CN100508980C - 利用δ阿片受体促效药来防止下泌尿系功能障碍的组合物 - Google Patents

利用δ阿片受体促效药来防止下泌尿系功能障碍的组合物 Download PDF

Info

Publication number
CN100508980C
CN100508980C CNB03810492XA CN03810492A CN100508980C CN 100508980 C CN100508980 C CN 100508980C CN B03810492X A CNB03810492X A CN B03810492XA CN 03810492 A CN03810492 A CN 03810492A CN 100508980 C CN100508980 C CN 100508980C
Authority
CN
China
Prior art keywords
gaonist
pharmaceutical composition
opiate receptor
solution
delta opiate
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CNB03810492XA
Other languages
English (en)
Other versions
CN1652787A (zh
Inventor
张宽仁
J·彼得·真戈
凯斯图蒂什·P·彼丘纳什
马欣
威廉·彭德格斯特
詹其泰
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Wersi Refco Group Ltd.
Original Assignee
Mount Cook Biosciences Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Mount Cook Biosciences Inc filed Critical Mount Cook Biosciences Inc
Publication of CN1652787A publication Critical patent/CN1652787A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN100508980C publication Critical patent/CN100508980C/zh
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Fee Related legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene or sparfloxacin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/02—Drugs for disorders of the urinary system of urine or of the urinary tract, e.g. urine acidifiers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/08—Drugs for disorders of the urinary system of the prostate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/10—Drugs for disorders of the urinary system of the bladder
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Hydrogenated Pyridines (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Abstract

本发明提供用于治疗尿道功能障碍的组合物和方法，其通过向需要这种治疗的受试者给予药物组合物实现，该药物组合物含有有效量的用以降低尿道功能障碍作用的δ阿片受体促效药。该组合物还可包括额外的用于治疗尿道功能障碍的活性药剂，例如α-肾上腺素促效药、抗胆碱药、α-肾上腺素拮抗剂及三环抗抑郁剂。

Description

利用δ阿片受体促效药来防止下泌尿系功能障碍的组合物
发明背景
发明领域
本发明涉及哺乳动物的下泌尿系尿道功能障碍，尤其涉及使用δ阿片受体激动剂来调节控制排尿的肌肉的收缩和舒张以治疗尿道疾病的组合物和方法。
相关技术说明
国家肾尿疾病咨询委员会(The National Kidney and UrologicDiseases Advisory Board)估计尿失禁(UI)影响了约17,000,000美国人。失禁是指很多人与衰老过程相关。然而，失禁不是衰老过程的自然部分。其可发生于任何年龄段，并可由多种原因引起，包括感染、药物作用、肌肉弱化、激素不平衡、神经性疾病和静止不动。失禁在很大程度上是被忽视的问题，这是由于受影响的人感到困窘、孤立、耻辱并不愿意讨论这种问题的原因。
自制需要从中枢神经***(CNS)输入，并组合下泌尿系功能。CNS的作用是复杂的，并且没有被完全理解，然而可以认为副交感神经、交感神经和体神经促使维持自制中所涉及的主要结构的活动。排尿(撒尿)的生理作用很复杂；然而基本上应该理解失禁的病因和治疗。由于尿通过输尿管进入膀胱，所以逼尿肌扩张而使得膀胱膨胀。由于膀胱装入尿，所以膀胱壁内的扩张受体受到刺激，从而得到关于膀胱内尿量的大脑信息。当膀胱体积较小时，交感神经***受到刺激，并且副交感神经***受到抑制，从而使得内部***收缩并且逼尿肌舒张。当膀胱被装满并需要排尿时，从大脑来的抑制信号被刺激副交感神经***从而使得逼尿肌收缩、抑制交感神经***从而使得内部***舒张的兴奋所代替。然后膀胱内压升到超过尿道内阻力的值，从而尿流出膀胱。一旦膀胱排空，那么大脑再次发送使得副交感神经受抑制、交感神经受刺激的兴奋，这样逼尿肌舒张、内部***收缩。膀胱也再次易于装尿。因此，由于下泌尿系涉及多种CNS***，所以通常难于预测药物和疾病的影响。
不同类型的尿道功能障碍表现出不同的症状。例如，排尿困难包括尿频、遗尿和尿急，并可由膀胱炎、***炎、良性***肥大(BPH)或神经性疾病引起。遗尿指尿在晚上或睡眠中无意流出。
确定出尿道功能障碍的类型和病因后，可以进行治疗，各种治疗包括行为性、手术和/或药理治疗技术。行为治疗可以包括肌肉锻炼、调节时间或吸取的流体量、和/或及时排空。然而，这种方法取决于动机，并且在某些情况下如公共机构中取决于负责管理失禁患者的看护员。
手术可以医治某些疾病，如阻塞、***增大、骨盆肌弱化，但手术被认为是最后考虑的手段，这是因手术伴随有固有的并发症。
药物治疗更常被用作尿道功能障碍防止技术，而代替行为治疗和手术。已经使用了各种治疗药物，包括：α-肾上腺素促效药，如去甲麻黄碱和伪麻黄碱；抗胆碱药，如奥昔布宁、丙胺太林、双环维林和托特罗定；α-肾上腺素拮抗剂，如哌唑嗪、特拉唑嗪和多沙唑嗪；及三环抗抑郁剂。然而，这些药物并不是对所有患者有效。更重要的是，这些药物的副作用(如口干、恶心、失眠、虚弱和/或疲劳)会防碍治疗或使患者产生抵触。此外，疾病态或与其它药物的相反作用会禁忌这些化合物的使用，或需要较小剂量而不能有效地防止尿道功能障碍。
因此，目前的药物治疗不能成功地解决这些与尿道功能障碍相关的问题。由此，本领域持续寻找改进的治疗尿道功能障碍的药剂，其能够方便地使用而没有障碍，并且不会产生与现有治疗方法相关的问题。
发明概述
本发明的一个方面涉及通过给予需要这种治疗的受试者药物组合物来防止尿道功能障碍的方法，该药物组合物含有有效量的δ阿片受体促效药以降低尿道功能障碍的作用。该药物组合物还含有额外的活性药剂，已发现这些药剂可有效地治疗尿道功能障碍，尽管其具有某些副作用，例如α-肾上腺素促效药、抗胆碱药、α-肾上腺素拮抗剂及三环抗抑郁剂，从而这种剂量降低的额外活性药剂与δ阿片受体促效药组合使用可改善或者甚至消除这种副作用，或因组合而得到其它的协同作用。
本发明的另一方面涉及一种降低尿道功能障碍作用的方法，该方法包括：给予该受试者药物组合物，该药物组合物含有有效量的δ阿片受体促效药，该促效药选自：
Figure C03810492D00151
及其药学上可接受的盐和酯。
本发明的另一方面涉及一种降低尿道功能障碍作用的方法，该方法包括：给予该受试者有效量的至少一种下式化合物：
Figure C03810492D00161
其中：Ar1是含有选自碳、氮、氧和硫原子的5-或6-元碳环或杂环芳香环，可以包括苯硫基、噻唑基、呋喃基、吡咯基、苯基或吡啶基，并且在其第一个碳原子上具有取代基Y，在其第二个环碳上具有取代基R1，
Y选自：
氢；
卤素；
C1-C6烷基、C2-C6链烯基、C2-C6炔基；
C1-C6卤代烷基；
C1-C6烷氧基；
C3-C6环烷氧基；
式SR8的硫化物，其中R8是C1-C6烷基、C2-C6链烯基、C2-C6炔基、C3-C6环烷基、具有C5-C10芳基部分和C1-C6烷基部分的芳烷基、或C5-C10芳基；
式SOR8的亚砜，其中R8与上述相同；
式SO2R8的砜，其中R8与上述相同；
腈；
C1-C6酰基；
式NHCO2R8的烷氧羰氨基(氨基甲酰基)，其中R8与上述相同；
羧酸或其酯、酰胺或盐；
式CH2NR9R10的氨甲基，其中R9和R10可相同或不同，并可以是氢、C1-C6烷基、C2-C6链烯基、C2-C6炔基、C2-C6羟烷基、C2-C6甲氧烷基、C3-C6环烷基或C5-C10芳基，或R9和R10一起形成5或6个原子的环，该环原子选自N和C；
式CONR9R10的碳酰胺，其中R9和R10与上述相同，或其C2-C30肽共轭物；及
式SO2NR9R10的磺酰胺，其中R9和R10与上述相同；
G是碳或氮；
R1是氢、卤素或C1-C4烷基、C2-C4链烯基、C2-C4炔基；
R3、R4和R5可相同或不同，并独立地选自氢和甲基，其中R3、R4或R5中的至少一个不是氢，条件是甲基的总个数不超过2，R3、R4和R5中的任何两个可形成1～3个碳原子的桥；
R6选自：
氢；
C1-C6烷基、C2-C6链烯基、C2-C6炔基；
C3-C6环烷基；
具有C5-C10芳基部分和C1-C6烷基部分的芳烷基；
具有C1-C4烷氧基和C1-C4烷基部分的烷氧烷基；
C2-C4氰烷基；
C2-C4羟烷基；
具有C1-C4烷基部分的氨羰烷基；及
R12COR13，其中R12是C1-C4亚烷基，R13是C1-C4烷基或C1-C4烷氧基或羟基，
或R6是
Figure C03810492D00171
Ar2是含有选自碳、氮、氧和硫原子的5-或6-元碳环或杂环芳香环，并且在其碳原子上具有取代基X，
其中X选自卤素(氟、溴、氯、碘)、氢、羟基和其酯、羧基和其酯；
羧基C1-C4烷基和其酯；羧酸、烷氧基、羟甲基和其酯；及氨基、其碳酰胺和磺酰胺；及其药学上可接受的盐。
出乎意料地是，上述不含有用羟基或甲基化的羟基取代的酚环的化合物对于治疗尿道问题是有效的，即使用羟基取代的酚环被认为是肽和非肽配体的关键药效团而用于识别δ-阿片受体并产生生理作用。Liao等(1998)，J.Med.Chem.，41，4767-4776。
在本发明进一个方面中，提供药物组合物以实施本发明的方法。在一个实施方案中，该药物组合物含有有效量的至少一种δ阿片受体促效药、其药学上可接受的盐和酯，并组合有药学上可接受的载体和可选择地用于尿道功能障碍的额外活性药剂，该促效药选自：
Figure C03810492D00191
该额外的活性药剂包括但不限于：α-肾上腺素促效药，如去甲麻黄碱和伪麻黄碱；抗胆碱药，如奥昔布宁、丙胺太林、双环维林和托特罗定；α-肾上腺素拮抗剂，如哌唑嗪、特拉唑嗪和多沙唑嗪；及三环抗抑郁剂。
其它类型的成分也可混合在该组合物中，例如赋形剂、表面活性剂、防腐剂、稳定剂、螯合剂等，这对于药物组合物制剂和药物传输领域中的所属技术人员来讲是可以理解的。
药物组合物的给予可以在预定的剂量方案内进行，从而使δ阿片受体促效药可有效地治疗下泌尿系功能障碍。
药物组合物的传输可通过任何能够有效减轻尿道功能障碍的给予途径来进行，包括但不限于口服、直肠、***、外用、舌下、粘膜、鼻内、眼睛、皮下、肌肉内、静脉内、皮肤、脊髓、鞘内、关节内、动脉内、蛛网膜下、蛛网膜内、子宫内、支气管内、淋巴内、尿道内、肺腔注射和尿道栓剂给药。
本发明的另一方面涉及一种用于治疗尿道功能障碍例如遗尿、失禁、或尿痛的试剂盒，其中该试剂盒包括本文所述的δ阿片受体促效药，例如药学上可接受的盐或酯形式，其中提供有效量的该阿片受体促效药以降低尿道功能障碍的作用。该试剂盒也可包括关于给药、剂量频率、患者应遵守的禁忌等的书面说明，其置于试剂盒容器中，如传送和/或存储容器。
从下面的说明书和所附的权利要求书中可更清楚本发明的其它方面、特征和实施方案。
附图简要说明
图1A、B和C总结了本发明示例性的δ阿片受体促效药的δ阿片受体亲合性。
图2A、B和C总结了通过静脉注射给予的本发明示例性的δ阿片受体促效药的两种尿动力学参数的膀胱内压评估结果。
图3总结了通过口服给予的本发明示例性的δ阿片受体促效药的两种尿动力学参数的膀胱内压评估结果。
图4表明经历部分尿道限制的受试动物的膀胱内压迹线及口服给予本发明化合物1的影响。迹线1a、1c；2a，2c；和3a，3c表明膀胱收缩和排空频率引起的排尿压力变化。迹线1b，1d；2b，2d；和3b，3d表明收集在盒子中的排空体积。
发明详细说明及其优选的实施方案
以下面引述的美国专利的全部内容作为参考：
Chang等，美国专利5,552,404，1996年9月3日公布；
Chang等，美国专利5,574,159，1996年11月12日公布；
Chang等，美国专利5,658,908，1997年8月19日公布；
Chang等，美国专利5,681,830，1997年10月28日公布；
Chang等，美国专利5,854,249，1998年12月29日公布；
Chang等，美国专利5,807,858，1998年9月15日公布；
Chang等，美国专利5,985,880，1999年11月16日公布；及
Chang等，美国专利6,300,332，2001年10月9日公布。
δ阿片受体存在于包括人在内的多种物种的中枢和***神经***中。δ阿片受体被认为在多种身体功能中起作用，如循环和疼痛***、免疫调节作用和和胃肠疾病。
促效药是与δ阿片受体结合从而通过产生药理反应来影响生化和/或生理途径的药剂。阿片受体活动的主要神经作用之一是阻隔断神经传递素的释放，如乙酰胆碱和去甲肾上腺素。尽管不希望限于任何特定的作用机理，但是可以认为用本发明公开的特定的δ阿片受体促效药之一活化δ阿片受体最终导致在副交感神经末端的乙酰胆碱的释放，从而防止肌肉收缩而使撒尿同时延迟。
定义
在详细说明本发明之前，可以理解本发明不限于特定的药物传输***。也可以理解本文所用的术语仅用于阐明特定的实施方案，而不是用来限制。
在说明和要求保护本发明中，下面的术语具有下面所述的定义。
本文所用的＂皮肤＂传输包括皮肤(或＂经皮＂)及经粘膜给药，即使药物通过皮肤或粘膜组织传输进血流。
本文所用的＂外用给药＂指外用药物或药学上的活性药剂传输至皮肤或粘膜。
本文所用的＂载体＂或＂赋形剂＂指适于药物给予的载体材料。有用的载体和赋形剂包括任何这种本领域公知的材料，例如任何液体、凝胶、溶剂、液体稀释剂、稳定剂等，它们是非毒性的，并不与组合物的其它成分以有害的方式相互作用。
本文所用的用于治疗尿道疾病的化合物的＂有效量＂是指可引起这种疾病的至少一种症状或参数得到改善的量。
用于治疗尿道功能障碍的δ阿片受体促效药
在本发明的方法中，有效量的δ阿片受体促效药被给予至患有或易患有尿道功能障碍的受试者。在第一实施方案中，适合的δ阿片受体促效药包括下面的化合物：
Figure C03810492D00231
4-((α-S)-α-((2S，5R)-2，5-二甲基-4-(3-氟苄基)-1-哌嗪基)苄基)-N，N-二乙基苯甲酰胺
Figure C03810492D00232
4-((α-S)-α-((2S，5R)-2，5-二甲基-4-(4-氟苄基)-1-哌嗪基)苄基)-N，N-二乙基苯甲酰胺
Figure C03810492D00233
3-((α-R)-α-((2S，5R)-4-烯丙基-2，5-二甲基-1-哌嗪基)-4-(二乙基氨基羰基)苄基)苯氧乙酸
Figure C03810492D00234
3-((α-S)-α-((2S，5R)-4-烯丙基-2，5-二甲基-1-哌嗪基)苄基)-N-(3-氟苯基)-N-甲基苯甲酰胺
Figure C03810492D00241
3-((α-R)-α-((2S，5R)-2，5-二甲基-4-(2-甲基-4-噻唑基甲基)-1-哌嗪基)-3-羟基苄基)-N-(3-氟苯基)-N-甲基苯甲酰胺
Figure C03810492D00242
3-((α-R)-α-((2S，5R)-2，5-二甲基-4-(3-氟丙基)-1-哌嗪基)-3-羟基苄基)-N-(3-氟苯基)-N-甲基苯甲酰胺
Figure C03810492D00243
3-((S)-((2S，5R)-4-烯丙基-2，5-二甲基-1-哌嗪基)(2-甲基苯基)甲基)苯酚
Figure C03810492D00244
4-((α-S)-α-((2S，5R)-4-(4-溴苄基)-2，5-二甲基-1-哌嗪基)苄基)-N，N-二乙基苯甲酰胺
Figure C03810492D00251
N-(3-氟苯基)-N-甲基-3-((哌啶-4-亚基)(3-羟基苯基)甲基)-苯甲酰胺
3-((S)-((2S，5R)-2，5-二甲基-1-哌嗪基)(2-甲基苯基)-甲基)苯酚
4-{4-[(R)-(4-二甲基氨磺酰基-苯基)-(3-羟基苯基)-甲基]-(2S，5R)-二甲基-哌嗪-1-甲基}-苯甲酸
Figure C03810492D00254
N，N-二乙基-3-((R)-((2S，5R)-2，5-二甲基-4-(哌啶-4-甲基)哌嗪基-1-)(3-羟基苯基)甲基)苯甲酰胺
及其药学上可接受的盐、酯和活性代谢物。这种化合物的组和物也预期包括在本发明的范围内。
δ阿片受体促效药也可以其酰胺或前药和/或组合物的形式给予。活性药剂的盐、酯、酰胺和前药可使用合成有机化学领域的所属技术人员公知的标准方法进行制备，其公开在例如J.March，Advanced有机Chemistry：Reactions，Mechanisms and Structure，4th Ed.(New York：Wiley-Interscience，1992)中。例如，酸加成盐可使用常规方法从自由碱来制备(通常其中药物的中性形式包括中性-NH2基团)，这包括与适合的酸反应。一般地，活性药剂的碱性形式可以溶解在极性有机溶剂中，例如甲醇或乙醇，而酸被加入其中。生成的盐或者沉淀，或者通过加入少量的极性溶剂而从溶液中析出。用于制备酸加成盐的适合酸包括有机酸例如乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、苹果酸、丙二酸、琥珀酸、马来酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、肉桂酸、苦杏仁酸、甲基磺酸、乙基磺酸、p-甲苯磺酸、水杨酸等，及无机酸例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等。通过用适合的碱处理，酸加成盐可以转化成自由碱。反之，在活性药剂上的酸部分的碱性盐的制备可通过相似方式使用药学上可接受的碱如氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化铵、氢氧化钙、三甲胺等来制备。
药学上可接受的盐的实例包括衍生于适合碱如碱金属(例如钠、钾)、碱土金属(例如钙、镁)、铵和NR’4 +(其中R′是C1-C4烷基)的盐。药学上可接受的氨基盐包括有机羧酸盐，如乙酸盐、乳酸盐、酒石酸盐、苹果酸盐、乳糖酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐；有机磺酸盐，如甲基磺酸盐、乙基磺酸盐、羟乙基磺酸盐、苯磺酸盐和对甲苯磺酸盐；及无机酸盐，如盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、磷酸盐和氨基磺酸盐。具有羟基的化合物的药学上可接受的盐由这种化合物的阴离子与适合的阳离子如Na+、NH4 +、或NR’4 +(其中R′例如是C1-4烷基)结合而成。
酯的制备包括功能化δ阿片受体促效药中的羟基和/或羧基功能化。羟基酯通常是自由醇的酰基取代的衍生物，即衍生于式RCOOH的羧酸，其中R是烷基，并优选是低级烷基。酯可在需要时通过常规的水解过程再转化成自由酸。药学上可接受的酯的实例包括本发明化合物中的羟基的羧酸酯，其中酯的羧酸部分中的非羰基部分选自直链或支链烷基(例如正丙基、叔丁基、正丁基)、烷氧烷基(例如甲氧基甲基)、芳烷基(例如苄基)、芳氧烷基(例如苯氧甲基)和芳基(例如，苯基)；烷基-，芳基-或芳基烷基磺酰基(例如甲基磺酰基)；氨基酸酯(例如L-缬氨酸酯或L-异亮氨酯)；二羧酸酯(例如半琥珀酸酯)；碳酸酯(例如乙氧羰基酯)；氨基甲酸酯(例如二甲基氨基羰基酯、(2-氨基乙基)氨基羰基酯)；及无机酸酯(例如单、二或三磷酸酯)。在药物分子结构中的羧基的酯通常可从C1-C4醇(例如乙醇、丙醇)或芳烷基醇(例如苄醇)来制备。酰胺和前药也可按相似的方式来制备。
δ阿片受体促效药的其它衍生物和类似物可使用合成有机化学领域所属技术人员公知的常规技术来进行制备，或可参照相关文献来制备。此外，手性活性药剂可以是纯异构体形式，或它们可作为异构体的外消旋混合物形式来给药。
药物制剂及给药方式：
本发明的制剂包括适于口服、鼻内、外用(包括口腔和舌下)、直肠、***和/或肠胃外给药的那些。取决于想用的给药方式，药物组合物可以是固体、半固体或液体剂量形式，例如片剂、栓剂、药丸、胶囊、软弹性凝胶胶囊、粉末、液体、悬浮液、霜剂、药膏、洗液等，优选的是单位剂形适于单次精确给药。组合物包括有效量的δ阿片受体促效药及需要时的药学上可接受的载体，此外也可包括其它药剂、佐剂、稀释剂、缓冲剂等。给于的活性药剂的量应取决于受治疗的受试者、受试者的体重、给药方式及诊断医生的判断。
尿道疾病及其症状包括尿急、尿频、失禁、尿漏、遗尿、尿痛、尿缓及难于排空膀胱。额外的参数是尿体积。用于治疗这种疾病的δ阿片受体促效药的有效量可通过本领域中的实验来确定，如建立多种剂量和频率，并与实验单元作比较。可以理解任何临床上或统计显著性的任何症状或不利方面的削弱都在本发明的范围内。临床上显著性削弱指患者和/或医生可察觉到这一现象。
单个患者可以同时患有几种尿痛症状，如尿急和尿频，它们均可通过本发明的方法来降低。在失禁的情况下，尿频的降低或不希望通过的尿体积的降低都被认为是治疗方法的有益作用。
可与载体材料混合以产生单次剂量形式的δ阿片受体促效药的量优选是可有效治疗尿道疾病的量。一般地，δ阿片受体促效药的量约为总制剂重量的1％～99％，优选约为5％～70％，最优选约为10％～30％。给予的δ阿片受体促效药的量还取决于受治疗的受试者、受试者的体重、给药方式及诊断医生的判断。
对于固体组合物而言，常规非毒性的固体载体包括例如药物级甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、糖精钠、滑石、纤维素、葡萄糖、蔗糖、碳酸镁等。液体药物给予组合物可以例如通常将本文所述的活性化合物和可选择的药物佐剂在赋形剂例如水、盐水、水性葡萄糖、甘油、乙醇等中溶解、分散等来制备，从而形成溶液或悬浮液。需要时，被给予的药物组合物也可含有少量的非毒性的辅助物质，如润湿剂或乳化剂、pH缓冲剂等，例如乙酸钠、单月桂酸山梨聚糖酯、三乙醇胺乙酸钠、三乙醇胺油酸盐等。实际上制备这种剂形的方法对本领域所属技术人员是公知或清楚的；例如，参见Remington：the Science andPractice of Pharmacy，19th Ed.(Easton，Pa.：Mack Publishing Co.，1995)。
对于口服给药，组合物通常是片剂或胶囊形式，或可以是水性或非水溶液、悬浮液或糖浆形式。片剂和胶囊是优选的口服给药形式。口服用的片剂和胶囊一般包括一种或多种常用的载体，如乳糖和玉米淀粉。通常也可加入润滑剂，如硬脂酸镁。当使用液体悬浮液时，本发明的δ受体促效药可与乳化剂或悬浮剂混合。需要时也可加入香味剂、着色剂和/或甜味剂。其它可选择地加到口服制剂中的成分包括但不限于防腐剂、悬浮剂、增稠剂等。
如果使用肠胃外给药，那么通常使用注射。注射的制剂可制成常规形式，如液体溶液或悬浮液，在注射前适于溶解或悬浮在液体中的固体形式，或乳化液。优选地，使用适合的载体、分散剂或润湿剂及悬浮剂根据本领域公知的技术配制无菌注射悬浮液。无菌注射制剂也可以是非毒性肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌注射溶液或悬浮液。可以使用的可接受的载体和溶剂是水、Ringer′s溶液和等渗压氯化钠溶液。此外，无菌固定油、脂肪酯或多元醇也常用作溶剂或悬浮介质。肠胃外给药另一种可选择的途径是使用较低释放或持续释放***，从而可保持恒定的剂量水平。
活性药剂可通过适于尿道药物传输的药物制剂来给予。这种制剂含有一种或多种选定的载体或赋形剂，如水、硅树脂、蜡、凡士林油、聚乙二醇(＂PEG＂)、丙二醇(＂PG＂)、脂质体、糖如甘露醇和乳糖和/或各种其它的材料，特别优选的是聚乙二醇及其衍生物。
优选的是传输剂型的本发明化合物，其可提供可控制或持续释放δ阿片受体促效药。在这种情况下，剂型通常包括可生物相容、可生物降解材料，通常是可生物降解的聚合物。这种聚合物的实例包括聚酯、聚烷基氰基丙烯酸酯、聚原酸酯、聚酸酐、白蛋白、凝胶和淀粉。这些和其它的聚合物可被用来提供可生物降解的微粒，其能够控制和持续释放药物，从而最小化所需要的剂量频率。
本发明的化合物也可通过皮肤或粘膜组织使用常规皮肤药物传输***来传输，即皮肤＂贴片＂，其中本发明的组合物通常包含在用作药物传输装置被粘贴于身体表面上的层压结构内。在这种结构中，药物组合物通常包含在用于构成上方支持层下面的层或＂存储器＂中。这种层压装置可以含有一个存储器，或者其也可含有多个存储器。在一个实施方案中，存储器包括药学上可接受的接触粘合材料的聚合基质，其用于在药物传输中将***粘合到皮肤上。适合的皮肤接触粘合材料的实例包括但不限于聚乙烯、聚硅氧烷、聚异丁烯、聚丙烯酸酯、聚氨酯等。可选择地，含有存储器和皮肤接触粘合剂的活性药剂以分离层和不同层存在，并且粘合剂在存储器之下，在这种情况下其可以是上述的聚合基质或可以是液体或凝胶存储器，或者也可以采用其它形式。层压层中的支持层用作这种装置的上表面，并构成层压结构的基本结构元件，从而可使装置具有柔软性。选定用作支持层的材料对于活性药剂和存在的任何其它基本上是不渗透的。
可选择地，本发明的药物组合物可以栓剂形式来直肠给药。这些可通过将药剂与适合的无刺激性赋形剂混合来制备，这种赋形剂在室温下是固体，但是在直肠温度下是液体，因而会在直肠中熔化，从而释放药物。这种材料包括可可油、蜂蜡和聚乙二醇。栓剂的重量通常约为1mg～50mg。然而，本领域所属技术人员可以理解栓剂的大小可以随活性药剂的功效、组合物的性质和其它因素而变化。
本发明的药物组合物也可以鼻内气溶胶或吸入给药。鼻内喷雾制剂包括活性化合物的纯化水溶液，其含有防腐剂和等渗压试剂。这种制剂优选被调节到与鼻内粘膜相容的pH和等渗压态。这种组合物可根据药物制剂领域中公知的技术来制备，并可制成盐水溶液，同时应用苄醇或其它适合的防腐剂、吸收促进剂以增强生物可用性、促进剂如氟碳或氮和/或其它常规稳定剂或分散剂。
本发明的δ阿片受体促效药可制备成用于外用药物输送的制剂，如药膏和霜剂。药膏是半固体制剂，其通常以矿脂或其它的矿脂衍生物为基础。含有选定的δ阿片受体促效药的霜剂在本领域是公知的粘性液体或半固体乳状液，或是水包油或是油包水。霜剂是可水洗的，并含有油相、乳化剂和水相。油相有时也称为＂内部＂相，其通常由矿脂和脂肪醇如十六烷基或十八烷基醇组成；水相尽管通常不是必须的，但其体积超过油相，并通常含有保湿剂。霜剂中的乳化剂通常是非离子、阴离子、阳离子或两性表面活性剂。本领域所属技术人员可以理解，特定的药膏或霜剂可使活性药剂的传输最优化。对于其它载体或赋形剂而言，药膏应该是惰性、稳定、非刺激性和非敏感性的。
眼用制剂可按与鼻内喷雾相似的方法来制备，除了pH和等渗压因素优选调节到适合眼用。
在某些应用中，优选使用“向量化”形式的活性药剂，如在脂质体或其它密封介质中封装活性药剂，或固定活性药剂，例如在适合的生物分子(如选自蛋白、脂蛋白、糖蛋白和多糖)上共价结合、螯合或结合配位。
除了本发明的δ阿片受体促效药外，上述药物制剂还可含有一种或多种药物活性药剂，其中额外的活性药剂曾被用于治疗尿道功能障碍，其剂量与通常没有本发明的δ阿片受体促效药存在下的给予量相比较低，从而可改善或者甚至消除额外的活性药剂的常见副作用。额外的药物活性药剂可以包括但不限于伪麻黄素、麻黄素、去甲麻黄碱、哌唑嗪、多沙唑嗪、特拉唑嗪、抗组胺剂、三环抗抑郁剂、奥昔布宁、丙胺太林、托特罗定、盐酸双环维林、消炎痛、巴氯芬、***、丙咪嗪、洛沃克、thiroidazine、氟哌啶醇、苯托品、羟哌氟丙嗪、特布他林、普萘洛林、异搏定、甲基多巴、利血平、胍乙啶和镇静剂。
本发明所预期的δ阿片受体促效药包括示意性表明的那些及其生理功能性衍生物。＂生理功能性衍生物＂指上述化合物的药学上可接受的盐、醚、酯或者醚或酯的盐，或任何其它的化合物，其中经给药至受者其能够提供(直接或间接)所述的化合物或其活性代谢物或残渣。
当然，所给予的δ阿片受体促效药的量、所用的剂量方案取决于所选定的特定δ阿片受体促效药、欲治疗的受试者的年龄和一般条件、受试者患病的严重度及诊断医生的判断。一般地，治疗用的本发明化合物的有效剂量可在很大范围内变化，这取决于所涉及到的特定疾病，在本领域中很容易确定本发明化合物的适合治疗剂量对于所述的组合物在每种疾病中得到治疗效果，优选地10微克(μg)～500毫克(mg)/千克受者体重/天，更优选为50μg～75mg/千克体重/天，最优选为1mg～50mg/千克体重/天。在一天内所需的剂量可以按适合的时间间隔分一次、二次、三次、四次、五次、六次或更多次分剂量给予。
给药的方式和剂量形式当然影响化合物的治疗量，对于给定的治疗应用这是所需要和有效的。例如，对于同样的活性成分而言，口服给药剂量通常至少为肠胃外给药方法中所用的剂量水平的两倍，例如2-10倍。在口服给药中，本发明化合物的剂量水平可以为5-200mg/70kg体重/天。在片剂形式时，通常活性药剂的剂量水平为10-100mg/片。
一般地，当局部给药时日剂量小于全身给药方式的剂量，通常δ阿片受体促效药每天给药1至4次。可选择地，较大的原始装填剂量可被用来得到δ阿片受体促效药的有效水平，并可用较小的剂量保持那种水平。取决于δ阿片受体促效药的半衰期和选定的给药途径的适用性，可以调节剂量方案以得到满意的治疗尿道疾病结果。
试剂盒
本发明也包括患者用试剂盒，用于实施治疗下泌尿系功能障碍的本发明方法。试剂盒含有欲给予的药物组合物和/或用于给予药物组合物的装置(例如经尿道药物输送装置，如注射器、皮肤贴片等)、用于在存储过程中和使用前容纳组合物和/或传输装置并优选是密封的容器及用于以有效方式实施给药的说明。制剂可由单位剂型的本发明δ阿片受体促效药组成。试剂盒可以含有相同药剂的不同剂量的多种制剂。说明可以是书面形式或图片形式，或可置于记录介质上，包括磁带和录相带等。
可以理解尽管已结合具体实施方案说明了本发明，但上前述说明及下面的实施例仅用于说明而不是限制本发明。本发明范围内的其它方面、优点和变化对于本发明领域所属技术人员是明显的。下面的实例阐明合成本发明化合物的优选步骤。
除非另有所指，所有的化学试剂均购于Aldrich ChemicalCompany，Milwaukee，Wisconsin。使用商业溶剂而未经进一步纯化。在磁场强度为200～600MHz的不同仪器上得到NMR谱。用Waters液相色谱***进行HPLC分析，其安装有717+自动取样器、600E***控制器和996光电二极管检测器。使用化学电离(CI)、电子喷雾(ES)或快速原子轰击(FAB)仪器进行质谱分析。在用硅胶GF(250微米)预涂覆的E.Merck玻璃片是进行分析性薄层色谱。使用AtlanticMicrolab，Norcross，Georgia进行元素分析。
实施例1
4-((α-S)-α-((2S，5R)-2，5-二甲基-4-(3-氟苄基)-1-哌嗪基)苄基)-N，N-二乙基苯甲酰胺
4-甲酸基-N，N-二乙基苯甲酰胺[4-(N，N-二乙基氨基甲酰基)苯甲醛]
将4-羧基苯甲醛(100.3g，0.67mol)溶解/悬浮在甲苯(1200mL)中，加入二甲基甲酰胺(0.15mL)，搅拌悬浮液，同时滴加亚硫酰二氯(53.5mL，87.2g，0.73mol)。在氮气中将反应混合物加热至回流，搅拌2h，在此期间内将醛酸但不是所有的加到溶液中。再加入亚硫酰二氯(20mL，32.6g，0.27mol)，持续回流过夜。蒸发透明的反应混合物，在无水四氢呋喃(1500mL)中溶解残渣。将溶液在冰/水浴中冷却，将二乙胺(173mL，122g，1.67mol(2.5当量))滴加到搅拌的溶液中。除去冰浴，持续搅拌2.5h。过滤反应混合物，除去白色晶体盐酸二乙胺副产物。晶体用乙酸乙酯(2×600mL)洗涤，放置洗液。蒸发四氢呋喃滤液，将残渣溶解在乙酸乙酯洗液中。随后用1M盐酸(2×600mL)、水(2×300mL)、稀释的碳酸钠溶液(饱和：H2O，1：1，2×600mL)、水(2×300mL)和饱和氯化钠溶液(300mL)洗涤。分离有机层，用无水硫酸钠干燥，蒸发，得标题化合物，淡褐色油，使用时未经进一步纯化。(产率115.7g，84％)。
4-((α-S)-α-((2S，5R)-4-烯丙基-2，5-二甲基-1-哌嗪基)苄基)-N，N-二乙基苯甲酰胺
在氮气中将4-甲酸基-N，N-二乙基苯甲酰胺(51.3g，250mmol)、苯并***(29.8g，250mmol)和(-)-(2R，5S)-1-烯丙基-2，5-二甲基哌嗪(38.6g，250mmol，Chirotech Division of Dow Pharma，Cambridge，UK)的甲苯(2500mL)溶液加热回流2.5h，同时共沸除水。在此过程中通过Dean/Stark汽水阀逐渐除去甲苯，直至反应混合物残余体积减至约700-800mL。用无水四氢呋喃(1000mL)稀释溶液，在冰/异丙醇浴中冷却至～0℃，并在氮气中搅拌，同时于～20min内通过大口双尖针加入苯基溴化镁(四氢呋喃中1.0M，500mL，500mmol)。在加入过程中，几乎立即形成镁盐的悬浮液，但没有稠至会防碍有效搅拌。开始时悬浮液是黄赭色，直到加入约三分之二的格氏试剂时，反应混合物快速变至红棕色。除去冰浴，将悬浮液在环境温度下搅拌1.5h，然后用饱和氯化铵水溶液(125mL)猝灭反应。搅拌黄色悬浮液30min，加入无水氯化镁(125g)。将悬浮液再搅拌1小时，并过滤。滤饼用四氢呋喃(400mL)洗涤，合并滤液和洗液，蒸发至棕色油。将残渣在乙酸乙酯(2500mL)和氢氧化钠水溶液(1.0M，1000mL)间分配。分离有机层，依次用1MNaOH(3×1000mL)、水(3×1200mL)和饱和氯化钠水溶液(750mL)洗涤。将乙酸乙酯(75mL)加至部分结晶的悬浮液中，从而在黑色的母液中得到浅色的晶体稠浆。过滤悬浮液，固体用少量冷的乙酸乙酯洗涤，并在室温下真空干燥，得到轻度反白固体(38.31g)。黑色滤液和洗液蒸发成黑色油，再次静置部分结晶。残渣用乙酸乙酯(20mL)研磨，过滤得淡黄色晶体(4.04g)。总产量42.35g(40.4％)。1H NMR((CD3)2SO，500MHz)；δ 0.94(d，J＝6.2Hz，3H)；1.09(d，J＝6.2Hz，3H，部分被br m，6H遮住)；1.80(m，1H)；2.09(dd，J＝11，7Hz，1H)；2.50(br m，1H，部分被DMSO遮住)；2.72(dd，J＝11，2.8Hz，1H)；2.84(dd，J＝14，7Hz，1H)；3.16(dd，J＝14，5.2Hz，1H)；3.28(br m，3H)；5.10(s，1H)，被5.09(d，J＝10.6Hz，1H)部分重叠；5.16(dd，J＝17，1.4Hz，1H)；5.79(m，1H)；7.28(m，5H)；7.38(m，2H)；7.42(d，J＝8Hz，2H)。
4-((α-S)-α-((2S，5R)-2，5-二甲基-1-哌嗪基)苄基)-N，N-二乙基苯甲酰胺
在氮气中将双(二亚苄基丙酮)钯(1.438g，2.5mmol，Acros Organics)和1，4-双(二苯基膦基)丁烷(1.066g，2.5mmol，Acros Organics)的四氢呋喃(20mL)溶液在室温下搅拌15min，然后用注射器加到在氮气中搅拌的4-((α-S)-α-((2S，5R)-4-烯丙基-2，5-二甲基-1-哌嗪基)苄基)-N，N-二乙基苯甲酰胺(20.98g，50mmol)和硫代水杨酸(9.25g，60mmol)的无水四氢呋喃(100mL)溶液中。在氮气中于室温下搅拌反应混合物2h，蒸发至干，将残渣溶解在乙酸乙酯(120mL)中，用醚(300mL)稀释。溶液用稀释的碳酸钠溶液(饱和：H2O，1∶3，3×200mL)洗涤。有机溶液用戊烷(800mL)稀释，用3M盐酸(5×40mL)、然后1M盐酸(3×50mL，与水(3×50mL)交替)萃取。合并水性萃取物，过滤除去少量的悬浮固体，用5M NaOH将pH调节至12。用二氯甲烷(3×150mL)萃取得到的油状悬浮液。合并有机萃取物，用无水硫酸钠干燥，蒸发至干，得到4-((α-S)-α-((2S，5R)-2，5-二甲基-1-哌嗪基)苄基)-N，N-二乙基苯甲酰胺淡黄色固体(18.07g，97.8％)。产物在薄层色谱(硅胶，EM60F254，乙酸乙酯中4％ NH4OH/10％ EtOH，Rf＝0.25)表现为单点，使用时未经进一步纯化。C24H33N3O 0.2H2O：计算值C，75.24；H，8.79；N，10.97。理论值C，75.24；H，8.87；N，10.86％。1H NMR(CDCl3，600MHz)；δ 0.93(d，J＝6.3Hz，3H)；1.12(br m，3H)；1.20(d，J＝6.1Hz，3H)；1.24(br m，3H)；1.55(dd，J＝9.7，11.3Hz，1H，部分被br m，2H遮住)；2.33(m，1H)；2.68(m，2H)；2.89(m，1H)；2.92(dd，J＝12.1，3.1Hz，1H)；3.29(brm，2H)；3.54(br m，2H)；5.38(s，1H)；7.14(m，2H)；7.30(m，3H)；7.35(m，2H)；7.46(d，J＝7.8Hz，2H)。
4-((α-S)-α-((2S，5R)-2，5-二甲基-4-(3-氟苄基)-1-哌嗪基)苄基)-N，N-二乙基苯甲酰胺
将4-((α-S)-α-((2S，5R)-2，5-二甲基-1-哌嗪基)苄基)-N，N-二乙基苯甲酰胺(9.128g，24.05mmol)的乙腈(150mL)溶液加到碘化钠(360mg，2.4mmol)中，在氮气中搅拌，同时加入三乙胺(12mL，8.76g，86.6mmol)，然后加入3-氟苄基溴(5.9mL，9.09g，48.1mmol)。加入氟苄基溴后立即出现混浊，1小时后稠化成白色晶体。在氮气中于室温下搅拌反应混合物过夜。蒸发除溶剂，向残渣中加入饱和碳酸氢钠溶液(25mL)。过滤收集到大量的白色沉淀，水洗，室温下真空干燥(10.54g，89.2％)。C31H38FN3O 0.2H2O：计算值C，75.79；H，7.88；N，8.55；F，3.87。理论值C，75.80；H，7.78；N，8.49；F，3.75％。
通过在250mL Erlenmeyer烧瓶中将产物搅拌下溶解在热的异丙醇(39mL)中并加热至微沸来重结晶。分批加入水，直至在微混的溶液(加入22mL水)持续观察到混浊。搅拌下将烧瓶冷却至室温，然后持续搅拌下用冰-水浴冷却1h。过滤收集晶体，用冷的2∶1的异丙醇/水洗涤，得到白色晶体(10.11g，96％)。C31H38FN3O：计算值C，76.35；H，7.85；N，8.62；F，3.90。理论值C，76.36；H，7.85；N，8.62；F，3.77％。1H NMR(CDCl3，300MHz)；δ 1.06(d，J＝6.1Hz，3H)；1.15(d，J＝6.1Hz，3H，部分被br m，3H重叠)；1.22(br m，3H)；1.94(dd，J＝10.8，8.1Hz，1H)；2.02(dd，J＝10.7，8.2Hz，1H)；2.57(br m，2H)；2.67(m，2H)；3.18(d，J＝13.8Hz，1H)；3.28(br m，2H)；3.53(br m，2H)；3.87(d，J＝13.5Hz，1H)；5.15(s，1H)；6.90(br t，J＝8.2Hz，1H)；7.04(m，2H)；7.21(m，3H)；7.30(m，5H)；7.46(d，J＝8.0Hz，2H)。
实施例2
从4-((α-S)-α-((2S，5R)-2，5-二甲基-1-哌嗪基)苄基)-N，N-二乙基苯甲酰胺(实施例1)和4-氟苄基溴按与实施例1相似的过程制备4-((α-S)-α-((2S，5R)-2，5-二甲基-4-(4-氟苄基)-1-哌嗪基)苄基)-N，N-二乙基苯甲酰胺。C31H38FN3O：计算值C，76.35；H，7.85；N，8.62；F，3.90。理论值C，76.32；H，7.86；N，8.60；F，3.95％。1H NMR(CDCl3，600MHz)；δ 1.07(d，J＝6.2Hz，3H)；1.10(d，J＝6.3Hz，3H，被br m，3H部分重叠)；1.23(br m，3H)；1.93(m，1H)；1.98(dd，J＝11.1，8.3Hz，1H)；2.54(br m，2H)；2.65(m，2H)；3.14(d，J＝13.1Hz，1H)；3.28(br m，2H)；3.54(br m，2H)；3.86(d，J＝13.1Hz，1H)；5.15(s，1H)；6.90(t，J＝8.2Hz，2H)；7.20(d，J＝7.3Hz，2H)；7.24(m，2H)；7.27(m，1H；被CDCl3部分重叠)；7.29(d，J＝9.4Hz，2H)；7.33(m，2H)；7.46(d，J＝8.1Hz，2H)。
实施例3
3-((α-R)-α-((2S，5R)-4-烯丙基-2，5-二甲基-1-哌嗪基)-4-(二乙基氨基羰基)苄基)苯氧乙酸
将3-溴苯酚(400g，2.31mol)、叔丁基氯二甲基硅烷(391g，2.54mol)和咪唑(346g，5.08mol)的5000mL二氯甲烷溶液在室温下搅拌过夜。将反应溶液倒入2000mL水中，分离各层。1N氢氧化钠水溶液(3×1500mL)和水(2×1500mL)洗涤有机层，然后通过硅胶垫(400g，二氧化硅60，230-400目)。用二氯甲烷(2×500mL)洗涤硅胶，合并滤液，减压除溶剂，得到669g(98.4％)的3-(溴苯氧基)-叔丁基二甲基硅烷，透明淡黄色液体。NMR(300MHz，CDCl3)：δ 0.2(s，6H)；1.0(s，9H)；6.75(m，1H)；7.0(br s，1H)；7.1(m，2H)。
通过回流下将3-溴苯氧基-叔丁基二甲基硅烷(27.3g，92.6mmol)和二溴乙烷(3.45g，18.4mmol)在100mL无抑制剂的无水四氢呋喃中的混合物缓慢加到镁屑(3.57g，147mmol)在无抑制剂的无水四氢呋喃中，形成3-叔丁基二甲基甲硅烷氧基苯基溴化镁。回流下搅拌1小时后，将浅棕色透明混合物冷却至室温。
将4-羧基苯甲醛(100.3g，0.67mol)溶解/悬浮在甲苯(1200mL)中，加入二甲基甲酰胺(0.15mL)，搅拌悬浮液，同时滴加亚硫酰二氯(53.5mL，87.2g，0.73mol)。在氮气中将反应混合物加热至回流，搅拌2h，在此期间内将醛酸但不是所有的加到溶液中。再加入亚硫酰二氯(20mL，32.6g，0.27mol)，持续回流过夜。蒸发透明的反应混合物，在无水四氢呋喃(1500mL)中溶解残渣。将溶液在冰/水浴中冷却，将二乙胺(173mL，122g，1.67mol(2.5当量))滴加到搅拌的溶液中。除去冰浴，持续搅拌2.5h。过滤反应混合物，除去白色晶体盐酸二乙胺副产物。结晶用乙酸乙酯(2×600mL)洗涤，放置洗液。蒸发四氢呋喃滤液，将残渣溶解在乙酸乙酯洗液中。随后用1M盐酸(2×600mL)、水(2×300mL)、稀释的碳酸钠溶液(饱和：H2O，1∶1，2×600mL)、水(2×300mL)和饱和氯化钠溶液(300mL)洗涤。分离有机层，用无水硫酸钠干燥，蒸发，得4-甲酸基-N，N-二乙基苯甲酰胺，淡褐色油，使用时未经进一步纯化。(产率115.7g，84％)。
在安有冷凝器和Dean-Stark汽水阀的1000mL圆底烧瓶中加入4-甲酸基-N，N-二乙基苯甲酰胺(9.50g，46.3mmol)、苯并***(5.51g，46.3mmol)、(2R，5S)-1-烯丙基-2，5-二甲基哌嗪(7.15g，46.3mmol，Chirotech Division of Dow Pharma，Cambridge，England)及400mL甲苯。在氮气中加热回流反应，直至在汽水阀中没有观察到额外的水(约2小时)。将反应冷却至室温，真空浓缩至体积剩约50mL。在氮气中将无水四氢呋喃(100mL)加到烧瓶中，同时搅拌以溶解所有残渣。在室温下通过双头针将苯并***加成物的溶液加到3-叔丁基二甲基甲硅烷氧基苯基溴化镁的溶液中(上述的)。搅拌2小时后，通过加入20mL饱和氯化铵水溶液猝灭反应。加入无水硫酸镁，并过滤反应物。真空除溶剂，在800mL乙酸乙酯中再次溶解残渣。用4×200mL的1M氢氧化钠、200mL的水、200mL的饱和氯化钠水溶液洗涤乙酸乙酯溶液。有机层用无水硫酸镁干燥，除去溶剂，得32.7g黑色油。将油溶解在250mL四氢呋喃和250mL的3M盐酸中，并在室温下搅拌2小时。用3×250mL的2∶1的***/乙酸乙酯萃取反应溶液。将乙酸乙酯(300mL)加到水层中，用氢氧化钠水溶液将pH调节至8。分离各层，水部分用3×300mL的乙酸乙酯萃取。合并有机萃取物，用饱和氯化钠水溶液洗涤，用无水硫酸钠干燥，真空除溶剂，得到12.4g棕色残渣。残渣用300g的硅胶色谱纯化，用含1-15％乙醇的二氯甲烷梯度洗脱，得到5.54g的4-((α-R)-α-((2S，5R)-4-烯丙基-2，5-二甲基-1-哌嗪基)-3-羟基苄基)-N，N-二乙基苯甲酰胺，无色胶(按4-甲酸基-N，N-二乙基苯甲酰胺计为27％)。
用无水四氢呋喃(2×5mL)洗涤氢化钠(分散在油中60％，250mg(150mg NaH，6.25mmol))，加入无水四氢呋喃(10mL)作为上清液。在搅拌的悬浮液中溶解4-((α-R)-α-((2S，5R)-4-烯丙基-2，5-二甲基-1-哌嗪基)-3-羟基苄基)-N，N-二乙基苯甲酰胺(435mg，1.0mmol)，当沸腾平息时，加入碘化钠(15mg，0.1mmol)。在氮气中将氯乙酸甲酯(350mL，434mg，4mmol)加到搅拌的悬浮液中，在环境温度下搅拌反应过夜。通过通入二氧化碳气体(从干冰得到)部分中和反应混合物，然后加入冰乙酸，直至通过湿指示带测量的悬浮液的pH为5。将反应混合物蒸发至干，将残渣在乙酸乙酯(10mL)和1M HCl(5mL)间分配。用1MHCl(2×3mL)萃取有机层，用饱和碳酸钠溶液将合并的酸性萃取物的pH调节至8。用乙酸乙酯(3×10mL)萃取油状水性悬浮液，用无水硫酸钠干燥合并的有机萃取物。将溶液蒸发至黄色胶。将残渣溶解在乙酸乙酯中，并加到(4×15cm)硅胶Biotage柱上，用含10％乙醇的乙酸乙酯洗脱。含有产物的馏分用t.l.c.(二氧化硅，EM60F254，含10％ EtOH的EtOAc，Rf＝0.52)检测，蒸发至干，室温2mmHg下干燥，得到3-((α-R)-α-((2S，5R)-4-烯丙基-2，5-二甲基-1-哌嗪基)-4-(二乙基氨基羰基)苄基)苯氧基乙酸甲酯，无色透明淡黄色胶。将残渣溶解在乙醇(4mL)和氢氧化钠水溶液(2.5M，1.0mL，2.5mmol)中，并在室温下搅拌6h。蒸发溶液除去大量的乙醇，加入水(5mL)。持续蒸发直至剩余约4mL溶液。再加入8mL水，蒸发溶液至约一半体积，以确保完全除去乙醇。过滤除去少量的悬浮固体，用3MHCl将溶液的pH调节至6。将溶液蒸发至干，用无水乙醇蒸发残渣几次以确保除去水。用乙醇(3×20mL)萃取残渣，合并乙醇萃取物，过滤，蒸发至干。用乙酸乙酯(5mL)研磨胶状残渣，过滤，蒸发，高真空下干燥，得到3-((α-R)-α-((2S，5R)-4-烯丙基-2，5-二甲基-1-哌嗪基)-4-(二乙基氨基羰基)苄基)苯氧乙酸，易碎白色泡沫(52mg，9.5％)。C29H39N3O4 0.9 NaCl 0.5H2O：计算值C，63.45；H，7.20；N，7.65。理论值C，63.83；H，7.19；N，7.25％；1H NMR(在D2O中0.1M NaOD，300MHz)；δ 0.86(d，J＝6.3Hz，3H)；0.94(t，J＝7.1Hz，3H)；1.01(d，J＝6.1Hz，3H)；1.09(t，J＝7.2Hz，3H)；1.81(t，J＝11.3Hz，1H)；2.09(t，J＝11.2Hz，1H)；2.43(m，2H)；2.73(m，3H)；3.13(q，J＝7.1Hz，2H)；3.25(dd，J＝13.5，5.8Hz，1H)；3.38(q，J＝7.2Hz，2H)；4.32(s，2H)；5.09(s，1H)：5.14(d，J＝7.8Hz，1H)；5.24(s，1H)；5.74(m，1H)；6.73(s，1H)；6.80(s，2H)；7.21(m，3H)；7.32(d，J＝8.2Hz，2H)。质谱：(ESI-，-5KV，MeOH)；m/z：493，(m+，25％)；492.5，((M-1)+，100％)。
实施例4
3-((α-S)-α-((2R，5S)-4-烯丙基-2，5-二甲基-1-哌嗪基)-苄基)-N-(3-氟苯基)-N-甲基苯甲酰胺
使用改进的还原氨化法从3-氟苯胺制备3-氟-N-甲基苯胺。首先，在40℃下将37％的甲醛水溶液以1∶1比例加到苯并***中来制备1-羟甲基苯并***，然后冷却至室温以沉淀产物。过滤后，将羟甲基苯并***(125g)在含有3-氟苯胺(92.2g)的甲苯中加热至回流。使用Dean-Stark汽水阀共沸除水。3小时后，将混合物冷却至室温，然后冷冻几小时以完全沉淀。滤掉白色结晶固体，得到174.2g(86.6％)的1-(3-氟苯胺基)甲基)-1H-苯并***。
在干四氢呋喃中将1-(3-氟苯胺基)甲基)-1H-苯并***(173.9g)调成浆。在室温下将硼氢化钠(32.5g)分批加到混合物中。加毕后，将混合物回流4小时。然后冷却溶液，倒入含有冰的400mL 5N HCl中。在室温下搅拌1小时。然后用10N氢氧化钠溶液将溶液pH调节至9-10。用***萃取产物。用1N氢氧化钠溶液洗涤醚萃取物，然后用饱和氯化钠溶液洗涤。有机相用硫酸钠干燥，过滤，然后减压下蒸发，得到87.5g(97％)的3-氟-N-甲基苯胺，无色油。[NMR(200MHz，DMSO-d6)：δ 2.76(s，3H)；3.41(br s，1H)；6.59-6.92(m，3H)；7.27(q，J＝8.0HZ，1H)]。在色谱中，将油溶解在***中，用醚HCl沉淀，同时剧烈搅拌。过滤白色固体，用醚洗涤，然后用热乙醇：乙酸乙酯/～1：30重结晶。盐酸盐比自由碱更稳定和易于处理。
在80mL干甲苯、亚硫酰二氯(7mL，96mmol)和5滴DMF中将3-羧基苯甲醛(Fluka；12.01g，80mmol)调成浆。在烧瓶上放置带有硫酸钙干燥管的回流冷凝器。溶液变透明后，将混合物回流1小时，然后冷却。除去挥发物。用真空泵方便地抽吸残渣。
在150mL干四氢呋喃中溶解粗酸氯化物，并在冰/水浴中冷却。加入N-甲基-3-氟苯胺盐酸盐(13.05g，80.8mmol)。然后用加料漏斗滴加50mL干四氢呋喃中的三乙胺(35mL，250mmol)。1小时内将混浊溶液升至室温，然后搅拌过夜。为除去大量的沉淀物，加入100mL***，过滤反应混合物。用更多的醚洗涤盐后，减压除溶剂。残渣用乙酸乙酯萃取，用1N HCl洗涤两次，然后用水、碳酸钠溶液、饱和NaCl溶液洗涤。用硫酸钠/硫酸镁干燥有机层，减压蒸发除溶剂。得到粗N-(3-氟苯基)-3-甲酸基-N-甲基苯甲酰胺，浅金色油，19.92g(96％，未经色谱产率)[NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ 3.38(s，3H)；6.94-7.02(m，2H)；7.18-7.29(m，2H)；7.46(t，J＝7.7Hz，1H)；7.55(d，J＝7.6Hz，1H)；7.81(m，2H)；9.90(s，1H)]。
将2R，5S-1-烯丙基-2，5-二甲基哌嗪(3.30g，21.4mmol，ChirotechDivision of Dow Pharma，Cambridge，England)、苯并***(2.58g，21.6mmol)、N-(3-氟苯基)-3-甲酸基-N-甲基苯甲酰胺(5.51g，21.4mmol)混合在175mL干甲苯中，并加入一滴三乙胺。将混合物置于油浴中，保持在120-130℃(浴温度)。将烧瓶安上Dean-Stark汽水阀，以允许共沸除水。在氮气中将混合物回流2-3小时，收集～150mL的甲苯/水共沸物。减压除去剩余的甲苯。由于加成物的水敏感性，所以琥珀/黄色油粗物质可用于随后的反应中。
上述的粗苯并***加成物溶解于100mL四氢呋喃中，并通过双头针加到40mL的1M苯基溴化镁的四氢呋喃(40mmol)中。反应轻微放热，然后转变成黄棕色混浊溶液。在氮气中于室温下搅拌2小时后，反应用5mL饱和氯化铵溶液猝灭。搅拌约半小时，加入过量的无水硫酸镁。减压下过滤浓缩溶液，得到含有苯并***的粗产物。将残渣溶解在150mL乙酸乙酯和100mL***中，用1M NaOH溶液(4×100mL)萃取除去苯并***。有机层用2N HCl溶液(2×75mL)萃取。合并酸性萃取物，用25％的NaOH水溶液调节至pH2.5，用乙酸乙酯萃取(3×75mL)，弃去水性部分。合并有机萃取物，然后用1M NaOH溶液调节至pH9，分离。用饱和氯化钠溶液洗涤后，用硫酸钠/硫酸镁干燥，减压除乙酸乙酯。用硅胶色谱(EtOAc+2％ NH4OH/CH2Cl2)纯化残渣油，得到2.03g(4.3mmol)的目标产物，琥珀/橙色树脂。1HNMR(300MHz，CDCl3)：δ 7.10-7.38(m，8H)，6.97(br dd，J～7.5Hz，2H)，6.83-6.89(m，1H)，6.76(br d，J-7.8Hz，2H)，5.76-5.93(m，1H)，5.19(d，J＝12.6Hz，1H)，5.16(d，J＝5.4Hz，1H)，5.08(s，1H)，3.48(s，3H)，3.37(dd，J＝6.0，14.4Hz，1H)，2.84(dd，J＝8.1，8.1Hz，1H)，2.77(dd，J-3.0，11.4Hz，1H)，2.44-2.56(m，1H)，2.38(br d，J～9.3Hz，2H)，2.06(t，J＝10.5Hz，1H)，1.67-1.80(m，2H)，1.10(d，J＝6.0Hz，3H)，0.96(d，J＝6.0Hz，3H)。
C30H34FN3O，0.25 C4H8O2：计算值C，75.43；H，7.35；N，8.51；F，3.85％。理论值：C，75.47；H，7.38；N，8.34；F，3.70％。该物质可转化成盐酸盐，并用CH2Cl2/Et2O沉淀成粉末状浅棕褐色固体。C30H34FN3O 2.0 HCl 0.3C4H10O 0.03 CH2Cl2：计算值C，65.89；H，6.92；N，7.38；C1，12.83％。理论值：C，65.75；H，7.03；N，7.13；C1，12.76％。
实施例5
3-((α-R)-α-((2S，5R)-2，5-二甲基-4-(2-甲基-4-噻唑基甲基)-1-哌嗪基)-3-羟基苄基)-N-(3-氟苯基)-N-甲基苯甲酰胺
使用改进的还原氨化法从3-氟苯胺制备3-氟-N-甲基苯胺。首先，在40℃下将37％的甲醛水溶液以1∶1比例加到苯并***中来制备1-羟甲基苯并***，然后冷却至室温以沉淀产物。过滤后，将羟甲基苯并***(125g)在含有3-氟苯胺(92.2g)的甲苯中加热至回流。使用Dean-Stark汽水阀共沸除水。3小时后，将混合物冷却至室温，然后冷冻几小时以完全沉淀。滤掉白色结晶固体，得到174.2g(86.6％)的1-(3-氟苯胺基)甲基)-1H-苯并***。
在干四氢呋喃中将1-(3-氟苯胺基)甲基)-1H-苯并***(173.9g)调成浆。在室温下将硼氢化钠(32.5g)分批加到混合物中。加毕后，将混合物回流4小时。然后冷却溶液，倒入含有冰的400mL 5NHCl中。在室温下搅拌1小时。然后用10N氢氧化钠溶液将溶液pH调节至9-10。用***萃取产物。用1N氢氧化钠溶液洗涤醚萃取物，然后用饱和氯化钠溶液洗涤。有机相用硫酸钠干燥，过滤，然后减压下蒸发，得到87.5g(97％)的3-氟-N-甲基苯胺，无色油。[NMR(200MHz，DMSO-d6)：δ 2.76(s，3H)；3.41(br.s，1H)；6.59-6.92(m，3H)；7.27(q，J＝8.0HZ，1H)]。在色谱中，将油溶解在***中，用醚HCl沉淀，同时剧烈搅拌。过滤白色固体，用醚洗涤，然后用热乙醇：乙酸乙酯/～1：30重结晶。盐酸盐比自由碱更稳定和易于处理。
在80mL干甲苯、亚硫酰二氯(7mL，96mmol)和5滴DMF中将3-羧基苯甲醛(Fluka；12.01g，80mmol)调成浆。在烧瓶上放置带有硫酸钙干燥管的回流冷凝器。溶液变透明后，将混合物回流1小时，然后冷却。除去挥发物。用真空泵方便地抽吸残渣。在150mL干四氢呋喃中溶解粗酸氯化物，并在冰/水浴中冷却。加入N-甲基-3-氟苯胺盐酸盐(13.05g，80.8mmol)。然后用加料漏斗滴加50mL干四氢呋喃中的三乙胺(35mL，250mmol)。1小时内将混浊溶液升至室温，然后搅拌过夜。为除去大量的沉淀物，加入100mL***，过滤反应混合物。用更多的醚洗涤盐后，减压除溶剂。残渣用乙酸乙酯萃取，用1N HCl洗涤两次，然后用水、碳酸钠溶液、饱和NaCl溶液洗涤。用硫酸钠/硫酸镁干燥有机层，减压蒸发除溶剂。得到粗N-(3-氟苯基)-3-甲酸基-N-甲基苯甲酰胺，浅金色油，19.92g(96％，未经色谱产率)[NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ 3.38(s，3H)；6.94-7.02(m，2H)；7.18-7.29(m，2H)；7.46(t，J＝7.7Hz，1H)；7.55(d，J＝7.6Hz，1H)；7.81(m，2H)；9.90(s，1H)]。
将2R，5S-1-烯丙基-2，5-二甲基哌嗪(1.28g，8.3mmol，ChirotechDivision of Dow Pharma，Cambridge，England)、苯并***(1.00g，8.3mmol)、N-(3-氟苯基)-3-甲酸基-N-甲基苯甲酰胺(2.14g，8.3mmol)混合在100mL干甲苯中，并加入一滴三乙胺。将混合物置于油浴中，保持在120-130℃(浴温度)。将烧瓶安上Dean-Stark汽水阀，以允许共沸除水。在氮气中将混合物回流2-3小时，收集～75mL的甲苯/水共沸物。减压除去剩余的甲苯。由于加成物的水敏感性，所以琥珀/黄色油粗物质可用于随后的反应中。
将3-溴苯酚(8.65g，50mmol)、叔丁基氯二甲基硅烷(7.97g，51.8mmol)和咪唑(8.85g，130mmol)的70mL无水二甲基甲酰胺溶液在室温下搅拌过夜。减压浓缩反应混合物后，将残渣溶解在200mL***中，用250mL的水萃取两次，用饱和氯化钠溶液洗涤。醚萃取物用硫酸钠/硫酸镁干燥，减压除溶剂。用硅胶短柱(3.5×10cm)色谱化淡黄色液体，用戊烷洗脱。合并所需要的馏分，除去溶剂，得到12.78g(89％)的3-(溴苯氧基)-叔丁基二甲基硅烷，透明液体。NMR(300MHz，CDCl3)：δ 0.2(s，6H)；1.0(s，9H)；6.75(m，1H)；7.0(br s，1H)；7.1(m，2H)。
将3-(溴苯氧基)-叔丁基二甲基硅烷(4.21g，14.6mmol，1.76当量)的溶液溶解在干四氢呋喃(30mL)中，在氮气中冷却至-75℃。剧烈搅拌溶液，用注射器将正丁基锂的己烷溶液(9.1mL，1.6M的溶液，14.5mmol，1.75当量)缓慢加到溶液中。在75℃下搅拌40分钟后，用双头针将溶液转移至烧瓶中，其中含有溴化镁醚化物在无水四氢呋喃(50mL)中的悬浮液(4.37g，16.9mmol，2.03当量)，并在室温下搅拌1小时。接下来，将粗苯并***加成物(用上述的2R，5S-1-烯丙基-2，5-二甲基哌嗪形成)溶解在10mL的四氢呋喃中，并用双头针加到新制的芳基溴化镁试剂中。反应轻微放热，然后转变成黄棕色混浊溶液。在氮气中于室温下搅拌2小时后，反应用3-4mL饱和氯化铵溶液猝灭。搅拌约半小时，加入过量的无水硫酸镁。减压下过滤浓缩溶液，得到含有苯并***副产物的粗甲硅烷基醚。将残渣溶解在乙酸乙酯中，用10％NaOH水溶液萃取三次除去苯并***。有机层用饱和氯化钠溶液洗涤，用硫酸钠/硫酸镁干燥，减压除乙酸乙酯。
通过在室温下在40mL的四氢呋喃中溶解残渣并加入40mL的3NHCl水溶液来除去叔丁基二甲基甲硅烷基保护基。加入酸后溶液升温。在室温下搅拌混合物90分钟。减压浓缩反应以除去大部分有机溶剂。在水和***：乙酸乙酯/3∶2的溶液之间分配残渣。酸性层用***：乙酸乙酯/3∶2的溶液萃取两次。用NaOH水溶液将水层调节至pH＝2，此时保持混浊，并开始沉淀出黑色油。加入二氯甲烷(～100mL)，并剧烈搅拌。分离，水层再次用过量的二氯甲烷洗涤。合并有机萃取物，用水分配，剧烈搅拌下用NaOH水溶液调节至pH＝9。然后分离，水层再次用过量的二氯甲烷洗涤。合并萃取物，用硫酸钠/硫酸镁干燥，减压蒸发溶剂。粗物质用硅胶柱色谱化(约20-25g硅胶/克粗物质)，首先用二氯甲烷洗脱，然后用含20％乙酸乙酯的二氯甲烷洗脱以除去少量的极性杂质。然后用含2％氢氧化铵(溶液A)、梯度为二氯甲烷(溶液B)的乙酸乙酯溶液洗脱柱子，极性很快从25％到达100％(B中的溶液A)。合并目标馏分，减压除溶剂，得到非对映异构体的10∶1混合物，粗产率60％。
通过将非对映异构体的混合物溶解在热乙酸乙酯(2-3mL/g物质)中，分批加入己烷(乙酸乙酯体积的两倍)，同时保持溶液是热的结晶产物。搅拌下将溶液逐渐冷却24小时，得到1.78g的(+)-3-((α-R)-α-((2S，5R)-4-烯丙基-2，5-二甲基-1-哌嗪基)-3-羟基苄基)-N-(3-氟苯基)-N-甲基苯甲酰胺，反白色结晶固体(m.p.＝144-145℃)。NMR(200MHz，DMSO-d6)：δ 0.84(d，J＝6.0Hz，3H)；0.97(d，J＝5.9Hz，3H)；1.69(dd，J1＝7.7Hz，J2＝10.7Hz，1H)；2.01(dd，J1＝7.4Hz，J2＝10.7Hz，1H)；2.28(br.d，J＝8.3Hz，1H)；2.40-2.52(m，2H)；2.67(br d，J＝10.5Hz，1H)；2.82(dd，J1＝7.6Hz，J2＝13.2Hz，1H)；3.17(br.d，J＝14.0Hz，1H)；3.34(s，3H)；4.80(s，1H)；5.10(d，J＝10.1Hz，1H)；5.17(d，J＝17.3Hz，1H)；5.70-5.84(m，1H)；6.42(d，J＝7.1Hz，1H)；6.56(s，1H)；6.65(d，J＝8.3Hz，1H)；6.90-7.32(m，9H)；9.31(s，1H)。质谱(CI-CH4)m/z：488(m+1，100％)，334(39％)，153(87％)。[α]D 20＝+4.9°(无水乙醇，c＝1.2)。
在氮气中将(+)-3-((α-R)-α-((2S，5R)-4-烯丙基-2，5-二甲基-1-哌嗪基)-3-羟基苄基)-N-(3-氟苯基)-N-甲基苯甲酰胺(4.88g，10mmol)、N-苯基三氟甲烷-磺酰亚胺(3.82g，10.7mmol)和三乙胺(3.1mL，22mmol)溶解在75mL二氯甲烷中，并在室温下搅拌过夜。减压浓缩后，将残渣溶解在100mL乙酸乙酯中，用Na2CO3溶液(3×100mL)、水(1×100mL)和盐水(1×100mL)洗涤。溶液用(Na2SO4/MgSO4)干燥，减压浓缩。残余油用硅胶柱色谱纯化(EtOAc+2％ NH4OH/CH2Cl2)，得到6.1g(9.8mmol)的三氟甲烷磺酸酯，粘稠金黄色油。
通过Genet法[J.P.Genet，S.Lemaire-Audoire，M.Savignac，Tetrahedron Letters，36，1267-1270(1995)]在硫代水杨酸存在下使用Pd(dba)2/DPPB除去烯丙基部分。浓缩反应，将残渣溶解在50mL乙酸乙酯和100mL***中。用Na2CO3溶液(3×100mL)和水(1×100mL)洗涤后，用3N HCl(3×20mL)和1N HCl(1×20mL)萃取有机溶液。用NaOH溶液将酸性萃取物调节至pH8.5，用二氯甲烷(3×25mL)萃取。溶液用(Na2SO4/MgSO4)干燥，减压浓缩。残余油用硅胶柱色谱纯化(EtOAc+2％ NH4OH/CH2Cl2)，得到4.44g(7.6mmol)的3-((α-R)-α-((2S，5R)-2，5-二甲基-1-哌嗪基)-3-(三氟甲基磺酰氧基)苄基)-N-(3-氟苯基)-N-甲基苯甲酰胺，粘稠深琥珀橙色油。
将上述的自由胺(0.93g，1.6mmol)与无水碳酸钠粉末(1.39g，13.2mmol)、10mL无水乙腈、碘化钠(0.10g，0.67mmol)和4-氯甲基-2-甲基噻唑盐酸盐(0.34g，1.84mmol)混合。在氮气中于室温下将反应搅拌两天，然后减压浓缩。将残渣悬浮在15mL乙醇中，加入10mL的2N NaOH溶液，在室温下搅拌反应过夜。真空除去乙醇，在水和二氯甲烷间分配残渣。用6N HCl将溶液调节至pH8.5，分离，再次用二氯甲烷(2×25mL)萃取。溶液用(Na2SO4/MgSO4)干燥，减压浓缩。残余油用硅胶柱色谱纯化(EtOAc+2％ NH4OH/CH2Cl2)，得到0.71g(1.2mmol)的3-((α-R)-α-((2S，5R)-2，5-二甲基-4-(2-甲基-4-噻唑基甲基)-1-哌嗪基)-3-羟基苄基)-N-(3-氟苯基)-N-甲基苯甲酰胺，反白泡沫。1HNMR(300MHz，d6-DMSO)：δ 9.31(s，1H)，7.15-7.26(m，6H)，6.95-7.09(m，3H)，6.86(d，J＝7.9Hz，1H)，6.62(dd，J＝1.5，8.0Hz，1H)，6.52(s，1H)，6.38(d，J＝7.5Hz，1H)，4.81(s，1H)，3.70(d，J＝14.5Hz，1H)，3.47(d，J＝14.5Hz，1H)，3.31(s，3H)，2.67(br dd，J＝～9Hz，1H)，2.60(s，3H)，2.37-2.48(m，2H，部分被DMSO峰遮住)，2.27(br d，J＝～9Hz，1H)，2.05(dd，J＝8.4，10.9Hz，1H)，1.65(dd，J＝8.4，10.9Hz，1H)，0.96和0.94(重叠对d，J＝～7Hz，3H)。C32H35FN4O2S 0.30C4H8O20.07CH2Cl2：计算值C，67.60；H，6.40；N，9.48；F，3.21；S，5.42％。理论值：C，67.51；H，6.54；N，9.47；F，3.22；S，5.65％。这种物质被转化成盐酸盐，用EtOH/H2O冻干成蓬松的反白固体。C32H35FN4O2S1.0 HCl 0.85H2O：计算值C，62.96；H，6.22；N，9.18；S，5.25；Cl，5.81％。理论值：C，63.06；H，6.22；N，8.99；S，5.26；Cl，5.85％。
实施例6
3-((α-R)-α-((2S，5R)-2，5-二甲基-4-(3-氟丙基)-1-哌嗪基)-3-羟基苄基)-N-(3-氟苯基)-N-甲基苯甲酰胺
3-((α-R)-α-((2S，5R)-2，5-二甲基-1-哌嗪基)-3-(三氟甲基磺酰氧基)-苄基)-N-(3-氟苯基)-N-甲基苯甲酰胺(从实施例5得到，0.70g，1.2mmol)与无水碳酸钠粉末(0.65g，6.1mmol)、10mL无水乙腈、碘化钠(0.03g，0.2mmol)和1-溴-3-氟丙烷(0.12mL，1.3mmol)混合。在氮气中于室温下将反应搅拌三天，然后减压浓缩。将残渣悬浮在15mL乙醇中，加入10mL 10％w/v的NaOH水溶液，在室温下搅拌反应2小时。真空除去乙醇，在水和二氯甲烷间分配残渣。用3N HCl将溶液调节至pH8.5，分离，再次用二氯甲烷(2×15mL)萃取。溶液用(Na2SO4/MgSO4)干燥，减压浓缩。残余油用硅胶柱色谱纯化(EtOAc+2％NH4OH/CH2Cl2)，得到0.39g(0.77mmol)的目标产物，反白泡沫。1HNMR(600MHz，d6-DMSO)：δ 9.28(s，1H)，7.17-7.24(m，5H)，7.04-7.07(m，2H)，6.97(dt，J＝2.2，8.4Hz，1H)，6.88(dd，J＝1.2，8.0Hz，1H)，6.61(dd，J＝1.8，8.0Hz，1H)，6.55(s，1H)，6.41(d，J＝7.4Hz，1H)，4.74(br s，1H)，4.42(dt，J＝47.5，6.0Hz，2H)，3.30(s，3H)，2.70(dd，J＝2.9，11.0Hz，1H)，2.55-2.61(m，1H)，2.48-2.52(m，1H-被部分DMSO峰遮住)，2.38-2.42(m，1H)，2.26(br d，J～9.2Hz，1H)，2.19-2.24(m，1H)，2.00(dd，J＝7.3，10.8Hz，1H)，1.70-1.75(m，1H)，1.64-1.70(m，2H)，0.95(d，J＝6.2Hz，3H)，0.86(d，J＝6.2Hz，3H)。C30H35F2N3O2：计算值C，70.98；H，6.95；N，8.28；F，7.48％。理论值：C，70.78；H，7.23；N，8.19；F，7.24％。
实施例7
3-((S)-((2S，5R)-4-烯丙基-2，5-二甲基-1-哌嗪基)(2-甲基苯基)甲基)苯酚
将2R，5S-1-烯丙基-2，5-二甲基哌嗪(3.06g，20mmol，ChirotechDivision of Dow Pharma，Cambridge，England)、苯并***(2.38g，20mmol)和2-甲苯甲醛(2.40g，20mmol)混合在140mL干甲苯中。将混合物置于油浴中，保持在120-130℃(浴温度)。将烧瓶安上Dean-Stark汽水阀，以允许共沸除水。在氮气中将混合物回流2-2.5小时，收集～100mL的甲苯/水共沸物。减压除去剩余的甲苯。由于加成物的水敏感性，所以粗琥珀/黄色油粗物质可用于随后的反应中，而不用纯化。
将3-(溴苯氧基)-叔丁基二甲基硅烷(从实施例5得到，9.49g，33mmol)的溶液溶解在干四氢呋喃(50mL)中，在氮气中冷却至-75℃。剧烈搅拌溶液，用注射器将正丁基锂的己烷溶液(13mL，2.5M的溶液，32.5mmol)缓慢加到溶液中。在-75℃下搅拌45分钟后，用双头针将溶液转移至烧瓶中，其中含有溴化镁醚化物在无水四氢呋喃(100mL)中的悬浮液(9.55g，37mmol)，并在室温下搅拌1小时。接下来，将粗苯并***加成物(用上述的2R，5S-1-烯丙基-2，5-二甲基哌嗪和甲苯甲醛形成)溶解在50mL的四氢呋喃中，并用双头针加到新制的芳基溴化镁试剂中。反应轻微放热，然后转变成黄棕色混浊溶液。在氮气中于室温下搅拌2小时后，反应用5mL饱和氯化铵溶液猝灭。搅拌约5分钟，加入过量的无水硫酸镁。减压下过滤浓缩溶液，得到含有苯并***副产物的粗甲硅烷基醚。将残渣溶解在乙酸乙酯中，用1N NaOH水溶液(3×100mL)萃取除去苯并***。有机层用饱和氯化钠溶液洗涤，用硫酸钠/硫酸镁干燥，减压除乙酸乙酯。
将残渣溶解在50mL的无水乙腈并加入四乙氟化铵二水合物(6.21g，33.5mmol)来除去叔丁基二甲基甲硅烷基。在氮气中于室温下搅拌1小时后，浓缩反应，将残渣溶解在100mL乙酸乙酯中。用稀释的NaHCO3溶液(3×75mL)和水(1×50mL)萃取混合物。有机层用100mL***稀释，用10％柠檬酸溶液(5×20mL)萃取，直至不能再萃取到有色物质。合并水性萃取物，用50％ NaOH水溶液调节至pH8.5，用二氯甲烷(3×50mL)萃取。有机溶液用(Na2SO4/MgSO4)干燥，减压浓缩。残余固体用硅胶柱过滤(EtOAc+2％ NH4OH)，得到2.08g(5.93mmol)的二苯甲基立体异构体混合物，浅棕褐色固体。用酸乙酯/庚烷结晶，得到0.85g(2.42mmol)的3-((S)-((2S，5R)-4-烯丙基-2，5-二甲基-1-哌嗪基)(2-甲基苯基)甲基)苯酚，白色蓬松针状晶体。1H NMR(600MHz，d6-DMSO)：δ 9.25(s，1H)，7.58(d，J＝7.8Hz，1H)，7.17(dt，J＝2.0，7.2Hz，1H)，7.04-7.08(m，3H)，6.70(d，J＝7.7Hz，1H)，6.68(s，1H)，6.58(dd，J＝1.8，8.0Hz，1H)，5.73-5.80(m，1H)，5.15(dd，J＝1.7，17.2Hz，1H)，5.07(dd，J＝0.9，10.1Hz，1H)，4.90(s，1H)，3.10(dd，J＝5.3，13.9Hz，1H)，2.86(dd，J＝6.8，13.9Hz，1H)，2.75-2.78(m，1H)，2.69(dd，J＝3.1，11.1Hz，1H)，2.49-2.53(m，1H-部分被DMSO峰遮住)，2.19(s，3H)，2.06(dd，J＝6.1，11.1Hz，1H)，1.97(dd，J＝5.6，11.3Hz，1H)，0.98(d，J＝6.4Hz，3H)，0.92(d，J＝6.4Hz，3H)。C23H30N2O：计算值C，78.82；H，8.63；N，7.99％。理论值：C，78.89；H，8.67；N，8.09％。这种物质被转化成盐酸，用H2O冻干成蓬松的白色固体。C23H30N2O1.1HCl 0.35 H2O：计算值C，69.60；H，8.08；N，7.06；Cl，9.83％。理论值：C，69.57；H，8.05；N，6.93；Cl，9.77％。
实施例8
4-(α-S)-α-((2S，5R)-4-(4-溴苄基)-2，5-二甲基-1-哌嗪基)苄基)-N，N-二乙基苯甲酰胺
通过按与实施例1相似的方式用4-溴苄基溴烷基化4-((α-S)-α-((2S，5R)-2，5-二甲基-1-哌嗪基)苄基)-N，N-二乙基苯甲酰胺(从实施例1得到)制备标题化合物(产率89.87％)。C31H38BrN3O：计算值C，67.87；H，6.98；N，7.66；Br，14.57。理论值C，68.00；H，7.02；N，7.68；Br，14.44％。1H NMR(CDCl3，600MHz)；δ 1.06(d，J＝6.2Hz，3H)；1.10(d，J＝6.1Hz，3H，重叠br m，3H)；1.23(br m，3H)；1.94(brt，J＝9.4Hz，1H)；2.01(dd，J＝11.1，8.1Hz，1H)；2.54(m，2H)；2.65(d，J＝9.2Hz，2H)；3.13(d，J＝13.4Hz，1H)；3.27(br m，2H)；3.54(br m，2H)；3.83(d，J＝13.5Hz，1H)；5.15(s，1H)；7.17(d，J＝8.1Hz，2H)；7.21(d，J＝7.5Hz，2H)；7.27(d，J＝6.2Hz，1H，部分被CHCl3遮住)；7.29(d，J＝8.1Hz，2H)；7.32(br t，J＝7.4Hz，2H)；7.39(d，J＝8.3Hz，2H)；7.46(d，J＝8.1Hz，2H)。
实施例9
N-(3-氟苯基)-N-甲基-3-((哌啶-4-亚基)(3-羟基苯基)甲基)-苯甲酰胺
哌啶-4-羧酸乙酯(50g)、二碳酸二叔丁基酯(76.4g)和Na2CO3(64.4g)在H2O/THF(530mL/212mL)中的混合物回流2h。冷却至室温后，反应混合物用EtOAc(400mL×3)萃取。合并有机层，用水(500mL×1)和盐水(500mL×1)洗涤，用MgSO4干燥，浓缩，得到哌啶-1，4-二羧酸-叔丁基酯4-乙酯(85.6g)。1H NNM(600MHz，DMSO-d6)δ 4.04(q，2H，J＝7.0Hz)，3.81(m，2H)，2.80(bs，2H)，2.48(m，1H)，1.77(m，2H)，1.37(m，2H)，1.36(s，9H)，1.16(t，J＝7.0Hz)。
在20℃下向上述产物和NHMe(OMe)：HCl(48.6g)的干THF(650mL)混合物中加入i-PrMgCl(2.0M THF溶液，498.4mL，996.8mmol)。在-5℃下将得到的溶液搅拌2h，然后NH4Cl水溶液猝灭反应，用EtOAc(800mL×2)萃取。合并有机层，用盐水洗涤，用MgSO4干燥，浓缩，得到4-(N-甲氧基-N-甲基氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯(80.3g)。1H NMR(600MHz，CDCl3)δ 4.08(m，2H)，3.67(s，3H)，3.14(s，3H)，2.76(bs，3H)，1.63(m，4H)，1.41(s，9H)。
在氮气中于-75℃下向(3-溴苯氧基)-叔丁基二甲基硅烷(从实施例5得到，6.12g)的THF(120mL)溶液中缓慢加入正丁基锂(9.37mL，2.5M溶液)。15分钟后，滴加4-(N-甲氧基-N-甲基氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯(5.80g)的THF(10mL)溶液。在氮气中搅拌反应过夜，同时升至室温。通过缓慢加入NH4Cl水溶液(80mL)猝灭反应。用EtOAc(120mL)萃取生成的混合物。用水(80mL×3)和盐水(80mL×1)洗涤有机层，用Na2SO4干燥，浓缩，得到粗产物(9.13g)，经纯化得到纯4-[3-(叔丁基-二甲基硅氧烷基)苯甲酰基]哌啶-1-羧酸叔丁基酯(5.12g；57％)。1HNMR(600MHz，DMSO-d6)δ 7.60(d，1H，J＝8.0Hz)，7.41(dd，1H，J＝8.0，8.0Hz)，7.32(m，1H)，7.11(dd，1H，J＝8.0，2.5Hz)，3.94(m，2H)，3.57(m，1H)，2.90(bs，2H)，1.72(m，2H)，1.38(s，9H)，1.37(m，2H)，0.94(s，9H)，0.19(s，6H)。
在氮气中回流3-碘苯甲酸(15.0g)和SOCl2(120mL)的混合物1h。将溶液冷却至室温，用旋转蒸发仪浓缩除去SOCl2。残余的3-碘苯甲酰氯真空干燥2h，然后溶解在CHCl3(200mL)中，在氮气中于0℃下搅拌20分钟。向溶液中滴加3-氟苯基胺(6.72g)，然后加入Et3N(12.24g)。在氮气中于室温下搅拌过夜后，通过加入水(10mL)猝灭反应。用水(100mL×3)和盐水(100mL×1)洗涤得到的混合物，用Na2SO4干燥，浓缩，得到粗产物(19.8g)，用CHCl3重结晶得到纯N-(3-氟-苯基)-3-碘苯甲酰胺，白色固体(13.5g；71％)。1H NMR(600MHz，DMSO-d6)δ 10.47(s，1H)，8.27(s，1H)，7.94(m，2H)，7.71(m，1H)，7.53(m，1H)，7.40-7.32(m，2H)，6.93(m，1H)。
在氮气中于0℃下将氢化钠(1.11g，在矿物油中60％ NaH)加到CH3I(4.53g)和N-(3-氟苯基)-3-碘苯甲酰胺(7.26g)的DMF(120mL)溶液中。在0℃下搅拌5分钟后，在氮气中于室温下搅拌反应4h。通过缓慢加入饱和NH4Cl(120mL)水溶液，然后加入水(100mL)猝灭反应。用***(300mL×2)萃取混合物。合并醚层，用水(150mL×4)和盐水(150mL×1)洗涤，用Na2SO4干燥，浓缩，得到粗产物(7.56g)，用柱色谱纯化，得到N-(3-氟-苯基)-3-碘-N-甲基苯甲酰胺(5.88g；78％)。1HNMR(600MHz，DMSO-d6)δ 7.64(m，2H)，7.28(m，1H)，7.24(d，1H，J＝7.5Hz)，7.19(m，1H)，7.04-6.99(m，3H)，3.33(s，3H)。
在氮气中于-78℃下将正丁基锂(1.61mL，1.92M溶液；3.10mmol)一次性加到N-(3-氟苯基)-3-碘-N-甲基苯甲酰胺(1.0g；2.82mmol)和4-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)苯甲酰基]-哌啶-1-羧酸叔丁基酯(1.182g；2.82mmol)在THF(150mL)的混合物中。在氮气中搅拌反应过夜，同时升至室温。向反应混合物中加入饱和NH4Cl溶液(25mL)，然后加入25mL水。用醚(300mL×2)萃取混合物。醚层用水(200mL×2)和盐水(200mL×1)洗涤，用Na2SO4干燥，浓缩，得到2.03g粗产物，用硅胶柱色谱纯化，用含30％EtOAc的戊烷洗脱，得到4-([3-(叔丁基二甲基硅烷氧基)苯基]{3-[N-(3-氟苯基)-N-甲基氨基甲酰基]苯基}羟甲基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯(763mg；42％)。1H NMR(600MHz，DMSO-d6)δ7.34(bs，1H)，7.29(s，1H)，7.23-7.16(m，3H)，7.09(m，2H)，6.94(m，2H)，6.85(m，2H)，6.60(d，1H，J＝7.0Hz)，5.25(s，1H)，3.88(m，2H)，3.35(s，3H)，2.60(bs，2H)，2.34(m，1H)，1.37(s，9H)，1.36(m，2H)，1.16(m，2H)，0.91(s，9H)，0.12(s，6H)。
将4-([3-(叔丁基二甲基硅烷氧基)苯基]{3-[N-(3-氟苯基)-N-甲基-氨基甲酰基]苯基}羟甲基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯(3.59g)和对甲苯磺酸一水合物(3.5g)在苯(200mL)中的混合物在安装有Dean-Stark汽水阀的圆底烧瓶中回流过夜。将反应溶液冷却至室温。将饱和Na2CO3溶液(50mL)加到溶液中，然后加入100mL的H2O。用EtOAc(300mL)萃取得到的混合物。观察到固体在两层间移动。因此，将75mL 0.5M NaOH溶液加到混合物中。搅拌30分钟后，混合物变得透明。分离有机层和水层。水层用EtOAc(100mL×1)萃取。合并有机层，用水(75mL×2)和盐水(75mL×1)洗涤，用Na2SO4干燥，浓缩，得到4-([3-(叔丁基-二甲基硅烷氧基)苯基]{3-[N-(3-氟苯基)-N-甲基氨基甲酰基]苯基}-亚甲基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯(2.83g；粗)。粗产物的TLC和1H NMR表明了化合物的混合物，其显然包括不带N-Boc和/或O-TBDMS保护基的目标脱水产物。粗产物未经纯化而用于下步中。
将四氢呋喃(70mL)和3N HCl(50mL)加到上述的粗4-([3-(叔丁基二甲基硅烷氧基)苯基]{3-[N-(3-氟苯基)-N-甲基氨基甲酰基]苯基}-亚甲基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯(2.75g)中。得到的混合物在60℃下搅拌4h。将反应混合物冷却至室温，然后加入水(100mL)。得到的溶液用***(100mL×2)萃取。剩下的水层用10％ NaOH中和至pH≈9。此时水层变混浊。用正丁醇(100mL×3)萃取混浊的水混合物。合并正丁醇层，用水(75mL×2)和盐水(75mL×1)洗涤，用Na2SO4干燥，浓缩，得到粗产物(2.27g；粗)，经纯化得到N-(3-氟苯基)-3-[(3-羟基苯基)-哌啶-4-亚基-甲基]-N-甲基-苯甲酰胺(579mg)。1H NMR(600MHz，DMSO-d6)δ9.25(s，1H)，7.23(m，3H)，7.09(d，1H，J＝10.0Hz)，7.03(dd，1H，J＝8.0，8.0Hz)，6.96(ddd，1H，J＝8.5，8.5，2.5Hz)，6.92(m，2H)，6.85(s，1H)，6.56(dd，1H，J＝8.0，2.0Hz)，6.34(s，1H)，6.31(d，1H，J＝7.5Hz)，3.35(s，3H)，2.65(m，2H)，2.55(m，2H)，2.13(bs，1H)，2.07(m，2H)，1.72(m，2H)；理论值：C，72.87；H，6.51；N，5.86。计算值C，72.77；H，6.62；N，5.98。
实施例10
3-((S)-((2S，5R)-2，5-二甲基-1-哌嗪基)(2-甲基苯基)甲基)苯酚
通过Genet法[J.P.Genet，S.Lemaire-Audoire，M.Savignac，Tetrahedron Letters，36，1267-1270(1995)]在硫代水杨酸存在下使用Pd(dba)2/DPPB从3-((S)-((2S，5R)-4-烯丙基-2，5-二甲基-1-哌嗪基)(2-甲基苯基)甲基)苯酚(实施例7，1.07g，2.2mmol)除去烯丙基。浓缩反应，将残渣溶解在50mL乙酸乙酯和50mL***中。用Na2CO3溶液(2×50mL)和水(1×50mL)洗涤后，用3N HCl(4×20mL)萃取有机溶液。用50％NaOH水溶液将酸性萃取物调节至pH8.5，用二氯甲烷(3×25mL)萃取。溶液用(Na2SO4/MgSO4)干燥，减压浓缩。残余油用硅胶柱色谱纯化(EtOAc+2％ NH4OH)，得到0.54g(1.2mmol)的粘稠浅琥珀色油。
将上述的自由胺(0.50g，1.1mmol)悬浮在20mL乙醇中，加入10mL10％w/v NaOH水溶液，反应在室温下搅拌2小时。真空除去乙醇，将残渣在水和二氯甲烷间分配。用3N HCl将溶液调节至pH8.5，分离，再次用二氯甲烷(2×20mL)萃取。溶液用(Na2SO4/MgSO4)干燥，减压浓缩。从残余油得到目标产物0.39g(1.1mmol)，浅棕褐色泡沫。1HNMR(600MHz，d6-DMSO)：δ 9.28(br s，1H)，7.46(d，J＝7.8Hz，1H)，7.16(br t，J～7.4Hz，1H)，7.06-7.11(m，3H)，6.59-6.62(m，2H)，6.56(s，1H)，5.12(s，1H)，2.87(dd，J＝2.8，11.8Hz，1H)，2.73-2.78(m，1H)，2.56-2.62(m，1H)，2.47-2.50(m，1H-部分被DMSO峰遮住)，2.44(dd，J＝8.8，11.8Hz，1H)，2.11(s，3H)，1.74(dd，J＝8.7，11.3Hz，1H)，0.98(d，J＝6.4Hz，3H)，0.87(d，J＝6.4Hz，3H)。C20H26N2O 0.3 H2O 0.35 CH2 Cl2：计算值C，70.73；H，7.96；N，8.11％。理论值：C，70.78；H，7.87；N，8.08％。这种物质被转化成盐酸盐，用H2O冻干成蓬松的浅褐色/棕褐色固体。C20H26N2O 0.95 HCl 0.9 H2O：计算值C，66.49；H，8.02；N，7.75；Cl，9.32％。理论值：C，66.36；H，7.86；N，7.61；Cl，9.23％。
实施例11
4-(4-[(R)-(4-二甲基氨磺酰基苯基)-(3-羟基苯基)甲基]-(2S，5R)-二甲基-哌嗪-1-甲基)苯甲酸
在0℃下用漏斗将叔丁基二甲基氯硅烷(26.01g；172.56mmol)加到3-羟基苯甲醛(20.7g；164.35mmol)和咪唑(27.97g；410.9mmol)的CHCl3(300mL)溶液中。在氮气中搅拌反应过夜，同时升至室温。反应混合物用水(100mL×3)和盐水(100mL×1)洗涤，用Na2SO4干燥，浓缩，得到粗产物(29.56g)，用柱色谱纯化，用(i)戊烷和(ii)含3％ EtOAc的戊烷洗脱，得到3-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-苯甲醛(21g；54％)。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ 9.93(s，1H)，7.45(d，1H，J＝7.5Hz)，7.38(dd，1H，J＝7.5，7.5Hz)，7.31(d，1H，J＝1.0Hz)，7.09(1H，dd，J＝7.5，1.0Hz)，0.98(s，9H)，0.20(s，6H)。
在氮气中于0℃下将二甲基胺(100mL，2.0M THF溶液；200mmol)加到对碘苯磺酰氯(54.76g；181mmol)的吡啶(300mL)溶液中，然后加入N，N-二甲基氨基吡啶(15mg)。在氮气中搅拌反应两天，同时从0℃升至室温。将反应溶液倒入1.2升水中。目标产物从H2O/吡啶溶液中析出。过滤收集固体，用H2O(300mL×2)洗涤。将固体溶解在EtOAc(500mL)中。EtOAc溶液用5％ HCI(300mL×3)、水(300mL×2)和盐水(300mL×1)洗涤，用Na2SO4干燥，浓缩，得到4-碘-N，N-二甲基苯磺酰胺(49.46g；88％)，白色固体，其未经进一步纯化而用于下一步反应。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ 7.88(d，2H，J＝8.5Hz)，7.46(d，2H，J＝8.5Hz)，2.69(s，3H)。
4-{(R)-((2R，5S)-4-烯丙基-2，5-二甲基-哌嗪基-1)-[3-(叔丁基-二甲基硅烷氧基)-苯基]-甲基}-N，N-二甲基-苯磺酰胺
步骤1-制备亚胺盐中间体：向安装有Soxhlet萃取器(填充有分子筛)的3颈烧瓶中加入苯并***(618mg；5.19mmol)、3-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-苯甲醛(1.227g；5.19mmol)、(+)-(2S，5R)-1-烯丙基-2，5-二甲基哌嗪(961mg；6.23mmol)和甲苯(150mL)。在氮气中将溶液回流20h，冷却至室温。
步骤2-制备格氏试剂：在氮气中于室温下将异丙基氯化镁(6.91mL，2.0M THF溶液；13.82mmol)加到4-碘-N，N-二甲基-苯磺酰胺(4.3g；13.82mmol)的溶液中。搅拌20分钟后，反应混合物的TLC表明形成新点，起始原料消失。
步骤3-中间体反应：在氮气中于室温下35分钟内将步骤1的溶液用注射器滴加到步骤2制备的格氏试剂中，同时剧烈搅拌反应溶液。在氮气中于室温下搅拌反应过夜。通过加入饱和NH4Cl(10mL)水溶液猝灭反应。通过加入EtOAc(120mL)和水(120mL)稀释得到的混合物。用硅藻土垫过滤混浊的混合物。将滤液倒入分离漏斗中。分离有机层和水层。用10％ NaOH(75mL×4)萃取有机层，用水(100mL×3)和盐水(100mL×1)洗涤，用Na2SO4干燥，浓缩，得到粗产物，用硅胶柱纯化，通过CombiFlashTM Sq 16x(梯度：100％ CH2Cl2～含7％ MeOH的CH2Cl2)进行，得到4-{(R)-((2R，5S)-4-烯丙基-2，5-二甲基-哌嗪基-1)-[3-(叔丁基-二甲基硅烷氧基)-苯基]-甲基}-N，N-二甲基-苯磺酰胺(1.3g；45％)。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ 7.71(d，2H，J＝8.0Hz)，7.35(d，2H，J＝8.0Hz)，7.12(dd，1H，J＝8.0，8.0Hz)，6.92(s，1H)，6.84(d，1H，J＝8.0Hz)，6.71(d，1H，J＝8.0Hz)，5.82(1H，m)，5.23-5.11(m，3H)，3.35(dd，1H，J＝14.0，5.5Hz)，2.88(dd，1H，J＝14.0，8.0Hz)，2.82(dd，1H，J＝11.0，3.0Hz)，2.73(s，6H)，2.68(dd，1H，J＝11.0，2.5Hz)，2.55(m，2H)，2.16(dd，1H，J＝11.0，8.5Hz)，1.85(dd，1H，J＝11.0，9.0Hz)，1.18(d，3H，J＝6.0Hz)，1.01(d，3H，J＝6.0Hz)，0.96(s，9H)，0.17(s，3H)，0.16(s，3H)。
4-[(R)-((2R，5S)-4-烯丙基-2，5-二甲基哌嗪基-1)-(3-羟基-苯基)甲基]-N，N-二甲基苯磺酰胺
将盐酸(3M，7mL)加到4-{(R)-((2R，5S)-4-烯丙基-2，5-二甲基-哌嗪基-1)-[3-(叔丁基-二甲基硅烷氧基)-苯基]-甲基}-N，N-二甲基-苯磺酰胺(1.3g)的THF(15mL)溶液中。混合物在室温下搅拌过夜。将水(15mL)加到反应中。用***(25mL×3)萃取反应混合物。剩余的H2O层用10％NaOH中和至pH＝8-9，然后用EtOAc(30mL×3)萃取。合并EtOAc层，用水(20mL×3)和盐水(20mL×1)洗涤，用Na2SO4干燥，浓缩，得到0.83g粗产物。粗产物用硅胶柱色谱纯化，通过CombiFlashTM Sq 16x(梯度：100％ CH2Cl2～含7％ MeOH的CH2Cl2)进行，得到4-[(R)-((2R，5S)-4-烯丙基-2，5-二甲基哌嗪基-1)-(3-羟基-苯基)甲基]-N，N-二甲基苯磺酰胺(720mg；70％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ 7.71(d，2H，J＝8.5Hz)，7.35(d，2H，J＝8.5Hz)，7.14(dd，1H，J＝8.0，8.0Hz)，6.89(bs，1H)，6.85(d，1H，J＝8.0Hz)，6.68(d，1H，J＝8.0，2.5Hz)，5.83(1H，m)，5.24-5.12(m，3H)，3.32(dd，1H，J＝13.5，5.0Hz)，2.86(dd，1H，J＝13.5，8.0Hz)，2.78(dd，1H，J＝11.5，3.0Hz)，2.72(s，6H)，2.65(dd，1H，J＝11.0，2.5Hz)，2.51(m，2H)，2.14(dd，1H，J＝11.5，9.0Hz)，1.81(dd，1H，J＝11.0，9.5Hz)，1.16(d，3H，J＝6.0Hz)，0.98(d，3H，J＝6.0Hz)；MS(FAB，甘油)m/z：444(M++H)，290，153；理论值：C，58.32；H，6.66；N，8.18。计算值(C24H33N3O3S 0.8 CH2C12)：C，58.23；H，6.82；N，8.21。
在氮气中于室温下在10分钟内将双(二亚苄基丙酮)钯(199mg)加到1，4-双(二苯基膦基)丁烷(148mg)的THF(4mL)溶液中。然后用注射器将得到的Pd催化剂[J.P.Genet，S.Lemaire-Audoire，M.Savignac，Tetrahedron Letters，36，1267-1270(1995)]转移到4-[(R)-((2R，5S)-4-烯丙基-2，5-二甲基-哌嗪基-1)-(3-羟基-苯基)-甲基]-N，N-二甲基-苯磺酰胺(3.08g)和硫代水杨酸(1.28g)的THF(130mL)溶液中。在氮气中于室温下搅拌反应过夜。浓缩反应混合物，将EtOAc(350mL)加到剩余残渣中，然后加入1N HCI(300mL)。将得到的混合物倒入分离漏斗中。分离EtOAc层和酸性水层。用EtOAc(100mL×3)萃取酸性水层。用1NNaOH溶液将酸性水层中和至pH≈8。此时观察到固体从水溶液中析出。用EtOAc∶MEOH＝95∶5(200mL×4)萃取混浊的水混合物。合并有机层，用水(100mL×1)洗涤，用Na2SO4干燥，浓缩，得到2.46g粗产物，经纯化得到4-[(R)-(3-羟基苯基)-((2R，5S)-二甲基哌嗪基-1)-甲基]-N，N-二甲基-苯磺酰胺(1.82g，65％)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ 9.28(s，IH)，7.74(d，2H，J＝8.0Hz)，7.43(d，2H，J＝8.0Hz)，7.09(dd，1H，J＝8.0，8.0Hz)，6.78(s，1H)，6.69(d，1H，J＝8.0Hz)，6.61(d，1H，J＝8，0Hz)，5.33(s，1H)，2.81-2.72(m，2H)，2.62(s，6H)，2.62-2.40(m，2H)，2.13(m，1H)，1.87(bs，1H)，1.39(1H，dd，J＝10.0，10.0Hz)。
4-[(R)-(3-羟基苯基)-((2R，5S)-二甲基哌嗪基-1)甲基]-N，N-二甲基苯磺酰胺(210mg)、4-羧基苯甲醛(156mg)和乙酸(63mg)的混合物溶于10mL THF和5mL DMF，在氮气中于室温下搅拌30分钟。将三乙酰氧基硼氢化钠(276mg)加到溶液中。反应在氮气中于室温下搅拌过夜。通过加入水(2mL)猝灭反应。真空浓缩得到的混合物除去THF。剩余的残渣用H2O(70mL)稀释，得到pH≈5的混浊的水混合物。水层用1MNaOH溶液中和至pH≈8。白色固体(目标产物)漂浮在水混合物中。过滤混合物，用水(15mL×2)洗涤固体。将固体溶解在EtOAc(60mL)中。EtOAc溶液用水(40mL×1)和盐水(40mL×1)洗涤，用Na2SO4干燥，浓缩，得到粗产物，用硅胶柱色谱纯化，通过CombiFlashTM Sq 16x(梯度：100％ CH2Cl2～含10％ MeOH的CH2Cl2)进行，得到4-{4-[(R)-(4-二甲基氨磺酰基-苯基)-(3-羟基苯基)甲基]-(2S，5R)-二甲基哌嗪-1-甲基}苯甲酸，白色固体(148mg；53％)。1H NMR(300MHz，CD3OD)δ 7.97(d，2H，J＝8.0Hz)，7.77(d，2H，J＝8.5Hz)，7.57(d，2H，J＝8.5Hz)，7.45(d，2H，J＝8.0Hz)，7.12(dd，1H，J＝8.0Hz)，6.89(s，1H)，6.84(d，1H，J＝8.0)，6.66(dd，1H，J＝8.0，2.0Hz)，5.22(s，1H)，4.16(d，1H，J＝13.5Hz)，3.67(d，1H，J＝13.5Hz)，2.99-2.87(m，3H)，2.68(s，6H)，2.64(m，1H)，2.38(m，1H)，2.11(m，IH)，1.93(d，3H，J＝6.5Hz)，1.15(d，3H，J＝6.5Hz)。MS(FAB，甘油)m/z：538.1(M++H)，404.2，290.2；理论值：C，63.28；H，6.69；N，7.39。计算值(C29H35N3O5S 0.9 CH3OH)：C，58.23；H，6.82；N，8.21。
实施例12
N，N-二乙基-3-((R)-((2S，5R)-2，5-二甲基-4-(哌啶-4-甲基)哌嗪基-1-)(3-羟基苯基)甲基)苯甲酰胺
3-羧基苯甲醛(150g，100mmo1)加到250mL3口圆底烧瓶中，在氮气中与110mL甲苯搅拌。将亚硫酰二氯(8.75mL，120mmol)加到混合物中，然后加入6滴DMF。在烧瓶上放置带有硫酸钙干燥管的回流冷凝器。将反应置于油浴中，加热使浴温度保持在120℃以下。将混合物回流1小时，得到透明溶液，然后冷却至室温。用无水甲苯稀释溶液，真空除去所有挥发物。
将粗酸氯化物溶解在200mL干四氢呋喃中，并在冰/水浴中冷却。通过加料漏斗滴加三乙胺(27.88mL，200mmol)的70mL干四氢呋喃溶液，然后滴加二乙胺(10.45mL，100mmol)。将混浊的溶液1小时内升至室温，搅拌过夜。加入水，产物用二氯甲烷萃取。有机层用水和饱和氯化钠溶液洗涤，用硫酸钠干燥，真空除去溶剂。得到3-甲酸基-N，N-二乙基苯甲酰胺(17.72g)，浅金黄色油(86％，未色谱化产率)。1HNMR(300MHz，DMSO-d6)：δ 1.04-1.18(m，6H)；3.17-3.45(m，4H)；7.65-7.66(m，2H)；7.85(s，1H)；7.93-7.94(m，1H)；10.03(s，1H)。
将2R，5S-1-烯丙基-2，5-二甲基哌嗪(2.31g，15mmol，ChirotechDivision of Dow Pharma，Cambridge，England)、苯并***(1.80g，15.15mmol，1.01当量)和3-甲酸基-N，N-二乙基苯甲酰胺(3.08g，15mmol)混合在150mL干甲苯中，并加入两滴三乙胺。将混合物置于油浴中，保持在140℃(浴温度)以下。将烧瓶安上Dean-Stark汽水阀和回流冷凝器，以允许共沸除水。在氮气中将混合物回流2-3小时，然后减压除去大部分甲苯。粗加成物未经分离而用于下面步骤中。
将粗苯并***加成物溶解在～20mL四氢呋喃中，并用双头针加到3-苯氧基-叔丁基二甲基硅烷溴化镁(从实施例5得到，1.75当量)的溶液中。在氮气中于室温下搅拌2小时后，反应用6-8mL饱和氯化铵溶液猝灭。搅拌30分钟后，加入过量的无水硫酸镁。减压下过滤浓缩溶液，得到含有苯并***副产物的粗甲硅烷基醚。将残渣溶解在乙酸乙酯中，用10％ NaOH水溶液萃取三次，除去大部分苯并***。有机层用饱和氯化钠溶液洗涤，硫酸钠/硫酸镁干燥，减压除乙酸乙酯。
通过在室温下在80mL的四氢呋喃中溶解残渣并加入80mL的3NHCl水溶液来除去叔丁基二甲基甲硅烷基保护基。加入酸后溶液升温。在室温下搅拌混合物90分钟。减压浓缩反应以除去大部分有机溶剂。在水和***：乙酸乙酯/3∶2的溶液之间分配残渣。酸性层用***：乙酸乙酯/3∶2的溶液萃取两次。用NaOH水溶液将水层调节至pH＝2，此时保持混浊，并开始沉淀出黑色油。加入二氯甲烷(～100mL)，并剧烈搅拌。分离，水层再次用过量的二氯甲烷洗涤。合并有机萃取物，用水分配，剧烈搅拌下用NaOH水溶液调节至pH＝9。然后分离，水层再次用过量的二氯甲烷洗涤。合并二氯甲烷萃取物，用硫酸钠/硫酸镁干燥，减压蒸发溶剂。粗物质用硅胶柱色谱化(约20-25g硅胶/克粗物质)，首先用二氯甲烷洗脱，然后用含20％乙酸乙酯的二氯甲烷洗脱以除去少量的极性杂质。然后用含2％氢氧化铵(溶液A)、梯度为二氯甲烷(溶液B)的乙酸乙酯溶液洗脱柱子，极性很快从25％到达100％(B中的溶液A)。合并目标馏分，减压除溶剂。得到非对映异构体的10：1混合物(约2.01g)。通过用乙酸乙酯(5-10mL)的溶液、然后缓慢加入庚烷(10-20mL)、逐渐冷却得到纯产物，得到1.35g(+)-3-((αR)-α-((2S，5R)-4-烯丙基-2，5-二甲基-1-哌嗪基)-3-羟基苄基)-N，N-二乙基苯甲酰胺，反白结晶固体，异构体纯度>98％(NMR测定)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ 0.90-0.92(d，J＝6.1Hz，3H)；0.94-1.04(m，6H)；1.06-1.08(d，J＝6.1Hz，3H)；1.73-1.76(m，2H)；2.01-2.15(m，1H)；2.52-2.56(q，J＝11.1Hz，2H)；2.69-2.72(q，J＝14.0Hz，2H)；2.75-2.82(q，J＝13.9Hz，1H)；3.11-3.40(d，J＝4.9Hz，2H)；3.56-3.62(d，J＝13.3Hz，2H)；5.05-5.11(dd，J1＝6.1Hz，J2＝16.6Hz，2H)；5.16(s，1H)；5.70-5.82(m，1H)；7.13-7.16(d，J＝7.3Hz，1H)；7.24-7.41(m，7H)；9.31(s，1H)。
在氮气中将3-((R)-((2S，5R)-4-烯丙基-2，5-二甲基-1-哌嗪基)-3-羟基苄基)-N-二乙基苯甲酰胺(4.35g，10mmol)、N-苯基三氟甲烷-磺酰亚胺(3.82g，10.7mmol)和三乙胺(3.1mL，22mmol)溶解在75mL二氯甲烷中，并在室温下搅拌过夜。减压浓缩后，将残渣溶解在100mL乙酸乙酯中，用Na2CO3溶液(3×100mL)、水(1×100mL)和盐水(1×100mL)洗涤。溶液用(Na2SO4/MgSO4)干燥，减压浓缩。残余油用硅胶柱色谱纯化(含2％ NH4OH的EtOAc/CH2Cl2)，得到6.01g(10.59mmol)的三氟甲烷磺酸酯，粘稠金黄色油。
通过Genet法[J.P.Genet，S.Lemaire-Audoire，M.Savignac，Tetrahedron Letters，36，1267-1270(1995)]在硫代水杨酸存在下使用Pd(dba)2/DPPB除去烯丙基。浓缩反应，将残渣溶解在50mL乙酸乙酯和100mL***中。用Na2CO3溶液(3×100mL)和水(1×100mL)洗涤后，用3N HCl(3×20mL)和1N HCl(1×20mL)萃取有机溶液。用NaOH溶液将酸性萃取物调节至pH8.5，用二氯甲烷(3×25mL)萃取。溶液用(Na2SO4/MgSO4)干燥，减压浓缩。残余油用硅胶柱色谱纯化(含2％NH4OH的EtOAc/CH2Cl2)，得到4.39g(8.32mmol)的粘稠深琥珀橙色油。
将上述自由胺(0.87g，1.50mmol)的乙腈(10mL)溶液加到碘化钠(100mg)、碳酸钠(0.88g，8.30mmol)中，在氮气中于室温下搅拌，同时加入4-吡啶甲基氯盐酸盐(0.27g，1.65mmol)。反应在6小时内完成。蒸发除溶剂，残渣在二氯甲烷和水之间分配，水层用二氯甲烷萃取多于两次。合并有机萃取物，用(Na2SO4/MgSO4)干燥，减压浓缩。残渣是黑红色无定形固体，用硅胶柱色谱纯化(EtOAc/CH2Cl2＝1/1，然后75％EtOAc和含2％ NH4OH的CH2Cl2)，得到0.35g(0.72mmol)的N，N-二乙基-3-((R)-((2S，5R)-2，5-二甲基-4-(哌啶-4-甲基)哌嗪基-1-)(3-羟基苯基)-甲基)苯甲酰胺，白色无定形固体。通过在乙醇中溶解碱并用乙醇中的0.2M HCl滴定至pH3.60制得盐。得到的盐溶液冻干过夜，得到白色粉末状固体。1H NMR(300MHz，d6-DMSO)：δ 0.90-1.10(m，12H)；1.90-2.08(m，2H)；2.58-2.68(m，5H)；3.08-3.50(m，4H)；3.68-3.79(d，J＝15.1Hz，1H)；4.94(s，1H)；6.61-6.76(m，3H)；7.07-7.44(m，7H)；8.43-8.45(d，J＝5.7Hz，2H)；9.32(s，1H)。487.6(M+1，100％)，509.3(30％)。C30H38N4O2HCl H2O：计算值C，66.59；H，7.64；N，10.35；Cl，6.55。理论值：C，66.23；H，7.56；N，10.23；Cl，6.73。
实施例13
阿片受体亲合性的体外测试
一组阿片受体促效药用于治疗尿道功能障碍，评估其在大鼠脑膜(μ和δ阿片样物质)和豚鼠小脑(κ阿片受体)中的体外阿片受体亲合性。从大鼠全脑或豚鼠小脑(由Pel-Freeze Biological Inc.(Rogers，AR.)供应)制备用于放射性配体结合的膜。在50mM TRIS(Tris[羟甲基]氨基甲烷)缓冲液(pH7.4)中均质化组织，其含有50μg/mL大豆胰岛素抑制剂、1mM EDTA(乙二胺四乙酸)和100μM PMSF(苯基甲基磺酰氯)。均质化的大脑组织在500×g下离心30分钟(4℃)以除去较大的碎片。上清液超声降解10秒(P.E.装置2，4℃)。然后使用10mM TRIS-蔗糖缓冲液(pH7.4)加入蔗糖溶液，最终浓度为0.35M，然后将大脑膜在40,000×g下离心30分钟(4℃)。然后用10mM TRIS缓冲液(pH7.4)洗涤膜球两次，其含有50μg/mL大豆胰岛素抑制剂、1mM EDTA和100μMPMSF。
在10mM TRIS缓冲液(pH7.4)中进行放射性配体结合分析，其含有50μg/mL大豆胰岛素抑制剂、1mM EDTA、5mM MgCl2和100μMPMSF。氚标记的DAMGO(μ)、Deltorphin II(δ)或U69593(κ)从NewEngland Nuclear购得，并用作对比例(2-3×10-10M最终浓度)中的配体，其中0.5×10-6M纳洛酮(从SIGMA Chemical Co.购得)限定了非特异性结合。所有的结合分析在室温下进行90分钟，然后通过在GF/C玻璃纤维过滤器上快速过滤而终止(Whatman，Hillsboro，OR)，使用50mMTRIS缓冲液(4℃，pH7.4)和Brandel半自动细胞收集器(型号M48，Brandel，Gaithersburg，MD)。过滤器用50mM TRIS缓冲液(4℃，pH7.4)洗涤两次，将过滤器置于液体闪烁放射性物质中，被束缚的放射活性用Beckman LS 6500闪烁计数器来计数。化合物抑制结合DAMGO(μ)、Deltorphin II(δ)或U69593(κ)的功效被确定为降低标记化合物结合的浓度的50％(IC50)。
体外测试结果总结在图1(表1)中，表明所有的测试化合物都有一定的δ阿片受体活性，尽管其中一些比另一些具有更大的活性。
实施例14
δ阿片受体促效药对健康有意识大鼠的膀胱内压参数的影响
使用重量为200～250克的雄性大鼠。大鼠可自由取食，除了在进行实验时将其在22-24℃下保持12小时亮暗循环至少一周。
大鼠用戊巴比妥65mg/kg i.p.腹腔注射来麻醉，并仰卧。在刮过和清洗过的中线腹壁上取得约10mm长的切口。尿道膀胱未与组织粘合，排空，然后在切口处***聚乙烯(PE50)导管，并永久缝合。在后肩域通过皮下通道取出导管，其与塑料适配器连接以避免被大鼠除去。为静脉(i.v.)注射测试化合物，将聚乙烯管(PE50)插进颈静脉，并从后肩域取出。由于膀胱内压图参数在植入导管后受时间影响，大鼠用1mg/kg青霉菌G进行肌肉内处理，以防止感染，并在植入后和测试之前休息3天。
为口服给予测试化合物，将聚乙烯管(PE50)插进胃中，并永久缝合。在后肩域通过皮下通道取出导管，其与塑料适配器连接以避免被大鼠除去。
在实验期间，将大鼠置于Bllman’s笼中，膀胱管的自由尖端通过T-型管与压力传感器(Grass PT300或Gould P23)相连以记录膀胱压力，并与蠕动泵相连以按0.1mL/min的恒定速率将盐水溶液连续输送进膀胱。连续记录输液期间的内腔压力。评估两种尿道动力学参数：排尿压力和排尿时间间隔，其等于逼尿肌收缩之前的体积容量(收缩频率下降)。排尿压力被定义为在排尿期间因逼尿肌收缩引起的最大膀胱压力。数据被计算为每次剂量下的几种动物测试结果的平均值。药效表达为相对于对照数据(100％)的百分比。
用输送盐水溶液以确定在没有测试化合物被用作对照基线时的大鼠活性。中止输送盐水溶液，给予测试化合物。在静脉给予90分钟后和口服给药120分钟后，记录每一动物的膀胱内压测量图，计算记录的膀胱内压测量图参数的平均值。
静脉注射不同的本发明测试化合物后记录90分钟内的膀胱内压测量图，其结果总结在图2(表2)中。特别地，结果表明静脉(i.v.)给予化合物1、2、3、4、10和12影响膀胱收缩的抑制。化合物1-10和12引起膀胱收缩的频率降低(膀胱收缩的时间间隔增大，说明膀胱容量增大)。化合物1、2、3、4、10和12因引起膀胱收缩强度下降和膀胱收缩频率下降而影响这两种参数。
化合物1、2、8和11也被通过胃导管口服给予来测试效力。测试上述相同的膀胱内压测量图，结果总结在图3中的表3中。口服给予化合物1和11使膀胱收缩频率下降和收缩压力下降，从而增大膀胱容量。出乎意料的是，化合物1对于这两种给药方法表现出相似的效力，这表明不同的给药方式可得到化合物相似的血液水平。有趣的是，化合物1不包括用羟基或甲基化的羟基取代的酚环。可以推测出酚环上的羟基或甲氧基是肽和非肽配体的关键药效团，其可识别δ阿片受体并起生理作用。然而，化合物1已被发现在没有这种酚环时有惊人的功效，从而可提供出乎意料的生理作用。
实施例15
δ阿片受体促效药对部分尿道受到限制的大鼠的膀胱内压参数的影响
使用重量为200～250克的雄性大鼠。使膀胱出口受阻从而使部分尿道受限制的方法基本上如Malmgren等J.Urol.137：1291-1294报导的，其内容在此引入作为参考。麻醉后，将腹壁和***剃毛，并用优碘清洗。在较低中线腹壁上取得切口，记住膀胱和最近的尿道。将外径为～1mm的塑料棒与尿道平行放置，用丝稠绷带环绕尿道和塑料棒。固定绷带后，除去外部的塑料棒，从而确保内腔直径为～1mm。给予动物止痛药丁丙诺啡，并回收。6周后进行第二次手术以除去尿道绷带，此时放置膀胱内压导管。在尿道中植入塑料棒6周在此区域引起炎症，并使测试大鼠膀胱肌肉不稳定，这与真正的尿道功能障碍带来的副作用相似。
在实验期间，膀胱管通过T-型管与压力传感器(Grass PT300或Gould P23)相连以定容地记录膀胱压力，并与蠕动泵相连以按0.1mL/min的恒定速率将盐水溶液连续输送进膀胱。连续记录输液期间的压力信号。
评估测试大鼠中的两种尿道动力学参数：排尿压力和排空时间间隔，其等于逼尿肌收缩之前的体积容量(收缩频率下降)。记录膀胱活性的变化，表达为压力或体积随时间的变化。
图4表明三个测试大鼠的尿道动力学参数的膀胱内压迹线，由于以前植入的障碍其尿道受到损害。迹线表明了在给予测试化合物之前和口服给予10mg/kg的化合物1之后的测试动物的尿道动力学参数。图左侧的迹线表明给予化合物1之前的三个测试动物的压力和排空记录(1a和b，2a和b，和3a和b)。观察迹线1a和1b，表明测试动物#1的膀胱肌肉经历了多次强力的收缩。此外从迹线1b可以看出连续排空的动物在膀胱中几乎不存储尿。另两个测试动物的迹线也表明不稳定的膀胱。三个测试动物口服化合物1后，收缩和体积容量得到明显改进。迹线1c和1d表明收缩频率和每次收缩的压力明显降低。此外，迹线1d表明体积容量增大，在排空前测试动物的膀胱容量增大。与迹线1b中的连续排空相反，测试动物间断排空，因而在排空之间可存储较大体积的尿。很明显在给予化合物1之后，三个测试动物在压力收缩的频率和强度(下降)方面都表现出明显改进，并且体积存储量也得到改进。

Claims (32)

1.δ阿片受体促效药在制备治疗患者尿道功能障碍的药物中的用途，其中所述的δ阿片受体促效药选自：
Figure C03810492C00021
或其药学上可接受的盐或酯。
2.如权利要求1所述的用途，其中所述的δ阿片受体促效药包含于药物组合物中，所述的药物组合物含有δ阿片受体促效药或其药学上可接受的盐或酯及药学上可接受的载体。
3.如权利要求2所述的用途，其中所述的组合物的给予方式选自口服、直肠、***、外用、舌下、粘膜、鼻内、眼睛、皮下、肌肉内、静脉内、皮肤、脊髓、鞘内、关节内、动脉内、蛛网膜内、支气管内、淋巴内、子宫内给药。
4.如权利要求3所述的用途，其中所述的组合物以单一剂型给予。
5.如权利要求2所述的用途，其中所述的用于治疗尿道功能障碍的药物组合物还含有至少一种额外的用于治疗尿道功能障碍的活性药剂。
6.如权利要求5所述的用途，其中所述的活性药剂选自：α-肾上腺素促效药、抗胆碱药、α-肾上腺素拮抗剂及三环抗抑郁剂。
7.如权利要求1所述的用途，其中所述的尿道功能障碍包括尿道失禁。
8.如权利要求1所述的用途，其中所述的δ阿片受体促效药具有下式结构：
或其药学上可接受的盐或酯。
9.如权利要求8所述的用途，其中所述的δ阿片受体促效药以药物组合物给予，所述的药物组合物含有δ阿片受体促效药或其药学上可接受的盐或酯及药学上可接受的载体。
10.如权利要求9所述的用途，其中所述的组合物的给予方式选自口服、直肠、***、外用、舌下、粘膜、鼻内、眼睛、皮下、肌肉内、静脉内、皮肤、脊髓、鞘内、关节内、动脉内、蛛网膜内、支气管内、淋巴内、子宫内给药。
11.如权利要求10所述的用途，其中所述的组合物以单一剂型给予。
12.如权利要求8所述的用途，其中所述的用于治疗尿道功能障碍的药物组合物还含有至少一种额外的用于治疗尿道功能障碍的活性药剂。
13.如权利要求12所述的用途，其中所述的活性药剂选自：α-肾上腺素促效药、抗胆碱药、α-肾上腺素拮抗剂及三环抗抑郁剂。
14.如权利要求8所述的用途，其中所述的尿道功能障碍包括尿道失禁。
15.一种防止尿道功能障碍的药物组合物，所述的药物组合物包括：有效量的用以防止尿道功能障碍的δ阿片受体促效药和药学上可接受的载体，其中所述的δ阿片受体促效药选自：
Figure C03810492C00051
或其药学上可接受的盐或酯。
16.如权利要求15的药物组合物，其中所述药物组合物为单位剂型，其中所述的单位剂型选自：片剂、胶囊、皮肤贴片及栓剂。
17.如权利要求15所述的药物组合物，还含有至少一种额外的用于治疗尿道功能障碍的活性药剂。
18.如权利要求17所述的药物组合物，其中所述的活性药剂选自：α-肾上腺素促效药、抗胆碱药、α-肾上腺素拮抗剂及三环抗抑郁剂。
19.如权利要求15所述的药物组合物，其中所述的尿道功能障碍包括尿道失禁。
20.如权利要求15的药物组合物，所述的药物组合物包括：有效量的用以防止尿道功能障碍的δ阿片受体促效药和药学上可接受的载体，其中所述的δ阿片受体促效药具有下式结构：
Figure C03810492C00061
或其药学上可接受的盐或酯。
21.如权利要求20所述的药物组合物，还含有至少一种另外的用于治疗尿道功能障碍的活性药剂。
22.如权利要求21所述的药物组合物，其中所述的活性药剂选自：α-肾上腺素促效药、抗胆碱药、α-肾上腺素拮抗剂及三环抗抑郁剂。
23.如权利要求20所述的药物组合物，其中所述的δ阿片受体促效药以1mg～50mg/千克体重/天的剂量给予所述的受试者。
24.如权利要求20所述的药物组合物，其中所述的δ阿片受体促效药以10μg～500mg/kg所述的受试者体重/天的剂量给予所述的受试者。
25.如权利要求20所述的药物组合物，其中所述的δ阿片受体促效药以50μg～75mg/千克体重/天的剂量给予所述的受试者。
26.如权利要求20所述的药物组合物，其中所述的药物组合物经口服给予。
27.一种防止尿道功能障碍的试剂盒，所述的试剂盒包括：有效量的用以防止尿道功能障碍的δ阿片受体促效药，其中所述的δ阿片受体促效药选自：
或其药学上可接受的盐或酯。
28.如权利要求27所述的试剂盒，还含有至少一种额外的用于治疗尿道功能障碍的活性药剂，所述的活性药剂选自：α-肾上腺素促效药、抗胆碱药、α-肾上腺素拮抗剂及三环抗抑郁剂。
29.至少一种δ阿片受体促效药或其药学可接受的盐或酯在制备治疗患者尿道功能障碍的药物中的用途，其中所述δ阿片受体促效药具有以下通式：
Figure C03810492C00082
其中：
Y选自：
氢；
卤素；
C1-C6烷基、C2-C6链烯基、C2-C6炔基；
C1-C6卤代烷基；
C1-C6烷氧基；
C3-C6环烷氧基；
式SR8的硫化物，其中R8是C1-C6烷基、C2-C6链烯基、C2-C6炔基、C3-C6环烷基、具有C5-C10芳基部分和C1-C6烷基部分的芳烷基、或C5-C10芳基；
式SOR8的亚砜，其中R8与上述相同；
式SO2R8的砜，其中R8与上述相同；
腈；
C1-C6酰基；
式NHCO2R8的烷氧羰氨基，其中R8与上述相同；
羧酸或其酯、酰胺或盐；
式CONR9R10的碳酰胺，其中R9和R10可相同或不同，并可以是氢、C1-C6烷基、C2-C6链烯基、C2-C6炔基、C2-C6羟烷基、C2-C6甲氧烷基、C3-C6环烷基或C5-C10芳基，或R9和R10一起形成5或6个原子的环，所述的环原子选自N和C；，或其C2-C30肽共轭物；及
式SO2NR9R10的磺酰胺，其中R9和R10与上述相同；
R1是氢、卤素或C1-C4烷基、C2-C4链烯基、C2-C4炔基；
R3、R4和R5相同或不同，并独立地选自氢和甲基，其中R3、R4或R5中的至少一个不是氢，条件是甲基的总个数不超过2；
R6选自：
氢；
C1-C6烷基、C2-C6链烯基、C2-C6炔基；
C3-C6环烷基；
具有C5-C10芳基部分和C1-C6烷基部分的芳烷基；
具有C1-C4烷氧基和C1-C4烷基部分的烷氧烷基；
C2-C4氰烷基；
C2-C4羟烷基；
具有C1-C4烷基部分的氨羰烷基；及
R12COR13，其中R12是C1-C4亚烷基，R13是C1-C4烷基或C1-C4烷氧基或羟基，
或R6是
Figure C03810492C00101
Ar2是含有选自碳、氮、氧和硫原子的5-或6-元碳环或杂环芳香环，并且在其碳原子上具有取代基X，
其中X选自氟、溴、氯、碘、氢、羟基和其酯；
羧基C1-C4烷基和其酯；羧酸、烷氧基、羟甲基和其酯；及氨基、其碳酰胺和磺酰胺。
30.如权利要求29所述的用途，其中所述的δ阿片受体促效药选自：
Figure C03810492C00102
或其药学上可接受的盐或酯。
31.如权利要求29所述的用途，其中所述的δ阿片受体促效药与药学上可接受的载体结合。
32.如权利要求29所述的用途，其中所述的δ阿片受体促效药与用于治疗尿道功能障碍的活性药剂结合，所述的活性药剂选自：α-肾上腺素促效药、抗胆碱药、α-肾上腺素拮抗剂及三环抗抑郁剂。
CNB03810492XA 2002-05-09 2003-05-09 利用δ阿片受体促效药来防止下泌尿系功能障碍的组合物 Expired - Fee Related CN100508980C (zh)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US37918602P 2002-05-09 2002-05-09
US60/379,186 2002-05-09
US10/434,004 US8476280B2 (en) 2002-05-09 2003-05-08 Compositions and methods for combating lower urinary tract dysfunctions with delta opioid receptor agonists
US10/434,004 2003-05-08

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN1652787A CN1652787A (zh) 2005-08-10
CN100508980C true CN100508980C (zh) 2009-07-08

Family

ID=29423661

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CNB03810492XA Expired - Fee Related CN100508980C (zh) 2002-05-09 2003-05-09 利用δ阿片受体促效药来防止下泌尿系功能障碍的组合物

Country Status (11)

Country Link
US (1) US8476280B2 (zh)
EP (1) EP1501513B1 (zh)
JP (1) JP4637571B2 (zh)
CN (1) CN100508980C (zh)
AU (1) AU2003228991B8 (zh)
CA (1) CA2525373C (zh)
IL (1) IL164654A0 (zh)
MX (1) MXPA04010934A (zh)
NZ (1) NZ536352A (zh)
RU (1) RU2333209C9 (zh)
WO (1) WO2003094853A2 (zh)

Families Citing this family (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE60230869D1 (de) 2001-05-18 2009-03-05 Astrazeneca Ab 4-(phenylpiperazinylmethyl) benzamidderivate und deren verwendung zur behandlung von schmerzen, angst oder gastrointestinalen störungen
JP2005513080A (ja) * 2001-12-20 2005-05-12 フェムファーマ， インコーポレイテッド 薬物の膣送達
SE0203300D0 (sv) 2002-11-07 2002-11-07 Astrazeneca Ab Novel Compounds
SE0203303D0 (sv) 2002-11-07 2002-11-07 Astrazeneca Ab Novel Compounds
US9173836B2 (en) 2003-01-02 2015-11-03 FemmeParma Holding Company, Inc. Pharmaceutical preparations for treatments of diseases and disorders of the breast
WO2004060322A2 (en) * 2003-01-02 2004-07-22 Femmepharma Holding Company, Inc. Pharmaceutical preparations for treatments of diseases and disorders of the breast
US7314880B2 (en) * 2003-01-02 2008-01-01 Mount Cook Biosciences, Inc. Cardioprotective delta opioid receptor agonists and methods of using same
US20050283385A1 (en) * 2004-06-21 2005-12-22 The Permanente Medical Group, Inc. Individualized healthcare management system
SE0401968D0 (sv) * 2004-08-02 2004-08-02 Astrazeneca Ab Diarylmethyl piperazine derivatives, preparations thereof and uses thereof
DK1781631T3 (da) 2004-08-02 2012-05-14 Astrazeneca Ab Diarylmethylpiperazinderivater, præparater dermed og anvendelser deraf
ES2283220B1 (es) * 2006-04-12 2008-11-01 Consejo Superior Investig. Cientificas Uso de agonistas del receptor opioide delta en la elaboracion de composiciones farmaceuticas, composiciones farmaceuticas que las contienen y sus aplicaciones en el tratamiento de tumores.
KR101288781B1 (ko) 2006-06-28 2013-07-22 암젠 인크 글리신 수송자-1 억제제
EP2104489A2 (en) * 2006-12-26 2009-09-30 FemmePharma Holding Company, Inc. Topical administration of danazol
US20110003000A1 (en) * 2009-07-06 2011-01-06 Femmepharma Holding Company, Inc. Transvaginal Delivery of Drugs
US8957066B2 (en) 2011-02-28 2015-02-17 Biomarin Pharmaceutical Inc. Histone deacetylase inhibitors
US10059723B2 (en) 2011-02-28 2018-08-28 Biomarin Pharmaceutical Inc. Histone deacetylase inhibitors
KR102094626B1 (ko) * 2016-02-25 2020-03-27 히사미쓰 세이야꾸 가부시키가이샤 외용 액제

Family Cites Families (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5574159A (en) 1992-02-03 1996-11-12 Delta Pharmaceuticals, Inc. Opioid compounds and methods for making therefor
GB9202238D0 (en) 1992-02-03 1992-03-18 Wellcome Found Compounds
US5807858A (en) 1996-06-05 1998-09-15 Delta Pharmaceutical, Inc. Compositions and methods for reducing respiratory depression
US5681830A (en) 1992-02-03 1997-10-28 Delta Pharmaceuticals, Inc. Opioid compounds
US5985880A (en) 1996-06-05 1999-11-16 Delta Pharmaceuticals Compositions and methods for reducing respiratory depression and attendant side effects of mu opioid compounds
US20020052007A1 (en) 1992-02-03 2002-05-02 Chang Kwen Jen Diarylmethylbenzylpiperazines and corresponding halobenzyl derivatives
ES2149881T3 (es) 1993-07-30 2000-11-16 Delta Pharmaceuticals Inc Compuestos de piperazina usados en terapia.
US6046200A (en) 1994-09-09 2000-04-04 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army Compositions having neuroprotective and analgesic activity
SE9504661D0 (sv) 1995-12-22 1995-12-22 Astra Pharma Inc New compounds
JP2000515525A (ja) * 1996-07-19 2000-11-21 アベーグ，グンナー 尿と胃腸の疾患の治療におけるｓ（―）―トルテロジン
TW548271B (en) 1996-12-20 2003-08-21 Astra Pharma Inc Novel piperidine derivatives having an exocyclic double bond with analgesic effects
US6090856A (en) * 1997-04-11 2000-07-18 Nippon Shinyaku Co., Ltd. Remedies for frequent urination and urinary incontinence
GB9804734D0 (en) 1998-03-05 1998-04-29 Pfizer Ltd Compounds
SE9904675D0 (sv) * 1999-12-20 1999-12-20 Astra Pharma Inc Novel compounds
SE0001209D0 (sv) * 2000-04-04 2000-04-04 Astrazeneca Canada Inc Novel compounds
SE0001207D0 (sv) * 2000-04-04 2000-04-04 Astrazeneca Canada Inc Novel compounds
DE10059415A1 (de) 2000-11-30 2002-06-06 Gruenenthal Gmbh Verwendung von schwachen Opioiden und gemischten Opioidagonisten/-antagonisten zur Therapie der Harninkontinenz
RU2314809C2 (ru) 2001-10-29 2008-01-20 Маунт Кук Байосайенсиз, Инк. Способ лечения депрессии соединениями-агонистами дельта-рецепторов
WO2003057223A1 (en) 2002-01-02 2003-07-17 Ardent Pharmaceuticals, Inc. Method of treating sexual dysfunctions with delta opioid receptor agonist compounds

Also Published As

Publication number Publication date
RU2333209C2 (ru) 2008-09-10
RU2004133054A (ru) 2005-08-10
AU2003228991B2 (en) 2007-12-06
MXPA04010934A (es) 2005-02-14
WO2003094853A3 (en) 2004-08-19
RU2333209C9 (ru) 2009-01-20
EP1501513B1 (en) 2014-04-16
JP4637571B2 (ja) 2011-02-23
EP1501513A2 (en) 2005-02-02
NZ536352A (en) 2008-07-31
CA2525373C (en) 2012-04-24
EP1501513A4 (en) 2009-08-26
IL164654A0 (en) 2005-12-18
CA2525373A1 (en) 2003-11-20
AU2003228991A1 (en) 2003-11-11
AU2003228991B8 (en) 2009-07-02
US8476280B2 (en) 2013-07-02
US20040002503A1 (en) 2004-01-01
JP2005525416A (ja) 2005-08-25
CN1652787A (zh) 2005-08-10
WO2003094853A2 (en) 2003-11-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN100508980C (zh) 利用δ阿片受体促效药来防止下泌尿系功能障碍的组合物
TW542838B (en) Pharmaceutical composition containing an opioid k receptor activating compound as an active ingredient for treating pruritis, derivative of morphinan quaternary ammonium salt and manufacturing method thereof, and derivative of morphinan-N-oxide
KR20010014279A (ko) 뮤 오피오이드 화합물의 호흡 저하 및 수반되는 부작용을감소시키기 위한 조성물 및 그 방법
CN103180327A (zh) 稠环的4-氨基嘧啶及其作为可溶性鸟甘酸环化酶的刺激物的用途
ES2965675T3 (es) Antagonistas del receptor NK-3 para el tratamiento terapéutico o cosmético del exceso de grasa corporal
WO2006105117A2 (en) Method of treating disorders and conditions using peripherally-restricted antagonists and inhibitors
CN105473554A (zh) 作为离子通道调节剂的稠合的哌啶酰胺类
WO2018199166A1 (ja) 新規テトラヒドロナフチルウレア誘導体
TW201240662A (en) Ester pro-drugs of [3-(1-(1H-imidazol-4-yl)ethyl)-2-methylphenyl] methanol for treating retinal diseases
TW200301701A (en) Method of treating sexual dysfunctions with delta opioid receptor agonist compounds
US9795601B2 (en) Compositions and methods for cancer treatment
US10875844B2 (en) Salicylate inhibitors of MELK and methods of use
US20220125769A1 (en) Estrogen receptor modulators for treating mutants
US7122173B2 (en) Agent for the treatment of bladder irritative symptoms accompanied by benign prostatic hyperplasia
ES2255607T3 (es) Utilizacion de buprenorfina para el tratamiento de la incontinencia urinaria.
US6881748B1 (en) Drug targeting
ES2292636T3 (es) 1-(2-m-metanosulfanomidofeniletil)-4-(m-trifluorometilfenil)piper.
TW200404064A (en) Compositions and methods for combating lower urinary tract dysfunctions with delta opioid receptor agonists
WO2002022127A1 (en) Use of phosphodiesterase inhibitors for the treatment of anorectal disorders
JPWO2005007155A1 (ja) 医薬組成物
WO2021204751A1 (en) Pharmaceutical combination for the treatment of liver diseases
CN116102558A (zh) 一类新型苯并二氮类化合物、其制备方法及其用途
JPH0753363A (ja) 頻尿治療剤
Sorbera et al. Fesoterodine
AU2002338234A1 (en) Agent for the treatment of bladder irritative symptoms accompanied by benign prostatic hyperplasia

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
ASS Succession or assignment of patent right

Owner name: VERMONT COOK BIOLOGICAL SCIENCE CO., LTD.

Free format text: FORMER OWNER: ARDENT PHARMACEUTICALS INC.

Effective date: 20071102

C41 Transfer of patent application or patent right or utility model
TA01 Transfer of patent application right

Effective date of registration: 20071102

Address after: American New York

Applicant after: MOUNT COOK BIOSCIENCES, Inc.

Address before: North Carolina

Applicant before: ARDENT PHARMACEUTICALS, Inc.

C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
ASS Succession or assignment of patent right

Owner name: WYLCI IBRAHIM

Free format text: FORMER OWNER: MT. COOK PHARMA, INC.

Effective date: 20120319

C41 Transfer of patent application or patent right or utility model
C56 Change in the name or address of the patentee

Owner name: MT. COOK PHARMA, INC.

Free format text: FORMER NAME: MOUNT COOK BIOSCIENCES INC.

CP01 Change in the name or title of a patent holder

Address after: New York, USA

Patentee after: MT. Cook pharmaceuticals

Address before: New York, USA

Patentee before: MOUNT COOK BIOSCIENCES, Inc.

TR01 Transfer of patent right

Effective date of registration: 20120319

Address after: New jersey, USA

Patentee after: Ibrahim Velsi

Address before: New York, USA

Patentee before: MT. Cook pharmaceuticals

ASS Succession or assignment of patent right

Owner name: WEIERXI GROUP CO., LTD.

Free format text: FORMER OWNER: WYLCI IBRAHIM

Effective date: 20131119

C41 Transfer of patent application or patent right or utility model
TR01 Transfer of patent right

Effective date of registration: 20131119

Address after: New jersey, USA

Patentee after: Wersi Refco Group Ltd.

Address before: New jersey, USA

Patentee before: Ibrahim Velsi

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20090708

Termination date: 20180509

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee