BG107239A - Метод за получаване на ензимни гранули - Google Patents

Метод за получаване на ензимни гранули Download PDF

Info

Publication number
BG107239A
BG107239A BG107239A BG10723902A BG107239A BG 107239 A BG107239 A BG 107239A BG 107239 A BG107239 A BG 107239A BG 10723902 A BG10723902 A BG 10723902A BG 107239 A BG107239 A BG 107239A
Authority
BG
Bulgaria
Prior art keywords
enzyme
granules
fluidized bed
liquid
enzyme granules
Prior art date
Application number
BG107239A
Other languages
English (en)
Inventor
Rudolf BARENDSE
Gabriel MEESTERS
Antonius HAPPEL
Original Assignee
Dsm N.V.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Dsm N.V. filed Critical Dsm N.V.
Publication of BG107239A publication Critical patent/BG107239A/bg

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/98Preparation of granular or free-flowing enzyme compositions

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Fodder In General (AREA)

Abstract

Методът за непрекъснато получаване на ензимни гранули включва следните етапи: а) получава се течен ензимен препарат, съдържащ един или повече ензими;б) по желание се добавят добавки към препарата, получен в етап а); в) един или повече течни ензимнипрепарати, получени в а) или б), се впръскват в кипящ слой чрез разпрашителни накрайници; г) финиятматериал, който се отделя от кипящия слой с отходния газ, се разпределя и връща в кипящия слой катосърцевина за образуване на гранулите; д) гранули с определен размер се образуват чрез нагласяване на пресяващия газов поток; е) крайните гранули се разтоварват чрез едно или повече противоположни гравитационни сита, поставени в поставка за захранване от апарат с кипящ слой, и ж) по желание ензимните гранули, получени в етап е), се обвиват. Изобретението се отнася също до ензимни гранули с изотропна структура, сферична форма и гладка повърхност, изразена чрез фактор на сферичност между 1 и 1,6 и, по желание - покритие.

Description

ОБЛАСТ НА ПРИЛОЖЕНИЕ
Настоящото изобретение се отнася до ензимни гранули и метод за получаване на тези ензимни гранули.
В последните десетилетия използването на ензими в промишлено производство се разширява по обем, видове използвани ензими и брой области на приложение. По- голямата част от тези ензими са получени чрез микроорганизми във ферментационни процеси от широк диапазон. Ензимите се получават от бульон или в някой случаи от клетки и се преработват до техния краен етап. Ензимите се предоставят като течни или сухи ензимни продукти; специфицирането на продуктите се определя главно от предвиденото приложение на крайния ползувател.
Ензимите са протеинови молекули и поради това присъщо нестабилни съединения, по- специално във водна среда. Стабилността при съхранение на ензимни препарати може значително да се повиши чрез формулиране на ензимни препарати в сухо състояние, такива като получени чрез разпратително сушене. Ензимите също са отговорни за повишено проявяване на алергични реакции при чувствителни лица, особено когато тези лица са изложени на инхалаторен ензимен прах. Конвенционалните техники на разпрашително сушене добиват присъщ прахов пудра продукт, съответстващ на малък размер на получените частици. Необходимо е да бъде направено значително усилие за усъвършенстване на ензимните препарати с намалено прахово съдържание чрез различни техники на гранулиране. Допълнително предимство на гранулатите са подобрените характеристики на обработка.
ПРЕДШЕСТВАЩО СЪСТОЯНИЕ НА ТЕХНИКАТА
Известни са няколко различни гранулационни техники за получаване на ензимни гранулата. Най- често използваните са мултистадийно сушене (МСС), агломеративен миксер, агломерация в кипящ слой, слоесто покриване в кипящ слой и екструзионни процеси. В по- голямата част от тези процеси ензимната фракция е представена като суха пудра, пастообразно или течност. Използването на сухи ензимни пудри би трябвало да се избягва, тъй като получаването и обработката на тези пудри предизвикват алергични рискове, описани по- рано. По- предпочитано използване на ензимните разтвори или пастообразни препарати, обаче изисква сух носител в посочените методи, с изключение на мултистадийното сушене.
Използването на носител не е за предпочитане, защото то повишава цената на ензимните гранули и повишава необходимостта от обработка и уточняване на дозирането на сухите носители. Освен това поради присъствието на този инертен носител, степента на активност, която може да бъде достигната от получения продукт се намалява и също минималният размер на частиците се увеличава. Затова, тези техники на гранулиране не могат да бъдат използвани за получаване на ензимни продукти с приложения, при които е необходима висока степен активност. Също цените за съхранение, пакетиране и транспорт за единица активност на тези, съдържащи носител продукти се повишават значително, поради относително ниската активност за единица тегло или обем. Освен това, използването на носител също е неподходящо за ефикасна продукция на ензимни частици с диаметър, по- малък отколкото няколко стотни от микрона. Това изключва използването на продуктите с приложения, където са необходими малки частици, както при хлебопекарно производство.
Мултистадийното сушене не изисква сухи носители и поради което няма неудобства, описани по- горе за техниките, които изискват сухи носители. Въпреки това, чрез мултистадийното сушене се добиват агломерирани и присъщи неравномерно формувани продукти, които са високо порьозни и имат ниска плътност. Неблагополучията при тези частици се изразяват в тяхната порьозна природа, която силно намалява механичната
Чь**· здравина. Заедно с неравномерната форма това води до висока чувствителност към триене и чупене по време на обработка и транспорт, водещо до съществено количество прах.
Патентни заявки ЕР-А-0163836 и ЕР-А-0332929 разкриват метод и устройство за получаване на гранулатен материал чрез продължителен метод в кипящ слой (WSA) без необходимост от сух носител. Гранулите могат да съдържат един или повече активни компоненти. Всички посочени активни компоненти са ниско молекулярни органични и неорганични молекули. Няма предположение или индикация , че този метод и гранулите, получени чрез него могат да бъдат използвани за присъщо нестабилни високо молекуларни биомолекули, такива като ензими.
Сега неочаквано беше открито, че чрез използване на непрекъснат процес в кипящ слой (WSA) за обработване на ензими, не- прахови ензимни гранули могат да бъдат получени с подобрени характеристики в сравнение с гранули, получени чрез добре известни гранулиращи техники.
Методът на продължителен кипящ слой (WSA) е определен тук като метод описан в Европейска патентна заявка ЕР-А-0163836.
Ензимите, използвани в храната са описани тук като ензими, които се използват като добавки или улесняващи вещества при методите в хранителната индустрия. Хранителната индустрия е описана като индустрия, която произвежда хранителни продукти за консумация при хора, като продукти на хлебопроизводните (например хляб), млечни продукти (например сирене и други ферментационни млечни продукти), напитки (например бира, вино, плодови сокове, питеен алкохол) и други. Ензими, използвани във фуражи са описани тук като ензими, които се използват като добавки или улесняващи методите вещества във фуражната промишленост. Фуражната промишленост е описана като индустрия, която произвежда животински фуражни продукти, такива като за птици, прасета, преживни животни и риби и т.н.
Изотропната структура е описана тук като структура на гранула, която има хомогенен състав и не съдържа твърд носител или ядро.
Факторът на сферичност е формоопределящ фактор, който дава съотношението между периметъра на обикновена гранула и периметъра на перфектно кръгла гранула. Перфектно кръглата гранула има фактор на сферичност 1. Повече или по- малко кръгла гранула има фактор на сферичност >1. Гладка повърхност е определена като частица, имаща фактор на сферичност между 1 и 1.6.
Разпределението на размера на гранулите е определено тук като разпределение на гранулния размер около диаметъра (d50) и който се изразява като dio/dgo; dio и d9o представителни диаметри в следния ред: 10% от масата имат диаметър на гранулата по- малък от dio и други 10% от масата имат диаметър на гранулата по- голям от d9o. Теоретичната максимална стойност на dio/dgo е 1, т.е. всички гранули имат приблизително еднакъв размер. По- малки стойности на di0/d90 съответстват на по- обширна, т.е. помалко неравно разпределение. Отбелязаните проценти и съотношения са на база на теглото. Отбелязаните обемни плътности са рехави обемни плътности.
СЪЩНОСТ НА ИЗОБРЕТЕНИЕТО
В първия аспект изобретението разкрива метод за получаване на ензимни гранули, характеризиращ с това, че (а) е получен течен ензимен препарат съдържащ един или повече ензима , (б) добавени са по желание добавки към течния ензимен препарат получен в (а), (в) един или повече течни ензимни препарати, получени в (а) или (б) се впръскват в кипящ слой отдолу чрез разпрашителни накрайници, (г) финият материал, който се отделя от кипящия слой с отходния газ, се разпределя и се връща към кипящия слой като сърцевина за гранулното формуване, (д) гранули е определен размер се образуват чрез нагласяване на пресяващия газов поток, (е) крайните гранули се разтоварват чрез един или повече противоположни гравитационни сита, поставени в поставка за захранване на апарат с кипящ слой и (ж) по желание ензимните гранули получени в етап (е) се покриват.
Течни ензимни препарати или пастообразни могат да бъдат получени по метод, включващ ферментация на подходящ микроорганизъм, продуциращ такъв ензим, последвано от долно поточно преработване във ферментационен бульон. Долно поточното преработване може да включва отделяне на биомаса чрез филтрация и ултрафилтрация на свободен от клетки ферментационен бульон. Алтернативно течен или пастообразен ензимен препарат може да бъде получен чрез разтваряне или частично разтваряне на твърд ензимен препарат, съответно във водна среда. В предпочитано изпълнение течният ензимен препарат включва смес на поне два ензимни препарата, получени както е описано по горе.
Подходящите добавки, които могат да бъдат добавени към течния или пастообразен ензимен препарат включват стабилизиращи агенти и/или помощни вещества и могат да бъдат разтворени или суспендирани в тези течни ензимни препарати при желани крайни концентрации. Стабилизиращи агенти могат да бъдат добавени за предпазване на ензима от инактивиране по време на гранулирането и/или следващото съхранение на ензимните гранули. Подходящи стабилизиращи агенти са добре известни в областта на техниката и включват органични и неорганични соли, захари и други въглехидрати, полиоли, субстрати и ензимни кофактори, амино киселини, протеини и полимери. Помощни вещества могат да бъдат добавени за подобряване на процеса на гранулиране и/или физическите свойства на ензимните гранули. Подходящи помощни вещества са пълнители, филмообразуватели, оцветители, анти-втвърдители и соли.
Сухото твърдо съдържимо на течния ензимен препарат, който е разпръснат в гранулационното легло може да варира между 5 и 60 тегловни %, за предпочитане 10 и 50 % и най- добре между 15 и 45 %.
Обикновено началната температура на въздуха може да бъде между 70° и 220°С. За предпочитане началната температура на въздуха е между 85° и 200° С, най- добре между 100° и 190°С. Обикновено крайната температура на въздуха може да бъде между 35° и 100°С. За предпочитане е между 40° и 95°С и най- добре между 50° и 90°С.
Финият материал, излизащ от кипящия слой може да бъде постоянно отделян от отходния въздух с помощта на циклонен сепаратор или прахов филтър и връщан към кипящия слой или вътрешно връщане на частички е осъществено с помощта на прахов филтър, приспособен за кипящ слой.
При точката на зареждане могат да бъдат използвани едно или повече зиг-заг сита, в които дължината на отвора и оттам кръстосаната секция на ситото могат да се нагласят чрез отрязъци, които са свързани един към друг в гребено-подобна форма, която е адаптирана към зиг-заг кръстосаната секция и които са плъзгащи се перпендикулярно към оста на ситото.
Крайните гранули могат да бъдат отстранени чрез използване на поставка за захранване, която е разделена на няколко хексагонални сегмента, които са наклонени всеки към техния център и имат накрайник в тази точка и ограждащо послидния кръгообразно формувано противоположно на гравитацията сито, като разтоварваща точка.
Във втория аспект изобретението осигурява ензимни гранули, получени чрез метод съгласно изобретението. Изобретението осигурява ензимни гранули, които се характеризират чрез изотропна структура, сферична форма и гладка повърхност. Сферичната форма и гладката повархност на гранулите се изразяват чрез фактора на сферичност, който е между 1 и 1.6, за предпочитане 1 и 1.5 и най- добре 1.1 и 1.4. Ензимните гранули съгласно изобретението са допълнително характеризирани чрез среден диаметър между 50 и 2000 микрона, за предпочитане 100 и 1000 микрона, най- добре между 100 и 750 микрона. Ензимните гранули съгласно изобретението имат ограничен размер разпределение, което се изразява като dio/d9O, което е между 0.3 и 1, за предпочитане между 0.4 и 1, найпредпочитано между 0.5 и 1. Гранулите съгласно изобретението са характеризирани чрез висока обемна плътност, обикновено межде 500 и 1100 грам за литър и висока механична якост и висока стабилност при съхранение.
Ензимните гранули съгласно изобретението съдържат ензимна фракция и по желание други добавки, такива като стабилизиращи агенти и/или помощни вещества и по желание допълнително покритие. Ензимните гранули не съдържат носител или ядро. Количеството ензим в ензимните гранули може да бъде високо до 100% , с възможност да има високо активни гранули, които ще зависят от състава на течните ензимни препарти, които са използвани за направа на гранулите. Стабилизиращите агенти могат да бъдат добавени за предпазване на ензима от инактивация по време на гранулирането и/или следващото съхранение на ензимните гранули.
Подходящи стабилизиращи агенти са добре известни в областта и включват органични и неорганични соли, захари и други въглехидрати, полиоли, субстрати и ензимни кофактори, амино киселини, протеини и полимери. Помощни вещества могат да се добавят за подобряване на гранулиращия процес, физическите свойства на ензимните гранули и/или за достигане на желаната активност на ензимните гранули. Подходящи помощни вещества включват пълнители, филмообзуватели, оцветители и противовтвърдители.
Ензимните гранули съгласно изобретението съдържат един или повече ензима, за предпочитане използващи се в храни и фуражи. Предпочитани ензими са протеази, липази, редокси-ензими (например глюкозо оксидаза), нишесте разграждащи ензими (амилаза, гликоамилаза и т.н.), не-нишесте полизахариди разграждащи ензими (целулази, пектинази, хемицелулази и т.н.) и фитази.
Предпочитано изпълнение съгласно изобретението е ензимна гранула, съдържаща алфа-амилаза, за предпочитане фунгиална алфа-амилаза, подобре алфа- амилаза от Aspergillus -вид, най- добре от Aspergillus oryzae.
Друго предпочитано изпълнение съгласно изобретението е ензимна гранула, съдържаща фитаза, за предпочитане фунгиална фитаза, по- добре фитаза от Aspergillus, най- добре от Aspergillus niger.
Друго предпочитано изпълнение съгласно изобретението е ензимна гранула, съдържаща млечно коагулиращ ензим, за предпочитане микробиален млечно коагулиращ ензим, по- добре млечно коагулиращ ензим от Rhizomucor, най- добре от Rhizomucor miehei.
Друго предпочитано изпълнение съгласно изобретението е ензимна гранула, съдържаща инвертаза, за предпочитане микробиална инвертаза, по- добре инвертаза от мая за хляб, най- добре от Saccharomyces cerevisiae.
ПРИМЕРНИ ИЗПЪЛНЕНИЯ
Изобретението е илюстрирано от следните примери, които не го ограничават по никакъв начин. Споменатите проценти и съотношения са на базата на тегло. Споменатите обемните плътности са порьозни плътности. ПРИМЕР 1
Ензимни гранули, съдържащи алфа-амилаза от Aspergillus oryzae Ч»·
В течен ензимен препарат, съдържащ алфа- амилаза от Aspergillus oryzae се разтваря магнезиев сулфат хептахидрат като стабилизиращ агент до крайна концентрация от 15%(тег./об.). Това води до получаване на разтвор с крайно сухо съдържание от около 38% и ензимна активност 3600 фунгиални амилазни единици за грам. Сместа след това се гранулира в непрекъсната пилотна инсталация с кипящ слой WSA 225(Glatt GmbbH, Weimar,Germany). Степента на водно изпаряване е около 4кг/час и началната и крайна температура е 180° и респективно 80°С. Характеристиките на получените ензимни гранули са обобщени в Таблица 1 и сравнени с гранули, получени с мултистадийно сушене на същия течен ензимен препарат, включващ добавки, както е описано по- горе.
ТАБЛИЦА 1
Свойства на амилаза съдържащи ензимни гранули, получени чрез гранулиране в непрекъснат кипящ слой и мултистадийно сушене
Характеристики Гранулационни техники
Непрекъснат кипящ слой Мултистадийно сушене
Форма Гладка, сферична Агломерати с нерегулирана форма
D50(micron) 140 140
Разпределение по размера o/d9o) 0.5 0.35
Фактор на сферичност 1.2 1.8
Обемна плътност (g/1) 670 350
Akthbhoct(F AU/ g) 8500 8500
Активност на добива (%) 85 85
Остатъчна влажност (%) 8 8
Една FAU (фунгиална алфа- амилазна единица) е количеството от ензима, който превръща 1 грам разтворимо нишесте за един час в продукт, който има еднаква абсорбция с примерен цвят при 620 шп след реакция с йод при pH 5.0 и 30°С и реакционно време между 15-25 минути. Примерният цвят е получен от разтвор, съдържащ в ЮОмл: 25g CoC12*6aq,3.84g калиев дихромат, 1 мл концентрирана солна киселина и вода.
ПРИМЕР 2
Ензимни гранули, съдържащи фитаза от Aspergillus niger
Към течен ензимен препарат, съдържащ фитаза от Aspergillus niger при концентрация от 27000 FTU/g и сухо съдържание от 27%, се добавят поливинилалкохол (PVA Ercol 5/88) като свързващ агент и цинков сулфат хексахидрат като ензимен стабилизатор до крайна концентрация от 1.2%(тегл./об.) за всеки от тях. В два отделни експеримента сместа се гранулира след това в непрекъсната пилотна инсталация с кипящ слой WSA 225(Glatt GmbH, Weimar,Germany), както е описано в пример 1, като потока се нагласява така, че да се получи желания размер на гранулата (Фо-таблица 2). Степента на водното изпаряване е около 4 кг/час и началната въздушна температура и крайната въздушна температура са 135°С и съответно 65°С.
Като сравнение течен ензимен препарат, съдържащ фитаза от Aspergillus niger концентрация от 27 000 FTU/g и сух о съдържание от 27% се смесва с сухо царевично нишесте в тегловно съотношение от приблизително 1:2 за да се получи екструдируема смес , която се обработва в Fitzpatrick BR-200 екструдер. Получените частици се сферонизират и сушат. Характеристиките на получените ензимни гранули се обощават в Таблица 2 и се сравняват с гранули, получени чрез екструзия.
Една FTU (фитазна единица) е количеството ензим, който освобождава 1 микромол фосфат за минута при 37°С при опитни условия (0.25 М натриев ацетат pH 5.5 и 51 шМ натриев фитат).
ТАБЛИЦА 2
Свойства на фитаза съдържаща ензимни гранули, получени чрез гранулиране в непрекъснат кипящ слой и екструзия.
Характеристики Гранулационни техники
Непрекъснат кипящ слой Екструзия
Експ. 1 Експ. 2
Форма Гладка сферична Близко до сферична
D5o(micron) 470 620 600
Разпределение по pa3Mep(dio/d9O) 0.5 0.7 0.65
Фактор на сферичност Неопр. Неопр. 1.4
Обемна плътност (g/1) 588 754 600
Активност (FTU/g) 83000 80000 8600
Активност на добива (%) 88 85 95
Остатъчна влажност (%) 8 4.5 5
ПРИМЕР 3
Ензимни гранули, съдържащи млечно коагулиращ ензим от Rhizomucor miehei
Течен препарат(17.5% сухо вещество) на млечно коагулиращ ензим от Rhizomucor miehei се получава и съдържа ензим при концентрация 3500 MCU/g и лактоза като помощно вещество в крайна концентрация 2.5%. Ензимният препарат се обработва след това в лабораторна непрекъсната инсталация с кипяш слой (Glatt GmbbH, Weimar,Germany). Началната и крайна температура е 120° С и 55°С.
Характеристиките на получените ензимни гранули са обобщени в Таблица 3 и са сравнени с гранули, получени с наслояващо покритие от кипящ слой чрез NaCl кристал, като носител.
ТАБЛИЦА 3
Свойства на млечно коагулиращи ензимни гранули , получени чрез постоянно гранулиране в кипящ слой и наслояващо покритие в кипящ слой с NaCl носител.
Характеристики Гранулационни техники
Непрекъснат кипящ слой Наслояващо покритие в кипящ слой с NaCl носител
Форма Гладко, сферично Закръглени кубовидни
D50(micron) 200 400
Разпределение по размер(0ю/09о) 0.44 0.34
Фактор на сферичност 1.2 1.6
Обемна плътност (g/1) 680 650
AKTHBHOCT(MCU/g) 16500 7000
Активност на добива (%) 95 85
Остатъчна влажност (%) 8 6
Една MCU (млечно коагулираща единица) е количеството ензим, който достига коагулиране на 1 мл 10% обезмаслено мляко при pH 6.45-6.5 при 37°С и в присъствие на 0.1 М СаСЬ за 40 минути (еквивалентни на една Soxhlet единица).
ПРИМЕР 4
Ензимни гранули, съдържащи инвертаза от Saccharomyces cerevisiae
Получава се течен ензимен препарат, съдържащ инвертаза от Saccharomyces cerevisiae . Той представлява разтвор с крайно сухо вещество
В от около 19% и ензимна активност от 70 000 инвертазни единици за грам. Сместа след това се гранулира в пилотна инсталация с непрекъснат кипящ слой WSA 225, както е описано в Пример 1. Степента на водното изпаряване е приблизително 33 кг/час и въздушните начална и крайна температури са около 100°С и съответно 56°С. Храктеристиките на получените ензимни гранули са представени в Таблица 4 и сравнени с гранули, получени с мултистадийно сушене на същия ензимен препарат.
Свойства на ензимни гранули, съдържащи инвиртаза от Saccharomyces cerevisiae получени с гранулиране в непрекъснат кипящ слой и W многостепенно сушене.
ТАБЛИЦА 4
Характеристики Гранулационна техника
Непрекъснат кипящ слой Многостепенно сушене
Форма Гладко, сферично Агломерати с неправилна форма
D50(micron) 230 200
Разпределение по pa3Mep(dlo/d9o) 0.4 0.35
Фактор на сферичност 1.2 1.8
Обемна плътност (g/1) 550 350
Активност(Единица^) 342000 360000
Активност на добива (%) 91 92
Остатъчна влажност (%) 9 5
Една инвертазна единица е количеството ензим, който образува 1 мг инвертна захар от 6 мл 5,4 % захароза при стандартни условия (pH 4.5, 20°С, 5 минути).
ПРИМЕР 5
Ензимни гранули съдържащи млечно коагулиращ ензим от Rhizomucor miehi В течен ензимен препарат съдържащ млечно коагулиращ ензим от Rhizomucor miehei, магнезиев сулфат хептахидрат като стабилизиращ агент до крайна концентрация 6% (тегл/об.). Това води до получаване на разтвор с крайно сухо съдържание от около 11% и ензимна активност от 2530 MCU за грам. Сместа след това се гранулира в пилотна непрекъсната инсталация с кипяш слой AGT 150 (Glatt GmbH, Weimar,Germany). Степента на водно изпаряване е приблизително около 2 кг/час и началната и крайна температури са 120°С и съответно 75°С. Характеристиките на получените ензимни гранули са обобщени в Таблица 5 . Скоростта на повърхностния въздушен поток е около 3 м/сек.
ТАБЛИЦА 5
Свойства на гранули от млечно коагулиращ ензим, получени с гранулиране в непрекъснат кипящ слой и наслояващо покритие в кипящ слой с носител NaCl.
Характеристики Гранулационни техники
Непрекъснат кипящ слой, MgSCh като стабилизатор Наслояващо покритие в кипящ слой с NaCl носител
Форма Гладко, сферично Закръглени кубовидни
D50(micron) 140 400
Разпределение по pa3Mep(dio/dc>o) 0.63 0.34
Фактор на сферичност 1.3 1.6
Обемна плътност (g/1) 700 650
Akthbhoct(MCU/g) 18300 7000
Активност на добива (%) 82 85
Остатъчна влажност (%) 4.5 6
ПРИМЕР 6
Ензимни гранули съдържащи химозин
В течен ензимен препарат, съдържащ телешки химозин, получен от генетично проектиране верига от Kluyveromyces lactis , натриев хлорид като пълнител и помощно вещество се разтваря за да се достигне крайно сухо вещество с концентрация от 14.5 тегл.%. Крайният разтвор съдържа 213 MCU за грам. Сместа след това се гранулира в AGT 150пилотна инсталация с непрекъснат кипящ слой (Glatt GmbH, Weimar,Germany). Степента на водното изпаряване е приблизително 2 кг/час и въздушните начална и крайна температури са около 96°и съответно 52 °C. Скоростта на повърхностния въздушен поток е около 3 м/сек. Храктеристиките на получените ензимни гранули са представени в Таблица 6 .
ТАБЛИЦА 6
Свойства на гранули химозин, , получени чрез постоянно гранулиране в кипящ слой и наслояващо покритие в кипящ слой с носител NaCl.
Характеристики Гранулационна техника
Непрекъснат кипящ слой с NaCl като пълнител и помощно вещество Наслояващо покритие в кипящ слой с NaCl носител
Форма Гладко, сферично Закръглени кубовидни
D50(micron) 140 400
Разпределение по pa3Mep(dio/d9O) 0.70 0.34
Фактор на сферичност 1.1 1.6
Обемна плътност (g/1) 1000 650
AKTHBHOCT(MCU/g) 1610 7000
Активност на добива (%) >90 85
Остатъчна влажност (%) 1 6

Claims (24)

1. Метод за непрекъснато получаване на ензимни гранули, характеризиращ се с това, че:
(а) се получава течен ензимен препарат съдържащ един или повече ензима ;
(б) добавят се по желание добавки към течния ензимен препарат получен в (а);
(в) един или повече течни ензимни препарати, получени в (а) или (б) се впръскват в кипящ слой чрез разпрашителни накрайници;
(г) финият материал, който се отделя от кипящия слой с отходния газ се разпределя и се връща към кипящия слой като сърцевина за образуване на гранулите;
(д) гранули с определен размер се образуват чрез нагласяване на пресяващия газов поток;
(е) крайните гранули се разтоварват чрез един или повече противоположни гравитационни сита, поставени в поставка за захранване на апарат с кипящ слой;
(ж) по желание ензимните гранули получени в етап (е) се обвиват.
2. Метод съгласно претенция 1, характеризиращ се с това, че ензимният препарат се получава съгласно процес, включващ ферментация на подходящ микроорганизъм, продуциращ такъв ензим, последвано от долно поточно преработване на ферментационния бульон.
3. Метод съгласно претенции 1 и 2, характеризиращ се с това, че добавките съдържат стабилизиращи агенти и/или помощни вещества.
4. Метод съгласно претенция 1, характеризиращ се с това, че стабилизиращите и/или помощни агенти са една или повече соли.
5. Метод съгласно всяка една от предходните претенции, характеризиращ се с това, че течният ензимен препарат съдържа ензим, използван в храна и фураж.
6. Метод съгласно всяка една от претенции от 1-5 , характеризиращ се с това, че течният ензимен препарат съдържа смес от поне два ензимни препарата.
7. Метод съгласно всяка една от предходните претенции, характеризиращ се с това, че течният ензимен препарат съдържа амилаза.
8. Метод съгласно всяка една от предходните претенции, характеризиращ се с това, че течният ензимен препарат съдържа фитаза.
9. Метод съгласно всяка една от предходните претенции, характеризиращ се с това, че течният ензимен препарат съдържа млечно коагулиращ ензим.
10. Метод съгласно всяка една от предходните претенции, характеризиращ се с това, че течният ензимен препарат съдържа инвертаза.
11. Метод съгласно всяка една от предходните претенции, характеризиращ се с това, че финият материал, излизащ от кипящия слой може да бъде постоянно отделян от отходния въздух с помощта на циклонен сепаратор или прахов филтър и връщан към кипящия слой или вътрешно връщане на частички е възможно с помощта на прахов филтър, приспособен за кипящ слой.
12. Метод съгласно всяка една от предходните претенции, характеризиращ се с това, че като точка на зареждане се използват едно или повече зиг-заг сита, в които дължината а отвора и оттам кръстосаната секция на ситото могат да се нагласят чрез отрязъци, които са свързани един към друг в гребено-подобна форма, която е адаптирана към зиг-заг кръстосаната секция, и които са плъзгащи перпендикулярно към оста на ситото.
13. Метод съгласно всяка една от предходните претенции, характеризиращ се с това, че крайните гранули могат да се отстраняват чрез използване на поставка за захранване, която е разделена на няколко хексагонални сегмента, които са наклонени всеки към техния център и имат накрайник в тази точка и ограждат по- късно кръгообразно формувано противоположно на гравитацията сито, като разтоварваща точка.
14. Ензимни гранули получени съгласно метод както е описано във всяка една от претенции 1-13.
15. Ензимни гранули, характеризиращи се с това, че имат изотропна структура, сферична форма и гладка повърхност, изразена чрез фактор на сферичност между 1 и 1.6 и по желание покритие.
16. Ензимни гранули съгласно претенция 15, характеризирани чрез разпределение, изразено като di0/d90, което е между 0.3 и 1.
17. Ензимни гранули съгласно всяка една от претенции15 и 16, характеризиращи се с това, че съдържат една или повече добавки.
18. Ензимни гранули съгласно претенция 17, характеризиращи се с това, че добавката е стабилизиращ агент.
19. Ензимни гранули съгласно претенция 18, характеризиращи се с това, че добавката е помощно вещество улесняващо гранулирането.
20. Ензимни гранули съгласно претенции 15-19, характеризиращи се с това, че ензимите се използват за храни и фуражи.
21. Ензимни гранули съгласно претенция 20, характеризиращи се с това, че ензимната фракция съдържа амилаза.
22. Ензимни гранули съгласно претенция 20, характеризиращи се с това, че ензимната фракция съдържа фитаза.
23. Ензимни гранули съгласно претенция 20, характеризиращи се с това, че ензимната фракция съдържа млечно коагулиращ ензим.
24. Ензимни гранули съгласно претенция 20, характеризиращи се с това, че ензимната фракция съдържа инвертаза.
BG107239A 2000-05-04 2002-10-31 Метод за получаване на ензимни гранули BG107239A (bg)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP00201635 2000-05-04
PCT/EP2001/004874 WO2001083727A2 (en) 2000-05-04 2001-04-27 Fluid bed process for the production of enzyme granules

Publications (1)

Publication Number Publication Date
BG107239A true BG107239A (bg) 2003-09-30

Family

ID=8171459

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
BG107239A BG107239A (bg) 2000-05-04 2002-10-31 Метод за получаване на ензимни гранули

Country Status (13)

Country Link
US (1) US20030124224A1 (bg)
EP (1) EP1278595A2 (bg)
JP (1) JP2003531608A (bg)
CN (1) CN1209184C (bg)
AR (1) AR028078A1 (bg)
AU (1) AU2001270500A1 (bg)
BG (1) BG107239A (bg)
BR (1) BR0110466A (bg)
CA (1) CA2407329A1 (bg)
CZ (1) CZ20023626A3 (bg)
MX (1) MXPA02010757A (bg)
PL (1) PL365796A1 (bg)
WO (1) WO2001083727A2 (bg)

Families Citing this family (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004013268A1 (en) * 2002-07-30 2004-02-12 Unilever N.V. Abrasive hard surface cleaning compositions
JP4559227B2 (ja) 2002-10-09 2010-10-06 ノボザイムス アクティーゼルスカブ 粒子組成物を改良する方法
ATE526077T1 (de) * 2003-06-11 2011-10-15 Glatt Ingtech Gmbh Enzym-granulat-herstellungsverfahren und erhältliche enzym-granulate
DE10357827A1 (de) * 2003-12-09 2005-07-14 Glatt Ingenieurtechnik Gmbh Verfahren zur Herstellung von Enzym-Granulaten und erhältliche Enzym-Granulate
DE10326231B4 (de) * 2003-06-11 2016-04-07 Glatt Ingenieurtechnik Gmbh Verfahren zur Herstellung von Enzym-Granulaten
DE102004022310B4 (de) * 2004-05-04 2010-01-07 Daimler Ag Brennstoffzellensystem mit einem Feuchtigkeitsaustauschmodul mit einem Bündel von für Feuchtigkeit durchlässigen Hohlfasermembranen
PL1695633T3 (pl) 2005-02-24 2010-08-31 Ipc Process Center Gmbh & Co Granulat do wytwarzania pellet paszy dla zwierząt
DK1861073T4 (da) * 2005-03-04 2012-07-23 Nycomed Pharma As Fremgangsmåde til fremstilling af calciumsammensætninger i en kontinuerlig fluid bed
DE102005043324A1 (de) * 2005-09-12 2007-03-15 Basf Ag Phytasehaltiges Enzymgranulat II
JP2021525533A (ja) 2018-06-01 2021-09-27 ダニスコ・ユーエス・インク 高ペイロードで無孔性の酵素含有被覆顆粒
MX2022000355A (es) 2019-07-09 2022-03-17 Dupont Nutrition Biosci Aps Composiciones de enzimas particuladas recubiertas de grasa.

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2966911D1 (en) * 1978-07-04 1984-05-24 Novo Industri As Microbial protease preparation suitable for admixture to washing compositions and process for preparing it
DE3565475D1 (en) * 1984-04-07 1988-11-17 Bayer Ag Process and apparatus for the production of granules
CN1025156C (zh) * 1990-08-22 1994-06-29 中国科学院化工冶金研究所 酶液的流化床制粒工艺及设备
WO1994004665A1 (de) * 1992-08-14 1994-03-03 Solvay Enzymes Gmbh & Co. Kg Neue enzymgranulate
ATE412754T1 (de) * 1994-12-21 2008-11-15 Hansens Lab Mikrobiell erzeugtes rennin mit verbesserter milchgerinnungsaktivität und verfahren zu dessen herstellung
US6120811A (en) * 1995-10-06 2000-09-19 Genencor International Inc. Microgranule for food/feed applications and process of making
JPH1023888A (ja) * 1996-07-10 1998-01-27 Kao Corp 酵素造粒物の製造方法
NZ501408A (en) * 1997-06-04 2002-02-01 Dsm N Carbohydrate-based enzyme granulates
US20020064816A1 (en) * 1999-12-16 2002-05-30 Jens Lerchl Moss genes from physcomitrella patens encoding proteins involved in the synthesis of carbohydrates
US20020155971A1 (en) * 2000-04-03 2002-10-24 Novozymes A/S Enzyme tablets for cleaning improvement

Also Published As

Publication number Publication date
JP2003531608A (ja) 2003-10-28
AU2001270500A1 (en) 2001-11-12
EP1278595A2 (en) 2003-01-29
PL365796A1 (en) 2005-01-10
CN1209184C (zh) 2005-07-06
WO2001083727A3 (en) 2002-07-11
CA2407329A1 (en) 2001-11-08
US20030124224A1 (en) 2003-07-03
WO2001083727A2 (en) 2001-11-08
CZ20023626A3 (cs) 2003-06-18
CN1427740A (zh) 2003-07-02
AR028078A1 (es) 2003-04-23
MXPA02010757A (es) 2004-05-17
BR0110466A (pt) 2003-04-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP1713348B1 (en) Granules containing stabilized phytase formulations
JP4515094B2 (ja) 飼料用酵素含有顆粒
US6120811A (en) Microgranule for food/feed applications and process of making
JP2002536005A (ja) 飼料酵素含有粒状物
EP1974030B1 (en) Improved enzyme formulations for animal feed
JP2002502255A (ja) 高活性フィターゼ粒状物
WO1993007260A1 (en) Process for dust-free enzyme manufacture
BG107239A (bg) Метод за получаване на ензимни гранули
JPH06296460A (ja) 発酵肉汁を基礎とする動物飼料添加物、その製法及びこれを含有する動物飼料又はプレミックス
JP2005514049A (ja) 飼料用酵素含有顆粒
MXPA98002584A (en) Microgranula for food applications / forr
KR20090079963A (ko) 증가된 열적 안정성을 가진 단백질-함유 물질
WO1991006638A1 (en) Dust-free coated enzyme formulation
CN1250650A (zh) 粉末形式的稳定维生素和类胡萝卜素制剂、和其生产方法
US20210212341A1 (en) Microcapsule comprising choline chloride and method for preparing the same
JP2002511403A (ja) 微生物および/またはポリペプチドもしくはタンパク質を含有するデンプンカプセル、およびその製造方法
US20070269555A1 (en) Enzyme Formulations
CN108175810A (zh) 一种10%含量的高效金霉素预混剂及其制备方法
CN1711036A (zh) 包括维生素b12的配方,生产方法及其用途
JPH02500165A (ja) 自己安定化ジペプチド甘味料
EP0694610A1 (en) COATED $i(PHAFFIA RHODOZYMA) YEAST AND GRANULE THEREOF
US20040175348A1 (en) Chitosan-containing powder
CA2120611C (en) Process for dust-free enzyme manufacture
FR2494963A1 (fr) Procede de fabrication d'une matiere premiere alimentaire a base de levures
EP1645195A1 (en) Stabilized enzyme formulations