CN100431624C - 可注射聚乳酸微载体/壳聚糖水凝胶复合支架的制备方法 - Google Patents
可注射聚乳酸微载体/壳聚糖水凝胶复合支架的制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN100431624C CN100431624C CNB2005100618683A CN200510061868A CN100431624C CN 100431624 C CN100431624 C CN 100431624C CN B2005100618683 A CNB2005100618683 A CN B2005100618683A CN 200510061868 A CN200510061868 A CN 200510061868A CN 100431624 C CN100431624 C CN 100431624C
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- microcarrier
- chitosan
- polylactic acid
- acid
- injectable
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 title claims abstract description 32
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 title abstract description 13
- 238000000034 method Methods 0.000 title abstract description 7
- 239000002131 composite material Substances 0.000 title abstract 5
- 239000002253 acid Substances 0.000 title abstract 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 40
- 229920000747 poly(lactic acid) Polymers 0.000 claims abstract description 31
- 239000004626 polylactic acid Substances 0.000 claims abstract description 31
- CERQOIWHTDAKMF-UHFFFAOYSA-N Methacrylic acid Chemical compound CC(=C)C(O)=O CERQOIWHTDAKMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 27
- ROOXNKNUYICQNP-UHFFFAOYSA-N ammonium persulfate Chemical compound [NH4+].[NH4+].[O-]S(=O)(=O)OOS([O-])(=O)=O ROOXNKNUYICQNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 22
- KWYHDKDOAIKMQN-UHFFFAOYSA-N N,N,N',N'-tetramethylethylenediamine Chemical compound CN(C)CCN(C)C KWYHDKDOAIKMQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 21
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 claims abstract description 20
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 claims abstract description 20
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 10
- LUEWUZLMQUOBSB-FSKGGBMCSA-N (2s,3s,4s,5s,6r)-2-[(2r,3s,4r,5r,6s)-6-[(2r,3s,4r,5s,6s)-4,5-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)-6-[(2r,4r,5s,6r)-4,5,6-trihydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]oxyoxan-3-yl]oxy-4,5-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]oxy-6-(hydroxymethyl)oxane-3,4,5-triol Chemical compound O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@@H](O[C@@H]2[C@H](O[C@@H](OC3[C@H](O[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H]3O)CO)[C@@H](O)[C@H]2O)CO)[C@H](O)[C@H]1O LUEWUZLMQUOBSB-FSKGGBMCSA-N 0.000 claims abstract description 7
- 229920002581 Glucomannan Polymers 0.000 claims abstract description 6
- 229940046240 glucomannan Drugs 0.000 claims abstract description 6
- 229910001870 ammonium persulfate Inorganic materials 0.000 claims description 19
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 17
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims description 16
- -1 aquagel compound Chemical class 0.000 claims description 15
- FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 3-(dimethylamino)propyliminomethylidene-ethylazanium;chloride Chemical compound Cl.CCN=C=NCCCN(C)C FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 8
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 claims description 4
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 claims description 4
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 4
- 239000003999 initiator Substances 0.000 claims description 3
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 claims description 3
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 claims description 2
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 claims description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 2
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 claims description 2
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 claims description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 abstract description 21
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 abstract description 14
- 238000001879 gelation Methods 0.000 abstract description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 abstract description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 abstract description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 abstract description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 abstract description 2
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 abstract description 2
- 229920002752 Konjac Polymers 0.000 abstract 1
- 239000012935 ammoniumperoxodisulfate Substances 0.000 abstract 1
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 abstract 1
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 abstract 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 abstract 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 abstract 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 abstract 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 abstract 1
- 235000010485 konjac Nutrition 0.000 abstract 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 abstract 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 18
- VAZSKTXWXKYQJF-UHFFFAOYSA-N ammonium persulfate Chemical compound [NH4+].[NH4+].[O-]S(=O)OOS([O-])=O VAZSKTXWXKYQJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide Chemical compound CCN=C=NCCCN(C)C LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 8
- 210000001612 chondrocyte Anatomy 0.000 description 7
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 6
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 5
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 238000000465 moulding Methods 0.000 description 4
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 4
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 3
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 2
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 2
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 244000309466 calf Species 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 229920002301 cellulose acetate Polymers 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000001218 confocal laser scanning microscopy Methods 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 230000002079 cooperative effect Effects 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 210000004292 cytoskeleton Anatomy 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 125000005395 methacrylic acid group Chemical group 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011017 operating method Methods 0.000 description 1
- 210000000963 osteoblast Anatomy 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 238000007493 shaping process Methods 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Materials For Medical Uses (AREA)
Abstract
本发明公开了一种可注射聚乳酸微载体/壳聚糖水凝胶复合支架的制备方法。采用碳二亚胺缩合的方法依次将甲基丙烯酸和乳酸接枝在壳聚糖分子链中,获得可聚合的水溶性壳聚糖衍生物。将聚乳酸微载体与壳聚糖水凝胶预聚物混合,同时加入增稠剂魔芋葡甘聚糖提高预聚物溶液的粘度以确保聚乳酸微载体的悬浮,便于注射过程的操作。采用过硫酸铵和四甲基乙二胺氧化还原引发体系,使上述复合物在体温下原位凝胶化形成细胞微载体/壳聚糖水凝胶的复合支架。本发明工艺简单,制得的复合支架不仅解决了可注射性微载体在体内不易成型和游走的问题,而且能显著提高水凝胶的强度,具有协同作用。该复合支架无毒,具生物降解性和生物相容性,可望用于组织工程中的可注射性支架。
Description
技术领域
本发明涉及一种可注射聚乳酸微载体/壳聚糖水凝胶复合支架的制备方法,尤其是用于组织工程中的可注射性支架。
技术背景
可注射性支架是将细胞与一种具有流动性的、生物相容性好的材料复合,直接通过注射器注射到机体缺损部位。材料能在原位形成具有一定机械强度、一定形状并且可与体液进行交换的支架,细胞在支架中生长并最终形成组织。也可将材料直接注入体内,利用注射物周围组织的细胞扩展生长增殖形成组织。由于具有微创性、体内培养环境以及低费用等特点,可注射性支架具有重要的临床应用价值和良好的发展前景。可注射性支架主要分为可注射性水凝胶支架和可注射性细胞微载体。可注射性水凝胶支架主要通过溶胶-凝胶转变在体内成型,具有良好的细胞相容性和易成型等特点,但是强度低,降解快。而可注射性细胞微载体需采用液体作为输运载体注射到受损部位在体内堆砌成型,操作方便,但不容易成型,并存在体内游走的问题。目前,国内外基本上都注重于单组分性能的提高,未见将两者结合以获得最优化的性能。
发明内容
本发明的目的是为组织工程提供一种可注射聚乳酸微载体/壳聚糖水凝胶复合支架的制备方法。
本发明的可注射聚乳酸细胞微载体/壳聚糖水凝胶复合支架的制备方法,包括以下步骤:
1)在常温下,将壳聚糖(CS)溶解在含甲基丙烯酸(MA)的溶液中,然后加入水溶性碳二亚胺(EDAC),于常温下进行反应,水溶性碳二亚胺与甲基丙烯酸的摩尔比为0.25~1.5,反应结束后,置于三蒸水中透析除去未反应物质及副产物,冻干得到接枝甲基丙烯酸的壳聚糖(CM);
2)在常温下,将接枝甲基丙烯酸的壳聚糖溶解在含乳酸(LA)的溶液中,然后加入水溶性碳二亚胺,于常温下进行反应,水溶性碳二亚胺与乳酸的摩尔比为0.3~1.8,反应结束后,置于三蒸水中透析除去未反应物质及副产物,冻干得到接枝甲基丙烯酸和乳酸的壳聚糖衍生物(CML);
3)在室温下,将接枝甲基丙烯酸和乳酸的壳聚糖衍生物溶解在水或磷酸盐缓冲液(PBS)中,配制成浓度为1~2.5%的壳聚糖衍生物溶液,然后加入魔芋葡甘聚糖(KGM)粉末,魔芋葡甘聚糖在壳聚糖衍生物溶液中的浓度为0.6~1%。搅拌均匀后,加入2.5~15mM引发体系过硫酸铵(APS)和四甲基乙二胺(TMEDA),过硫酸铵和四甲基乙二胺的摩尔比为1∶1,混合均匀;
4)将聚乳酸微载体加入到步骤3)的混合液中,其中聚乳酸微载体在混合液中的重量体积比为2.5%~10%,混合均匀后,置于25℃~45℃下反应形成聚乳酸微载体/壳聚糖水凝胶复合支架。
上述的聚乳酸微载体是表面具有胶原的聚乳酸微球,可直接进行复合,也可在其表面预先负载所需的细胞(如软骨细胞、成骨细胞或肝细胞等)后进行复合。
本发明方法操作工艺简单、实施条件温和。利用高粘度的魔芋葡甘聚糖作为增稠剂提高接枝甲基丙烯酸和乳酸的壳聚糖溶液的粘度,确保聚乳酸微载体在溶液中的悬浮,以利于注射的顺利进行。以凝胶预聚物为运输载体将微载体注射到所需部位,并在原位凝胶化形成具有一定形状的微载体/水凝胶复合支架,水凝胶有利于微载体的成型,并且将其包裹,可以防止其在体内的游走;同时微载体可以有效提高水凝胶的强度,二者复合具有一定的协同效应。该复合支架无毒,具生物降解性和生物相容性。本发明方法提供了一种新结构的细胞支架及其制备方法,能够用于组织工程和整形修复中。
附图说明
图1是在不同EDAC与MA的摩尔比下MA接枝量的变化曲线;
图2是在不同EDAC与LA的摩尔比下LA接枝量的变化曲线;
图3是在37℃下,聚乳酸微载体在KGM/CML溶液中悬浮15分钟后的照片;其中CML浓度为1%,图中标记的是KGM浓度;
图4是37℃和5mM APS/TMEDA下,加入不同KGM含量的1%CML的凝胶时间;
图5是在37℃和5mM APS/TMEDA下制备的不同KGM含量的1%CML凝胶在水中24h的平衡溶胀比;
图6是在37℃和5mM APS/TMEDA下制备的不同KGM含量的1%CML凝胶的动态弹性模量,图中标注的为KGM含量;
图7是在37℃和5mM APS/TMEDA下制备的不同聚乳酸微载体含量的0.6%KGM/1%CML复合支架的动态弹性模量,图中标注为微载体的重量体积含量;
图8是在37℃和5mM APS/TMEDA下制备的不同聚乳酸微载体含量的0.6%KGM/1%CML复合支架干燥后的内部结构,图下标注为微载体的重量体积含量,(a)为2.5%,(b)为5%,(c)为10%;
图9是软骨细胞在5%微载体/0.6%KGM/1%CML复合支架中的细胞活性,细胞种植密度为600×104/ml;
图10是采用激光共聚焦显微镜(CLSM)观察软骨细胞在5%微载体/0.6%KGM/1%CML复合支架中的生长行为,图中(a)为1天,(b)为6天,(c)为12天;
图11是采用扫描电子显微镜(SEM)观察软骨细胞在5%微载体/0.6%KGM/1%CML复合支架中的形态,图中(a),(b)均为1天,(c),(d)均为6天,(e),(f)均为12天。
图12是采用SEM观察软骨细胞在5%微载体/0.6%KGM/1%CML复合支架中的形态,图中(a)为球形细胞,(b)为细胞团,(c)为铺展的细胞层。
具体实施方式
实例1
称取壳聚糖(CS)800mg置于250ml锥形瓶中,加入100ml三蒸水和420μlMA(0.48mmol),待CS完全溶解后,加入930mg EDAC(0.48mmol),然后在室温下,搅拌反应24h。为去除未反应的MA和其他小分子产物,将反应混合液置入截止分子量为10,000Da透析袋中,在大量三蒸水和室温下透析3d,每天换2~3次三蒸水。最后将此液体冻结,冻干,得到MA接枝的壳聚糖(CM)。CM收率均大于90%,MA接枝量约为23%,见图1;可在水中溶胀。将上述的400mgCM溶解在含210μl LA(0.2mmol)的50ml三蒸水中,完全溶解后加入460mgEDAC(0.24mmol)。此混合液在室温下搅拌24h后,将反应混合液置入截止分子量为10,000Da透析袋中,在大量三蒸水和室温下透析3d,每天换2~3次三蒸水。最后将此液体冻结,冻干,得到接枝MA和LA的壳聚糖(CML)。CML的收率均大于90%,LA接枝量约为52%,见图2。将100mg接枝率为23%的甲基丙烯酸和接枝率为52%的乳酸的壳聚糖衍生物(CML)溶解在水中,配制成10ml 1%CML溶液,然后加入60mg KGM粉末,混合均匀。加入50μl 1M过硫酸铵(APS)和50μl 1M和四甲基乙二胺(TMEDA)溶液,混合均匀。然后加入500mg聚乳酸微载体,在混合液中微载体的重量体积比为5%,混合均匀后,用1ml针筒(无针头)注射到模具中。置于37℃下,8min后得到微载体/水凝胶复合支架。该复合支架的动态弹性模量在频率为0.1~100rad/s时为0.12~1.15MPa,见图7,干燥后其内部结构见图8b。
实例2
称取壳聚糖800mg置于250ml锥形瓶中,加入100ml三蒸水和420μl MA(0.48mmol),待CS完全溶解后,加入232.5mg EDAC(0.12mmol),然后在室温下,搅拌反应24h。为去除未反应的MA和其他小分子产物,将反应混合液置入截止分子量为10,000Da透析袋中,在大量三蒸水和室温下透析3d,每天换2~3次三蒸水。最后将此液体冻结,冻干,得到MA接枝的壳聚糖(CM)。CM收率均大于90%,MA接枝量约为11.74%,见图1。
实例3
将实例1得到的MA接枝量约为23%的400mg CM溶解在含210μl LA(0.2mmol)的50ml三蒸水中,完全溶解后加入115mg EDAC(0.06mmol)。此反应混合液在室温下搅拌24h后,置入截止分子量为10,000Da透析袋中,在大量三蒸水和室温下透析3d,每天换2~3次三蒸水。最后将此液体冻结,冻干,得到产物为MA和LA接枝壳聚糖(CML)。CML的收率均大于90%,LA接枝量约为43.2%,见图2。
实例4
将实例1得到的100mg CML溶解在水中,配制成10ml 1%CML溶液,然后加入100mg KGM粉末,混合均匀,KGM含量为1%。然后加入250mg聚乳酸微载体,置于37℃水浴中,15分钟后可见聚乳酸微载体悬浮在1%KGM/1%CML溶液中,有利于注射的进行。见图3。
实例5
将实例1得到的100mg CML溶解在水中,配制成10ml 1%CML溶液,然后加入60mg KGM粉末,混合均匀。加入50μl 1M过硫酸铵(APS)和50μl 1M四甲基乙二胺(TMEDA)溶液,混合均匀后,直接置于37℃下。其凝胶时间为5.4min,见图4。平衡溶胀比为65,见图5。动态弹性模量在频率为0.1~100rad/s时为1.2KPa~24.4KPa,见图6。
实例6
将实例1得到的100mg CML溶解在水中,配制成10ml 1%CML溶液,然后加入60mg KGM粉末,混合均匀。加入50μl 1M过硫酸铵(APS)和50μl 1M四甲基乙二胺(TMEDA)溶液。加入250mg聚乳酸微载体,其微载体含量为2.5%,混合均匀后,用1ml针筒(无针头)注射到模具中,置于37℃下,8min后可得微载体/水凝胶复合支架。该复合支架的动态弹性模量在频率为0.1~100rad/s时为13KPa~258KPa,见图7,干燥后其内部结构见图8a。
实例7
将实例1得到的100mg CML溶解在水中,配制成10ml 1%CML溶液,然后加入60mg KGM粉末,混合均匀。加入50μl 1M过硫酸铵(APS)和50μl 1M四甲基乙二胺(TMEDA)溶液。加入1g聚乳酸微载体,其微载体重量体积含量为10%,混合均匀后,用1ml针筒(无针头)注射到模具中,置于37℃下,8min后可得微载体/水凝胶复合支架。该复合支架的动态弹性模量在频率为0.1~100rad/s时为0.87~2.15MPa,见图7,干燥后其内部结构见图8c。
实例8
将实例1得到的CML、KGM采用紫外光照射消毒;聚乳酸微载体采用75%酒精浸泡消毒;APS和TMEDA与磷酸盐缓冲液(PBS)配制成1M的溶液后,采用孔径为0.22μm醋酸纤维素膜过滤消毒。将软骨细胞预先种植在250mg聚乳酸微载体表面,7天后细胞长满后备用。将50mg CML先溶解在5ml PBS中,配制成1%CML/PBS溶液后,加入30mg KGM粉末,混合均匀。加入引发剂APS/TMEDA的PBS溶液,最终浓度为5mM。先将0.5ml高浓度的细胞悬液加入到凝胶预聚物中,混合均匀,细胞种植密度为600×104/ml。然后加入负载细胞的微载体,含量为5%。用1ml针筒将此混合物注射到模具中,置于37℃下,8min后,形成复合支架。将该复合支架转移到24孔培养板中,加入含20%小牛血清的培养基进行培养,每2~3天换液。软骨细胞活性先增加后不变,见图9。细胞在凝胶化和混合过程中有部分死亡,细胞会向微载体表面迁移、粘附、铺展和增殖,并且有细胞团存在,见图10和图11。凝胶中的细胞为圆形,并存在细胞团,微载体表面的细胞为铺展的细胞层,见图12。
Claims (3)
1.可注射聚乳酸微载体/壳聚糖水凝胶复合支架的制备方法,包括以下步骤:
1)在常温下,将壳聚糖溶解在含甲基丙烯酸的溶液中,然后加入水溶性碳二亚胺,于常温下进行反应,水溶性碳二亚胺与甲基丙烯酸的摩尔比为0.25~1.5,反应结束后,置于三蒸水中透析除去未反应物质及副产物,冻干得到接枝甲基丙烯酸的壳聚糖;
2)在常温下,将接枝甲基丙烯酸的壳聚糖溶解在含乳酸的溶液中,然后加入水溶性碳二亚胺,于常温下进行反应,水溶性碳二亚胺与乳酸的摩尔比为0.3~1.8,反应结束后,置于三蒸水中透析除去未反应物质及副产物,冻干得到接枝甲基丙烯酸和乳酸的壳聚糖衍生物;
3)在室温下,将接枝甲基丙烯酸和乳酸的壳聚糖衍生物溶解在水或磷酸盐缓冲液中,配制成浓度为1~2.5%的壳聚糖衍生物溶液,然后加入魔芋葡甘聚糖粉末,魔芋葡甘聚糖在壳聚糖衍生物溶液中的浓度为0.6~1%,搅拌均匀后,加入2.5~15mM引发体系过硫酸铵和四甲基乙二胺,过硫酸铵和四甲基乙二胺的摩尔比为1∶1,混合均匀;
4)将聚乳酸微载体加入到步骤3)的混合液中,其中聚乳酸微载体在混合液中的重量体积比为2.5%~10%,混合均匀后,于25℃~45℃下反应形成聚乳酸微载体/壳聚糖水凝胶复合支架。
2.根据权利要求1所述的可注射聚乳酸微载体/壳聚糖水凝胶复合支架的制备方法,其特征是聚乳酸微载体是表面具有胶原的聚乳酸微球。
3.根据权利要求2所述的可注射聚乳酸微载体/壳聚糖水凝胶复合支架的制备方法,其特征是在聚乳酸微载体表面负载细胞。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CNB2005100618683A CN100431624C (zh) | 2005-12-07 | 2005-12-07 | 可注射聚乳酸微载体/壳聚糖水凝胶复合支架的制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CNB2005100618683A CN100431624C (zh) | 2005-12-07 | 2005-12-07 | 可注射聚乳酸微载体/壳聚糖水凝胶复合支架的制备方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN1799644A CN1799644A (zh) | 2006-07-12 |
CN100431624C true CN100431624C (zh) | 2008-11-12 |
Family
ID=36810002
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CNB2005100618683A Expired - Fee Related CN100431624C (zh) | 2005-12-07 | 2005-12-07 | 可注射聚乳酸微载体/壳聚糖水凝胶复合支架的制备方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN100431624C (zh) |
Families Citing this family (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN100431623C (zh) * | 2006-10-23 | 2008-11-12 | 天津大学 | 壳聚糖-聚乳酸共聚物三维多孔支架制备方法 |
CN101225123B (zh) * | 2007-12-07 | 2010-10-13 | 北京化工大学 | 一种水溶性壳聚糖衍生物及其制备方法和应用 |
CN101322858B (zh) * | 2008-07-14 | 2013-06-12 | 昆明理工大学 | 一种引导骨组织再生修复的可降解多孔支架材料及其制备方法 |
CN101791432B (zh) * | 2010-03-19 | 2013-04-03 | 浙江大学 | 一种半乳糖化壳聚糖/聚酯类聚合物复合支架的制备方法 |
CN103958666B (zh) * | 2011-11-29 | 2020-01-10 | 加利福尼亚大学董事会 | 用于三维组织培养和工程化的葡甘聚糖支架 |
CN110478529A (zh) * | 2019-09-24 | 2019-11-22 | 广西医科大学 | 一种3d打印魔芋胶水凝胶支架及制备方法和应用 |
Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1386478A (zh) * | 2001-05-23 | 2002-12-25 | 中国科学院化学研究所 | 组织工程用复合结构细胞支架及其制法和用途 |
US20040117033A1 (en) * | 1999-03-24 | 2004-06-17 | Frondoza Carmelita G. | Method for composite cell-based implants |
CN1586636A (zh) * | 2004-07-15 | 2005-03-02 | 浙江大学 | 将水凝胶复合到多孔组织工程支架中的方法 |
US20050054101A1 (en) * | 2003-07-17 | 2005-03-10 | Global Cell Solutions Llc | Automated cell culture system and process |
CN1593671A (zh) * | 2004-06-25 | 2005-03-16 | 清华大学 | 用于脂肪组织工程的多孔壳聚糖支架材料的制备方法 |
WO2005054440A2 (en) * | 2003-12-01 | 2005-06-16 | Tissue Engineering Consultants, Inc. | A biomimetic composition reinforced by a polyelectrolytic complex of hyaluronic acid and chitosan |
WO2005097871A1 (en) * | 2004-03-22 | 2005-10-20 | Universite De Geneve | Pseudo-thermosetting neutralized chitosan composition forming a hydrogel and a process for producing the same |
-
2005
- 2005-12-07 CN CNB2005100618683A patent/CN100431624C/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20040117033A1 (en) * | 1999-03-24 | 2004-06-17 | Frondoza Carmelita G. | Method for composite cell-based implants |
CN1386478A (zh) * | 2001-05-23 | 2002-12-25 | 中国科学院化学研究所 | 组织工程用复合结构细胞支架及其制法和用途 |
US20050054101A1 (en) * | 2003-07-17 | 2005-03-10 | Global Cell Solutions Llc | Automated cell culture system and process |
WO2005054440A2 (en) * | 2003-12-01 | 2005-06-16 | Tissue Engineering Consultants, Inc. | A biomimetic composition reinforced by a polyelectrolytic complex of hyaluronic acid and chitosan |
WO2005097871A1 (en) * | 2004-03-22 | 2005-10-20 | Universite De Geneve | Pseudo-thermosetting neutralized chitosan composition forming a hydrogel and a process for producing the same |
CN1593671A (zh) * | 2004-06-25 | 2005-03-16 | 清华大学 | 用于脂肪组织工程的多孔壳聚糖支架材料的制备方法 |
CN1586636A (zh) * | 2004-07-15 | 2005-03-02 | 浙江大学 | 将水凝胶复合到多孔组织工程支架中的方法 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
聚乳酸/壳聚糖复合支架材料的生物相容性研究. 李立华等.中国生物医学工程学报,第24卷第4期. 2005 |
聚乳酸/壳聚糖复合支架材料的生物相容性研究. 李立华等.中国生物医学工程学报,第24卷第4期. 2005 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN1799644A (zh) | 2006-07-12 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN104582747B (zh) | 用于制造具有活细胞的水凝胶微粒的方法和用于制造组织工程支架的组合物 | |
CN104892962B (zh) | 一种巯基/二硫键可控自交联透明质酸水凝胶的制备方法及其应用 | |
CN100431624C (zh) | 可注射聚乳酸微载体/壳聚糖水凝胶复合支架的制备方法 | |
CN109734851B (zh) | 一种温敏聚合物及其合成方法与温敏可注射水凝胶 | |
CN102172498B (zh) | 一种三维多孔壳聚糖/明胶微球及其制备方法和在肝细胞培养中的应用 | |
CN106377797A (zh) | 儿茶酚基改性生物大分子支架材料的制备方法 | |
CN101848738A (zh) | 制备用于组织工程、细胞培养和细胞传递的多孔支架的方法 | |
CN104144715A (zh) | 胶原蛋白结构体及胶原蛋白结构体的制造方法 | |
CN101824160A (zh) | 一种壳聚糖/聚乙烯醇/聚乳酸共混多孔膜的制备方法 | |
CN100594949C (zh) | 注射型聚酯类微载体与纤维蛋白凝胶复合支架的制备方法 | |
CN104262648A (zh) | 一种以双醛聚乙二醇为交联剂的胶原基生物医用材料及其制备方法 | |
CN102488925A (zh) | 一种可注射的关节软骨组织修复材料及其制备方法 | |
Hu et al. | Preparation and properties of an injectable scaffold of poly (lactic-co-glycolic acid) microparticles/chitosan hydrogel | |
CN104587531B (zh) | 一种修复关节软骨损伤的凝胶支架的制备方法 | |
JP4002299B2 (ja) | 組織処理用の改善されたヒドロゲル | |
RU2234514C2 (ru) | Макропористые хитозановые гранулы и способ их получения, способ культивирования клеток | |
Mahboubian et al. | Temperature-responsive methylcellulose–hyaluronic hydrogel as a 3D cell culture matrix | |
CN102604149B (zh) | 三维壳聚糖水凝胶及其制备方法 | |
CN104001208A (zh) | 一种生物高分子/甲壳素纳米晶复合支架材料及其制备方法 | |
CN107149702A (zh) | 一种聚多巴胺改性多孔支架的制备 | |
CN104548196B (zh) | 一种基于乙烯基‑巯基交联的组织工程支架材料及其制备方法 | |
CN103007342B (zh) | 生物可降解医用磷酸三钙/γ-聚谷氨酸复合材料及其制备方法 | |
CN113577381A (zh) | 基于微凝胶支架材料构建的可注射软骨及其应用 | |
CN1330386C (zh) | 用于组织工程的可注射性壳聚糖水凝胶的制备方法 | |
CN113244453B (zh) | 可控多级交联可注射热致相变水凝胶的制备方法及应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant | ||
C17 | Cessation of patent right | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20081112 Termination date: 20111207 |