BE1025622B1 - Dispositif de lecture optique matricielle d’un support solide amovible pour la détection et/ou la quantification d’analytes présents dans un échantillon - Google Patents
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Abstract
Dispositif (1) de lecture optique d’un support solide (2) amovible pour la détection et/ou la quantification d’analytes présents dans un échantillon comprenant une unité optique (7) pour analyser le support solide (2) selon deux dimensions ; des moyens de traitement d’image (12) pour analyser une image (40) à deux dimensions du support solide (2) selon deux dimension ; des moyens de détermination (13) pour déterminer des informations d’analyte sur la base des données des moyens de traitement d’image (12) ; et des moyens de transmission configurés pour transmettre les informations d’analyte.
Description
Par délégation spéciale :
BE2017/5706
Dispositif de lecture optique matnctelle dfun support solide amovible pour la détection et/ou la quantification d’analytes présents dans un échantillon
Domains technique [0601] Selon un premier aspect, l’invention se rapporte à un dispositif de lecture optique d'un support solide pour la détection et/ou la quantification d’analytes présents dans un échantillon. Selon un deuxième aspect, l’invention se rapporte à un ensemble de diagnostic comprenant un dispositif de lecture optique selon le premier aspect et un moyen de diagnostic.
Etat de ta technique [0002] La surveillance et le contrôle des produits alimentaires imposent d’effectuer des tests le plus en amont possible de- leur fabrication. Idéalement ces tests doivent être réalisés sur le lieu de production des matières premières 15 ou sur leur Heu de transformation. Ces tests de dépistages ou tests de screening sont particulièrement conçus pour détecter la présence} de certains analytes de type} bactérien, antibactérien ou antibiotique dans des échantillons. La multiplication des normes sanitaires et ia volonté d’une meilleure traçabilité des produits alimentaires imposent une multiplication des analytes à tester ainsi 2Q que de connaître ie plus précisément possible leurs classes et leurs quantités.
[0003] Une·} façon de détecter des analytes d’un échantillon consiste à utiliser un mélange réactionnel comprenant des molécules biologiques de reconnaissance par exemple capables chacune de reconnaître un analyte déterminé présent dans ledit échantillon. La détection d'analytes peut alors être 2 3 réalisée avec une tigette (support immunochrornatographique) que l’on plonge dans une fiole contenant le mélange réactionnel· La tigette comprend en général plusieurs zones souvent appelées ligne ou point de détection correspondant à différents analytes à détecter ou à quantifier, Le diagnostic est finalement réalisé par exemple par une visualisation directe de chacun des 30 lignes de la tigette, ou à l’aide d‘un lecteur permettant d’analyser les signaux émis par les différents lignes ou points de détection.
BE2017/5706 [0004] Un analyte à détecter est donc souvent mis en évidence par une ligne ou points sur ia tigette. Le changement de couleur ou d'intensité lumineuse du signal réfléchi par la ligne ou le point en lien avec l’analyte à détecter est la méthode la plus répandue (réflectométrie). Des molécules 5 couplées à un fluorophore (ou à une molécule active pouvant générer/modifier un substrat fluorescent ou chromogène) ayant une fonction de marquage peuvent être utilisées pour notamment permettre d’obtenir des seuils de détection plus bas et permettant de rendre le signal non-interprétable de manière directe par l’œil humain dans le but de contourner les risques de lu subjectivité (ou d’erreur) d'un individu à un autre ainsi qu’un risque de falsification. L'utilisation de fluorophores nécessite notamment une inspection de la fluorescence émise par les différents lignes ou points positionnés sur une tigette.
[0005] Il est déjà connu de l’état de ia technique lecteur optique pour 15 réaliser un diagnostic concernant la présence et ou la quantité d'anaiytes présents sur une tigette de test préalablement trempée dans un fluide à tester, Cependant, les lecteurs optiques actuels ne permettent pas la lecture optique d'un grand nombre de régions d’intérêt présentes sur une tigette. Cette limitation de lecture du nombre de région d’intérêt nécessite par exemple 2 0 d’effectuer plusieurs mesures consécutives avec des types de tigettes différents et/ou l’utilisation de lecteurs optiques différents adaptés à chacune des tigettes à tester.
Résumé de l’invention [0006] Selon un premier aspect, un des buts de la présente invention est de fournir un dispositif de lecture optique d'un support solide amovible pour ia détection et/ou la quantification d’anaiytes présents dans un échantillon et permettant une lecture simultanée d’un grand nombre de zones à tester (ou dots). La présente invention permet de délivrer un résultat qualitatif et 30 éventuellement quantitatif de chacune des zones à tester.
[0607] A cet effet, les inventeurs proposent un dispositif de lecture optique d’un support solide amovible pour la détection et/ou la quantification d’anaiytes présents dans un échantillon et comprenant :
BE2017/5706
- un emplacement poer recevoir ledit support solide ;
une unité optique pour analyser ledit support solide et comprenant :
o une première source lumineuse pour émettre selon une intensité d’émission et dans une première plage do longueur d’onde un premier faisceau lumineux vers ledit emplacement ;
o un système d’imagerie comprenant un détecteur optique à deux dimensions peur fournir une image à deux dimensions d’une zone de visualisation, ladite zone de visualisation comprenant au moins une portion dudit emplacement ;
ü o un filtre pour filtrer une plage de longueur d'onde définie, et positionné entre l’emplacement et ledit système d’imagerie ;
- des moyens de traitement d’image de ladite Image à deux dimensions pour :
o détecter des zones de références de ladite image à deux 15 dimensions, o déterminer un nombre fini de sous-ensembles de ladite image à deux dimensions, o positionner dans ladite Image à deux dimensions chaque sousensemble à une position prédéterminée par rapport auxdites zones de référence, o fournir des données relatives à des intensités lumineuses issues desdits sous-ensembles ;
- des moyens de détermination pour :
o calculer, pour chaque sous-ensemble, une intensité de sous25: ensemble, et
- des moyens de transmission configurés pour transmettre ladite Intensité de sous-ensemble pour chaque sous-ensemble.
[0008] Le dispositif selon l’invention permet la lecture simultanée d'un grand nombre de dots grâce à un détecteur optique à deux dimensions et à des 30 moyens de traitement d’image et de détermination permettant de lire des informations d’analytes pour chacun des dots.
[0009] L’image à deux dimensions comprend des sous-ensemble, des portions, des régions d'intérêt, des zones d’intérêt ou encore des parties
BE2017/5706 d’images. Préférentiellement, les sous-ensemble d’une image à deux dimensions comprennent une pluralité de pixels. De préférence, chaque sousensemble comprend au moins 20 pixels, de préférence plus de 50 pixels et de manière encore plus préférée plus de 250 pixels.
[0010] Davantage du dispositif selon l’invention est de pouvoir réaliser un diagnostic par une lecture de fluorescence en continu en s'affranchissant un maximum du bruit de fond engendré par la source lumineuse.
[0011] L’avantage du dispositif de lecture optique de l'invention est de permettre La lecture optique d’un grand nombre de régions d’intérêt présents sur 10 une seule et même tigette. En effet, le dispositif de lecture optique de l’invention permet ia lecture optique d'un grand nombre de régions d’intérêt présents sur une seule tigette et dispose dre moyens pour analyser un grand nombre de régions d’intérêt sur une tigette de manière précise. Dans le cas du dispositif optique de l’invention, ia lecture d’un grand nombre de régions d’intérêt ne 15 nécessite pas de prévoir des emplacements pour plusieurs tigettes. L’emploi de plusieurs tigettes dans un même lecteur optique pour une lecture simultanée de plusieurs tigettes afin de couvrir un grand nombre de régions d’intérêt avec un même capteur optique étant source de mauvais placement et de décalage des régions d’intérêt d’une mesure à une autre et oe pour chacune des tigettes 20 Introduites dans le lecteur optique.
[0012] De préférence, le dispositif selon l’invention permet la lecture d’emplacements (de récupération) ou de dots fixés sur un support solide (ou système récupérateur) selon un arrangement, préférentiellement matriciel en deux dimensions sous la forme de points présentant chacun un diamètre 25 compris entre 20 μm et 2 mm, de préférence compris entre 100 μm et 500 μm, et encore plus préférentiellement compris entre 250 μm et 400 μm. Le dispositif selon l’invention permet ia bonne différenciation d’emplacements de récupération sous forme de points présentant chacun un diamètre et un espacement compris entre 20 μm et 2 mm, de préférence compris entre 100 30 μm et 500 μm et encore plus préférentiellement compris entre 250 μm et 400 μm, permettant ainsi de fixer au moins 5 emplacements, de préférence au moins 10, et encore plus préférentiellement au moins 15 emplacements de récupération en simpiioat, en duplioat, en triplicat ou plus pour ia détection et/ou
BE2017/5706 te quantification d’au moins 5, de preference au mains 10, préférentiellement au moins 15 analytes de classes différentes, appartenant ou non à des familles d’analytes distinctes, ainsi qu'au moins un emplacement de récupération déposé en simplicat, en duplicat, en triplicat ou plus destiné au contrôle positif /. du seuil de détection permettant de valider le test et/ou à ia calibration pour la détection et/ou la quantification, et ce sur un système récupérateur ayant une taille raisonnable et de l’ordre du centimètre carré, pour te réalisation de la détection et/ou te quantification desdits au moins 15 analytes par le dispositif de lecture optique de l’invention.[O013] Le dispositif selon l’invention permet ia lecture des zones à tester, en particulier avec une mesure instantanée de fluorescence ou de façon préférée avec une mesure de la lumière réfléchie des zones à tester. De préférence, le signai interprété par tes moyens de détermination peut avoir une intensité absolue (unité arbitraire) ou avoir une intensité relative par rapport à une intensité émise par un point de 15 référence ou par un point de contrôle interne émettant une intensité de référence.
[0014] Les analytes pouvant être détectés et ou quantifiés sont par exemple des contaminants chimiques, des protéines ou des pathogènes. Les échantillons pouvant faire l’objet d’une détection et ou d’une quantification par 2 u le dispositif selon l’invention sont par exemple des échantillons de lait, de sang, de sérum, de salive, d'eau, d’urine, de céréales, de viande, de sécrétions lacrymales...
[0015] De façon préférée, le dispositif d'identification est positionné au niveau dudit emplacement pour identifier un support solide à lire positionné 2 5 dans ledit emplacement. Les moyens de communications sont également des moyens de lecture, par exemple pour lire des données sur un support solide de données amovible. Par exemple, les moyens de communications permettent une connexion à un réseau de type internet par des câbles ou par des moyens sans fil de type wifi, Bluetooth, 4/5G ou de communication en champ proche. 3û Un support, solide selon l’invention est par exemple une tigette.
[0016] De préférence la première source lumineuse permet une lecture des régions d’intérêt en fluorescence, c’est-à-dire avec une plage de longueur d’onde qui coïncide avec le spectre d’absorption d’éléments fluorescent tels que
BE2017/5706 des molécules de marquage. Les molécules de marquage réémettent alors l’énergie lumineuse absorbée dans une plage de longueur différente de la plage de la première source lumineuse. L'unité optique permet alors l’acquisition du signal de fluorescence émis par les molécules de marquage fluorescentes. Un 5 filtre passe-bande positionné entre le détecteur optique et les molécules de marquage fluorescentes permet de stopper la lumière émise par ia source lumineuse permettant l'excitation des molécules de marquage fluorescentes tout en laissant passer la lumière émise par les molécules de marquage fluorescentes.
tu [0017] De préférence, les moyens de transmission sont configurés pour transmettre ou communiquer l’information d’analyte pour chaque sousensemble vers une mémoire. De préférence, tes moyens de transmission permettent de transmettre une information d’analyte vers un dispositif d’affichage compris dans le dispositif de lecture optique selon l’invention.
[0018] Un avantage du dispositif selon l’invention est de pouvoir recevoir un support solide comme par exemple une tigette de type immunochromatographique (avec ou sans cassette) ou une puce microfluidique.
[0019] Par exemple, un kit comprend le dispositif de l’invention et un 2 G incubateur, afin de permettre l'incubation du mélange réactionnel contenu dans une fiole ainsi que pendant le trempage du support solide amovible. L'incubateur permet le maintien en position et en température du mélange réactionnel à une température de préférence entre 25*C et 35ôC et encore plus préférentiellement à 30*0, L’incubateur est à utiliser avant le positionnement du 25 support solide amovible dans remplacement du dispositif.
[0020] De préférence, l’image à deux dimensions comprend des zones contrastées par rapport à une zone de fond, et en ce que, les moyens de traitement d’image de l’image à deux dimensions permettent en outre de :
- recadrer l’image à deux dimensions en une image recadrée, l’image recadrée montrant une portion plus importante ou égale de l’emplacement pour recevoir un support solide que dans l’image à deux dimensions ;
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- attribuer une surface définie pour chaque position à deux dimensions de sous-ensemble dans l’image recadrée ;
- effectuer une optimisation locale de position de chaque sous-ensemble de sorte que la surface définie de chaque sous-ensemble est positionnée de sorte à renvoyer une intensité lumineuse maximale de chacune des zones contrastées.
[0021] De préférence la surface définie pour chaque position à deux dimensions de sous-ensemble dans l’image recadrée est arrondie, de préférence circulaire, de préférence un disque.
IO De préférence, ledit nombre fini de sous-ensembles est supérieur ou égal à cinq sous-ensembles, de préférence, à plus de dix sous-ensembles et de manière encore plus préférée à plus de quinze sous-ensembles.
[0022] Un avantage de pouvoir lire plus de cinq sous-ensembles, de préférence plus de dix sous-ensembles et de façon encore plus préférée plus 15 de quinze sous-ensembles est de pouvoir réaliser un diagnostic d'un échantillon à tester en une seule lecture d’une seule et même support solide amovible.
[G023] De préférence, le dispositif de l’invention comprend en outre une deuxième source lumineuse pour émettre un deuxième faisceau lumineux dans une deuxième plage de longueur d’onde.
[0024] Un avantage de disposer d’une deuxième source lumineuse est de pouvoir disposer d’un lecteur optique pour la lecture- de régions d’intérêt avec une plage de longueur d’onde différente de ia première plage de longueur d’onde émise par la première source lumineuse. De préférence, la deuxième source lumineuse permet une lecture en lumière réfléchie. La deuxième source 1 lumineuse éclaire les régions d’intérêt d’une tigette positionnée dans l’emplacement du lecteur. Des molécules de marquages présentent ou non au niveau des régions d’intérêt, permettent su non une absorption, ou une moindre réflexion de la région d’intérêt éclairée par ladite deuxième source lumineuse. L'unité optique permet alors une acquisition de la lumière réfléchie par la tigette dans la zone de visualisation. En fonction de la présence ou non des molécules de marquages, il en résulte des régions d’intérêt plus ou moins sombres par rapport à la zone de fond de la tigette.
BE2017/5706 [G025] Par exemple, des molécules de marquage fluorescentes et ou modifiant la réflexion peuvent être utilisées, ce qui nécessite une lecture en fluorescence et une lecture en lumière réfléchie. Les deux lectures sont par exemple exécutées l’une après l’autre dans un ordre prédéfini ou non prédéfini. [0026] Un filtre passe bande est par exemple utilisé afin de, lors d'une mesure en lumière réfléchie, laisser passer vers l'unité de détection optique une plage de longueur d’onde susceptible d'étre absorbée ou non par les molécules de marquage modifiant la réflexion. En effet, cela permet d’augmenter le contraste en supprimant le bruit, de fond dû aux longueurs d’onde émise par la source lumineuse mais non absorbées par les molécules de marquage. Le filtre passe bande est de préférence positionné entre la source lumineuse et les molécules de marquage ou entre les molécules de marquage et le détecteur optique.
[0027] De préférence, la première plage de longueur d’onde est distincte de ladite deuxième plage de longueur d’onde.
[0028] L'avantage de disposer de deux sources lumineuses émettant dans des plages de longueur d’onde distinctes permet une lecture d'un plus grand choix de molécules de marquages. Par exemple cela permet la lecture de molécules de marquage pouvant renvoyer un signal par fluorescence et de molécules de marquages pouvant modifier la réflexion de la lumière sur le support solide amovible.
[0029] De préférence, If) filtre est un filtre passe double bande pour laisser passer deux plages de longueur d’onde définies dont une des deux plages est ia première plage de longueur d'onde ou la deuxième plage de longueur d'onde, ne nécessitant donc aucun changement physique de filtre passe bande lors des analyses.
[0030] Par exemple, un avantage d’utiliser un filtre passe double bande positionné entre les molécules de marquage et le détecteur optique permet la détection de molécules de marquage différentes ou permettant une lecture dans des plages de longueur d'onde distinctes. De préférence le filtre passe double bande est utilisé en présence de deux sources lumineuses différentes émettant dans des plages de longueur d'onde différentes. De préférence, un
B E2017/5706 filtre passe double bande est utilisé dans te cas d’un lecteur optique permettant une lecture des molécules de marquage en réflexion et en fluorescence.
[0031] De préférence, l’information d’analyte est déterminée sur la base d’au moins deux intensités de sous-ensembles issues d’au moins deux sousensemble. Par exemple, information d’analyte est une moyenne d’au moins deux intensités de sous-ensembie issues d'au moins deux sous-ensembles.
[G032] Un avantage de réaliser une moyenne est de permettre de lisser d'éventuelles perturbations dans la lecture du support solide amovible. De manière encore plus préférée, une moyenne est réalisée sur la base de trois intensités de sous-ensemble issues d’au moins trois sous-ensembles, [0Ö33] De préférence, l’information d’analyte est une Information de type binaire.
[0034] Un-a information d’analyte de type binaire est une information d’analyte qualitative. Par exemple l’information d’analyte permet d’indiquer une présence positive ou une présence négative d’un analyte. Par exemple, le système de détermination, sur la base d'une intensité pivot ou intensité seuil ou ratio définie par l'information relative au support, permet d'assigner une valeur binaire à une intensité de sous-ensemble. Les moyens de détermination indiquent par exemple peur une intensité de sous-ensemble supérieure à une intensité de sous-ensemble seuil, une présence d’analyte négative. Les moyens de détermination indiquent par exemple pour une intensité de sous-ensemble inférieurs à une intensité de sous-ensemble seuil, une présence d’analyte positive. Par exemple, une information d’analyte est comprise dans la mémoire du dispositif de l’invention et ne nécessite pas d’extraire cette information d’analyte à partir d’une information relative au support. De préférence, une intensité seuil est définie par utilisateur en fonction de règlementations propres â un territoire.
[0033] De préférence, l’information d’analyte est une information proportionnelle à l’intensité lumineuse mesurée.
[0036] Un avantage d’une information d’analyte proportionnelle à l’intensité lumineuse mesurée est de pouvoir réaliser une analyse quantitative d’anaiytes dans un échantillon. De préférence, l’information d’analyte est
B E2017/5706 calibrée avec une courbe de calibration qui dépend du lot de fabrication du support solide amovible et du point d’intérêt correspondant a l’analyte choisi.
[0037] De préférence, l’unité optique comprend en outre :
o un capteur d’intensité lumineuse pour mesurer l’intensité S d’émission émise par ladite première source lumineuse ;
o un moyen de rétrocontrôle pour moduler ladite intensité d’émission de ladite première source lumineuse en fonction de l’intensité d’émission mesurée par ledit capteur d’intensité lumineuse de sorte que ladite première source lumineuse 10 émette une intensité cible.
[0038] Un avantage de ce mode de réalisation préféré de la présente invention est de fournir un dispositif de lecture optique d’un support solide amovible pour la détection et/ou la quantification d’analytes présents dans un échantillon et permettant une lecture simultanée d’un grand nombre de zones à 15 tester (ou dots). Un autre avantage de ce mode de réalisation préféré de la présente invention est qu’il permet de délivrer un résultat qualitatif et éventuellement quantitatif de chacune des zones à tester.
[0039] Lorsqu’une technique de fluorescence ou une technique en lumière réfléchie est utilisée pour lire les zones à tester (ou points), un moyen 20 de rétrocontrôle est par exemple utilisé et permet de garantir une intensité lumineuse d’excitation toujours égale, ce qui permet une mesure instantanée de fluorescence ou de réflexion fiable, quelle que soit la température, la source d’énergie utilisée ou encore ia durée d'utilisation et le vieillissement de la source lumineuse. L'utilisation du moyen de rétrocontrôle permet de garantir 25 une source d’énergie lumineuse ayant une intensité constante dans le temps et prédéfinie. Une source d’énergie lumineuse ayant une intensité prédéfinie permet notamment de garantir des résultats quantitatifs fiables. Le moyen de rétrocontrôle est de préférence un moyen de rétrocontrôle électronique.
[0040] Les moyens de rétrocontrôle permettent de définir par exemple 30 une intensité d’émission cible d’une source lumineuse. Un capteur d’intensité permet de mesurer une intensité d’émission de la source lumineuse et de renvoyer l’intensité mesurée de la source d’émission aux moyens de rétrocontrôle. Les moyens de rétrocontrôle permettent par exemple de définir ia
BE2017/5706 tension d’alimentation ou l’intensité du courant fourni à la source lumineuse. Lorsque l’intensité lumineuse de la source lumineuse renvoyée par le capteur d’intensité aux moyens de rétrocontrôle est trop faible par rapport à l’intensité cible, les moyens de rétrocontrôle permettent une augmentation de la tension 5 ou du courant alimentant la source lumineuse. Au contraire, lorsque l’intensité lumineuse de la source lumineuse est trop élevée par rapport à l’intensité cible, les moyens de rétrocontrôle réduisent la tension ou le courant alimentant la source lumineuse. Les moyens de rétrocontrôle permettent une régulation de l'intensité lumineuse émise afin que ia source lumineuse opère à une intensité 10 lumineuse cible, stable dans le temps. Par exemple, l’intensité lumineuse cible est définie lors d'une calibration initiale et enregistrée dans une mémoire du dispositif. Cette régulation de l’intensité lumineuse permet d’assurer une lecture du support solide avec une même intensité cible contrôlée afin que cette intensité lumineuse ne soit pas influencée par des variations de température ou 15 d’un vieillissement de la source lumineuse. Les moyens de rétrocontrôle permettent la régulation de l’intensité lumineuse pour assurer une intensité cible d’une source lumineuse pour une mesure en fluorescence et ou en lumière réfléchie. Un avantage de ce dispositif de rétrocontrôle est d’assurer une intensité lumineuse contrôlé afin de pouvoir réaliser une lecture d'un support 20 solide amovible avec une technique- de fluorescence en continu et de pouvoir lire un signal de manière qualitatif et/ou quantitatif. Un autre avantage de pouvoir réaliser une lumière avec une intensité de lumière cible est de pouvoir assurer une meilleure consistance et comparaison des résultats d’un appareil à un autre. Par exemple, il est possible de pouvoir définir des facteurs de 2 5 correction pour chaque) lot de support solide amovible applicables sur n’importe quel dispositif de lecture optique de l’invention.
[6041] De préférence, le dispositif comprend en outre :
- un dispositif d'identification pour identifier un support solide à lire ;
des moyens de communications pour obtenir une information relative à 30 un support solide à lire.
[Ô042] Un avantage que le lecteur optique de l’invention comprenne un dispositif d’identification pour identifier un support solide à lire est de permettre un choix automatique de la méthode à appliquer au support solide à lire. Cela
BE2017/5706 permet un gain de temps et permet d’éviter les risques d’erreur par rapport à un choix manuel de la méthode. Une méthode de lecture comprend des informations propre au support solide à lire et permettant notamment le bon fonctionnement de l’unité optique, des moyens de traitement d’image et de S détermination afin de pouvoir obtenir une information fiable relative à au moins un analyte.
[0043] De préférence, l’intensité cible est définie sur la base de l’information relative audit support solide à lire.
[0044] Un avantage que l’intensité cible destinée aux moyens de il rétrocontrôle soit spécifiée dans l’information relative au support solide à lire est que cette intensité peut être modifiée en fonction du support solide à lire et de ia spécificité de celui-ci. Cela permet une plus grande flexibilité des supports soiides pouvant être lus par le lecteur optique de l’invention. Il est par exemple envisageable de combiner une intensité cible avec une méthode relative à une 15 tigette ou un lot de tigettes. Une telle méthode comprendrait en plus d’une
Intensité cible, un gain, un temps exposition, des signaux minimum de (in)validité des CTRL, des ratio cut-off (seuil de décision POS/NEG spécifique en fonction du lot et du point sur la tigette.
[6Ô45] De préférence la surface définie pour chaque position à deux 20 dimensions de sous-ensemble dans l'image recadrée est arrondie, de préférence circulaire, de préférence un disque.
[0046] De préférence, les moyens de détermination sont configurés pour o déterminer sur la base de l’intensité de sous-ensemble et sur la 25 base de l’information relative au support solide à lire, des informations d’analyte pour chaque sous-ensemble.
[0Ö47] De préférence, un des avantages du mode de réalisation préféré de l’invention est de fournir un dispositif de lecture optique d'un support solide amovible pour la détection et/ou la quantification d’aocs ytes présents dans un 30 échantillon avec un choix automatique de la méthode à appliquer à l’échantillon à partir d'une base de données de méthodes. Le présent mode de réalisation de l’invention permet en outre une correction automatique liée à la variation de
BE2017/5706 lots du support solide amovible pour chaque dots permettant la détection ou ia quantification d’anaiytes.
[0048] Le dispositif de lecture optique selon ce mode de réalisation préféré de l’invention permet une lecture optique d’une tigette pour l’analyse 5 d’un échantillon avec un choix de méthode de lecture automatisé. La méthode de lecture comprenant de préférence des données relatives a : une version de méthode, un numéro de lot, une date limite d’utilisation d’un lot, le type de source lumineuse utilisée, le type de zone d’intérêt (ligne ou point), méthode pour analyse quantitative (binaire) ou quantitative, des paramètres d’acquisition 10 d’image (temps d'exposition, gain,,..), les positions par rapport à des points de référence (par exemple selon des coordonnées cartésiennes), un nombre de zones d’intérêt, un nombre de réplica par analyte, l’organisation matricielle des zones d’intérêt sur le support solide mobile, la dimensions des zones d’intérêt (par exemple, un rayon), une dimension relative à une zone autour d’une zone 15 d’intérêt à considérer pour la prise en compte du background, des paramètres de calibration du type interpolation de données ou permettant une analyse quantitative d’un échantillon et enfin la désignation des zones d’intérêt en fonction de l’analyte qu’elles permettent de détecter et/ou de quantifier, [0Ü49] La choix automatique de la méthode de lecture est réalisé par le 20 lecteur optique de l’invention grâce au dispositif d’identification pour identifier un support solide à lire. Par exemple, le dispositif d’identification est un lecteur de code barre, de QR code, de datamatrix ou similaire permettant â partir d’un code inscrit sur un support solide, de disposer d’informations relative au support solide. De préférence, à partir d’une information relative au support solide 25 contenu par un marquage présent sur un support solide, le lecteur optique de l’invention permet grâce aux moyens de communication de consulter une base de données de méthode afin d’accéder à la méthode correspondant au support solide présent dans le lecteur. Par exemple le dispositif d’identification est lecteur de données en champ proche et le type de marquage présent sur un 30 support solide est une puce RFID. Par exemple les moyens de communication permettent d’accéder â une base de données de méthode sous format imprimé. Par exemple la base donnés est répartie sur plusieurs feuillets, la méthode correspondant au support solide étant acquise par la lecture du feuillet
ΒΕ2017/5706 correspondant à la méthode voulue. Par exemple tes moyens d’affichage du lecteur optique indiquent le feuillet comprenant la méthode voulue. Par exemple les moyens de communications permettent une confirmation que la méthode lue est bien te méthode correspondant à un support solide à lire.
[0050] Lro dispositif de lecture optique selon ce mode de réalisation de l’invention permet à partir d’une image à deux dimensions fournit par le détecteur optique, une détermination d’un nombre de sous-ensembles à analyser à partir des informations contenues dans ia méthode choisie grâce au dispositif d’identification. Cela permet une meilleure localisation des zones d’intérêts sur le support solide à lire. Lorsque les sous-ensembles sont positionnés au niveau des zones d’intérêt de te tigette-, tes moyens de détermination permettent une détermination d’une information d’analyte pour chaque sous-ensemble, Par exemple une information d’analyte pour une zone d’intérêt est modifiée par tes moyens de détermination sur la base d’informations d’analytes contenues dans la méthode. Par exemple, ces informations d’analytes sont une courbe de calibration permettant de déterminer une information quantitative d’un analyte. Par exempte, des informations d’analytes sont une intensité seuil pour une zone d'intérêt et donc pour un analyte, intensité seuil à partir de laquelle un analyte est considéré présent ou non présent dans l’échantillon testé. Par exemple, une valeur d’intensité seuil peut varier d’un lot de support solide mobile à un autre ce qui nécessite un accès automatique à une méthode pour assurer un résultat d’analyse fiable et avec un seuil de détection correspondant aux normes en vigueur.
[0051] De préférence tes tigettes à mesurer sont dotées d'un identifiant unique (à partir duquel la méthode de lecture peut être automatiquement désignée) qui permet de prévenir un utilisateur de te réutilisation d’une tigette déjà utilisée. En effet, il existe un risque de réutilisation d’une tigette ayant déjà été utilisé pour l’analyse d’un premier échantillon et ne pouvant être réutilisée pour une analyse d’un deuxième échantillon. Ainsi le dispositif de l'invention, permet de vérifier dans une base de données de support solide mobile, via les moyens de communication, si te support solide mobile inséré dans te lecteur optique n’a pas encore été utilisé. Si il s'agit de ia première utilisation du support solide mobile, la lecture optique peut commencer, si il s’agit d’une
BE2017/5706 deuxième utilisation (ou plus) la lecture optique ne démarre pas et l’utilisateur est averti que le support solide mobile n’est pas valable pour réaliser une analyse d’un échantillon choisi.
[0852] Un avantage du lecteur optique de ce mode de réalisation de l’invention est de permettre la détermination d'une méthode à partir d’un marquage de type code barre; ou RFiD présent sur un support solide mobile à lire afin de transférer automatiquement des informations relatives au support solide mobile à lire, telles que des paramétres de calibration propres à chaque support solide (ou lot de support solide).
[0053] Un avantage d’utiliser un marquage de type code barre ou RFID présent sur ou dans ia tigette à tester permettant de coder une information relative à la tigette est de permettre une lecture rapide d’un identifiant unique à partir duquel, le choix de la méthode peut se faire de manière automatique en accédant à une base de données de méthodes. Il est plus avantageux de procéder de la sorte plutôt que de stocker une méthode dans un marquage de type code bar ou RFID car la quantité d’information contenue dans de tels marquage est très limitée. Cette limitation de la quantité d’information pouvant être contenue dans ce type de marquage ne permet pas de fournir des informations relatives à un grand nombre de dots ou de lignes d'analytes à lire.
0 Cet avantage de ce mode de réalisation de l'invention, de pouvoir accéder à une méthode ne limitant le nombre d analyte pouvant être testé par un support solide permet l'utilisation de tigettes sur lesquelles sont présents un grand nombre de points ou de lignes correspondant à un grand nombre d’analytes â tester et disposant d’une information détaillée pour chacun des analytes à tester. De plus, la présence d'informations relatives à des analytes à tester présent dans une base de données de méthode plutôt que dans le marquage permet l’inscription du marquage lors de la fabrication des supports solides, les informations de méthode relatives à chaque analyte et à chaque support, solide pouvant être établis suite â la production du lot de support solide. Une modification de ia méthode étant également envisageable si par exemple un suivi qualité venait à révéler une anomalie ne permettant pas une lecture correcte d’un résultat d’analyte. Dans le cas où le marquage présent sur le support solide devrait être imprimé directement sur le support solide, cela
BE2017/5706 devrait se faire en différé des zones d’intérêt du support solide ou bien devrait ne pas contenir d’informations relative à la spécificité du lot en cours de production.
[0054] De préférence, lesdlts moyens de traitement d'image sont configurés pour :
o déterminer, à partir d’une information relative audit support solide à lire, un nombre fini de sous-ensembles de ladite image à deux dimensions, o positionner dans ladite image à deux dimensions chaque sous10 ensemble à une position prédéterminée à partir de ladite
Information relative audit support solide par rapport auxdites zones de référence.
[0055] De préférence, le dispositif comprend en outre :
- des moyens de sélection pour :
o sélectionner à partir d'une liste d’analytes prédéfinis, une sélection d’analytes à détecter et/ou à quantifier ;
en ce que les moyens de traitement d’image sont configurés pour :
o déterminer le nombre fini de sous-ensembie de l’image à deux dimensions à partir de l'information relative au support solide à 20 lire, chaque sous-ensembie correspondant à un analyte ;
en oe que les moyens de détermination sont configurés pour :
o calculer l’intensité de sous-ensembie pour chaque sous-ensembie correspondant à un analyte sélectionné dans la sélection d’analytes :
o déterminer sur la base de l’intensité de sous-ensembie des informations danalyte pour chaque sous-ensembie correspondant à un analyte sélectionné dans la sélection d’analytes ;
et en ce que les moyens de transmission sont configurés pour transmettre l’information d’analyte pour chaque sous-ensembie correspondant à un 30 analyte sélectionné dans ia sélection d’analytes, [0056] Un avantage de ce mode de réalisation préféré de la présente invention est de fournir un dispositif de lecture optique d’un support solide amovible pour la détection et/ou la quantification d’analytes présents dans un .JL· échantillon et permettant la sélection des analytes à tester sans nécessiter l’utilisation de plusieurs types de supports solides amovibles. Un autre avantage de celui-ci est de permettre une sélection d’analytes parmi une liste préétablie pour laquelle un opérateur souhaite tester la présence ou obtenir une 5 quantification desdits analytes.
[0057] Un autre avantage de ce mode de réalisation préféré est de permettre la lecture des zones à tester, en particulier avec une mesure Instantanée de fluorescence ou de façon préférée avec une mesure de la lumière réfléchie des zones à tester. Afin de permettre une sélection des l û analytes à tester correspondant à des zones d’intérêts sur une tigette, le dispositif propose grâce à l'accès à une méthode contenant des informations relatives à une tigette, une sélection à partir d’une liste d'analytes à tester. Il est en effet intéressant d’effectuer une sélection des analytes à tester avant d'en obtenir les résultats afin de bien cibler les analytes dont il est nécessaire de 15 connaître les résultats d’un test afin de ne pas exposer un utilisateur à une trop grande quantité de résultats. Donner accès à une trop grande quantité de résultats à un utilisateur n'en ayant pas nécessairement le besoin l’expose au risque d’une perte d’objectivité par rapport à son intention d’analyse initiale. Il est également intéressant d’un point de vue économique pour l’utilisateur qu’il 20 paie uniquement pour les résultats dont il a réellement besoin. Pour ie producteur et ou le distributeur, il est intéressant de disposer d’un procédé industriel unique permettant une simplification du procédé de fabrication ainsi qu’une simplification de la gestion des stocks. Ainsi, te dispositif de finvention, grâce à des moyens de sélection, permet un choix des analytes à tester par 25 l’utilisateur avant d’effectuer la lecture de la tigette. Les moyens de sélection, en communication avec les moyens de traitement d’image permettent aux moyens de traitement d’image, une détermination des informations des analytes sélectionnés uniquement, [0058] Un autre avantage de ce mode de réalisation préféré est de 3 u permettre) une lecture optique basée sur un signal optique (fluorescence ou réflectométrie) de zones comprenant des informations relatives aux analytes à tester. De plus, ce lecteur optique permet une sélection des analytes à tester à partir d’une seule tigette, c’est-à-dire ne nécessitant pas ie positionnement
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BE2017/5706 d’une ou plusieurs tigettes différentes dans une cassette, ia cassette étant ensuite insérée dans te lecteur. Plusieurs tigettes pouvant également être insérées directement dans un lecteur optique. Par ailleurs, ce lecteur optique permet par exemple une communication par câble ou sans-fil des résultats 5 concernant les analytes à tester.
[0059] Un avantage d’utiliser le lecteur optique de ce mode de réalisation préféré pour réaliser un diagnostic concernant une sélection d’anaiytes d’intérêt est qu’il ne nécessite ni une première sélection des bandelettes â tester, ni ia mise en contact de chacune de ces bandelettes avec le produit â tester puis lû leur positionnement dans le lecteur optique. Le lecteur optique de l’invention pour permettre une sélection des analytes d’intérêt ne nécessite pas que soit mis à disposition une pluralité de bandelettes permettant le test de ladite sélection d’anaiytes à tester. Tout cela permet d’éviter une manipulation importante des bandelettes à tester, coûteuse en temps et en gestion des 15 stocks. Cela permet également une analyse plus simple, plus rapide et plus ciblée des analytes à tester, en disposant uniquement des résultats sélectionnés à l’issue de la lecture de la bandelette par le lecteur optique de l’invention.
[0060] De préférence, la liste d’anaiytes prédéfinis est comprise dans û l'information relative à un support solide.
[0001] L’avantage d’avoir une liste d’analyte prédéfinis dans l’information relative à un support solide est de disposer d’une liste comprenant seulement les analytes que le support solide amovible est capable de déterminer. Cela permet de réaliser une sélection uniquement à partir des analytes pour lesquels 25 il est possible d’obtenir un résultat et non à partir d’une liste exhaustive d’anaiytes.
[0062] De préférence, ie dispositif comprend en outre :
- un compteur de crédit, le compteur de crédit étant incrémenté lors de la sélection de chaque analyte à détecter et/ou à quantifier par les moyens 30 deselection.
[0063] Par exemple, le compteur de crédit permet une incrémentation positive ou négative, par exempte le compteur de crédit est rechargeable et permet de bloquer les moyens de traitement d’image et ou les moyens de
BE2017/5706 détermination et ou tes moyens de transmission des données relative à la tigette à mesurer lorsque te solde de crédit est égal à zéro ou que te solde de crédit n’est pas suffisant pour réaliser l’analyse de tous les analytes sélectionnés par les moyens de sélection. Un avantage du compteur de crédit est qu’il peut être rechargé à partir des moyens de communications. Par exemple une consigne pour incrémenter te crédit de façon positive est contenu sur une clé usb amovible ou directement transférée en weaservice via une plateforme internet utilisée pour ia gestion des dispositifs optiques à distance. Par exemple une consigne pour une incrémentation positive de crédit est accessible aux moyens d’une connexion sans fil. Par exemple le compteur de crédit est un compteur d’unité ou ‘unit’. Par exemple, tes crédits (ou unités d’utilisation) virtuelles sont décomptés au regard du nombre d’analyse (tigettes) et du nombre de channel (point ou dot) sélectionné. Les crédits peuvent être rechargés après un payement.
[0064] De préférence, les moyens de détermination sont configurés pour :
o déterminer sur te base de l’intensité de sous-ensemble et sur la base) de l’information relative au support solide â lire, tes informations d’analyte pour chaque sous-ensemble correspondant à un analyte sélectionné dans la sélection d’anaiytes.
[0065] De préférence, te dispositif comprend en outre :
des moyens de cryptage et d’enregistrement pour enregistrer l’image à deux dimensions sur te base d’un cryptage défini.
[0066] Par exempte, les moyens de sélection, en communication avec les moyens de détermination et avec tes moyens de transmission, permettent ia transmission des résultats concernant les analytes sélectionnés. L’image ayant permis la détermination des résultats concernant tes analytes est par exempte transmise vers des moyens de cryptage. Les moyens de cryptages permettant alors un cryptage des données relatives aux analytes enregistrés et non enregistrés et l’enregistrement de ces données cryptées. L’avantage de l’enregistrement des données cryptées comprenant les résultats des analytes non-sélectionnés permet de pouvoir disposer des résultats concernant tes analytes non-sélectionnés mais d’en limiter l’accès aux personnes disposant de
BE2017/5706 moyens de décryptages aptes à décrypter les données cryptées par les moyens de cryptages. Par exemple, les données cryptées comprennent limage à deux dimensions acquise par le détecteur optique ainsi qu’une méthode ou une information relative à la tigette testées. Pour obtenir des résultats des « channels (points) non-sélectionnés », il faut activer les « channels (points)» en question et faire une « réannaiyse d'image existante » pour dévoiler les résultats des points non-sélectionnés initialement. Un avantage de disposer de l’image acquise par l’unité optique ainsi que d’une information relative à la tigette testée est de pouvoir réaliser une ré-analyse du support solide à n'importe quel moment après la première analyse selon l'invention. Il est ainsi possible de s’assurer de la bonne analyse de l’image par les moyens de traitement d’image, d'analyser des sous-ensembles n’ayant pas été sélectionnés par les moyens de sélection ou encore d'effectuer analyse quantitative lorsqu’une première analyse qualitative avait été effectuée. Cet avantage d'enregistrer l'image, de préférence sous forme cryptée, permet de s’assurer qu’elle ne peut être lue que par une personne ayant les droits d’y accéder. Lors d'une ré-analyse, dans le cas où de l’analyse d’analytes non précédemment détecté ou quantifier, une incrémentation d’un compteur de crédit est de préférence possible.
[0867] De préférence, l'information relative à un support solide à lire comprend une information correspondant à chacun des sous-ensembles.
[8060] Un avantage de disposer d’une information relative à un support solide amovible comprenant une information relative à chacun des sousensembles est qu’il est possible d’indiquer dans l’information relative au support solide, des caractéristiques essentielles comme les analytes correspondant à chacun des sous-ensembles ainsi que par exemple des courbes de calibration permettant une mesure qualitative et quantitative.
[8860] De préférence, le dispositif est compact et hermétique.
[8070] Un avantage d’avoir un dispositif compact et hermétique est de pouvoir utiliser le dispositif de façon portative. Un autre avantage est de pouvoir utiliser le dispositif dans des conditions extérieures ou dans des conditions liées au Heu de production d’un lot dont provient l’échantillon â tester.
[0071] De préférence, le dispositif comprend en outre :
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- une surface externe ;
des moyens de refroidissement pour transférer une quantité de chaleur de l’intérieur dudit dispositif vers ladite surface externe.
[0072] De préférence ia surface externe crée une étanchéité à l’eau et à la poussière. Un avantage des moyens de refroidissement qui permettent un transfert de chaleur de l’intérieur du dispositif vers sa surface externe est de permettre le transfert de chaleur sans pour autant nuire à l’étanchéité ou à l’hermétisme selon un indice de protection IP54 selon la norme de CEI 60529 consultée en septembre 2017.
[0073] De préférence, les moyens de refroidissement comprennent un caloduc.
[0074] Un avantage du caloduc est qu'il permet le transport d’une grande quantité de chaleur sur une distance relativement grande. De fait le calcduc est particulièrement bien adapté pour le dispositif de l’invention car il d’acheminer la 15 chaleur produite à tout endroit à l’intérieur du dispositif vers l'extérieur du dispositif tout en conservant une bonne étanchéité.
[0075] De préférence, le dispositif d’identification du support solide est un lecteur de data matrix, de code barre, ou de QR code.
[0076] Selon un deuxième aspect, un des buts de l’invention est de fournir un ensemble de diagnostic permettant un diagnostic pratique, économique, efficace et optimisé par rapport aux ensembles de diagnostic actuels, et ce en permettant la détection et/ou la quantification non seulement d’un nombre plus élevé de classas d’anaiytes appartenant à une famille d’anaiytes (par exemple les antibiotiques), mais également d’un nombre plus
5 élevé de classes d’anaiytes appartenant à plusieurs familles d’anaiytes (par exemple les résidus médicamenteux, les toxines ou encore les métaux lourds). Plus particuliérement, un ensemble de diagnostic selon le deuxième aspect de l’invention permet la détection et/ou la quantification d’au moins cinq classes différentes d’anaiytes, de préférence d’au moins dix classes différentes d’anaiytes, encore plus préférentiellement d’au moins quinze classes différentes d’anaiytes présents dans un échantillon et appartenant à au moins deux families d’anaiytes distinctes, et ce en moins de quinze minutes.
BE2017/5706 [0077] A cet effet, les inventeurs proposent un ensemble de diagnostic pour la lecture optique d’un système récupérateur comprenant :
- le dispositif selon le premier aspect de l'invention ;
un moyen de diagnostic pour la détection et/ou la quantification respective, simultanée et spécifique d’une pluralité d’analytes présents dans un échantillon comprenant au moins un mélange réactionnel et au moins un système récupérateur, ledit au moins un système récupérateur étant sous la forme d’un support solide auquel se trouvent fixés en des emplacements de récupération distincts et connus dans l’espace, des 10 ligands compétiteurs et/ou des molécules biologiques de reconnaissance, de manière à identifier par la localisation desdits emplacements de récupération sur ledit support, iesdits analytes présents dans ledit échantillon, ledit moyen de diagnostic étant caractérisé en ce que ledit système récupérateur comprend des emplacements de récupération qui sont disposés selon un arrangement matriciel en deux dimensions qui est défini selon un système de coordonnées connues et spécifiques desdits ligands compétiteurs et/ou desdites molécules biologiques de reconnaissance fixés audits emplacements de récupération dudit système récupérateur.
[0078] Les variantes et avantages mentionnés pour le premier aspect de l’invention s’appliquent à l'ensemble de diagnostic suivant le deuxième aspect, mutadis mutandis.
[0079] En effet, il a été démontré de manière surprenante qu’un
2.5 ensemble de diagnostic comprenant un moyen de diagnostic qui comprend un système de récupération présentant des emplacements de récupération qui sont disposés selon un arrangement matriciel en deux dimensions qui est défini selon un système de coordonnées connues et spécifiques permet de détecter et/ou de quantifier au moins cinq classes différentes d’analytes, de préférence 30 au moins dix classes différentes d’analytes, de préférence au moins quinze classes différentes d'analytes présents dans un échantillon et appartenant à au moins deux familles d’analytes distinctes, et ce en moins de quinze minutes. Un ensemble de diagnostic avec un moyen de diagnostic est par conséquent plus
BE2017/5706 pratique, plus économique eî plus efficace que les moyens de diagnostic connus actuellement qui se limitent généralement à moins de cinq classes différentes d’analytes, typiquement seulement à deux ou trois classes différentes d’analytes, ces classes appartenant à une même famille d’analytes 5 (par exemple les antibiotiques).
[0080] De préférence, Iesdits emplacements de récupération sont disposés selon un arrangement matriciel en deux dimensions sous la forme de points présentant chacun un diamètre compris entre 20 μm à 2 mm. de préférence compris entre 100 à 500 μm et encore plus préférentiellement 10 compris entre 250 μm et 400 μm.
[0081] Il a été démontré que des emplacements de récupération sous forme de points présentant chacun un diamètre compris entre 20 μm et 2 mm, de préférence compris entre- 100 μm et 500 μm, préférentiellement entre 2-50 μm et 400 μm, permettaient de fixer au moins cinq, de préférence eu moins dix, 15 plus préférentiellement au moins quinze emplacements de récupération en simplicat, en duplicat ou en triplicat pour la détection et/ou la quantification d’au moins cinq, de préférence au moins dix, plus préférentiellement d’au moins quinze analytes de classes différentes, appartenant ou non à des familles d’analytes distinctes, ainsi qu’au moins un emplacement de récupération 2 0 déposé en simplicat, en duplicat ou en triplioat destiné au contrôle positif du seuil de détection permettant de valider le test et/ou à la calibration pour la détection et/ou la quantification, et ce sur un système récupérateur ayant une taille raisonnable et de l’ordre du centimètre carré, pour la réalisation de la détection et/ou la quantification d'au moins treize analytes par le dispositif de 25 lecture optique.
[0082] De préférence, ledit système de coordonnées présente une première coordonnée définie sur un axe longitudinal d’une longueur dudit système récupérateur et une deuxième coordonnées définie sur un axe longitudinal d’une largeur dudit système récupérateur.
[0083] De préférence, ledit système récupérateur comprend au moins cinq, de préférence au moins dix, et plus préférentiellement au moins quinze emplacements de récupération distincts destinés à la détection et/ou la quantification respective, simultanée et spécifique d’au moins cinq, de
BE2017/5706 préférence d’au moins dix, plus préférentiellement d’au moins quinze analytes de classes distinctes présents dans un échantillon et appartenant ou non à des familles d’analytes différentes, et au moins un emplacement de récupération destiné à un contrôle et/ou un calibrateur,
Brève description des figures [0084] Ces aspects ainsi que d’autres aspects de l’invention seront clarifiés dans la description détaillée de modes de réalisation particuliers de l’invention, référence étant faite aux dessins des figures, dans lesquelles:
- tes Fig.1a, Fig. 1b, Fig. 1c, Fig. 1d et Fig. 1e montrent des modes de réalisations schématiques du dispositif selon l’invention ;
- les Fig.2a et Fig. 2b montrent un mode de réalisation schématique du dispositif selon l’invention ;
- tes Fig.3a et Fig.3b montrent un exemple d’image à deux dimensions selon l'invention ;
- la Fig.4 montre une vue en 3D d’un mode de réalisation selon l’invention. Les dessins des figures ne sont pas à l’échelle, Généralement, des éléments semblables sont dénotés par des références semblables dans les figures. La présence de numéros de référence aux dessins ne peut être considérée comme limitative, y compris lorsque ces numéros sont indiqués dans les revendications.
Description détaillée de certains modes de réalisation de l’invention [0085] Les Figures la à 1e montrent un exemple de mode de réalisation du dispositif 1 selon l'invention. Un support solide 2 amovible pour la détection et/ou la quantification d'analytes présents dans un échantillon es! inséré dans te dispositif 1 et est reçu par un emplacement 2û. L’emplacement 20 permet de recevoir le support solide 2 pour que le positionnement du support solide 2 soit le plus reproductible possible d’un support solide 2 à un autre par rapport à l’unité optique 7. De préférence, l’emplacement 20 est une partie amovible du dispositif 1 qui est par exemple soutenu par un dispositif de tiroir. Pour réaliser la lecture optique d’un support solide 2, l'emplacement 20 est par exemple retiré du dispositif afin de pouvoir y positionner le support solide 2 à lire optiquement. Lorsque le support solide 2 à lire est positionné dans
BE2017/5706 remplacement 20, ceux-ci sont de préférence ramenés à l'intérieur du dispositif 1 pour y effectuer la lecture optique. L’emplacement 20 permet un positionnement rapide et fiable du support solide 2. Le support solide 2 lorsqu’il est présent dans le dispositif 1 tel qu'illustré en figure 1 est éclairé par une 5 source lumineuse 3, 4. Un signal lumineux renvoyé par le support solide 2 vers un système d’imagerie 60 est détecté par le détecteur optique 6 pour fournir une image 40 à deux dimensions du support solide 2, [0086] Une source lumineuse 3. 4 a par exemple les spécifications suivantes :
la première source lumineuse 3: diode électroluminescente ayant une longueur d’onde dominante : 590 nm, largeur de bande d'émission (FWHM) : 18 nm, puissance d’émission minimale / typique : 160 mW / 170 mW, De préférence la première source lumineuse 3 comprend au moins une diode électroluminescente, de préférence au moins trois 15 diodes et de façon encore plus préférée six diodes afin d’assurer une intensité lumineuse suffisante d’éclairage de la région d’intérêt (zone de visualisation) du support solide 2, l’utilisation d’au moins deux diodes permet une meilleure uniformité d’éclairage de la région d’intérêt du support solide ;
0 - la deuxième source lumineuse 4 : diode électroluminescente ayant une longueur d’onde dominante : 525nm.
Le système d’imagerie 60 comprend un détecteur optique 6, une optique pour focaliser le signal lumineux renvoyé par le support solide 2 sur le détecteur optique 6. De préférence le détecteur optique 6 est un détecteur de type 2 5 CMOS. Dans un autre mode de réalisation, te détecteur 6 est un détecteur de type CCD. Par exempte te détecteur optique est un réseau de photo détecteurs. Une optique de focalisation est par exempte une lentille convergente, par exempte une lentille convergente ayant une langueur focale comprise entre 15 mm et 20 mm.
[0087] Le lecteur optique 1 de l’invention comprend également un filtre 10 positionné sur le chemin optique du signai lumineux renvoyé par le support, solide 2 et situé en amont du détecteur optique 6. De préférence te filtre 10 est un filtre passe bande qui permet de laisser passer une bande de longueur
BE2017/5706 d’onde du signal lumineux renvoyé par le support solide 2 lors de son illumination par une source lumineuse 3, 4. La bande de longueur d’onde transmise par le filtre permet la détection et/ou la quantification d’anaiytes présents dans un échantillon.
Préférentiellement, Ie filtre 10 est un filtre passe double bande, c’est-à-dire transparent à deux bandes de longueurs d'ondes distinctes. Par exemple, le filtre 10 passe double bande a une première plage de transmission centrée sur 527 nm et avec une bande de transmission nominale à mi-hauteur (FWHM) de
54,1 nm. La première plage de transmission a une transmission supérieure à 90 û % dans la plage de longueur d’onde 506 - 548 nm. Une deuxième plage de transmission centrée sur 645 nm et avec une bande de transmission nominale à mi-hauteur (FWHM) de 61 nm. La deuxième plage de transmission a une transmission supérieure à 90 % dans la plage de longueur d’onde 620,5 669 5 nm. Chacune des bandes de transmiss on du filtre passe double bande permet la détection et/ou la quantification d'anaiytes présents dans un échantillon. Par exemple, le support solide 2 comprend des molécules de marquages fluorescentes qui nécessitent un filtre pour être détectées et/ou quantifiées. Le filtre 10 permet de bien différencier dans la lumière qui est renvoyée par ie support solide 2 au détecteur optique à deux dimensions 6, la composante réfléchie et. la composante issue de la fluorescence desdits composés. De préférence pour une lecture optique d’un support solide 2 en fluorescence (photoluminescence), seule la plage de longueur d’onde émise par les molécules fluorescentes en rapport avec i’analyte à détecter doit être transmise au détecteur optique 6. En effet la transmission des longueurs 2? d’ondes en lien avec ia source lumineuse 3, 4 d’excitation ne permet pas d’obtenir un bon rapport signal/brult. L’élimination de la plage de longueur d’onde d’un faisceau lumineux 30, 40 au niveau du détecteur 60 est donc préférable lors d’une mesure en fluorescence.
[0688] L’ image 40 â deux dimensions acquise par le détecteur optique 6 à deux dimensions est ensuite acheminée vers les moyens de traitement d’image 12 afin d’y être analysé. Les moyens de détermination 13 permettent un traitement des données générées par les moyens de traitement d’image 12 afin de fournir une ou des informations concernant un ou des analytes présents
BE2017/5706 dans un échantillon. Par exempte si un analyte est présent ou absent d'un échantillon. Ces informations concernant des analytes sont transmises à un utilisateur par le biais des moyens de transmission 19.
[0089] Les figures 1 b et 1 e montrent en outre un moyen de rétrocontrôle 2 11, relié à un détecteur d’intensité lumineuse 5, par exempte une photodiode sensible dans la plage de longueur d’onde émise par une source lumineuse 3. Ce moyen de rétrocontrôle 11 permet de fournir à la source lumineuse 3 un signai électrique afin que l’emplacement 20 pour recevoir le support solide 2 soit éclairer avec une intensité cible choisie et par exempte constante quelles 10 que soient les conditions extérieures au dispositif 1 de l’invention. Par exemple le moyen de rétrocontrôle 11 permet une régulation de l’intensité lumineuse.
[0090] La Fig. 1b montre un mode de réalisation selon l’invention basé sur ia Fig. la et comprenant, en outre des moyens de rétrocontrôle 11 permettant d’assurer une illumination du support solide 2 contrôlée. La 15 photodiode 5 est positionnée de sorte qu’elle reçoive un flux lumineux généré par la source lumineuse 3, 4 représentatif de la l’intensité lumineuse dirigée vers remplacement 20 et ou le support solide 2.
[0091] La Fig. 1c montre- un mode de réalisation selon l’invention comprenant des moyens de communication 8 reliés aux moyens de traitement >3 d'image 12 et aux moyens de détermination 13. Les moyens de communication permettent, l’accès à une base de données de méthode pouvant être informatisée et stockée sur un serveur, stockée dans une mémoire interne ou externe au lecteur optique de l’invention, par exemple une clé usb, un CD, une) mémoire non-volatile. La base de données peut également être non informatisé 2 et présentée sous forme papier et lisible par le lecteur optique 1 sous forme d’un code barre, datamatrix, QR code. Par exemple le lecteur optique 25 de l'invention peut lire les données de la base de données non-inforrnatisée grâce â un lecteur optique externe au dispositif. Par exemple le dispositif d’identification 25 décrit en Fig. 1d et Fig. 1e permet la lecture des données de 30 la base de données non-inforrnatisée. Ä partir des données obtenues de ia base de données (informatisée ou non-informatisée), les moyens de communications 8 peuvent transmettre aux moyens de traitement d’image 12 des données relative à l’emplacement des points ou des lignes d’intérêt. De
BE2017/5706 préférence, te position dos points ou des lignes d'intérêt est données par rapport à des points ou zones de références. Par exemple les moyens de communication 8 peuvent envoyer à l'unité optique 7 des informations relatives au type de source lumineuse, é l'intensité de la source lumineuse requise, au 5 temps d'exposition pour l'acquisition d'une image 40 â deux dimensions permettant la détection et ou la quantification d'analytes présent dans un échantillon.
[9092] Les moyens de communication 8 sont également configurés pour transmettre des données issues de la base de données vers les moyens de 10 détermination 13. Ces données permettent notamment de donner une correspondance entre les points 41 ou tes lignes d'intérêt identifiées et d’extraire par tes moyens de traitement d’image 12, des informations concernant un analyte à déterminer ou à quantifier. Par exempte, tes moyens de traitement d’image 12 attribuent à chaque point 41 ou ligne présent sur le 15 support solide 2 une position, par exemple des coordonnées dans un repère cartésien par rapport à des points ou zones de référence 45. Les moyens de détermination 13 permettent alors pour chacun des points 41 ou lignes présents ou sensé être présents de leur attribuer un nom d’analyte. Les données issues des moyens de communication 8 et transmises aux moyens de détermination 20 13 comprennent également des informations relative à des valeurs seuils, par exemple spécifiée par une ou des normes, à partir desquelles un analyte est considéré comme présent en trop grande quantité ou présent dans des proportions acceptable ou inversement. Ces données comprennent par exemple des courbes de calibration permettant une analyse quantitative d’un 25 analyte. De préférence, pour chaque point 41 ou ligne d’intérêt, ii existe une courbe de calibration permettant de donner une concentration de i’analyte dans l'échantillon et correspondant à un point d'intérêt 41.
[0093] Dans un mode de realisation préféré, le lecteur optique de l’invention comprend des moyens de sélection 27 permettant à un utilisateur 30 une sélection des analyte dont il souhaite déterminer la présence (dans des proportions excédant les normes en vigueur dans le domaine d’application des supports solides 2) ou ia quantité dans un échantillon, Il peut exister plusieurs mode afin d’effectuer une sélection des analytes â déterminer. Par exemple un
BE2017/5706 administrateur du lecteur optique 1 de l’invention peut effectuer une sélection type qui sera utilisée lors de chacune des lectures de support solide 2. Par exemple la sélection peut être effectuée à la carte, c'est-à-dire qu’avant le début de chaque lecture de support solide 2, l’utilisateur sélectionne les 5 analytes dont il souhaite connaître la présence et ou la quantité dans l’échantillon qu’il souhaite tester. De préférence les moyens de communication 8 envoient aux moyens de sélection 27, des informations concernant les analytes qu’il est possible de détecter avec le support solide inséré dans le lecteur optique 1. Ainsi l'utilisateur peut effectuer un choix, uniquement à partir î û des analytes qu’il est possible d'analyser avec le support solide 2 inséré dans le lecteur et non à partir d’une liste générique d’analyte dont l’utilisateur ne sait pas s’il serait possible d'en obtenir un quelconque résultat. Lorsque la sélection de l'utilisateur est effectuée, cette sélection est communiquée par les moyens de selection 27 aux moyens de détermination 13. Les moyens de détermination 15 13 déterminent alors pour chaque analyte sélectionné, une intensité de sousensemble ou de point d’intérêt 41 correspondant aux analytes sélectionnés. À partir de celte intensité de sous-sensemble et grâce aux données communiquées par les moyens de communication 8 concernant une valeur seuil ou une courbe de calibration pour chacun des point d’intérêt 41, les ..h? moyens de détermination 13 envoient aux moyens de transmission 19, des résultats concernant la détection et ou la quantification des analytes sélectionnés lorsqu'une sélection a été réalisée eu de tous les analytes dont le support solide 2 permet la détection ou la quantification lorsqu’aucune sélection n'a été réalisée,
5 [0894] Les informations relatives à un support solide sont par exemple transmises aux moyens de traitement d’image 12 afin que ceux-ci disposent d'informations relatives à un nombre de point d’intérêt ou à un positionnement préféré de ces points d’intérêt ou encore à des corrections permettant une comparaison des différents lots entre eux afin d’effectuer une mesure 30 quantitative des analytes présents dans un échantillon. Les moyens de transmission 19 sont de préférence connectés aux moyens de communication 8.
BE2017/5706 [0095] La Fig. 1d montre un mode de réalisation selon l’invention comprenant un dispositif d’identification 25 permettant ia lecture d’un identifiant présent sur le support solide 2. Un identifiant est par exemple un code barre, un data matrix ou un QR code, dans ce cas le dispositif d’identification 25 est lecteur de code optique connu de l’homme du métier. Un identifiant est par exemple une puce RFID, dans ce cas le dispositif d’identification 25 est un lecteur en champ proche connu de l’homme du métier. Le dispositif d identification 25 lorsqu’il a acquis une information à partir de l’identifiant présent sur le support solide 2, envoi vers les moyens de communication 8 l’information relative au support solide inséré dans le lecteur optique 1, À partir de cette information, les moyens de communication peuvent acquérir à partir d’une base de données, des informations spécifique au support 2 inséré ou au lot auquel le support solide 2 Inséré appartient. En l’absence d’un dispositif d’identification 25, ii est possible d’indiquer manuellement aux moyens de communication un identifia’’t relatif au support solide 2 inséré, par exemple avec un clavier connecté au lecteur optique 1 ou avec l'écran tactile qui équipe le lecteur optique 1.
[009S] En Fig. 1e, le lecteur optique intègre un dispositif d’identification 25, des moyens de sélection 27 et des moyens de communication 8.
[9097] Il est également possible de positionner dans les modes de réalisations présentés dans les Figs. 1a à 1e, une deuxième source lumineuse 4 telle que représentée en Fig. 2a et Fig. 2b. Clans le cas de la présence de moyens de rétrocontrôle 11, la deuxième source lumineuse 4 est reliée à ces moyens de rétrocontrôle 11 afin que l'intensité de la deuxième source lumineuse 4 puisse être contrôlée telle que décrit pour l’intensité de la première source lumineuse 3.
[9098] Le lecteur optique 1 selon l’invention dispose de préférence d’une première 3 et d’une deuxième 4 source lumineuse tel qu’illustré en Fig. 2a et Fig. 2b. De préférence, la première source lumineuse 3 est destinée à effectuer une lecture/mesure en fluorescence du support solide 2. De préférence, la deuxième source lumineuse 4 est destinée à effectuer une lecture/mesure en réflexion du support solide 2 pour la détection et/ou la quantification d'analytes. La présence du filtre 10 passe double bande permet d’utiliser le même
BE2017/5706 détecteur optique 6 pour une mesure en fluorescence ou pour une mesure en réflexion. De préférence les première 3 et deuxième 4 sources lumineuses sont utilisées l'une après l’autre pour la mesure d’un même support solide 2 dans un ordre variable. De manière plus préférée une seule source lumineuse est utilisée pour la détection et ou la quantification d’analytes présents dans un échantillon par la lecture optique d'un support solide 2.
[0099] Une image 40 à deux dimensions acquise par le détecteur 6 est alors envoyée vers les moyens de traitement d’image 12. Les moyens de traitement d’image 12 permettent les étapes de traitement d’image détaillées ciaprès. De préférence ces étapes sont utilisées en fonction d’une méthode choisie manuellement par un opérateur ou automatiquement par une reconnaissance de la tigette à mesurer par le lecteur optique et en particulier par un dispositif d’identification.
[0190] Prétraitement - Recadrage de l’image à deux dimensions [0101] L’étape de recadrage de l’image 40 à deux dimensions en une image recadrée 42 â deux dimensions permet de sélectionner au sein de l’image originale 40 à deux dimensions une région d’intérêt rectangulaire comprenant des zones de la tigette à analyser plus spécifique et comprenant moins de zones de fond ou de zones sans rapport avec te support solide 2 à lire. Les zones de l’image 40 à deux dimensions inutiles â l'analyse future sont ainsi éliminées de l’image recadrée 42. Le recadrage de l’image 40 à deux dimensions est une étape facultative.
[0192] La région d’intérêt de l’image recadrée 42 est définie à partir de l'image 40 à deux dimensions (définie par des pixels selon des coordonnées cartésiennes) par des coordonnées x et y en pixels de l'extrémité haute gauche de la région rectangulaire d’intérêt, sa largeur en pixels et sa hauteur en pixels. [9103] Prétraitement ~ Correction d’uniformité [9104] Le but est du prétraitement de l’image 40 à deux dimensions ou de Limage recadrée 42 et plus particulièrement de la correction d'uniformité est de corriger la non uniformité de l’éclairage au sein de la région d'intérêt, pour qu’elle n’impacte pas les analyses futures du support solide 2. Cette correction d’uniformité peut être activée ou non par les moyens de traitement d'image 12. La correction de l’uniformité de l’éclairage est par exemple réalisé à partir d’un
ΒΕ2017/5706 fichier comprenant une image modèle (ou de calibration), par exemple d’un support solide n’ayant pas encore été soumis à l'échantillon à caractérisé ou d’un support solide ne comprenant pas de peint ou de bande supportant des molécules de marquages. Cette image modèle est par exemple enregistrée dans une mémoire du lecteur optique 1 accessible par les moyens de traitement d’image 12.
[0105] En l’absence d’une image modèle, une auto-calibration est effectuée. L’auto-calibration consiste à créer une image (un modèle) synthétique pour la correction d’uniformité, utilisée en lieu et place de l’image modèle et ce, en appliquant à la région d’intérêt originale deux filtres médians consécutifs. Ces filtres, en remplaçant la valeur de chaque pixel de l’image par la valeur médiane des pixels se situant dans un voisinage de taille définie, permettent d'obtenir une version doutée moins bruitée de image 40 à deux dimensions (élimination des valeurs aberrantes) tout en respectant le contraste de l’image.
[0106] Détection initiate des points [0107] Cette étape vise à détecter la position des dots présents sur la tigette. Pour ce faire, une fenêtre carrée de détection (de côté égal à deux fois le rayon d’un point) balaye dans un premier temps l’entièreté de limage analysée 40, 42 à la recherche de zones correspondant potenttellement à des points à savoir les zones les plus brillantes dans limage entourées de zones sombres (zones contrastées par rapport à une zone de fond).
[0106] À chaque position de la fenêtre, la moyenne des valeurs des pixels au sein d'un cercle de rayon défini au centre de la fenêtre, est calculée. Celle-ci est ensuite comparée â la moyenne des pixels compris dans un anneau extérieur, entourant le cercle de rayon. Si la différence entre les deux moyennes est supérieure à un certain seuil (fixé empiriquement), te- centre de la fenêtre de balayage est considéré comme appartenant à une zone correspondant potentiellement à un dot. En balayant l'entièreté de limage 40 à deux dimensions, un masque binaire spécifiant tes zones potentielles de dots est ainsi créé.
[6109] Dans un deuxième temps, tes cercles sont détectés au sein de l’image binaire obtenue lors de la première phase de détection. Parmi les
BE2017/5706 cercles détectés, on retrouve notamment les points de la grille mais également de « faux points » dus notamment à l’apparition des bords du support solide 2 au sein de la ROI définie par l’utilisateur. Pour éliminer les faux points au sein du masque binaire et ne garder que les cercles correspondant aux points de la grille, l’emplacement théorique de la grille au sein de l’image 40 ,42 est utilisé.
[0110] L’emplacement théorique de la grille est déterminé sur base des coordonnées « x1 », « y1 » (en haut à gauche) et « xn », « ym » (en bas à droite) qui définissent la position des points extrêmes de ia grille en haut à gauche et en bas à droite. Étant donné la différence entre la position réelle de 10 la grille de points et la position théorique spécifiée par la méthode de lecture ou par les moyens de traitement d’image 12, les coordonnées théoriques selon
Taxe y « y1 » et « ym » sont corrigées sur base de la détection automatique du support solide 2 au sein de la ROI large définie par l'opérateur. Cette détection est permise grâce à la connaissance de la hauteur du support solide spécifiée 1 5 par la méthode de lecture ou par les moyens de traitement d’image 12.
[Ö111] L’emplacement théorique de la grille révisé sert alors à définir une sous-région d’intérêt complètement incluse au sein du support solide, au sein duquel les cercles détectés sont conservés (car considérés comme appartenant â la grille de points) et en dehors de laquelle ies cercles détectés sont 21 considérés comme de fausses détections de points et sont dès lors éliminés.
Après l’élimination des mauvaises détections, un masque binaire spécifiant les positions initialement estimées des points de la grille est obtenu.
[8112] Fitting grille sur dots visibles [0113] Cette étape vise à faire correspondre un motif de grille initial de 21 dots sur les dots détectés au sein de la région d'intérêt afin d’optimiser postérieurement les positions estimées des dots et de permettre leur mesure.
Un rectangle entourant l’ensemble des dots délectés initialement (et non éliminés) est dans un premier temps calculé.
[0114] Le coin haut gauche ou ie coin en haut à gauche « xi », « y1 » du 33 rectangle obtenu permet de déterminer l'emplacement observé en pratique (et non plus théorique) du premier point de la grille initiale (en haut â gauche).
Avec l’aide de paramètres spécifiant respectivement le nombre de dots présents sur la tigette en X et en Y, le rectangle défini permet également de
BE2017/5706 déterminer l'angle que forme la grille de points avec l’horizontale mais aussi de calculer l’espace entre points observé en pratique selon X et Y. En effet, l’espace entre points selon x(y) est déterminé comme le rapport entre la hauteur (largeur) du rectangle calculé et des paramètres spécifiant respectivement le nombre de dots présents sur le support solide 2 en X et en Y. Cet espace entre dots « pratique » est moyenne avec l’espace inter points théorique (déterminé quant à lui sur base des paramètres « x1 », « y1 », « xn », « ym » et des valeurs des paramètres spécifiant respectivement Ie nombre de dots présents sur la tigette en X et en Y. Cette moyenne est réalisée dans le but de contrer l’effet d’un élargissement potentiel excessif de l’espace inter points « pratique », élargissement observé lorsqu’un point n’est pas exemple plus aligné par rapports aux points situés sur une même ligne.
[0115] Un motif de grille initiai peut être défini à partir d’un coin haut gauche de la grille, l'angle que forme cette dernière avec l’horizontale, l’espacement entre points et le nombre de points connus spécifié par une méthode propre à chaque support solide 2. La recherche des correspondances entre les points détectés et les points du motif de grille initial est ensuite initiée par les moyens de traitement d’image 12. Les correspondances trouvées servent alors au calcul d’une transformation géométrique (homographie) qui est appliquée à la grille théorique pour que celle-ci s’adapte d’avantage aux points du support solide 2 et ce- afin d’obtenir une grille théorique. La grille théorique s'adapte déjà à la plupart des points visibles mais certains doivent encore être optimisés tels que des points qui ne seraient pas bien alignés par rapport aux autres.
[0116] Optimisation locale des dots [0117] Pour que chaque dot soit centré sur un point de mesure, une optimisation locale de ia position de chaque point de la grille théorique est réalisée. Ceci permet d’obtenir une mesure fiable de points mal alignés par rapport aux autres. Les points mal alignés sont par exemple dus à un mauvais alignement des moyens de production des points sur le support solide 2. Le nombre d’itérations de l’optimisation locale de position est défini par un paramètre de nombre d’itérations d’optimisation locale de- position. Si ce dernier est nul, aucune optimisation n’est réalisée.
BE2017/5706 [0118] Pour chaque point théorique, une fenêtre d’analyse (de côté égal à deux fois le rayon externe de l'anneau de mesure du food (background) d’un dot en pixels balaye une zone d’intérêt définie autour du point. À chaque position de ia fenêtre, une mesure du ratio signal/background est calculée.
Celle-ci est définie comme la différence entre la moyenne des valeurs des pixels au sein d’un cercle de rayon en pixels de la zone de signal contenant le point défini au centre de la fenêtre, et la moyenne des pixels compris dans un anneau extérieur, entourant le cercle de rayon en pixels de la zone de signai contenant le point. Les paramètres de rayon interne de l’anneau de mesure du .1 u fond (background) d’un point en pixels et de rayon externe de l’anneau de mesure du background (fond) d’un point en pixels représentent respectivement le rayon interne et le rayon externe de cet anneau de mesure du background (fond). La position du dot est modifiée de telle sorte à correspondre à la position de la fenêtre d’analyse présentant ie meilleur ratio signal/baokground.
[0119] Mesure des dots [0120] À chaque point de mesure, une mesure du signal utile est réalisée â savoir l’intensité moyenne des pixels au sein d’un cercle de rayon égal au paramètre de rayon de mesure en pixels de la zone de signal contenant le point à mesurer. La mesure de l’intensité du background est également mesurée en 20 considérant l’intensité moyenne des pixels de l’image 40 à deux dimension au sein d’un anneau extérieur au point de rayon interne de l’anneau de mesure du background en pixels et de rayon externe de l’anneau de mesure du background en pixels.
[0121] Les mesures brutes des points sont obtenues en faisant la 25 différence entre la mesure du signal et du background et en multipliant cette différence par le nombre de pixels au sein du cercle de rayon de la zone de signal contenant le point en pixel.
[0122] Les Fig. 2a et Fig. 2b montrent par exemple un mode de réalisation préféré de l’invention comprenant un habillage étanche 16 ayant un 30 indice de protection IF554 selon la norme CEI 60529 consulté en septembre 2017. L’habillage est notamment étanche à l'eau et à la poussière. La partie de réception du support, solide 2 et comprenant remplacement 20 est notamment rendu étanche des parties optiques et électronique au moyen d’une vitre de
BE2017/5706 protection. Cette vitre de protection est par exemple représentée en Fig. 1a à Fig. 1d et Fig. 2a à Fig. 2b de sorte à décrire un angle non droit entre sa surface et un faisceau lumineux en provenance du support solide 2 en direction du détecteur optique 6, afin de limiter la réflexion de faisceaux lumineux émis 5 par le support solide 2. Afin de limiter réchauffement dans l’enceinte du dispositif de lecture 1, des moyens de refroidissement 15 permettent un transfert de chaleur généré par les composant électroniques et optiques vers l’extérieur de I enceinte étanche 16. Les moyens de refroidissement permettent une collection de la chaleur auprès des composants les plus émetteurs de 10 chaleur tels que des microprocesseurs et assure 1e transfert de cette chaleur vers l’extérieur de l’enceinte étanche. De préférence la chaleur est ensuite dissipée vers l'extérieur de façon passive à l’aide d’un radiateur en métal. De préférence le transfert entre les composants émetteurs de chaleur et le radiateur situé à l'extérieur de l’enceinte étanche est réalisé par un caloduc.
[8123] Des moyens de communication 8 sont de préférence inclus dans le lecteur optique 1 selon l'invention afin de pouvoir acquérir une méthode adaptée à la lecture d’un support solide. Les moyens de communication 8 permettent également la communication des résultats Issus des moyens de transmission. Les résultats peuvent être communiqués de façon qualitative ou 20 quantitative vers un dispositif d’affichage, d'impression, de messagerie électronique, ou d’enregistrement analogique ou digital. Les moyens de communication 8 permettent par exemple d’accéder à une méthode spécifique à chaque lot de support solide 2. Une base de donnée de méthode est par exemple accessible via un réseau de type internet ou local, à partir d’une 2 0 mémoire de type nc-n-volatile, à partir d’éléments imprimés de type code barre,
QR code ou date-matrix. Les éléments imprimés sont par exemple lus par des moyens de lecture optique adaptés et connus de l’homme du métier, [0124] Les figures 3A et 38 montrent une image 40 à doux dimensions acquise par le détecteur optique sur laquelle figure des points de référence 45 30 et des point d’intérêt 41. Les points d’intérêt correspondent aux emplacements sur lesquels les molécules de marquages se sont immobilisées. Chaque point correspond à un analyte à mesurer prédéterminé. Par exemple ies points d'intérêt sont alignés lors de l'acquisition de l’image 40 à deux dimensions, par
BE2017/5706 exempte ils sont alignés selon une même direction, par exemple ils sont répartis dans un espace à deux dimensions. Une image 40 à deux dimensions peut être recadrée par tes moyens de traitement d’image 12 en une image recadrée 42 telle que représentée en figure 3a ou 3b.
[0125] La Figure 4 montre une vue en trois dimension d’un exemple de réalisation du dispositif de lecture 1 de l’invention. Le dispositif 1 est doté d’une surface externe 16 de laquelle dépasse un dispositif de refroidissement 15 situé sur l’arrière du dispositif 1. Un emplacement 20 prenant ia forme d’un tiroir permet le positionnement d’un support solide amovible 2 dans le dispositif 1. Le 10 dispositif est équipé de moyen d’affichage permettant par exemple ia saisie de données grâce à un écran de type tactile. Un moyen de préhension est intégré dans le dispositif afin de garantir une mobilité optimale. Des moyens de connections sans-fil permettent au dispositif 1 une intégration dans tout environnement de travaii et dispose de batteries afin de bénéficier d’une 15 autonomie suffisante pour réaliser un nombre suffisant de lecture d échantillon sur une journée de travail par exemple.
[0126] En résumé, invention peut également être décrite comme suit.
Dispositif 1 de lecture optique d’un support solide 2 amovible pour la détection et/ou la quantification d’analytes présents dans un échantillon comprenant une 20 unité optique 7 pour analyser le support solide 2 selon deux dimensions ; des moyens de traitement d’image 12 pour analyser une image 40 à deux dimensions du support solide 2 selon deux dimensions ; des moyens de détermination 13 pour déterminer des informations d’analyte sur la base des données des moyens de traitement d'image 12 : et des moyens de transmission 25 configurés pour transmettre les informations d’analyte.
Claims (10)
1 c
1. Dispositif (1) de lecture optique d’un support solide (2) amovible pour la détection et/ou la quantification d’anaiytes présents dans un échantillon et comprenant :
- un emplacement (20) pour recevoir ledit support solide (2) ;
- une unité optique (7) pour analyser ledit support solide (2) et comprenant :
o une première source lumineuse (3) pour émettre selon une intensité d’émission et dans une première plage de longueur d’onde un premier faisceau lumineux vers ledit emplacement (20) ;
c un système d’imagerie (60) comprenant un détecteur optique} à deux dimensions (6) pour fournir une image à deux dimensions (40) d'une zone de visualisation, ladite zone de visualisation comprenant au moins une portion dudit emplacement (20) ;
o un filtre (10) pour filtrer une plage de longueur d’onde définie, et positionné entre l’emplacement (20) et ledit système d’imagerie (60) ;
· des moyens de traitement d’image (12) de ladite image à deux dimensions (40) pour :
o détecter des zones de références (45) de ladite image à deux dimensions (40), o déterminer un nombre fini de sous-ensembles (41) de ladite image à deux dimensions (40), o positionner dans ladite image à deux dimensions (40) chaque sous-ensemble (41 ) à une position prédéterminée par rapport, auxdltes zones de référence (45), o fournir des données relatives à des intensités lumineuses issues desdits sous-ensembles (41) ;
- des moyens de détermination (13) pour :
BE2017/5706 o calculer, pour chaque sous-ensemble (41), une intensité de sous-ensemble, et
- des moyens de transmission (19) configurés pour transmettre ladite intensité de sous-ensemble pour chaque sous-ensemble (41).
2 5 sous-ensembles (41) et de manière encore plus préférée à plus de quinze sous-ensembles (41 ).
2. Dispositif (1) selon la revendication précédente caractérisé en ce que ladite image à deux dimension (40) comprend des zones contrastées par rapport à une zone de fond, et en ce que, tes moyens de traitement d’image (12) de l’image à deux dimensions (40) 10 permettent en outre de :
- recadrer ladite image à deux dimensions (40) en une image recadrée (42), ladite Image recadrée (42) montrant une portion plus importante dudit emplacement (20) pour recevoir un support solide (2) que dans ladite image à deux dimensions (40) ;
15 - attribuer une surface définie pour chaque position à deux dimensions de sous-ensemble (41 ) dans ladite image recadrée (42) ;
effectuer une optimisation locale de position de chaque sousensemble (41) de sorte que ladite surface définie de chaque sousensemble (41) est positionnée de sorte à renvoyer une intensité 20 lumineuse maximale de chacune desdites zones contrastées.
3. Dispositif (1) selon l’une quelconque des revendications précédentes caractérisé en ce que ledit nombre fini de sous-ensembles (41) est supérieur ou égal à cinq sous-ensembles (41 ), de préférence, à plus de dix
4. Dispositif (1) selon l’une quelconque des revendications précédentes caractérisé en ce qu’il comprend en outre une deuxième source lumineuse
30 (4) configurée pour émettre un deuxième faisceau lumineux (40) dans une deuxième plage de longueur d’onde.
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5 axe longitudinal d'une largeur dudit système récupérateur.
29. Ensemble de diagnostic selon l'une quelconque des trois revendications précédentes caractérisé en ce que ledit système récupérateur (2) comprend au moins cinq, de préférence au moins dix, et plus préférentiellement au
5 26. Ensemble de diagnostic pour la lecture optique d’un système récupérateur comprenant :
ledit dispositif (1 ) selon l’une quelconque des revendications précédentes un moyen de diagnostic pour ia détection et/ou la quantification respective, simultanée et spécifique d'une pluralité d’analytes présents
10 dans un échantillon (E) comprenant au moins un mélange réactionnel et au moins un système récupérateur (2), ledit au moins un système récupérateur (2) étant sous la forme d’un support solide (2) auquel se trouvent fixés en des emplacements de récupération distincts et connus dans l'espace, des ligands compétiteurs et/ou des molécules biologiques 15 de reconnaissance, de manière à identifier par la localisation desdits emplacements de récupération sur ledit support, Iesdits analytes présents dans ledit échantillon, ledit moyen de diagnostic étant caractérisé en ce que ledit système récupérateur (2) comprend des emplacements de récupération qui sont 20 disposés selon un arrangement matriciel en deux dimensions qui est défini selon un système de coordonnées connues et spécifiques desdits ligands compétiteurs et/ou desdites molécules biologiques de reconnaissance fixés audits emplacements de récupération dudit système récupérateur (2).
27. Ensemble de diagnostic selon la revendication précédente caractérisé en oe que Iesdits emplacements de récupération sont disposés selon un arrangement matriciel en deux dimensions sous la forme de points présentant chacun un diamètre compris entre 20 μm à 2 mm, de préférence ,’b= compris entre 100 à 500 μm et encore plus préférentiellement compris entre
250 μm et 400 μm.
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28. Ensemble de diagnostic selon l’une quelconque des deux revendications précédentes, caractérisé en ce que ledit système de coordonnées présente une première coordonnée définie sur un axe longitudinal d’une longueur dudit système récupérateur et une deuxième coordonnées définie sur un
5. Dispositif (1) selon l’une quelconque dos revendications précédentes caractérisé en ce que ladite première plage de longueur est distincte de ladite deuxième plage de longueur d’onde.
5
6. Dispositif (1) selon l’une quelconque des revendications précédentes caractérisé en ce que ledit filtre (10) est un filtre passe double bande pour laisser passer deux plages de longueur d’onde définies dont une des deux plages est ladite première plage de longueur d'onde ou ladite deuxième plage de longueur d’onde.
.10
7. Dispositif (1) selon l’une quelconque des revendications précédentes caractérisé en ce que ladite information d’analyte est déterminée sur la base d’au moins deux intensités de sous-ensemble issues d'au moins deux sous-ensemble (41 ),
8. Dispositif (1) selon l’une quelconque des revendications précédentes caractérisé en ce que lesdits sous-ensembles (41) ont une forme arrondie et de préférence ont une forme de disque.
20
9. Dispositif (1) selon l’une quelconque des revendications précédentes caractérisé en ce que ladite information d’analyte est une information de type binaire.
10. Dispositif (1) selon l’une quelconque des revendications 1 à 8 caractérisé ? 5 en ce que ladite information d’analyte est une information proportionnelle à ladite intensité lumineuse mesurée.
11. Dispositif (1) selon l’une quelconque des revendications précédentes caractérisé en ce que ladite unité optique (7) comprend en outre :
30 o un capteur d’intensité lumineuse (5) pour mesurer l’intensité d’émission émise par ladite première source lumineuse (3) ;
o un moyen de rétrocontrôle (11) pour moduler ladite intensité d’émission de ladite première source lumineuse (3) en fonction
BE2017/5706 de l’intensité d’émission mesurée par ledit capteur d'intensité lumineuse (5) de sorte que ladite première source lumineuse (3) émette une intensité cible.
12. Dispositif (1) selon l'une quelconque des revendications précédentes caractérisé en ce qu'il comprend en outre :
- un dispositif d’identification pour identifier un support solide (2) à lire :
- des moyens de communications (8) pour obtenir une information relative à un support solide (2) à lire.
13. Dispositif (1) selon la revendication précédente caractérisé en ce que ladite intensité cible est définie sur la base de l’information relative audit support solide (2) à lire.
-X
14. Dispositif (1) selon l’une quelconque des deux revendications précédentes caractérisé en ce que lesdits moyens de détermination (13) sont configurés pour déterminer sur la base de ladite intensité de sous-ensemble et sur la base de l'information relative audit support solide- (2) ä lire, des informations d’analyte pour chaque sous-ensemble (41).
15. Dispositif (1) selon l’une quelconque des trois revendications précédentes caractérisé en ce que lesdits moyens de traitement d’image (12) sont configurés peur :
o déterminer, à partir d'une information relative audit support solide (2) à lire, un nombre fini de sous-ensembles (41) de ladite image à deux dimensions (40), o positionner dans ladite Image à deux dimensions (40) chaque sous-ensemble (41 ) â une position prédéterminée à partir de ladite information relative audit support solide (2) par rapport auxdites zones de référence (45).
BE2017/5706
16. Dispositif (1) selon l'une quelconque des revendications précédentes lorsqu’il dépend de la revendication 12 caractérisé en ce qu’il comprend en outre :
- des moyens de sélection (27) pour :
o sélectionner à partir d’une liste d’analytes prédéfinis, une sélection d’analytes à détecter et/ou à quantifier ;
en ce que les moyens de traitement d’image (12) sont configurés pour :
o déterminer ledit nombre fini de sous-ensemble (41) de ladite image (40) à deux dimensions à panir de l'information relative audit support solide (2) à lire, chaque sous-ensembte (41) correspondant à un analyte ;
en ce que les moyens de détermination (13) sont configurés pour :
o calculer ladite intensité de sous-ensemble (41) pour chaque sousensemble (41 ) correspondant à un analyte sélectionné dans ladite sélection d’analytes ;
o déterminer sur ia base de ladite intensité de sous-ensemble des informations d’analyte pour chaque sous-ensemble (41 ) correspondant à un analyte sélectionné dans ladite sélection d’analytes ;
et en ce que les moyens de transmission (19) sont configurés pour transmettre ladite information d’analyte pour chaque sous-ensemble (41) correspondant à un analyte sélectionné dans ladite sélection d’analytes.
17. Dispositif (1) selon la revendication précédente caractérisé en ce que ladite liste d’analytes prédéfinis est comprise dans ladite information relative â un support solide (2).
18. Dispositif (1) selon l’une quelconque des deux revendications précédentes caractérisé en ce- qu’il comprend en outre :
- un compteur de crédit (18). ledit compteur de crédit (18) étant incrémenté lors de ia sélection de chaque analyte à détecter et/ou à quantifier par les moyens de sélection (27).
BE2017/5706
BE2017/5706 •'s 'i
25. Dispositif (1) selon Tune quelconque des revendications précédentes caractérisé en ce que ledit dispositif d’identification du support solide (2) est un lecteur de data matrix, de code barre, ou de QR code.
10 moins quinze emplacements de récupération distincts destinés à la détection et/ou la quantification respective, simultanée et spécifique d’au moins cinq, de préférence d’au moins dix, plus préférentiellement, d’au moins quinze analytes de classes distinctes présents dans un échantillon et appartenant eu non à des familles d’analytes différentes, et au moins un 15 emplacement de récupération destiné à un contrôle et/ou un calibrateur.
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