WO2017125635A1 - Dispositivo automático de cambio de objetivo para microscopio de haz láser plano - Google Patents

Dispositivo automático de cambio de objetivo para microscopio de haz láser plano Download PDF

Info

Publication number
WO2017125635A1
WO2017125635A1 PCT/ES2017/070028 ES2017070028W WO2017125635A1 WO 2017125635 A1 WO2017125635 A1 WO 2017125635A1 ES 2017070028 W ES2017070028 W ES 2017070028W WO 2017125635 A1 WO2017125635 A1 WO 2017125635A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
cuvette
laser beam
objective
supports
longitudinal translation
Prior art date
Application number
PCT/ES2017/070028
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
Jorge Ripoll Lorenzo
Alicia ARRANZ DE MIGUEL
César NOMBELA ARRIETA
Original Assignee
4D-Nature Imaging Consulting S.L.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 4D-Nature Imaging Consulting S.L. filed Critical 4D-Nature Imaging Consulting S.L.
Publication of WO2017125635A1 publication Critical patent/WO2017125635A1/es

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G02—OPTICS
    • G02B—OPTICAL ELEMENTS, SYSTEMS OR APPARATUS
    • G02B21/00—Microscopes
    • G02B21/02—Objectives

Definitions

  • the invention pertains to the field of microscopy, and more particularly to the flat laser beam illumination microscopy used to obtain images of several transparent or semi-transparent samples such as embryos, tissues and other biological samples.
  • the object of the present invention is a new automatic device that allows the image acquisition objective of a flat laser beam microscope to be changed depending on the magnification desired at any given time.
  • a flat laser beam microscope is essentially formed by a camera coupled to a high numerical aperture lens and arranged in a direction called "detection direction", and a lighting medium capable of emitting a thin sheet of light according to a direction called “ lighting direction "which is perpendicular to the detection direction, following the original configuration of Siedentopf and Zsigmondy coupled to a detection chamber.
  • the camera can obtain a 2D fluorescence image of the part of the sample illuminated by the illumination sheet or plane. If the sample is also moved in the direction of the detection axis and several 2D images are taken in different positions, a set or stack of 2D images is generated where each of the 2D images corresponds to a position of the illumination plane with respect to the sample.
  • This stack of 2D images contains information on the z-position (depth of the sample according to the detection direction) obtained by moving the sample, and the x and y positions, present in each 2D image.
  • the 2D image stack can then be merged to generate a 3D image of the sample, as described in US 7,554,725 by Stelzer et al. Subsequently, it was proposed to rotate the sample around its own axis, normally vertical, to capture several stacks of 2D images (commonly called "angular measures") and merge them later, which allows to improve anisotropy and image quality (S Preibisch et al, Nature Methods 7 (2010)).
  • Fig. 1 shows an example of a flat laser beam microscope (100).
  • the sample (107) is arranged in a support (101) inside a cuvette (102) filled with a liquid.
  • a beam (103) of Gaussian, Bessel, Airy or similar linear illumination strikes a cylindrical lens (104) that focuses it thanks to a lighting objective (105) to generate the vertical flat illumination sheet (106).
  • This sheet (106) of vertical flat lighting strikes the sample (107) according to the lighting direction (DI), and the fluorescent light (108) emitted by that particular plane of the sample (107) is collected by a target (109).
  • DD direction of detection
  • DI direction of illumination
  • the support (101) can rotate around its vertical axis to allow several angular measurements to be taken in accordance with the technique proposed by Preibisch.
  • the OPT technique (Optical Projection Tomography), described in US20060122498 A1
  • OPT technique is relatively similar to X-ray tomography. It is essentially based on optically illuminating the sample homogeneous and obtain, on the side of the sample opposite to the one from which it is illuminated, an image that can be assimilated to the "shadow” that the sample casts on a plane, or in the case of measuring the fluorescence, the total emission of the illuminated volume
  • This "shadow” or fluorescence emission, normally called projection image has different shades of gray depending on the absorption of light and / or fluorescence emission that occurs in different parts of the sample.
  • This reconstruction algorithm is usually based on solving the Radon transform, originally developed for the X-ray 3D image.
  • the inventors of the present application have also filed the patent application P201531401, entitled “Multiple charge device for flat laser beam microscope” which describes a multiple charge device for feeding a flat laser beam microscope of a continuous flow and Sequential samples.
  • This device fundamentally comprises a capillary conduit that crosses the measuring area of the microscope sample receiving cell having a diameter such that it only allows the passage of the samples one at a time, and an adjustable flow generating element connected to the capillary conduit capable of causing a continuous and controllable flow of samples immersed in a fluid medium through said capillary conduit. This allows a plurality of samples to be passed sequentially through the interior of the receiving cell, accelerating the process of data acquisition of multiple samples.
  • the current flat laser beam microscopes (100) as shown in Fig. 1 normally employ a target (109) called "immersion.”
  • This type of objective (109) requires to be introduced into the fluid in which the sample (107) is immersed, so that said fluid is the only means that interposes between objective (109) and sample (107). Because of this, since the detection direction (DD) according to which the objective (109) is oriented is normally horizontal, the distal end of the objective (109) must enter into the interior of the cuvette (102) through a hole . This setting prevents the change of the lens (109).
  • the invention describes a new automatic lens change device that allows one lens to be automatically exchanged for another in case it is necessary to modify the magnification.
  • This automatic device has two main configurations, a horizontal configuration and a vertical configuration.
  • the objective that is being used is moved in a vertical plane to introduce it above the cuvette until its end is immersed in the fluid that fills the cuvette. Therefore, “immersion” objectives are used in this case.
  • the horizontal configuration the objective that being used, it travels in a horizontal plane on the outside of the cuvette, approaching it at most until its end is adjacent to a lateral wall of the cuvette. Therefore, in this case objectives called "air" are used.
  • This horizontal configuration is also compatible with the presence of a horizontal "immersion” lens fixed to the cuvette, so that by rotating the cuvette it is possible to choose whether the "immersion” device or any of the "air” devices is used. .
  • this new device not only allows the change of objective, but also avoids the need for the change to be made manually, which allows to optimize the processes of obtaining images.
  • the invention describes an automatic lens change device for a flat laser beam microscope comprising: at least two supports for targets, a lateral translation means and a longitudinal translation means. Each of these elements is described in more detail below: a) Supports
  • At least two supports configured for parallel coupling of at least two objectives oriented according to a detection direction. That is, the supports are normally located next to each other according to a direction perpendicular to the detection direction and oriented in parallel according to said detection direction so that, when some objectives are coupled to said supports, all objectives are oriented in parallel. according to the direction of detection.
  • the supports can in principle be configured in any way as long as they allow the rigid coupling of a lens.
  • they may be supports configured so that the lens snaps into place, or they may have threaded clamping elements or the like.
  • the number of media it will depend on the number of objectives necessary for the application. For example, it may be two, three, or more supports.
  • the lateral displacement of the supports can be done individually for each support.
  • the device would include a lateral translation means for each support.
  • the supports are preferably fixed to a single platform, the platform being laterally movable by the lateral translation means. That is, in this case the brackets move laterally all together.
  • Lateral translation means The lateral translation means is configured to move at least two supports laterally so that one of the lenses is facing a flat laser beam microscope cuvette. As mentioned above, it can be a single lateral translation means that move all the supports together, or a lateral translation means for each support so that the supports move individually. In either case, the lateral translation means have the function of placing a specific support, corresponding to a target with a determined magnification, in front of the microscope cuvette.
  • the longitudinal translation means is configured to move longitudinally according to the direction of detection at least the support to which the lens facing the cuvette is attached.
  • the function of this means of longitudinal translation is to allow an adequate focus of the sample whose images are to be acquired by means of the lens facing the cuvette. It can be a single means of longitudinal translation that longitudinally displaces all the supports in unison, or a means of individual longitudinal translation for each support. Both longitudinal and lateral translation means can be simply implemented by small motors.
  • This new device allows to automatically change the objective used at any time to modify the magnification. In addition, this device can have two main configurations. Horizontal configuration
  • the detection direction is horizontal, so that both the lateral translation direction and the longitudinal translation direction are contained in a horizontal plane.
  • the objective in use at all times is not introduced into the cuvette, but acquires the images through the glass of a sidewall of the cuvette. Therefore, in this configuration the type of objective used is an "air" objective.
  • the sample is introduced into the cuvette from above and rotates around a vertical rotation axis.
  • the end of stroke of the longitudinal translation means corresponds to a position in which the distal end of the target facing the cuvette is adjacent to a side wall of said cuvette. That is, the longitudinal translation means can move the support facing the cuvette at most until the end of the corresponding target is next to the side wall of the cuvette without touching it. The reason is obviously to prevent the distal end of the lens from damaging or breaking the side wall of the cuvette.
  • the platform is longitudinally movable by the longitudinal translation means. That is, as the objective in use does not exceed the plane of the side wall of the cuvette, and since all the objectives are located in parallel, there is no danger that any objective will collide with said wall. Therefore, in this case it is not necessary for each support to move longitudinally individually, but rather the longitudinal translation means can move the entire platform assembly, and therefore all the supports at the same time.
  • the detection direction is vertical, so that both the lateral translation direction and the longitudinal translation direction are contained in a vertical plane.
  • the target in use at any time is configured to enter the cuvette vertically from above. Since the cuvette is open superiorly, the target can descend until its distal end is immersed in the fluid that fills the cuvette. Therefore, in this configuration the type of objective used is an "immersion" objective.
  • the sample is introduced into the cuvette from one side and rotates around a horizontal rotation axis.
  • the end of stroke of the longitudinal translation means corresponds to a position in which the distal end of the target facing the cuvette is below the level of the fluid filling said cuvette.
  • each individual support is longitudinally movable by the longitudinal translation means. That is, as the objective in use can descend until its end is introduced into the fluid that fills the cuvette, if all the targets were displaced together there would be a danger that, depending on the size of the cuvette and the separation distance between the supports, one of the objectives adjacent to the objective in use came to collide with one of the side walls of the cuvette.
  • the longitudinal translation means displaces each support individually. This can be done in different ways, either by using an individual longitudinal translation means for each support, or by using a single longitudinal translation means configured so that it can be coupled at any time only to the support facing the cuvette.
  • the present invention is also generally directed to a flat laser beam microscope comprising an automatic target change device according to any of the preceding claims.
  • a flat laser beam microscope which is provided with an automatic horizontal change lens device as described in the previous lines may additionally comprise: d) A means for rotating the cuvette around a vertical axis.
  • This means of rotation can be configured in any way as long as it allows the tray to be rotated in a controlled manner until it is placed in a desired position depending on the most suitable image acquisition mode at any time. For example, it can be simply formed by a small electric stepper motor coupled to the bucket.
  • selecting the angle of rotation of the cuvette can be selected if the fixed "immersion" objective or one of the "air” objectives of the automatic target change device is used. That is, if it is desired to use any of the objectives of the automatic target change device, the cuvette is placed in a position where the fixed target does not interfere with the use of said device. For example, the cuvette can be placed in a position where the fixed target is on the opposite side to that in which the automatic target change device is located, or on the opposite side from that from which it is carried out the lighting of the bucket. In this situation, the user can normally use any of the objectives of the automatic lens change device by connecting the objective in question to an image acquisition equipment that is supposed to be located on that side of the cuvette.
  • the cuvette is placed in a position where said fixed objective is located on the face where the automatic lens change device and also the image acquisition equipment are located.
  • the automatic device will be in a retracted position so that it does not interfere in obtaining the sample images using the fixed target. In this situation, the user can connect the fixed objective to the image acquisition equipment and use it normally.
  • Fig. 1 shows an example of a flat laser beam microscope according to the prior art.
  • Fig. 2 shows a view of a flat laser beam microscope equipped with an automatic lens change device according to the first horizontal configuration.
  • Fig. 3 shows a view of a flat laser beam microscope provided with a lens changing device according to the second vertical configuration.
  • Fig. 4 shows a view of a flat laser beam microscope according to the vertical configuration provided with a means of rotation of the cuvette and an additional lateral objective.
  • Fig. 1 shows an example of a flat laser beam microscope (100) according to the prior art.
  • the sample (107) is arranged in a support (101) inside a cuvette (102) filled with a liquid.
  • a beam (103) of Gaussian, Bessel, Airy or similar linear illumination strikes a cylindrical lens (104) that focuses it thanks to a lighting objective (105) to generate the sheet (106) of vertical flat lighting.
  • This sheet (106) of vertical flat lighting strikes the sample (107) according to the direction of illumination (DI), and the fluorescent light (108) emitted by the sample is collected by a direction-oriented detection lens (109) of detection (DD), which is perpendicular to the lighting direction (DI).
  • the support (101) can rotate around its vertical axis.
  • Fig. 2 shows an example of automatic lens change device (1) according to the present invention in its horizontal configuration.
  • the device (1) of this example specifically has three supports (2) located in a horizontal plane and oriented according to a direction of detection (DD) also horizontal.
  • the three supports (2) are rigidly fixed to a horizontal platform (5), in parallel and aligned with each other.
  • a respective lens (109) is attached to each of the supports (2).
  • the supports (2) are arranged such that the distal ends of the lenses (109) coupled thereto are aligned according to a direction perpendicular to the detection direction (DD).
  • the platform (5) is connected to a lateral translation means (3), for example a small electric motor step by step or provided with a reducer, which is configured to move said platform (5) in a direction perpendicular to the direction of detection (DD) within a horizontal plane.
  • This lateral translation allows to select which of the objectives (109) is aligned with the sample (107) housed inside the cuvette (102).
  • the selection of the objective (109) can be done, for example, according to the magnification needed at a given time or for a particular sample (107).
  • the platform (5) is in turn connected to a means (4) of longitudinal translation, which can also be a small electric motor step by step or equipped with a reducer, which is configured to move said platform (5) according to the direction of detection (DD).
  • This longitudinal translation serves to properly focus the sample (107) on the lens (109) being used.
  • air targets (109) are used that point to the sample (107) through a side wall of the cuvette (102).
  • the existence of this end of race allows to fix the three supports (2) in parallel and aligned to the same platform (5) and move them all together, since with this configuration neither the objectives (109) not aligned with the sample (107) they can collide with the bucket (107).
  • the sample (107) is arranged with the aid of a support (101) inside the cuvette (102) according to a vertical orientation.
  • Fig. 3 shows another example of the automatic target change device (1) of the present invention in its vertical configuration.
  • the device (1) also has three supports (2) located this time in a vertical plane and oriented according to a detection direction (DD) which in this case is vertical.
  • the three supports (2) are fixed to a vertical platform (5), although in this case they are individually longitudinally movable according to the vertical detection direction (DD) relative to the platform (5), as will be seen later.
  • Each of the supports (2) has a lens (109) attached, and, in a resting position of the device (1), the distal ends of the three lenses (109) are aligned in a direction perpendicular to the detection direction (DD).
  • the platform (5) is connected to a lateral translation means (3) similar to those mentioned above which is configured to move the platform (5) according to a horizontal direction perpendicular to the direction (DD) of detection. As in the previous configuration, this lateral translation allows to select which of the objectives (109) is aligned with the sample (107) housed inside the cuvette (102).
  • each of the supports (2) is connected to a respective longitudinal translation means (4) configured to individually move the corresponding support (2) vertically according to the detection direction.
  • immersion objectives (109) are used, so that once the objective (109) to be used by means of the lateral translation means (3) is selected, the corresponding longitudinal translation means (4) is used to lower only said specific objective (109) until its distal end enters the cuvette (102) through its open upper part and is introduced into the liquid in which the sample (107) is immersed. Therefore, the limit switch of the longitudinal translation means (4) must be calibrated so that the distal end of the lens (109) is immersed in said liquid but without touching the sample.
  • the objectives (109) that are not used remain in their rest or retracted position, there is no danger that they may collide with the cuvette (102).
  • the sample (107) located on a support (101) is arranged inside the cuvette (102) according to a horizontal orientation.
  • FIG. 4 shows a case in which the device (1) is installed in a microscope (100) which also has a means (10) for rotating the cuvette (102), such as an electric motor, and an additional lens (11) fixedly coupled to a wall of the cuvette (102) of such so that its distal end is immersed in the liquid that fills the cuvette (102).
  • a means (10) for rotating the cuvette (102) such as an electric motor
  • an additional lens (11) fixedly coupled to a wall of the cuvette (102) of such so that its distal end is immersed in the liquid that fills the cuvette (102).
  • the objectives (109) are moved to a retracted position away from the cuvette (102), as shown in Fig. 4, and then the cuvette (102) is rotated ) until you place the lens (1 1) on the side of the microscope (100) where the image acquisition equipment is located.

Landscapes

  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Optics & Photonics (AREA)
  • Microscoopes, Condenser (AREA)

Abstract

La invención describe un nuevo dispositivo (1) automático que permite cambiar el objetivo (109) de adquisición de imágenes de un microscopio de haz láser plano en función de la magnificación que se desea en cada momento. El dispositivo (1) comprende: al menos dos soportes (2) configurados para el acoplamiento en paralelo de al menos dos objetivos (109) orientados según una dirección (DD) de detección; un medio (3) de traslación lateral configurado para desplazar lateralmente dichos al menos dos soportes (2) de modo que uno de los objetivos (109) quede enfrentado a una cubeta (102) del microscopio (100) de haz láser plano; y un medio (4) de traslación longitudinal configurado para desplazar longitudinalmente según la dirección (DD) de detección al menos el soporte (2) al que está acoplado el objetivo (109) enfrentado a la cubeta (102).

Description

DESCRIPCIÓN
Dispositivo automático de cambio de objetivo para microscopio de haz láser plano OBJETO DE LA INVENCIÓN
La invención pertenece al campo de la microscopía, y más particularmente a la microscopía de iluminación de haz láser plano usada para la obtención de imágenes de varias muestras transparentes o sem i-transparentes tales como embriones, tejidos y otras muestras biológicas.
El objeto de la presente invención es un nuevo dispositivo automático que permite cambiar el objetivo de adquisición de imágenes de un microscopio de haz láser plano en función de la magnificación que se desea en cada momento.
ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN
Los estudios de embriones y muestras biológicas similares a través de microscopio óptico presentan, a diferencia de lo que sucede con células individuales, problemas particulares relacionados con la absorción de la luz y la pérdida de resolución debida a la dispersión de la luz. Para solucionar estos problemas, en los últimos años se han desarrollado mejoras importantes sobre los microscopios de haz láser plano, cuya invención data del 1903.
Un microscopio de haz láser plano está formado fundamentalmente por una cámara acoplada a un objetivo de alta apertura numérica y dispuesta según una dirección denominada "dirección de detección", y un medio de iluminación capaz de emitir una lámina delgada de luz según una dirección denominada "dirección de iluminación" que es perpendicular a la dirección de detección, siguiendo la configuración original de Siedentopf y Zsigmondy acoplada a una cámara de detección. Con esta configuración, la cámara puede obtener una imagen 2D de fluorescencia de la parte de la muestra iluminada por la lámina o plano de iluminación. Si además se desplaza la muestra en la dirección del eje de detección y se toman varias imágenes 2D en diferentes posiciones, se genera un conjunto o pila de imágenes 2D donde cada una de las imágenes 2D corresponde a una posición del plano de iluminación con respecto a la muestra. Esta pila de imágenes 2D contiene información de la posición en z (profundidad de la muestra según la dirección de detección) obtenida al mover la muestra, y de las posiciones x e y, presentes en cada imagen 2D. La pila de imágenes 2D puede entonces fusionarse para generar una imagen 3D de la muestra, como se describe en el documento US 7,554,725 de Stelzer et al. Posteriormente, se propuso hacer rotar la muestra alrededor de su propio eje, normalmente vertical, para captar varias pilas de imágenes 2D (comúnmente denominadas "medidas angulares") y fusionarlas posteriormente, lo que permite mejorar la anisotropía y la calidad de las imágenes (S. Preibisch et al, Nature Methods 7 (2010)).
Para una comprensión más clara de esta técnica, se adjunta la Fig. 1 que muestra un ejemplo de microscopio (100) de haz láser plano. La muestra (107) se dispone en un soporte (101) dentro de una cubeta (102) rellena con un líquido. Un haz (103) de iluminación lineal Gaussiano, Bessel, Airy o similar, incide sobre una lente (104) cilindrica que lo enfoca gracias a un objetivo (105) de iluminación para generar la lámina (106) de iluminación plana vertical. Esta lámina (106) de iluminación plana vertical incide sobre la muestra (107) según la dirección de iluminación (DI), y la luz fluorescente (108) emitida por ese plano concreto de la muestra (107) es recogida por un objetivo (109) de detección orientado según la dirección de detección (DD), que es perpendicular a la dirección de iluminación (DI). El soporte (101) puede girar alrededor de su eje vertical para permitir la toma de varias medidas angulares de acuerdo con la técnica propuesta por Preibisch.
Por otra parte, la técnica OPT (Tomografía de Proyección Óptica, Optical Projection Tomography según sus siglas en inglés), descrita en el documento US20060122498 A1 , es relativamente similar a la tomografía por rayos X. Se basa fundamentalmente en iluminar ópticamente la muestra de forma homogénea y obtener, en el lado de la muestra opuesto a aquel desde el que se ilumina, una imagen que puede asimilarse a la "sombra" que proyecta la muestra sobre un plano, o en el caso de medir la fluorescencia, la emisión total del volumen iluminado. Esta "sombra" o emisión de fluorescencia, normalmente denominada imagen de proyección, tiene diferentes tonos de gris en función de la absorción de la luz y/o emisión de fluorescencia que se produce en diferentes partes de la muestra. Si se ilumina la muestra desde varios ángulos, es posible implementar un algoritmo de reconstrucción sobre todas las imágenes obtenidas para generar una imagen 3D de dicha muestra. Este algoritmo de reconstrucción suele estar basado en resolver la transformada de Radon, originalmente desarrollada para la imagen 3D con rayos X.
Recientemente, los inventores de la presente solicitud han presentado la solicitud de patente PCT/ES2015/070455 titulada "Microscopio y procedimiento para la generación de imágenes 3D de una colección de muestras" que describe un nuevo microscopio que combina la técnica de haz láser plano de tipo SPIM (Selective Plañe lllumination Microscope) con la técnica de la tomografía de proyección óptica (OPT, Optical Projection Tomography). Este nuevo microscopio no almacena una imagen 2D completa por cada posición de la lámina de iluminación, sino que para cada ángulo de adquisición almacena únicamente un parámetro representativo de cada píxel obtenido mediante técnicas de tipo OPT. Es decir, para cada ángulo de adquisición se almacena una única imagen de proyección 2D, en lugar de toda una pila de imágenes 2D (como en la técnica de haz láser plano). Esto permite no sólo disminuir los requerimientos del sistema, sino también aumentar la velocidad de adquisición.
Los inventores de la presente solicitud han presentado también la solicitud de patente P201531401 , titulada "Dispositivo de carga múltiple para microscopio de haz láser plano" que describe un dispositivo de carga múltiple para la alimentación a un microscopio de haz láser plano de un flujo continuo y secuencial de muestras. Este dispositivo fundamentalmente comprende un conducto capilar que atraviesa la zona de medida de la cubeta de recepción de muestras del microscopio que tiene un diámetro tal que sólo permite el paso de las muestras de una en una, y un elemento de generación de flujo regulable conectado al conducto capilar capaz de provocar un flujo continuo y controlable de muestras inmersas en un medio fluido a través de dicho conducto capilar. Ello permite hacer pasar de manera secuencial una pluralidad de muestras por el interior de la cubeta de recepción, acelerando el proceso de adquisición de datos de muestras múltiples. En cualquiera de estos casos, los microscopios (100) de haz láser plano actuales como el mostrado en la Fig. 1 normalmente emplean un objetivo (109) denominado "de inmersión". Este tipo de objetivo (109) requiere estar introducido en el fluido en que está inmersa la muestra (107), de modo que dicho fluido sea el único medio que se interpone entre objetivo (109) y muestra (107). Debido a esto, como la dirección de detección (DD) según la cual está orientado el objetivo (109) es normalmente horizontal, el extremo distal del objetivo (109) debe entrar en el interior de la cubeta (102) a través de un orificio. Esta configuración impide el cambio del objetivo (109).
DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN
La invención describe un nuevo dispositivo automático de cambio de objetivo que permite cambiar automáticamente un objetivo por otro en caso de que sea necesario modificar la magnificación. Este dispositivo automático presenta dos configuraciones principales, una configuración horizontal y una configuración vertical. En la configuración vertical, el objetivo que se está utilizando se desplaza en un plano vertical para introducirlo por arriba en la cubeta hasta que su extremo está inmerso en el fluido que rellena la cubeta. Por tanto, en este caso se utilizan objetivos "de inmersión". En la configuración horizontal, el objetivo que se está utilizando se desplaza en un plano horizontal por el exterior de la cubeta acercándose a la misma como máximo hasta que su extremo es adyacente a una pared lateral de la cubeta. Por tanto, en este caso se utilizan objetivos denominados "de aire". Esta configuración horizontal es además compatible con la presencia de un objetivo horizontal "de inmersión" fijado a la cubeta, de modo que haciendo girar la cubeta se pueda elegir si se utiliza el dispositivo "de inmersión" o cualquiera de los dispositivos "de aire". En cualquiera de los casos, este nuevo dispositivo no sólo permite el cambio de objetivo, sino que además evita la necesidad de que el cambio se realice manualmente, lo que permite optimizar los procesos de obtención de imágenes.
La invención describe un dispositivo automático de cambio de objetivo para microscopio de haz láser plano que comprende: al menos dos soportes para objetivos, un medio de traslación lateral y un medio de traslación longitudinal. A continuación, se describe cada uno de estos elementos con mayor detalle: a) Soportes
Se trata de al menos dos soportes configurados para el acoplamiento en paralelo de al menos dos objetivos orientados según una dirección de detección. Es decir, los soportes están normalmente situados uno junto al otro según una dirección perpendicular a la dirección de detección y orientados en paralelo según dicha dirección de detección de modo que, cuando se acoplan unos objetivos a dichos soportes, todos los objetivos están orientados en paralelo según la dirección de detección.
Los soportes pueden en principio estar configurados de cualquier modo siempre que permitan el acoplamiento rígido de un objetivo. Por ejemplo, puede tratarse de soportes configurados de modo que el objetivo encaje a presión, o bien pueden tener elementos de apriete de tipo roscado o similares. En cuanto al número de soportes, dependerá a su vez del número de objetivos necesarios para la aplicación. Por ejemplo, puede tratarse de dos, tres, o más soportes.
El desplazamiento lateral de los soportes puede realizarse de manera individual para cada soporte. En este caso, el dispositivo incluiría un medio de traslación lateral para cada soporte. Sin embargo, en una realización preferida de la invención los soportes preferentemente están fijados a una única plataforma, siendo la plataforma desplazable lateralmente por el medio de traslación lateral. Es decir, en este caso los soportes se desplazan lateralmente todos juntos. b) Medio de traslación lateral El medio de traslación lateral está configurado para desplazar lateralmente los al menos dos soportes de modo que uno de los objetivos quede enfrentado a una cubeta del microscopio de haz láser plano. Como se ha comentado anteriormente, puede tratarse de un único medio de traslación lateral que desplaza todos los soportes conjuntamente, o bien de un medio de traslación lateral para cada soporte de manera que los soportes se desplazan individualmente. En cualquiera de los casos, el medio de traslación lateral tiene la función de colocar un soporte específico, que corresponde a un objetivo con una magnificación determinada, frente a la cubeta del microscopio. c) Medio de traslación longitudinal
El medio de traslación longitudinal está configurado para desplazar longitudinalmente según la dirección de detección al menos el soporte al que está acoplado el objetivo enfrentado a la cubeta. La función de este medio de traslación longitudinal es permitir un enfoque adecuado de la muestra cuyas imágenes se desea adquirir mediante el objetivo enfrentado a la cubeta. Puede tratarse de un único medio de traslación longitudinal que desplaza longitudinalmente todos los soportes al unísono, o bien un medio de traslación longitudinal individual para cada soporte. Los medios de traslación tanto longitudinal como lateral pueden estar implementados simplemente mediante motores de pequeño tamaño. Este nuevo dispositivo permite cambiar de manera automática el objetivo utilizado en cada momento para modificar la magnificación. Además, este dispositivo puede presentar dos configuraciones principales. Configuración horizontal
En una realización preferida de la invención, la dirección de detección es horizontal, de modo que tanto la dirección de traslación lateral como la dirección de traslación longitudinal están contenidas en un plano horizontal. Esto significa que el objetivo en uso en cada momento no se introduce en la cubeta, sino que adquiere las imágenes a través del cristal de una pared lateral de la cubeta. Por tanto, en esta configuración el tipo de objetivo empleado es un objetivo "de aire". En esta configuración horizontal del dispositivo de la invención, la muestra se introduce en la cubeta por arriba y rota alrededor de un eje de rotación vertical.
En otra realización más preferida de la invención, el fin de carrera del medio de traslación longitudinal corresponde a una posición en la que el extremo distal del objetivo enfrentado a la cubeta es adyacente a una pared lateral de dicha cubeta. Es decir, el medio de traslación longitudinal puede desplazar el soporte enfrentado a la cubeta como máximo hasta que el extremo del objetivo correspondiente está junto a la pared lateral de la cubeta sin tocarla. El motivo es evidentemente evitar que el extremo distal del objetivo pueda dañar o romper la pared lateral de la cubeta
En otra realización aún más preferida de la invención, la plataforma es desplazable longitudinalmente por el medio de traslación longitudinal. Es decir, como el objetivo en uso no llega a superar el plano de la pared lateral de la cubeta, y como todos los objetivos están ubicados en paralelo, no existe el peligro de que ningún objetivo llegue a chocar con dicha pared. Por lo tanto, en este caso no es necesario que cada soporte se desplace longitudinalmente de manera individual, sino que el medio de traslación longitudinal puede desplazar todo el conjunto de la plataforma, y por tanto todos los soportes a la vez.
Configuración vertical
De acuerdo con otra realización preferida de la invención, la dirección de detección es vertical, de modo que tanto la dirección de traslación lateral como la dirección de traslación longitudinal están contenidas en un plano vertical. Esto significa que el objetivo en uso en cada momento está configurado para introducirse en la cubeta verticalmente desde arriba. Como la cubeta está abierta superiormente, el objetivo puede descender hasta que su extremo distal queda inmerso en el fluido que rellena la cubeta. Por tanto, en esta configuración el tipo de objetivo utilizado es un objetivo "de inmersión". Además, en la configuración vertical del dispositivo de la invención la muestra se introduce en la cubeta por un lateral y rota alrededor de un eje de rotación horizontal.
En otra realización preferida de la invención, el fin de carrera del medio de traslación longitudinal corresponde a una posición en la que el extremo distal del objetivo enfrentado a la cubeta queda por debajo del nivel del fluido que rellena dicha cubeta. En otra realización aún más preferida de la invención, cada soporte individual es desplazable longitudinalmente por el medio de traslación longitudinal. Es decir, como el objetivo en uso puede descender hasta que su extremo se introduce en el fluido que rellena la cubeta, si se desplazaran todos los objetivos conjuntamente existiría el peligro de que, en función del tamaño de la cubeta y de la distancia de separación entre los soportes, uno de los objetivos adyacentes al objetivo en uso llegase a chocar con alguna de las paredes laterales de la cubeta. Para evitar esta posibilidad, en esta configuración preferentemente el medio de traslación longitudinal desplaza cada soporte de manera individual. Esto puede hacerse de diferentes modos, bien usando un medio de traslación longitudinal individual para cada soporte, o bien utilizando un único medio de traslación longitudinal configurado de modo que pueda acoplarse en cada momento únicamente al soporte enfrentado a la cubeta.
La presente invención también está dirigida de manera general a un microscopio de haz láser plano que comprende un dispositivo automático de cambio de objetivo de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores.
Además, un microscopio de haz láser plano que está dotado de un dispositivo automático de cambio de objetivo de configuración horizontal como el descrito en las líneas anteriores puede adicionalmente comprender: d) Un medio de rotación de la cubeta alrededor de un eje vertical. Este medio de rotación puede configurarse de cualquier manera siempre que permita hacer girar la cubeta de una manera controlada hasta situarla en una posición deseada en función del modo de adquisición de imágenes más adecuado en cada momento. Por ejemplo, puede estar formado simplemente por un pequeño motor eléctrico paso a paso acoplado a la cubeta. e) Un objetivo fijado a una pared lateral de la cubeta de tal modo que su extremo distal atraviesa dicha pared lateral y está inmerso en el fluido que rellena la cubeta.
Se trata pues de un objetivo fijo "de inmersión" similar a los utilizados en los microscopios de haz láser plano de acuerdo con la técnica anterior.
De este modo, seleccionando el ángulo de rotación de la cubeta puede seleccionarse si se utiliza el objetivo fijo "de inmersión" o alguno de los objetivos "de aire" del dispositivo automático de cambio de objetivo. Es decir, si se desea utilizar alguno de los objetivos del dispositivo automático de cambio de objetivo, se coloca la cubeta en una posición en la que el objetivo fijo no interfiera con el uso de dicho dispositivo. Por ejemplo, puede colocarse la cubeta en una posición en la que el objetivo fijo se encuentre en la cara opuesta a aquella en la que está el dispositivo automático de cambio de objetivo, o bien en la cara opuesta a aquella desde la que se lleva a cabo la iluminación de la cubeta. En esta situación, el usuario puede utilizar normalmente cualquiera de los objetivos del dispositivo automático de cambio de objetivo conectando el objetivo en cuestión a un equipamiento de adquisición de imágenes que se supone situado en ese lado de la cubeta.
Alternativamente, si se desea utilizar el objetivo fijo, se coloca la cubeta en una posición en la que dicho objetivo fijo se encuentre en la cara donde está el dispositivo automático de cambio de objetivo y también el equipamiento de adquisición de imágenes. El dispositivo automático se encontrará en una posición retraída de manera que no interfiera en la obtención de las imágenes de la muestra usando el objetivo fijo. En esta situación, el usuario podrá conectar el objetivo fijo al equipamiento de adquisición de imágenes y utilizarlo normalmente.
BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS
La Fig. 1 muestra un ejemplo de microscopio de haz láser plano de acuerdo con la técnica anterior.
La Fig. 2 muestra una vista de un microscopio de haz láser plano dotado de un dispositivo automático de cambio de objetivo de acuerdo con la primera configuración horizontal. La Fig. 3 muestra una vista de un microscopio de haz láser plano dotado de un dispositivo de cambio de objetivo de acuerdo con la segunda configuración vertical.
La Fig. 4 muestra una vista de un microscopio de haz láser plano según la configuración vertical dotado de un medio de rotación de la cubeta y un objetivo lateral adicional.
REALIZACIONES PREFERENTES DE LA INVENCIÓN
La Fig. 1 muestra un ejemplo de microscopio (100) de haz láser plano de acuerdo con la técnica anterior. Como se ha descrito más arriba en este documento, la muestra (107) se dispone en un soporte (101) dentro de una cubeta (102) rellena con un líquido. Un haz (103) de iluminación lineal Gaussiano, Bessel, Airy o similar, incide sobre una lente (104) cilindrica que lo enfoca gracias a un objetivo (105) de iluminación para generar la lámina (106) de iluminación plana vertical. Esta lámina (106) de iluminación plana vertical incide sobre la muestra (107) según la dirección de iluminación (DI), y la luz fluorescente (108) emitida por la muestra es recogida por un objetivo (109) de detección orientado según la dirección de detección (DD), que es perpendicular a la dirección de iluminación (DI). El soporte (101) puede girar alrededor de su eje vertical.
La Fig. 2 muestra un ejemplo de dispositivo (1) automático de cambio de objetivo según la presente invención en su configuración horizontal. Como se puede apreciar, el dispositivo (1) de este ejemplo presenta específicamente tres soportes (2) situados en un plano horizontal y orientados según una dirección de detección (DD) también horizontal. Los tres soportes (2) están fijados rígidamente a una plataforma (5) horizontal, en paralelo y alineados unos con otros. A cada uno de los soportes (2) está acoplado un objetivo (109) respectivo. En otras palabras, los soportes (2) están dispuestos de tal modo que los extremos distales de los objetivos (109) acoplados a los mismos están alineados de acuerdo con una dirección perpendicular a la dirección de detección (DD).
La plataforma (5) está conectada a un medio (3) de traslación lateral, por ejemplo un pequeño motor eléctrico paso a paso o dotado de un reductor, que está configurado para desplazar dicha plataforma (5) en una dirección perpendicular a la dirección de detección (DD) dentro de un plano horizontal. Esta traslación lateral permite seleccionar cuál de los objetivos (109) queda alineado con la muestra (107) alojada en el interior de la cubeta (102). La selección del objetivo (109) se puede hacer, por ejemplo, según la magnificación que se necesita en un momento determinado o para una muestra (107) en particular. La plataforma (5) está conectada a su vez a un medio (4) de traslación longitudinal, que también puede ser un pequeño motor eléctrico paso a paso o dotado de un reductor, que está configurado para desplazar dicha plataforma (5) según la dirección de detección (DD). Esta traslación longitudinal sirve para enfocar adecuadamente la muestra (107) en el objetivo (109) que se está utilizando. En esta configuración horizontal, se utilizan objetivos (109) de aire que apuntan a la muestra (107) a través de una pared lateral de la cubeta (102). Por ese motivo, es necesario calibrar cuidadosamente el final de carrera del medio (4) de traslación longitudinal para que el extremo distal del objetivo (109) alineado con la cubeta (102) no avance excesivamente y llegue a chocar con dicha pared lateral de la cubeta (102). La existencia de este final de carrera permite fijar los tres soportes (2) en paralelo y alineados a la misma plataforma (5) y desplazarlos todos conjuntamente, ya que con esta configuración tampoco los objetivos (109) no alineados con la muestra (107) pueden llegar a chocar con la cubeta (107). En esta configuración horizontal, la muestra (107) está dispuesta con ayuda de un soporte (101) en el interior de la cubeta (102) según una orientación vertical.
La Fig. 3 muestra otro ejemplo del dispositivo (1) automático de cambio de objetivo de la presente invención en su configuración vertical. En este ejemplo, el dispositivo (1) también presenta tres soportes (2) situados esta vez en un plano vertical y orientados según una dirección de detección (DD) que en este caso es vertical. Los tres soportes (2) están fijados a una plataforma (5) vertical, aunque en este caso son desplazables longitudinalmente de manera individual según la dirección de detección (DD) vertical con relación a la plataforma (5), como se verá más adelante. Cada uno de los soportes (2) tiene acoplado un objetivo (109), y, en una posición de reposo del dispositivo (1), los extremos distales de los tres objetivos (109) están alineados según una dirección perpendicular a la dirección de detección (DD). La plataforma (5) está conectada a un medio (3) de traslación lateral similar a los mencionados anteriormente que está configurado para desplazar la plataforma (5) según una dirección horizontal perpendicular a la dirección (DD) de detección. Al igual que en la configuración anterior, esta traslación lateral permite seleccionar cuál de los objetivos (109) queda alineado con la muestra (107) alojada en el interior de la cubeta (102).
Además, cada uno de los soportes (2) está conectado a un respectivo medio (4) de traslación longitudinal configurado para desplazar de manera individual el correspondiente soporte (2) verticalmente según la dirección de detección. En esta configuración vertical se utilizan objetivos (109) de inmersión, de manera que una vez seleccionado el objetivo (109) que se va a utilizar mediante el medio (3) de traslación lateral, se utiliza el medio (4) de traslación longitudinal correspondiente para hacer descender únicamente dicho objetivo (109) específico hasta que su extremo distal entra en la cubeta (102) a través de su parte superior abierta y se introduce en el líquido en el que está inmersa la muestra (107). Por tanto, el final de carrera de los medios (4) de traslación longitudinal debe estar calibrado para que el extremo distal del objetivo (109) se sumerja en dicho líquido pero sin llegar a tocar la muestra. Puesto que, a diferencia de lo que ocurre en la configuración horizontal, los objetivos (109) que no se utilizan permanecen en su posición de reposo o retraída, no existe peligro de que puedan llegar a chocar con la cubeta (102). En esta configuración, la muestra (107) situada en un soporte (101) se dispone en el interior de la cubeta (102) de acuerdo con una orientación horizontal.
Por último, la Fig. 4 muestra un caso en que el dispositivo (1) está instalado en un microscopio (100) que además tiene un medio (10) de rotación de la cubeta (102), como por ejemplo un motor eléctrico, y un objetivo (11) adicional acoplado de manera fija a una pared de la cubeta (102) de tal modo que su extremo distal está inmerso en el líquido que rellena la cubeta (102). Estos elementos permiten al usuario seleccionar entre cualquiera de los objetivos (109) de aire desplazables por medio del dispositivo (1) descrito en los ejemplos anteriores, y el objetivo (1 1) adicional de inmersión. Para ello, si se desea utilizar uno de los objetivos (109) se acciona el medio (10) de rotación de la cubeta (102) hasta colocar el objetivo (1 1) adicional en el lado opuesto del microscopio (100) y se utiliza el objetivo (109) en cuestión del modo descrito anteriormente. En caso de que se desee utilizar el objetivo (11), se desplazan los objetivos (109) hasta una posición replegada alejada de la cubeta (102), como se muestra en la Fig. 4, y a continuación se hace girar la cubeta (102) hasta colora el objetivo (1 1) en el lado del microscopio (100) donde se encuentra el equipamiento de adquisición de imágenes.

Claims

REIVINDICACIONES
1. Dispositivo (1) automático de cambio de objetivo (109) para microscopio (100) de haz láser plano, caracterizado por que comprende:
- al menos dos soportes (2) configurados para el acoplamiento en paralelo de al menos dos objetivos (109) orientados según una dirección (DD) de detección;
- un medio (3) de traslación lateral configurado para desplazar lateralmente dichos al menos dos soportes (2) de modo que uno de los objetivos (109) quede enfrentado a una cubeta (102) del microscopio (100) de haz láser plano; y
- un medio (4) de traslación longitudinal configurado para desplazar longitudinalmente según la dirección (DD) de detección al menos el soporte (2) al que está acoplado el objetivo (109) enfrentado a la cubeta (102).
2. Dispositivo (1) de acuerdo con la reivindicación 1 , donde los al menos dos soportes (2) están fijados a una plataforma (5), siendo la plataforma (5) desplazable lateralmente por el medio (3) de traslación lateral.
3. Dispositivo (1) de acuerdo con la reivindicación 2, donde la dirección (DD) de detección es horizontal, de modo que tanto la dirección de traslación lateral como la dirección de traslación longitudinal están contenidas en un plano horizontal.
4. Dispositivo (1) de acuerdo con la reivindicación 3, donde el fin de carrera del medio (4) de traslación longitudinal corresponde a una posición en la que un extremo distal del objetivo (109) enfrentado a la cubeta (102) es adyacente a una pared lateral de dicha cubeta (102).
5. Dispositivo (1) de acuerdo con la reivindicación 4, donde la plataforma (5) es desplazable longitudinalmente por el medio (4) de traslación longitudinal.
6. Dispositivo (1) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-2, donde la dirección (DD) de detección es vertical, de modo que tanto la dirección de traslación lateral como la dirección de traslación longitudinal están contenidas en un plano vertical.
7. Dispositivo (1) de acuerdo con la reivindicación 6, donde cada soporte (2) es desplazable longitudinalmente de manera individual por el medio (4) de traslación longitudinal.
8. Dispositivo (1) de acuerdo con la reivindicación 7, donde el fin de carrera del medio (4) de traslación longitudinal corresponde a una posición en la que el extremo distal del objetivo (109) enfrentado a la cubeta (102) queda por debajo del nivel del fluido que rellena dicha cubeta (102).
9. Microscopio (100) de haz láser plano caracterizado por que comprende un dispositivo (1) automático de cambio de objetivo (109) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores.
10. Microscopio (100) de haz láser plano caracterizado por que comprende un dispositivo (1) automático de cambio de objetivo (109) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 2-4, y que además comprende:
- un medio de rotación (10) de la cubeta (102) alrededor de un eje vertical; y
- un objetivo (1 1) fijado a una pared lateral de la cubeta (102) de tal modo que su extremo distal atraviesa dicha pared lateral y está inmerso en el fluido que rellena la cubeta (102),
de modo que seleccionando el ángulo de rotación de la cubeta (102) puede seleccionarse si se utiliza el objetivo (1 1) fijo o alguno de los objetivos (109) del dispositivo (1) automático de cambio de objetivo (109).
PCT/ES2017/070028 2016-01-21 2017-01-17 Dispositivo automático de cambio de objetivo para microscopio de haz láser plano WO2017125635A1 (es)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
ES201630071A ES2630733B1 (es) 2016-01-21 2016-01-21 Dispositivo automático de cambio de objetivo para microscopio de haz láser plano
ESP201630071 2016-01-21

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2017125635A1 true WO2017125635A1 (es) 2017-07-27

Family

ID=59362154

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/ES2017/070028 WO2017125635A1 (es) 2016-01-21 2017-01-17 Dispositivo automático de cambio de objetivo para microscopio de haz láser plano

Country Status (2)

Country Link
ES (1) ES2630733B1 (es)
WO (1) WO2017125635A1 (es)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP3650906A4 (en) * 2017-07-04 2021-04-07 Universidad Carlos III de Madrid ROTARY LENS SWITCH FOR A PLANAR LASER BEAM MICROSCOPE

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2003029156A (ja) * 2001-07-19 2003-01-29 Minolta Co Ltd 固浸レンズ及びそれを用いた対物レンズ及び光記録再生装置
US20100134881A1 (en) * 2007-04-18 2010-06-03 Helmut Lippert Objective replacement device for microscopes
US20120200693A1 (en) * 2009-09-24 2012-08-09 Carl Zeiss Microimaging Gmbh Microscope with a sheet of light

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2003029156A (ja) * 2001-07-19 2003-01-29 Minolta Co Ltd 固浸レンズ及びそれを用いた対物レンズ及び光記録再生装置
US20100134881A1 (en) * 2007-04-18 2010-06-03 Helmut Lippert Objective replacement device for microscopes
US20120200693A1 (en) * 2009-09-24 2012-08-09 Carl Zeiss Microimaging Gmbh Microscope with a sheet of light

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP3650906A4 (en) * 2017-07-04 2021-04-07 Universidad Carlos III de Madrid ROTARY LENS SWITCH FOR A PLANAR LASER BEAM MICROSCOPE

Also Published As

Publication number Publication date
ES2630733B1 (es) 2018-07-04
ES2630733A1 (es) 2017-08-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2248548T3 (es) Platina rotativa para formar imagenes de una muestra.
ES2912386T3 (es) Microscopio y procedimiento para la microscopía SPIM
ES2964747T3 (es) Microscopio
JP6632523B2 (ja) 顕微鏡で複数のサンプルを検査するための光学装置および方法
JP6445531B2 (ja) サンプルを画像化するための顕微鏡モジュール
JP6195922B2 (ja) 顕微鏡
AU2003238484B2 (en) Microscope with a viewing direction perpendicular to the illumination direction
JP6514198B2 (ja) 光シート顕微鏡検査用の装置
ES2628318T3 (es) Bandeja, sistema y método de supervisión y de cultivo de un cultivo celular
JP2016535861A5 (es)
ES2909610T3 (es) Medición y corrección de la inclinación del cubreobjetos en el haz luminoso de un microscopio
ES2567379B1 (es) Microscopio y procedimiento para la generación de imágenes 3D de una colección demuestras
ES2800680T3 (es) Microscopio confocal multimodal de escaneo de línea y escaneo de muestras
ES2928577T3 (es) Barrido en Z fijo bidimensional y tridimensional
US20140147884A1 (en) Laser microdissection device and method
CN111492295A (zh) 用于对样本成像的显微镜和用于这种显微镜的样本保持器
ES2630733B1 (es) Dispositivo automático de cambio de objetivo para microscopio de haz láser plano
ES2749742B2 (es) Microscopio y procedimiento de haz láser plano para muestras extensas
JP2017525982A (ja) ハイスループット生化学的スクリーニング
BR112019011137A2 (pt) aparelho para estabelecer o efeito de ingredientes ativos em nematódeos e outros organismos em testes aquosos
US10437038B2 (en) Device and method for creating an optical tomogram of a microscopic sample
ES2695798B2 (es) Dispositivo rotativo de cambio de objetivo para microscopio de haz láser plano
ES2749734B2 (es) Dispositivo móvil de generación de imágenes 3D mediante haz láser plano
WO2017168026A1 (es) Dispositivo de sujeción de muestras para microscopio
WO2017055673A1 (es) Dispositivo de carga múltiple para microscopio de haz láser plano

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 17741137

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 17741137

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1