BR112017006085B1 - Composto ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, composição farmacêutica, uso do composto ou seu sal farmaceuticamente aceitável - Google Patents

Abstract

Este relatório descritivo refere-se geralmente a compostos 1-alquil-6-oxo-1,6-di- hidropiridin-3-ila (incluindo seus sais). Este relatório descritivo também se refere a composições farmacêuticas e kits compreendendo um tal composto, usos de um tal composto (incluindo métodos de tratamento e preparações medicamentosas), e processos para a preparação de um tal composto.

Description

CAMPO DO RELATÓRIO DESCRITIVO

[0001] Este relatório descritivo refere-se genericamente a compostos 1-alquil-6-oxo-1,6-di-hidropiridin-3-ila (incluindo seus sais). Este relatório descritivo também se refere a composições farmacêuticas e kits compreendendo um tal composto, usos de um tal composto (incluindo métodos de tratamento e preparações medicamentosas), e processos para a preparação de um tal composto.

ANTECEDENTES

[0002] Glucocorticoides (GCs) têm sido usados desde há décadas para tratar afeções inflamatórias e imunes agudas e crônicas, incluindo artrite reumatoide, asma, doença pulmonar obstrutiva crônica ("COPD"), osteoartrite, febre reumática, rinite alérgica, lúpus eritematoso sistêmico, doença de Crohn, doença inflamatória do intestino e colite ulcerativa. Exemplos de GCs incluem dexametasona, prednisona, e prednisolona. Infelizmente, os GCs estão muitas vezes associados a efeitos secundários graves e por vezes irreversíveis, tais como osteoporose, hiperglicemia, efeitos no metabolismo da glucose (diabetes mellitus), adelgaçamento da pele, hipertensão, glaucoma, atrofia muscular, síndrome de Cushing, homeostase de fluidos e psicose (depressão). Estes efeitos secundários podem limitar particularmente o uso de GCs em um cenário crônico. Assim, continuam a ser necessárias terapias alternativas que possuam os efeitos benéficos de GCs, mas com uma probabilidade reduzida de efeitos secundários.

[0003] Os GCs formam um complexo com o receptor de GC (GR) para regular a transcrição de genes. O complexo GC-GR é translocado para o núcleo celular, e então liga-se a elementos de resposta a GC (GREs) nas regiões promotoras de vários genes. O complexo GC-GR- GRE resultante, por sua vez, ativa ou inibe a transcrição de genes localizados proximamente. O complexo GC-GR também (ou alternativamente) pode regular negativamente a transcrição de genes por um processo que não envolve ligação de DNA. Neste processo, denominado transrepressão, o complexo GC-GR entra no núcleo e interage diretamente (via interação proteína-proteína) com outros fatores de transcrição, reprimindo a sua capacidade de induzir transcrição genética e, assim, expressão de proteínas.

[0004] Crê-se que alguns dos efeitos secundários de GCs resultam de reatividade cruzada com outros receptores de esteroides (por exemplo, receptores de progesterona, androgênio, mineralocorticoide, e estrogênio), que têm domínios de ligação de ligantes um pouco homólogos; e/ou a incapacidade de modular seletivamente a expressão de genes e sinalização a jusante. Em consequência, crê-se que um modulador de GR seletivo (SGRM) eficaz, que se ligue a GR com maior afinidade relativamente a outros receptores de hormônios esteroides, proporcionará uma terapia alternativa para abordar a necessidade não satisfeita de uma terapia que possua os efeitos benéficos de GCs, mas, ao mesmo tempo, com menos efeitos secundários.

[0005] Foi relatado que uma faixa de compostos tem atividade de SGRM. Ver, por exemplo, WO2007/0467747, WO2007/114763, WO2008/006627, WO2008/055709, WO2008/055710, WO2008/052808, WO2008/063116, WO2008/076048, WO2008/079073, WO2008/098798, WO2009/065503, WO2009/142569, WO2009/142571, WO2010/009814, WO2013/001294, e EP2072509. Ainda assim, continuam a ser necessários novos SGRMs que exibam, por exemplo, uma potência, eficácia, eficiência em pacientes insensíveis a esteroides, seletividade, solubilidade que permita administração oral, perfil farmacocinético que permita um regime de dosagem desejável, estabilidade por armazenamento (por exemplo, estabilidade hidrolítica, térmica, química, ou fotoquímica), cristalinidade, tolerabilidade para uma gama de pacientes, perfil de efeitos secundários e/ou perfil de segurança melhorados. SUMÁRIO DO RELATÓRIO DESCRITIVO

[0006] Este relatório descritivo é dirigido, inter alia, a compostos 1- alquil-6-oxo-1,6-di-hidropiridin-3-ila; métodos de tratamento usando os compostos 1-alquil-6-oxo-1,6-di-hidropiridin-3-ila (por exemplo, usos dos compostos para tratar várias afeções e como ferramentas farmacológicas); uso dos compostos 1-alquil-6-oxo-1,6-di-hidropiridin-3- ila para preparar medicamentos; composições compreendendo os compostos 1-alquil-6-oxo-1,6-di-hidropiridin-3-ila (por exemplo, composições farmacêuticas); kits compreendendo os compostos 1- alquil-6-oxo-1,6-di-hidropiridin-3-ila; métodos para a fabricação dos compostos 1-alquil-6-oxo-1,6-di-hidropiridin-3-ila; e intermediários usados em tais métodos de fabricação.

[0007] Em resumo, este relatório descritivo é dirigido, em parte, a um composto da Fórmula I ou seu sal. A Fórmula I corresponde a:

Aqui: R1 é selecionado de halo, metila e halometila. Cada R2 é um halo independentemente selecionado. Cada um de R3A, R3B e R3C é independentemente selecionado de H, halo, halometila e halometóxi. R4 é selecionado de H, halo e metila. R5 é selecionado de metila e etila.

[0008] Este relatório descritivo também é dirigido, em parte, a composições farmacêuticas. Tais composições compreendem um composto da Fórmula I (ou sal farmaceuticamente aceitável), e um excipiente farmaceuticamente aceitável.

[0009] Este relatório descritivo também é dirigido, em parte, a composições farmacêuticas orais. Tais composições compreendem um composto da Fórmula I (ou sal farmaceuticamente aceitável), e um excipiente farmaceuticamente aceitável.

[00010] Este relatório descritivo também é dirigido, em parte, a um composto da Fórmula I (ou sal farmaceuticamente aceitável) para uso como medicamento.

[00011] Este relatório descritivo também é dirigido, em parte, a um composto da Fórmula I (ou sal farmaceuticamente aceitável) para a terapia de uma afeção (em geral um distúrbio) mediada por (ou então associada a) o receptor de glucocorticoide.

[00012] Este relatório descritivo também é dirigido, em parte, a um composto da Fórmula I (ou sal farmaceuticamente aceitável) para o tratamento de artrite reumatoide.

[00013] Este relatório descritivo também é dirigido, em parte, ao uso de um composto da Fórmula I (ou sal farmaceuticamente aceitável) para a fabricação de um medicamento.

[00014] Este relatório descritivo também é dirigido, em parte, ao uso de um composto da Fórmula I (ou sal farmaceuticamente aceitável) para a fabricação de um medicamento destinado à terapia de uma afeção (em geral um distúrbio) mediada por (ou então associada a) o receptor de glucocorticoide.

[00015] Este relatório descritivo também é dirigido, em parte, ao uso de um composto da Fórmula I (ou sal farmaceuticamente aceitável) para a fabricação de um medicamento destinado ao tratamento de artrite reumatoide.

[00016] Este relatório descritivo também é dirigido, em parte, a um método para o tratamento de uma afeção (em geral um distúrbio) mediada por (ou então associada a) o receptor de glucocorticoide em um mamífero (por exemplo, um ser humano) necessitado de tal tratamento. O método compreende administrar ao mamífero uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da Fórmula I (ou sal farmaceuticamente aceitável).

[00017] Este relatório descritivo também é dirigido, em parte, a um método para o tratamento de artrite reumatoide em um mamífero (por exemplo, um ser humano) necessitado de tal tratamento. O método compreende administrar ao mamífero uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da Fórmula I (ou sal farmaceuticamente aceitável).

[00018] O relatório descritivo também é dirigido, em parte, a um kit. O kit compreende um respectivo composto da Fórmula I (ou sal farmaceuticamente aceitável). O kit também compreende um aparelho para administrar o composto (ou sal farmaceuticamente aceitável) a um mamífero (por exemplo, um ser humano); instruções para administrar o composto (ou sal farmaceuticamente aceitável) a um mamífero (por exemplo, um ser humano); um excipiente; ou um ingrediente farmaceuticamente ativo diferente do composto da Fórmula I (ou sal farmaceuticamente aceitável).

[00019] Aspectos adicionais da invenção do Requerente serão claros para o perito na técnica a partir da leitura deste relatório descritivo.

DESCRIÇÃO DE MODALIDADES ILUSTRATIVAS

[00020] Esta descrição de modalidades ilustrativas destina-se meramente a dar a conhecer a outros peritos na técnica a invenção do Requerente, os seus princípios, e a sua aplicação prática de modo que outros peritos na técnica possam facilmente adaptar e aplicar o relatório descritivo em suas numerosas formas, tanto quanto melhor se adéquem aos requisitos de um uso particular. Esta descrição e seus exemplos específicos, não obstante indicarem modalidades deste relatório descritivo, destinam-se meramente a propósitos ilustrativos. Em consequência, este relatório descritivo não está limitado às modalidades ilustrativas descritas neste relatório descritivo, e pode ser modificado de modo variado. Adicionalmente, deve ser apreciado que várias características do relatório descritivo que, por motivos de clareza, são descritas no contexto de modalidades separadas, também podem ser combinadas para formar uma única modalidade. Inversamente, várias características do relatório descritivo que, por motivos de brevidade, são descritas no contexto de uma única modalidade, também podem ser combinadas para formar respectivas subcombinações.

OS COMPOSTOS

[00021] Como notado acima, este relatório descritivo é dirigido, em parte, a um composto da Fórmula I ou um seu sal. A Fórmula I corresponde a:

[00022] Em geral, R1 é selecionado do grupo que consiste de halo, metila e halometila.

[00023] Em algumas modalidades, R1 é halo. Em algumas de tais modalidades, R1 é fluoro.

[00024] Em algumas modalidades, R1 é metila.

[00025] Em algumas modalidades, R1 é halometila.

[00026] Em geral, cada R2 é um halo independentemente selecionado.

[00027] Em algumas modalidades, cada R2 é fluoro.

[00028] Em algumas modalidades, R1 é halo, e cada R2 é fluoro. Em algumas de tais modalidades, R1 é fluoro, e cada R2 é fluoro.

[00029] Em algumas modalidades, R1 é metila, e cada R2 é fluoro.

[00030] Em geral, cada um de R3A, R3B e R3C é independentemente selecionado de H, halo, halometila e halometóxi.

[00031] Em algumas modalidades, cada um de R3A, R3B e R3C é independentemente selecionado de H, fluoro, cloro, trifluorometila, difluorometóxi e trifluorometóxi.

[00032] Em algumas modalidades, pelo menos um de R3A, R3B e R3C é H.

[00033] Em algumas modalidades, pelo menos um de R3A, R3B e R3C é H; e cada um dos restantes dois de R3A, R3B e R3C é independentemente selecionado de H, fluoro, cloro, trifluorometila, difluorometóxi e trifluorometóxi.

[00034] Em algumas modalidades, apenas um de R3A, R3B e R3C é H. Em algumas de tais modalidades, R3A é H. Em outras de tais modalidades, R3B é H.

[00035] Em algumas modalidades, R3B é H, e cada um de R3A e R3C é halo. Em algumas de tais modalidades, cada um de R3A e R3C é fluoro. Em outras de tais modalidades, cada um de R3A e R3C é cloro.

[00036] Em algumas modalidades, dois (e não mais do que dois) de R3A, R3B e R3C são, cada um, H.

[00037] Em algumas modalidades, cada R3A e R3B é H.

[00038] Em algumas modalidades, cada R3A e R3B é H, e R3c é halo. Em algumas de tais modalidades, R3c é fluoro. Em outras de tais modalidades, R3c é cloro.

[00039] Em algumas modalidades, cada R3A e R3C é H.

[00040] Em algumas modalidades, cada R3A e R3C é H, e R3B é halo. Em algumas de tais modalidades, R3B é fluoro. Em outras de tais modalidades, R3B é cloro.

[00041] Em algumas modalidades, cada R3A e R3C é H, e R3B é halometila. Em algumas de tais modalidades, R3B é trifluorometila.

[00042] Em algumas modalidades, cada R3A e R3C é H, e R3B é halometóxi. Em algumas de tais modalidades, R3B é difluorometóxi. Em outras de tais modalidades, R3B é trifluorometóxi.

[00043] Em algumas modalidades, cada um de todos os R3A, R3B e R3C é H.

[00044] Em geral, R4 é selecionado de H, halo e metila.

[00045] Em algumas modalidades, R4 é H.

[00046] Em algumas modalidades, R4 é halo. Em algumas de tais modalidades, R4 é cloro.

[00047] Em algumas modalidades, R4 é metila.

[00048] Em geral, R5 é selecionado de metila e etila.

[00049] Em algumas modalidades, R5 é metila.

[00050] Em algumas modalidades, R5 é etila.

[00051] Em algumas modalidades, a estrutura do composto das modalidades acima corresponde à Fórmula (IA):

[00052] Compostos da Fórmula I incluem, por exemplo, os seguintes

[00053] Algumas modalidades são dirigidas a um composto que corresponde à seguinte estrutura (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável):

[00054] Em algumas de tais modalidades, o composto corresponde à seguinte estrutura (ou é um seu sal farmaceuticamente aceitável):

[00055] Algumas modalidades são dirigidas a um composto que corresponde à seguinte estrutura (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável):

[00056] Em algumas de tais modalidades, o composto corresponde à seguinte estrutura (ou é um seu sal farmaceuticamente aceitável):

[00057] Algumas modalidades são dirigidas a um composto que corresponde à seguinte estrutura (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável):

[00058] Em algumas de tais modalidades, o composto corresponde à seguinte estrutura (ou é um seu sal farmaceuticamente aceitável):

[00059] Em algumas modalidades, compostos e sais deste relatório descritivo exibem uma ou mais das seguintes características: uma potência, eficácia, eficiência em pacientes insensíveis a esteroides, seletividade, solubilidade que permita administração oral, perfil farmacocinético que permita um regime de dosagem desejável, estabilidade por armazenamento (por exemplo, estabilidade hidrolítica, térmica, química, ou fotoquímica), cristalinidade, tolerabilidade para uma gama de pacientes, perfil de efeitos secundários e/ou perfil de segurança desejáveis.

[00060] Em algumas modalidades, o composto da Fórmula I (ou seu sal farmaceuticamente aceitável) é um agonista parcial e antagonista parcial do receptor de glucocorticoides. Em algumas modalidades, o composto da Fórmula I (ou seu sal farmaceuticamente aceitável) exibe atividade em ambos os ensaios do Exemplo 24 embaixo, com um efeito agonista de transativação menor do que 50% no Ensaio Agonista de GRE e um efeito antagonista de transativação maior do que 50% no Ensaio Antagonista de GRE.

[00061] Os compostos da Fórmula I incluem pelo menos dois centros quirais. No caso de uma estrutura ou nome químico, nesta patente, não indicar a quiralidade, é pretendido que a estrutura ou nome abranja qualquer isômero quiral isolado correspondente a essa estrutura ou nome, bem como qualquer mistura de isômeros quirais (por exemplo, o racemato). Em algumas modalidades, um único isômero quiral é obtido através do seu isolamento de uma mistura de isômeros (por exemplo, um racemato) usando, por exemplo, separação cromatográfica quiral. Em outras modalidades, um único isômero quiral é obtido através de síntese direta a partir de, por exemplo, um material de partida quiral.

[00062] Em algumas modalidades, os compostos da Fórmula I estão na forma de um composto diferente de sal.

[00063] Em algumas modalidades, os compostos da Fórmula I estão na forma de um sal. Em algumas de tais modalidades, os sais são sais de adição de ácidos. Em geral, um sal de adição de ácido pode ser preparado usando vários ácidos inorgânicos ou orgânicos. Tais sais podem ser tipicamente formados, por exemplo, por mistura do composto com um ácido (por exemplo, uma quantidade estequiométrica de ácido) usando vários métodos conhecidos na técnica. Esta mistura pode ocorrer em água, um solvente orgânico (por exemplo, éter, acetato de etila, etanol, isopropanol, ou acetonitrila), ou uma mistura aquosa/orgânica.

[00064] Um sal pode ser vantajoso devido a uma ou mais das suas propriedades químicas ou físicas, tais como estabilidade a diferentes temperaturas e umidades, ou uma solubilidade desejável em água, óleo, ou outro solvente. Em alguns casos, um sal pode ser usado para auxiliar o isolamento ou purificação do composto. Em algumas modalidades (em particular quando o sal é destinado a administração a um animal, ou é um reagente para uso na fabricação de um composto ou sal destinado a administração a um animal), o sal é farmaceuticamente aceitável.

[00065] Exemplos de ácidos inorgânicos que podem ser tipicamente usados para formar sais de adição de ácidos incluem ácido clorídrico, bromídrico, iodídrico, nítrico, carbônico, sulfúrico, e fosfórico. Exemplos de ácidos orgânicos incluem, por exemplo, as classes de ácidos orgânicos alifáticos, cicloalifáticos, aromáticos, aralifáticos, heterocíclicos, carboxílicos, e sulfônicos. Exemplos específicos de sais orgânicos incluem colato, sorbato, laurato, acetato, trifluoroacetato, formato, propionato, succinato, glicolato, gluconato, digluconato, lactato, malato, ácido tartárico (e seus derivados, por exemplo, dibenzoiltartarato), citrato, ascorbato, glucuronato, maleato, fumarato, piruvato, aspartato, glutamato, benzoato, ácido antranílico, mesilato, estearato, salicilato, p-hidroxibenzoato, fenilacetato, mandelato (e seus derivados), embonato (pamoato), etanossulfonato, benzenossulfonato, pantotenato, 2-hidroxietanossulfonato, sulfanilato, ciclo- hexilaminossulfonato, ácido algínico, ácido β-hidroxibutirico, galactarato, galacturonato, adipato, alginato, butirato, canforato, canforsulfonato, ciclopentanopropionato, dodecilsulfato, glicoheptanoato, glicerofosfato, heptanoato, hexanoato, nicotinato, 2- naftalessulfonato, oxalato, palmoato, pectinato, 3-fenilpropionato, picrato, pivalato, tiocianato, tosilato, e undecanoato.

[00066] Os compostos da Fórmula I e seus sais destinam-se a abranger quaisquer derivados isotopicamente etiquetados (ou "radioetiquetados") de um composto da Fórmula I ou seu sal. Tal derivado é um derivado de um composto da Fórmula I ou seu sal no qual um ou mais átomos estão substituídos por um átomo que tem uma massa atômica ou número de massa diferente da massa atômica ou número de massa tipicamente encontrado na natureza. Exemplos de radionuclídeos que podem ser incorporados incluem 2H (também escrito como "D" de deutério), 3H (também escrito como "T" de trítio), 11C, 13C, 14C, 13N, 15N, 15O, 17O, 18O, 18F, 36Cl, 82Br, 75Br, 76Br, 77Br, 123I, 124I, 125I, e 131I. O radionuclídeo usado dependerá da aplicação específica desse derivado radioetiquetado. Por exemplo, para ensaios de etiquetagem e competição de receptores in vitro, 3H ou 14C são muitas vezes úteis. Para aplicações de radioimagiologia, 11C ou 18F são muitas vezes úteis. Em algumas modalidades, o radionuclídeo é 3H. Em algumas modalidades, o radionuclídeo é 14C. Em algumas modalidades, o radionuclídeo é 11C. E em algumas modalidades, o radionuclídeo é 18F.

[00067] É contemplado que os compostos da Fórmula I e seus sais possam ter várias formas de estado sólido. Também é contemplado que os compostos da Fórmula I e seus sais possam estar em uma forma não solvatada ou na forma de um solvato (por exemplo, um hidrato).

[00068] Também é contemplado que um composto da Fórmula I ou um seu sal possa ser ligado a um parceiro de acoplamento, por exemplo, ao ser quimicamente acoplado ao composto ou sal ou fisicamente associado ao mesmo. Exemplos de parceiros de acoplamento incluem uma etiqueta ou molécula repórter, um substrato de suporte, um transportador ou molécula de transporte, um efetor, um fármaco, um anticorpo, ou um inibidor. Parceiros de acoplamento podem ser covalentemente ligados a um composto ou sal via um grupo funcional apropriado presente no composto, tal como um grupo hidroxila, carboxila, ou amino. Outros derivados incluem a formulação de um composto ou sal com lipossomos.

B. USOS MÉDICOS

[00069] Devido à sua capacidade de se ligarem ao receptor de glucocorticoides, o Requerente crê que os compostos descritos neste relatório descritivo são úteis como agentes anti-inflamatórios, e também podem exibir ações antialérgicas, imunossupressoras e antiproliferativas. Assim, é contemplado que compostos da Fórmula I (incluindo seus sais farmaceuticamente aceitáveis) possam ser usados como medicamento para o tratamento ou profilaxia de uma ou mais das seguintes afeções (em geral um distúrbio) em um mamífero: doenças pulmonares, que coincidem com processos inflamatórios, alérgicos e/ou proliferativos, incluindo doenças pulmonares cronicamente obstrutivas de qualquer origem (incluindo asma brônquica, doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD)), bronquite de diferentes origens, síndrome da dificuldade respiratória do adulto (ARDS), síndrome da dificuldade respiratória aguda, bronquiectasia, todas as formas de doenças pulmonares restritivas (incluindo alveolite alérgica), todas as formas de edema pulmonar (incluindo edema pulmonar tóxico), sarcoidoses, e granulomatoses (incluindo doença de Boeck); doenças reumáticas/doenças autoimunes/doenças degenerativas das articulações, que coincidem com processos inflamatórios, alérgicos e/ou proliferativos, incluindo todas as formas de doenças reumáticas (incluindo artrite reumatoide, febre reumática aguda, polimialgia reumática, colagenoses, e doença de Behçet), artrite reativa, doenças inflamatórias de tecidos moles de outras origens, sintomas artríticos em doenças degenerativas das articulações (artroses), artrites traumáticas, doenças de colágeno de outras origens (incluindo lúpus eritematoso sistêmico, lúpus eritematoso discoide, esclerodermia, polimiosite, dermatomiosite, poliarterite nodosa, e arterite temporal), síndrome de Sjogren, síndrome de Still, síndrome de Felty, vitiligo e reumatismo de tecidos moles; alergias, que coincidem com processos inflamatórios, alérgicos e/ou proliferativos, incluindo todas as formas de reações alérgicas (incluindo edema de Quincke; mordeduras de insetos; reações alérgicas a agentes farmacêuticos, derivados do sangue, meios de contraste, etc.; choque anafilático; urticária; e doenças alérgicas vasculares), vasculite alérgica, e vasculite inflamatória; inflamações vasculares (vasculites), incluindo panarterite nodosa, arterite temporal, eritema nodoso, poliarterite nodosa, granulomatose de Wegner, e arterite de células gigantes; nefropatias, que coincidem com processos inflamatórios, alérgicos e/ou proliferativos, incluindo síndrome nefrótica e todas as nefrites (incluindo glomerulonefrite); doenças do fígado, que coincidem com processos inflamatórios, alérgicos e/ou proliferativos, incluindo decomposição aguda de células hepáticas, hepatite aguda de diferentes origens (incluindo induzida pelas vias viral, tóxica ou por agente farmacêutico), e hepatite cronicamente agressiva e/ou cronicamente intermitente; doenças gastrointestinais, que coincidem com processos inflamatórios, alérgicos e/ou proliferativos, incluindo enterite regional (doença de Crohn), gastrite, esofagite de refluxo, colite ulcerativa, e gastroenterite de outras origens (incluindo doença celíaca nativa); doenças proctológicas, que coincidem com processos inflamatórios, alérgicos e/ou proliferativos, incluindo eczema anal, fissuras, hemorroidas, e proctite idiopática; doenças oculares, que coincidem com processos inflamatórios, alérgicos e/ou proliferativos, incluindo queratite alérgica, uveíte irite, conjuntivite, blefarite, neurite óptica, corioidite, e oftalmia simpática; doenças da área ouvido-nariz-garganta, que coincidem com processos inflamatórios, alérgicos e/ou proliferativos, incluindo rinite alérgica, febre do feno, otite externa (causada por dermatite de contato, infecção, etc.), e otite média; doenças neurológicas, que coincidem com processos inflamatórios, alérgicos e/ou proliferativos, incluindo edema cerebral (incluindo edema cerebral induzido por tumores), esclerose múltipla, encefalomielite aguda, diferentes formas de convulsões (incluindo espasmos infantis com cabeceamento), meningite, lesão da medula espinhal, e derrame cerebral; doenças do sangue, que coincidem com processos inflamatórios, alérgicos e/ou proliferativos, incluindo anemia hemolítica adquirida, trombocitopenia (incluindo trombocitopenia idiopática), linfomas de M. Hodgkins e Não de Hodgkins, trombocitemias, e eritrocitoses; doenças tumorais, que coincidem com processos inflamatórios, alérgicos e/ou proliferativos, incluindo leucemia linfática aguda, linfoma maligno, linfogranulomatoses, linfossarcoma, e metástases extensas (incluindo cânceres da mama e próstata); doenças endócrinas, que coincidem com processos inflamatórios, alérgicos e/ou proliferativos, incluindo orbitopatia endócrina, crise tirotóxica, tireoidite de Quervain, tireoidite de Hashimoto, hipertireoidismo, doença de Basedow, tireoidite granulomatosa, bócio linfadenoide; transplantes, que coincidem com processos inflamatórios, alérgicos e/ou proliferativos; afeções de choque grave, que coincidem com processos inflamatórios, alérgicos e/ou proliferativos, incluindo choque anafilático; terapia de substituição, que coincide com processos inflamatórios, alérgicos e/ou proliferativos, incluindo insuficiência suprarrenal primária inata (incluindo síndrome adrenogenital congênito), insuficiência suprarrenal primária adquirida (incluindo doença de Addison, adrenalite autoimune, meta-infecciosa, tumores, metástases, etc.), insuficiência suprarrenal secundária inata (incluindo, por exemplo, hipopituitarismo congênito), e insuficiência suprarrenal secundária adquirida (incluindo meta-infecciosa, tumores, etc.);

[00070] Êmese, que coincide com processos inflamatórios, alérgicos e/ou proliferativos, incluindo em combinação com um antagonista de 5- HT3 em vômitos induzidos por agentes citostáticos;

[00071] Dores de origem inflamatória, incluindo lumbago; e

[00072] Doenças dermatológicas, que coincidem com processos inflamatórios, alérgicos e/ou proliferativos, incluindo dermatite atópica (incluindo em crianças), dermatite exfoliativa, psoríase, doenças eritematosas (desencadeadas por diferentes agentes nocivos, incluindo radiação, agentes químicos, queimaduras, etc.), queimaduras com ácidos, dermatoses bolhosas (incluindo pênfigo vulgar autoimune, e penfigoide bolhoso), doenças do grupo liquenoide, comichão (incluindo de origens alérgicas), todas as formas de eczema (incluindo eczema atópico ou eczema seborreico), rosácea, pênfigo vulgar, eritema exsudativo multiforme, eritema nodoso, balanite, prurido (incluindo de origem alérgica), manifestação de doenças vasculares, vulvite, perda de cabelo inflamatória (incluindo alopecia areata), linfoma cutâneo de células T, erupções de qualquer origem ou grupos de dermatoses, psoríase e parapsoríase, e pitiríase rubra pilar.

[00073] Sem prejuízo do anteriormente exposto, é contemplado que os compostos revelados neste relatório descritivo (incluindo seus sais farmaceuticamente aceitáveis) possam ser usados para tratar afeções tais como: diabetes do tipo I (diabetes dependente de insulina), síndrome de Guillain-Barré, restenoses após angioplastia transluminal percutânea, doença de Alzheimer, dor aguda e crônica, arteriosclerose, lesão de reperfusão, lesão térmica, lesão de múltiplos órgãos secundária a traumatismo, meningite purulenta aguda, enterocolite necrotizante e síndromes associadas a hemodiálise, leucoférese, transfusão de granulócitos, Síndrome de Conies, hiperaldosteronismo primário e secundário, retenção de sódio aumentada, excreção aumentada de magnésio e potássio (diurese), retenção de água aumentada, hipertensão (sistólica isolada e sistólica/diastólica combinada), arritmias, fibrose do miocárdio, enfarte do miocárdio, Síndrome de Bartter, distúrbios associados a níveis excessivos de catecolamina, falha cardíaca congestiva diastólica e sistólica (CHF), doença vascular periférica, nefropatia diabética, cirrose com edema e ascites, varizes esofágicas, fraqueza muscular, pigmentação de melanina aumentada da pele, perda de peso, hipotensão, hipoglicemia, Síndrome de Cushing, obesidade, intolerância à glucose, hiperglicemia, diabetes mellitus, osteoporose, poliúria, polidipsia, inflamação, distúrbios autoimunes, rejeição de tecidos associada a transplante de órgãos, malignidades tais como leucemias e linfomas, febre reumática, poliarterite granulomatosa, inibição de linhagens de células mieloides, proliferação imune/apoptose, supressão e regulação do eixo HPA, hipercortisolemia, modulação do equilíbrio de citocinas para Thl/Th2, doença renal crônica, hipercalcemia, insuficiência adrenal aguda, insuficiência adrenal primária crônica, insuficiência adrenal secundária, hiperplasia adrenal congênita, síndrome de Little, inflamação sistêmica, doença inflamatória do intestino, granulomatose de Wegener, artrite de células gigantes, osteoartrite, edema angioneurótico, tendinite, bursite, hepatite ativa crônica autoimune, hepatite, cirrose, paniculite, cistos inflamados, pioderma gangrenoso, fasciíte eosinofílica, policondrite recidivante, sarcoidose doença de Sweet, lepra reativa do tipo 1, hemangiomas capilares, líquen plano, eritema nodoso acne, hirsutismo, necrólise epidérmica tóxica, eritema multiforme, psicoses, distúrbios cognitivos (tais como perturbações da memória) distúrbios do humor (tais como depressão e distúrbio bipolar), distúrbios de ansiedade e distúrbios da personalidade.

[00074] Como usado aqui, o termo "falha cardíaca congestiva" (CHF) ou ''doença cardíaca congestiva" refere-se a um estado de doença do sistema cardiovascular em que o coração é incapaz de bombear eficientemente um volume adequado de sangue para cumprir os requisitos dos tecidos e sistemas de órgãos do corpo. Tipicamente, CHF é caracterizado por falha ventricular esquerda (disfunção sistólica) e acúmulo de fluido nos pulmões, sendo a causa subjacente atribuída a um ou mais estados de doença cardíaca ou cardiovascular incluindo doença das artérias coronárias, enfarte do miocárdio, hipertensão, diabetes, doença de válvula cardíaca, e cardiomiopatia. O termo "falha cardíaca congestiva diastólica" refere-se a um estado de CHF caracterizado por enfraquecimento da capacidade do coração de relaxar apropriadamente e ficar cheio de sangue. Inversamente, o termo "falha cardíaca congestiva sistólica" refere-se a um estado de CHF caracterizado por enfraquecimento da capacidade do coração de contrair apropriadamente e ejetar sangue.

[00075] Como será apreciado pelo perito na técnica, distúrbios fisiológicos podem apresentar-se como uma afeção "crônica", ou um episódio "agudo". O termo "crônico", como usado aqui, significa uma afeção de progressão lenta e continuidade prolongada. Como tal, uma afeção crônica é tratada quando é diagnosticada e o tratamento é continuado durante toda a doença. Inversamente, o termo "agudo" significa um evento ou ataque exacerbado, de curta duração, seguido de um período de remissão. Assim, o tratamento de distúrbios fisiológicos contempla eventos agudos e afeções crônicas. Em um evento agudo, o composto é administrado no início dos sintomas e é interrompido quando os sintomas desaparecem.

[00076] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) destinado a uso em terapia.

[00077] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) destinado a uso no tratamento de uma afeção mediada por GR (tal como uma afeção descrita acima).

[00078] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) destinado a uso no tratamento de uma afeção inflamatória ou imune que responde a um glucocorticoide esteroide (por exemplo, dexametasona, prednisona, e/ou prednisolona).

[00079] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) destinado a uso no tratamento de uma afeção inflamatória.

[00080] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) destinado a uso no tratamento de uma afeção respiratória.

[00081] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) destinado a uso no tratamento de uma afeção reumática.

[00082] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) destinado a uso no tratamento de artrite reumatoide.

[00083] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) destinado a uso no tratamento de asma.

[00084] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) destinado a uso no tratamento de exacerbação de asma moderada até grave.

[00085] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) destinado a uso no tratamento de COPD.

[00086] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) destinado a uso no tratamento de exacerbação de COPD moderada até grave.

[00087] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) destinado a uso no tratamento de síndrome do intestino irritável.

[00088] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) destinado a uso no tratamento de um distúrbio do colágeno.

[00089] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) destinado a uso na profilaxia de rejeição de transplante renal.

[00090] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) destinado a uso no tratamento de sarcoidose.

[00091] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) destinado a uso no tratamento de doença de Addison.

[00092] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) destinado a uso no tratamento de leucemia linfocítica crônica.

[00093] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) destinado a uso no tratamento de leucemia linfocítica aguda.

[00094] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) destinado a uso no tratamento de síndrome da dificuldade respiratória.

[00095] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) destinado a uso no tratamento de síndrome nefrótica.

[00096] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) destinado a uso no tratamento de uma doença dermatológica.

[00097] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) destinado a uso na fabricação de um medicamento para terapia.

[00098] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) destinado a uso na fabricação de um medicamento para o tratamento de uma afeção mediada por GR (tal como uma afeção descrita acima).

[00099] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) destinado a uso na fabricação de um medicamento para o tratamento de uma afeção inflamatória ou imune que responde a um glucocorticoide esteroide (por exemplo, dexametasona, prednisona, e/ou prednisolona).

[000100] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) destinado a uso na fabricação de um medicamento para o tratamento de uma afeção inflamatória.

[000101] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) destinado a uso na fabricação de um medicamento para o tratamento de uma afeção respiratória.

[000102] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) destinado a uso na fabricação de um medicamento para o tratamento de uma afeção reumática.

[000103] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) destinado a uso na fabricação de um medicamento para o tratamento de artrite reumatoide.

[000104] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) destinado a uso na fabricação de um medicamento para o tratamento de asma.

[000105] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) destinado a uso na fabricação de um medicamento para o tratamento de exacerbação de asma moderada até grave.

[000106] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) destinado a uso na fabricação de um medicamento para o tratamento de COPD.

[000107] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) destinado a uso na fabricação de um medicamento para o tratamento de exacerbação de COPD moderada até grave.

[000108] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) destinado a uso na fabricação de um medicamento para o tratamento de síndrome do intestino irritável.

[000109] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) destinado a uso na fabricação de um medicamento para o tratamento de um distúrbio do colágeno.

[000110] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) destinado a uso na fabricação de um medicamento para profilaxia de rejeição de transplante renal.

[000111] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) destinado a uso na fabricação de um medicamento para o tratamento de sarcoidose.

[000112] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) destinado a uso na fabricação de um medicamento para o tratamento de doença de Addison.

[000113] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) destinado a uso na fabricação de um medicamento para leucemia linfocítica crônica.

[000114] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) destinado a uso na fabricação de um medicamento para o tratamento de leucemia linfocítica aguda.

[000115] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) destinado a uso na fabricação de um medicamento para o tratamento de síndrome da dificuldade respiratória.

[000116] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) destinado a uso na fabricação de um medicamento para o tratamento de síndrome nefrótica.

[000117] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) destinado a uso na fabricação de um medicamento para o tratamento de uma doença dermatológica.

[000118] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um método de tratamento de uma doença em um mamífero necessitado de tal tratamento. O método compreende administrar ao mamífero uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável).

[000119] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um método de tratamento de uma afeção mediada por GR (tal como uma afeção descrita acima) em um mamífero necessitado de tal tratamento. O método compreende administrar ao mamífero uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável).

[000120] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um método de tratamento de uma afeção inflamatória ou imune que responde a um glucocorticoide esteroide (por exemplo, dexametasona, prednisona, e/ou prednisolona) em um mamífero necessitado de tal tratamento. O método compreende administrar ao mamífero uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável).

[000121] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um método de tratamento de uma afeção inflamatória em um mamífero necessitado de tal tratamento. O método compreende administrar ao mamífero uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável).

[000122] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um método de tratamento de uma afeção respiratória em um mamífero necessitado de tal tratamento. O método compreende administrar ao mamífero uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável).

[000123] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um método de tratamento de uma afeção reumática em um mamífero necessitado de tal tratamento. O método compreende administrar ao mamífero uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável).

[000124] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um método de tratamento de artrite reumatoide em um mamífero necessitado de tal tratamento. O método compreende administrar ao mamífero uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável).

[000125] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um método de tratamento de asma em um mamífero necessitado de tal tratamento. O método compreende administrar ao mamífero uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável).

[000126] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um método de tratamento de exacerbação de asma moderada até grave em um mamífero necessitado de tal tratamento. O método compreende administrar ao mamífero uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável).

[000127] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um método de tratamento de COPD em um mamífero necessitado de tal tratamento. O método compreende administrar ao mamífero uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável).

[000128] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um método de tratamento de exacerbação de COPD moderada até grave em um mamífero necessitado de tal tratamento. O método compreende administrar ao mamífero uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável).

[000129] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um método de tratamento de síndrome do intestino irritável em um mamífero necessitado de tal tratamento. O método compreende administrar ao mamífero uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável).

[000130] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um método de tratamento de um distúrbio do colágeno em um mamífero necessitado de tal tratamento. O método compreende administrar ao mamífero uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável).

[000131] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um método de profilaxia de rejeição de transplante renal em um mamífero necessitado de tal tratamento. O método compreende administrar ao mamífero uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável).

[000132] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um método de tratamento de sarcoidose em um mamífero necessitado de tal tratamento. O método compreende administrar ao mamífero uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável).

[000133] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um método de tratamento de doença de Addison em um mamífero necessitado de tal tratamento. O método compreende administrar ao mamífero uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável).

[000134] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um método de tratamento de leucemia linfocítica crônica em um mamífero necessitado de tal tratamento. O método compreende administrar ao mamífero uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável).

[000135] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um método de tratamento de leucemia linfocítica aguda em um mamífero necessitado de tal tratamento. O método compreende administrar ao mamífero uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável).

[000136] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um método de tratamento de síndrome da dificuldade respiratória em um mamífero necessitado de tal tratamento. O método compreende administrar ao mamífero uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável).

[000137] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um método de tratamento de síndrome nefrótica em um mamífero necessitado de tal tratamento. O método compreende administrar ao mamífero uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável).

[000138] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a um método de tratamento de uma doença dermatológica em um mamífero necessitado de tal tratamento. O método compreende administrar ao mamífero uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável).

[000139] Em algumas modalidades, os métodos de tratamento descritos acima compreendem administrar oralmente ao mamífero uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável).

[000140] Em algumas modalidades, o mamífero tratado nos métodos de tratamento acima descritos é um ser humano.

[000141] Em algumas modalidades, o mamífero tratado nos métodos de tratamento acima descritos é um mamífero diferente de um ser humano. Tais mamíferos incluem, por exemplo, animais de companhia (por exemplo, cães, gatos e cavalos), gado (por exemplo, bovino e suíno); animais laboratoriais (por exemplo, camundongos e ratos); e animais selvagens, de zoo e de circo (por exemplo, ursos, leões, tigres, primatas e macacos).

C. COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS

[000142] Algumas modalidades deste relatório descritivo são dirigidas a composições farmacêuticas (ou medicamentos) compreendendo um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável), bem como a processos para a fabricação de tais composições farmacêuticas. Em geral, a composição farmacêutica compreende uma quantidade terapeuticamente eficaz do composto ou sal. Composições farmacêuticas compreendendo um composto ou sal descrito neste relatório descritivo podem variar muito. Apesar de ser contemplado que um composto ou sal descrito neste relatório descritivo possa ser administrado por si próprio (isto é, sem qualquer outro ingrediente ativo ou inativo), a composição farmacêutica normalmente compreenderá, ao invés, um ou mais ingredientes ativos adicionais e/ou ingredientes inertes. Os ingredientes inertes presentes nas composições farmacêuticas deste relatório descritivo são por vezes coletivamente referidos como "excipientes". Métodos de fabricação de composições farmacêuticas e uso de excipientes são bem conhecidos na técnica. Ver, por exemplo, Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, PA, 15a Edição, 1975.

[000143] É contemplado que composições compreendendo um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) possam ser formuladas para uma variedade de vias e meios de administração adequados, incluindo administração oral, retal, nasal, tópica, bucal, sublingual, vaginal, por inalação, insuflação, ou parenteral. Em algumas modalidades, o composto ou sal é administrado oralmente. Em algumas modalidades, o composto ou sal é administrado intravenosamente. Em algumas modalidades, o composto ou sal é administrado intramuscularmente. Em algumas modalidades, o composto ou sal é administrado subcutaneamente. E, em algumas modalidades, o composto ou sal é administrado pela via intraperitoneal, intratorácica, epidural, intratecal, intracerebroventricular, e por injeção nas articulações. Em algumas modalidades, o composto ou sal é administrado topicamente.

[000144] É contemplado que composições farmacêuticas deste relatório descritivo possam estar na forma, por exemplo, de sólidos, soluções aquosas ou oleosas, suspensões, emulsões, cremes, pomadas, névoas, géis, pulverizações nasais, supositórios, pós finamente divididos, e aerossóis ou nebulizadores para inalação.

[000145] Em algumas modalidades, a composição compreende uma forma de dosagem líquida que pode ser administrada oralmente.

[000146] Em algumas modalidades, a composição compreende uma forma de dosagem sólida que pode ser administrada oralmente.

[000147] Composições em forma sólida podem incluir, por exemplo, pós, comprimidos, grânulos dispersíveis, cápsulas, cápsulas de hóstia ("cachets"), e supositórios. Um transportador sólido pode compreender uma ou mais substâncias. Tais substâncias são geralmente inertes. Um transportador também pode atuar, por exemplo, como um diluente, agente aromatizante, solubilizador, lubrificante, conservante, estabilizador, agente de suspensão, aglutinante, ou agente desintegrante. Também pode atuar, por exemplo, como um material de encapsulação. Exemplos de transportadores frequentemente adequados incluem manitol, lactose, carbonato de magnésio, estearato de magnésio, talco, lactose, açúcar (por exemplo, glucose e sacarose), pectina, dextrina, amido, tragacanto, celulose, derivados de celulose (por exemplo, metilcelulose e carboximetilcelulose sódica), sacarina de sódio, cera de baixo ponto de fusão, e manteiga de cacau de qualidade farmacêutica.

[000148] Em pós, o transportador é tipicamente um sólido finamente dividido, que está em uma mistura com o componente ativo finamente dividido. Em comprimidos, o componente ativo é tipicamente misturado com o transportador que tem as propriedades de ligação desejáveis, em proporções adequadas, e é compactado no formato e tamanho desejados.

[000149] Para a preparação de composições de supositórios, uma cera de baixo ponto de fusão (por exemplo, uma mistura de glicerídeos de ácidos graxos e manteiga de cacau) é tipicamente primeiramente fundida, seguido de dispersão na mesma do ingrediente ativo, por exemplo, por agitação. A mistura homogênea fundida é então derramada em moldes convenientemente dimensionados e é deixada esfriar e solidificar. Exemplos de excipientes não irritantes que podem estar presentes em composições de supositórios incluem, por exemplo, manteiga de cacau, gelatina glicerinada, óleos vegetais hidrogenados, misturas de polietilenoglicóis de vários pesos moleculares, e ésteres de ácidos graxos de polietilenoglicol.

[000150] Composições líquidas podem ser preparadas, por exemplo, por dissolução ou dispersão do composto ou um sal deste relatório descritivo em um transportador, tal como, por exemplo, água, soluções de água/propilenoglicol, solução salina dextrose aquosa, glicerol, ou etanol. Em algumas modalidades, soluções aquosas para administração oral podem ser preparadas por dissolução de um composto ou sal deste relatório descritivo em água com um solubilizador (por exemplo, um polietilenoglicol). Corantes, agentes aromatizantes, estabilizadores, e agentes espessantes, por exemplo, também podem ser adicionados. Em algumas modalidades, suspensões aquosas para uso oral podem ser preparadas por dispersão do composto ou sal deste relatório descritivo, em uma forma finamente dividida, em água, juntamente com um material viscoso, tal como, por exemplo, uma ou mais gomas sintéticas naturais, resinas, metilcelulose, carboximetilcelulose sódica, ou outros agentes de suspensão. Se desejado, a composição líquida também pode conter outros ingredientes inertes auxiliares não tóxicos, tais como, por exemplo, agentes molhantes ou emulsificantes, agentes de tamponamento do pH e similares, por exemplo, acetato de sódio, monolaurato de sorbitana, acetato sódico de trietanolamina, monolaurato de sorbitana, oleato de trietanolamina, etc. Tais composições também podem conter outros ingredientes, tais como, por exemplo, um ou mais adjuvantes farmacêuticos.

[000151] Em algumas modalidades, a concentração do composto da Fórmula I (ou seu sal farmaceuticamente aceitável) na composição farmacêutica vai desde cerca de 0,05% até cerca de 99% (em peso). Em algumas de tais modalidades, por exemplo, a concentração vai desde cerca de 0,05 até cerca de 80%, desde cerca de 0,10 até cerca de 70%, ou desde cerca de 0,10% até cerca de 50% (em peso).

[000152] Quando um composto ou sal deste relatório descritivo é administrado como terapia única para o tratamento de um distúrbio, uma "quantidade terapeuticamente eficaz" é uma quantidade suficiente para reduzir ou aliviar completamente sintomas ou outros efeitos prejudiciais da afeção; curar a afeção; inverter, travar completamente, ou abrandar a progressão da afeção; reduzir o risco de agravamento da afeção; ou retardar ou reduzir o risco de surgimento da afeção.

[000153] Em algumas modalidades deste relatório descritivo, a composição farmacêutica é adequada para administração oral em uma forma de dosagem unitária, por exemplo, de um comprimido ou cápsula contendo desde cerca de 0,1 mg até cerca de 10 g do composto da Fórmula I ou seu sal farmaceuticamente aceitável.

[000154] Em algumas modalidades, a composição farmacêutica compreende uma quantidade de um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) que é terapeuticamente eficaz para tratar uma afeção mediada por GR (tal como uma afeção descrita acima) que seja desejado tratar.

[000155] Em algumas modalidades, a composição farmacêutica compreende uma quantidade de um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) que é terapeuticamente eficaz para tratar uma afeção inflamatória.

[000156] Em algumas modalidades, a composição farmacêutica compreende uma quantidade de um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) que é terapeuticamente eficaz para tratar uma afeção respiratória.

[000157] Em algumas modalidades, a composição farmacêutica compreende uma quantidade de um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) que é terapeuticamente eficaz para tratar uma afeção reumática.

[000158] Em algumas modalidades, a composição farmacêutica compreende uma quantidade de um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) que é terapeuticamente eficaz para tratar artrite reumatoide.

[000159] Em algumas modalidades, a composição farmacêutica compreende uma quantidade de um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) que é terapeuticamente eficaz para tratar asma.

[000160] Em algumas modalidades, a composição farmacêutica compreende uma quantidade de um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) que é terapeuticamente eficaz para tratar exacerbação de asma moderada até grave.

[000161] Em algumas modalidades, a composição farmacêutica compreende uma quantidade de um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) que é terapeuticamente eficaz para tratar COPD.

[000162] Em algumas modalidades, a composição farmacêutica compreende uma quantidade de um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) que é terapeuticamente eficaz para tratar exacerbação de COPD moderada até grave.

[000163] Em algumas modalidades, a composição farmacêutica compreende uma quantidade de um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) que é terapeuticamente eficaz para tratar síndrome do intestino irritável.

[000164] Em algumas modalidades, a composição farmacêutica compreende uma quantidade de um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) que é terapeuticamente eficaz para tratar um distúrbio do colágeno.

[000165] Em algumas modalidades, a composição farmacêutica compreende uma quantidade de um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) que é terapeuticamente eficaz para profilaxia de rejeição de transplante renal.

[000166] Em algumas modalidades, a composição farmacêutica compreende uma quantidade de um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) que é terapeuticamente eficaz para tratar sarcoidose.

[000167] Em algumas modalidades, a composição farmacêutica compreende uma quantidade de um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) que é terapeuticamente eficaz para tratar doença de Addison.

[000168] Em algumas modalidades, a composição farmacêutica compreende uma quantidade de um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) que é terapeuticamente eficaz para tratar leucemia linfocítica crônica.

[000169] Em algumas modalidades, a composição farmacêutica compreende uma quantidade de um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) que é terapeuticamente eficaz para tratar leucemia linfocítica aguda.

[000170] Em algumas modalidades, a composição farmacêutica compreende uma quantidade de um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) que é terapeuticamente eficaz para tratar síndrome da dificuldade respiratória.

[000171] Em algumas modalidades, a composição farmacêutica compreende uma quantidade de um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) que é terapeuticamente eficaz para tratar síndrome nefrótica.

[000172] Em algumas modalidades, a composição farmacêutica compreende uma quantidade de um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) que é terapeuticamente eficaz para tratar uma doença dermatológica.

[000173] A dosagem e frequência ótimas da administração dependerão da afeção particular a ser tratada e da sua gravidade; da espécie do paciente; da idade, sexo, estatura e peso, dieta, e estado físico geral do paciente particular; razão de pesos cérebro/corpo; outra medicação que o paciente possa estar a tomar; da via de administração; da formulação; e outros fatores variados conhecidos dos médicos (no contexto de pacientes humanos), veterinários (no contexto de pacientes não humanos), e outros peritos na técnica.

[000174] É contemplado, em algumas modalidades, que a quantidade ótima de um composto ou sal deste relatório descritivo seja pelo menos cerca de 0,01 mg/kg de peso do corpo por dia, desde cerca de 0,01 até cerca de 100 mg/kg de peso do corpo por dia, ou desde cerca de 0,01 até cerca de 10 mg/kg de peso do corpo por dia (por exemplo, 0,5 mg/kg de peso do corpo por dia) quando administrado sistemicamente.

[000175] É contemplado que as composições farmacêuticas possam estar em uma ou mais formas de dosagem unitária. Em conformidade, a composição pode ser dividida em doses unitárias contendo quantidades apropriadas do componente ativo. A forma de dosagem unitária pode ser, por exemplo, uma cápsula, cápsula de hóstia, ou o próprio comprimido, ou pode estar no número apropriado de qualquer uma destas formas embaladas. A forma de dosagem unitária pode ser, alternativamente, uma preparação embalada em que a embalagem contém quantidades discretas da composição, tais como, por exemplo, comprimidos embaladaos, cápsulas ou pós em frascos ou ampolas. Formas de dosagem unitária podem ser preparadas, por exemplo, por vários métodos bem conhecidos na área da farmácia.

[000176] É contemplado que uma dosagem possa ser administrada uma vez ao dia ou em doses divididas, tal como, por exemplo, desde 2 até 4 vezes ao dia.

D. COMBINAÇÕES

[000177] Este relatório descritivo também é dirigido a terapias ou composições de combinação em que um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável), ou uma composição farmacêutica compreendendo um composto da Fórmula I (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável), é administrado de modo concorrente (possivelmente na mesma composição) ou sequencial com um ou mais agentes ativos diferentes para o tratamento de quaisquer das afeções acima discutidas.

[000178] Em algumas modalidades em que é usada uma terapia de combinação, a quantidade do composto ou sal deste relatório descritivo e a quantidade do(s) outro(s) agente(s) farmaceuticamente ativo(s), quando combinadas, são terapeuticamente eficazes para tratar um distúrbio visado no paciente animal. Neste contexto, as quantidades combinadas formam uma "quantidade terapeuticamente eficaz" se, quando combinadas, forem suficientes para reduzir ou aliviar completamente sintomas ou outros efeitos prejudiciais do distúrbio; curar o distúrbio; inverter, travar completamente, ou abrandar a progressão do distúrbio; reduzir o risco de agravamento do distúrbio; ou retardar ou reduzir o risco de surgimento do distúrbio. Tipicamente, tais quantidades podem ser determinadas pelo perito na técnica, por exemplo, começando com a gama de dosagens descrita nesta patente para o composto ou sal deste relatório descritivo e gama(s) de dosagem aprovada(s) ou então publicada(s) do(s) outro(s) composto(s) farmaceuticamente ativo(s).

[000179] Quando usado em uma terapia de combinação, é contemplado que o composto ou sal deste relatório descritivo e os outros ingredientes ativos possam ser administrados em uma única composição, composições completamente separadas, ou uma combinação destes. Também é contemplado que os ingredientes ativos possam ser administrados de modo concorrente, simultâneo, sequencial, ou separado. As composição(ões) e frequência(s) de dosagem particulares da terapia de combinação dependerão de uma variedade de fatores, incluindo a via de administração, a afeção a ser tratada, a espécie do paciente, quaisquer interações potenciais entre os ingredientes ativos quando combinados em uma única composição, quaisquer interações entre os ingredientes ativos quando são administrados ao paciente animal, e outros fatores variados conhecidos dos médicos (no contexto de pacientes humanos), veterinários (no contexto de pacientes não humanos), e outros peritos na técnica.

E. KITS

[000180] Este relatório descritivo também é dirigido, em parte, a um kit compreendendo o composto da Fórmula I ou um seu sal. Em algumas modalidades, o kit também compreende um ou mais componentes adicionais, tais como, por exemplo: (a) um aparelho para administrar o composto da Fórmula I ou um seu sal; (b) instruções para administrar o composto da Fórmula I ou um seu sal; (c) um excipiente (por exemplo, um agente de ressuspensão); ou (d) um ingrediente ativo adicional, que podem estar na mesma e/ou em diferentes formas de dosagem relativamente ao composto da Fórmula I ou seu sal. Em algumas modalidades (particularmente quando o kit é destinado a uso na administração do composto da Fórmula I ou seu sal a um paciente animal), o sal é um sal farmaceuticamente aceitável.

F. PREPARAÇÃO DE COMPOSTOS

[000181] Seguidamente são discutidos vários esquemas de síntese para a fabricação de compostos da Fórmula I. Os esquemas são seguidos de exemplos detalhados que ilustram a preparação de uma variedade de compostos da Fórmula I e intermediários para a fabricação de tais compostos. É esperado que um perito na técnica de síntese orgânica, após a leitura da discussão apresentada embaixo (isoladamente ou em combinação com conhecimento geral na área), consiga adaptar e aplicar os métodos para preparar qualquer composto abrangido pela Fórmula I. O conhecimento geral na área inclui, por exemplo:

[000182] Procedimentos convencionais para uso de grupos protetores e exemplos de grupos protetores adequados, que são descritos, por exemplo, em Protective Groups in Organic Synthesis, T.W. Green, P.G.M. Wuts, Wiley-Interscience, Nova Iorque (1999).

[000183] Referências que discutam várias reações de síntese orgânica, incluem manuais de química orgânica, tais como, por exemplo, Advanced Organic Chemistry, March 4a edição, McGraw Hill (1992); e Organic Synthesis, Smith, McGraw Hill, (1994). Também incluem, por exemplo, R.C. Larock, Comprehensive Organic Transformations, 2a edição, Wiley-VCH: Nova Iorque (1999); F.A. Carey; R.J. Sundberg, Advanced Organic Chemistry, 2a edição, Plenum Press: Nova Iorque (1984); L.S. Hegedus, Transition Metals in the Synthesis of Complex Organic Molecules, 2a edição, University Science Books: Mill Valley, CA (1994); L. A. Paquette, Ed., The Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley: Nova Iorque (1994); A.R. Katritzky, O. Meth-Cohn, CW. Rees, Eds., Comprehensive Organic Functional Group Transformations, Pergamon Press: Oxford, RU (1995); G. Wilkinson; F.G A. Stone; E.W. Abel, Editores, Comprehensive Organometallic Chemistry, Pergamon Press: Oxford, RU (1982); B.M. Trost; I. Fleming, Comprehensive Organic Synthesis, Pergamon Press: Oxford, RU (1991); A.R. Katritzky, CW. Rees Editores, Comprehensive Heterocyclic Chemistry, Pergamon Press: Oxford, RU (1984); A.R. Katritzky; CW. Rees, E.F.V. Scriven, Editores, Comprehensive Heterocyclic Chemistry II, Pergamon Press: Oxford, RU (1996); C. Hansen; P.G. Sammes; J.B. Taylor, Editores, Comprehensive Medicinal Chemistry: Pergamon Press: Oxford, RU (1990). Adicionalmente, artigos de revisão recorrentes de metodologia sintética e tópicos relacionados incluem: Organic Reactions, John Wiley: Nova Iorque; Organic Syntheses; John Wiley: Nova Iorque; The Total Synthesis of Natural Products, John Wiley: Nova Iorque; The Organic Chemistry of Drug Synthesis, John Wiley: Nova Iorque; Annual Reports in Organic Synthesis, Academic Press: San Diego CA; e Methoden der Organischen Chemie (Houben-Weyl), Thieme: Estugarda, Alemanha.

[000184] Referências que discutem química heterocíclica incluem, por exemplo, Heterocyclic Chemistry, J.A. Joule, K. Mills, G.F. Smith, 3a edição, Cheapman e Hall, páginas 189-225 (1995); e Heterocyclic Chemistry, T.L. Gilchrist, 2a edição Longman Scientific and Technical, páginas 248-282 (1992).

[000185] Bases de dados de transformações sintéticas, incluindo Chemical Abstracts, que podem ser pesquisadas usando CAS Online ou SciFinder; e Handbuch der Organischen Chemie (Beilstein), que pode ser pesquisada usando, por exemplo, software tal como SpotFire.

[000186] O Esquema 1 embaixo ilustra um protocolo geral para a fabricação de compostos descritos neste relatório descritivo, usando uma via de Ullman ou uma via de aziridina. Esquema 1

[000187] No Esquema 1, Ar é

e R é

[000188] O reagente amino álcool usado no Esquema 1 pode ser preparado usando o Esquema 2 embaixo. Esquema 2

[000189] O reagente de Grignard (ArMgBr) usado no Esquema 2 pode ser obtido comercialmente, ou, se não puder, em geral pode ser preparado a partir do correspondente brometo de arila e Mg e/ou iPrMgCl usando métodos publicados.

[000190] Os reagentes iodo e hidróxi piridona indazol usados no Esquema 1 podem ser preparados usando o Esquema 3A ou 3B embaixo, respectivamente. Esquema 3A

Esquema 3B

[000191] O Esquema 4 embaixo proporciona um protocolo alternativo para a fabricação de compostos descritos neste relatório descritivo. Esquema 4

[000192] Em geral, solventes, temperaturas, pressões, e outras condições reacionais podem ser otimizadas pelo perito na técnica. Materiais de partida estão disponíveis no mercado, são conhecidos da literatura, ou podem ser sintetizados pelo perito na técnica usando métodos de rotina de química orgânica. E técnicas combinatoriais podem ser geralmente usadas para preparar compostos quando, por exemplo, os intermediários possuem grupos adequados para tais técnicas.

G. EXEMPLOS

[000193] Estes Exemplos são proporcionados apenas para propósitos ilustrativos. A partir da discussão acima e destes Exemplos, o perito na técnica pode descobrir as características essenciais da invenção do Requerente, e sem sair do seu espírito e escopo, pode fazer várias alterações e modificações para adaptar o relatório descritivo aos vários usos e condições. Em resultado, este relatório descritivo não é limitado pelos exemplos ilustrativos apresentados embaixo. Exemplos 1-23. Síntese de Compostos Métodos gerais.

[000194] Espectros de RMN foram registrados em um espectrômetro Bruker Avance, Avance II ou Avance III a uma frequência de prótons de 300, 400, 500 ou 600 MHz. Os picos centrais de clorof0rmio-δ (H 7,26 ppm), CD3OD (H 3,30 ppm) ou DMSO-d6 (H 2,49 ppm) foram usados como referências internas.

[000195] Realizaram-se experiências de LC/MS usando um sistema Waters Acquity combinado com um sistema de Q-ToF Massa Waters Xevo ou de UPLC Shimadzu 2010EV em modo ESI. LC foi realizada em duas montagens: 1) coluna BEH C18 (1,7 μm 2,1x50 mm) em combinação com um gradiente (2-95% de B em 5 min) de tampão aquoso 46 mM carbonato de amônio/amônia a pH 10 (A) e MeCN (B) a uma taxa de fluxo de 1,0 mL/min ou em combinação com um gradiente (5-95% de B em 2 min) de água e TFA (0,05%) (A) e CH3CN e TFA (0,05%) a uma taxa de fluxo de 1,0 mL/min (B).

[000196] A pureza óptica, indicada como excesso enantiomérico (% ee), foi determinada por:

[000197] Método A: HPLC quiral usando um cromatógrafo da série Agilent 1100. Sistema equipado com Chiralpak (IB-3, IA-3 ou IC-3) 50x4,6 mm; 3 μm. Como fase móvel foi usado hexano (trietilamina 0,1%)/EtOH (85:15) com uma taxa de fluxo de 1 mL/min. O volume de injeção foi 3 μL e a detecção de compostos foi efetuada por UV a 254 nm.

[000198] Método B: Sistema de SFC quiral equipado com Chiralpak (IC ou AD-H) 150x4,6 mm, 3 μm ou Chiracel (OD-H, OJ-3, OD-3 ) ou Lux 5u Cellulose-3. Como gradientes de eluentes de CO2 (100 g/min, 120 bar, 40°C) (A) e 5-40% MeOH/dietilamina (0,1%), EtOH/dietilamina (0,1%), 20% álcool isopropílico ou 20% álcool isopropílico/NH3 200:1 (B) foram aplicados com uma taxa de fluxo de 4 mL/min. O volume de injeção foi 0,7 μL ou 10 μL e a detecção de compostos foi efetuada por UV a 254 nm ou 220 nm.

[000199] HPLC preparativa foi realizada com um sistema Waters FractionLynx com detecção por MS integrada e equipado com colunas Prep C18 OBD 5 μm 19 x 150 mm da X-Bridge ou Sunfire. Alternativamente usou-se detecção por Gilson GX-281 com UV integrado, equipado com Kromasil C8 10 μm, 20x250 ID ou 50x250 ID mm. Como eluente (acídico) aplicaram-se gradientes de água/MeCN/ácido acético (95/5/0,1) ou água/TFA 0,05% (A) e MeCN/TFA 0,05% (B) ou (básico) MeCN ou MeOH (A) e amônia 0,03% em água ou NH4HCO3 0,03% (B).

[000200] Realizou-se SCF preparativa com um sistema SCF Waters Prep100 com detecção por MS integrada, equipado com Waters Viridis 2-EP ou Phenomenex Luna Hilic, 30 x 250 mm, 5 μm. Como eluente aplicaram-se gradientes de CO2 (100 g/min, 120 bar, 40°C) (A) e MeOH/NH3 (20 mM) ou MeOH (ácido fórmico 5%) ou MeOH (B).

[000201] A menos que afirmado de outro modo, os materiais de partida usados nos exemplos embaixo estavam comercialmente disponíveis ou foram previamente descritos na literatura. Todos os solventes e reagentes comerciais tinham qualidade laboratorial, e foram usados como recebidos, a menos que afirmado de outro modo.

[000202] Todas as temperaturas estão em graus Celsius (°C). Em geral, a menos que afirmado de outro modo, as operações discutidas nos exemplos embaixo foram realizadas à temperatura da sala ou ambiente (18-25°C); a progressão das reações foi monitorada por HPLC, LC-MS ou TLC; foi usado equipamento de vidro laboratorial padrão seco no forno e manipulações de rotina foram conduzidas à temperatura ambiente sob um manto de N2; as evaporações foram realizadas sob pressão reduzida usando um evaporador rotativo; e os produtos foram secos sob pressão reduzida a uma temperatura adequada.

[000203] Os nomes dos compostos exemplificados nesta patente foram gerados usando ChemDraw Ultra 11.0. Este é um programa gerador-de-nomes-químicos que atribui nomes químicos a estruturas desenhadas premindo um botão. Exemplo 1. Preparação de 2,2-difluoro-N-[(1R,2S)-3-metil-1-{[1-(1- metil-6-oxo-1,6-di-hidropiridin-3-il)-1H-indazol-5-il]óxi}-1- fenilbutan-2-il]propanamida.

Etapa A. Preparação de 5-[5-[(terc-butildimetilsilil)óxi]-1H-indazol- 1-il]-1-metil-1,2-di-hidropiridin-2-ona.

[000204] Em um balão de fundo redondo de 4 tubuladuras de 2 L, purgado e mantido com uma atmosfera inerte de N2, colocou-se uma solução de 5-[(terc-butildimetilsilil)óxi]-1H-indazol (805 g, 3,2 mols) em tolueno (8 L), 5-iodo-1-metil-1,2-di-hidropiridin-2-ona (800 g, 3,4 mols) e K3PO4 (1,2 kg, 5,8 mols). Adicionou-se ciclo-hexano-1,2-diamina (63 g, 0,5 mol) seguido da adição de CuI (1,3 g, 6,8 mmols) em vários lotes. A solução resultante foi agitada por uma noite a 102°C. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo, dando origem a 3,0 kg do composto do título na forma de um sólido negro bruto. LC/MS: m/z 356 [M+H]+. Etapa B. Preparação de 5-(5-hidroóxi-1H-indazol-1-il)-1- metilpiridin-2(1H)-ona.

[000205] Em um balão de fundo redondo de 4 tubuladuras de 2 L colocou-se 5-[5-[(terc-butildimetilsilil)óxi]-1H-indazol-1-il]-1-metil-1,2-di- hidropiridin-2-ona (3,0 kg, bruto) e uma solução de HCl (2 L, 24 mols, 36%) em água (2 L) e MeOH (5 L). A solução resultante foi agitada por uma hora a 40°C e então foi evaporada até à secura. O sólido resultante foi lavado com água (4 x 5 L) e acetato de etila (2 x 0,5 L), dando origem a 480 g (61%, duas etapas) do produto do título na forma de um sólido marrom. LC/MS: m/z 242 [M+H]+. 1HRMN (300 MHz, DMSO-d6): δ 3,52 (3H, s),6,61 (1H, m),7,06 (2H, m),7,54 (1H, m), 7,77 (1H, m), 8,19 (2H, m) 9,35 (1H,s). Etapa C. Preparação de ((1R,2S)-1-hidroóxi-3-metil-1-fenilbutan-2- il)carbamato de terc-butila.

[000206] Dissolveu-se 3-metil-1-oxo-1-fenilbutan-2-ilcarbamato de (S)-terc-butila (1,0 kg, 3,5 mols) em tolueno (4 L). Em seguida, adicionou-se 2-propanol (2 L), seguido de tri-isopropoxialumínio (0,145 L, 0,73 mol). A mistura reacional foi aquecida a 54-58°C por uma hora sob pressão reduzida (300-350 mbar) para iniciar a destilação azeotrópica. Após a recolha de 0,75 L de condensado, adicionou-se 2- propanol (2 L), e a mistura reacional foi agitada por uma noite a pressão reduzida, dando origem a 4 L de condensado no total. Adicionou-se tolueno (3 L) a 20°C, seguido de HCl 2 M (2 L) ao longo de 15 min para manter a temperatura menor do que 28°C. As camadas foram separadas (pH da fase aquosa 0-1) e a camada orgânica foi lavada sucessivamente com água (3 L), NaHCO3 4% (2 L) e água (250 mL). O volume da camada orgânica foi reduzido de 6 L a 50°C e 70 mbar para 2,5 L. A mistura resultante foi aquecida para 50°C e adicionou-se heptano (6,5 L) a 47-53°C para manter o material em solução. A temperatura da mistura foi lentamente decrescida para 20°C, foi semeada com os cristais do composto do título a 37°C (as sementes de cristais foram preparadas em um lote anterior produzido pelo mesmo método e então evaporando a mistura reacional até à secura, transformando o resíduo em pasta em heptano, e isolando os cristais por filtração), e deixado repousar por uma noite. O produto foi removido por filtração, lavado com heptano (2 x 1 L) e seco sob vácuo, dando origem a 806 g (81%) do composto do título na forma de um sólido branco. 1HRMN (500 MHz, DMSO-d6): δ 0,81 (dd, 6H), 1,16 (s, 8H), 2,19 (m, 1H), 3,51 (m, 1H), 4,32 (d, 1H), 5,26 (s, 1H), 6,30 (d, 1H), 7,13 - 7,2 (m, 1H), 7,24 (t, 2H), 7,3 - 7,36 (m, 3H). Etapa D. Preparação de sal cloridrato de (1R,2S)-2-amino-3-metil-1- fenilbutan-1-ol.

[000207] A uma solução de HCl em propan-2-ol (5-6 N, 3,1 L, 16 mols) a 20°C adicionou-se ((1R,2S)-1-hidróxi-3-metil-1-fenilbutan-2- il)carbamato de terc-butila (605 g, 2,2 mols) em porções ao longo de 70 minutos seguido da adição de MTBE (2 L) ao longo de 30 minutos. A mistura reacional foi esfriada para 5°C e agitada por 18 horas. O produto foi isolado por filtração e seco, dando origem a 286 g do composto do título na forma de um sal de HCl (61% de rendimento). O licor mãe foi concentrado para 300 mL. Então adicionou-se MTBE (300 mL), e a precipitação resultante foi isolada por filtração, dando origem a mais 84 g do composto do título na forma de um sal de HCl (18% de rendimento). Total 370 g (79%). 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 0,91 (dd, 6H), 1,61 - 1,81 (m, 1H), 3,11 (s, 1H), 4,99 (s, 1H), 6,08 (d, 1H), 7,30 (t, 1H), 7,40 (dt, 4H), 7,97 (s, 2H). Etapa E. Preparação de (2S,3S)-2-isopropil-1-(4-nitrofenilsulfonil)- 3-fenilaziridina.

[000208] Cloridrato de (1R,2S)-2-amino-3-metil-1-fenilbutan-1-ol (430 g, 2,0 mols) foi misturado com DCM (5 L) a 20°C. Então adicionou-se cloreto de 4-nitrobenzenossulfonila (460 g, 2,0 mols) ao longo de 5 min. Em seguida, a mistura foi esfriada para -27°C. Adicionou-se lentamente trietilamina (1,0 kg, 10 mols) mantendo a temperatura a -18°C. A mistura reacional foi esfriada para -30°C, e adicionou-se lentamente cloreto de metanossulfonila (460 g, 4,0 mols) mantendo a temperatura a -25°C. A mistura reacional foi então agitada a 0°C por 16 h antes da adição de trietilamina (40 mL, 0,3 mol; 20 mL, 0,14 mol e 10 mL, 0,074 mol) a 0°C em porções ao longo de 4 horas. Subsequentemente adicionou-se água (5 L) a 20°C, e as camadas resultantes foram separadas. A camada orgânica foi lavada com água (5 L) e o volume foi reduzido para 1 L sob vácuo. Adicionou-se MTBE (1,5 L), e a mistura foi agitada em um evaporador rotativo a 20°C por uma noite e foi filtrada, dando origem a 500 g (70%) do produto do título na forma de um sólido. 1HRMN (400 MHz, CDCl3): δ 1,12 (d, 3H), 1,25 (d, 3H), 2,23 (ddt, 1H), 2,89 (dd, 1H), 3,84 (d, 1H), 7,08 - 7,2 (m, 1H), 7,22 - 7,35 (m, 4H), 8,01 - 8,13 (m, 2H), 8,22 - 8,35 (m, 2H) Etapa F. Preparação de N-((1R,2S)-3-metil-1-(1-(1-metil-6-oxo-1,6- di-hidropiridin-3-il)-1H-indazol-5-ilóxi)-1-fenilbutan-2-il)-4- nitrobenzenossulfonamida.

[000209] (2S,3S)-2-Isopropil-1-(4-nitrofenilsulfonil)-3-fenilaziridina (490 g, 1,3 mol) foi misturado com 5-(5-hidróxi-1H-indazol-1-il)-1- metilpiridin-2(1H)-ona (360 g, 1,4 mol) em acetonitrila (5 L) a 20°C. Adicionou-se carbonato de césio (850 g, 2,6 mols) em porções ao longo de 5 min. A mistura reacional foi então agitada a 50°C por uma noite. Adicionou-se água (5 L) a 20°C, e a mistura resultante foi extraída com 2-metiltetra-hidrofurano (5 L e 2,5 L). A camada orgânica combinada foi lavada sucessivamente com HCl 0,5 M (5 L), água (3 x 5 L) e salmoura (5 L). A camada orgânica remanescente foi concentrada formando um óleo espesso, e então adicionou-se MTBE (2 L). O precipitado resultante foi filtrado, dando origem a 780 g (pureza 71% p/p) do produto do título bruto na forma de um sólido amarelo, que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional. 1HRMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 0,93 (dd, 6H), 2,01 - 2,19 (m, 1H), 3,50 (s, 3H), 3,74 (s, 1H), 5,00 (d, 1H), 6,54 (d, 1H), 6,78 (d, 1H), 6,95 - 7,15 (m, 4H), 7,23 (d, 2H), 7,49 (d, 1H), 7,69 (dd, 1H), 7,74 (d, 2H), 8,00 (s, 1H), 8,08 (d, 2H), 8,13 (d, 2H). Etapa G. Preparação de 2,2-difluoro-N-[(1R,2S)-3-metil-1-{[1-(1- metil-6-oxo-1,6-di-hidropiridin-3-il)-1H-indazol-5-il]óxi}-1- fenilbutan-2-il]propanamida.

[000210] N-((1R,2S)-3-metil-1-(1-(1-metil-6-oxo-1,6-di-hidropiridin-3- il)-1H-indazol-5-ilóxi)-1-fenilbutan-2-il)-4-nitrobenzenossulfonamida (780 g, 71% p/p) foi misturado com DMF (4 L). Então adicionou-se DBU (860 g, 5,6 mols) a 20°C ao longo de 10 min. Adicionou-se lentamente ácido 2-mercaptoacético (170 g, 1,9 mol) ao longo de 30 min, mantendo a temperatura a 20°C. Após uma hora, adicionou-se 2,2- difluoropropanoato de etila (635 g, 4,60 mols) ao longo de 10 min a 20°C. A mistura reacional foi agitada por 18 horas. Subsequentemente, adicionou-se mais 2,2-difluoropropanoato de etila (254 g, 1,8 mol), e a mistura reacional foi agitada por mais 4 h a 20°C. Então adicionou-se lentamente água (5 L) ao longo de 40 min, mantendo a temperatura a 20°C. A camada aquosa foi extraída com acetato de isopropila (4 L e 2 x 2 L). A camada orgânica combinada foi lavada com HCl 0,5 M (4 L) e salmoura (2 L). A camada orgânica foi então combinada com a camada orgânica de uma reação paralela partindo de 96 g de N-((1R,2S)-3-metil- 1-((1-(1-metil-6-oxo-1,6-di-hidropiridin-3-il)-1H-indazol-5-il)óxi)-1- fenilbutan-2-il)-4-nitrobenzenossulfonamida, e foi concentrada para aproximadamente 1,5 L. A solução marrom resultante foi filtrada. O filtro foi lavado duas vezes com acetato de isopropila (2 x 0,5 L). O filtrado foi evaporado até se formar um sólido. O sólido foi então co-evaporado com etanol 99,5% (1 L), dando origem a 493 g (77%, duas etapas) de um sólido amorfo.

[000211] Dissolveu-se o sólido (464 g, 0,94 mol) em etanol/água 2:1 (3,7 L) a 50°C. A mistura reacional foi então semeada com cristais () do composto do título (0,5 g) a 47°C, e formou-se uma mistura ligeiramente opaca. A mistura foi mantida a essa temperatura por uma hora. Em seguida, a temperatura foi decrescida para 20°C ao longo de 7 horas, e foi mantida a 20°C por 40 h. O sólido foi removido por filtração, lavado com etanol/água 1:2 (0,8 L) frio (5°C), e seco em vácuo a 37°C por uma noite, dando origem a 356 g (0,70 mol, 74%, 99,9% ee) do composto do título na forma de um mono-hidrato. LC/MS: m/z 495 [M+H]+. 1H RMN (600 MHz, DMSO-d6) δ 0,91 (dd, 6H), 1,38 (t, 3H), 2,42 (m, 1H), 3,50 (s, 3H), 4,21 (m, 1H), 5,29 (d, 1H), 6,53 (d, 1H), 7,09 (d, 1H), 7,13 (dd, 1H), 7,22 (t, 1H), 7,29 (t, 2H), 7,47 (d, 2H), 7,56 (d, 1H), 7,70 (dd, 1H), 8,13 (d, 1H), 8,16 (d, 1H), 8,27 (d, 1H).

[000212] As sementes de cristais podem ser preparadas a partir do composto amorfo preparado de acordo com o Exemplo 2 usando ácido 2,2-difluoropropanoico, seguido de purificação em HPLC. O composto (401 mg) foi pesado em um frasco de vidro. Adicionou-se etanol (0,4 mL), e o frasco foi agitado e aquecido para 40°C, dando origem a uma solução límpida, ligeiramente amarela. Adicionou-se etanol/água (0,4 mL, 50/50% vol/vol). Começou a ocorrer cristalização em 5 min, e, passados 10 min, formou-se uma suspensão branca espessa. Os cristais foram recolhidos por filtração. Exemplo 2 Preparação de 2,2,2-trifluoro-N-[(1R,2S)-3-metil-1-{[1-(1- metil-6-oxo-1,6-di-hidropiridin-3-il)-1H-indazol-5-il]óxi}-1- fenilbutan-2-il]acetamida.

Etapa A. Preparação de 5-iodo-1-(6-metoxipiridin-3-il)-1H-indazol.

[000213] Uma mistura de acetato de cobre (II) (82 mg, 0,45 mmol), 5- iodo-1H-indazol (100 mg, 0,41 mmol), ácido 6-metoxipiridin-3-il borônico (91 mg, 0,59 mmol) e piridina (133 μL, 1,64 mmol) em DCM (3,2 mL) à temperatura ambiente, aberta ao ar (frasco não selado), foi agitada por uma noite. A mistura reacional foi filtrada e evaporada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia eluindo com acetato de etila/éter de petróleo (1:8), dando origem a 114 mg (86%) do composto do título na forma de um sólido amarelo. LCMS: m/z 352 [M+H]+. 1HRMN (300 MHz; DMSO-d6): δ 3,94 (3H, s), 7,04 (1H, d), 7,59 (1H, d), 7,73 (1H, d), 8,06 (1H, dd), 8,32-8,34 (2H, m), 8,55 (1H, d). Etapa B. Preparação de 5-(5-iodo-1H-indazol-1-il)piridin-2(1H)-ona.

[000214] A uma mistura agitada de 5-iodo-1-(6-metoxipiridin-3-il)-1H- indazol (6,4 g, 18 mmols) em HCl 2 M (31 mL, 62 mmols) e etanol (51 mL) adicionou-se HCl concentrado (15 mL, 180 mmols). A solução resultante refluiu por 24 horas. A mistura foi subsequentemente esfriada, e o precipitado resultante foi removido por filtração, lavado com água e seco em vácuo a 40°C por 3,5 h, dando origem ao produto do título 5,9 g (95%) na forma de um sólido branco. LCMS: m/z 338 [M+H]+. 1HRMN (300 MHz; DMSO-d6): δ 6,48 (1H, d), 7,42 (2H, d), 7,60-7,75 (2H, m), 7,81 (1H, d), 8,23 (1H, d), 11,92 (1H, l). Etapa C. Preparação de 5-(5-iodo-1H-indazol-1-il)-1-metilpiridin- 2(1H)-ona.

[000215] A uma mistura de 5-(5-iodo-1H-indazol-1-il)piridin-2(1H)-ona (1,6 g, 4,7 mmols, 1,0 equiv) e K2CO3 (2 g, 14 mmols, 3,0 equiv) em DMF (50 mL) adicionou-se MeI (0,9 mL, 14 mmols, 3,0 equiv) à temperatura ambiente sob N2. A mistura foi agitada por 4 horas à temperatura ambiente e então foi submetida a partição entre DCM e água. A camada orgânica foi separada, lavada com água e purificada por cromatografia em coluna eluindo com MeOH / DCM (1/20), dando origem ao produto do título bruto 1,7 g na forma de um sólido branco. LCMS: m/z 352 [M+H]+. 1HRMN (300 MHz, CDCl3): δ 3,64 (3H, s), 6,72 (1H, d), 7,23 (1H, d), 7,65-7,70 (3H, m), 8,05 (1H, s), 8,15(1H, s). Etapa D. Preparação de 5-(5-((1R,2S)-2-amino-3-metil-1- fenilbutóxi)-1H-indazol-1-il)-1-metilpiridin-2(1H)-ona.

[000216] Uma mistura de (1R,2S)-2-amino-3-metil-1-fenilbutan-1-ol como base livre (Exemplo 1/ etapa D) (0,96 g, 5,3 mmols), 5-(5-iodo-1H- indazol-1-il)-1-metilpiridin-2(1H)-ona (1,9 g, 5,4 mmols), iodeto de cobre(I) (0,51 g, 2,7 mmols), ácido 2-(dimetilamino)acético (0,55 g, 5,3 mmols) e carbonato de césio (5,2 g, 16 mmols) em butironitrila (30 mL) foi agitada a 130°C por 20 horas. Em seguida, a mistura reacional foi esfriada para a temperatura ambiente e concentrada, e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em sílica-gel eluindo com DCM/MeOH (20/1), dando origem a 0,5 g (23%) do composto do título bruto. LC/MS: m/z 403 [M+H]+ Etapa E. Preparação de 2,2,2-trifluoro-N-[(1R,2S)-3-metil-1-{[1-(1- metil-6-oxo-1,6-di-hidropiridin-3-il)-1H-indazol-5-il]óxi}-1- fenilbutan-2-il]acetamida.

[000217] Uma mistura de 5-(5-((1R,2S)-2-amino-3-metil-1-fenilbutóxi)- 1H-indazol-1-il)-1-metilpiridin-2(1H)-ona (850 mg, 1,8 mmol), TFA (250 mg, 2,2 mmols), HATU (1021 mg, 2,7 mmols) e DIPEA (0,94 mL, 5,4 mmols) em DMF (7 mL) foi agitada à temperatura ambiente por várias horas. Em seguida, a mistura reacional foi derramada em água e extraída com DCM (3 x 20 mL), foi seca em Na2SO4 e concentrada. O resíduo foi purificado em sílica-gel por cromatografia em coluna eluindo com DCM/MeOH (10/1), dando origem a 500 mg (56%) do composto do título na forma de um sólido branco. LCMS m/z 499 [M+H]+. 1HRMN (300MHz, CDCl3): δ 0,90 - 1,05 (6H, m), 1,98 - 2,08 (1H, m), 3,59 (3H, s), 4,38 - 4,45 (1H, m), 5,33 (1H, d), 6,19 (1H, d), 6,68 (1H, d), 6,93 (1H, d), 7,11 (1H, dd), 7,30 - 7,45 (6H, m), 7,58 - 7,68 (2H, m), 7,92 (1H, s). Exemplo 3. N-[(1R,2S)-1-(3,5-difluorofenil)-3-metil-1-{[1-(1-metil-6- oxo-1,6-di-hidropiridin-3-il)-1H-indazol-5-il]óxi}butan-2-il]-2,2- difluoropropanamida.

[000218] O composto do título foi preparado seguindo o procedimento para o Exemplo 2 usando ácido 2,2-difluoropropanoico, dando origem a 58 mg (40%) do produto. O reagente de Grignard no Esquema 2 foi gerado de acordo com o procedimento seguinte: Magnésio (2,0 g, 83 mmols), 3,5-difluorobromobenzeno (1,45 g, 7,6 mmols) e iodo (I2, cat.) foram misturados em THF (2 mL). A mistura reacional foi aquecida para 60°C. Após o desaparecimento da cor vermelha, adicionou-se gota a gota mais 3,5-difluorobromobenzeno (13 g, 67 mmols) em THF (150 mL), mantendo a temperatura a 50°C. A mistura reacional refluiu então por 3 horas, e depois foi esfriada para a temperatura ambiente. A solução resultante (~0,5 M em THF) foi usada sem purificação. LC/MS: m/z 531 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz; CDCl3): δ 0,99-1,05 (m, 6H), 1,72 (t, 3H), 2,09-2,20 (m, 1H), 3,66 (s, 3H), 4,30-4,37(m, 1H), 5,19 (d, 1H), 6,33(d, 1H), 6,71-6,78 (m, 2H), 6,91-6,99 (m, 3H), 7,11 (d, 1H), 7,37(d, 1H), 7,60 (l, 2H), 7,97(s, 1H). Exemplo 4. Preparação de N-[(1R,2S)-1-(3,5-difluorofenil)-3-metil-1- {[1-(1-metil-6-oxo-1,6-di-hidropiridin-3-il)-1H-indazol-5-il]óxi}butan- 2-il]-2,2-difluoropropanamida.

[000219] O composto do título foi preparado seguindo o procedimento para o Exemplo 2 usando TFA, dando origem a 40 mg (33%) de produto. O reagente de Grignard no Esquema 2 foi gerado de acordo com o procedimento seguinte: Magnésio (2,0 g, 83 mmols), 3,5- difluorobromobenzeno (1,45 g, 7,6 mmols) e iodo (I2, cat.) foram misturados em THF (2 mL). A mistura resultante foi aquecida para 60°C. Após o desaparecimento da cor vermelha, adicionou-se gota a gota mais 3,5-difluorobromobenzeno (13 g, 67 mmols) em THF (150 mL), mantendo a temperatura a 50°C. A mistura reacional refluiu por 3 h, e então foi esfriada para temperatura ambiente. A solução (~0,5 M em THF) foi usada sem purificação. LC/MS: m/z 535 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz; CDCl3): δ1,01-1,07 (m, 6H), 2,07-2,18 (m, 1H), 3,63 (s, 3H), 4,344,40 (m, 1H), 5,26 (d, 1H), 6,27 (d, 1H), 6,73-6,81 (m, 2H), 6,91-6,98 (m, 3H), 7,10 (d, 1H), 7,35 (d, 1H), 7,60-7,65 (m, 2H), 7,97 (s, 1H). Exemplo 5. Preparação de N-[(1R,2S)-1-(3-clorofenil)-3-metil-1-{[1- (1-metil-6-oxo-1,6-di-hidropiridin-3-il)-1H-indazol-5-il]óxi}butan-2- il]-2,2-difluoropropanamida.

[000220] O composto do título foi preparado seguindo o procedimento para o Exemplo 2 usando ácido 2,2-difluoropropanoico, dando origem a 62 mg (47%) de produto. LC/MS: m/z 529/531 3:1 [M+H]+. 1HRMN (300 MHz; CDCl3): δ 0,99-1,05 (m, 6H), 1,69 (t, 3H), 2,11-2,17 (m, 1H), 3,66 (s, 3H), 4,32-4,39 (m, 1H), 5,19 (d, 1H), 6,30 (d, 1H), 6,73 (d, 1H), 6,94 (d, 1H), 7,14 (d, 1H), 7,28-7,39 (m, 5H), 7,62-7,66 (m, 2H), 7,95 (s, 1H). Exemplo 6. Preparação de N-[(1R,2S)-1-(3-clorofenil)-3-metil-1-{[1- (1-metil-6-oxo-1,6-di-hidropiridin-3-il)-1H-indazol-5-il]óxi}butan-2- il]-2,2,2-trifluoroacetamida.

[000221] O composto do título foi preparado seguindo o procedimento para o Exemplo 2 usando TFA, dando origem a 55 mg (68%) de produto. LC/MS: m/z 533/535 3:1 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz; CDCl3): δ1,04 (t, 6H), 2,03-2,07 (m, 1H), 3,64 (s, 3H), 4,35-4,41 (m, 1H), 5,27 (d, 1H), 6,23 (d, 1H), 6,79 (d, 1H), 6,94 (d, 1H), 7,10 (d, 1H), 7,28-7,39 (m, 5H), 7,60-7,69 (m, 2H), 7,96 (s, 1H). Exemplo 7. Preparação de N-[(1R,2S)-1-(4-clorofenil)-3-metil-1-{[1- (1-metil-6-oxo-1,6-di-hidropiridin-3-il)-1H-indazol-5-il]óxi}butan-2- il]-2,2-difluoropropanamida.

[000222] O composto do título foi preparado seguindo o procedimento para o Exemplo 2 usando ácido 2,2-difluoropropanoico, dando origem a 60 mg (33%) de produto. LCMS: m/z 529/531 3:1 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ 1,01 (m, 6H), 1,70 (t, 3H), 2,11 (m, 1H), 3,62 (s, 3H), 4,35 (m, 1H), 5,22 (d, 1H), 6,30 (d, 1H), 6,70 (m, 1H), 6,91(s, 1H), 7,10 (m, 1H), 7,35 (m, 5H), 7,63 (m, 2H), 7,95 (s, 1H). Exemplo 8. Preparação de N-[(1R,2S)-1-(3,5-diclorofenil)-3-metil-1- {[1-(1-metil-6-oxo-1,6-di-hidropiridin-3-il)-1H-indazol-5-il]óxi}butan- 2-il]-2,2-difluoropropanamida.

[000223] O composto do título foi preparado seguindo o procedimento para o Exemplo 2 usando ácido 2,2-difluoropropanoico, dando origem a 50 mg (28%) de produto. LCMS: m/z 563 [M+H]+. 1HRMN (300MHz, CD3OD) δ 0,89-0,92 (m, 6H), 1,46-1,59 (t, 3H), 2,39 (m, 1H), 3,33 (s, 3H), 4,10-4,17 (m, 1H), 5,30-5,33 (d, 1H), 6,53-6,56 (d, 1H), 7,13-7,19 (m, 2H), 7,50-7,74 (m, 5H), 8,18-8,19 (m, 2H),8,34-8,37 (m, 1H). Exemplo 9. Preparação de 2,2-difluoro-N-{(1R,2S)-3-metil-1-{[1-(1- metil-6-oxo-1,6-di-hidropiridin-3-il)-1H-indazol-5-il]óxi}-1-[4- (trifluorometóxi)fenil]butan-2-il}propanamida.

[000224] O composto do título foi preparado seguindo o procedimento para o Exemplo 2 usando ácido 2,2-difluoropropanoico, dando origem a 52 mg (26%) de produto. O reagente de Grignard no Esquema 2 foi gerado de acordo com o procedimento seguinte: Adicionaram-se magnésio (0,29 g, 12 mmols) e iodo (I2, cat.) a um balão reacional, seguido de adição gota a gotade uma solução de 1-bromo-4- (trifluorometóxi)benzeno (2,4 g, 10 mmols) em THF (10 mL). A mistura reacional refluiu por uma hora, e então foi esfriada para a temperatura ambiente. A solução resultante (~1 M em THF) foi usada sem purificação. LCMS: m/z 579 [M+H]+. 1H-RMN (300 MHz; CD3OD): δ 1,02-1,05 (6H, m), 1,31-1,50 (3H, t), 2,46-2,53 (1H, m), 3,66 (3H, s), 4,36-4,41 (1H, m), 5,31-5,34 (1H, d), 6,70-6,73 (1H, d), 7,17-7,25 (4H, m), 7,51-7,61 (3H, m), 7,81-7,86 (1H, m), 8,06-8,08 (2H, m). Exemplo 10. Preparação de 2,2-difluoro-N-{(1R,2S)-3-metil-1-{[1-(1- metil-6-oxo-1,6-di-hidropiridin-3-il)-1H-indazol-5-il]óxi}-1-[4- (trifluorometil)fenil]butan-2-il}propanamida.

[000225] O composto do título foi preparado seguindo o procedimento para o Exemplo 2 usando ácido 2,2-difluoropropanoico, dando origem a 65 mg (26%) de produto. LCMS: m/z 563 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz; CDCl3): δ 1,01-1,07 (6H, m), 1,44-1,73 (3H, t), 2,10-2,18 (1H, m), 3,63 (3H, s), 4,38-4,45 (1H, m), 5,30-5,32 (1H, d), 6,32-6,35 (1H, d), 6,716,75 (1H, m), 6,93 (1H, s), 7,10-7,14 (1H, m), 7,34-7,37 (1H, m), 7,547,65 (6H, m), 7,94 (1H, s). Exemplo 11. Preparação de N-[(1R,2S)-1-[4-(difluorometóxi)fenil]- 3-metil-1-{[1-(1-metil-6-oxo-1,6-di-hidropiridin-3-il)-1H-indazol-5- il]óxi}butan-2-il]-2,2-difluoropropanamida.

Etapa A. Preparação de 1-(4-(terc-butildimetilsililóxi)fenil)-3-metil- 1-oxobutan-2-ilcarbamato de (S)-terc-butila.

[000226] A uma suspensão de Mg (2,0 g, 82 mmols) em tetra- hidrofurano seco (5 mL) adicionou-se uma solução de (4- bromofenóxi)(terc-butil)dimetilsilano (20 g, 70 mmols) em tetra- hidrofurano (10 mL). A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente por uma hora e então foi adicionada a uma solução de 1- (metoxi(metil)amino)-3-metil-1-oxobutan-2-ilcarbamato de (S)-terc- butila (6,0 g, 24 mmols) em tetra-hidrofurano (20 mL) a 0°C. Após agitação por uma noite à temperatura ambiente, a reação foi interrompida com NH4Cl aquoso (200 mL). A mistura foi então extraída com acetato de etila (3 x 50 mL), e a camada orgânica combinada foi lavada com salmoura, seca com Na2SO4 e concentrada. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna eluindo com acetato de etila/éter de petróleo 1:5, dando origem a 3,5 g (36%) do composto do título na forma de um sólido branco. LCMS: m/z 408 [M+H]+. Etapa B. Preparação de (1R,2S)-1-(4-(terc-butildimetilsililóxi)fenil)- 1-hidróxi-3-metilbutan-2-ilcarbamato de terc-butila.

[000227] Dissolveu-se 1-(4-(terc-butildimetilsililóxi)fenil)-3-metil-1- oxobutan-2-ilcarbamato de (S)-terc-butila (3,5 g, 8,6 mmols) em tolueno (21 mL), adicionaram-se propan-2-ol (5,7 g, 95 mmols) e triisopropoxialumínio (3,2 g, 16 mmols). A mistura reacional foi então aquecida a 50°C por 18 horas. Em seguida, a mistura reacional foi derramada em NH4Cl aquoso (200 mL) e extraída com acetato de etila (2 x 100 mL). A camada orgânica combinada foi lavada com salmoura, foi seca em Na2SO4 e concentrada, e o resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna, eluindo com acetato de etila/éter de petróleo (1/5), dando origem a 3,0 g (85%) do produto do título na forma de um sólido branco. LCMS: m/z 336 [M+H-tBuOH]+ Etapa C. Preparação de (1R,2S)-1-hidróxi-1-(4-hidroxifenil)-3- metilbutan-2-ilcarbamato de terc-butila.

[000228] A uma solução de (1R,2S)-1-(4-(terc-butildimetilsililóxi)fenil)- 1-hidróxi-3-metilbutan-2-ilcarbamato de terc-butila (3,0 g, 7,0 mmols) em tetra-hidrofurano (7 mL) adicionou-se TBAF (22 mL, 22 mmols). A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente por uma noite, foi evaporada e diluída com NH4Cl aquoso (200 mL), e extraída com acetato de etila (2 x 100 mL). A camada orgânica combinada foi lavada com salmoura, foi seca em Na2SO4 e concentrada. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna eluindo com acetato de etila/éter de petróleo (1/3), dando origem a 2,0 g (96%) do produto do título na forma de um sólido branco. LCMS: m/z 294 [M-H]- Etapa D. Preparação de (1R,2S)-1-(4-(difluorometóxi)fenil)-1- hidróxi-3-metilbutan-2-ilcarbamato de terc-butila.

[000229] A uma solução de 18-coroa-6 (0,2 g) e NaOH (1,8 g, 44 mmols) em H2O (5 mL) adicionou-se uma solução de (1R,2S)-1-hidróxi- 1-(4-hidroxifenil)-3-metilbutan-2-ilcarbamato de terc-butila (2 g, 6,8 mmols) em iPrOH (5 mL). A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente por 0,5 h e então foi aquecida para 65°C. Fez-se borbulhar clorodifluorometano (gasoso) na mistura reacional por 6 h a 65°C. A mistura reacional foi então esfriada para a temperatura ambiente, foi derramada em NH4Cl aquoso (200 mL), e extraída com acetato de etila (3 x 50 mL). A camada orgânica combinada foi lavada com salmoura, seca com Na2SO4 e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna eluindo com acetato de etila/éter de petróleo (1/5), dando origem a 1,0 g (43%) do produto do título na forma de um sólido branco. LCMS: m/z 346 [M-H]+ Etapa E. Preparação de (1R,2S)-2-amino-1-(4-(difluorometóxi)fenil)- 3-metilbutan-1-ol.

[000230] A uma solução de (1R,2S)-1-(4-(difluorometóxi)fenil)-1- hidróxi-3-metilbutan-2-ilcarbamato de terc-butila (1 g, 2,8 mmols) em DCM (3 mL) adicionou-se TFA (3 mL). A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente por 3 horas. A solução foi então foi evaporada, e o resíduo foi diluído com NaHCO3 aquoso (100 mL) e extraído com DCM/MeOH (10/1) (3 x 50 mL). A camada orgânica combinada foi seca em NaSO4, e concentrada, dando origem a 0,6 g (84%) do produto do título bruto na forma de um sólido branco que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional. LCMS: m/z 246 [M+H]+ Etapa F. Preparação de N-[(1R,2S)-1-[4-(difluorometóxi)fenil]-3- metil-1-{[1-(1-metil-6-oxo-1,6-di-hidropiridin-3-il)-1H-indazol-5- il]óxi}butan-2-il]-2,2-difluoropropanamida.

[000231] O composto do título foi preparado seguindo o procedimento para o Exemplo 2 usando ácido 2,2-difluoropropanoico, dando origem a 50 mg (34%) do produto. LCMS: m/z 561 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz; CD3OD) δ 1,01-1,04 (6H, m), 1,40-1,52 (3H, t), 2,46-2,52 (1H, m), 3,66 (3H, s), 4,36-4,40 (1H, m), 5,28-5,31 (1H, d), 6,67 (1H, t) 6,70-6,73 (1H, d), 6,78 (1H, t), 7,16-7,22 (4H, m), 7,51-7,54 (3H, m), 7,81-7,85 (1H, m), 8,04-8,07 (2H, m). Exemplo 12. Preparação de 2,2-difluoro-N-[(1R,2S)-3-metil-1-{[6- metil-1-(1-metil-6-oxo-1,6-di-hidropiridin-3-il)-1H-indazol-5-il]óxi}-1- fenilbutan-2-il]propanamida.

Etapa A. Preparação de 5-iodo-1-(6-metoxipiridin-3-il)-6-metil-1H- indazol.

[000232] Adicionou-se piridina (0,38 mL, 4,6 mmols) a 5-iodo-6-metil- 1H-indazol (300 mg, 1,16 mmol), ácido (6-metoxipiridin-3-il)borônico (270 mg, 1,7 mmol) e acetato de cobre (II) (210 mg, 1,2 mmol) em DCM (10 mL). A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente sob ar por uma noite e então foi concentrada sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia em sílica-gel eluindo com acetato de etila/éter de petróleo 5:95, dando origem a 340 mg (80%) do composto do título na forma de um óleo amarelo. LCMS: m/z 366 [M+H]+. Etapa B. Preparação de 5-(5-iodo-6-metil-1H-indazol-1-il)piridin- 2(1H)-ona.

[000233] Adicionou-se HCl (4,7 mL, 47 mmols) a 5-iodo-1-(6- metoxipiridin-3-il)-6-metil-1H-indazol (340 mg, 0,93 mmol) em EtOH (5 mL). A mistura resultante foi agitada a 80°C por uma noite e filtrada, dando origem a 260 mg (80%) do composto do título na forma de um sólido amarelo que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional. LCMS: m/z 352 [M+H]+ Etapa C. Preparação de 5-(5-iodo-6-metil-1H-indazol-1-il)-1- metilpiridin-2(1H)-ona.

[000234] Adicionou-se gota a gotaiodeto de metila (0,14 mL, 2,2 mmols) a uma mistura de 5-(5-iodo-6-metil-1H-indazol-1-il)piridin-2-ol (260 mg, 0,74 mmol) e K2CO3 (360 mg, 2,6 mmols) em DMF (5 mL) a 0°C. A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente por uma noite, foi diluída com acetato de etila (50 mL) e lavada com água (50 mL) e salmoura (50 mL). A camada orgânica foi seca em Na2SO4, foi filtrada e evaporada, dando origem a 200 mg (74%) do composto do título na forma de um sólido marrom que foi usado na reação seguinte sem purificação adicional. LC/MS: m/z 366 [M+H]+ Etapa D. Preparação de 2,2-difluoro-N-[(1R,2S)-3-metil-1-{[6-metil- 1-(1-metil-6-oxo-1,6-di-hidropiridin-3-il)-1H-indazol-5-il]óxi}-1- fenilbutan-2-il]propanamida.

[000235] O composto do título foi preparado seguindo o procedimento para o Exemplo 2 usando 5-(5-iodo-6-metil-1H-indazol-1-il)-1- metilpiridin-2(1H)-ona na etapa D e ácido 2,2-difluoropropanoico na etapa E, dando origem a 50 mg (30%) de produto. LCMS: m/z 509 [M+H]+. 1H RMN (300MHz, CD3OD, ppm): δ 1,00 (m, 6H), 1,45 (t, 3H), 2,45 (m, 4H), 3,60 (s, 3H), 4,42 (m, 1H), 5,36 (d, 1H), 6,65 (d, 1H), 7,00 (s, 1H), 7,30(m, 4H), 7,50 (d, 2H), 7,75 (m, 1H), 7,95 (s, 1H) , 8,00 (s l, 1H). Exemplo 13. Preparação de N-[(1R,2S)-1-(4-clorofenil)-3-metil-1-{[1- (1-metil-6-oxo-1,6-di-hidropiridin-3-il)-1H-indazol-5-il]óxi}butan-2- il]-2,2,2-trifluoroacetamida.

Etapa A. 5-(5-((1R,2S)-2-amino-1-(4-clorofenil)-3-metilbutóxi)-1H- indazol-1-il)-1-metilpiridin-2(1H)-ona.

[000236] O composto do título foi preparado seguindo o procedimento para o Exemplo 2. Etapa B. Preparação de N-[(1R,2S)-1-(4-clorofenil)-3-metil-1-{[1-(1- metil-6-oxo-1,6-di-hidropiridin-3-il)-1H-indazol-5-il]óxi}butan-2-il]- 2,2,2-trifluoroacetamida.

[000237] Em um balão de fundo redondo de 50 mL colocaram-se 5-(5- ((1R,2S)-2-amino-1-(4-clorofenil)-3-metilbutóxi)-1H-indazol-1-il)-1- metilpiridin-2(1H)-ona (150 mg, 0,34 mmol, 1,00 equiv), DCM (10 mL), e TEA (104 mg, 1,03 mmol, 3,00 equiv). Tal foi seguido da adição de 2,2,2-trifluoroacetato de trifluoroacetila (108 mg, 0,51 mmol, 1,50 equiv) gota a gota com agitação a 0°C. A solução resultante foi agitada por duas horas a 0°C. A mistura foi então lavada com H2O. Em seguida, a mistura foi seca em sulfato de sódio anidro e concentrada sob vácuo. O resíduo resultante foi aplicado em uma coluna de sílica-gel com DCM/MeOH (50:1). Tal originou 98 mg (41%) do composto do título na forma de um sólido amarelo claro. LC/MS: m/z 533/535 3:1 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz; CDCl3): δ 1,02 (m, 6H), 2,05 (m, 1H), 3,62 (s, 3H), 4,35 (m, 1H), 5,30 (d, 1H), 6,24 (d, 1H), 6,74 (d, 1H), 6,92(s, 1H) , 7,10 (d, 1H), 7,35 (m, 5H), 7,65 (m, 2H), 7,94 (s, 1H). Exemplo 14. Preparação de N-[(1R,2S)-1-(3,5-diclorofenil)-3-metil- 1-{[1-(1-metil-6-oxo-1,6-di-hidropiridin-3-il)-1H-indazol-5- il]óxi}butan-2-il]-2,2,2-trifluoroacetamida.

[000238] O composto do título foi preparado seguindo o procedimento para o Exemplo 13, dando origem a 50 mg (28%) de produto. LC/MS: m/z 567 [M+H]+. 1HRMN (300MHz, CD3OD): δ 0,90-0,96 (m, 6H), 2,39 (m, 1H), 3,50 (s, 3H), 4,15-4,16 (m, 1H), 5,31-5,34 (d, 1H), 6,53-6,56 (d, 1H), 7,15-7,19 (m, 2H), 7,51-7,74 (m, 5H), 8,17-8,19 (m, 2H), 9,10-9,13 (m, 1H). Exemplo 15. Preparação de 2,2,2-trifluoro-N-{(1R,2S)-3-metil-1-{[1- (1-metil-6-oxo-1,6-di-hidropiridin-3-il)-1H-indazol-5-il]óxi}-1-[4- (trifluorometil)fenil]butan-2-il}acetamida.

[000239] O composto do título foi preparado seguindo o procedimento para o Exemplo 13, dando origem a 60 mg (24%) de produto. LC/MS: m/z 567 [M+H]+. 1HRMN (300 MHz; CD3OD): δ 1,01-1,08 (6H, m), 2,02-2,13 (1H, m), 3,63 (3H, s), 4,40-4,47 (1H, m), 5,38-5,40 (1H, d), 6,306,33 (1H, d), 6,72-6,76 (1H, dd), 6,92 (1H, s), 7,10-7,14 (1H, m), 7,357,38 (1H, m), 7,53-7,67 (6H, m), 7,95 (1H, s). Exemplo 16. Preparação de N-[(1R,2S)-1-[4-(difluorometóxi)fenil]- 3-metil-1-{[1-(1-metil-6-oxo-1,6-di-hidropiridin-3-il)-1H-indazol-5- il]óxi}butan-2-il]-2,2,2-trifluoroacetamida.

[000240] O composto do título foi preparado seguindo o procedimento para o Exemplo 13, dando origem a 50 mg (26%) de produto. O amino álcool usado na etapa 7 foi preparado como descrito no Exemplo 14. LC/MS: m/z 565 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz; CD3OD) δ 0,99-1,04 (6H, m), 2,43-2,49 (1H, m), 3,63 (3H, s), 4,33-4,38 (1H, m), 5,26 - 5,28 (1H, d), 6,68-6,70 (1H, d), 6,74 (1H, t), 7,12-7,19 (4H, m), 7,46-7,51 (3H, m), 7,78-7,82 (1H, m), 8,02-8,04 (2H, m). Exemplo 17. Preparação de N-[(1R,2S)-1-(4-cloro-3-fluorofenil)-3- metil-1-{[1-(1-metil-6-oxo-1,6-di-hidropiridin-3-il)-1H-indazol-5- il]óxi}butan-2-il]-2,2,2-trifluoroacetamida.

[000241] O composto do título foi preparado seguindo o procedimento para o Exemplo 13, dando origem a 124 mg (81%) do produto. O reagente de Grignard no Esquema 2 foi gerado in situ a partir de magnésio em pó (1,0 g, 41 mmols) e cloreto de lítio (2,5 g, 59 mmols) foram misturados sob N2 em tetra-hidrofurano seco (116 mL) e então esfriados para -10°C. Adicionou-se cloreto de isopropil magnésio (2 M em tetra-hidrofurano) (15 mL, 30 mmols) a uma taxa mantendo a temperatura menor do que -5°C. O banho de esfriamento foi removido e adicionou-se 4-bromo-1-cloro-2-fluorobenzeno (6,7 g, 32 mmols) em porções, mantendo a temperatura menor do que 5°C durante a adição. LC/MS: m/z 551/553 3:1 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz; CDCl3): δ 1,03 (d, 3H), 1,07 (d, 3H), 2,13 (dq, 1H), 3,63 (s, 3H), 4,38 (dt, 1H), 5,29 (d, 1H), 6,36 (d, 1H), 6,72 (dd, 1H), 6,93 (d, 1H), 7,11 (dd, 1H), 7,17 (dd, 1H), 7,22 (dd, 1H), 7,37 (d, 1H), 7,4-7,47 (m, 1H), 7,59-7,67 (m, 2H), 7,96 (d, 1H). Exemplo 18. Preparação de N-[(1R,2S)-1-[3-cloro-5-fluorofenil]-3- metil-1-{[1-(1-metil-6-oxo-1,6-di-hidropiridin-3-il)-1H-indazol-5- il]óxi}butan-2-il]-2,2,2-trifluoroacetamida.

[000242] O composto do título foi preparado seguindo o procedimento para o Exemplo 13, dando origem a 100 mg (62%) do produto. O reagente de Grignard no Esquema 2 foi preparado como descrito no Exemplo 17. LC/MS: m/z 551/553 3:1 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz; CDCl3): δ 1,03 (d, 3H), 1,07 (d, 3H), 2,09-2,2 (m, 1H), 3,64 (s, 3H), 4,37 (dt, 1H), 5,26 (d, 1H), 6,35 (d, 1H), 6,74-6,8 (m, 1H), 6,94 (d, 1H), 7,07 (ddt, 2H), 7,12 (dd, 1H), 7,22 (s, 1H), 7,38 (d, 1H), 7,61-7,71 (m, 2H), 7,99 (s, 1H). Exemplo 19. Preparação de N-[(1R,2S)-1-(3-cloro-5-fluorofenil)-3- metil-1-{[1-(1-metil-6-oxo-1,6-di-hidropiridin-3-il)-1H-indazol-5- il]óxi}butan-2-il]-2,2-difluoropropanamida.

[000243] Dissolveu-se 5-(5-((1R,2S)-2-amino-1-(3-cloro-5-fluorofenil)- 3-metilbutóxi)-1H-indazol-1-il)-1-metilpiridin-2(1H)-ona (140 mg, 0,30 mmol) em DMF (2 mL) e adicionaram-se ácido 2,2-difluoropropanoico (82 mg, 0,75 mmol), TBTU (240 mg, 0,75 mmol) e DIPEA (0,31 mL, 1,8 mmol). A mistura reacional foi agitada à temperatura ambiente por uma noite, foi interrompida com água, extraída com DCM, seca (MgSO4) e concentrada. O produto foi purificado em uma cromatografia em coluna, eluindo com um gradiente de acetato de etila (0-100%) em heptano, e foi concentrado. O DMF que coeluiu foi removido por dissolução do resíduo em DCM (20 mL), lavagem com água (3 x 20 mL), secagem (MgSO4) e concentração, dando origem a 120 mg (73%) do composto do título. LC/MS: m/z 547/549 3:1 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz; CDCl3): δ 1,00 (d, 3H), 1,05 (d, 3H), 1,71 (t, 3H), 2,14-2,24 (m, 1H), 3,63 (s, 3H), 4,3-4,37 (m, 1H), 5,19 (d, 1H), 6,40 (d, 1H), 6,71-6,76 (m, 1H), 6,94 (d, 1H), 7,04 (dt, 1H), 7,07 (d, 1H), 7,12 (dd, 1H), 7,22 (s, 1H), 7,37 (d, 1H), 7,61-7,67 (m, 2H), 7,98 (d, 1H). O reagente de Grignard usado aqui foi preparado como descrito no Exemplo 17. Exemplo 20. Preparação de N-[(1R,2S)-1-(4-cloro-3-fluorofenil)-3- metil-1-{[1-(1-metil-6-oxo-1,6-di-hidropiridin-3-il)-1H-indazol-5- il]óxi}butan-2-il]-2,2-difluoropropanamida.

[000244] O composto do título foi preparado seguindo o procedimento para o Exemplo 23, dando origem a 83 mg (57%) do produto. O reagente de Grignard usado aqui foi preparado como descrito no Exemplo 17. LC/MS: m/z 547/549 3:1 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz; CDCl3): δ 1,00 (d, 3H), 1,04 (d, 3H), 1,71 (t, 3H), 2,12-2,21 (m, 1H), 3,62 (s, 3H), 4,35 (dt, 1H), 5,22 (d, 1H), 6,38 (d, 1H), 6,71 (dd, 1H), 6,93 (d, 1H), 7,11 (dd, 1H), 7,17 (dd, 1H), 7,22 (dd, 1H), 7,36 (d, 1H), 7,40 (t, 1H), 7,58-7,67 (m, 2H), 7,96 (s, 1H). Exemplo 21. Preparação de N-[(1R,2S)-1-{[6-cloro-1-(1-metil-6-oxo- 1,6-di-hidropiridin-3-il)-1H-indazol-5-il]óxi}-3-metil-1-fenilbutan-2- il]-2,2-difluoropropanamida.

Etapa A. Preparação de 5-((terc-butildimetilsilil)óxi)-6-cloro-1H- indazol.

[000245] A uma mistura de 6-cloro-1H-indazol-5-ol (0,5 g, 3,0 mmols) e 1H-imidazol (0,50 mL, 4,5 mmols) em DCM (8 mL) adicionou-se terc- butilclorodimetilsilano (0,47 g, 3,1 mmols) a 0°C. A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente por uma noite. Em seguida, a mistura foi derramada em ácido cítrico aquoso 0,5 M (40 mL) e extraída com DCM (2 x 60 mL). A camada orgânica combinada foi seca com um separador de fases e concentrada, dando origem a 0,70 g do produto do título bruto que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6): δ 0,23 (s, 6H), 1,02 (s, 9H), 7,32 (s, 1H), 7,64 (s, 1H), 7,97 (s, 1H), 12,99 (s, 1H). Etapa B. Preparação de 5-(5-((terc-butildimetilsilil)óxi)-6-cloro-1H- indazol-1-il)-1-metilpiridin-2(1H)-ona.

[000246] 5-((terc-butildimetilsilil)óxi)-6-cloro-1H-indazol (0,70 g) e 5- iodo-1-metilpiridin-2(1H)-ona (Exemplo 1, Etapa B) (0,64 g, 2,7 mmols) foram misturados em tolueno (2 mL) e aquecidos suavemente para se dissolverem a 50°C. A mistura resultante foi evacuada e purgada com N2 várias vezes. Adicionaram-se fosfato de potássio (0,43 mL, 5,2 mmols) e (1S,2S)-ciclo-hexano-1,2-diamina (0,060 mL, 0,50 mmol), seguido de iodeto de cobre(I) (0,028 g, 0,15 mmol). A mistura foi então aquecida para 110°C por 19 horas. Em seguida, a mistura foi esfriada para temperatura ambiente e diluída com acetato de etila (120 mL), foi lavada com HCl 1 M (50 mL), e ácido ascórbico saturado (30 mL). As camadas orgânica e aquosa foram separadas em um separador de fases. A camada orgânica foi concentrada, dando origem a 1,2 g do produto do título na forma de um óleo púrpura/marrom que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional. Etapa C. Preparação de 5-(6-cloro-5-hidróxi-1H-indazol-1-il)-1- metilpiridin-2(1H)-ona.

[000247] A uma solução de 5-(5-((terc-butildimetilsilil)óxi)-6-cloro-1H- indazol-1-il)-1-metilpiridin-2(1H)-ona (1,2 g) em etanol (7 mL) adicionou- se hidróxido de potássio (0,26 g, 4,7 mmols) à temperatura ambiente. A mistura resultante foi agitada por 2,5 h. Adicionou-se água (40 mL), e a mistura foi lavada com MTBE (40 mL), foi acidificada para pH 4 com HCl 3,8 M, extraída com 2-metiltetra-hidrofurano (2 x 30 mL), e seca com um separador de fases, dando origem a 0,45 g (54%, 3 etapas) do composto do título que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6): δ 3,52 (s, 3H), 6,54 (d, 1H), 7,28 (s, 1H), 7,72 (dd, 1H), 7,78 (s, 1H), 8,12-8,19 (m, 1H), 8,20 (s, 1H), 10,08 (s, 1H). Etapa D. Preparação de N-((1R,2S)-1-((6-cloro-1-(1-metil-6-oxo-1,6- di-hidropiridin-3-il)-1H-indazol-5-il)óxi)-3-metil-1-fenilbutan-2-il)-4- nitrobenzenossulfonamida.

[000248] A uma solução de (2S,3S)-2-isopropil-1-((4- nitrofenil)sulfonil)-3-fenilaziridina (Exemplo 1, Etapa E) (0,5 g, 1,1 mmol) e 5-(6-cloro-5-hidróxi-1H-indazol-1-il)-1-metilpiridin-2(1H)-ona (0,42 g, 1,2 mmol) em acetonitrila (7 mL) adicionou-se carbonato de césio (0,75 g, 2,3 mmols). A mistura resultante foi aquecida para 50°C por uma noite. Em seguida, a mistura foi esfriada para temperatura ambiente, derramada em água (30 mL) e extraída com 2-metiltetra-hidrofurano (2 x 40 mL). A camada orgânica combinada foi lavada com água, seca com um separador de fases e concentrada. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia "flash" automatizada em um Biotage® KP- SIL eluindo com um gradiente de 0-100% de acetato de etila em heptano, dando origem a 0,43 g (63%) do produto do título. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6): δ 0,89 (d, 3H), 0,98 (d, 3H), 2,23 (s, 1H), 3,49 (s, 3H), 3,79 (s, 1H), 5,17 (d, 1H), 6,52 (d, 1H), 6,94 (s, 1H), 7,04 (d, 1H), 7,09 (t, 2H), 7,24 (d, 2H), 7,66 (dd, 1H), 7,72 (d, 2H), 7,81 (s, 1H), 8,04 (s, 1H), 8,11 (d, 2H), 8,13-8,19 (m, 2H). Etapa E. Preparação de N-[(1R,2S)-1-{[6-cloro-1-(1-metil-6-oxo-1,6- di-hidropiridin-3-il)-1H-indazol-5-il]óxi}-3-metil-1-fenilbutan-2-il]- 2,2-difluoropropanamida.

[000249] Dissolveu-se N-((1R,2S)-1-((6-cloro-1-(1-metil-6-oxo-1,6-di- hidropiridin-3-il)-1H-indazol-5-il)óxi)-3-metil-1-fenilbutan-2-il)-4- nitrobenzenossulfonamida (0,37 g, 0,60 mmol) em DMF (4 mL), e adicionou-se gota a gota DBU (0,27 mL, 1,8 mmol) à solução, seguido de ácido 2-mercaptoacético (0,084 mL, 1,2 mmol). A mistura reacional foi subsequentemente agitada à temperatura ambiente por duas horas e então foi dividida em dois volumes iguais. Um volume foi usado no Exemplo 22. O outro volume (0,132 g, 0,30 mmol) foi agitado à temperatura ambiente, e adicionou-se gota a gota 2,2- difluoropropanoato de etila (0,125 g, 0,91 mmol). A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente por 18 horas, seguido de aquecimento para 45°C por duas horas. Em seguida, a mistura foi deixada esfriar para a temperatura ambiente. A reação foi interrompida com água e diluída com acetato de etila (30 mL). A camada aquosa foi extraída duas vezes com acetato de etila, e a camada orgânica combinada foi seca em um separador de fases, concentrada e purificada em SFC, dando origem a 63 mg (40%) do composto do título. LC/MS: m/z 529/531 3:1 [M+H]+. 1H RMN (600 MHz, DMSO-d6): δ 0,92 (t, 6H), 1,41 (t, 3H), 2,43 (d, 1H), 3,50 (s, 3H), 4,27 (d, 1H), 5,42 (d, 1H), 6,52 (d, 1H), 7,18 (s, 1H), 7,23 (t, 1H), 7,31 (t, 2H), 7,48 (d, 2H), 7,67 (dd, 1H), 7,86 (s, 1H), 8,11-8,22 (m, 2H), 8,30 (d, 1H). Exemplo 22. Preparação de N-[(1R,2S)-1-{[6-cloro-1-(1-metil-6-oxo- 1,6-di-hidropiridin-3-il)-1H-indazol-5-il]óxi}-3-metil-1-fenilbutan-2- il]-2,2,2-trifluoroacetamida.

[000250] Um volume da mistura reacional de intermediáriado Exemplo 21 (0,132 g, 0,30 mmol) foi agitado à temperatura ambiente com adição de 2,2,2-trifluoroacetato de etila (0,108 mL, 0,91 mmol) gota-a-gota. A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente por 5 h, foi interrompida com água e diluída com acetato de etila (30 mL). A camada aquosa foi extraída duas vezes com acetato de etila e a camada orgânica combinada foi seca em um separador de fases, concentrada e purificada em SFC, dando origem a 89 mg (55%) do composto do título. LC/MS: m/z 533/535 3:1 [M+H]+. 1H RMN (600 MHz, DMSO-d6): δ 0,95 (dd, 6H), 2,42 (d, 1H), 3,50 (s, 3H), 4,27 (d, 1H), 5,44 (d, 1H), 6,52 (d, 1H), 7,22 (s, 1H), 7,26 (d, 1H), 7,32 (t, 2H), 7,46 (d, 2H), 7,67 (dd, 1H), 7,86 (s, 1H), 8,14 (d, 1H), 8,18 (d, 1H), 9,11 (d, 1H). Exemplo 23. Preparação de N-[(1R,2S)-1-{[1-(1-etil-6-oxo-1,6-di- hidropiridin-3-il)-1H-indazol-5-il]óxi}-3-metil-1-fenilbutan-2-il]-2,2- difluoropropanamida.

Etapa A. Preparação de (1R,2S)-3-metil-1-fenil-1-(1-(tetra-hidro-2H- piran-2-il)-1H-indazol-5-ilóxi)butan-2-amina.

[000251] (1R,2S)-2-amino-3-metil-1-fenilbutan-1-ol (Exemplo 1, Etapa D) (2,8 g, 15 mmols), 5-iodo-1-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-1H-indazol (5 g, 15 mmols), iodeto de cobre(I) (1,5 g, 7,6 mmols), ácido 2- (dimetilamino)acético (1,6 g, 15 mmols) e carbonato de césio (15 g, 45 mmol) foram misturados em butironitrila (100 mL). A mistura resultante foi agitada a 130°C por 20 horas. O produto bruto foi purificado por cromatografia em sílica gel, eluindo com DCM/MeOH (20/1), dando origem a 3,0 g (53%) do produto do título na forma de uma goma marrom. LC/MS: m/z 380 [M+H]+ Etapa B. Preparação de 2,2-difluoro-N-[(1R,2S)-3-metil-1-[[1-(oxan- 2-il)-1H-indazol-5-il]óxi]-1-fenilbutan-2-il]propanamida.

[000252] Em um balão de fundo redondo de 100 mL colocaram-se 5- [(1R,2S)-2-amino-3-metil-1-fenilbutóxi]-1-(oxan-2-il)-1H-indazol (3,0 g, 7,9 mmols), DMF (20 mL), DIPEA (3,1 g, 24 mmols), ácido 2,2- difluoropropanoico (1,7 g, 15 mmols) e HATU (6 g, 16 mmols). A solução resultante foi agitada por uma noite à temperatura ambiente. A mistura resultante foi derramada em água e extraída com DCM, e a camada orgânica combinada foi concentrada. O resíduo foi purificado em cromatografia em coluna, eluindo com DCM/MeOH (20:19), dando origem a 3,4 g (91%) do composto do título na forma de um sólido marrom. LC/MS: m/z 472 [M+H]+ Etapa C. Preparação de N-((1R,2S)-1-(1H-indazol-5-ilóxi)-3-metil-1- fenilbutan-2-il)-2,2-difluoropropanamida.

[000253] Em um balão de fundo redondo de 100 mL colocaram-se 2,2- difluoro-N-[(1R,2S)-3-metil-1-[[1-(oxan-2-il)-1H-indazol-5-il]óxi]-1- fenilbutan-2-il]propanamida (4,2 g, 8,9 mmols), DCM (15 mL) e ácido trifluoroacético (7 mL). A solução resultante foi agitada por uma noite à temperatura ambiente e então foi concentrada sob vácuo. Em seguida, o pH da solução foi ajustado para pH 7-8 com bicarbonato de sódio aquoso. A solução resultante foi extraída com DCM. A camada orgânica combinada foi seca em Na2SO4 anidro e concentrada sob vácuo, dando origem a 3,4 g (98%) do composto do título na forma de um sólido marrom. O composto bruto foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional. LC/MS: m/z 388 [M+H]+ Etapa D. Preparação de 5-bromo-1-etilpiridin-2(1H)-ona.

[000254] A uma solução de 5-bromopiridin-2(1H)-ona (1,0 g, 6,0 mmols) e K2CO3 (2,0 g, 15 mmols) em DMF (10 mL) adicionou-se brometo de etila (0,7 g, 7,5 mmols). A mistura resultante foi agitada por uma noite à temperatura ambiente. Em seguida, a mistura foi diluída com acetato de etila (50 mL), foi lavada com H2O (50 mL) e salmoura (100 mL), seca em Na2SO4 e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em sílica-gel eluindo com éter de petróleo /acetato de etila (20/1), dando origem a 0,9 g (74%) do produto do título na forma de um óleo marrom. LC/MS: m/z 202 [M+H]+ Etapa F. Preparação de ácido 1-etil-6-oxo-1,6-di-hidropiridin-3- ilborônico.

[000255] A uma solução de 5-bromo-1-etilpiridin-2(1H)-ona (0,9 g, 4,5 mmols, 1,0 equiv), (PinB)2 (1,7 g, 6,7 mmols) e KOAc (1,9 g, 130 mmols) em dioxano (6 mL) adicionou-se Pd(dppf)Cl2 (0,3 g) sob N2. A solução resultante foi agitada a 80°C por 3 horas sob N2. Em seguida, a mistura foi diluída com acetato de etila (100 mL), e lavada com H2O (50 mL) e salmoura (100 mL). As camadas orgânicas foram secas em Na2SO4, e o resíduo resultante foi purificado por cromatografia em sílica-gel eluindo com éter de petróleo/acetato de etila (10/1), dando origem a 0,2 g (27%) do produto do título na forma de um óleo marrom. O produto bruto foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional. LC/MS: m/z 168 [M+H]+ Etapa G. Preparação de N-[(1R,2S)-1-{[1-(1-etil-6-oxo-1,6-di- hidropiridin-3-il)-1H-indazol-5-il]óxi}-3-metil-1-fenilbutan-2-il]-2,2- difluoropropanamida.

[000256] Adicionou-se acetato de cobre (II) (77 mg, 0,42 mmol) a uma mistura agitada de N-((1R,2S)-1-(1H-indazol-5-ilóxi)-3-metil-1- fenilbutan-2-il)-2,2-difluoropropanamida (150 mg, 0,4 mmol), ácido 1- etil-6-oxo-1,6-di-hidropiridin-3-ilborônico (160 mg, 1,0 mmol) e piridina (120 mg, 1,6 mmol) em DCM (3 mL) à temperatura ambiente, aberta ao ar (frasco não selado). A mistura resultante foi agitada por uma noite. Os sólidos foram então removidos por filtração, e o filtrado foi concentrado sob vácuo. O produto bruto foi purificado por Prep-HPLC, dando origem a 21 mg (10%) do composto do título na forma de um sólido branco. LC/MS: m/z 509 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz; CDCl3): δ 1,01 - 1,10 (m, 6H), 1,33 - 1,46 (m, 6H), 2,46 - 2,49 (m, 1H), 4,08 -4,15 (m, 2H), 4,36 - 4,61 (m, 1H), 5,25 - 5,28 (m, 1H), 6,68 - 6,71 (d, 1H), 7,14 - 7,40 (m, 5H), 7,47 - 7,51 (m, 3H), 7,79 - 7,83 (m, 1H), 8,02 - 8,06 (m, 2H).

Exemplo 24. Avaliação Biológica Ensaio Agonista de GRE

[000257] Uma linhagem de células repórter (ChagoK1 18:7:2 s4/GRE) foi estabelecida por transfecção estável da linhagem de células de carcinoma broncogênico humano, ChaGo K1 (ATCC: HTB 168) com uma construção repórter MMTV-GRE-LacZ. A linhagem de células gerada permite a identificação de compostos exibindo atividade agonista no receptor de glucocorticoides (GR) humano via indução da expressão do gene LacZ. O GR ativado por ligantes liga-se ao Elemento de Resposta a Glucocorticoides (GRE) no promotor do gene LacZ e a transcrição é iniciada. A atividade de beta-galactosidase resultante é medida através de uma reação colorida (alteração da absorvância).

[000258] Células ChagoK1 18:7:2 s4/GRE crioconservadas foram suspensas em meio RPMI com FBS 10%, NEAA 1% e piruvato de sódio 1%, e foram semeadas como 50000 células/200 μL/poço em placas de 96 poços e cultivadas a 37°C com 5% de CO2 e 95% de umidade por 24 horas. Adicionou-se às células 1 μL de composto, a diferentes concentrações, e o sistema foi incubado por mais 24 horas. As células foram lavadas uma vez em PBS e submetidas à lise com 50 μL de Triton-X 0,1% por 10 minutos à temperatura ambiente. Adicionaram-se a cada poço 40 μL de mistura reacional (MgCh 2,5 mM, β-mercapto etanol 0,1 M, 1,7 mg/mL de ONPG e fosfato de sódio 42,5 mM, pH 7,5), e o sistema foi mantido a 37°C por 60 minutos. A reação foi então terminada por adição de 100 μL de solução de terminação (glicina 300 mM, EDTA 15 mM, pH 11,3, ajustado com NaOH). As placas foram medidas a 420 nm quanto à absorvância em um leitor SpectraMax (Molecular Device).

[000259] A eficácia relativa (% do efeito) de um composto é calculada com base no efeito agonista total de dexametasona: % do Efeito = ((abs Amostra - abs min) / (abs max - abs min)) x 100

[000260] Para calcular EC50, max, min e fator de inclinação para cada composto, uma curva de resposta à concentração é ajustada por representação gráfica de % do Efeito versus concentração de composto usando a equação logística de 4 parâmetros: y = A+(B-A)/(1+((10C)/x)D) em que A = Y min, B = Y max, C = log EC50 e D = Fator de inclinação

Ensaio Antagonista de GRE

[000261] Uma linhagem de células repórter (ChagoK1 18:7:2 s4/GRE) foi estabelecida por transfecção estável da linhagem de células de carcinoma broncogênico humano, ChaGo K1 (ATCC: HTB 168) com uma construção repórter MMTV-GRE-LacZ. A linhagem de células gerada permite a identificação de compostos exibindo atividade antagonista no receptor de glucocorticoides (GR) humano via redução da expressão do gene LacZ. O GR ativado por dexametasona liga-se ao Elemento de Resposta a Glucocorticoides (GRE) no promotor do gene LacZ e a transcrição é iniciada. As propriedades antagonistas de compostos são avaliadas como redução da intensidade de beta-galactosidase desde a pré-estimulação com dexametasona através de uma reação colorida (alteração da absorvância).

[000262] Células ChagoK1 18:7:2 s4/GRE crioconservadas foram suspensas em meio RPMI com FBS 10%, NEAA 1% e piruvato de sódio 1%, e foram semeadas como 50000 células/200 μL/poço em placas de 96 poços e cultivadas a 37°C com 5% de CO2 e 95% de umidade por 24 horas. As células foram pré-estimuladas com 2 μL de dexametasona (70 nM de conc. final) por 4-5 h, antes da adição de 1 μL de composto a diferentes concentrações e incubação por mais 24 horas. As células foram lavadas uma vez em PBS e submetidas a lise com 50 μL de Triton-X 0,1% por 10 minutos à temperatura ambiente. Adicionaram-se a cada poço 40 μL de mistura reacional (MgCh 2,5 mM, β-mercapto etanol 0,1 M, 1,7 mg/mL de ONPG e fosfato de sódio 42,5 mM, pH 7,5), e o sistema foi mantido a 37°C por 60 minutos. A reação foi então terminada por adição de 100 μL de solução de terminação (glicina 300 mM, EDTA 15 mM, pH 11,3, ajustado com NaOH). As placas foram medidas a 420 nm quanto à absorvância em um leitor SpectraMax (Dispositivo Molecular).

[000263] A eficácia relativa (% do efeito) de um composto é calculada com base no efeito antagonista total do composto de referência Mifepristona (RU486): % do Efeito = ((abs Amostra - abs min) / (abs max - abs min)) x 100

[000264] Para calcular IC50, max, min e fator de inclinação para cada composto, uma curva de resposta à concentração é ajustada por representação gráfica de % do Efeito versus concentração de composto usando a equação logística de 4 parâmetros: y = A+(B-A)/(1+((10C)/x)D) em que A = Y min, B = Y max, C = log IC50 e D = Fator de inclinação

[000265] A Tabela 1 mostra os resultados destes ensaios com os compostos dos Exemplos 1-23. "TA" é a transativação medida em modo agonista no Ensaio Agonista de GRE, e em modo antagonista no Ensaio Antagonista de GRE Tabela 1 Resultados de Ensaios Biológicos

Sangue Completo Humano In Vitro

[000266] A atividade anti-inflamatória de compostos e prednisolona foi determinada in vitro pela sua capacidade de inibir a liberação de TNFα a partir de sangue completo estimulado com LPS. Sangue venoso de doadores humanos foi recolhido e anticoagulado com heparina de sódio e transferido para uma placa de fundo redondo de poliestireno estéril (Corning) a 190 μL por poço.

[000267] Os compostos foram preparados a partir de soluções-mãe 10 mM em dimetilsulfóxido (DMSO, Sigma) por diluição em série 1/3 em DMSO para produzir uma placa principal com a concentração máxima a 3,33 mM e a concentração mais baixa a 0,1 μM. Adicionaram-se compostos da placa principal ao sangue à diluição de 1 μL/poço (1/200) para originar concentrações finais variando entre 16,7 μM e 0,5 nM. Os poços de controle receberam somente 1 μL de DMSO e a concentração final de DMSO em todos os poços foi 0,5%. As amostras foram suavemente misturadas e colocadas em uma incubadora umidificada (95% de ar/5% de CO2) a 37°C e foram incubadas por 45 min.

[000268] LPS (serótipo de E. coli 0127:B8, Sigma) foi diluído em PBS sem CaCl2/MgCl2 (Gibco), dando origem a uma solução de trabalho a 600 μg/mL. Adicionaram-se 10 μL a cada poço para originar uma concentração final de LPS de 30 μg/mL. Os controles não estimulados receberam somente PBS a 10 μL/poço. As amostras foram, mais uma vez, suavemente misturadas, e as placas foram incubadas por uma noite durante 18 horas. Após a incubação, o sangue foi centrifugado a 700 x g por 5 min, e o plasma foi removido e transferido para congelação a -20°C antes do ensaio quanto à liberação de TNFα.

[000269] Os níveis de proteína TNFα foram determinados usando um kit AlphaLISA hTNFα (Perkin Elmer) de acordo com as instruções do fabricante. Em resumo, as amostras foram deixadas regressar à temperatura ambiente e foram centrifugadas a 1500 x g por 5 minutos. As amostras foram diluídas 1/5 (5 μL de amostra em 20 μL de tampão AlphaLISA). Ao mesmo tempo, preparou-se uma curva padrão de TNFα por diluições em série 1/3 a partir de uma solução-mãe (5000-2 pg/mL). Transferiram-se 5 μL de amostra/curva padrão para uma OptiplateTM de 384 poços, e a esta adicionaram-se 20 μL de mistura de esférulas aceitadoras/anticorpo biotinilado anti-TNFα humano. A placa foi incubada à temperatura ambiente por 60 min. Após esta incubação, adicionaram-se 25 μL de esférulas doadoras de estreptavidina, e a placa foi incubada por mais 60 minutos no escuro à temperatura ambiente. As amostras foram lidas a 615 nm com excitação a 680 nm usando um leitor de placas Envision. O TNFα presente nas amostras foi determinado por extrapolação da curva padrão e expresso como pg/mL.

[000270] A % de inibição de TNFα foi determinada pela equação: % de inibição = (1-(A-B)/(C-B)) x 100

[000271] Aqui, A = TNFα em amostras estimuladas com LPS contendo composto, B = TNFα em amostras não estimuladas e C = TNFα em amostras estimuladas com LPS sem composto. A percentagem de inibição foi representada graficamente contra a concentração, e determinou-se uma curva usando um ajustamento de curvas de 4 parâmetros (Xlfit 4.1) para determinar o pIC50. Tabela 2 pIC50 de TNFα para Prednisolona e os Compostos do Exemplo 1, 3 & 6

Ensaio in vitro de expressã ío de mRNA de tirosina aminotransferase ("TAT")

[000272] O impacto de compostos de teste em eventos hiperglicêmicos foi avaliado observando alterações na expressão de mRNA do gene que codifica tirosina aminotransferase (TAT), que está sob regulação direta do receptor de glucocorticoides em hepatócitos humanos.

Esboço experimental

[000273] Hepatócitos primários humanos crioconservados (BioreclamationIVT, M00995-P lote EPB) foram plaqueados em placas de 24 poços revestidas com colágeno I (Becton Dickinson, 354408). Foi permitida a adesão das células por 4 h antes de serem desafiadas com compostos de teste por uma noite (18 h). As células foram recolhidas e o RNA total foi isolado usando o Kit RNeasy Plus Mini (Qiagen, 74136) seguido de síntese de cDNA usando o kit de transcrição reversa de cDNA High Capacity (Applied Biosystems, 4368813). Realizou-se RT PCR em tempo real em um aparelho de aplicação de ciclos de PCR Applied Biosystems 7500, usando iniciadores Taqman para TAT (Life technologies, Hs00356930_m1) e o gene de referência hipoxantina fosforribosiltransferase 1 (Life technologies, Hs99999909_m1).

Protocolo

[000274] Hepatócitos primários humanos crioconservados foram transferidos para meio de plaqueamento (BioreclamationIVT, Z990003) pré-aquecido (37°C) e diluídos para 0,7 x 106 células viáveis/mL. 500 μL da suspensão de células foram plaqueados em cada poço de uma placa de 24 poços revestida com colágeno I e as células foram deixadas sedimentar e aderir a 37°C por 4 horas. Após a incubação, o meio foi suavemente descartado e substituído por meio desprovido de insulina, glucose, glutamina, piruvato (BioreclamationIVT, S00304), contendo compostos de interesse, prednisolona a 1 μM, com dissolução em DMSO (concentração final de DMSO 0,01%), ou DMSO isoladamente como controle. As placas foram então incubadas a 37°C por mais 18 horas. O meio foi descartado, e o isolamento de RNA total (Qiagen) e síntese de cDNA (Applied Biosystems) foram realizados de acordo com o protocolo dos fabricantes. Realizou-se RT PCR em tempo real usando reagentes TaqMan (Life technologies) no aparelho de aplicação de ciclos de PCR 7500, e os valores de Ct para a expressão do gene TAT foram normalizados para o gene de controle e expressos como alteração em número de vezes em comparação com o controle de DMSO usando o método 2-ΔΔCt. Tabela 3

[000275] Expressão do Gene Tirosina Aminotransferase, em Alteração em Número de Vezes, Relativamente ao Controle

[000276] A menos que indicado em contrário, aplica-se o seguinte neste relatório descritivo:

[000277] Os termos "halogênio" e "halo" significam cloro, bromo, fluoro, ou iodo. Em algumas modalidades, os átomos de halogênio em uma molécula são selecionados do grupo que consiste em cloro ou fluoro. Em algumas modalidades, os átomos de halogênio em uma molécula são cloro. E em algumas modalidades, os átomos de halogênio em uma molécula são fluoro.

[000278] Quando o termo "halo" modificar outro substituinte (por exemplo, metila ou metóxi), o outro substituinte é substituído com um ou mais halo. Assim, por exemplo, "halometila" abrange uma metila substituída com um halo (por exemplo, -CFH2), dois halo (por exemplo, -CF2H), ou três halo (por exemplo, -CF3).

[000279] O termo "farmaceuticamente aceitável" é usado para caracterizar uma fração (por exemplo, um sal, forma de dosagem, ou excipiente) como sendo apropriada para uso de acordo com avaliação médica fundamentada. Em geral, uma fração farmaceuticamente aceitável tem um ou mais benefícios que são mais importantes do que qualquer efeito prejudicial que a fração possa ter. Efeitos prejudiciais podem incluir, por exemplo, toxicidade excessiva, irritação, resposta alérgica, e outros problemas e complicações.

[000280] Neste relatório descritivo, a menos que afirmado de outro modo, os termos "inibidor" e "antagonista" significam um composto que por qualquer meio bloqueia, parcial ou completamente, a via de transdução conducente à produção de uma resposta pelo agonista. Um agonista pode ser um agonista total ou parcial.

[000281] O termo "distúrbio", a menos que afirmado de outro modo, significa qualquer afeção ou doença associada à atividade de receptores de glucocorticoides.

[000282] Referências feitas no singular também podem incluir o plural. Por exemplo, "um" e "uma" podem referir-se a um ou mais do que um.

[000283] A palavra "incluindo" neste relatório descritivo deve ser interpretada inclusivamente em vez de exclusivamente. Em conformidade, qualquer lista após a palavra "incluindo" destina-se a ser ilustrativa e não é pretendido que seja limitadora.

[000284] As palavras "compreendem", "compreende", e "compreendendo" nesta patente (incluindo as reivindicações) devem ser interpretadas inclusivamente em vez de exclusivamente. É pretendido que esta interpretação seja igual à interpretação dada a estas palavras sob a lei de patentes dos Estados Unidos.

[000285] O termo "BnOH" significa álcool benzílico.

[000286] O termo "boc" significa terc-butiloxicarbonila.

[000287] O termo "CDI" significa 1,1'-carbonildiimidazol.

[000288] O termo "CO2" significa dióxido de carbono.

[000289] O termo "DBU" significa 2,3,4,6,7,8,9,10-octa- hidropirimido[1,2-a]azepina.

[000290]

[000291]

[000292]

[000293]

[000294]

[000295]

[000296]

[000297]

[000298] O termo "DCM" significa diclorometano. O termo "DIPEA" significa di-isopropiletilamina. O termo "DMF" significa dimetilformamida. O termo "dppf" significa 1,1‘-bis(difenilfosfino)ferroceno. O termo "DMSO" significa dimetil sulfóxido. O termo "ESI" significa ionização por eletropulverização. O termo "EtOH" significa etanol. O termo "GC" significa glucocorticoide. O termo "GRE" significa elemento de resposta a glucocorticoides.

[000299] O termo "GR" significa receptor de glucocorticoides.

[000300] O termo "1H RMN" significa ressonância magnética nuclear de prótons.

[000301] O termo "HATU" significa hexafluorofosfato de 1- [bis(dimetilamino)metileno]-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]piridínio 3-óxido.

[000302] O termo "HCl" significa ácido clorídrico.

[000303] O termo "HPLC" significa cromatografia líquida de alto desempenho.

[000304] O termo "h" significa hora ou horas.

[000305] O termo "LCMS" significa detecção por cromatografia líquida espectrometria de massa.

[000306]

[000307]

[000308]

[000309]

[000310]

[000311]

[000312] O termo "m/z" significa razão entre massa e carga. O termo "Me" significa metila. O termo "MeI" significa iodeto de metila. O termo "MeOH" significa metanol. O termo "min" significa min ou min. O termo "MS" significa espectro de massa. O termo "MsCl" significa cloreto de metanossulfonila.

[000313] O termo "MTBE" significa éter de metil terc-butila.

[000314] O termo "N2" significa nitrogênio gasoso.

[000315] O termo "RMN" significa ressonância magnética nuclear.

[000316] O termo "NsCl" significa cloreto de 4-nitrobenzenossulfonila.

[000317] O termo "(PinB)2" significa bis(pinacolato)diboro.

[000318] O termo "SFC" significa cromatografia de fluido supercrítico.

[000319] O termo "SGRM" significa um composto não esteroide que modula (isto é, é um agonista parcial ou completo, um antagonista parcial ou completo, ou é um agonista parcial e um antagonista parcial) do receptor de glucocorticoides.

[000320] O termo "TBAF" significa fluoreto de tetra-n-butilamônio.

[000321] O termo "TBDMSCl" significa Cloreto de terc-butildimetilsilila.

[000322] O termo "TBTU" significa tetrafluoroborato de 2-(1H- benzo[d][1,2,3]triazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametilisourônio.

[000323] O termo "TEA" significa trietilamina.

[000324] O termo "TFA" significa ácido trifluoroacético.

[000325] O termo "TFAA" significa anidrido trifluoroacético.

[000326] A descrição detalhada acima destina-se meramente a dar a conhecer a outros peritos na técnica o relatório descritivo, os seus princípios, e a sua aplicação prática de modo que outros peritos na técnica possam adaptar e aplicar o relatório descritivo em suas numerosas formas, tanto quanto melhor se adequem aos requisitos de um uso particular. Em consequência, este relatório descritivo não está limitado às modalidades acima, e pode ser modificado de modo variado.

Claims (16)

1. Composto ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, caracterizado pelo fato de que: a estrutura do composto corresponde à Fórmula I:

R1 é selecionado de halo, metila e halometila; cada R2 é um halo independentemente selecionado; cada um de R3A, R3B e R3C é independentemente selecionado de H, halo, halometila e halometóxi; R4 é selecionado de H, halo e metila; e R5 é selecionado de metila e etila.

2. Composto ou seu sal farmaceuticamente aceitável, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a estrutura do composto corresponde à Fórmula (IA):

3. Composto ou seu sal farmaceuticamente aceitável, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 e 2, caracterizado pelo fato de que R1 é metila.

4. Composto ou seu sal farmaceuticamente aceitável, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que cada R2 é fluoro.

5. Composto ou seu sal farmaceuticamente aceitável, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado pelo fato de que: um de R3A, R3B e R3C é H; e cada um dos restantes dois de R3A, R3B e R3C é independentemente selecionado de H, F, Cl, trifluorometila, difluorometóxi e trifluorometóxi.

6. Composto ou seu sal farmaceuticamente aceitável, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado pelo fato de que cada um de R3A, R3B e R3C é H.

7. Composto ou seu sal farmaceuticamente aceitável, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado pelo fato de que R5 é metila.

8. Composto ou seu sal farmaceuticamente aceitável, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o composto é selecionado de:

9. Composto ou seu sal farmaceuticamente aceitável, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o composto é:

10. Composto ou seu sal farmaceuticamente aceitável, de acordo com a reivindicação 9, caracterizado pelo fato de que o composto é 2,2-difluoro-N-[(1R,2S)-3-metil-1-{[1-(1-metil-6-oxo-1,6-di- hidropiridin-3-il)-1H-indazol-5-il]óxi}-1-fenilbutan-2-il]propanamida, e possui a seguinte fórmula estrutural:

11. Composto ou seu sal farmaceuticamente aceitável, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10, caracterizado pelo fato de que é para uso como medicamento.

12. Composto ou seu sal farmaceuticamente aceitável, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10, caracterizado pelo fato de que é para uso no tratamento de artrite reumatoide.

13. Composto ou seu sal farmaceuticamente aceitável, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10, caracterizado pelo fato de que é para uso no tratamento de asma.

14. Composto ou seu sal farmaceuticamente aceitável, de acordo com a reivindicação 13, caracterizado pelo fato de que a asma é asma brônquica.

15. Composição farmacêutica caracterizada pelo fato de que compreende: uma quantidade terapeuticamente eficaz do composto ou seu sal farmaceuticamente aceitável, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 14, e um excipiente.

16. Uso do composto ou seu sal farmaceuticamente aceitável, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 14, caracterizado pelo fato de que é para a fabricação de um medicamento para o tratamento de artrite reumatoide ou asma.