CN101119740A

CN101119740A - 中药地榆及其提取物在制备升高红细胞和血红蛋白药物中的应用

Info

Publication number: CN101119740A
Application number: CNA2005800416849A
Authority: CN
Inventors: 李伯刚; 邹文俊; 刘忠荣; 吴建明
Original assignee: Chengdu Diao Pharmaceutical Group Co Ltd
Current assignee: Chengdu Diao Pharmaceutical Group Co Ltd
Priority date: 2004-12-14
Filing date: 2005-12-13
Publication date: 2008-02-06
Anticipated expiration: 2025-12-13
Also published as: CN101119740B

Abstract

地榆、地榆总皂苷及通式为(I)的三萜皂苷化合物在制备升高红细胞和血红蛋白的药物中的用途。将地榆及其提取物、地榆总皂苷或通式为(I)的乌索烷型三萜皂甙化合物，加入药学上可接受的辅料或辅助性成分制备成制剂，如口服制剂或注射剂。该制剂可以明显升高红细胞和血红蛋白，治疗或预防各种贫血，尤其是骨髓造血功能低下或衰竭引起的贫血。

Description

中药地揄及其提取物在制备升髙红细胞和血红蛋白药物中的应用

所属技术领域

本发明涉及中药地榆及其提取物的新用途，具体地，是在制备升高红细胞和血红蛋白的药物中的应用，属中药领域。

背景技术

正常状态下红细胞的生成与衰亡维持动态平衡，使单位体积中的红细胞、血红蛋白和血细胞比容等数值保持稳定。红细胞生成减少或破坏过多，或二者兼而有之, 就会引起贫血。红细胞生成减少引起的贫血主要有： 1)造血原料不足或利用障碍，如铁代谢异常引起的贫血、叶酸或 B₁₂代谢异常引起的贫血等； 2)骨髓造血功能低下或衰竭，如再生障磚性贫血； 3)各种疾病引起的继发性贫血。红细胞破坏过多引起的贫血则有红细胞内在因素如红细胞膜缺陷等或红细胞外在因素如免疫性溶血等。此外，失血过多也可引起失血性贫血，可以说贫血是内科、外科、儿科、妇产科等各科的多发疾病。贫血的治疗方法主要包括药物、输血、脾脏切除术、造血干细胞移植、基因治疗等，一般根据不同的病因或发病机制选择一种或多种治疗手段, 其中药物治疗仍是目前治疗贫血最重要的手段。针对造血原料不足或利用障碍所致贫血的治疗药物较多，如含铁制剂等，但针对骨髓造血功能低下或衰竭所致贫血的药物相对较少，如再生障碍性贫血的治疗主要釆用雄性激素或糖皮质激素类药物治疗，如丙酸睾酮以及***等，但这些药物的副作用较大，如丙酸睾爾导致雄性化或***增生， ***导致骨质疏松等，此外，新的生物制剂如促红细胞生成素（EP0)等，临床使用疗效显著，但主要限于肾性贫血的治疗，而且这些药物大多为注射方式，使用不便。

地榆为蔷薇科植物地榆 Sanguisorba officinalis L.或长叶地榆 Sanguisorba officinalis L. Var Longifolia(Bert) Ytl et Li.的干燥根 (《中药现代研究与应用》

(第二卷)，郑虎占主编，北京，学苑出版社， 1997， 10) ，为中医临床常用中药，性寒，味苦、涩，具有凉血止血，解毒敛疮的功效，常用于吐血、咯血、便血、痔血、血痢及崩漏等各种血热出血证以及水火烫伤、湿疹及痈肿等。

现代研究表明，地榆主要含多种鞣质、三萜及其苷、黄酮类、糖类和无机微量元素，其中含鞣质 17~25%，皂苷 2. 5〜4% (地榆属植物研究进展，中草药， 1996， 27 (增刊）： 213；中药化学，上海人民出版社， 1975)。地榆具有促进伤口愈合、抑菌、抗炎、止血、镇静、镇吐、抗腹泻等作用 (《中药现代研究与应用》（第二卷)，郑虎占主编，北京，学苑出版社， 1997, 10)；地榆提取物对紫外线 B导致大鼠皮肤损伤具有抑制作用（国外医学中医中药分册， 2002， 24 (5): 299)；日本 Mimaki Y 等人报道，从地榆根中分离得到的几种乌索烷型三萜皂苷具有细胞毒活性，即能够抑制 HSC- 2 ( 人口底癌）细胞和 HGF ( 杂交瘤生长因子） [phytochemistry. 2001, 57 (5) :773-779]；公开号为 CN 1504478 A的专利公开了地榆总皂苷提取物在升高白细胞或 /和血小板中的应用,，表明地榆可用于各种原因，尤其是癌症患者放化疗治疗引起的白细胞减少症和血小板减少症。党春兰等研究了地榆对正常家兔血液流变学的影响，作者利用数理模型，探讨了全血粘度与地榆止血功效的关系，认为地榆的止血功效与全血粘度的升高有关。（党春兰，程方荣.地榆对家兔血液流变学的影响.中国医学物理学杂志， 1997， 14 (3)： 138〜： 139)但到目前为止，尚无关于地榆原生药、地榆提取物或地榆各种活性成分在升高红细胞和血红蛋白，用于治疗和 /或预防贫血的报道。

1

确认本发明内容 Λ:

本发明的技术方案是錄供: 7中!^地榆及提取物的用途，具体地说，是在制备升高藝磁中 ¾¾途

¾的中药: HM^来源于蔷薇科植物地榆 Sanguisorba officinalis L.或长叶地榆 Sanguisorba officinalis L. Var Longifolia(Bert)YU et Li.的干燥根。

所述的地榆为地榆原生药粉或水 /有机溶剂提取物。

其中，所述的地榆有机溶剂提取物为甲醇、乙醇、乙酸乙酯、正丁醇、 ***等有机溶剂中的一种或任意两种或者多种溶剂以任意比例组成的混合溶剂提取物。

其中，所述的水或有机溶剂地榆提取物中含有地榆总皂苷，其重量百分比为 10 98%。优选 40〜98%。

其中，所述的地榆总皂苷中含有通式为（I) 的乌索烷型三萜皂苷化合物。

( I )

其中：为11、 ΟΗ中的一种；为 H、 D-葡萄糖、 D-半乳糖、 L-***糖、 L-鼠李糖、 D-木糖、 D-葡萄糖醛酸、 L-半乳糖醛酸、 D-木糖葡萄糖、乙酰 -L-***糖中的一种; 为 OH、 CH₂中的一种；为 H、 C¾中的一种； R_s为 H、 D-葡萄糖中的―种。

其中，所述通式为（I) 的化合物，、 ¾是 H， R₂是 α -L-***糖， R₃为 OH, 是 -0-葡萄糖，即为 3-O- a -L-***糖基 -19 α -羟基乌索 -12烯 -28-羧酸 -28-Ο- β -Ρ-葡萄糖基酯（ziyu- glycoside I，化合物 A)。

所述通式为（I) 的化合物，、、 R_s是 H， R₂是 α -Ο-L-***糖，为 OH, 即为 19 α -羟基乌索 -12烯 -28-羧酸 -3- a -0-L-***糖苷（ziyu- glycoside Π，化合物 Β )ο

所述通式为（I) 的化合物， Ri、 R₂、是 H， R₃为 OH， R₅是 β -D-葡萄糖，即为 3 β，19 α -二羟基乌索 -12烯 -28-羧酸 -28-0- β -D-葡萄糖基（化合物 C)。

所述通式为（I) 的化合物，、 R₂、 »、 R₅是 H， R₃为 OH，即为 3 β，19 α - 二羟基乌索 -12烯 -28-羧酸（化合物 D)。

所述通式为（I)的化合物，是 H，是 a -L-***糖， ¾、 4同时为 =CH₂， R_s是 β -D-葡萄糖，即为 3 β〖( _α -1-***糖）羟基】乌索- 12,19(29) -二烯 -28-羧酸 -28-0- β -Β-葡萄糖基（化合物 Ε)。

所途通式为（I) 的化合物， ¾、是 Η， ¾、 ¾是 OH, 是 - -葡萄糖，艮 P为 2 α ,3 α ,19 α -三羟基乌索 -12烯 -28-羧酸 -28-0- β -D-葡萄糖基酯（化合物 F)。

进一步的，本发明还提供了地榆总皂苷及其主要活性成分通式为 (I)的乌索烷型三萜皂苷化合物在制备升高红细胞和血红蛋白的药物中的用途。

本发明提供了一种药物组合物，它是以地榆原生药材、或地榆药材的水或有机溶剂提取物、或地榆总皂苷或通式为 (I)的乌索烷型三萜皂苷化合物为活性成分，加上药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的制剂。

所述的制剂是口服制剂或注射剂。

本发明还提供了地榆总皂苷的制备方法，它包括以下步骤：

a、将地榆原药材适当粉碎处理后，用水、甲醇或乙醇，室温或加热提取，过滤，滤去药渣，滤液在常压或减压下浓缩，静置备用；

b、将 a步骤提取浓縮液用聚酰胺柱吸附，然后用 30〜90%的乙醇洗脱，洗脱液减压回收后，可重复用聚酰胺柱吸附 1〜3次，得浸膏，经真空或冷冻干燥得地榆总苷。

本发明还提供了该药物组合物的制备方法，它包括以下步骤：

a.将地榆原药材适当粉碎处理后，用水、甲醇或乙醇，室温或加热提取 1〜3次，每次 1〜3小时;过滤，滤去药渣，滤液在常压或减压卞浓缩至一定浓度，静置备用； b.将 a步骤提取浓缩液用聚酰胺柱吸附，然后用 30〜90%的乙醇洗脱，洗脱液减压回收后，可重复用聚酰胺柱吸附 1〜3次，得浸膏，经真空或冷冻干燥得干粉，再加入药学上常用的辅料或辅助性成分制备而药学上常甩的口服制剂或注射剂；

或取有效量的通式为（I) 的乌索烷型三萜皂苷化合物，加入药学上常用的辅料或辅助性成分制备学上常用的口服制剂或注剂。

其中，提取溶剂以 50〜90%的乙醇溶液较好。乙醇溶液用量为药材重量的 6〜 12倍，其中以 8倍为佳。洗脱液为 60〜90%乙醇，以 70%为佳。以上制备的干粉，为浅黄色固体物质，味微苦，其中所含总皂苷占总重量的 10〜98%。

本发明还提供了该药物组合物在制备升高红细胞和血红蛋白作用的药物中的应用。

通式为（I)的乌索烷型三萜皂苷化合物及上述优选的化合物 A、 B、 C：、 D、 E、 F可以从天然植物地榆（Sanguisorba officinalis L),长叶地榆 Longifrfia(Bettol.)Y¾.et Li), 高山地榆（Sanguisorba alpina Beg. )，冬青科植物枸骨 (Ilex corunta Lindl.) ¾嫩叶（苦丁茶）、毛冬青（Hex pubescens Hook.et.Arn.),华车蓝剌头 (Echinops grijisu) 根、通泉草 (mazus miqueU), Hex crenata等中任意一种或几种中分离获得；也可以通过化学方法合成获得。具体化学提取分离方法可按文献方法进行 (The structures of glycosides and aglycone of Sanguisorbae Radix,Chem.Pharm.BuU. 1971,19(8):1700-1707； Triterpene glycosides from the roots of Sanguisorba O cinals, Phytochemistry.2001,57(5),773-779_; 地榆中皂苷类化合物分离、鉴定及其含量测定. 中草药， 2003,34(5):397-399)o

本发明发现，中药地榆及其提取物、地榆总皂苷或通式为 (I)的乌索垸型三萜皂苷化合物具有升高红细胞和血红蛋白作用，对 ⁶°Co— γ射线、化学药物所致小鼠贫血及失血性贫血有显著的治疗作用。

本发明还提供以所述的中药地榆及其提取物、地榆总皂苷或通式为 (I)的乌索烷型三萜皂苷化合物作为有效药用成分的药物制剂，可用于升高红细胞和血红蛋白，治疗和 /或预防各种贫血尤其是由骨髓造血功能低下或衰竭造成的贫血。

以上中药地榆及其提取物、地榆总皂苷或通式为 (Ϊ)的乌索烷型三萜皂苷化合物，与药学上可接受的辅助添加剂成分混合后，按相应的常规药物制剂方法，可以制备升高红细胞和血红蛋白的药物。例如，与在口服制剂中可以被接受的崩解剂、赋形剂、润滑剂、粘合剂、填充剂等常用辅助添加成分混合后，按常规的操作方法和过程，可以制成为片剂、丸剂、胶囊剂或多种相应的缓释剂、控释剂等固体口服制剂形式的药物；与常规的增溶剂、乳化剂、润湿剂、起泡或消泡剂等表面活性剂、稀释剂、防腐剂、稳定剂、矫味剂、增稠剂等混合后，按相应的常规方法，可以制备成为水剂、糖浆、口服液等液体制剂式的口服翁物；与常规的悬浮剂、稳定剂、分散剂或调节溶液渗透压的试剂混合，按相应的常规方法，配置成注射液。

萌还提供一种药物组合物，其中含有中药地榆及其提取物、地榆总皂苷或通式为 0)的乌索烷型三萜皂苷化合物，或中药地榆及其提取物、地榆总皂苷或通式为 0)的乌索烷型三萜皂苷化合物与其它具有升高红细胞和血红蛋白作用的西药或中药活性成分配伍组成的复方。

按照本发明，可以将上述含有中药地榆及其提取物、或地榆总皂苷或通式为（I) 的乌索垸型三萜皂苷化合物，或中药地榆及其提取物、或地楡总皂苷或通式为（I) 的乌索烷型三萜皂苷化合物与其它具有升高红细胞和血红蛋白的西药或中药活性成分配伍组成的复方制剂，按照常规的制剂技术，制备成口服制剂或注射剂。

本发明的有益效果：由于中药地榆及其提取物、地榆总皂苷或通式为（I) 的乌索烷型三萜皂苷化合物具有明显的升高红细胞和血红蛋白的作用，可用于制备治疗和 /或预防各种贫血，尤其是由骨髓造血功能低下或衰竭引起的贫血的药物制剂，如 P服制剂或注射剂。.具有疗效显著、价格低廉、服用方便的特点。

显然，根 «本 ¾明¾上 ^ ，按 ^ ¼ 的普逾 S杀愤用芋崁，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以作出其它多种形式的修改、替换或变更。

以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例，凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

具体实施方式

实施例 1 地榆原生药药品的制备

取中药地榆原生药，即地榆 Sanguisorba officinalis L.或长叶地榆 Sanguisorba officinalis L. Var Longifolia(Bert) Yu et Li.的干燥根净制以后，按常规方法粉碎，过筛，制成粒度为 60〜120目的地榆细粉，细粉装入胶囊，灭菌，分装即成。

实施例 2 地榆总皂苷提取物 1的制备

地榆 1000g, 粉碎后加入 70%的乙醇溶液 8L，加热回流提取 1. 5小时，过滤，滤渣再加入 70%的乙醇溶液 6L，加热回流提取 1小时，过滤。合并两次滤液，浓缩至一定浓度，静置备用。取聚酰胺树脂装柱，将上述提取液过聚酰胺柱吸附，然后用 70%的乙醇洗脱柱子，收集洗脱液，洗脱液减压浓缩，回收乙醇，得浸膏。所得浸膏加水加热溶解，再过聚酰胺柱 2次，得浸膏，真空干燥得干粉 24g, 为地榆提取物 1。取地榆提取物 lg, 精密称定，置 250ml烧瓶中，加入 7%盐酸溶液和无水乙醇各 20ml，水浴加热回流 2h，水浴温度控制在 90〜95°C，滤过，滤液于水浴上挥干，残渣用 15ml蒸馏水转移至分液漏斗中，加乙酸乙酯萃取 5次，每次 15ml，将乙酸乙酯萃取液水浴蒸干，残渣用甲醇溶解，参照文献高效液相一蒸发光散射方法（赵宇新，李曼玲. 高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定中药及制剂中齐墩果酸和熊果酸的含量.药物分析杂志， 2004， 24 (2)： 167〜170)检测，测得地榆总皂苷提取物 1 中地榆总皂苷含量占总重量的 74%。

实施例 3地榆总皂苷提取物 2的制备

地榆 1000_g，粉碎后加入 80%的乙醇溶液 8L，加热回流提取 1. 5小时，过滤，滤渣再加入 80%的乙醇溶液加热回流提取 1小时，过滤。合并两次滤液，浓缩至一定浓度，静置备用。 ^树脂装柱，将上述提取液过聚酰胺柱吸附，然后用 75%的乙醇选¾ JC 液，洗脱液减压浓缩，回收乙醇，得浸膏。所得浸膏加水加热酰] ¾ 次，得浸膏，真空干燥得干粉 19g, 为地榆提取物 2，用实施例 2中所述方法捡测，其中地榆总皂苷含量占总重量的 55%。

实施例 4 ^ 3的制备

称取地榆 1000g, 1¾量70%的乙醇加热回流 3次，每次 2h。合并 3次提取液，放冷，过滤，回收乙醇，得浸膏。将浸膏用 3倍量的水溶解，用石油醚萃取 3次，每次 300ml，除去脂溶性杂质。水层用 600ml正丁醇分 3次萃取，弃去水层，减压回收正丁醇至干，即得地榆皂苷干粉 53g,取粗皂苷 15 用 3 量的水溶解，加食盐饱和，用正丁醇萃取 (50 m ix 3) , 合并正丁醇层，用水洗去还原糖，至水层呈淡黄色，减压回收正丁醇至干，得到精制皂苷 10. 5 g，呈粉末状。为地榆提取物 3，用实施例 2中所述方法检测，其中地榆总皂苷含量占总重量的 96%。

在上逑提取方法的机理不变的情况下，对提取用有机溶剂作相应的改变、替换，均可达到相同的提取效果，得到不同地榆总皂苷含量的提取物。

实施例 5乌索烷型三萜皂苷化合物 A、 B、 C的提取分离和结构确认

提取与分离：地榆药材购自成都市中药材公司，经鉴定为 Sanguisorba officinalis L.。取地榆药材 20kg,切片，用 8倍量 70%乙醇提取 2次,每次 1小时，滤过，回收乙醇，加水至 0. 3g生药 /ml, 冷藏 12小时,取上清液通过大孔吸附树脂。先用水洗至 Molish反应呈阴性，再用 70%乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，并浓缩得浓浸膏。浓浸膏加入 25L热水充分搅拌，抽滤出沉淀（约 4 k_g， TLC检测主要为鞣质）。滤液分别用等体积乙酸乙酯和正丁醇各萃取三次，然后减压浓缩蒸干，得乙酸乙酯浸膏 300 g，正丁醇浸膏 320 go 将所得乙酸乙酯浸膏用硅胶柱分离，用石油醚:丙酮 =20:1〜2:1梯度洗脱得 19个组分，将第 16组分在甲醇中静置，得固体物；将固体物再用硅胶柱分离，石油醚：丙酮 =5:1洗脱，在第 34〜36分钟析出白色碎晶体，即得化合物 B 20mg_;将所得正丁醇浸膏，用硅胶柱分离，初始洗脱剂釆用氯仿：甲醇 =10:1, 之后再用 6:1、 4:1、 2:1等梯度洗脱。在梯度为 4:1时有固体析出，反复用甲醇溶解之后析出，最后得到白色粉末 852 mg，即化合物 A; 将所得正丁醇浸膏，用 R_P-18柱分离，开始采用甲醇和水（40%甲醇）洗脱剂，之后分别用 50%、 70%、 90%、 100%甲醇洗脱，在 70%甲醇段有混合固体出现，然后将其用 Sephadex LH-20 分离，得到 38mg化合物：。

结构确认：测定得到的化合物 A、 B、 C的碳谱和氢谱数据，与文献研究报道的一致 (Dong-Liang Cheng > Xiao-Ping Cao, Pomolic acid derivatives from the root of Sanguisorba officinalis, Phytochemistry, 1992, 31 (4) ： 1317—1320)，即：化合物 A为 30 -〖0-( 1 -***糖)1-19 1 -羟基乌索-12-烯-28-羧酸-28- -葡萄糖酯（ziyu- glycoside I ); 化合物 B为 3 β -[0-( α -L-***糖)】-W α -羟基乌索 -12- 烯- 28-羧酸（ziyu— glycoside II )-, 化合物 C ¾ 3 β ,19 α -二羟基乌索 -12-烯 -28-羧酸 -28- β -ϋ-葡萄糖酯。化合物 A、 B、 C的¹ H NMR和 ¹³C NMR数据见下表 1。上述乌索烷三萜皂苷化合物 A、 Bv,C的提取分离和结构的确定为本发明药物质量控制的基础，偉本^：明药物质量可。

实施例 6片剂的制备

片剂的组成：地榆提取物 0.5g

HPMC画 30g

乳糖 69g

硬脂酸镁 0.5g

共 100g

将地榆提取物（实施例 2、 3或 4, 在所述的提取物的范围内不同提取物可制条不同规格的片剂)、乳糖混匀，以 75%乙醇为粘合剂制湿颗粒，过 22 目筛, 50Ό干燥 3小时， 22目筛整粒，加入硬脂酸镁混匀压片，制成 1000片，每片 0.1g。用于贫血患者，口服，一日 3次，每次 2片。

实施例 7胶囊剂的制备

胶囊组成：地榆提取物 0.5g

淀粉 99g

硬脂酸镁 0.5g

共 100g

将地榆提取物（实施例 2、 3或 4, 在所述的提取物的范围内不同提取物可制备不同规格的胶囊剂）、淀粉、硬脂酸镁混勾，装胶囊，共 1000粒，每粒 0.1g。用于贫血患者，口服，一日 3次，每次 2粒。

实施例 8注射剂的制备

注射液组成：地榆总皂苷 0.5g

吐温 80 10ml

氯化钠 8g

地榆总皂苷提取物（实施例 2、 3或 4, 在所述的提取物的范围内不同提取物可制备不同规格的注射剂），加入 10%碳酸钠调 pH值至 7.0~7.5, 冷藏过滤，加入吐温 -80，加注射用水至 lOOOml, 滤过，分装，灌封， 100°C流通蒸汽灭菌， 30min即得。

实施例 9注射剂的制备

注射液组成：化合物 A 0.2g

吐温 80 10ml

氯化钠 8g

化合物 A加入 10%碳酸钠调 PH值至 7.0〜7.5, 冷藏过滤，加入吐温 -80, 加注射用水至 1卿 0腿!，滤过，分装，灌封， WMTC流通蒸汽灭菌， 30min即得。

实施例 10 复方片剂的制备

用地榆提取物制备复方制剂，取地榆提取物 0.5_g (实施例 2、 3或 4，在所述的提取物的范围内不同提取物可制备不同规格的片剂），黄芪总皂苷 200g,按常规方法, 加入辅料, 制成片剂稱_? 每片 /粒 200_mg, 用于贫血患者, 口服，一日 3次，每次 1片或 1 , 月二^程。

以下通过药效学试验证明本发明的有益效果。

试验例 1：地榆原生药粉、地榆总皂苷、化合物 A、 B、 C对环磷酰胺所致小鼠贫血的影响

昆明种小鼠，雌雄各半，体重 22~24g，按体重随机分为 9组：正常对照组、模型组、地榆原生药组、地榆总皂苷高、中、低剂量组、化合物 A、 B、 C组。除正常对照组外，各组均腹腔注射环磷酰胺 100mg/kg，连续 3天，注射环磷酰 ^日后镩胄腐，连续 10夭， ^Μ ^ ^Α^Μ 10 眼目取 Jfiff 鼠红细胞数（RBC)、血^:蛋白含量（HGB)以及红细胞比积（HCT)。结巣; E表 2: 地榆原生药粉、地榆总皂苷、化合物 A、 B、 C对环磯酰胺所致贫血小鼠 RBC、 HGB及

HCT的影响（X土 s)

组别剂量样本数 RBC HGB HCT

(mg/kg) (只） (10^U L) (g L) (%)

. 正常对照组 ― 12 10. 00±0. 74 153.51 ±9. 72 40.54+1. 84 模型对照组 ― 10 9.05±0.86^AA 136.84±7. β7^ΑΑ 36.84±2. 29^AA 地榆原生卿 2000 12 9.78±0.62* 149.25±10.74* 37.55±3.61 地总翰高量组 10 12 11.27±3.21** 161.33±12.59** 42.86±5.61** 地榆总苷中剂量组 5 12 10.05±1.08* 150.46±14.76" 39.97±4.37* 地榆总皂苷低剂量组 1 12 9.77±1.23* 145.02±11.37* 38.42±3.31 化食物 A组 0. 24 12 11.55±0.99** 164.89±18.29** 43.91±4.06" 化合物 B组 0. 24 12 9.93±0.?8* 147.4 ±12.97* 36.07±3.12 化合物 C组 0. 24 12 10.11±1.02* 145.06±12.56* 37.12±3.77 注：与正常对照组比较： ^A P<0.05, " P<0.01

与模型对照组比较- * P<0.05, '* P<0.01

从表 2结果可以看出，小鼠连续注射环磷酰胺 3天后，红细胞数以及血红蛋白含量下降，与正常组小鼠比较有极显著差异，表明模型成功。分别给予地榆原生药粉、地榆总皂苷、化合物 A、 B、 C后，与模型组相比，小鼠红细胞数、血红蛋白含量、红细胞比积均明显增加，且差异有显著的统计学意义，表明地榆原生药粉、地榆总皂苷、化合物 A、 B、 C具有治疗化疗药物所致贫血的作用。

试验例 2: 地榆原生药粉、地榆总皂苷、化合物 A、 B、 C对 ^6eCo-Y射线所致小鼠贫血的影响

昆明种小鼠，雌雄各半，体重 22~24_g，按体重随机分为 9组：正常对照组、模型组、地榆原生药组、地榆总皂苷高、中、低剂量组、化合物 A、 B、 C组。除正常对照组外，其余各组小鼠接受 ^6eGo- Y射线一次性照射，源皮距 5m，每只小鼠总吸收量为 750cGy„以上照射在成都锋歸照场进。辐照次日后灌胃药物，连续 10天， B 眶静脉丛取血，测定各鼠 RBC：、 HGB和 HCT值。结果见表 3。

表 3 地榆原生药粉、地榆总皂苷提取物 1、化合物 A、 B、 C对 ^6β )-γ射线所致贫血小鼠

BBC、 HGB及 HCT的影响（X±s)

组别剂量样本数 RBC HGB HCT

(mg/kg) (只） (10¹²/L) (g L) (%) 正常对廂组一 12 10.23±0.65 146.67±10.40 39.39±2.81 模型对照组 ― 10 8.49±0.72" 128.90±9.89^AA 33.78±2.18^AA 地揄厚生药组 2000 12 10.26±1.58* 150.25±25.12** 37,55*7.52* 地剂量组 % 12 11.18±1.39** 159.17±31.24** 40.15i8.25* 地榆皂苷中麵组 5 12 10.11±1.93* 148.29±29.37** 37.5¾t6.95* 地榆总皂苷低剂量组 1 12 9.21±1.45* 136.27±21.54* 36.55±7.11* 化合物 A组 0.24 12 12.36±1.55** 165.05±33.42** 41.56±6.74** 化合物 B组 0.24 12 10.12±0.96* 150.35±28.17* 36.72±9.86 化合物 C组 0.24 12 9.56 o±1.25* 147.31±26.19* 36.22±9.77

注：与正常组比较： ^A Ρ<0.05, " P<0.01

与模型组比较： * P<0.05, P<0.01

从表 3结果可以看出，小鼠接受 ^6DCo- Y射线一次性照射 10后，红细胞数以及血红蛋白含量处于较低水平，与正常对照小鼠比较，有极显著差异 (P<0. 01) ,表明 ^6eCo- Y射线致小鼠贫血模型成立。在分别给予地榆原生药、地榆总皂苷、化合物 A、 B、 C后，与模型组相比，小鼠红细胞数、血红蛋白含量、红细胞比积均明显增加，且差异有显著的统计学意义，表明地榆原生药粉、地榆总皂苷、化合物 A、 B、 C具有治疗放射线所致贫血的作用。

试验例 3：地榆总皂苷、化合物 A、 B、 C对失血性贫血小鼠 RBC、 HGB及 HCT 响

取小白鼠 80只，体重 18〜22_g，随机分为 8组，正常对照组、模型组、地榆总皂苷高、中、低剂量组、化合物 A、 B、 C组。除正常对照组外，其余各组均眼球放血 0.5ml (严格控制放血量)， 24小时后腹腔注射给药，连续 7天，末次给药 1小时后眼球取血测定 RBC、 HGB及 HCT，结果见表 4。

表 4地榆总皂苷、化合物 A、 B、 C对失血性贫血小鼠 RBC、 HGB及 HCT的影响（X±s) 组别剂量样本数 RBC HGB HCT

C mg/kg) (只） (g L) (%) 正常对照组 ― 10 10.72±1.02 169.25±9.37 41.71±2.42 模型对照组 ― 10 9.00±1.37" 157.38±10.96^{Α Δ} 35.21±6.34^{Δ Α} 地榆总皂苷提取物 1高 2 10 11.51±1.13** 172.93±12.68** 43.22±5.75** 地榆总皂苷提取物 1中 1 10 10.78±8».96'"' 165.21±10.S5* 41.12±3.16*^A 地榆总皂苷提取物 1低 0. 2 10 9.42±0.77* 160.73±9.61 37.73±2.06 化合物 A组 0. 24 10 11.58±2.15" 180.22±11.65"^A 42.35±3.57 化合物 B组 0. 24 10 10.06±1.96* 168.76±11.57^ft* 39.78±3.15* 化合物 C组 0. 24 10 9.78±0.86* 165.23±10.22* 38.97±3.58* 注：与正常组比较: ^A P<0.05 ^A P<0.01

_;¾¾»¾ ·¾ ^ίΚ05,'·^;' ** . P<0.01

从表 4结果可看 i , 与正常 ^照组比较，造模后小鼠 RBC、 HGB、 HCT明显降低，差异有显著性（P<0. 01 ), 说明造模成功；在分别给予地榆总皂苷和化合物 A、 B、 C后，与模型组相比，小鼠红细胞数、血红蛋白含量、红细胞比积均明显增加，且差异有显奢的统计学意义，说明地榆总皂苷、化合物 A、 B、 C对失血性贫血具有显的治疗作用。上述^ ^注射 ^试验说明，本发 ¾药作为剂同有升 ittc i 红 ¾白作^。

irf未同 6量组、不同药方药效 ά验说明, 本发明药物提取物升高红细胞和白：呈明显效系，说明本发明药物采用口 Λ和注射南种药式，具有明显的弁高细胞和血红蛋白的作用，且其作用随给药剂量的增加而增强，可用 ¾治和/ ^f 其由艙血能低下^ ¾竭起的她的药 ^, 疗¾ «, 且质量稳定，控性强。

Claims

权利要求书

1、中药地楡在制备升高红细胞和血红蛋白的药物中的用途。

2、根据权利要求 1所述的用途，其特征在于：所述的中药地榆来自于蔷薇科植物地榆 Sanguisorba officinalis L.或长叶地榆 Sanguisorba officinalis L. Var Longifolia(Bert)YU et Li.的干燥根。
3、根据权利要求 1或 2所述的用途，其特征在于：所述的地榆为地榆原生药粉。
4、根据权利要求 1或 2所述的用途，其特征在于: 所述的地榆为水或有机溶剂提取物。
5、根据权利要求 4所述的用途，其特征在于：所述的地榆有机溶剂提取物为甲醇、乙醇、乙酸乙酯、正丁醇、 ***有机溶剂中的一种或任意两种或者多种溶剂以任意比例组成的混合溶剂提取物。
6、根据权利要求 4所述的用途，其特征在于：所述的地榆水或有机溶剂提取物中含有地榆总皂苷，其重量百分比为 10〜98%。
7、根据权利要求 6所述的用途，其特征在于：所述的地榆水或有机溶剂提取物中含有地揄总皂苷，其重量百分比为 40〜98%。
8、根据权利要求 6或 7所述的用途，其特征在于：所述的地榆总皂苷中含有通式为（I) 的乌索烷型三萜皂苷化合物：

其中：为11、 OH中的一种；为 H、 D-葡萄糖、 D-半乳糖、 L-***糖、 L-鼠李糖、 D-木糖、 D-葡萄糖醛酸、 L-半乳糖醛酸、 D-木糖 -D-葡萄糖、乙酰 -L-阿拉伯糖中的一种；为 OH、 CH₂中的一种；为 H、 C¾中的一种； R_s为 H、 D- 葡萄糖中的一种。
9、地榆总皂苷在制备升高红细胞和血红蛋白的药物中的用途。
10、通式为（I) 的乌索烷型三萜皂苷化合物在制备升高红细胞和血红蛋白的药物中的用途。
11、一种升高红细胞和血红蛋白药物的组合物，它是以地榆原生药材、或地榆药材的水或有机溶剂提取物、或地榆总皂苷或通式为（I) 的乌索烷型三萜皂苷化合物为活性成分，加上药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的制剂。
12、根据权利要求 11所述的药物组合物，其特征在于：所述的制剂是口服制剂或注射剂。
13、一种制备地榆总皂苷的方法，它包括以下步骤：

a、将地榆原药材适当粉碎处理后，用水、甲醇或乙醇，室温或加热提取,过滤，滤去药渣,滤雜駆難 £ Hfe禱禪 , _;；_;

b、将 _a 挺 Me錄 miieii 然甩^^ ％的醇，洗脱液减压回收后，可重复用聚酰胺柱吸附 1〜3次，獰浸膏，经寘空或冷冻干燥得地榆总 ¾¾ ^{; :}-; ^?? ^:; ·τ '^ - - ^：^ ：- ■·■ .

14、一种 $lj备权利要求 11或 12所述的药物组合物的方法，它包括以下步骤： a、将地榆廪药材适当粉碎处理后，用水、甲醇或乙醇，室温或加热提取,过滤，滤去药渣》滤液在常压或减压下浓缩, 静置备用；

b、将 a步骤提取浓缩液用聚胺柱吸附，然后用 30〜90%的乙醇洗脱，洗脱液减压回收后 , ¾Γ董复用家酰胺辁吸附 1〜3次，得浸膏，经真空或冷冻干燥得地榆总皂苷，再加入药学上常用的辅料或辅助性成分制备成药学上常用的口服制剂或注射剂；

或取有效量的通式为 (I) 的乌索烷型三萜皂苷化合物，加入药学上常用的辅料或辅助性分制¥ 药学上常用的服制剂或注射剂。