(O)₂NR⁹R¹⁰，

14)氧代，

15)CHO，

16)(N＝O)R⁹R¹⁰，

17)(C＝O)_aO_bC₃-C₈环烷基，或

18)Si(R^c)₃；

R⁷′选自：

1)氢，

2)C₁-C₆-亚烷基-NR⁹R¹⁰，

3)C₁-C₆-烷基，

4)C₁-C₆-亚烷基-Si(R^c)₃，和

5)C₁-C₆-亚烷基-OH；

R⁸选自：

1)(C＝O)_rO_s(C₁-C₁₀)烷基，其中r和s独立地是0或1，

2)O_r(C₁-C₃)全氟烷基，其中r是0或1，

3)(C₀-C₆)亚烷基-S(O)_mR^a，其中m是0、1或2，

4)氧代，

5)OH，

6)卤素，

7)CN，

8)(C＝O)_rO_s(C₂-C₁₀)链烯基，

9)(C＝O)_rO_s(C₂-C₁₀)炔基，

10)(C＝O)_rO_s(C₃-C₆)环烷基，

11)(C＝O)_rO_s(C₀-C₆)亚烷基-芳基，

12)(C＝O)_rO_s(C₀-C₆)亚烷基-杂环基，

13)(C＝O)_rO_s(C₀-C₆)亚烷基-N(R^b)₂，

14)C(O)R^a，

15)(C₀-C₆)亚烷基-CO₂R^a，

16)C(O)H，

17)(C₀-C₆)亚烷基-CO₂H，

18)C(O)N(R^b)₂，

19)S(O)_mR^a，

20)S(O)₂NR⁹R¹⁰，

21)C(NH)NH₂；和

22)Si(R^c)₃；

R⁹和R¹⁰独立地选自：

1)H，

2)(C＝O)O_bC₁-C₁₀烷基，

3)(C＝O)O_bC₃-C₈环烷基，

4)(C＝O)O_b芳基，

5)(C＝O)O_b杂环基，

6)C₁-C₁₀烷基，

7)芳基，

8)C₂-C₁₀链烯基，

9)C₂-C1₀炔基，

10)杂环基，

11)C₃-C₈环烷基，

12)SO₂R^a，和

13)(C＝O)NR^b ₂，

R⁹和R¹⁰可以与它们相连的氮一起形成一个在每个环中具有3-7元的单环或双环杂环，并且所述的单环或双环杂环除所述的氮外，任选含有一个或两个选自N、O和S的其它杂原子，所述的单环或双环杂环任选被一个或多个选自R⁸的取代基取代；

R^a是(C₁-C₆)烷基、(C₃-C₆)环烷基、芳基或杂环基；

4.一种化合物，其是：

(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-N-{(3R，4S)-3-氟-1-[3-(三甲基甲硅烷基)丙基]哌啶-4-基}-2-(羟甲基)-N-甲基-2-苯基-2，5-二氢-1H-吡咯-1-羧酰胺

或其药学上可接受的盐或立体异构体。

5.药物组合物，其由权利要求1的化合物和药学上可接受的载体组成。

6.一种用于治疗或预防需要这种治疗的哺乳动物中癌症的方法，其包括给予所述的哺乳动物治疗有效量的权利要求1的化合物。

7.权利要求6的治疗癌症或预防癌症的方法，其中所述的癌症选自脑癌、泌尿生殖道癌、淋巴***癌、胃癌、喉癌和肺癌。

8.权利要求6的治疗或预防癌症的方法，其中所述的癌症选自组织细胞淋巴瘤、肺腺癌、小细胞肺癌、胰腺癌、gioblastomas和乳腺癌。

9.一种使用权利要求1的化合物用于制备用于治疗或预防在需要这种治疗的哺乳动物中的癌症的药物的方法。

10.一种使用权利要求1的化合物用于制备用于抑制在需要这种治疗的哺乳动物中的有丝***驱动蛋白KSP的药物的方法。