BR112015023060B1 - Entidades químicas - Google Patents

Abstract

ENTIDADES QUÍMICAS. São fornecidas entidades químicas selecionadas a partir de compostos de fórmula (I), (I) em que R1, R2 e m têm os significados indicados na descrição, e os sais, solvatos e estereoisô-meros farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, que são inibidores de ATR e são potencial-mente úteis no tratamento de câncer. São ainda proporcionadas composições farmacêuticas das entidades químicas, produtos de combinação que contêm as entidades químicas, uso das composições como agentes terapêuticos, e métodos de tratamento utilizando essas composi-ções.

Description

[001] Esta invenção refere-se a entidades químicas com atividade anticâncer, e mais especificamente a entidades químicas que inibem a ATR (Ataxia telangiectasia mutada e quinase relacionada-Rad3). Esta invenção também se refere a composições farmacêuticas contendo, e às utilizações de tais entidades químicas.

Antecedentes da Invenção

[002] As entidades químicas tricíclicas da presente invenção são inibidores de ATR e têm um número de aplicações terapêuticas, em particular no tratamento de câncer.

[003] Os cânceres são uma consequência do crescimento descontrolado de células de uma ampla variedade de tecidos diferentes. Em muitos casos, as novas células penetram no tecido já existente, ou elas sofrem metástase em órgãos distantes. Cânceres ocorrem em uma ampla variedade de órgãos e frequentemente progridem de uma forma específica para o tecido. O termo “câncer”, como um termo genérico descreve, portanto, um grande grupo de doenças definidas de diferentes órgãos, tecidos e tipos de células.

[004] Em 2008, mais de 12 milhões de pessoas no mundo foram diagnosticadas com câncer. No mesmo ano, aprox. 7,5 milhões de mortes foram assumidas como consequência destas doenças (Globocan Relatório de 2008). Só nos EUA, em 2012, mais de 1,6 milhões de novos casos e mais de 500.000 mortes foram previstas a partir de cânceres. A maioria destes novos casos referem-se a cânceres do cólon (~ 100 000), pulmão (~ 230 000), mama (~ 230 000) e próstata (~ 240 000) (American Cancer Society, Cancer Facts and Figures 2012).

[005] Muitos tratamentos atuais contra o câncer, incluindo agentes quimioterápicos e radiação ionizante, induzem danos no DNA e estagnação da forquilha de replicação, ativando, assim, vias de ponto de verificação do ciclo celular e levando a parada do ciclo celular. Uma variedade de estudos tem mostrado que esta resposta é um mecanismo importante que ajuda as células cancerosas a sobreviverem aos tratamentos. Estas constatações levaram ao desenvolvimento de agentes visando às vias de sinalização de resposta de dano ao DNA.

[006] ATR é um membro da família de proteínas da quinase relacionada com quinase fosfatidilinositol (PIKK), e é ativada por uma grande variedade de eventos de danos no DNA. Em particular, a ATR é essencial para coordenar a resposta ao estresse replicativo (RS), que representa a acumulação patológica de DNA de cadeia simples (ssDNA). A natureza de recombinação gênica de ssDNA leva a rearranjos cromossômicos que são a marca registrada de câncer. Em resposta ao RS, ATR provoca paragem do ciclo celular nas fases S e G2/M por fosforilação de CHK1.

[007] ATR pode prevenir o desenvolvimento de câncer, como a resposta de ponto de verificação de ATR pode limitar a expansão de células pré-cancerosas submetidas a RS, como resultado de ativação de oncogenes. Além disso, devido à via do ponto de verificação de ATR-CHK1 servir para garantir a sobrevivência de células após RS, um ponto de verificação de ATR CHK1-normal e robusto pode ser um mecanismo de resistência à quimioterapia e pode permitir as células cancerosas a sobreviver a níveis endógenos elevados de RS.

[008] A inibição dos componentes da via ATR-CHK1 poderia potencialmente aumentar a eficácia de inibidores de replicação. Além disso, a inibição do ATR pode ser especialmente tóxica para as células com elevados níveis de RS, tal como as que expressam oncogenes ou carecem de supressores de tumores. Nestas células, forte limitação da atividade de ATR (por exemplo, por utilização de um inibidor de ATR) iria gerar quantidades letais de RS que conduzem à morte celular.

[009] Uma vantagem potencial de células de sensibilização deste modo seria a capacidade de reduzir as doses dos inibidores de replicação. Isto iria resultar em toxicidade reduzida para os sistemas de órgãos hematológicos e gastrointestinais, dentre outros, se as células normais não são sensibilizadas para a mesma extensão. A especificidade do inibidor da replicação para causar a morte de células de câncer pode ser assistida pelo fato das células não transformadas terem pontos de verificação de S e G2 mais robustos do que as células tumorais. Por exemplo, muitos tipos de câncer têm mutações em p53 ou outros componentes da via do p53, levando a dependência em relação aos pontos de verificação de S e G2 para deter o ciclo celular e fornecer a reparação e sobrevivência. A inibição dos pontos de verificação de S e G2 pode, então, preferencialmente matar essas células tumorais deficientes em p53.

[0010] A listagem ou discussão de um documento aparentemente-publicado antes no presente relatório descritivo não deve ser necessariamente tomada como um reconhecimento de que o documento faz parte do estado da técnica ou de conhecimento geral comum.

[0011] Existe uma falta de potentes inibidores de ATR. Portanto, existe uma necessidade de entidades químicas que inibam seletivamente ATR para uso clínico ou para um estudo mais aprofundado da resposta de ATR.

Sumário da Invenção

[0012] A presente invenção refere-se a uma série de entidades químicas tricíclicas que são inibidoras de ATR. Estas entidades químicas demonstram uma boa seletividade para ATR e são potencialmente úteis no tratamento de câncer. A invenção refere-se ainda a composições farmacêuticas das entidades químicas, para o uso das composições como agentes terapêuticos, e a métodos de tratamento utilizando essas composições.

[0013] Em um aspecto, a presente invenção proporciona entidades químicas selecionadas a partir de compostos de fórmula (I)

(I) em que; R1 é selecionado a partir de arila e heteroarila; R2 é selecionado a partir de NR3SO2R3, alquila, cicloalquila, arila e heteroarila; em que R3 é independentemente selecionado em cada ocorrência a partir de H, alquila, cicloalquila e heterocicloalquila; e m é 1 ou 2; alquila representa um radical hidrocarboneto saturado linear tendo até 10 átomos de carbono (C1-C10) ou um hidrocarboneto saturado ramificado de 3 a 10 (ou seja, entre 3 e 10) átomos de carbono (C3-C10); cicloalquila é um hidrocarboneto C3-C10 mono ou bicíclico saturado, o qual pode estar opcionalmente fundido a um grupo arila; ou cicloalquila é adamantil; heterocicloalquila é um anel mono ou bicíclio saturado de 3 a 10 membros, C-ligado ou N-ligado, que contém 1, 2, 3 ou 4 heteroátomos independentemente selecionados a partir de N, S e O, em que um átomo de N ou S no anel pode ser substituído por um oxigênio para formar um grupo N-óxido, sulfóxido ou sulfona; arila é fenil, bifenil ou naftil; e heteroarila é um anel aromático mono, bi ou tricíclico de 5, 6, 9 ou 10, 12, 13 ou 14 membros, que contém 1, 2, 3 ou 4 heteroátomos do anel independentemente selecionado a partir de N, S, e O; e sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos e estereoisômeros dis mesmos.

[0014] Quando qualquer um de R1, R2 e R3 é selecionado a partir de alquila, cicloalquila, heterocicloalquila, arila e heteroarila, em conformidade com a fórmula (I) tal como definida acima, em seguida, esse grupo pode ser substituído ou não substituído. Quando substituídos, geralmente haverá de 1 a 5 substituintes presentes, preferencialmente 1, 2 ou 3 substituintes.

[0015] Os substituintes para o referido alquila, heterocicloalquila, cicloalquila, a menos que indicado de outra forma, podem ser selecionados independentemente a partir de halogênio, OH, CN, COOR4, CF3, NR4R4, NR4COR4, (NR4)nSO2R4, em que n é 0 ou 1, alquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, cicloalquila opcionalmente substituída por 1,2 ou 3 átomos de halogênio, e O-alquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, ou dois substituintes em um átomo podem ser tomados em conjunto com o átomo ao qual eles estão ligados para formar uma estrutura cíclica selecionada dentre cicloalquila e heterocicloalquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 grupos selecionados a partir de halogênio, alquila C(O)C1-C4, C(O)O-(alquila C1-C4) e alquila C1-C4 opcionalmente substituida com 1, 2 ou 3 átomos de halogênio; e em que R4 é independentemente selecionado em cada ocorrência a partir de H, alquila, arila, heteroarila, cicloalquila e heterocicloalquila, em que o alquila, arila, heteroarila, cicloalquila e heterocicloalquila é opcionalmente substituído por 1, 2 ou 3 substituintes selecionados a partir de halogênio, alquila, O-alquila, N(alquila C1-C4)2, alquila N(alquila C1-C4)COC1-C4, ou dois grupos R4 em um substituinte são tomados em conjunto com o átomo(s) aos quais eles estão ligados para formar um heterocicloalquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, ou, onde um substituinte compreendendo um grupo R4 está presente em um grupo alquila, cicloalquila ou heterocicloalquila, o grupo R4 é tomado juntamente com um substituinte em que o alquila, cicloalquila ou heterocicloalquila para formar um heterocicloalquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio.

[0016] Os substituintes para os referidos grupos arila e heteroarila podem ser selecionados independentemente a partir de halogênio, OH, CN, COOR4, CF3, NR4R4, NR4COR4, (NR4)nSO2R4, em que n é 0 ou 1, alquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, O-alquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, cicloalquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, e heterocicloalquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio; em que R5 é selecionado independentemente dentre COalquila, COarila ou COheteroarila.

[0017] Em uma modalidade da presente invenção, os substituintes para o referido alquila, heterocicloalquila, cicloalquila, a menos que indicado de outra forma, podem ser selecionados independentemente a partir de halogênio, OH, CN, COOR4, CF3, NR4R4, NR4COR4, (NR4)nSO2R4, em que n é 0 ou 1, alquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, cicloalquila opcionalmente substituída por 1,2 ou 3 átomos de halogênio, e O-alquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, ou dois substituintes em um único átomo podem ser tomados em conjunto com o átomo ao qual eles estão ligados para formar uma estrutura cíclica selecionada dentre cicloalquila e heterocicloalquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 grupos selecionados a partir de halogênio e alquila C1-C4 opcionalmente substituída com átomos de 1, 2 ou 3 halogênio.

[0018] A presente invenção abrange todos os tautômeros, isômeros, estereoisômeros (incluindo enantiômeros, diastereoisômetros e misturas racêmicas e escalêmicas dos mesmos) de compostos de fórmula (I) tal como aqui definidos e os seus sais e pró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis.

[0019] Em ainda outro aspecto, a presente invenção proporciona um N-óxido de um composto de fórmula (I) tal como aqui definido, e os tautômeros, isômeros, estereoisômeros (incluindo enantiômeros, diastereoisômetros e misturas racêmicas e escalêmicas dos mesmos) dos mesmos, e sais e pró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis.

[0020] Será entendido que certas entidades químicas da presente invenção podem existir em formas solvatadas, por exemplo, hidratadas, bem como formas não solvatadas. É para ser entendido que a presente invenção abrange todas essas formas solvatadas.

[0021] A presente invenção também compreende os seguintes aspectos, alternativas e suas combinações. Preferências e opções para um dado aspecto, a característica ou parâmetro da invenção deve, a menos que o contexto indique de outra forma, serem consideradas como tendo sido reveladas emcombinação com quaisquer e todas as preferências e opções para todos os outros aspectos, características e parâmetros da invenção. Por exemplo, as definições particulares para o grupo R1 aqui definido podem ser combinadas com as definições particulares para o grupo R2.

[0022] Em um aspecto da invenção, R1 é heteroarila. Em particular, R1 é heteroarila bicíclica.

[0023] Em um aspecto da invenção, R1 é selecionado dentre:

e particularmente

em que cada um de R6, R7, R8, R9, R11 e R12 independentemente selecionado a partir de H, halogênio, cicloalquila, OH, CN, COOR4, CF3, NR4R4, NR4COR4, R10 eOR10,, em que R10 é alquila (C1-C6) opcionalmente substituída com 1, 2 ou 3 átomos de halogênio.

[0024] De preferência, R6 é selecionado a partir de halogênio ou H, mais preferencialmente, F ou H.

[0025] De um modo preferido, R7, R8 e R9 são, cada um, independentemente selecionados a partir de CN ou particularmente, H, halogênio, R10, e OR10, mais preferivelmente, a partir de H, halogênio e R10.

[0026] De preferência, R7 é selecionado a partir de halogênio, alquila (C1-C6), e alquila O(C1-C6), particularmente a partir de halogênio e alquila O(C1-C6), mais particularmente a partir de halogênio e OMe, mais particularmente, a partir de F e OMe.

[0027] De preferência, R7 é selecionado dentre halogênio, CN, alquila O(C1-C6) e alquila (C1-C6) opcionalmente substituída por 1 a 3 átomos de halogênio, particularmente a partir de halogênio, CN, O(C1-C4)alquila e (C1-C4)alquila opcionalmente substituída por 1 a 3 átomos de halogênio, mais particularmente a partir de halogênio, CN, Me, CF3 e OMe, mais particularmente, dentre Cl, F, CN, Me, CF3 e OMe.

[0028] De preferência, R1 é selecionado a partir de H, R10, NR4R4 e NR4COR4, por exemplo, a partir de morfolinil, N(C1-4alquila)C1-4alquila, ou particularmente H, alquila (C1- C6), NH2, alquila NHC1-4 e alquila NHCOC1-4, mais particularmente, H, Me, NHMe, N(Me)2, NHEt, NH(isopropila), NH(n-propila), NH2 e morfolin-4-ila. Mais preferencialmente, R11 é selecionado dentre alquila (C1-C6), NR4R4 e NR4COR4, mais preferencialmente, NR4R4, em particular, NHMe, N(Me)2, NHEt, NH(isopropila), NH(n-propila), NH2, e morfolin-4-ila.

[0029] De preferência, R12 é selecionado a partir de H, halogênio, R10 ou OR10, especialmente a partir de H, halogênio, ou R10, ou mais particularmente, dentre H ou R10.

[0030] Em particular, R6 e R9 podem ser cada um independentemente selecionado a partir de F ou H; R7 e R8 podem ser cada um independentemente selecionado a partir de H, halogênio, R10, e OR10; R11 pode ser selecionado a partir de H, R10, NR4R4 e NR4COR4; e R12 é selecionado a partir de H, halogênio, R10 ou OR10.

[0031] Alternativamente, R6 e R9 podem ser cada um independentemente selecionado a partir de F ou H; R7 e R8 podem ser cada um independentemente selecionado a partir de H, halogênio, CN, R10, e OR10; R11 pode ser selecionado a partir de H, R10, NR4R4 e NR4COR4; e R12 é selecionado a partir de H, halogênio, R10 ou OR10.

[0032] Alternativamente, R6 pode ser selecionado a partir de halogênio ou H, em especial, F ou H; R7, R8 e R9 podem ser cada um independentemente selecionados a partir de H, halogênio, R10, e OR10; R11 pode ser selecionado a partir de H, R10, NR4R4 e NR4COR4; em que R4 é independentemente selecionado em cada ocorrência a partir de H ou alquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, ou grupos R4 são tomados em conjunto com o átomo ao qual eles estão ligados para formar heterocicloalquila, opcionalmente substituído por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio; e R12 pode ser selecionado de H ou R10.

[0033] Em outra alternativa, R6 pode ser selecionado a partir de halogênio ou H, em especial, F ou H; R7, R8 e R9 podem ser, cada um, independentemente selecionados a partir de H, halogênio, CN, R10, e OR10; R11 pode ser selecionado a partir de H, R10, NR4R4 e NR4COR4; em que R4 é independentemente selecionado em cada ocorrência a partir de H ou alquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, ou grupos R4 são tomados em conjunto com o átomo ao qual eles estão ligados para formar heterocicloalquila, opcionalmente substituído por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio; e R12 pode ser selecionado a partir de H, halogênio ou R10.

[0034] Em particular, R6 pode ser selecionado a partir de halogênio ou H, em particular, F ou H; R7, R8 e R9 podem ser, cada um, independentemente selecionados a partir de H, halogênio, alquila (C1-6), e alquila O(C1-6); R11 pode ser selecionado a partir de H, alquila (C1-6), NR4R4 e NR4COR4; em que R4 é independentemente selecionado em cada ocorrência a partir de H ou alquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio ou os grupos R4 são tomados em conjunto com o átomo(s) ao qual estão ligados para formar heterocicloalquila, opcionalmente substituído por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio; e R12 pode ser selecionado a partir de H, alquila (C1-6) ou alquila O(C1-6).

[0035] Alternativamente, R6 pode ser selecionado a partir de halogênio ou H, em especial, F ou H; R7, R8 e R9 podem ser, cada um, independentemente selecionados a partir de H, halogênio, CN, alquila O(C1-6) e alquila (C1-6), opcionalmente substituído por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio; R11 pode ser selecionado a partir de H, alquila (C1-6), NR4R4 e NR4COR4; em que R4 é independentemente selecionado em cada ocorrência a partir de H ou alquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio ou os grupos R4 são tomados em conjunto com o átomo (s) ao qual estão ligados para formar heterocicloalquila, opcionalmente substituído por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio; e R12 pode ser selecionado a partir de H, halogênio, alquila (C1-6) ou alquila O(C1-6).

[0036] Em particular, R6 pode ser selecionado a partir de halogênio ou H, em particular, F ou H; R7, R8 e R9 podem ser, cada um, independentemente selecionados a partir de H, halogênio, alquila (C1-6) e alquila O(C1-6); R11 pode ser selecionado a partir de H, alquila (C1-C6), NH2, alquila NHC1-4 e alquila NHCO(C1-4); e R12 pode ser selecionado de H ou R10.

[0037] Alternativamente, R6 pode ser selecionado a partir de halogênio ou H, em especial, F ou H; R7, R8 e R9 podem ser, cada um, independentemente selecionados a partir de H, halogênio, CN, alquila O(C1-6) e alquila (C1-6), opcionalmente substituído por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio; R11 pode ser selecionado a partir de H, alquila (C1-C6), NH2, alquila NHC1-4, N(alquila C1-4)2, morfolinila e aquila NHCO(C1-4); e R12 pode ser selecionado a partir de H, halogênio ou R10.

[0038] Alternativamente, R6, R7, R8, R9 e R12 podem ser H; e R11 pode ser selecionado a partir de alquila (C1-C6), NR4R4 e NR4COR4, particularmente NR4R4, mais particularmente, NHMe, N(Me)2, NHEt, NH(iso-propil), NH(n-propil), NH2, e morfolin- 4-il, mais particularmente NHMe; em que R4 é independentemente selecionado em cada ocorrência a partir de H ou alquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, ou grupos R4 são tomados em conjunto com o átomo ao qual eles estão ligados para formar heterocicloalquila, opcionalmente substituído por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio.

[0039] Em alternativa, R11 pode ser selecionado a partir de alquila (C1-C6), NR4R4 e NR4COR4; um de R6, R7, R8, R9 e R12 se encontra presente e não representa H; e o restante de R6, R7, R8, R9 e R12 se presente são H.

[0040] Alternativamente, R6, R8, R9, R11 e R12 podem ser H; e R7 pode ser selecionados a partir de halogênio, alquila (C1-C6), e alquila O(C1-C6), particularmente a partir de halogênio e alquila O(C1-C6), mais particularmente a partir de halogênio e OMe.

[0041] Numa outra alternativa, R6, R8, R9, R11 e R12 podem ser H; e R7 pode ser selecionado a partir de halogênio, CN, alquila O(C1-C6) e alquila (C1-C6) opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, particularmente a partir de halogênio, CN, Me, CF3 e OMe.

[0042] Alternativamente, R6, R7, R8, R9, R11 e R12 podem ser todos H.

[0043] Em um aspecto da invenção, R2 é selecionado a partir de NR4SO2R4, alquila, cicloalquila, arila e heterocicloalquila, em que alquila e cicloalquila são opcionalmente substituídas por 1, 2 ou 3 substituintes selecionados a partir de 1, 2 ou 3 substituintes selecionados a partir de (NR4)nSO2R4, OH e CN, e ainda opcionalmente substituídos por 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados a partir de halogênio, alquila (C1-C6) opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, cicloalquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, e alquila O(C1-C6) opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, e mais ainda, opcionalmente substituído com (i) 2 substituintes sobre um único átomo, que são considerados em conjunto com o átomo ao qual eles estão ligados para formar uma estrutura cíclica selecionada de entre cicloalquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 grupos selecionados a partir de halogênio e alquila C1-C4, ou com (ii) um substituinte que é tomado em conjunto com um dos grupos R4 para formar um heterocicloalquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio; e em que arila e heterocicloalquila são opcionalmente substituídas com 1, 2 ou 3 substituintes selecionados a partir de 1, 2 ou 3 substituintes selecionados a partir de (NR4)nSO2R4, OH e CN, e ainda opcionalmente substituído por 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados a partir de halogênio, alquila (C1-C6) opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, cicloalquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, e alquila O(C1-C6) opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio.

[0044] Num outro aspecto da invenção, R2 é selecionado a partir de NR3SO2R3, alquila, cicloalquila, arila e heteroarila, em que alquila e cicloalquila são opcionalmente substituídos com 1, 2 ou 3 substituintes selecionados a partir de (NR4)nSO2R4, OH e CN, e ainda opcionalmente substituídos com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados a partir de halogênio, alquila (C1-C6) opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, cicloalquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, e alquila O(C1-C6) opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, e mais ainda, opcionalmente, substituído com (i) 2 substituintes sobre um único átomo, que são considerados em conjunto com o átomo ao qual eles estão ligados para formar uma estrutura cíclica selecionada de entre cicloalquila e heterocicloalquila, ambas as quais são opcionalmente substituídas por 1, 2 ou 3 grupos selecionados a partir de halogênio, alquila C1-C4, alquila C(O)C1-C4 e alquila C(O)O-C1-C4, ou com (ii) um substituinte que é tomado em conjunto com um dos grupos R4 (se presente) para formar um heterocicloalquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio; e em que arila e heteroarila estão opcionalmente substituídos com 1, 2 ou 3 substituintes selecionados a partir de (NR4)nSO2R4, OH e CN, ainda opcionalmente substituídos com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados a partir de halogênio, alquila (C1-C6) opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, cicloalquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, e alquila O(C1-C6) opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio.

[0045] Em particular, R2 é selecionado a partir de NR4SO2R4, alquila e cicloalquila, em que alquila e cicloalquila são opcionalmente substituídos como descrito no parágrafo anterior; em particular, em que o alquila e o cicloalquila é substituído com pelo menos um substituinte selecionado a partir de (NR4)nSO2R4, em que n é 0 ou 1, OH e CN, e em que alquila e cicloalquila é ainda opcionalmente substituído com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados de entre halogênio, CN, COOR4, CF3, alquila (C1-C6) opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, cicloalquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos halogênio, e alquila O(C1-C6) opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, ou com 2 substituintes num único átomo de que são tomados em conjunto com o átomo ao qual eles estão ligados para formar uma estrutura cíclica selecionada de entre cicloalquila e heterocicloalquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 grupos selecionados a partir de halogênio e alquila C1-C4.

[0046] Em particular, R2 é selecionado a partir de NR3SO2R3, alquila e cicloalquila, em que alquila e cicloalquila são opcionalmente substituídos como descrito no parágrafo anterior; em particular, em que o alquila e o cicloalquila é substituído com pelo menos um substituinte selecionado a partir de (NR4)nSO2R4, em que n é 0 ou 1, OH e CN, e em que alquila e cicloalquila é ainda opcionalmente substituído com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados de entre halogênio, CN, COOR4, CF3, alquila (C1-C6) opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, cicloalquila opcionalmente substituídas por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, e alquila O(C1-C6) opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, ou com 2 substituintes num único átomo de que são tomados em conjunto com o átomo ao qual eles estão ligados para formar uma estrutura cíclica selecionada de entre cicloalquila e heterocicloalquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 grupos selecionados a partir de halogênio, alquila C1-C4, alquila C(O)C1-C4 e alquila C(O)O- C1-C4.

[0047] Em particular, R2 pode ser alquila substituído com pelo menos um substituinte selecionado a partir de (NR4)nSO2R4, OH e CN, e ainda opcionalmente substituído com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados a partir de halogênio, alquila (C1-C6) opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, cicloalquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, e alquila O(C1-C6) opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, e mais ainda, opcionalmente, substituído com (i) 2 substituintes num único átomo de que são tomados em conjunto com o átomo ao qual eles estão ligados para formar uma estrutura cíclica selecionada de entre cicloalquila facultativamente substituído por 1, 2 ou 3 grupos selecionados a partir de halogênio e alquila C1-C4, ou com (ii) um substituinte que é tomado em conjunto com um dos grupos R4 para formar um heterocicloalquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio.

[0048] Em particular, R2 pode ser alquila substituído com pelo menos um substituinte selecionado a partir de (NR4)nSO2R4, OH e CN, e ainda opcionalmente substituído com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados a partir de halogênio, alquila (C1-C6) opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, cicloalquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, e alquila O(C1-C6) opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, e mais ainda, opcionalmente, substituído com (i) 2 substituintes sobre um único átomo, que são considerados em conjunto com o átomo ao qual eles estão ligados para formar uma estrutura cíclica selecionada de entre cicloalquila e heterocicloalquila, ambas as quais são opcionalmente substituídas por 1, 2 ou 3 grupos selecionados a partir de halogênio, alquila C1-C4, alquila C(O)C1-C4 e alquila C(O)O-C1-C4, ou com (ii) um substituinte que é tomado em conjunto com um dos grupos R4 (se presente) para formar um heterocicloalquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio.

[0049] Em particular, R2 pode ser (CH2)pC(R13)2(CH2)qQ, em que Q é (NR4)nSO2R4, OH ou CN, em particular, em que Q é SO2R4,, em que p e q são independentemente 0, 1 ou 2, e em que (i) R13 é independentemente selecionados a partir do grupo que consiste em H e (C1-C4)alquila, em particular, em que ambos os grupos R13 são H, em que ambos os grupos R13 são metil, ou (ii) um de R13 é selecionado de entre o grupo que consiste em H e (C1-C4)alquila e o outro R13 é tomado juntamente com R4, se presente, para formar um heterocicloalquila de 3-6 membros opcionalmente substituído por 1, 2 ou 3 grupos selecionados a partir de halogênio e alquila C1-C4, ou (iii) os grupos R13 são tomados em conjunto com o átomo ao qual eles estão ligados para formar um estrutura cíclica selecionada a partir de (C3-C6)cicloalquila e heterocicloalquila de 3-6 membros opcionalmente substituído por 1, 2 ou 3 grupos selecionados a partir de halogênio e alquila C1-C4, em particular ciclopropanil, tetra-hidropiranil, piperidinil ou N-metilpiperidinil.

[0050] Em particular, R2 pode ser (CH2)pC(R13)2(CH2)qQ, em que Q é (NR4)nSO2R4, OH ou CN, em particular, em que Q é SO2R4,, em que p e q são independentemente 0, 1 ou 2, e em que (i) R13 é independentemente selecionado a partir do grupo que consiste em H e (C1-C4)alquila, em particular, em que ambos os grupos R13 são H, em que ambos os grupos R13 são metil, ou (ii) um de R13 é selecionado de entre o grupo que consiste em H e (C1-C4)alquila e o outro R13 é tomado juntamente com R4, se presente, para formar um heterocicloalquila de 3-6 membros opcionalmente substituído por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, ou (iii) grupos R13 são tomados em conjunto com o átomo ao qual eles estão ligados para formar uma estrutura cíclica selecionada a partir de (C3-C6)cicloalquila e heterocicloalquila de 3 a 6 membros opcionalmente substituído por 1, 2 ou 3 grupos selecionados a partir de halogênio, alquila C1-C4, alquila C(O)C1-C4 e alquila C(O)O-C1-C4, em particular ciclopropanila, ciclobutila, tetra-hidropiranila, piperidinila, N- metilpiperidinila, ou N-etoxicarbonilpiperidinila.

[0051] Alternativamente, R2 pode ser selecionado a partir de NR3SO2R3.

[0052] Neste e outros aspectos da presente invenção, R3 pode ser H ou alquila (C1-C4) opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, particularmente H ou (C1- C4)alquila, mais particularmente H ou Me.

[0053] Em alguns aspectos da invenção, R4 pode ser alquila (C1-C4) opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio ou (C3-C6)cicloalquila, opcionalmente substituído por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio. Em particular, R4 pode ser metil, ciclopropil ou trifluorometil.

[0054] Num outro aspecto da invenção, R2 é selecionado a partir de (NR4)nSO2R4, alquila, cicloalquila, arila e heteroarila, em que alquila, cicloalquila, arila e heteroarila é substituído com (NR4)nSO2R4, e em que alquila e cicloalquila é ainda opcionalmente substituído com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados de entre halogênio, CN, COOR4, CF3, alquila (C1C6) opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, cicloalquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, e alquila O(C1-C6) opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, ou com dois substituintes em um único átomo, que são considerados em conjunto com o carbono ao qual eles estão ligados para formar cicloalquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 grupos selecionados a partir de halogênio e alquila C1-C4, e em que arila e heteroarila é ainda opcionalmente substituído com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados de entre halogênio, CN, COOR4, CF3, alquila (C1C6) opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, cicloalquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, e alquila O(C1-C6) opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio.

[0055] Num outro aspecto da invenção, R2 é selecionado a partir deNR3SO2R3, alquila, cicloalquila, arila e heteroarila, em que alquila, cicloalquila, arila e heteroarila é substituído com (NR4)nSO2R4, e em que alquila e cicloalquila é ainda opcionalmente substituído com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados de entre halogênio, CN, COOR4, CF3, alquila (C1C6) opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, cicloalquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, e alquila O(C1-C6) opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, ou com dois substituintes em um único átomo, que são considerados em conjunto com o carbono ao qual eles estão ligados para formar cicloalquila ou heterocicloalquila, ambos os quais são opcionalmente substituídos por 1, 2 ou 3 grupos selecionados a partir de halogênio, alquila C1-C4, alquila C(O)C1-C4 e alquila C(O)O-C1-C4, e em que arila e heteroarila é ainda opcionalmente substituído com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados de entre halogênio, CN, COOR4, CF3, alquila (C1C6) opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, cicloalquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, e alquila O(C1-C6) opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio.

[0056] Por exemplo, R2 pode ser selecionado a partir de NR3SO2R3, alquila, cicloalquila, arila e heteroarila, em que alquila, cicloalquila, arila e heteroarila é substituído com (NR4)nSO2R4, e em que alquila, cicloalquila, arila e heteroarila é ainda opcionalmente substituído com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados de entre halogênio, CN, CF3, alquila (C1-C6) opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio e alquila O(C1-C6) opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio.

[0057] A configuração estereoquímica sobre o centro quiral obrigatório na entidade química de fórmula (I) (ou seja, o centro quiral adjacente ao grupo -(CH)m pode ser S. Em particular, quando n é 1 a configuração estereoquímica em torno do centro quiral pode ser S. Mais particularmente, quando m é 1, a configuração estereoquímica em torno do centro quiral pode ser S.

[0058] A configuração estereoquímica sobre o centro quiral pode ser R. Em particular, quando n é 2, a configuração estereoquímica em torno do centro quiral pode ser R. Mais particularmente, quando m é 2, a configuração estereoquímica em torno do centro quiral pode ser R.

[0059] Em um aspecto, a invenção compreende um composto a partir do grupo consistindo de:

e os tautômeros, sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos e estereoisômeros dos mesmos.

Aplicações Terapêuticas

[0060] Como mencionado anteriormente, as entidades químicas da presente invenção são inibidores potentes e seletivos de ATR. Elas são, portanto, úteis no tratamento de condições de doença para as quais o excesso de atividade de ATR é um fator causador ou em que a atividade de ATR é particularmente necessária para a sobrevivência das células não saudáveis.

[0061] Por conseguinte, a presente invenção proporciona um composto de fórmula (I) para utilização em medicina.

[0062] A presente invenção também proporciona a utilização de um composto de fórmula (I) na fabricação de um medicamento para o tratamento ou prevenção de uma doença ou condição na qual esteja implicada a atividade de ATR.

[0063] A presente invenção também proporciona um composto de fórmula (I) para utilização no tratamento ou prevenção de uma doença ou condição na qual esteja implicada a atividade de ATR.

[0064] A presente invenção também fornece um método de tratamento de uma doença ou condição em que a atividade de ATR é implicada compreendendo a administração a um indivíduo em necessidade do mesmo de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de fórmula (I).

[0065] Num aspecto, a doença ou condição em que está implicada a atividade de ATR é câncer.

[0066] Num aspecto, a doença ou condição na qual a atividade da ATR está implicada é o câncer do pulmão, câncer da próstata, melanoma, câncer do ovário, câncer da mama, câncer do endométrio, câncer do rim, câncer gástrico, sarcomas, carcinoma da cabeça e do pescoço, tumores do sistema nervoso central e as suas metástases, e também para o tratamento de pacientes com leucemia mielóide aguda.

[0067] Outras doenças ou condições em que a atividade de ATR está implicada incluem, mas não estão limitadas a, doenças malignas hematológicas, tais como leucemia, mieloma múltiplo, os linfomas tais como a doença de Hodgkin, linfomas não-Hodgkin (incluindo linfoma das células do manto), e síndromes mielodisplásicas, e também tumores sólidos e suas metástases, tais como câncer da mama, câncer do pulmão (câncer do pulmão de células não pequenas (NSCLC), câncer do pulmão de células pequenas (SCLC), o carcinoma de células escamosas), o câncer do endométrio, tumores do sistema nervoso central, tais como gliomas, tumor neuroepitelial disembrioplástico, glioblastoma multiforme, gliomas mistos, meduloblastoma, retinoblastoma, neuroblastoma, germinoma e teratoma, cânceres do trato gastrointestinal, tais como o câncer gástrico, o câncer esofágico, carcinoma hepatocelular (fígado), colangiocarcinomas, carcinomas do cólon e retal, cânceres do intestino delgado, câncer de pâncreas, câncer de pele, como melanomas (em particular melanoma metastático), cânceres da tireóide, câncer de cabeça e pescoço e câncer das glândulas salivares, próstata, testículos, ovário, colo do útero, útero, vulva, bexiga, rim (incluindo carcinoma de células renais, células claras e oncocitoma renal), carcinomas de células escamosas, sarcomas, tais como osteossarcoma, condrossarcoma, leiomiossarcoma, sarcoma de tecido mole, sarcoma de Ewing, tumor estromal gastrointestinal (GIST), sarcoma de Kaposi e cânceres pediátricos, como rabdomiossarcoma e neuroblastomas.

[0068] As entidades químicas da presente invenção podem ser administradas em combinação com outros agentes terapêuticos. Em particular, as entidades químicas da presente invenção podem ser administradas em combinação com agentes citotóxicos. Quando a terapia combinada é empregue, as entidades químicas da presente invenção e os referidos agentes de combinação podem existir na mesma ou em diferentes composições farmacêuticas, e podem ser administrados separadamente, sequencialmente ou simultaneamente. As entidades químicas da presente invenção, e outros agentes terapêuticos podem estar presentes numa concentração em quaisquer proporções, por exemplo, o produto de combinação pode conter de 0,01% em peso até 99,99% em peso das entidades químicas da presente invenção, e podem igualmente conter de 0,01% em peso até 99,99% em peso de outros agentes terapêuticos.

[0069] Os agentes adequados a serem utilizados em combinação incluem os seguintes: i. fármacos antiproliferativos/antineoplásicos e suas combinações, como utilizadas em oncologia médica, tais como agentes alquilaantes (por exemplo cisplatina, carboplatina, ciclofosfamida, mostarda nitrogenada, melfalano, clorambucil, bussulfano e nitrosoureias); antimetabolitos (por exemplo, antifolatos, tais como fluorpirimidinas como 5-fluoruracila e tegafur, raltitrexed, metotrexato, citosina arabinosídeo, hidroxiuréia e gencitabina); antibióticos anti tumorais (por exemplo, antraciclinas como adriamicina, bleomicina, doxorrubicina, daunomicina, epirrubicina, idarrubicina, mitomicina-C, dactinomicina e mitramicina); agentes antimitóticos (por exemplo alcalóides de vinca como vincristina, vinblastina, vindesina e vinorelbina e taxóides como o paclitaxel e taxotere); e inibidores da topoisomerase (por exemplo epipodofilotoxinas como etoposídeo e teniposídeo, amsacrina, topotecano e as camptotecinas); ii. agentes citostáticos, tais como anti-estrogênios (por exemplo, tamoxifeno, toremifeno, raloxifeno, droloxifeno e iodoxifeno), os reguladores negativos de receptor de estrogênio (por exemplo, fulvestrant), anti- androgênios (por exemplo, bicalutamida, flutamida, nilutamida e acetato de ciproterona), antagonistas de LHRH ou agonistas de LHRH (por exemplo, goserelina, leuprorelina e buserelina), progestogênicos (por exemplo, acetato de megestrol), inibidores da aromatase (por exemplo, como anastrozol, letrozol, vorazol e exemestano) e inibidores de 5D-redutase, tal como finasterida; iii. agentes anti-invasão (por exemplo, inibidores da família da quinase c-Src como o 4-(6-cloro-2,3- metilenedioxianilino)-7-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]-5- tetra-hidropiran-4-iloxiquinazolina (AZD0530; Pedido de Patente Internacional WO 01/94341) e N -(2-cloro-6- metilfenil)-2-{6-[4-(2-hidroxietil)piperazin-1-il]-2- metilpirimidin-4-ilamino}tiazol-5-carboxamida (dasatinibe, BMS-354825, J. Med. Chem. 2004, 47, 6658-6661), e inibidores de metaloproteinase como marimastate e inibidores da função do receptor ativador do plasminogênio da uroquinase); iv. inibidores da função do fator de crescimento: por exemplo, tais inibidores incluem anticorpos do fator de crescimento e anticorpos do receptor do fator de crescimento (por exemplo, o anticorpo trastuzumabe anti-erbB2 [HerceptinTM] e o anticorpo anti-erbB1 cetuximabe [C225]); tais inibidores incluem, por exemplo, inibidores da tirosina quinase, por exemplo, inibidores da família do fator de crescimento da epiderme (por exemplo, inibidores de quinase de tirosina da família de EGFR, tais como N-(3-cloro-4- fluorfenil)-7-metoxi-6-(3-morfolinopropoxi)quinazolin-4- amina (gefitinibe, ZD1839), N-(3-etinilfenil)-6,7-bis (2- metoxietoxi)quinazolin-4-amina (erlotinibe, OSI-774) e 6- acrilamido-N-(3-cloro-4-fluorfenil)-7-(3- morfolinopropoxi)quinazolin-4-amina (CI 1033) e inibidores da tirosina quinase erbB2, tais como lapatinibe), os inibidores da família do fator de crescimento de hepatócitos, inibidores da família do fator de crescimento derivado das plaquetas, tais como imatinibe, inibidores de serina/treonina quinases (por exemplo, inibidores de sinalização de Ras/Raf tais como os inibidores da farnesil transferase, por exemplo, sorafenibe (BAY 43-9006)) e inibidores da sinalização celular através de MEK e/ou através da via das quinases PI3K, mTOR e AKT; v. agentes antiangiogêncis tais como aqueles que inibem os efeitos do fator de crescimento endotelial vascular, [por exemplo, o anticorpo do fator de crescimento celular endotelial bevacizumabe anti-vascular (AvastinTM) e inibidores de tirosina quinase do receptor de VEGF, tais como 4-(4-bromo- 2-f luoroanilino)-6-7- metoxi-(1- metilpiperidin-4-ilmetoxi)quinazolina (ZD6474; Exemplo 2 no documento WO 01/32651), 4- (4-flúor-2-metilindol-5-iloxi)- 6-metoxi-7- (3-pirrolidin-l-ilpropoxi)quinazolina (AZD2171; Exemplo 240 no documento WO 00/47212), vatalanib (PTK787; documento WO 98/35985) e a SUl 1248 (sunitinibe; documento WO 01/60814), e compostos que funcionam por outros mecanismos (por exemplo, linomida, inibidores da função de integrina αvβ3 e angiostatina)]; vi. agentes danificadores vasculares, tais como combretastatina A4 e compostos divulgados nos Pedidos Internacionais de Patente WO 99/02166, WO 00/40529, WO 00/41669, WO 01/92224, WO 02/04434 e WO 02/08213; vii. terapias anti-sentido, por exemplo, aquelas que são dirigidas para os alvos listados acima, tais como ISIS 2503, um agente anti-sentido anti-ras; viii. abordagens de terapia de genes, incluindo abordagens para substituir genes aberrantes, tais como p53 aberrante ou BRCA1 ou BRCA2 aberrante, abordagens GDEPT (terapia pró-fármaco de enzima dirigida ao gene), tais como aquelas que utilizam citosina-desaminase, timidina quinase ou uma enzima nitro-redutase bacteriana e abordagens para aumentar a tolerância do paciente à quimioterapia ou radioterapia, tal como terapia de gene de resistência a múltiplos fármacos; ix. abordagens de imunoterapia, incluindo abordagens ex-vivo e in-vivo para aumentar a imunogenicidade das células tumorais do paciente, tais como transfecção com citocinas, tais como interleucina 2, interleucina 4 ou fator de estimulação de colônias de macrófago-granulócitos, abordagens para diminuir a anergia de célula T, abordagens utilizando células imunitárias transfectadas, tais como células dendríticas transfectadas com citocinas, abordagens utilizando linhagens celulares tumorais transfectadas com citocinas e abordagens utilizando anticorpos anti- idiotípicos; e x. agentes modificadores de cromatina que permitem a reversão das alterações epigenéticas envolvidas na carcinogênese, modificando, por exemplo, agentes demetilantes de DNA tais como 5' azacitidina e decitabina (5-aza-2'desoxicitidina, dezocitidina) e inibidores de desacetilase, tais como vorinostat (ácido hidroxâmico suberoilanilida, Zolinza) e peptídeo depsi (Romidepsin, Istodax).

[0070] De acordo com um outro aspecto da invenção, é proporcionada uma combinação compreendendo o produto: (A) um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável, solvato ou um estereoisêmero do mesmo, como aqui definido anteriormente; e (B) outro agente terapêutico que é útil no tratamento de câncer e/ou uma doença proliferativa, em que cada um dos componentes (A) e (B) é formulado numa mistura com um adjuvante, diluente ou veículo farmaceuticamente aceitável.

[0071] Tais produtos de combinação proporcionam a administração de um composto da invenção em conjunto com outro agente terapêutico, e podem, assim, ser apresentados ou como formulações separadas, em que pelo menos uma das referidas formulações compreendem um composto da invenção e pelo menos uma compreende o outro agente terapêutico, ou podem ser apresentadas (isto é, formuladas) como uma preparação combinada (ou seja, apresentada como uma única formulação que inclui um composto da invenção e outro agente terapêutico).

[0072] Assim, é ainda proporcionado: (1) uma formulação farmacêutica incluindo um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável, solvato ou um estereoisômero do mesmo, como aqui definido anteriormente, um outro agente terapêutico que é útil no tratamento de câncer e/ou uma doença proliferativa, e um adjuvante, diluente ou veículo farmaceuticamente aceitável; e (2) um kit de partes que compreende os componentes: (a) uma formulação farmacêutica incluindo um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável, solvato ou um estereoisômero do mesmo, como aqui definido anteriormente, em mistura com um adjuvante, diluente ou veículo farmaceuticamente aceitável; e (b) uma formulação farmacêutica incluindo um outro agente terapêutico que é útil no tratamento de câncer e/ou uma doença proliferativa, em mistura com um adjuvante, diluente ou veículo farmaceuticamente aceitável, em que os componentes (a) e (b) são cada um proporcionados em uma forma que é adequada para administração em conjunto com a outra.

[0073] A invenção proporciona ainda um processo para a preparação de um produto de combinação tal como aqui anteriormente definido, processo esse que compreende a associação de um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável, solvato ou um estereoisômero do mesmo, como aqui definido anteriormente, com o outro agente terapêutico que é útil no tratamento de câncer e/ou uma doença proliferativa, e pelo menos um adjuvante farmaceuticamente aceitável, diluente ou veículo.

[0074] Por “colocar em associação”, significa que os dois componentes se tornam adequadas para administração em conjunto um com o outro.

[0075] Assim, em relação ao processo para a preparação de um kit de partes como aqui anteriormente definido, por trazer os dois componentes “em associação com” um ao outro, inclui- se que os dois componentes do kit de partes podem ser: (i) proporcionados como formulações separadas (isto é, independentemente um do outro), que são subsequentemente reunidas para utilização em conjunção uma com a outra em terapia de combinação; ou (ii) embalados e apresentados conjuntamente como componentes separados de um “pacote de combinação” para utilização em conjunto uns com os outros em terapia de combinação. Definições

[0076] O termo “alquila” inclui os resíduos de hidrocarboneto saturado, incluindo: -grupos lineares de 1 a 10 átomos de carbono (C1-C10) ou de 1 a 6 átomos de carbono (C1-C6), ou de 1 a 4 átomos de carbono (C1-C4). Exemplos de tais grupos alquila incluem, mas não estão limitados, a C1 (meti), C2 (etil), C3 (propil) e C4 (butil). -grupos ramificada de 3 a 10 (ou seja, entre 3 e 10) átomos de carbono (C3 -C10), ou de até 7 átomos de carbono (C3-C7), ou de um máximo de 4 átomos de carbono (C3-C4). Exemplos de tais grupos alquila incluem, mas não estão limitados a, C3 (1-metiletil), C4 (1-metilpropil, 2-metilpropil, 1,1- dimetiletil) e C5 -(1,1-dimetil-propil, 2,2-dimetilpropil, 3-metilbutil, pentan-2-ilo, pentan-3-il). cada um opcionalmente substituído tal como indicado acima.

[0077] Salvo indicação em contrário, o halogênio é selecionado a partir de F, Cl, Br e I; em particular, o halogênio é F.

[0078] Cicloalquila é como definido acima. Os grupos cicloalquila podem conter de 3 a 10 átomos de carbono, ou de 4 a 10 átomos de carbono, ou de 5 a 10 átomos de carbono, ou de 3 a 6 átomos de carbono. Exemplos de grupos cicloalquila monoclicos adequados incluem ciclopropil, ciclobutil, ciclopentilo, ciclo-hexil e ciclo-heptil. Exemplos de grupos cicloalquila biclicos adequados incluem decahidronaftaleno e octahidro-1H-indeno. Cicloalquila pode ser fundido com arila. Exemplos de grupos cicloalquila adequados, quando fundidos com arila, incluem indanil e 1,2,3,4- tetrahidronaftil e.

[0079] Heterocicloalquila é um anel mono ou bicíclico saturado de 3 a 10 membros C-ligado ou N-ligado, em que o o referido anel heterocicloalquila podem conter 1, 2, 3 ou 4 heteroátomos selecionados independentemente a partir de S, N e O, em que um átomo de N ou S no anel pode ser substituído com um oxigênio para formar um grupo N-óxido, sulfóxido ou sulfona. Exemplos de grupos heterocicloalquila adequados incluem tetrahidrotiofeno e, particularmente, oxiranilo, aziridinilo, azetidinilo, tetrahidrofuranilo, pirrolidinilo, tetrahidropiranilo, piperidinilo, N- metilpiperidinilo, morfolinilo, N-metil morfolinilo, piperazinilo, N-metilpiperazinilo, azepanilo, oxazepanilo e diazepanilo.

[0080] Arila é como definido acima. Tipicamente, arila será opcionalmente substituído com 1, 2 ou 3 substituintes. Os substituintes opcionais são selecionados dentre os acima referidos. Exemplos de grupos arila adequados incluem fenil e naftil (cada um opcionalmente substituído tal como indicado acima).

[0081] Heteroarila é como definido acima. Tipicamente, os grupos heteroarila contêm 5, 6, 9, 10, 12, 13 ou 14 membros no anel em que 1, 2, 3 ou 4 membros no anel são independentemente selecionados a partir de O, S e N. Numa modalidade, um grupo heteroarila pode ser 5 , 6, 9 ou 10 membros, por exemplo, monociclico de 5 membros, monocíclico de 6 membros, bicíclico de anel fundido de 9 membros ou bicíclico de anel fundido de 10 membros.

[0082] Grupos heteroaromáticos monocíclicos incluem grupos heteroaromáticos contendo 5 a 6 membros do anel em que 1, 2, 3 ou 4 membros no anel são independentemente selecionados a partir de O, S e N.

[0083] Exemplos de grupos heteroarila adequados incluem indazolila, pirrolopiridinila e, em especial, tienila, furanila, pirrolila, pirazolila, imidazolila, oxazolila, isoxazolila, tiazolila, isotiazolila, triazolila, oxadiazolila, tiadiazolila, tetrazolila, piridinila, piridazinila, pirimidinila, pirazinila, indolila, benzimidazolila, benzotriazolila, quinolinila e isoquinolinila (opcionalmente substituídas tal como indicado acima).

[0084] O termo “C-ligado”, tal como em “heterocicloalquila C-ligada”, significa que o grupo heterocicloalquila é unido à parte restante da molécula através de um átomo de carbono do anel.

[0085] O termo “N-ligado”, tal como em “heterocicloalquila N-ligado”, significa que o grupo heterocicloalquila é unido à parte restante da molécula através de um átomo de nitrogênio do anel.

[0086] O termo “O-ligado”, tal como em “resíduo de hidrocarboneto O-ligado”, significa que o resíduo de hidrocarboneto é unido à parte restante da molécula através de um átomo de oxigênio.

[0087] “Sal farmaceuticamente aceitável” significa um sal fisiologicamente ou toxicologicamente tolerável e inclui, quando apropriado, os seus sais de adição de base farmaceuticamente aceitáveis e sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis. Por exemplo, (i) em que um composto da invenção contém um ou mais ácidos grupos, por exemplo, grupos carbóxi, sais de adição de base farmaceuticamente aceitáveis que podem ser formados incluem sais de sódio, potássio, cálcio, magnésio e amônio ou sais com aminas orgânicas, tais como, dietilamina, N-metil- glucamina, dietanolamina ou aminoácidos (por exemplo, lisina) e semelhantes; (ii) quando um composto da invenção contém um grupo básico, tal como um grupo amino, os sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis que podem ser formados incluem cloridratos, bromidratos, sulfatos, fosfatos, acetatos, citratos, lactatos, tartaratos, mesilatos, succinatos, oxalatos, fosfatos, tosilatos, esilatos, benzenossulfonatos, naftalenodissulfonatos, maleatos, adipatos, fumaratos, hipuratos, canforatos, xinafoatos, p-acetamidobenzoatos, dihidroxibenzoatos, hidroxinaftoatos, succinatos, ascorbatos, oleatos, bissulfatos e semelhantes.

[0088] Hemisais de ácidos e bases, também podem ser formados, por exemplo, sais de hemissulfato e hemicálcicos.

[0089] Para uma revisão de sais adequados, ver “Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection and Use” by Stahl and Wermuth (Wiley-VCH, Weinheim, Germany, 2002).

[0090] “Pró-fármaco” refere-se a um composto que é convertível in vivo por meios metabólicos (por exemplo, por hidrólise, redução ou oxidação) a um composto da invenção. Os grupos adequados para a formação de pró-fármacos são descritos em ‘The Practice of Medicinal Chemistry, 2nd Ed. pp561-585 (2003) and in F. J. Leinweber, Drug Metab. Res., 1987, 18, 379.

[0091] As entidades químicas da invenção podem existir em ambas as formas não solvatadas e solvatadas. O termo “solvato” é aqui utilizado para descrever um complexo molecular compreendendo o composto da invenção e uma quantidade estequiométrica de moléculas de solvente, um ou mais veículos farmaceuticamente aceitáveis, por exemplo, etanol. O termo “hidrato” é empregue quando o solvente é a água.

[0092] Sempre que as entidades químicas da invenção existem em uma ou mais formas geométrica, ótica, enantiomérica, diastereomérica e tautomérica incluindo mas não se limitando a formas cis- e trans-, formas E- e Z-, formas R-, S- e meso-, formas ceto- e enol-. A menos que indicado de outra forma uma referência a um composto particular inclui todas essas formas isoméricas, incluindo racêmica e outras misturas dos mesmos. Quando tais isômeros apropriados podem ser separados das suas misturas pela aplicação ou adaptação de métodos conhecidos (por exemplo, técnicas cromatográficas e técnicas de recristalização). Quando tais isômeros apropriados podem ser preparados por aplicação ou adaptação de métodos conhecidos (por exemplo, síntese assimétrica).

[0093] No contexto da presente invenção, as referências aqui feitas a “tratamento” incluem referências a tratamento curativo, paliativo e profilático.

Métodos Gerais

[0094] As entidades químicas de fórmula (I) devem ser avaliadas para as suas propriedades biofarmacêuticas, tais como a solubilidade e a estabilidade da solução (através de pH), permeabilidade, etc., a fim de selecionar a forma de dosagem mais apropriada e via de administração para o tratamento da indicação proposta. Elas podem ser administradas sozinhas ou em combinação com uma ou mais outras entidades químicas da invenção ou em combinação com um ou mais outros fármacos (ou como qualquer combinação dos mesmos). Geralmente, serão administradas como uma composição em associação com um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis. O termo “excipiente” é aqui utilizado para descrever qualquer ingrediente diferente do composto(s) da invenção, que pode transmitir ou uma característica funcional (isto é, controladora da taxa de liberação de fármacos) e/ou uma não-funcional (ou seja, auxiliar de processamento ou diluente) para as formulações. A escolha de excipiente irá, em grande extensão, depender de fatores tais como o modo particular de administração, o efeito do excipiente sobre a solubilidade e estabilidade, e a natureza da forma de dosagem.

[0095] Entidades químicas da invenção destinadas para utilização farmacêutica podem ser administradas como um sólido ou um líquido, tal como um comprimido, cápsula ou solução. As composições farmacêuticas adequadas para o fornecimento de entidades químicas da presente invenção e métodos para a sua preparação serão prontamente evidentes para os técnicos especialistas no assunto. Tais composições e métodos para a sua preparação podem ser encontrados, por exemplo, em Remington’s Pharmaceutical Sciences, 19th Edition (Mack Publishing Company, 1995).

[0096] Por conseguinte, a presente invenção proporciona uma composição farmacêutica compreendendo um composto de fórmula (I) e um veículo, diluente ou excipiente farmaceuticamente aceitável. O composto de fórmula (I) (ou um sal, solvato ou um estereoisômero farmaceuticamente aceitável do mesmo), e o veículo, diluente ou excipiente farmaceuticamente aceitável pode estar presente na composição em quaisquer proporções. Por exemplo, a composição farmacêutica pode conter entre 0,01% em peso a 99,99% em peso do composto de fórmula (I), e pode conter de forma semelhante a partir de 0,01% em peso até 99,99% em peso do veículo, diluente ou excipiente farmaceuticamente aceitável. Quando m é 1, o enantiômero (S) do composto de fórmula (I) pode estar presente na composição a 90% de excesso enantiomérico ou mais, de um modo preferido, em 95% de excesso enantiomérico ou maior. Quando m é 2, o enantiômero (R) do composto de fórmula (I) pode estar presente na composição a 90% de excesso enantiomérico ou mais, de um modo preferido, em 95% de excesso enantiomérico ou maior.

[0097] As entidades químicas da invenção também podem ser administradas diretamente na corrente sanguínea, no tecido subcutâneo, no músculo, ou em um órgão interno. Os meios adequados para administração parentérica incluem as vias intravenosa, intra-arterial, intraperitoneal, intratecal, intraventricular, intra-uretral, intra-esternal, intracraniana, intramuscular, intra-sinovial e subcutânea. Os dispositivos adequados para administração parenteral incluem injetores de agulha (incluindo microagulhas), injetores sem agulha e técnicas de infusão.

[0098] As formulações parentéricas são tipicamente soluções aquosas ou oleosas. Quando a solução é aquosa, excipientes tais como açúcares (incluindo, mas não restritos à glicose, manitol, sorbitol, etc), sais, carboidratos e agentes de tamponamento (preferencialmente para um pH de desde 3 a 9), mas, para algumas aplicações, eles podem ser mais adequadamente formulados como uma solução não-aquosa, estéril, ou como uma forma seca para ser utilizada em conjunto com um veículo adequado, tal como, água estéril isenta de pirogênio.

[0099] As formulações parentéricas podem incluir implantes derivados de polímeros degradáveis, tais como poliésteres (isto é, ácido polilático, polilactido, polilactídeo-co-glicólido, policaprolactona, polihidroxibutirato), poliortoésteres e polianidridos. Estas formulações podem ser administradas através de incisão cirúrgica no tecido subcutâneo, o tecido muscular ou diretamente em órgãos específicos.

[00100] A preparação de formulações parenterais em condições estéreis, por exemplo, por liofilização, pode ser facilmente conseguida utilizando técnicas farmacêuticas padrão bem conhecidas dos técnicos especialistas no assunto.

[00101] A solubilidade de entidades químicas de fórmula (I) utilizadas na preparação de soluções parenterais pode ser aumentada pelo uso de técnica de formulação adequadas, tais como a incorporação de co-solventes e/ou agentes que aumentam a solubilidade, tais como surfactantes, estruturas micelares e ciclodextrinas.

[00102] Numa modalidade, as entidades químicas da invenção podem ser administradas por via oral. A administração oral pode envolver engolir, de modo que o composto entra no trato gastrointestinal, e/ou bucal, lingual ou sublingual pela qual o composto entra na corrente sanguínea diretamente a partir da boca.

[00103] As formulações adequadas para administração oral incluem tampões sólidos, micropartículas sólidas, semi- sólidas e líquidos (incluindo sistemas de múltiplas fases ou dispersos), tais como comprimidos; cápsulas moles ou duras contendo multi- ou nano-partículas, líquidos, emulsões ou pós; pastilhas (incluindo preenchidas com líquido); comprimidos mastigáveis; geles; as formas de dosagem de dispersão rápida; filmes; óvulos; sprays; e adesivos bucais/mucoadesivos.

[00104] As formulações adequadas para administração oral podem também ser concebidas para proporcionar as entidades químicas da invenção numa forma de liberação imediata ou numa forma de taxas de sustentação, em que o perfil de liberação pode ser retardado, pulsado, controlado, sustentado ou retardado e sustentado ou modificado de tal maneira que permite otimizar a eficácia terapêutica das referidas entidades químicas. Os meios para fornecer as entidades químicas de uma maneira de sustentação da taxa são conhecidos na técnica e incluem polímeros de liberação lenta que podem ser formulados com as referidas entidades químicas para controlar a sua liberação.

[00105] Exemplos de polímeros de sustentação da taxa incluem polímeros degradáveis e não degradáveis que podem ser utilizados para liberar as referidas entidades químicas por difusão ou uma combinação de difusão e erosão do polímero. Exemplos de polímeros de sustentação da taxa incluem hidroxipropil metilcelulose, hidroxipropil celulose, metilcelulose, etilcelulose, celulose carboximetil sódica, álcool polivinílico, polivinilpirrolidona, goma xantana, polimetacrilatos, óxido de polietileno e polietilenoglicol.

[00106] Formulações líquidas (incluindo sistemas de múltiplas fases e dispersos) incluem emulsões, soluções, xaropes e elixires. Tais formulações podem ser apresentadas como agentes de enchimento em cápsulas moles ou duras (preparadas, por exemplo, a partir de gelatina ou hidroxipropilmetilcelulose) e compreendem tipicamente um veículo, por exemplo, água, etanol, polietilenoglicol, propilenoglicol, metilcelulose, ou um óleo adequado, e um ou mais agentes emulsionantes e/ou agentes de suspensão. As formulações liquidas também podem ser preparadas por reconstituição de um sólido, por exemplo, a partir de um sachê.

[00107] As entidades químicas da invenção também podem ser utilizadas em formas de dosagem de rápida dissolução, de desintegração rápida, tais como as descritas em Liang e Chen, Expert Opinion in Therapeutic Patents, 2001, 11 (6), 981986.

[00108] A formulação de comprimidos é discutida em Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets, Vol. 1, by H. Lieberman and L. Lachman (Marcel Dekker, New York, 1980).

[00109] Para administração a pacientes humanos, a dose diária total das entidades químicas da invenção está tipicamente no intervalo dentre 0,01 mg e 1000 mg, ou entre 0,1 mg e 250 mg, ou de 1 mg e 50 mg, dependendo, é claro, no modo de administração.

[00110] A dose total pode ser administrada em doses únicas ou divididas e pode, a critério do médico, estar fora do intervalo típico aqui dado. Estas dosagens baseiam-se em um indivíduo humano médio tendo um peso de cerca de 60 kg e 70 kg. O médico será prontamente capaz de determinar as doses para indivíduos cujo peso caia fora deste intervalo, tais como crianças e idosos.

Métodos Sintéticos

[00111] As entidades químicas da presente invenção podem ser preparadas de acordo com os procedimentos dos seguintes Esquemas e Exemplos, utilizando materiais apropriados e são adicionalmente exemplificadas pelos exemplos específicos aqui proporcionados abaixo. Além disso, utilizando os procedimentos aqui descritos, um técnico especialista no assunto pode prontamente preparar entidades químicas adicionais que caem dentro do escopo da presente invenção aqui reivindicado. As entidades químicas ilustradas nos exemplos não são, no entanto, para serem interpretadas como formando o único gênero que é considerado como a invenção. Os exemplos ilustram ainda detalhes para a preparação das entidades químicas da presente invenção. Os técnicos especialistas no assunto compreenderão prontamente que variações conhecidas das condições e processos dos procedimentos preparativos seguintes podem ser usadas para preparar estas entidades químicas.

[00112] As entidades químicas da invenção podem ser isoladas na forma dos seus sais farmaceuticamente aceitáveis, tais como os descritos anteriormente aqui neste documento anteriormente.

[00113] Pode ser necessário proteger grupos funcionais reativos (por exemplo, hidróxi, amino, tio ou carbóxi) nos intermediários utilizados na preparação de entidades químicas da presente invenção para evitar a sua participação indesejada numa reação que conduz à formação das entidades químicas. Os grupos protetores convencionais, por exemplo, os descritos por T. W. Greene and P. G. M. Wuts in “Protective groups in organic chemistry” John Wiley and Sons, 4th Edition, 2006, podem ser utilizados. Por exemplo, um grupo protetor adequado para utilização aqui é terc-butóxi carbonila (Boc), que é facilmente removido por tratamento com um ácido tal como ácido trifluoracético ou cloreto de hidrogênio num solvente orgânico tal como diclorometano. Alternativamente, o grupo protetor amino pode ser um grupo (Z) benziloxicarbonila que pode ser removido por hidrogenação com um catalisador de paládio sob uma atmosfera de hidrogênio ou grupo 9-fluorenilmetilxicarbonila (Fmoc) que pode ser removido por soluções de aminas orgânicas secundárias, tais como dietilamina ou piperidina nos solventes orgânicos. Os grupos carboxila são geralmente protegidos como ésteres, tais como metil, etil, benzil ou terc-butil que podem ser removidos por hidrólise na presença de bases tais como hidróxido de lítio ou de sódio. Os grupos protetores benzil também podem ser removidos por hidrogenação com um catalisador de paládio sob uma atmosfera de hidrogênio, enquanto os grupos terc-butila também podem ser removidos pelo ácido trifluoracético. Alternativamente um grupo protetor de éster de tricloroetila é removido com zinco em ácido acético. Um grupo hidróxi comum protetor adequado para utilização aqui é um éter de metila, condições de desproteção compreendem refluxo em HBr 48% aquoso, durante 1-24 horas, ou por agitação com tribrometo de borano em diclorometano durante 1-24 horas. Alternativamente, onde um grupo hidroxila é protegido como um éter benzílico, condições de desproteção incluem a hidrogenação com um catalisador de paládio sob uma atmosfera de hidrogênio.

[00114] As entidades químicas de acordo com a fórmula geral (I) podem ser preparadas utilizando métodos sintéticos convencionais, por exemplo, mas não se limitando a, as vias descritas no Esquema 1.

[00115] No esquema 1, * indica um centro quiral.

[00116] Os métodos de preparação de outros compostos de acordo com a Fórmula (I) serão evidentes para o técnico especialista no assunto.

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

[00117] A Figura 1 mostra a inibição dr ATR em células vivas por entidades químicas do Exemplo 1, Exemplo 2, Exemplo 3 e do Exemplo 11 e o efeito de cafeína, um inibidor de ATR.

[00118] A Figura 2(A) mostra o efeito de entidades químicas do Exemplo 1 e Exemplo 2, sozinhas ou em combinação com hidroxiureia (HU), sobre o nível de RPA ligado a cromatina. A Figura 2(B) mostra o efeito de entidades químicas do Exemplo 3 e Exemplo 11 sobre o nível de RPA ligado a cromatina.

[00119] A Figura 3(A) mostra o efeito de entidades químicas do Exemplo 1 e Exemplo 2, sozinhas ou em combinação com HU, sobre a progressão das células através do ponto de verificação de G2/M. A Figura 3(B) mostra o efeito de entidades químicas do Exemplo 3 e Exemplo 11 na progressão das células através da fase S.

[00120] Figura 4(A) mostra o efeito de entidades químicas dos Exemplo 1 e Exemplo 2, sozinhas ou em combinação com HU, na formação de focos nucleares da proteína de reparação de DNA 53BP1. A Figura 4(B) mostra o efeito de entidades químicas dos Exemplo 3 e Exemplo 11 na formação de focos nucleares da proteína de reparação de DNA 53BP1.

[00121] A Figura 5 mostra o efeito da entidade química do Exemplo 11 no perfil farmacocinético.

[00122] A Figura 6 mostra o efeito da entidade química do Exemplo 3 no perfil farmacocinético.

[00123] A Figura 7 mostra o efeito do Exemplo 11 sobre o volume de tumores em camundongos injetados por via intravenosa com células de linfoma Eμmyc.

[00124] A Figura 8 mostra o efeito do Exemplo 3 sobre o volume de tumores em camundongos injetados por via intravenosa com células de linfoma Eμmyc.

Exemplos

[00125] A invenção é ilustrada pelos seguintes exemplos não-limitativos de síntese, caracterização e ensaios biológicos, nos quais as seguintes abreviaturas e definições são usadas:

[00126] Daqui a diante, o termo “DCM” significa diclorometano, “CHCl3” significa clorofórmio, “MeOH” significa metanol, “EtOH” significa etanol, “EtOAc” significa acetato de etila, “THF” significa tetrahidrofurano, “AcCN” significa acetonitrila”, DMAP “significa 4-dimetilaminopiridina,” DIPEA “significa diisopropiletilamina,”DMF” significa dimetilformamida,”DME” significa dimetoxietano,”DMA” significa dimetilacetamida,” DMSO” significa dimetilsulfóxido, “Et2O” significa éter dietílico,”Hex”significa hexano, “EtOAc” significa acetato de etila, “BA/BE” significa ácido borônico/éster, “Pd(PPh3)4” significa tetraquis(trifenilfosfina)paládio, “Pd(Ph3P)2Cl2” significa diclorobis(trifenilfosfina)paládio (II), “Pd(dppf)Cl2.DCM” significa dicloreto de 1,1'-bis (difenilfosfino)ferrocenopaládio (II), complexo de diclorometano, “CDI” significa carbonildiimidazol, “Na2SO4” significa sulfato dissódico “MgSO4”significa sulfato de magnésio, “K2CO3” significa carbonato dipotássico, “Na2CO3” significa carbonato dissódico, “NaHCO3” significa bicarbonato de sódio, “NaH” significa hidreto de sódio, “TEA” significa trietilamina, “POCl3” significa oxicloreto de fósforo, “TFA” significa ácido trifluoracético, “TBAF” significa flúor tetrabutilamônio, “sat.” significa saturado, “aq.” significa aquoso, “Ar” significa argônio, “HPLC” significa cromatografia líquida de alta eficiência,”tR” significa tempo de retenção, “MS” significa espectrometria de massa, “CCF” significa cromatografia em camada fina, “Rf” significa fator de retardo, “g” significa grama(s), “mmol” significa milimol(s), “eq” significa equivalente(s), “mL” significa mililitro(s), “min” significa minuto(s), “h” significa hora(s), “rt” significa temperatura ambiente. Caracterização

[00127] Os espectros de RMN foram registrados em um espectrômetro Bruker Avance II 300 e espectrômetro Bruker Avance II 700 equipados com fase inversa 5mm QXI 700 S4, a unidade de gradiente Z e controlador de temperatura variável.

[00128] As medições de HPLC foram realizadas utilizando um HP 1100 da Agilent Technologies compreendendo uma bomba (binária) com desgaseificador, um amostrador automático, um forno de coluna, um detector de díodos (DAD) e uma coluna como especificado nos respectivos métodos abaixo. O fluxo da coluna foi dividido para um espectrômetro de MS. O detector de MS foi configurado com uma fonte de ionização de eletropulverização ou API/APCI. O azoto foi utilizado como gás nebulizador. A aquisição de dados foi realizada com o software ChemStation LC/MSD.

[00129] Método 1 de HPLC (LC-MS1): HPLC de fase reversa foi realizado em um Gemini-NX C18 (100 x 2,0 mm; 5um), Solvente A: água com ácido fórmico a 0,1%; Solvente B: acetonitrila com 0,1% de ácido fórmico. Gradiente: 5% de B a 100% de B em 8 minutos a 50°C, DAD.

[00130] Método 2 de HPLC (LC-MS2): HPLC de fase reversa foi realizado em um Gemini-NX C18 (100 x 2,0 mm; 5um), Solvente A: água com ácido fórmico a 0,1%; Solvente B: acetonitrila com 0,1% de ácido fórmico. Gradiente: 50% de B a 100% de B em 8 minutos a 50°C, DAD.

[00131] Método 3 de HPLC (LC-MS3): HPLC de fase reversa foi realizado em um Gemini-NX C18 (100 x 2,0 mm; 5um), Solvente A: água com ácido fórmico a 0,1%; Solvente B: acetonitrila com 0,1% de ácido fórmico. Gradiente: 5% de B a 40% de B em 8 minutos a 50°C, DAD.

[00132] Método 4 de HPLC( LC-MS4): HPLC de fase reversa foi realizado numa coluna Gemini C18 (50 x 2 mm, 3 um); Solvente A: água com ácido fórmico a 0,1%; Solvente B: acetonitrila com 0,1% de ácido fórmico. Gradiente: 10 a 95% de B em 4 min a uma taxa de fluxo de 0,5 mL/min, seguida por 2 min a 100% de B a 0,8 mL/min, temperatura controlada a 50°C, DAD.

[00133] Método 5 de HPLC( LC-MS5): HPLC de fase reversa foi realizado numa coluna Gemini C18 (50 x 2 mm, 3 um); Solvente A: água com bicarbonato de amônio 10 mM; Solvente B: acetonitrila. Gradiente: 20 a 100% de B em 3 min, a uma taxa de fluxo de 0,5 mL/min, seguida por 2 min a 100% de B a 0,8 mL/min, temperatura controlada a 40 °C, DAD.

[00134] Método 6 de HPLC (LC-MS6): HPLC de fase reversa foi realizado em um Gemini-NX C18 (100 x 2,0 mm; 5um), Solvente A: água com ácido fórmico a 0,1%; Solvente B: acetonitrila com 0,1% de ácido fórmico. Gradiente: 0% de B a 30% de B em 8 minutos a 50 °C, DAD.

[00135] “Massa encontrada” refere-se ao isótopo mais abundante detectado no HPLC-MS.

[00136] Valor Ótico: O valor ótico foi medido em um Perkin Elmer 241 digital com uma célula de 1 dm de comprimento. EXEMPLO 1

[00137] Uma mistura de intermediário X (100 mg, 0,30 mmol) com éster pinacólico ácido indol-4-borônico (90 mg, 0,37 mmol), diclorobis(trifenilfosfina) paládio (II) (40 mg) e uma solução aquosa 2 M de Na2CO3 (0,4 mL) em dioxano (2 mL), foi aquecida em um tubo de pressão elevada durante 3 h. A mistura escura foi arrefecida até à rt, diluída com água (20 mL) e extraída com EtOAc (2 x 15 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura, secas sobre Na2SO4 e concentradas em vácuo. O produto em bruto foi purificado primeiro por cromatografia flash em coluna (Isolute Si II 5 g) eluindo- se com um sistema de dissolvente de EtOAc/ciclo-hexano (de 50% a 100% em EtOAc) e depois com NH3 7 M em MeOH/DCM (a partir de 0% to 10% on NH3). Produto requerido foi recuperado na forma de sólido creme que foi triturado várias vezes com éter dietílico para se obter 12 mg do Exemplo 1.

[00138] 1H NMR (300 MHz, DMSO) □ 7,89 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,36 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,24 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,11 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 4,53 (d, J = 12,6 Hz, 1H), 4,33 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 4,00 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 3,89-3,82 (m, 2H), 3,70 (d, J = 9,8 Hz, 1H), 3,50 (t, J = 10,6 Hz, 1H), 3,19-3,02 (m, 2H), 2,89 (s, 3H), 1,83 (s, 3H), 1,81 (s, 3H),

[00139] LC-MS1: tR= 4,88 min, M+1 = 429,0. Intermediário X

[00140] A uma solução arrefecida (-5°C) do intermediário IX (100 mg, 0,3 mmol) em DMF (1 mL) foi adicionado terc- butóxido de sódio (35 mg, 0,3 mmol) e MeI (20 L, 0,3 mmol). Após 10 min de agitação mais terc-butóxido de sódio (35 mg, lavada com solução aquosa 1 M de HCl (2 x 15 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre Na2SO4 e concentradas em vácuo. O resíduo amarelo recuperado resultou no produto X requerido que foi utilizado sem purificação adicional (75 mg). Intermediário IX

[00141] Uma mistura do intermediário VIII (800 mg, 2,1 mmol) e metanossulfinato de sódio (200 mg, 3,8 mmol) em DMF (8 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 2 h. A mistura foi esfriada bruscamente pela adição de solução aquosa 1 M de Na2SO3. A mistura foi extraída com DCM (3 x 25 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas em vácuo, deixando o produto requerido como sólido creme, intermediário IX (550 mg).

[00142] Intermediário IX também pode ser sintetizado diretamente a partir do intermediário VI e VII. Uma mistura de VI e VII (400 mg) com metanossulfinato de sódio (150 mg, 1,4 mmol) em AcCN/DMF (10 mL, 4: 1) foi aquecida a 80°C durante 18 h. A mistura de reação foi temperada por meio da adição de sat. aq. Na2S2O3 e extraiu-se três vezes com DCM (3 x 20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas em vácuo. O sólido de cor creme, intermediário IX, foi usado na fase seguinte sem purificação adicional, 320 mg. Intermediário VIII

[00143] Uma mistura da mistura de VI e VII (800 mg) e iodeto de lítio (730 mg, 5,4 mmol) em dioxano (6 mL) foi aquecida a refluxo durante 3 h. A mistura foi arrefecida até à temperatura ambiente e foram adicionados água e salmoura. A mistura foi extraída com EtOAc (3 x 20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre Na2SO4, e concentradas em vácuo. O produto obtido foi utilizado sem purificação adicional, como intermediário VIII (1 g, quantitativo). Intermediário VI e VII

[00144] A uma solução do intermediário V (800 mg) em DCM (20 mL) com TEA (0,650 mL, 4,6 mmol) foi adicionado gota a gota cloreto de metanossulfonila (0,290 mL, 3,7 mmol). A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h e resfriada bruscamente por adição de sat. NaHCO3. As diferentes camadas foram separadas, e a camada aquosa foi extraída com DCM (3 x 15 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (30 mL), secas sobre Na2SO4 e concentradas em vácuo. O resíduo obtido (800 mg) foi uma mistura do intermediário VI e VII, mas utilizou-se ainda mais na etapa seguinte sem purificação adicional. Intermediário V

[00145] Para duas soluções do intermediário IV (400 mg, 1,4 mmol) em THF (40 mL) arrefecida a 0°C foi adicionada uma solução de borohidreto de lítio 2 M em THF (1 mL). As misturas resultantes foram agitadas a 0°C durante 15 min e à temperatura ambiente durante 1h. As duas misturas foram resfriadas bruscamente por adição de água, misturadas e extraídas com EtOAc (3 x 50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre Na2SO4 e concentradas em vácuo. Produto requerido foi obtido na forma de sólido branco, intermediário V (800 mg) e utilizado para a etapa seguinte sem purificação adicional. Intermediário III, IV

[00146] A uma solução do intermediário II (1.860 g, 5,7 mmol) em THF (280 mL) NaH foi adicionado em uma caldeira (suspensão a 60% em óleo mineral, 276 mg). A mistura resultante foi agitada a 60°C durante 5 h, mais NaH (60 mg) foi adicionado continuando o aquecimento durante 3 h. A mistura foi arrefecida até à temperatura ambiente, resfriada bruscamente por adição de água/gelo e os solventes removidos no rotavapor parcialmente. A mistura foi diluída com um pouco de água e extraída com EtOAc (3 x 20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre Na2SO4 e concentradas em vácuo.

[00147] O produto em bruto foi triturado com MeOH, filtrado e o filtrado foi concentrado em vácuo. O filtrado foi purificado por cromatografia flash em coluna eluindo com um sistema de solvente de EtOAc/ciclohexano (de 25% a 100% em EtOAc), mas uma quantidade muito pequena de produto necessário IV (30 mg) foi recuperada.

[00148] A camada aquosa foi acidificada e extraída com DCM (3 x 50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas em vácuo, deixando um sólido branco, que resultou no intermediário III (1,2 g).

[00149] A uma suspensão de Intermediário III (500 mg) em MeOH (25 mL) foi adicionada uma solução de (trimetilsilil)diazometano 2 M em THF (3 mL). As misturas resultantes foram agitadas à temperatura ambiente durante 3h, e mais trimetilsilildiazometano 2 M em THF (2,5 mL) foi adicionado. A agitação continuou à temperatura ambiente durante 5 h. As reações foram resfriadas bruscamente por adição de água, combinadas e extraídas com EtOAc (2 x 50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secas sobre Na2SO4 e concentradas em vácuo, deixando o produto requerido como intermediário IV, sólido creme claro (740 mg, 70%).

[00150] Intermediário IV pode também ser sintetizado a partir de intermediário II utilizando carbonato de césio como base na AcCN sob aquecimento até se completar a reação. Intermediário II

[00151] Uma mistura de I (1,5 g, 6,2 mmol) e (rac) 3- hidroximetilmorfolina (875 mg, 7,4 mmol) com DIPEA (1,6 mL, 9,3 mmol) em EtOH (30 mL) foi aquecida a 75°C durante 1 h 30 min. A mistura foi arrefecida até à temperatura ambiente e os solventes foram removidos em vácuo. O resíduo oleoso foi redissolvido em DCM (20 mL), lavado com solução sat. de NaHCO3 (3 x 20 mL), salmoura (30 mL), seco sobre Na2SO4 e concentrado em vácuo. Produto requerido, intermediário II (1.860 g, 93%) foi usado sem mais purificações adicionais. Intermediário I

[00152] Oxicloreto de fósforo (150 ml) foram adicionados gota a gota a metil 5-cloro-2,6-dioxo-3H-pirimidina-4- carboxilato (5 g, 24 mmol), utilizando um funil de pressão de compensação, durante 30 min a 0°C. Depois N, N- dietilanilina (5 ml, 32 mmol) foi adicionada. A mistura resultante foi aquecida até à temperatura ambiente e aquecida a refluxo durante 18 h. A mistura castanha foi arrefecida até à temperatura ambiente e o excesso de POCl 3 foi removido sob pressão reduzida. O resíduo oleoso foi vertido em gelo/água e extraído com éter dietílico (3 x 20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre Na2SO4 e concentradas em vácuo. O sólido castanho foi triturado com ciclohexano, deixando um sólido castanho- rosa, como intermediário I (4 g EXEMPLO

[00153] Exemplo foi sintetizado de acordo com um protocolo semelhante ao do Exemplo 1 por acoplamento de intermediário XI com éster pinacol de ácido indol-4- borônico.

[00154] 1H NMR (300 MHz, DMSO) □ 7,88 (d J = 7,4 Hz, 1H) 7,44 (d J = 8,0 Hz, 1H), 7,35 (d, J 3,0 Hz, 1H), 7,24 7,03 (m 2H), 4,56 (d, J = 12,3 Hz, 1H) 4,31 (dd, J = 10,8 3,1 Hz, 1H), 4,00 (d, J = 11,3 Hz, 1H) 3,85 3,78 (m, 5H) 3,52 - 3,58 (m, 1H), 3,31 - 3,02 (m, 6H), 2,89 (s, 3 H) 2,10- 2,02 (m 2H).

[00155] LC-MS1: tR= 4,54 min, M+1 = 471,0

[00156] Intermediário XI

[00157] uma solução arrefecida (0°C) do intermediário IX (75 mg, mmol) em DMF (3 mL) com bis (2-bromoetil) éter (75 L, mmol) foi adicionado t BuONa (55 mg) em um recipiente. A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 5 h. Mais tBuONa (25 mg) foi adicionado agitando à seguinte sem purificações adicionais. EXEMPLO 3

[00158] Exemplo 3 foi sintetizado de acordo com um protocolo semelhante ao utilizado para o Exemplo 1, por acoplamento de intermediário XII com o éster pinacol ácido indol-4-borônico.

[00159] 1H NMR (300 MHz, DMSO) □ 11,14 (s, 1H), 7,87 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,42 (bs, 1H), 7,23 (bs, 1H), 7,16 (d, t = 7,8 Hz, 1H), 4,55 (d, J = 12,9 Hz, 1H), 4,31 (dd, J = 10,7, 3,2 Hz, 1H), 4,00 (d, J = 11,2 Hz, 1H), 3, 93 — 3, 62 (m, 5H), 3,51 (t, J = 10,6 Hz, 1H), 3,23 - 3,05 (m, 5H), 2,79 (s, 3H), 2,11-2,05 (m, 2H).

[00160] LC-MS1: tR= 4,55 min, M+1 = 471,0.

[00161] [α]D = +40 (c 0,273, CHCl3/MeOH 9:1). Intermediário XII

[00162] Intermediário XII foi sintetizado seguindo um protocolo sintético similar ao que foi utilizado para a síntese do intermediário XI, mas utilizando na etapa 1, 3 (R) cloridrato de hidroximetilmorfolina.

[00163] Intermediário XIV, [α]D = +29 (c 0.52, CHCl3/MeOH 9:1).

[00164] Exemplo 4 foi sintetizado de acordo com um protocolo semelhante ao utilizado para o Exemplo 1, por acoplamento do intermediário XVI com éster pinacol ácido indol-4-borônico.

[00165] 1H NMR (300 MHz, DMSO) □ 11,12 (s, 1H), 7,91 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,41 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,35 (bs, 1H), 7,27 (bs, 1H), 7,09 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 4,53 (d, J = 12,1 Hz, 1H), 4,32 (dd, J = 11,0, 3,3 Hz, 1H), 3,98 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 3,92 — 3,74 (m, 2H), 3,69-3,65 (m, 1H), 3,49-3,44 (m, 1H), 3,21 — 2,96 (m, 2H), 2, 65-2, 60 (m, 1H), 1,88 (s, 6H), 0,92 - 0,67 (m, 4H).

[00166] LC-MS1: tR= 5,18 min, M+1 = 455,0. Intermediário XVI

[00167] Intermediário XVI foi sintetizado seguindo um protocolo semelhante ao utilizado para o Intermediário X por reação de alquilaação com iodeto de metila intermediário XVII.

[00168] Intermediário XVII foi sintetizado seguindo um protocolo semelhante ao utilizado para o Intermediário IX com ciclopropanosulfinato de sódio.

[00169]O composto 5 foi sintetizado de acordo com um protocolo semelhante ao utilizado para o Produto 1, por acoplamento de intermediário XVIII com éster pinacol ácido indol-4-borônico.

[00170] 1H NMR (300 MHz, DMSO) □ 7,93 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,45 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,39-7,32 (m, 2H), 7,12 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 4,58 - 4,35 (m, 2H), 4,01 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 3,89-3,84 (m , 2H), 3,74-3,70 (m, 1H), 3,65-3,55 (m, 2H), 3,53-3,50 (m, 1H), 3,27 - 3,02 (m, 2H).

[00171] LC-MS1: tR= 5,29 min, M+1 = 455,0

[00172] Intermediário XVIII foi preparado por reação do intermediário VIII com trifluormetanossulfinato de sódio em DMF a 80°C durante 2 h. EXEMPLO 6

[00173] Exemplo 6 foi sintetizado seguindo uma via sintética semelhante a utilizada para o exemplo 27, usando como precursor 3(R)-hidroximetilmorfolina.

[00174] LC-MS1: tR= 4,77 min, M+1 = 427,1,

[00175] 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 11,21 (s, 1H), 7,98 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,48 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,45 - 7,31 (m, 2H), 7,16 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 4,53 (m, 1H), 4,43 (m, 1H), 4,06 (m, 1H), 4,05 - 3,90 (m, 2H), 3,74 (m, 1H), 3,56 (m, 1H), 3,29 - 3,11 (m, 2H), 3,09 (s, 3H), 1,71 (m, 2H), 1,43 (m, 2H). EXEMPLO 7

[00176] Exemplo 7 foi sintetizado de acordo com um protocolo semelhante ao utilizado para o Exemplo 1, por acoplamento de intermediário IX com éster pinacol ácido indol-4-borônico.

[00177] 1H NMR (300 MHz, DMSO) □ 7,96 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,49 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,39 (d, J = 3,0 Hz, 1H), 7,35 (d, J = 3,0 Hz, 1H), 7,16 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 4,64 - 4,31 (m, 4 H), 4,11 — 4,00 (m, 1H), 4,02 - 3,84 (m, 2H), 3,77-3,74 (m, 1H), 3,57 (t, J = 11,7 Hz, 1H), 3,22 (t, J = 10,9 Hz, 1H), 3,15 (s, 3H), 3,13 - 3,03 (m, 1H).

[00178] LC-MS1: tR= 3,64 min, M+1 = 401,2 EXEMPLO 8

[00179] Uma mistura de intermediário X (50 mg, 0,14 mmol) e N-metil-1H-1,3-benzodiazol-2-amina (45 mg, 0,28 mmol) com Cs2CO3 (140 mg, 0. 43 mmol) em DMA (2 mL) foi aquecida num tubo de alta pressão, durante 7 dias. A mistura foi arrefecida até à temperatura ambiente e filtrada em rt e concentrada em vácuo. O resíduo oleoso foi redissolvido em EtOAc (25 mL), lavado com água (3 x 20 mL) e salmoura (30 mL). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4 e concentrada em vácuo.

[00180] O produto em bruto foi purificado por cromatografia flash em coluna (Isoluto Si II 5 g) eluindo- se com um sistema de solvente de EtOAc/ciclohexano (de 50% a 100% em EtOAc). Exemplo 8 foi recuperado limpo, (10 mg, 15%).

[00181] 1H NMR (300 MHz, DMSO) □ 8,14 (q, J = 4,8 Hz, 1H), 8,00 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,25 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,07 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 6,98 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 4,44-4,38 (m, 2H), 4,15 – 3,77 (m, 4H), 3,57 (t, J = 10,8 Hz, 1H), 3,23 (t, J = 10,8 Hz, 2H3,03 (s, 3H), 3,02 (d, J = 5,0 Hz, 3H), 1,83 (s, 3H), 1,82 (s, 3H).

[00182] LC-MS1: tR= 3,03 min, M+1 = 459,0.EXEMPLO 9

[00183] Exemplo 9 (sal de seguindo um protocolo semelhante 1, por acoplamento de intermediário XI com ácido B-1H- pirrol[2,3-c]piridina-4-ilborônico (cas1312368-90-3).

[00184] 1H NMR (300 MHz, DMSO) □ 11,68 (s, 1H), 8,90 (s, 1H), 8,72 (s, 1H), 8,30 (s, 1H, HCOOH), 7,62 (s, 1H), 7,12 (s, 1H), 4,63 (d, J = 13,0 Hz, 1H), 4,43 — 4,37 (m, 1H), 4,09-3,53 (m, 7H), 3,33-3,15 (m, 6H), 2,87 (s, 3H), 2,18- 1,95 (m, 2H).

[00185] LC-MS1: tR= 2,36 min, M+1 = 472,1 EXEMPLO 10

[00186] Exemplo 10 foi sintetizado seguindo um protocolo semelhante ao utilizado para o Exemplo 1, por acoplamento de intermediário XXI com o éster pinacol ácido indol-4- borônico.

[00187] Intermediário XXI foi sintetizado seguindo um protocolo sintético semelhante ao utilizado para a síntese de intermediário XII, mas utilizando na etapa 1, 3 (S)- hidroximetilmorfolina.

[00188] 1H NMR (300 MHz, DMSO) 11,21 (s, 1H), 7,94 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,48 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,42 (s, 1H), 7,23 (s, 1H), 7,16 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 4,63 (d, J = 12,8 Hz, 1H), 4,38 (dd, J = 10,7, 3,1 Hz, 1H), 4,07 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 3,99 – 3,68 (m, 5H), 3,58 (t, J = 10,7 Hz, 1H), 3,30 – 3,07 (m, 6H), 2,86 (s, 3H), 2,23 – 2,04 (m, 2H).

[00189] LC-MS1: tR= 4,58 min, M+1 = 471,3.

[00190] [α]D = -36 (c 0,32, CHCl3/MeOH 9:1)

[00191] Valor ótico de um dos precursores na síntese:

[00192]

[α]D = -28 (c 0,43, CHCl3/MeOH 9:1). EXEMPLO 11

[00193] Exemplo 11 foi sintetizado seguindo um protocolo semelhante ao utilizado para o Exemplo 8 a partir de intermediário XX em DMF.

[00194] 1H NMR (300 MHz, DMSO) □ 8,14 (q, J = 4,8 Hz, 1H), 8,00 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,25 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,07 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 6,98 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 4,44-4,38 (m, 2H), 4,15 - 3,77 (m, 4H), 3,57 (t, J = 10,8 Hz, 1H), 3,23 (t, J = 10,8 Hz, 2H), 3,03 (s, 3H), 3,02 (d, J = 5,0 Hz, 3H), 1,83 (s, 3H), 1,82 (s, 3H).

[00195] LC-MS1: tR= 2,95 min, M+1 = 459,1.

[00196] [α]D = +49 (c 0,233, CHCl3/MeOH 9:1).

[00197] Intermediário XX foi sintetizado seguindo vias sintéticas aqui descritas e usando como precursor de cloridrato de 3(R)-hidroximetilmorfolina.

[00198] Exemplo 12 foi sintetizado seguindo um protocolo semelhante ao utilizado para o Exemplo 8 a partir intermediário XI numa mistura de AcCN e DMF.

[00199] 1H NMR (300 MHz, DMSO) □ 7,96 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,89 (q, J = 4,9 Hz, 1H), 7,25 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,07 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 6,98 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 4,50 - 4,31 (m, 2H), 4,07 (d, J = 11,7 Hz, 1H), 4, 00 - 3,76 (m, 5H), 3,59 (t, J = 10,6 Hz, 1H), 3,32-3,20 (m, 6H), 3,00 (d, J = 4,8 Hz, 3H), 2,94 (s, 3H), 2,18 - 2,06 (m, 2H).

[00200] LC-MS1: tR= 2,82 min, M+1 = 501,1. EXEMPLO 13

[00201] Intermediário XXII (80 mg) em THF (3 mL) foi tratado com TBAF (2 mL; 2 mmol; 1M em THF). Depois de se agitar durante 1 hora em rt, a reação foi terminada. Em seguida, foi adicionada água e a mistura foi extraída com DCM, a fase orgânica foi seca sobre MgSO4, filtrada e evaporada obtendo-se um resíduo que foi purificado por cromatografia automatizada em EtOAc/ciclohexano (de 50% a 75% em EtOAc). Exemplo 13 foi recuperado como um sólido branco (7 mg).

[00202] 1H NMR (300 MHz, DMSO) d 11,24 (s, 1H), 7,56 — 7,30 (m, 2H), 6,97 (dd, J = 11,3, 8,8 Hz, 1H), 6,79 (s, 1H), 4,55 - 4,31 (m, 2H), 4,05 - 3,74 (m, 6H), 3,53 (t, J = 10,5 Hz, 1H), 3,27 - 3,00 (m, 5H), 2,85 (s, 3H), 2,18 - 1,94 (m, 3H).

[00203] LC-MS1: tR= 4,51 min, M+1 = 489,0. Intermediário XXII

[00204] Uma mistura do intermediário XI (50 mg), ácido [1- (terc-butil-dimetil-silanil)-5-flúor-1H-indol-4-il]borônico (45 mg, 0,15 mmol), PdCl2(PPh3)2 (18 mg), solução aquosa 2 M de Na2CO3 (0,250 mL), em dioxano (1 mL) foi aquecida num tubo de pressão elevada durante 2 horas. A mistura escura foi filtrada através de uma almofada de Celite lavando com DCM. O filtrado foi concentrado em vácuo. O produto em bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash em SiO2 eluindo com um sistema de dissolvente de EtOAc/ciclohexano (de 25% a 75% em EtOAc). Requerido composto XXII foi recuperado como um sólido branco, (80 mg). EXEMPLO 14

[00205] Exemplo 14 foi sintetizado seguindo um protocolo semelhante ao utilizado para o Exemplo 13.

[00206] 1H NMR (300 MHz, DMSO) d 11,30 (s, 1H), 7,53 — 7,45 (m, 2H), 7,04 (dd, J= 11,4, 9,0, 1H), 6,87 (s, 1H), 4,54 - 4,43 (m, 2H), 4,09 - 3,78 (m, 4H), 3,58 (t, J = 10,9 Hz, 1H), 3,26 (t, J = 10,8 Hz, 1H), 3,13 (dt, J = 12,9, 3,0 Hz, 1H), 3,03 (s, 3H),1,90 (s, 3H), 1,88 (s, 3H),

[00207] LC-MS1: tR= 4,71 min, M+1 = 447,0.

[00208] Intermediário XXIII foi sintetizado por acoplamento da reação de X com ácido [1-(terc-butil-dimetil- silanil)-5-flúor-1H-indol-4-il]borônico, utilizando o mesmo protocolo que o utilizado para o intermediário XXII. EXEMPLO 15

[00209] Exemplo 15 foi sintetizado seguindo uma via sintética semelhante a utilizada para o Exemplo 1, usando como precursor 3 -hidroximetilmorfolina (S).

[00210] LC-MS1: tR= 4,88 min, M+1 = 429,0.

[00211] 1H NMR (300 MHz, DMSO) d 11,13 (s, 1H), 7,89 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,41 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,34 (bs, 1H), 7,24 (s, 1H), 7,09 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 4,53 (d, J = 12,2 Hz, 1H), 4,33 (dd, J = 10,9, 3,3 Hz, 1H), 3,99 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 3, 93 - 3,75 (m, 2H), 3,73 - 3, 64 (m, 1H), 3,49 (t, J = 10,7 Hz, 1H), 3,23 - 3,00 (m, 2H), 2,88 (s, 3 H), 1,82 (s, 3H), 1,81 (s, 3H). EXEMPLO 16

[00212] Uma mistura do intermediário X (40 mg, 0,115 mmol), com 4- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il) -1H- pirrol[2,3-b]piridina (34 mg, 0,138 mmol), PdCl2(PPh3)2 (12 mg, 0,017 mmol) e solução aquosa 2 M de Na2CO3 (0,23 mL) em dioxano (1,2 mL) foi aquecida a refluxo num tubo de pressão elevada durante 4 horas. A mistura reacional escura foi arrefecida até à temperatura ambiente e filtrada através de uma almofada de Celite, lavando com DCM. O filtrado foi concentrado em vácuo e o resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna flash (SiO2) eluindo-se com um sistema de dissolvente de EtOAc/cilohexano (de 20% a 50% em EtOAc). Exemplo 16 foi recuperado como um sólido creme (31 mg).

[00213] LC-MS1 tR =3,606, MS: 430,0 [M+H]+

[00214] 1H NMR (300 MHz, DMSO) d 11,73 (s, 1H), 8,30 (d, J = 5,0 Hz, 1H), 7,88 (d, J = 5,0 Hz, 1H), 7,62 - 7,51 (m, 1H), 7,23 (dd, J = 3,3, 1,9 Hz, 1H), 4,59 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 4,43 (dd, J = 10,9, 3,4 Hz, 1H), 4,06 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 3,97 - 3,73 (m, 3H), 3,57 (t, J = 10,4 Hz, 1H), 3,28 - 3,10 (m, 2H), 2,95 (s, 3H), 1,90 (s, 3H), 1,88 (s, 3H). EXEMPLO 17

[00215] Exemplo 17 foi sintetizado seguindo um protocolo semelhante ao utilizado para o Exemplo 1, por acoplamento de com indol éster pinacol ácido 6-flúor-4- borônico

[00216] LC-MS1 tR= 4,78 min, MS: 489,5 [M+H]+

[00217] 1H NMR (300 MHz, DMSO) d 11,22 (s, 1H), 7,65 (d, J = 13,7 Hz, 1H), 7,42 - 7,30 (m, 1H), 7,25 - 7,12 (m, 2H), 4,54 (d, J = 14,8 Hz, 1H), 4,32 (d, J = 10,6 Hz, 1H), 4,00 (d, J = 11,7 Hz, 1H), 3,95 - 3,78 (m, 4H), 3,78 - 3,66 (m, 1H), 3,51 (t, J = 10,9 Hz, 1H), 3,22 (s, 3H), 2,11 - 2,02 (m, 2H). EXEMPLO 18

[00218] Exemplo 18 foi sintetizado seguindo um protocolo semelhante ao utilizado para o Exemplo 1, por acoplamento de intermediário XI com 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il) 1H-pirrol[2,3-b]piridina.

[00219] LC-MS1 tR= 3,42 min, MS: 472,5 [M+H]+

[00220] 1H NMR (300 MHz, DMSO) d 11,75 (s, 1H), 8,29 (d, J = 5,0 Hz, 1H), 7,87 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 7,55 (s, 1H), 7,15 (s, 1H), 4,62 (d, J = 12,6 Hz, 1H), 4,41 (dd, J = 10,8, 3,2 Hz, 1H), 4,08 (d, J = 11,2 Hz, 1H), 4,02 — 3,76 (m, 5H), 3,59 (t, J = 10,7 Hz, 1H), 3,30 — 3,11 (m, 6H), 2,87 (s, 3H), 2,23 - 2,07 (m, 2H). EXEMPLO 19

[00221] Exemplo 19 foi sintetizado seguindo um protocolo semelhante ao utilizado para o Exemplo 1, por acoplamento de intermediário XI com 6-metóxi-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il-1H-indol, CAS: 955979-12-1.

[00222] LC-MS1 tR= 4,53 min, MS: 501,6 [M+H]+

[00223] 1H NMR (300 MHz, DMSO) d 10,96 (s, 1H), 7,53 (s, 1H), 7,22 (s, 1H), 7,08 (s, 1H), 6,97 (s, 1H), 4,56 (d, J = 13,6 Hz, 1H), 4,34 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 4,03 (d, J = 11,0 Hz, 1H), 3,98 - 3,79 (m, 5H), 3,75 (s, 3H), 3,54 (t, J = 3,05 (m, 6H), 2,81 (s, 3H), 2,18 - 2,02 (m, 2H). EXEMPLO 20

[00224] Exemplo 20 foi sintetizado seguindo um protocolo semelhante ao utilizado para o Exemplo 1, por acoplamento de intermediário XI com 2-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)-1H-indol CAS:955979-22-3.

[00225] LC-MS1 tR= 4,77 min MS: 485,6 [M+H]+

[00226] 1H NMR (300 MHz, DMSO) d 11,03 (s, 1H), 7,88 (d, J 1H), 7,34 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,05 (t, J = 7,7 (s, 1H), 4,62 (d, J = 12,3 Hz, 1H), 4,37 (dd EXEMPLO 21

[00227] Exemplo 21 foi sintetizado seguindo um protocolo semelhante ao utilizado para o Exemplo 15, por acoplamento de intermediário XXIV com cloridrato de ácido indazol-4- borônico.

[00228] LC-MS1: tR= 5,169 min, M+1 = 430,10,

[00229] 1H RMN (300 MHz, DMSO) d 13,18 (s, 1H), 8,75 (s, 1H), 8,05 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,63 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,49 - 7,38 (m, 1H), 4,60 (d , J = 12,1 Hz, 1H), 4,41 (dd, J = 10,9, 3,3 Hz, 1H), 4,07 (dd, J = 11,4, 2,9 Hz, 1H), 3,99 - 3,71 (m, 3H), 3,77 (t, J = 9,4 Hz, 1H), 3,57 (t, J = 10,6 Hz, 1H), 3,28 - 3,10 (m, 2H), 2,96 (s, 3H), 1,90 (s, 3H), 1,88 (s, 3H). EXEMPLO 22

[00230] Uma mistura do intermediário 2-I (80 mg), éster pinacol ácido indol-4-borânico (60 mg, 0,25 mmol), com PdCl2(dppf) (25 mg) e uma solução aquosa a 2 de Na2CO3 (0,4 mL, 0,8 mmol) em dioxano (1 mL) foi aquecida num tubo de alta pressão a 85°C durante 3 h. A mistura reacional escura foi filtrada através de uma almofada de Celite lavando com DCM. Os solventes foram removidos em vácuo, e o resíduo foi purificado por cromatografia flash em coluna (Isoluto Si II, 5 g) eluindo-se com um sistema de dissolvente de EtOAc/ciclohexano (de 25% a 100% em EtOAc). O produto pretendido foi recuperado como um sólido branco como o composto 22 (8 mg).

[00231] LCMS1, tR= 4,75 min, MS: 485,2 [M+H]+

[00232] 1H RMN (300 MHz, DMSO) d 11,24 (s, 1H), 7,97 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,50 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,43 (t, J = 2,6 Hz, 1H), 7,23 (s, 1H), 7,17 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 4,24 (t, J = 5,5 Hz, 2H), 4,11 - 3,70 (m, 8H), 3,53 - 3,46 (m, 1H), 3,30 - 3,09 (m, 4H) , 2,85 (s, 3H), 2,24 - 1,93 (m, 4H).

[00233] [α]D = -15 (c 0.204, CHCl3/MeOH 9:1) com um excesso enantiomérico de 60% ca. Intermediário 2-I

[00234] A uma mistura arrefecida do Intermediário 2-II (80 mg) com bis(2-bromoetil) éter (75 L, 0,6 mmol) em DMF (4 mL) foi adicionado em um recipiente de terc-butóxido de sódio (70 mg, 0,7 mmol). A mistura castanha escura foi agitada a esta temperatura durante 30 min e à temperatura ambiente durante 18 h. Após esse tempo mais terc-butóxido de potássio (30 mg) foi adicionado à mistura continuando a agitação por mais 2 h. A mistura foi extinta por adição de água e extraída três vezes com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre Na2SO4 e concentradas em vácuo. O produto requerido foi recuperado na forma de sólido amarelo-creme do produto desejado 2-I (80 mg). Intermediário 2-II

[00235] Uma mistura do intermediário 2-III (210 mg) e metanossulfinato de sódio (0,90 mg, 0,89 mmol) em AcCN:DMF foi aquecida num tubo de alta pressão a 100°C A mistura de reação foi arrefecida até à temperatura ambiente, resfriada bruscamente por adição de solução aquosa 1 M Na2S2O3 e extraída com DCM três vezes. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (25 mL), secas sobre Na2SO4 e concentradas em vácuo. O resíduo etapa. Intermediário 2-III

[00236] A uma mistura do intermediário 2-IV (190 mg) em DCM (10 mL) com TEA (0,150 mL, 1,0 mmol) foi adicionado gota a gota cloreto de metanossulfonilo (70μL, 0,9 mmol). A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h 30 até que o material de partida foi consumido. A reação foi resfriada bruscamente por adição de água e extraída com DCM (3 x 20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre Na2SO4 e concentradas em vácuo. O sólido cristal laranja creme, intermediário 2III (210 mg) foi usado sem mais purificação. Intermediário 3-IV

[00237] A uma solução arrefecida do Intermediário 2-V (0,275 g) em THF (8 mL) foi adicionada uma solução 2 M de LiBH4 in THF (0,6 mL, 0,12 mmol). A mistura resultante foi agitada a 0 °C durante 30 min e à temperatura ambiente durante 2 h. A reação foi resfriada bruscamente por adição de água e extraída com EtOAc três vezes. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre Na2SO4 e concentradas em vácuo. O produto, intermediário 2-IV, foi recuperado na forma de sólido cor de laranja creme (190 mg) e utilizado sem mais purificação. Intermediário 3-V

[00238] Uma mistura do intermediário 2-VI (869 mg) com Cs2CO3 (2,6 mg, 8,1 mmol) em AcCN (120 mL) foi aquecida a refluxo (85°C) durante 18 h. A mistura foi arrefecida até à temperatura ambiente e os solventes foram removidos em vácuo. O resíduo foi redissolvido em DCM e lavado com HCl aquoso 1M (3 x 25 mL). A fase orgânica foi lavada com salmoura, seca sobre Na2SO4 e concentrada em vácuo, deixando um sólido laranja claro como intermediário 2-V (275 mg) que foi utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional. Intermediário 2-VI

[00239] Uma mistura de metil 2,5,6-tricloro-4- pirimidinacarboxilato (700 mg, 2,8 mmol) com cloridrato de (R)-2-(morfolin-3-il)etanol (600 mg, 3,5 mmol, 60% de excesso enantiomérico ( ee)) em EtOH (10 mL) e DIPEA (1,5 mL; 8,6 mmol) foi aquecida a refluxo durante 2 h. A mistura amarelo claro foi arrefecida até à temperatura ambiente e os solventes foram removidos em vácuo. O óleo amarelo claro recuperado foi redissolvido em DCM (60 mL), lavado com NaHCO3 sat. aq. (2 x 50 mL), água (2 x 50 mL) e salmoura (50 mL). A fase orgânica foi seca sobre Na2SO4 e concentrada em vácuo, deixando o produto desejado como um óleo amarelo claro, o intermediário 2-VI (860 mg) que foi utilizado sem mais purificação. EXEMPLO 23

[00240] Exemplo 23 foi sintetizado seguindo o mesmo esquema de síntese que o utilizado para o composto 2-1, mas utilizando cloridrato de (S)-2-(morfolin-3-il) etanol (60% ee) como material de partida na etapa 1.

[00241] LCMS1, tR= 4,71 min, MS: 485,2 [M+H]+

[00242] 1H NMR (300 MHz, DMSO) d 11,24 (s, 1H), 7,97 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,50 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,43 (s, 1H), 7,23 (s, 1H), 7,17 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 4,24 (t, J = 5,4 Hz, 2H), 4,09 - 3,70 (m, 8H), 3,50 (dd, J = 11,3, 7,0 Hz, 1H), 3,30 - 3,11 (m, 4H), 2,85 (s, 3H), 2,24 - 1,93 (m, 4H).

[00243] [α]D = +8 (c 0,227, CHCl3/MeOH 9:1) com um excesso enantiomérico de 60% ca. EXEMPLO 24

[00244] Uma mistura do intermediário 2-VII (50 mg), éster pinacol ácido indol-4-borônico (40 mg, 0,16 mmol), com PdCl2(dppf) (15 mg) e uma solução aquosa 2 M de Na2CO3 (0,3 mL, 0,6 mmol) em dioxano (2 mL) foi aquecida num tubo de alta pressão a 85°C durante 3 h. A mistura reacional escura foi arrefecida até à temperatura ambiente, filtrada através do recipiente de Celite lavando com DCM e o filtrado foi concentrado em vácuo. O produto em bruto foi purificado por cromatografia flash em coluna (Isoluto Si II 5 g) eluindo- se com um sistema de solvente de EtOAc/ciclohexano (de 50% a 100% em EtOAc). As frações contendo o produto pretendido foram combinadas e concentradas em vácuo. O composto em título foi recuperado como um sólido creme que foi triturado duas vezes com éter dietílico e secos em vácuo para se obter o produto desejado exemplo 24, como um sólido branco (6 mg).

[00245] LCMS1, tR= 5,01 min, MS: 443,2 [M+H]+

[00246] 1H NMR (300 MHz, DMSO) d 11,16 (s, 1H), 7,92 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,43 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,37 (s, 1H), 7,24 (s, 1H), 7,11 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 4,18 (t, J = 5,8 Hz, 2H), 4,00 (d, J = 13,0 Hz, 1H), 3, 90 — 3,79 (m, 1H), 3,79 — 3,66 (m, 3H), 3,61 — 3,48 (m, 1H), 3,37 (t, J = 10,2 Hz, 1H), 2,88 (s, 3H), 2,08 - 1,89 (m, 2H), 1,84 (s, 6H).

[00247] [α]D = +6 (c 0,215, CHCl3/MeOH 9:1) com um excesso enantiomérico de 60% ca. Intermediário 2-VII

[00248] A uma solução arrefecida (0°C) de 2-VIII (80 mg) em DMF (2 mL) adicionou-se primeiro terc-butóxido de sódio (25 mg, 0,25 mmol) e após 5 min de agitação, adicionou-se iodometano (16 L, 0,25 mmol). A mistura resultante foi agitada durante 15 min e uma segunda adição de terc-butóxido de sódio (25 mg, 0,25 mmol) e iodometano (16 μL, 0,25 mmol) foi realizada. A mistura foi agitada durante 2 h e resfriada bruscamente por adição de água. A mistura foi extraída com DCM três vezes. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas Na2SO4. O produto em bruto, o intermediário 2-VII (50 mg) foi ainda utilizado para a etapa seguinte sem purificação adicional. EXEMPLO 25

[00249] O protocolo sintético usado para o Exemplo 24 foi repetido utilizando o intermediário XLI, a fim de obter o exemplo 25.

[00250] LCMS1, tR= 4,99 min, MS: 443,2 [M+H]+

[00251] 1H NMR (300 MHz, DMSO) d 11,23 (s, 1H), 7,98 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,50 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,43 (t, J = 2,5 Hz, 1H), 7,31 (s, 1H), 7,17 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 4,25 (t, J = 5,6 Hz, 2H), 4,07 (d, J = 13,6 Hz, 1H), 3, 97 - 3, 87 (m, 1H), 3,87 - 3,72 (m, 3H), 3,69 - 3,56 (m, 1H), 3,44 (t, J = 10,3 Hz, 1H), 2,95 (s, 3H), 2,12 - 1,96 (m, 2H), 1,91 (s, 6H).

[00252] [α]D = -6 (c 0.317, CHCl3/MeOH 9:1) com um excesso enantiomérico de 60% ca. EXEMPLO 26

[00253] Exemplo 26 foi sintetizado seguindo uma via sintética semelhante a utilizado para o exemplo 14, usando como precursor 3-hidroximetilmorfolino (S).

[00254] LC-MS1: tR = 4,77 min, MS: = 447,1 [M + H] +

[00255] 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 11,23 (s, 1H), 7,51 - 7,34 (m, 2H), 6,97 (dd, J = 11,2, 8,8 Hz, 1H), 6,80 (s, 1H), 4,49 - 4,35 (m, 2H), 4,02 - 3,63 (m, 4H), 3,50 - 3,37 (m, 1H), 3,21-3,09 (m, 1H), 3,09 - 2,91 (m, 1H), 2,96 (s, 3H), 1,83 (s, 3H), 1,81 (s, 3H), EXEMPLO 27

[00256] Uma mistura de intermediário XXV (15 mg, 0,043 mmol) com o éster pinacol ácido indol-4-borônico (13 mg, 0,052 mmol), diclorobis(trifenilfosfina)paládio (II) (6 mg, 0,009 mmol) e uma solução aquosa 2M de Na2CO3 (0,1 mL) em dioxano (0,5 ml), foi aquecida num tubo de pressão elevada durante 3 h. A mistura escura foi arrefecida até à rt, diluída com água (10 mL) e extraída com EtOAc (2 x 10 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura, secas sobre Na2SO4 e concentradas em vácuo. O produto em bruto foi purificado primeiro por cromatografia flash em coluna (Isolute Si II 5 g) eluindo-se com um sistema de dissolvente de EtOAc/ciclohexano (de 50% a 100% em EtOAc) para se obter 3 mg do produto final, Exemplo 27.

[00257] LC-MS1: tR= 4,08 min M+1 = 427,1,

[00258] 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 11,14 (s, 1H), 7,91 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,41 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,35 (bs, 1H), 7,28 (s, 1H), 7,09 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 4,47 (m, 1H), 4,36 (m, 1H), 3,98 (m, 1H), 3,86 (m, 2H), 3,67 (m, 1H), 3,50 (m, 1H), 3,21-3,01 (m, 2H), 3,02 ( s, 3H), 1,64 (bs, 2H), 1,35 (bs, 2H). Intermediário XXV

[00259] NaOH aquoso preparado frescamente (4N) (0,547 mL) foi adicionado a uma solução do intermediário IX (70 mg, 0,219 mmol), dibromoetano (0,038 mL, 0,438 mmol) e TBAB (14 mg, 0,044 mmol) em tolueno (3 mL) . A mistura foi agitada a 80°C em um tubo de MW durante 2h e à 110°C (banho de areia) em um tubo MW durante 16 h. Após arrefecimento, a mistura de reação foi diluída com EtOAc e lavada com água e salmoura. A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4 e concentrada em vácuo. O produto em bruto foi purificado primeiro por cromatografia flash em coluna (Isolute Si II 5 g) eluindo- se com um sistema de solvente de EtOAc/ciclohexano (de 20% a 80% em EtOAc) para se obter 15 mg do intermediário XXV necessário. EXEMPLO 28

[00260] Exemplo 28 foi sintetizado seguindo uma via sintética semelhante ao utilizado para o Exemplo 17, usando como precursor de 3(R)-hidroximetilmorfolino.

[00261] LC-MS1 tR= 4,76 min, MS: 489,1 [M+H]+

[00262] 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 11,22 (s, 1H), 7,65 (d, J = 13,7 Hz, 1H), 7,42 - 7,30 (m, 1H), 7,25 - 7,12 (m, 2H), 4,54 (d, J = 14,8 Hz, 1H), 4,32 (d, J = 10,6 Hz, 1H), 4,00 (d, J = 11,7 Hz, 1H), 3,95 - 3,78 (m, 4H), 3,78 - 3,66 (m, 1H), 3,51 (t, J = 10,9 Hz, 1H), 3,22 - 3,03 (m, 6H), 2,80 (s, 3H), 2,11 - 2,02 (m, 2H). EXEMPLO 29

[00263] Exemplo 29 foi sintetizado seguindo uma via sintética semelhante ao utilizado para o Exemplo 19, usando como precursor de 3(R)-hidroximetilmorfolino.

[00264] LC-MS1, tR=4,5 min, MS: 501 [M+H]+

[00265] 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 11,01 (s, 1H), 7,57 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 7,29 - 7,24 (m, 1H), 7,12 (s, 1H), 7,01 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 4,60 (d, J = 13,1 Hz, 1H), 4,38 (dd, J = 10,7, 3,1 Hz, 1H), 4,07 (dd, J = 11,4, 2,7 Hz, 1H), 4,00 - 3,83 (m, 5H), 3,80 (s, 3H), 3,58 (td, J = 11,7, 1,9 Hz, 1H), 3,30 - 3,09 (m, 6H), 2,86 (s, 3H), 2,17 - 2,03 (m, 2H). EXEMPLO 30

[00266] Exemplo 30 foi sintetizado seguindo uma via sintética semelhante a utilizada para o Exemplo 18, usando como precursor 3(R)-hidroximetilmorfolino.

[00267] LCMS1, tR=3,3 min, MS: 472,5 [M+H]+

[00268] 1H NMR (300 MHz, DMSO) d 11,69 (s, 1H), 8,23 (d, J 6,98 (m, 1H), 4,56 (d, J = 12,8 Hz, 1H), 4,34 (dd, J = 10,8, 3,1 Hz, 1H), 4,01 (dd, J = 11,6, 3,0 Hz, 1H), 3,67 (m, 1H), 3,52 (t, J = 10,7 Hz, 1H), 3,26 - 3,03 (m, 6H), 2,80 (s, 3H), 2,14 - 1,95 (m, 2H). EXEMPLO 31

[00269] A uma suspensão do intermediário 2-VII (90 mg, 0,249 mmol) em ACN (1,5 mL) e DMF (0,15 mL) foi adicionado N-metil-1H-1,3-benzodiazol-2-amina (73 mg, 0,497 mmol ) e Cs2CO3(400 mg, 1,244 mmol). A mistura de reação foi aquecida num tubo selado a 130°C durante 3 dias. No arrefecimento, produto final 31, como um sólido branco (50 mg).

[00270] LCMS1, tR= 3,12 min, MS: 473,2 [M+H]+

[00271] 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 8,17 (q, J = 4,9 Hz, 1H), 8,01 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,25 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,07 (t, J = 7,0 Hz, 1H), 6,97 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 4,26 (m, 2H), 3,99 (m, 3H), 3, 87 - 3,72 (m, 2H), 3,60 (m, 1H), 3,47 (m, 1H), 3,01 (m, 6H), 2,22 - 1,95 (m, 2H), 1,85 (m, 6H). Intermediário 2-IX

[00272] A uma solução de 2-X (90 mg, 0,270 mmol) em DMF (2,2 mL) a 0°C adicionou-se KtBuO (32 mg, 0,566 mmol) e Mel (18 L). A mistura de reação foi agitada a 0°C durante 15 min e KtBuO (32 mg, 0,566 mmol) e MeI (18 L) A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h. HCl 1 M (20 mL) foi adicionada e a mistura foi extraída com DCM (3x40 mL). Os orgânicos foram secos sobre Na2SO4, filtrados e evaporados. O produto em bruto, o intermediário 2-IX (100 mg) foi ainda utilizado para a etapa seguinte sem purificação adicional. Intermediário 2-X

[00273] Intermediário 2-X foi sintetizado seguindo o mesmo esquema de síntese que o utilizado para o Intermediário 2- II, mas usando cloridrato de 2-(morfolin-3-il)etanol racêmico como material de partida na etapa 1. EXEMPLO 32

[00274] A uma suspensão do intermediário XI-2 (70 mg, 0,173 mmol) em ACN (1,5 mL) e DMF (0,15 mL) foi adicionado N-metil- 1H-benzodiazol-1,3-2-amina (51 mg, 0,347 mmol) e Cs2CO3 (282 mg, 0,867 mmol). A mistura de reação foi aquecida num tubo selado a 130°C durante 40 horas. No arrefecimento, H2O (50 mL) e EtOAc (40 mL) foram adicionados. Um sólido apareceu na interfase, foi filtrado e lavado com EtOAc e Et2O para dar o produto final 32 na forma de um sólido branco (35 mg).

[00275] LC-MS1, tR = 3,98 min, MS: 515,2 [M+H]+

[00276] 1H RMN (300 MHz, DMSO) δ 7,97 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,88 (q, J = 4,9 Hz, 1H), 7,25 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,07 (t, J = 7,1 Hz, 1H), 6,98 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 4,43 - 4,29 (m, 1H), 4,24 (m, 1H), 4,10 - 3,76 (m, 8H), 3,56 (m, 1H) , 3,46 - 3,36 (m, 2H), 3,03 (m, 1H), 2,99 (d, J = 4,9 Hz, 3H), 2,94 (s, 3H), 2,89 (m, 1H), 2,30 - 1,96 (m, 4H). Intermediário 2-XI

[00277] A uma mistura arrefecida do Intermediário 2-X (280 mg, 0,839 mmol) com bis(2-bromoetil) éter (265 L, 2,097 mmol) em DMF (4 mL) foi adicionado em um recipiente terc-butóxido de sódio (282 mg, 2,517 mmol). A mistura castanha escura foi agitada a 0°C à durante 30 min e à temperatura ambiente durante 20h. Após esse tempo, mais terc-butóxido (140 mg) foi adicionado à mistura e a agitação foi continuada durante mais 20 h. A mistura foi resfriada bruscamente por adição de água (25 ml) e HCl 1M (15 mL) e a mistura foi extraída três vezes com EtOAc (75 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre Na2SO4 e concentradas em vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna flash (10% a 20% de EtOAc/DCM) para dar o produto intermediário 2-XI como um sólido amarelo (170 mg). EXEMPLO 33

[00278] Uma mistura de 4-bromo-6-flúor-1H-indol (32 mg, 0.149 mmol), bis(pinacolato)diboro (79 mg, 0,309 mmol), KOAc (36 mg, 0,371 mmol) e PdCl2(dppf) (20 mg, 0.025 mmol) em dioxano (1,3 mL) foi aquecida num tubo selado a 100°C durante 3 h. Ao arrefecer, o intermediário XI-2 (50 mg, 0,124 mmol), Pd(PPh3)4 (14 mg, 0,012 mmol) e Na2CO3 2M (0,25 mL) foram adicionados. A mistura de reação foi aquecida a 100°C durante 20 h. No arrefecimento, a mistura foi purificada por cromatografia flash em coluna (5% a 20% de AcOEt em DCM) e triturada com Et2O para dar o composto final 33 como um sólido branco (30 mg).

[00279] LC-MS1, tR = 4,95 min, MS: 503,2 [M+H]+

[00280] 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 11,32 (s, 1H), 7,74 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 7,45 (s, 1H), 7,30 (d, J = 9,4 Hz, 1H), 7,23 (s, 1H), 4,26 (s, 2H), 4,05-3,71 (m, 8H), 3,52 (m, 1H), 3,56-3,09 (m, 4H), 2,86 (s, 3H), 2,27-1,96 (m, 4H). EXEMPLO 34

[00281] Exemplo 34 foi sintetizado seguindo um protocolo semelhante ao utilizado para o Exemplo 33 por reação de acoplamento do composto 2-XII (CAS: 393553-55-4).

[00282] LCMS1, tR= 4,72 min, MS: 515,2 [M+H]+

[00283] 1H NMR (300 MHz, DMSO) d 11,04 (s, 1H), 7,59 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 7,29 (s, 1H), 7,12 (s, 1H), 7,03 (s, 1H), 4,24 (m, 2H), 4,11 - 3,79 (m, 8H), 3,79 (s, 3H), 3,56 - 3,44 (m, 1H), 3,21 (m, 4H), 2,85 (s, 3H), 2,14 (m, 4H), EXEMPLO 35

[00284] Uma mistura de intermediário XXVI (40 mg, 0,125 mmol), éster pinacol ácido indol-4-borônico (40 mg, 0,162 mmol), PdCl2(PPh3)2 (18 mg, 0,025 mmol) e Na2CO3 2M ( 0,25 ml) em dioxano (1 mL) foi aquecida num tubo selado a 100°C durante 4h. No arrefecimento, a mistura foi purificada por cromatografia em coluna flash (0% a 10% de MeOH em DCM) para dar o produto final 35, como um sólido amarelo (10 mg).

[00285] LC-MS1: tR= 4,17 min, M+1 = 402,5

[00286] 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 11,11 (s, 1H), 7,85 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,44 - 7,28 (m, 4H), 7,08 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 4,38 (m, 1H), 4,30 (m, 1H), 3,96 (m, 1H), 3,84 (m, 2H), 3,53 (m, 2H), 3,34 (s, 4H), 3,22 - 3,12 (m, 2H), 3,00 (s, 1H). Intermediário XXVI

[00287] A uma solução de intermediário XXVII (30 mg, 0,124 mmol) em DMF (1 mL) adicionou-se NaH a 60% (12 mg, 0,309 mmol) a 0°C. A mistura foi agitada durante 20 min e MeSO2Cl (20 L, 0,247 mmol) foi adicionado. A mistura de reação foi deixada aquecer até à temperatura ambiente e agitada durante 20 h. Após esse tempo mais MeSO2Cl (20 L, 0,247 mmol) foi adicionado e a mistura foi agitada durante 30 min. Água (20 ml) foi adicionada e foi extraída com EtOAc (2 x 20 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e evaporadas para se obter o produto intermédio XXVI como óleo cor de laranja (50 mg). Intermediário XXVII

[00288] Uma mistura de intermediário XXVIII (50 mg, 0,169 mmol), AcOH (0,5 mL) e H2O (0,5 mL) foi aquecida num tubo selado a 100°C durante 30 minutos. No arrefecimento, a solução saturada de NaHCO3 (20 mL) foi cuidadosamente adicionada e, a mistura foi extraída com EtOAc (2 x 15 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 filtradas e evaporadas para se obter o produto intermédio XXVII como um sólido branco (30 mg). Intermediário XXVIII

[00289] A uma suspensão de intermediário XXIX (75 mg, 0,259 mmol) em acetona (2 mL) foi adicionada uma solução de NaN3 (50 mg, 0,776 mmol) em H2O (0,2 mL) gota a gota. A mistura de reação foi agitada à rt durante 1,5 h. Água (5 mL) foi adicionada e a mistura foi extraída com EtOAc (2 x 20 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e evaporadas para se obter o produto intermediário XXVIII como sólido oleoso amarelo (50 mg). Intermediário XXIX

[00290] A uma suspensão do intermediário XXX (70 mg, 0,258 mmol) em DCM (2 mL) foi adicionado DMF (1 gota). Depois de 5 min, cloreto de oxalilo (2 M em DCM) (26 L) foi adicionado à temperatura ambiente. Após 1h mais cloreto de oxalilo (2 M em DCM) (0,15 mL) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 10 min e evaporadas para se obter o produto intermédio XXIX como um sólido amarelo (75 mg). Intermediário XXX

[00291] A uma suspensão do intermediário IV (200 mg, 0,700 mmol) em THF (0,2 mL) foi adicionado NaOH 0,5 N (1,7 mL, 0,840 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 3 h. HCl concentrado foi adicionado até pH ~ 4-5 e, a suspensão foi filtrada e lavada com H2O para dar intermediário XXX como um sólido branco (70 mg). O filtrado foi extraído com EtOAc (30 mL) e CHCI3: i PrOH (2x30 mL). As camadas orgânicas foram secas, filtradas e evaporadas para dar o intermediário XXX como um sólido branco (130 mg). EXEMPLO 36

[00292] Uma mistura de intermediário XXXI (30 mg, 0,074 mmol), éster pinacol ácido indol-4-borônico (25 mg, 0,1 mmol), PdCl2(PPh3)2 (10 mg, 0,015 mmol), e solução aquosa 2 M de Na2CO3 (0,150 mL) em dioxano (1 mL) foi aquecida a 100°C num tubo selado sob atmosfera de Ar. A mistura escura foi arrefecida até à temperatura ambiente e filtrada através de uma almofada de Celite lavando com DCM. O filtrado foi concentrado em vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna flash (25% a 100% de ciclohexano em EtOAc) e depois com 7M NH3 em MeOH/DCM (de 0% a 10%) para dar o produto final de Exemplo 36 como um sólido creme (1,5 mg ).

[00293] LC-MS1: tR= 3,55 min, M+1 = 484,2

[00294] 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 11,17 (s, 1H), 7,89 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,42 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,39 - 7,32 (m, 1H), 7,18 (m, 1H), 7,09 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 4,55 (m, 1H), 4,33 (m, 1H), 4,00 (m, 1H), 3, 90 - 3, 64 (m, 4H), 3,59 - 3,41 (m, 4H), 3,21 — 2,91 (m, 2H), 2,77 (s, 3H), 1,99 (s, 3H), 1,98 - 1,88 (m, 2H), 1,78 (m, 2H). Intermediário XXXI

[00295] A uma solução do intermediário IX (50 mg, 0,156 mmol) e cloridrato de mecloretamina (75 mg, 0,391 mmol) em DMF (3 mL), arrefecida a 0°C foi adicionada, em porções, terc-butóxido de sódio (75 mg, 0,782 mmol). A mistura resultante foi agitada a 0°C durante 30 min e à temperatura ambiente durante 18 h. Depois daquele tempo, mais terc- butóxido de sódio (70 mg, 0,728 mmol) foi adicionado em um recipiente. A mistura resultante escura foi agitada durante 1 h, desativada pela adição de água, e extraída três vezes com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre Na2SO4 e concentradas em vácuo para dar o intermediário XXXI (30 mg). EXEMPLO 37

[00296] A uma solução de intermediário XXXII (30 mg, 0,046 mmol) em THF (1 mL) foi adicionada uma solução 1 M de TBAF em THF (55 L, 0,055 mmol). A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h. A reação foi resfriada bruscamente por adição de água e extraída três vezes com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre Na2SO4 e concentradas em vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna flash (25% a 100% de ciclohexano em EtOAc) para dar o produto final do Exemplo 37 como um sólido branco (4 mg).

[00297] LC-MS1: tR= 4,68 min, M+1 = 501,2

[00298] 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 11,25 (s, 1H), 7,87 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,24 (t, J = 2,6 Hz, 1H), 7,14 (s, 1H), 6,67 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 4,55 (m, 1H), 4,29 (m, 1H), 4,01 (m, 1H), 3,90 (s, 3H), 3, 89 — 3, 64 (m, 5H), 3,51 (m, 1H), 3,28-3,09 (m, 6H), 2,79 (s, 3H), 2,13 - 1,98 (m, 2H). Intermediário XXXII

[00299] Uma mistura de intermediário XI (50 mg, 0,128 mmol), bis(pinacolato)diboro (81 mg, 0,321 mmol), KOAc (38 mg, 0,385 mmol) e PdCl2(dppf)2 (11 mg, 0,013 mmol) iem dioxano (1,5 mL) foi aquecida a 100 °C durante 3 h. A mistura escura foi arrefecida até à temperatura ambiente e 4-bromo-7- metóxi-1-triisopropilsilanil-1H-indol (50 mg, 0,154 mmol), Pd(PPh3)4 (13 mg, 0,013 mmol) e 2 M Na2CO3 aquoso (0,2 mL) foram adicionados. A mistura resultante foi aquecida num tubo de alta pressão a 100°C durante 18 h. A mistura escura foi arrefecida até à temperatura ambiente e filtrada através de uma almofada de Celite. O filtrado foi concentrado em vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna flash (10% a 60% de ciclohexano em EtOAc) para dar o intermediário XXXII como um sólido creme (30 mg). EXEMPLO 38

[00300] Uma mistura de intermediário XXXIII (45 mg, 0,157 mmol), éster pinacol ácido indol-4-borônico (50 mg, 0,205 mmol), PdCl2(PPh3)2 (22 mg, 0,031 mmol) e Na2CO3 2M (0,32 ml) em dioxano (1 mL) foi aquecida num tubo selado a 100°C durante 5 h. No arrefecimento, a mistura foi purificada por cromatografia em coluna flash (0% a 5% de MeOH emDCM) para dar o produto final do Exemplo 38 como um sólido branco (10 mg).

[00301] LC-MS1: tR= 2,87 min, M+1 = 367,1

[00302] 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 11,24 (s, 1H), 7,97 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,48 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,44 (t, J = 2,7

[00303] A uma suspensão do intermediário IV (100 mg, 0,350 mmol) em THF (1,5 mL) a 0°C adicionou-se MeMgBr (3M em Et2O, 0,29 mL, 0,875 mmol) gota a gota. A mistura de reação foi agitada a 0°C durante 15 min e à temperatura ambiente durante 1 h. A mistura de reação foi vertida em solução saturada de NaHCO3 (10 mL) e extraídacom EtOAc (2x20 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e evaporadas para dar o intermediário XXXIII como um sólido amarelo (95 mg). EXEMPLO 39

[00304] A uma suspensão do intermediário XXXIII (45 mg, 0,157 mmol) em ACN (1 ml) e DMF (0,1 mL) foi adicionado N- metil-1H-1,3-benzodiazol-2-amina (46 mg, 0,315 mmol) e Cs2CO3 (257 mg, 0,787 mmol). A mistura de reação foi aquecida num tubo selado a 130°C durante 40 h. No arrefecimento, água (35 mL) foi adicionada e a mistura foi extraída com EtOAc (2 x 30 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e evaporadas. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna flash (0% a 30% EtOAc em DCM e 0% a 5% de MeOH em DCM) para dar o produto final Exemplo 39 como um sólido branco (38 mg).

[00305] LC-MS1: tR= 3,02 min, M+1 = 397,2

[00306] 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 8,89 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 8,14 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,24 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,07 (t, J = 7,0 Hz, 1H), 6,97 (t, J = 7,1 Hz, 1H), 5,22 (s, 1H), 4,50 - 4,28 (m, 2H), 4,07 (m, 1H), 4,01 - 3,90 (m, 1H), 3,86 (m, 1H), 3,79 (m, 1H), 3,58 (m, 1H), 3,23 (m, 2H), 3,05 (m, 3H), 1,52 (s, 5H). EXEMPLO 40

[00307] A uma mistura desgaseificada do intermediário XXXIV (45 mg, 0,153 mmol), éster pinacol ácido indol-4- borônico (50 mg, 0,198 mmol) e 2M aq Na2CO3 (0,5 mL) em dioxano (1,5 mL) foi adicionado diclorobis(trifenilfosfina)paládio (II) (21 mg, 0,031 mmol). A mistura foi aquecida em um recipiente perto ao refluxo durante 3h. Água (35 ml) foi adicionada e a mistura foi extraída com DCM/MeOH 9:1. As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e evaporadas. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna flash (0% a 6% de DCM em MeOH) para dar o produto final do Exemplo 40 (15 mg). Intermediário XXXIV

[00308] A uma mistura de intermediário XXXV (50 mg, 0,187 mmol) e Mel (0,05 mL, 0,803 mmol) em DMF seco (1 mL) a 0°C, NaOtBu (60 mg, 0,562 mmol) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 2h. Solução saturada de NaHCO3 foi adicionada e a mistura foi extraída com EtOAc. As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4, filtradas e evaporadas para se obter o intermediário XXXIV (45 mg). Intermediário XXXV

[00309] A uma solução do intermediário VI (200 mg, 0,596 mmol) em DMF (4 mL), NaCN (35 mg, 0,715 mmol) foi adicionado à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 2h. Após a adição de água, um sólido foi removido por filtração e o filtrado foi extraído com EtOAc. As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4, filtrada e evaporada para dar o intermediário XXXV (50 mg). EXEMPLO 41

[00310] Uma mistura de intermediário XXXVI (134 mg, 0,372 mmol), éster pinacol ácido indol-4-borônico (109 mg, 0,447 mmol), PdCl2(PPh3)2 (52 mg, 0,074 mmol) e 2 M de Na2CO3 aquoso sol (0,745 ml) em 1,4-dioxano (2,55 mL) foi aquecido a 110°C num tubo selado num banho de areia do mar, durante 3 horas. No arrefecimento, a mistura reacional foi repartida entre H2O e DCM. A camada aquosa foi extraída 3 vezes com DCM. As camadas orgânicas combinadas foram secas (Na2SO4), filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em coluna, primeiro (0% a 10% de MeOH emDCM) e segundo (0% a 100% de EtOAc em ciclohexanos) para dar o produto final do Exemplo 41 como um sólido amarelo pálido (30 mg).

[00311] LC-MS: tR= 4,92 & 5,00 min, M+1 = 441,3,

[00312] 1H NMR (300 MHz, DMSO) d 11,23 (s, 1H), 8,03 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,49 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,43 (t, J = 2,5 Hz, 1H), 7,31 (s, 1H), 7,17 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 4,57 (m, 1H), 4,43 — 4,30 (m, 1H), 4,11 — 3,99 (m, 1H), 3,93 (m, 1H), 3,73 (m, 1H), 3,56 (m, 1H), 3,44 - 3,32 (m, 2H), 3,28 - 3,07 (m, 4H), 2,25 - 2,06 (m, 3H), 1,73 (s, 3H). Intermediário XXXVI

[00313] NaOtBu (54 mg, 0,557 mmol) foi adicionado a uma mistura de intermediário XXXVI (142 mg, 0,371 mmol) em DMF (37 mL) a 0°C. A reação foi agitada a 0°C durante 30 minutos, e à temperatura ambiente durante 30 minutos adicionais. Uma quantidade adicional de NaOtBu (24 mg, 0,248 mmol) foi adicionada à mistura de reação seguindo-se a adição de Mel (0, 023 mL, 0,371 mmol) a 0°C. A reação foi agitada a 0°C durante 30 minutos, e em seguida à temperatura ambiente durante 2 horas adicionais. Foi adicionada água à mistura reacional e extraiu-se com EtOAc (3 x). As camadas orgânicas combinadas foram secas (Na2SO4), filtradas e evaporadas para dar o intermediário XXXVII (134 mg). Intermediário XXXVII

[00314] A uma mistura de intermediário XXXVIII (209 mg, 0,597 mmol) em dioxano (18,40 mL) e H2O (4,60 mL), mCPBA (113 mg, 0,656 mmol) foi adicionado seguido pela adição de KMnO4 (127 mg, 0,776 mmol) à temperatura ambiente. A reação foi agitada à temperatura ambiente durante 5 horas. Uma quantidade adicional de mCPBA (50 mg, 0,290 mmol) e KMnO4(60 mg, 0,367 mmol) foi adicionada à mistura reacional, e agitou- se à temperatura ambiente durante 16 horas. Uma quantidade adicional de mCPBA (20 mg, 0,116 mmol) e KMnO4 (30 mg, 0,184 mmol) foi adicionada à mistura reacional, e agitou-se à temperatura ambiente durante 3 horas adicionais. A mistura de reação foi temperada com 10% de Na2S2O3 sol aquosa e extraída 3 vezes com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas (Na2SO4), filtradas e evaporadas para dar o intermediário XXXV (230 mg). Intermediário XXXVIII

.

[00315] Uma mistura de intermediários VI e VII (200 mg, 0,596 mmol), 3-cloro-1-propanotiol (79 mg, 0,715 mmol) e DIPEA (0,21 mL, 1,198 mmol) em DCM (11 mL) foi aquecida a 50ºC em um tubo selado em um banho de areia do mar durante 16 horas.Uma quantidade adicional de 3-cloro-1-propanotiol (40 mg, 0,362 mmol) e DIPEA (0,1 mL, 0,570) foram adicionados à mistura da reação, e aqueceu-se a 50°C durante 72 horas. A reação foi diluída com DCM e lavada com uma solução aquosa de NaHCO3 saturado, e com solução salina. A camada orgânica foi sobre Na2SO4, filtrada e evaporada para dar o intermediário XXXVIII (209 mg). EXEMPLO 42

[00316] Uma mistura de intermediário XXXIX (30 mg, 0,114 mmol), éster pinacol ácido indol-4-borônico (33 mg, 0,137 mmol), PdCl2(PPh3)2 (12 mg, 0,017 mmol) e Na2CO3 2M ( 0,175 mL, 0,343 mmol) em dioxano (0,7 mL) foi aquecida num tubo selado a 100°C durante 1 hora. No arrefecimento, a mistura foi purificada por cromatografia em coluna flash (0% a 5% de MeOH emDCM) para dar o produto final do Exemplo 42 como um sólido branco (10 mg).

[00317] LC-MS: tR= 3,34 min, M+1 = 424,2.

[00318] 1H NMR (300 MHz, DMSO) d 11,20 (s, 1H), 11,16 (s, 1H), 8,09 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,48 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 7,41 (m, 4H), 7,19 (m, 2H), 6,60 (s, 1H), 4,61 (m, 1H), 4,31 (m, 1H), 4,11 (m, 1H), 3,95 (m, 2H), 3,78 (m, 1H), 3,63 (m, 1H), 3,26 (m, 2H). Intermediário XXXIX

[00319] A uma solução de intermediário XXVII (100 mg, 0,412 mmol) em DCM (8 mL) foi adicionado trimetilclorossilano (470 μL, 3,709 mmol) gota a gota. Depois de se agitar à temperatura ambiente durante 30 minutos, nitrito de isopentilo (170 μL, 1,236 mmol) foi adicionado gota a gota. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 90 minutos. A mistura foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna flash (0% a 2% de MeOH em DCM) para dar o intermediário XXVII (65 mg). EXEMPLO 43

[00320] Uma mistura de intermediário XXXIX (35 mg, 0,134 mmol), éster pinacol ácido indol-4-borônico (32 mg, 0,134 mmol),PdCl2(PPh3)2 (14 mg, 0,020 mmol) e Na2CO3 2M ( 0,2 mL) em dioxano (0,8 mL) foi aquecida em um tubo selado a 100°C durante 90 minutos. PdCl2(PPh3)2 (14 mg, 0,020 mmol) e 3- (metilsulfonil)fenilborônico (32 mg, 0,160 mmol) foram adicionados e a mistura foi aquecida a 100°C durante 90 minutos. No arrefecimento, a mistura foi purificada por cromatografia flash em coluna, primeiro (0% a 5% de MeOH em DCM) e segundo por meio de HPLC prep para dar o Exemplo 43 como um produto minoritário, um sólido branco (7 mg).

[00321] LC-MS: tR= 4,89 min, M+1 = 463,1.

[00322] 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 11,22 (s, 1H), 8,79 (s, 1H), 8,66 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 8,52 — 8,45 (m, 1H), 8,12 — 8,07 (m, 1H), 8,00 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,76 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,50 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,45 — 7,33 (m, 2H), 7,19 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 6,59 (s, 1H), 4,63 (d, J = 12,5 Hz, 1H), 4,35 (dd, J = 11,1, 3,3 Hz, 1H), 4,08 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 4,03 - 3,91 (m, 2H), 3,78 (s, 1H), 3,59 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 3,26 (s, 3H), 3,14 (s, 1H). EXEMPLO 44

[00323] Exemplo 44 foi sintetizado seguindo uma via sintética semelhante a utilizada para o Exemplo 38, usando como precursor 3 (R)-hidroximetilmorfolina.

[00324] LC-MS1, tR= 2,92 min, MS: 367,1 [M+H]+

[00325] 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 11,24 (s, 1H), 7,97 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 7,55 - 7,38 (m, 2H), 7,18 (dd, J = 14,1, 6,3 Hz, 2H), 5,51 (s, 1H), 4,53 (d, J = 11,5 Hz, 1H), 4,42 (dd, J = 11,0, 3,3 Hz, 1H), 4,06 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 3,99 - 3,86 (m, 2H), 3,72 (s, 1H), 3,57 (t, J = 10,5 Hz, 1H), 3,30 - 3,03 (m, 2H), 1,52 (s, 6H). EXEMPLO 45

[00326] Uma mistura de 4-bromo-6-flúor-1H-indol (36 mg, 0,168 mmol), bis (pinacolato)diboro (90 mg, 0,350 mmol), acetato de potássio (41 mg, 0,420 mmol) e PdCl2(dppf) (23 mg, 0,028 mmol) em dioxano (1 mL) foi aquecida num tubo selado a 100°C durante 3 h. Ao arrefecer, o intermediário XL (40 mg, 0,140 mmol) em dioxano (1 ml), tetraquis(trifenilfosfina)paládio (0) (16 mg, 0,014 mmol) e Na2CO3 2M (0,21 mL) foram adicionados. A mistura de reação foi aquecida a 100°C durante 19 h. No arrefecimento, a mistura foi purificada por cromatografia flash em coluna, primeiro (de 5% a 10% de AcOEt em DCM) e a segundo por meio de prep-HPLC para dar o produto final do Exemplo 45 como um sólido branco (12 mg).

[00327] LC-MS1, tR= 4,04 min, MS: 385,2 [M+H]+

[00328] 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 11,30 (s, 1H), 7,79 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 7,44 (s, 1H), 7,26 (d, J = 15,4 Hz, 2H), 5,34 (s, 1H), 4,47 (dd, J = 27,0, 10,9 Hz, 2H), 4,05 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 3,93 (t, J = 10,1 Hz, 2H), 3,72 (s, 1H), 3,58 (s, 1H), 3,20 (dd, J = 24,7, 13,8 Hz, 3H), 1,52 (s, 7H). Intermediário XL

[00329] Intermediário XL foi sintetizado seguindo uma via sintética semelhante a utilizada para o intermediário XXXIII, usando como precursor 3(R)-hidroximetilmorfolina. EXEMPLO 46

[00330] Exemplo 46 foi sintetizado seguindo uma via sintética semelhante a utilizada para o Exemplo 45, por acoplamento de Suzuki do intermediário XL com 4-bromo-6- metoxi-1H-indol na presença de bis(pinacolato)diboro e um catalisador de paládio.

[00331] LC-MS1, tR= 3,38 min, MS: 397,2 [M+H]+

[00332] 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 11,03 (s, 1H), 7,60 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 7,29 (s, 1H), 7,10 (s, 1H), 7,02 (s, 1H), 5,44 (s, 1H), 4,59 — 4,35 (m, 2H), 4,07 (s, 1H), 3,92 (t, J = 9,7 Hz, 2H), 3,81 (s, 3H), 3,77 - 3, 65 (m, 1H), 3,57 (s, 1H), 3,22 (s, 2H), 1,52 (s, 6H).

EXEMPLO 47 - Ensaio de Inibição de ATR celular

[00333] Atividade de ATR está restrita a células replicantes e muitos dos seus alvos também podem ser fosforilados por outras PIKKs. Estas restrições têm limitado o desenvolvimento de ensaios celulares seletivos no passado. Para superar essas limitações, um sistema celular previamente desenvolvido em que a ATR, e só ATR, pode ser ativada à vontade em todas as células (Toledo et al Genes Dev. 22, 297-302 2008) foi usado. Neste sistema, a adição de 4-hidroxitamoxifeno (4-OHT), promove a translocação nuclear de um fragmento de TopBP1 que ativa então ATR. A fosforilação de H2AX que se segue 4-OHT em adição destas células é uma leitura direta e seletiva da atividade de ATR, que não é influenciada pelo resto da PIKKs. Esta propriedade tem sido usada no passado como uma plataforma de rastreio para compostos com capacidade inibidora da ATR (Toledo et al. Nat Struct Mol Biol 2011). A Figura 1 ilustra o conduto tubular para quantificar a atividade de ATR com este sistema, e fornece o cálculo da IC 50 para quatro compostos representativos da série corrente (compostos dos Exemplos 1, 2, 3 e 11). A linhagem celular utilizada foi um clone da linhagem do câncer da mama MCF7 que expressa de forma estável o fragmento de ativação de ATR TopBP1 (descrito em Toledo et al 2008) Genes Dev.

[00334] A inibição da ATR em células por compostos dos Exemplos 1, 2, 3 e 11 vivo é mostrada na Figura 1. Os detalhes são os seguintes: (A) . A imagem ilustra o sistema celular para a ativação de ATR utilizada nos ensaios, e que foi descrito em Toledo, LI, et al. Genes Dev. 22, 297-302 (2008). Em resumo, um fragmento de ativação de ATR da proteína TopBP1 está fundido para um fragmento do receptor de estrogênio. A proteína de fusão resultante é mantida no citoplasma, mas se transloca para o núcleo na presença de 4-hidroxitamoxifeno (OHT), onde ativa ATR. (B) . Ativação induzida por OHT neste sistema leva a uma fosforilação generalizada da histona H2AX ( H2AX), um alvo de ATR. Importante, e como descrito em Toledo, Li et al. Genes Dev. 22, 297-302 (2008), a formação de H2AX neste sistema é estritamente dependente da ATR, e não é influenciada por outras quinases relacionadas, tais como DNA-PKs ou ATM. As imagens ilustram o tipo de sinal H2AX que é observado com este sistema. A construção retroviral TopBP1- ER transporta um repórter IRES-GFP para a identificação de células infectadas. Note-se que todas as células (verde) infectadas respondem a OHT com uma formação maciça de H2AX. (C). Ilustração do oleoduto de microscopia de elevado rendimento utilizado para a avaliação in cellulo de inibidores de ATR, tal como definido em Toledo, Li et al. Nat. Struct.Mol. Biol. 18, 721-727 (2011). Resumidamente, TopBP1-ER expressando células são expostas a OHT para ativação de ATR em placas de 96 poços, e subsequentemente processado para H2AX Imunofluorescência . O sinal é adquirido em seguida com um Opera High Throughput Microscope (Perkin Elmer), e o sinal nuclear H2AX é analisado em cada poço. O sinal de média em cada poço é codificado por cores (preto = nenhum sinal; vermelha = sinal máximo). (D) . Exemplo de como um inibidor de ATR bem conhecido (cafeína), comporta-se, neste ensaio celular. No lado esquerdo, os dados a partir de poços de células expressando TOPBP1-ER com ou sem OHT (500 nM). À direita, o efeito da cafeína em células expostas a 500 nM OHT. Como visto, o aumento das concentrações de cafeína levou a uma redução gradual no sinal H2AX nuclear médio por poço, consistente com a inibição da ATR ([cafeína] = 0,1, 0,2, 0,5, 1, 2 e 5 mM). (E) . Efeito das concentrações crescentes do Composto do exemplo 1 e 2 em OHT induzida por H2AX, medido como em (D). (Concentrações: 0,0003, 0,001, 0,003, 0,01, 0,03, 0,1, 0,3, 1 e 3 μM). Duplicatas por cada condição são mostradas. (F) . Dados brutos que mostram a intensidade de H2AX por núcleo individuais obtidos a partir da experiência apresentada em (E), em células expostas a OHT (500 nM) e concentrações crescentes de Composto do Exemplo 1. Cada ponto corresponde à intensidade de H2AX por núcleo de indivíduo. As barras pretas indicam valores médios. (G) . Curvas sigmoidais representando os dados obtidos em (E) foram utilizadas para calcular os valores de IC50 para cada composto. (H) . Efeito de concentrações crescentes de Exemplo 3 e do Exemplo 11 em OHT induzida H2AX, medido como em (D). (Concentrações: 0,0003, 0,001, 0,003, 0,01, 0,03, 0,1, 0,3, 1 e 3 μM). Duplicatas por cada condição são mostradas. (I) . Dados de matérias-primas que mostram a Intensidade H2AX por núcleos individuais obtidos a partir da experiência apresentada em (H), em células expostas a OHT (500 nM) e concentrações crescentes do Exemplo 11. Cada ponto corresponde à intensidade de H2AX por núcleo individual. As barras pretas indicam valores médios. (J) . Curvas sigmoidais representando os dados obtidos em (H) foram utilizadas para calcular os valores de IC50 para cada composto.

[00335] Em adição ao sistema de seleção acima descritos, compostos dos Exemplos aqui apresentados foram rastreados quanto à sua capacidade para inibir a ATR intracelular utilizando um ensaio de transferência de Western para detectar a fosforilação do substrato CHK1 (S345) de ATR em células tratadas com hidroxiureia. Células HT29 são plaqueadas a 500.000 células por poço em placas de 6 poços em meio RPMI (Sigma R6504) suplementado com soro fetal bovino a 10% (Sigma F7524), solução de penicilina/estreptomicina diluída 1: 100 (Gibco 15070-063), e fungizona (Gibco, 15290018), e deixadas aderir durante a noite a 37°C em 5% de CO2. Os compostos são, em seguida, adicionados a partir de uma concentração final de 10DM para o meio celular em 3 diluições em série e as células são incubadas a 37°C em 5% de CO2. Após 15 min, a hidroxiuréia (Sigma H8627) é adicionada a uma concentração final de 2,5 mM. Após 30 min de tratamento com hidroxiuréia, as células são lavadas em PBS, lisadas adicionando 50 μL de tampão de lise em proteína (50mM Tris pH 7.5, 150mM NaCl, 1% IGEPAL CO-630 (Sigma, Ref. 542334- 100G-A), Phospho Stop (Roche, Ref. 04906837001) ae Complete Mini EDTA free (Roche, Ref. 11836170001)). O teor de proteína dos lisados foi determinada pelo método de Bradford modificado (Sigma, Ref. B6916). As proteínas foram resolvidas por SDS-PAGE e transferidas para membrana de nitrocelulose (VWR International Eurolab, Ref. 732-4007). As membranas foram incubadas durante a noite a 4°C com anticorpos específicos para CHK1 total (Santa Cruz Biotechnology, sc-8404), fosfoserina-345 CHK1 (Cell Signaling Technology # 2348) que foram lavadas e depois incubadas com anticorpos anti-camundongos conjugado IRDye800 (Pierce/Cultek, 35521) e secundário IgG anti-coelho de cabra Alexa Fluor 680 (Invitrogen, A21076). As bandas foram visualizadas e quantificadas usando um sistema de imagem de infravermelho Odyssey (LI-COR Biosciences). A percentagem de CHK1 fosforilada contra CHK1 total, em células tratadas com hidroxiuréia foi feita como cem por cento de fosforilação. A percentagem de fosforilação de CHK1 é finalmente plotada contra a concentração para cada composto, e as EC50s para inibição intracelular de ATR são calculadas usando ActivityBase de IDBS.

[00336] A atividade biológica dos compostos no ensaio celular de ATR é representada nas seguintes tabelas de resultados semi-quantitativos: EC50 >1μM (*),100 nM< EC50<1 μM (**) ou EC50 <100 nM (***),. Tabela 1

EXEMPLO 48 - Ensaio de inibição de ATM e ATR celular

[00337] ATM e ATR possuem respostas distintas e sobrepostas a danos no DNA. Elas devem participar juntas, e as respostas devem ser coordenadas. Ambas as vias podem ser ativadas por radiação ionizante, e UV. Como o tratamento com UV não é prático para ser utilizado num ensaio de células de elevado rendimento, o 4NQO mimético de UV (Sigma) foi escolhido para ativar a via de resposta a danos no DNA de ATR e ATM.

[00338] Chk1, uma proteína-quinase a jusante de ATR, tem um papel fundamental no controle de ponto de verificação de dano do DNA, bem como Chk2 a jusante de ATM. Ativação de Chk1 envolve a fosforilação de Ser317 e Ser345 (considerada como o alvo preferencial para a fosforilação/ativação por ATR) e ativação de Chk2 implica na fosforilação de Thr68 (mais notavelmente substrato de ATM). Este ensaio mede uma redução na fosforilação de Chk1 (Ser 345) e de Chk1 (Thr 68) em células de adenocarcinoma do cólon HT29 a seguir ao tratamento com o composto e o mimético de UV 4NQO. Os compostos em 1 mM foram criados por diluição em DMSO a 100% e depois diluídos 1:100 em meio de ensaio (meio RPMI, FCS a 10%, glutamina a 1%). As células foram plaqueadas em placas de 6 cavidades Costar a 5x 105 células por ml em 2 mL de RPMI, FCS a 10%, glutamina a 1% e cultivadas durante 24 horas. A seguir à adição do composto, as células foram incubadas durante 60 minutos. Uma concentração final de 3DM 4NQO (preparada em 100% de DMSO) foi então adicionada, e as células incubadas durante mais 60 min. As células são lisadas e pChk1 Ser345 e pCHK2 Thr68 (Cell Signaling Technology, # 2,661) versus CHK1 e CHK2 total (Santa Cruz Biotechnology, sc-5278), respectivamente, foi analisada por Western blot, conforme descrito acima. A percentagem de CHK1 fosforilada contra CHK1 total ou p-CHK2 contra CHK2 total em células tratadas com 4NQO foi feita como cem por cento de fosforilação. A porcentagem de fosforilação de CHK1 ou CHK2 é finalmente plotada contra a concentração de cada composto, e EC50s para inibição intracelular de ATR são calculadas usando ActivityBase de IDBS.

[00339] A seletividade dos compostos exemplificados para ATR sobre ATM é mostrada na Tabela 2. Tabela 2

Exemplo 49- Ensaios de proliferação celular In vitro

[00340] A potência in vitro dos compostos foi medida pelo ensaio de proliferação celular descrito supra; o Ensaio de Viabilidade Celular Luminescente CellTiter-Glo®, comercialmente disponível na Promega Corp., Madison, WI. Este método de ensaio homogêneo baseia-se na expressão recombinante de Coleoptera luciferase (US 5.583.024; US 5.674.713; US 5.700.670) e determina o número de células viáveisem cultura com base na quantificação de ATP presente, um indicador de células metabolicamente ativas (Crouch et al. (1993) J. Immunol. Meth. 160:81-88; US 6602677). O ensaio CellTiterGlo® foi conduzido em 96 tornando-se passível de rastreamento automatizado de alto rendimento (HTS) (Cree et al. (1995) AntiCancer Drugs 6:398-404).

[00341] O procedimento de ensaio homogêneo envolve a adição do reagente único (Reagente CellTiter-Glo®) diretamente para células cultivadas em meio suplementado com soro. Lavagem celular, a remoção das etapas de pipetagem média e múltipla não é necessária. O sistema detecta apenas 15 células/cavidade em um formato de 96 poços em 10 minutos após a adição de reagente e de mistura.

[00342] O formato homogêneo de “adicionar-misturar-medir” resulta na lise celular e geração de um sinal luminescente proporcional à quantidade de ATP presente. A quantidade de ATP é diretamente proporcional ao número de células presentes na cultura. O Ensaio CellTiter-Glo® gera um sinal luminescente de “tipo de brilho” produzido pela reação de luciferase, a qual tem uma meia-vida geralmente superior a cinco horas, dependendo do tipo de células e meio utilizado. As células viáveissão refletidas em unidades de luminescência relativa (RLU). O substrato, Beetle Luciferin, é oxidativamente descarboxilado por luciferase de vagalume recombinante com a conversão concomitante de ATP em AMP e geração de fótons. A meia-vida alargada elimina a necessidade de utilizar injetores de reagentes e proporciona flexibilidade para o processamento contínuo ou descontínuo modo de múltiplas placas. Este ensaio de proliferação celular pode ser usado com vários formatos de poços múltiplos, por exemplo, formato de poço 96 ou 384. Os dados podem ser gravados por luminômetro ou câmera CCD de imagem do dispositivo. A saída de luminescência é apresentada como unidades relativas de luz (RLU), medidas ao longo do tempo. EXEMPLO 50 - Ensaio de combinação

[00343] O índice de combinação (CI) de combinações de certos compostos dos exemplos e os vários agentes quimioterápicos no título celular em ensaios de proliferação celular in vitro podem ser testados. A pontuação do índice combinação é calculada pelo método de Chou e Talalay (software CalcuSyn, Biosoft). A força da sinergia é registrada com o sistema de classificação de Chou e Talalay: CI inferior a 0,8 indica sinergia, CI entre 0,8 e 1,2 indica aditividade e CI superior a 1,2 indica antagonismo.

[00344] Os valores de EC50 de combinações representativas também são calculados. Os valores de EC50 medidos individualmente do agente quimioterápico e os compostos dos exemplos são comparados com o valor de EC50 da combinação. As linhagens de células são caracterizadas por tipo de tumor. Os ensaios de combinação são realizados como descrito em: “Pim 1 kinase inhibitor ETP-45299 suppresses cellular proliferation and synergizes with PI3K inhibition”. Blanco- Aparicio, et al. Cancer Lett. 2011, 300(2), 145-153. EXEMPLO 51 - ensaio de atividade de alfa PI3K

[00345] A atividade de quinase foi medida usando o ensaio comercial ADP Hunter™ Plus disponível de DiscoveRx (# 33-016), que é um ensaio homogêneo para medir a acumulação de ADP, um produto universal da atividade de quinase. A enzima, de PI3K (p110/p85 foi comprada de Carna Biosciences (# 07CBS- 0402A). O ensaio foi realizado seguindo as recomendações do fabricante com ligeiras modificações, principalmente, que o tampão de quinase foi substituído por 50 mM HEPES, pH 7,5, 3 mM MgCl2, 100 mM NaCl, 1 mM EGTA, 0,04% CHAPS, 2 mM TCEP e 0,01 mg/mL BGG. O PI3K foi ensaiado numa experiência de titulação para determinar a concentração de proteína ótima para o ensaio de inibição. Para calcular o IC50 dos compostos, diluições em série 1: 5 dos compostos foram adicionadas à enzima a uma concentração fixa (2,5 g/mL). A enzima foi pré- incubada com o inibidor e substrato 30 M PIP2 (P9763, Sigma) durante 5 min e, em seguida, foi adicionada ATP para uma concentração final de 50 M. A reação foi realizada durante 1 hora a 25oC. Reagente A e B foram sequencialmente adicionadas aos poços e as placas foram incubadas durante 30 min a 37oC. Contagens de fluorescência foram lidas num instrumento Victor (Perkin Elmer) com as configurações recomendadas (544 e 580 nm como comprimento de onda de excitação e emissão, respectivamente). Os valores foram normalizados contra a atividade de controle incluída para cada enzima (isto é, 100% de atividade de PI3 quinase, sem composto). Estes valores foram comparados com a concentração de inibidor e foram ajustados a uma curva dose-resposta sigmóide usando o modelo sigmoidal de quatro parâmetros logístico implementar para o software base Activity. EXEMPLO 52 - Ensaio de atividade de mTOR

[00346] A atividade enzimática de mTOR foi medida utilizando um ensaio de atividade de quinase LanthaScreen™ (Invitrogen). A enzima foi adquirida a partir de Invitrogen (PV4754), bem como o substrato marcado com GFP (GFP-4EBP1; PV4759) e o anticorpo Tb-antip4EBP1(pThr46) (PV4757). O ensaio foi realizado em 50 mM de tampão HEPES, pH 7,5, contendo 1,5 mM MnCl2, 10 mM MgCl2, 1 mM EGTA, 2,5 mM DTT e 0,01% de Tween-20. A concentração dos componentes do ensaio foram as seguintes: 0,24 nM mTOR quinase, 400 nM 4EBP1-GFP, 10 mM de ATP e diluições em série do composto (inibidor) a ser avaliado. Após 1 h de incubação à temperatura ambiente, EDTA a 20 mM foi utilizado para parar a reação e o anticorpo marcado com o térbio (4 nM) adicionado para detectar o produto fosforilado. O anticorpo se associou com o produto fosforilado, resultando em um aumento do valor de TR-FRET. O valor de TR-FRET (um número adimensional) foi calculado como a razão entre o sinal de aceitador (GFP, emissão a 520 nm) para o sinal de doador (térbio, emissão a 495 nm). Os valores foram plotados contra a concentração de inibidor e ajustados a uma curva sigmóide de dose-resposta utilizando o modelo sigmoidal de quatro parâmetros Logístico implementar para o software de base Activity. EXEMPLO 53 - Ensaio de atividade de DNAPK

[00347] A atividade de quinase foi medida usando o ensaio comercial ADP Hunter™ Plus disponível de DiscoveRx (# 90-0083), que é um ensaio homogêneo para medir a acumulação de ADP, um produto universal da atividade de quinase. A enzima, a DNA-PK foi adquirida de Promega (# V5811). O ensaio foi feito seguindo as recomendações do fabricante com pequenas modificações: Principalmente o tampão de quinase foi substituído por 15 mM de HEPES, pH 7,5, MgCl2 10 mM, NaCl 20 mM, 1 mM EGTA, 0,1 mg/mL BGG, 0,02% de Tween 20. A DNA-PK foi ensaiado numa experiência de titulação para determinar a concentração de proteína ótima para o ensaio de inibição. Para calcular o IC50 dos compostos, as diluições em série 1: 3 dos compostos foram adicionadas à enzima a uma concentração fixa (2U/L). A enzima foi pré-incubada com o inibidor e substrato 200 M DNA e em seguida adicionou-se ATP para uma concentração final de 75 M. A reação foi realizada durante 1 hora a 37oC. Reagente A e B foram sequencialmente adicionados aos poços e as placas foram incubadas durante 30 min à temperatura ambiente. Contagens de fluorescência foram lidas num instrumento EnVision (Perkin Elmer) com as configurações recomendadas (550 e 590 nm como comprimento de onda de excitação e emissão, respectivamente). Os valores foram normalizados contra a atividade de controle incluídos para cada enzima (isto é, 100% de atividade de quinase DNA_PK, sem composto). Estes valores foram comparados com a concentração de inibidor e foram ajustados a uma curva dose- resposta sigmóide usando o modelo sigmoidal de quatro parâmetros Logistc implementar para o software de base Activity. EXEMPLO 54- inibição da fosforilação de AKT (ensaio ELISA)

[00348] Inibição da fosforilação de AKT. (Ensaio de ELISA) pode ser utilizado como uma medida da atividade de PI3K e mTOR nas células. A atividade é medida como níveis endógenos de proteína fosfo-Akt1 (Ser473). Células de osteossarcoma U2OS são plaqueadas em 96 placas de cultura de tecido de revestimento de poli-D-lisina (18.000 células/poço). Após o tratamento com diluições em série do composto durante 3 horas, as células são fixadas diretamente nos poços com 4% de paraformaldeído.

[00349] Após fixação, poços individuais passam pela mesma série de etapas utilizadas para um immunoblot convencional: incluindo o bloqueio com 5% de BSA, incubação com 1/1000 de anticorpo-AKT primário (Ser 74) em PBS contendo BSA a 5% a 4°C durante a noite (Sinalização celular), a lavagem e a incubação com o segundo anticorpo HRP anti-camundongo IgG durante 1 h à RT (Amersham). Após a adição de substrato quimioluminescente de sensibilidade máxima SuperSignal ELISA Femto (Pierce), os resultados são lidos utilizando um leitor de placas de luminescência (Victor). Os valores de EC50 foram estabelecidos para os compostos testados.

[00350] A atividade biológica para os compostos selecionados no ensaio bioquímico de PI3KD, mTOR e DNAPK é mostrada na Tabela 3. Tabela 3

Exemplo 55 - Avaliação da capacidade dos compostos para gerar DNA de cadeia simples

[00351] A principal função celular de ATR é a supressão de RS (Lopez-Contreras, A. J. & Fernandez-Capetillo, O. DNA Repair (Amst.) 9, 1249-1255 (2010)). Ao nível molecular, RS é definida como a acumulação de grandes porções de DNA de cadeia simples. Em células, ssDNA é rapidamente revestido por proteína de Replicação A (RPA). Portanto, o nível de RPA ligada a cromatina pode ser utilizado como um marcador substituto de ssDNA (Toledo, Li et al. Nat. Struct.Mol. Biol. 18, 721-727 (2011); Lopez-Contreras, A. J. et al.Journal of Experimental Medicine (2012). doi:10.1084/jem.20112147).

[00352] O efeito dos compostos dos Exemplos 1, 2, 3 e 11 no nível de RPA ligada a cromatina é mostrado nas Figuras 2(A) e 2(B). Os detalhes são os seguintes: (A) . Figura 2(A) mostra o efeito do Exemplo 1 e Exemplo 2 (1 DM) sobre o nível de RPA ligada a cromatina. Os compostos foram usados por si só, ou em combinação com HU, um inibidor da ribonucleotídeo-redutase que esgota grupos de dNTP e é um conhecido indutor do estresse replicativo. RPA ligada a cromatina foi quantificada por meio de microscopia de elevado rendimento, como descrito acima. Consistente com a inibição de ATR, os três compostos podem aumentar os níveis de RPA ligada a cromatina, e esta atividade é grandemente exacerbada na presença de HU. (B) . A Figura 2(B) mostra o efeito do Exemplo 3 e do Exemplo 11 (1 μM) para aumentar os níveis de RPA ligada a cromatina. Isto foi quantificado por High Throughput Microscopy tal como definido antes. Consistente com a inibição de ATR, os dois compostos podem aumentar os níveis de RPA ligada a cromatina. Exemplo 56 - Avaliação da atividade na prevenção do colapso de forquilhas de replicação paralisadas

[00353] Um dos papéis mais conhecidos de ATR é impedir a formação de quebras de cadeia dupla de DNA (DSB) em forquilhas de replicação paralisadas (Lopez-Contreras, AJ & Fernandez-Capetillo, Reparo do DNA O. (Amst.) 9, 1249-1255 (2010)). Para testar esta atividade, foram realizados dois ensaios (A, B). Ambos os ensaios demonstram que os compostos do Exemplo 1, Exemplo 2, Exemplo 3 e Exemplo 11 podem promover a rotura de forma robusta de forquilhas de replicação HU paradas, o que é consistente com a sua capacidade inibitória de ATR. a. No primeiro ensaio, as células humanas U2OS foram expostas (ou não) para 2 mM de HU para promover o bloqueamento das forquilhas de replicação. Em seguida, as células foram liberadas em meio contendo 1 μM dos compostos Exemplo 1 e Exemplo 2, durante 16 h e o teor de DNA foi analisado através de citometria de fluxo, medindo a intensidade de fluorescência do iodeto de propídio. As células de controle foram tratadas com o mesmo volume de DMSO.

[00354] Os resultados são mostrados na Figura 3 (A) para os compostos dos Exemplos 1 e 2. A geração de quebras no DNA em células em replicação seria ativar o próximo ponto de verificação celular em G2, conduzindo à paragem do ciclo celular e uma acumulação de células na fase G2. Consistente com isto, os compostos Exemplo 1 e Exemplo 2 conduziram a uma acumulação de células na fase G2, que foi grandemente aumentada se previamente exposta a HU.

[00355] Os resultados são mostrados na Figura 3(B) para os compostos dos Exemplos 3 e 11. Geração massiva de quebras no DNA em células em replicação evitaria que as células de progredissem através da fase S, levando a uma acumulação de células na presente fase do ciclo celular. Consistente com isto, os dois compostos conduziram a uma acumulação de fase intra-S de células. b. A geração de DSB derivando a partir do colapso de forquilhas paralisadas também foi quantificada através de uma avaliação da formação de focos nucleares da proteína de reparação de DNA 53BP1. Esta avaliação da inibição de ATR foi efetuada por métodos descritos na literatura (Toledo et al. Nat. Struct. Mol. Biol. 2011). Figura 4(A) mostra o número de focos 53BP1 que estavam presentes em células tratadas com inibidores de ATR (para os exemplos 1 e 2), com ou sem HU como em a. Como pode ser visto na Figura 4 (A), a presença de 1 μM de composto do Exemplo 1 ou Exemplo 2 levou a uma formação maciça de focos 53BP1 em células tratadas com HU (2 mM).

[00356] A Figura 4(B) mostra o número de focos 53BP1 que estavam presentes em células tratadas com inibidores de ATR (para os Exemplos 3 e 11). Como se vê nas imagens extraídas a partir de células tratadas como em a, a presença de 1 μM do Exemplo 3 ou Exemplo 11, levou a uma formação maciça de focos 53BP1. Consistente com sua capacidade inibitória de ATR, ambos os ensaios exemplificam que compostos 3 e 11 podem promover vigorosamente a estagnação e quebra de forquilhas de replicação. EXEMPLO 57 - Ensaio de Ligação de hERG

[00357] O gene hERG codifica para uma proteína de canal iônico localizada sobre o coração. Ele está envolvido na coordenação da batida do coração devido a sua capacidade de conduzir corrente elétrica. Interação com este canal hERG pode causar prolongamento do intervalo QT. Este prolongamento pode levar a arritmias ventriculares. Por conseguinte, os compostos do presente pedido de patente foram caracterizados de acordo com o seguinte ensaio.

[00358] Kits de ensaio de ENsaio de hERG preditor foram obtidos da Invitrogen (Carlsbad, CA). O ensaio de ligação foi realizado de acordo com as instruções do kit. As medições de polarização de fluorescência foram efetuadas utilizando Leitor de Microplacas EnVision da Perkin-Elmer Instruments. Valores de polarização foram calculados automaticamente usando Software de base Activity. Uma descrição do ensaio é publicada por Piper et al. Assay & Drug Dev. Tech. 6, 213 (2008).

[00359] Os dados de IC50 (em micromolar) para os compostos selecionados são apresentados na Tabela 4: Tabela 4

EXEMPLO 58 - Ensaio de inibição de CYP

[00360] Os citocromos P450 (CYP450) são uma super família de enzimas que catalisam o metabolismo oxidativo de um conjunto diversificado de produtos químicos hidrofóbicos, incluindo a maioria dos fármacos terapêuticos. O ensaio P450- Glo baseado na Luciferase (Promega, V9770, V9790, V9880, V9890, V9770) emprega substratos luminogênicos de sonda CYP450 (Luciferin-IPA, Luciferin-ME, Luciferin-H, Luciferin- BE, Luciferin-ME EGE, Luciferin-H EGE e Luciferin-PPXE) que são derivados de luciferina de besouro, um substrato para enzimas luciferase. Os derivados não são substratos para a luciferase, mas são convertidos por P450 para luciferina, que por sua vez reage com a luciferase para produzir uma quantidade de luz que é diretamente proporcional à atividade de P450. O ensaio mede a inibição dependente da dose de CYP pelos compostos de teste contra enzimas CYP recombinantes expressas em células de inseto. A reação de CYP é realizada através de incubação de um substrato de CYP luminogênico com uma enzima de CYP e sistema de regeneração de NADPH, em seguida, o Reagente de Detecção de Luciferina reconstituído é adicionado. Este reagente pára simultaneamente a reação de CYP e inicia um sinal luminescente de tipo brilho com uma meia-vida maior do que 4 horas. A reação da luciferase do tipo brilho produz um sinal estável, que elimina a necessidade de detecção de luminescência rigorosamente cronometrada.

[00361] Cinco isoformas de CYP (0.5pmol) foram testadas, isto é, 1A2, 2C9, 2C19, 2D6 e 3A4 (cada isoforma foi determinada em uma placa de ensaio em separado). Cada placa de ensaio continha vários compostos em 2 concentrações (10M and 1M), com 2 repetições para cada concentração ou um pequeno número de compostos por placa em resposta a dose em duplicata (50, 16.5, 5.4, 1.8, 0.6, 0.2, 0.066, 0.022, 0.007 M). Além disso, cada placa de ensaio continha 8 concentrações diferentes de um inibidor específico da isoforma (furafilina, sulfafenazol, N-3-benzilnirvanol, quinidina e cetoconazol como inibidores de CYP 1A2, 2C9, 2C19, 2D6 e 3A4, respectivamente), com duas repetições para cada concentração. Os compostos de teste e de referência para os inibidores foram testados a uma concentração final de DMSO de 0,5%. A placa de ensaio também incluiu 8 repetições um controle de veículo contendo 0,5% de DMSO/H2O. As membranas contendo o CYP, composto de teste e o substrato de sonda foram pré-incubadas 10 min a 37°C na ausência de NADPH, NADPH foi, em seguida, adicionado a seguir à incubação durante 60 minutos a 37°C, a reação foi terminada pela adição de reagente de detecção de luciferina. Após 20 min de incubação a 37°C, a placa de ensaio foi lida no leitor Envision 2104 Multilable. Os valores foram normalizados contra a atividade de controle incluída para cada CYP. Estes valores foram representados graficamente contra a concentração do inibidor e foram ajustados a uma curva dose-resposta sigmoidal, utilizando o modelo sigmoidal de quatro parâmetros Logistc implementado para o software de base Activity. Inibição Dependente de Tempo de CYP3A4

[00362] Microssomas de fígado humano (0,1 mg/mL) e composto de ensaio (0,01, 0,1, 0,4, 1, 4, 10, 50 M concentração final de DMSO 0,2%) ou DMSO ou foram pré- incubados durante 30 minutos na ausência e na presença de NADPH ou foram submetidos a uma pré-incubação de 0 min. O midazolam (2,5 M) foi então adicionado às incubações. Após 5 minutos, adicionou-se metanol com padrões internos. As amostras foram analisadas por LC/MS/MS para monitorar a formação de 1'-hidroximidazolam. Os valores de IC50 foram determinados.

[00363] Os dados de IC50 em unidades micromolares () para cinco isoformas de CYP são mostrados para os compostos selecionados da Tabela 5: Tabela 5

EXEMPLO 59 - Farmacocinética

[00364] A fim de determinar o destino dos compostos in vivo, os estudos farmacocinéticos foram conduzidos usando camundongos fêmeas de 10 semanas de idade Balb-C. Os compostos foram dissolvidos em veículos selecionados a uma concentração calculada de forma a administrar a dose selecionada em 0,1 mL. Os animais foram administrados por via intravenosa e por via oral (por sonda), e sacrificados em diferentes pontos no tempo (n = 3, em cada ponto de tempo). Os pontos de tempo foram 0,08, 0,25, 0,5, 1, 4 e 8 h para a ramificação intravenosa, e 0,08, 0,16, 0,25, 0,5, 1, 4, 8 e 24 h para ramificação oral. O sangue foi recolhido e processado para o plasma, que foi analisado e quantificado por meio de espectrometria de massa em tandem acoplada com cromatografia líquida. Os parâmetros farmacocinéticos foram estimados por meio do ajuste dos dados experimentais a um modelo compartimental usando o software WinNonlin para análise farmacocinética. Os parâmetros estimados foram como se segue: área sob a curva (AUC); meia-vida plasmática do produto (t^); depuração plasmática (Cl); volume de distribuição (Vd); MRT (tempo médio de residência); biodisponibilidade (F%); A concentração plasmática máxima após a administração oral (Cmax); Hora em que a Cmax ocorre (Tmax).

[00365] A Figura 5 mostra os parâmetros farmacocinéticos e perfil em camundongos BALBC após i.v. (1 mg/kg) e p.o. (10 mg/kg), a administração do Exemplo 11 formulada em 10% de N- metil-2-pirrolidona, 50% de polietilenoglicol 300 e 40% de solução salina. Três camundongos foram sacrificados em cada ponto de tempo.

[00366] A Figura 6 mostra os parâmetros farmacocinéticos e perfil em camundongos Balbc após administração i.v. e p.o. do Exemplo 3 formulado em 10% de solução salina de N-metil- 2-pirrolidona, 50% de polietilenoglicol 300 e 40%. Três camundongos foram sacrificados em cada ponto de tempo. EXEMPLO 60 - Avaliação da eficácia In vivo

[00367] A eficácia dos compostos da invenção por si só ou em combinação com agentes quimioterápicos foram medidas in vivo através do implante de aloenxertos ou xenoenxertos de células de câncer em roedores e tratamento dos animais portadores de tumor com os compostos isoladamente ou em combinação com agentes quimioterápicos. Obtiveram-se resultados variáveis, dependendo, inter alia, da linhagem de células, a presença ou ausência de estresse replicativo ou determinadas mutações nas células tumorais, a sequência de administração de um agente quimioterápico e composto, e o regime de dosagem.

[00368] A Figura 7 mostra o volume do tumor ao longo de 33 dias em coortes de camundongos de 8-10 semanas de idade C57BL/6 injetados por via intravenosa com células de linfoma Eμmyc. Os camundongos receptores foram monitorados durante a formação do tumor pela presença de células tumorais no (medição de LDH) no sangue, e duas vezes por semana por palpação dos linfonodos pré-escapular e cervicais, uma vez por semana por medições de sonografia do tamanho dos linfonodos torácicos. Os camundongos foram agrupados (8 camundongos por grupo) e tratados por via oral com veículo (10% de N-metil-2-pirrolidona, 90% polietileno Glicol 300) e 25 e 50 mg/kg de Exemplo 11 formulado no mesmo veículo, uma vez por dia, por 2 dias por semana na primeira semana e 5 dias na segunda e na terceira semana. A eficácia do tratamento foi feita avaliando o peso relativo de todos os tecidos tumorais (baço, linfonodos salivares, linfonodos mamários, timo e linfonodos mesentéricos) versus peso corporal subtraindo o peso relativo dos mesmos tecidos normais. As barras representam o erro padrão da média (n = 8).

[00369] Dosagem de coortes iniciada no Dia 12 após a injeção das células tumorais quando todos os camundongos mostraram um aumento nos valores de LDH no sangue relativamente a camundongos não inoculados. Em comparação com o controle do veículo, as doses do Exemplo 11 tiveram um efeito para retardar o crescimento do tumor, com o aumento do atraso em doses mais elevadas. Na dose mais baixa de 25 mg/kg, uma inibição do crescimento tumoral (TGI) de 53% foi obtida no dia 33 em relação ao veículo e a dose mais elevada de 50 mg/kg demonstrou uma TGI de 74%.

[00370] A Figura 8 mostra o volume do tumor ao longo de 22 dias em coortes de camundongos de 8-10 semanas de idade C57BL/6 injetados por via intravenosa com células de linfoma Eμmyc e doses por via oral uma vez ao dia (2 dias por semana na primeira semana, 5 dias por semana a segunda semana e 2 dias por semana na terceira semana) por 13 dias, começando no dia 0 com: veículo (10% N-Metil- 2-pirrolidona, 90% polietileno Glicol 300) e 25 mg/kg do Exemplo 3 formulado no mesmo veículo (7 camundongos por grupo).

[00371] Dosagem de coortes iniciada no Dia 10 após a injeção das células tumorais quando todos os camundongos mostraram um aumento nos valores de LDH no sangue em relação a um camundongo não inoculado. Em comparação com o controle de veículo, a dose do Exemplo 3 tinha um efeito para retardar o crescimento do tumor. Em 25 mg/kg uma TGI de 46% foi obtida no dia 23, em comparação com o veículo. EXEMPLO 61

[00372] Exemplo 61 foi sintetizado seguindo uma via sintética semelhante a utilizada para o Exemplo 4, usando como precursor 3 (R)-hidroximetilmorfolina.

[00373] LC-MS1: tR= 5,26 min, MS: 455,2 [M+H]+,

[00374] 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 11,20 (s, 1H), 7,98 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,52 - 7,39 (m, 2H), 7,34 (s, 1H), 7,16 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 4,59 (d, J = 13,0 Hz, 1H), 4,39 (dd, J = 10,9, 3,2 Hz, 1H), 4,13 - 4,00 (m, 1H), 3,99 - 3,81 (m, 2H), 3,74 (t, J = 9,4 Hz, 1H), 3,56 (t, J = 10,6 Hz, 1H), 3,19 - 3,12 (m, 2H), 2,72 - 2,67 (m, 1H), 1,92 (d, J = 3,7 Hz, 6H), 1,01 - 0,77 (m, 4H). EXEMPLO 62

[00375] Exemplo 62 foi sintetizado seguindo uma mesma via sintética a utilizada para o Exemplo 31, mas utilizando intermediário XLI com N-metil-1H-1,3-benzodiazol-2-amina

[00376] LC-MS1: tR= 2,92 min, MS: 473,3 [M+H]+.

[00377] 1H NMR (300 MHz, DMSO) 1H), 8,01 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,07 (td, J = 7,6, 1,0 Hz, 1H), 1H), 4,33 — 4,20 (m, 2H), 4,08 — 2H), 3,60 (ddd, J = 12,5, 9,1, 11,5, 7,9 Hz, 1H), 3,01 (s, 3H), 2,21 - 2,09 (m, 1H), 2,05 - 1,96 (s, 3H). Intermediário XLI

[00378] Intermediário XLI foi sintetizado seguindo uma mesma via sintética a utilizado para o Intermediário 2-VII, por reação de alquilaação com iodometano na presença de terc- butóxido de intermediário quiral 2-II. EXEMPLO 63

[00379] Uma mistura do Intermediário XX (70 mg, 0,2 mmol) em acetonitrila (1,0 mL) foi adicionada (1H-benzoimidazol- 2-il)-isopropil-amina (65 mg. 0,4) e Cs2CO3 (200 mg, 0,6 mmol ) . A reação foi aquecida a 120°C em um tubo de alta pressão, durante 6 dias. A mistura foi arrefecida até à temperatura ambiente e o solvente foi removido em vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em coluna (Isoluto Si II 5), eluindo com um sistema de solvente de EtOAc/ciclohexano (de 50% a 100% em EtOAc). O produto pretendido foi recuperado como um sólido branco, e foi triturado com éter dietílico. O sólido insolúvel foi separado por filtração e seco em vácuo (33 mg, 33%).

[00380] LC-MS1: tR= 3,34 min, MS: 487,2 [M+H]+

[00381] 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 7,91 (d, J = 7,9 Hz, 2H), 7,17 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 6,99 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 6,90 (dd, J = 11,1, 4,2 Hz, 1H), 4,40 — 4,23 (m, 2H), 4,17 — 3,71 (m,5H), 3,50 (t, J = 11,7 Hz, 1H), 3,18 (dd, J = 19,4, 8,6 Hz, 2H), 2,94 (s, 3H), 1,78 (s, 3H), 1,76 (s, 3H), 1,20 (d, J = 6,4 Hz, 6H). Intermediário XX

[00382] Intermediário XX foi sintetizado seguindo uma mesma via sintética a utilizada para o Intermediário X, mas usando como precursor 3(R)-hidroximetilmorfolina. EXEMPLO 64

[00383] A uma mistura do Intermediário XX (80 mg, 0,2 mmol) em acetonitrila (1,0 mL) adicionou-se intermediário XLII (75 mg. 0,4) e Cs2CO3 (225 mg, 0,7 mmol). A reação foi aquecida a 120°C em um tubo de alta pressão, durante 3 dias. A mistura foi arrefecida até à temperatura ambiente e diluída com água e EtOAc. As diferentes camadas foram separadas e a fase orgânica foi lavada duas vezes com solução sat. de NaHCO3, uma vez com salmoura, secas sobre Na2SO4 e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em coluna (Isoluto Si II 5), eluindo com um sistema de solvente de EtOAc/ciclohexano (de 25% a 100% em EtOAc) e re-purificado por HPLC semi preparativa. O produto pretendido foi recuperado como um sólido branco.

[00384] LC-MS1: tR = 3,19 min, MS: 473,2 [M+H]+

[00385] 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 8,09 (t, J = 4,1 Hz, 1H), 7,93 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,17 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,00 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 6,90 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 4,43 - 4,25 (m, 2H), 4,00 (dd, J = 11,7, 3,6 Hz, 1H), 3, 95 — 3,70 (m, 3H), 3,58 - 3,32 (m, 3H), 3,22 - 3, 08 (m, 2H), 2,96 (s, 3H), 2,02 - 1,84 (m, 1H), 1,77 (s, 3H), 1,75 (s, 3H), 1,17 (t, J = 7,1 Hz, 3H). Intermediário XLII

[00386] Uma mistura de 2-clorobenzimidazol (150 mg, 0,9 mmol) e etilamina a 70% em água (0,4 mL) em ACN (0,5 mL) foi aquecida sob irradiação com micro-ondas durante 45 min a 160°C (Biotage, Abs. Level VH). Os solventes foram removidos em vácuo. O produto em bruto foi suspenso numa mistura de solvente 1:1 CHCl3/iPrOH. As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 e concentrou-se em vácuo, deixando óleo límpido (75 mg; 65%). EXEMPLO 65

[00387] Uma mistura do Intermediário XX (75 mg, 0,2 mmol) em acetonitrila (2,0 mL) foi adicionado intermediário XLIII (76 mg, 0,4) e Cs2CO3(210 mg, 0,6 mmol). A reação foi aquecida a 115°C num tubo de alta pressão, durante 3 dias. A mistura foi arrefecida até à temperatura ambiente e diluída com água e EtOAc. As diferentes camadas foram separadas e a fase orgânica foi lavada duas vezes com solução sat. de NaHCO3, uma vez com salmoura, secas sobre Na2SO4 e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em coluna (Isoluto Si II 5), eluindo com um sistema de solvente de EtOAc/ciclohexano (de 25% a 100% em EtOAc) e re-purificado por HPLC semi preparativa. O produto pretendido foi recuperado como um sólido branco.

[00388] LC-MS1: tR= 3,32 min, MS: 487,2 [M+H]+

[00389] 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 8,12 (t, J = 5,7 Hz, 1H), 7,93 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,17 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 6,99 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 6,89 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 4,42 - 4,21 (m, 2H), 3,99 (d, J = 11,5 Hz, 1H), 3, 96 - 3, 69 (m, 3H), 3,50 (t, J = 10,6 Hz, 1H), 3,38 - 3,31 (m, 2H), 3,20 - 3,13 (m, 2H), 2,95 (s, 3H), 1,77 (s, 3H), 1,75 (s, 3H), 1,59 (dd, J = 14,5, 7,3 Hz, 2H), 0,87 (t, J = 7,4 Hz, 3H). Intermediário XLIII

[00390] Uma mistura de 2-clorobenzimidazol (100 mg, 0,6 mmol) e propilamina (0,3 mL, 3,2 mmol) em acetonitrila (0,4 mL) foi aquecida sob irradiação com micro-ondas durante 50 min a 160°C (Biotage, Abs. Level VH). Os solventes foram removidos em vácuo, o produto bruto foi purificado por cromatografia flash em coluna (Si Isolutes 5 g), eluindo com um sistema solvente de MeOH/DCM (de 0% a 5% em MeOH). O produto final requerido foi recuperado como um óleo incolor (90 mg; 78%). EXEMPLO 66

[00391] Exemplo 66 foi sintetizado seguindo um protocolo semelhante ao utilizado para o Exemplo 8 a partir de intermediário XLIV em acetonitrila como solvente.

[00392] LC-MS1: tR= 3,00 min, MS: 457,2 [M+H]+

[00393] 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 8,14 (q, J = 4,3 Hz, 1H), 7,99 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,19 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,01 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 6,91 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 4,37 (dd, J = 11,0, 3,3 Hz, 1H), 4,26 (d, J = 13,0 Hz, 1H), 4,00 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 3, 94 - 3, 82 (m, 2H), 3, 82 - 3, 69 (m, 1H), 3,50 (t, J = 11,9 Hz, 1H), 3,18 (dd, J = 22,2, 11,6 Hz, 2H), 2,99 (s, 3H), 2,97 (d, J = 4,8 Hz, 3H), 1,63 (s, 2H), 1,36 (s, 2H). Intermediário XLIV

[00394] Intermediário XLIV foi sintetizado seguindo um protocolo semelhante ao utilizado para o intermediário XXV utilizando como precursor 3(R)-hidroximetilmorfolina. EXEMPLO 67

[00395] Uma mistura de intermediário XLVII (100 mg, 0,30 mmol), éster pinacol ácido indol-4-borônico (81 mg, 0,33 mmol), PdCl2(PdPPh3)2 (20 mg, 0,03) e 0,6 ml de Na2CO3 (aquoso 2 M) em dioxano (2,0 mL) foi aquecida a 100°C durante 5 h. A mistura escura foi filtrada através de uma almofada de Celite lavando com DCM. O filtrado foi concentrado em vácuo e o resíduo foi purificado por meio de cromatografia flash em coluna de Biotage eluindo com um sistema de solvente de EtOAc/ciclohexano (de 25% a 75% em EtOAc). O produto desejado foi re-purificado por HPLC prep. O composto final requerido 67 foi recuperado como um sólido branco.

[00396] LC-MS1: tR= 5,05 min, MS: 441,1 [M+H]+

[00397] 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 11,14 (s, 1H), 7,93 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,41 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,33 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 7,24 (s, 1H), 7,09 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 4,49 (d, J = 12,9 Hz, 1H), 4,29 (dd, J = 10,9, 3,1 Hz, 1H), 3,98 (d, J = 11,5 Hz, 1H), 3, 87 - 3, 80 (m, 2H), 3,67 (t, J = 9,5 Hz, 1H), 3,50 (t, J = 10,6 Hz, 1H), 3,23 - 3, 00 (m, 2H), 2,99 - 2,80 (m, 4H), 2,79 (s, 3H), 2,09 - 2,07 (m, 1H), 1,85 - 1,80 (m, 1H). Intermediário XLVII

[00398] Uma mistura de intermediário XLVI (30 mg, 0,1 mmol) de 1,3-dibromopropano (22 uL, 0,21 mmol), TBAB (6 mg) e uma solução aquosa 10 M de NaOH (0,1 mL) em tolueno (1 mL) foi aquecida num tubo de alta pressão a 110°C durante 18 h. A mistura foi arrefecida até à temperatura ambiente e diluiu- se com EtOAc/água. As diferentes camadas foram separadas e a fase aquosa foi extraída duas vezes com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre Na2SO4 e concentradas em vácuo. O resíduo amarelo proporcionou intermediário XLVII. Intermediário XLVI

[00399] Intermediário XLVI foi sintetizado seguindo um protocolo semelhante ao utilizado para o intermediário IX usando como precursor (R)-hidroximetilmorfolina. EXEMPLO 68

[00400] Uma mistura de intermediário XLVIII (110 mg, 0,24 mmol), éster pinacol ácido indol-4-borônico (70 mg, 0,28 mmol), PdCl2(PdPPh3)2 (17 mg, 0,02) e 0,5 ml de Na2CO3 (aquoso 2 M) em dioxano (2,0 mL) foi aquecida a 100°C durante 4 h. A mistura escura foi filtrada através de uma almofada de Celite lavando com DCM. O filtrado foi concentrado em vácuo e o resíduo foi purificado por cromatografia flash em coluna (Isolute Si II 5 g) eluindo-se com um sistema de solvente de EtOAc/ciclohexano (de 15% a 100% em EtOAc). O exemplo 68 foi recuperado como um sólido branco.

[00401] LC-MS1: tR= 5,14 min, MS: 542,2 [M+H]+

[00402] 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 11,23 (s, 1H), 7,96 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,49 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,43 (s, 1H), 7,24 (s, 1H), 7,16 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 4,62 (d, J = 12,3 Hz, 1H), 4,39 (dd, J = 10,9, 3,2 Hz, 1H), 4,09 — 3, 07 (m, 7H), 3,78 (t, J = 10,8 Hz, 1H), 3,57 (t, J = 12,8 Hz, 1H), 3,32 - 3, 08 (m, 5H), 2,89 (s, 3H), 2,80 (dd, J = 15,3, 11,7 Hz, 1H), 2,06 - 1, 84 (m, 2H), 1,16 (t, J = 7,0 Hz, 3H). Intermediário XLVIII

[00403] Uma mistura de intermediário XLVI (200 mg, 0,6 mmol), bis-(2-cloro-etil)-carbâmico ácido éster (335 uL, 1,5 mmol), TBAB (40 mg) e uma solução aquosa 10 M de NaOH (0,6 mL ) em tolueno (2 mL) foi aquecida num tubo de alta pressão a 110°C durante 18 h. A mistura foi arrefecida até à temperatura ambiente e diluída com água e EtOAc. As diferentes camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraída duas vezes com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre Na2SO4 e concentradas em vácuo. O produto em bruto foi purificado por cromatografia flash em coluna (Isolute Si II, 10 g), eluindo com um sistema de solvente de EtOAc/ciclohexano (de 25 a 75% em EtOAc). O composto final requerido XLVIII foi recuperado como um sólido creme (100 mg, 33%). EXEMPLO 69

[00404] Uma mistura de 68 (60 mg, 0,11 mmol) com LiOH (60 mg, 1,4 mmol) numa mistura de solvente de MeOH/2-propanol (1: 1, 2 mL) foi aquecida, sob irradiação com microndas durante 150 min a 160°C (Biotage Abs. Level VH). Os solventes foram removidos em vácuo. O produto em bruto foi purificado por cromatografia flash em coluna (Isolute Si II 5 g) eluindo com um sistema solvente: primeiro MeOH/DCM (de 0% a 5% em MeOH) e depois com NH3 em MeOH/DCM (5% da solução de 7 N NH3 em MeOH). O produto final requerido 69 foi recuperado como um sólido branco (15 mg, 28%).

[00405] LC-MS1: tR= 2,54 min; 2,71 min, MS: 470,2 [M+H]+

[00406] 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 11,15 (s, 1H), 7,88 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,41 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,35 (s, 1H), 7,19 (s, 1H), 7,09 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 4,55 (d, J = 12,7 Hz, 1H), 4,31 (dd, J = 10,5, 2,9 Hz, 1H), 4,00 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 3, 93 — 3, 64 (m, 3H), 3,51 (t, J = 11,3 Hz, 1H), 3,19 - 3,06 (m, 4H), 2,91 (d, J = 12,4 Hz, 2H), 2,74 (s, 3H), 2,40 - 2,33 (m, 2H), 1,94 - 182 (m, 2H). EXEMPLO 70

[00407] O composto 70 foi sintetizado seguindo uma via sintética semelhante à utilizado para a síntese do Exemplo 11, por reação de um intermediário quiral XX com 2 aminobenzimidazol (solvente de acetonitria, 130°C durante 3 dias).

[00408] LC-MS1: tR= 2,983 min, MS 445,20 [M+H]+,

[00409] 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 7,97 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,39 (brs, 2H), 7,18 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,05 (td, J = 7,5, 1,0 Hz, 1H), 6,99 - 6,92 (m, 1H), 4,40 (dt, J = 15,1, 7,7 Hz, 2H), 4,05 (dd, J = 11,5, 3,2 Hz, 1H), 3,99 - 3,79 (m, 3H), 3,56 (td, J = 11,6, 2,3 Hz, 1H), 3,21 (m, 2H), 3,01 (s, 3H), 1,83 (s, 3H), 1,81 (s, 3H). EXEMPLO 71

[00410] O composto 71 foi sintetizado seguindo uma via sintética semelhante ao utilizado para a síntese do Exemplo 1 a partir de reação de acoplamento do intermediário XX quiral com éster pinacol indol-4-flúor-6-borônico.

[00411] LC-MS1: tR= 5,14 min; MS: 447,2 [M+H]+

[00412] 1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 11,29 (bs, 1H), 7,74 (dd, J=11,4, 2,2 Hz, 1H), 7,43 (bt, J=2,5 Hz, 1H), 7,31 (bs, 1H), 7,26 (dd, J=9,3, 2,2 Hz, 1H), 4,57 (bd, J=12,6 Hz, 1H), 4,40 (dd, J=10,8, 3,3 Hz, 1H), 4,05 (bd, J=11,2 Hz, 1H), 3,96-3,86 (m, 2H), 3,80-3,73 (m, 1H), 3,55 (bt, J=11,2 Hz, 1H), 3,25-3,09 (m, 2H), 2,95 (s, 3H), 1,89 (s, 3H), 1,87 (s, 3H) ppm. EXEMPLO 72

[00413] O composto 72 foi sintetizado seguindo uma via sintética semelhante à utilizada para a síntese do Exemplo 1 a partir de reação de acoplamento do intermediário quiral XX com 6-metóxi éster pinacol indol-4-borônico.

[00414] LC-MS1: tR= 4,89 min; MS: 459,3 [M+H]+

[00415] 1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 11,00 (bs, 1H), 7,60 (d, J=2,3 Hz, 1H), 7,27 (bt, J=2,5 Hz, 1H), 7,19 (bs, 1H), 7,00 (d, J=2,3 Hz, 1H), 4,56 (bd, J=12,6 Hz, 1H), 4,39 (dd, J=10,8, 3,3 Hz, 1H), 4,06 (bd, J=11,5 Hz, 1H), 3,96-3,85 (m, 2H), 3,81 (s, 3H), 3,81-3,70 (m, 1H), 3,56 (bt, J=11,6 Hz, 1H), 3,25-3,08 (m, 2H), 2,95 (s, 3H), 1,88 (s, 3H), 1,86 (s, 3H) ppm. EXEMPLO 73

[00416] O composto 73 foi sintetizado seguindo uma via sintética semelhante à utilizada para a síntese do Exemplo 11, por reação de um intermediário quiral XX com 2-morfolin- 4-il-1H-benzimidazol (solvente de acetonitrila, 130°C durante 3 dias).

[00417] 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 7,65 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,38 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,12 (td, J = 7,6, 1,1 Hz, 1H), 7, 06 - 6, 97 (m, 1H), 4,43 (dd, J = 15,6, 8,1 Hz, 2H), 4,06 - 3,77 (m, 4H), 3,65 (s, 4H), 3,56 - 3,44 (m, 1H), 3,27 - 3,07 (m, 6H), 2,99 (s, 3H), 1,83 (s, 3H), 1,81 (s, 3H).

[00418] LC-MS1: tR= 3,167 min, MS: 515,30 [M+H]+. EXEMPLO 74

[00419] O composto 74 foi sintetizado seguindo uma via sintética semelhante à utilizada para a síntese do Exemplo 6 a partir de reação de acoplamento de um intermediário quiral XLIV com éster pinacol indol-4-flúor-6-borônico.

[00420] LCMS 1= tR=4,825 min, MS: 445,2 [M+H]+

[00421] 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 11,05 (s, 1H), 7,53 (dd, J = 11,5, 2,4 Hz, 1H), 7,25 — 7,16 (m, 1H), 7,13 (s, 1H), 7,04 (dd, J = 9,1, 2,1 Hz, 1H), 4,29 (d, J = 11,8 Hz, 1H), 4,21 (dd, J = 11,0, 3,4 Hz, 1H), 3,89 — 3,79 (m, 1H), 3,72 (dd, J = 13,4, 6,2 Hz, 2H), 3,52 (t, J = 9,7 Hz, 1H), 3,34 (dd, J = 11,9, 9,2 Hz, 1H), 3, 07 — 2,88 (m, 2H), 2,85 (s, 3H), 1,55 - 1,43 (m, 2H), 1,20- 1,19 (m, 2H). EXEMPLO 75

[00422] O composto 75 foi sintetizado seguindo uma via sintética semelhante à utilizada para a síntese do Exemplo 6 a partir de reação de acoplamento de um intermediário quiral XLIV com éster pinacol indol-4-metoxi-6-borônico.

[00423] LCMS 1= tR= 4,311 min, MS: 457,1 [M+H]+

[00424] 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 11,19 (s, 1H), 7,81 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 7,51 - 7,35 (m, 2H), 7,20 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 4,70 (d, J = 11,8 Hz, 1H), 4,62 (dd, J = 11,0, 3,4 Hz, 1H), 4,25 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,18 - 4,06 (m, 2H), 4,00 (s, 3H), 3,97 - 3,86 (m, 1H), 3,75 (t, J = 10,7 Hz, 1H), 3,47 - 3,29 (m, 2H), 3,28 (s, 3H), 1,89 (d, J = 3,5 Hz, 2H), 1,61 (d, J = 3,8 Hz, 2H). EXEMPLO 76

[00425] O composto 76 foi sintetizado seguindo uma via sintética semelhante à utilizada para a síntese do Exemplo 67 a partir de reação de acoplamento do intermediário quiral XLVII com éster pinacol indol-4-f lúor-7-borônico.

[00426] LC-MS1, Rt= 6.09 min, MS: 459,1 [M+H]+

[00427] 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 10,96 (s, 1H), 8,07 (dd, J = 8,4, 5,4 Hz, 1H), 7,53 (m, 1H), 6,90 (dd, J = 10,1, 8,4 Hz, 1H), 6,58 (dd, J = 2,9, 2,3 Hz, 1H), 4,60 (dd, J = 13,1, 1,4 Hz, 1H), 4,36 (dd, J = 11,0, 3,4 Hz, 1H), 4,03 (dd, J = 11,5, 3,2 Hz, 1H), 3,92 (m, 2H), 3,75 (dt, J = 9,5, 3,3 Hz, 1H), 3,55 (m, 1H), 3,20 (t, J = 10,8 Hz, 1H), 3,11 (td, J = 12,8, 3,8 Hz, 1H), 2,94 (m, 4H), 2,89 (s, 3H), 2,18 (m, 1H), 1,87 (m, 1H). EXEMPLO 77

[00428] O composto 77 foi sintetizado seguindo uma via sintética semelhante à utilizada para a síntese do Exemplo 67 a partir de reação de acoplamento de um intermediário quiral XLVII com éster pinacol indol-4-flúor-6-borônico.

[00429] LC-MS1, tR= 5,24 min, MS: 459,1 [M+H]+

[00430] 1H NMR (300 MHz, DMSO) 11,28 (s, 1H), 7,77 (dd, J = 11,5, 2,4 Hz, 1H), 7,41 (m, 1H), 7,31 (t, J = 2,1 Hz, 1H), 7,26 (dd, J = 9,2, 2,3 Hz, 1H), 4,55 (dd, J = 13,2, 1,5 Hz, 1H), 4,36 (dd, J = 10,9, 3,3 Hz, 1H), 4,05 (dd, J = 11,5, 3,75 (m, 1H), 3,56 (td, J = 12,1, 2,2 Hz, 1H), 3,15 (m, 2H), 2,95 (m, 4H), 2,86 (s, 3H), 2,14 (m, 1H), 1,88 (m, 1H). EXEMPLO 78

[00431] O composto 78 foi sintetizado seguindo uma via sintética semelhante à utilizada para a síntese do Exemplo 67 a partir de reação de acoplamento de um intermediário quiral XLVII com éster pinacol indol-4-metoxi-6-borônico.

[00432] LC-MS1, tR= 4,95 min, MS: 471,1 [M+H]+

[00433] 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 11,00 (s, 1H), 7,63 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 7,20 (m, 1H), 7,17 (m, 1H), 7,00 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 4,53 (d, J = 11,5 Hz, 1H), 4,35 (dd, J = 10,9, 3,3 Hz, 1H), 4,05 (dd, J = 11,6, 3,2 Hz, 1H), 3,91 (m, 2H), 3,80 (s, 3H), 3,73 (m, 1H), 3,56 (td, J = 11,7, 2,4 Hz, 1H), 3,15 (m, 2H), 2,95 (m, 4H), 2,85 (s, 3H), 2,14 (m, 1H), 1,88 (m, 1H). EXEMPLO 79

[00434] O composto 79 foi sintetizado seguindo uma via sintética similar à que foi utilizada para a síntese do Exemplo 11, por reação de um intermediário quiral XX com 1H- benzimidazol-2-amina, N, N-dimetil (solvente acetonitrila, 130°C durante 3 dias).

[00435] LC-MS1: tR= 2,820 min, MS: 473,30 [M+H]+.

[00436] 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 7,51 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,30 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,07 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 6,94 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 4,39 (dd, J = 25,1, 11,5 Hz, 2H), 4,03 — 3,87 (m, 3H), 3,82 (t, J = 9,1 Hz, 1H), 3,51 (t, J = 11,4 Hz, 1H), 3,26 - 3,17 (m, 1H), 3,11 (dd, J = 12,7, 2,8 Hz, 1H), 3,00 (s, 3H), 2,87 (s, 6H), 1,81 (s, 3H), 1,79 (s, 3H). EXEMPLOS 80, 81

[00437] Os compostos 80 e 81 foram sintetizados seguindo do Exemplo 11, por reação de um intermediário quiral XX com 5-cloro-N-metil-1H-1,3-benzodiazol-2-amina. Exemplo 80:

[00438] LC-MS1: tR= 3.602 min, MS: 493.10 [M+H]+.

[00439] 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 8,25 (s, 1H), 8,04 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,25 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,12 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 4,43 (dd, J = 10,7, 3,1 Hz, 1H), 4,31 (d, J = 13,0 Hz, 1H), 4,07 (dd, J = 11,5, 3,4 Hz, 1H), 4,00 — 3,81 (m, 3H), 3, 65 - 3,54 (m, 1H), 3,30 - 3,20 (m, 2H), 3,04 (s, 6H), 1,84 (s, 3H), 1,82 (s, 3H). Exemplo 81:

[00440] LC-MS1: tR= 3.651 min, MS 493.10 [M+H]+.

[00441] 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 8,37 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 7,96 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,26 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,98 (dd, J = 8,5, 2,0 Hz, 1H), 4,42 (dd, J = 10,6, 2,9 Hz, 1H), 4,33 (d, J = 12,3 Hz, 1H), 4,08 - 3,78 (m, 4H), 3,56 (dd, J = 11,7, 9,6 Hz, 1H), 3,27 – 3,16 (m, 2H), 3,03 (brs, 6H), 1,82 (s, 3H), 1,80 (s, 3H). EXEMPLO 82, 83

[00442] Os compostos 82 e 83 foram sintetizados seguindouma via sintética similar à que foi utilizada para a síntese do Exemplo 11, por reação de um intermediário quiral XX com 5-flúor-N-metil-1H-1,3-benzodiazol-2-amina. Exemplo 82:

[00443] 1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ = 7,98 (q, J=5,0 Hz, 1H), 7,68 (dd, J= 9,9, 2,5 Hz, 1H), 7,12 (dd, J= 8,7, 5,1 Hz, 1H), 6,86-6,79 (m, 1H), 4,33 (dd, J= 10,8, 4,2 Hz, 1H), 4,23 (bd, J= 12,9 Hz, 1H), 3,98 (dd, J= 11,7, 3,3 Hz, 1H), 3,89-3,69 (m, 3H), 3,52-3,44 (m, 1H), 3,20-3,07 (m, 2H), 2,94 (s, 3H), 2,91 (d, J= 5,0 Hz, 3H), 1,74 (s, 3H), 1,72 (s, 3H) ppm.

[00444] LC-MS 1: tR= 3,18 min; MS: 477,1[M+H]+ Exemplo 83:

[00445] 1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ = 8,29 (q, J=4,8 Hz, 1H), 7,97 (dd, J= 8,7, 5,1 Hz, 1H), 7,04 (dd, J= 9,6, 2,4 Hz, 1H), 6,78 (td, J= 8,7, 2,4 Hz, 1H), 4,44-4,34 (m, 2H), 4,09-3,78 (m, 4H), 3,61-3,49 (m, 1H), 3,31-3,16 (m, 2H), 3,03 (s, 3H), 3,02 (d, J= 4,8 Hz, 3H), 1,82 (s, 3H), 1,81 (s, 3H) ppm.

[00446] LC-MS 1: tR= 3,27 min; MS: 477,1 [M+H]+ EXEMPLO 84, 85

[00447] Os compostos 84 e 85 foram sintetizados seguindo uma via sintética similar à que foi utilizada para a síntese do Exemplo 11, por reação de um intermediário quiral XX com 5-metil-N-metil-1H-1,3-benzodiazol-2-amina. EXEMPLOS 86, 87

[00448] Os compostos 86 e 87 foram sintetizados seguindo do Exemplo 66, por reação de um intermediário quiral XLIV com 5-cloro-N-metil-1H-1,3-benzodiazol-2-amina. Exemplo 86:

[00449] 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 7,98 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 7,86 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 7,03 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,90 (dd, J = 8,4, 2,0 Hz, 1H), 4,23 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 4,05 (d, J = 12,6 Hz, 1H), 3,86 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 3,82 — 3,70 (m, 2H), 3,71 — 3,53 (m, 1H), 3,38 (dd, J = 14,7, 7,9 Hz, 1H), 3,05 (dd, J = 19,6, 13,6 Hz, 2H), 2,90 — 2,79 (m, 6H), 1,48 (s, 2H), 1,21 (s, 2H).

[00450] LCMS 1 = tR= 3.53 min, MS: 491.1[M+H]+ Exemplo 87:

[00451] 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 8,34 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 8,03 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,27 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,99 (dd, J = 8,5, 2,1 Hz, 1H), 4,44 (dd, J = 10,9, 3,3 Hz, 1H), 4,31 (d, J = 12,5 Hz, 1H), 4,05 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 4,01 — 3,89 (m, 2H), 3, 89 - 3,73 (m, 1H), 3,57 (t, J = 11,8 Hz, 1H), 3,29 - 3,13 (m, 2H), 3,10 - 3,00 (m, 6H), 1,69 (s, 2H), 1,42 (s, 2H).

[00452] LCMS 1: tR= 3,59 min, MS: 491,1 [M+H]+ EXEMPLO 88, 89

[00453] Os compostos 88 e 89 foram sintetizados seguindo uma via sintética similar à que foi utilizada para a síntese do Exemplo 66, por reação de um intermediário quiral XLIV com 5-flúor-N-metil-1H-1,3-benzodiazol-2-amina. EXEMPLO 90, 91

[00454] Os compostos 90 e 91 foram sintetizados seguindo uma via sintética similar à que foi utilizada para a síntesedo Exemplo 66, por reação de um intermediário quiral XLIV com 5-metil-N-metil-1H-1,3-benzodiazol-2-amina. EXEMPLOS 92

[00455] O composto 92 foi sintetizado seguindo uma via sintética similar à que foi usada para a síntese dos Exemplos 90, 91, por reação de um intermediário quiral XLVII com N- metil-1H-1,3-benzodiazol-2-amina.

[00456] 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 8,12 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 8,05 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,25 (d, J = 6,9 Hz, 1H), 7,07 (m, 1H), 6,98 (dd, J = 11,5, 3,8 Hz, 1H), 4,36 (m, 2H), 4,06 (m, 1H), 3,93 (dd, J = 10,9, 8,4 Hz, 2H), 3,83 (m, 1H), 3,58 (t, J = 10,5 Hz, 1H), 3,22 (t, J = 10,8 Hz, 2H), 3,01 (d, J = 4,8 Hz, 3H), 2,91 (s, 3H), 2,85 (m, 4H), 2,16 (dd, J = 19,0, 10,1 Hz, 1H), 1,90 (m 1H).

[00457] LCMS1: tR= 3.19min; MS= 471.0 [M+H]+. EXEMPLO 93

[00458] O composto 93 foi sintetizado seguindo uma via sintética semelhante a utilizada para a síntese do Exemplo 67 a partir da reação de acoplamento do intermediário quiral XLVII com 2-metil éster pinacol indol-4-borônico.

[00459] LC-MS1, Rt= 5,13 min, MS: 455,1 [M+H]+

[00460] 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 11,02 (s, 1H), 7,95 (dd, J = 7,6, 0,8 Hz, 1H), 7,33 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,05 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 7,00 (s, 1H), 4,55 (dd, J = 13,0, 1,3 Hz, 1H), 4,34 (dd, J = 11,0, 3,3 Hz, 3,0 Hz, 1H), 3,90 (m, 2H), 3,73 (dd, J = 12,0, 9,1 Hz, 1H), 3,21 (m, 1H), 2,97 (m, 4H), 2,85 (s, 1H), 1,88 (m, 1H), EXEMPLOS 94, 95

[00461] Os compostos 94 e 95 foram sintetizados seguindo uma via sintética similar à que foi usada para a síntese dos Exemplos 90, 91, por reação de um intermediário quiral XLVII com 5-cloro-N-metil-1H-1,3-benzodiazol-2-amina . Exemplo 94:

[00462] 1H RMN (300 MHz, DMSO) δ 8,24 (q, J = 4,7 Hz, 1H), 8,02 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,27 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 6,99 (dd, J = 8,5, 2,1 Hz, 1H), 4,37 (dd, J = 11,0, 3,5 Hz, 1H), 4,32 (d, J = 11,8 Hz, 1H), 4,05 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 3,93 (m, 2H), 3,81 (m, 1H ), 3,57 (t, J = 10,5 Hz, 1H), 3,22 (t, J = 10,9 Hz, 2H), 3,02 (d, J = 4,8 Hz, 3H), 2,91 (s, 3H), 2,84 (m, 4H ), 2,16 (dd, J = 19,2, 10,0 Hz, 1H), 1,89 (s, 1H), LCMS1: tR=3,88min; MS = 505,1 [M+H]+ Exemplo 95:

[00463] 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 8,11 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 8,07 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 7,24 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,10 (dd, J = 8,4, 2,1 Hz, 1H), 4,38 (dd, J = 11,0, 3,3 Hz, 1H), 4,26 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 4,07 (dd, J = 11,6, 3,4 Hz, 1H), 3,94 (dd, J = 11,0, 8,2 Hz, 2H), 3,83 (m, 1H), 3,59 (td, J = 12,0, 2,6 Hz, 1H), 3,25 (m, 2H), 3,02 (d, J = 4,8 Hz, 3H), 2,91 (s, 3H), 2,85 (m, 4H), 2,17 (m, 1H), 1,90 (m, 1H), LCMS1: tR= 3,81min; MS= 505,0 [M+H]+ EXEMPLO 96, 97

[00464] Os compostos 96 e 97 foram sintetizados seguindo uma via sintética similar à que foi usada para a síntese dos Exemplos 90, 91, por reação de um intermediário quiral XLVII com 5-flúor-N-metil-1H-1,3-benzodiazol-2-amina . Exemplo 96:

[00465] 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 8,03 (q, J = 4,4 Hz, 1H), 7,82 (dd, J = 10,1, 2,6 Hz, 1H), 7,22 (dd, J = 8,6, 5,1 Hz, 1H), 6,92 (m, 1H), 4,38 (dd, J = 10,9, 3,3 Hz, 1H), 4,28 (d, J = 12,8 Hz, 1H), 4,08 (dd, J = 11,6, 3,4 Hz, 1H), 3,94 (m, 2H), 3,81 (m, 1H), 3,58 (m, 1H), 3,24 (m, 2H), 3,00 (d, J = 4,8 Hz, 3H), 2,91 (s, 3H), 2,84 (m, 4H), 2,17 (dd, J = 19,7, 9,2 Hz, 1H), 1,90 (m, 1H).

[00466] LC-MS1, Rt= 3.36 min, MS= 489.1[M+H]+ Exemplo 97:

[00467] 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 8,24 (q, J = 4,7 Hz, 1H), 8,02 (dd, J = 8,8, 5,2 Hz, 1H), 7,05 (dd, J = 9,8, 2,6 Hz, 1H), 6,78 (m, 1H), 4,36 (m, 2H), 4,06 (dd, J = 11,7, 3,3 Hz, 1H), 3,93 (t, J = 10,0 Hz, 2H), 3,81 (m, 1H), 3,58 (m, 1H), 3,22 (t, J = 10,8 Hz, 2H), 3,02 (d, J = 4,8 Hz, 3H), 2,91 (s, 3H), 2,85 (m, 4H), 2,17 (m, 1H), 1,89 (m, 1H).

[00468] LC-MS1, Rt= 3,46 min, MS= 489,1[M+H]+ EXEMPLO 98, 99

[00469] Os compostos 98 e 99 foram sintetizados seguindo uma via sintética similar à que foi usada para a síntese dos Exemplos 90, 91, por reação de um intermediário quiral XLVII com 5-metil-N-metil-1H-1,3-benzodiazol-2-amina. EXEMPLO 100

[00470] O composto 100 foi sintetizado seguindo uma via sintética semelhante a utilizada para a síntese do Exemplo 1 a partir da reação de acoplamento de um intermediário quiral XX com 6-ciano éster pinacol indol-4-borônico. EXEMPLO 101

[00471] O composto 101 foi sintetizado seguindo uma via sintética semelhante à utilizada para a síntese do Exemplo 1 a partir de reação de acoplamento do intermediário quiral XX com 6-triflúormetil éster pinacol indol-4-borônico.

[00472] 1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): 11,68 (bs, 1H), 8,18 (bs, 1H), 7,81 (bs, 1H), 7,69 (bt, J= 2,7, 1H), 7,43 (bs, 1H), 4,55 (bd, J=11,7 Hz, 1H), 4,41 (dd, J=11,1, 3,6 Hz, 1H), 4,07 (dd, J=11,4, 3 Hz, 1H), 3,97-3,88 (m, 2H), 3,81-

[00473] LC-MS 1: tR= 5,65 min; MS= 497,2 [M+H]+ EXEMPLO 102

[00474] O composto 102 foi sintetizado seguindo uma via sintética semelhante à utilizada para a síntese do Exemplo 1 a partir de reação de acoplamento do intermediário quiral XX com éster pinacol indol-4-flúor-7-borônico.

[00475] 1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ = 11,45 (bs, 1H), 8,06 (dd, J=8,4, 5,4 Hz, 1H), 7,52 (bt, J=2,7 Hz, 1H), 6,91 (dd, J=10,2, 8,4 Hz, 1H), 6,60 (bt, J=2,7 Hz, 1H), 4,63 (bd, J=11,7 Hz, 1H), 4,43 (dd, J=10,8, 3,3 Hz, 1H), 4,06-3,89 (m, 3H), 3,82-3,73 (m, 1H), 3,60-3,52 (m, 1H), 3,21 (t, J=10,8, 1H), 3,16-3,02 (m, 1H), 3,05 (s, 3H), 1,88 (s, 3H), 1,87 (s, 3H) ppm.

[00476] LC-MS 1: tR= 5.98 min; MS= 447.1 [M+H]+ EXEMPLO 103

[00477] O composto 103 foi sintetizado seguindo uma via sintética semelhante à utilizada para a síntese do Exemplo 1 a partir de reação de acoplamento, de intermediário quiral XX com 2-metil éster pinacol indol-4-borônico.

[00478] 1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 11,00 (bs, 1H), 7,87 (d, J=7,6 Hz, 1H), 7,30 (d, J=7,6 Hz, 1H), 7,02 (t, J=7,6 Hz, 1H), 6,96 (bs, 1H), 4,56 (bd, J=12,0 Hz, 1H), 4,36 (dd, J=10,8, 3,5 Hz, 1H), 4,03 (bd, J=11,6 Hz, 1H), 3,93-3,82 (m, 2H), 3,76-3,68 (m, 1H), 3,53 (bt, J=11,6 Hz, 1H), 3,22-3,05 (m, 2H), 2,92 (s, 3H), 2,39 (s, 3H), 1,86 (s, 3H), 1,84 (s, 3H) ppm.

[00479] LC-MS1: tR= 5,12 min; MS: 443,0 [M+H]+ EXEMPLO 104

[00480] O composto 104 foi sintetizado seguindo uma via sintética similar à que foi utilizada para a síntese do Exemplo 3 por reação de acoplamento de um intermediário XII quiral com 6-ciano éster pinacol ácido indol-4-borônico. EXEMPLO 105

[00481] O composto 105 foi sintetizado seguindo uma via sintética similar à que foi utilizada para a síntese do Exemplo 3 por reação de acoplamento de um intermediário XII quiral com 6-triflúormetil éster pinacol ácido indol-4- borônico.

[00482] 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 11,69 (s, 1H), 8,15 (s, 1H), 7,81 (s, 1H), 7,69 (t, J = 2,7 Hz, 1H), 7,34 (s, 1H), 4,58 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 4,39 (m, 1H), 4,08 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 3,93 (m, 4H), 3,79 (m, 1H), 3,58 (t, J = 10,6 Hz, 1H), 3,27-3,13 (m, 6H), 2,88 (s, 3H), 2,10 (m, 2H),

[00483] LCMS1: tR= 5,39 min; MS = 539,2 [M+H]+. EXEMPLO 106

[00484] O composto 106 foi sintetizado seguindo uma via sintética similar à que foi utilizada para a síntese do Exemplo 3 por reação de acoplamento do intermediário XII quiral com éster pinacol ácido indol-4-flúor-7-borônico.

[00485] 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 11,04 (s, 1H), 8,00 (dd, J = 8,3, 5,3 Hz, 1H), 7,52 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 6,91 (dd, J = 10,1, 8,4 Hz, 1H), 6,59 (m, 1H), 4,66 (d, J = 13,2 Hz, 1H), 4,39 (dd, J = 10,9, 3,3 Hz, 1H), 4,04 (d, J = 11,5 Hz, 1H), 3,93 (m, 4H), 3,79 (m, 1H), 3,58 (t, J = 10,5 Hz, 1H), 3,24 (m, 4H), 3,07 (d, J = 13,7 Hz, 2H), 2,93 (s, 3H), 2,14 (m, 2H),

[00486] LCMS1: tR= 5,62 min; MS= 489.1 [M+H]+. EXEMPLO 107

[00487] O composto 107 foi sintetizado seguindo uma via sintética semelhante à utilizada para a síntese do Exemplo 6 a partir da reação de acoplamento de um intermediário quiral XLIV com 6-ciano éster pinacol indol-4-borônico. EXEMPLO 108

[00488] O composto 108 foi sintetizado seguindo uma via sintética semelhante à utilizada para a síntese do Exemplo 6 a partir da reação de acoplamento de um intermediário quiral XLIV com 6-triflúormetil éster pinacol indol-4- borônico.

[00489] 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 11,68 (s, 1H), 8,20 (d, J = 1,4 Hz, 1H), 7,81 (s, 1H), 7,69 (t, J = 2,7 Hz, 1H), 7,47 (s, 1H), 4,46 (dd, J = 18,7, Hz, 1H), 4,02 — 3,90 (m, 2H), J = 10,6 Hz, 1H), 3,32 - 3,13 1,67 (m, 2H), 1,44 - 1,43 (m, 7,6 Hz, 2H), 4,08 (d, J = 8,2 3,83 - 3,68 (m, 1H), 3,57 (t, (m, 2H), 3,08 (s, 3H), 1,77 - 2H).

[00490] LCMS 1 = tR 5,38 min; MS= 495,1 1 [M+H]+. EXEMPLO 109

[00491] O composto 109 foi sintetizado seguindo uma via sintética semelhante utilizada para a síntese do Exemplo 6 a partir de reação de acoplamento de um intermediário quiral XLIV com 2-metil éster pinacol indol-4-borônico.

[00492] LCMS tR = 1 4,141 min, MS: 441,1 [M+H]+

[00493] 1H NMR (300 MHz DMSO) δ 10,80 (s, 1H), 7,70 (dd 7,5 0,9 Hz 1H) 7,11 (d J = 7,9 Hz, 1H), 6,90 6,69 (m 2H), 4,30 (d 11,8 Hz 1H), 4,19 (dd, J = 11,0 3,3 Hz 1H), 3,83 (dd, J 14,5 5, 1 Hz, 1H), 3,78 - 3, 65 (m 2H) 3,51 (t J = 9,7 Hz 1H), 3,34 (dd, J = 12,0, 9,2 Hz 1H) 3,08 - 2,91 (m, 2H) 2,87 (s, 3H), 2,20 (s, 3H), 1,54 1,46 (m, 2H), 1,20-1,17 (m, 2H). EXEMPLO 110

[00494] O composto 110 foi sintetizado seguindo uma via sintética semelhante à utilizada para a síntese do Exemplo 6 a partir de reação de acoplamento de um intermediário quiral XLIV com éster pinacol indol-4-flúor-7-borônico.

[00495] 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 11,17 (s, 1H), 8,10 (dd, J = 8,4, 5,4 Hz, 1H), 7,61 — 7,50 (m, 1H), 6,92 (dd, J = 10,1, 8,4 Hz, 1H), 6, 64 — 6, 56 (m, 1H), 4,59 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 4,44 (dd, J = 11,0, 3,5 Hz, 1H), 4,11 — 3,87 (m, 3H), 3, 85 - 3,70 (m, 1H), 3, 85 - 3, 68 (m, 1H), 3,56 (t, J = 10,5 Hz, 1H), 3,32 - 3,10 (m, 2H), 3,08 (s, 3H), 1,79 - 1,70 (m, 2H), 1,51 - 1,42 (m, 2H).

[00496] LCMS 1 = Rt= 5,77 min, MS= 445,1 [M+H]+ EXEMPLO 111

[00497] O composto 111 foi sintetizado seguindo uma via sintética semelhante à utilizada para a síntese do Exemplo 67 a partir de reação de acoplamento do intermediário quiral XLVII com 6-ciano éster pinacol indol-4-borônico. EXEMPLO 112

[00498] O composto 112 foi sintetizado seguindo uma via sintética semelhante à utilizada para a síntese do Exemplo 67 a partir de reação de acoplamento do intermediário quiral XLVII com 6-triflúormetil éster pinacol indol-4-borônico.

[00499] LC-MS1, Rt= 5,74 min, MS= 509,1 [M+H]+

[00500] 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 11,67 (s, 1H), 8,22 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 7,81 (d, J = 0,5 Hz, 1H), 7,68 (m, 1H), 7,43 (s, 1H), 4,51 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 4,36 (m, 1H), 4,05 (m, 1H), 3,94 (m, 2H), 3,75 (m, 1H), 3,57 (m, 1H), 3,21 (m, 2H), 2,95 (m, 4H), 2,86 (s, 3H), 2,13 (m, 1H), 188 (m, 1H). EXEMPLOS 113 e 114

[00501] Os compostos 113 e 114 foram sintetizados seguindo uma via sintética similar à que foi utilizada para a síntese do Exemplo 11, por reação de um intermediário quiral XX com 5-carbonitrila-N-metil-1H-1,3-benzodiazol-2-amina. Exemplo 113

[00502] 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 8,36 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 8,22 (s, 1H), 7,45 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,31 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 4,37 (dd, J = 10,8, 3,1 Hz, 1H), 4,26 (d, J = 11,7 Hz, 1H), 4,07 — 3,71 (m, 4H), 3,53 (t, J = 10,7 Hz, 1H), 3,25 — 3,12 (m, 2H), 3,00 (d, J = 4,8 Hz, 3H), 2,97 (s, 3H), 1,76 (d, J = 5,2 Hz, 6H).

[00503] LCMS1: Rt 4,01 min; MS=483,9 [M+H]+ Exemplo 114

[00504] 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 8,25 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 8,05 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,61 (s, 1H), 7,33 (dd, J = 8,3, 1,5 Hz, 1H), 4,48 - 4,19 (m, 2H), 4,11 - 3,72 (m, 4H), 3,50 (t, J = 10,7 Hz, 1H), 3,30 — 3,14 (m, 2H), 2,97 (d, J = 2,9 Hz, 6H), 1,75 (d, J = 5,0 Hz, 6H).

[00505] LCMS1: Rt 3,78 min; MS: 483,9 [M+H]+

Claims (17)

1. Entidade química selecionada a partir de compostos de fórmula (I)

caracterizada pelo fato de que: R1 é uma heteroarila bicíclica selecionada do grupo que consiste em indazolila, indolila, benzimidazolila e pirrolopiridinila; R2 é selecionado a partir de NR3SO2R3, alquila e cicloalquila; em que R3 é independentemente selecionado em cada ocorrência a partir de H, alquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, cicloalquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio e heterocicloalquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio; e m é 1 ou 2; alquila é um hidrocarboneto saturado linear tendo até 10 átomos de carbono (C1-C10) ou um hidrocarboneto saturado ramificado de entre 3 e 10 átomos de carbono (C3-C10); cicloalquila é um hidrocarboneto C3-C10 mono ou bicíclico saturado, o qual pode estar opcionalmente fundido a um grupo arila; ou cicloalquila é adamantila; heterocicloalquila é um anel mono ou bicíclico saturado de 3 a 10 membros, C-ligado ou N-ligado, que contém 1, 2, 3 ou 4 heteroátomos independentemente selecionados a partir de N, S e O, em que um átomo de N ou S no anel pode ser substituído por um oxigênio para formar um grupo N-óxido, sulfóxido ou sulfona; arila é fenila, bifenila ou naftila; e heteroarila é um anel aromático mono, bi ou tricíclico de 5, 6, 9 ou 10, 12, 13 ou 14 membros, que contém 1, 2, 3 ou 4 heteroátomos do anel independentemente selecionados a partir de N, S e O; em que, quando R2 é selecionado de alquila ou cicloalquila, a referida alquila ou cicloalquila é substituída com pelo menos um substituinte selecionado de (NR4)nSO2R4, em que n é 0 ou 1, OH e CN; e a referida alquila ou cicloalquila é ainda opcionalmente substituída com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados de halogênio, CN, COOR4, CF3, alquila (C1-C6) opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, cicloalquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, e alquila O(C1-C6) opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, ou com 2 substituintes em um único átomo que são tomados em conjunto com o átomo ao qual estão ligados para formar uma estrutura cíclica selecionada a partir de cicloalquila e heterocicloalquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 grupos selecionados a partir de halogênio, alquila C1-C4 , alquila C(O)C1-C4 e alquila C(O)O-C1-C4; em que R3 é selecionado a partir de alquila, cicloalquila e heterocicloalquila, em seguida as referidas alquila, heterocicloalquila e cicloalquila podem opcionalmente ser substituídas em cada ocorrência por 1, 2, 3, 4 ou 5 substituintes, em que os substituintes são selecionados independentemente dentre halogênio, OH, CN, COOR4, CF3, NR4R4, NR4COR4, (NR4)nSO2R4, em que n é 0 ou 1, alquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, cicloalquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, O-alquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, e em que dois substituintes em um átomo único podem ser tomados em conjunto com o átomo ao qual eles estão ligados para formar uma estrutura cíclica selecionada dentre cicloalquila e heterocicloalquila opcionalmente substituídas por 1, 2 ou 3 grupos selecionados a partir de halogênio, alquila C(O)C1- C4, C(O)O-(alquila C1-C4) e alquila C1-C4 opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio; cada grupo heteroaril bicíclico representado por R1 pode ser opcionalmente substituído em cada ocorrência por 1, 2, 3, 4 ou 5 substituintes selecionados independentemente dentre halogênio, OH, CN, COOR4, CF3, NR4R4, NR4COR4, (NR4)nSO2R4, em que n é 0 ou 1, NHR5, alquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, O-alquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, cicloalquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, e heterocicloalquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio; R4 é independentemente selecionado, em cada ocorrência, a partir de H, alquila, arila, heteroarila, cicloalquila e heterocicloalquila, em que a alquila, arila, heteroarila, cicloalquila e heterocicloalquila são opcionalmente substituídas com 1, 2 ou 3 substituintes selecionados a partir de halogênio, alquila, O-alquila, N(alquila C1-C4)2, alquila N(alquila C1-C4)COC1-C4, ou os grupos R4 são tomados em conjunto como átomo(s) ao qual estão ligados para formar uma heterocicloalquila, opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio ou, onde um substituinte compreendendo um grupo R4 está presente em um grupo alquila, cicloalquila ou heterocicloalquila, o grupo R4 pode ser tomado em conjunto com um substituinte naquela alquila, cicloalquila ou heterocicloalquila para formar uma heterocicloalquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio; e R5 é independentemente selecionado a partir de alquila- CO, arila-CO ou heteroarila-CO; e sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo.

2. Entidade química, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que R1 é selecionado a partir de:

em que a partir de halogênio e H; R7, R8 e R9 são, cada um, independentemente selecionados a partir de H; halogênio; CN; R10; e OR10; em que R10 é alquila (C1-C6) opcionalmente substituída com 1, 2 ou 3 átomos de halogênio; R11 é selecionado a partir de H, R10, NR4R4 e NR4COR4; em que R4 é independentemente selecionado em cada ocorrência a partir de H ou alquila opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, ou os grupos R4 são tomados em conjunto com o(s) átomo(s) ao(s) qual(is) estão ligados para formar heterocicloalquila, opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio; e R12 é selecionado a partir de H, halogênio, OR10 ou R10.

3. Entidade química, de acordo com a reivindicação 2, caracterizada pelo fato de que: R6 é selecionado a partir de H e halogênio; R7, R8 e R9 são selecionados a partir de H, halogênio, CN, alquila O(C1-C6) e alquila (C1-C6) opcionalmente substituídos por um ou mais átomos de halogênio; R11 é selecionado a partir de H, alquila (C1-C6), NR4R4 e NR4COR4; e R12 é selecionado a partir de H, halogênio, alquila (C1C6) e alquila O(C1-C6).

4. Entidade química, de acordo com a reivindicação 2, caracterizada pelo fato de que R6, R7, R8, R9 e R12 são H; e R11 é selecionado a partir de alquila (C1-C6), NR4R4 e NR4COR4.

5. Entidade química, de acordo com a reivindicação 2, caracterizada pelo fato de que R6, R8, R9, R11 e R12 são H; e R7 é selecionado a partir de halogênio, CN, alquila O(C1-C6), e alquila (C1-C6) opcionalmente substituídos por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio.

6. Entidade química, de acordo com a reivindicação 2, caracterizada pelo fato de que R6, R7, R8, R9, R11 e R12 são H.

7. Entidade química, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que R2 é (CH2)pC(R13)2(CH2)qQ, em que Q é (NR4)nSO2R4, OH ou CN, em que p e q são independentemente 0, 1 ou 2, e em que (i) R13 é independentemente selecionado, em cada ocorrência, do grupo consistindo de H e alquila (C1-C4), ou (ii) um de R13 é selecionado dentre o grupo que consiste em H e alquila (C1C4) ou o outro R13 é tomado juntamente com R4, se presente, para formar uma heterocicloalquila de 3 a 6 membros opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 átomos de halogênio, ou (iii) os grupos R13 são tomados em conjunto com o carbono ao qual estão ligados para formar uma estrutura cíclica selecionada a partir de cicloalquila (C3-C6) e heterocicloalquila de 3 a 6 membros, opcionalmente substituídas por 1, 2 ou 3 grupos selecionados a partir de halogênio, alquila C1-C4, alquila C(O)C1-C4 e alquila C(O)O- C1-C4.

8. Entidade química, de acordo com a reivindicação 7, caracterizada pelo fato de que ambos os grupos R13 são H, em que ambos os grupos R13 são metil ou em que os grupos R13 são tomados em conjunto com o carbono ao qual eles estão ligados para formar ciclopropanila, ciclobutila, tetrahidropiranila, piperidinila, N-etoxicarbonilpiperidinila ou N- metilpiperidinila.

9. Entidade química, de acordo com a reivindicação 8, caracterizada pelo fato de que Q é SO2R4.

10. Entidade química, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, caracterizada pelo fato de que quando m é 1, o centro quiral obrigatório na entidade química de fórmula (I) está na configuração (S) e em que, quando m é 2, o centro quiral obrigatório na entidade química de fórmula (I) se encontra na configuração (R).

11. Entidade química, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que é selecionada a partir do grupo consistindo em:

e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.

12. Entidade química caracterizada pelo fato de que é selecionada do grupo que consiste em:

e sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo.

13. Composição farmacêutica caracterizada pelo fato de que compreende uma entidade química conforme definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 12 e um veículo, diluente ou excipiente farmaceuticamente aceitável, em que a composição contém de 0,01% em peso a 99,99% em peso da entidade química conforme definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 12, e de 0,01% em peso a 99,99% em peso do veículo, diluente ou excipiente farmaceuticamente aceitável.

14. Uso de uma entidade química conforme definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 12, caracterizado pelo fato de que é na fabricação de um medicamento para o tratamento de uma doença ou condição associada com uma proliferação aumentada.

15. Uso, de acordo com a reivindicação 14, caracterizado pelo fato de que a doença ou condição associada com uma proliferação aumentada é câncer.

16. Uso, de acordo com a reivindicação 15, caracterizado pelo fato de que a doença ou condição é câncer do endométrio, câncer do cólon ou câncer do estômago.

17. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 13, caracterizada pelo fato de que a composição farmacêutica compreende adicionalmente um agente terapêutico selecionado dentre a lista que consiste em: cisplatina, carboplatina, ciclofosfamida, mostarda nitrogenada, melfalano, clorambucil, bussulfano, uma nitrosoureia, 5-fluoruracila, tegafur, raltitrexed, metotrexato, citosina arabinosídeo, hidroxiuréia, gencitabina, adriamicina, bleomicina, doxorrubicina, daunomicina, epirrubicina, idarrubicina, mitomicina-C, dactinomicina, mitramicina, vincristina, vinblastina, vindesina, vinorelbina, paclitaxel, taxotere, etoposídeo, teniposídeo, amsacrina, topotecano, uma camptotecina, tamoxifeno, toremifeno, raloxifeno, droloxifeno, iodoxifeno, fulvestrant, bicalutamida, flutamida, nilutamida, acetato de ciproterona, goserelina, leuprorelina, buserelina, acetato de megestrol, anastrozol, letrozol, vorazol, exemestano, finasterida, 4-(6-cloro-2,3-metilenedioxianilino)-7-[2-(4- metilpiperazin-1-il)etoxi]-5- tetra-hidropiran-4- iloxiquinazolin, N-(2-cloro-6-metilfenil)-2-{6-[4-(2- hidroxietil)piperazina-1-il]-2-metilpirimidin-4- ilamino}tiazol-5-carboxamida (dasatinibe), marimastate, trastuzumabe, cetuximabe, N-(3-cloro-4-fluorfenil)-7- metoxi-6-(3-morfolinopropoxi)quinazolin-4-amina (gefitinibe), N-(3-etinilfenil)-6,7-bis (2- metoxietoxi)quinazolin-4-amina (erlotinibe), 6-acrilamido- IV-(3-cloro-4-fluorfenil)-7-(3-morfolinopropoxi)quinazolin- 4-amina, lapatinibe, imatinibe, sorafenibe, bevacizumabe, 4- (4-bromo-2-fluoroanilino)-6-metoxi-7-(1-metilpiperidin-4- ilmetoxi)quinazolina, 4-(4-flúor-2-metilindol-5-iloxi)-6- metoxi-7-(3-pirrolidin-lilpropoxi)quinazolina, vatalanibe, sunitinibe, linomida, combretastatina A4, ISIS 2503, 5' azacitidina, decitabina (5-aza-2'desoxicitidina), vorinostat (ácido hidroxâmico suberoilanilida, peptídeo depsi (romidepsina).

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