WO2018164369A1 - 효소 처리된 무궁화 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선용 조성물 - Google Patents

효소 처리된 무궁화 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선용 조성물 Download PDF

Info

Publication number
WO2018164369A1
WO2018164369A1 PCT/KR2018/000594 KR2018000594W WO2018164369A1 WO 2018164369 A1 WO2018164369 A1 WO 2018164369A1 KR 2018000594 W KR2018000594 W KR 2018000594W WO 2018164369 A1 WO2018164369 A1 WO 2018164369A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
extract
enzyme
treated
skin
composition
Prior art date
Application number
PCT/KR2018/000594
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
이태후
양정은
황은선
박상용
김슬아
박설웅
Original Assignee
(주)에스디생명공학
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by (주)에스디생명공학 filed Critical (주)에스디생명공학
Priority to CN201880001049.5A priority Critical patent/CN108834400B/zh
Publication of WO2018164369A1 publication Critical patent/WO2018164369A1/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9783—Angiosperms [Magnoliophyta]
    • A61K8/9789—Magnoliopsida [dicotyledons]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/64—Proteins; Peptides; Derivatives or degradation products thereof
    • A61K8/66—Enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/08—Anti-ageing preparations
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/10—Preparation or pretreatment of starting material
    • A61K2236/19—Preparation or pretreatment of starting material involving fermentation using yeast, bacteria or both; enzymatic treatment
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/74—Biological properties of particular ingredients
    • A61K2800/78—Enzyme modulators, e.g. Enzyme agonists
    • A61K2800/782—Enzyme inhibitors; Enzyme antagonists
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/80—Process related aspects concerning the preparation of the cosmetic composition or the storage or application thereof
    • A61K2800/805—Corresponding aspects not provided for by any of codes A61K2800/81 - A61K2800/95

Definitions

  • the present invention relates to a composition for improving skin wrinkles, and more particularly to a composition for improving skin wrinkles containing an enzyme-treated rose of sharon as an active ingredient.
  • Skin wrinkles are known to be affected by various factors such as skin moisture content, collagen content, and immunity to the external environment.
  • the most important factors affecting the formation of double wrinkles are collagen production and collagenase, a collagen degrading enzyme. Naze expression and activity.
  • Collagen is present in the dermal layer of the skin and is known as a major ingredient that gives skin elasticity with elastin, which accounts for about 70-80% of the total dry weight of the skin. Collagen is reduced by internal factors such as decreased cellular activity due to natural aging, and biosynthesis is reduced or degradation is accelerated by external factors such as increased stress in various harmful environments or increased free radical species by sunlight. have.
  • ROS reactive oxygen species
  • MAPKs mitogen activated protein kinases
  • ERK extracellular signal-regulated kinase
  • JNK c-Jun amino-terminal kinase
  • AP-1 protein is associated with the activity of matrix metalloproteinase (MMP) gene
  • MMP matrix metalloproteinase
  • Type I collagen is the most abundant protein in the extracellular matrix of connective tissue. Extracellular matrix includes other types of proteins such as type III, V, and VII collagen, elastin, proteoglycans, fibronectin.
  • Controlling the expression level of type I collagen protein is the most important factor in preventing skin photoaging. Irradiation of UVB reduces expression of collagen precursor procollagen in skin fibroblasts through inhibition of the TGF- ⁇ / Smad signaling system. In addition, the TGF- ⁇ 1 signaling system is one of the important factors regulating the synthesis of extracellular matrix in human skin fibroblasts.
  • ROS reactive oxygen species
  • Mugunghwa Hugunghwa; Hibiscus syriacus L.
  • the national flower of Korea is known to have about 200 species in Korea alone. It has been used as a medicinal plant having the efficacy of.
  • Mugunghwa is the national flower of Korea, only the research on the cultivation and breeding of Mugunghwa has been mainly conducted in Korea until now, and various studies of physiological activity using Mugunghwa are insufficient, and in particular, functional cosmetics or foods applicable to life Very few studies have been developed as raw materials.
  • bioconversion technology has the advantage of increasing the functionality of natural products and securing a large amount of potent substances.
  • composition for improving pruritus with herbal extracts' includes Chihwang, Seokchangpo, Yellow and White, Red Ginseng, bamboo Leaf, Licorice, Prunus, Mokeunpi, Kwandonghwa, Janggunpi and Neck and Extract It is disclosed that the composition for improving pruritus containing as an anti-inflammatory effect, moisture moisturizing effect and wrinkle improvement effect, but the effect is the same as the above only by combining the 11 herbal ingredients, the single composition The effect of improving skin wrinkles is not mentioned at all.
  • Mugunghwa as an ingredient of the cosmetic composition, which can be used safely because it is harmless to the human body and easily obtains raw materials, it is used in combination with other plant materials such as Patent Application No. 10-2011-0125087. There was a problem that should be.
  • the present inventors have intensively researched to maximize the skin wrinkle improvement effect of Rose of Sharon and utilize it as a main ingredient of the cosmetic composition, and as a result, human fibroblasts induced by UVB irradiation when the Rose of Rose extract was treated with glycolytic enzymes (human In response to photoaging of dermal fibroblasts (NHDFs), it has been found to have an excellent effect on anti-oxidation, anti-inflammatory and skin wrinkle improvement, thus completing the present invention.
  • human fibroblasts induced by UVB irradiation when the Rose of Rose extract was treated with glycolytic enzymes human In response to photoaging of dermal fibroblasts (NHDFs)
  • the present invention provides a cosmetic composition for improving skin wrinkles comprising a glycolytic enzyme-treated rose of sharon as an active ingredient.
  • extract refers to an extract obtained by extracting a plant, a diluent or concentrate of the extract, a dried product obtained by drying the extract, a crude or purified product of the extract, a mixture thereof, or the like, It includes the extract itself and extracts of all formulations that can be formed using the extract.
  • the extract of the present invention may be preferably prepared and used in the form of a dry powder after extraction.
  • the Rose of Sharon extract can be extracted from the natural, hybrid or cultivated plants of Rose of Sharon, can be extracted from plant tissue culture, preferably from the bark of the stem and root have.
  • the method for preparing the extract may be a conventional extraction method in the art, such as ultrasonic extraction, leaching and reflux extraction.
  • Solvents used for extraction are water, alcohols or mixtures thereof, preferably methanol or ethanol, but are not limited to these.
  • the amount of the extraction solvent may be used 2 to 50 times by weight of the sample, preferably 2 to 20 times.
  • the sample may be left for 1 to 72 hours for leaching in the extraction solvent, preferably for 24 to 48 hours.
  • glycolytic enzyme of the present invention means an enzyme that catalyzes the reaction, and in the present invention, it means an enzyme that decomposes carbohydrates such as cellulose, amylose, tannin, and pectin.
  • examples of the glycolysis enzymes include cellulase, hemicellulase, pectinase, glucosidase, tanase, but not limited thereto. If the enzyme has the activity of breaking down the polysaccharide form of the polymer present in the green light extract is included in the glycolysis enzyme of the present invention.
  • the glycolysis enzyme is one or more enzymes selected from the group consisting of hemicellulase, pectinase, glucosidase, and tanase desirable.
  • the enzymes may be used alone or in combination with these enzymes.
  • the glycolytic enzyme is preferably an enzyme mixed with pectinase and hemicellulase, wherein the preferred mixing ratio is pectinase to hemicellulase 1: 1 to 1: 5 or Pectinase to hemicellulase 1: 1 to 5: 1 is preferred. If the mixing ratio is not satisfied, the content of the active ingredient in the glycolysis-treated rose of Sharon extract is relatively reduced.
  • improve skin wrinkles means skin regeneration, skin elasticity improvement, skin wrinkle prevention or improvement, or skin inflammation improvement.
  • skin aging refers to all diseases caused by an increase in reactive free radicals, and non-limiting examples of the skin aging include wrinkles, sagging of the skin, decrease in elasticity and the like.
  • composition for improving skin condition of the present invention protects DNA, proteins (including lipoproteins) and membrane lipids from oxidative damage with an excellent free radical removal effect.
  • skin regeneration or “improve skin elasticity” or “prevent or improve skin wrinkles” refers to any action that increases the production of collagen or inhibits the breakdown of collagen to increase the total amount of collagen.
  • skin wrinkle refers to the lines produced by the skin decay, can be caused by the cause of genes, the reduction of collagen present in the dermis of the skin, the external environment.
  • preventing or improving skin wrinkles refers to inhibiting or inhibiting the generation of wrinkles on the skin, or alleviating wrinkles already generated.
  • the main functions of skin fibroblasts include the regeneration of damaged skin tissue through extracellular matrix synthesis and proliferation.
  • Extracellular matrix synthesis factors such as photoaging or accumulation of damage caused by free oxygen and cellular aging due to telomeres breakdown They lower the physiological activity of dermal fibroblasts in the dermis.
  • Type I collagen which accounts for more than 95% of the extracellular matrix of the skin, plays a very important part in the physiological activity of fibroblasts through interactions and signal exchanges with cell adhesion molecules and cytoskeleton.
  • the synthesis of is decreased, the amount of collagen in the skin tissue is reduced, thereby reducing the surface tension to reduce the skin elasticity and wrinkles of the skin, as well as reducing the bioactive function, including the proliferation and regeneration of the cells cause a vicious cycle.
  • collagen of dermal fibroblasts can be seen to be directly related to the repair or regeneration of tissue during skin regeneration, skin elasticity, skin wrinkle formation and skin damage.
  • 'MMP' matrix metallo-proteinase
  • composition comprising the glycolysis-treated Mugunghwa extract of the present invention as an active ingredient is characterized by increasing the expression of type I procollagen protein and inhibiting the expression of MMP-1 protein and MMP-3 protein.
  • the composition comprising the enzyme-treated Mugunghwa extract of the present invention reduces the expression of MMP-1 and MMP-3 to reduce cytotoxicity and promote collagen degradation in normal human dermal fibroblasts (NHDF) irradiated with ultraviolet light.
  • NHDF normal human dermal fibroblasts
  • improvement means any action that at least reduces the parameters associated with alleviation or treatment of a condition, such as the degree of symptoms.
  • Enzyme-treated rose of sharon extract contained in the cosmetic composition for improving skin wrinkles of the present invention is effective in improving skin wrinkles by itself, even when used in combination with materials known to be effective in improving skin wrinkles.
  • the effect of improving skin wrinkles can be sustained.
  • the material that is effective in improving the skin wrinkles is not limited to this, chamomile flower extract, rosemary leaf extract, pasqueflower leaf extract, Ersnier extract, ginseng extract, geranium flower extract, ginseng extract, St. Mary's extract, thyme extract, Nettle extract, yarrow extract, clove extract, fennel extract, papaya leaf extract, sunflower extract, eucalyptus extract, and angelica extract.
  • the cosmetic composition of the present invention may further include a water-soluble vitamin, a fat-soluble vitamin, a polymer peptide, a polymer polysaccharide, a sphingolipid and a seaweed extract.
  • the water-soluble vitamins may be any one that can be formulated in cosmetics, but preferably vitamin B1, vitamin B2, vitamin B6, pyridoxine, pyridoxine, vitamin B12, pantothenic acid, nicotinic acid, nicotinic acid amide, folic acid, vitamin C, vitamin H And salts thereof (thiamine hydrochloride, sodium ascorbate salt, etc.) and derivatives (ascorbic acid-2-sodium phosphate salt, ascorbic acid-2-magnesium phosphate salt, etc.) may also be used in the present invention. Included in water-soluble vitamins.
  • the water-soluble vitamin can be obtained by a conventional method such as microbial conversion, microbial culture purification, enzyme method or chemical synthesis.
  • the fat-soluble vitamins may be any one that can be formulated in cosmetics, but preferably vitamin A, carotene, vitamin D2, vitamin D3, vitamin E, and the like, and derivatives thereof (ascorbic palmitate, ascorbic acid stearate). Bin, dipalmitinate, ascorbate, dl-alpha tocopherol acetate, dl-alpha tocopherol vitamin E, DL-pantothenyl alcohol, D-pantotenyl alcohol, pantothenyl ether, etc.) do.
  • the polymer peptide may be any compound that can be formulated in cosmetics, and preferably collagen, hydrolyzed collagen, gelatin, elastin, hydrolyzed elastin, keratin and the like.
  • the polymer peptide can be purified and obtained by a conventional method such as purification method of microbial culture solution, enzyme method or chemical synthesis method, or can be purified and used from natural products such as dermis such as pig or cow and silk fiber of silkworm.
  • the polymer polysaccharide may be any compound as long as it can be blended into cosmetics.
  • hydroxyethyl cellulose, xanthan gum, chondroitin sulfate or a salt thereof (sodium salt, etc.) may be mentioned.
  • chondroitin sulfate or its salt, etc. can be normally purified from a mammal or fish.
  • the sphingolipide may be any compound as long as it can be blended into cosmetics, and preferably, ceramide, phytosphingosine, sphingose sugar lipid, and the like.
  • the sphingolipids can usually be purified from mammals, fish, shellfish, yeasts or plants by conventional methods or obtained by chemical synthesis.
  • the seaweed extract may be any one that can be formulated in cosmetics, but may preferably include brown algae extract, red algae extract, green algae extract, and the like, and calginane, arginic acid, and arginic acid purified from these seaweed extracts.
  • Sodium, potassium arginate and the like are also included in the seaweed extract used in the present invention.
  • Seaweed extract can be obtained by purification from seaweed by conventional methods.
  • the cosmetic of the present invention may be blended with the above essential components, if necessary, with other ingredients normally blended into the cosmetic.
  • blending component examples include oil or fat components, humectants, emollients, ultraviolet absorbers, pH adjusters, flavoring agents, blood circulation accelerators, cooling agents, limiting agents, purified water and the like.
  • fat or oil components examples include ester fats, hydrocarbon fats, silicone fats, fluorine fats, animal fats, and vegetable fats and oils.
  • ester fats and oils examples include glyceryl tri2-ethylhexanoate, cetyl 2-ethylhexanoate, isopropyl myristate, butyl mystinate, isopropyl palmitate, ethyl stearate, octyl palmitate, and isocetyl isostearate, Butyl stearate, ethyl linoleate, isopropyl linoleate, ethyl oleate, isocyanate isocetyl, isostearyl mysterylate, isostearyl palmitate, octylate acid octyldodecyl, isocetyl isostearate, diethyl sebacate, Diisopropyl adipropyl, isoalkyl neopentane, tri (capryl, capric acid) glyceryl, trimethyl ethyl trimethylo
  • hydrocarbon-based oils and fats examples include hydrocarbon-based oils such as squalene, liquid paraffin, alpha-olefin oligomer, isoparaffin, ceresin, paraffin, liquid isoparaffin, polybutene, microcrystalline wax, and vaseline.
  • the silicone-based fats and oils include polymethylsilicone, methylphenylsilicone, methylcyclopolysiloxane, octamethylpolysiloxane, decamethylpolysiloxane, dodecamethylcyclosiloxane, dimethylsiloxane methylcetyloxysiloxane copolymer, dimethylsiloxane methylsteoxysiloxane copolymer, and alkyl.
  • Modified silicone oil amino modified silicone oil and the like.
  • Perfluoro polyether etc. are mentioned as said fluorine-based fats and oils.
  • the animal or plant oils include avocado oil, almond oil, olive oil, sesame oil, rice bran oil, soybean oil, corn oil, rapeseed oil, almond oil, palm kernel oil, palm oil, castor oil, sunflower oil, grape seed oil, cottonseed oil, palm oil, Cucumber nut oil, wheat germ oil, rice germ oil, shea butter, moon sour colostrum, marker demia nut oil, egg yolk oil, tallow, horse oil, mink oil, orange rape oil, jojoba oil, canderry wax, carnauba wax, liquid ranol And animal or plant fats and oils such as hardened castor oil.
  • the moisturizing agent examples include a water-soluble low molecular moisturizer, a fat-soluble molecular moisturizer, a water-soluble polymer, and a fat-soluble polymer.
  • fat-soluble low molecular humectants examples include cholesterol and cholesterol esters.
  • water-soluble polymer examples include carboxyvinyl polymer, polyasparaginate, tragacanth, xanthan gum, methyl cellulose, hydroxymethyl cellulose, hydroxyethyl cellulose, hydroxypropyl cellulose, carboxymethyl cellulose, water soluble chitin, chitosan, and dextrin. Can be mentioned.
  • the fat-soluble polymer examples include polyvinylpyrrolidone eicosene copolymer, polyvinylpyrrolidone hexadecene copolymer, nitrocellulose, dextrin fatty acid ester, polymer silicone, and the like.
  • emollient examples include long-chain acyl glutamic acid cholesteryl ester, hydroxy stearic acid cholesterol, 12-hydroxystearic acid, stearic acid, rosin acid, lanolin fatty acid cholesteryl ester, and the like.
  • Examples of the ultraviolet absorber include paraaminobenzoic acid, ethyl paraaminobenzoate, amyl paraaminobenzoic acid, octyl paraaminobenzoate, ethylene glycol salicylate, phenyl salicylate, octyl salicylate, benzyl salicylate, butylphenyl salicylate, homomentyl salicylate, Cinnamic acid benzyl, paramethoxy cinnamic acid-2-ethoxyethyl, paramethoxy cinnamic acid octyl, diparamethoxy cinnamic acid mono-2-ethylhexane glyceryl, paramethoxy cinnamic acid isopropyl, diisopropyl diisopropyl cinnamic acid ester mixture , Urocanoic acid, ethyl urocanate, hydroxymethoxybenzophenone,
  • pH adjuster examples include citric acid, sodium citrate, malic acid, sodium malate, fmaric acid, sodium fmarate, succinic acid, sodium succinate, sodium hydroxide, sodium monohydrogen phosphate, and the like.
  • Cosmetics prepared by containing the composition of the present invention may take the form of solutions, emulsions, viscous mixtures and the like.
  • the components included in the cosmetic composition of the present invention may include components commonly used in cosmetic compositions in addition to the components as an active ingredient, for example, conventional auxiliaries such as stabilizers, pigments and natural flavors and It may further include a carrier.
  • composition of the present invention can be used in various ways, such as cosmetics or face wash having the effect of improving skin wrinkles.
  • composition of the present invention can be added, for example, skin lotion, skin softener, skin toner, astringent, lotion, milk lotion, moisturizing lotion, nourishing lotion, massage cream, nourishing cream, moisturizing cream, hand cream
  • Cosmetics such as foundations, essences, nutritional essences, packs and the like, soaps, cleansing foams, cleansing lotions, cleansing creams, body lotions, feminine cleansers, hand cleansers, and body cleansers.
  • the formulation of the present invention is a paste, cream or gel
  • animal carriers vegetable fibers, waxes, paraffins, starches, tracantes, cellulose derivatives, polyethylene glycols, silicones, bentonites, silicas, talc or zinc oxide, etc.
  • carrier components can be used as carrier components.
  • lactose When the formulation of the present invention is a powder or a spray, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate or polyamide powder may be used, in particular in the case of a spray, additionally chlorofluorohydrocarbon, propane Propellants such as butane or dimethyl ether.
  • a solvent, solvating agent or emulsifying agent is used as the carrier component, such as water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, propylene glycol, 1 Fatty acid esters of, 3-butylglycol oil, glycerol aliphatic ester, polyethylene glycol or sorbitan.
  • the present invention provides a pharmaceutical composition for improving skin wrinkles comprising a glycolytic enzyme-treated rose of sharon as an active ingredient.
  • the glycolytic enzyme is preferably an enzyme mixed with pectinase and hemicellulase, wherein the preferred mixing ratio is pectinase to hemicellulase 1: 1 to 1: 5 or Pectinase to hemicellulase 1: 1 to 5: 1 is preferred. If the mixing ratio is not satisfied, the content of the active ingredient in the glycolysis-treated rose of Sharon extract is relatively reduced.
  • the glycolysis-treated Mugunghwa extract increases the expression of type I procollagen protein and inhibits the expression of MMP-1 and MMP-3 proteins. do.
  • composition of the present invention may further comprise suitable carriers, excipients and diluents commonly used in the manufacture of pharmaceutical compositions.
  • compositions of the invention may also be used in the form of their pharmaceutically acceptable salts, or may be used alone or in combination with other pharmaceutically active compounds.
  • Carriers, excipients and diluents that may be included in the compositions of the present invention include lactose, dextrose, sucrose, oligosaccharides, sorbitol, mannitol, xylitol, erythritol, maltitol, starch, acacia rubber, alginate, gelatin, calcium phosphate, calcium Silicates, cellulose, methyl cellulose, microcrystalline cellulose, polyvinyl pyrrolidone, water, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate and mineral oil.
  • composition of the present invention diluents or excipients such as fillers, extenders, binders, wetting agents, disintegrating agents, and surfactants are usually used.
  • composition of the present invention is administered directly to the skin in the form of an external preparation for application to the skin in the form of an external preparation for creams, gels, patches, sprays, ointments, warnings, lotions, linens, pastas or cataplasmas. It may be, but is not limited thereto.
  • Preferred dosages of the mixed compositions of the present invention vary depending on the condition and weight of the patient, the extent of the disease, the form of the drug, the route of administration and the duration of administration, and may be appropriately selected by those skilled in the art, preferably 0.01 ⁇ g / ml to 25 It may be administered at a dose of ⁇ g / ml. Topical administration may be administered once a day or may be divided several times.
  • the cosmetic and pharmaceutical compositions of the present invention can be directly used as a composition for improving skin wrinkles because they have an effect on skin wrinkle improvement, antioxidant and anti-inflammatory, and contain other natural extracts effective for skin wrinkle improvement. It is also available in the form of mixing with the ingredients, it is expected to enhance the skin wrinkle improvement effect of the existing materials.
  • the composition comprising the glycolytic enzyme-treated Mugunghwa extract of the present invention as an active ingredient inhibits the expression of MMP-1 and MMP-3 in human dermal fibroblasts and increases the production of type I procollagen, It is effective in preventing the occurrence of skin wrinkles and improving wrinkles of damaged skin.
  • composition of the present invention is excellent in the efficacy of preventing, ameliorating or treating skin aging and skin inflammation.
  • composition of the present invention is a substance derived from natural products, it is not toxic, and does not cause side effects even when applied to the human body, and thus has high utility as a cosmetic, quasi-drug, food or pharmaceutical composition.
  • Figure 1 is a graph showing the effect of glycolysis-treated green light extract and unenzymatic green light extract on cell survival.
  • Figure 2 is a graph comparing the results of Chromatography analysis of the glycolysis-treated green light extract and unenzymatic green light extract.
  • Figure 3 is a graph comparing the radical scavenging activity effect (DPPH assay) of the glycolysis-treated green light extract and unenzymatic green light extract.
  • Figure 4 is a graph comparing the anti-inflammatory activity of the glycolysis-treated green light extract and unenzymatic green light extract.
  • FIG. 5 is a graph comparing the effects of glycolysis-treated Mugunghwa extract and unenzymatic Mugunghwa extract on MMP-1 protein expression in UVB-irradiated human fibroblasts.
  • FIG. 6 is a graph comparing the effects of glycolysis-treated Mugunghwa extract and unenzymatic Mugunghwa extract on the expression of type I procollagen protein in UVB-irradiated human fibroblasts.
  • FIG. 7 is a graph comparing the radical scavenging activity effect (ABTS assay) between the glycolytic enzyme-treated rose of sharon of Example 1 and the rose of sharon, which was treated with the other enzymes of Comparative Examples 2 and 3.
  • FIG. 7 is a graph comparing the radical scavenging activity effect (ABTS assay) between the glycolytic enzyme-treated rose of sharon of Example 1 and the rose of sharon, which was treated with the other enzymes of Comparative Examples 2 and 3.
  • FIG. 8 is a graph comparing the effects of the glycolysis-treated Mugunghwa extract of Example 1 and the Mugunghwa extract treated with other enzymes of Comparative Examples 2 and 3 on the expression of MMP-1 protein in UVB-irradiated human fibroblasts.
  • the enzyme-added solution was placed in a constant temperature water bath and stirred at 60 ° C. for 24 hours to react with the enzyme. After the completion of the reaction, 14% by weight of 100% ethanol was added again, the mixture was extracted with stirring overnight, and the supernatant was lyophilized to be used as an example.
  • the green light extract was prepared in the same manner except that the process of Example 1 was not carried out using an enzyme.
  • the green light extract was prepared in the same manner as in Example 1, except that glucoamylase was used instead of pectinase and hemicellulase mixed in a 1: 1 weight ratio as an enzyme.
  • the green light extract was prepared in the same manner as in Example 1 except that lactase was used instead of pectinase and hemicellulase mixed in a 1: 1 weight ratio as an enzyme.
  • Extract components prepared in Example 1 and Comparative Example 1 were analyzed using the chromatography equipment according to the conditions of Table 1 below.
  • the glycolysis-treated green light extract was 271% at 1, 10, 50, 100, and 250 ⁇ g / ml doses compared to the non-enzymatic green light extract, respectively. It was observed that the antioxidant activity was improved by 136%, 308%, 422%, and 249%, and the levels of these antioxidant effects were observed to be almost equivalent to the positive control arbutin.
  • Enzyme-treated rose of sharon 1 was prepared at concentrations of 1, 10, 50, 100, and 250 ⁇ g / mL, respectively, and dispensed into 96-well plates, mixed with ABTS solution to block light, and reacted for 37 to 10 minutes. The absorbance was then measured at 734 nm using a microplate reader (Molecular Devices FilterMax F5; San Francisco, CA, USA). At this time, the well-known antioxidant arbutin was treated at the same concentration and used as a positive control group, and the antioxidant capacity of the sample was obtained by calculating the absorbance of the no addition group and expressed as a percentage as follows.
  • the green light extract treated with the glycolysis enzyme used in the present invention has a superior radical scavenging activity and almost the same effect as arbutin compared to the green light extract treated with glucoamylase or lactase .
  • DMEM 2 ml of DMEM was added to a 40 mm cell culture dish, and human fibroblasts were seeded at a concentration of about 1.2 ⁇ 10 5 , followed by incubation for 24 hours at 37 ° C. and 5% CO 2 . Thereafter, UVB was irradiated under 144 mJ / cm 2 condition, and then cultured for 3 days by replacing with a medium containing glycolytic enzyme-treated rose of sharon (10, and 100 ⁇ g / ml, respectively) prepared in Example 1. The culture was then harvested and centrifuged at 4 ° C. and 7500 rpm for 5 minutes using MISA-1 and MMP-3 (Human Total MMP-1 kit, R & D Systems, Inc., Minneapolis, MN, USA) changes in protein expression levels were confirmed.
  • MISA-1 and MMP-3 Human Total MMP-1 kit, R & D Systems, Inc., Minneapolis, MN, USA
  • the glycolysis-treated Mugunghwa extract of the present invention can be effectively used for the prevention and improvement of skin wrinkles by effectively inhibiting the expression of MMP-1 and MMP-3 proteins that cause wrinkles could know.
  • Comparative Example 2 and Comparative Example treated with lactase treated with Glycolytic enzyme-treated Mugunghwa extract of Example 1 and glucoamylase in human fibroblasts irradiated with UVB to compare and confirm the activity of the glycolysis enzyme used in the present invention The effect of Mugunghwa extract of 3 on the expression of MMP-1 protein is shown in FIG. From the contents of FIG. 8, it was confirmed that the green light extract treated with the glycolysis enzyme used in the present invention more effectively inhibits the expression of MMP-1 protein than the green light extract treated with glucoamylase or lactase.
  • Human fibroblasts treated with UV radiation at a dose of 144 mJ / cm 2 had a 2.1-fold reduction in the production of type 1 procollagen protein compared to the UV-treated group.
  • the decrease in production of type 1 procollagen protein due to UV irradiation showed a phenomenon of increasing again by the treatment of Mugunghwa extract.
  • the glycolysis-treated Mugunghwa extract treatment group showed a superior increase effect compared to the non-enzyme-treated group, which produced 130% and 177% of type 1 procollagen protein at 10, and 100 ⁇ g / ml doses, respectively.
  • the increase effect was shown (FIG. 6).
  • the composition for improving skin wrinkles comprising the glycolysis-treated Mugunghwa extract of the present invention has an antioxidant effect equivalent to that of arbutin, and acts on TGF- ⁇ / Smad signaling system of type 1 procollagen.
  • TGF- ⁇ / Smad signaling system of type 1 procollagen acts on TGF- ⁇ / Smad signaling system of type 1 procollagen.
  • the composition of the present invention is excellent in preventing, ameliorating or treating skin aging and skin inflammation, and is non-toxic because it is a substance derived from natural products, and does not cause side effects even when applied to the human body, cosmetics, quasi-drugs, food or pharmaceutical compositions. High utilization of furnace.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

본 발명은 당분해 효소 처리된 무궁화 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 주름 개선용 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 조성물은 인간 진피 섬유 아세포들에서 MMP-1 단백질의 발현을 억제하고, 타입 Ⅰ 프로콜라겐의 생성을 증가시킴으로써, 피부 주름의 발생을 예방하고, 손상된 피부의 주름을 개선하는 효능을 나타낸다. 종합적으로, 본 발명의 조성물은 피부 주름을 예방하고 크게 개선시킬 수 있다.

Description

효소 처리된 무궁화 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선용 조성물
본 발명은 피부 주름 개선용 조성물에 관한 것으로, 더욱 구체적으로 효소 처리된 무궁화 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선용 조성물에 관한 것이다.
피부 주름은 피부 수분함량, 콜라겐 함량 및 외부 환경에 대한 면역력 등 여러 가지 요소들에 의해 영향을 받는 것으로 알려져 있으며, 이중 주름의 형성에 가장 큰 영향을 미치는 것은 콜라겐의 생성량 및 콜라겐 분해 효소인 콜라게네이즈의 발현과 활성이다.
콜라겐은 피부 진피층에 존재하는데, 피부 전체 건조 중량의 약 70 내지 80%를 차지하는 엘라스틴과 함께 피부에 탄력을 부여하는 주요 성분으로 알려져 있다. 콜라겐은 자연 노화에 따른 세포활성 저하와 같은 내부 요인에 의해 감소되고, 여러 유해 환경에서의 스트레스 증가나 태양 광선에 의한 활성 산소 종의 증가와 같은 외부 요인에 의하여 생합성이 감소되거나, 분해가 촉진되고 있다.
한편, 활성산소종(reactive oxygen species, ROS)의 과생산은 UVB 노출 환경에서 보고된 바 있고, UVB 노출과 연관된 신호전달 체계는 MAPKs(mitogen activated protein kinases), ERK(extracellular signal-regulated kinase), p38 카이나아제, 및 JNK(c-Jun amino-terminal kinase) 등의 단백질과 관련되어 있는데, NF-B 및 AP-1 전사인자의 발현증가를 유도한다. 또한, AP-1 단백질은 MMP(matrix metalloproteinase) 유전자의 활성과 관련되어 있고, NF-B 단백질은 인터루킨과 같은 전염증 사이토카인(proinflammatory cytokines)의 발현에 영향을 미친다.
노화된 피부에서 콜라겐 및 엘라스틴의 붕괴는 주로 MMP 단백질과 같은 그 분해 효소의 증가된 발현에 의해 야기된다. 또한, 전염증 사이토카인은 콜라겐의 합성을 방해하고, 콜라겐의 붕괴를 촉진시킨다. 타입 I 콜라겐은 연결 조직의 세포외 기질에서 가장 풍부한 단백질이다. 세포외 기질에는 타입 III, V, 및 VII 콜라겐, 엘라스틴, 프로테오글라이칸, 파이브로넥틴과 같은 다른 유형의 단백질을 포함한다.
타입 I 콜라겐 단백질의 발현 수준을 조절하는 것은 피부 광노화를 예방하는데 있어서 가장 중요한 인자이다. UVB의 조사는 TGF-β/Smad 신호전달 체계의 억제를 통해 피부 섬유아세포에서 콜라겐 전구체인 프로콜라겐(procollagen)의 발현을 감소시키게 된다. 또한, TGF-β1 신호전달 체계는 인간 피부 섬유아세포에서 세포외 기질의 합성을 조절하는 중요한 인자의 하나이다.
따라서, AP-1 및 MAPKs 인자에 의해 조절되는 활성산소종(ROS)의 생성, 및 MMPs, ILs, TGF-β, 및 타입 I 프로콜라겐의 발현은 피부 광노화 연구에 있어서 유용한 마커로 작용한다.
이와 같이 콜라겐 감소를 저해하여 피부 주름개선에 효과가 있는 천연물질을 탐색하고자 하는 여러 다양한 시도가 있었다. 콜라겐의 주름개선 효과를 이용하기 위하여 화장품 또는 연고 등과 같은 피부외용제 조성물에 콜라겐을 배합한 제품들이 출시되었으나, 이들 제품들은 콜라겐 자체를 피부 표면에 도포하는 것으로 고분자 물질인 콜라겐의 경피 흡수가 어려워 본질적인 주름개선 효과를 나타낼 수 없었다. 이러한 문제를 해결하기 위하여 콜라겐합성 촉진물질에 대한 관심이 높아졌으며, 종래 알려진 콜라겐합성 촉진물질로는 비타민C, 레티노익산, 형질전환생장인자(transforming growth factor, TGF), 동물태반 유래의 단백질(JP8-231370), 베툴린산(betulinic acid, JP8-208424), 클로렐라 추출물(JP9-40523, JP10-36283, 섬유아세포 증식 촉진작용) 등이 있다. 그러나 상기 물질은 피부 적용시 자극과 발적 등 안전성 문제로 사용량에 제한이 있거나 그 효과가 미미하여 실질적으로 주름개선 효과를 기대할 수 없다는 문제점이 있었다. 따라서 종래 피부 주름 개선용 조성물보다 생체에 안전하고 항산화 효과, 피부 염증개선 효과, 및 주름개선 효과가 높은 새로운 조성물의 개발이 절실히 요구되고 있다.
한편, 우리나라의 국화인 무궁화(Mugunghwa; Hibiscus syriacus L.)는 국내에서만 약 200여종이 있는 것으로 알려져 있으며, 목근피(Hibisci cortex)는 무궁화의 뿌리 및 줄기 껍질부분으로 예로부터 한방에서 소염, 항균 등의 효능을 가진 약용식물로 이용되어 왔다. 하지만, 무궁화가 우리나라의 국화임에도 불구하고 현재까지 국내에서는 무궁화의 재배 및 육종에 대한 연구만 주로 이루어지고 있으며, 무궁화를 이용한 다양한 생리활성 연구가 미흡하고, 특히 생활 속에 적용 가능한 기능성화장품 또는 식품 등의 원료로서 개발 가능한 연구 결과는 거의 없다.
최근 천연물에 생물전환기술을 적용하여 다양한 기능성 원료를 개발하기 위한 연구가 활발히 이루어지고 있다. 이러한 생물전환 기술은 천연물의 기능성 증대 및 효능 물질을 다량 확보할 수 있다는 장점이 있다.
특허출원 제10-2011-0125087호 ‘한방추출물을 유효성분으로 하는 소양증 개선용 조성물’에는 지황, 석창포, 황백, 고삼, 죽엽, 자초, 편축, 목근피, 관동화, 장군피 및 목과 추출물을 유효성분으로 함유하는 소양증 개선용 조성물이 항염증 효과, 수분 보습 효과 및 주름개선 효과가 있음을 개시하고 있으나, 그 효과는 11가지 한방재료를 복합하여 상기와 같은 효과가 있을 뿐이며, 목근피 단일 조성물 자체가 갖는 피부주름개선의 효과는 전혀 언급되어 있지 않다.
현재까지 무궁화 단일 추출물을 이용하는 경우에는 항산화, 항염증, 또는 피부 주름개선 등에 유효한 효과를 얻기 힘든 것으로 알려져 있다. 이로 인해, 인체에 무해하여 안전하게 사용할 수 있고, 원료를 쉽게 구할 수 있는 장점을 갖는 무궁화를 화장료 조성물의 소재로 활용하기 위해서는 특허출원 제10-2011-0125087호와 같이 다른 식물소재들과 복합하여 사용하여야 하는 문제점이 있었다.
이에, 본 발명자들은 무궁화가 갖는 피부 주름 개선의 효과를 극대화하고, 화장료 조성물의 주원료로 활용하고자 예의 연구 노력한 결과, 무궁화 추출물을 당분해 효소로 처리하는 경우 UVB 조사에 의해 유도된 인간 섬유아세포(human dermal fibroblasts, NHDFs)의 광노화에 대응하여, 항산화, 항염증 및 피부 주름 개선에 뛰어난 효과가 있음을 확인하고, 본　발명을 완성하게 되었다.
따라서, 본 발명의 주된 목적은 효소 처리된 무궁화 추출물을 유효성분으로 하는 피부 주름 개선에 뛰어난 효과를 갖는 조성물을 제공하는 데 있다.
본 발명의 한 양태에 따르면, 본 발명은 당분해 효소 처리 무궁화 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명자들은 피부 노화 방지, 염증개선, 및 주름 개선 등 피부상태 개선에 효능이 있는 물질을 찾고자 여러 가지 천연물질들 중에서 유효한 물질을 검색한 결과, 당분해 효소 처리된 무궁화 추출물의 피부 주름 개선 효과가 획기적으로 증가함을 발견하였고, 또한 피부에 적용시 안전성에도 문제가 없음을 확인하였다.
본 발명의 "무궁화(Hibiscus syriacus L.)"는 한반도 전역에서 자생하는 쌍떡잎식물 아욱목 아욱과의 낙엽관목을 의미하며, 이러한 무궁화를 추출하고 효소로 처리하는데 있어서, 상기 무궁화 전체 또는 잎, 꽃, 꽃받침, 수술, 암꽃술, 줄기, 뿌리 등의 일부를 사용할 수 있지만, 특별히 제한은 없다. 본 발명의 일 구체예에서는 줄기껍질, 뿌리껍질 또는 이들을 혼합하여 사용할 수 있다. 무궁화 나무의 줄기 및 뿌리껍질을 한방에서는 목근피 또는 천근피라고 지칭하기도 하며, 본 발명의 무궁화 추출물과 목근피 추출물은 동일한 의미로 사용된다.
본 발명에서 사용되는 용어, "추출물"은 식물의 추출 처리에 의하여 얻어지는 추출액, 상기 추출액의 희석액이나 농축액, 상기 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 상기 추출액의 조정제물이나 정제물, 또는 이들의 혼합물 등, 추출액 자체 및 추출액을 이용하여 형성 가능한 모든 제형의 추출물을 포함한다. 본 발명의 상기 추출물은 바람직하게 추출 후 건조 분말 형태로 제조되어 사용될 수 있다.
본 발명의 일 구체예에서, 상기 무궁화 추출물은, 무궁화의 천연, 잡종 또는 변종 식물로부터 추출될 수 있고, 식물 조직 배양물에서도 추출이 가능하며, 바람직하게는 줄기 및 뿌리의 껍질부위에서 추출될 수 있다.
상기 추출물을 제조하는 방법은 초음파 추출법, 침출법 및 환류 추출법 등 당업계의 통상적인 추출 방법일 수 있다. 추출에 사용되는 용매는 물, 알코올 또는 이들의 혼합물이며, 바람직하게는 메탄올 또는 에탄올이지만, 이들로 제한되는 것은 아니다.
추출 용매의 양은 시료의 중량 기준으로 2 내지 50배를 사용할 수 있으며, 바람직하게는 2 내지 20배이다. 추출을 위해 시료는 추출 용매에서 침출을 위해 1 내지 72 시간 동안 방치될 수 있으며, 바람직하게는 24 내지 48시간 동안 방치될 수 있다.
본 발명의 용어 "당분해 효소(glycolytic enzyme)"는 해당 반응을 촉매하는 효소를 의미하며, 본 발명에서는 넓은 의미에서 셀룰로오스, 아밀로오스, 탄닌, 펙틴 등의 탄수화물을 분해하는 효소를 의미한다.
본 발명에서, 상기 당분해 효소의 예로는 셀룰라아제(cellulase), 헤미셀룰라아제(hemicellulase), 펙티나아제(pectinase), 글루코시다아제(glucosidase), 탄나아제(tannase) 효소를 들 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니며, 무궁화 추출물에 존재하는 다당류 형태의 고분자를 분해하는 활성을 갖는 효소이면 본 발명의 당분해 효소에 포함된다.
본 발명의 일 구체예에서, 상기 당분해 효소는 헤미셀룰라아제(hemicellulase), 펙티나아제(pectinase), 글루코시다아제(glucosidase), 및 탄나아제(tannase)로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 효소인 것이 바람직하다. 또한, 상기 효소들은 단독으로 사용하거나, 또는 이들 효소들을 복합 처리하여 사용할 수도 있다.
본 발명의 또 다른 구체예에서 상기 당분해 효소는 펙티나아제 및 헤미셀룰라아제를 혼합한 효소인 것이 바람직하며, 이때 바람직한 혼합비는 중량비를 기준으로 펙티나아제 대 헤미셀룰라아제 1:1 내지 1:5 또는 펙티나아제 대 헤미셀룰라아제 1:1 내지 5:1인 것이 바람직하다. 상기 혼합비를 만족하지 않는 경우, 당분해 효소 처리 무궁화 추출물 중 유효 활성 성분의 함량이 상대적으로 감소한다.
본 발명에서 제시하는 당분해 효소 처리된 무궁화 추출물은 특별한 언급이 없는 한, 상기 예시된 효소 이외에도 해당 반응을 촉매하는 당분해 효소로 처리된 무궁화 추출물을 모두 포함하며, 피부 주름 개선의 소재로 사용될 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어, "피부 주름 개선" 이란 피부 재생, 피부 탄력 개선, 피부 주름 방지 또는 개선, 또는 피부 염증 개선을 의미한다.
본 발명에서 사용되는 용어, "피부 노화" 란 반응성 자유 라디칼 증가에 의해 유발되는 모든 질환을 의미하며, 상기 피부 노화의 비제한적인 예로 주름, 피부의 쳐짐, 탄력성 감소 등을 들 수 있다.
많은 질환상태와 자유라디칼 손상과의 상관관계는 널리 입증되어 있으며 효소, 이온채널, 구조 단백질 및 막지질을 포함하는 많은 세포 구성성분이 반응성 자유 라디칼 종에 대한 잠재적인 표적물이다. 상기 잠재적인 표적물과 자유 라디칼의 반응은 특정범위의 세포기능을 손상시켜 병리학적 변화를 유발하여 궁극적으로 세포를 사멸시킨다.
본 발명의 피부상태 개선용 조성물은 우수한 자유라디칼 제거 효과로 산화적 손상으로부터 DNA, 단백질(지단백질 포함) 및 막지질을 보호한다.
본 발명에서 사용되는 용어, "피부 재생" 또는 "피부 탄력 개선" 또는 "피부 주름 방지 또는 개선" 이란 콜라겐의 생성을 증가시키거나, 콜라겐의 분해를 억제하여 콜라겐 총량을 증가시키는 모든 작용을 의미하며, 본 발명에서 용어, "피부 주름"이란, 피부가 쇠하여 생긴 잔줄을 의미하는데, 유전자에 의한 원인, 피부 진피에 존재하는 콜라겐의 감소, 외부 환경 등에 의해 유발될 수 있다.
본 발명에서 "피부 주름 방지 또는 개선"이란, 피부에 주름이 생성되는 것을 억제 또는 저해하거나, 이미 생성된 주름을 완화시키는 것을 말한다.
피부 섬유아세포의 주된 기능으로 세포외기질 합성과 증식을 통한 손상된 피부 조직 재생 등을 들 수 있는데, 광노화와 같은 외인성 노화 요인 또는 유리 산소에 의한 손상 누적, 텔로미어 단절로 인한 세포 노화 등에 따른 내인성 노화 요인들은 진피층 내에 있는 피부섬유아세포의 생리 활성 기능을 저하시키게 된다. 피부 세포외기질 중 95% 이상을 차지하고, 세포의 부착분자(adhesion molecule) 및 세포 골격(cytoskeleton) 등과의 상호 작용과 신호 교류를 통해 섬유아세포의 생리 활성에 매우 주요한 부분을 담당하는 제I형 콜라겐의 합성이 저하될 경우, 피부 조직 내 콜라겐 양이 감소되고, 이에 따라 표면 장력이 감소되어 피부 탄력이 저하되고 피부 주름이 형성될 뿐만 아니라, 세포의 증식 및 재생 기능을 포함하는 생리 활성 기능이 감소하는 악순환의 원인이 된다.
따라서, 피부섬유아세포의 콜라겐은 피부 재생, 피부 탄력, 피부 주름 형성 및 피부 손상 시 조직의 수복 또는 재생과 직접적인 관련이 있다고 볼 수 있다.
즉, 피부 섬유아세포의 콜라겐 또는 프로콜라겐의 합성이 촉진되거나, 콜라겐을 분해하는 기질 단백질 분해효소(matrix metallo-proteinase, 이하 'MMP'라 함)의 합성이 저해되면, 피부 탄력 개선, 피부 재생, 피부 주름 개선, 상처 치유, 손상된 피부 조직의 수복 및 재생; 및 피부 노화 방지 등의 효과를 얻을 수 있다.
본 발명의 당분해 효소 처리 무궁화 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물은 타입 I 프로콜라겐 단백질의 발현을 증가시키고, MMP-1 단백질 및 MMP-3 단백질의 발현을 억제하는 것을 특징으로 한다.
구체적으로, 본 발명의 상기 효소 처리된 무궁화 추출물을 포함하는 조성물은 자외선 조사된 정상 인간 진피 섬유아세포(NHDF)에서 세포 독성을 저감시키고, 콜라겐 분해를 촉진시키는 MMP-1 및 MMP-3의 발현을 억제시키면서, 타입 Ⅰ 프로콜라겐의 생성을 증가시키는바, 피부 탄력 증가, 피부 재생, 피부 주름 개선, 상처 치유, 손상된 피부 조직의 수복 및 재생; 및 피부 노화 방지 등의 효과 등을 가질 수 있다. 구체적으로는 피부주름의 예방 또는 개선의 효과를 가질 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어, "개선"이란 상태의 완화 또는 치료와 관련된 파라미터, 예를 들면 증상의 정도를 적어도 감소시키는 모든 행위를 의미한다.
본 발명의 피부 주름 개선용 화장료 조성물에 함유된 효소 처리된 무궁화 추출물은 그 자체로 피부 주름 개선에 효과가 있으며, 기존에 알려진 피부 주름 개선에 효과가 있다고 공지된 물질들과 혼합하여 사용하는 경우에도 피부 주름 개선의 효과를 지속적으로 유지할 수 있다.
상기 피부 주름 개선에 효과가 있는 물질로는 이에 제한되지는 않으나, 캐모마일 꽃 추출물, 로즈마리 잎 추출물, 할미꽃 잎 추출물, 어스니어 추출물, 인삼 추출물, 제라늄 꽃 추출물, 고삼 추출물, 성모초 추출물, 타임 추출물, 쐐기풀 추출물, 야로우 추출물, 클로브 추출물, 펜넬 추출물, 파파야잎 추출물, 해바라기 추출물, 유칼립투스 추출물, 및 안젤리카 추출물 등이 있다.
이외에도 본 발명의 화장료 조성물은 수용성 비타민, 지용성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당, 스핑고 지질 및 해초 엑기스 등을 더 포함할 수 있다.
상기 수용성 비타민으로는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것도 될 수 있으나, 바람직하게는 비타민 B1, 비타민 B2, 비타민 B6, 피리독신, 염산피리독신, 비타민 B12, 판토텐산, 니코틴산, 니코틴산아미드, 엽산, 비타민 C, 비타민 H 등을 들 수 있으며, 그들의 염(티아민염산염, 아스코르빈산나트륨염 등)이나 유도체(아스코르빈산-2-인산나트륨염, 아스코르빈산-2-인산마그네슘염 등)도 본 발명에서 사용할 수 있는 수용성 비타민에 포함된다. 상기 수용성 비타민은 미생물 변환법, 미생물 배양물의 정제법, 효소법 또는 화학 합성법 등의 통상의 방법에 의해 수득할 수 있다.
상기 지용성 비타민으로는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것도 될 수 있으나, 바람직하게는 비타민 A, 카로틴, 비타민 D2, 비타민 D3, 비타민 E 등을 들 수 있으며, 그들의 유도체(팔미틴산아스코르빈, 스테아르산아스코르빈, 디팔미틴산아스코르빈, 아세트산dl-알파 토코페롤, 니코틴산dl-알파 토코페롤비타민 E, DL-판토테닐알코올, D-판토테닐알코올, 판토테닐에틸에테르 등) 등도 본 발명에서 사용되는 지용성 비타민에 포함된다.
상기 고분자 펩티드로는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것도 될 수 있으나, 바람직하게는 콜라겐, 가수 분해 콜라겐, 젤라틴, 엘라스틴, 가수 분해 엘라스틴, 케라틴 등을 들 수 있다. 상기 고분자 펩티드는 미생물 배양액의 정제법, 효소법 또는 화학 합성법 등의 통상의 방법에 의해 정제 취득할 수 있으며, 또는 통상 돼지나 소 등의 진피, 누에의 견 섬유 등의 천연물로부터 정제하여 사용할 수 있다.
상기 고분자 다당에는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것도 될 수 있으나, 바람직하게는 히드록시에틸셀룰로오스, 크산탄검, 콘드로이틴 황산 또는 그 염(나트륨염 등) 등을 들 수 있다. 예를 들어, 콘드로이틴 황산 또는 그 염 등은 통상 포유동물이나 어류로부터 정제하여 사용할 수 있다.
상기 스핑고 지질로는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것도 될 수 있으나, 바람직하게는 세라미드, 피토스핑고신, 스핑고당 지질 등을 들 수 있다. 상기 스핑고 지질은 통상 포유류, 어류, 패류, 효모 또는 식물 등으로부터 통상의 방법에 의해 정제하거나 화학 합성법에 의해 취득할 수 있다.
상기 해초 엑기스로는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것도 될 수 있으나, 바람직하게는 갈조 엑기스, 홍조엑기스, 녹조 엑기스 등을 들 수 있으며, 또한, 이들의 해초 엑기스로부터 정제된 칼라기난, 아르긴산, 아르긴산나트륨, 아르긴산칼륨 등도 본 발명에서 사용되는 해초 엑기스에 포함된다. 해초 엑기스는 해초로부터 통상의 방법에 의해 정제하여 취득할 수 있다.
본 발명의 화장료에는 상기 필수 성분과 더불어 필요에 따라 통상 화장료에 배합되는 다른 성분을 배합할 수 있다.
이외에 첨가해도 되는 배합 성분으로서는 유지 성분, 보습제, 에몰리엔트제, 자외선 흡수제, pH 조정제, 향료, 혈행 촉진제, 냉감제, 제한제, 정제수 등을 들 수 있다.
상기 유지 성분으로는 에스테르계 유지, 탄화수소계 유지, 실리콘계 유지, 불소계 유지, 동물 유지, 식물 유지 등을 들 수 있다.
상기 에스테르계 유지로는 트리2-에틸헥산산글리세릴, 2-에틸헥산산세틸, 미리스틴산이소프로필, 미리스틴산부틸, 팔미틴산이소프로필, 스테아르산에틸, 팔미틴산옥틸, 이소스테아르산이소세틸, 스테아르산부틸, 리놀레산에틸, 리놀레산이소프로필, 올레인산에틸, 미리스틴산이소세틸, 미리스틴산이소스테아릴, 팔미틴산이소스테아릴, 미리스틴산옥틸도데실, 이소스테아르산이소세틸, 세바신산디에틸, 아디핀산디이소프로필, 네오펜탄산이소알킬, 트리(카프릴, 카프린산)글리세릴, 트리2-에틸헥산산트리메틸롤프로판, 트리이소스테아르산트리메틸롤프로판, 테트라2-에틸헥산산펜타엘리슬리톨, 카프릴산세틸, 라우린산데실, 라우린산헥실, 미리스틴산데실, 미리스틴산미리스틸, 미리스틴산세틸, 스테아르산스테아릴, 올레인산데실, 리시노올레인산세틸, 라우린산이소스테아릴, 미리스틴산이소트리데실, 팔미틴산이소세틸, 스테아르산옥틸, 스테아르산이소세틸, 올레인산이소데실, 올레인산옥틸도데실, 리놀레산옥틸도데실, 이소스테아르산이소프로필, 2-에틸헥산산세토스테아릴, 2-에틸헥산산스테아릴, 이소스테아르산헥실, 디옥탄산에틸렌글리콜, 디올레인산에틸렌글리콜, 디카프린산프로필렌글리콜, 디카프릴산프로필렌글리콜, 디카프린산네오펜틸글리콜, 디옥탄산네오펜틸글리콜, 트리카프릴산글리세릴, 트리운데실산글리세릴, 트리이소팔미틴산글리세릴, 트리이소스테아르산글리세릴, 네오펜탄산옥틸도데실, 옥탄산이소스테아릴, 이소노난산옥틸, 네오데칸산헥실데실, 네오데칸산옥틸도데실, 이소스테아르산이소세틸, 이소스테아르산이소스테아릴, 이소스테아르산옥틸데실, 폴리글리세린올레인산에스테르, 폴리글리세린이소스테아르산에스테르, 시트르산트리이소세틸, 시트르산트리이소알킬, 시트르산트리이소옥틸, 락트산라우릴, 락트산미리스틸, 락트산세틸, 락트산옥틸데실, 시트르산트리에틸, 시트르산아세틸트리에틸, 시트르산아세틸트리부틸, 시트르산트리옥틸, 말산디이소스테아릴, 히드록시스테아르산 2-에틸헥실, 숙신산디2-에틸헥실, 아디핀산디이소부틸, 세바신산디이소프로필, 세바신산디옥틸, 스테아르산콜레스테릴, 이소스테아르산콜레스테릴, 히드록시스테아르산콜레스테릴, 올레인산콜레스테릴, 올레인산디히드로콜레스테릴, 이소스테아르산피트스테릴, 올레인산피트스테릴, 12-스테알로일히드록시스테아르산이소세틸, 12-스테알로일히드록시스테아르산스테아릴, 12-스테알로일히드록시스테아르산이소스테아릴 등의 에스테르계 등을 들 수 있다.
상기 탄화 수소계 유지로는 스쿠알렌, 유동 파라핀, 알파-올레핀올리고머, 이소파라핀, 세레신, 파라핀, 유동 이소파라핀, 폴리부덴, 마이크로 크리스탈린 왁스, 와셀린 등의 탄화 수소계 유지 등을 들 수 있다.
상기 실리콘계 유지로는 폴리메틸실리콘, 메틸페닐실리콘, 메틸시클로폴리실록산, 옥타메틸폴리실록산, 데카메틸폴리실록산, 도데카메틸시클로실록산, 디메틸실록산 메틸세틸옥시실록산 공중합체, 디메틸실록산 메틸스테알록시실록산 공중합체, 알킬 변성 실리콘유, 아미노 변성 실리콘유 등을 들 수 있다.
상기 불소계 유지로는 퍼플루오로폴리에테르 등을 들 수 있다.
상기 동물 또는 식물 유지로는 아보카도유, 아르몬드유, 올리브유, 참깨유, 쌀겨유, 대두유, 옥수수유, 유채유, 행인유, 팜핵유, 팜유, 피마자유, 해바라기유, 포도종자유, 면실유, 야자유, 쿠쿠이너트유, 소맥배아유, 쌀 배아유, 시아버터, 월견초유, 마커데이미아너트유, 난황유, 우지, 마유, 밍크유, 오렌지라피유, 호호바유, 캔데리러왁스, 카르나바왁스, 액상 라놀, 경화피마자유 등의 동물 또는 식물 유지를 들 수 있다.
상기 보습제로는 수용성 저분자 보습제, 지용성 분자 보습제, 수용성 고분자, 지용성 고분자 등을 들 수 있다.
상기 수용성 저분자 보습제로는 세린, 글루타민, 솔비톨, 만니톨, 피롤리돈-카르복실산나트륨, 글리세린, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 에틸렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜B(중합도 n = 2 이상), 폴리프로필렌글리콜(중합도 n = 2 이상), 폴리글리세린B(중합도 n = 2 이상), 락트산, 락트산염 등을 들 수 있다.
상기 지용성 저분자 보습제로는 콜레스테롤, 콜레스테롤에스테르 등을 들 수 있다.
상기 수용성 고분자로는 카르복시비닐폴리머, 폴리아스파라긴산염, 트라가칸트, 크산탄검, 메틸셀룰로오스, 히드록시메틸셀룰로오스, 히드록시에틸셀룰로오스, 히드록시프로필셀룰로오스, 카르복시메틸셀룰로오스, 수용성키틴, 키토산, 덱스트린 등을 들 수 있다.
상기 지용성 고분자로는 폴리비닐피롤리돈 에이코센 공중합체, 폴리비닐피롤리돈 헥사데센 공중합체, 니트로셀룰로오스, 덱스트린지방산에스테르, 고분자 실리콘 등을 들 수 있다.
상기 에몰리엔트제로는 장쇄아실글루타민산콜레스테릴에스테르, 히드록시스테아르산콜레스테릴, 12-히드록시스테아르산, 스테아르산, 로진산, 라놀린지방산콜레스테릴에스테르 등을 들 수 있다.
상기 자외선 흡수제로는 파라아미노벤조산, 파라아미노벤조산에틸, 파라아미노벤조산아밀, 파라아미노벤조산옥틸, 살리실산에틸렌글리콜, 살리신산페닐, 살리신산옥틸, 살리신산벤질, 살리신산부틸페닐, 살리신산호모멘틸, 계피산벤질, 파라메톡시계피산-2-에톡시에틸, 파라메톡시계피산옥틸, 디파라메톡시계피산모노-2-에틸헥산글리세릴, 파라메톡시계피산이소프로필, 디이소프로필ㆍ디이소프로필계피산에스테르 혼합물, 우로카닌산, 우로카닌산에틸, 히드록시메톡시벤조페논, 히드록시메톡시벤조페논술폰산 및 그 염, 디히드록시메톡시벤조페논, 디히드록시메톡시벤조페논디술폰산나트륨, 디히드록시벤조페논, 테트라히드록시벤조페논, 4-tert-부틸-4'-메톡시디벤조일메탄, 2,4,6-트리아닐리노-p-(카르보-2'-에틸헥실-1'-옥시)-1,3,5-트리아진, 2-(2-히드록시-5-메틸페닐)벤조트리아졸 등을 들 수 있다.
상기 pH 조정제로는 시트르산, 시트르산나트륨, 말산, 말산나트륨, 프말산, 프말산나트륨, 숙신산, 숙신산나트륨, 수산화나트륨, 인산일수소나트륨 등을 들 수 있다.
또한, 이외에 첨가해도 되는 배합 성분은 이에 한정되는 것은 아니며, 또, 상기 어느 성분도 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 배합 가능하지만, 총중량에 대하여 바람직하게는 0.01 내지 5 중량부, 보다 바람직하게는 0.01 내지 3 중량부로 배합될 수 있다.
본 발명의 조성물을 함유하여 제조된 화장료는 용액, 유화물, 점성형 혼합물 등의 형상을 취할 수 있다.
또한, 본 발명의 상기 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효성분으로서 상기 성분 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예를 들면, 안정화제, 안료 및 천연향료와 같은 통상적인 보조제 및 담체를 더 포함할 수 있다.
본 발명의 조성물은 피부 주름 개선의 효과를 갖는 화장품 또는 세안제 등에 다양하게 이용될 수 있다.
본 발명의 조성물을 첨가할 수 있는 제품으로는, 예를 들어, 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양에센스, 팩 등과 같은 화장품류와 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션, 여성청결제, 손세정제, 및 바디클린저 등이 있다.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판, 부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액의 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 당분해 효소 처리 무궁화 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 주름 개선용 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명의 일 구체예에서, 상기 당분해 효소는 헤미셀룰라아제(hemicellulase), 펙티나아제(pectinase), 글루코시다아제(glucosidase), 및 탄나아제(tannase)로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 효소인 것이 바람직하다. 또한, 상기 효소들은 단독으로 사용하거나, 또는 이들 효소들을 복합 처리하여 사용할 수도 있다.
본 발명의 또 다른 구체예에서 상기 당분해 효소는 펙티나아제 및 헤미셀룰라아제를 혼합한 효소인 것이 바람직하며, 이때 바람직한 혼합비는 중량비를 기준으로 펙티나아제 대 헤미셀룰라아제 1:1 내지 1:5 또는 펙티나아제 대 헤미셀룰라아제 1:1 내지 5:1인 것이 바람직하다. 상기 혼합비를 만족하지 않는 경우, 당분해 효소 처리 무궁화 추출물 중 유효 활성 성분의 함량이 상대적으로 감소한다.
또한, 본 발명의 피부 주름 개선용 약학적 조성물에서, 상기 당분해 효소 처리된 무궁화 추출물은 타입 I 프로콜라겐 단백질의 발현을 증가시키고, MMP-1 및 MMP-3 단백질의 발현을 억제하는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 조성물은 약학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다.
본 발명의 조성물의 약학적 투여 형태는 이들의 약학적 허용 가능한 염의 형태로도 사용될 수 있고, 또한 단독으로 또는 타 약학적 활성 화합물과 결합하여 사용될 수 있다.
본 발명의 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 올리고당, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다.
본 발명의 조성물을 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다.
본 발명의 조성물은 피부에 적용할 수 있는 피부 외용제 제형으로서 크림, 젤, 패취, 분무제, 연고제, 경고제, 로션제, 리니멘트제, 파스타제 또는 카타플라스마제의 피부 외용제 형태로 피부에 직접 투여될 수 있으나, 이에 한정하는 것은 아니다.
본 발명의 혼합 조성물의 바람직한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있으며, 바람직하게는 0.01㎍/㎖ 내지 25㎍/㎖의 용량으로 투여될 수 있다. 외용투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수도 있다.
본 발명의 화장료 및 약학적 조성물은 그 자체적으로 피부 주름개선, 항산화 및 항염증에 대한 효과가 있으므로 피부 주름 개선용 조성물로 바로 이용될 수 있고, 피부 주름 개선에 효과가 있는 천연 추출물들을 함유하는 다른 성분과 혼합하여 사용하는 형태로도 이용이 가능하여 기존에 사용하고 있는 소재들의 피부 주름 개선 효과를 좀 더 높여줄 수 있을 것으로 기대된다.
이상 설명한 바와 같이, 본 발명의 당분해 효소 처리 무궁화 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물은 인간 진피 섬유아세포에서 MMP-1 및 MMP-3의 발현을 억제하고, 타입 Ⅰ 프로콜라겐의 생성을 증가시킴으로써, 피부 주름의 발생을 예방하고, 손상된 피부의 주름을 개선하는 효능을 나타낸다.
또한, 본 발명의 조성물은 피부 노화, 및 피부 염증을 예방하거나 개선 또는 치료하는 효능이 우수하다.
또한, 본 발명의 조성물은 천연물 유래의 물질이어서 독성이 없으며, 인체에 적용하여도 부작용을 유발하지 않아 화장료, 의약외품, 식품 또는 약학 조성물로의 활용도가 높다.
도 1은 당분해 효소 처리된 무궁화 추출물 및 효소 처리되지 않은 무궁화 추출물이 세포 생존에 미치는 영향을 나타낸 그래프이다.
도 2는 당분해 효소 처리된 무궁화 추출물과 효소 처리되지 않은 무궁화 추출물의 Chromatography 분석 결과를 비교한 그래프이다.
도 3은 당분해 효소 처리된 무궁화 추출물 및 효소 처리되지 않은 무궁화 추출물의 라디칼 소거 활성 효과(DPPH assay)를 비교한 그래프이다.
도 4는 당분해 효소 처리된 무궁화 추출물 및 효소 처리되지 않은 무궁화 추출물의 항염증 활성을 비교한 그래프이다.
도 5는 UVB 조사된 인간섬유아세포에서 당분해 효소 처리 무궁화 추출물과 효소 처리되지 않은 무궁화 추출물이 MMP-1 단백질 발현에 미치는 영향을 비교한 그래프이다.
도 6은 UVB 조사된 인간섬유아세포에서 당분해 효소 처리 무궁화 추출물과 효소 처리되지 않은 무궁화 추출물이 타입 I 프로콜라겐 단백질의 발현에 미치는 영향을 비교한 그래프이다.
도 7은 실시예 1의 당분해 효소 처리 무궁화 추출물과 비교예 2 및 3의 기타 효소로 처리된 무궁화 추출물의 라디칼 소거 활성 효과(ABTS assay)를 비교한 그래프이다.
도 8은 UVB 조사된 인간섬유아세포에서 실시예 1의 당분해 효소 처리 무궁화 추출물과 비교예 2 및 3의 기타 효소로 처리된 무궁화 추출물이 MMP-1 단백질 발현에 미치는 영향을 비교한 그래프이다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하기로 한다. 이들 실시예는 단지 본 발명을 예시하기 위한 것이므로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지는 않는다.
실시예: 효소 처리된 무궁화 추출물의 제조
실시예 1. 효소( 펙티나아제 및 헤미셀룰라아제 1:1 중량비) 처리된 무궁화 추출물의 제조
무궁화의 줄기 및 뿌리 껍질 1kg을 정제수로 세척하고 건조시킨 다음, 분쇄하고 세말화하여 분말을 얻었다. 분말화된 무궁화에 10배 중량의 에탄올을 가한 후, 하룻밤 동안 교반시키며 에탄올 용매 추출한 후, 여과하여 그 상등액을 동결건조하여 추출물을 수득하였다. 수득한 추출물에 10배 부피의 물을 첨가한 후, 1M HCl과 1M NaOH를 이용하여 용액이 pH 5 내지 8 사이가 되도록 조절하였다. 여기에 효소(펙티나아제 및 헤미셀룰라아제 1:1 중량비로 혼합, 비전바이오사, 한국)를 무궁화 분말의 중량 대비 10%로 첨가하였다. 그리고, 효소 첨가된 용액을 항온수조에 넣고 60℃에서 24시간 동안 교반하여 효소와 반응시켰다. 반응 종료 후, 다시 14배 중량의 100% 에탄올을 첨가한 후, 하룻밤 동안 교반시키며 추출한 후, 여과하여 그 상등액을 동결건조하여 실시예로 이용하였다.
실시예 2. 효소(헤미셀룰라아제) 처리된 무궁화 추출물의 제조
상기 실시예 1에서 효소로서 1:1 중량비로 혼합한 펙티나아제 및 헤미셀룰라아제 대신에 헤미셀룰라아제를 단독으로 사용한 것을 제외하고는 동일한 방법으로 무궁화 추출물을 제조하였다.
비교예 1. 효소 처리하지 않은 무궁화 추출물의 제조
상기 실시예 1에서 효소를 사용하여 처리하는 과정을 거치지 않은 것을 제외하고는 동일한 방법으로 무궁화 추출물을 제조하였다.
비교예 2. 효소(글루코아밀라아제) 처리된 무궁화 추출물의 제조
상기 실시예 1에서 효소로서 1:1 중량비로 혼합한 펙티나아제 및 헤미셀룰라아제 대신에 글루코아밀라아제를 사용한 것을 제외하고는 동일한 방법으로 무궁화 추출물을 제조하였다.
비교예 3. 효소(락타아제) 처리된 무궁화 추출물의 제조
상기 실시예 1에서 효소로서 1:1 중량비로 혼합한 펙티나아제 및 헤미셀룰라아제 대신에 락타아제를 사용한 것을 제외하고는 동일한 방법으로 무궁화 추출물을 제조하였다.
실험예 1. 피부섬유아세포에서 무궁화 추출물이 세포성장에 미치는 효과 검증
무궁화 추출물이 인간 피부섬유아세포(NHDF, normal human dermal fibroblasts)의 생장에 미치는 효과를 아래와 같은 방법으로 확인하였다.
우선, 10% FBS(fetal bovine serum, Cambrex)가 포함된 전용 배지인 DMEM(Dulbeccos modified Eagles medium) 배지에 피부섬유아세포를 40mm 크기의 세포 배양 접시에 1.2×105 농도로 접종한 후 24시간 동안, 37℃, 5% CO2 습윤 조건 하에서 배양하였다. 이후, 배지를 제거하고 300㎕ 용량의 PBS를 가하고, UVB(UVB Peak range: 312nm, UV dose: 144mJ/cm2)를 조사한 다음, 무혈청 DMEM 배지로 희석한 실시예 1의 효소처리 무궁화 추출물을 농도 별(1, 10, 및 100 ㎍/mL)로 처리하여 72시간 동안 배양하였다. 72시간 후, 1 mg/mL의 MTT를 처리하고 2시간 후, 세포에 MTT 처리로 인해 생성된 포마잔(formazan)을 DMSO로 녹여 570nm에서 흡광도를 측정하였다.
그 결과, 인간 피부섬유아세포에 실시예 1의 당분해 효소 처리된 무궁화 추출물을 처리한 경우, 효소 처리된 무궁화 추출물이 인간 피부섬유아세포의 세포 생존율에 크게 영향을 미치지 않는 것으로 확인되었으며, 이를 통해 효소 처리된 무궁화 추출물이 인체에 독성을 나타내지 않음을 확인할 수 있었다(도 1 참조).
실험예 2. 효소 처리된 무궁화 추출물과 무궁화 추출물의 성분 비교 분석
상기 실시예 1 및 비교예 1에서 제조한 추출물 성분을 크로마토그래피 장비를 이용하여 하기 표 1의 조건에 따라 분석하였다.
Figure PCTKR2018000594-appb-T000001
그 결과, 실시예 1의 효소 처리한 무궁화 추출물이 비교예 1의 효소 처리하지 않은 무궁화 추출물에 비해 머무름 시간 5분에서 10분에서 검출되는 성분의 양이 상대적으로 크게 증가한 것을 확인할 수 있었다(도 2).
실험예 3. 효소처리된 무궁화 추출물의 라디칼 소거 활성 효과( DPPH assay) 검증
DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl, Sigma, USA)의 환원력을 이용하는 상 등의 문헌(Sang S et al., J.Agric. Food Chem. 50(8), p2459-2463, 2002)에 기재된 방법에 따라, 본 발명에 따른 효소처리된 무궁화 추출물의 항산화 활성을 측정하였다.
메탄올에 녹인 0.2 mM DPPH 용액 180 ul와 증류수 20 ul에 녹인 무궁화 추출물(음성 대조군), 당분해 효소처리된 무궁화 추출물, 및 알부틴(양성대조군)(1, 10, 50, 100, 250 ㎍/㎖)을 96-웰 마이크로플레이트에 넣고 37℃에서 30 분간 배양한 후, 환원된 DPPH의 양을 분광 광도계(Precision microplate reader; Molecular Devices, VersaMax)를 이용하여 520 nm에서 흡광도를 측정하여 시료를 가하지 않는 무첨가 대조군과 활성을 비교하였다. 상기 실험은 3회 반복하여 수행되었다.
그 결과, 도 3 및 아래 표 2를 참조하면, 당분해 효소 처리된 무궁화 추출물은 효소처리되지 않은 무궁화 추출물에 비해 각각 1, 10, 50, 100, 및 250 ㎍/㎖ 용량 처리시, 271%, 136%, 308%, 422%, 및 249% 개선된 우수한 항산화 효과를 보이는 것을 관찰할 수 있었고, 이러한 항산화 효과의 수치들은 양성대조군인 알부틴과 거의 동등한 효과를 나타내는 것으로 관찰되었다.
무궁화 추출물 및 효소 처리된 무궁화 추출물의 DPPH 시험 결과
처리농도 1ug/ml 10ug/ml 50ug/ml 100ug/ml 250ug/ml
비교예 1 (흡광도) 0.811 1.59 1.09 5.89 16.4
실시예 1 (흡광도) 2.20 2.17 3.38 24.8 40.7
효소처리 후 효능 개선율 271% 136% 308% 422% 249%
실험예 4. 효소처리된 무궁화 추출물의 라디칼 소거 활성 효과( ABTS assay) 검증
PBS를 용매로 하여 1.0 mM의 ABTS (2,2-azobis-(2-amidinopropane)HCl)과 2.5 mM의 ABTS 2,2-azino-bis (3-ethylbenzthiazol- line-6-sulfonic acid) diammonium salt) 혼합용액을 만들고 70에서 30분간 반응시킨 뒤 상온에서 천천히 식도록 하였다. 그 후 용액의 상층액을 0.45 ㎛ PVDF 실린지 필터(SmartiLAB, Korea)로 여과하여 여과액의 흡광도가 734 nm의 0.650±0.020이 되는 것을 확인 한 후 실험에 사용하였다.
실시예 1의 효소처리 무궁화 추출물을 각각 1, 10, 50, 100 및 250 ㎍/mL의 농도로 제조하여 96-웰 플레이트에 분주한 뒤 ABTS 용액과 혼합하여 빛을 차단시키고 37에서 10분간 반응시킨 후 마이크로플레이트 리더(Molecular Devices FilterMax F5; San Francisco, CA, USA)를 사용하여 734 nm에서 흡광도를 측정하였다. 이때, 잘 알려진 항산화물질인 알부틴을 같은 농도로 처리하여 양성대조군으로 사용하였으며, 시료의 항산화능은 무첨가군의 흡광도를 구하여 아래와 같이 백분율로 표시하였다.
Figure PCTKR2018000594-appb-I000001
상기 실험 결과 실시예 1의 효소 처리 무궁화 추출물의 라디칼 소거 활성은 양성대조군인 알부틴과 거의 동등한 효과를 나타내는 것으로 관찰되었다. 또한, 본원발명에 사용된 무궁화 추출물의 라디칼 소거 활성 효과를 비교 확인하기 위하여 실시예 1의 당분해 효소 처리 무궁화 추출물과 글루코아밀라아제로 처리된 비교예 2 및 락타아제로 처리된 비교예 3의 무궁화 추출물의 ABTS를 비교하여 도 7에 나타내었다. 도 7의 도시된 내용으로부터 본원발명에 사용된 당분해 효소로 처리된 무궁화 추출물이 글루코 아밀라아제 또는 락타아제로 처리된 무궁화 추출물에 비하여 우수한 라디칼 소거 활성을 가지며 알부틴과도 거의 동등한 효과를 나타냄을 확인할 수 있었다.
실험예 5. MMP-1 및 MMP-3 단백질의 합성 저해
40 mm 세포 배양 접시에 2 ㎖의 DMEM 배양액을 넣고, 인간섬유아세포를 약 1.2x105의 농도로 접종한 후, 37℃, 5% CO2 환경에서 24시간 동안 배양하였다. 그 후, UVB를 144 mJ/cm2 조건으로 조사한 후, 실시예 1에서 제조된 당분해 효소 처리된 무궁화 추출물(각각 10, 및 100 ㎍/㎖)을 포함한 배지로 교체하여 3일간 배양하였다. 이후 배양액을 회수(harvest)하여 4℃, 7500rpm 환경에서 5분간 원심분리(centrifuge)하여 ELISA 방법을 이용하여 MMP-1 및 MMP-3(Human Total MMP-1 kit, R&D Systems, Inc., Minneapolis, MN, USA)의 단백질 발현량 변화를 확인하였다.
144 mJ/cm2 용량으로 자외선 조사 처리한 인간섬유아세포는 자외선 무처리 군에 비해 MMP-1 및 MMP-3 단백질의 생성이 각각 2배 및 3배 증가하였다. 이렇게 자외선 조사 처리로 인한 MMP-1 및 MMP-3 단백질의 생성 증가는 당분해 효소 처리된 무궁화 추출물의 처리에 의해서 감소하는 현상을 나타내었다(도 4 및 도 5). 이때, MMP-1 단백질의 경우에는 각각 1, 10, 및 100 ㎍/㎖ 용량에서 45%, 53%, 및 91% 의 발현 억제 효과를, MMP-3 단백질의 경우에는 각각 1, 10, 및 100㎍/㎖ 용량에서 50%, 67% 및 85% 개선된 단백질 발현 억제 효과를 나타내었으며, 이를 표 3 및 표 4에 각각 나타내었다.
무궁화 추출물 및 효소 처리된 무궁화 추출물의 MMP -1 단백질의 합성 저해 시험 결과
처리농도 1ug/ml 10ug/ml 100ug/ml
비교예 1 (pg/ml) 13456 10543 8546
실시예 1 (pg/ml) 7803.181 6654.074 1306.355
효소처리 후 효능 개선율 45% 53% 91%
무궁화 추출물 및 효소 처리된 무궁화 추출물의 MMP -3 단백질의 합성 저해 시험 결과
처리농도 1ug/ml 10ug/ml 100ug/ml
비교예 1 (pg/ml) 2691.87 2429.77 1005.38
실시예 1 (pg/ml) 1602.5 1057.6 475.4
효소처리 후 효능 개선율 50% 67% 85%
상기와 같은 결과를 통해, 본 발명의 당분해 효소 처리된 무궁화 추출물은 주름생성의 원인이 되는 MMP-1 및 MMP-3 단백질의 발현을 효과적으로 억제하여 피부 주름의 예방 및 개선에 효과적으로 사용될 수 있음을 알 수 있었다.
또한, 본원발명에 사용된 당분해 효소의 활성을 비교 확인하기 위하여 UVB 조사된 인간섬유아세포에서 실시예 1의 당분해 효소 처리 무궁화 추출물과 글루코아밀라아제로 처리된 비교예 2 및 락타아제로 처리된 비교예 3의 무궁화 추출물이 MMP-1 단백질 발현에 미치는 영향을 비교하여 도 8에 나타내었다. 도 8의 내용으로부터 본원발명에 사용된 당분해 효소로 처리된 무궁화 추출물이 글루코 아밀라아제 또는 락타아제로 처리된 무궁화 추출물에 비하여 MMP-1 단백질의 발현을 보다 효과적으로 억제함을 확인할 수 있었다.
실험예 6. 타입 1 프로콜라겐 단백질의 합성 촉진
40 mm 세포 배양 접시에 2 ㎖의 DMEM 배양액을 넣고, 인간섬유아세포를 약 1.2x105의 농도로 접종한 후, 37℃, 5% CO2 환경에서 24시간 동안 배양하였다. 그 후, UVB를 144 mJ/cm2 조건으로 조사한 후, 실시예 1에서 제조된 당분해 효소 처리된 무궁화 추출물(각각 10, 및 100 ㎍/㎖)을 포함한 배지로 교체하여 3일간 배양하였다. 이후 배양액을 회수(harvest)하여 4℃, 7500rpm 환경에서 5분간 원심분리(centrifuge)하여 ELISA 방법을 이용하여 타입 1 프로콜라겐(Procollagen Type I C Peptide EIA Kit, Takara, Shiga, Japan)의 단백질 발현량 변화를 확인하였다.
144 mJ/cm2 용량으로 자외선 조사 처리한 인간섬유아세포는 자외선 무처리 군에 비해 타입 1 프로콜라겐 단백질의 생성이 2.1배 감소하였다. 이렇게 자외선 조사 처리로 인한 타입 1 프로콜라겐 단백질의 생성 감소는 무궁화 추출물의 처리에 의해서 다시 증가하는 현상을 나타내었다.
이때, 당분해 효소 처리된 무궁화 추출물 처리군은 효소 처리되지 않은 군과 비교할 때 월등한 증가 효과를 나타내는데, 각각 10, 및 100 ㎍/㎖ 용량에서 130% 및 177%의 타입 1 프로콜라겐 단백질의 생성 증가 효과를 나타내었다(도 6).
상기와 같은 결과를 통해, 본 발명의 당분해 효소 처리된 무궁화 추출물을 포함하는 피부 주름 개선용 조성물은 알부틴과 동등한 항산화 효과를 갖고, TGF-β/Smad 신호전달체계에 작용하여 타입 1 프로콜라겐의 생성을 촉진시키고, 콜라겐 분해 효소인 MMP-1 및 MMP-3 단백질의 발현을 억제하는 작용을 통해, 주름 생성을 효과적으로 예방하고, 생성된 주름을 개선하는 효과가 있음을 확인할 수 있었다.
이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다.
따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.
본 발명의 조성물은 피부 노화, 및 피부 염증을 예방하거나 개선 또는 치료하는 효능이 우수하며, 천연물 유래의 물질이어서 독성이 없으며, 인체에 적용하여도 부작용을 유발하지 않아 화장료, 의약외품, 식품 또는 약학 조성물로의 활용도가 높다.

Claims (11)

  1. 당분해 효소 처리된 무궁화(Hibiscus syriacus L.) 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 상기 당분해 효소는 헤미셀룰라아제(hemicellulase), 펙티나아제(pectinase), 글루코시다아제(glucosidase), 및 탄나아제(tannase)로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 효소인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  3. 제1항에 있어서, 상기 당분해 효소는 펙티나아제 및 헤미셀룰라아제를 혼합한 효소인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  4. 제1항에 있어서, 상기 당분해 효소 처리된 무궁화 추출물은 타입 I 프로콜라겐 단백질의 발현을 증가시키고, MMP-1 및 MMP-3 단백질의 발현을 억제하는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  5. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 캐모마일 꽃 추출물, 로즈마리 잎 추출물, 할미꽃 잎 추출물, 어스니어 추출물, 인삼 추출물, 제라늄 꽃 추출물, 고삼 추출물, 성모초 추출물, 타임 추출물, 쐐기풀 추출물, 야로우 추출물, 클로브 추출물, 펜넬 추출물, 파파야잎 추출물, 해바라기 추출물, 유칼립투스 추출물 및 안젤리카 추출물에서 선택된 하나 이상의 식물 추출물을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  6. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션, 여성청결제, 손세정제, 및 바디클린저에서 선택된 어느 하나의 제형인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  7. 당분해 효소 처리된 무궁화 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 주름 개선용 약학적 조성물.
  8. 제7항에 있어서, 상기 당분해 효소는 헤미셀룰라아제(hemicellulase), 펙티나아제(pectinase), 글루코시다아제(glucosidase), 및 탄나아제(tannase)로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 효소인 것을 특징으로 하는 당분해 효소 약학적 조성물.
  9. 제7항에 있어서, 상기 당분해 효소는 펙티나아제 및 헤미셀룰라아제를 혼합한 효소인 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
  10. 제7항에 있어서, 상기 당분해 효소 처리 무궁화 추출물은 타입 I 프로콜라겐 단백질의 발현을 증가시키고, MMP-1 단백질의 발현을 억제하는 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
  11. 제7항에 있어서, 상기 조성물은 크림, 젤, 패취, 분무제, 연고제, 경고제, 로션제, 리니멘트제, 파스타제 및 카타플라스마제에서 선택된 어느 하나의 제형인 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
PCT/KR2018/000594 2017-03-07 2018-01-12 효소 처리된 무궁화 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선용 조성물 WO2018164369A1 (ko)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201880001049.5A CN108834400B (zh) 2017-03-07 2018-01-12 含有酶处理的木槿提取物作为有效成分的用于改善皮肤皱纹的组合物

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR20170028629 2017-03-07
KR10-2017-0028629 2017-03-07

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2018164369A1 true WO2018164369A1 (ko) 2018-09-13

Family

ID=63448214

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/KR2018/000594 WO2018164369A1 (ko) 2017-03-07 2018-01-12 효소 처리된 무궁화 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선용 조성물

Country Status (3)

Country Link
KR (1) KR101924956B1 (ko)
CN (1) CN108834400B (ko)
WO (1) WO2018164369A1 (ko)

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR102432834B1 (ko) * 2019-11-28 2022-08-17 숙명여자대학교산학협력단 식품소재용 무궁화 조성물 및 이의 제조방법
CN111920749A (zh) * 2020-08-31 2020-11-13 滕明军 一种含白芦藜醇的面部精华液及其制备方法
KR102376523B1 (ko) * 2021-06-02 2022-03-17 한남대학교 산학협력단 무궁화나무 수피 추출물을 포함하는 화장료 조성물
WO2023086305A1 (en) * 2021-11-09 2023-05-19 Elc Management Llc Cosmetic compositions and method of using the same
CN115300443B (zh) * 2022-08-02 2023-12-08 银川凤仪堂生物工程有限公司 一种羊胎素提取方法及在化妆品中的应用

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR930022977A (ko) * 1992-05-08 1993-12-18 이덕중 무궁화에서 음료등 기호식품의 첨가물 추출방법
KR0169006B1 (ko) * 1995-10-02 1999-01-15 이분옥 무궁화를 이용한 피부화장료
KR20100059302A (ko) * 2008-11-26 2010-06-04 (주)아모레퍼시픽 목근피 추출물 함유 피부외용제 조성물
KR20110125087A (ko) * 2010-05-12 2011-11-18 (주) 메디플랜 한방추출물을 유효성분으로 하는 소양증 개선용 조성물

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP5129440B2 (ja) 2005-06-14 2013-01-30 共栄化学工業株式会社 植物発酵物及びこれを含む化粧料
JP5957208B2 (ja) * 2011-11-14 2016-07-27 共栄化学工業株式会社 化粧料
CN104906112B (zh) * 2015-05-20 2018-02-23 杨克西 一种促进蛋白质合成的组合物及其制备方法和用途
CN105796445A (zh) * 2016-05-24 2016-07-27 广州丹奇日用化工厂有限公司 一种从慈姑果实中提取慈姑提取物的方法及其应用
CN105997738A (zh) * 2016-07-12 2016-10-12 广州丹奇日用化工厂有限公司 一种含番杏提取物的护肤精华液
CN106176844B (zh) * 2016-08-31 2019-06-14 桂林电子科技大学 一种抗氧化作用强的木槿叶提取物制备方法
CN106236675B (zh) * 2016-09-27 2020-04-28 广东丸美生物技术股份有限公司 一种具有保湿和抗衰老功效的护肤基质及其制备与应用

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR930022977A (ko) * 1992-05-08 1993-12-18 이덕중 무궁화에서 음료등 기호식품의 첨가물 추출방법
KR0169006B1 (ko) * 1995-10-02 1999-01-15 이분옥 무궁화를 이용한 피부화장료
KR20100059302A (ko) * 2008-11-26 2010-06-04 (주)아모레퍼시픽 목근피 추출물 함유 피부외용제 조성물
KR20110125087A (ko) * 2010-05-12 2011-11-18 (주) 메디플랜 한방추출물을 유효성분으로 하는 소양증 개선용 조성물

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
RYOO, IN -JA: "Anti-skin aging effect of syriacusins from Hibiscus Syriacus on ultraviolet-irradiated human dermal fibroblast cells", BIOMOLECULES & THERAPEUTICS, 2010, pages 300 - 307, XP053020325, DOI: doi:10.4062/biomolther.2010.18.3.300 *

Also Published As

Publication number Publication date
KR20180102485A (ko) 2018-09-17
KR101924956B1 (ko) 2018-12-04
CN108834400B (zh) 2021-05-04
CN108834400A (zh) 2018-11-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
WO2018164369A1 (ko) 효소 처리된 무궁화 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선용 조성물
WO2011059292A2 (ko) 피부세포증식 촉진, 항산화 및 항알러지 효과가 우수한 알로에 베라 새순 농축물 또는 추출물
KR102088728B1 (ko) 식물 복합추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 탄력 및 주름 개선용 화장료 조성물
WO2018097605A2 (ko) 바다제비집 복합 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부주름 개선용 조성물, 이를 이용한 피부주름 개선용 패치, 및 마스크 팩
KR101908077B1 (ko) 천연 한방 추출물을 유효성분으로 포함하는 미백, 피부 노화 방지 또는 피부 주름 개선용 조성물
KR101849661B1 (ko) 효소 처리된 싸주아리 쑥 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 상태 개선용 조성물
WO2020071630A1 (ko) 천연소재 추출물을 포함하는 피부 개선용 조성물
KR20240023412A (ko) 보툴리눔 독소 유래 펩타이드 단편, 및 이를 포함하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물
WO2018111042A2 (ko) 한약재 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물
WO2016056781A1 (ko) 알파인 웜우드 추출물을 포함하는 탈모 방지 또는 육모 촉진용 조성물
WO2016056780A1 (ko) 알피나 골무꽃 추출물을 포함하는 탈모 방지 또는 육모 촉진용 조성물
WO2019139403A1 (ko) 세리신, 사상자 추출물 및 겨우살이 추출물을 포함하는, 피부 재생, 진정 또는 상처 치유용 조성물
WO2017119535A1 (ko) 카노신, 대두 펩타이드 및 천심련 추출물을 포함하는 항노화용 조성물
WO2014157910A1 (ko) 효소처리 타나까 추출물을 함유하는 조성물
WO2020246766A1 (ko) 찹쌀떡버섯으로 발효한 홍경천 추출물을 함유하는 피부노화 예방 또는 개선용 조성물
KR101877047B1 (ko) 효소 처리된 유칼립투스 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 예방 또는 개선용 조성물
KR102139156B1 (ko) 효소처리된 홍삼 및 천마 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부주름 예방 또는 개선용 조성물
WO2019132217A1 (ko) 회화나무열매 발효액 또는 이의 추출액을 유효성분으로 함유하는 피부 주름개선용 화장료 조성물 및 그의 제조방법
WO2018151563A1 (ko) 코스모스 추출물을 포함하는 광노화 방지 및 피부주름 개선용 조성물
WO2019225891A1 (ko) 아이리린 b를 포함하는 피부 항노화 조성물
KR101877049B1 (ko) 효소 처리된 안젤리카 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 예방 또는 개선용 조성물
WO2017213310A1 (ko) 디프테로카푸스 인트리카투스 추출물을 이용한 피부 주름 개선용 조성물
KR101991936B1 (ko) 효소처리된 천마 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 예방 또는 개선용 조성물
WO2024063587A1 (ko) 오토파지 활성을 유도하는 비파나무 잎 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 개선용 조성물
WO2022050819A1 (ko) 효소처리 크릴 오일 추출물을 유효성분으로 포함하는 항염증, 피부 주름개선, 보습 및 피부 재생 촉진용 조성물

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 18764081

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

32PN Ep: public notification in the ep bulletin as address of the adressee cannot be established

Free format text: NOTING OF LOSS OF RIGHTS PURSUANT TO RULE 112(1) EPC (EPO FORM 1205A DATED 02.02.2019)

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 18764081

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1