CA3028101A1

CA3028101A1 - Kit destine au traitement du sepsis et/ou de toute hyper-inflammation generalisee (sirs) ou cellulaire dommageable

Info

Publication number: CA3028101A1
Application number: CA3028101A
Authority: CA
Inventors: Vincent COTEREAU
Original assignee: Serenite-Forceville
Current assignee: Serenite-Forceville
Priority date: 2015-06-25
Filing date: 2016-06-24
Publication date: 2016-12-29
Also published as: WO2016207577A1; EP3313414A1; US11224633B2; FR3037798A1; US20180185443A1

Abstract

La présente invention a pour objet un kit comprenant un premier container comprenant une composition comprenant au moins une protéine séléniée anti-oxydante et au moins un second container comprenant au moins une composition comprenant au moins un composé sélénié oxydant. La présente invention concerne également une méthode d'administration qui permet d'administrer des doses efficaces et cytotoxiques de composés séléniés, permettant d'inhiber l'hyper-activation des phagocytes et en particulier des polynucléaires neutrophiles circulants immatures et protège directement et indirectement les cellules endothéliales, en particulier pour le traitement du sepsis, du SIRS et des leucémies. Enfin, dans un autre aspect, l'invention concerne un dispositif d'administration adapté à la méthode d'administration selon l'invention.

Description

KIT DESTINÉ AU TRAITEMENT DU SEPSIS ET/OU DE TOUTE HYPER-INFLAMMATION GÉNÉRALISÉE (SIRS) OU CELLULAIRE
DOMMAGEABLE
DOMAINE DE L'INVENTION
La présente invention concerne notamment le traitement du sepsis, de l'inflammation aigue généralisée (SIRS, systemic inflammatory response syndrome) et plus particulièrement du choc septique et des états de SIRS donnant des tableaux similaires nécessitant le recours aux catécholamines après un remplissage ou lors de phase rapide de remplissage en cas d'aggravation très brutale. La présente invention concerne également un traitement des leucémies (pour les éléments circulants). En particulier, la présente invention concerne une association en kit d'une protéine séléniée et d'un composé sélénié pour le traitement de ces syndromes et maladies. La présente invention concerne également une méthode d'administration qui permet d'administrer des doses .. efficaces de composés séléniés toxiques pour les cellules hyperactives circulantes et les pathogènes (bactéries, virus, champignon et parasites) mais bénéfiques au total pour l'ensemble de l'organisme. Enfin, dans un autre aspect, l'invention concerne un dispositif d'administration.
.. ÉTAT DE LA TECHNIQUE
Le sepsis correspond à une réponse inflammatoire généralisée excessive de l'organisme en réaction à une infection bactérienne, le plus souvent, mais aussi parasitaire, virale ou fongique. Dans l'état de l'art actuel, le sepsis est un syndrome et non une maladie. Le sepsis sévère est défini par la présence d'une ou plusieurs dysfonctions ou défaillances d'organes et de signes d'hypo-perfusion périphérique, tandis que le choc septique est défini par la présence d'une hypotension persistante malgré un remplissage adéquat associé le plus souvent à des défaillances multi-viscérales. Par adéquat, on retient généralement un remplissage de 20 à 30 mg/kg. Dans les deux cas, une réponse

2 complexe de l'organisme excessive ou inadaptée, nécessite la mise en oeuvre de suppléances des grandes fonctions en réanimation pour éviter le décès. Ce déploiement complexe d'assistances de grandes fonctions permet à des personnes qui décèderaient de survivre au sepsis ; toutefois malgré ces suppléances coûteuses, les taux de mortalité
de ces patients, 28 jours après le début de l'épisode, sont respectivement d'environ 20 à
30% et 40 à 50%. De plus, le nombre de lits de réanimation disponibles pour les traiter efficacement est limité. Le sepsis entraîne ainsi un nombre de décès très important, légèrement supérieur à ceux causés par l'infarctus du myocarde, et est la première cause de décès à l'hôpital et représente plus de 5% des dépenses hospitalières (0,5%
du PIB).
II s'agit d'une des principales causes de mortalité dans le monde et serait la première en cas de pandémie où les structures de réanimations seraient totalement débordées. Il correspond à l'une des principales causes de dépenses de santé dans le monde en pratique courante. Par ailleurs, il serait une cause de mortalité importante en cas de situation de pandémie ¨ le sepsis est à l'origine des décès dans le cas des épidémies de pestes par exemple ¨, de désastre (associé aux syndromes d'écrasement), de bioterrorisme ou de guerre. Dans ce dernier cas, il sera volontiers associé à
une autre cause d'inflammation généralisée que constituent les brûlures étendues qui représenteraient plus de 30% des victimes. L'inflammation aigue est également un événement majeur chez les victimes d'irradiation qui ne décèderaient pas immédiatement.
Actuellement, le traitement de cette urgence médicale consiste en l'administration dans l'heure d'antibiotiques, associée à un remplissage, à une oxygénation, à
l'introduction de catécholamines et à la prise en charge en réanimation en l'absence de traitement spécifique. Par ailleurs, le patient peut se voir administrer des corticoïdes à faible dose .. mais cela reste très controversé et d'efficacité ¨ s'il y a lieu ¨ limitée.
Des recommandations ont été établies au niveau mondial dans le cadre de la surviving sepsis campaign, travail collaboratif au niveau mondial comprenant les principales sociétés de réanimation dont américaines et européennes. Néanmoins, il n'existe pas à
l'heure actuel de traitement spécifique de cette réaction excessive de défense de l'organisme et l'essentiel des traitement proposés est d'essayer de permettre à l'organisme de survivre à cette situation d'auto-agression par la mise en place la plus judicieuse possible de

3 suppléance en attendant la fin de cette réaction, tout en ayant traité
l'origine de ce qui a déclenché celle-ci (activation des toll-récepteurs) infectieuse dans le cadre du sepsis (PAMPS), dégâts cellulaires dans le cadre des syndromes inflammatoires aigus généralisés (DAMPS).
Au niveau de la microcirculation, l'interaction des cellules phagocytaires et de l'endothélium, succédant à la mise en alerte très rapide des cellules de la réponse innée secondaire à l'activation des récepteurs Toll, participe à la modification de l'endothélium (flip-flap) passant d'un endothélium non-adhérent, non inflammatoire et non coagulant à un endothélium adhérent, inflammatoire et coagulant puis lésé
avec abrasion de l'endothélium surface layer (ES L), formation de dérivée réactif nitro-oxygéné ¨ comme le peroxynitrite par l'action conjointe des polynucléaires adhérents (émission d'anion surperoxyde) et des cellules endothéliales activée (émission de NO), émission de microparticules, et ouverture des jonctions serrées et souffrance de l'endothélium. Ce dysfonctionnement de la microcirculation et cette souffrance de l'endothélium sont considérés comme un ou l'élément majeur dans la survenue des défaillances viscérales secondaires au sepsis sévère et au choc septique. Ces défaillances viscérales peuvent conduire au décès malgré les suppléances en réanimation qui permettent à des sujets qui auraient dû décéder de survivre transitoirement ou non, et conduisent au décès en l'absence de ces soins de réanimation.
On a pu considérer (modélisation mathématique appliquée à la biologie) que cette situation consistait en une situation de chaos.
L'objectif de la réanimation est alors de ramener le sujet, une fois l'épisode aigu passé, vers l'attracteur de l'homéostasie en le libérant progressivement des attracteurs de survie liés aux suppléances. Cet état hyper-inflammatoire entraîne le plus souvent une défaillance immunitaire acquise qui va faire le lit de nouvelles infections, éventuellement avec des pathogènes non dangereux chez un sujet non-immunodéprimé
et pouvant entraîner de nouveau une réaction de sepsis. L'évolution risque fort de se faire alors de choc septique en choc septique vers un épuisement du sujet dans un tableau de marasme et de dénutrition majeure conduisant le plus souvent à une

4 limitation thérapeutique devant une situation dépassée où le retour à une situation sans suppléance ne semble plus possible et correspond à de l'acharnement.
Les dérivés réactifs de l'oxygène (métabolisme oxydatif (respiratory burst) des polynucléaires, hyperactivation des cellules endothéliales avec la synthèse de NO, phénomènes d'ischémie-reperfusion et souffrance mitochondriale) générés par la lutte contre les agents infectieux ont un rôle majeur dans la dysfonction endothéliale, première étape vers les défaillances multi-viscérales et le décès. Le sélénium est un atome bivalent en physiopathologie. Sur le plan physicochimique, il appartient à la colonne VI à qui est celle de l'oxygène (famille chimique des chalcogènes). De fait, sur le plan chimique et biochimique, les petits composés séléniés sont souvent des molécules oxydantes toxiques.
Ainsi le sélénite de sodium est l'un des composés séléniés les plus toxiques et sa toxicité est similaire à celle des sels d'arsenic. Une concentration de 101-1mol/L entraîne une destruction cellulaire pour des cellules détachées (Stewart MS, Free Radic Biol Med. 1999 Jan;26(1-2):42-8). Une concentration en sélénium de 18 1J mol/L est observée dans les cas d'intoxication mortelle (Nuttall KL, Ann Clin Lab Sci.

Autumn ; 36(4):409-20). La dose létale chez l'homme semble être de l'ordre de 1,5 à 3 mg/kg. Le sélénite de sodium va réagir préférentiellement avec les ponts disulfures. Sa toxicité est plus importante sur les cellules libres, que sur les tapis cellulaires, et également beaucoup plus importante sur les cellules hyper-activées que sur les cellules quiescentes. In vitro, on a démontré son activité cytotoxique particulièrement sur des cellules cancéreuses pour des concentrations au-delà de 2 à 5 1-1mol/L de sélénium sous forme de sélénite de sodium. La toxicité du sélénite de sodium semble s'exercer principalement au niveau de la mitochondrie particulièrement chez les cellules en hyperactivité.
Incorporé dans les protéines séléniées, le sélénium ¨ comme celui inclus dans la molécule du sélénite de sodium ¨ permet à celles-ci d'être un élément clef de la défense anti-oxydante chez les mammifères. De ce fait, les cas d'empoisonnement aigu par des composés séléniés sont complètement réversibles quand ils ne sont pas mortels, le sélénium une fois incorporé dans ces protéines séléniées ayant une action anti-oxydante opposée à celle des composés séléniés oxydants comme le sélénite. Dans le cadre de l'amélioration de leur défense anti-oxydante (et de leur régulation du potentiel redox intra-cellulaire modulant toute l'activité cellulaire), les mammifères et les oiseaux ont acquis un acide aminé particulier, la sélénocystéine, où le sélénium remplace le souffre

5 dans la cystéine. Ce remplacement est contrôlé génétiquement, avec la modification de la signification du codon stop UGA du fait de la présence d'une structure voisine et nécessite de l'énergie sous forme d'ATP. La présence de cet acide aminé au niveau du site actif des enzymes séléniées va permettre à ceux-ci d'avoir une action anti-oxydante plus rapide et plus robuste que leur précurseur à fer et le remplacement de la sélénocystéine par la cystéine au niveau du site actif diminue par un facteur l'efficacité de ces enzymes. Les protéines séléniées sont des enzymes anti-oxydantes majeures chez les mammifères. La carence en sélénium est mortelle chez l'homme et le modèle knock-out pour la sélénocystéine est létal.
Au niveau plasmatique on observe deux protéines séléniées, la sélénoprotéine-P, protéine très conservée entre les espèces et exception parmi les enzymes séléniées du fait qu'elle comporte 9 acides aminés sélénocystéine (tandis que les autres n'ont qu'un seul acide aminé sélénocystéine) et la glutathion peroxydase plasmatique. La sélénoprotéine-P (Sel-P) représente 60% du sélénium plasmatique. Elle assure le transport du sélénium biologiquement actif (sélénocystéine) entre le foie et les tissus et participe directement à la protection anti-oxydante de l'endothélium par une action enzymatique, probable détoxifiante, de l'ion peroxynitrite. Il a été montré
qu'elle a un rôle de stabilisation de membrane limitant l'émission de microparticules.
Du fait de l'appréhension de la toxicité du sélénite de sodium, l'administration de ce sélénite a été faite en continu ou encore avec des bolus sur 30 minutes, comme décrit dans Angstwurm MW, (Crit Care Med. 2007 Jan;35(1):118-26) qui observe une tendance à la diminution de la mortalité avec une administration de 1000 g de sélénium sous forme de sélénite de sodium (14 p g/kg) poursuivi d'une administration d'une même dose en continu sur 24h, poursuivie pendant 15 jours, mais dont les résultats n'ont pu être reproduit à l'heure actuelle (Angstwurm MW, Crit Care Med.
2007 Jan;35(1):118-26). La dose maximum de 1000 1tg/jour est recommandée par

6 Heyland DK (Crit Care. 2007;11(4):153), une dose de 4000 1tg/jour (55 p g/kg) administrée en continu n'ayant pas eu d'effet bénéfique en raison selon lui d'effet négatifs. L'administration de 2000 g (80 p g/kg) en bolus chez le mouton s'est accompagné d'effets positifs, contrairement à l'administration d'une même dose en continu, néanmoins ne permettait pas de conclure sur l'intérêt d'une administration en bolus (Wang Z et al. Shock. 2009 Aug;32(2):140-6). De fait, l'intérêt de cette administration en bolus reste très discuté (Alhazzani, W.et al. Crit Care Med.

Jun;41(6):1555-64). Actuellement, les recommandations de la société européenne de nutrition (ESPEN) sont de ne pas dépasser 750 à 1000 1-1g/jour en raison des risques de toxicité (Singer P et al. Clin Nutr. 2009 Aug;28(4):387-400), ceci correspond à la NOAEL No Adverse Effect Level déterminé en nutrition (800 p g, soit 11 1-1g/kg et par jour). Quant à la société américaine de nutrition ASPEN, elle recommande un apport optimum entre 500 et 7501-1g/jour. Au vu des différents résultats des études, l'intérêt de l'administration de sélénium chez les patients de réanimation en sepsis n'est pas recommandé dans Dellinger RP et al. (Crit Care Med. 2013 Feb;41(2):580-637) ni dans Casaer MP et al. (N Engl J Med. 2014 Mar 27;370(13):1227-36).
Toutefois, la Demanderesse est restée convaincue que l'administration de composés contenant du sélénium (ou sélénite) est une réponse adaptée pour gérer les éléments circulants toxiques dans le cadre du sepsis et de la leucémie.
Dans cette voie, la Demanderesse s'est interrogée sur la manière d'optimiser l'administration de composés contenant du sélénium, tout en protégeant l'organisme de leurs effets toxiques. A ce jour, et à sa connaissance, ce problème technique n'est pas résolu. Et en tout état de cause, il existe un besoin très fort de moyens permettant de diminuer significativement le taux de mortalité élevé chez des sujets atteints de sepsis et de leucémie.
RÉSUMÉ
L'objet de l'invention est de proposer une solution à ce problème technique, et propose un traitement qui cible les phagocytes, en particulier les polynucléaires neutrophiles. au moyen d'une administration, en deux temps, de composés, de préférence séléniés, de

7 PCT/FR2016/051569 natures différentes, dans un premier temps d'une protéine anti-oxydante, de préférence une protéine séléniée, puis dans un deuxième temps, d'un composé oxydant, de préférence un composé sélénié, en administration ultra-rapide (également appelée administration flash), et de préférence en quelques flashs répétés, et non en bolus.
L'invention protège directement et indirectement les cellules endothéliales, limite l'adhésion des polynucléaires neutrophiles aux cellules endothéliales tout en permettant d'inhiber l'hyper-activation des phagocytes et en particulier des polynucléaires neutrophiles circulants immatures. Elle peut également participer à
l'antibiothérapie, lorsque le sujet est soumis à une antibiothérapie, par un effet cytotoxique sur les agents .. pathogènes circulants, y compris lorsque le sujet est résistant à
l'antibiothérapie.
DÉFINITIONS
Dans la présente invention, les termes ci-dessous sont définis de la manière suivante :
- "Traitement", "traiter" ou "soulager" sont des termes relatifs au traitement thérapeutique, et signifient retarder l'installation d'un syndrome ou d'une maladie, stopper le syndrome ou la maladie, ou faire régresser le syndrome ou la maladie.
Dans un mode de réalisation, le syndrome est le sepsis ; les sujets concernés par l'invention incluent donc les sujets à la phase initiale du sepsis, diagnostiqués notamment par une diminution de la sélénoprotéine-P circulante ou par tout autre biomarqueur du sepsis, et/ou les sujets chez lesquels le sepsis est déjà
diagnostiqué
ou avéré. Un sujet est considéré comme efficacement traité d'un sepsis s'il montre une diminution observable et/ou mesurable de production d'oxyde d'azote et/ou de lactate, et/ou une diminution notable du taux de mortalité ainsi qu'une diminution de la gravité des défaillances viscérales (pouvant être mesurées par le score SOFA).
Ces paramètres d'évaluation d'un traitement efficace sont facilement mesurables par des procédures de routine connues du médecin. Dans un autre mode de réalisation, la maladie est un cancer, circulant ou à tumeur solide ; les sujets concernés par l'invention incluent donc les sujets atteints d'un cancer.
- Un "excipient" désigne, dans la présente invention, toute substance autre que le principe actif présent dans une composition lui conférant des propriétés de stabilité,

8 de forme (liquide, solide, gélule, etc... suivant le mode d'administration), de goût, de dissolution (par exemple dissolution ciblée dans l'estomac ou le tube digestif), de couleur, etc... Un "excipient pharmaceutiquement acceptable" désigne plus spécifiquement un excipient qui n'induit pas de réaction allergique ou non-souhaitée lors de son administration. Cette définition inclut notamment tous les solvants et milieux de dispersion pharmaceutiquement acceptables.
- La "quantité efficace" (ou "quantité thérapeutiquement efficace") pour le traitement du sepsis se réfère à une quantité nécessaire ou suffisante pour, sans causer d'effets secondaires significatifs et défavorables pour le sujet, (1) retarder ou stopper un sepsis, (2) apporter des améliorations à un sepsis, (3) réduire la sévérité
ou l'incidence d'un sepsis, (4) stopper ou soigner un sepsis ; en ce qui concerne l'administration de la protéine anti-oxydante, de préférence séléniée, administrée en premier lieu, selon l'invention, la quantité efficace est celle capable de protéger l'endothélium contre l'inflammation et l'hyperoxydation induite par le sepsis, mais aussi contre la toxicité du sélénite de sodium ou d'un autre composé sélénié
oxydant susceptible d'être administré ultérieurement ; une quantité efficace de protéine anti-oxydante, de préférence séléniée, peut être administrée avant l'apparition du sepsis, pour une action prophylactique ou préventive ; de façon alternative ou additionnelle, une quantité efficace de protéine séléniée peut être administrée après l'apparition du sepsis, pour une action thérapeutique ; en ce qui concerne le composé sélénié, la quantité efficace de composé sélénié ne doit être administrée qu'après l'administration de la quantité efficace de protéine anti-oxydante, de préférence séléniée protectrice, et est comprise entre 50 et 600 1tg/kg d'équivalent sélénium administrée à une concentration cytotoxique de manière à atteindre une concentration plasmatique du composé sélénié oxydant d'environ 2 à 40 1J
mol/L, préférentiellement de 10 à 20 1J mol/L. la quantité efficace en composé
sélénié est celle nécessaire ou suffisante pour réduire l'hyper-activation des cellules phagocytaires ou polynucléaires neutrophiles, et contrôler l'hyper-inflammation, l'état d'hyper-oxydation et stopper la situation de chaos par une action cytotoxique ciblée et transitoire.

9 - Une administration "ultra-rapide" ou "en flash" selon l'invention se réfère à une administration à une vitesse de plus de 2 à 15 mL/sec, de préférence de 3 à
mL/sec, plus préférentiellement de 4 à 5 mL/sec.
- Une administration "en flash répétés" ou "fractionnée" correspond à la succession 5 à brève échéance, environ 5 à 20 minutes, préférentiellement environ 10 minutes, d'une à 10, de préférence 2 à 5, très préférentiellement 3 administrations en flash.
- Le terme "administration lente" selon l'invention se réfère à une quantité
de protéine séléniée administrée à une vitesse d'environ un quart à deux ou cinq fois la sélénoprotéine-P totale du sujet. La détermination de la quantité de Sel-P
totale est

10 en particulier décrite dans le brevet européen : EP1393078 ou le brevet US
7,635,491. La vitesse d'administration est calculée pour que l'administration dure d'environ 10 min à une heure, de préférence environ 30 minutes. Soit par exemple, pour un homme de 70 kg avec un volume plasmatique d'environ 3000 mL, d'environ 2 à 90 mg de sélénoprotéine-P en 10 min à une heure et préférentiellement en 30 minutes, soit une vitesse de 2 à 540 mg/heure, de préférence 50 à 400 mg/heure, très préférentiellement de 80 à 200 mg/heure. La quantité de sélénoprotéine-P totale variant selon les sujets et le praticien saura déterminer la vitesse d'administration adaptée à chacun. Cette injection peut être répétée une à trois fois dans la journée, particulièrement la première journée toutes les 4, 6 8 ou 12 heures (soit une à quatre administrations/jour de traitement).
- "Environ", placé devant un nombre, signifie plus ou moins 20% de la valeur nominale de ce nombre.
- "sujet", au sens de la présente invention fait référence à un mammifère ou un oiseau. Le mammifère peut être un humain (patient), un primate non humain, souris, rat, chien, chat, cheval, ou vache, mais n'est limité à ces exemples. Un sujet peut être mâle ou femelle. Un sujet peut être un adulte, un enfant ou un nourrisson. Un sujet est un patient diagnostiqué avec un syndrome, notamment le sepsis, ou une maladie, notamment la leucémie. Un sujet selon l'invention peut également être un organe ou un greffon.

- Le terme sepsis correspond à la définition du sepsis 2016 et est définie comme une dysfonction d'organe mettant en jeu la vie et causée par une réponse dérégulée à
une infection. La dysfonction d'organe peut être évaluée par une augmentation du SOFA de 2 points (ou plus) qui est associé avec une moralité de plus de 10%.
Le 5 terme choc septique doit être défini comme des sujets en sepsis où il existe une défaillance circulatoire particulièrement prononcée, avec des anomalies cellulaires et métaboliques qui sont associées à une mortalité plus élevée que dans le sepsis seul (Singer M et JAMA. 2016;315(8):801-810).
10 DESCRIPTION DÉTAILLÉE
Ainsi, dans un premier aspect, l'invention concerne un kit comprenant : un premier container comprenant une composition comprenant une protéine anti-oxydante, de préférence une protéine séléniée ; et au moins un second container comprenant au moins une composition comprenant au moins un composé oxydant, de préférence un composé
sélénié.
Selon un mode de réalisation, la protéine séléniée anti-oxydante est sélectionnée dans le groupe comprenant ou constitué par: la sélénoprotéine P, la gluthatione peroxydase, la thioredoxine réductase, la iodothyronine déiodinase, la formate déshydrogénase, la méthionine sulfoxide réductase, la sélénophosphase synthétase, la sélénoprotéine Pa (SelPa), sélénoprotéine W (Se1W), la sélénoprotéine T (SelT), la sélénoprotéine R (Se1R
ou SelX), la sélénoprotéine de 15 kDa (5e115), la sélénoprotéine N (SelN), la sélénoprotéine T (SelT2), la sélénoprotéine M (SelM), la sélénoprotéine G-rich (G-rich), la sélénoprotéine W2 (Se1W2), la sélénoprotéine BthD (BthD), la sélénoprotéine H (SelH), la sélénoprotéine I (SelI), la sélénoprotéine K (SelK), la sélénoprotéine 0 (Se10), la sélénoprotéine R (Se1R), la sélénoprotéine S (SelS) et la sélénoprotéine Pb (SelPb). Suivant un mode de réalisation, la composition du premier container comprend une protéine séléniée telle que décrite ci-dessus, en association avec tout excipient pharmaceutiquement acceptable. Dans un mode de réalisation, la protéine séléniée anti-oxydante est la sélénoprotéine P sous sa forme complète ou sous des formes tronquées, sous une isoforme à 51 kDa ou une isoforme à 61 kDa, d'origine humaine ou d'un autre

11 mammifère ou oiseau, ou une gluthation peroxydase, dont la glutathion peroxydase plasmatique. Dans un mode de réalisation, le premier container comprend en outre des protéines du groupe des protéines liant l'héparine (HBP), de préférence de l'antithrombine III (AT III).
Selon un mode de réalisation, le composé sélénié oxydant est sélectionné dans le groupe comprenant ou constitué par: sélénite de sodium, sélénodiglutathion, sélénométhyl sélénocystéine, diméthyl sélinoxyde, sélénocystamine, ou des dérivés de synthèse chimique contenant un ou plusieurs atomes de sélénium, un sélénium hybride, sel de sélénium fluoré, sel de sélénium chloré, sel de sélénium bromé, sel de sélénium iodé, un sélénoxyde, un sel de sélénium sulfuré, sel de sélénium tellurié, sel de sélénium de potassium, sel de sélénium de germanium, sel de sélénium de barium, sel de sélénium de plomb, sel de sélénium de zinc ou un sel de sélénium nitrogéné, atonimy (III), sélénide (5b25e3), arsenic (III), sélénide (AS2Se3), bismuth (III) sélénide (Bi2Se3), cadmium sélénide (CdSe), cobalt (II) sélénide (CoSe), de mercure (II) (HgSe), sélénium .. oxychloride, sélényl chloride (C120Se), sélénium sulfide, sélénium disulfide (SeS2), sélénide d'argent (I) (Ag2Se), sélénide d'indium (III) (In2Se3), sélénide de strontium (SeSr), acide sélénié (H204Se), le dioxyde de sélénium (025e), sélénium (Se), acide sélénieux , acide sélénieux (H203Se), sélénoglutathion.
Selon un autre mode de réalisation, le composé sélénié oxydant est un dérivé
méthylé
du sélénium. Selon un autre mode de réalisation, le composé sélénié oxydant est un acide aminé contenant du sélénium. Selon un autre mode de réalisation, le composé
sélénié oxydant est un composé organique sélénié (contenant du sélénium) compris dans le groupe des composés organiques séléniés comprenant mais n'étant pas limités à des composés alkyl, alicyclique, cyclanes, terpéniques, aromatiques et hétérocycliques, notamment la méthionine de sélénium, la sélénourée, ou le diéthyledithiocarbamate de sélénium.
Selon un autre mode de réalisation, le composé sélénié oxydant est un sélénium hybride de la formule Se(x)H(y) ou x et y indépendamment sont un entier compris entre 1 et 10, de préférence x est 1 et y est 2.

12 Selon un mode de réalisation, le composé sélénié oxydant est du sélénite de sodium (Na2Se03), de préférence sous une forme non-pentahydratée. Selon un mode de réalisation, le composé sélénié est la sélénocystéine.
Suivant un mode de réalisation, la composition du second container comprend un composé sélénié oxydant tel que décrit ci-dessus, en association avec tout excipient pharmaceutiquement acceptable.
Selon un autre mode de réalisation, le kit selon l'invention comprend un troisième container anti-oxydant comprenant de la vitamine C à faible dose (anti-oxydante), de la vitamine E, un précurseur du glutathion, des sels de fer, des sels d'or, des sels de cuivre à faible dose (anti-oxydante), et/ou des sels de zinc.
Selon un autre mode de réalisation, le kit selon l'invention comprend un quatrième container oxydant, comprenant de la vitamine C à forte dose (dose oxydante, supérieure à 20 mg), des sels de fer, des sels d'or, des sels de cuivre à forte dose, et/ou des composés telluriés.
Dans un mode de réalisation le kit selon l'invention comprend :
a. un premier container, comprenant une composition comprenant une protéine anti-oxydante, de préférence séléniée ;
b. un, deux ou au moins trois second containers, chacun des seconds containers comprenant au moins une composition comprenant au moins un composé oxydant, de préférence sélénié, de préférence du sélénite de sodium ou de la sélénocystéine ; dans un mode de réalisation, tous les seconds containers comprennent la même composition ;
c. optionnellement au moins un troisième container de composés oxydants comprenant de la vitamine C, de la vitamine E, un précurseur du glutathion, des sels de zinc, des sels d'arsenic, des sels de cuivre (en faible concentration) et/ou des protéines du groupe des protéines liant l'héparine (HBP), de préférence de la vitamine E;
d. optionnellement au moins un quatrième container de composés anti-oxydants comprenant de la vitamine C à forte concentration (supérieure à 20

13 mg/L), des sels de fer, des sels d'or, des sels de cuivre, et/ou des composés telluriés.
Selon un mode de réalisation, un container est une unité de dosage. De préférence, le premier container contenant une protéine anti-oxydante, de préférence séléniée, a une capacité de 5 à 100 mL, de préférence 20 à 50 mL. De préférence, le second container contenant le composé sélénié a une capacité de 0,05 à 10 mL, de préférence 4 mL.
Dans un mode de réalisation, la composition incluse dans le premier ou le second container inclut au moins un excipient pharmaceutiquement acceptable. Les excipients pharmaceutiquement acceptables selon l'invention comprennent l'eau, le sérum physiologique, la solution de Ringer, une solution de dextrose et des solutions d'éthanol, le glucose, le saccharose, le dextrane, le mannose, le mannitol, le sorbitol, le polyéthylène glycol (PEG), le phosphate, l'acétate, de la gélatine, des huiles collagène, Carbopol , des légumes, et analogues. On peut en outre inclure des conservateurs appropriés, des stabilisants, des antioxydants, des agents antimicrobiens et des agents tampons, tels que, par exemple, le hydroxyanisole butylé (BHA), le hydroxytoluène butylé (BHT), l'acide citrique, la tétracycline, et similaires.
D'autres exemples d'excipients pharmaceutiquement acceptables qui peuvent être utilisés dans l'invention comprennent, mais ne sont pas limités à, des échangeurs d'ions, l'alumine, le stéarate d'aluminium, la lécithine, des protéines sériques, telles que l'albumine sérique humaine, des substances tampons comme des phosphates, la glycine, l'acide sorbique, le sorbate de potassium, des mélanges de glycérides partiels d'acides gras végétaux saturés, l'eau, des sels ou des électrolytes, comme le sulfate de protamine, l'hydrogénophosphate disodique, l'hydrogénophosphate de potassium, le chlorure de sodium, des sels de zinc, la silice colloïdale, le trisilicate de magnésium, la polyvinylpyrrolidone, les substances à base de cellulose, la carboxyméthylcellulose sodique, des polyacrylates, des cires, des polymères séquences polyéthylène polyoxypropylène, polyéthylène glycol et la graisse de laine.
D'autres exemples d'excipients pharmaceutiquement acceptables qui peuvent être utilisés dans l'invention comprennent, mais ne sont pas limités à, des tensioactifs (par

14 exemple l'hydroxypropylcellulose); des supports appropriés, tels que, par exemple, les solvants et les milieux de dispersion contenant, par exemple, l'eau, l'éthanol, un polyol (par exemple glycérol, propylène glycol et polyéthylène glycol liquide, et analogues), des mélanges appropriés de ceux-ci, et les huiles végétales, telles que par exemple, l'huile d'arachide et l'huile de sésame; des agents isotoniques, tels que, par exemple, des sucres ou du chlorure de sodium; les agents d'enrobage, tels que, par exemple, la lécithine; des agents retardant l'absorption, tels que, par exemple, le monostéarate d'aluminium ou la gélatine; des conservateurs, tels que, par exemple, le chlorure de benzalkonium, le chlorure de benzéthonium, le chlorobutanol, le thimérosal et analogues; des tampons, tels que, par exemple, l'acide borique, le bicarbonate de sodium ou de potassium, les borates de sodium ou de potassium, les carbonates de sodium ou de potassium, l'acétate de sodium, le biphosphate de sodium et analogues; des agents de tonicité, tels que, par exemple, le dextrane 40, le dextrane 70, le dextrose, la glycérine, le chlorure de potassium, le propylène glycol, le chlorure de sodium; des antioxydants et des stabilisants, tels que, par exemple, le bisulfite de sodium, le métabisulfite de sodium, le thiosulfite de sodium, la thiocarbamide et analogues; des agents mouillant non ionique ou des agents clarifiants, tels que, par exemple, le polysorbate 80, le polysorbate 20, le poloxamère 282 et le tyloxapol; des agents modifiant la viscosité, tels que, par exemple l'hydroxyéthylcellulose, hydroxméthylpropylcellulose, la lanoline, la méthylcellulose, le pétrolatum, le polyéthylène glycol, l'alcool polyvinylique, la polyvinylpyrrolidone, la carboxyméthylcellulose; et analogues.
Selon un mode de réalisation, les compositions incluses dans le kit selon l'invention sont adaptées à une administration par injection, telle que, par exemple, par injection intraveineuse, intrathécale, intradermale, intramusculaire ou épidurale. Dans un mode de réalisation, l'administration est intraveineuse. Dans un autre mode de réalisation, le kit est adapté pour l'administration par intraveineuse, de préférence périphérique. Dans un autre mode de réalisation, le kit est adapté pour l'administration par un cathéter veineux central (par exemple via la veine jugulaire, sous-clavière ou fémorale), un cathéter artériel pour un effet local ou dans une situation de chaos. Selon un mode de réalisation de l'invention, les compositions incluses dans le kit de l'invention sont adaptées à une administration de préférence par un cathéter central multivoies de façon à éviter les réactions avec d'autres médicaments.
Selon un autre mode de réalisation de l'invention, le cathéter utilisé est un cathéter imprégné d'antiseptique, et/ou antibiotique.
5 Selon un mode de réalisation, les compositions incluses dans le kit selon l'invention sont adaptés à une administration par injection dans un dispositif de circulation extracorporelle.
Des exemples de formulations adaptées à une administration par injection incluent, mais ne sont pas limitées à, une solution injectable ou une émulsion injectable (telle que, par 10 exemple, une émulsion huile dans eau, une émulsion eau dans huile, une émulsion anhydre, une émulsion solide ou une microémulsion).
Dans un second aspect, l'invention concerne le kit tel que ci-dessus décrit, pour son utilisation dans une méthode d'administration séquentielle, à un sujet qui en a besoin, ledit sujet pouvant être un patient, des compositions incluses dans les différents

15 containers du kit. Cette méthode est décrite ci-après.
Dans un troisième aspect, l'invention concerne une méthode pour l'administration séquentielle des compositions contenues dans le kit de l'invention, à un sujet qui en a besoin, d'une quantité thérapeutiquement efficace des compositions incluses dans les différents containers du kit décrit ci-dessus, selon un mode séquentiel, à
savoir en premier lieu l'administration d'une quantité efficace de la composition du premier container, à savoir une composition comprenant une protéine anti-oxydante, de préférence une protéine séléniée, en continu, puis l'administration en flash d'une quantité efficace de la composition du second container, à savoir une composition comprenant un composé sélénié oxydant. Dans un mode de réalisation, l'administration flash de la composition du second container est une administration en flash répétés une à cinq fois. Dans un mode de réalisation l'administration flash de la composition est constituée de trois administrations flash successives de la composition du second container.

16 Dans un quatrième aspect, l'invention concerne une méthode pour l'administration séquentielle des compositions contenues dans le kit de l'invention, à un sujet qui en a besoin, d'une quantité thérapeutiquement efficace des compositions incluses dans les différents containers du kit décrit ci-dessus, selon un mode séquentiel, à
savoir en premier lieu l'administration d'une quantité efficace de la composition du premier container, à savoir une composition comprenant une protéine anti-oxydante, de préférence une protéine séléniée, en continu, optionnellement complétée par l'administration de la composition du troisième container puis l'administration en flash d'une quantité efficace de la composition du second container, optionnellement complétée par l'administration de la composition du quatrième container. Dans un mode de réalisation, l'administration flash de la composition du second container est une administration en flash répétés une à cinq fois. Dans un mode de réalisation l'administration flash de la composition est constituée de trois administrations flash successives de la composition du second container.
Selon un autre mode de réalisation, la méthode de l'invention comprend une étape préliminaire de détermination du moment opportun pour débuter l'administration des compositions contenues dans le kit de l'invention. Selon un mode de réalisation, l'administration selon l'invention est débutée de façon précoce avant les lésions de l'endothélium et après le début de l'hyper-inflammation. Selon un autre mode de réalisation, la détermination du moment opportun pour débuter l'administration comprend la détection et la quantification de la Sel-P dans le plasma d'un sujet. Dans un mode de réalisation, le début du traitement est décidé lorsque le sujet montre une diminution plasmatique de la moitié aux trois-quarts du taux de référence de la Sel-P, qui est d'environ 5 mg/L : en d'autres termes, si le sujet a une concentration plasmatique en Sel-P de 1 à 2,5 mg/L, le début de traitement peut être décidé.
La détermination de la quantité de Sel P est en particulier décrite dans le brevet européen :
EP 1 393 078 ou le brevet US 7,635,491 incorporés ici par référence.
L'augmentation du lactate est également un bon indicateur pour le début du traitement.
Selon un mode de réalisation de l'invention, la protéine séléniée anti-oxydante selon l'invention doit être ou est administrée au sujet à une quantité susceptible de la faire

17 revenir à un taux plasmatique moyen chez l'homme. L'homme possède en effet une concentration plasmatique de Sel-P d'environ 5 mg/L. Pour revenir à un niveau normal de Sel-P dans le plasma se rapprochant de environ 5 mg/L chez un sujet atteint de sepsis ou d'inflammation généralisée aigüe par exemple, la quantité de sélénoprotéine-P
administrée est, dans un mode de réalisation, de 2 à 90 mg de préférence 2 à
30 mg, très préférentiellement 4 à 30 mg de sélénoprotéine-P administrée lentement, c'est-à-dire à
pendant environ 10 min à environ une heure et préférentiellement environ 30 minutes.
Selon un autre mode de réalisation de l'invention, la protéine séléniée selon l'invention doit être ou est administrée au sujet 1, 2, 3, 4, 5 ou 6 fois par jour pendant 1, 2, 3 ou 4 jours, de préférence 3 jours.
Selon un autre mode de réalisation, le composé sélénié doit être ou est administré en flash de sorte à obtenir une concentration de l'élément sélénium dans le plasma d'environ 2 à 40 1J mol/L, préférentiellement de 10 à 20 1J mol/L. Selon un mode de réalisation, l'administration flash est l'injection d'une composition de composé sélénié, de préférence sélénite de sodium ou sélénocystéine, de concentration de 0,1 mg/mL à
10 mg/mL, de préférence 0,2 à 5 mg/mL ou suivant un autre mode de réalisation d'environ 1,5 mg/mL à 30 mg/mL, de préférence 5 mg/mL à 15 mg/mL, exprimé en équivalent sélénium, en un temps d'environ 0,1 à 4 secondes, de préférence environ 0,5 à 1 seconde. Suivant un mode de réalisation particulier, la concentration en équivalent sélénium administrée flash est d'environ 0,05 à environ 0,6 mg/kg de masse corporelle, de préférence 0,05 à environ 0,3 mg/kg de masse corporelle, très préférentiellement d'environ 0,1 à 1 mg/kg, d'environ 0,2 à 0,5 mg/kg, de préférence d'environ 0,25 à
0,35 mg/kg, de préférence d'environ 0,23 mg/kg.
La vitesse d'injection est de préférence d'environ 1 à 10 mL/sec ou 2 à 10 mL/sec, de préférence environ 3 à 4 mL/sec ou 4 à 5 mL/sec. L'administration peut être réalisée par cathéter central ou par administration intra-veineuse.
Suivant un mode de réalisation, le schéma thérapeutique s'étend sur plusieurs jours, de préférence 1, 2, 3 ou 4 jours et la composition comprenant la protéine anti-oxydante, de préférence séléniée, est administrée toutes les 4, 6, 8 ou 12 heures, en continu pendant 10 minutes à 1 heure, ladite administration étant suivie, entre 10 min à deux heures (de préférence 10 à 20 minutes) après la fin de l'administration de la protéine séléniée de un

18 à trois flash de composition comprenant le composé sélénié oxydant, les flash étant réalisés de 5 à 20 minutes d'intervalle entre eux. Suivant un mode de réalisation, la composition comprenant la protéine anti-oxydante, de préférence séléniée, est administrée pendant 30 minutes, puis après un temps d'attente de 10 minutes, la composition comprenant le composé sélénié est administrée en trois injections flash espacées de 10 minutes ; l'ensemble est répété au bout de 4, 6, 8 et/ou 12h.
Dans un mode de réalisation, le contenu du troisième container (de préférence, la Vitamine E) est administré en continu avant l'administration des flashs de la composition comprenant le ou les composés séléniés, de préférence sur 10 minutes à 2h, de préférence pendant l'administration de la composition de la composition de protéine séléniée.
Dans un mode de réalisation, le contenu du quatrième container (de préférence, la Vitamine C à forte concentration) est administré en continu en commençant dans l'espace de temps d'administration des flashs de composés séléniés, et de préférence .. pendant 10 minutes à 2h.
Selon un mode de réalisation de l'invention, l'administration pourra être répétée, avec des injections itératives suivies de rinçage par une solution neutre type sérum physiologique ou glucosé, selon les modalités de ce qui est réalisé pour les injections de produit de contraste lors des scanners. Cette modalité d'administration avec des injections flash permet l'obtention de concentrations cytotoxiques, particulièrement sur les cellules inflammatoires hyper activées, les polynucléaires neutrophiles et ainsi l'effet thérapeutique en limitant la quantité de produit administré et donc sa toxicité en particulier pulmonaire et/ou cardiaque.
L'administration en flash mimant un injecteur rapide de type de ceux utilisé
en imagerie a été choisie pour optimiser le pic de concentration cytotoxique du composé
sélénié
selon l'invention. De plus la répétition des doses, à un intervalle court ou administration fractionnée, a permis d'optimiser l'effet cytotoxique sur les cellules phagocytaires hyper-activées et l'administration préalable de sélénoprotéine-P de protéger l'endothélium. De plus la dose administrée au total sur les trois injections en flash est bien supérieure à celles administrée jusqu'à présent. La dose ainsi fractionnée permet

19 ainsi d'obtenir des pics très élevés transitoires et répétés du produit actif tout en limitant le risque d'une toxicité pulmonaire et/ou cardiaque.
Dans un mode de réalisation, le composé sélénié oxydant du second container est inclus dans un moyen de transport ou vectorisé pour cibler les cellules phagocytaires ou de la réponse innée. Selon un mode de réalisation, le composé sélénié oxydant est vectorisé
ou inclus dans un moyen de transport pour cibler en particulier les polynucléaires neutrophiles circulants immatures. Selon un autre mode de réalisation, le composé
sélénié oxydant inclus dans un moyen de transport ou vectorisé selon l'invention exprime des récepteurs spécifiques des cellules phagocytaires ou de la réponse innée .. comme par exemple, le récepteur CD64, CD36. Selon un autre mode de réalisation, le composé sélénié oxydant inclus dans un moyen de transport ou vectorisé exprime des récepteurs spécifiques des polynucléaires neutrophiles circulants immatures ou de cellules cancéreuses ou de bactéries ou de virus ou de parasites ou d'agents fongiques.
Selon un autre mode de réalisation, le moyen de transport selon l'invention est un .. globule rouge fantôme. La préparation des globules rouges fantômes est décrite dans Dodge JT et al. Arch Biochem Biophys. 1963 Jan; 100: 119-30; Shaillender M. et al.
International Journal of Pharmaceutics 415 (2011) 211¨ 217. Le globule rouge fantôme est utilisé comme moyen de transport et de présentation du composé sélénié ;
il permet d'éviter les effets secondaires systémiques des composé séléniés oxydants dont on .. connaît la gravité (létal) ; il permet également d'agir à des concentrations très élevées de composé sélénié au niveau des cellules cibles en l'occurrence les cellules phagocytaires et plus particulièrement les polynucléaires neutrophiles circulants immatures au niveau de la microcirculation et de protéger directement et indirectement l'endothélium tout en diminuant l'hyperactivation, les cellules cancéreuses, les bactéries, les virus ou les .. parasites ou d'agents fongiques.
Au sein de la cellule ciblée, les cibles privilégiées sont les mitochondries pour diminuer l'activation des polynucléaires hyperactivés ou autres cellules hyperactives ou le noyau de façon à bloquer la fixation du NFKB sur l'ADN et donc de ce fait de limiter, ou bloquer la réaction inflammatoire généralisée.

Selon un autre mode de réalisation, le moyen de transport ou vecteur selon l'invention est une nanoparticule. Des exemples de nanoparticules selon l'invention sont décrits dans l'article de Vergaro V. et al. Drug-loaded polyelectrolyte microcapsules for sustained targeting of cancer cells. Adv Drug Deliv Rev. 2011 Aug 14; 63(9):
847-64.
5 Par exemple, les nanoparticules selon l'invention incluent mais ne sont pas limitées à:
une nanoparticule lipidique solide, un transporteur lipidique nanostructuré, un dendrimère, une nanoparticule magnétique, un fullerène, un nanotube de carbone, un nanotube halloysite, un colloïde, un colloïde recouverts de polyélectrolytes, un nanocolloïde, des microcapsules de polyélectrolytes.
10 Selon un autre mode de réalisation, le moyen de transport ou vecteur selon l'invention est une capsule. De préférence, la capsule selon l'invention est un sac capsulaire.
Selon un mode de réalisation, le moyen de transport ou vecteur selon l'invention est un liposome. Selon un mode de réalisation, le vecteur selon l'invention est un liposome cationique. Des liposomes connus de l'homme du métier incluent mais ne sont pas 15 .. limités à RPR209120/DOPE. Selon un autre mode de réalisation, le vecteur selon l'invention est un liposome cationique mannosylé pour cibler spécifiquement les polynucléaires neutrophiles. Des liposomes permettant de cibler des polynucléaires neutrophiles sont décrits par exemple dans Kelly C. et al. (Targeted liposomal drug delivery to monocytes and macrophages. J Drug Deliv. 2011; 2011: 727241). Des

20 formulations pour cibler les phagocytes sont bien connues de l'homme du métier.
Selon un autre mode de réalisation, le sujet de l'invention est atteint d'un cancer, notamment de leucémie, lymphome ou cancer à tumeur solide. Dans un mode de réalisation particulier, le sujet est atteint de leucémie ou de lymphome. Des exemples de leucémies incluent mais ne sont pas limitées à: leucémie aiguë, leucémie chronique, Leucémies de la lignée lymphoïde, leucémies de la lignée myéloïde, leucémie aiguë
lymphoblastique, leucémie lymphoïde chronique, leucémie aiguë myéloblastique, leucémie myéloïde chronique. Des exemples de lymphomes incluent mais ne sont pas limitées à : lymphome, hodgkinien et non hodgkinien.

21 Selon un mode de réalisation, le sujet est atteint d'une tumeur solide. Les tumeurs solides comprennent les carcinomes et les sarcomes. Des exemples de carcinomes incluent mais ne sont pas limitées à: cancers du sein, des poumons, de la prostate, de l'intestin. Des exemples de sarcomes incluent mais ne sont pas limitées à:
cancers de l'os, du cartilage.
La présente invention concerne également un dispositif adapté à un mode d'administration biphasique du kit selon l'invention.
Selon un mode de réalisation, le dispositif comprend un mode d'administration flash.
Selon un autre mode de réalisation, le dispositif comprend un mode d'administration lente.
Le dispositif d'administration ne peut être réalisé avec les pompes à
perfusions habituellement utilisées et nécessite une injection avec un niveau de pression très élevé
allant jusqu'à 8 bar et permettant l'injection jusqu'à 10 mL/secondes. Chez les gros mammifères et à fortiori chez l'homme, le dispositif comprend une pompe à
haute pression automatisée de type de celle utilisée en imagerie permettant des débits très élevés notamment dans des cathéters centraux.
Selon un autre mode de réalisation, le dispositif comprend un dispositif de circulation extracorporelle. De préférence, ce dispositif de circulation extracorporelle permet une atteinte des éléments figurés du sang sans toxicité pour 1' endothélium.
Selon un mode de réalisation, le dispositif selon l'invention fournit une source d'énergie pour générer une pression et/ou un débit fluidique, tout en offrant à
l'utilisateur une rétroaction tactile et/ou audible de la pression fluidique générée, ce qui permet à
l'utilisateur de moduler la pression et/ou l'écoulement du fluide. Le système d'injection de la présente invention est capable de fournir à la fois un mode d'administration à
faible débit et/ou basse pression précise tout comme un mode d'administration à haut débit et/ou haute pression.

22 Selon un mode de réalisation, le système d'injection du dispositif selon l'invention comprend un module de commande de fluide en liaison active avec un injecteur connecté à une seringue. La seringue est en connexion fluidique avec une vanne automatique du module de commande de fluide, qui est également en communication fluidique avec une source de contraste par l'intermédiaire d'une chambre d'écoulement intermédiaire. La chambre compte-gouttes comprend de préférence un mécanisme de détection du niveau de fluide. Une valve de préférence automatisée est également en communication avec un premier orifice d'entrée d'une lumière d'une vanne d'isolement de pression. La valve empêche les fluides salins et/ou contaminés de pénétrer dans la seringue et permet au module de commande d'arrêter l'écoulement du fluide de la seringue rapidement à toute pression et/ou à tout débit. Cette capacité
d'arrêter immédiatement l'écoulement du fluide d'injection à toute pression et tout débit supprime sensiblement les effets de la conformité du système et permet à la fois une administration lente d'un composé et à la fois une administration flash d'un autre .. composé.
L'invention concerne aussi un kit tel que décrit ci-dessus, pour son utilisation dans le traitement du sepsis et/ou de l'inflammation aigue généralisée (SIRS, systemic inflammatory response syndrome), du sepsis sévère, du choc septique, d'un cancer (notamment leucémie, lymphome ou cancer à tumeur solide), ladite utilisation mettant en oeuvre la méthode d'administration décrite ci-dessus. Dans un mode de réalisation, le sujet traité peut être en état de choc septique. Dans un mode de réalisation, le sujet traité
peut être en état de défaillance multi-viscérale.
La présente invention concerne en particulier un kit pour son utilisation dans le traitement du sepsis et/ou de l'inflammation aigue généralisée (SIRS, systemic inflammatory response syndrome) comprenant d'une part une protéine sélénié
anti-oxydante, et d'autre part un composé sélénié, la protéine séléniée anti-oxydante étant destinée à être administrée lentement avant l'administration du composé
sélénié, qui est destiné à être administré après la protéine séléniée de manière ultra-rapide, de préférence en flash répétés.

23 Les termes de sepsis et de SIRS tels qu'utilisés dans l'invention peuvent correspondre à
un choc septique et des états de SIRS donnant des tableaux similaires nécessitant le recours aux catécholamines après un remplissage ou lors de phase rapide de remplissage en cas d'aggravation très brutale. Le sepsis sévère peut être indiqué par la présence d'une ou plusieurs dysfonctions ou défaillances d'organes et de signes d'hypo-perfusion périphérique. Le sepsis sévère correspond à une réponse systémique inflammatoire à
une infection associée à une défaillance viscérale, une hypo-perfusion ou hypotension incluant l'acidose lactique, l'oligurie ou une altération du statut mental. Le choc septique peut être révélé par la présence d'une hypotension persistant malgré
un remplissage adéquat. Par adéquat, on retient généralement un remplissage de 20 à 30 mg/kg. Le de choc septique est souvent caractérisé par une réponse systémique inflammatoire à une infection associée à un collapsus (hypotension) de plus d'une heure malgré un remplissage adapté et en l'absence d'autre cause d'hypotension.
(L'hypotension est plus tardive chez l'enfant et d'autres signes doivent être pris en compte en pédiatrie). L'hypotension est définie comme une: pression artérielle systolique < 90 mmHg, pression artérielle moyenne < 60 mmHg, ou diminution > 40 mmHg chez l'adulte ou +/- 2 DS en dessous de celle de référence chez l'enfant).
Le sepsis sévère, tout comme le choc septique, est un syndrome basé sur le reflet clinique de la (des) défaillance(s) viscérale(s), elle-même(s) conséquence de la réponse métabolique à l'agression.
La réponse systémique inflammatoire (SIRS) est un terme descriptif utilisé
pour décrire la présence d'une réponse inflammatoire généralisée indépendamment de sa cause, et est reconnue par un ensemble de signes complexes. Selon la dernière conférence de consensus, selon la "2001 SCCM/ESICM/ACCP/ATS/SIS International Sepsis Definitions Conference", ces signes sont actuellement définis comme suit :
= Paramètres généraux :
¨ Fièvre ou hypothermie (< 36 ou > 38,3 C), ¨ Tachycardie > 90 bpm (beats per minutes) ou +/- 2 déviation standard (DS) par rapport à la valeur de référence pour l'âge, ¨ Tachypnée > 30 bpm,

24 ¨ Trouble du statut mental, ¨ CEdèmes ou balance hydrosodée positive (>20 ml/kg sur 24h).
= Paramètres inflammatoires :
¨ Hyperleucocytose ou leucopénie (> 12.000 ou < 4000/0), ¨ Présence de> 10% de formes immatures, ¨ C reactive Protein plasmatique (CRP) +/- 2 DS des valeurs de référence, ¨ Procalcitonine plasmatique (PCT) +/- 3 DS des valeurs de référence.
= Paramètres hémodynamiques :
¨ Hypotension artérielle (pression artérielle systolique < 90 mmHg, pression artérielle moyenne, ¨ <70 mmHg, ou diminution > 40 mmHg chez l'adulte ou +/- 2 DS en dessous de celle de référence chez l'enfant).
¨ Saturation en oxygène du sang veineux mêlé (Sv02) > 70% (non utilisable chez l'enfant), ¨ Index cardiaque > 3,5 L/min.m2 (non utilisable chez l'enfant).
= Dysfonction d'organe :
¨ Hypoxémie artérielle (Pa02/Fi02 < 300), ¨ Oligurie (aigue) (diurèse < 0,5 ml/kg/h ou 45 ml pendant 2 dernières heures), ¨ Augmentation de la créatininémie > 0,5 mg/dl, ¨ Anomalies de la coagulation (temps de thromboplastine activée> 60 s ou > 1,5 du pourcentage normalisé international), ¨ Iléus (silence abdominal à l'auscultation), ¨ Trombocytopénie < 100,000/0, ¨ Hyperbilirubinémie (bilirubinémie totale > 4 mg/dl ou 70 mmol/L).
= Paramètres de perfusion tissulaire :
¨ Hyperlactatémie > 3 mmol/L, ¨ Augmentation du temps de reperfusion capillaire, Le terme de défaillance multi-viscérale tel qu'utilisé dans l'invention correspond à un syndrome clinique caractérisé par une dysfonction aigue et potentiellement réversible d'un organe ou d'une grande fonction, non directement impliqué dans le processus pathologique initial. La défaillance multi-viscérale est généralement associée à une 5 hypotension (pression artérielle systolique < 90 mmHg ou réduction > 40 mmHg à
partir de la valeur initiale en l'absence d'autre cause).
Les défaillances multi-viscérales sont volontiers basées sur le score de SOFA
(Sepsis Related Organ Failure Assessment) (Tableau 1), les deux premiers grades s'associent à
des dysfonctions, les deux derniers à des défaillances. Ils s'associent alors le plus 10 souvent à la nécessité de mise en oeuvre de suppléance pour maintenir le sujet en vie. Il peut s'agir notamment (i) de la ventilation par un appareil pour assister la respiration, (ii) de la perfusion et l'administration de catécholamines pour maintenir une tension satisfaisante et un bon débit du sang, (iii) de la dialyse pour remplacer les reins, (iv) de la transfusion de sang et de plaquettes. Ces suppléances, et leur surveillance, vont avoir 15 un impact très important dans le coût du traitement des sujets en état de choc septique.
Pas de Fonctions 1 2 3 4 défaillance(0) Respiratoire <200 et <
100 et >400 <400 <300 (Pa02/Fi02 en mmHg) ventilé
ventilé
Coagulation >150. <150 <100 <50 <20 (plaquettes en 10 /mm) Hépatique <20 >20 >33 >102 >204 (bilirubine enlimol/L) Dopa > 5 Dopa > 15 Cardiovasculaire Dopamine <
Adré. ou Adré. ou (Pression artérielle > 70 <70 5 ou Noradré. < Noradré. >
moyenne) Dobutamine 0,1 0,1 Système nerveux central 15 13-14 10-12 6-9 <6 (score de Glasgow) Rénal >300 >440 ou <110 >110 >171 (Créatininémie) ou diu < 500 diu < 200 Tableau 1 (score de SOFA de 0 à 20) (Dopa pour Dopamine, Adré pour Adrénaline, Noradré pour Noradrénaline, diu pour diurèse en ml/j.) Le score de SOFA
(Sepsis Related Organ Failure Assessment) est un des scores de défaillances les plus utilisés.
20 La définition du sepsis a été modifiée en 2016 et est définie comme une dysfonction d'organe mettant en jeu la vie et causée par une réponse dérégulée à une infection. La dysfonction d'organe peut être évaluée par une augmentation du SOFA de 2 points (ou plus) qui est associé avec une moralité de plus de 10%. Le choc septique doit être défini comme des sujets en sepsis où il existe une défaillance circulatoire particulièrement prononcée, avec des anomalies cellulaires et métaboliques qui sont associées à
une mortalité plus élevée que dans le sepsis seul (Singer M et JAMA.
2016;315(8):801-810).
Les marqueurs permettant de surveiller l'évolution d'un sepsis sont connus de l'homme du métier. La concentration plasmatique en lactate et son évolution est un marqueur tardif mais communément retenu de la survenue d'un sepsis et de la surveillance de l'efficacité de la prise en charge d'un choc septique (ou d'un sepsis sévère), Les autres marqueurs reconnus sont ceux de la surveillance des défaillances viscérales tels que listées dans la conférence de consensus de 2001 et dans le score de SOFA.
D'autres marqueurs comme l'oxyde d'azote NO, des cytokines, des facteurs de croissance en particulier de l'endothélium, des microparticules, des dosages de récepteurs sont utilisés mais dans le cadre de la recherche. Le dosage de la sélénoprotéine-P a été
proposé
comme marqueur précoce du sepsis et de sa gravité.
Selon un mode de réalisation, le sujet de l'invention est un sujet atteint de sepsis et/ou d'inflammation aigue généralisée.
Selon un autre mode de réalisation, le sujet de l'invention est atteint d'un sepsis à la .. phase précoce.
Selon un mode de réalisation, le sujet de l'invention est un sujet ayant subi un arrêt cardiaque ou une ischémie reperfusion.
Selon un mode de réalisation, le sujet de l'invention est sous traitement antibiotique ou est atteint d'une infection bactérienne notamment résistante aux antibiotiques ou est atteint d'une infection virale.
Selon un mode de réalisation, le sujet de l'invention est un organe et la méthode selon l'invention est implémentée avant le prélèvement d'organe, dans le cadre d'une préparation de greffon, dans la cadre d'une greffe et/ou dans la cadre d'un rejet de greffe.
Des pathologies préexistantes peuvent rendre le sujet plus à risque de faire un sepsis (selon la définition du document, sepsis sévère et choc septique) au décours d'une .. infection: une hépatopathie alcoolique, une cirrhose, une anorexie, une dénutrition, une malnutrition, un diabète, un cancer, une hémopathie, une maladie de système, un sujet atteint du syndrome d'immunodéficience acquise (SIDA) ou une pathologie inflammatoire chronique, notamment intestinale, et la survenue préalable récente d'un épisode de sepsis, la présence de nombreux cathéters. Suivant un mode de réalisation, le sujet de l'invention est atteint d'une de ces pathologies.
L'inflammation aigue est également un événement majeur chez les victimes d'irradiation qui ne décèderaient pas immédiatement. Elle concerne également les syndromes de détresse respiratoire aigüe par exposition aux gaz suffocants, vésicants et irritants, et aux autres atteintes d'organes par inflammation aigüe.
L'inflammation aigue est par ailleurs un évènement secondaire à l'exposition à des armes à effet par ondes électromagnétiques.
L'inflammation aigüe se réfère également aux états de choc allergiques ou les formes graves d'allergies telles que l' oedème de Quincke .
L'inflammation aigüe est également la conséquence d'une revascularisation tardive levée d'une ischémie aigüe quel qu'en soit le territoire (cérébral, cardiaque, des membres inférieurs), crush syndrome, revascularisation après arrêt cardiaque, de pancréatites aigües sévères infectées ou non, un neuro-paludisme (accès pernicieux), poussée aigüe de lymphome ou de vascularite.
L'inflammation aigüe concerne également les conséquences de la défaillance .. immunitaire à l'occasion d'infections nosocomiales avec des agents pathogènes de plus en plus opportunistes.

Selon un autre mode de réalisation, le sujet de l'invention est atteint d'un sepsis grave.
Un sepsis grave au sens de la présente invention est un sepsis avec dysfonction aiguë
d'un ou de plusieurs organes ("défaillance multi-viscérale").
Selon un autre mode de réalisation, le sujet de l'invention est atteint d'un choc septique.
Selon un mode de réalisation, le sujet de l'invention est un sujet sain en apparence, ce qui signifie que le sujet n'a pas été antérieurement diagnostiqué ou identifiés comme ayant ou souffrant d'un état septique, ou qui est en train de développer un état septique ou SIRS de sévérité similaire.
Selon un mode de réalisation, le sujet peut être un sujet asymptomatique d'un état septique. Tel qu'utilisé ici, un sujet asymptomatique fait référence à un sujet qui ne présente pas les symptômes classiques d'un état septique.
Selon un autre mode de réalisation, le sujet peut être à risque d'avoir ou de développer un état septique, tel que défini par des indices cliniques tel que par exemple : l'origine ethnique, l'âge, une comorbidité, l'abus d'alcool, la pauvreté, un bas statut socio-économique, ou la saison (le sepsis est plus fréquent en hiver dans les régions où il existe).
Selon un autre mode de réalisation, le sujet présente au moins deux des symptômes suivants : température supérieure à 38,2 C (ou hypothermie inférieure à 36 C), tachypnée supérieure ou égale à 30 mouvements par minute (min), tachycardie supérieure à 120 battements par min, pression artérielle systolique inférieure à
110 mmHg.
Selon un autre mode de réalisation, le sujet présente au moins deux des symptômes suivants : température supérieure à 38,2 C (ou hypothermie inférieure à 36 C), tachypnée supérieure ou égale à 22 mouvements par minute (min), syndrome confusionnel ; tachycardie supérieure à 120 battements par min, pression artérielle systolique inférieure à 100 mmHg.

Selon un mode de réalisation, le sujet est un nourrisson ou un enfant présentant des facteurs favorisant le développement des états septiques. Les facteurs favorisant le développement d'un état septique chez le nourrisson comprennent mais ne sont pas limités à: immunocompétence (purpura fulminans), immunodéficience (déficits immunitaires congénitaux ou acquis), comorbidité (malformations cardiaques ou urinaires), grands brulés, polytraumatisés, ou hospitalisés en réanimation.
Selon un autre un mode de réalisation, le sujet est un enfant présentant des facteurs favorisant le développement d'un sepsis. Des exemples d'infections à l'origine d'un sepsis comprennent mais ne sont pas limitées à: des méningites, des septicémies, des infections focales, des infections respiratoires, des bactériémies primitives, des infections génito-urinaires, abdominales, des tissus mous, du système nerveux central, des endocardites. Des exemples d'infections focales comprennent mais ne sont pas limitées à : pneumonie, otite, épiglotitte, conjonctivite, arthrite, urétrite, péricardite.
Selon un autre mode de réalisation, le sujet de l'invention présente des facteurs favorisant une évolution rapide vers une réaction inflammatoire aigue et qui comprennent de manière non-limitative : a) sepsis : une septicémie, une infection pulmonaire (telle que la pneumonie), une infection intra-abdominale, une infection grave de purpura, des lésions nécrotico-bulleuses de fasciite nécrosante, des infections nosocomiales, des péritonites, des méningites ou des septicémies bactériennes, b) SIRS, une pancréatite, une brûlure étendue, l'asthme aigu grave, un polytraumatisme, une irradiation massive, l'asthme aigu grave, les fumées d'incendie, les gaz (de combat) irritant, les ischémies reperfusions comme lors de syndromes d'écrasement et les excitations moléculaire des armes non létales.
Selon un autre mode de réalisation, le sujet de l'invention a subi une intervention chirurgicale lourde, une intervention chirurgicale avec clampage (ischémie-reperfusion), une intervention chirurgicale avec circulation extra-corporelle.
Ainsi, l'invention a pour objet une méthode selon l'invention, dans laquelle le sujet est un patient atteint de sepsis et/ou d'inflammation aigue généralisée, et/ou de sepsis au stade précoce, et/ou d'un sepsis grave, et/ou d'un choc septique, et/ou de défaillances multi-viscérales, et/ou présente au moins deux des symptômes suivants :
température supérieure à 38,2 C (ou hypothermie inférieure à 36 C), tachypnée supérieure ou égale à 30 mouvements par minute (min), de préférence supérieure ou égale à 22 mouvements par minute (min), (tachycardie supérieure à 120 battements par min), pression artérielle 5 systolique inférieure à 100 mm Hg, syndrome confusionnel ; et/ou est un sujet, en particulier un nourrisson ou un enfant présentant des facteurs favorisant le développement des états septiques ou du sepsis ou des facteurs favorisant une évolution rapide vers une réaction inflammatoire aigue a subi une intervention chirurgicale lourde, une intervention chirurgicale avec clampage (ischémie-reperfusion) ou circulation 10 extra-corporelle.
Dans un cinquième aspect, l'invention concerne un kit tel que décrit ci-dessus, pour son utilisation dans le traitement des cancers. Selon un mode de réalisation, l'invention concerne un kit tel que décrit ci-dessus, pour son utilisation dans le traitement des leucémies, de préférence des formes aigües de leucémies, ladite utilisation mettant en 15 oeuvre la méthode d'administration selon l'invention décrite ci-dessus.
De préférence, la méthode et le kit selon l'invention sont utilisés en traitement d'appoint pour le traitement des leucémies, de préférence des formes aigues de leucémies. En particulier, le kit selon l'invention est utilisée en traitement d'appoint notamment lors de chirurgie pour limiter la prolifération de cellules cancéreuses dont les modes de fixation à
20 1' endothélium présentent des similitudes avec les polynucléaires hyperactivés.
Selon un mode de réalisation, l'invention concerne un kit tel que décrit ci-dessus, pour son utilisation dans le traitement des tumeurs solides.
Dans un sixième aspect, l'invention concerne un kit tel que décrit ci-dessus, pour son utilisation pour réduire la production de peroxynitrite ou d'autres dérivés réactifs nitro-

25 oxygénés (e.g. anion superoxyde 02¨, oxygène singulet 02, peroxyde d'hydrogène H202, ou encore de l'ozone 03) chez un sujet qui en a besoin, ladite utilisation mettant en oeuvre la méthode d'administration selon l'invention décrite ci-dessus.
Dans un septième aspect, l'invention concerne un kit tel que décrit ci-dessus, pour son utilisation pour réduire l'hyper-inflammation chez un sujet qui en a besoin, ladite utilisation mettant en oeuvre la méthode d'administration selon l'invention décrite ci-des sus.
Dans un huitième aspect, l'invention concerne un kit tel que décrit ci-dessus, pour son utilisation pour réduire la quantité de bactéries, ou de virus, ou de parasites ou d'agents fongiques chez un sujet qui en a besoin, ladite utilisation mettant en oeuvre la méthode d'administration selon l'invention décrite ci-dessus.
BREVE DESCRIPTION DES FIGURES
Figure 1 est une photographie montrant l'aspect des poumons d'un rat décédé
avec le traitement complet (Sel P + Na2Se03). L'aspect pulmonaire est sensiblement normal.
Figure 2 est une photographie montrant l'aspect des poumons d'un rat n'ayant reçu que de la Sel-P. L'aspect pulmonaire est peu altéré.
EXEMPLES
La présente invention se comprendra mieux à la lecture des exemples suivants qui illustrent non-limitativement l'invention.
Exemple 1 : composition selon l'invention Composition A est une solution de composé sélénié oxydant : sélénite de sodium de concentration 0,2 mg/mi en équivalent Se.
Composition A2 est une solution témoin d'eau pour préparation injectable (ppi).
Composition B est une solution de protéines plasmatiques enrichie en Sel-P et contenant 0,05 mg/mi de Sel-P. Dans un mode de réalisation préféré, cette solution purifiée comprend des protéines de liaison à l'héparine (HBP) dont l'AT III.
Composition B2 est une solution témoin d'albumine à 4% diluée au 20ème.

Exemple 2 : inclusion du composé sélénié selon l'invention dans un globule rouge fantôme Dans un mode de réalisation, le composé sélénié oxydant selon l'invention est inclus dans un globule rouge fantôme, permettant la libération du composé sélénié
oxydant au niveau de la microcirculation et du site spécifique de l'adhésion des cellules phagocytaires ou de la réponse immune innée avec les cellules endothéliales.
Ceci permet une action cytotoxique limitant l'hyper-inflammation et limitant l'adhésion des cellules phagocytaires ou de la réponse immune innée avec les cellules endothéliales, adhésion qui fait intervenir des ponts disulfures et de protéger directement ou indirectement l'endothélium.
Exemple 3 : dispositif selon l'invention L'invention comprend en outre un dispositif selon l'invention qui administre la protéine séléniée (dans cet exemple, sélénoprotéine P) lentement puis le composé
sélénié (dans cet exemple, sélénite de sodium) en flash.
Par exemple, le dispositif d'administration peut être le système de Swiss Medical Care :
Computed Tomography (CT) Exprès III 134 Contrast Media Delivery System (CMDS), ou CT Premica TM CMDS décrit dans les demandes de brevet : EP1713528, EP2298382, EP2477677.
Par exemple, le dispositif d'administration peut aussi être le système de Medrad Inc.
décrit dans la demande internationale : W02005104687, ou la demande US2004242996.
Exemple 4 : kit selon l'invention Le kit selon l'invention comprend au moins deux containers distincts, l'un contenant le composé A et l'autre comprenant le composé B :
Container de la composition A: 0,15 ml d'une solution de sélénite de sodium à
la concentration de 0,2 mg/mi en équivalent Sélénium (Se).

Container de la composition B : 1 mL d'une solution de plasma enrichi en Sel-P
à une concentration de 0,05 mg/mL.
Exemple 5 : Effet des administrations successives de Sel-P et Na2Se03 Matériel et Méthodes Rats La prise en charge des animaux et les procédures expérimentales ont été
approuvées par le comité d'éthique et validé selon la procédure en vigueur avec le ministère.
Les expérimentations seront conduites avec des rats mâles TOPS Han Ico Wistar de 12 semaines. (Charles River, L'Arbresle, France). Les animaux ont de ce fait un poids compris entre 380 et 400 g au moment de l'expérimentation. Ils seront gardés dans des cages individuelles en polystyrène thermoformées en accord avec les standards du Ministère de l'Agriculture et de l'Environnement et gardés à une température de 21 1 C, avec une humidité relative de 55% et une alternance de 12h du cycle nycthéméral (jour/nuit). Ils auront un accès libre à une alimentation adaptée et un accès libre à l'eau correspondant à un apport adéquat en sélénium. Une acclimatation d'une semaine sera réalisée pour limiter le stress expérimental. Les animaux manifestement malades au début des expérimentations seront exclus.
Groupes d'animaux :
= Groupe 1 : Témoins malades LPS seul : aucune intervention.
= Groupe 2: Témoins perfusion sur 30 min : administration de la solution témoin B2 sur 30 minutes (min.), attente 10 min. puis administration de Na2Se03 (A) sur 30 min (perfusion).
= Groupe 3 : Témoins des compositions B et A : administration de la solution témoin B2 sur 30 min, attente 10 min. puis administration de la solution témoin A2 en 3 injections flash toutes les 10 min.
= Groupe 4: Action de la composition A seule : administration de la solution témoin B2 sur 30 min, attente 10 min, puis administration de Na2Se03 (A) en 3 injections flash toutes les 10 min.

= Groupe 5 : Action de la composition B seule : administration de Sel-P (B) sur 30 min, attente 10 min. puis administration de la solution témoin A2 en 3 injections flash toutes les 10 min.
= Groupe 6 : Action en synergie des compositions B et A: administration de Sel-P
(B) sur 30 min, attente 10 min. puis administration de Na2Se03 (A) en 3 injections flash toutes les 10 min.
Le critère principal est la concentration plasmatique en lactate tel qu'il a été indiqué au comité d'éthique.
Solutions = LPS: LPS Salmonella typhimurium Serotype LG511, Sigma L-6511 (Lot 12K4090).
= Composition A (sélénite de sodium) : La solution de travail est à la concentration de 0,2 mg/m1 en équivalent Se. Injection à H 3h40 après l'injection de LPS dans la veine jugulaire interne par le cathéter central de la quantité de la solution de travail à faire entre deux traits (correspondant à
0,2 mg/mi) de façon à délivrer 0,1 mg/kg d'équivalent sélénium sous forme de sélénite de sodium. Perfusion maintenue par du sérum physiologique à minima 0,1 ml/h (NaCl).
= Composition A2: Eau pour préparation injectable (ppi) qui sera à injecter selon les mêmes modalités et rinçage selon les mêmes modalités.
= Composition B: la solution du plasma humain enrichie en sélénoprotéine-P
à
raison de 0,05 mg/ml, avec une purification d'environ 8% avec une concentration en protéine de 2 g/L. Injection de 2,5 ml en 30 minutes à chaque animal.
= Composition B2: Albumine à 4% humaine à diluer au 20ème - Injection de 1 ml de la solution diluée au 20ème aux animaux sur 30 min à la vitesse de 2 ml/h.
Protocole expérimental :
- HO: Déclenchement du choc septique par l'administration intra-péritonéale de LPS
à 50 mg/kg à HO. 4 rats témoins ont eu initialement une dose de 50 mg/kg de LPS.

- H1, les rats sont anesthésiés et appareillés. L'anesthésie est effectuée sous penthotal et fentanyl, les animaux sont ensuite trachéotomisés puis un cathéter est mis en place dans la jugulaire. La perfusion est maintenue par du sérum physiologique à
minima 0,1 ml/h (NaCl).
5 - Intervention à H3 : Perfusion continue de la Sel-P (B) (1 ml) ou du témoin B2 (1 ml) sur 30 min. Attente de 10 minutes. La perfusion continue est maintenue pour limiter les pertes de la composition B (ou B2).
- Intervention à H 3h40, 3 injections ultra rapides ou flash en 0,5 sec de 0,15 ml de la composition A (sélénite de sodium) ou composition A2 (témoin) toutes les 10 min.
10 et rinçage de la perfusion avec 0,15 ml de sérum physiologique.
L'injection est réalisée directement au niveau du cathéter jugulaire interne.
Une anesthésie générale est maintenue par une administration d'une demi-dose de penthotal en intrapéritonéal toutes les heures ou en cas de début de signe de réveil.
- Prélèvements à H 6h30:
15 Prélèvement et euthanasie : prélèvement terminaux et euthanasie à 6 h30 après l'injection de LPS, ou prélèvement immédiat si décès de l'animal durant le protocole expérimental.
Prélèvement d'un gaz du sang et prélèvement d'un tube d'EDTA et d'héparinate de lithium lors de l'euthanasie des rats.
20 Un échantillon des poumons a été prélevé pesé et mis au congélateur de façon à pouvoir déterminer, au moins, le ratio sec/humide comme indicateur de l'oedème pulmonaire.
- Paramètres mesurés :
Dosage immédiat du lactate, des gaz du sang en veineux, du ionogramme sanguin, de la glycémie et du taux d'hémoglobine et de l'hématocrite de la créatininémie.
D'autres 25 mesures seront réalisées sur les échantillons mis en congélation sur tubes EDTA et Héparinate de lithium.

Résultats Effet du traitement sur la concentration en lactate :
Les groupes témoins comprennent : groupes 1 ; 2 et 4 avec sélénite de sodium en administration continue ou administration flash, groupe 3 avec injection d'albumine et injection d'eau et groupe 5 avec administration de Sel-P.
Taux de Groupe lactate 1 4,78 1 3,76 1 5,45 Témoins 1 7,36 2 8,75 3 6,78 3 8,45 Traitement : 5 3,35 Sel-P 5 4,79 6 2,2 Traitement en _________________________________________ 6 2,63 synergie 6 2,02 Tableau 2.
Les animaux issus du groupe 4 ne survivent pas à l'administration de sélénite de sodium seul. Par conséquent aucune valeur n'est indiquée dans le tableau 2.
Sur l'ensemble du groupe 6, la concentration en lactate est significativement abaissée chez les rats de ce groupe comparé aux rats des groupes témoins. La concentration en lactate est de 2,28 0,31 vs 6,48 1,88 mmol/L (p=0.017 test de Mann Whitney) (Tableau 2).
Ceci est lié à la valeur normalisée de la concentration en lactate et à la très fiable variation entre les concentrations en lactate dans ce groupe dans un modèle de LPS très sévère (50 mg/kg de LPS) et une euthanasie à 6h30 après l'administration de LPS.

Par ailleurs les trois rats du groupe 6 (B : sélénoprotéine-P sur 30 minutes et 3 injections flash de A: sélénite de sodium non hydraté à la dose de 0,1 mg/kg par injection flash) ont des constantes biologiques proches des valeurs de référence malgré
l'administration 6h30 avant d'une dose mortelle de LPS à 50 mg/kg.
Effet du traitement sur les gaz du sang :
Les gaz du sang ont été mesurés en veineux chez des animaux euthanasiés (Tableau 3).
Dans le groupe 6 : la saturation en sang veineux mêlé central est haute ce qui témoigne de l'absence ou de la faible souffrance métabolique, ainsi que du débit cardiaque adapté.
Par ailleurs, la glycémie est dans les valeurs de référence, et le pH peu modifié. Au niveau rénal, il y a peu d'élévation de la concentration de la créatinémie.
On constate par ailleurs au niveau pulmonaire un aspect macroscopique pratiquement normal très différent de l'aspect macroscopique des rats témoins qui dans ce modèle très sévère ont un aspect hépatisé témoin d'un syndrome de détresse respiratoire aigüe très important (Figure 1).
Dans le groupe 2: le tableau montre qu'un rat ayant reçu de l'albumine dilué
et du sélénite de sodium à la dose de 3 x 0,1 mg/kg = 0,3 mg/kg de sélénium sur 30 minutes présente des paramètres biologiques très différents par rapport au groupe 1 de rats témoins avec une souffrance très importante, pré-létale: on constate une augmentation du lactate majeure, un pH abaissé, une glycémie effondrée et une augmentation de la créatininémie. La Scv02 s'est effondré du probablement à très bas débit cardiaque imposant aux cellules une extraction maximale en oxygène malgré la situation de sepsis.
Dans le groupe 5 : chez les rats n'ayant reçu que de la sélénoprotéine-P, on constate une amélioration incomplète. Les valeurs du pH sont abaissées et la fonction rénale est peu altérée ainsi que la valeur de la glycémie par rapport à ce qui est observé
chez le rat précédent (groupe 2), correspondant à ce qui est observé chez la plupart des rats témoins. La Scv02 reste aussi dans des valeurs moins altérées que chez le rat précédent.
On constatera également une moindre altération de l'aspect pulmonaire qui n'a pas l'aspect hépatisé constaté chez les rats témoins (Figure 2).

Groupe 1 1 1 1 2 3 3 5 5 6 6 6 pH
7,44 7,270 7,43 6,74 6,906 7,240 7,210 7,357 7,346 7,400 7,491 7,313 Pa02 387 33,7 40,9 59,6 16 37,9 33,7 55,3 34 51,5 40,4 47,8 mmHg mmHg 20'1 83'4 33'2 44'9 97 39,9 56,5 44,7 45,4 48,7 34,1 54,3 CO3H- 13,7 37,8 23,3 6,1 19,6 18,6 22,2 25,1 27,7 31 26,6 28,3 Scv02 ou 100 54 79,3 58,3 8,9 65 51,2 86,9 64,5 85,9 80,7 79,3 Sa02 Lactate artériel 4,78 5,45 7,36 probable Lactate 3,76 8,75 6,78 8,45 3,35 4,79 2,2 2,63 2,02 veineux Na 139 143 141 155 144 105 132 140 143 145 144 142 K 4,5 5,8 4,2 5 7,5 >12 9,9 4,6 5,2 6,4 5,2 6,1 Cl 116 104 105 133 116 81 103 107 105 107 108 106 Ca 1,01 1,16 1,08 0,62 1,21 0,57 0,71 1,12 1,17 1,12 1,14 1,22 AgapK 14 7 17 21 16 ND 17 13 16 13 15 14 Ht 40 48 38 <10% 35 45 50 38 41 35 38 35 cHb 13,5 16,4 12,9 NA 12,1 15,4 17 13 14 11,8 13 11,9 Gly 1,1 1,01 1,2 1,21 0,27 0,52 0,67 1,16 1,25 1,14 1,23 1 Creat 77 180 113 44 156 132 215 52 94 100 78 113 Tableau 3.

Claims

REVENDICATIONS

1. Kit comprenant un premier container comprenant une composition comprenant au moins une protéine séléniée anti-oxydante et au moins un second container comprenant au moins une composition comprenant au moins un composé sélénié
oxydant.

2. Kit selon la revendication 1, dans lequel ladite protéine séléniée anti-oxydante est sélectionnée dans le groupe comprenant : la sélénoprotéine P, la gluthatione peroxydase, la thioredoxine réductase, la iodothyronine déiodinase, la formate déshydrogénase, la méthionine sulfoxide réductase, la sélénophosphase synthétase, la sélénoprotéine Pa (Se1Pa), la sélénoprotéine W (Se1W), la sélénoprotéine T (Se1T), la sélénoprotéine R (Se1R ou Se1X), la sélénoprotéine de 15 kDa (Se115), la sélénoprotéine N (Se1N), la sélénoprotéine T (Se1T2), la sélénoprotéine M (Se1M), la sélénoprotéine G-rich (G-rich), la sélénoprotéine (Se1W2), la sélénoprotéine BthD (BthD), la sélénoprotéine H (Se1H), la sélénoprotéine I (Se1I), la sélénoprotéine K (Se1K), la sélénoprotéine O
(Se1O), la sélénoprotéine R (Se1R), la sélénoprotéine S (Se1S) et la sélénoprotéine Pb (Se1Pb).

3. Kit selon la revendication 1 ou 2, dans lequel la composition du premier container comprend une protéine séléniée en association avec tout excipient pharmaceutiquement acceptable et comprend en outre des protéines du groupe des protéines liant l'héparine (HBP), de préférence de l'antithrombine III (AT
III).

4. Kit selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, dans lequel ledit composé
sélénié oxydant est sélectionné dans le groupe comprenant : sélénite de sodium, sélénocystéine, sélénodiglutathion, sélénométhyl sélénocystéine, diméthyl sélinoxyde, sélénocystamine, ou des dérivés de synthèse chimique contenant un ou plusieurs atomes de sélénium, un sélénium hybride, sel de sélénium fluoré, sel de sélénium chloré, sel de sélénium bromé, sel de sélénium iodé, un sélénoxyde, un sel de sélénium sulfuré, sel de sélénium tellurié, sel de sélénium de potassium, sel de sélénium de germanium, sel de sélénium de baryum, sel de sélénium de plomb, sel de sélénium de zinc ou un sel de sélénium nitrogéné, atonimy sélénide, arsenic sélénide, bismuth sélénide, cadmium sélénide, cobalt sélénide, sélénide de mercure, sélénium oxychloride, sélényl chloride, sélénium sulfide, sélénium disulfide, sélénide d'argent, sélénide d'Indium, sélénide de strontium, acide sélénié, le dioxyde de sélénium, sélénium, acide sélénieux, acide sélénié, sélénoglutathion.

5. Kit selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, dans lequel ledit le composé
sélénié oxydant est du sélénite de sodium, de préférence sous une forme non-pentahydratée, ou de la sélénocystéine.

6. Kit selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, dans lequel la composition du second container comprend un composé sélénié oxydant, en association avec tout excipient pharmaceutiquement acceptable.

7. Kit selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, dans lequel ledit le composé
sélénié oxydant est inclus dans un moyen de transport sélectionné dans le groupe comprenant : un globule rouge fantôme, une capsule, une nanoparticule, un liposome, de préférence ledit moyen de transport est un globule rouge fantôme.

8. Kit selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, comprenant en outre un troisième container anti-oxydant comprenant de la vitamine C à faible concentration, de la vitamine E, un précurseur du glutathion, des sels de cuivre à
faible concentration et/ou des sels de zinc.

9. Kit selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, comprenant en outre un quatrième container oxydant comprenant de la vitamine C à forte concentration, des sels de fer, des sels d'or, des sels de cuivre à forte concentration, des sels d'arsenic et/ou des composés telluriés oxydants.

10. Kit selon l'une quelconque des revendications 1 à 9, comprenant :
a. un premier container, comprenant une composition comprenant une protéine séléniée anti-oxydante, de préférence de la sélénoprotéine P, b. un, deux ou au moins trois second containers, chacun des second containers comprenant au moins une composition comprenant au moins un composé
sélénié oxydant, de préférence du sélénite de sodium, c. optionnellement un troisième container anti-oxydant comprenant de la vitamine C à faible concentration, de la vitamine E, un précurseur du glutathion, des sels de cuivre à faible concentration et/ou des sels de zinc.
d. optionnellement un quatrième container oxydant comprenant de la vitamine C à forte concentration, des sels de fer, des sels d'or, des sels de cuivre à
forte concentration, des sels d'arsenic et/ou des composés telluriés.

11. Kit selon l'une quelconque des revendications 1 à 10, pour son utilisation dans le traitement du sepsis et/ou de l'inflammation aigüe généralisée.

12. Kit selon l'une quelconque des revendications 1 à 10, pour son utilisation dans le traitement des cancers solides ou des leucémies, de préférence des formes aigües de leucémies.

13. Méthode pour une administration, à un sujet qui en a besoin, d'une quantité
thérapeutiquement efficace des compositions incluses dans les différents containers du kit selon l'une quelconque des revendications 1 à 12, selon un mode séquentiel, à savoir en premier lieu l'administration d'une quantité efficace de la composition du premier container, qui est une composition comprenant une protéine anti-oxydante, de préférence une protéine séléniée, en continu, puis l'administration en un flash ou en plusieurs flash répétés d'une quantité
efficace de la composition du second container, qui est une composition comprenant un composé sélénié oxydant.

14. Méthode pour une administration selon la revendication 13, comprend l'administration en continu sur 10 minutes à 1 heure, d'une quantité efficace de composition de protéine séléniée du premier container, qui est de préférence de la sélénoprotéine P, et quelques minutes après d'une quantité efficace de la composition de composé sélénié du ou des second containers, en trois flash répétés.

15. Méthode selon l'une quelconque des revendications 13 ou 14, dans laquelle la protéine séléniée selon l'invention doit être ou est administrée par injection au sujet d'une quantité d'environ 2 à 90 mg de sélénoprotéine-P en continu pendant environ 10 min à environ une heure, et 10 à 20 minutes après la fin de cette administration, le composé sélénié oxydant est ou doit être administré par injection 0,05 à environ 0.6 mg d'équivalent Se /kg de masse corporelle, de composé sélénié, de préférence sélénite de sodium, la dose étant fractionnée en 3 injections en flash successives espacées de 10 minutes.

16. Méthode selon l'une quelconque des revendications 13 à 15, dans laquelle le sujet est atteint de sepsis et/ou d'inflammation aigue généralisée, et/ou de sepsis au stade précoce, et/ou d'un sepsis grave, et/ou d'un choc septique, et/ou de défaillances multi-viscérales, et/ou présente au moins deux des symptômes suivants : température supérieure à 38,2.degrés.C (ou hypothermie inférieure à
36.degrés.C), tachypnée supérieure ou égale à 22 mouvements par minute (min), tachycardie supérieure à 120 battements par min, pression artérielle systolique inférieure à
100 mmHg.

17. Méthode selon l'une quelconque des revendications 13 à 16, dans laquelle le sujet est atteint d'un cancer solide ou d'une leucémie, de préférence des formes aigües d'une leucémie, et la méthode selon l'invention utilisée en traitement d'appoint pour le traitement des leucémies, de préférence des formes aigues de leucémies.

18. Méthode selon l'une quelconque des revendications 13 à 17, pour réduire la production de peroxynitrite, ou l'hyper inflammation chez un sujet qui en a besoin.

19. Méthode selon l'une quelconque des revendications 13 à 16, dans laquelle le sujet est atteint d'une inflammation aigue notamment due à une exposition à une irradiation ou à une onde électromagnétique, ou est atteint d'un syndrome de détresse respiratoire aigüe, notamment dû à une exposition à des gaz suffocants, vésicants ou irritants.

20. Méthode selon l'une quelconque des revendications 13 à 16, dans laquelle le sujet est atteint d'une inflammation aigue due à un choc allergique ou à une allergie.

21. Méthode selon l'une quelconque des revendications 13 à 16, dans laquelle le sujet a subi un arrêt cardiaque ou une ischémie reperfusion.

22. Méthode selon l'une quelconque des revendications 13 à 16, dans laquelle le sujet est sous traitement antibiotique ou est atteint d'une infection bactérienne notamment résistante aux antibiotiques ou est atteint d'une infection virale.

23. Méthode selon l'une quelconque des revendications 13 à 16, dans laquelle le sujet est un organe et la méthode est implémentée avant le prélèvement d'organe, dans le cadre d'une préparation de greffon, dans la cadre d'une greffe et/ou dans la cadre d'un rejet de greffe.

24. Dispositif de mise en oeuvre de la méthode selon l'une quelconque des revendications 13 à 23.