CH650680A5

CH650680A5 - PHARMACEUTICAL AGENT FROM HUMAN INSULIN, HUMAN C PEPTIDE AND HUMAN PROINSULIN.

Info

Publication number: CH650680A5
Application number: CH5011/82A
Authority: CH
Inventors: Ronald Eugene Chance; Bruce Hill Frank; John Allison Galloway
Original assignee: Lilly Co Eli
Priority date: 1981-08-27
Filing date: 1982-08-23
Publication date: 1985-08-15
Also published as: NZ201685A; SE8204872D0; IL66612A; LU84357A1; MW3982A1; JPS5846026A; GB2104381B; AU551734B2; CA1176159A; IT1153183B; IT8223018A0; BE894187A; AU8759782A; ZA826160B; ZW17682A1; GB2104381A; FR2511868A1; PH18640A; NL8203313A; DE3232035A1

Description

Aufgabe der Erfindung ist nun die Bereitstellung eines 35 pharmazeutischen Mittels, durch das sich die natürliche hormonale Homöostase in einem diabetischen Zustand besser angenähert erreichen und aufrechterhalten lässt als durch Verabreichung von Insulin allein. The object of the invention is now to provide a pharmaceutical agent by means of which the natural hormonal homeostasis in a diabetic state can be better approximated and maintained than by administering insulin alone.

Diese Aufgabe wird nun erfindungsgemäss gelöst durch 40 ein pharmazeutisches Mittel aus einem pharmazeutisch unbedenklichen Träger und einer Wirkstoffkombination, das dadurch gekennzeichnet ist, dass es als Wirkstoffkombination Human-Insulin, Human-C-Peptid und Human-Proinsulin enthält, wobei das Molverhältnis von Human-Insulin zu 45 Human-C-Peptid 1:4 bis 4:1 beträgt und das Gewichtsverhältnis von Human-Insulin zu Human-Proinsulin 1:100 bis 100:1 ausmacht. This object is now achieved according to the invention by a pharmaceutical agent comprising a pharmaceutically acceptable carrier and an active substance combination, which is characterized in that it contains human insulin, human C peptide and human proinsulin as the active substance combination, the molar ratio of human Insulin to 45 human C peptide is 1: 4 to 4: 1 and the weight ratio of human insulin to human proinsulin is 1: 100 to 100: 1.

Die drei wesentlichen Bestandteile des erfindungsgemäs-sen pharmazeutischen Mittels sind Human-Insulin, Human-50 C-Peptid und Human-Proinsulin. The three essential components of the pharmaceutical agent according to the invention are human insulin, human 50 C peptide and human proinsulin.

Die Verabreichung einer Kombination aus Human-Insu-lin, Human-C-Peptid und Human-Proinsulin unter Verwendung eines erfindungsgemässen Mittels ergibt eine hatürli-chere Verwertung der Glucose und eine bessere Glucose-55 Steuerung als die Verwendung von Insulin allein, so dass die oben erwähnten nachteiligen Diabeteskomplikationen verringert werden. The administration of a combination of human insulin, human C peptide and human proinsulin using an agent according to the invention results in a more rapid utilization of the glucose and a better control than the use of insulin alone, so that the adverse diabetes complications mentioned above are reduced.

Human-Proinsulin ist über eine Reihe verschiedener Wege zugänglich, beispielsweise durch organische Synthese, 6o Isolierung aus der Bauchspeicheldrüse von Menschen und seit neuem auch durch Rekombinations-DNA-Methodolo-gie. Human proinsulin is accessible in a number of different ways, for example by organic synthesis, isolation from human pancreas, and more recently by recombinant DNA methodology.

Die Herstellung von Proinsulin unter Anwendung der Rekombinations-DNA-Methodologie erfordert die Bildung 65 einer Sequenz einer DNA-Codierung für die Aminosäuresequenz von Human-Proinsulin, was sich entweder durch Isolierung, Konstruktion oder eine Kombination aus beidem erreichen lässt. Die Human-Proinsulin-DNA wird dann in The production of proinsulin using the recombinant DNA methodology requires the formation of a sequence of DNA coding for the amino acid sequence of human proinsulin, which can be accomplished either by isolation, construction, or a combination of both. The human proinsulin DNA is then in

3 3rd

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Lesephase in einen geeigneten Clonierungs- und Expressionsträger eingesetzt. Der Träger dient zur Transformierung eines geeigneten Mikroorganismus, und der hierbei erhaltene transformierte Mikroorganismus wird hierauf Fermentationsbedingungen unterzogen, die (a) zur Bildung weiterer Kopien des proinsulingenhaltigen Vektors und (b) zur Expression von Proinsulin oder einem Proinsulinvorläufer führen. Reading phase used in a suitable cloning and expression carrier. The carrier is used to transform a suitable microorganism, and the transformed microorganism obtained is then subjected to fermentation conditions which (a) lead to the formation of further copies of the vector containing proinsulin and (b) to the expression of proinsulin or a proinsulin precursor.

Handelt es sich beim Expressionsprodukt um einen Proinsulinvorläufer, dann enthält ein solches Produkt im allgemeinen die Human-Proinsulinaminosäuresequenz, die an ihrer endständigen Aminogruppe an ein Bruchstück eines Proteins gebunden ist, das normalerweise in der Gensequenz ausgedrückt wird, in welche das Proinsulin eingesetzt worden ist. Die Proinsulinaminosäuresequenz ist an das Proteinbruchstück über eine spezifisch spaltbare Stelle gebunden, bei der es sich normalerweise um Methionin handelt. Dieses Produkt wird gewöhnlich als verschmolzenes Genprodukt bezeichnet. When the expression product is a proinsulin precursor, such a product generally contains the human proinsulin amino acid sequence which is attached at its terminal amino group to a fragment of a protein which is normally expressed in the gene sequence in which the proinsulin has been inserted. The proinsulin amino acid sequence is linked to the protein fragment via a specifically cleavable site, which is usually methionine. This product is commonly referred to as a fused gene product.

Die erhaltene Proinsulinaminosäuresequenz wird vom verschmolzenen Genprodukt mittels Cyanogenbromid abgespalten, worauf man die Cysteinsulfhydrylreste der Proinsulinaminosäuresequenz durch übliche Umwandlung in die entsprechenden S-Sulfonate stabilisiert. The proinsulin amino acid sequence obtained is cleaved from the fused gene product by means of cyanogen bromide, whereupon the cysteine sulfhydryl residues of the proinsulin amino acid sequence are stabilized by customary conversion into the corresponding S-sulfonates.

Das erhaltene Proinsulin-S-sulfonat wird dann gereinigt, und im Anschluss daran überführt man das gereinigte Proin-sulin-S-sulfonat in Proinsulin, indem man die drei erforderlichen Disulfidbindungen an den geeigneten Stellen bildet. Hierauf wird das in dieser Weise gebildete Proinsulin einer Reinigung unterzogen. The proinsulin S-sulfonate obtained is then purified, and then the purified proinsulin S-sulfonate is converted to proinsulin by forming the three required disulfide bonds at the appropriate sites. The proinsulin formed in this way is then subjected to purification.

Der zweite wirksame Bestandteil des erfindungsgemässen Mittels, nämlich das Human-Insulin, ist ebenfalls über die verschiedensten Wege zugänglich, beispielsweise durch organische Synthese, herkömmliche Isolierung aus der Bauchspeicheldrüse von Menschen, Umwandlung von isoliertem tierischem Insulin, Umwandlung von Human-Proinsulin oder Rekombinations-DNA-Methodologie. The second active component of the agent according to the invention, namely human insulin, is also accessible in a wide variety of ways, for example by organic synthesis, conventional isolation from the human pancreas, conversion of isolated animal insulin, conversion of human proinsulin or recombination DNA -Methodology.

Human-Proinsulin lässt sich enzymatisch spalten, und zwar gewöhnlich unter Verwendung von Trypsin oder Carb-oxypeptidase B, wodurch Human-Insulin gebildet wird. Human proinsulin can be cleaved enzymatically, usually using trypsin or carboxypeptidase B, which produces human insulin.

Ähnlich wie oben für die Herstellung von Human-Proinsulin beschrieben, lässt sich unter Anwendung der Rekombinations-DNA-Methodologie auch Human-Insulin durch getrennte Expression und Isolierung der A-Kette von Human-Insulin und der B-Kette von Human-Insulin und anschliessende geeignete Bildung der Disulfidbindung herstellen. Similar to that described above for the production of human proinsulin, human recombinant DNA can also be used to isolate human insulin by expressing and isolating the A chain from human insulin and the B chain from human insulin and subsequent ones produce suitable formation of the disulfide bond.

Human-Insulin lässt sich ferner auch aus Schweineinsulin herstellen. Human-Insulin unterscheidet sich von Schweineinsulin durch eine einzige Aminosäure, nämlich durch die an der endständigen Carboxylgruppe der B-Kette befindliche Aminosäure. Zu diesem Zweck ersetzt man die bei Schweineinsulin vorhandene B-30-Aminosäure, nämlich Alanin, durch Threonin. Im einzelnen wird hierzu auf US-PS 3 276 961 hingewiesen. Human insulin can also be produced from pig insulin. Human insulin differs from swine insulin by a single amino acid, namely the amino acid located on the terminal carboxyl group of the B chain. For this purpose, the B-30 amino acid present in porcine insulin, namely alanine, is replaced by threonine. In particular, reference is made to US Pat. No. 3,276,961.

Der dritte aktive Bestandteil des erfindungsgemässen Mittels, nämlich das Human-C-Peptid, ist ein Teil eines Peptids, das bei Human-Proinsulin vorhanden ist und über das die Ketten A und B des Insulins miteinander verbunden sind. Dieses Peptid, das auch als Verknüpfungspeptid bezeichnet wird, wird während der Bildung von Human-Insulin aus Proinsulin entfernt. Das bei Human-Insulin vorhandene Verknüpfungspeptid hat die folgende Formel The third active component of the agent according to the invention, namely the human C peptide, is part of a peptide which is present in human proinsulin and by means of which the chains A and B of the insulin are linked to one another. This peptide, also known as the linking peptide, is removed from proinsulin during the formation of human insulin. The linking peptide present in human insulin has the following formula

Arg-Arg-Glu-Ala-Glu-Asp-Leu-Gln-Val-Gly-Gln-Val-Glu- Arg-Arg-Glu-Ala-Glu-Asp-Leu-Gln-Val-Gly-Gln-Val-Glu-

Leu-Gly-Gly-Gly-Pro-Gly-Ala-Gly-Ser-Leu-Gln-Pro-Leu- Leu-Gly-Gly-Gly-Pro-Gly-Ala-Gly-Ser-Leu-Gln-Pro-Leu-

Ala-Leu-Glu-Gly-Ser-Leu-Gln-Lys-Arg. Ala-Leu-Glu-Gly-Ser-Leu-Gln-Lys-Arg.

Das im erfindungsgemässen Mittel enthaltene Human-C-Peptid unterscheidet sich vom Verknüpfungspeptid durch das Fehlen von vier Aminosäuren, nämlich von zwei Aminosäuren an jedem Ende. Das Human-C-Peptid hat daher fol-5 gende Struktur The human C peptide contained in the agent according to the invention differs from the linking peptide in that there are no four amino acids, namely two amino acids at each end. The human C peptide therefore has the following structure

Glu-Ala-Glu-Asp-Leu-Gln-Val-Gly-Gln-Val-Glu-Leu-Gly- Glu-Ala-Glu-Asp-Leu-Gln-Val-Gly-Gln-Val-Glu-Leu-Gly-

Gly-Gly-Pro-Gly-Ala-Gly-Ser-Leu-Gln-Pro-Leu-Ala-Leu- Gly-Gly-Pro-Gly-Ala-Gly-Ser-Leu-Gln-Pro-Leu-Ala-Leu-

Glu-Gly-Ser-Leu-Gln. Glu-Gly-Ser-Leu-Gln.

10 10th

Das als Bestandteil beim erfindungsgemässen Mittel benötigte Human-C-Peptid kann durch chemische Synthese hergestellt werden, und hierzu wird beispielsweise auf Diabetes 27 (Suppl. 1), 149 bis 160 (1978) hingewiesen, oder es lässt i5 sich auch aus Human-Proinsulin durch Spaltung bei der Bildung von Human-Insulin erzeugen. The human C-peptide required as a constituent of the agent according to the invention can be produced by chemical synthesis, and for this purpose reference is made, for example, to Diabetes 27 (Suppl. 1), 149 to 160 (1978), or it can also be made from human proinsulin by cleavage in the formation of human insulin.

Human-C-Peptid ist ferner auch zusammen mit Human-Insulin durch die oben beschriebene enzymatische Spaltung von Human-Proinsulin zugänglich. 20 Das erfmdungsgemässe Mittel enthält Human-Insulin, Human-C-Peptid und Human-Proinsulin. Human-Proinsulin ist darin in einem Gewichtsverhältnis von Human-Insulin zu Human-Proinsulin von 1:100 bis 100:1 vorhanden. Vorzugsweise beträgt das Gewichtsverhältnis von Human-Insu-25 ün zu Human-Proinsulin 1:2 bis 100:1, insbesondere 1:1 bis 20:1 und vor allem 4:1 bis 20:1. Weitere bevorzugte Gewichtsbereiche von Human-Insulin zu Human-Proinsulin sind 1:30 bis 100:1,1:15 bis 100:1,1:10 bis 100:1,1:30 bis 20:1,1:15 bis 20: lundi: 10 bis 20:1. - . . 30 Human-C-Peptid ist im erfindungsgemässen Mittel in einem Molverhältnis von Human-Insulin zu Human-C-Peptid von 1:4 bis 4:1 enthalten. Vorzugsweise beträgt das Molverhältnis von Human-Insulin zu Human-C-Peptid 1:2 bis 2:1, und insbesondere 1:1 bis 2:1. Human C peptide is also accessible together with human insulin through the enzymatic cleavage of human proinsulin described above. 20 The agent according to the invention contains human insulin, human C peptide and human proinsulin. Human proinsulin is present in a weight ratio of human insulin to human proinsulin of 1: 100 to 100: 1. The weight ratio of human insulin to human proinsulin is preferably 1: 2 to 100: 1, in particular 1: 1 to 20: 1 and especially 4: 1 to 20: 1. Further preferred weight ranges from human insulin to human proinsulin are 1:30 to 100: 1.1: 15 to 100: 1.1: 10 to 100: 1.1: 30 to 20: 1.1: 15 to 20: lundi: 10 to 20: 1. -. . Human C peptide is contained in the agent according to the invention in a molar ratio of human insulin to human C peptide from 1: 4 to 4: 1. The molar ratio of human insulin to human C peptide is preferably 1: 2 to 2: 1, and in particular 1: 1 to 2: 1.

35 Das erfmdungsgemässe Mittel zeichnet sich, wie bereits erwähnt, vor allem dadurch aus, dass sich mit ihm eine natürliche hormonale Homöostase besser erreichen lässt, so dass hierdurch die bekannten Komplikationen von Diabetes unterbunden, wesentlich vermindert oder verzögert werden 40 können. Bestimmten Diabetikern lässt sich Insulin durch subkutane Injektion nicht wirksam verabreichen, da an der Injektionsstelle Proteasen zugegen sind, die das Insulin rasch zerstören, bevor es vom Blutstrom absorbiert und an die Empfangerstellen transportiert werden kann. Diesen Diabe-45 tikern muss Insulin durch intravenöse Injektion gegeben werden, wenn sie überhaupt mit Insulin behandelt werden können. Die hierzu erforderhchen wiederholten intravenösen Injektionen sind infolge der damit verbundenen Schädigung der Venen des Empfängers und der hierdurch verursachten 50 Infektionen unerwünscht. Überraschenderweise wurde demgegenüber nun gefunden, dass Human-Proinsulin von diesen insulinabbauenden Proteasen nicht abgebaut wird, so dass sich dieses durch subkutane Injektion verabreichen lässt. Seine Stabilität und die hierdurch bedingte gute Verfügbarkeit 55 tragen zur Erzielung einer natürlichen hormonalen Homöostase bei. Insulin und Proinsulin bilden zusammen Komplexe, so dass zu erwarten ist, dass Proinsulin das ansonsten abbaubare Insulin auch schützt. 35 As already mentioned, the agent according to the invention is characterized above all by the fact that it can be used to achieve natural hormonal homeostasis better, so that the known complications of diabetes can thereby be prevented, significantly reduced or delayed 40. Certain diabetics cannot be effectively administered insulin by subcutaneous injection, as proteases are present at the injection site that destroy the insulin quickly before it can be absorbed by the bloodstream and transported to the recipient sites. These diabetics must be given insulin by intravenous injection if they can be treated with insulin at all. The repeated intravenous injections required for this purpose are undesirable due to the damage to the recipient's veins and the resulting 50 infections. In contrast, it has now surprisingly been found that human proinsulin is not degraded by these insulin-degrading proteases, so that it can be administered by subcutaneous injection. Its stability and the resulting good availability 55 contribute to the achievement of a natural hormonal homeostasis. Insulin and proinsulin form complexes, so it can be expected that proinsulin will also protect the otherwise degradable insulin.

60 Neuere Untersuchungen (Diabetes 31, Suppl. 2, 126A (1982) ) haben ferner zu der Erkenntnis geführt, dass Human-Proinsulin in Zielgewebe, beispielsweise in Fettzellen, eingebaut wird. Seine besondere intrazelluläre Wirkung auf molekularem Massstab ist zwar bis jetzt noch unbekannt, 65 doch wird hierdurch die Erkenntnis weiter gestützt, dass Human-Proinsulin eine aktive Rolle bei der Erzielung einer natürlichen hormonalen Homöostase spielt und hierfür notwendig ist. 60 Recent studies (Diabetes 31, Suppl. 2, 126A (1982)) have also led to the finding that human proinsulin is incorporated into target tissue, for example in fat cells. Its special intracellular effect on a molecular scale is still unknown, 65 but this further supports the knowledge that human proinsulin plays an active role in achieving natural hormonal homeostasis and is necessary for this.

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Zusätzlich zur Verbesserung der Erzielung einer natürlichen hormonalen Homöostase ergeben diejenigen erfindungsgemässen Mittel, bei denen das Gewichtsverhältnis von Human-Insulin zu Human-Proinsulin gleich ist oder weniger als etwa 1:1 beträgt, den weiteren Vorteil eines besonders langen hypoglykämischen Effekts. Bevorzugte Mittel, die diesen weiteren Vorteil aufweisen, verfügen über ein Gewichtsverhältnis von Human-Insulin zu Human-Proinsulin von 1:100 bis 1:1. Andere bevorzugte Gewichtsverhältnisse von Human-Insulin zu Human-Proinsulin betragen 1:30 bis 1:1, und insbesondere 1:30 bis 1:10 oder 1:10 bis 1:1. Bei solchen Mitteln ist der Bedarf an herkömmlichen Insulin-Formulierungszusätzen nur gering, wie Protamin, das im NPH-Insulin vorhanden ist, oder überschüssigem Zink, das in Lente-Insulin zugegen ist. Beide diese Zusätze sind künstlich und somit nicht physiologisch. In addition to improving the achievement of a natural hormonal homeostasis, those agents according to the invention in which the weight ratio of human insulin to human proinsulin is equal to or less than approximately 1: 1 give the further advantage of a particularly long hypoglycemic effect. Preferred agents which have this further advantage have a weight ratio of human insulin to human proinsulin of 1: 100 to 1: 1. Other preferred weight ratios of human insulin to human proinsulin are 1:30 to 1: 1, and in particular 1:30 to 1:10 or 1:10 to 1: 1. With such agents, the need for conventional insulin formulation additives such as protamine, which is present in NPH insulin, or excess zinc, which is present in lente insulin, is low. Both of these additives are artificial and therefore not physiological.

In Diabetes 31, Suppl. 2,135A (1982) werden Untersuchungen beschrieben, die zeigen, dass die Human-Insulinre-zeptorbindung durch die Anwesenheit von Human-Proinsulin verbessert wird. Auch durch diese Ergebnisse wird die Erkenntnis wiederum weiter gestützt, dass die Verfügbarkeit und Anwesenheit von Human-Proinsulin zu einer Verbesserung oder Wiederherstellung der natürlichen hormonalen Homöostase führt. In Diabetes 31, Suppl. 2,135A (1982), studies are described which show that the human insulin receptor binding is improved by the presence of human proinsulin. These results also support the knowledge that the availability and presence of human proinsulin leads to an improvement or restoration of natural hormonal homeostasis.

Die zur Aufrechterhaltung einer natürlichen hormonalen Homöostase oder zur Erzielung eines Zustands, der der natürlichen hormonalen Homöostase beim Diabetiker stärker angenähert ist, erforderliche Menge an erfindungsgemässem Mittel ist natürlich abhängig von der Schwere des diabetischen Zustands. Die zu verabreichende Menge hängt auch vom jeweiligen Verabreichungsweg ab. Letztendlich ist die Menge an zu verabreichendem Mittel und die Häufigkeit einer solchen Verabreichung der Entscheidung des jeweiligen Arztes überlassen. Im allgemeinen wird ein Dosierungsbereich gewählt, der für etwa 0,02 bis etwa 5 Einheiten an Human-Insulin pro kg Körpergewicht und pro Tag sorgt und der vorzugsweise etwa 0,1 bis etwa 1 Einheit an Human-Insulin pro kg Körpergewicht und pro Tag ergibt. The amount of agent according to the invention required to maintain natural hormonal homeostasis or to achieve a state which is more closely approximated to natural hormonal homeostasis in the diabetic is of course dependent on the severity of the diabetic state. The amount to be administered also depends on the respective route of administration. Ultimately, the amount of agent to be administered and the frequency of such administration is up to the decision of the particular doctor. In general, a dosage range is selected which provides about 0.02 to about 5 units of human insulin per kg body weight and per day and which preferably provides about 0.1 to about 1 unit of human insulin per kg body weight and per day .

Das erfmdungsgemässe Mittel wird parenteral verabreicht, beispielsweise subkutan, intramuskulär oder intravenös. Das Mittel enthält den Wirkstoff, nämlich Human-Insulin, Human-C-Peptid und Human-Proinsulin, zusammen mit einem pharmazeutisch unbedenklichen Träger hierfür und gegebenenfalls auch noch zusammen mit anderen therapeutischen Bestandteilen. Die Gesamtmenge an im erfindungsgemässen Mittel vorhandenem Wirkstoff macht im allgemeinen etwa 99,99 bis etwa 0,01 Gew.-% aus. Der vorhandene Träger muss mit den anderen Bestandteilen des Mittels verträglich sein und darf natürlich auch zu keiner Beeinträchtigung des Patienten führen. The agent according to the invention is administered parenterally, for example subcutaneously, intramuscularly or intravenously. The agent contains the active ingredient, namely human insulin, human C peptide and human proinsulin, together with a pharmaceutically acceptable carrier therefor and, if appropriate, also together with other therapeutic constituents. The total amount of active ingredient present in the composition according to the invention generally makes up about 99.99 to about 0.01% by weight. The existing carrier must be compatible with the other components of the agent and, of course, must not impair the patient.

Erfmdungsgemässe Mittel, die sich für die parenterale Verabreichung eignen, sind am besten sterile wässrige Lösungen und/oder Suspensionen der pharmazeutisch wirksamen Bestandteile, und diese Lösungen oder Suspensionen sind vorzugsweise mit dem Blut des Empfängers isotonisch gemacht, was sich im allgemeinen unter Verwendung von Natriumchlorid, Glycerin, Glucose, Mannit, Sorbit und ähnlichen bekannten Mitteln erreichen lässt. Zusätzlich können die Mittel auch noch irgendeine Anzahl von Hilfsstoffen enthalten, wie Puffer, Konservierungsmittel, Dispergierungs-mittel, Mittel zur Förderung eines raschen Wirkungsbeginns, Mittel zur Förderung einer verlängerten Wirkungsdauer oder andere bekannte Mittel. Typische Konservierungsmittel sind beispielsweise Phenol, m-Kresol oder Me-thyl-p-hydroxybenzoat. Beispiele für typische Puffer sind Natriumphosphat, Natriumacetat oder Natriumeitrat. Agents according to the invention which are suitable for parenteral administration are best sterile aqueous solutions and / or suspensions of the pharmaceutically active constituents, and these solutions or suspensions are preferably made isotonic with the blood of the recipient, which is generally done using sodium chloride, Glycerin, glucose, mannitol, sorbitol and similar known agents can be achieved. In addition, the agents can also contain any number of auxiliaries, such as buffers, preservatives, dispersing agents, agents for promoting a rapid onset of action, agents for promoting an extended duration of action or other known agents. Typical preservatives are, for example, phenol, m-cresol or methyl p-hydroxybenzoate. Examples of typical buffers are sodium phosphate, sodium acetate or sodium citrate.

Ferner können auch entsprechende Mittel zur geeigneten Einstellung des pH-Werts vorhanden sein, beispielsweise Appropriate means for suitably adjusting the pH can also be present, for example

Säuren, wie Chlorwasserstoffsäure, oder Basen, wie Natriumhydroxid. Der pH-Wert entsprechender wässriger Mittel liegt im allgemeinen zwischen etwa 2 und 8, vorzugsweise etwa 6,8 und 8,0. Acids such as hydrochloric acid or bases such as sodium hydroxide. The pH of corresponding aqueous agents is generally between about 2 and 8, preferably about 6.8 and 8.0.

Andere geeignete Zusätze sind beispielsweise zweiwertige Zinkionen, die, falls überhaupt vorhanden, im allgemeinen in einer Menge von etwa 0,01 bis etwa 0,5 mg/100 Einheiten Human-Proinsulin anwesend sind, oder Protaminsalze, beispielsweise in Form des Sulfats, die, falls überhaupt, im allgemeinen in einer Menge von etwa 0,1 bis etwa 3 mg/100 Einheiten Human-Proinsulin vorliegen. Other suitable additives are, for example, divalent zinc ions, which, if any, are generally present in an amount of about 0.01 to about 0.5 mg / 100 units of human proinsulin, or protamine salts, for example in the form of the sulfate, which if any, generally present in an amount from about 0.1 to about 3 mg / 100 units of human proinsulin.

Die Erfindung wird im folgenden anhand von Beispielen weiter erläutert. The invention is explained in more detail below with the aid of examples.

Beispiel 1 example 1

Formulierung aus neutralem regulärem Human-Insulin, Human-C-Peptid und Human-Proinsulin (Molverhältnis von Human-Insulin zu Human-C-Peptid 1:4, Gewichtsver-hältnis von Human-Insulin zu Human-Proinsulin 100:1,40 Einheiten Insulin pro ml) Formulation of neutral regular human insulin, human C peptide and human proinsulin (molar ratio of human insulin to human C peptide 1: 4, weight ratio of human insulin to human proinsulin 100: 1.40 units Insulin per ml)

Zur Herstellung von 10 ml dieser Formulierung vermischt man Mix to make 10 ml of this formulation

Human-Zinkinsulin (28 E/mg) 400 E Human zinc insulin (28 U / mg) 400 U

Human-C-Peptid 30 mg Human C peptide 30 mg

Human-Proinsulin 0,14 mg Human proinsulin 0.14 mg

Phenol, destilliert 20 mg Phenol, 20 mg distilled

Glycerin 160 mg Glycerin 160 mg

Wasser und entweder 10%-ige Chlorwasserstoffsäure oder 10%-iges Natriumhydroxid in solcher Menge miteinander, dass sich eine Zusammensetzung mit einem Volumen von 10 ml und einem End-pH-Wert von 7,0 bis 7,8 ergibt. Water and either 10% hydrochloric acid or 10% sodium hydroxide together in such an amount that a composition with a volume of 10 ml and a final pH of 7.0 to 7.8 results.

Beispiel 2 Example 2

Formulierung aus neutralem regulärem Human-Insulin, Human-C-Peptid und Human-Proinsulin (Molverhältnis von Human-Insulin zu Human-C-Peptid 1:1, Gewichts Verhältnis von Human-Insulin zu Human-Proinsulin 20:1,100 Einheiten Insulin pro ml) Formulation of neutral regular human insulin, human C peptide and human proinsulin (molar ratio of human insulin to human C peptide 1: 1, weight ratio of human insulin to human proinsulin 20: 1,100 units of insulin per ml )

Human-Zinkinsulin (28 E/mg) 1000 E Human zinc insulin (28 U / mg) 1000 U

Human-C-Peptid 19 mg Human C peptide 19 mg

Human-Proinsulin 1,8 mg Human proinsulin 1.8 mg

Phenol, destilliert 20 mg Phenol, 20 mg distilled

Glycerin 160 mg Glycerin 160 mg

Beispiel 3 Example 3

Formulierung aus Protamin, Human-Zinkinsulin, Human-C-Peptid und Human-Proinsulin (Molverhältnis von Human-Insulin zu Human-C-Peptid 1:1, Gewichtsverhältnis von Human-Insulin zu Human-Proinsulin 20:1,40 Einheiten Insulin pro ml) Formulation of protamine, human zinc insulin, human C peptide and human proinsulin (molar ratio of human insulin to human C peptide 1: 1, weight ratio of human insulin to human proinsulin 20: 1.40 units of insulin per ml)

Human-Zinkinsulin (28 E/mg) 400 E Human zinc insulin (28 U / mg) 400 U

Human-C-Peptid 8 mg Human C peptide 8 mg

Human-Proinsulin 0,7 mg Human proinsulin 0.7 mg

Phenol, destilliert 25 mg Phenol, 25 mg distilled

Zinkoxid 0,78 mg Zinc oxide 0.78 mg

Glycerin 160 mg Glycerin 160 mg

Protaminsulfat 4,0 bis 6,0 mg Protamine sulfate 4.0 to 6.0 mg

Natriumphosphat, Kristalle 38 mg Sodium phosphate, crystals 38 mg

Wasser und entweder 10%-ige Chlorwasserstoffsäure oder 10%-iges Natriumhydroxid in solcher Menge miteinander, Water and either 10% hydrochloric acid or 10% sodium hydroxide in such an amount with each other,

4 4th

5 5

10 10th

15 15

20 20th

25 25th

30 30th

35 35

40 40

45 45

50 50

55 55

60 60

65 65

650 680 650 680

dass sich eine Zusammensetzung mit einem Volumen von 10 ml und einem End-pH-Wert von 7,1 bis 7,4 ergibt. that a composition with a volume of 10 ml and a final pH of 7.1 to 7.4 results.

Beispiel 4 Example 4

Formulierung aus Protamin, Human-Zinkinsulin, Hu-man-C-Peptid und Human-Proinsulin (Molverhältnis von Human-Insulin zu Human-C-Peptid 2:1, Gewichtsverhältnis von Human-Insulin zu Human-Proinsulin 1:1, 100 Einheiten Insulin pro ml) Formulation of protamine, human zinc insulin, Hu-man C peptide and human proinsulin (molar ratio of human insulin to human C peptide 2: 1, weight ratio of human insulin to human proinsulin 1: 1, 100 units Insulin per ml)

Human-Zinkinsulin (28 E/mg) 1000 E Human zinc insulin (28 U / mg) 1000 U

Human-C-Peptid 9 mg Human C peptide 9 mg

Human-Proinsulin 36 mg Human proinsulin 36 mg

Phenol, destilliert 25 mg Phenol, 25 mg distilled

Zinkoxid 2,0 mg Zinc oxide 2.0 mg

Glycerin 160 mg Protaminsulfat 10 bis 15 mg Glycerin 160 mg protamine sulfate 10 to 15 mg

Natriumphosphat, Kristalle 38 mg Sodium phosphate, crystals 38 mg

Wasser und entweder 10%-ige Chlorwasserstoffsäure oder 10%-iges Natriumhydroxid in solcher Menge miteinander, dass sich eine Zusammensetzung mit einem Volumen von 10 ml und einem End-pH-Wert von 7,1 bis 7,4 ergibt. Water and either 10% hydrochloric acid or 10% sodium hydroxide together in such an amount that a composition with a volume of 10 ml and a final pH of 7.1 to 7.4 results.

Beispiel 5 Example 5

Formulierung aus Isophanprotamin, Human-Zinkinsulin, Human-C-Peptid und Human-Proinsulin (Molverhältnis von Human-Insulin zu Human-C-Peptid 1:1, Gewichtsverhältnis von Human-Insulin zu Human-Proinsulin 4:1,40 Einheiten Insulin pro ml) Formulation of isophane protamine, human zinc insulin, human C peptide and human proinsulin (molar ratio of human insulin to human C peptide 1: 1, weight ratio of human insulin to human proinsulin 4: 1.40 units of insulin per ml)

Human-Zinkinsulin (28 E/mg) 400 E Human zinc insulin (28 U / mg) 400 U

Human-C-Peptid 8 mg Human C peptide 8 mg

Human-Proinsulin 3,6 mg m-Kresol, destilliert 16 mg Human proinsulin 3.6 mg m-cresol, distilled 16 mg

Phenol, destilliert 6,5 mg Phenol, distilled 6.5 mg

Glycerin 160 mg Glycerin 160 mg

Protaminsulfat 1,2 bis 2,4 mg Protamine sulfate 1.2 to 2.4 mg

Natriumphosphat, Kristalle 38 mg Sodium phosphate, crystals 38 mg

Beispiel 6 Example 6

Formulierung aus Isophanprotamin, Human-Zinkinsu-lin, Human-C-Peptid und Human-Proinsulin (Molverhältnis von Human-Insulin zu Human-C-Peptid 4:1, Gewichtsver-hältnis von Human-Insulin zu Human-Proinsulin 1:2,100 Einheiten Insulin pro ml) Formulation of isophane protamine, human zinc insulin, human C peptide and human proinsulin (molar ratio of human insulin to human C peptide 4: 1, weight ratio of human insulin to human proinsulin 1: 2,100 units Insulin per ml)

Human-Zinkinsulin (28 E/mg) 1000 E Human zinc insulin (28 U / mg) 1000 U

Human-C-Peptid 5 mg Human C peptide 5 mg

Human-Proinsulin 71 mg m-Kresol, destilliert 16 mg Human proinsulin 71 mg m-cresol, distilled 16 mg

Phenol, destilliert 6,5 mg Phenol, distilled 6.5 mg

Glycerin 160 mg Glycerin 160 mg

Protaminsulfat 3,0 bis 6,0 mg Protamine sulfate 3.0 to 6.0 mg

Natriumphosphat, Kristalle 38 mg Sodium phosphate, crystals 38 mg

Beispiel 7 Example 7

Formulierung aus Human-Zinkinsulin-Suspension, Hu-man-C-Peptid und Human-Proinsulin (Molverhältnis von Human-Insulin zu Human-C-Peptid 1:2, Gewichtsverhältnis s von Human-Insulin zu Human-Proinsulin 1:10,40 Einheiten Insulin pro ml) Formulation of human zinc insulin suspension, Hu-man C peptide and human proinsulin (molar ratio of human insulin to human C peptide 1: 2, weight ratio s of human insulin to human proinsulin 1: 10.40 Units of insulin per ml)

Human-Zinkinsulin (28 E/mg) 400 E Human zinc insulin (28 U / mg) 400 U

io Human-C-Peptid 15 mg io human C peptide 15 mg

Human-Proinsulin 143 mg Human proinsulin 143 mg

Natriumacetat, wasserfrei 16 mg Sodium acetate, anhydrous 16 mg

Natriumchlorid, Granulat 70 mg Sodium chloride, granules 70 mg

Methyl-p-hydroxybenzoat 10 mg i5 Zinkoxid 0,63 mg Methyl p-hydroxybenzoate 10 mg i5 zinc oxide 0.63 mg

Wasser und entweder 10%-ige Chlorwasserstoffsäure oder 10%-iges Natriumhydroxid in solcher Menge miteinander, dass sich eine Zusammensetzung mit einem Volumen von 10 ml und einem End-pH-Wert von 7,2 bis 7,5 ergibt. Water and either 10% hydrochloric acid or 10% sodium hydroxide together in such an amount that a composition with a volume of 10 ml and a final pH of 7.2 to 7.5 results.

20 20th

Beispiel 8 Example 8

Formulierung aus Human-Zinkinsulin-Suspension, Human-C-Peptid und Human-Proinsulin (Molverhältnis von Human-Insulin zu Human-C-Peptid 1:1, Gewichtsverhältnis von Human-Insulin zu Human-Proinsulin 20:1,100 Einheiten Insulin pro ml) Formulation of human zinc insulin suspension, human C peptide and human proinsulin (molar ratio of human insulin to human C peptide 1: 1, weight ratio of human insulin to human proinsulin 20: 1,100 units insulin per ml)

Human-Zinkinsulin (28 E/mg) 1000 E Human zinc insulin (28 U / mg) 1000 U

Human-C-Peptid 19 mg Human C peptide 19 mg

Human-Proinsulin 1,8 mg Human proinsulin 1.8 mg

Natriumacetat, wasserfrei 16 mg Sodium acetate, anhydrous 16 mg

Natriumchlorid, Granulat 70 mg Sodium chloride, granules 70 mg

Methyl-p-hydroxybenzoat 70 mg Methyl p-hydroxybenzoate 70 mg

Zinkoxid 1,6 mg Zinc oxide 1.6 mg

Wasser und entweder 10%-ige Chlorwasserstoffsäure oder 10%-iges Natriumhydroxid in solcher Menge miteinander, dass sich eine Zusammensetzung mit einem Volumen von 40 10 ml und einem End-pH-Wert von 7,2 bis 7,5 ergibt. Water and either 10% hydrochloric acid or 10% sodium hydroxide together in such an amount that a composition with a volume of 40 10 ml and a final pH of 7.2 to 7.5 results.

Beispiel 9 Example 9

45 Formulierung aus neutralem regulärem Human-Insulin, Human-C-Peptid und Human-Proinsulin (Molverhältnis von Human-Insulin zu Human-C-Peptid 1:4, Gewichtsverhältnis von Human-Insulin zu Human-Proinsulin 100:1,40 Einheiten Insulin pro ml) 45 formulation of neutral regular human insulin, human C peptide and human proinsulin (molar ratio of human insulin to human C peptide 1: 4, weight ratio of human insulin to human proinsulin 100: 1.40 units insulin per ml)

so Zur Herstellung von 10 ml dieser Formulierung vermischt man So mix to make 10 ml of this formulation

Human-Natriuminsulin (28 E/mg) 400 E Human sodium insulin (28 U / mg) 400 U

Human-C-Peptid 30 mg Human C peptide 30 mg

Human-Proinsulin 0,14 mg Human proinsulin 0.14 mg

55 Phenol, destilliert 20 mg 55 phenol, distilled 20 mg

Glycerin 160 mg Glycerin 160 mg

Wasser und entweder 10%-ige Chlorwasserstoffsäure oder 10%-iges Natriumhydroxid in solcher Menge miteinander, dass sich eine Zusammensetzung mit einem Volumen von 60 10 ml und einem End-pH-Wert von 7,0 bis 7,8 ergibt. Water and either 10% hydrochloric acid or 10% sodium hydroxide together in such an amount that a composition with a volume of 60-10 ml and a final pH of 7.0 to 7.8 results.

Beispiel 10 Example 10

Formulierung aus neutralem regulärem Human-Insulin, 65 Human-C-Peptid und Human-Proinsulin (Molverhältnis von Human-Insulin zu Human-C-Peptid 1:1, Gewichtsverhältnis von Human-Insulin zu Human-Proinsulin 20:1,100 Einheiten Insulin pro ml) Formulation of neutral regular human insulin, 65 human C peptide and human proinsulin (molar ratio of human insulin to human C peptide 1: 1, weight ratio of human insulin to human proinsulin 20: 1,100 units insulin per ml )

30 30th

650 680 650 680

Human-Natriuminsulin (28 E/mg) 1000 E Human sodium insulin (28 U / mg) 1000 U

Human-C-Peptid 19 mg Human C peptide 19 mg

Human-Proinsulin 1,8 mg Human proinsulin 1.8 mg

Phenol, destilliert 20 mg Phenol, 20 mg distilled

Glycerin 160 mg Glycerin 160 mg

6 6

5 5

10 10th

15 15

20 20th

25 25th

30 30th

35 35

40 40

45 45

50 50

55 55

60 60

65 65

Claims

650 680 650 680

2 2nd

PATENTANSPRÜCHE PATENT CLAIMS

1. Pharmazeutisches Mittel aus einem pharmazeutisch unbedenklichen Träger und einer Wirkstoffkombination, dadurch gekennzeichnet, dass es als Wirkstoffkombination Human-Insulin, Human-C-Peptid und Human-Proinsulin enthält, wobei das Molverhältnis von Human-Insulin zu Human-C-Peptid 1:4 bis 4:1 beträgt und das Gewichtsverhältnis von Human-Insulin zu Human-Proinsulin 1:100 bis 100:1 ausmacht. 1. Pharmaceutical composition consisting of a pharmaceutically acceptable carrier and a combination of active substances, characterized in that it contains as a combination of active substances human insulin, human C peptide and human proinsulin, the molar ratio of human insulin to human C peptide 1: 4 to 4: 1 and the weight ratio of human insulin to human proinsulin is 1: 100 to 100: 1.

2. Mittel nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass das Molverhältnis von Human-Insulin zu Human-C-Peptid 2. Composition according to claim 1, characterized in that the molar ratio of human insulin to human C peptide

1:2 bis 2:1, vorzugsweise 1:1 bis 2:1, beträgt. 1: 2 to 2: 1, preferably 1: 1 to 2: 1.

3. Mittel nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass das Gewichtsverhältnis von Human-Insulin zu Human-Proinsulin 1:10 bis 100:1, vorzugsweise 1:2 bis 100:1, ausmacht. 3. Composition according to claim 1, characterized in that the weight ratio of human insulin to human proinsulin is 1:10 to 100: 1, preferably 1: 2 to 100: 1.

4. Mittel nach Anspruch 1 oder 3, dadurch gekennzeichnet, dass das Gewichtsverhältnis von Human-Insulin zu Hu-man-Proinsulin 1:1 bis 20:1, vorzugsweise 4:1 bis 20:1, ausmacht. 4. Composition according to claim 1 or 3, characterized in that the weight ratio of human insulin to Hu-man proinsulin is 1: 1 to 20: 1, preferably 4: 1 to 20: 1.

5. Mittel nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass es zweiwertige Zinkionen enthält. 5. Composition according to claim 1, characterized in that it contains divalent zinc ions.

6. Mittel nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass es Protaminsalz enthält. 6. Composition according to claim 1, characterized in that it contains protamine salt.

7. Mittel nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass das Gewichtsverhältnis von Human-Insulin zu Human-Proinsulin 1:30 bis 100:1, vorzugsweise 1:15 bis 100:1, ausmacht. 7. Composition according to claim 1, characterized in that the weight ratio of human insulin to human proinsulin is 1:30 to 100: 1, preferably 1:15 to 100: 1.

8. Mittel nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass das Gewichtsverhältnis von Human-Insulin zu Human-Proinsulin 1:30 bis 20:1, vorzugsweise 1:15 bis 20:1 oder 8. Composition according to claim 1, characterized in that the weight ratio of human insulin to human proinsulin 1:30 to 20: 1, preferably 1:15 to 20: 1 or

1:10 bis 20:1, ausmacht. 1:10 to 20: 1.

9. Mittel nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass das Gewichtsverhältnis von Human-Insulin zu Human-Proinsulin 1:100 bis 1:1, vorzugsweise 1:30 bis 1:1 oder 9. Composition according to claim 1, characterized in that the weight ratio of human insulin to human proinsulin 1: 100 to 1: 1, preferably 1:30 to 1: 1 or

1:10 bis 1:1, ausmacht. 1:10 to 1: 1.

10. Mittel nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass das Gewichtsverhältnis von Human-Insulin zu Human-Proinsulin 1:30 bis 1:10 ausmacht. 10. Composition according to claim 1, characterized in that the weight ratio of human insulin to human proinsulin is 1:30 to 1:10.

Diabetes mellitus ist eine Stoffwechselstörung, die sich darin äussert, dass das Körpergewebe Kohlenhydrate nicht mehr im normalen Ausmass oxidieren kann. Sein wichtigster Faktor ist ein Mangel an Insulin. Seit etwa 60 Jahren werden Diabetiker durch Verabreichung bestimmter Mengen an Insulin behandelt. Das hierzu benötigte Insulin wird aus der Bauchspeicheldrüse von Tieren isoliert, und zwar im allgemeinen von Rindern oder Schweinen. Sowohl Rinderinsulin als auch Schweineinsulin unterscheiden sich in ihrer Struktur vom Insulin, das von der Bauchspeicheldrüse des Menschen gebildet wird. Seit kurzem lässt sich durch Rekombinations-DNA-Methodologie auch Insulin erzeugen, das mit dem von der Bauchspeicheldrüse des Menschen gebildeten Insulin identisch ist. Die Verwendung eines solchen Insulins ermöglicht dem Diabetiker eine engere Nachahmung des natürlichen Systems als unter Einsatz der anderen Insuline. Diabetes mellitus is a metabolic disorder which manifests itself in the fact that the body tissue can no longer oxidize carbohydrates to the normal extent. Its most important factor is a lack of insulin. For about 60 years, diabetics have been treated with certain amounts of insulin. The insulin required for this is isolated from the pancreas of animals, generally from cattle or pigs. Both bovine insulin and swine insulin differ in structure from insulin, which is produced by the human pancreas. Recently, recombinant DNA methodology has also made it possible to produce insulin that is identical to the insulin made by the human pancreas. The use of such an insulin enables the diabetic to imitate the natural system more closely than when using the other insulins.

Unabhängig davon ist seit langem bekannt, dass eine Verabreichung von Insulin an einen Diabetiker allein nicht ausreicht, um den normalen Stoffwechselzustand wieder herzustellen und/oder aufrechtzuerhalten. Insulin beeinflusst zwar eindeutig den Metabolismus von Kohlenhydraten, Regardless of this, it has long been known that administering insulin to a diabetic alone is not sufficient to restore and / or maintain the normal metabolic state. While insulin clearly affects the metabolism of carbohydrates,

doch sind mit Diabetes mellitus weitere Störungen verbunden, die grossteils oder überhaupt insgesamt von der Struktur und Funktion der Blutgefässe abhängen. Die zu diesen Störungen führenden Mängel lassen sich nur selten durch herkömmliche Behandlung mit Insulin vollständig korrigieren. However, other disorders are associated with diabetes mellitus, which depend largely or entirely on the structure and function of the blood vessels. The deficiencies leading to these disorders can rarely be completely corrected by conventional treatment with insulin.

s Die in Verbindung mit Diabetes auftretenden Gefassab-normitäten werden häufig als Komplikationen von Diabetes bezeichnet. Sie bestehen im allgemeinen in mikroangiopathi-schen Veränderungen, die zu Schädigungen der Retina und der Niere führen. Neuropathie ist eine weitere Diabeteskom-lo plikation, die mit den beobachteten mikroangiopathischen Veränderungen direkt oder indirekt in Beziehung stehen kann oder auch nicht. Zu Beispielen für spezifische Erscheinungsformen von Diabeteskomplikationen gehören (1) Augenerkrankungen unter Einschluss von Retinopathie, Kata-15 raktbildung, Glaukom und extraocularen Muskellähmungen, (2) Munderkrankungen unter Einschluss von Zahnfleischentzündungen, erhöhtem Zahnkariesbefall, periodon-taler Erkrankungen und erhöhter Resorption des Alveolar-knochens, (3) motorische, sensorische und autonome Neuro-20 pathie, (4) Erkrankung grosser Blutgefässe, (5) Mikroangiopathie, (6) Erkrankungen der Haut unter Einschluss von Xanthoma diabeticorum, Necrobiosis lipoidica diabetico-rum, Furunkulose, Mykosen und Hautjucken, (7) Erkrankungen der Nieren unter Einschluss diabetischer Glomeru-25 losklerose, arteriolarer Nephrosklerose und Pyelonephritis und (8) Probleme während des Schwangerschaft unter Einschluss der Zunahme der Bildung zu grosser Kinder, der Totgeburten, der Fehlgeburten, des Neugeborenensterbens und der angeborenen Defekte. s Vascular abnormalities associated with diabetes are often referred to as complications of diabetes. They generally consist of microangiopathic changes that damage the retina and kidney. Neuropathy is another diabetes complication that may or may not be directly or indirectly related to the observed microangiopathic changes. Examples of specific manifestations of diabetes complications include (1) eye diseases including retinopathy, Kata-15 ract formation, glaucoma and extraocular muscle paralysis, (2) oral diseases including gum infections, increased tooth decay, periodontal diseases and increased resorption of the alveolar bone , (3) motor, sensory and autonomic neuro-20 pathology, (4) disease of large blood vessels, (5) microangiopathy, (6) skin diseases including Xanthoma diabeticorum, necrobiosis lipoidica diabetico-rum, furunculosis, mycoses and itchy skin, (7) kidney diseases including diabetic glomerular losclerosis, arteriolar nephrosclerosis, and pyelonephritis; and (8) problems during pregnancy, including the increase in large child formation, stillbirth, miscarriage, newborn death, and congenital defects.

30 Manche und möglicherweise sogar alle diabetischen Komplikationen sind eine Folge des Fehlens von Insulin allein, so dass der Körper sein natürliches hormonelles Gleichgewicht nicht mehr bilden kann. 30 Some, and possibly all, diabetic complications are a result of the lack of insulin alone, so the body can no longer maintain its natural hormonal balance.