WO2022149220A1 - たばこ香味液の製造方法、たばこ香味液、たばこ添加物、および香味吸引器 - Google Patents

たばこ香味液の製造方法、たばこ香味液、たばこ添加物、および香味吸引器 Download PDF

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tobacco
yeast
liquid
flavor
useful
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PCT/JP2021/000222
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亮祐 長瀬
勝媛 崔
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日本たばこ産業株式会社
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    • A24B15/167—Chemical features of tobacco products or tobacco substitutes of tobacco substitutes in liquid or vaporisable form, e.g. liquid compositions for electronic cigarettes

Definitions

  • the present invention relates to a method for producing a tobacco flavoring liquid, a tobacco flavoring liquid, a tobacco additive, and a flavor aspirator.
  • the leaves of tobacco plants are subjected to various processing processes such as a drying process at a farm, a long-term aging process at a raw material factory for one to several years, and a subsequent blending and cutting at a manufacturing factory. After that, it is used in the manufacture of flavor aspirators such as cigarettes.
  • the leaves of the tobacco plant become a fragrant tobacco material.
  • tobacco material is referred to as "leaf tobacco” to distinguish it from the leaves of tobacco plants.
  • the leaf tobacco itself may be used as a flavor source of the flavor aspirator, or a tobacco flavor component may be extracted from the leaf tobacco and the obtained tobacco extract may be used as a flavor source of the flavor aspirator.
  • Patent Document 1 discloses a method for preparing a scented reconstituted tobacco from tobacco particles, in which the tobacco particles are extracted with water to obtain an extract and a residue, and then obtained. The obtained extract is fermented with yeast to prepare a fermented liquid, a reconstituted tobacco is prepared from the obtained residue, and the fermented liquid is added to the reconstituted tobacco to prepare a scented reconstituted tobacco.
  • An object of the present invention is to provide a technique relating to a tobacco extract in which useful components such as flavor components are enhanced.
  • the present inventors have noted that when yeast is cultured in a tobacco extract to produce useful components in the yeast, most of the useful components remain in the yeast cells and are not sufficiently released into the tobacco extract. However, this point has been improved to complete the present invention.
  • Extracting the water-soluble component contained in the tobacco material from the tobacco material with an aqueous solvent to obtain a tobacco extract is obtained.
  • a yeast-containing culture medium by culturing yeast in the tobacco extract From the yeast contained in the yeast-containing culture solution, an elution solvent containing an organic solvent is used to elute the useful components contained in the cells of the yeast, and the useful components and the tobacco after culturing are extracted.
  • a method for producing a yeast flavoring liquid which comprises obtaining a tobacco flavoring liquid containing a liquid, is provided.
  • the tobacco flavoring liquid produced by the above-mentioned method is provided.
  • Tobacco flavoring liquid produced by the above method and Provided is a tobacco additive containing a tobacco residue obtained when obtaining a tobacco extract in the above-mentioned method.
  • a flavor aspirator containing the above-mentioned tobacco flavor liquid or the above-mentioned tobacco additive is provided.
  • FIG. 1 is a flowchart showing an example of a method for producing a tobacco flavoring liquid.
  • FIG. 2 is a flowchart showing another example of a method for producing a tobacco flavoring liquid.
  • FIG. 3 is a cross-sectional view showing an example of a combustion type flavor aspirator.
  • FIG. 4 is a perspective view showing an example of a heated flavor aspirator.
  • FIG. 5 is a diagram showing the internal structure of the tobacco stick.
  • FIG. 6 is a diagram showing the internal structure of the aerosol generator.
  • FIG. 7 is a microscope image showing the state of yeast in the elution step (S4) of the method of the first embodiment.
  • FIG. 8 is a graph showing the concentration of fatty acid in the tobacco flavoring liquid.
  • Tobacco flavoring liquid manufacturing method The method for manufacturing tobacco flavoring liquid is Extracting the water-soluble component contained in the tobacco material from the tobacco material with an aqueous solvent to obtain a tobacco extract is obtained.
  • a yeast-containing culture medium by culturing yeast in the tobacco extract.
  • an elution solvent containing an organic solvent is used to elute the useful components contained in the cells of the yeast, and the useful components and the tobacco after culturing are extracted.
  • tobacco extract with enhanced useful component since the useful component produced by yeast is eluted into the tobacco extract, a "tobacco extract with enhanced useful component" can be obtained.
  • tobacco extract with enhanced useful ingredients such as flavoring ingredients
  • tobacco flavoring liquid is referred to as "tobacco flavoring liquid”.
  • obtaining a tobacco flavoring liquid is The yeast-containing culture solution and an elution solvent containing an organic solvent are mixed, and from the yeast contained in the obtained mixture, useful components contained in the cells of the yeast are eluted into the liquid portion of the mixture.
  • the yeast can be removed from the useful component eluate to obtain a yeast-free useful component eluate.
  • each of the "useful ingredient eluate" containing yeast and the "yeast-free useful ingredient eluate" corresponds to the tobacco flavoring liquid.
  • the method according to the first embodiment is described in ⁇ 1-1. It will be described in detail in the column of 1st Embodiment>.
  • obtaining a tobacco flavoring liquid is Separation of the yeast-containing culture solution into the yeast and the tobacco extract,
  • the separated yeast is mixed with an elution solvent containing an organic solvent, and the useful component contained in the cells of the yeast is eluted from the yeast contained in the obtained mixture into the liquid portion of the mixture.
  • the yeast may be removed from the useful ingredient eluate to obtain a yeast-free useful ingredient eluate. This can be done by mixing the useful component eluate or the yeast-free useful component eluate with the separated tobacco extract to obtain a useful component-containing liquid.
  • the "useful component-containing liquid" prepared without going through the step of removing yeast from the useful component eluent and the "useful component-containing liquid” prepared through the step of removing yeast from the useful component eluent corresponds to a tobacco flavor liquid.
  • the method according to the second embodiment is described in ⁇ 1-2.
  • the second embodiment> will be described in detail.
  • the method for producing the tobacco flavoring liquid is (S1) Extracting the water-soluble component contained in the tobacco material from the tobacco material with an aqueous solvent to obtain a tobacco extract is obtained. (S2) Yeast is cultivated in the tobacco extract to obtain a yeast-containing culture broth. (S4) The yeast-containing culture solution is mixed with an elution solvent containing an organic solvent, and the useful component contained in the cells of the yeast is added to the liquid portion of the mixture from the yeast contained in the obtained mixture. To obtain a useful component eluate by eluting into (S5) If necessary, the yeast is removed from the useful component eluate to obtain a yeast-free useful component eluate.
  • FIG. 1 shows the method according to the first embodiment.
  • the yeast removal step (S5) may or may not be performed. That is, the "yeast-free useful component eluate" obtained in the yeast removal step (S5) may be used as the tobacco flavoring liquid, or the "useful component eluate” obtained in the elution step (S4) may be used. It may be used as a tobacco flavoring liquid in a state where yeast remains.
  • extraction step (S1) In the extraction step (S1), the water-soluble component contained in the tobacco material is extracted from the tobacco material with an aqueous solvent to obtain a tobacco extract. In the extraction step (S1), a tobacco extract is obtained and at the same time a tobacco residue is obtained (see FIG. 1).
  • Tobacco material can be tobacco chopped ready to be incorporated into tobacco products such as burnable or heated flavor aspirators.
  • tobacco chopped ready to be incorporated into tobacco products refers to the drying process at the farm, the subsequent long-term aging process at the raw material plant for one to several years, and the subsequent blending and stamping at the manufacturing plant. It refers to tobacco carvings that have undergone various processing processes and are ready to be incorporated into tobacco products.
  • Tobacco carving is a carved piece of leaf tobacco.
  • Tobacco chopping is a tobacco material that is processed into a reusable shape of deboned leaf chopping, mid-bone chopping, and recycled tobacco (that is, leaf debris, chopped debris, mid-bone debris, fine powder, etc. generated in the work process of the factory). ), Or a mixture of these. Tobacco chopped may be crushed to increase extraction efficiency and the resulting crushed material may be used for extraction.
  • tobacco chopping may be a single variety or a mixture of different varieties.
  • Water or hydrous ethanol can be used as the aqueous solvent.
  • hydrous ethanol for example, a mixture of ethanol and water in a volume ratio of 1: 1 can be used.
  • the aqueous solvent is generally water, preferably water at room temperature (eg, about 20 ° C.) to 70 ° C.
  • the aqueous solvent can be used, for example, in an amount of 500 to 5000% by mass based on the tobacco material.
  • Extraction is performed, for example, by immersing the tobacco material in warm water at 40-60 ° C. for 30-180 minutes, or shaking the tobacco material in warm water at 40-60 ° C. for 30-180 minutes (eg, 200 rpm). be able to.
  • the extraction may be performed by repeating the extraction operation a plurality of times. Specifically, the water-soluble component contained in the tobacco material is extracted from the tobacco material with an aqueous solvent, and then the obtained tobacco residue is put into a new aqueous solvent to perform a second extraction operation, and further, if necessary. Then, the extraction may be performed by repeating the extraction operation with a new aqueous solvent.
  • the tobacco extract contains a water-soluble component contained in the tobacco material.
  • water-soluble components contained in tobacco materials for example, components that are nutrient sources for yeast (for example, sugars, amino acids, proteins, nutrient salts) and components that contribute to tobacco flavor (for example, organic acids, foliar resins). , Terpenoids, polyphenols) and the like.
  • the tobacco residue and the tobacco extract are separated, and the tobacco extract is used as a raw material for obtaining a tobacco flavor liquid.
  • the tobacco residue can be mixed with the finally obtained tobacco flavor liquid, and the obtained mixture can be appropriately processed and used to prepare a tobacco filler.
  • the tobacco residue may be mixed with the finally obtained tobacco flavor liquid and used to prepare a tobacco molded product such as a sheet of tobacco from the obtained mixture.
  • the tobacco residue may be mixed with the finally obtained tobacco flavor liquor and used to dry and grind the resulting mixture to produce tobacco powder.
  • yeast any kind of yeast can be used as long as it can produce useful components when cultured in a tobacco extract.
  • the "useful ingredient” refers to an ingredient useful for the finally obtained tobacco flavoring liquid.
  • the useful component may be, for example, a component that contributes to the flavor of the tobacco flavor liquid (hereinafter referred to as a flavor contributing component) or a component that colors the tobacco flavor liquid (hereinafter referred to as a coloring component). , It may be a component that prevents the decay and fermentation of the tobacco flavor liquid (hereinafter, referred to as an antiseptic component).
  • the useful ingredient is preferably a flavor-contributing ingredient.
  • the "flavor-contribution component” may be a flavor component that emits a flavor, or may be a precursor that is converted into a flavor component when heated or burned by a flavor aspirator.
  • Examples of the flavor-contribution component include carotenoids, fatty acids, triglycerides (that is, glycerin esters of fatty acids), acetates, fatty acid esters, organic acids, higher alcohols (for example, alcohols having 8 to 22 carbon atoms) and the like. ..
  • Examples of the coloring component include carotenoids.
  • Examples of the preservative component include lactic acid, fatty acid glycosides, benzoic acid and the like.
  • yeast known to produce the above-mentioned useful ingredients can be used in the method of the present invention.
  • yeasts that produce fatty acids include yeasts of the genus Yarrowia, such as Yarrowia alimentaria, Yarrowia bubula, Yarrowia deformans, Yarrowia dibulgata, Yarrowia galli, Yarrowia hollandica, Yarrowia keelieuxsis, Yarrowia lipolytica, Yarrowia lipolytica, Yarrowia osloensis, Yarrowia par.
  • yeasts of the genus Yarrowia such as Yarrowia alimentaria, Yarrowia bubula, Yarrowia deformans, Yarrowia dibulgata, Yarrowia galli, Yarrowia hollandica, Yarrowia keelieuxsis, Yarrowia lipolytica, Yarrowia lipolytica, Yarrowia osloensis, Yarrowi
  • Yeasts that produce acetic acid esters, fatty acid esters, or higher alcohols include yeasts of the genus Saccharomyces, such as Saccharomyces cerevisiae, Saccharomyces paradoxus, Saccharomyces bayanus, Saccharomyces uvarum, Saccharomyces arboricola; fabianii, Cyberlindnera suaveolens, Cyberlindneraamericana, Cyberlindnera xylosilytyca; yeasts of the genus Wickerhamomyces, such as Wickerhamomyces anomalus, Wickerhamomyces ciferri, Wickerhamomyces canadensis.
  • yeasts of the genus Saccharomyces such as Saccharomyces cerevisiae, Saccharomyces paradoxus, Saccharomyces bayanus, Saccharomyces uvarum, Saccharomyces arboricola; fabianii, Cyberlindnera suaveolens, Cyberlind
  • yeast may be cultivated in a tobacco extract, or two or more types of yeast may be cultivated in a tobacco extract.
  • the yeast may be a genetically modified yeast that has been genetically modified to increase the production of useful components.
  • yeast culture conditions are not particularly limited, and conditions suitable for the growth of the yeast to be used and the production of useful components can be appropriately selected.
  • yeast Prior to culturing, yeast can be added to the tobacco extract at a concentration of, for example, 10-108 cells / mL. Culturing can be carried out, for example, at 10-40 ° C. for 5-168 hours.
  • the tobacco extract contains a component that is a nutrient source for yeast and a component that is a raw material for useful components, and can provide an environment suitable for yeast growth and production of useful components. Therefore, it is not necessary to add additional components to the tobacco extract. However, the method of the present invention does not preclude the addition of additional ingredients to the tobacco extract.
  • yeast-containing culture medium The mixture of yeast and tobacco extract obtained after culturing yeast in a tobacco extract is referred to as "yeast-containing culture medium" in the present specification.
  • yeast-containing culture broth the amount of useful components produced by yeast is increased as compared with the "mixture of yeast and tobacco extract before culturing".
  • the yeast-containing culture broth has a reduced amount of substances consumed by the yeast for growth and production of useful components as compared with the "mixture of yeast and tobacco extract before culturing".
  • the mixture containing yeast and the elution solvent obtained after the elution step is completed is referred to as a "useful component eluate".
  • an elution solvent containing an organic solvent can be used as the elution solvent.
  • the elution solvent may be the organic solvent itself or a mixture of the organic solvent and water.
  • the elution solvent is preferably an elution solvent containing an organic solvent miscible with water, and more preferably an elution solvent containing an alcohol miscible with water. That is, the preferred elution solvent is an alcohol miscible with water or a hydrous alcohol thereof.
  • the organic solvent contained in the elution solvent is preferably an organic solvent having an SP value of 10 to 14.5, and more preferably an alcohol having an SP value of 10 to 14.5.
  • Examples of the organic solvent contained in the elution solvent include ethanol, isopropanol, methanol, or butanol.
  • the organic solvent contained in the elution solvent is more preferably ethanol or isopropanol, and most preferably ethanol. That is, the most preferable elution solvent is ethanol or hydrous ethanol.
  • the SP value refers to the value of the Hildebrand solubility parameter.
  • the SP value is known in various solvents, for example, the SP value of ethanol is 12.7, the SP value of isopropanol is 11.5, the SP value of methanol is 14.5, and the SP value of butanol is 11.4. be.
  • organic solvent contained in the elution solvent one kind may be used, or two or more kinds may be mixed and used.
  • the elution solvent is such that the concentration of the organic solvent in the mixed solution of the yeast-containing culture solution and the elution solvent is, for example, 50% by volume or more, preferably 50 to 95% by volume, and more preferably 60 to 95% by volume. It can be added to a yeast-containing culture solution. The concentration of the organic solvent can be appropriately adjusted in consideration of the elution efficiency of useful components.
  • the term "mixed solution of yeast-containing culture solution and elution solvent” refers to a mixed solution of a liquid portion of a yeast-containing culture solution (that is, a tobacco extract after culturing) and an elution solvent. Refers to and does not contain yeast.
  • the elution solvent can be added to the yeast-containing culture solution in an amount of, for example, 100 to 900% by volume.
  • the amount of the elution solvent added can be appropriately adjusted in consideration of the elution efficiency of useful components.
  • the concentration of ethanol in the mixed solution of the yeast-containing culture solution and the elution solvent is, for example, 50% by volume or more. It can be added to the yeast-containing culture solution in an amount preferably 50 to 90% by volume, more preferably 60 to 90% by volume, still more preferably 60 to 80% by volume, and most preferably 70% by volume.
  • the concentration of ethanol in the mixed solution of the yeast-containing culture solution and the elution solvent is, for example, 50% by volume or more.
  • the amount of the solvent-containing culture solution is preferably 50 to 90% by volume, more preferably 60 to 90% by volume, further preferably 70 to 90% by volume, further preferably 80 to 90% by volume, and most preferably 90% by volume. Can be added to.
  • the yeast-containing culture solution and the elution solvent are mixed, and then the useful components contained in the yeast cells are eluted from the yeast contained in the obtained mixture into the liquid portion of the mixture.
  • Elution can be carried out by stirring the mixture of the yeast-containing culture solution and the elution solvent over a predetermined period while heating if necessary.
  • elution is preferably performed while stirring the mixture, but elution may be performed while the mixture is allowed to stand.
  • the stirring speed can be, for example, 60-300 rpm.
  • the elution may be carried out while heating, and when the effect of promoting elution by heating is not observed, the elution is carried out at room temperature (for example, from 15 to 15) without heating. It may be carried out at 25 ° C.).
  • the elution temperature and elution time can be appropriately adjusted in consideration of the elution efficiency of useful components.
  • the elution can be carried out by stirring the mixture at room temperature (for example, 15 to 25 ° C.) for 5 to 60 minutes. ..
  • the elution can be carried out by stirring the mixture at 80-95 ° C. for 15-60 minutes. ..
  • yeast removal step (S5) yeast can be removed from the useful component eluate obtained in the elution step (S4) to obtain a yeast-free useful component eluate (see FIG. 1). As described above, the yeast removal step (S5) may or may not be performed.
  • Yeast can be removed by general methods such as pressure filtration, vacuum filtration, natural filtration, centrifugation, and decantation.
  • pressure filtration vacuum filtration
  • natural filtration natural filtration
  • centrifugation centrifugation
  • decantation decantation
  • the yeast removal step (S5) When the yeast removal step (S5) is performed, the obtained "yeast-free useful ingredient eluate" corresponds to the tobacco flavoring liquid. On the other hand, when the yeast removing step (S5) was not performed, the “useful component eluate” corresponds to the tobacco flavoring liquid, and yeast remains.
  • the above method may further include removing the organic solvent from the tobacco flavoring liquid after obtaining the tobacco flavoring liquid.
  • the organic solvent can be removed by a general method such as vacuum concentration, normal pressure concentration, and spray drying.
  • the method of the first embodiment is excellent in that yeast can be easily removed in the yeast removal step (S5) because yeast is easily precipitated in the elution step (S4).
  • This excellent effect is demonstrated in Example 1 below.
  • this excellent effect will be specifically described. That is, when an elution solvent containing an organic solvent is added to the yeast-containing culture solution in the elution step (S4), the polarity of the liquid portion of the yeast-containing culture solution (that is, the tobacco extract after culturing) changes, and the tobacco extract changes.
  • the water-soluble protein that had been dissolved in the solvent becomes insoluble.
  • the presence of the insolubilized protein promotes the aggregation of microorganisms contained in the tobacco extract (such as added yeast and yeast and mold originally contained in the tobacco extract).
  • This aggregation phenomenon occurs even under the condition that only the cells of the microorganism are present, but it occurs more prominently under the condition where the microorganism coexists with the protein. Therefore, in the method of the first embodiment, the aggregated microbial and protein complex can be easily precipitated by increasing the mass to form pellets.
  • the added yeast can easily form pellets, and by removing the pellets, yeast can be easily removed from the tobacco extract. Can be removed.
  • yeast is cultured in a tobacco extract, and the obtained yeast-containing culture solution is mixed with an elution solvent to elute useful components, but yeast is separated from the yeast-containing culture solution and separated. It is also possible to elute useful components by mixing yeast with an elution solvent.
  • the method for producing the tobacco flavoring liquid is (S1) Extracting the water-soluble component contained in the tobacco material from the tobacco material with an aqueous solvent to obtain a tobacco extract is obtained. (S2) Yeast is cultivated in the tobacco extract to obtain a yeast-containing culture broth. (S3) Separation of the yeast-containing culture solution into the yeast and the tobacco extract, and (S4) The separated yeast and an elution solvent containing an organic solvent are mixed, and from the yeast contained in the obtained mixture, a useful component contained in the cells of the yeast is added to the liquid portion of the mixture.
  • the present invention comprises mixing the useful ingredient eluate or the yeast-free useful ingredient eluate with the separated tobacco extract to obtain a useful ingredient-containing liquid.
  • FIG. 2 shows the method according to the second embodiment.
  • the method according to the second embodiment will be described in the order of the steps (S1) to (S6) with reference to FIG.
  • the description of the parts that overlap with the method according to the first embodiment will be omitted, and the parts different from the method according to the first embodiment will be mainly described.
  • the yeast removal step (S5) may or may not be performed. That is, when the yeast removal step (S5) is performed, the "yeast-free useful component eluent" and the “separated tobacco extract” are mixed in the mixing step (S6) to obtain “yeast-free". Since a "useful ingredient-containing liquid” is obtained, such a "yeast-free useful ingredient-containing liquid” can be used as a tobacco flavor liquid. On the other hand, when the yeast removal step (S5) was not performed, the “useful component eluent” and the “separated tobacco extract” were mixed in the mixing step (S6), and the yeast remained. Since the "useful ingredient-containing liquid” can be obtained in the state, such "useful ingredient-containing liquid” can be used as a yeast flavoring liquid.
  • extraction step (S1) In the extraction step (S1), the water-soluble component contained in the tobacco material is extracted from the tobacco material with an aqueous solvent to obtain a tobacco extract. In the extraction step (S1), a tobacco extract is obtained and at the same time a tobacco residue is obtained (see FIG. 2).
  • the extraction step (S1) can be carried out in the same manner as the extraction step (S1) described in the method of the first embodiment.
  • yeast is cultivated in the tobacco extract obtained in the extraction step (S1) to obtain a yeast-containing culture broth (see FIG. 2).
  • the culturing step (S2) can be carried out in the same manner as the culturing step (S2) described in the method of the first embodiment.
  • the separation step (S3) When the culture step (S2) is completed, the yeast-containing culture solution is separated into yeast and tobacco extract (see FIG. 2).
  • the separation step (S3) can be performed by a general method such as pressure filtration, vacuum filtration, natural filtration, centrifugation, and decantation.
  • the elution solvent the same elution solvent as that described in the method of the first embodiment can be used.
  • the elution solvent is mixed with the yeast-containing culture solution (liquid).
  • the elution solvent is mixed with yeast (solid). Therefore, in the second embodiment, the concentration of the organic solvent in the elution solvent is maintained as it is without being diluted even after the elution solvent is mixed with yeast.
  • the concentration of the organic solvent in the elution solvent is, for example, 50% by volume or more, preferably 50 to 100% by volume, and more preferably 60 to 100% by volume.
  • the concentration of the organic solvent in the mixture of yeast and the elution solvent is also, for example, 50% by volume or more, preferably 50 to 100% by volume, and more preferably 60 to 100% by volume.
  • the concentration of the organic solvent can be appropriately adjusted in consideration of the elution efficiency of useful components.
  • the elution solvent can be added to the separated yeast in an amount of, for example, 35 to 100% by volume with respect to the amount of the yeast-containing culture solution from which the yeast is derived.
  • the amount of the elution solvent added can be appropriately adjusted in consideration of the elution efficiency of useful components.
  • the concentration of ethanol in the elution solvent is, for example, 50.
  • concentration of ethanol in the elution solvent is, for example, 50.
  • volume or more preferably 50 to 100% by volume, more preferably 60 to 90% by volume, still more preferably 60 to 80% by volume, and most preferably 70% by volume.
  • the concentration of ethanol in the elution solvent is, for example, 50.
  • concentration of ethanol in the elution solvent is, for example, 50.
  • volume or more preferably 50 to 100% by volume, more preferably 60 to 100% by volume, still more preferably 70 to 100% by volume, still more preferably 80 to 100% by volume, and most preferably 90 to 100% by volume.
  • yeast removal step (S5) yeast can be removed from the useful component eluate obtained in the elution step (S4) to obtain a yeast-free useful component eluate (see FIG. 2).
  • the yeast removal step (S5) may or may not be performed.
  • the yeast removing step (S5) can be carried out in the same manner as the yeast removing step (S5) described in the method of the first embodiment.
  • yeast-free useful component eluent obtained in the yeast removal step (S5) and the yeast extract separated in the separation step (S3) are mixed to be yeast-free.
  • the obtained "yeast-free useful ingredient-containing liquid" corresponds to a tobacco flavoring liquid.
  • the yeast removal step (S5) when the yeast removal step (S5) was not performed, the useful component eluate obtained in the elution step (S4) and the tobacco extract separated in the separation step (S3) were mixed to contain useful components. Get the liquid.
  • the obtained "useful ingredient-containing liquid" corresponds to the tobacco flavor liquid, and yeast remains.
  • the above-mentioned method may further include removing the organic solvent from the tobacco flavoring liquid after obtaining the tobacco flavoring liquid, as in the method of the first embodiment.
  • the method of the present invention includes a step of eluting useful components contained in yeast cells into a tobacco extract, the finally obtained tobacco flavor liquid can contain a large amount of useful components.
  • the method of the present invention is a simple method because useful components contained in the yeast cells can be eluted without disrupting the yeast cells.
  • Tobacco flavor liquid ⁇ 2. Tobacco flavor liquid> According to another aspect, the tobacco flavoring liquid produced by the above-mentioned "method for producing a tobacco flavoring liquid" is provided.
  • the tobacco flavoring liquid may be any of the following: (I) "Useful component eluate” obtained in the elution step (S4) of the method of the first embodiment; (Ii) "Yeast-free useful component eluate” obtained in the yeast removal step (S5) of the method of the first embodiment; (Iii) A "useful ingredient-containing liquid” obtained when the mixing step (S6) is performed without performing the yeast removal step (S5) by the method of the second embodiment; and (iv) the method of the second embodiment. A "yeast-free useful ingredient-containing liquid” obtained when the mixing step (S6) is performed after the yeast removal step (S5) is performed.
  • the tobacco flavor liquid produced by the above-mentioned "method for producing a tobacco flavor liquid" includes the above four types of products as specific examples.
  • the tobacco flavoring liquid is produced by the above-mentioned "method for producing a tobacco flavoring liquid"
  • it can contain a large amount of useful ingredients. Therefore, when the tobacco flavoring liquid is incorporated into the flavor aspirator, the effect of the useful component can be remarkably exhibited in the flavor aspirator.
  • the useful ingredient is a flavor-contribution ingredient
  • the tobacco flavoring liquid can contain a large amount of flavor-contribution ingredient, and therefore, when incorporated into a tobacco product such as a flavor aspirator, the enhanced flavor is provided to the user. Can be done.
  • the tobacco flavor liquid produced by the above-mentioned "method for producing a tobacco flavor liquid" can be incorporated into a tobacco product such as a flavor aspirator according to a known technique.
  • a tobacco product such as a flavor aspirator according to a known technique.
  • An example of using the tobacco flavoring liquid will be described below.
  • the tobacco flavor liquid can be used by adding it to a tobacco material (for example, deboned leaves or leaf tobacco) and drying the obtained mixture.
  • a tobacco material for example, deboned leaves or leaf tobacco
  • the tobacco flavor liquid is added to the tobacco residue obtained in the above-mentioned extraction step (S1), and a tobacco molded product such as a sheet tobacco or tobacco granule is prepared from the obtained mixture, and the tobacco molded product is used as a tobacco product. It can be used as a tobacco flavor source.
  • the tobacco flavor liquid is added to the tobacco residue obtained in the above-mentioned extraction step (S1), the obtained mixture is dried and pulverized to prepare a tobacco powder, and the tobacco powder is used as a tobacco material (for example, deboning). It can be used by adding it to leaves and tobacco.
  • the tobacco flavor liquid is added to the tobacco residue obtained in the above-mentioned extraction step (S1), the obtained mixture is dried and pulverized to prepare a tobacco powder, and the tobacco powder is suspended in water to produce a tobacco slurry.
  • a tobacco material eg, deboned leaves or leaf tobacco.
  • the tobacco flavor liquid can be encapsulated according to a known technique, and the obtained flavor capsule can be incorporated into the filter portion of the tobacco product.
  • the tobacco flavor liquid may be used in combination with the tobacco residue obtained in the above-mentioned extraction step (S1). Therefore, according to another aspect Tobacco flavoring liquid produced by the above-mentioned "method for producing tobacco flavoring liquid” and Provided is a tobacco additive containing a tobacco residue obtained when a tobacco extract is obtained in the above-mentioned "method for producing a tobacco flavor liquid”.
  • the tobacco additive may be a product obtained by drying a mixture of the tobacco flavor liquid and the tobacco residue obtained in the extraction step (S1). This product can be used as a tobacco flavor source for tobacco products.
  • the tobacco additive is a tobacco molded product obtained by molding a mixture of a tobacco flavor liquid and a tobacco residue obtained in the extraction step (S1) into a specific shape such as a sheet shape or a granule shape. You may.
  • the tobacco molded product can be used as a tobacco flavor source for tobacco products.
  • the tobacco additive may be a tobacco powder obtained by drying a mixture of the tobacco flavor liquid and the tobacco residue obtained in the extraction step (S1) and pulverizing the mixture into powder.
  • Tobacco powder can be added to a tobacco material (for example, deboned leaves or leaf tobacco) to enhance the flavor of the tobacco material.
  • the tobacco additive is obtained by drying a mixture of the tobacco flavor liquid and the tobacco residue obtained in the extraction step (S1), pulverizing it into a powder, and suspending the obtained powder in water. It may be a tobacco slurry. By adding the tobacco slurry to the tobacco material (for example, deboned leaves and leaf tobacco), the flavor of the tobacco material can be enhanced.
  • Tobacco additives may contain additives such as binders, pH regulators, preservatives, and antioxidants, if necessary.
  • Flavor aspirator The above-mentioned "tobacco flavoring liquid” or the above-mentioned “tobacco additive” can be incorporated into any tobacco product.
  • the above-mentioned "tobacco flavor liquid” or the above-mentioned “tobacco additive” can be incorporated into a flavor aspirator such as a combustion type flavor aspirator or a heated flavor aspirator. That is, according to another aspect, a flavor aspirator containing the above-mentioned "tobacco flavor liquid” or the above-mentioned “tobacco additive” is provided.
  • tobacco flavor liquid or the above-mentioned “tobacco additive” can be incorporated into any position of the tobacco product as long as the user can enjoy the enhanced flavor when the tobacco product is used.
  • combustion-type flavor aspirators examples include cigarettes, pipes, pipes, cigars, or cigarillos.
  • the combustion type flavor aspirator 1 shown in FIG. 3 is A tobacco rod 2 including a tobacco filler 2a and a tobacco wrapping paper 2b that wraps around the tobacco filler 2a.
  • a filter 3 including a filter medium 3a and a plug wrapper 3b wound around the filter medium 3a, It includes a tobacco rod 2 and a chip paper 4 wound on the filter 3 so as to connect the tobacco rod 2 and the filter 3.
  • the tobacco rod 2 contains a tobacco filler 2a such as a tobacco chopped or a tobacco molded body.
  • tobacco rods can have, for example, a diameter of 5-10 mm and a length of 40-80 mm, similar to a regular cigarette.
  • the filter 3 is a filter composed of a single filter medium 3a, a so-called plain filter.
  • the filter medium 3a can be made of a filter medium such as acetate tow, like a normal cigarette.
  • the filter 3 has about the same diameter as the tobacco rod 2 and can be, for example, 15-40 mm in length, similar to a normal cigarette.
  • the plug wrapper 3b can have a thickness of 10 to 100 ⁇ m, and it may or may not be breathable, but it is common to use breathable paper.
  • the chip paper 4 is adhered with an adhesive so as to cover the entire plug wrapper 3b and a part of the tobacco wrapping paper 2b.
  • the chip paper 4 may have, for example, an axial length (width) of the tobacco rod of 20 to 50 mm and a thickness of 10 to 100 ⁇ m. Similar to a normal cigarette, the chip paper 4 may be provided with a large number of small holes (ventilation holes) for ventilation in a row, a plurality of rows, or irregularly along the circumferential direction of the cigarette.
  • the above-mentioned "tobacco flavor liquid” and the above-mentioned “tobacco additive” can be incorporated into, for example, a tobacco filler 2a or a filter medium 3a.
  • a carbon heat source type aspirator that heats the tobacco filler with the combustion heat of the carbon heat source (see, for example, WO2006 / 073065);
  • a liquid atomizer that generates and sucks the flavor derived from the tobacco filler together with the aerosol (see, eg, WO2015 / 046385). And so on.
  • FIG. 4 is a perspective view showing an example of a heated flavor aspirator.
  • FIG. 5 is a diagram showing the internal structure of the tobacco stick.
  • FIG. 6 is a diagram showing the internal structure of the aerosol generator.
  • the heated flavor aspirator 100 is A tobacco stick 110 containing a tobacco filler and an aerosol source, An aerosol generator 120 to which the tobacco stick 110 is detachably attached, the aerosol generator 120 which heats the tobacco stick 110 to generate an aerosol from an aerosol source and releases a flavor component from a tobacco filler by the action of the aerosol. And have.
  • the tobacco stick 110 is a replaceable cartridge and has a columnar shape extending along the longitudinal direction.
  • the tobacco stick 110 is configured to generate an aerosol and a flavor component by being heated while being inserted into the aerosol generator 120.
  • the tobacco stick 110 forms a base material portion 11A including the filling material 111 and the first rolling paper 112 for winding the filling material 111, and an end portion opposite to the base material portion 11A. It has a mouthpiece 11B. The base material portion 11A and the mouthpiece portion 11B are connected by the second roll paper 113.
  • the mouthpiece 11B has a paper tube portion 114, a filter portion 115, and a hollow segment portion 116 arranged between the paper tube portion 114 and the filter portion 115.
  • the paper tube portion 114 is a paper tube formed by winding paper in a cylindrical shape, and the inside is hollow.
  • the filter portion 115 includes a filter medium such as acetate tow.
  • the hollow segment portion 116 includes a packed bed having one or more hollow channels.
  • the filter medium of the filter portion 115 and the packed layer of the hollow segment portion 116 are connected by covering with a plug wrapper 117. Since the packed bed is composed of fibers and the packed density of the fibers is high, air and aerosol flow only through the hollow channels during suction, and hardly flow inside the packed bed.
  • the tobacco stick 110 when it is desired to reduce the decrease due to the filtration of the aerosol component in the filter portion 115, it is effective to shorten the length of the filter portion 115 and replace it with the hollow segment portion 116 in order to increase the delivery amount of the aerosol. Is.
  • the mouthpiece 11B is composed of three segments, but the mouthpiece 11B may be composed of one or two segments, or may be composed of four or more segments.
  • the hollow segment portion 116 may be omitted, and the paper tube portion 114 and the filter portion 115 may be arranged adjacent to each other to form the mouthpiece portion 11B.
  • the length of the tobacco stick 110 in the longitudinal direction is preferably 40 to 90 mm, more preferably 50 to 75 mm, and even more preferably 50 to 60 mm.
  • the circumference of the tobacco stick 110 is preferably 15 to 25 mm, more preferably 17 to 24 mm, and even more preferably 20 to 23 mm.
  • the length of the base material portion 11A is 20 mm
  • the length of the paper tube portion 114 is 20 mm
  • the length of the hollow segment portion 116 is 8 mm
  • the length of the filter portion 115 is 7 mm.
  • the lengths of these individual segments can be appropriately changed according to manufacturing aptitude, required quality, and the like.
  • Filler 111 contains a tobacco filler and an aerosol source.
  • the aerosol source is heated to a predetermined temperature to generate an aerosol.
  • Aerosol sources include, for example, glycerin, propylene glycol, triacetin, 1,3-butanediol, and mixtures thereof.
  • the content of the aerosol source in the filler 111 is not particularly limited, and is usually 5% by mass or more, preferably 10% by mass or more, from the viewpoint of generating a sufficient amount of aerosol and imparting a good flavor and taste. It is usually 50% by mass or less, preferably 20% by mass or less.
  • the tobacco filler has, for example, the form of tobacco chopped or the form of a tobacco molded product. If the tobacco filler has a tobacco chopped form, it may have a tobacco chopped form obtained by chopping leaf tobacco (ie, aged tobacco leaves) to a width of, for example, 0.8-1.2 mm. good. Alternatively, if the tobacco filler has the form of a sheet tobacco, it may have the form of an elongated sheet tobacco obtained by chopping the sheet tobacco into, for example, a width of 0.8 to 1.2 mm. Alternatively, it may have the form of a corrugated sheet tobacco obtained by gathering the sheet tobacco without chopping it.
  • the content of the filler 111 in the tobacco stick 110 is, for example, 200 to 400 mg and preferably 250 to 320 mg when the base material portion 11A has a circumference of 22 mm and a length of 20 mm.
  • the water content of the filler 111 is, for example, 8 to 18% by mass, preferably 10 to 16% by mass. With such a water content, the occurrence of winding stains is suppressed, and the winding suitability of the base material portion 11A during manufacturing is improved.
  • the first roll paper 112, the second roll paper 113, and the plug wrapper 117 can be the same as the cigarette wrapping paper, the chip paper, and the plug wrapper used in the cigarette, respectively.
  • the above-mentioned "tobacco flavoring liquid” and the above-mentioned “tobacco additive” can be incorporated into, for example, the filler 111 or the filter medium of the filter unit 115.
  • the aerosol generator 120 has an insertion hole 130 into which the tobacco stick 110 can be inserted. That is, the aerosol generator 120 has an inner tubular member 132 that constitutes the insertion hole 130.
  • the inner cylinder member 132 may be made of a heat conductive member such as aluminum or stainless steel (SUS).
  • the aerosol generator 120 may have a lid portion 140 that closes the insertion hole 130.
  • the lid portion 140 is configured to be slidable between a state in which the insertion hole 130 is closed and a state in which the insertion hole 130 is exposed (see FIG. 4).
  • the aerosol generator 120 may have an air flow path 160 that communicates with the insertion hole 130.
  • One end of the air flow path 160 is connected to the insertion hole 130, and the other end of the air flow path 160 communicates with the outside (outside air) of the aerosol generation device 120 at a place different from the insertion hole 130.
  • the aerosol generator 120 may have a lid 170 that covers the end of the air flow path 160 on the side communicating with the outside air.
  • the lid portion 170 may be in a state of covering the end portion of the air flow path 160 on the side communicating with the outside air, or may be in a state of exposing the air flow path 160.
  • the lid portion 170 does not airtightly block the air flow path 160 even when it covers the air flow path 160. That is, even when the lid portion 170 covers the air flow path 160, the outside air can flow into the air flow path 160 through the vicinity of the lid portion 170.
  • the user With the tobacco stick 110 inserted in the aerosol generator 120, the user holds one end of the tobacco stick 110, specifically, the mouthpiece 11B shown in FIG. 5, and performs a suction operation.
  • the outside air flows into the air flow path 160 by the suction operation of the user.
  • the air flowing into the air flow path 160 is guided into the user's oral cavity through the tobacco stick 110 in the insertion hole 130.
  • the aerosol generator 120 may have a temperature sensor inside the air flow path 160 or on the outer surface of the wall portion constituting the air flow path 160.
  • the temperature sensor may be, for example, a thermistor, a thermoelectric pair, or the like.
  • the internal temperature of the air flow path 160 or the air flow path 160 is configured by the influence of the air flowing in the air flow path 160 from the lid 170 side toward the heater 30 side.
  • the temperature of the wall is lowered.
  • the temperature sensor can detect the suction operation of the user by measuring this temperature drop.
  • the aerosol generator 120 has a battery 10, a control unit 20, and a heater 30.
  • the battery 10 stores the electric power used in the aerosol generator 120.
  • the battery 10 may be a rechargeable secondary battery.
  • the battery 10 may be, for example, a lithium ion battery.
  • the heater 30 may be provided around the inner cylinder member 132.
  • the space for accommodating the heater 30 and the space for accommodating the battery 10 may be separated from each other by the partition wall 180. As a result, it is possible to prevent the air heated by the heater 30 from flowing into the space accommodating the battery 10. Therefore, it is possible to suppress the temperature rise of the battery 10.
  • the heater 30 preferably has a tubular shape capable of heating the outer periphery of the columnar tobacco stick 110.
  • the heater 30 may be, for example, a film heater.
  • the film heater may have a pair of film-like substrates and a resistance heating element sandwiched between the pair of substrates.
  • the film-like substrate is preferably made of a material having excellent heat resistance and electrical insulation, and is typically made of polyimide.
  • the resistance heating element is preferably made of one or more metal materials such as copper, nickel alloys, chromium alloys, stainless steels, platinum rhodium and the like, and may be formed of, for example, a stainless steel substrate. Further, the resistance heating element may be copper-plated at the connection portion and its lead portion in order to connect to the power supply by a flexible printed circuit (FPC).
  • FPC flexible printed circuit
  • the heat shrink tube may be provided on the outside of the heater 30.
  • the heat-shrinkable tube is a tube that shrinks in the radial direction by heat, and is composed of, for example, a thermoplastic elastomer.
  • the heater 30 is pressed against the inner cylinder member 132 by the contraction action of the heat shrink tube. As a result, the adhesion between the heater 30 and the inner cylinder member 132 is enhanced, so that the heat conduction from the heater 30 to the tobacco stick 110 via the inner cylinder member 132 is enhanced.
  • the aerosol generator 120 may have a tubular heat insulating material on the outside of the heater 30 in the radial direction, preferably on the outside of the heat-shrinkable tube.
  • the heat insulating material may serve to prevent the outer surface of the housing of the aerosol generator 120 from reaching an excessively high temperature by blocking the heat of the heater 30.
  • the heat insulating material can be made of, for example, an airgel such as silica airgel, carbon airgel, or alumina airgel.
  • the airgel as a heat insulating material may be typically an airgel having a high heat insulating performance and a relatively low manufacturing cost.
  • the heat insulating material may be a fiber-based heat insulating material such as glass wool or rock wool, or may be a foam-based heat insulating material of urethane foam or phenol foam.
  • the heat insulating material may be a vacuum heat insulating material.
  • the heat insulating material may be provided between the inner cylinder member 132 facing the tobacco stick 110 and the outer cylinder member 134 on the outer side of the heat insulating material.
  • the outer cylinder member 134 may be made of a heat conductive member such as aluminum or stainless steel (SUS).
  • the heat insulating material is preferably provided in a closed space.
  • the control unit 20 may include a control board, a CPU, a memory, and the like. Further, the aerosol generation device 120 may have a notification unit for notifying the user of various information under the control of the control unit 20.
  • the notification unit may be, for example, a light emitting element such as an LED, a vibrating element, or a combination thereof.
  • the control unit 20 When the control unit 20 detects the user's activation request, the control unit 20 starts supplying electric power from the battery 10 to the heater 30.
  • the user's activation request is made, for example, by the user's operation of a push button or a slide switch, or by the user's suction operation.
  • the user's activation request may be made by pressing the push button 150. More specifically, the user's activation request may be made by pressing the push button 150 with the lid 140 open. Alternatively, the user's activation request may be made by detecting the user's suction operation.
  • the user's suction operation can be detected by, for example, a temperature sensor as described above.
  • [A2] Obtaining the tobacco flavoring liquid can be obtained.
  • the yeast-containing culture solution and an elution solvent containing an organic solvent are mixed, and from the yeast contained in the obtained mixture, useful components contained in the cells of the yeast are eluted into the liquid portion of the mixture.
  • [A3] Obtaining the tobacco flavoring liquid can be obtained.
  • the yeast-containing culture solution and an elution solvent containing an organic solvent are mixed, and from the yeast contained in the obtained mixture, useful components contained in the cells of the yeast are eluted into the liquid portion of the mixture.
  • the method according to [A1] which is carried out by removing the yeast from the useful component eluate to obtain a yeast-free useful component eluate.
  • [A4] Obtaining the tobacco flavoring liquid can be obtained. Separation of the yeast-containing culture solution into the yeast and the tobacco extract, The separated yeast is mixed with an elution solvent containing an organic solvent, and the useful component contained in the cells of the yeast is eluted from the yeast contained in the obtained mixture into the liquid portion of the mixture. To obtain a useful component eluate, The method according to [A1], which is carried out by mixing the useful component eluate and the separated tobacco extract to obtain a useful component-containing liquid. [A5] Obtaining the tobacco flavoring liquid can be obtained.
  • the separated yeast is mixed with an elution solvent containing an organic solvent, and the useful component contained in the cells of the yeast is eluted from the yeast contained in the obtained mixture into the liquid portion of the mixture.
  • a useful component eluate By removing the yeast from the useful component eluate to obtain a yeast-free useful component eluate, The method according to [A1], which is carried out by mixing the yeast-free useful component eluate and the separated tobacco extract to obtain a yeast-free useful component-containing liquid.
  • [A6] The method according to [A2] or [A3], wherein the elution is performed by stirring a mixture of the yeast-containing culture solution and the elution solvent.
  • [A7] The method according to [A2] or [A3], wherein the elution is performed by heating a mixture of the yeast-containing culture solution and the elution solvent.
  • the concentration of the organic solvent in the mixed solution of the yeast-containing culture solution and the elution solvent is 50% by volume or more, preferably 50 to 95% by volume, and more preferably 60 to 95% by volume.
  • the method according to [A2], [A3], [A6] or [A7] which is added to the yeast-containing culture solution in an amount of%.
  • [A9] The method according to [A4] or [A5], wherein the elution is performed by stirring a mixture of the yeast and the elution solvent.
  • [A10] The method according to [A4] or [A5], wherein the elution is carried out by heating a mixture of the yeast and the elution solvent.
  • the elution solvent is an amount such that the concentration of the organic solvent in the mixture of the yeast and the elution solvent is 50% by volume or more, preferably 50 to 100% by volume, and more preferably 60 to 100% by volume.
  • the method according to [A4], [A5], [A9] or [A10] added to the yeast.
  • [A12] The method according to any one of [A1] to [A11], wherein the tobacco material is tobacco chopped.
  • the aqueous solvent is water or hydrous ethanol, preferably water, more preferably water at 20 to 70 ° C.
  • the yeast is a yeast of the genus Rhodotorula, a yeast of the genus Xanthophyllomyces, a yeast of the genus Yarrowia, a yeast of the genus Lipomyces, and a yeast of the genus Saccharomyces.
  • [A15] The method according to any one of [A1] to [A14], wherein the elution solvent is an organic solvent or a mixture of an organic solvent and water.
  • the organic solvent is an organic solvent miscible with water, preferably an alcohol miscible with water.
  • the elution solvent is an alcohol miscible with water or a water-containing alcohol thereof.
  • the organic solvent is an organic solvent having an SP value of 10 to 14.5, preferably an alcohol having an SP value of 10 to 14.5, more preferably ethanol, isopropanol, methanol or butanol, and further preferably.
  • the method according to any one of [A1] to [A18], wherein the elution solvent is ethanol or hydrous ethanol.
  • [A20] The method according to any one of [A1] to [A19], which further comprises removing the organic solvent from the tobacco flavoring liquid.
  • [A21] The method according to any one of [A1] to [A20], wherein the useful ingredient is a flavor-contributing ingredient.
  • the flavor-contribution component comprises carotenoid, fatty acid, neutral fat (that is, glycerin ester of fatty acid), acetic acid ester, fatty acid ester, organic acid, and higher alcohol (for example, alcohol having 8 to 22 carbon atoms).
  • the method according to any one of [A1] to [A21] which is at least one kind of component selected from the group.
  • [B1] A tobacco flavoring liquid produced by the method according to any one of [A1] to [A22].
  • [B5] The tobacco flavoring liquid according to [B1], wherein the tobacco flavoring liquid is the yeast-free useful ingredient-containing liquid described in [A5].
  • the tobacco according to [C1] which is a tobacco molded product obtained by molding a mixture with a tobacco residue obtained when obtaining the tobacco extract by the method according to any one of [A1] to [A22]. Additive.
  • [D1] A flavor aspirator containing the tobacco flavor liquid according to any one of [B1] to [B5].
  • [D2] A flavor aspirator containing the tobacco additive according to any one of [C1] to [C5].
  • [D3] The flavor aspirator according to [D1] or [D2], wherein the flavor aspirator is a combustion type flavor aspirator.
  • [D4] The flavor aspirator according to [D1] or [D2], wherein the flavor aspirator is a heated flavor aspirator.
  • Example 1 In Example 1, it was confirmed that yeast precipitates in the elution step (S4) of the method of the first embodiment.
  • Extraction step (S1) Yellow leaf tobacco was crushed and used as a "tobacco material”. Yellow seed leaf tobacco chopped (100 g) was crushed to a size of 100 ⁇ m or less with a crusher, 600 mL of water at 60 ° C. was added, and the mixture was shaken (200 rpm for 2 hours). As a result, the water-soluble component contained in leaf tobacco was extracted. Then, solid-liquid separation was performed by filtration. As a result, a tobacco extract and a tobacco residue were obtained.
  • Culture step (S2) Yarrowia yeast (Yarrowia lipolytica) was added to 3 mL of the obtained tobacco extract to a concentration of 105 cells / mL, and the yeast was cultured in the tobacco extract. Culturing was performed by shaking culture (240 rpm) at 28 ° C. for 24 hours under aerobic conditions. The "mixture of yeast and tobacco extract" obtained after culturing is called “yeast-containing culture broth”.
  • elution solvent in the elution step (S4) 24 hours after the start of the culture, 7 mL of ethanol was added as an elution solvent to 3 mL of the yeast-containing culture solution. Specifically, ethanol was added in an amount such that the concentration of ethanol in the mixed solution of the yeast-containing culture solution and ethanol was 70% by volume.
  • ethanol was added as an elution solvent to yeast in a normal yeast growth medium.
  • the elution solvent was added in an amount such that the concentration of ethanol in the mixed solution of the yeast growth medium and ethanol became 70% by volume.
  • FIG. 7 The state of yeast after the addition of the elution solvent is shown in FIG.
  • the photograph on the right side shows an example of the present invention
  • the photograph on the left side shows a comparative example.
  • the water-soluble protein in the tobacco extract was insolubilized, whereby an aggregated precipitate of the insoluble protein and yeast was formed, and the precipitate was pelletized.
  • yeast did not form a cohesive precipitate.
  • yeast cells form a cohesive precipitate together with the insolubilized protein in the elution step (S4)
  • yeast is extracted from the yeast extract in the subsequent yeast removal step (S5). Can be easily removed.
  • Example 2 In Example 2, a tobacco flavoring solution was prepared using the fatty acid-producing yeast according to the method of the first embodiment, and it was confirmed that the amount of fatty acid in the tobacco flavoring solution was increased.
  • Culture step (S2) Yarrowia yeast (Yarrowia lipolytica) was added to 3 mL of the obtained tobacco extract to a concentration of 105 cells / mL, and the yeast was cultured in the tobacco extract. Culturing was performed by shaking culture (240 rpm) at 28 ° C. for 48 hours under aerobic conditions. The "mixture of yeast and tobacco extract" obtained after culturing is called “yeast-containing culture broth”.
  • Elution step (S4) Forty-eight hours after the start of the culture, either ethanol, hydrous ethanol, or water was added to 3 mL of the yeast-containing culture solution as an elution solvent. Specifically, the elution solvent was added in an amount such that the concentration of ethanol in the mixed solution of the yeast-containing culture solution and the elution solvent was 0% by volume, 50% by volume, 70% by volume, or 85% by volume.
  • the obtained mixture was stirred at room temperature (25 ° C.) for 30 minutes (120 rpm). As a result, the yeast produced by yeast was eluted in the liquid portion of the mixture to obtain a "useful component eluate".
  • Yeast removal step (S5) Yeast was removed from the obtained useful ingredient eluate to obtain a "yeast-free useful ingredient eluate", that is, a tobacco flavoring liquid.
  • the concentration of fatty acid in the obtained tobacco flavoring liquid was measured using GC-MSD.
  • control 1 the concentration of fatty acid was similarly measured for yeast before culturing in the tobacco extract.
  • control 2 instead of the elution step (S4), yeast was crushed with a bead-type homogenizer, fatty acids contained in yeast cells were eluted, and the concentration of the eluted fatty acids was measured in the same manner.
  • the concentration of the fatty acid contained in the tobacco flavoring liquid obtained according to the method of the present invention was equivalent to the concentration of the fatty acid measured by Control 2 (bead crushing). This result shows that the method of the present invention can elute the fatty acid contained in the yeast cells by a simple method without disrupting the yeast cells.
  • Example 3 In Example 3, a tobacco flavoring solution was prepared using the carotenoid-producing yeast according to the method of the second embodiment, and it was confirmed that the amount of carotenoids in the tobacco flavoring solution was increased.
  • Culture step (S2) Yeast of the genus Rhodotorula (Rhodotorula toruloides ) was added to 100 mL of the obtained tobacco extract to a concentration of 105 cells / mL, and the yeast was cultured in the tobacco extract. Culturing was performed by shaking culture (240 rpm) at 28 ° C. for 144 hours under aerobic conditions. The "mixture of yeast and tobacco extract" obtained after culturing is called "yeast-containing culture broth”.
  • Separation step (S3) 144 hours after the start of culturing, the yeast-containing culture broth was separated into a tobacco extract and a yeast precipitate by centrifugation.
  • Elution step (S4) To the yeast precipitate separated from 8 mL of the yeast-containing culture solution, 4 mL of either ethanol, hydrous ethanol, or water was added as an elution solvent. The concentration of the added ethanol was 0% by volume, 70% by volume, or 100% by volume.
  • the resulting mixture was heated at 90 ° C. for 1 hour.
  • the carotenoid produced by yeast was eluted into the liquid portion of the mixture to obtain a "useful component eluate".
  • Yeast removal step (S5) Yeast was removed from the obtained useful ingredient eluate to obtain a "yeast-free useful ingredient eluate".
  • carotenoids could not be detected in the case of control or when the elution step was performed using an elution solvent containing no ethanol, whereas the elution step using an elution solvent containing ethanol.
  • carotenoids tollarodin, xanthophile, tolulen, and ⁇ -carotene could be detected.
  • the elution efficiency of carotenoids was high.
  • the elution was performed at 80 ° C. for 1 hour.
  • carotenoids could be detected as in the case of the elution temperature of 90 ° C.
  • the obtained tobacco flavoring liquid contains a sufficient amount of carotenoids.
  • Carotenoids are not only flavor-contributing components, but also coloring components. Therefore, such a tobacco flavor liquid can provide the user with an enhanced flavor when used in a tobacco product such as a flavor aspirator.
  • the tobacco flavoring liquid is also useful as a colored tobacco extract.
  • Example 4 the tobacco flavoring liquid prepared in Example 2 was incorporated into a cigarette and sensory evaluation was performed.
  • Tobacco slurry was added to "tobacco chopped ready to be incorporated into tobacco products (hereinafter referred to as tobacco chopped)". Specifically, the tobacco slurry was added to the tobacco slurries so that the tobacco powder in the tobacco slurries was added in an amount of 2% by weight with respect to the tobacco shavings. Tobacco chopped with tobacco slurry was harmonizeed for 2 days under conditions of 22 ° C. and 60% Rhes.
  • cigarette A The cigarette shown in FIG. 3 was produced by using the scented cigarette carving as a tobacco filler.
  • a cigarette (referred to as cigarette B) was similarly produced using unscented tobacco carving as a control.

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Abstract

たばこ材料から前記たばこ材料に含まれる水溶性成分を水性溶媒で抽出して、たばこ抽出液を得ることと、酵母を前記たばこ抽出液中で培養して、酵母含有培養液を得ることと、前記酵母含有培養液に含有される前記酵母から、有機溶媒を含む溶出溶媒を用いて、前記酵母の菌体内に含まれる有用成分の溶出を行って、前記有用成分と、培養後の前記たばこ抽出液とを含むたばこ香味液を得ることとを含む、たばこ香味液の製造方法。

Description

たばこ香味液の製造方法、たばこ香味液、たばこ添加物、および香味吸引器
　本発明は、たばこ香味液の製造方法、たばこ香味液、たばこ添加物、および香味吸引器に関する。
　たばこ植物の葉は、収穫された後、農家での乾燥工程、その後の原料工場での１年ないし数年の長期熟成工程、およびその後の製造工場でのブレンドおよび裁刻など種々の加工処理を経た後に、シガレットなどの香味吸引器の製造に使用される。これら種々の加工処理工程を経ることにより、たばこ植物の葉は、香り豊かなたばこ材料となる。かかるたばこ材料は、たばこ植物の葉と区別して、「葉たばこ」と呼ばれる。葉たばこは、それ自体を香味吸引器の香味源として使用してもよいし、葉たばこからたばこ香味成分を抽出し、得られたたばこ抽出液を香味吸引器の香味源として使用してもよい。
　葉たばこには種々の香味成分が含まれているが、葉たばこやたばこ抽出液に対して、香味成分を増加させるための化学的処理や生物学的処理を行うことが知られている。例えば、特許文献１は、たばこ粒子から、加香された再構成たばこを調製する方法を開示し、この方法では、たばこ粒子を水で抽出して抽出液と残渣とを得て、その後、得られた抽出液を酵母で発酵させて発酵液を調製し、得られた残渣から再構成たばこを調製し、発酵液を再構成たばこに添加して、加香された再構成たばこを調製する。
米国特許第４８９５１７５号
　本発明は、香味成分などの有用成分を増強したたばこ抽出液に関する技術を提供することを目的とする。
　本発明者らは、たばこ抽出液中で酵母を培養して、酵母に有用成分を生産させた場合、有用成分の多くが酵母の菌体内にとどまり、たばこ抽出液に十分に放出されないことに着目し、この点を改良して本発明を完成させるに至った。
　すなわち、１つの側面によれば、
　たばこ材料から前記たばこ材料に含まれる水溶性成分を水性溶媒で抽出して、たばこ抽出液を得ることと、
　酵母を前記たばこ抽出液中で培養して、酵母含有培養液を得ることと、
　前記酵母含有培養液に含有される前記酵母から、有機溶媒を含む溶出溶媒を用いて、前記酵母の菌体内に含まれる有用成分の溶出を行って、前記有用成分と、培養後の前記たばこ抽出液とを含むたばこ香味液を得ることと
を含む、たばこ香味液の製造方法が提供される。
　別の側面によれば、前述の方法により製造されるたばこ香味液が提供される。
　更に別の側面によれば、
　前述の方法により製造されるたばこ香味液と、
　前述の方法においてたばこ抽出液を得る際に得られるたばこ残渣と
を含むたばこ添加物が提供される。
　更に別の側面によれば、前述のたばこ香味液または前述のたばこ添加物を含む香味吸引器が提供される。
　本発明によれば、香味成分などの有用成分を増強したたばこ抽出液に関する技術が提供される。
図１は、たばこ香味液の製造方法の一例を示すフローチャートである。 図２は、たばこ香味液の製造方法の別の例を示すフローチャートである。 図３は、燃焼型香味吸引器の一例を示す断面図である。 図４は、加熱型香味吸引器の一例を示す斜視図である。 図５は、たばこスティックの内部構造を示す図である。 図６は、エアロゾル生成装置の内部構造を示す図である。 図７は、第１実施形態の方法の溶出工程（Ｓ４）における酵母の様子を示す顕微鏡画像である。 図８は、たばこ香味液中の脂肪酸の濃度を示すグラフである。
　以下、本発明を詳細に説明するが、以下の説明は、本発明を説明することを目的とし、本発明を限定することを意図しない。
　＜１．たばこ香味液の製造方法＞
　たばこ香味液の製造方法は、
　たばこ材料から前記たばこ材料に含まれる水溶性成分を水性溶媒で抽出して、たばこ抽出液を得ることと、
　酵母を前記たばこ抽出液中で培養して、酵母含有培養液を得ることと、
　前記酵母含有培養液に含有される前記酵母から、有機溶媒を含む溶出溶媒を用いて、前記酵母の菌体内に含まれる有用成分の溶出を行って、前記有用成分と、培養後の前記たばこ抽出液とを含むたばこ香味液を得ることと
を含む。
　この方法では、酵母が生産した有用成分をたばこ抽出液に溶出させるため、「有用成分を増強したたばこ抽出液」が得られる。本明細書では、「香味成分などの有用成分を増強したたばこ抽出液」を「たばこ香味液」と呼ぶ。
　上記方法の第１実施形態において、たばこ香味液を得ることは、
　前記酵母含有培養液と、有機溶媒を含む溶出溶媒とを混合し、得られた混合物に含有される前記酵母から、前記酵母の菌体内に含まれる有用成分を、前記混合物の液体部分に溶出させて、有用成分溶出液を得ることと、
　必要ならば、前記有用成分溶出液から前記酵母を除去して、酵母フリーの有用成分溶出液を得ること
により行うことができる。第１実施形態では、酵母を含有する「有用成分溶出液」および「酵母フリーの有用成分溶出液」のそれぞれが、たばこ香味液に相当する。第１実施形態に係る方法は、以下の＜１－１．第１実施形態＞の欄で詳細に説明する。
　上記方法の第２実施形態において、たばこ香味液を得ることは、
　前記酵母含有培養液を、前記酵母と前記たばこ抽出液とに分離することと、
　分離された前記酵母と、有機溶媒を含む溶出溶媒とを混合し、得られた混合物に含有される前記酵母から、前記酵母の菌体内に含まれる有用成分を、前記混合物の液体部分に溶出させて、有用成分溶出液を得ることと、
　必要ならば、前記有用成分溶出液から前記酵母を除去して、酵母フリーの有用成分溶出液を得ることと、
　前記有用成分溶出液または前記酵母フリーの有用成分溶出液と、分離された前記たばこ抽出液とを混合して、有用成分含有液を得ること
により行うことができる。第２実施形態では、有用成分溶出液から酵母を除去する工程を経ることなく調製された「有用成分含有液」および有用成分溶出液から酵母を除去する工程を経て調製された「有用成分含有液」のそれぞれが、たばこ香味液に相当する。第２実施形態に係る方法は、以下の＜１－２．第２実施形態＞の欄で詳細に説明する。
　＜１－１．第１実施形態＞
　第１実施形態によれば、たばこ香味液の製造方法は、
　（Ｓ１）たばこ材料から前記たばこ材料に含まれる水溶性成分を水性溶媒で抽出して、たばこ抽出液を得ることと、
　（Ｓ２）酵母を前記たばこ抽出液中で培養して、酵母含有培養液を得ることと、
　（Ｓ４）前記酵母含有培養液と、有機溶媒を含む溶出溶媒とを混合し、得られた混合物に含有される前記酵母から、前記酵母の菌体内に含まれる有用成分を、前記混合物の液体部分に溶出させて、有用成分溶出液を得ることと、
　（Ｓ５）必要ならば、前記有用成分溶出液から前記酵母を除去して、酵母フリーの有用成分溶出液を得ることと
を含む。
　第１実施形態に係る方法を図１に示す。以下、第１実施形態に係る方法を、図１を参照しながら（Ｓ１）、（Ｓ２）、（Ｓ４）および（Ｓ５）の工程順に説明する。上述のとおり、酵母除去工程（Ｓ５）は、行ってもよいし行わなくてもよい。すなわち、酵母除去工程（Ｓ５）で得られた「酵母フリーの有用成分溶出液」をたばこ香味液として使用してもよいし、溶出工程（Ｓ４）で得られた「有用成分溶出液」を、酵母が残存したままの状態でたばこ香味液として使用してもよい。
　［抽出工程（Ｓ１）］
　抽出工程（Ｓ１）では、たばこ材料からたばこ材料に含まれる水溶性成分を水性溶媒で抽出して、たばこ抽出液を得る。抽出工程（Ｓ１）では、たばこ抽出液が得られるのと同時にたばこ残渣も得られる（図１参照）。
　たばこ材料は、燃焼型または加熱型の香味吸引器などのたばこ製品に配合される準備が整ったたばこ刻を使用することができる。「たばこ製品に配合される準備が整ったたばこ刻」とは、農家での乾燥工程、その後の原料工場での１年ないし数年の長期熟成工程、およびその後の製造工場でのブレンドおよび裁刻など種々の加工処理を経て、たばこ製品に配合される準備が整ったたばこ刻を指す。
　たばこ刻は、葉たばこの裁刻物である。たばこ刻は、除骨葉の刻、中骨の刻、再生たばこ（すなわち、工場の作業工程で生じる葉屑、刻み屑、中骨屑、細粉などを再使用可能な形状に加工したたばこ材料）の刻、またはこれらの混合物のいずれであってもよい。たばこ刻は、抽出効率を高めるために粉砕し、得られた粉砕物を抽出のために使用してもよい。
　たばこ刻は、任意の品種のものを使用することができ、たとえば黄色種、バーレー種、オリエント種などのものを使用することができる。たばこ刻は、単一品種のものを使用してもよいし、異なる品種の混合物を使用してもよい。
　水性溶媒としては、水または含水エタノールを使用することができる。含水エタノールとしては、例えば、エタノールと水との体積比１：１の混合物を使用することができる。水性溶媒は、一般的には水であり、好ましくは室温（例えば、約２０℃）～７０℃の水である。水性溶媒は、例えば、たばこ材料に対して５００～５０００質量％の量で使用することができる。
　抽出は、例えば、たばこ材料を４０～６０℃の温水中で３０～１８０分間浸漬するか、あるいは、たばこ材料を４０～６０℃の温水中で３０～１８０分間振盪（例えば２００ｒｐｍ）することにより行うことができる。
　また、抽出は、複数回の抽出操作を繰り返すことにより行ってもよい。具体的には、たばこ材料からたばこ材料に含まれる水溶性成分を水性溶媒で抽出し、その後、得られたたばこ残渣を新たな水性溶媒に入れて２回目の抽出操作を行い、更に必要に応じて、新たな水性溶媒での抽出操作を繰り返すことにより、抽出を行ってもよい。
　抽出により、たばこ残渣とたばこ抽出液との混合物が得られる。たばこ抽出液は、たばこ材料に含まれる水溶性成分を含有する。「たばこ材料に含まれる水溶性成分」として、例えば、酵母の栄養源となる成分（例えば、糖類、アミノ酸、タンパク質、栄養塩類）や、たばこ香味に寄与する成分（例えば、有機酸、葉面樹脂、テルペノイド、ポリフェノール類）などが挙げられる。
　抽出の後、たばこ残渣とたばこ抽出液とは分離され、たばこ抽出液は、たばこ香味液を得るための原料として使用される。一方、たばこ残渣は、最終的に得られたたばこ香味液と混合し、得られた混合物を適宜加工して、たばこ充填材を作製するために使用することができる。例えば、たばこ残渣は、最終的に得られたたばこ香味液と混合し、得られた混合物からシートたばこなどのたばこ成形体を作製するために使用してもよい。あるいは、たばこ残渣は、最終的に得られたたばこ香味液と混合し、得られた混合物を乾燥させ粉砕してたばこパウダーを作製するために使用してもよい。
　［培養工程（Ｓ２）］
　培養工程（Ｓ２）では、抽出工程（Ｓ１）で得られたたばこ抽出液中で酵母を培養して、酵母含有培養液を得る（図１参照）。
　酵母は、たばこ抽出液中で培養した際に有用成分を生産することができれば、任意の種類の酵母を使用することができる。
　本明細書において、「有用成分」は、最終的に得られるたばこ香味液にとって有用な成分を指す。有用成分は、例えば、たばこ香味液の香味に寄与する成分（以下、香味寄与成分という）であってもよいし、たばこ香味液を着色する成分（以下、着色成分という）であってもよいし、たばこ香味液の腐敗や発酵を防ぐ成分（以下、防腐成分という）であってもよい。
　有用成分は、好ましくは香味寄与成分である。「香味寄与成分」は、香味を放出する香味成分であってもよいし、香味吸引器で加熱または燃焼されたときに香味成分に変換される前駆体であってもよい。
　香味寄与成分としては、例えば、カロテノイド、脂肪酸、中性脂肪（すなわち、脂肪酸のグリセリンエステル）、酢酸エステル、脂肪酸エステル、有機酸、高級アルコール（例えば、炭素数８～２２のアルコール）などが挙げられる。着色成分としては、例えば、カロテノイドが挙げられる。防腐成分としては、例えば、乳酸、脂肪酸配糖体、安息香酸などが挙げられる。
　したがって、上述の有用成分を生産することが知られている酵母を、本発明の方法で使用することができる。
　カロテノイドを生産する酵母としては、Rhodotorula属の酵母、例えばRhodotorula alborubescens、Rhodotorula araucariae、Rhodotorula babjevae、Rhodotorula dairenensis、Rhodotorula diobovata、Rhodotorula evergladensis、Rhodotorula glutinis、Rhodotorula graminis、Rhodotorula kratochvilovae、Rhodotorula mucilaginosa、Rhodotorula ngohengohe、Rhodotorula pacifica、Rhodotorula paludigena、Rhodotorula sinensis、Rhodotorula sphaerocarpa、Rhodotorula taiwanensis、Rhodotorula toruloides；Xanthophyllomyces属の酵母、例えばXanthophyllomyces australis、Xanthophyllomyces rhodozyma、Xanthophyllomyces tasmanicaが挙げられる。
　脂肪酸を生産する酵母としては、Yarrowia属の酵母、例えばYarrowia alimentaria、Yarrowia bubula、Yarrowia deformans、Yarrowia divulgata、Yarrowia galli、Yarrowia hollandica、Yarrowia keelungensis、Yarrowia lipolytica、Yarrowia osloensis、Yarrowia parophoni、Yarrowia phangngaensis、Yarrowia porcina、Yarrowia yakushimensis；Lipomyces属の酵母、例えばLipomyces anomalus、Lipomyces arxii、Lipomyces chichibuensis、Lipomyces doorenjongii、Lipomyces japonicus、Lipomyces kockii、Lipomyces kononenkoae、Lipomyces lipofer、Lipomyces mesembrius、Lipomyces okinawensis、Lipomyces oligophaga、Lipomyces orientalis、Lipomyces smithiae、Lipomyces spencermartinsiae、Lipomyces starkeyiが挙げられる。
　酢酸エステル、脂肪酸エステル、または高級アルコールを生産する酵母としては、Saccharomyces属の酵母、例えばSaccharomyces cerevisiae、Saccharomyces paradoxus、Saccharomyces bayanus、Saccharomyces uvarum、Saccharomyces arboricola；Cyberlindnera属の酵母、例えばCyberlindnera jadinii、Cyberlindnera saturnus、Cyberlindnera fabianii、Cyberlindnera suaveolens、Cyberlindnera americana、Cyberlindnera xylosilytyca；Wickerhamomyces属の酵母、例えばWickerhamomyces anomalus、Wickerhamomyces ciferri、Wickerhamomyces canadensisが挙げられる。
　１種類の酵母がたばこ抽出液中で培養されてもよいし、２種類以上の酵母がたばこ抽出液中で培養されてもよい。また、酵母は、有用成分の生産量を増加するように遺伝的に改変された遺伝子組換え酵母であってもよい。
　酵母の培養条件は、特に限定されず、使用する酵母の生育および有用成分の生産に適した条件を適宜選択することができる。培養に先立って、酵母は、たばこ抽出液に、例えば１０～１０8細胞／ｍＬの濃度で添加することができる。培養は、例えば１０～４０℃で、例えば５～１６８時間にわたって行うことができる。
　たばこ抽出液は、酵母の栄養源となる成分や有用成分の原料となる成分が含まれており、酵母の生育および有用成分の生産に適した環境を提供することができる。このため、たばこ抽出液に追加の成分を添加する必要はない。ただし、本発明の方法は、たばこ抽出液に追加の成分を添加することを除外しない。
　酵母をたばこ抽出液中で培養した後に得られる、酵母とたばこ抽出液との混合物を、本明細書では「酵母含有培養液」と呼ぶ。酵母含有培養液は、「培養前の酵母とたばこ抽出液の混合物」と比べると、酵母が生産した有用成分の量が増加している。また、酵母含有培養液は、「培養前の酵母とたばこ抽出液の混合物」と比べると、酵母が生育や有用成分の生産のために消費した物質の量が減少している。
　［溶出工程（Ｓ４）］
　溶出工程（Ｓ４）では、培養工程（Ｓ２）で得られた酵母含有培養液と、有機溶媒を含む溶出溶媒とを混合し、得られた混合物に含有される酵母から、酵母の菌体内に含まれる有用成分を、混合物の液体部分に溶出させる。これにより、有用成分溶出液を得る（図１参照）。
　本明細書では、溶出工程を終えた後に得られる、酵母と溶出溶媒とを含有する混合物を「有用成分溶出液」と呼ぶ。
　溶出溶媒としては、有機溶媒を含む溶出溶媒を使用することができる。溶出溶媒は、有機溶媒それ自体であってもよいし、有機溶媒と水との混合物であってもよい。溶出溶媒は、好ましくは、水と混和性を有する有機溶媒を含む溶出溶媒であり、より好ましくは、水と混和性を有するアルコールを含む溶出溶媒である。すなわち、好ましい溶出溶媒は、水と混和性を有するアルコール、またはその含水アルコールである。
　溶出溶媒に含まれる有機溶媒は、好ましくは、１０～１４．５のＳＰ値を有する有機溶媒であり、より好ましくは、１０～１４．５のＳＰ値を有するアルコールである。溶出溶媒に含まれる有機溶媒の例として、エタノール、イソプロパノール、メタノール、またはブタノールが挙げられる。溶出溶媒に含まれる有機溶媒は、より好ましくは、エタノールまたはイソプロパノールであり、最も好ましくはエタノールである。すなわち、最も好ましい溶出溶媒は、エタノールまたは含水エタノールである。
　ＳＰ値は、Hildebrand溶解度パラメータの値を指す。溶媒のＳＰ値が高いほど、水との混和性が高いことを表す。ＳＰ値は、種々の溶媒で公知であり、例えば、エタノールのＳＰ値は１２．７、イソプロパノールのＳＰ値は１１．５、メタノールのＳＰ値は１４．５、ブタノールのＳＰ値は１１．４である。
　溶出溶媒に含まれる有機溶媒は、１種類が使用されてもよいし、２種類以上が混合されて使用されてもよい。
　溶出溶媒は、酵母含有培養液と溶出溶媒との混合液中の有機溶媒の濃度が、例えば５０体積％以上、好ましくは５０～９５体積％、より好ましくは６０～９５体積％になる量で、酵母含有培養液に添加することができる。有機溶媒の濃度は、有用成分の溶出効率を考えて適宜調整することができる。本明細書において、「酵母含有培養液と溶出溶媒との混合液（mixed solution）」の用語は、酵母含有培養液の液体部分（すなわち、培養後のたばこ抽出液）と溶出溶媒との混合液を指し、酵母を含まない。
　また、溶出溶媒は、酵母含有培養液に対して、例えば１００～９００体積％の量で添加することができる。溶出溶媒の添加量は、有用成分の溶出効率を考えて適宜調整することができる。
　例えば、溶出溶媒としてエタノールまたは含水エタノールを使用し、有用成分として脂肪酸を溶出させたい場合、エタノールは、酵母含有培養液と溶出溶媒との混合液中のエタノールの濃度が、例えば５０体積％以上、好ましくは５０～９０体積％、より好ましくは６０～９０体積％、更に好ましくは６０～８０体積％、最も好ましくは７０体積％になる量で、酵母含有培養液に添加することができる。
　例えば、溶出溶媒としてエタノールまたは含水エタノールを使用し、有用成分としてカロテノイドを溶出させたい場合、エタノールは、酵母含有培養液と溶出溶媒との混合液中のエタノールの濃度が、例えば５０体積％以上、好ましくは５０～９０体積％、より好ましくは６０～９０体積％、更に好ましくは７０～９０体積％、更に好ましくは８０～９０体積％、最も好ましくは９０体積％になる量で、酵母含有培養液に添加することができる。
　溶出工程（Ｓ４）では、酵母含有培養液と溶出溶媒とを混合した後、得られた混合物に含有される酵母から、酵母の菌体内に含まれる有用成分を、混合物の液体部分に溶出させる。溶出は、酵母含有培養液と溶出溶媒との混合物を、必要であれば加熱しながら、所定期間にわたって撹拌することにより行うことができる。
　溶出は、有用成分の溶出効率の観点で、混合物を撹拌しながら行うことが好ましいが、混合物を静置しながら行ってもよい。混合物を撹拌する場合、撹拌速度は、例えば６０～３００ｒｐｍとすることができる。
　また、加熱により有用成分の溶出が促進される場合、溶出は、加熱しながら行ってもよいし、加熱による溶出の促進効果がみられない場合、溶出は、加熱することなく室温（例えば１５～２５℃）で行ってもよい。
　溶出温度および溶出時間は、有用成分の溶出効率を考えて適宜調整することができる。
　例えば、溶出溶媒としてエタノールまたは含水エタノールを使用し、有用成分として脂肪酸を溶出させたい場合、溶出は、混合物を室温（例えば１５～２５℃）で５～６０分間にわたって撹拌することにより行うことができる。
　例えば、溶出溶媒としてエタノールまたは含水エタノールを使用し、有用成分としてカロテノイドを溶出させたい場合、溶出は、混合物を８０～９５℃に加熱しながら、１５～６０分間にわたって撹拌することにより行うことができる。
　［酵母除去工程（Ｓ５）］
　酵母除去工程（Ｓ５）では、溶出工程（Ｓ４）で得られた有用成分溶出液から酵母を除去して、酵母フリーの有用成分溶出液を得ることができる（図１参照）。上述のとおり、酵母除去工程（Ｓ５）は、行ってもよいし、行わなくてもよい。
　酵母の除去は、加圧濾過、減圧濾過、自然濾過、遠心分離、デカンテーションなどの一般的な方法により行うことができる。酵母を有用成分溶出液から除去した場合、酵母の代謝によりたばこ香味液の組成が変化する可能性をなくすことができ、たばこ香味液の品質安定性の点で好ましい。
　酵母除去工程（Ｓ５）を行った場合、得られた「酵母フリーの有用成分溶出液」が、たばこ香味液に相当する。一方、酵母除去工程（Ｓ５）を行わなかった場合、「有用成分溶出液」が、たばこ香味液に相当し、酵母が残存している。
　上述の方法は、たばこ香味液を得た後、たばこ香味液から有機溶媒を除去することを更に含んでいてもよい。有機溶媒の除去は、減圧濃縮、常圧濃縮、噴霧乾燥などの一般的な方法により行うことができる。
　第１実施形態の方法は、溶出工程（Ｓ４）において酵母が容易に沈殿するため、酵母除去工程（Ｓ５）において酵母を容易に除去することができる点で優れている。この優れた効果は、後述の実施例１で実証されている。以下、この優れた効果を具体的に説明する。すなわち、溶出工程（Ｓ４）で、酵母含有培養液に、有機溶媒を含む溶出溶媒を添加すると、酵母含有培養液の液体部分（すなわち、培養後のたばこ抽出液）の極性が変わり、たばこ抽出液に溶解していた水溶性タンパク質が不溶化する。不溶化したタンパク質の存在により、たばこ抽出液に含まれる微生物（添加した酵母およびもともとたばこ抽出液に含まれている酵母やカビ等）の凝集が促進される。この凝集現象は、微生物の菌体のみが存在する条件下でも起こるが、微生物がタンパク質と共存する条件下において、より顕著に起こる。したがって、第１実施形態の方法では、凝集した微生物とタンパク質の複合体は、質量の増加により容易に沈殿してペレットを形成することができる。このように、第１実施形態の方法では、たばこ抽出液に含まれる水溶性タンパク質のおかげで、添加した酵母がペレットを形成し易く、当該ペレットを除去することにより、たばこ抽出液から酵母を容易に除去することができる。
　＜１－２．第２実施形態＞
　第１実施形態では、酵母をたばこ抽出液中で培養し、得られた酵母含有培養液を溶出溶媒と混合して有用成分の溶出を行うが、酵母含有培養液から酵母を分離し、分離された酵母を溶出溶媒と混合して有用成分の溶出を行うこともできる。
　すなわち、第２実施形態によれば、たばこ香味液の製造方法は、
　（Ｓ１）たばこ材料から前記たばこ材料に含まれる水溶性成分を水性溶媒で抽出して、たばこ抽出液を得ることと、
　（Ｓ２）酵母を前記たばこ抽出液中で培養して、酵母含有培養液を得ることと、
　（Ｓ３）前記酵母含有培養液を、前記酵母と前記たばこ抽出液とに分離することと、
　（Ｓ４）分離された前記酵母と、有機溶媒を含む溶出溶媒とを混合し、得られた混合物に含有される前記酵母から、前記酵母の菌体内に含まれる有用成分を、前記混合物の液体部分に溶出させて、有用成分溶出液を得ることと、
　（Ｓ５）必要ならば、前記有用成分溶出液から前記酵母を除去して、酵母フリーの有用成分溶出液を得ることと、
　（Ｓ６）前記有用成分溶出液または前記酵母フリーの有用成分溶出液と、分離された前記たばこ抽出液とを混合して、有用成分含有液を得ることと
を含む。
　第２実施形態に係る方法を図２に示す。以下、第２実施形態に係る方法を、図２を参照しながら（Ｓ１）～（Ｓ６）の工程順に説明する。以下の説明では、第１実施形態に係る方法と重複する部分についての説明は省略し、第１実施形態に係る方法と異なる部分を中心に説明する。
　上述のとおり、酵母除去工程（Ｓ５）は、行ってもよいし行わなくてもよい。すなわち、酵母除去工程（Ｓ５）を行った場合には、混合工程（Ｓ６）で、「酵母フリーの有用成分溶出液」と「分離されたたばこ抽出液」とを混合して、「酵母フリーの有用成分含有液」が得られるため、かかる「酵母フリーの有用成分含有液」をたばこ香味液として使用することができる。一方、酵母除去工程（Ｓ５）を行わなかった場合には、混合工程（Ｓ６）で、「有用成分溶出液」と「分離されたたばこ抽出液」とを混合して、酵母が残存したままの状態で「有用成分含有液」が得られるため、かかる「有用成分含有液」をたばこ香味液として使用することができる。
　［抽出工程（Ｓ１）］
　抽出工程（Ｓ１）では、たばこ材料からたばこ材料に含まれる水溶性成分を水性溶媒で抽出して、たばこ抽出液を得る。抽出工程（Ｓ１）では、たばこ抽出液が得られるのと同時にたばこ残渣も得られる（図２参照）。抽出工程（Ｓ１）は、第１実施形態の方法で説明した抽出工程（Ｓ１）と同様に実施することができる。
　［培養工程（Ｓ２）］
　培養工程（Ｓ２）では、抽出工程（Ｓ１）で得られたたばこ抽出液中で酵母を培養して、酵母含有培養液を得る（図２参照）。培養工程（Ｓ２）は、第１実施形態の方法で説明した培養工程（Ｓ２）と同様に実施することができる。
　［分離工程（Ｓ３）］
　培養工程（Ｓ２）が完了したら、酵母含有培養液を、酵母とたばこ抽出液とに分離する（図２参照）。分離工程（Ｓ３）は、加圧濾過、減圧濾過、自然濾過、遠心分離、デカンテーションなどの一般的な方法により行うことができる。
　［溶出工程（Ｓ４）］
　溶出工程（Ｓ４）では、分離工程（Ｓ３）で分離された酵母と、有機溶媒を含む溶出溶媒とを混合し、得られた混合物に含有される酵母から、酵母の菌体内に含まれる有用成分を、混合物の液体部分に溶出させて、有用成分溶出液を得る（図２参照）。
　溶出溶媒は、第１実施形態の方法で説明した溶出溶媒と同様のものを使用することができる。第１実施形態では、分離工程（Ｓ３）を含まないため、溶出溶媒は、酵母含有培養液（液体）と混合する。一方、第２実施形態では、溶出溶媒は、酵母（固体）と混合する。したがって、第２実施形態では、溶出溶媒中の有機溶媒の濃度は、溶出溶媒を酵母と混合した後も、希釈されることなくそのまま維持される。
　第２実施形態において、溶出溶媒中の有機溶媒の濃度は、例えば５０体積％以上、好ましくは５０～１００体積％、より好ましくは６０～１００体積％である。酵母と溶出溶媒との混合物中の有機溶媒の濃度も同様に、例えば５０体積％以上、好ましくは５０～１００体積％、より好ましくは６０～１００体積％である。有機溶媒の濃度は、有用成分の溶出効率を考えて適宜調整することができる。
　また、溶出溶媒は、酵母が由来する酵母含有培養液の量に対して、例えば３５～１００体積％の量で、分離された酵母に添加することができる。溶出溶媒の添加量は、有用成分の溶出効率を考えて適宜調整することができる。
　例えば、溶出溶媒としてエタノールまたは含水エタノールを使用し、有用成分として脂肪酸を溶出させたい場合、溶出溶媒中のエタノールの濃度（すなわち、酵母と溶出溶媒との混合物中のエタノールの濃度）は、例えば５０体積％以上、好ましくは５０～１００体積％、より好ましくは６０～９０体積％、更に好ましくは６０～８０体積％、最も好ましくは７０体積％である。
　例えば、溶出溶媒としてエタノールまたは含水エタノールを使用し、有用成分としてカロテノイドを溶出させたい場合、溶出溶媒中のエタノールの濃度（すなわち、酵母と溶出溶媒との混合物中のエタノールの濃度）は、例えば５０体積％以上、好ましくは５０～１００体積％、より好ましくは６０～１００体積％、更に好ましくは７０～１００体積％、更に好ましくは８０～１００体積％、最も好ましくは９０～１００体積％である。
　その他の溶出条件は、第１実施形態の方法で説明した溶出条件と同様の条件を採用することができる。
　［酵母除去工程（Ｓ５）］
　酵母除去工程（Ｓ５）では、溶出工程（Ｓ４）で得られた有用成分溶出液から酵母を除去して、酵母フリーの有用成分溶出液を得ることができる（図２参照）。上述のとおり、酵母除去工程（Ｓ５）は、行ってもよいし、行わなくてもよい。酵母除去工程（Ｓ５）は、第１実施形態の方法で説明した酵母除去工程（Ｓ５）と同様に実施することができる。
　［混合工程（Ｓ６）］
　酵母除去工程（Ｓ５）を行った場合、酵母除去工程（Ｓ５）で得られた酵母フリーの有用成分溶出液と、分離工程（Ｓ３）で分離されたたばこ抽出液とを混合して、酵母フリーの有用成分含有液を得る（図２参照）。得られた「酵母フリーの有用成分含有液」が、たばこ香味液に相当する。
　一方、酵母除去工程（Ｓ５）を行わなかった場合、溶出工程（Ｓ４）で得られた有用成分溶出液と、分離工程（Ｓ３）で分離されたたばこ抽出液とを混合して、有用成分含有液を得る。得られた「有用成分含有液」が、たばこ香味液に相当し、酵母が残存している。
　上述の方法は、第１実施形態の方法と同様、たばこ香味液を得た後、たばこ香味液から有機溶媒を除去することを更に含んでいてもよい。
　＜１－３．効果＞
　本発明に従って、たばこ抽出液中で酵母を培養し、酵母の菌体から香味成分などの有用成分をたばこ抽出液に溶出させると、香味成分などの有用成分を増強したたばこ抽出液（本明細書では、たばこ香味液という）を製造することができる。
　本発明の方法は、酵母の菌体内に含まれる有用成分をたばこ抽出液に溶出させる工程を含むため、最終的に得られるたばこ香味液は、多量の有用成分を含むことができる。また、本発明の方法は、酵母の菌体を破砕することなく、酵母の菌体内に含まれる有用成分の溶出を行うことができるため、簡便な方法である。
　＜２．たばこ香味液＞
　別の側面によれば、上述の「たばこ香味液の製造方法」により製造されるたばこ香味液が提供される。
　上述のとおり、たばこ香味液は、以下の何れであってもよい：
（i）第１実施形態の方法の溶出工程（Ｓ４）で得られる「有用成分溶出液」；
（ii）第１実施形態の方法の酵母除去工程（Ｓ５）で得られる「酵母フリーの有用成分溶出液」；
（iii）第２実施形態の方法で酵母除去工程（Ｓ５）を行うことなく混合工程（Ｓ６）を行った場合に得られる「有用成分含有液」；および
（iv）第２実施形態の方法で酵母除去工程（Ｓ５）を行った後に混合工程（Ｓ６）を行った場合に得られる「酵母フリーの有用成分含有液」。
　したがって、上述の「たばこ香味液の製造方法」により製造されるたばこ香味液は、上記４種類の生成物を具体例として包含する。
　上述のとおり、たばこ香味液は、上述の「たばこ香味液の製造方法」により製造されるため、多量の有用成分を含むことができる。したがって、かかるたばこ香味液を香味吸引器に組み込んだ場合、香味吸引器において有用成分の効果を顕著に発揮することができる。例えば、有用成分が香味寄与成分である場合、たばこ香味液は、多量の香味寄与成分を含むことができるため、香味吸引器などのたばこ製品に組み込んだ場合、増強した香味をユーザに提供することができる。
　上述の「たばこ香味液の製造方法」により製造されるたばこ香味液は、公知技術に従って、香味吸引器などのたばこ製品に組み込むことができる。以下に、たばこ香味液の使用例を説明する。
　例えば、たばこ香味液は、たばこ材料（例えば、除骨葉や葉たばこ）に添加し、得られた混合物を乾燥させることにより、使用することができる。
　あるいは、たばこ香味液は、上述の抽出工程（Ｓ１）で得られたたばこ残渣に添加し、得られた混合物から、シートたばこやたばこ顆粒などのたばこ成形体を作製し、たばこ成形体をたばこ製品のたばこ香味源として使用することができる。
　あるいは、たばこ香味液は、上述の抽出工程（Ｓ１）で得られたたばこ残渣に添加し、得られた混合物を乾燥させ粉砕してたばこパウダーを作製し、たばこパウダーをたばこ材料（例えば、除骨葉や葉たばこ）に添加することにより、使用することができる。
　あるいは、たばこ香味液は、上述の抽出工程（Ｓ１）で得られたたばこ残渣に添加し、得られた混合物を乾燥させ粉砕してたばこパウダーを作製し、たばこパウダーを水に懸濁してたばこスラリーを調製し、たばこスラリーをたばこ材料（例えば、除骨葉や葉たばこ）に添加することにより、使用することができる。
　あるいは、たばこ香味液は、公知技術に従ってカプセル化し、得られた香料カプセルをたばこ製品のフィルタ部分に組み込むことができる。
　＜３．たばこ添加物＞
　上述のとおり、たばこ香味液は、上述の抽出工程（Ｓ１）で得られたたばこ残渣と組み合わせて使用してもよい。したがって、別の側面によれば、
　上述の「たばこ香味液の製造方法」により製造されるたばこ香味液と、
　上述の「たばこ香味液の製造方法」においてたばこ抽出液を得る際に得られるたばこ残渣と
を含むたばこ添加物が提供される。
　以下に、たばこ添加物の具体例を説明する。　
　例えば、たばこ添加物は、たばこ香味液と、抽出工程（Ｓ１）で得られたたばこ残渣との混合物を乾燥させることにより得られた生成物であってもよい。この生成物は、たばこ製品のたばこ香味源として使用することができる。
　あるいは、たばこ添加物は、たばこ香味液と、抽出工程（Ｓ１）で得られたたばこ残渣との混合物を、シート形状や顆粒形状などの特定形状に成形することにより得られたたばこ成形体であってもよい。たばこ成形体は、たばこ製品のたばこ香味源として使用することができる。
　あるいは、たばこ添加物は、たばこ香味液と、抽出工程（Ｓ１）で得られたたばこ残渣との混合物を、乾燥させ、パウダー状に粉砕することにより得られたたばこパウダーであってもよい。たばこパウダーは、たばこ材料（例えば、除骨葉や葉たばこ）に添加することにより、たばこ材料の香味を増強することができる。
　あるいは、たばこ添加物は、たばこ香味液と、抽出工程（Ｓ１）で得られたたばこ残渣との混合物を、乾燥させ、パウダー状に粉砕し、得られたパウダーを水に懸濁させることにより得られたたばこスラリーであってもよい。たばこスラリーは、たばこ材料（例えば、除骨葉や葉たばこ）に添加することにより、たばこ材料の香味を増強することができる。
　たばこ添加物は、必要に応じて、バインダー、ｐＨ調整剤、防腐剤、酸化防止剤などの添加剤を含んでいてもよい。
　＜４．香味吸引器＞
　上述の「たばこ香味液」または上述の「たばこ添加物」は、任意のたばこ製品に組み込むことができる。典型的な例として、上述の「たばこ香味液」または上述の「たばこ添加物」は、燃焼型香味吸引器や加熱型香味吸引器などの香味吸引器に組み込むことができる。すなわち、別の側面によれば、上述の「たばこ香味液」または上述の「たばこ添加物」を含む香味吸引器が提供される。
　上述の「たばこ香味液」または上述の「たばこ添加物」は、たばこ製品をユーザが使用した際に、増強した香味を味わうことができれば、たばこ製品の任意の位置に組み込むことができる。
　燃焼型香味吸引器の例として、シガレット、パイプ、キセル、葉巻、またはシガリロなどが挙げられる。燃焼型香味吸引器の一例、すなわち典型的な構成のシガレットを、図３に示す。
　図３に示す燃焼型香味吸引器１は、
　たばこ充填材２ａとたばこ充填材２ａの周囲を巻装するたばこ巻紙２ｂとを含むたばこロッド２と、
　濾材３ａと濾材３ａの周囲に巻かれたプラグラッパー３ｂとを含むフィルタ３と、
　たばこロッド２とフィルタ３とを接続するようにたばこロッド２とフィルタ３上に巻かれたチップペーパー４と
を含む。
　たばこロッド２は、たばこ刻やたばこ成形体などのたばこ充填材２ａを含む。たばこロッドは、通常のシガレットと同様、例えば、５～１０ｍｍの直径および４０～８０ｍｍの長さを有することができる。
　フィルタ３は、単一の濾材３ａからなるフィルタ、いわゆるプレーンフィルタである。濾材３ａは、通常のシガレットと同様、アセテートトウなどの濾材により構成することができる。フィルタ３は、たばこロッド２とほぼ同じ直径を有し、長さは、通常のシガレットと同様、例えば１５～４０ｍｍであり得る。プラグラッパー３ｂは、１０～１００μｍの厚さであり得、その通気性の有無は問わないが、通気性を有する紙を使用するのが一般的である。
　チップペーパー４は、プラグラッパー３ｂの全体とたばこ巻紙２ｂの一部とを覆うように、接着剤で接着されている。チップペーパー４は、例えば、たばこロッドの軸方向の長さ（幅）が２０～５０ｍｍ、厚さが１０～１００μｍであり得る。通常のシガレットと同様、チップペーパー４には、通気用の小開孔（ベンチレーション孔）がシガレットの円周方向に沿って一列、複数列若しくは不規則に多数穿設されていてもよい。
　図３に示す燃焼型香味吸引器１の場合、上述の「たばこ香味液」や上述の「たばこ添加物」は、例えば、たばこ充填材２ａまたは濾材３ａに組み込むことができる。
　次に、加熱型香味吸引器の例について説明する。加熱型香味吸引器の例として、
　炭素熱源の燃焼熱でたばこ充填材を加熱する炭素熱源型吸引器（例えばＷＯ２００６／０７３０６５を参照）；
　たばこ充填材を含むたばこスティックと、たばこスティックを電気加熱するための加熱デバイスとを備えた電気加熱型吸引器（例えばＷＯ２０１０／１１０２２６を参照）；または
　液状のエアロゾル源をヒータにより加熱してエアロゾルを発生させ、エアロゾルとともにたばこ充填材由来の香味を吸引する液体霧化型吸引器（例えばＷＯ２０１５／０４６３８５を参照）
などが挙げられる。
　以下に、加熱型香味吸引器の一例を、図４～６を参照して説明する。図４は、加熱型香味吸引器の一例を示す斜視図である。図５は、たばこスティックの内部構造を示す図である。図６は、エアロゾル生成装置の内部構造を示す図である。
　図４に示すとおり、加熱型香味吸引器１００は、
　たばこ充填材とエアロゾル源とを含むたばこスティック１１０と、
　たばこスティック１１０を着脱可能に装着するエアロゾル生成装置１２０であって、たばこスティック１１０を加熱してエアロゾル源からエアロゾルを発生させるとともに、エアロゾルの作用によりたばこ充填材から香味成分を放出させるエアロゾル生成装置１２０と
を有する。
　たばこスティック１１０は、交換可能なカートリッジであり、長手方向に沿って延びる柱状形状を有する。たばこスティック１１０は、エアロゾル生成装置１２０に挿入された状態で加熱されることによってエアロゾルおよび香味成分を発生するように構成されている。
　図５に示すとおり、たばこスティック１１０は、充填物１１１と、充填物１１１を巻装する第１巻紙１１２とを含む基材部１１Ａと、基材部１１Ａとは反対側の端部を形成する吸口部１１Ｂとを有する。基材部１１Ａと吸口部１１Ｂは、第２巻紙１１３によって連結されている。
　吸口部１１Ｂは、紙管部１１４と、フィルタ部１１５と、紙管部１１４とフィルタ部１１５との間に配置された中空セグメント部１１６とを有する。紙管部１１４は、紙を円筒形に巻いて形成された紙管であり、内側は空洞である。フィルタ部１１５は、アセテートトウなどの濾材を含む。中空セグメント部１１６は、１つ又は複数の中空チャネルを有する充填層を含む。フィルタ部１１５の濾材と中空セグメント部１１６の充填層とは、プラグラッパー１１７で覆うことにより連結されている。充填層は、繊維から構成され、繊維の充填密度が高いため、吸引時は、空気やエアロゾルは中空チャンネルのみを流れることになり、充填層内はほとんど流れない。たばこスティック１１０において、フィルタ部１１５でのエアロゾル成分の濾過による減少を少なくしたいときに、フィルタ部１１５の長さを短くして中空セグメント部１１６で置き換えることはエアロゾルのデリバリー量を増大させるために有効である。
　吸口部１１Ｂは３つのセグメントから構成されているが、吸口部１１Ｂは１つ又は２つのセグメントから構成されていてもよいし、４つ又はそれ以上のセグメントから構成されていてもよい。例えば、中空セグメント部１１６を省略し、紙管部１１４とフィルタ部１１５を互いに隣接配置して吸口部１１Ｂを形成することもできる。
　たばこスティック１１０の長手方向の長さは、４０～９０ｍｍであることが好ましく、５０～７５ｍｍであることがより好ましく、５０～６０ｍｍであることがさらに好ましい。たばこスティック１１０の円周は１５～２５ｍｍであることが好ましく、１７～２４ｍｍであることがより好ましく、２０～２３ｍｍであることがさらに好ましい。また、たばこスティック１１０の長手方向において、基材部１１Ａの長さは２０ｍｍ、紙管部１１４の長さは２０ｍｍ、中空セグメント部１１６の長さは８ｍｍ、フィルタ部１１５の長さは７ｍｍであってよいが、これら個々のセグメントの長さは、製造適性、要求品質等に応じて、適宜変更できる。
　充填物１１１は、たばこ充填材とエアロゾル源とを含む。エアロゾル源は、所定温度で加熱されてエアロゾルを発生する。エアロゾル源として、例えば、グリセリン、プロピレングリコール、トリアセチン、１，３－ブタンジオール、及びこれらの混合物を挙げることができる。充填物１１１中のエアロゾル源の含有量は、特に限定されず、十分な量のエアロゾルの発生と、良好な香喫味の付与の観点から、通常５質量％以上であり、好ましくは１０質量％以上であり、また、通常５０質量％以下であり、好ましくは２０質量％以下である。
　たばこ充填材は、上記で説明したとおり、例えば、たばこ刻の形態またはたばこ成形体の形態を有する。たばこ充填材は、たばこ刻の形態を有する場合、葉たばこ（すなわち熟成済たばこ葉）を、例えば０．８～１．２ｍｍの幅に刻むことにより得られたたばこ刻の形態を有していてもよい。あるいは、たばこ充填材は、シートたばこの形態を有する場合、シートたばこを、例えば０．８～１．２ｍｍの幅に刻むことにより得られた細長いシートたばこの形態を有していてもよいし、あるいは、シートたばこを刻まずにギャザー加工することにより得られた波形のシートたばこの形態を有していてもよい。
　たばこスティック１１０における充填物１１１の含有量は、基材部１１Ａが円周２２ｍｍ、長さ２０ｍｍの場合、例えば、２００～４００ｍｇであり、２５０～３２０ｍｇであることが好ましい。充填物１１１の水分含有量は、例えば、８～１８質量％であり、１０～１６質量％であることが好ましい。このような水分含有量であると、巻染みの発生を抑制し、基材部１１Ａの製造時の巻上適性を良好にする。
　第１巻紙１１２、第２巻紙１１３、およびプラグラッパー１１７は、それぞれ、シガレットで使用されるたばこ巻紙、チップペーパー、およびプラグラッパーと同じものを使用することができる。
　図５に示すたばこスティック１１０の場合、上述の「たばこ香味液」や上述の「たばこ添加物」は、例えば、充填物１１１またはフィルタ部１１５の濾材に組み込むことができる。
　図６に示すとおり、エアロゾル生成装置１２０は、たばこスティック１１０を挿入可能な挿入孔１３０を有する。すなわち、エアロゾル生成装置１２０は、挿入孔１３０を構成する内側筒部材１３２を有する。内側筒部材１３２は、例えばアルミニウムやステンレス（ＳＵＳ）のような熱伝導部材によって構成されていてよい。
　また、エアロゾル生成装置１２０は、挿入孔１３０を塞ぐ蓋部１４０を有していてよい。蓋部１４０は、挿入孔１３０を塞いだ状態と、挿入孔１３０を露出させた状態（図４参照）との間をスライド可能に構成されている。
　エアロゾル生成装置１２０は、挿入孔１３０に連通する空気流路１６０を有していてよい。空気流路１６０の一端は、挿入孔１３０に連結されており、空気流路１６０の他端は、挿入孔１３０とは別のところでエアロゾル生成装置１２０の外部（外気）に連通している。
　エアロゾル生成装置１２０は、空気流路１６０の、外気に連通する側の端部を覆う蓋部１７０を有していてよい。蓋部１７０は、空気流路１６０の、外気に連通する側の端部を覆った状態にすることもできるし、あるいは、空気流路１６０を露出させた状態にすることもできる。
　蓋部１７０は、空気流路１６０を覆った状態であっても空気流路１６０に気密に閉塞することはない。すなわち、蓋部１７０が空気流路１６０を覆った状態であっても、蓋部１７０付近を介して空気流路１６０内に外気が流入可能に構成されている。
　ユーザは、エアロゾル生成装置１２０にたばこスティック１１０を挿入した状態で、たばこスティック１１０の一端部、具体的には、図５に示される吸口部１１Ｂを咥え、吸引動作を行う。ユーザの吸引動作により、空気流路１６０に外気が流入する。空気流路１６０内に流入した空気は、挿入孔１３０内のたばこスティック１１０を通って、ユーザの口腔内に導かれる。
　エアロゾル生成装置１２０は、空気流路１６０内又は空気流路１６０を構成する壁部の外面に、温度センサを有していてよい。温度センサは、例えば、サーミスタや熱電対等であってよい。ユーザがたばこスティック１１０の吸口部１１Ｂを吸引すると、空気流路１６０内を蓋部１７０側からヒータ３０側に向かって流れる空気の影響で、空気流路１６０の内部温度又は空気流路１６０を構成する壁部の温度が低下する。温度センサは、この温度低下を測定することによってユーザの吸引動作を検知することができる。
　エアロゾル生成装置１２０は、バッテリ１０と、制御ユニット２０と、ヒータ３０と、を有する。バッテリ１０は、エアロゾル生成装置１２０で用いる電力を蓄積する。バッテリ１０は、充放電可能な二次電池であってよい。バッテリ１０は、例えばリチウムイオン電池であってよい。
　ヒータ３０は、内側筒部材１３２の周りに設けられていてよい。ヒータ３０を収容する空間と、バッテリ１０を収容する空間は、隔壁１８０によって互いに分離されていてよい。これにより、ヒータ３０により加熱された空気が、バッテリ１０を収容する空間内に流入することを抑制することができる。したがって、バッテリ１０の温度上昇を抑制することができる。
　ヒータ３０は、柱状のたばこスティック１１０の外周を加熱可能な筒形状であることが好ましい。ヒータ３０は、例えばフィルムヒータであってよい。フィルムヒータは、一対のフィルム状の基板と、一対の基板の間に挟まれた抵抗発熱体とを有していてよい。フィルム状の基板は、耐熱性及び電気絶縁性に優れた材料から作られることが好ましく、典型的には、ポリイミドから作られる。抵抗発熱体は、銅、ニッケル合金、クロム合金、ステンレス、白金ロジウム等の金属材料の１つ又は２つ以上から作られることが好ましく、例えば、ステンレス製の基材によって形成され得る。さらに、抵抗発熱体はフレキシブルプリント回路（ＦＰＣ）によって電源と接続するために接続部位及びそのリード部に銅メッキを施してもよい。
　好ましくは、熱収縮チューブが、ヒータ３０の外側に設けられていてよい。熱収縮チューブは、熱により半径方向に収縮するチューブであり、例えば熱可塑性エラストマによって構成されている。熱収縮チューブの収縮作用により、ヒータ３０が内側筒部材１３２に押し付けられる。これにより、ヒータ３０と内側筒部材１３２の密着性が高まるので、ヒータ３０からたばこスティック１１０への内側筒部材１３２を介した熱の伝導性が高まる。
　エアロゾル生成装置１２０は、ヒータ３０の半径方向の外側、好ましくは熱収縮チューブの外側に、筒状の断熱材を有していてもよい。断熱材は、ヒータ３０の熱を遮断することによって、エアロゾル生成装置１２０の筐体外面が過度な高温に達するのを防止する役割を果たし得る。断熱材は、例えば、シリカエアロゲル、カーボンエアロゲル、アルミナエアロゲル等のエアロゲルから作られることができる。断熱材としてのエアロゲルは、典型的には、断熱性能が高くかつ製造コストが比較的低いシリ力エアロゲルであってよい。ただし、断熱材は、グラスウールやロックウール等の繊維系断熱材であってもよいし、ウレタンフォームやフェノールフォームの発泡系断熱材であってもよい。或いは、断熱材は真空断熱材であってもよい。
　断熱材は、たばこスティック１１０に面する内側筒部材１３２と、断熱材の外側の外側筒部材１３４との間に設けられていてよい。外側筒部材１３４は、例えばアルミニウムやステンレス（ＳＵＳ）のような熱伝導部材によって構成されていてよい。断熱材は、密閉された空間内に設けられることが好ましい。
　制御ユニット２０は、制御基板、ＣＰＵ、及びメモリ等を含んでいてよい。また、エアロゾル生成装置１２０は、制御ユニット２０による制御の下でユーザに各種情報を報知するための通知部を有していてもよい。通知部は、例えばＬＥＤのような発光素子もしくは振動素子、又はこれらの組み合わせであってよい。
　制御ユニット２０は、ユーザの起動要求を検知したら、バッテリ１０からヒータ３０への電力供給を開始する。ユーザの起動要求は、例えば、ユーザによる押しボタンやスライド式スイッチの操作や、ユーザの吸引動作によって為される。ユーザの起動要求は、押しボタン１５０の押下によって為されてもよい。より具体的には、ユーザの起動要求は、蓋部１４０が開いた状態での押しボタン１５０の押下によって為されてもよい。或いは、ユーザの起動要求は、ユーザの吸引動作の検知によって為されてもよい。ユーザの吸引動作は、例えば前述したような温度センサによって検知できる。
　＜５．好ましい実施形態＞
　以下に、好ましい実施形態をまとめて示す。
　［Ａ１］　たばこ材料から前記たばこ材料に含まれる水溶性成分を水性溶媒で抽出して、たばこ抽出液を得ることと、
　酵母を前記たばこ抽出液中で培養して、酵母含有培養液を得ることと、
　前記酵母含有培養液に含有される前記酵母から、有機溶媒を含む溶出溶媒を用いて、前記酵母の菌体内に含まれる有用成分の溶出を行って、前記有用成分と、培養後の前記たばこ抽出液とを含むたばこ香味液を得ることと
を含む、たばこ香味液の製造方法。
　［Ａ２］　前記たばこ香味液を得ることが、
　前記酵母含有培養液と、有機溶媒を含む溶出溶媒とを混合し、得られた混合物に含有される前記酵母から、前記酵母の菌体内に含まれる有用成分を、前記混合物の液体部分に溶出させて、有用成分溶出液を得ること
により行われる［Ａ１］に記載の方法。
　［Ａ３］　前記たばこ香味液を得ることが、
　前記酵母含有培養液と、有機溶媒を含む溶出溶媒とを混合し、得られた混合物に含有される前記酵母から、前記酵母の菌体内に含まれる有用成分を、前記混合物の液体部分に溶出させて、有用成分溶出液を得ることと、
　前記有用成分溶出液から前記酵母を除去して、酵母フリーの有用成分溶出液を得ること
により行われる［Ａ１］に記載の方法。
　［Ａ４］　前記たばこ香味液を得ることが、
　前記酵母含有培養液を、前記酵母と前記たばこ抽出液とに分離することと、
　分離された前記酵母と、有機溶媒を含む溶出溶媒とを混合し、得られた混合物に含有される前記酵母から、前記酵母の菌体内に含まれる有用成分を、前記混合物の液体部分に溶出させて、有用成分溶出液を得ることと、
　前記有用成分溶出液と、分離された前記たばこ抽出液とを混合して、有用成分含有液を得ること
により行われる［Ａ１］に記載の方法。
　［Ａ５］　前記たばこ香味液を得ることが、
　前記酵母含有培養液を、前記酵母と前記たばこ抽出液とに分離することと、
　分離された前記酵母と、有機溶媒を含む溶出溶媒とを混合し、得られた混合物に含有される前記酵母から、前記酵母の菌体内に含まれる有用成分を、前記混合物の液体部分に溶出させて、有用成分溶出液を得ることと、
　前記有用成分溶出液から前記酵母を除去して、酵母フリーの有用成分溶出液を得ることと、
　前記酵母フリーの有用成分溶出液と、分離された前記たばこ抽出液とを混合して、酵母フリーの有用成分含有液を得ること
により行われる［Ａ１］に記載の方法。
　［Ａ６］　前記溶出が、前記酵母含有培養液と前記溶出溶媒との混合物を撹拌することにより行われる［Ａ２］または［Ａ３］に記載の方法。
　［Ａ７］　前記溶出が、前記酵母含有培養液と前記溶出溶媒との混合物を加熱することにより行われる［Ａ２］または［Ａ３］に記載の方法。
　［Ａ８］　前記溶出溶媒は、前記酵母含有培養液と前記溶出溶媒との混合液中の前記有機溶媒の濃度が、５０体積％以上、好ましくは５０～９５体積％、より好ましくは６０～９５体積％になる量で、前記酵母含有培養液に添加される［Ａ２］、［Ａ３］、［Ａ６］または［Ａ７］に記載の方法。
　［Ａ９］　前記溶出が、前記酵母と前記溶出溶媒との混合物を撹拌することにより行われる［Ａ４］または［Ａ５］に記載の方法。
　［Ａ１０］　前記溶出が、前記酵母と前記溶出溶媒との混合物を加熱することにより行われる［Ａ４］または［Ａ５］に記載の方法。
　［Ａ１１］　前記溶出溶媒は、前記酵母と前記溶出溶媒との混合物中の前記有機溶媒の濃度が、５０体積％以上、好ましくは５０～１００体積％、より好ましくは６０～１００体積％になる量で、前記酵母に添加される［Ａ４］、［Ａ５］、［Ａ９］または［Ａ１０］に記載の方法。
　［Ａ１２］　前記たばこ材料がたばこ刻である［Ａ１］～［Ａ１１］の何れか１に記載の方法。
　［Ａ１３］　前記水性溶媒が、水または含水エタノール、好ましくは水、より好ましくは２０～７０℃の水である［Ａ１］～［Ａ１２］の何れか１に記載の方法。
　［Ａ１４］　前記酵母が、ロドトルラ（Rhodotorula）属の酵母、キサントフィロマイセス（Xanthophyllomyces）属の酵母、ヤロウィア（Yarrowia）属の酵母、リポマイセス（Lipomyces）属の酵母、サッカロマイセス（Saccharomyces）属の酵母、サイバーリンドネラ（Cyberlindnera）属の酵母、およびウィッカーハモマイセス（Wickerhamomyces）属の酵母からなる群より選択される少なくとも１種類の酵母である［Ａ１］～［Ａ１３］の何れか１に記載の方法。
　［Ａ１５］　前記溶出溶媒が、有機溶媒、または有機溶媒と水との混合物である［Ａ１］～［Ａ１４］の何れか１に記載の方法。
　［Ａ１６］　前記有機溶媒が、水と混和性を有する有機溶媒、好ましくは水と混和性を有するアルコールである［Ａ１］～［Ａ１５］の何れか１に記載の方法。
　［Ａ１７］　前記溶出溶媒が、水と混和性を有するアルコール、またはその含水アルコールである［Ａ１］～［Ａ１６］の何れか１に記載の方法。
　［Ａ１８］　前記有機溶媒が、１０～１４．５のＳＰ値を有する有機溶媒、好ましくは、１０～１４．５のＳＰ値を有するアルコール、より好ましくは、エタノール、イソプロパノール、メタノールまたはブタノール、更に好ましくは、エタノールまたはイソプロパノール、最も好ましくはエタノールである［Ａ１］～［Ａ１７］の何れか１に記載の方法。
　［Ａ１９］　前記溶出溶媒が、エタノールまたは含水エタノールである［Ａ１］～［Ａ１８］の何れか１に記載の方法。
　［Ａ２０］　前記たばこ香味液から前記有機溶媒を除去することを更に含む［Ａ１］～［Ａ１９］の何れか１に記載の方法。
　［Ａ２１］　前記有用成分が、香味寄与成分である［Ａ１］～［Ａ２０］の何れか１に記載の方法。
　［Ａ２２］　前記香味寄与成分が、カロテノイド、脂肪酸、中性脂肪（すなわち、脂肪酸のグリセリンエステル）、酢酸エステル、脂肪酸エステル、有機酸、および高級アルコール（例えば、炭素数８～２２のアルコール）からなる群より選択される少なくとも１種類の成分である［Ａ１］～［Ａ２１］の何れか１に記載の方法。
　［Ｂ１］　［Ａ１］～［Ａ２２］の何れか１に記載の方法により製造されるたばこ香味液。
　［Ｂ２］　前記たばこ香味液が、［Ａ２］に記載される有用成分溶出液である［Ｂ１］に記載のたばこ香味液。
　［Ｂ３］　前記たばこ香味液が、［Ａ３］に記載される酵母フリーの有用成分溶出液である［Ｂ１］に記載のたばこ香味液。
　［Ｂ４］　前記たばこ香味液が、［Ａ４］に記載される有用成分含有液である［Ｂ１］に記載のたばこ香味液。
　［Ｂ５］　前記たばこ香味液が、［Ａ５］に記載される酵母フリーの有用成分含有液である［Ｂ１］に記載のたばこ香味液。
　［Ｃ１］　［Ａ１］～［Ａ２２］の何れか１に記載の方法により製造されるたばこ香味液と、
　［Ａ１］～［Ａ２２］の何れか１に記載の方法において前記たばこ抽出液を得る際に得られるたばこ残渣と
を含むたばこ添加物。
　［Ｃ２］　［Ａ１］～［Ａ２２］の何れか１に記載の方法により製造されるたばこ香味液と、
　［Ａ１］～［Ａ２２］の何れか１に記載の方法において前記たばこ抽出液を得る際に得られるたばこ残渣と
の混合物を乾燥させることにより得られる生成物である［Ｃ１］に記載のたばこ添加物。
　［Ｃ３］　［Ａ１］～［Ａ２２］の何れか１に記載の方法により製造されるたばこ香味液と、
　［Ａ１］～［Ａ２２］の何れか１に記載の方法において前記たばこ抽出液を得る際に得られるたばこ残渣と
の混合物を成形することにより得られるたばこ成形体である［Ｃ１］に記載のたばこ添加物。
　［Ｃ４］　［Ａ１］～［Ａ２２］の何れか１に記載の方法により製造されるたばこ香味液と、
　［Ａ１］～［Ａ２２］の何れか１に記載の方法において前記たばこ抽出液を得る際に得られるたばこ残渣と
の混合物を、乾燥させ、パウダー状に粉砕することにより得られるたばこパウダーである［Ｃ１］に記載のたばこ添加物。
　［Ｃ５］　［Ａ１］～［Ａ２２］の何れか１に記載の方法により製造されるたばこ香味液と、
　［Ａ１］～［Ａ２２］の何れか１に記載の方法において前記たばこ抽出液を得る際に得られるたばこ残渣と
の混合物を、乾燥させ、パウダー状に粉砕し、得られたパウダーを水に懸濁させることにより得られるたばこスラリーである［Ｃ１］に記載のたばこ添加物。
　［Ｄ１］　［Ｂ１］～［Ｂ５］の何れか１に記載のたばこ香味液を含む香味吸引器。
　［Ｄ２］　［Ｃ１］～［Ｃ５］の何れか１に記載のたばこ添加物を含む香味吸引器。
　［Ｄ３］　前記香味吸引器が燃焼型香味吸引器である［Ｄ１］または［Ｄ２］に記載の香味吸引器。
　［Ｄ４］　前記香味吸引器が加熱型香味吸引器である［Ｄ１］または［Ｄ２］に記載の香味吸引器。
　［実施例１］
　実施例１では、第１実施形態の方法の溶出工程（Ｓ４）において酵母が沈殿することを確認した。
　１－１．方法
　第１実施形態の方法に従って、抽出工程（Ｓ１）、培養工程（Ｓ２）、および溶出工程（Ｓ４）の溶出溶媒の添加を行った。
　抽出工程（Ｓ１）
　黄色種の葉たばこを粉砕し、「たばこ材料」として使用した。黄色種の葉たばこの刻（１００ｇ）を粉砕器で１００μｍ以下のサイズまで粉砕し、６０℃の水６００ｍＬを加え、振盪（２００ｒｐｍ・２時間）した。これにより、葉たばこに含まれる水溶性成分を抽出した。その後、ろ過により固液分離した。これにより、たばこ抽出液およびたばこ残渣を得た。
　培養工程（Ｓ２）
　得られたたばこ抽出液３ｍＬに、Yarrowia属の酵母（Yarrowia lipolytica）を１０5 細胞／ｍＬの濃度になるように添加し、酵母をたばこ抽出液中で培養した。培養は、好気条件下において、２８℃で２４時間にわたって、振盪培養（２４０ｒｐｍ）により行った。培養後に得られた「酵母とたばこ抽出液との混合物」を「酵母含有培養液」と呼ぶ。
　溶出工程（Ｓ４）の溶出溶媒の添加
　培養開始から２４時間後、酵母含有培養液３ｍＬに、溶出溶媒としてエタノール７ｍＬを添加した。具体的には、エタノールは、酵母含有培養液とエタノールとの混合液中のエタノールの濃度が７０体積％になる量で添加した。
　比較例として、通常の酵母生育培地中の酵母に、溶出溶媒としてエタノールを添加した。具体的には、溶出溶媒は、酵母生育培地とエタノールとの混合液中のエタノールの濃度が７０体積％になる量で添加した。
　１－２．結果
　溶出溶媒の添加後の酵母の様子を図７に示す。図７において、右側の写真は本発明の例を示し、左側の写真は比較例を示す。本発明の例では、たばこ抽出液中の水溶性タンパク質が不溶化し、これにより、不溶化タンパク質と酵母の凝集沈殿物が形成され、沈殿物がペレット化した。一方、比較例では、酵母は凝集沈殿物を形成しなかった。
　これらの結果から、第１実施形態の方法は、酵母細胞が、溶出工程（Ｓ４）で不溶化タンパク質と一緒に凝集沈殿物を形成するため、その後の酵母除去工程（Ｓ５）でたばこ抽出液から酵母を容易に除去できることが分かる。
　［実施例２］
　実施例２では、第１実施形態の方法に従って、脂肪酸生産酵母を用いてたばこ香味液を調製し、たばこ香味液中の脂肪酸の量が増加していることを確認した。
　２－１．方法
　抽出工程（Ｓ１）
　実施例１に記載の抽出工程（Ｓ１）と同じ方法に従って、たばこ抽出液およびたばこ残渣を得た。
　培養工程（Ｓ２）
　得られたたばこ抽出液３ｍＬに、Yarrowia属の酵母（Yarrowia lipolytica）を１０5 細胞／ｍＬの濃度になるように添加し、酵母をたばこ抽出液中で培養した。培養は、好気条件下において、２８℃で４８時間にわたって、振盪培養（２４０ｒｐｍ）により行った。培養後に得られた「酵母とたばこ抽出液との混合物」を「酵母含有培養液」と呼ぶ。
　溶出工程（Ｓ４）
　培養開始から４８時間後、酵母含有培養液３ｍＬに、溶出溶媒として、エタノール、含水エタノール、または水の何れかを添加した。具体的には、溶出溶媒は、酵母含有培養液と溶出溶媒との混合液中のエタノールの濃度が０体積％、５０体積％、７０体積％、または８５体積％になる量で添加した。
　得られた混合物を、室温（２５℃）で３０分間にわたって攪拌した（１２０ｒｐｍ）。これにより、酵母が生産した脂肪酸を混合物の液体部分に溶出させて、「有用成分溶出液」を得た。
　酵母除去工程（Ｓ５）
　得られた有用成分溶出液から酵母を除去して、「酵母フリーの有用成分溶出液」、すなわちたばこ香味液を得た。
　脂肪酸の測定
　得られたたばこ香味液中の脂肪酸の濃度をＧＣ－ＭＳＤを用いて測定した。一方、コントロール１として、たばこ抽出液で培養する前の酵母について、脂肪酸の濃度を同様に測定した。コントロール２として、溶出工程（Ｓ４）の代わりに、酵母をビーズ式ホモジナイザーで破砕し、酵母の菌体に含有される脂肪酸を溶出し、溶出された脂肪酸の濃度を同様に測定した。
　２－２．結果
　脂肪酸濃度の測定結果を図８に示す。図８の結果から、本発明の方法に従って、たばこ抽出液中で脂肪酸生産酵母を培養し、酵母の菌体から脂肪酸成分をたばこ抽出液に溶出させると、脂肪酸成分を増強したたばこ抽出液（すなわち、たばこ香味液）を製造できることが分かる。
　酵母が生産した脂肪酸を分析したところ、オレイン酸およびリノール酸が多かった。また、溶出溶媒のエタノール濃度は５０体積％以上であると、脂肪酸の溶出効率が高く、溶出溶媒のエタノール濃度が７０体積％の場合に、脂肪酸の溶出効率が最も高かった。
　また、本発明の方法に従って得られたたばこ香味液に含まれる脂肪酸の濃度は、コントロール２（ビーズ破砕）で測定された脂肪酸の濃度と同等であった。この結果は、本発明の方法が、酵母の菌体を破砕することなく、簡便な方法で、酵母の菌体内に含まれる脂肪酸を溶出できることを示す。
　［実施例３］
　実施例３では、第２実施形態の方法に従って、カロテノイド生産酵母を用いてたばこ香味液を調製し、たばこ香味液中のカロテノイドの量が増加していることを確認した。
　３－１．方法
　抽出工程（Ｓ１）
　実施例１に記載の抽出工程（Ｓ１）と同じ方法に従って、たばこ抽出液およびたばこ残渣を得た。
　培養工程（Ｓ２）
　得られたたばこ抽出液１００ｍＬに、Rhodotorula属の酵母（Rhodotorula toruloides）を１０5 細胞／ｍＬの濃度になるように添加し、酵母をたばこ抽出液中で培養した。培養は、好気条件下において、２８℃で１４４時間にわたって、振盪培養（２４０ｒｐｍ）により行った。培養後に得られた「酵母とたばこ抽出液との混合物」を「酵母含有培養液」と呼ぶ。
　分離工程（Ｓ３）
　培養開始から１４４時間後、酵母含有培養液を、遠心分離によりたばこ抽出液と酵母の沈殿物とに分離した。
　溶出工程（Ｓ４）
　酵母含有培養液８ｍＬから分離した酵母の沈殿物に、溶出溶媒として、エタノール、含水エタノール、または水の何れかを４ｍＬ添加した。添加したエタノールの濃度は、０体積％、７０体積％、または１００体積％であった。
　得られた混合物を、９０℃で１時間にわたって加熱した。これにより、酵母が生産したカロテノイドを混合物の液体部分に溶出させて、「有用成分溶出液」を得た。
　酵母除去工程（Ｓ５）
　得られた有用成分溶出液から酵母を除去して、「酵母フリーの有用成分溶出液」を得た。
　混合工程（Ｓ６）
　得られた酵母フリーの有用成分溶出液と、分離工程（Ｓ３）で分離されたたばこ抽出液とを混合して、「酵母フリーの有用成分含有液」、すなわちたばこ香味液を得た。
　カロテノイドの検出
　得られたたばこ香味液中のカロテノイドを、薄膜クロマトグラフィーにより検出した。具体的には、たばこ香味液を濃縮し、得られた濃縮液をアセトンとヘキサンの混合液（アセトン：ヘキサン＝３：７（v/v））に溶かし、得られたサンプルを薄膜クロマトグラフィーで分析した。
　一方、コントロールとして、たばこ抽出液で培養する前の酵母について、カロテノイドを同様に検出した。
　３－２．結果
　エタノールを含む溶出溶媒を用いて溶出工程を行った場合、得られたたばこ香味液は、酵母が生産したカロテノイドの存在により、黄色ないしオレンジ色を示した。一方、エタノールを含まない溶出溶媒を用いて溶出工程を行った場合、得られたたばこ香味液は、無色であった。
　また、薄膜クロマトグラフィーの結果によると、コントロールの場合やエタノールを含まない溶出溶媒を用いて溶出工程を行った場合、カロテノイドを検出できなかったのに対し、エタノールを含む溶出溶媒を用いて溶出工程を行った場合、カロテノイドとして、トルラロジン、キサントフィル、トルレン、およびβ－カロテンを検出することができた。
　溶出溶媒のエタノール濃度は７０体積％以上であると、カロテノイドの溶出効率が高かった。また、溶出は、９０℃で１時間かけて行った以外に、８０℃で１時間かけて行った。８０℃の溶出温度の場合も、９０℃の溶出温度の場合と同様に、カロテノイドを検出することができた。
　これらの結果から、本発明の方法に従って、たばこ抽出液中でカロテノイド生産酵母を培養し、酵母の菌体からカロテノイド成分をたばこ抽出液に溶出させると、カロテノイド成分を増強したたばこ抽出液（すなわち、たばこ香味液）を製造できることが分かる。
　また、これらの結果から、得られたたばこ香味液が、カロテノイドを十分な量で含んでいることが分かる。カロテノイドは、香味寄与成分であるだけでなく、着色成分でもある。したがって、かかるたばこ香味液は、香味吸引器などのたばこ製品で使用した際に、増強した香味をユーザに提供することができる。また、かかるたばこ香味液は、着色されたたばこ抽出液としても有用である。
　［実施例４］
　実施例４では、実施例２で調製されたたばこ香味液をシガレットに組み込み、官能評価を行った。
　４－１．方法
　シガレットの作製
　実施例２で調製された「たばこ香味液」を、実施例２の抽出工程（Ｓ１）で得られた「たばこ残渣」と混合した。得られた混合物を乾燥機でパウダー状になるまで乾燥させて、たばこパウダーを得た。次に、たばこパウダーを６倍重量の水に懸濁して、たばこスラリーを得た。
　たばこスラリーを、「たばこ製品に配合される準備が整ったたばこ刻（以下、たばこ刻という）」に添加した。具体的には、たばこスラリー中のたばこパウダーが、たばこ刻に対して２重量％の量で添加されるように、たばこスラリーをたばこ刻に添加した。たばこスラリーにより加香されたたばこ刻を、２２℃および６０％ＲＨの条件下で２日間調和した。
　加香されたたばこ刻をたばこ充填材として用いて、図３に示すシガレット（シガレットＡという）を作製した。コントロールとして、加香していないたばこ刻を用いて、同様にシガレット（シガレットＢという）を作製した。
　評価方法
　専門評価パネル７名が、２種類のシガレットを喫煙した。
　４－２．結果
　シガレットＡは、シガレットＢと比べて、煙質にとろみがあり差別化され、全体としてニュートラルな印象があり、とろみはあるが煙質が穏やかであった。この結果は、本発明のたばこ香味液が、香味吸引器に組み込まれると、たばこ香味に寄与し、増強した香味をユーザに提供できることを示す。

Claims (11)

  1. 　たばこ材料から前記たばこ材料に含まれる水溶性成分を水性溶媒で抽出して、たばこ抽出液を得ることと、
    　酵母を前記たばこ抽出液中で培養して、酵母含有培養液を得ることと、
    　前記酵母含有培養液に含有される前記酵母から、有機溶媒を含む溶出溶媒を用いて、前記酵母の菌体内に含まれる有用成分の溶出を行って、前記有用成分と、培養後の前記たばこ抽出液とを含むたばこ香味液を得ることと
    を含む、たばこ香味液の製造方法。
  2. 　前記たばこ香味液を得ることが、
    　前記酵母含有培養液と、有機溶媒を含む溶出溶媒とを混合し、得られた混合物に含有される前記酵母から、前記酵母の菌体内に含まれる有用成分を、前記混合物の液体部分に溶出させて、有用成分溶出液を得ること
    により行われる請求項１に記載の方法。
  3. 　前記たばこ香味液を得ることが、
    　前記酵母含有培養液と、有機溶媒を含む溶出溶媒とを混合し、得られた混合物に含有される前記酵母から、前記酵母の菌体内に含まれる有用成分を、前記混合物の液体部分に溶出させて、有用成分溶出液を得ることと、
    　前記有用成分溶出液から前記酵母を除去して、酵母フリーの有用成分溶出液を得ること
    により行われる請求項１に記載の方法。
  4. 　前記たばこ香味液を得ることが、
    　前記酵母含有培養液を、前記酵母と前記たばこ抽出液とに分離することと、
    　分離された前記酵母と、有機溶媒を含む溶出溶媒とを混合し、得られた混合物に含有される前記酵母から、前記酵母の菌体内に含まれる有用成分を、前記混合物の液体部分に溶出させて、有用成分溶出液を得ることと、
    　前記有用成分溶出液と、分離された前記たばこ抽出液とを混合して、有用成分含有液を得ること
    により行われる請求項１に記載の方法。
  5. 　前記たばこ香味液を得ることが、
    　前記酵母含有培養液を、前記酵母と前記たばこ抽出液とに分離することと、
    　分離された前記酵母と、有機溶媒を含む溶出溶媒とを混合し、得られた混合物に含有される前記酵母から、前記酵母の菌体内に含まれる有用成分を、前記混合物の液体部分に溶出させて、有用成分溶出液を得ることと、
    　前記有用成分溶出液から前記酵母を除去して、酵母フリーの有用成分溶出液を得ることと、
    　前記酵母フリーの有用成分溶出液と、分離された前記たばこ抽出液とを混合して、酵母フリーの有用成分含有液を得ること
    により行われる請求項１に記載の方法。
  6. 　前記有機溶媒が、水と混和性を有する有機溶媒である請求項１～５の何れか１項に記載の方法。
  7. 　前記たばこ香味液から前記有機溶媒を除去することを更に含む請求項１～６の何れか１項に記載の方法。
  8. 　前記有用成分が、香味寄与成分である請求項１～７の何れか１項に記載の方法。
  9. 　請求項１～８の何れか１項に記載の方法により製造されるたばこ香味液。
  10. 　請求項１～８の何れか１項に記載の方法により製造されるたばこ香味液と、
    　請求項１～８の何れか１項に記載の方法において前記たばこ抽出液を得る際に得られるたばこ残渣と
    を含むたばこ添加物。
  11. 　請求項９に記載のたばこ香味液または請求項１０に記載のたばこ添加物を含む香味吸引器。
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