WO2012021014A2 - 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 복합조성물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병 또는 당뇨 합병증 예방 또는 치료용 조성물 - Google Patents

당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 복합조성물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병 또는 당뇨 합병증 예방 또는 치료용 조성물 Download PDF

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김명화
구세광
예인해
이한창
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    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics

Definitions

  • composition for the prevention or treatment of diabetes or complications of diabetes mellitus containing a complex composition of Angelica extract and acid garlic extract as an active ingredient
  • the present invention relates to a composition for preventing or treating diabetes mellitus or diabetic complications comprising a composite composition of Angelica extract and acid garlic extract as an active ingredient.
  • Diabetes is one of the representative chronic adult diseases. Diabetes patients in Korea are estimated to be at least 2.5 million, about 5% of the total population.
  • Diabetes is a disease in which sugar in the blood remains in the blood and cannot be used as energy due to lack of insulin secretion or lack of insulin action or function.
  • the causes of diabetes include westernization of diet, obesity, lack of exercise, and stress.
  • developed countries such as the United States, Europe, and Japan have tremendous socio-economic consequences of increased obesity and diabetes.In Korea, economic development has led to a rapid increase in diabetes, with more than 300 million patients by 2025. (Kim, Y., Diabetes Care, 1995, 18: 545-548).
  • Diabetes can be broadly divided into insulin-dependent type 1 diabetes and non-dependent type 2 diabetes. Type 1 diabetics rarely secrete insulin due to genetic causes or viral infections, and type 2 diabetics have normal amounts of insulin.
  • type 2 diabetes with obesity is caused by insulin resistance caused by an increase in fatty acids in the blood, resulting in abnormalities in glucose metabolism, resulting in higher blood glucose in the blood. It is also thought that abnormalities in insulin secretion and abnormal signal transduction are causes of type 2 diabetes. Insulin resistance is a major factor in the etiology of type 2 diabetes, which appears in more than 90% of people with type 2 diabetes and is thought to precede years of hyperglycemia (Haffner SM, et al. JAMA, 1990, 263: 2893-). 2898). Insulin resistance and thus a combination of metabolic and vascular abnormalities are called insulin resistance syndrome or metabolic syndrome.
  • Metabolic Syndrome It is associated with an increased risk of coronary artery disease, especially coronary artery disease (Isomaa B, et al. Diabetes Care, 2001, 24: 683-9), and metabolic syndrome is reported to triple the risk and mortality of coronary artery disease. (Lakka H, et al. JAMA, 2002, 288: 2709-2716). Metabolic syndrome refers to a condition in which various diseases such as diabetes, hypertension, hyperlipidemia, obesity, coronary or arteriosclerosis, which occur due to chronic metabolic disorders, occur simultaneously. Reaven (Reaven GM, Diabetes, 1988, 37 (1595-1607) for the first time. Metabolic syndrome is characterized by insulin resistance, hypertension, dyslipidemia, and mostly accompanied by overweight or obesity.
  • Metabolic syndrome is also a risk factor for cardiovascular disease and has been reported to be associated with death from all causes. Unlike the type 1 diabetes, the type 2 diabetes patients are reported to have a higher prevalence of metabolic syndrome, and it is known that mortality increases when the patients with type 2 diabetes are accompanied by metabolic syndrome (Bonora E, et al. Diabet Med., 2004, 21: 52-8; Ford ES, Diabetes Care., 2005, 28: 1769-78; Alexander CM, et al. Diabetes, 2003, 52: 1210-1214). In addition, studies have been published on the association between the major and microvascular complications of crab type 2 diabetes and the components of metabolic syndrome such as hypertension and dyslipidemia (Mykkanen L, et al.
  • the most serious problems of metabolic syndrome are the development of chronic complications such as diabetic retinopathy, nephropathy, neuropathy, hyperlipidemia, and cardiovascular diseases (stroke, angina, myocardial infarction, peripheral vascular disease) (Wolf SP, Br Med Bull., 1993 , 49: 642-652). Most of these chronic complications go through an irreversible process once they occur, and until now there is no way to completely block this process, which can lead to serious symptoms and death if not properly treated.
  • composition for the prevention and treatment of conventional diabetes or diabetic complications The composition for the prevention or treatment of obesity and metabolic syndrome (Metabolic Syndrome or Syndrome X) containing a complex extract of Evodiae Fructus, White Root (Imperatae Rhizoma) and Cirrus Unshiu Markovich as an active ingredient It is disclosed in the Republic of Korea Patent Publication No. 2009-0114093, the Republic of Korea Patent Publication No.
  • 2010-0956278 is a composite containing Yeoju, Dongeohacho, phalanges, Sangbaekpi, jeonseuneun root, Hwangjeong, Baekchul, Mcmundong, Cornus, Ginseng Disclosed is a composition for the treatment or prevention of diabetes or diabetic complications using the herbal extract as an active ingredient.
  • Korean Patent Publication No. 2006-0025990 discloses Baekgangjam, Red Ginseng, Pageukcheon, Donkey God, Gugija, Bokbunja, Jahanggi, Breeding, Gupan, Keel, Choeyang, Hwangjeong, Jiji, Gokjeongcho, Dragon Meat, Sujijihwang, Wooseol, Blush Disclosed is a composition for preventing diabetes light containing a complex herbal extract consisting of a powder, aspirations, schisandra, baekpanxin, fasting, itinerary, chajeonja, antler, hippocampus, and clam.
  • Korean Patent Laid-Open Publication No. 2003-0059952 discloses a composition comprising an extract consisting of a peritropic excipient pure herbal medicine compound, ie, rhubarb, tea, earth and sand, fruit, wind and poison.
  • a peritropic excipient pure herbal medicine compound ie, rhubarb, tea, earth and sand, fruit, wind and poison.
  • Angelica gigas Nakai is a naturalized plant that is cultivated in Korea, and the Korean Angelica is known as a true donkey. It is a perennial herb that is native to Japan and is 60-90 cm high, and its flowers are white in August-September. Running at the end, the fruit is flat long oval with narrow wings at the edge. The root is called Angelica, which has the effect of blood, so there is no blood on the face, dizziness is frequent, and it is known to be effective for people who have no gloss on eyes and lips.
  • Angelica extracts were induced by diabetes by promoting the activation of 5 'AMP-activated protein kinase (AMP') and glucose uptake in the C2C12 myotube, a mouse skeletal muscle cell. It has been reported that various diseases can be prevented (Korean Patent Publication No. 2005-0111657), and lipid metabolism is improved to decrease blood concentration of trigyceride and increase blood concentration of HDL cholesterol in diabetic disease. It is also known to work (Korean Patent Publication No. 2009-0078267). Mountain garlic (Allium victor ial is subsp.platyphyl lum) is a perennial herb belonging to the monocotyledonous liliaceae, which is distributed throughout the region.
  • AMP' 5 'AMP-activated protein kinase
  • the extract of each part of mountain garlic is edible and has been traditionally used in one room for cold, antibacterial, digestive and dry stomach.
  • sulfur compounds with potential antithrombotic action and antiplatelet cell activity have been reported (Wijaya, CH et al., Nat. Prod. Sci., 1996, 2, 37-42; Li akopou 1 ou-Kyr i ak i des, M. et al., Phytochem., 1985, 24, 600-601).
  • the effects of the acid garlic extract has been widely studied, the composition for the prevention or treatment of atherosclerosis and hypercholesterolemia containing acid garlic extract as an active ingredient (Korean Patent Publication No.
  • liver protection or Compositions for the prevention or treatment of liver disease Korea Patent Publication No. 2005-0102572
  • compositions for the prevention or treatment of diabetic disease Korea Patent Publication No. 2005-0043092
  • Antimicrobial composition Korean Patent Publication No. 2009-0100732
  • GJIC gap junctional intercellular communication
  • Therapeutic composition Water Korean Patent Publication No. 2009-0100573 and the like have been reported.
  • the present inventors have studied to find an effective substance for diabetic or diabetic complications in natural products, and as a result, a composite composition of a mixture of Angelica extract and acid garlic has a synergistic effect than the sum of the individual extracts to treat and improve diabetes or diabetic complications. Confirmed to exhibit an excellent effect to complete the present invention.
  • An object of the present invention to provide a pharmaceutical composition for the prevention or treatment of diabetes mellitus or diabetic complications containing a complex composition of the Angelica extract and acid garlic extract as an active ingredient.
  • Another object of the present invention to provide a pharmaceutical composition for the prevention or treatment of obesity diseases containing a complex composition of Angelica extract and acid garlic extract as an active ingredient.
  • Another object of the present invention to provide a health food composition for the prevention or improvement of diabetes mellitus or diabetic complications containing a complex composition of the Angelica extract and acid garlic extract as an active ingredient.
  • Another object of the present invention to provide a health food composition for the prevention or improvement of obesity diseases containing a complex composition of Angelica extract and acid garlic extract as an active ingredient.
  • the present invention provides a method for preventing diabetes or diabetic complications comprising a composite composition in which the mixed weight ratio of Angelica extract and acid garlic extract is 1: 4-6 or 2-4: 1 as an active ingredient.
  • a therapeutic pharmaceutical composition provided is a therapeutic pharmaceutical composition.
  • the present invention provides a pharmaceutical composition for the prevention or treatment of obesity diseases containing a complex composition of the mixed weight ratio of Angelica extract and acid garlic extract 1: 1: 6-6 or 2-4: 1 as an active ingredient. .
  • the present invention is a health food composition for preventing or improving diabetes or diabetic complications containing a composite composition of the mixed weight ratio of Angelica extract and acid garlic extract is 1: 4-6 or 2-4: 1 as an active ingredient To provide.
  • the present invention provides a health food composition for the prevention or improvement of obesity diseases containing a complex composition of the mixed weight ratio of Angelica extract and acid garlic extract 1: 4-6 or 2-4: 1 as an active ingredient. .
  • composition ratio of the composite composition of Angelica extract and acid garlic extract according to the present invention is 1: 4-6 or 2-4: 1, better anti-obesity, hypoglycemia, and anti-obesity than the sum of the effects of the individual extracts Prevents, treats or improves diabetic and diabetic obesity, hyperglycemia, hyperlipidemia, hypertension, atherosclerosis, stroke, liver damage, kidney damage, immunosuppression, eye damage It can be usefully used as a composition for the composition, and because it is excellent in anti-obesity effect, it can be usefully used as a composition for preventing, treating or improving obesity.
  • 1 is a graph showing the weight gain for the administration group according to an embodiment of the present invention.
  • Figure 2 is a view showing the change in the diameter of the ovarian peripheral fat cells and abdominal wall fat cells diameter for the administration group according to an embodiment of the present invention.
  • the present invention provides a pharmaceutical composition for preventing or treating diabetic or diabetic complications, which contains a complex composition of the Angelica extract and acid garlic extract as an active ingredient.
  • the Angelica extract and the garlic extract is preferably a weight ratio of 1: 4-6 or 2-4: 1, more preferably 1: 4 or 4: 1, Most preferred is 4: 1.
  • the pharmaceutical composition according to the present invention exhibits anti-obesity activity, and thus may be usefully used for preventing or treating diabetic obesity disease, which is a complication from diabetes.
  • the effects of the pharmaceutical composition according to the present invention on the body weight, changes in the ovarian fat weight, changes in the ovarian fat cell diameter and changes in abdominal wall fat cell diameter, weight loss, ovary It has excellent effects on reducing peripheral fat weight, decreasing ovarian fat cell size, and reducing abdominal wall fat cell size, and thus can be usefully used for preventing or treating diabetic obesity diseases (see Examples 1 and 6 and FIGS. 1-2).
  • the pharmaceutical composition according to the present invention exhibits hypoglycemic activity, and thus may be useful for preventing or treating diabetes or complications caused by diabetes.
  • the pharmaceutical composition according to the present invention exhibits anti-hyperlipidemic activity, and thus may be useful for preventing or treating diabetes or complications caused by diabetes.
  • results decreased total cholesterol in blood, decreased blood triglyceride content, decreased blood LDL content and increased HDL content in blood (see Examples 3 and 8), increased number of pancreatic islets, increased pancreatic islet diameter and pancreatic islet.
  • the pharmaceutical composition according to the present invention may be useful for preventing or treating diabetes mellitus or complications caused by diabetes by showing liver protective activity.
  • the pharmaceutical composition according to the present invention exhibits renal protective activity and can be usefully used for preventing or treating diabetes or complications caused by diabetes.
  • ⁇ change of thymus gland weight, change of spleen weight, change of total thickness of thoracic lobule, change of thickness of thyroid cortex, change of total thickness of spleen for the pharmaceutical composition according to the present invention As a result of experiments to measure the change, the weight of the thymus gland increased, the spleen weight increased, the total thickness of the thymus lobules, the thickness of the thymus cortex increased, the total thickness of the spleen, and the mean diameter of the splenic white medulla. It can be usefully used to prevent or treat complications (see Example 13).
  • the pharmaceutical composition according to the present invention exhibits an ocular protective activity, and can be usefully used for preventing or treating diabetes or complications caused by diabetes.
  • the change of the cataract visual acuity, the change of the cataract quantitative image value, the change of the lens damage value, the change of the thickness of the lens damage region, the change of the total thickness of the retina, the frozen layer in the retina Experiments measuring the change in thickness, the thickness of the nuclear layer in the retina, and the number of hematopoiesis present in the perilimbary membrane resulted in decreased cataract visual acuity, quantitative cataract image, decreased lens injuries, and lens injuries.
  • the composite composition of the Angelica extract and acid garlic extract of the present invention shows a very excellent effect in obesity, diabetes mellitus, hyperglycemia, liver damage, kidney damage, immune activity and eye protection caused by diabetes or diabetes. Therefore, it can be usefully used for diabetes or diabetic complications.
  • the diabetes which can be prevented or treated by the pharmaceutical composition according to the present invention is type 2 diabetes
  • the diabetic complications include diabetic nephropathy, diabetic liver cirrhosis, hypertension, atherosclerosis, stroke, Heart failure, immunosuppression and diabetic retinopathy may be further included.
  • the present invention also provides a method for treating diabetes mellitus or diabetic complications comprising the step of administering an effective amount of the composite composition of the Angelica extract and acid garlic extract to a subject in need thereof.
  • the Angelica extract and the garlic extract is preferably a weight ratio of 1: 4-6 or 2-4: 1, more preferably 1: 4 or 4: 1, 4: Most preferably, it is 1.
  • the complex composition exhibits an anti-obesity effect by reducing weight, reducing ovarian peripheral fat weight, decreasing ovarian peripheral fat cell size, and reducing abdominal wall fat cell size. Complications caused by treatment can be treated (see Examples 1 and 6 ′ FIGS. 1-2). Furthermore, in the treatment method according to the present invention, the complex composition exhibits a hypoglycemic effect, thereby treating diabetes or complications caused by diabetes (see Examples 2 and 7).
  • the complex composition is hypercholesterol total cholelate It has been shown to decrease sterol content, blood triglyceride content, and blood low density lipoprotein (LDL) content, and increase blood high density lipoprotein (HDL) content (see Examples 3 and 8). Since the diameter is increased and the number of glucagon immune response cells in the pancreatic islets is excellent, the protective effect against pancreatic B cells (see Example 11) is excellent, thereby treating complications caused by diabetes or diabetes.
  • LDL blood low density lipoprotein
  • HDL blood high density lipoprotein
  • the complex composition exhibits a hepatoprotective effect by reducing liver weight, decreasing blood aspartame aminotransferase (AST) content and decreasing blood aminotransferase (ALT) content.
  • AST blood aspartame aminotransferase
  • ALT blood aminotransferase
  • the complex composition exhibits a renal protection effect by reducing the content of urea nitrogen (BUN) and creatinine in the blood, reducing the number of denatured tubules, and reducing kidney weight. Diabetes or complications caused by diabetes can be treated (see Examples 5, 10 and 12).
  • the complex composition is effective in increasing the thymus gland weight, increasing the spleen weight, increasing the total thickness of the thymus lobule, increasing the thickness of the thyroid cortex, increasing the total thickness of the spleen, and increasing the mean diameter of the splenic white medulla.
  • the composite composition is a cataract visual acuity reduction, cataract quantitative image number reduction, lens damage value reduction, lens damage area thickness reduction, retinal thickness increase, retinal freezing layer thickness increase And an increase in the thickness of the nuclear layer in the retina and a decrease in the number of hematopoiesis present in the inner layer of the membrane, thereby exhibiting an ocular protective activity, thereby treating complications caused by diabetes or diabetes (see Example 14).
  • the composite composition of the Angelica extract and wild garlic extract of the present invention is a combination of diabetes mellitus or diabetes mellitus obesity, increased blood sugar, hyperlipidemia, liver damage, kidney damage, immune activity and eye Very good in protection Because of its numerous effects, it can treat diabetes or diabetic complications.
  • the present invention also provides a pharmaceutical composition for the prevention or treatment of obesity diseases, containing a complex composition of the Angelica extract and acid garlic extract as an active ingredient.
  • the Angelica extract and the garlic extract is preferably a weight ratio of 1: 4-6 or 2-4: 1, more preferably 1: 4 or 4: 1, 4: 1 is most preferable.
  • the pharmaceutical composition of the present invention is excellent in weight loss, peripheral ovarian fat weight reduction, ovarian fat cell size reduction, abdominal wall fat cell size reduction effect, so as well as diabetic obesity diseases caused by diabetes, It can be useful for preventing or treating obesity diseases.
  • the present invention provides a method for treating obesity diseases comprising the step of administering to the subject in need thereof a complex composition comprising a mixture of the Angelica extract and acid garlic extract.
  • the Angelica extract and acid garlic extract is preferably a weight ratio of 1: 4-6 or 2-4: 1, more preferably 1: 4 or 4: 1, 4: Most preferably, it is 1.
  • the complex composition exhibits an anti-obesity effect by reducing the weight, decreasing the ovarian fat weight, reducing the size of the peripheral fat cells, reducing the size of the abdominal wall fat cells, thereby producing obesity diseases.
  • Can be treated see Examples 1 and 6, FIGS. 1-2).
  • the present invention provides a health food composition for preventing or improving diabetic or diabetic complications, which contains a complex composition of the Angelica extract and acid garlic extract as an active ingredient.
  • the Angelica extract and the acid garlic extract is preferably a weight ratio of 1: 4-6 or 2-4: 1, more preferably 1: 4 or 4: 1. 4: 1 is most preferable.
  • the health food composition according to the present invention shows a weight loss, ovarian fat weight reduction, ovarian fat cell size reduction, abdominal wall fat cell size reduction effect Since it appears to have a fish tank obesity effect, it can be usefully used to prevent or ameliorate diabetes or diabetes-caused complications (see Examples 1 and 6 and FIGS. 1-2). Furthermore, since the health food composition has been shown to have a hypoglycemic effect, it may be usefully used for preventing or improving complications caused by diabetes or diabetes mellitus (see Examples 2 and 7).
  • the health food composition has a blood total cholesterol content, blood triglyceride content, blood low density lipoprotein (LDL) content reduction effect, blood high density lipoprotein (HDL) content increase effect (Examples 3 and 8) ),
  • the number of pancreatic islets, the diameter of the pancreatic islets, and the number of glucagon immune reaction cells in the pancreatic islets are reduced, so the protective effect against pancreatic B cells is excellent (see Example 11). It can be usefully used for prevention or improvement.
  • the health food composition shows a liver protection effect by reducing liver weight, decreasing blood aspartameaminotransferase (AST) content and decreasing blood aminotransferase (ALT) content, which is caused by diabetes or diabetes mellitus.
  • AST blood aspartameaminotransferase
  • ALT blood aminotransferase
  • the health food composition exhibits a kidney protective effect by reducing the content of urea nitrogen (BUN) and creatinine in the blood, reducing the number of denatured tubules, and reducing kidney height, thereby improving the diabetic or diabetic complications. It can be usefully used to prevent or improve (see Examples 5, 10 and 12).
  • BUN urea nitrogen
  • the health food composition shows an effect of increasing the thymus gland weight, increasing the spleen weight, increasing the total thickness of the thymus lobule, increasing the thickness of the thyroid gland, increasing the total thickness of the spleen, and increasing the mean diameter of the splenic white medulla.
  • the health food composition is a cataract visual acuity reduction, cataract quantitative image Eye protection due to decreased numbers, decreased lens injuries, reduced thickness of the lens injured area, increased retinal thickness, increased thickness of the frozen layer in the retina, increased thickness of the nuclear layer in the retina, and a decrease in the number of blood in the boundary layer.
  • the composite composition of the Angelica extract and acid garlic extract of the present invention has a very excellent effect in obesity, increased blood sugar, hyperlipidemia, liver damage, kidney damage, immune activity and eye protection caused by diabetes or diabetes. It can be usefully used to improve diabetes or diabetic complications of diabetes mellitus or diabetic complications.
  • the diabetes that can be prevented or improved by the health food composition according to the present invention is type 2 diabetes, and the complications of diabetes include diabetic nephropathy, diabetic liver cirrhosis, hypertension, atherosclerosis, stroke, and heart failure. , Immunosuppression and diabetic retinopathy may further include.
  • the present invention provides a health food composition for preventing or improving obesity diseases containing a composite composition of the Angelica extract and acid garlic extract as an active ingredient.
  • the Angelica extract and the acid garlic extract is preferably a weight ratio of 1: 4-6 or 2-4: 1, more preferably 1: 4 or 4: 1. , 4: 1 is most preferred.
  • the health food composition of the present invention is excellent in weight loss, peripheral ovarian fat weight reduction, ovarian fat cell size reduction, abdominal wall fat cell size reduction effect to prevent diabetic obesity diseases caused by diabetes as well as normal obesity diseases Or it can be useful for treatment.
  • the composition according to the present invention exhibits an excellent anti-obesity, antihyperlipidemia, hypoglycemic effect, hepatoprotective effect, renal protective effect and immunoprotective effect depending on the dose.
  • the composition according to the present invention exhibits an equivalent or better effect than the double-dose control group in the combination-complex group with the control drug, and is superior by the combination of the composition with various other drugs.
  • Anti-obesity It was confirmed that there is a possibility of hypoglycemia, hypoglycemic effect, hepatoprotective effect, renal protection effect, immune activity effect and eye protection effect.
  • the composition according to the present invention was not recognized as a result of a single oral dose toxicity test in rats up to the limit dose of 2000 mg / kg, the micronucleus test using mouse bone marrow cells was observed to be negative , It was confirmed that the composition is safe for use in health food and food jars (see Examples 15 and 16).
  • the Angelica and acid garlic can be used without limitation, such as cultivated, harvested or commercially available.
  • the donkey and mountain garlic can use the entire plant, preferably using a leaf, stem or root, but is not limited thereto.
  • the Angelica and live garlic can be used at any stage of the growth stage.
  • Extraction solvents for extracting Angelica and oleracea are preferably water, alcohols or mixtures thereof, preferably water, lower alcohols of d 4 , or mixtures thereof, and it is more preferable to extract methane or ethanol. Preferably, but not limited to.
  • the amount of the extraction solvent is preferably 2-30 times the dry weight of Angelica and dry garlic, and more preferably 20 times, but is not limited thereto.
  • the method of extracting the Angelica extract and acid garlic extract is a method using an extraction device such as hot water extraction, dipping extraction, supercritical extraction, subcritical extraction, high temperature extraction, high pressure extraction, reflux angle extraction and ultrasonic extraction or XAD and HP Conventional extraction methods in the art can be used, such as the use of adsorption resins containing -20, and is preferably heated, reflux extraction or phase extraction from, but is not limited thereto.
  • Extraction times of the sugar ear extract and the garlic extract is preferably 1-5 times, more preferably three times repeated extraction is not limited thereto. It may be extracted once -5 times by the ultrasonic extraction method.
  • Silver extraction is preferably 10 ° C-100 ° C and more preferably room temperature, but is not limited thereto.
  • the extraction time is preferably 1 day -7 days, more preferably 3 days -7 days, but is not limited thereto.
  • Concentration under reduced pressure after extraction is preferred, but is not limited thereto.
  • the vacuum concentration is preferably a vacuum rotary evaporator, but is not limited thereto.
  • the drying is vacuum drying, boiling drying, spray drying, It is preferable to perform warm or lyophilization, but not always limited thereto.
  • the composite composition according to the present invention may be prepared in powder form by concentrating under reduced pressure at a temperature of 60-70 ° C, or by lyophilization or drying using a spray dryer or fluid bed granulator.
  • the composition comprising the Angelica extract and acid garlic extract of the present invention preferably comprises 0.1-50% by weight of the composition relative to the total weight of the composition, but is not limited thereto.
  • the composite composition of the Angelica extract and acid garlic extract according to the present invention may further include a suitable carrier, excipient and diluent commonly used in the manufacture of a medicament.
  • composition according to the present invention can be used in the form of oral formulations, external preparations, suppositories, and sterile injectable solutions, such as powders, granules, tablets, capsules, suspensions, emulsions, syrups, and aerosols, respectively, according to conventional methods.
  • sterile injectable solutions such as powders, granules, tablets, capsules, suspensions, emulsions, syrups, and aerosols, respectively, according to conventional methods.
  • Carriers, excipients and diluents which may be included in the compositions of the present invention include lactose, dextrose, sucrose, sorbbi, manny, xylly, erythri, malty, starch, acacia rubber, alginate, gelatin, Calcium phosphate, calcium silicate, cellulose, methyl cellulose, microcrystalline cellulose, polyvinyl pyridone, water, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate and mineral oil. have.
  • composition in the case of formulation, it is prepared by using commonly used layering agents, extenders, binders, wetting agents, disintegrating agents, and diluents or excipients.
  • High brothers for oral administration include tablets, pills, powders, granule capsules, and the like, and such solid preparations include at least one excipient in the composition of the present invention, for example, starch, calcium carbonate, sucrose It is prepared by mixing sucrose, lactose, gelatin and the like.
  • lubricants such as magnesium stearate and talc are also used.
  • Oral liquid preparations include suspensions, solvents, emulsions, and syrups.
  • ком ⁇ онентs such as wetting agents, sweeteners, fragrances, and preservatives can be included.
  • Preparations for parenteral administration include sterile aqueous solutions, non-aqueous solvents, suspensions, emulsions, lyophilized preparations and suppositories.
  • Non-aqueous solvents and suspending agents include propylene glycol, polyethylene glycol, vegetable oils such as evolved oil, and injectable esters such as ethyl oleate. Can be used.
  • compositions of the present invention may be administered orally or parenterally, for example, orally, sublingually, nasal, rectally or subcutaneously.
  • compositions of the present invention vary depending on the condition and weight of the patient, the severity of the disease, the form of the drug, the route of administration and the duration, and may be appropriately selected by those skilled in the art.
  • the composition of the present invention may be administered in divided doses -3 times a day within the range of 10-1000 mg dose based on the normal person (standard weight 60 kg), but is not necessarily limited thereto.
  • the amount does not limit the scope of the present invention in any aspect.
  • the composite composition combining the Angelica extract and acid garlic extract according to the present invention may be added to the health supplements such as food, beverages and the like for the purpose of preventing or improving diabetes disease, diabetes complications or obesity.
  • Examples of foods to which the above substances can be added include dairy products, including soups, meat sausages, breads, biscuit cakes, chocolate candy snacks, confectionery, pizza, ramen, other noodles, 3 ⁇ 4, ice creams, various soups, beverages , Alcoholic beverages, dairy products and dairy products, and the like, and may include all of the health functional foods in the conventional sense.
  • Angelica extract and acid garlic extract of the present invention may be added to the food as it is, or used with other food or food ingredients, and may be appropriately used according to conventional methods.
  • the mixing amount of the active ingredient can be suitably determined according to the purpose of use (prevention or improvement).
  • the amount of the composite composition in the health food can be added to 0.1-90 parts by weight of the total food weight.
  • the amount may be below the above range, and since there is no problem in terms of safety, the active ingredient may be used in an amount above the above range.
  • the health functional beverage composition of the present invention is not particularly limited to other ingredients except for containing the complex composition as essential ingredients in the indicated ratios, and may contain various flavors or natural carbohydrates as additional ingredients, such as ordinary drinks.
  • natural carbohydrates include monosaccharides such as glucose, fructose and the like; Disa Carbides such as maltose, sucrose and the like; And sugars such as conventional sugars such as polysaccharides such as dextrin, cyclodextrin and the like, and xylitol, sorbitol, erythritol and the like.
  • natural flavoring agents tautin, stevia extract (e.g., Rebaudioside A, glycyrrhizin, etc.) and synthetic flavoring agents (saccharin, aspartame, etc.) can be advantageously used.
  • the proportion of natural carbohydrates is generally about 1-20 g, preferably about 5-12 g per 100 mi of the composition of the present invention.
  • the Angelica extract and acid garlic extract of the present invention are various nutrients, vitamins, minerals (electrolytes), synthetic flavors and natural flavors such as flavoring agents, coloring agents and neutralizing agents (cheese, chocolate, etc.), pectic acid And salts thereof, alginic acid and salts thereof, organic acids, protective colloidal thickeners, pH regulators, stabilizers, preservatives, glycerin, alcohols, carbonation agents used in carbonated drinks and the like.
  • the Angelica extract and acid garlic extract of the present invention may contain a pulp for the production of natural fruit juice and fruit juice beverage and vegetable beverage.
  • the proportion of such additives is not so critical but is generally selected in the range of 0.1 to about 20 parts by weight per 100 parts by weight of Angelica extract and acid garlic extract of the present invention.
  • Angelica gigas (Angelica Gigas Radix) was collected from Pyeongchang, Gangwon-do, and Wild Garlic Leaves were used from Namwon, Jeollanam-do.
  • 50% ethane was added to 100 g of the Angelica and 50 g of garlic, and 2.7 mg of the Angelica was extracted using a water bath (East-West Science DS—SWB-4) for 3 hours at 60 ° C.
  • Garlic was extracted at 80 ° C for 3 hours, and the filtrate was filtered under reduced pressure using a filter paper to obtain a concentrate using a vacuum evaporator (BUCHI Rotavapor R— 144, swizerland).
  • BUCHI Rotavapor R— 144 swizerland
  • Angelica obtained 32 g of lyophilized extract in 32% yield and 10.8 g of acid garlic in 18% yield.
  • the freeze-dried extract powder is 10 mg / mi concentration in distilled water Were dissolved and stored in a -20 freezer, light brown and dark brown, respectively, shielded from light and denaturation.
  • mice fed high fat diet prepared to investigate the anti-obesity, hypoglycemia, anti-hyperlipidemia, hepatoprotective and renal protective effects of diabetic or diabetic complications of the Angelica extract and acid garlic extract of the present invention are diabetic and As the most widely used animal model for developing related metabolic syndrome therapies (Sone H et al., Trends Mol Med.
  • a total of 11 kinds of composite compositions were prepared by mixing the Angelica extract and acid garlic extract of the preparation example in the weight ratio of Table 2.
  • Simvastatin Wha Pharm. Ind. Co., Ltd., Korea
  • silymarin Sigma, MO, USA
  • metformin Wako Pure Chemical, Osaka, Japan
  • the reference drug was kept in a block so that light and moisture were blocked.
  • the prepared composite composition was used directly dissolved in distilled water, high fat feed After 1 week, 7 animals per group were divided into 18 groups and orally administered at 10 / kg once a day for 84 days. Eleven complex compositions and two single extracts were administered at 100 mg / kg and simvastatin, silymarin and metformin at 10 100 250 mg / kg, respectively. At the end of drug administration, two animals with large standard deviations of body weight were excluded from each group. Table 3 shows the composition and administration group of the substances together.
  • Adipose tissue is an organ that performs both endocrine and secretion as well as a simple energy store, and is known to secrete adipokine, a bioactive substance secreted from adipocytes (Fuji ta H et al., Endocr). J. 2005, 52: 427-33). Changes in the secretion of adipokine are known to lead to complex diseases such as obesity and insulin resistance (Mitchell M et al., Reproduction., 2005, 130: 583-97).
  • Angelica Wild Garlic 1: 2 5.32 ⁇ 2.24 16.62 ⁇ 7.04 -26.33
  • Composition 1 8 3.40 ⁇ 2/78 13.74 ⁇ 1.83 -39.10
  • mice fed the high fat diet used as the high fat diet (HFD) control group gained 596.30% higher body weight than the mice fed the normal diet used as the normal control group.
  • Angelica excluding the group consisting of simvastatin, silymarin and metformin, donkey extract or wild garlic extract alone, and weight gain similar to HFD control group: 6)
  • the combination composition of the extract and the acid garlic extract showed 11.88-54.17% of weight loss compared to the HFD control group, and when the ratio of donkey: acid garlic was 1: 4-6 and 2-4: 1, 47.65—59.04%
  • the weight ratio of the composite composition was 54.17% and 59.04%, respectively, and the weight ratio of the composite composition was excellent.
  • mice fed the high fat feed used as the high fat feed OFD) control group had a 503.32% increase in the weight of the ovary fat compared to the normal fed mice used as the normal control.
  • donkey chu The group administered with simvastatin, silymarin, and metformin used as a control drug except the composite composition group having a composition ratio of 6: 1 in which the relative composition to the body weight of the extract and the acid garlic extract were increased, the donkey extract or the acid garlic It was confirmed that the fat weight around the ovary was reduced by 24.51-57.58% compared to the HFD control group in the single administration group and the 10 Angelica extract and the composite composition administration group of acid garlic.
  • the weight ratio of donkey: acid garlic is 1: 2-6, 2-4: 1 and 10: 1 in the administration group, the weight of fat around the ovary is 38.45-57.58%, which is more than that of the Angelica extract or the acid garlic extract alone.
  • the weight ratio of the composite composition was 54.28% and 57.58% in the group of 1: 4 and 4: 1, respectively, and the ovarian fat weight reduction was excellent. And when it was administered alone with the garlic (29.54%) was found to be much better than the ovarian fat weight reduction effect.
  • mice fed the high fat diet used as the high fat diet (HFD) control group increased 225.05% in diameter of the adipocytes around the ovary compared to the mice fed the normal diet used as the control group.
  • the group administered simvastatin, silymarin, metformin, the group administered with Angelica extract or acid garlic extract alone, and the group administered with the composite composition of Angelica extract and acid garlic decreased 13.48-61.90%.
  • the anti-obesity effect was shown to be best suppressed by 60.90% of the increase in the diameter of ovarian adipocytes compared to the HFD control group.
  • the change in the diameter of abdominal wall adipocytes was found to be increased to 242.70% in the high fat diet (HFD) control group, the control group, Angelica extract or wild garlic extract administered three control drugs. It was confirmed that the diameter of abdominal wall adipocytes was reduced to 22.58-59.94% in the group administered alone and 11 groups administered the Angelica and San garlic complex compositions.
  • HFD high fat diet
  • the weight ratio of the composite composition of Angelica extract and acid garlic in the administration group is 1: 2-6 and 2-4: 1
  • the effect of inhibiting the increase in the diameter of abdominal wall fat cells was 39.70-59.94% compared to the HFD control group.
  • the weight ratio of the composite composition was 47.23% and 59.94%, respectively, in the weight ratio of 1: 4 and 4: 1, indicating that the abdominal wall adipocytes had an excellent diameter reducing effect (32.56%).
  • acid garlic alone (37.22%) showed better than abdominal wall fat cell diameter reduction effect.
  • the composite composition of Angelica extract and acid garlic extract of the present invention reduces the weight gain compared to the group administered with Angelica extract or Mountain garlic extract alone as well as the high fat diet (HFD) control, and the fat weight around the ovary It is effective in reducing and increasing the diameter of peri-ovarian fat cells and abdominal wall fat cells, so that the pharmaceutical composition for the prevention or treatment of diabetes or diabetes complications, or the health function for the prevention or improvement of diabetes or diabetes complications It can be usefully used as a food.
  • HFD high fat diet
  • the composite composition of the Angelica extract and acid garlic extract of the present invention is excellent in hypoglycemic effect as compared to the group administered with Angelica extract or Mountain garlic extract alone, as well as high-fat feed (HFO) control, diabetes mellitus or diabetes complications It can be usefully used as a preventive or therapeutic pharmaceutical composition for, or as a dietary supplement for the prevention or improvement of diabetes or diabetic complications.
  • HFO high-fat feed
  • hyperlipidemia occurs in the form of complications (Chen et al., 2005) and, in general, hyperglycemia has been a problem for reducing HDL with increasing LDL, triglycerides and total cholesterol (Milionis HJ et al. , Am Heart J., 2004, 148: 635-40; Forrester JS et al., Circulation., 2005, 111: 1847-54; Kamada T et al., Dig Liver Dis., 2005, 37: 39-43 ).
  • mice fed high-fat diets used as high-fat diet (HFD) controls were compared to mice fed normal diets used as normal controls. It was confirmed that the rester content was increased by 121.62% in the HFD control group compared to the normal control group, and the total cholesterol content in the blood was reduced by 26.25—46.03% in the HFD control group compared to the HFD control group.
  • the administration group of the composite composition of Angelica extract and acid garlic weight of 1: 1-6 and 2-4: 1 is 34.00-46.03%, which is better than the HFD control group. Confirmed. Of these, 36.28% and 46.30%, respectively, in the weight ratio of 1: 4 and 4: 1 in the composite composition decreased blood total cholesterol content. It was shown that the total cholesterol in blood was better than the effect of reducing the content of Angelica alone (26.25%) and wild garlic alone (29.90%).
  • the anticholesterolemic effect was the most excellent with 46.03% of the total cholesterol reduction in blood.
  • the blood triglyceride was increased to 284.25% compared to the normal control group, and the group Angelica extract or acid garlic extract administered simvastatin, silymarin, and metformin used as the control drug
  • the serum triglyceride content was lowered in the 25.41-46.52% of all treatment groups, including the group administered alone and the group containing 11 kinds of Angelica extract and acid garlic complex.
  • the triglyceride content of blood was 46.31%, showing the best antihyperlipidemic effect.
  • LDL hyperlipidemia
  • HDL high density lipoprotein
  • the blood low density lipoprotein (LDL) content is high-fat diet.
  • HFD the control group was found to increase to 112.90% compared to the normal control group, HFD in the control group, the group administered with Angelica extract or wild garlic extract alone, and the group administered the Angelica and acid garlic complex composition. It was confirmed that the blood LDL content is reduced to 19.70-40.15% than the control.
  • the weight ratio of the composite composition of Angelica extract and acid garlic in the administration group is 1: 1-6 and 2-6: 1, the blood LDL content is increased to 28.03-40.15% compared to the HFD control group.
  • the effect of reducing LDL content in blood was 40.15%, which showed the best antihyperlipidemic effect.
  • the high-density lipoprotein (HDL) content in the blood was found to be 53.99% lower in the high-fat diet (HFD) control group than in the normal control group, except for the administration of simvastatin, which significantly increased the blood HDL content in comparison with the HFD control group.
  • the rest of the administration group was confirmed to increase the blood HDL content of 29.78-48.89% compared to the HFD control group.
  • the administration group of the composite composition of Angelica extract and acid garlic was 1: 4-6 and 2-4: 1, and the HDL content was increased to 35.11-48.89% compared to the Angelica extract or acid garlic extract alone administration group.
  • the weight ratio of 1: 4 and 4: 1 in the composite composition was 44.44% and 48.95%, respectively.
  • the composite composition of the Angelica extract and acid garlic extract of the present invention is a total cholesterol content, blood triglyceride content and compared with the high-fat diet (HFD) control group, as well as the group administered Angelica extract or acid garlic extract alone It is excellent in reducing the low density lipoprotein content in blood and increasing the high density lipoprotein in blood, so it can be useful as a pharmaceutical composition for the prevention or treatment of diabetes or diabetes complications, or as a dietary supplement for the prevention or improvement of diabetes or diabetes complications. Can be.
  • HFD high-fat diet
  • Feeding high fat feed is accompanied by hyperlipidemia and liver damage, and due to hypertrophy of liver cells caused by fatty stool, the increase of liver weight and the increase of blood AST and ALT content (Mukai M et al., Dig Dis Sci. 2002; 47: 549-55; Neves RH et al., Mem Inst Oswaldo Cruz. 2006; 101: 253-60).
  • AST commonly known as serum oxaltic transaminase (SG0T)
  • ALT serum glutamic pyruvic transaminase
  • Sodikoff CH A guide to laboratory diagnosis.2nd ed., Mosby: St. Louise, 1995: 1 36).
  • Composition 1 8 1.457 ⁇ 0.267 2.944 ⁇ 0.606 -1.96
  • the liver relative weight increase effect was 27.47%, it was confirmed that the liver protection effect is the most excellent.
  • the administration group of the composite composition of Angelica extract and acid garlic was 1: 4-6 and 2: 1 4: 1, and the blood AST concentration was 43.05-50.53%, and the blood ALT concentration was 42.82-52.70%. It was confirmed that the AST and ALT contents in the blood were significantly reduced in comparison with the wild garlic extract alone administration group. Of these, 43.93% and 50.53% of AST concentrations were decreased in the group of the composite composition having a weight ratio of 1: 4 and 4: 1, respectively. ALT concentration reduction effects were 43.38% and 52.70%.
  • the composite composition of the Angelica extract and acid garlic extract of the present invention is excellent in reducing the blood concentration of ALT and AST, which is an indicator of weight of liver and hepatocellular damage, thus preventing or treating diabetes or diabetic complications. It can be usefully used as a pharmaceutical composition or a dietary supplement for preventing or improving diabetes or diabetic complications.
  • kidney lesions are caused by glomerular atrophy and fibrosis, inflammatory cell infiltration, and tubular necrosis, and an increase in the content of urea nitrogen and creatinine in the blood, which is called diabetic nephropathy (Imaeda A). et al., Food Chem Toxicol. 200240: 1415-22; Trachtman H et al., Pediatr Nephrol. 200217: 20-9).
  • the blood urea nitrogen (BUN) and creatinine (creatinine) content are the most representative blood chemistry of kidney status (Arch Med Res., 2004 Nov. Dec: 35 (6): 484-94). .
  • mice fed the high fat diet used as a high fat diet (HFD) control group had an increase in blood urea nitrogen (BUN) content of 94.26% compared to mice fed the normal diet used as a normal control group. Except for the group that received simvastatin, a control that showed a blood BUN content similar to that of the HFD control group.
  • HFD high fat diet
  • the BUN content in the blood decreased to 20.94-46.55% in the administration group.
  • the weight ratio of 1: 4 and 4: 1 in the composite composition was 38.67% and 46.55%, respectively.
  • the composite composition administration group with the combined weight ratio of Angelica extract and wild garlic extract was 4: 1, showing 46.55% lower blood BUN content than the HFD control group.
  • the creatinine content in the HFD control group was increased by 154.29% compared to the normal control group, and the blood creatinine content was significantly different from the HFD control group in the HFD control group. It was confirmed that the creatinine content in the blood was reduced by 15.73-48.31%.
  • the administration group of the composite composition of Angelica extract and wild garlic extract weighed 1: 4—6 and 2-4: 1 showed 35.96-48.31% to reduce blood creatinine content than the HFD control group.
  • the creatinine content was decreased by 35.96% and 48.31%, respectively.
  • the creatinine content was reduced by 48.31% compared to the HFD control group, which showed the best renal protection effect. Therefore, the composite composition of the Angelica extract and acid garlic extract of the present invention is excellent in the effect of reducing blood urea nitrogen (BUN) content and blood creatinine content can be usefully used as a dietary supplement for diabetic or diabetic complications.
  • BUN blood urea nitrogen
  • mice fed the high fat diet used as the high fat diet (HFD) control group showed an increase in the number of denatured tubules to 820.51% compared to the mice fed the normal feed used as the normal control group, and the HFD control group.
  • the number of denatured tubules was reduced to 18.66-59.05% in the other groups except simvastatin, a control group that showed similar changes in the number of denatured tubules.
  • the combined weight ratio of Angelica extract and acid garlic extract in the administration group is 1: 1-6,
  • the composite composition group of 2-4: 1 was 33.70-59.05%, and the effect of reducing the number of tubules was better than that of the HFD control group, and the weight ratio of the composite composition of 1: 4 and 4: 1 group was higher. 42.34% and 59.05% showed better reduction of the number of denatured tubules, which was superior to that of Angelica alone (19.5) and acid garlic alone (27.86%).
  • the composite composition administration group with the combined weight ratio of Angelica extract and wild garlic extract was 4: 1, showing the best effect of reducing the number of denatured tubules (59.053 ⁇ 4) than the HFD control group. Therefore, the composite composition of the Angelica extract and acid garlic extract of the present invention reduces blood urea nitrogen (BUN) content and blood creatinine concentration, and has an excellent effect of reducing the number of denatured tubules for the prevention or treatment of diabetes or diabetic complications. It may be useful as a pharmaceutical composition or as a dietary supplement for the prevention or amelioration of diabetes or diabetic complications.
  • BUN blood urea nitrogen
  • the composite composition of the mixed weight ratio of the Angelica extract and acid garlic extract prepared in the same manner as in Example 1 was used by directly dissolving in distilled water, and fed a high fat feed to a total of 15 groups of 8 dogs each week from one week. Divided orally at 10 / kg once a day for 84 days. Three control drugs simvastatin, silymarin, and metformin were administered at 10, 100 and 250 mg / kg, respectively, and three types of Angelica, wild garlic and silver leaf extracts were administered at 100 mg / kg. A composite composition with a combined weight ratio of Angelica extract and Garlic extract of 4: 1 was administered at 200, 100 and 50 mg / kg. Table 15 shows the composition of the substance and the administration group.
  • Table 16 shows the weight change of mice to which the composite composition was administered in order to investigate the effect of the composite composition having a mixed weight ratio of 4: 1 and Angelica extract of the present invention on obesity.
  • the 84-day weight gain for the HFD control group showed a change of 190.54% compared to the normal control group.
  • Simvastatin, silymarin, metformin and Angelica, wild garlic and Ginkgo biloba extract alone showed 33-6 weight loss compared to HFD control.
  • the weight loss effect was 41-55% compared to the HFD control group.
  • mice fed the high fat diet used as the high fat diet (HFD) control group showed a 1006.71% increase in the weight of the ovarian fat compared to the normal fed group.
  • Simvastatin, silymarin, metformin and Angelica, wild garlic, and ginkgo biloba extract alone used as a control group showed a 15-76% decrease in fat weight around the ovary compared to the HFD control group.
  • the fat weight around the ovary was reduced to 50-76% compared to the HFD control group.
  • Angelica Mountain Garlic 200 me / kg 88.50 ⁇ 14.60 -58.33
  • mice fed the high fat diet used as the high fat diet (HFD) control group had a 257.52% increase in the diameter of the adipocytes around the ovary compared to the mice fed the normal diet used as the control group.
  • the diameter of peri-ovary fat cells was 35-58%, which was markedly reduced compared to the HFD control group.
  • control group 161.39 ⁇ 32 ⁇ 38 -20.24
  • Angelica mountain garlic 200 me / ke 97.51 ⁇ 20.60 -51.81
  • mice fed the high fat diet used as the high fat diet (HFD) control group had a 193.41% increase in the diameter of abdominal wall fat cells compared to the mice fed the normal diet used as the control group.
  • Simvastatin, silymarin, metformin and Angelica, wild garlic and ginkgo biloba extract alone administration group was found to decrease the diameter of abdominal wall fat cells by 20-39% compared to the HFD control group.
  • the composite composition 200 100 and 50 mg / kg of the composite weight ratio of Angelica extract and acid garlic extract, the diameter of abdominal wall adipocytes was 34-52%, compared with the HFD control group. Therefore, the results of the present experiment, the composite composition of the mixed weight ratio of Angelica extract and wild garlic extract 4: 1 significantly suppressed the weight gain, fat accumulation or fat cell hypertrophy of HFD fed mice in a dose-dependent manner, Angelica extract and acid The anti-obesity effect of the composite composition with a combined weight ratio of garlic extract of 4: 1 was confirmed.
  • Example 7 Effect of Complex Composition Composed of 4: 1 of Angelica Extract and Mountain Garlic Extract on Blood Glucose
  • mice fed the high fat diet used as the high fat diet (HFD) control group showed a 131.67% increase in blood glucose level compared to the mice fed the normal diet used as the normal control group.
  • HFD high fat diet
  • the blood glucose was significantly reduced to 30-49% compared to the HFD control group.
  • mice fed the high fat diet used as the high fat diet (HFD) control group showed a 129.05% increase in the total cholesterol content compared to the mice fed the normal diet used as the normal control group.
  • Simvastatin, silymarin, metformin, and Angelica, wild garlic and ginkgo biloba extract alone used as a total cholesterol was reduced by 22-39% compared to the HFD control group.
  • the composite composition 200 100 and 50 mg / kg of the mixed weight ratio of Angelica extract and acid garlic extract, 4: 1, the total cholesterol content was 31-47% compared to the HFD control group.
  • the blood triglyceride was increased to 297.76% compared to the normal control group, and the simvastatin, silymarin, metformin and donkey, wild garlic, and ginkgo biloba extract alone were used as control.
  • the blood triglyceride was confirmed to be reduced by 23-35%.
  • mice fed the high fat diet used as a high fat diet (HFD) control group had a 123.66% increase in low-density lipoprotein (LDL) content in the blood compared to mice fed the normal diet used as a normal control group.
  • Simvastatin, silymarin, metformin and Angelica, wild garlic and ginkgo biloba extract alone used as a control drug showed a 22-34% decrease in LDL content compared to the HFD control group.
  • the low density lipoprotein (LDL) content was 30-47%.
  • the high-density lipoprotein (HDL) content in blood was found to be reduced by 60.13% in the high-fat diet (HFD) control group compared to the normal control group.
  • Simvastatin, silymarin, metformin and Angelica, wild garlic and ginkgo biloba extracts were used as control drugs. It was confirmed that the high density lipoprotein (HDL) content in the blood increased by 2% by 33% compared to the HFD control group.
  • the concentration of HDL in the blood was 39-52%, compared with the HFD control group.
  • Example 9 The Effect of Complex Composition Composed of 4: 1 of Angelica Extract and Acid Garlic Extract on Liver Damage
  • liver weight showed a significant decrease (25.96%) as the weight gain was more significant.
  • Simvastatin, silymarin, metformin and Angelica, wild garlic and ginkgo biloba extract alone used as a control group was found to increase the relative weight of the liver by 7-19% compared to the HFD control group.
  • the relative weight to liver weight was 14-35% compared to the HFD control group.
  • mice fed the high fat diet used as the high fat diet (HFD) control group were fed the mice fed the normal feed used as the normal control group.
  • Blood urea nitrogen (BUN) content was increased to 127.62%, and silymarin, metformin and donkey, acid garlic and ginkgo biloba were excluded, except for the control group simvastatin, which showed a blood BUN content similar to the HFD control group. It was confirmed that the urea nitrogen (BUN) content in the blood alone was 27-36% lower than the HFD control group.
  • the composite composition 200 100 and 50 mg / kg of the composite weight ratio of Angelica extract and acid garlic extract, 4: 1, the blood urea nitrogen (BUN) content was 33-46%.
  • the blood creatinine content of the HFD control group was found to increase by 157.89% compared to the normal control group.
  • Acid garlic and ginkgo biloba extract alone administration group showed a 28-36% decrease in blood creatinine content compared to the HFD control group.
  • the blood creatinine content was 33-46%, which was remarkably reduced compared to the HFD control group.
  • mice fed the high fat diet used as the high fat diet (HFD) control group showed an increase in the number of denatured tubules to 894.38% compared to the mice fed the normal diet used as the normal control group, and the HFD control group.
  • the group treated with silymarin, metformin and Angelica, wild garlic and ginkgo biloba extract alone except for the control group simvastatin, which showed a similar number of denatured tubules, the number of denatured tubules was reduced by 24-42% compared to the HFD control group.
  • the composite composition 200 100 and 50 mg / kg of the composite weight ratio of Angelica extract and acid garlic extract, the number of denatured tubules was 38-68%, which was markedly reduced compared to the HFD control group. Therefore, the composite composition of the Angelica extract and acid garlic extract according to the present invention has a combined weight ratio of 4: 1, which shows excellent anti-obesity, anti-hyperlipidemia, hypoglycemic effect, hepatoprotective effect and kidney protection effect depending on the dose. It can be usefully used as a composition for the prevention, treatment and improvement of complications.
  • Example 11 Effect of a Complex Composition of 4: 1 of Angelica Extract and Acid Garlic Extract on the Diabetes of Streptozotocin (STZ) -Induced Diabetes Animal Model Streptozotocin (STZ) is a selective pancreatic islet Destroys insulin-producing B cells in the body, leading to diabetes (Hsu and Crump, Philadelphia, 1989, 186-201). It is known to cause atrophy and decrease of water due to inflammation reaction of pancreatic islet.
  • the pharmacological effects of diabetes mellitus and diabetic complications according to the administration dose of the composite composition of the Angelica extract and the garlic extract of 4: 1 were evaluated using stramtozotocin (STZ) -induced diabetic rats.
  • STZ was dissolved in 50 mM complete citrate solution (pH 6.0) to induce diabetes by single intraperitoneal administration at a dose of 60 mg / kg / 5 n ⁇ . In normal media controls, the same route of citrate complete citrate solution was used instead of STZ. Was administered.
  • the composite composition consisting of the weight ratio of Angelica extract and wild garlic extract was 4: 1, and dissolved in sterile distilled water at the capacity of 200, 100 and 50 mg / kg, respectively. 22 days after the administration of STZ at a concentration of 28 days orally administered, silymarin was also dissolved in sterile distilled water at a dose of 100 mg / kg was administered at 5 mt / kg. Meanwhile, sterile distilled water was administered at 5 mi / kg in the normal medium control group and the STZ control group, respectively. Table 27 shows the composition of the substances and the administration group.
  • Table 28 shows the changes in blood glucose of rats to which the composite composition was administered in order to examine the effects of the composite composition having a mixed weight ratio of 4: 1 of the Angelica extract and acid garlic extract of the present invention on STZ-induced diabetes.
  • the rats used as the STZ control group had an increase in blood sugar level of 5974.14% compared with the rats used as the normal control group, and the blood glucose reduction group of the silymarin group used as the control drug was 62.79% lower than that of the STZ control group. Indicated.
  • the composite composition 200 100 and 50 mg / kg of the mixed weight ratio of Angelica extract and acid garlic extract, the blood sugar level was significantly reduced by 49-80% compared to the STZ control group and was significantly higher than the STZ control group. Reduction of blood glucose is dose dependent in all dose groups.
  • the composite composition with the combined weight ratio of Angelica extract and acid garlic extract was found to have a relatively good hypoglycemic effect.
  • the rats used as the STZ control group had a 69% decrease in the number of pancreatic islets compared to the rats used as the normal control group, and the number of 112% of the pancreatic islets in the silymarin-administered group used as the reference drug compared to the STZ control group.
  • An increase was shown.
  • Pancreatic islets showed a significant increase in the number of pancreatic islets in the combined composition of 200, 100 and 50 mg / kg of pancreatic extract and wild garlic extract in a ratio of 4: 1 compared to the STZ control group.
  • the rats used as the STZ control group showed a decrease of 77% in diameter of the pancreatic islets compared to the rats used as the normal control group, and the silymarin-administered group used as the control drug showed a 152% increase in the diameter of the pancreatic islets compared to the STZ control group.
  • the composition of 200 100 and 50 mg / kg of the composite composition with the combined weight ratio of Angelica extract and acid garlic extract, 4: 1
  • the diameter of the pancreatic islets was 121-208%, indicating a significant increase.
  • the rats used as the STZ control group had an 82% reduction in the number of insulin immunosuppressive cells in the pancreatic islets compared to the rats used as the normal control group, and 102% compared to the STZ control group in the silymarin-administered group used as the control drug.
  • Insulin immunoreaction cells in the pancreatic islet increased.
  • the composite composition 200 100 and 50 mg / kg of the mixed weight ratio of Angelica extract and wild garlic extract, the number of insulin immune cells in the pancreatic islet was 71-212%, compared with the STZ control group. It was.
  • the rats used as the STZ control group had a 135% increase in the number of glucagon immune reaction cells in the pancreatic islet compared to the rats used as the normal control group, and the STZ control group in the silymarin-administered group used as the reference drug.
  • the number of glucagon-immunoreactive cells in pancreatic islet was decreased by 46%.
  • the composite composition 200 100 and 50 mg / kg of the mixed weight ratio of Angelica extract and acid garlic extract, the number of glucagon immune reaction cells in the pancreatic islet was 27-48%. .
  • the composite composition of Angelica extract and acid garlic extract is expected to exhibit antidiabetic activity as a protective action against pancreatic B cells directly, and the composite composition of the mixed weight ratio of Angelica extract and acid garlic extract of the present invention is 4: 1. It has been shown to have an antidiabetic effect similar to that of silymarin, which is known to be effective in doses of diabetes.
  • Example 12 Effect of the composite composition of the weight ratio of Angelica extract and acid garlic extract of 4: 1 on the kidney of streptozotocin (STZ) -induced diabetic animal model
  • rats used as the STZ control group were the normal control group. Absolute and relative weights were increased by 96% and 275%, respectively, compared to the rats used, and silymarin-treated groups used as reference drugs showed 17 and 30% reductions in absolute weight and relative weight, respectively, compared to the STZ control group.
  • the composite composition 200 100 and 50 mg / kg of the mixed weight ratio of Angelica extract and acid garlic extract, the absolute weight and the relative weight were 23-26% and 28-38%, respectively, compared to the STZ control group. Indicated.
  • rats used as the STZ control group had an 8600% increase in blood urea nitrogen (BUN) content compared to the rats used as the normal control group, and 67% of the silymarin-administered group used as the control group compared to the STZ control group. It showed a decrease in blood urea nitrogen (BUN) content.
  • BUN blood urea nitrogen
  • the concentration of urea nitrogen (BUN) was 43-87% compared to the STZ control group.
  • the rats used as the STZ control group had a 1140% increase in blood creatinine content compared to the rats used as the normal control group, and in the silymarin-administered group used as the reference drug, 56% of the blood cleavage was compared to the STZ control group. It showed a decrease in the atinine content.
  • the composite composition 200 100 and 50 mg / kg of the mixed weight ratio of Angelica extract and acid garlic extract, the concentration of creatinine in the blood was 44-85%.
  • the rats used as the STZ control group had a 825% increase in the number of degenerative glomeruli compared to the rats used as the normal control group, and 56% of the denatured glomeruli in the silymarin-administered group used as the reference drug compared to the STZ control group. A decrease in number was shown.
  • the composite composition 200 100 and 50 mg / kg of the composite weight ratio of Angelica extract and acid garlic extract, the number of denatured glomeruli was 38-72%.
  • Example 13 The Effects of Complex Compositions of Mixed Weight of Angelica Extract and Mountain Garlic Extract on 4: 1 on Immune Activity of Straptozotocin (STZ) —Induced Diabetes Animal Model
  • the composite weight ratio of 4: 1 was determined. The change is measured and the results are shown in Table 35 below.
  • the rats used as the STZ control group had 90 and 80% reductions in the absolute and relative weights of the thymus gland compared to the rats used as the normal control group, respectively.
  • Thyroid gland weight and bed mass increased by 217% and 166%, respectively.
  • the absolute and relative weights of the thymus gland were 214-316% and 213-243%, respectively, compared to the STZ control group. It showed an increase effect.
  • the rats used as the STZ control group had 58 and 18% reductions in the absolute and relative weights of the spleen compared to the rats used as the normal control group, respectively.
  • the absolute weight and phase mass of the spleen increased by 58% and 34%, respectively.
  • the composite composition 200 100 and 50 mg / kg of the common weight ratio of the Angelica extract and the garlic extract, the absolute and relative weights of the spleen were 35-75% and 29-46%, respectively, compared to the STZ control group. It showed a marked increase effect.
  • Tissues of the mammary gland of rats induced with diabetes in order to investigate the effect of the composite composition of the mixed weight ratio of Angelica extract and wild garlic extract according to the present invention on the immune activity of STZ-induced diabetic animal model
  • the experimental results of the pathological changes are shown in Table 37 below.
  • the rats used as the STZ control group had a 56% reduction in the total thickness of the thymus lobules compared with the rats used as the normal control group, and the total thickness of the thymus lobules was 30 compared to the STZ control group in the silymarin-administered group used as the reference drug. A percentage increase was shown.
  • the composite composition 200 100 and 50 mg / kg of the mixed weight ratio of Angelica extract and acid garlic extract, the total thickness of the thoracic lobule was 21-493 ⁇ 4>, respectively, compared to the STZ control group.
  • the rat used as the STZ control group had a 62% decrease in the thickness of the thyroid cortex compared with the rat used as the normal control group, and in the silymarin-administered group used as the reference drug, the thyroid cortex thickness was lower than that of the STZ control group. ⁇ 2 increase was shown.
  • the thyroid cortex thickness was 59-108%, respectively, compared with the STZ control group, which showed a significant increase effect.
  • the rats used as the STZ control group had a 46% reduction in the total spleen thickness compared to the rats used as the normal control group, and the total spleen thickness was 30 compared to the STZ control group in the silymarin treated group used as the control. A% increase was shown.
  • the composite composition 200 100 and 50 mg / kg of the composition weight ratio of Angelica extract and acid garlic extract of 4: 1, the total spleen thickness was 21-49%, which was remarkably increased compared to the STZ control group.
  • the rats used as the STZ control group had a 60% decrease in the mean diameter of the splenic white medulla compared to the rats used as the normal control group, and the silymarin-administered group used as the reference drug compared to the STZ control group.
  • the average diameter of the white water was reduced by 56%.
  • 100 and 50 mg / kg of the mixed weight ratio of Angelica extract and acid garlic extract, 4: 1 the mean diameter of splenic white medulla was 44-117%, respectively, compared to the STZ control group.
  • Cataract and retinal injury are also one of the most common complications of diabetes. About 2 ⁇ of diabetic patients suffer from diabetic cataract, and eye damage caused by diabetes can be caused by various complex mechanisms. (Jarrett and Keen, Lancet. 1976, 2, 1009-12; Klein et al., Ophthalmology. 1985, 92, 1191-6; Jahn et al., Ophthalmic Res. 1986, 18, 112) 6; Brown and Bron, But t erwot h-He i nemann. 1996, 19 211; Swamy-Mruthint i et al., Curr Eye Res.
  • oxidative ive stress Also known as one of the pathogenic mechanisms (Boscia et al., Invest Ophthalmol Vis Sci. 2000, 41, 2461-5; Spec tor, J Ocul Pharmacol Ther. 2000, 16, 193-201; Ozmen et al., Clin Biochem. 2002, 35, 69-72; Ramana et al., J Diabetes Complications. 2004, 18, 177-82).
  • Cataract levels and histopathological changes of eyeballs have been used as a criterion for evaluating the effects of candidates on diabetic eye damage.
  • cataracts in diabetic eye damage, and lens damage, retinal atrophy and angiogenesis are increased.
  • the cataract visual acuity was increased by 1067% compared to rats used as a control group, and the cataract visual acuity was decreased by 403 ⁇ 4> compared to the STZ control group in the simarin group administered as a control.
  • 100- and 50 mg / kg-administered group showed a 31-51% significant reduction in cataract visual acuity compared to the STZ control group.
  • the rats used as the STZ control group had a 442% increase in cataract quantitative image value compared to the rats used as the normal control group, and the quantitative image of cataracts compared to the STZ control group in the silymarin-administered group used as the reference drug.
  • the figure showed a 37% decrease.
  • the cataract quantitative image value was 31-49% markedly reduced compared to the STZ control group.
  • Tissue of the lens of rats induced diabetes mellitus in order to investigate the effect of the composite composition of 4: 1 of the Angelica extract and acid garlic extract according to the present invention on the eye protection of STZ-induced diabetic animal model
  • the experimental results of the pathological changes are shown in Table 40 below.
  • the ratio of lens damage was 33-56%, respectively, compared to the STZ control group.
  • the rats used as the STZ control group had a 303% increase in the thickness of the lens injuries compared to the rats used as the normal control group, and the lens damage compared to the STZ control group in the silymarin-administered group used as the reference drug.
  • the thickness of the site showed a 37% reduction.
  • the composite composition 200 100 and 50 mg / kg of the composite weight ratio of Angelica extract and acid garlic extract, the thickness of the lens injury area was 33-58%, respectively, compared to the STZ control group.
  • mice used as STZ controls had a 6 «reduction in total retinal thickness compared to rats used as controls.
  • the total thickness of the retina was increased by 5 «compared to the STZ control group.
  • the total composition thickness of the retina was 45-92% in the composite composition 200, 100 and 50 mg / kg of the composite weight ratio of Angelica extract and acid garlic extract, respectively, compared to the STZ control group.
  • the rats used as the STZ control group had a decrease in thickness of the retinal plexus layer by 483 ⁇ 4> compared to the rats used as the normal control group, and the retinal freezing group compared to the STZ control group in the silymarin-administered group used as the reference drug.
  • the thickness of the worms showed a 35% increase.
  • the composite composition 200 100 and 50 mg / kg of the composite weight ratio of Angelica extract and acid garlic extract, the thickness of the retinal frozen layer was 31-76%, respectively, compared to the STZ control group.
  • the thickness of the nuclear layer STZ control Contrast present in the inner layer of STZ control (/ retina) compared to (>)
  • rats used as STZ controls had a 53% reduction in the thickness of the retinal nuclear layer compared to rats used as controls.
  • the thickness of the retinal nuclear layer was increased by 30% compared to the STZ control group.
  • the composite composition 200 100 and 50 mg / kg of the composite weight ratio of Angelica extract and acid garlic extract, the thickness of the retinal nuclear layer was 36-59%, respectively.
  • the rats used as the STZ control group had a 730% increase in the number of blood vessels present in the inner membrane of the retinal boundary membrane compared to the rats used as the normal control group. Compared to the control group, the number of blood vessels present in the inner retinal border membrane showed a 49% reduction.
  • the composite composition 200 100 and 50 mg / kg of the mixed weight ratio of Angelica extract and acid garlic extract, the number of blood vessels in the inner membrane of the retinal boundary membrane was 46-65%, respectively, compared to the STZ control group. Indicated.
  • the composite composition of the Angelica extract and acid garlic extract of the present invention has a relatively effective effect on diabetes and diabetic kidney damage, immunosuppression and eye damage by STZ administration, very effective in diabetes and related complications It is considered that the effective effect is recognized in the 50 mg / kg administration group, the optimal effective dose can be administered below 50 mg / kg, the composite composition of Angelica extract and acid garlic extract is equivalent to the same dose of silymarin as a whole Indicated.
  • Mouse bone marrow cells were evaluated to evaluate the genotoxicity of a composite composition with a weight ratio of 4: 1 of the Angelica extract and acid garlic extract of the present invention selected as an optimal composition for obese diabetes and complications caused by high fat feeding. In vitro Vivo micronucleus experiments were performed.
  • the composite composition 2000, 1000 and 500 mg / kg of the mixed weight ratio of the Angelica extract and acid garlic extract of the present invention was 4: 1, dissolved in sterile distilled water, and orally administered once daily at 10 / kg for 2 days.
  • Silver sterilized distilled water 10 / kg only was administered orally for 2 days, and the positive control group was intraperitoneally administered at 10m £ / k g dissolved in 70 mg / kg CPA in saline (saline).
  • micronucleated polycytic erythrocytes represents a potential for genotoxicity.
  • the composite composition with the combined weight ratio of Angelica extract and wild garlic extract showed a numerical change of MNPCE similar to that of the medium control group up to 2000 mg / kg of rodent maximum dose. It was confirmed that the micronucleus experiment using the negative.
  • the numerical changes of micronucleated red blood cells of each group are shown in Table 45 below.
  • the ratio of polyinflammatory erythrocytes is an indicator of cytotoxicity of treated substances. (Heddle et al., Handbook of Mutagenicity Test Procedures. 2nd Edion, Elsevier, pp. 441-57, 1984). As a result of this experiment, it was found that the PCE / (PCE + NCE) ratio and PCE / (PCE + NCE) ratio were significantly reduced compared to the control group. NCE) ratio was observed above 0.47 on average (individual: above 0.44), so there is no error due to cytotoxicity. The change in the ratio of polyinflammatory red blood cells in each group is shown in Table 48 below.
  • the composite composition with a common increase ratio of 4: 1 extract did not show any significant change in MNPCE up to the 2000 mg / kg rodent limit dose and was negative in micronucleus experiments using bone marrow cells.
  • the preparation examples of the pharmaceutical composition including the extract of the present invention will be described, but the present invention is not intended to be limited thereto, but is intended to be described in detail.
  • Talc 10 mg Powders are prepared by combining the above ingredients and filling in airtight sachets.
  • Magnesium stearate 2 mg A capsule preparation is prepared by mixing the above ingredients according to a conventional capsule preparation method and filling into gelatin capsules.
  • the amount of the above ingredient is prepared per ampoule (2 m ⁇ ).
  • Vitamin A Acetate 70 ⁇
  • composition ratio of the vitamin and mineral mixtures described above is a relatively suitable composition for the health food in a preferred embodiment, but the formulation ratio may be arbitrarily modified, according to the conventional health food manufacturing method After mixing the components, the granules may be prepared and used for preparing a health food composition according to a conventional method.
  • composition ratio is a relatively suitable composition for the preferred drink in a preferred embodiment, the compounding ratio may be arbitrarily modified according to regional and national preferences such as demand hierarchy, demand country, and usage.
  • a beverage was prepared using conventional methods with the above composition and content.
  • Brown rice, barley, red rice, and yulmu were alphanized by a known method to distribute the dried ones, and then prepared into a powder having a particle size of 60 mesh.
  • Black beans, black sesame seeds, and perilla were also roasted by steaming in a known manner, and then prepared into a powder having a particle size of 60 mesh.
  • the grains and seeds prepared above, and the composite composition of Angelica and wild garlic of the present invention were prepared by combining the following ratios. 30% brown rice

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Abstract

【요약서】 본 발명은 당귀(Angelicae Gigantis Radix) 추출물 및 산마늘(Wild Garlic Leaves) 추출물을 혼합한 복합조성물을 함유하는 약학적 조성물 및 건강기능식품조성물에 관한 것이다. 본 발명에 의한 당귀 추출물 및 산마늘 추출물을 혼합한 복합조성물은 우수한 항 비만, 혈당강하, 항 고지혈증, 간 보호 및 신장보호 효과를 나타내므로 당뇨병 및 당뇨병성 비만, 혈당증가, 고지혈증, 고혈압, 동맥 경화증, 뇌졸증, 간 손상, 신장 손상, 면역억제, 안구 손상 등의 당뇨 합병증의 예방, 치료 또는 개선용 조성물로 유용하게 이용될 수 있고, 또한, 항 비만 효과가 우수하므로 비만 예방, 치료 또는 개선용 조성물로 유용하게 이용될 수 있다.

Description

【명세서】
【발명의 명칭】
당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 복합조성물을 유효성분으로 함유하는 당뇨 병 또는 당뇨 합병증 예방또는 치료용조성물
【기술분야】
본 발명은 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 복합조성물을 유효성분으로 함유 하는 당뇨병 또는 당뇨 합병증 예방또는 치료용 조성물에 관한 것이다.
【배경기술】
당뇨병은 대표적인 만성 성인병의 하나이다. 우리나라의 당뇨병 환자는 전체 인구의 약 5%정도로 최소한 250만 명으로 추정되고 있다.
당뇨병 (Diabetes)은 혈중에 있는 당분이 인슐린 분비의 부족이나 인슐린의 작용 및 기능 부족으로 인해 에너지로 사용되지 못하고 혈액에 남아 있게 되는 질 병이다. 당뇨병의 원인으로는 식생활의 서구화, 비만증, 운동부족, 스트레스 등을 들을 수 있다. 현재 미국， 유럽 및 일본과 같은 선진국에서는 비만 및 당뇨병의 증 가로 인한 사회 경제적인 파장이 엄청나며, 한국의 경우도 경제적 발전으로 인해 당뇨병 환자가 급속도로 증가하여 2025년경에는 3억명 이상의 환자가 발생할 것으 로 예측된다 (Kim, Y., Diabetes Care, 1995, 18:545-548). 당뇨병은 크게 인슐린 의존성인 제 1형 당뇨병과 비의존성 제 2형 당뇨병으로 나눌 수 있다. 제 1형 당뇨병 환자는 유전적 원인 또는 바이러스 감염 등에 의하여 인슐린을 거의 분비하지 못하며， 제 2형 당뇨병 환자는 분비되는 인슬린의 양은 정 상이다. 많은 경우 비만을 동반하는 제 2형 당뇨병은 혈중 내 지방산의 증가로 인하 여 인술린 저항성이 유도되어 포도당 대사에 이상이 발생하여 결국 혈중 내 혈당이 높아지는 질환이며， 아울러, 췌장소도의 기능 부전 및 이로 인한 인슐린 분비의 이 상과 신호 전달 이상이 제 2형 당뇨병의 원인으로 또한 생각된다. 인슐린 저항성은 제 2형 당뇨병 병인의 주요 요소로서, 게 2형 당뇨병 환자의 90%이상에서 나타나며， 고혈당이 나타나기 수년 전부터 선행되는 것으로 생각된다 (Haffner S M, et al . JAMA, 1990, 263:2893-2898). 인슐린 저항성과 이에 따른 대사 이상 및 혈관계 이 상들의 집합체를 인슐린 저항성 증후군 (insulin resistance syndrome) 또는 대사 증후군 (metabolic syndrome)이라 한다. 인슐린 저항성과 대사증후군은 심혈관계 질 환， 특히 관동맥 질환의 위험도 증가와 연관성이 있으며 (Isomaa B, et al . Diabetes Care, 2001, 24:683-9), 대사증후군으로 인해 관동맥 질환의 위험도와 사 망률을 3배 정도 증가시키는 것으로 보고된바 있다 (Lakka H, et al . JAMA, 2002, 288:2709-2716). 대사증후군이란 만성적인 대사 장애로 인하여 발생하는 당뇨병， 고혈압， 고 지혈증， 비만， 관상 또는 동맥경화증과 같은 여러 가지 질환이 동시에 발생하는 질 환을 일컫는 것으로서 1988년 Reaven(Reaven GM, Diabetes, 1988， 37: 1595-1607)에 의해 처음으로 규명되었다. 대사증후군은 인슐린저항성과 고혈압， 이상지질혈증을 특징으로 하고 있으며, 대부분 과체중이나 비만을 동반하고 있다. 대사증후군은 또 한 심혈관질환의 위험 인자이며， 모든 원인으로 인한 사망과 연관되어 있다고 보고 되었다. 제 2형 당뇨병 환자의 경우 게 1형 당뇨병과 달리 대사증후군의 유병률이 높 다고 보고되고 있으며， 제 2형 당뇨병 환자가 대사증후군을 동반할 때 사망률이 증 가한다고 알려져 있다 (Bonora E, et al. Diabet Med., 2004, 21:52-8; Ford ES, Diabetes Care. , 2005, 28:1769-78； Alexander CM, et al. Diabetes, 2003， 52:1210-1214). 또한， 게 2형 당뇨병의 대혈관 및 미세혈관 합병증과 고혈압， 이상 지질혈증 등의 대사증후군의 구성요소들과의 연관성에 대한 연구들이 발표되어 있 다 (Mykkanen L, et al . Diabetologia. , 1993, 36： 553-559； Haffner SM, et al . Diabetes, 1992, 41:715-722). 대사증후군의 가장 심각한 문제점은 당뇨병성 망막증， 신증， 신경병증， 고지 혈증, 심혈관질환 (뇌졸중， 협심증， 심근경색증, 말초혈관질환)과 같은 만성 합병증 의 발생이다 (Wolf SP, Br Med Bull., 1993, 49:642-652). 이러한 만성 합병증은 대 부분 일단 발생 된 이후에는 비가역적인 진행과정을 밟게 되며 아직까지는 이러한 과정을 완전히 차단할 수 있는 방법이 없어서 적절한 치료가 병행되지 않을 경우， 심각한 증상을 초래하여 환자를 죽음에까지 이르게 한다. 그러므로 복합적 증상을 갖는 대사증후군의 효과적인 관리 또는 치료를 위해서는 정상 혈당의 유지를 위한 혈당강하 효과와 동시에 신병증， 간병증， 고지혈증 등을 치료하는 효과를 갖는 것 이 이상적이나, 아직까지 이러한 치료제는 개발되지 않았으며， 혈당강하제， 혈압강 하제， 콜레스테를 치료제등을 각각 개별적으로 별도로 복용하고 있다. 종래의 당뇨병 또는 당뇨 합병증의 예방 및 치료를 위한 생약 복합조성물에 는， 오수유 (Evodiae Fructus), 백모근 (Imperatae Rhizoma) 및 청피 (Citrus Unshiu Markovich)의 복합 추출물을 유효성분으로 함유하는 비만 (Obesity) 및 대사증후군 (Metabolic Syndrome or Syndrome X)의 예방 또는 치료용 조성물이 대한민국 특허 공개 제 2009-0114093호에 개시되어 있고， 대한민국 특허공개 제 2010-0956278호에는 여주, 동층하초, 지골피， 상백피， 귀전우ᅳ 갈근， 황정， 백출， 맥문동, 산수유， 인 삼을 포함하는 복합생약 추출물을 유효성분으로 하는 당뇨병 또는 당뇨 합병증의 치료 또는 예방용 조성물이 개시되어 있다.
또한, 대한민국 특허공개 제 2006-0025990호에는 백강잠， 홍삼， 파극천， 당귀 신, 구기자， 복분자, 자황기， 육종용, 구판， 용골， 쇄양， 황정， 원지, 곡정초， 용 안육， 숙지황， 우슬， 홍조， 산약， 포부자, 오미자, 백복신, 속단, 여정자, 차전자, 녹용， 해마 및 합개로 구성된 복합 생약 추출물을 함유하는 당뇨병 예방 빛 치료용 조성물이 개시되어 있다.
나아가, 대한민국 특허공개 제 2003-0059952호에는 변방 소풍순기원 생약 복 합제즉， 대황, 차전자， 토사자, 지실， 방풍, 독활로 이루어진 추출물을 포함하는 조성물이 개시되어 있다.
그러나, 여전히 당뇨병 또는 당뇨 합병증을 더욱 효과적으로 예방 또는 치료 할 수 있는 물질의 개발이 요구되고 있다. 한편, 당귀 (Angelica gigas Nakai)는 국내에서 재배되는 귀화 식물로서 한국 산 당귀를 참당귀라고 하며， 일본이 원산지인 여러해살이풀로 높이 60-90 cm이고, 꽃은 흰색으로 8-9월에 가지 끝에 달리며, 열매는 편평한 긴 타원형이고 가장자리 에 좁은 날개가 있다. 뿌리를 당귀라고 하는데, 보혈의 효능이 있으므로 얼굴에 핏 기가 없고 현기증이 자주 나며 눈과 입술에 윤기가 없는 사람에게 효능이 있다고 알려져 있다. 몸이 허약하여 오는 두통， 여성들의 월경 조절 효능이 뛰어나므로 산 전이나 산후의 여러 질병에 자주 사용되며， 월경불순, 복통을 치료한다. 위장의 기 능이 약해서 오는 변비 치료에 효과가 있다 (배기환 저, 민간요법과 한방요법에 따 른건강지침서 원색도감， 2003, 102-103) .
지금까지 알려져 있는 당귀의 성분으로는 쿠마린 (coumarine)계 물질인 데커 신 (decursin), 데커시놀 (decursinol)， 노다케네틴 (nodakenetin)， 움벨리페론 (umbel liferon), 노다 케닌 (nodakenin)， 베타 -시토스테를 (β -sitosterol), 안젤란- I , 안젤란 -Π 등이 있다. 단리 된 데커신과 데커시놀은 토끼 적출 장관을 마비시 키는 것으로 밝혀졌고, 개구리 적출심장에 대하여는 억제작용 그리고 토끼의 호흡 억제와 혈압강하 작용이 보고되었으며 생쥐의 자발작용을 억제한다는 보고도 있다 ( 생약학회지 1970, 1, 1:25-32). 또한， 항혈전작용， 조혈작용， 심장수축억제작용， 혈관이완작용, 혈중지질농도 강하를 통한 죽상동맥경화 억제작용, 면역조절작용, 항암작용 및 항염증작용 등이 보고되고 있다 (Chung B. S., et al ,
HyangyakDaesacheon: Youngrimsa, 1998， 406-408) . 최근에는 데커신이 단백질 인산 화효소 C(protein kinase C)의 활성을 증진시키는 작용이 있으며， 펙틴질 다당류인 안젤란 -I , 안젤란 -Π 등이 항암제또는 면역 증강제로서 효과가 있음이 밝혀졌고( 대한민국 특허공개 제 1999-0031277호), 신장독성을 효과적으로 경감시킬 수 있는 신장독성 억제제로서 특히， 항암제또는 당뇨병 치료제조성물에서 유용하게 이용될 수 있다는 보고가 있다 (대한민국 특허공개 제 2001-0080265호).
또한， 당귀추출물은 마우스 골격근육세포인 C2C12 myotube에서 5' AMP-활성 화 단백질 인산화 효소 (5' AMP activated protein kinase, AMPK)의 활성 및 포도당 의 흡수를 촉진시켜 혈당을 조절함으로 당뇨로 인하여 발생 되는 각종 질병들을 예 방할 수 있다는 보고가 있고 (대한민국 특허공개 제 2005-0111657호)， 당뇨성 질환에 서의 중성지방 (trigyceride)의 혈중농도는 감소시키고 HDL 콜레스테를의 혈중농도 를 높이는 지질대사개선작용을 하는 것으로도 알려져 있다 (대한민국 특허공개 제 2009-0078267호). 산마늘 (Allium victor ial is subsp. platyphyl lum)은 전지역에 고루 분포하고 있는 외떡잎 식물 백합 목 백합과에 속하는 여러해살이 풀이다. 산마늘의 부위별 추출물은 식용이 가능하고， 전통적으로 감기나 항세균, 소화， 건위 등의 용도로 한 방에서 사용되어 왔다. 또한， 잠재적인 항 혈전 작용을 가지는 황 화합물과 항 혈 소판 웅집 활성이 보고되었다 (Wijaya, C. H. et al., Nat. Prod. Sci. , 1996, 2, 37-42； L i akopou 1 ou-Kyr i ak i des , M. et al. , Phytochem. , 1985， 24， 600-601). 또 한, 산마늘 추출물의 효과에 대해서는 널리 연구되어 산마늘 추출물을 유효성분으 로 포함하는 동맥경화증 및 고콜레스테를혈증의 예방 또는 치료용 조성물 (대한민국 특허공개 제 2002-0050362호), 간 보호 또는 간질환의 예방 또는 치료용 조성물 (대 한민국 특허공개 제 2005-0102572호), 당뇨성 질환의 예방 또는 치료용 조성물 (대한 민국 특허공개 제 2005-0043092호) 등이 보고되었고, 최근에는 항산화제용 또는 항 균제용 조성물 (대한민국 특허공개 제 2009-0100732호)， 암 발생 또는 진행 시에 나 타나는 병리 현상인 간극 결합부의 세포 내 신호전달 (gap junctional intercellular communication, GJIC) 억제를 회복시켜, 암 예방 또는 치료용 조성 물 (대한민국 특허공개 제 2009-0100573호)등이 보고되어 있다. 이에 , 본 발명자들은 천연물 중에서 당뇨병 또는 당뇨병 합병증에 효과적인 물질을 찾고자 연구한 결과, 당귀 추출물 및 산마늘의 추출물을 흔합한 복합조성물 이 개별 추출물의 합보다 상승효과를 나타내어 당뇨병 또는 당뇨 합병증을 치료 및 개선하는 탁월한 효과를 나타냄을 확인하고 본 발명을 완성하였다.
【발명의 상세한 설명】
【기술적 과제】
본 발명의 목적은 당귀 추출물 및 산마늘 추출물을 흔합한 복합조성물을 유 효성분으로 함유하는 당뇨병 또는 당뇨 합병증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 을 제공하는 데 있다.
본 발명의 다른 목적은 당귀 추출물 및 산마늘 추출물을 흔합한 복합조성물 을 유효성분으로 함유하는 비만질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 데 있다.
본 발명의 또 다른 목적은 당귀 추출물 및 산마늘 추출물을 흔합한 복합조성 물을 유효성분으로 함유하는 당뇨 또는 당뇨 합병증의 예방 또는 개선용 건강식품 조성물을 제공하는 데 있다.
본 발명의 다른 목적은 당귀 추출물 및 산마늘 추출물을 흔합한 복합조성물 을 유효성분으로 함유하는 비만질환의 예방 또는 개선용 건강식품 조성물을 제공하 는 데 있다.
【기술적 해결방법】
상기 목적을 달성하기 위하여 , 본 발명은 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합 중량비가 1 :4-6 또는 2-4: 1로 흔합된 복합조성물을 유효성분으로 함유하는 당 뇨병 또는 당뇨 합병증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
또한， 본 발명은 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합 중량비가 1 :4-6 또는 2-4: 1로 흔합된 복합조성물을 유효성분으로 함유하는 비만질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
나아가, 본 발명은 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합 중량비가 1 :4-6 또 는 2-4: 1로 흔합된 복합조성물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병 또는 당뇨 합병증 의 예방 또는 개선용 건강식품 조성물을 제공한다. 또한, 본 발명은 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합 중량비가 1:4-6또는 2-4:1로 흔합된 복합조성물을 유효성분으로 함유하는 비만질환의 예방 또는 개선용 건강식품 조성물올 제공한다.
【유리한 효과】
본 발명에 의한 당귀 추출물 및 산마늘 추출물을 흔합한 복합조성물의 조성 비율이 1:4-6 또는 2-4:1인 경우에서 개별 추출물의 효과의 합에 비하여 더 우수한 항 비만， 혈당강하, 항 고지혈증, 간 보호 및 신장보호 효과를 나타내므로 당뇨병 및 당뇨병성 비만, 혈당증가, 고지혈증， 고혈압， 동맥 경화증， 뇌졸증, 간 손상， 신장 손상, 면역억제, 안구 손상 둥의 당뇨 합병증의 예방, 치료 또는 개선용 조성 물로 유용하게 이용될 수 있고， 또한， 항 비만 효과가 우수하므로 비만 예방， 치료 또는 개선용 조성물로 유용하게 이용될 수 있다.
【도면의 간단한 설명】
도 1은 본 발명의 일실시예에 따른 투여군에 대한 증체량을 나타내는 그래프 이다.
도 2는 본 발명의 일실시예에 따른 투여군에 대한 난소주위 지방세포의 직경 및 복벽지방세포의 직경의 변화를 나타내는 도면이다.
【발명의 실시를 위한 최선의 형태】
본 발명은 당귀 추출물 및 산마늘 추출물을 흔합한 복합조성물을 유효성분으 로 함유하는 당뇨병 또는 당뇨 합병증 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한 다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다. 본 발명에 따른 상기 약학적 조성물에 있어서, 당귀 추출물과 산마늘 추출물 은 중량비가 1:4-6 또는 2-4:1인 것이 바람직하고， 1:4또는 4:1인 것이 더욱 바람 직하며， 4:1인 것이 가장 바람직하다. 또한， 본 발명에 따른 상기 약학적 조성물은 항비만 활성을 나타냄으로써， 당뇨병으로부터 유발되는 합병증인 당뇨병성 비만 질환을 예방 또는 치료하는데 유 용하게 사용할수 있다. 구체적으로， 본 발명에 따른 상기 약학적 조성물이 체중에 미치는 영향， 난 소주위 지방중량 변화 , 난소주위 지방세포 직경의 변화 및 복벽 지방세포 직경의 변화에 대한 실험을 수행한 결과 , 체중 감소， 난소주위 지방중량 감소， 난소 주위 지방세포 크기 감소， 복벽 지방세포 크기 감소 효과가 우수하므로 당뇨병성 비 만 질환을 예방 또는 치료하는데 유용하게 사용할 수 있다 (실시 예 1 및 6， 도 1-2 참 조) . 나아가, 본 발명에 따른 상기 약학적 조성물은 혈당강하 활성을 나타냄으로 써 , 당뇨병 또는 당뇨병으로부터 유발되는 합병증을 예방 또는 치료하는데 유용하 게 사용할 수 있다.
구체적으로， 본 발명에 따른 상기 약학적 조성물이 혈당에 미치는 영향에 대 한 실험을 수행한 결과， 혈당강하 효과가 우수하므로， 당뇨병 또는 당뇨 합병증을 예방 또는 치료하는데 유용하게 사용될 수 있다 (실시 예 2 및 7 참조) . 또한， 본 발명에 따른 상기 약학적 조성물은 항 고지 혈증 활성을 나타냄으로 써， 당뇨병 또는 당뇨병으로부터 유발되는 합병증을 예방 또는 치료하는데 유용하 게 사용될 수 있다 .
구체적으로， 본 발명에 따른 상기 약학적 조성물에 대한 혈중 총 콜레스테를 및 혈중 트리글리세라이드 함량의 변화 , 혈증 저밀도지단백 (LDL) 및 혈중 고밀도지 단백 (HDL) 함량의 변화를 측정하는 실험을 수행한 결과， 혈중 총 콜레스테를 함량 감소， 혈중 트리글리세라이드 함량 감소 , 혈중 LDL 함량 감소 및 혈중 HDL 함량 증 가 (실시 예 3 및 8 참조)， 췌장섬의 수의 증가， 췌장섬의 직경 증가 및 췌장섬 내 글루카곤 면역반웅세포의 수의 감소에 따라 췌장 B 세포에 대한 보호 효과 (실시 예 11 참조)가 우수하므로 당뇨병 또는 당뇨 합병증을 예방 또는 치료하는 데 유용하 게 사용 될 수 있다 . 나아가 본 발명에 따른 상기 약학적 조성물은 간 보호 활성을 나타냄으로 써 ᅳ 당뇨병 또는 당뇨병으로부터 유발되는 합병증을 예방 또는 치료하는데 유용하 게 사용될 수 있다 .
구체적으로， 본 발명에 따른 상기 약학적 조성물에 대한 간 중량의 변화， 혈 중 아스파탐아미노전이효소 (AST) 및 알라닌아미노전이효소 (ALT) 함량의 변화를 측 정하는 실험을 수행한 결과, 간 중량 증가, 혈중 AST 함량 감소 및 혈중 ALT 함량 감소 효과가 우수하므로 당뇨병 또는 당뇨 합병증을 예방 또는 치료하는 데 유용하 게 사용될 수 있다 (실시 예 4 및 9 참조) . 또한， 본 발명에 따른 상기 약학적 조성물은 신장보호 활성을 나타냄으로써， 당뇨병 또는 당뇨병으로부터 유발되는 합병증을 예방 또는 치료하는데 유용하게 사 용될 수 있다 .
구체적으로 , 본 발명에 따른 상기 약학적 조성물에 대한 혈중 요소질소 (BUN) 및 크레아티닌 함량의 변화 및 변성 세뇨관 수의 변화를 측정하는 실험을 수행한 결과， 혈증 BUN 함량 감소， 혈중 크레아티닌 함량 감소， 변성 세뇨관 수 감소 및 신장 중량 감소 효과가 우수하므로 당뇨병 또는 당뇨합병증을 예방 또는 치료하는 데 유용하게 사용될 수 있다 (실시 예 5, 10 및 12 참조) . 나아가， 본 발명에 따른 상기 약학적 조성물은 면역활성 효과를 나타냄으로 써， 당뇨병 또는 당뇨병으로부터 유발되는 합병증을 예방 또는 치료하는데 유용하 게 사용될 수 있다.
구체적으로 ᅳ 본 발명에 따른 상기 약학적 조성물에 대한 가슴샘 중량의 변 화 , 비장 중량의 변화 , 가슴샘 소엽 전체 두께의 변화 , 가슴샘 피 질 두께의 변화， 비장 전체 두께의 변화 비장 백색수질의 평균 직경의 변화를 측정하는 실험을 수 행한 결과， 가슴샘 중량 증가, 비장 중량 증가， 가슴샘 소엽 전체 두께 증가， 가슴 샘 피 질 두께 증가， 비장 전체 두께 증가 및 비장 백색수질의 평균 직경 증가 효과 가 우수하므로 당뇨병 또는 당뇨 합병증을 예방 또는 치료하는 데 유용하게 사용될 수 있다 (실시 예 13 참조) . 또한， 본 발명에 따른 상기 약학적 조성물은 안구보호 활성을 나타냄으로써 , 당뇨병 또는 당뇨병으로부터 유발되는 합병증을 예방 또는 치료하는데 유용하게 사 용될 수 있다 .
구체적으로， 본 발명에 따른 상기 약학적 조성물에 대한 백내장 육안 수치의 변화， 백내장 정량 이미지 수치의 변화 , 수정체 손상 수치의 변화， 수정체 손상부 위의 두께의 변화 망막 전체 두께의 변화， 망막 속 얼기층 두께의 변화， 망막 속 핵층의 두께의 변화 및 속경 계막 내에 존재하는 혈과의 수의 변화를 측정하는 실험 을 수행한 결과 , 백내장 육안 수치 감소 , 백내장 정량 이미지 수치 감소， 수정체 손상 수치 감소 , 수정체 손상부위의 두께 감소， 망막 전체 두께 증가， 망막 속 얼 기층 두께 증가 및 망막 속 핵충의 두께 증가 및 속경계막 내에 존재하는 혈과의 수 감소 효과가 우수하므로 당뇨병 또는 당뇨합병증을 예방 또는 치료하는데 유용 하게 사용될 수 있다 (실시예 14 참조). 따라서， 본 발명의 당귀 추출물 및 산마늘 추출물을 흔합한 복합조성물은 당 뇨병 또는 당뇨병으로부터 유발되는 비만， 혈당의 증가 고지혈증, 간손상, 신장손 상, 면역활성 및 안구보호에 있어서 매우 우수한 효과를 나타내므로 당뇨병 또는 당뇨합병증에 유용하게 사용될 수 있다. 나아가， 본 발명에 따른 상기 약학적 조성물에 의해 예방 또는 치료될 수 있 는 상기 당뇨병은 제 2형 당뇨병이고, 상기 당뇨 합병증으로는 당뇨성 신변증， 당뇨 성 간변증， 고혈압， 동맥 경화증， 뇌졸증, 심부전증, 면역억제 및 당뇨성 망막증 등을 더 포함할 수 있다. 또한, 본 발명은 상기 당귀 추출물 및 산마늘 추출물을 흔합한 복합조성물을 이를 필요로 하는 대상에게 유효량으로 투여하는 단계를 포함하는 당뇨병 또는 당 뇨 합병증의 치료방법을 제공한다. 본 발명에 따른 치료방법에 있어서， 상기 당귀 추출물 및 산마늘 추출물은 중량비가 1:4-6 또는 2-4:1인 것이 바람직하고， 1:4 또는 4:1인 것이 더욱 바람직 하며 , 4:1인 것이 가장 바람직하다. 또한, 본 발명에 따른 치료방법에 있어서, 상기 복합조성물은 체중을 감소， 난소주위 지방중량 감소， 난소주위 지방세포 크기 감소, 복벽 지방세포 크기 감소 효과를 나타내어 항 비만 효과를 나타냄으로써 ᅳ 당뇨병 또는 당뇨병으로 유발되는 합병증을 치료할수 있다 (실시예 1 및 6ᅳ 도 1-2 참조). 나아가, 본 발명에 따른 치료방법에 있어서, 상기 복합조성물은 혈당강하 효 과를 나타냄으로써, 당뇨병 또는 당뇨병으로 유발되는 합병증을 치료할 수 있다 (실 시예 2 및 7참조). 또한, 본 발명에 따른 치료방법에 있어서， 상기 복합조성물은 혈증 총 콜레 스테를 함량， 혈중 트리글리세라이드 함량, 혈중 저밀도지단백 (LDL) 함량 감소 효 과를 나타내고, 혈중 고밀도지단백 (HDL) 함량 증가 효과를 나타내며 (실시예 3 및 8 참조), 췌장섬의 수ᅳ 췌장섬의 직경 증가 및 췌장섬 내 글루카곤 면역반웅세포의 수의 감소하므로 췌장 B 세포에 대한 보호 효과 (실시예 11 참조)가 우수하므로 당 뇨병 또는 당뇨병으로 유발되는 합병증을 치료할수 있다. 나아가, 본 발명에 따른 치료방법에 있어서, 상기 복합조성물은 간 중량 감 소， 혈중 아스파탐아미노전이효소 (AST) 함량 감소 및 혈중 아미노전이효소 (ALT) 함 량 감소 효과를 나타내어 간 보호 효과를 나타냄으로써, 당뇨병 또는 당뇨병으로 유발되는 합병증을 치료할 수 있다 (실시예 4및 9 참조). 또한， 본 발명에 따른 치료방법에 있어서, 상기 복합조성물은 혈중 요소질 소 (BUN) 및 혈중 크레아티닌의 함량 감소， 변성 세뇨관의 수의 감소 효과 및 신장 중량 감소 효과를 나타내어 신장보호 효과를 나타냄으로써， 당뇨병 또는 당뇨병으 로 유발되는 합병증을 치료할 수 있다 (실시예 5， 10 및 12 참조). 나아가, 본 발명에 따른 치료방법에 있어서， 상기 복합조성물은 가슴샘 중량 증가， 비장 중량 증가， 가슴샘 소엽 전체 두께 증가， 가슴샘 피질 두께 중가， 비장 전체 두께 증가 및 비장 백색수질의 평균 직경 증가 효과를 나타내어 면역활성 효 과를 나타냄으로써， 당뇨병 또는 당뇨병으로부터 유발되는 합병증을 치료할 수 있 다 (실시예 13 참조). 또한, 본 발명에 따른 치료방법에 있어서, 상기 복합조성물은 백내장 육안 수치 감소， 백내장 정량 이미지 수치 감소, 수정체 손상 수치 감소， 수정체 손상부 위의 두께 감소， 망막 전체 두께 증가, 망막 속 얼기층 두께 증가 및 망막 속 핵층 의 두께 증가 및 속경계막 내에 존재하는 혈과의 수 감소 효과를 나타내어 안구보 호 활성 효과를 나타냄으로써， 당뇨병 또는 당뇨병으로부터 유발되는 합병증을 치 료할수 있다 (실시예 14참조). 따라서， 본 발명에 따른 치료방법에 있어서, 본 발명의 당귀 추출물 및 산마 늘 추출물을 흔합한 복합조성물은 당뇨병 또는 당뇨병으로부터 유발되는 비만, 혈 당의 증가， 고지혈증, 간손상， 신장손상， 면역활성 및 안구보호에 있어서 매우 우 수한 효과를 나타내므로 당뇨병 또는 당뇨합병증을 치료할 수 있다. 또한, 본 발명은 당귀 추출물 및 산마늘 추출물을 흔합한 복합조성물을 유효 성분으로 함유하는 비만질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 상기 약학적 조성물에 있어서 , 당귀 추출물과 산마늘 추출물 은 중량비가 1 :4-6 또는 2-4: 1인 것이 바람직하고 , 1 :4 또는 4: 1인 것이 더욱 바람 직하며 , 4: 1인 것이 가장 바람직하다.
본 발명의 상기 약학적 조성물은 전술한 바와 같이 체중 감소， 난소주위 지 방중량 감소， 난소 주위 지방세포 크기 감소 , 복벽 지방세포 크기 감소 효과가 우 수하므로 당뇨병으로부터 유발되는 당뇨병성 비만질환뿐만 아니라 통상의 비만질환 을 예방 또는 치료하는데 유용하게 사용할 수 있다. 또한， 본 발명은 상기 당귀 추출물 및 산마늘 추출물을 흔합한 복합조성물을 이를 필요로 하는 대상에게 유효량으로 투여하는 단계를 포함하는 비만질환의 치료 방법을 제공한다.
본 발명에 따른 치료방법에 있어서， 상기 당귀 추출물 및 산마늘 추출물은 중량비가 1:4-6 또는 2-4: 1인 것이 바람직하고 , 1 :4 또는 4: 1인 것이 더욱 바람직 하며， 4: 1인 것이 가장 바람직하다.
또한， 본 발명에 따른 치료방법에 있어서， 상기 복합조성물은 체중을 감소， 난소주위 지방중량 감소, 난소주위 지방세포 크기 감소, 복벽 지방세포 크기 감소 효과를 나타내어 항 비만 효과를 나타냄으로써， 비만질환을 치료할 수 있다 (실시예 1 및 6, 도 1-2 참조) . 나아가, 본 발명은 당귀 추출물 및 산마늘 추출물을 흔합한 복합조성물을 유 효성분으로 함유하는 당뇨병 또는 당뇨 합병증 예방 또는 개선용 건강식품 조성물 을 제공한다.
본 발명에 따른 상기 건강식품 조성물에 있어서， 당귀 추출물과 산마늘 추출 물은 중량비가 1:4-6 또는 2-4: 1인 것이 바람직하고， 1 :4 또는 4: 1인 것이 더욱 바 람직하며， 4: 1인 것이 가장 바람직하다. 또한， 본 발명에 따른 상기 건강식품 조성물은 체중을 감소 , 난소주위 지방 중량 감소， 난소주위 지방세포 크기 감소， 복벽 지방세포 크기 감소 효과를 나타내 어 항 비만 효과가 있는 것으로 나타나므로 당뇨병 또는 당뇨병으로 유발되는 합병 증을 예방 또는 개선하는데 유용하게 사용될 수 있다 (실시 예 1 및 6， 도 1-2 참조 ) . 나아가， 상기 건강식품 조성물은 혈당강하 효과가 있는 것으로 나타나므로 당뇨병 또는 당뇨병으로 유발되는 합병증을 예방 또는 개선하는데 유용하게 사용될 수 있다 (실시 예 2 및 7 참조) . 또한， 상기 건강식품 조성물은 혈중 총 콜레스테를 함량， 혈중 트리글리세라 이드 함량， 혈중 저밀도지단백 (LDL) 함량 감소 효과를 나타내고 , 혈중 고밀도지단 백 (HDL) 함량 증가 효과를 나타내며 (실시 예 3 및 8 참조) , 췌장섬의 수， 췌장섬의 직경 증가 및 췌장섬 내 글루카곤 면역반웅세포의 수의 감소하므로 췌장 B 세포에 대한 보호 효과 (실시 예 11 참조)가 우수하므로 당뇨병 또는 당뇨병으로 유발되는 합병증을 예방 또는 개선하는데 유용하게 사용될 수 있다. 나아가ᅳ 상기 건강식품 조성물은 간 중량 감소 , 혈중 아스파탐아미노전이효 소 (AST) 함량 감소 및 혈중 아미노전이효소 (ALT) 함량 감소 효과를 나타내어 간 보 호 효과가 있는 것으로 나타나므로 당뇨병 또는 당뇨병으로 유발되는 합병증을 예 방 또는 개선하는데 유용하게 사용될 수 있다 (실시 예 4 및 9 참조) . 또한， 상기 건강식품 조성물은 혈중 요소질소 (BUN) 및 혈중 크레아티닌의 함량 감소， 변성 세뇨관의 수의 감소 효과 및 신장 증량 감소 효과를 나타내어 신 장보호 효과가 있는 것으로 나타나므로 당뇨병 또는 당뇨병으로 유발되는 합병증을 예방 또는 개선하는데 유용하게 사용될 수 있다 (실시 예 5, 10 및 12 참조) . 나아가， 상기 건강식품 조성물은 가슴샘 중량 증가， 비장 중량 증가， 가슴샘 소엽 전체 두께 증가, 가슴샘 피 질 두께 증가, 비장 전체 두께 증가 및 비장 백색 수질의 평균 직경 증가 효과를 나타내어 면역활성 효과가 있는 것으로 나타나므로 당뇨병 또는 당뇨병으로부터 유발되는 합병증을 예방 또는 개선하는데 유용하게 사 용될 수 있다 (실시 예 13 참조) . 또한, 상기 건강식품 조성물은 백내장 육안 수치 감소 , 백내장 정량 이미지 수치 감소， 수정체 손상 수치 감소， 수정체 손상부위의 두께 감소， 망막 전체 두께 증가, 망막 속 얼기층 두께 증가 및 망막 속 핵층의 두께 증가 및 속경계막 내에 존재하는 혈과의 수 감소 효과를 나타내어 안구보호 활성 효과가 있는 것으로 나타 나므로 당뇨병 또는 당뇨병으로부터 유발되는 합병증을 예방 또는 개선하는데 유용 하게 사용될 수 있다 (실시예 14 참조) . 따라서， 본 발명의 당귀 추출물 및 산마늘 추출물을 흔합한 복합조성물은 당 뇨병 또는 당뇨병으로부터 유발되는 비만, 혈당의 증가, 고지혈증 , 간손상, 신장손 상, 면역활성 및 안구보호에 있어서 매우 우수한 효과를 나타내므로 당뇨병 또는 당뇨합병증의 당뇨병 또는 당뇨 합병증을 개선하는데 유용하게 사용될 수 있다. 나아가， 본 발명에 따른 상기 건강식품 조성물에 의해 예방 또는 개선될 수 있는 상기 당뇨병은 제 2형 당뇨병이고 , 상기 당뇨 합병증으로는 당뇨성 신변증 , 당 뇨성 간변증， 고혈압， 동맥 경화증, 뇌졸증， 심부전증， 면역억제 및 당뇨성 망막증 등을 더 포함할 수 있다. 또한， 본 발명은 당귀 추출물 및 산마늘 추출물을 흔합한 복합조성물을 유효 성분으로 함유하는 비만질환 예방 또는 개선용 건강식품 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 상기 건강식품 조성물에 있어서， 당귀 추출물과 산마늘 추출 물은 중량비가 1:4-6 또는 2-4: 1인 것이 바람직하고， 1 :4 또는 4: 1인 것이 더욱 바 람직하며 , 4: 1인 것이 가장 바람직하다.
본 발명의 상기 건강식품 조성물은 체중 감소， 난소주위 지방중량 감소， 난 소 주위 지방세포 크기 감소 , 복벽 지방세포 크기 감소 효과가 우수하므로 당뇨병 으로부터 유발되는 당뇨병성 비만질환뿐만 아니라 통상의 비만질환을 예방 또는 치 료하는데 유용하게 사용할 수 있다. 또한, 본 발명에 따른 상기 조성물은 투여용량의존적으로 우수한 항비만， 항 고지혈증, 혈당강하, 간보호 효과, 신장보호 효과 면역활성 효과 및 안구보호 효 과를 나타낸다.
나아가， 본 발명에 따른 상기 조성물은 대조약물과의 복합조성물 투여군에서 두배용량의 대조약물 투여군과 비교시 동등 유사하거나 더 우수한 효과를 나타내 어 , 상기조성물과 다른 여러 가지 약물과의 조합에 의해 더 우수한 항비만, 항고지 혈증， 혈당강하, 간보호 효과， 신장보호 효과, 면역활성 효과 및 안구보호 효과가 나타날 가능성이 있음을 확인하였다. 또한， 본 발명에 따른 상기 조성물은 랫트에서 단회경구 투여독성 실험의 결 과 한계용량인 2000 mg/kg까지 사망례가 인정되지 않았으며, 마우스 골수세포를 이 용한 소핵실험 결과 음성을 나타내는 것으로 관찰되어 의약품， 건강식품 및 식품둥 으로 사용하기 안전한조성물임을 확인하였다 (실시예 15 및 16 참조). 본 발명에 따른 당귀 추출물 및 산마늘 추출물을 함유하는 복합조성물에 있 어서, 상기 당귀 및 산마늘은 재배한 것， 채취한 것 또는 시판되는 것 등이 제한 없이 사용될 수 있다. 상기 당귀 및 산마늘은 식물 전체를 이용할 수 있고, 잎， 줄 기 또는 뿌리를 이용하는 것이 바람직하나 이에 한정되는 것은 아니다. 상기 당귀 및 산마늘은 생육단계 중 모든 시기가사용 가능하다.
상기 당귀 및 산마늘 추출시 추출 용매는 물, 알코올 또는 이들의 흔합물， 바람직하게는 물， d 4의 저급 알코올 또는 이들의 흔합물을 사용하는 것이 바람직 하며， 메탄을 또는 에탄올로 추출하는 것이 더욱 바람직하나， 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 추출 용매의 양은 당귀 및 산마늘 건조 중량의 2-30배로 함이 바람직하 고, 20배로 하는 것이 더 바람직하나, 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 당귀 추출물 및 산마늘 추출물을 추출하는 방법은 열수 추출， 침지 추 출, 초임계 추출， 아임계 추출， 고온 추출, 고압 추출， 환류 넁각 추출 및 초음파 추출 등의 추출장치를 이용한 방법 또는 XAD 및 HP-20을 포함한 흡착 수지를 이용 하는 방법 등 당 업계의 통상적인 추출방법을 사용할 수 있으며， 가온하며 환류 추 출 또는 상은에서 추출하는 것이 바람직하나, 이에 한정하는 것은 아니다. 상기 당 귀 추출물 및 산마늘 추출물의 추출 회수는 1-5회인 것이 바람직하며， 3회 반복 추 출하는 것이 더욱 바람직하나 이에 한정되는 것은 아니다. 초음파 추출 방법으로 1 회 -5회 추출될 수 있다. 추출 시 은도는 10 °C-100 °C인 것이 바람직하며 상온인 것이 더욱 바람직하나 이에 한정되지 않는다. 상기 추출 시간은 1일 -7일인 것이 바 람직하고, 3일 -7일인 것이 더욱 바람직하나 이에 한정되지 않는다.
추출 후 감압농축하는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다.
이때， 상기 감압 농축은 진공회전증발농축기를 이용하는 것이 바람직하나 이 에 한정하지 않는다. 또한， 건조는 감압건조, 진공건조, 비등건조， 분무 건조, 상 온건조 또는 동결건조를 하는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다. 구체적으로 본 발명에 따른 복합조성물은 60-70 °C의 온도에서 감압 농축하 여 연조엑기스로 제조하거나， 동결건조 하거나 스프레이 드라이어 또는 유동층 조 립기를 이용하여 건조함으로써 분말형태로 제조할 수 있다. 상기 본 발명의 당귀 추출물 및 산마늘 추출물을 포함하는 조성물은 조성물 총 중량에 대하여 상기 조성물을 0.1-50 중량 %로 포함하는 것이 바람직하나 이에 한정되지 않는다. 본 발명에 따른 상기 당귀 추출물 및 산마늘 추출물을 혼합한 복합조성물은 약제의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체， 부형제및 희석제를 더 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 조성물은， 각각 통상의 방법에 따라산제， 과립제， 정제， 캡 슐제, 현탁액， 에멀견， 시럽， 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제， 좌제및 멸균 주 사용액의 형태로 제형화 하여 사용될 수 있다. 본 발명의 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제및 회석제로는 락토즈， 덱스트로즈， 수크로스, 솔비를， 만니를， 자일 리를 에리스리를, 말티를, 전분, 아카시아 고무， 알지네이트， 젤라틴, 칼슴 포스 페이트， 칼슘 실리케이트, 셀를로즈, 메틸 셀를로즈, 미정질 샐를로스， 폴리비닐 피를리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트， 프로필히드록시벤조에이트， 탈크， 마그네 슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다.
제제화할 경우에는 보통 사용하는 층진제， 증량제， 결합제, 습윤제， 붕해 제， 계면활성제둥의 회석제또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고 형제제에는 정제， 환제， 산제， 과립제 캡슐제등이 포함되며, 이러한 고형제제는 본 발명의 조성물에 적어도 하나 이상의 부형제예를 들면, 전분， 탄산칼슴 (calcium carbonate), 슈크로스 (sucrose) 또는 락토오스 (lactose)， 젤라틴 등을 섞어 조제된 다. 또한 단순한 부형제이외에 마그네슘 스테아레이트， 탈크 같은 윤활제들도 사용 된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제， 내용액제， 유제， 시럽제등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순회석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들 면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제 에는 멸균된 수용액， 비수성용제, 현탁제， 유제， 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜 (propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜， 을리브 오일과 같은 식물성 기름， 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔 (witepsol), 마크로골, 트원 (tween) 61， 카카오지， 라우린지， 글리세를젤라틴 등이 사용될 수 있다. 본 발명의 조성물은 경구 또는 비경구로 투여될 수 있으며, 예를 들면， 구 강， 설하， 비강， 직장또는피하내로 투여될 수 있다.
본 발명의 조성물의 바람직한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도， 약물형태， 투여경로 및 기간에 따라 다르나, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있 다. 그러나 바람직한 효과를 위해서, 본 발명의 조성물은 정상인 (표준 체중 60 kg) 을 기준으로 10-1000 mg 투여범위 내에서 1일 1회 -3회 나누어 투여될 수 있으나, 반드시 이제제한되는 것은 아니며 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위 를 한정하는 것은 아니다. 본 발명에 따른 당귀 추출물 및 산마늘 추출물을 흔합한 복합조성물은 당뇨 병, 당뇨 합병증 또는 비만 예방 또는 개선을 목적으로 상기 복합조성물을 식품, 음료 등의 건강보조 식품에 첨가할 수 있다.
상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식 품의 예로는 드링크제， 육류ᅳ 소시지， 빵, 비스킷 떡， 초콜릿 캔디류 스낵류， 과자류， 피자, 라면, 기타 면류, ¾류， 아이스크림류를 포함한 낙농제품， 각종 스 프， 음료수, 알코올 음료, 유제품 및 유가공 제품 등이 있으며， 통상적인 의미에서 의 건강기능식품을 모두 포함할 수 있다.
본 발명의 당귀 추출물 및 산마늘 추출물은 식품에 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고， 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용 될 수 있다. 유효 성분의 흔합양은 그의 사용 목적 (예방 또는 개선용)에 따라 적합 하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 건강식품 중의 상기 복합조성물의 양은 전체 식 품 중량의 0.1-90 중량부로 가할 수 있다. 그러나 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범 위 이상의 양으로도사용될 수 있다.
본 발명의 건강 기능성 음료 조성물은 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 복합조성물을 함유하는 외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당， 과당 등; 디사 카라이드, 예를 들어 말토스， 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드， 예를 들어 덱스트 린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당， 및 자일리틀， 소르비를， 에리트리를 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제 (타우마틴， 스테비아 추출물 (예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진등) 및 합성 향미제 (사카린, 아 스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 mi당 일반적으로 약 1—20 g, 바람직하게는 약 5—12 g이다.
상기 외에 본 발명의 당귀 추출물 및 산마늘 추출물은 여러 가지 영양제 , 비 타민, 광물 (전해질)， 합성 풍미제및 천연 풍미제등의 풍미제, 착색제및 중진제 (치 즈， 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염， 알긴산 및 그의 염， 유기산, 보호성 콜로이드 증점제， pH 조절제， 안정화제， 방부제， 글리세린, 알코올， 탄산음료에 사용되는 탄 산화제등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 당귀 추출물 및 산마늘 추출물은 천연 과일 쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다.
이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하진 않지만 본 발명의 당귀 추출물 및 산마늘 추출물 100 중량 부 당 0.1-약 20 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
【발명의 실시를 위한 형태】
이하, 본 발명을 제조예 및 실시예에 의해 상세히 설명한다.
단， 하기 제조예 및 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐， 본 발명의 내용 이 하기 제조예 및 실시예에 한정되는 것은 아니다.
<제조예 1> 당귀 추출물 및 산마늘 추출물 제조
본 실험에서 사용된 당귀 (當歸)는 참당귀 (Angelica Gigas Radix)로 강원도 평창에서 채취한 것이며ᅤ 산마늘 (Wild Garlic Leaves)은 전라남도 남원에서 채취한 것을 사용하였다. 먼저 , 상기 당귀 100 g 및 산마늘 50 g에 50%에탄을 2.7 를 넣 고， 항온조 (water bath, 동서과학 DS—SWB-4)를 이용하여 당귀는 60 °C에서 3시간 동안 추출하였고, 산마늘은 80 °C에서 3시간 동안 추출한 후， 여과지를 이용하여 감압 여과한 여과액을 진공희전증발농축기 (BUCHI Rotavapor R— 144， swizerland)를 이용하여 농축액을 얻고， 다시 이를 동결건조기로 건조하여 분말을 얻었다. 그 결 과， 당귀는 32%의 수율로 동결건조 추출물 32 g을 얻었고， 산마늘은 18%의 수율로 10.8 g을 얻었다. 상기 동결 건조한 추출물 분말은 증류수에서 10 mg/ mi 농도로 용해되었으며， 각각 약한 갈색과 진한 갈색으로, 빛과 변성으로부터 차단된 -20 냉동실에 보관하였다.
<실시예 1> 당귀 추출물 및 산마늘 추출물로 구성된 복합조성물이 비만에 미 치는 영향
당뇨병 동물모델의 제조
본 발명의 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 당뇨병 또는 당뇨 합병증에 따른 항비만, 혈당강하, 항 고지혈증， 간 보호 및 신장보호 효과를 조사하기 위하여 준 비된 고지방 사료 (HFD)를 공급한 마우스는 당뇨 및 이와 관련된 대사증후군 치료제 개발에 가장 널리 이용되는 동물 모델로써 (Sone H et al . , Trends Mol Med. 2001， 7:320-2; Park SH et al . , J Ethnopharmacol., 2005, 102:326-35)， 고지방 사료 공 급에 의해 비만이 초래되고， 일반적으로 고혈당, 인슐린 저항성， 지방간， 신장변성 및 고지혈증이 초래되는 것으로 알려져 있다 (Surwit RS et al. , Diabetes. , 1988, 37： 1163-7； Thupari JN et al. , Aw J Physiol Endocrinol Me tab. 2004, 287-Έ97- E104; Yun SN et al. , Arch Pharm Res., 2004, 27:790-6). 본 발명에서는 마우스를 각 실험군 당 7마리를 1군으로 하여 총 18군 (126 마 리)을 사용하였고， 일반 설치류용 사료 (superfeed Co. , Korea)를 먹인 (Normal)군과 45 /Kcal 고지방사료 (D12451; Diet reserch, PA, USA)를 먹인 군 (Control)으로 나 누었다. 실험기간 동안 사료와 물은 낮 동안에 자유롭게 섭취하도록 하였으며 , 동 물 사육실의 온도는 20-25 °C이고， 습도는 40-45 °C로 유지시키고， 12시간 마다 낮 과 밤이 반복되도록 사육실내 명암주기 (light-dark cycle)를 조절하여 적웅시킨 후 사용하였다. 상기 일반 사료 및 고지방 사료의 성분은 하기 표 1에 기술하였다. 【표 1】
Figure imgf000021_0001
시험물질의 제조
상기 제조예의 당귀 추출물 및 산마늘 추출물을 표 2의 중량비로 흔합하여 총 11종의 복합조성물을 제조하였다.
대조약물로는 심바스타틴 (Wha Pharm. Ind. Co. , Ltd. , Korea), 실리마린 (Sigma, MO, USA), 메트포르민 (Wako Pure Chemical , Osaka, Japan)을 사용하였다. 상기 대조약물은 빛과 습기가 차단 되도록 넁동보관하였다.
【표 2】
Figure imgf000021_0002
시험물질의 투여
상기 제조된 복합조성물은 증류수에 직접 녹여 사용하였고, 고지방 사료를 공급하고 일주일 후부터 각 군당 7마리씩 총 18개 군으로 나누어 84일간 하루에 한 번씩 10 /kg로 경구투여 하였다. 11종류의 복합조성물과 2종류의 단일 추출물들 은 100 mg/kg으로 투여되었고， 심바스타틴， 실리마린 및 메트포르민은 각각 10 100 250 mg/kg으로 투여되었다. 약물 투여 종료시 체중의 표준편차가 큰 두 마리 를 각 군에서 제외하였다. 하기 표 3에 물질의 조성 및 투여군을 정리하여 나타내 었다.
【표 3]
Figure imgf000022_0001
본 발명의 모든 고지방 사료 (HFD) 공급군에서는 정상 대조군에 비해 현저한 사료 섭취 중량의 감소를 나타내었으나 열량적 측면에서 보면， 본 실험에 사용한 고지방사료의 열량 (4.73 kcal/g)이 정상 사료 (0.21 kcal/g)에 비해 대략 20배 정도 높으므로 (표 1 참조)， 비만 유발에는 큰 영향을 미치지 않은 것으로 판단되며， 일
부 복합조성물 투여군에서 유의성 없는 사료 섭취량의 증가가 인정된 이외에, HFD 대조군에 비해 유의성 있는 사료 섭취량의 변화는 모든 투여군에서 인정되지 않아， 본 발명에서 인정된 약리효과들이 사료 섭취량 감소에 의한 것은 아닌 것으로 판단 된다. 당귀 추출물 및 산마늘 추출물로 구성된 복합조성물이 비만에 미치는 영향 지방축적은 비만 시 초래되는 가장 일반적인 현상으로 조직병리학적 검사 시 지방세포의 비대가 초래되는 것으로 알려져 있다 (DiGirolamo M et al . , / Physiol., 1998, 274:R1460-7; Morange PE et al . , Arterioscler Thromb Vase Biol., 2000， 20:1150-4). 지방조직은 단순 에너지 저장소로서의 역할뿐만 아니라 내분비와 분비를 동시에 수행하는 장기이며， 지방세포에서 분비되는 생리활성물질 인 아디포카인 (Adipokine)을 분비하는 것으로 알려져 있다 (Fuji ta H et al .， Endocr J. 2005, 52:427-33). 아디포카인 (Adipokine)의 분비 변화는 비만과 인슐린 저항성과 같은 복합적인 질병을 초래할 수 있는 것으로 알려져 있다 (Mitchell M et al. , Reproduction., 2005， 130 :583-97).
(1) 체중에 미치는 영향
본 발명의 당귀 추출물 및 산마늘 추출물로 구성된 복합조성물이 비만에 미 치는 영향에 대해 알아보기 위하여 상기 복합조성물이 투여된 마우스의 체중변화를 도 1 및 표 4에 나타내었다.
【표 4】
체중증가
구분 적웅기간 투여기간 HFD 대조군
(7¾) (84임) 대비 %
대조군 정상군 1.56±0.08 3.24±3.94
HFD 4.50±1.77 22.56±7.44 596.30(정상군 대비) 심바스타틴 5.54±3.67 15.76±7.22 -30.14
대조약물 실리마린 5.62±3.07 15.50±13.21 -31.29
투여군 메트포르민 3.58±1.95 9.00±3.00 -60.11
단독 당귀 6.16±1.78 12.64±6.86 -43.97
투여군 산마늘 5.70±1.58 13.02±2.39 -42.29
1:1 4.38±1.49 15.66±8.55 -30.59
당귀:산마늘 1:2 5.32±2.24 16.62±7.04 -26.33
1:4 4.50±0.77 10.34±6.07 -54.17
복합 1:6 5·18±1·32 11.76±4.73 -47.87
조성물 1：8 3.40±2/78 13.74±1.83 -39.10
투여군 1:10 4·38±0·94 13.76±4.10 -39.01
2:1 5·19±1.22 11.81±4.82 -47.65
(mg/mg)
4:1 5.16±1.28 9.24±3.15 -59.04
6:1 4.24±1.36 24.36±4.70 7.98
8:1 5.40±2.41 19.88±2.62 -11.88
10： 1 5.72±1.57 16.44±5.99 -27.13
표 4에서 나타낸 바와 같이, 고지방 사료 (HFD) 대조군으로 사용된 고지방사 료를 공급한 마우스는 정상대조군으로 사용된 일반사료를 공급한 마우스에 비해 체 중이 596.30% 높게 증가하였고， 대조약물로 사용된 심바스타틴, 실리마린 및 메트 포르민을 투여한 군， 당귀 추출물 또는 산마늘 추출물을 각각 단독투여한 군 및 HFD 대조군과 유사한 체중 증가를 나타낸 당귀:산마늘의 조성비가 6:1인 복합조성 물군을 제외한 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 복합조성물 투여군에서 HFD 대조군 에 비해 11.88-54.17%의 체중감소를 나타내었고， 당귀:산마늘의 비율이 1:4-6 및 2-4:1인 경우， 47.65— 59.04%로 현저한 체중감소를 나타내었고， 이중, 복합조성물의 중량비가 1:4 및 4:1의 투여군에서는 각각 54.17% 및 59.04%로 체중 감소 효과가 우수한 것으로 나타났고， 이는 당귀 단독투여시 (43.97%) 및 산마늘 단독투여시 (42.29%)의 체중 감소 효과보다 우수한 것으로 나타내었다.
특히， 당귀 :산마늘의 중량비가 4:1인 경우， HFD 대조군에 비해 체중 감소 효 과가 59.04%로 가장 우수하게 나타나 항 비만 효과가 있는 것을 확인하였다. (2) 난소주위의 지방중량의 변화
본 발명의 당귀 추출물 및 산마늘 추출물로 구성된 복합조성물이 비만에 미 치는 영향에 대해 알아보기 위하여 상기 복합조성물이 투여된 마우스의 난소주위의 지방중량의 변화를 측정하여 실험결과를 하기 표 5에 나타내었다.
【표 5】
Figure imgf000025_0001
표 5에 나타낸 바와 같이， 고지방 사료 OFD) 대조군으로 사용된 고지방사료 를 공급한 마우스는 정상대조군으로 사용된 일반사료를 공급한 마우스에 비해 난소 주위 지방의 중량이 정상대조군 보다 503.32% 증가하는 것을 확인하였고， 당귀 추 출물 및 산마늘 추출물의 복합조성물 투여군 중 체중대비 상대중량이 증가한 6:1의 조성비를 갖는 복합조성물 투여군을 제외한 대조약물로 사용된 심바스타틴, 실리마 린 및 메트포르민을 투여한 군， 당귀 추출물 또는 산마늘 추출물의 단독 투여군 및 10종의 당귀 추출물 및 산마늘의 복합조성물 투여군이 HFD 대조군에 비해 난소주위 의 지방중량이 24.51-57.58% 감소하는 것을 확인하였다.
상기 투여군 중에서 당귀 :산마늘의 중량비가 1:2-6， 2-4:1 및 10:1인 경우 난소 주위 지방 중량이 38.45-57.58%로 당귀 추출물 또는 산마늘 추출물의 단독 투 여군에 비해 더 우수한 것으로 나타났고, 이중， 복합조성물의 중량비가 1:4 및 4:1 의 투여군에서는 각각 54.28% 및 57.58%로 난소주위 지방중량 감소 효과가 우수한 것으로 나타났고， 이는 당귀 단독투여시 (24.51%) 및 산마늘 단독투여시 (29.54%)의 난소주위 지방중량 감소 효과보다 매우 우수한 것으로 나타났다.
특히, 당귀:산마늘의 중량비가 4:1인 경우, 대조군에 비해 난소 주위 지방 중량 감소 효과가 57.5¾로 가장 우수하게 나타나 항 비만 효과가 있는 것을 확인 하였다.
(3) 난소주위의 지방세포 직경의 변화
본 발명의 당귀 추출물 및 산마늘 추출물로 구성된 복합조성물이 비만에 미 치는 영향에 대해 알아보기 위하여 상기 복합조성물이 투여된 마우스의 난소주위의 지방세포 직경의 변화를 측정하여 실험결과를 하기 표 6에 나타내었다.
【표 6】
Figure imgf000027_0001
표 6에 나타낸 바와 같이, 고지방 사료 (HFD) 대조군으로 사용된 고지방사료 를 공급한 마우스는 정상대조군으로 사용된 일반사료를 공급한 마우스에 비해 난소 주위 지방세포의 직경이 225.05% 증가하였고， 대조약물로 사용된 심바스타틴, 실리 마린， 메트포르민을 투여한 군, 당귀 추출물 또는 산마늘 추출물을 단독으로 투여 한 군 및 당귀 추출물 및 산마늘의 복합조성물을 투여한 군은 13.48-61.90%의 감소 하였다.
상기 투여군 중에서 당귀 추출물 및 산마늘의 복합조성물의 중량비율이 1:4- 6 및 2-4:1인 경우， HFD 대조군 및 당귀 추출물 또는 산마늘 추출물의 단독투여군 보다 난소 주위 지방세포의 직경이 54.95-61.90% 감소시키는 효과를 나타냈고， 이 중， 복합조성물의 중량비가 1:4 및 4:1의 투여군에서는 각각 60.37% 및 61.90%로 난소주위 지방세포 직경 감소 효과가 우수한 것으로 나타났고, 이는 당귀 단독투여 시 (13.48%) 및 산마늘 단독투여시 (46.5 )의 난소주위 지방세포 직경 감소 효과보 다 매우 우수한 것으로 나타났다.
특히， 당귀 및 산마늘의 흔합비율이 4:1인 투여군의 경우， HFD 대조군 보다 난소주위 지방세포의 직경 증가를 60.90%로 가장 우수하게 억제하는 것으로 나타나 항 비만 효과가 가장 우수한 것으로 나타났다.
(4) 복벽지방세포 직경의 변화
본 발명의 당귀 추출물 및 산마늘 추출물로 구성된 복합조성물이 비만에 미 치는 영향에 대해 알아보기 위하여 상기 복합조성물이 투여된 마우스의 복벽 지방 세포 직경의 변화를 측정하여 실험결과를 하기 표 7에 나타내었다.
【표 7】
Figure imgf000029_0001
표 7에 나타낸 바와 같이 , 복벽 지방세포의 직경 변화는 고지방 사료 (HFD) 대조군이 정상대조군에 비해 242.70%로 증가하는 것이 확인되었고, 3종의 대조약물 을 투여한 군， 당귀 추출물 또는 산마늘 추출물을 단독으로 투여한 군 및 당귀 및 산마늘 복합조성물을 투여한 11 종의 군에서 HFD 대조군 보다 복벽 지방세포의 직 경이 22.58-59.94%로 감소하는 것을 확인하였다.
상기 투여군 중에서 당귀 추출물 및 산마늘의 복합조성물의 중량비율이 1:2- 6 및 2-4:1인 경우， HFD 대조군에 비해 39.70-59.94%로 복벽 지방세포의 직경이 증 가하는 것을 억제하는 효과를 나타냈고， 이중， 복합조성물의 중량비가 1:4 및 4:1 의 투여군에서는 각각 47.23% 및 59.94%로 복벽 지방세포의 직경 감소 효과가 우수 한 것을 나타냈고， 이는 당귀 단독투여시 (32.56%) 및 산마늘 단독투여시 (37.22%)의 복벽 지방세포 직경 감소 효과보다 매우 우수한 것으로 나타냈다.
특히, 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합비율이 4:1인 투여군의 경우， HFD 대조군에 비해 복벽지방 세포 직경 감소 효과가 59.94%로 나타나 항 비만 효과 가 가장 우수한 것으로 나타났다. 따라서, 본 발명의 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 복합조성물은 고지방 사 료 (HFD) 대조군뿐만 아니라， 당귀 추출물 또는 산마늘 추출물을 단독으로 투여한 군에 비해 증체량을 감소시키고， 난소 주위의 지방 중량을 감소시키며， 난소 주위 지방세포의 직경 및 복벽 지방 세포의 직경이 증가하는 것을 억제하는 효과가 우수 하므로 당뇨병 또는 당뇨 합병증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물, 또는 당뇨병 또는 당뇨 합병증의 예방 또는 개선용 건강기능식품으로 유용하게 이용될 수 있다.
<실시예 2> 당귀 추출물 및 산마늘 추출물로 구성된 복합조성물이 혈당에 미 치는 영향
혈당의 증가는 당뇨병의 가장 기본적인 현상으로 (Sathishsekar D et al . Biol Pharm Bull., 2005, 28:978-83)， 고지방 사료 (HFD) 공급 마우스 역시 전형적 인 제 2형 당뇨병 모델로 이용되고 있다 (Surwit RS et al . , Diabetes., 1988， 37： 1163-7； Yun SN et al. , Arch Pharm Res., 2004, 27:790-6). 따라서 본 발명에서도 고지방 사료 (HFD) 공급에 의해 현저한 혈당 상승이 초래되었다. 본 발명의 당귀 추출물 및 산마늘 추출물로 구성된 복합조성물이 혈당에 미 치는 영향에 대해 알아보기 위하여 상기 실시예 1에서 제조된 복합조성물이 투여된 마우스의 혈당변화를 측정하여 실험결과를 하기 표 8에 나타내었다.
【표 8】
사료섭취량 HFD 대조군 혈당량 HFD 대조군
(g/mouse/dav) 대비 % (me/dl) 대비 % 정상군 6.54±1.10 103.60±11.84
HFD 4.67±0.92 -28.59 249.80 ±29.17 141.12
(정상군 (정상군 대비) 대비) 대조약물 심바스타틴 4.56±0.93 -2.36 231.00±31.43 -7.53
심리마리 4.92±0.75 5.35 199.00±13.29 -20.34 투여군
메트포민 4.38±0.61 -6.21 136.60±11.87 -45.32 단독 당귀 4.62±0.61 -1.07 180.20±14.22 -27.86 투여군 산마늘 4.88±0.58 4.50 194.40±8.02 -22.18
1:1 4.68±0.67 0.21 175.80±34.74 -29.62
1:2
당귀:산마늘 5.23±0.83 11.99 186.00±24.83 -25.54 보 1:4 5.27±0.82 12.85 147.40± 13.26 -40.99 ᄇ 1:6 4.78±0.78 2.36 157.60±25.83 -36.91 조성물 1:8 4.96±0.70 6.21 196.80± 18.25 -21.22 투여군 1:10 4.58±0.56 -1.93 186.80±18.27 -25.22
2:1 4.77土 0.64 2.14 146.40± 15.73 -41；39
(mg/mg)
4:1 4.57±0.90 -2.14 128.40±21.62 -48.60
6:1 5.06±1.05 8.35 169.20±30.87 -32.27
8:1 5.20±0.76 11.35 180.00±30.85 -27.94
10:1 4.79±0.86 2.57 178.60±14.10 -28.50 표 8에 나타낸 바와 같이， 고지방 사료 (HFD) 대조군으로 사용된 고지방사료 를 공급한 마우스는 정상대조군으로 사용된 일반사료를 공급한 마우스에 비해 혈당 이 141.12% 증가하는 것을 확인하였고， 대조약물로 사용된 심바스타틴을 투여한 군 을 제외한 실리마린， 메트포르민을 투여한 군， 당귀 추출물 또는 산마늘 추출물을 단독으로 투여한 군 및 11종의 당귀 추출물 및 산마늘의 복합조성물을 투여한 군은 HFD 대조군에 비해 7.53-48.60%로 혈당이 감소하는 것을 확인하였다.
상기 투여군 중에서 당귀 추출물 및 산마늘의 복합조성물의 중량비율이 1:4- 6 및 2-4:1인 경우， HFD 대조군에 비해 32.27— 48.60%로 혈당이 감소시키는 효과가 있는 것으로 확인하였고, 이중， 복합조성물의 중량비가 1:4 및 4:1인 투여군에서는 각각 40.99% 및 48.60%로 혈당강하 효과가 우수한 것으로 나타났고, 이는 당귀 단 독투여시 (27.86%) 및 산마늘 단독투여시 (22.18%)의 감소 효과보다 월등히 우수한 것으로 나타내었디-.
특히， 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합비율이 4:1인 투여군의 경우， 혈 당강하 효과가 48.60%로 가장 뛰어난 것으로 나타났다. 따라서, 따라서, 본 발명의 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 복합조성물은 고지방 사료 (HFO) 대조군뿐만 아니라, 당귀 추출물 또는 산마늘 추출물을 단독으로 투여한 군에 비해 혈당강하 효과가 우수하므로 당뇨병 또는 당뇨 합병증의 예방 또 는 치료용 약학적 조성물， 또는 당뇨병 또는 당뇨 합병증의 예방 또는 개선용 건강 기능식품으로 유용하게 이용될 수 있다.
<실시예 3> 당귀 추출물 및 산마늘 추출물로 구성된 복합조성물이 고지혈증 에 미치는 영향
고혈당 상태가 지속됨에 따라 합병증의 형태로 고지혈증이 초래되며 (Chen et al., 2005) , 일반적으로 고지혈증 시 LDL, 트리글리세라이드 및 총 콜레스테롤 함 량 증가와 함께 HDL 감소가 문제시되고 있다 (Milionis HJ et al . , Am Heart J., 2004， 148:635-40; Forrester JS et al . , Circulation., 2005， 111:1847-54; Kamada T et al. , Dig Liver Dis., 2005, 37:39-43). 따라서 후보물질에 대한 항 고지혈증 효과는 혈중 LDL, 트리글리세라이드 및 총 콜레스테를 함량 감소와 함께 HDL함량의 증가에 초점이 맞추어져 있다 (Cheng JWᅳ Clin Ther . , 2004, 26:1368-87; Pirat B et al . , Anadolu Kardiyol Derg. , 2004, 4:318-22; Tan BK et al., Life Sci., 2005， 76:2827-39).
(1) 혈중 콜레스테롤 및 트리글리세라이드 함량의 변화
본 발명의 당귀 추출물 및 산마늘 추출물로 구성된 복합조성물이 고지혈증에 미치는 영향에 대해 알아보기 위하여 상기 실시예 1에서 제조된 복합조성물이 투여 된 마우스의 지질 대사의 이상 여부를 알아보기 위한 혈중 총 콜레스테를 함량 및 혈중 중성지방 (트리글리세라이드) 함량의 변화를 표 9에 나타내었다.
【표 9】 혐중 농도 One/dl)
구분 총 콜레스테롤 HFD 대조군 트리글리세라이 HFD 대조군 대비 % 대비 ¾ 대조군 정상군 99.00±9.41 5으80±17.17
HFD 219.40±36.59 121.62 195.20±21.31 284.25
(정상군 (정상군 대비) 대비) 대조약물 심바스타 132.00±11.02 -39.84 104.40±22.20 -46.52 투여군
심리마린 149.20±13.33 -32.00 132.60± 13.26 -32.07 메트포민 151.00±18.03 -31.18 126.60± 13.99 -35.14 단독 당귀 161.80±19.12 -26.25 145.20±11.69 -25.61 투여군 산마늘 153.40±12.95 -29.90 130.60± 10.21 -33.09
1:1 144.60±8.47 -34.09 125.00±17.39 -35.96 당귀:산마늘 1:2 141.40±22.01 -35.55 123.00±6.96 -36.99
1:4 139.80±12.93 -36.28 107.80±8.76 -44.77 복합 1:6 144.80±13.88 -34.00 118.20±13.10 -39.40 조성물 1:8 153.40±16.62 -30.08 131.60±18.09 -32.58 투여군 1:10 153.60±20.77 -29.99 130.40±25.50 -33.20
2:1 141.10 ±21.90 -35.68 120.40±13.79 -38.32
(mg/mg)
4:1 118.40±15.18 -46.03 104.80±15.35 -46.31
6:1 145.40±20.32 -33.73 120.60± 13.90 -28.22
8:1 160.60±17.94 -26.80 144.40±20.32 -26.02
10:1 152.80 ±18.21 -30.36 145.60±11.93 -25.41 표 9에 나타낸 바와 같이， 고지방 사료 (HFD) 대조군으로 사용된 고지방사료 를 공급한 마우스는 정상대조군으로 사용된 일반사료를 공급한 마우스에 비해 총콜 레스테를 함량은 HFD 대조군이 정상대조군에 비해 121.62%로 증가하는 것이 확인되 었고， 대조약물을 포함한 모든 투여군에서는 HFD 대조군에 비해 혈중 총 콜레스테 롤 함량이 26.25— 46.03%로 감소하는 것을 확인하였다.
상기 투여군 중에서 당귀 추출물 및 산마늘의 복합조성물의 중량이 1:1-6 및 2-4:1인 투여군은 34.00-46.03%로 HFD 대조군에 비해 더 우수하게 혈중 총 콜레스 테롤 함량이 감소하는 것을 확인하였다. 이중， 복합조성물의 중량비가 1:4 및 4:1 인 투여군에서는 각각 36.28% 및 46.30%로 혈중 총 콜레스테롤 함량 감소 효과가 나타났고， 이는 당귀 단독투여시 (26.25%) 및 산마늘 단독투여시 (29.90%)의 혈중 총 콜레스테를 함량 감소 효과보다 우수한 것으로 나타났다.
특히， 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 혼합비율이 4:1인 투여군인 경우， 혈 중 총 콜레스테를 함량 감소 효과가 46.03%로 나타나 항 고지혈증 효과가 가장 우 수한 것으로 나타났다. 또한， 고지방 사료 (HFD) 대조군의 경우， 혈중 트리클리세라이드가 정상 대조 군에 비해 284.25%로 증가하였고, 대조약물로 사용된 심바스타틴， 실리마린, 메트 포르민을 투여한 군 당귀 추출물 또는 산마늘 추출물을 단독으로 투여한 군 및 11 종의 당귀 추출물 및 산마늘의 복합조성물을 투여한 군을 포함한 모든 투여군에서 25.41-46.52%로 HFD 대조군 보다 혈중 트리글리세라이드 함량이 감소하였다.
상기 투여군 중에서 당귀 추출물 및 산마늘의 복합조성물의 중량비율이 1:4- 6 및 2-6:1인 경우， HFD 대조군에 비해 38.22-46.31%로 혈중 트리글리세라이드 함 량이 감소시키는 효과가 있는 것으로 확인되었다. 이중， 복합조성물의 중량비가 1:4 및 4:1인 투여군에서는 각각 44.77% 및 46.31%로 혈중 트리글리세라이드 함량 감소 효과가 우수한 것으로 나타났다.
특히， 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합비율이 4:1인 투여군의 경우， 혈 중 트리글리세라이드 함량 감소 효과가 46.31%로 항 고지혈증 효과가 가장 우수한 것으로 나타났다.
(2) 혈중 LDL 및 HDL의 변화
본 발명의 당귀 추출물 및 산마늘 추출물로 구성된 복합조성물이 고지혈증에 미치는 영향에 대해 알아보기 위하여 상기 실시예 1에서 제조된 복합조성물이 투여 된 마우스의 지질 대사의 이상 여부를 알아보기 위한 혈중 저밀도지단백 (LDL) 및 고밀도지단백 (HDL)을 측정하여 표 10에 나타내었다.
【표 10] ¾중 농도 (mg/dl)
구분 LDL HFD 대조군 HDL 대조군 대비 % 대비 ¾ 대조군 정상군 12.40土 2.19 97.80±8.41
HFD 26.40±2.19 112.90 45.00+11.90 -53.99
(정상군 (정상군 대비) 대비) 심바스타린 16.00土 1.58 -39.39 58.40±14.40 29.78 대조약물 실리마린 20.20±3.70 -23.48 60.20±5.63 33.78 투여군 메트포민 21.20±3.27 -19.70 60.00±3.54 33.33 단독 당귀 20.80±2.05 -21.21 59.80±3.96 32.89 투여군 산마늘 20.40±1.14 -22.73 60.40±5.86 34.22
1:1 19.00±1.87 -28.03 64.20±4.21 42.67 당귀:산마늘 1:2 20.40±1.67 -22.73 59.20±2.49 31.56
1:4 17.60±1.67 -33.33 65.00±8.80 44.44 복합 1:6 17.00±1.58 -35.61 63.12±4.12 40.26 조성물
1:8 20.40±1.67 -22.73 59.80±3.27 32.89 투여군 1:10 20.20±3.11 -23.48 60.80±2.68 35.11
(mg/mg) 2:1 18.00±2.24 -31.82 63.60±4.34 41.33
4:1 15.80±1.92 -40.15 67.00±4.85 48.89
6:1 19.90±1.41 -28.03 62.20±8.04 38.22
8:1 19.80±1.92 -25.00 60.00±6.44 33.33
10:1 20.40±1.44 -22.73 60.00±1.87 33.33 표 10에 나타낸 바와 같이, 혈중 저밀도지단백 (LDL) 함량은 고지방 사료
(HFD) 대조군이 정상대조군에 비해 112.90%로 증가하는 것이 확인되었고， 대조약물 을 투여한 군， 당귀 추출물 또는 산마늘 추출물을 단독으로 투여한 군 및 당귀 및 산마늘 복합조성물을 투여한 군에서 HFD 대조군 보다 혈중 LDL 함량이 19.70- 40.15%로 감소하는 것을 확인하였다.
상기 투여군 중에서 당귀 추출물 및 산마늘의 복합조성물의 중량비율이 1:1- 6 및 2-6:1인 경우, HFD 대조군에 비해 28.03-40.15%로 혈중 LDL 함량이 증가하는
것을 억제하는 효과가 있는 것으로 확인되었고， 이중， 복합조성물의 중량비가 1:4 및 4:1인 투여군에서는 각각 33.33% 및 40.15%로 혈중 저밀도지단백 함량 감소 효 과가 나타났고， 이는 당귀 단독투여시 (21.21%) 및 산마늘 단독투여시 (22.73%)의 혈중 저밀도지단백 함량 감소 효과보다 우수한 것으로 나타났다.
특히 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합비율이 4:1인 투여군의 경우, 혈 중 LDL 함량 감소 효과가 40.15%로 나타나 항 고지혈증 효과가 가장 우수한 것을 확인하였다. 또한， 혈중 고밀도지단백 (HDL) 함량은 고지방 사료 (HFD) 대조군이 정상 대조 군에 비해 53.99% 감소하는 것이 확인되었고， 혈중 HDL 함량이 HFD 대조군에 비해 유의성 없이 현저하게 증가한 심바스타틴을 투여한 군을 제외한 나머지 투여군에서 는 HFD 대조군에 비해 29.78-48.89%로 혈증 HDL 함량이 증가하는 것을 확인하였다. 상기 투여군 중에서 당귀 추출물 및 산마늘의 복합조성물의 중량이 1:4-6 및 2-4:1인 투여군은 35.11-48.89%로 당귀 추출물 또는 산마늘 추출물 단독 투여군에 비해 우수하게 HDL 함량을 증가시키는 것을 확인하였고 이중， 복합조성물의 중량 비가 1:4 및 4:1인 투여군에서는 각각 44.44% 및 48.95%로 혈증 고밀도지단백 함량 증가 효과가 우수한 것으로 나타났다.
특히， 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합비율이 4:1인 투여군의 경우， 혈 중 HDL 함량 증가 효과가 48.89%로 나타나 항 고지혈증 효과가 가장 뛰어난 것으로 확인되었다. 따라서， 본 발명의 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 복합조성물은 고지방 사 료 (HFD) 대조군뿐만 아니라, 당귀 추출물 또는 산마늘 추출물을 단독으로 투여한 군에 비해 총 콜레스테를 함량， 혈중 트리글리세라이드 함량 및 혈중 저밀도지단백 함량을 감소시키고, 혈중 고밀도지단백을 증가시키는 효과가 우수하므로 당뇨병 또 는 당뇨 합병증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물, 또는 당뇨병 또는 당뇨 합병증 의 예방 또는 개선용 건강기능식품으로 유용하게 이용될 수 있다.
<실시예 4> 당귀 추출물 및 산마늘 추출물로 구성된 복합조성물이 간손상에 미치는 영향
고지방사료 공급 시 고지혈증과 함께 간 손상이 수반되며, 지방변에 의한 간 세포의 비대에 의해 간 중량의 증가와 이에 따른 혈중 AST 및 ALT 함량의 증가가 유발된다 (Mukai M et al . , Dig Dis Sci . 2002 ;47： 549-55； Neves RH et al . , Mem Inst Oswaldo Cruz. 2006； 101：253-60) . 일반적으로 혈청 옥살레이틱 트랜스아미나 제 (SG0T)로 알려진 AST와 혈청 글루타믹 피루빅 트랜스아미나제 (SGPT)로 알려진 ALT는 간 손상을 측정하는 가장 일반적인 혈액화학 수치이다 (Sodikoff CH, A guide to laboratory diagnosis . 2nd ed. , Mosby: St. Louise, 1995:1一 36).
(1) 간 중량의 변화
당귀 추출물 및 산마늘 추출물로 구성된 Π종의 천연물 복합조성이 간손상에 미치는 영향에 대해 알아보기 위하여 상기 실시예 1에서 제조된 복합조성물이 투여 된 마우스의 간 중량의 변화는 하기 표 11에 나타내었다.
【표 11】
가중량
구분 절대중량 상대중량 HFD 대조군
(e) (체중대비 %) 대비 %
대조군 정상군 1.368±0.191 4.145±0.138
HFD 1.698±0.180 3.003土 0.325 -27.55
(정상군 대비)
대조약물 심바스타 1.609± 0.232 3.319±0.290 10.52
투여군 뛰
심리마리 1.583±0.324 3.242±0.461 7.96
메트포민 1.528±0.165 3.600±0.433 19.88
단독 당귀 1.567± 0.146 3.356±0.412 11.75
투여군 산마늘 1.435±0.196 3.058±0.216 1.83
1:1 1.571±0.240 3.235±0.443 7.73 당귀:산마늘 1:2 1.648±0.148 3.266±0.303 8.76
1:4 1.651±0.220 3.828±0.503 27.47 복합 1:6 1.685±0.340 3.675±0.460 22.38
조성물 1:8 1.457±0.267 2.944±0.606 -1.96
투여군 1:10 1.467±0.062 3.106±0.375 3.43
2:1 1.757±0.352 3.465±0.844 15.38
(mg/mg)
4:1 1.560±0.211 3.552±0.303 18.28
6:1 1.771±으116 3.049±0.203 1.53
8:1 1.733±0.083 3.189±0.098 6.19
10:1 1.671±0.156 3.313±0.190 10.32 표 11에 나타낸 바와 같이, 고지방사료 공급에 의해 현저한 절대 간 중량의 증가가 인정되었으나， 체중증가가 더 현저한 이유로 간 상대중량은 유의성 있는 감 소 (27.55%)를 나타내었다. 대조약물로 사용된 심바스타틴, 메트포르민을 투여한 군
， 당귀를 단독으로 투여한 군 및 당귀 및 산마늘의 중량비가 1:4-6 및 2-4:1인 복 합조성물을 투여한 군이 HFD 대조군에 비해 10.52-27.47%로 간의 체중대비 상대 중 량을 증가시키는 효과를 나타냈고, 이중, 복합조성물의 중량비가 1:4 및 4:1인 투 여군에서는 각각 27.47% 및 18.28%로 간 상대중량을 증가시키는 효과가 우수한 것 으로 나타났다.
특히， 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합비가 1:4인 투여군의 경우, 간 상대중량 증가 효과가 27.47%로 간 보호 효과가 가장 뛰어난 것으로 확인되었다.
(2) 혈중 AST 및 ALT의 변화
당귀 추출물 및 산마늘 추출물로 구성된 복합조성이 간손상에 미치는 영향에 대해 알아보기 위하여 아스파탐 아미노전이효소 (AST) 및 알라닌 아미노전이효소 (ALT)의 혈중 농도를 측정하여 실험결과를 하기 표 12에 나타내었다.
【표 12】
Figure imgf000039_0001
표 12에 나타낸 바와 같이， 간세포의 손상을 알아보는 인자인 아스파탐 노전이효소 (AST) 및 알라닌 아미노전이효소 (ALT)의 혈중 농도 변화는 고지방 사료 (HFD) 대조군이 정상대조군에 비해 각각 145.58% 및 49그 64%로 높게 나타났고, HFD
대조군과 유사하게 나타난 대조약물인 심바스타틴을 투여한 군을 제외한 모든 투여 군에서 HFD 대조군에 비해 AST 농도가 14.87-50.53%로 감소하는 것을 확인하였 고, 혈중 ALT농도는 14.62-52.70%로 감소하는 것을 확인하였다.
상기 투여군 중에서 당귀 추출물 및 산마늘의 복합조성물의 중량이 1:4-6 및 2一 4:1인 투여군은 혈중 AST 농도가 43.05-50.53%이고， 혈중 ALT 농도는 42.82- 52.70%로 당귀 추출물 또는 산마늘 추출물 단독 투여군에 비해 혈중 AST 및 ALT 함 량을 우수하게 감소시키는 것을 확인하였고, 이중， 복합조성물의 중량비가 1:4 및 4:1인 투여군에서는 각각 43.93% 및 50.53%로 AST 농도 감소 효과가 나타났고， ALT 농도 감소 효과는 43.38% 및 52.70%로 나타났다.
특히， 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합비율이 4:1인 투여군의 경우, 혈 중 AST의 농도 감소 효과는 50.53% 및 ALT의 농도 감소 효과는 52.70%로 나타나 간 보호 효과가 가장 우수한 것으로 나타났다. 따라서， 본 발명의 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 복합조성물은 간의 체중 대비 중량， 간세포 손상 여부를 나타내는 지표인 ALT 및 AST의 혈중농도를 감소시 키는 효과가 우수하므로 당뇨병 또는 당뇨 합병증의 예방 또는 치료용 약학적 조성 물, 또는 당뇨병 또는 당뇨 합병증의 예방 또는 개선용 건강기능식품으로 유용하게 이용될 수 있다.
<실시예 5> 당귀 추출물 및 산마늘 추출물로 구성된 복합조성물이 신장손상 에 미치는 영향
당뇨병 상태가 만성화됨에 따라사구체 위축과 섬유화， 염증세포 침윤 및 세 뇨관 괴사와 이에 따른 혈중 요소질소 및 크레아티닌 함량의 증가를 주요 증상으로 하는 신장병변이 초래되며， 이를 당뇨병성 신병증이라 한다 (Imaeda A et al . , Food Chem Toxicol . 200240:1415-22； Trachtman H et al · , Pediatr Nephrol . 200217:20- 9). 이중 혈중 요소질소 (blood urea nitrogen, BUN)와 크레아티닌 (크레아티닌) 함 량은 신장의 상태를 나타내는 가장 대표적인 혈액화학 수치이다 (Arch Med Res. , 2004 Novᅳ Dec: 35(6)： 484-94) .
(1) 혈중 BUN 및 크레아티닌의 변화
당귀 추출물 및 산마늘 추출물로 구성된 복합조성이 신장손상에 미치는 영향 에 대해 알아보기 위하여 상기 실시예 1에서 제조된 화합물이 투여된 마우스의 혈 중 요소질소 (BUN) 및 혈중 크레아티닌의 농도 변화를 측정하여 실험결과를 하기 표 13에 나타내었다.
【표 13]
Figure imgf000041_0001
표 13에 나타낸 바와 같이 , 고지방 사료 (HFD) 대조군으로 사용된 고지방사료 를 공급한 마우스는 정상대조군으로 사용된 일반사료를 공급한 마우스에 비해 94.26%로 혈중 요소질소 (BUN) 함량이 증가하는 것을 나타냈고， HFD 대조군과 유사 한 혈중 BUN 함량을 나타낸 대조약물인 심바스타틴을 투여한 군을 제외한 나머지
투여군에서 20.94-46.55%로 혈중 BUN 함량이 감소하였디-.
상기 투여군 중에서 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 혼합 중량비가 1:4-6 및 2-4:1인 복합조성물 투여군은 35.96-46.55%로 HFD 대조군 보다 혈중 BUN 함량을 감소시켜 당귀 단독투여 26.11% 및 산마늘 단독투여 30.33%보다 효과가 우수함을 확인하였고， 이중, 복합조성물의 중량비가 1:4 및 4:1인 투여군에서는 각각 38.67% 및 46.55%로 혈중 BUN 함량 감소 효과가 나타났다.
특히， 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합 중량비가 4:1인 복합조성물 투 여군의 경우, HFD 대조군 보다 혈중 BUN 함량 감소 효과가 46.55%로 나타나 신장 보호 효과가 가장 우수한 것으로 나타났다. 또한， 혈중 크레아티닌 함량은 HFD 대조군이 정상 대조군에 비해 154.29% 증 가하는 것이 확인되었고， 혈중 클레아티닌 함량이 HFD 대조군과 유사하게 함량의 변화를 나타낸 심바스타틴을 투여한 군을 제외한 나머지 투여군에서는 HFD 대조군 에 비해 15.73-48.31%로 혈중 크레아티닌 함량이 감소하는 것을 확인하였다.
상기 투여군 중에서 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 복합조성물의 중량이 1:4—6 및 2-4:1인 투여군은 35.96-48.31%로 HFD 대조군보다 혈중 크레아티닌 함량 을 감소시키는 것을 확인하였고, 이중， 복합조성물의 중량비가 1:4 및 4:1인 투여 군에서는 각각 35.96% 및 48.31%로 혈중 크레아티닌 함량 감소 효과를 나타냈다. 특히， 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합비율이 4:1인 투여군의 경우， HFD 대조군 보다 혈중 크레아티닌 함량 감소 효과가 48.31%로 나타나 신장보호 효 과가 가장 우수한 것으로 확인되었다. 따라서， 본 발명의 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 복합조성물은 혈중 요소 질소 (BUN) 함량 및 혈중 크레아티닌 함량을 감소시키는 효과가 우수하므로 당뇨병 또는 당뇨 합병증 개선용 건강기능식품으로 유용하게 이용될 수 있다.
(2) 변성 세뇨관 수의 변화
당귀 추출물 및 산마늘 추출물로 구성된 복합조성물이 신장손상에 미치는 영 향에 대해 알아보기 위하여 상기 실시예 1에서 제조된 화합물이 투여된 마우스의 변성 세뇨관 수의 변화를 측정하여 실험결과를 하기 표 14에 나타내었다.
【표 14]
Figure imgf000043_0001
표 14에 나타낸 바와 같이 , 고지방 사료 (HFD) 대조군으로 사용된 고지방사료 를 공급한 마우스는 정상대조군으로 사용된 일반사료를 공급한 마우스에 비해 변성 세뇨관 수가 820.51%로 증가하는 것을 나타냈고, HFD 대조군과 유사한 변성 세뇨관 수의 변화를 나타낸 대조약물인 심바스타틴을 투여한 군을 제외한 나머지 투여군에 서 변성 세뇨관의 수가 18.66-59.05%로 감소하였다.
상기 투여군 중에서 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합 중량비가 1:1-6,
2-4:1인 복합조성물 투여군은 33.70-59.05%로 HFD 대조군 보다 변세뇨관의 수를 감 소시키는 효과가 우수함을 확인하였고， 이중, 복합조성물의 중량비가 1:4 및 4:1인 투여군에서는 42.34% 및 59.05%로 변성 세뇨관의 수의 감소 효과가 우수한 것으로 나타났고， 이는 당귀 단독투여시 (19.5 ) 및 산마늘 단독투여 (27.86%)보다 변성 세 뇨관의 수의 감소 효과가 뛰어난 것으로 나타났다.
특히， 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합 중량비가 4:1인 복합조성물 투 여군의 경우， HFD 대조군 보다 변성 세뇨관의 수의 감소 효과가 59.05¾>로 나타나 신장보호 효과가 가장 우수한 것으로 나타났다. 따라서， 본 발명의 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 복합조성물은 혈중 요소 질소 (BUN) 함량 및 혈중 크레아티닌 농도를 감소시키며， 변성 세뇨관의 수를 감소 시키는 효과가 우수하므로 당뇨병 또는 당뇨 합병증의 예방 또는 치료용 약학적 조 성물， 또는 당뇨병 또는 당뇨 합병증의 예방 또는 개선용 건강기능식품으로 유용하 게 이용될 수 있다.
<실시예 6> 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합 중량비가 4:1로 구성된 복 합조성물이 비만에 미치는 영향
상기 실시예 1 내지 5에서 비만， 혈당， 고지혈， 간손상 및 신장손상에 대한 우수한 효과가 있는 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합 중량비가 4:1인 복합조 성물이 비만에 미치는 영향을 알아보기 위하여 하기 실험을 수행하였다. 시험물질의 투여
상기 실시예 1과 동일한 방법으로 제조된 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합 중량비가 4:1인 복합조성물은 증류수에 직접 녹여 사용하였고, 고지방 사료를 공급하고 일주일 후부터 각 군당 8마리씩 총 15개 군으로 나누어 84일간 하루에 한 번씩 10 /kg로 경구투여 하였다. 3종류의 대조약물인 심바스타틴， 실리마린， 메 트포민은 각각 10， 100 및 250 mg/kg으로 투여되었고， 3종류의 당귀， 산마늘 및 은 행엽 추출물은 100 mg/kg으로 투여되었으며， 3용량의 당귀 추출물 및 산마늘 추출 물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물은 200， 100 및 50 mg/kg으로 투여되었다. 하 기 표 15에 물질의 조성 및 투여군을 정리하여 나타내었다.
【표 15】
Figure imgf000045_0001
당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합 중량비가 4:1로 구성된 복합조성물 o 비만에 미치는 영향
(1) 체중에 미치는 영향
본 발명의 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물 이 비만에 미치는 영향에 대해 알아보기 위하여 상기 복합조성물이 투여된 마우스 의 체중변화를 표 16에 나타내었다.
【표 16]
Figure imgf000046_0001
표 16에서 나타낸 바와 같이， 투여기간인 84일간의 증체량은 HFD 대조군의 경우， 정상 대조군에 비해 190.54%의 변화를 나타내었으며， 대조약물로 사용된 심 바스타틴, 실리마린， 메트포민 및 당귀， 산마늘 및 은행엽 추출물 단독 투여군에서 HFD 대조군에 비해 33-6 의 체중감소 효과를 나타내었다.
당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물 200， 100 및 50 mg/kg 투여군에서 HFD 대조군에 비해 41—55%의 체중감소 효과를 나타내었다.
(2) 난소주위의 지방중량의 변화
본 발명의 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물 이 비만에 미치는 영향에 대해 알아보기 위하여 상기 복합조성물이 투여된 마우스 의 난소주위의 지방중량의 변화를 측정하여 실험결과를 하기 표 17에 나타내었다.
【표 17】
Figure imgf000047_0001
표 17에 나타낸 바와 같이, 고지방사료 (HFD) 대조군으로 사용된 고지방사료 를 공급한 마우스는 정상대조군으로 사용된 일반사료를 공급한 마우스에 비해 난소 주위 지방의 중량이 정상대조군 보다 1006.71% 증가하는 것을 확인하였고， 대조약 물로 사용된 심바스타틴， 실리마린， 메트포민 및 당귀, 산마늘 및 은행엽 추출물 단독 투여군에서 HFD 대조군에 비해 난소주위의 지방 중량이 15-76% 감소하는 것을 확인하였다.
당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물 200， 100 및 50 mg/kg 투여군에서 HFD 대조군에 비해 난소주위의 지방 중량이 50-76%로 감소 효과를 나타내었다.
(3) 난소주위의 지방세포 직경의 변화
본 발명의 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물 이 비만에 미치는 영향에 대해 알아보기 위하여 상기 복합조성물이 투여된 마우스 의 난소주위의 지방세포 직경의 변화를 측정하여 실험결과를 하기 표 18에 나타내 었다.
【표 18] 직^ urn)
구분 난소주위 HFD 대조군 대비
지방세포 (%)
정상대조군 정상군 59.41±5.84
HFD 대조군 HFD 212.40±31.18 257.52
(정상군 대비)
대조약물투여군 심바스타린 170.53±25.38 -19.71
심리마린 132.94±13.55 -37.41
메트포민 112.96±18.71 -46.82
단독투여군 당귀 165.66±9.80 -22.01
산마늠 142.31±28.42 -33.00
은해 ¾ 150.98土 14.60 -28.92
당귀:산마늘 200 me/kg 88.50± 14.60 -58.33
(4:1) 복합조성물 100 mg/kg 115.50±18.30 -45.62
투여군 50 mg/kg 139.03±15.59 -34.54
표 18에 나타낸 바와 같이， 고지방 사료 (HFD) 대조군으로 사용된 고지방사료 를 공급한 마우스는 정상대조군으로 사용된 일반사료를 공급한 마우스에 비해 난소 주위 지방세포의 직경이 257.52% 증가하였고, 대조약물로 사용된 심바스타틴， 실리 마린， 메트포민 및 당귀, 산마늘 및 은행엽 추출물 단독 투여군에서 HFD 대조군에 비해 난소 주위 지방세포의 직경이 20-47% 감소하는 것을 확인하였다.
당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물 200， 100 및 50 mg/kg 투여군에서 HFD 대조군에 비해 난소 주위 지방세포의 직경이 35-58%로 현저한 감소 효과를 나타내었다.
(4) 복벽지방세포 직경의 변화
본 발명의 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물 이 비만에 미치는 영향에 대해 알아보기 위하여 상기 복합조성물이 투여된 마우스 의 복벽 지방세포 직경의 변화를 측정하여 실험결과를 하기 표 19에 나타내었다.
【표 19] ZJ-ᄇ 직경 (圆)
보 HFD 대조군 대비
지방세포 ( )
정상대조군 정상군 68.96±14·55
HFD 대조군 HFD 202 ·35± 13.68 193.41
(정상군 대비)
대조약물투여군 심바스타틴 161.39±32·38 -20.24
심리마리 136·73±30.21 -32.43
메트포 ?1 122.51±9·52 -39.46
단독투여군 당귀 143.91±23.96 -28.88
산마늘 139.14± 17.49 -31.24
은행 ¾ 153.67±7.14 -24.05
당귀:산마늘 200 me/ke 97.51±20.60 -51.81
(4:1) 복합조성물 100 mg/kg 116.09±21·25 -42.62
투여군 50 mg/kg 133.29±21·82 -34.13
표 19에 나타낸 바와 같이, 고지방 사료 (HFD) 대조군으로 사용된 고지방사료 를 공급한 마우스는 정상대조군으로 사용된 일반사료를 공급한 마우스에 비해 복벽 지방세포의 직경이 193.41% 증가하였고 대조약물로 사용된 심바스타틴， 실리마린， 메트포민 및 당귀， 산마늘 및 은행엽 추출물 단독 투여군에서 HFD 대조군에 비해 복벽 지방세포의 직경이 20-39% 감소하는 것을 확인하였다.
당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물 200， 100 및 50 mg/kg 투여군에서 HFD 대조군에 비해 복벽 지방세포의 직경이 34— 52%로 현저 한 감소 효과를 나타내었다. 따라서， 본 실험의 결과， 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1 인 복합조성물은 투여용량의존적으로 HFD 공급 마우스의 체중증가, 지방축적 또는 지방세포 비대를 현저히 억제하여， 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물의 항비만 효과를 확인하였다.
<실시예 7> 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합 중량비가 4:1로 구성된 복 합조성물이 혈당에 미치는 영향
본 발명의 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물 이 혈당에 미치는 영향에 대해 알아보기 위하여 상기 실시예 6에서 제조된 복합조 성물이 투여된 마우스의 혈당변화를 측정하여 실험결과를 하기 표 20에 나타내었 다. 【표 20]
Figure imgf000050_0001
표 20에 나타낸 바와 같이， 고지방 사료 (HFD) 대조군으로 사용된 고지방사료 를 공급한 마우스는 정상대조군으로 사용된 일반사료를 공급한 마우스에 비해 혈당 이 131.67% 증가하는 것을 확인하였고， 대조약물로 사용된 심바스타틴을 제외한 실 리마린， 메트포민 및 당귀， 산마늘 및 은행엽 추출물 단독 투여군에서 HFD 대조군 에 비해 혈당이 21-40% 감소하는 것을 확인하였다.
당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물 200， 100 및 50 mg/kg 투여군에서 HFD 대조군에 비해 혈당이 30-49%로 현저한 감소 효과를 나타내었다.
<실시예 8〉 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합 중량비가 4:1로 구성된 복 합조성물이 고지혈증에 미치는 영향
(1) 혈중 콜레스테를 및 트리글리세라이드 함량의 변화
본 발명의 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물 이 고지혈증에 미치는 영향에 대해 알아보기 위하여 상기 실시예 6에서 제조된 복 합조성물이 투여된 마우스의 지질 대사의 이상 여부를 알아보기 위한 혈중 총 콜레 스테를 함량 및 혈중 중성지방 (트리글리세라이드) 함량의 변화를 하기 표 21에 나 타내었다. 【표 21]
Figure imgf000051_0001
표 21에 나타낸 바와 같이 고지방 사료 (HFD) 대조군으로 사용된 고지방사료 를 공급한 마우스는 정상대조군으로 사용된 일반사료를 공급한 마우스에 비해 총콜 레스테를 함량이 129.05% 증가하는 것을 확인하였고， 대조약물로 사용된 심바스타 틴， 실리마린， 메트포민 및 당귀, 산마늘 및 은행엽 추출물 단독 투여군에서 HFD 대조군에 비해 총콜레스테를 함량이 22-39% 감소하는 것을 확인하였다.
당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물 200， 100 및 50 mg/kg 투여군에서 HFD 대조군에 비해 총콜레스테를 함량이 31-47%로 현저한 감소 효과를 나타내었다. 또한， 고지방 사료 (HFD) 대조군의 경우， 혈중 트리클리세라이드가 정상 대조 군에 비해 297.76%로 증가하였고， 대조약물로 사용된 심바스타틴， 실리마린, 메트 포민 및 당귀， 산마늘 및 은행엽 추출물 단독 투여군에서 HFD 대조군에 비해 혈중 트리클리세라이드가 23-35% 감소하는 것을 확인하였다.
당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물 200, 100 및 50 mg/kg 투여군에서 HFD 대조군에 비해 혈중 트리클리세라이드가 30— 49%로 현 저한 감소 효과를 나타내었다. (2) 혈중 LDL 및 HDL의 변화
본 발명의 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물 이 고지혈증에 미치는 영향에 대해 알아보기 위하여 상기 실시예 6에서 제조된 복 합조성물이 투여된 마우스의 지질 대사의 이상 여부를 알아보기 위한 혈중 저밀도 지단백 (LDL) 및 고밀도지단백 (HDL)을 측정하여 표 22에 나타내었다.
【표 22]
Figure imgf000052_0001
표 22에 나타낸 바와 같이， 고지방 사료 (HFD) 대조군으로 사용된 고지방사료 를 공급한 마우스는 정상대조군으로 사용된 일반사료를 공급한 마우스에 비해 혈중 저밀도지단백 (LDL) 함량이 123.66% 증가하는 것을 확인하였고， 대조약물로 사용된 심바스타틴， 실리마린， 메트포민 및 당귀, 산마늘 및 은행엽 추출물 단독 투여군에 서 HFD 대조군에 비해 혈중 저밀도지단백 (LDL) 함량이 22-34% 감소하는 것을 확인 하였다.
당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물 200 100 및 50 mg/kg 투여군에서 HFD 대조군에 비해 혈중 저밀도지단백 (LDL) 함량이 30—47% 로 현저한 감소 효과를 나타내었다. 또한， 혈중 고밀도지단백 (HDL) 함량은 고지방 사료 (HFD) 대조군이 정상 대조 군에 비해 60.13% 감소하는 것이 확인되었고， 대조약물로 사용된 심바스타틴， 실리 마린， 메트포민 및 당귀， 산마늘 및 은행엽 추출물 단독 투여군에서 HFD 대조군에 비해 혈중 고밀도지단백 (HDL) 함량이 2그 33% 증가하는 것을 확인하였다.
당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물 200 100 및 50 mg/kg 투여군에서 HFD 대조군에 비해 혈중 고밀도지단백 (HDL) 함량이 39-52% 로 현저한 증가 효과를 나타내었다.
<실시예 9> 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합 중량비가 4:1로 구성된 복 합조성물이 간손상에 미치는 영향
(1) 간 중량의 변화
본 발명에 따른 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조 성물이 간손상에 미치는 영향에 대해 알아보기 위하여 상기 실시예 6에서 제조된 복합조성물이 투여된 마우스의 간 중량의 변화는 하기 표 23에 나타내었다.
【표 23]
Figure imgf000053_0001
표 23에 나타낸 바와 같이， 고지방사료 공급에 의해 현저한 절대 간 중량의 증가가 인정되었으나， 체중증가가 더 현저한 이유로 간 상대중량은 유의성 있는 감 소 (25.96%)를 나타내었다. 대조약물로 사용된 심바스타틴, 실리마린， 메트포민 및 당귀， 산마늘 및 은행엽 추출물 단독 투여군에서 HFD 대조군에 비해 간의 체중대비 상대 중량이 7-19% 증가하는 것을 확인하였다.
당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물 200， 100 및 50 mg/kg 투여군에서 HFD 대조군에 비해 간의 체중대비 상대 중량이 14-35%로 현저한 증가 효과를 나타내었다.
(2) 혈중 AST 및 ALT의 변화
본 발명에 따른 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조 성물이 간손상에 미치는 영향에 대해 알아보기 위하여 아스파탐 아미노전이효소 (AST) 및 알라닌 아미노전이효소 (ALT)의 혈중 농도를 측정하여 실험결과를 하기 표 24에 나타내었다.
【표 24]
Figure imgf000054_0001
표 24에 나타낸 바와 같이， 간세포의 손상을 알아보는 인자인 아스파탐 노전이효소 (AST) 및 알라닌 아미노전이효소 (ALT)의 혈증 농도 변화는 고지방 사료 (HFD) 대조군이 정상대조군에 비해 각각 143.63% 및 543.39%로 높게 나타났고， HFD 대조군과 유사하게 나타난 대조약물인 심바스타틴을 투여한 군을 제외한 실리 마린, 메트포민 및 당귀， 산마늘 및 은행엽 추출물 단독 투여군에서 HFD 대조군에 비해 AST 농도 및 ALT 농도가 각각 29-43% 및 29-44% 감소하는 것을 확인하였다. 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물 200， 100 및 50 mg/kg 투여군에서 HFD 대조군에 비해 AST 농도 및 ALT 농도가 각각 36-46% 및 37-46%로 감소 효과를 나타내었다.
<실시예 10> 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합 중량비가 4:1로 구성된 복합조성물이 신장손상에 미치는 영향
(1) 혈중 BUN 및 크레아티닌의 변화
본 발명에 따른 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조 성물이 신장손상에 미치는 영향에 대해 알아보기 위하여 상기 실시예 6에서 제조된 화합물이 투여된 마우스의 혈중 요소질소 (BUN) 및 혈중 크레아티닌의 농도 변화를 측정하여 실험결과를 하기 표 25에 나타내었다.
【표 25]
Figure imgf000055_0001
표 25에 나타낸 바와 같이， 고지방 사료 (HFD) 대조군으로 사용된 고지방사료 공급한 마우스는 정상대조군으로 사용된 일반사료를 공급한 마우스에 127.62%로 혈중 요소질소 (BUN) 함량이 증가하는 것을 나타냈고， HFD 대조군과 유사 한 혈중 BUN 함량을 나타낸 대조약물인 심바스타틴을 투여한 군을 제외한 실리마 린， 메트포민 및 당귀， 산마늘 및 은행엽 추출물 단독 투여군에서 HFD 대조군에 비 해 혈중 요소질소 (BUN) 함량이 27-36% 감소하는 것을 확인하였다.
당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물 200， 100 및 50 mg/kg 투여군에서 HFD 대조군에 비해 혈중 요소질소 (BUN) 함량이 33-46%로 현저한 감소 효과를 나타내었다. 또한， 혈중 크레아티닌 함량은 HFD 대조군이 정상 대조군에 비해 157.89% 증 가하는 것이 확인되었고, 혈중 클레아티닌 함량이 HFD 대조군과 유사하게 함량의 변화를 나타낸 심바스타틴을 투여한 군을 제외한 실리마린， 메트포민 및 당귀， 산 마늘 및 은행엽 추출물 단독 투여군에서 HFD 대조군에 비해 혈중 클레아티닌 함량 이 28-36% 감소하는 것을 확인하였다.
당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물 200， 100 및 50 mg/kg 투여군에서 HFD 대조군에 비해 혈중 클레아티닌 함량이 33-46%로 현 저한 감소 효과를 나타내었다.
(2) 변성 세뇨관 수의 변화
본 발명에 따른 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조 성물이 신장손상에 미치는 영향에 대해 알아보기 위하여 상기 실시예 6에서 제조된 화합물이 투여된 마우스의 변성 세뇨관 수의 변화를 측정하여 실험결과를 하기 표 26에 나타내었다.
【표 26]
구분 조직형태 계측범
변성 세뇨관 수 HFD 대조군 대비
C/100 세뇨과) (%)
정상대조군 정상군 7.25±4.10
HFD 대조군 HFD 72.13+11.12 894.83
(정상군 대비)
대조약물투여군 심바스타틴 71.00±13.56 -1.56
심리마리 41.63±14.85 -42.29
메트포 ?1 48.00土 4.69 -33.45
단독투여군 당귀 54.38±8.48 -24.61
산마늠 54.63±8.73 -24.26
은행엽 52.38±12.03 -27.38
당귀:산마늘 200 me/ke 23.00±9.97 -68.11
(4:1) 복합조성 100 mg/kg 38.88±12.21 -46.10 투여군 50 mg/kg 44.75±7.85 -37.95
표 26에 나타낸 바와 같이， 고지방 사료 (HFD) 대조군으로 사용된 고지방사료 를 공급한 마우스는 정상대조군으로 사용된 일반사료를 공급한 마우스에 비해 894.38%로 변성 세뇨관 수가 증가하는 것을 나타냈고， HFD 대조군과 유사한 변성 세뇨관 수를 나타낸 대조약물인 심바스타틴을 투여한 군을 제외한 실리마린， 메트 포민 및 당귀， 산마늘 및 은행엽 추출물 단독 투여군에서 HFD 대조군에 비해 변성 세뇨관 수가 24—42% 감소하는 것을 확인하였다.
당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물 200， 100 및 50 mg/kg 투여군에서 HFD 대조군에 비해 변성 세뇨관 수가 38-68%로 현저한 감 소 효과를 나타내었다. 따라서， 본 발명에 따른 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1 인 복합조성물은 투여용량의존적으로 우수한 항비만, 항고지혈증， 혈당강하， 간보 호 효과 및 신장보호 효과를 나타내므로 당뇨병 또는 당뇨 합병증의 예방， 치료 및 개선용 조성물로 유용하게 이용될 수 있다.
<실시예 11> 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합 중량비가 4:1로 구성된 복합조성물이 스트렙토조토신 (STZ)-유발 당뇨병 동물모델의 당뇨병에 미치는 영향 스트렙토조토신 (STZ)은 선택적으로 췌장섬의 인슐린 생산 B세포를 파괴하여 당뇨병을 유발시키므로 (Hsu and Crump, Philadelphia, 1989, 186-201), 조직학적으 로 췌장섬의 염증반웅에 의한 위축과 수적 감소가 초래되는 것으로 알려져 있으며
(Bonnevie— Nielsen et al ..Diabetes. 1981， 30, 424-9； Higdon et al . , Vet Pathol . 2001， 38， 715-20), 췌장섬의 형태학적 및 인슐린과 글루카곤 생산 세포의 변화를 기초로 당뇨병에 대한 약효를 검증해 왔다 (Kobayashi et al .， Phyt other Res. 2002, 16， 377-82； Kavalali et al . , J Ethnopharmacol . 2003, 84， 241-5； Kim et al . , Biol Pharm Bull. 2006， 29， 477-82； Kim et al . , Biosci Biotechnol Biochem. 2007, 71， 1527-34) . 스트렙토조토신 (STZ)- 유발 당뇨병 동물모델의 제조
본 발명에서는 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합 중량비가 4:1로 구성된 복합조성물의 투여 용량별 당뇨병 및 당뇨 합병증에 대한 약리효과를 스트램토조토 신 (STZ) 유발 당뇨병 랫트를 이용하여 평가하였다. STZ를 50 mM 시트르산 완층용액 (pH 6.0)에 용해시켜, 60 mg/kg/5n^의 용량으로 단회 복강투여 하여 당뇨병을 유발 하였으며， 정상 매체 대조군에서는 STZ 대신 동일용량의 시트르산 완층용액만 동일 한 경로로 투여하였다. 시험물질의 투여
각 군당 8마리씩 총 6개 군으로 나누어 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔 합 중량비가 4:1로 구성된 복합조성물을 200, 100 및 50 mg/kg의 용량으로 각각 멸 균 증류수에 용해시켜 5 /kg의 농도로 STZ 투여 22일 후부터， 28일간 매일 경구 투여하였으며， 실리마린 역시 100 mg/kg의 용량으로 멸균 증류수에 용해시켜 5 mt /kg으로 투여하였다. 한편 정상 매체 대조군 및 STZ 대조군에서는 멸균 증류수를 5 mi/kg으로 각각 투여하였다. 하기 표 27에 물질의 조성 및 투여군을 정리하여 나타 내었다.
【표 27】
Figure imgf000059_0001
STZ 50 tns/ks 당귀 :산마늘 (4:1) 50 ms/증류수 5 mi 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합 중량비가 4:1로 구성된 복합조성물이 스트렙토조토신 (STZ)-유발 당뇨병 동물모델의 당뇨병에 미치는 영향
(1) 혈당에 미치는 영향
본 발명의 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물 이 STZ—유발 당뇨병에 미치는 영향에 대해 알아보기 위하여 상기 복합조성물이 투 여된 랫트의 혈당의 변화를 표 28에 나타내었다.
【표 28]
Figure imgf000059_0002
표 28에서 나타낸 바와 같이， STZ 대조군으로 사용된 랫트는 정상대조군으로 사용된 랫트에 비해 혈당이 5974.14% 높게 증가하였고， 대조약물로 사용된 실리마 린 투여군에서 STZ 대조군에 비해 62.79%의 혈당감소를 나타내었다. 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물 200, 100 및 50 mg/kg 투여군 에서 STZ 대조군에 비해 혈당이 49-80%로 현저한 감소 효과를 보였으며， STZ 대조 군에 비해 현저한 혈당의 감소가 모든 용량의 투여군에서 용량 의존적으로 인정되 어， 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물은 비교적 우 수한 혈당 강하 효과를 나타내는 것으로 확인되었다.
(2) 췌장의 조직병리학적 변화에 미치는 영향
본 발명의 본 발명에 따른 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물이 STZ-유발 당뇨병에 미치는 영향에 대해 알아보기 위하여 상기 복합조성물이 투여된 랫트의 췌장의 조직병리학적 변화를 표 29에 나타내었다.
【표 29】
Figure imgf000060_0001
표 29에서 나타낸 바와 같이， STZ 대조군으로 사용된 랫트는 정상대조군으로 사용된 랫트에 비해 췌장섬의 수가 69% 감소하였고， 대조약물로 사용된 실리마린 투여군에서 STZ 대조군에 비해 112%의 췌장섬의 수 증가를 나타내었다. 당귀 추출 물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물 200, 100 및 50 mg/kg 투여 군에서 STZ 대조군에 비해 췌장섬의 수가 51-170%로 현저한 증가 효과를 나타내었 다.
또한， STZ 대조군으로 사용된 랫트는 정상대조군으로 사용된 랫트에 비해 췌 장섬의 직경 77% 감소하였고， 대조약물로 사용된 실리마린 투여군에서 STZ 대조군 에 비해 152%의 췌장섬의 직경 증가를 나타내었다. 당귀 추출물 및 산마늘 추출물 의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물 200， 100 및 50 mg/kg 투여군에서 STZ 대조군에 비해 췌장섬의 직경이 121-208%로 현저한 증가 효과를 나타내었다.
(2) 췌장섬내 면역반웅 세포 수에 미치는 영향
본 발명에 따른 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조 STZ-유발 당뇨병에 미치는 영향에 대해 알아보기 위하여 상기 복합조성물이 투여된 랫트의 췌장섬내 면역반응 세포 수의 변화를 하기 표 30에 나타내었다.
【표 30]
Figure imgf000061_0001
표 30에서 나타낸 바와 같이， STZ 대조군으로 사용된 랫트는 정상대조군으로 사용된 랫트에 비해 췌장섬내의 인슐린 면역반웅세포의 수가 82% 감소하였고， 대조 약물로 사용된 실리마린 투여군에서 STZ 대조군에 비해 102%의 췌장섬내의 인술린 면역반웅세포의 수 증가를 나타내었다. 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량 비가 4:1인 복합조성물 200， 100 및 50 mg/kg 투여군에서 STZ 대조군에 비해 췌장 섬내의 인술린 면역반응세포의 수가 71-212%로 현저한 증가 효과를 나타내었다. 또한， 표 30에서 나타낸 바와 같이, STZ 대조군으로 사용된 랫트는 정상대조 군으로 사용된 랫트에 비해 췌장섬내의 글루카곤 면역반웅세포의 수가 135% 증가하 였고， 대조약물로 사용된 실리마린 투여군에서 STZ 대조군에 비해 46%의 췌장섬내 의 글루카곤 면역반응세포의 수 감소를 나타내었다. 당귀 추출물 및 산마늘 추출물 의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물 200, 100 및 50 mg/kg 투여군에서 STZ 대조군에 비해 췌장섬내의 글루카곤 면역반웅세포의 수가 27-48%로 현저한 감소 효과를 나타 내었다. 상기에 나타낸 바와 같이, 췌장섬의 수적 감소와 함께 평균 직경의 감소 즉， 위축소견이 STZ 대조군에서 인정되었고, 췌장섬내 인슐린 면역반웅세포의 수적 감 소와 함께 글루카곤 면역반웅세포의 증가가 인정되었으나， 세 용량의 당귀 추출물 및 산마늘 추출물 복합조성물 투여에 의해 이러한 췌장의 형태학적 변화, 인슐린 및 글루카곤 면역반웅세포의 변화가 투여용량의존적으로 현저히 억제되었다.
따라서 당귀 추출물 및 산마늘 추출물 복합조성물은 직접적인 췌장 B세포에 대한 보호 작용으로 항당뇨 활성을 나타낼 것으로 판단되며， 본 발명의 당귀 추출 물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물은 동일한 용량의 당뇨병에 효과가 있다고 알려져 있는 실리마린과 동등 유사한 항당뇨 효과가 있는 것으로 나 타났다.
<실시예 12> 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합 중량비가 4:1로 구성된 복합조성물이 스트렙토조토신 (STZ)-유발 당뇨병 동물모델의 신장에 미치는 영향
(1) 신장 중량의 변화
본 발명에 따른 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 혼합중량비가 4:1인 복합조 성물이 STZ-유발 당뇨병에 의한 신장손상에 미치는 영향에 대해 알아보기 위하여 상기 당뇨병을 유발시킨 랫트의 신장 중량의 변화를 측정하여 실험결과를 하기 표 31에 나타내었다.
【표 31]
Figure imgf000062_0001
표 31에서 나타낸 바와 같이， STZ 대조군으로 사용된 랫트는 정상대조군으로 사용된 랫트에 비해 절대중량 및 상대중량이 각각 96% 및 275% 증가하였고, 대조약 물로 사용된 실리마린 투여군에서 STZ 대조군에 비해 정대중량 및 상대중량이 각 각 17 및 30% 감소를 나타내었다. 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물 200， 100 및 50 mg/kg 투여군에서 STZ 대조군에 비해 절대중량 및 상대중량이 각각 23-26% 및 28-38%로 현저한 감소 효과를 나타내었다.
(2) 혈중 BUN 의 변화
본 발명에 따른 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 혼합중량비가 4:1인 복합조 성물이 STZ-유발 당뇨병에 의한 신장손상에 미치는 영향에 대해 알아보기 위하여 상기 당뇨병을 유발시킨 랫트의 혈중 요소질소 (BUN)의 농도 변화를 측정하여 실험 결과를 하기 표 32에 나타내었다.
【표 32]
Figure imgf000063_0001
표 32에서 나타낸 바와 같이， STZ 대조군으로 사용된 랫트는 정상대조군으로 사용된 랫트에 비해 혈중 요소질소 (BUN) 함량이 8600% 증가하였고， 대조약물로 사 용된 실리마린 투여군에서 STZ 대조군에 비해 67%의 혈중 요소질소 (BUN) 함량 감소 를 나타내었다. 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물 200, 100 및 50 mg/kg 투여군에서 STZ 대조군에 비해 혈중 요소질소 (BUN) 함량이 43-87%로 현저한 감소효과를 나타내었다.
(3) 혈증 클레아티닌 함량 의 변화 본 발명에 따른 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조 성물이 STZ-유발 당뇨병에 의한 신장손상에 미치는 영향에 대해 알아보기 위하여 상기 당뇨병을 유발시킨 랫트의 혈중 클레아티닌 함량 변화를 측정하여 실험결과를 하기 표 33에 나타내었다.
【표 33]
Figure imgf000064_0001
표 33에서 나타낸 바와 같이， STZ 대조군으로 사용된 랫트는 정상대조군으로 사용된 랫트에 비해 혈중 클레아티닌 함량이 1140% 증가하였고, 대조약물로 사용된 실리마린 투여군에서 STZ 대조군에 비해 56%의 혈중 클레아티닌 함량 감소를 나타 내었다. 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물 200, 100 및 50 mg/kg 투여군에서 STZ 대조군에 비해 혈중 클레아티닌 함량이 44-85%로 현저 한 감소효과를 나타내었다.
(4) 신장의 조직병리학적 변화
본 발명에 따른 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조 성물이 STZ-유발 당뇨병에 의한 신장손상에 미치는 영향에 대해 알아보기 위하여 상기 당뇨병을 유발시킨 랫트의 변성 사구체 수 및 변성 세뇨관 수와 같은 신장의 조직병리학적 변화를 측정하여 실험결과를 하기 표 34에 나타내었다.
【표 34] 구분 조직병리학적 변화
변성 사구체 STZ 대조군 변성 세뇨관 STZ 대조군 τ 대비 (%) 丁 대비 (%)
(/100 (/100
사구체) 세뇨관)
정상대조군 정상군 2.50±1.69 6.88±4.42
STZ 대조군 STZ 71.50±7.89 2760.00 63.63±15.17 825.45
(정상군 (정상군 대비) 대비) 대조^물투여군 심리마리 22.88±6.22 -68.01 28.13±9.45 -55.80 당귀:산마늘 (4: 200 ms/ke 11.25±2.38 -84.27 17.88±6.94 -71.91
100
1) 복합조성물 mg/kg 23.50±8.93 -67.13 31.38±7.42 -50.69 투여군 50 mg/kg 36.25± 14.79 -49.30 39.25±6.94 -38.31 표 34에서 나타낸 바와 같이, STZ 대조군으로 사용된 랫트는 정상대조군으로 사용된 랫트에 비해 변성 세뇨관 수가 2760% 증가하였고， 대조약물로 사용된 실리 마린 투여군에서 STZ 대조군에 비해 68%의 변성 세뇨관 수의 감소를 나타내었다. 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물 200， 100 및 50 mg/kg 투여군에서 STZ 대조군에 비해 변성 세뇨관 수가 49-84%로 현저한 감소효과 를 나타내었다.
또한, 표 34에서 나타낸 바와 같이， STZ 대조군으로 사용된 랫트는 정상대조 군으로 사용된 랫트에 비해 변성 사구체 수가 825% 증가하였고, 대조약물로 사용된 실리마린 투여군에서 STZ 대조군에 비해 56%의 변성 사구체 수의 감소를 나타내었 다. 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물 200， 100 및 50 mg/kg 투여군에서 STZ 대조군에 비해 변성 사구체 수가 38-72%로 현저한 감소효 과를 나타내었다. 상기 나타낸 바와 같이， STZ 투여 21일 후 모든 STZ 투여군에서는 현저한 혈 중 BUN 및 크레아티닌 함량의 증가를 나타내어， STZ 투여에 의한 당뇨병성 신장 병 증이 후보물질 투여 시작 전 비교적 잘 유발된 것으로 판단되며， 신장 중량， 혈증 BUN 및 크레아티닌 함량의 증가， 모세혈관 확장성 사구체 위축과 변성 세뇨관의 증 가가 모든 용량의 당귀 추출물 및 산마늘 추출물 복합조성물 투여에 의해 현저히 억제되었으므로， 당귀 추출물 및 산마늘 추출물 복합조성물은 당뇨병성 신병증을 매우 유효하게 억제하는 것으로 판단되며， 동일한 용량의 실리마린과 동등 유사한 당뇨병성 신병증에 대한 효과가 있음을 확인하였다.
<실시예 13〉 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합 중량비가 4:1로 구성된 복합조성물이 스트랩토조토신 (STZ)—유발 당뇨병 동물모델의 면역활성에 미치는 영 힝:
당뇨병시 현저한 면역억제가 초래되며, 이로 인해 이차 감염이 쉽게 일어나, 면역억제역시 중요한 당뇨 합병증의 하나로 취급되고 있으며, 당뇨병시 현저한 가 슴샘 및 비장과 같은 임파기계의 위축과 이로 인한 중량 감소 및 사이토카인 (cytokine)의 변화가 초래된다 (Tabata et al. , Cell Immunol. 1984, 89, 250-8； Clary et al . , Immunopharmaco 1 ogy - 1990， 20， 153-64； Mic et al . , Comp Med. 2007, 57, 476-81； Briede et al. , Cell Biochem Funct . 2008, 26, 908-15； Rubinstein et al. , Clin Exp I隱 unol . 2008, 154 ,235-46). 이에 본 발명에서는 STZ-유발 당뇨병 동물모델의 가슴샘 및 비장의 변화를 측정하여 당귀 추출물 및 산 마늘 추출물 복합조성물이 면역활성에 미치는 영향을 다음과 같이 확인하였다.
(1) 가슴샘 중량의 변화
본 발명에 따른 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조 성물이 STZ-유발 당뇨병 동물모델의 면역활성에 미치는 영향에 대해 알아보기 위하 여 상기 당뇨병을 유발시킨 랫트의 가슴샘 중량의 변화를 측정하여 실험결과를 하 기 표 35에 나타내었다.
【표 35]
Figure imgf000067_0001
표 35에서 나타낸 바와 같이 , STZ 대조군으로 사용된 랫트는 정상대조군으로 사용된 랫트에 비해 가슴샘의 절대중량 및 상대중량이 각각 90 및 80% 감소하였고， 대조약물로 사용된 실리마린 투여군에서 STZ 대조군에 비해 가슴샘 절대중량 및 상 대중량이 각각 217% 및 166% 증가를 나타내었다. 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물 200, 100 및 50 mg/kg 투여군에서 STZ 대조군에 비 해 가슴샘 절대중량 및 상대중량이 각각 214-316% 및 213-243%로 현저한 증가 효과 를 나타내었다.
(2) 비장 중량의 변화
본 발명에 따른 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조 성물이 STZ-유발 당뇨병 동물모델의 면역활성에 미치는 영향에 대해 알아보기 위하 여 상기 당뇨병을 유발시킨 랫트의 비장 증량의 변화를 측정하여 실험결과를 하기 표 36에 나타내었다.
【표 36]
Figure imgf000068_0001
표 36에서 나타낸 바와 같이 , STZ 대조군으로 사용된 랫트는 정상대조군으로 사용된 랫트에 비해 비장의 절대중량 및 상대중량이 각각 58 및 18% 감소하였고， 대조약물로 사용된 실리마린 투여군에서 STZ 대조군에 비해 비장의 절대중량 및 상 대중량이 각각 58% 및 34% 증가를 나타내었다. 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔 합중량비가 4:1인 복합조성물 200， 100 및 50 mg/kg 투여군에서 STZ 대조군에 비해 비장의 절대중량 및 상대중량이 각각 35-75% 및 29-46%로 현저한 증가 효과를 나타 내었다.
(3) 가슴샘의 조직병리학적 변화
본 발명에 따른 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조 성물이 STZ-유발 당뇨병 동물모델의 면역활성에 미치는 영향에 대해 알아보기 위하 여 상기 당뇨병을 유발시킨 랫트의 가슴샘의 조직병리학적 변화를 측정하여 실험결 과를 하기 표 37에 나타내었다.
【표 37]
Figure imgf000069_0001
표 37에서 나타낸 바와 같이, STZ 대조군으로 사용된 랫트는 정상대조군으로 사용된 랫트에 비해 가슴샘 소엽 전체두께가 56% 감소하였고， 대조약물로 사용된 실리마린 투여군에서 STZ 대조군에 비해 가슴샘 소엽 전체두께가 30% 증가를 나타 내었다. 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물 200， 100 및 50 mg/kg 투여군에서 STZ 대조군에 비해 가슴샘 소엽 전체두께가 각각 21-49¾>로 현저한 증가 효과를 나타내었다.
또한， 표 37에서 나타낸 바와 같이， STZ 대조군으로 사용된 랫트는 정상대조 군으로 사용된 랫트에 비해 가슴샘 피질 두께가 62% 감소하였고， 대조약물로 사용 된 실리마린 투여군에서 STZ 대조군에 비해 가슴샘 피질 두께가 Ί2 증가를 나타내 었다. 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물 200， 100 및 50 mg/kg 투여군에서 STZ 대조군에 비해 가슴샘 피질 두께가 각각 59-108%로 현 저한 증가 효과를 나타내었다.
(4) 비장의 조직병리학적 변화
본 발명에 따른 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조 성물이 STZ-유발 당뇨병 동물모델의 면역활성에 미치는 영향에 대해 알아보기 위하 여 상기 당뇨병을 유발시킨 랫트의 비장의 조직병리학적 변화를 측정하여 실험결과 를 하기 표 38에 나타내었다. 【표 38】
Figure imgf000070_0001
표 38에서 나타낸 바와 같이， STZ 대조군으로 사용된 랫트는 정상대조군으로 사용된 랫트에 비해 비장 전체 두께가 46% 감소하였고， 대조약물로 사용된 실리마 린 투여군에서 STZ 대조군에 비해 비장 전체 두께가 30% 증가를 나타내었다. 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 혼합중량비가 4:1인 복합조성물 200， 100 및 50 mg/kg 투여군에서 STZ 대조군에 비해 비장 전체 두께가 각각 21-49%로 현저한 증가 효과 를 나타내었다.
또한， 표 38에서 나타낸 바와 같이， STZ 대조군으로 사용된 랫트는 정상대조 군으로 사용된 랫트에 비해 비장 백색수질의 평균직경이 60% 감소하였고, 대조약물 로 사용된 실리마린 투여군에서 STZ 대조군에 비해 비장 백색수질의 평균직경이 56% 감소를 나타내었다. 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합 조성물 200， 100 및 50 mg/kg 투여군에서 STZ 대조군에 비해 비장 백색수질의 평균 직경이 각각 44-117%로 현저한 증가 효과를 나타내었다. 상기 나타낸 바와 같이， STZ 대조군에서는 현저한 가슴샘 및 비장 중량의 감 소와 함께， 조직병리학적 위축이 인정되었으나， 세 용량의 모든 당귀 추출물 및 산 마늘 추출물 복합조성물 투여에 의해 가슴샘 및 비장의 변화가 투여용량의존적으로 억제되어, 당귀 추출물 및 산마늘 추출물 복합조성물은 당뇨병과 관련된 면역 면역 억제를 비교적 유효하게 억제하는 것으로 판단되며， 동일한 용량의 실리마린 과 동 등 유사한 정도의 면역활성 효과를 나타내었다.
<실시예 14> 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합 중량비가 4:1로 구성된 복합조성물이 스트렙토조토신 (STZ)-유발 당뇨병 동물모델의 안구보호에 미치는 영 힝:
백내장과 망막 손상 역시 가장 흔한 당뇨 합병증 중 하나로， 당뇨환자의 대 략 2 。정도가 당뇨성 백내장으로 고생하고 있으며 , 당뇨병에 의한 안구손상은 여러 가지 복합적인 기전에 의해 일어날 수 있으나， 주로 고혈당의 기간과 그 정도에 달 려 있고 (Jarrett and Keen, Lancet . 1976, 2， 1009-12； Klein et al . , Ophthalmology. 1985， 92, 1191-6； Jahn et al. , Ophthalmic Res. 1986, 18， 112- 6； Brown and Bron, But t erwot h-He i nemann . 1996, 19으 211; Swamy-Mruthint i et al., Curr Eye Res. 1999, 18， 423-9) , 산화 스트레스 (oxidat ive stress) 역시 증 요한 발병 기전 중 하나로 알려져 있다 (Boscia et al., Invest Ophthalmol Vis Sci . 2000, 41， 2461-5； Spec tor, J Ocul Pharmacol Ther. 2000， 16, 193—201; Ozmen et al . , Clin Biochem. 2002, 35, 69-72； Ramana et al . , J Diabetes Complications. 2004， 18, 177-82) . 백내장 수치 및 안구의 조직병리학적 변화가 후보물질의 당뇨병성 안구손상에 대한 약효 평가 기준으로 이용되어 왔으며, 당뇨 병성 안구손상시 현저한 백내장의 증가와 함께 수정체의 손상， 망막 위축 및 신생 혈관의 증가가 관찰된다 (Barber et al . , J Clin Invest . 1998， 102, 783-91； Yoshida et al . , Biol Pharm Bull. 2004， 27， 338—44; ametaka et al. , J Pharmacol Sci . 2008a, 106, 144-51； Kametaka et al . , J Pharmacol Sci . 2008b, 106， 651-8； Saito et al . , Biol Pharm Bull . 2008, 31, 1959-63). 이에 본 발명에 서는 STZ-유발 당뇨병 동물모델의 백내장 수치 및 안구의 조직병리학적 변화를 측 정하여 당귀 추출물 및 산마늘 추출물 복합조성물이 안구보호에 미치는 영향을 다 음과 같이 확인하였다.
(1) 백내장 수치의 변화
당귀 추출물 및 산마늘 추출물로 구성된 복합조성물이 STZ-유발 당뇨병 동물 모델의 안구보호에 미치는 영향에 대해 알아보기 위하여 상기 당뇨병을 유발시킨 랫트의 백내장 수치의 변화를 측정하여 실험결과를 하기 표 39에 나타내었다.
【표 39】 구분 백내^ >- 수치
육안 수치 STZ 대조군 정량 STZ 대조군 대비 (%) 이미지 -분석 대비
수치 (%)
정상대조군 정상군 0.38±0.52 9.29±2.88
STZ 대조군 STZ 4.38±0.74 1066.67 50.36 + 6.04 441.99
(정상군 (정상군 대비) 대비) 대조약물투여군 심리마리 2.63±0.92 -40.00 31.77±8.78 -36.91 당귀:산마늘 (4: 200 me/ks 2.13±0.64 -51.43 25.91±6.98 -48.55 1) 복합조성물 100 mg/kg 2·75±0·89 -37.14 32.23±7.50 -36.00 투여군 50 mg/kg 3.00±1·07 -31.43 34.72±10.93 -31.06 표 39에서 나타낸 바와 같이, STZ 대조군으로 사용된 랫트는 정상대조군으로 사용된 랫트에 비해 백내장 육안 수치가 1067% 증가하였고， 대조약물로 사용된 실 리마린 투여군에서 STZ 대조군에 비해 백내장 육안 수치가 40¾> 감소를 나타내었다. 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물 20으 100 및 50 mg/kg 투여군에서 STZ 대조군에 비해 백내장 육안 수치가 31-51% 현저한 감소 효과 를 나타내었다.
또한, 표 39에서 나타낸 바와 같이， STZ 대조군으로 사용된 랫트는 정상대조 군으로 사용된 랫트에 비해 백내장 정량 이미지 수치가 442% 증가하였고， 대조약물 로 사용된 실리마린 투여군에서 STZ 대조군에 비해 백내장 정량 이미지 수치가 37% 감소를 나타내었다. 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 혼합중량비가 4:1인 복합조성 물 200， 100 및 50 mg/kg 투여군에서 STZ 대조군에 비해 백내장 정량 이미지 수치 가 31-49% 현저한 감소 효과를 나타내었다.
(2) 수정체의 조직병리학적 변화
본 발명에 따른 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조 성물이 STZᅳ유발 당뇨병 동물모델의 안구보호에 미치는 영향에 대해 알아보기 위하 여 상기 당뇨병을 유발시킨 랫트의 수정체의 조직병리학적 변화를 측정하여 실험결 과를 하기 표 40에 나타내었다.
【표 40] 구분 수정체의 조직병리한적 변화
손상 수치 STZ 대조군 손상부위의 STZ 대조군 대비 (%) 두께 ("m/ lens) 대비 (%) 정상대조군 정상군 0.25 + 0.46 432.95 ±107.56
STZ 대조군 STZ 2.25±0/711 800.00 1744.33 ±326.77 302.90
(정상군 대 (정상군 대 비) 비) 대조약물투여군 심리마리 1.38±0.74 -38.89 1096.97 ±179.75 -37.11 당귀:산마늘 (4: 200 ms/ke 1.00±0.53 -55.56 816.64±301·07 -53.18 1) 복합조성물 100 mg/kg 1.38±0.52 -38.89 939.35 ±277.97 -46.15 투여군 50 me/ke 1.50±0.53 -33.33 1162.96 ±192.40 -33.33 표 40에서 나타낸 바와 같이， STZ 대조군으로 사용된 랫트는 정상대조군으로 사용된 랫트에 비해 수정체 손상 수치가 800% 증가하였고， 대조약물로 사용된 실리 마린 투여군에서 STZ 대조군에 비해 수정체 손상 수치가 39% 감소를 나타내었다. 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물 200, 100 및 50 mg/kg 투여군에서 STZ 대조군에 비해 수정체 손상 수치가 각각 33-56%로 현저한 감 소 효과를 나타내었다.
또한， 표 40에서 나타낸 바와 같이, STZ 대조군으로 사용된 랫트는 정상대조 군으로 사용된 랫트에 비해 수정체 손상부위의 두께가 303% 증가하였고， 대조약물 로 사용된 실리마린 투여군에서 STZ 대조군에 비해 수정체 손상부위의 두께가 37% 감소를 나타내었다. 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성 물 200， 100 및 50 mg/kg 투여군에서 STZ 대조군에 비해 수정체 손상부위의 두께가 각각 33-58%로 현저한 감소 효과를 나타내었다.
(3) 망막의 조직병리학적 변화
본 발명에 따른 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조 성물이 STZ-유발 당뇨병 동물모델의 안구보호에 미치는 영향에 대해 알아보기 위하 여 상기 당뇨병을 유발시킨 랫트의 망막의 조직병리학적 변화를 측정하여 실험결과 를 하기 표 41 및 표 42에 나타내었다.
【표 41] 구분 망막의 조직 t 리학적 변화
전체 두께 STZ 대조군 얼기층 두께 STZ 대조군 ("m/망막) 대비 (%) (am/망막) 대비 (%) 정상대조군 정상군 432.26 117.07±16.24
STZ 대조군 ±114.83
STZ 154.50±31.03 -64.26 60.33±11.58 -48.46
(정상군 대 (정상군 대 비) 비 ) 대조약물투여군 심리마리 237.65±51.35 53.82 81.67±14.14 35.37 당귀:산마늘 (4: 200 me/ke 296.92±67.63 92.18 105.92±6.50 75.57
100 mg/kg 247.38±45.86 60.12 83.53±13.81 38.45 1) 복합조성물
투여군 50 ms/ e 223.91±30.14 44.92 79.14± 10.29 31.18 표 41에서 나타낸 바와 같이， STZ 대조군으로 사용된 랫트는 정상대조군으로 사용된 랫트에 비해 망막의 전체두께가 6« 감소하였고， 대조약물로 사용된 실리마 린 투여군에서 STZ 대조군에 비해 망막의 전체두께가 5« 증가를 나타내었다. 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물 200， 100 및 50 mg/kg 투여군에서 STZ 대조군에 비해 망막의 전체두께가 각각 45-92%로 현저한 증가 효과 를 나타내었다.
또한， 표 41에서 나타낸 바와 같이, STZ 대조군으로 사용된 랫트는 정상대조 군으로 사용된 랫트에 비해 망막 얼기층의 두께가 48¾> 감소하였고， 대조약물로 사 용된 실리마린 투여군에서 STZ 대조군에 비해 망막 얼기충의 두께가 35% 증가를 나 타내었다. 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물 200， 100 및 50 mg/kg 투여군에서 STZ 대조군에 비해 망막 얼기층의 두께가 각각 31-76% 로 현저한 증가 효과를 나타내었다.
【표 42]
구분 ᄆ막의 조직 t 리학적 ^화
핵층의 두께 STZ 대조군 속경계막 내 STZ 대조군 ( /망막) 대비 ( >) 에 존재하는 대비
혈관의
수 (/1隱 of
망막)
정상대조군 정상군 91.22±9.07 1.25±0.71
STZ 대조군 STZ 42.45 -52.92 10.38土 1.69 730.00
±11.27 (정상군 (정상군 대비) 대비) 대조약물투여군 심리마리 55.72±8.64 29.74 5.25±1.04 -49.40 당귀:산마늘 (4: 200 mg/ke 68.09±9.69 58.54 3.63±0.74 -65.06 1) 복합조성물 100 mg/kg 64.36 49.86 5.13±1.25 -50.60 투여군 ±10.36
50 mg/ks 58.49±8/78 36.19 5.63±1.77 -45.78 표 42에서 나타낸 바와 같이 , STZ 대조군으로 사용된 랫트는 정상대조군으로 사용된 랫트에 비해 망막 핵층의 두께가 53% 감소하였고， 대조약물로 사용된 실리 마린 투여군에서 STZ 대조군에 비해 망막 핵층의 두께가 30% 증가를 나타내었다. 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물 200， 100 및 50 mg/kg 투여군에서 STZ 대조군에 비해 망막 핵층의 두께가 각각 36-59%로 현저한 증 가 효과를 나타내었다.
또한， 표 42에서 나타낸 바와 같이， STZ 대조군으로 사용된 랫트는 정상대조 군으로 사용된 랫트에 비해 망막 속경계막 내에 존재하는 혈관의 수가 730% 증가하 였고， 대조약물로 사용된 실리마린 투여군에서 STZ 대조군에 비해 망막 속경계막 내에 존재하는 혈관의 수가 49% 감소를 나타내었다. 당귀 추출물 및 산마늘 추출물 의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물 200， 100 및 50 mg/kg 투여군에서 STZ 대조군에 비해 망막 속경계막 내에 존재하는 혈관의 수가 각각 46-65%로 현저한 감소 효과를 나타내었다. 상기 나타낸 바와 같이， 백내장 및 수정체 손상의 증가와 함께 망막 두께, 망막의 속얼기층 및 속핵층의 두께의 감소， 속 한계막의 혈관 증식 등 전형적인 당 뇨병성 안구 손상이 STZ 대조군에서 인정되었으나, 세 용량의 모든 당귀 추출물 및 산마늘 추출물 복합조성물 투여에 의해 이러한 백내장 및 안구손상이 현저히 억제 되었다. 따라서 본 발명에 따른 당귀 추출물 및 산마늘 추출물 복합조성물은 당뇨 병성 안구손상올 효과적으로 억제하는 것으로 나타나， 동일한 용량의 실리마린과 동등 유사한 정도의 안구손상 억제효과를 나타내므로 당뇨병 또는 당뇨 합병증의 예방， 치료 및 개선용 조성물로 유용하게 이용될 수 있다.
또한， 상기 본 발명의 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 복합조성물은 STZ 투 여에 의한 당뇨 및 당뇨병성 신장손상， 면역억제 및 안구손상에 대해 비교적 유효 한 효과를 나타내므로， 당뇨 및 관련 합병증에 매우 유효할 것으로 판단되며， 50 mg/kg 투여군에서도 유효한 효과가 인정되어, 최적 유효 용량은 50 mg/kg 이하로 투여할 수 있고， 당귀 추출물 및 산마늘 추출물 복합조성물은 전체적으로 동일한 용량의 실리마린과 동등 유사한 효과를 나타내었다.
<실시예 15〉 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합 중량비가 4:1로 구성된 복합조성물의 독성실험
(1) 실험 동물 및 방법
본 발명에 따른 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조 성물에 대하여 래트 단회 경구 투여 독성 자료를 얻기 위해 식품의약품안전청 고시 제 2009-116 "의약품 등의 독성시험 기준" 에 의거하여， 설치류 투여 한계 용량인 2000 mg/kg을 최고 투여군을 설정하고 공비 2로 1000 및 500 mg/kg 투여군을 중간 및 저용량 투여군으로 설정하여 실험을 수행하였다. 실험동물은 암.수 SD 랫트를 사용하였으며， 총 8군 (매체 대조군 포함)으로 각 1군 당 각각 5마리씩 사용하였다. 약물은 멸균증류수를 용매로 사용하여 경구투여하였으며， 2000, 1000, 500 및 0 mg/kg을 단회 경구투여 하였다.
(2) 실험결과
본 발명에 따른 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조 성물의 래트 단회 경구 투여 독성실험 결과를 하기에 나타내었다. 사망률
상기 실험 결과， 설치류 한계 투여용량인 2000 mg/kg 투여군까지 본 발명의 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물 투여와 관련된 사 망례는 14일간의 실험기간 동안 발생하지 않았다. 체중 및 증체량
모든 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물 투여 군에서 각각의 동일 성별 매체 대조군과 비교하여 의미 있는 체중 및 증체량의 변 화는 실험 전 기간동안 각각 발생하지 않았다. 기간동안의 각 군의 증체량의 변화 를 다음의 표 43에 나타내었다.
【표 43]
Figure imgf000077_0001
반수치사량, 개략적 치사량, 표적장기
본 실험에서 설치류 투여한계 용량인 2000 mg/kg 투여군까지 사망례가 인정 되지 않아, 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물의 래 트에 대한 단회 경구 투여 반수 치사량 및 개략적 치사량은 암수 각각 〉2000 mg/kg 으로 산출되었으며， 특정 임상증상 및 표적 장기 역시 관찰되지 않았다. 실험의 결 과를 다음의 표 46에 나타내었다.
【표 44】
Figure imgf000077_0002
표 44에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합 중량비가 4:1인 복합조성물의 랫트에서 단회 경구 투여독성 실험의 결과, 설치류 투여 한계 용량인 2000 mg/kg까지 사망례가 인정되지 않았으며 , 다른 독성 증상이 인정되지 않아, 2주 반복 용량 설정 실험에서도， 본 실험의 최대 투여 용량인 2000 mg/kg을 최고 투여용량으로 하고， 1000 및 500 mg/kg을 중간 및 저용량 투여군으로 설정해야 할 것으로 판단된다. <실시예 16> 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합 중량비가 4:1로 구성된 복합조성물의 소핵실험
(1) 실험 동물 및 방법
고지방 사료 공급에 의해 유발되는 비만성 당뇨 및 합병증에 최적 조성으로 선정된 본 발명의 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물 에 대한 유전독성을 평가하기 위해， 마우스 골수세포를 이용한 생체 외 Vivo) 소핵실험을 수행하였다.
실험동물로는 수컷 ICR 마우스 총 5군 (매체 대조군 및 양성 대조군 -CPA 투여 군 포함) 1 군 당 각각 10마리씩 사용하였다. 본 발명의 당귀 추출물 및 산마늘 추 출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물 2000， 1000 및 500 mg/kg을 멸균 증류수수 에 용해시켜 10 /kg으로 일일 1회씩 2일간 경구투여 하였으며, 매체 대조군은 멸 균 증류수 10 /kg만을 2일간 경구투여 하고， 양성 대조군은 CPA 70 mg/kg을 소금 물 (saline)에 용해시켜 10m£/kg으로 단회 복강 투여하였다.
현재까지 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 혼합중량비가 4:1인 복합조성물에 대한 마우스 경구투여 독성 자료가 없어, 설치류 한계 투여용량 (OECD Guidelines #423， 2001； KFDA Guidelines 2009-116, 2009)인 2000 mg/kg을 최고 용량으로 설정 하고, KFDA Guideline(2009-116, 2009)에 따라 공비 2로 1000 및 500 mg/kg 투여군 을 설정하였으며， 마우스 단회 경구투여시 적절 투여 용량 (Flecknell, Laboratory Animal Anesthesia, 2nd Ed, p 269, 1996)인 10 mi/kg의 용량으로 1일 일회씩 2일 간 경구 투여하였다.
(2) 실험결과
당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물의 소핵실험 결과를 항목별로 하기에 나타내었다. 사망률
실험 결과， 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물 투여와 관련된 사망례는 발생하지 않았으며, 매체 대조군 및 CPA 투여군에서도 사 망례는 발생하지 않았다. 체증 및 증체량 CPA 또는 본 발명의 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복 합조성물 투여군에서 의미 있는 체중 및 증체량의 변화는 발생하지 않았다. 소핵다염적혈구 (MNPCE, micronucleus polychromatic erythrocyte) 수적 변화 마우스 골수 도말 표본을 이용한 소핵실험은 유전독성올 평가하는 데 있어서 가장 간단하고 확실한 평가로 알려져 있으며 (Renner, Mutat Res. 1990；244： 185-8) , 소핵다염적혈구의 증가는 유전독성을 일으킬 수 있는 가능성을 나타낸다. 본 실험 의 결과， 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 흔합중량비가 4:1인 복합조성물은 설치 류 최대 투여용량인 2000 mg/kg까지 매체 대조군과 유사한 MNPCE의 수적 변화를 나 타내었으므로, 마우스 골수 세포를 이용한 소핵실험에 음성인 것을 확인하였다. 각 그룹의 소핵다염적혈구의 수적변화를 다음의 표 45에 나타내었다.
【표 45]
Figure imgf000079_0002
Figure imgf000079_0001
로 사용되는 대표적인 약 물로 (Grochow, Williams & Wilkins; 1996； 293—316)， 조혈세포 및 임파기계 세포에 손상을 미쳐 현저한 백혈구 감소증을 초래하는 것으로 알려져 있다 (Angulo et al . , Blood. 2000；95：212-20). CPA의 대사산물인 알킬레이팅 핵산 (alkylating nucleic acids)(Miyauchi et al . , Tohoku J Exp Med. 1990 ;162 :147-67)이 자유—라디칼 (free-radicals)을 형성하고 匪를 알킬레이팅시켜 유전독성 (mutagenici ty)을 초래 하는 것으로 알려져 있으며 (El-Bayoumy, Mutat Res. 2001 ;475： 123-39) , 현재 한국 식품의약품 안전청 고시 (의약품등의독성시험기준, 제 2009-116호， 2009)에서 마우스 골수 세포를 이용한 소핵시험시 양성 대조약물로의 사용을 권고하고 있다. 본 실험 에서 CPA 70 mg/kg 투여군에서 매체 대조군에 비해 유의성 있는 소핵다염 적혈구의 증가가 인정되어， 본 실험이 비교적 잘 수행된 것으로 판단된다. 다염적혈구 (PCE(PCE+NCE normochromat ic erythrocyte)) 비율의 변화
다염적혈구 (PCE/(PCE+NCE))의 비율은 처리 물질의 세포독성을 나타내는 지표 로 일반적으로 0.20 이상 시， 골수세포를 이용한 소핵실험 실험결과를 인정하고 있 다 (Heddle et al .， Handbook of Mutagenicity Test Procedures. 2nd Edi t ion, Elsevier, pp. 441-57, 1984). 본 실험의 결과, CPA 투여군에 국한되어 매체 대조 군에 비해 유의성 있는 PCE의 수적 감소와 이에 따른 PCE/(PCE+NCE) 비율의 감소가 인정되었으나， CPA 투여군을 포함한 모든 실험군에서 PCE/(PCE+NCE) 비율이 평균 0.47이상 (개체: 0.44 이상)으로 관찰되어 세포 독성에 의한 오류는 없을 것으로 판 단된다. 각 그룹의 다염적혈구 비율의 변화를 다음의 표 48에 나타내었다.
【표 46]
Figure imgf000080_0002
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늘 추출물의 흔 합증량비가 4:1인 복합조성물은 설치류 한계투여용량인 2000 mg/kg까지 의미 있는 MNPCE의 수적 변화를 나타내지 않아， 골수 세포를 이용한 소핵실험에서 음성을 나 타내는 것으로 관찰되었다. 하기에 본 발명의 추출물을 포함하는 약학적 조성물의 제조예를 설명하나, 본 발명은 이를 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.
<제제예 1> 약학적 제제의 제조
1-1. 산제의 제조
당귀 및 산마늘 복합조성물 500 mg
유당 100 mg
탈크 10 mg 상기의 성분들을 흔합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조한다.
1-2. 정제의 제조
당귀 및 산마늘 복합조성물 500 mg
옥수수전분 100 mg
O
ΤΓ당 100 mg
스테아린산 마그네슘 2 mg 상기의 성분들을 흔합한 후 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제 를 제조한다.
1-3. 캅셀제의 제조
당귀 및 산마늘 복합조성물 500 mg
옥수수전분 100 mg
유당 100 mg
스테아린산 마그네슘 2 mg 통상의 캡슐제제조방법에 따라 상기의 성분을 흔합하고 젤라틴 캡슐에 충전 하여 캡술제를 제조한다.
1-4. 주사제의 제조
당귀 및 산마늘 복합조성물
주사용 멸균 증류수
H 조절제 통상의 주사제의 제조방법에 따라 1 앰플당 (2 m^) 상기의 성분 함량으로 제 조한다.
1-5. 액제의 제조
당귀 및 산마늘 복합조성물 100 mg
이성화당 10 g
만니를 5 g
정제수 적량 통상의 액제의 제조방법에 따라 정제수에 각각의 성분을 가하여 용해시키고 레몬 향을 적량 가한 다음 상기의 성분을 흔합한 다음 정제수를 가하여 전체를 정 제수를 가하여 전체 100 로 조절한 후 갈색 병에 층진하여 멸균시켜 액체를 제조 한다. <제제예 2> 건강식품의 제조
당귀 및 산마늘 복합조성물 1000 mg
비타민 흔합물 적량
비타민 A 아세테이트 70 μ
비타민 E 1.0 mg
비타민 0.13 mg
비타민 0.15 mg 비타민 B6 0.5 mg 비타민 B12 0.2 비타민 C 10 mg
비오틴 10 iig
니코틴산아미드 1.7 rag
엽산 50 iig
판토텐산 칼슘 0.5 mg
무기질 흔합물 적량
황산제 1철 1.75 mg
산화아연 0.82 mg
탄산마그네슘 25.3 mg
제 1인산칼륨 15 mg
제 2인산칼슘 55 mg
구연산칼륨 90 mg
탄산칼슘 100 mg
염화마그네슘 24.8 mg 상기의 비타민 및 미네랄 흔합물의 조성비는 비교적 건강식품에 적합한 성분 을 바람직한 실시예로 흔합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무 방하며， 통상의 건강식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 흔합한 다음， 과립을 제 조하고， 통상의 방법에 따라 건강식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.
<제제예 3> 건강 음료의 제조
당귀 및 산마늘 복합조성물 1000 mg 구연산 1000 mg
올리고당 100 g
매실농축액 2 g
타우린 1 g
정제수를 가하여 전체 900 ιη^ 통상의 건강 음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 흔합한 다음, 약 1시간 동 안 85 °C에서 교반 가열한 후， 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2 I 용기에 취득 하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 건강 음료 조성물 제조에 사용하였다. 상기 조성비는 비교적 기호 음료에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 흔합 조성하였지만 수요계층이나, 수요국가， 사용용도 등 지역적， 민족적 기호 도에 따 라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.
<제조예 4> 기타 건강식품의 제조
4-1. 음료의 제조
꿀 522 mg
치옥토산아미드 5 rag
니코틴산아미드 10 mg
염산리보플라빈나트륨 3 mg
염산피리독신 2 mg
이노시를 30 nig
오르트산 50 nig
당귀 및 산마늘 복합조성물 0.48-1.28 mg
200 상기 조성 및 함량으로 하여 통상적인 방법을 사용하여 음료를 제조하였다.
4-2. 츄잉껌의 제조
껌베이스 20%
설탕 76.36-76.76%
당귀 및 산마늘 복합조성물 0.24-0.64%
후르츠향 1% 2% 상기 조성 및 함량으로 하여 통상적인 방법을 사용하여 츄잉 ¾을 제조하였
4-3. 캔디의 제조
설탕 50-60%
물엿 39.26-49.66%
당귀 및 산마늘 복합조성물 0.24-0.64%
오렌지향 0.1% 상기 조성 및 함량으로 하여 통상적인 방법을 사용하여 캔디를 제조하였다. 4-4. 밀가루 식품의 제조
당귀 및 산마늘 복합조성물 0.5-5 중량부를 밀가루 100 중량부에 첨가하고， 이 흔합물을 이용하여 빵， 케이크， 쿠키, 크래커 및 면류를 제조하여 건강 증진용 식품을 제조하였다.
4-5. 유제품 (dairy products)의 제조
당귀 및 산마늘 복합조성물 5-10 중량부를 우유 100 중량부에 첨가하고, 상 기 우유를 이용하여 버터 및 아이스크림과 같은 다양한 유제품을 제조하였다.
4-6. 선식의 제조
현미， 보리， 참쌀， 율무를 공지의 방법으로 알파화 시켜서 건조한 것을 배전 한 후 분쇄기로 입도 60 메시의 분말로 제조하였다. 검은콩， 검정깨, 들깨도 공지 의 방법으로 찌서 건조한 것을 배전한 후 분쇄기로 입도 60 메시의 분말로 제조하 였다. 상기에서 제조한 곡물류 및 종실류와 본 발명의 당귀 및 산마늘 복합조성물 을 다음과 같은 비율로 배합하여 제조하였다. 현미 30%
율무 15%
보리 20%
들깨 7% 검정콩 7% 검은깨 Ί 당귀 및 산마늘 복합조성물 3% 영지 0.5% 지황 0.5%

Claims

【청구의 범위】
【청구항 1】
당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 중량비가 1:4-6 또는 2-4:1로 조성된 복합 생약 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병 또는 당뇨 합병증의 예방 또는 치료 용 약학적 조성물.
【청구항 2]
제 1항에 있어서， 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 중량비가 1:4 또는 4:1로 조성되는 것을 특징으로 하는 당뇨병 또는 당뇨 합병증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
【청구항 3】
제 1항에 있어서, 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 증량비가 4:1로 조성되는 것을 특징으로 하는 당뇨병 또는 당뇨 합병증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
【청구항 4】
게 1항에 있어서, 상기 조성물은 항 비만 활성을 나타내는 것을 특징으로 하 는 당뇨병 또는 당뇨 합병증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
【청구항 5】
제 1항에 있어서， 상기 조성물은 혈당강하 활성을 나타내는 것을 특징으로 하 는 당뇨병 또는 당뇨 합병증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
【청구항 6】
거 U항에 있어서， 상기 조성물은 항 고지혈증 활성을 나타내는 것을 특징으로 하는 당뇨병 또는 당뇨 합병증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
【청구항 7】
제 1항에 있어서, 상기 조성물은 간 보호 활성을 나타내는 것을 특징으로 하 는 당뇨병 또는 당뇨 합병증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
【청구항 8】 게 1항에 있어서， 상기 조성물은 신장보호 활성을 나타내는 것을 특징으로 하 는 당뇨병 또는 당뇨 합병증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
【청구항 9】
거 U항에 있어서， 상기 조성물은 면역억제보호 활성을 나타내는 것을 특징으 로 하는 당뇨병 또는 당뇨 합병증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
【청구항 10】
저 U항에 있어서, 상기 조성물은 안구손상보호 활성을 나타내는 것을 특징으 로 하는 당뇨병 또는 당뇨 합병증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
【청구항 11】
제 1항에 있어서， 상기 당뇨병은 제 2형 당뇨병인 것을 특징으로 하는 당뇨병 또는 당뇨 합병증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
【청구항 12】
거 U항에 있어서， 상기 당뇨 합병증은 당뇨성 신변증， 당뇨성 간변증, 고혈 압， 동맥 경화증， 뇌졸중， 심부전증， 면역억제 및 당뇨병성 망막증으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 질환인 것을 특징으로 하는 당뇨병 또는 당뇨 합병증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
【청구항 13]
당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 중량비가 1:4—6 또는 2-4:1로 조성된 복합 생약 추출물을 유효성분으로 함유하는 비만질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성 을_
【청구항 14]
제 11항에 있어서, 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 중량비가 1:4또는 4:1로 조성되는 것을 특징으로 하는 비만질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
【청구항 15】
제 11항에 있어서, 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 중량비가 4:1로 조성되는 것을 특징으로 하는 비만질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
【청구항 16]
제 1항에 있어서, 당뇨병 또는 당뇨합병증의 예방 또는 치료효과가 용량 의존 적으로 야기됨을 특징으로 하는 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 복합조성물.
【청구항 17】
제 1항에 있어서， 비만질환의 예방 또는 치료효과가 용량 의존적으로 야기됨 을 특징으로 하는 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 복합조성물.
【청구항 18】
당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 중량비가 1:4-6 또는 2-4:1로 조성된 복합 생약 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병 또는 당뇨 합병증의 예방 또는 개선 용 건강식품 조성물.
【청구항 19】
제 14항에 있어서， 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 중량비가 1:4 또는 4:1로 조성되는 것을 특징으로 하는 당뇨병 또는 당뇨 합병증의 예방 또는 개선용 건강식 품 조성물.
【청구항 20]
제 14항에 있어서, 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 중량비가 4:1로 조성되는 것을 특징으로 하는 당뇨병 또는 당뇨 합병증의 예방 또는 개선용 건강식품 조성
【청구항 21】
제 14항에 있어서， 상기 조성물은 항 비만 활성을 나타내는 것을 특징으로 하 는 당뇨병 또는 당뇨 합병증의 예방 또는 개선용 건강식품 조성물.
【청구항 22】
제 14항에 있어서， 상기 조성물은 혈당강하 활성을 나타내는 것을 특징으로 하는 당뇨병 또는 당뇨 합병증의 예방 또는 개선용 건강식품 조성물.
【청구항 23]
제 14항에 있어서， 상기 조성물은 항 고지혈증 활성을 나타내는 것을 특징으 로 하는 당뇨병 또는 당뇨 합병증의 예방 또는 개선용 건강식품 조성물.
【청구항 24]
제 14항에 있어서， 상기 조성물은 간 보호 활성을 나타내는 것올 특징으로 하 는 당뇨병 또는 당뇨 합병증 예방 또는 개선용 건강식품 조성물.
【청구항 25】
제 14항에 있어서， 상기 조성물은 신장보호 활성을 나타내는 것을 특징으로 하는 당뇨병 또는 당뇨 합병증의 예방 또는 개선용 건강식품 조성물.
【청구항 26】
제 14항에 있어서， 상기 조성물은 면역억제보호 활성을 나타내는 것을 특징으 로 하는 당뇨병 또는 당뇨 합병증의 예방 또는 개선용 건강식품 조성물.
【청구항 27】
제 14항에 있어서， 상기 조성물은 안구손상보호 활성을 나타내는 것을 특징으 로 하는 당뇨병 또는 당뇨 합병증의 예방 또는 개선용 건강식품 조성물.
【청구항 28]
제 14항에 있어서， 상기 당뇨병은 게 2형 당뇨병인 것을 특징으로 하는 당뇨병 또는 당뇨 합병증의 예방 또는 개선용 건강식품 조성물.
【청구항 29】
제 14항에 있어서， 상기 당뇨 합병증은 당뇨성 신변증， 당뇨성 간변증， 고혈 압， 동맥 경화증， 뇌졸중， 심부전증， 면역억제 및 당뇨병성 망막증으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 질환인 것을 특징으로 하는 당뇨병 또는 당뇨 합병증의 예방 또는 개선용 건강식품 조성물.
【청구항 30】 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 중량비가 1:4-6 또는 2-4:1로 조성된 복합 생약 추출물을 유효성분으로 함유하는 비만질환의 예방 또는 개선용 건강식품 조성 물
【청구항 31]
제 24항에 있어서， 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 중량비가 1:4 또는 4:1로 조성되는 것을 특징으로 하는 비만질환의 예방 또는 개선용 건강식품 조성물.
【청구항 32]
제 24항에 있어서, 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 중량비가 4:1로 조성되는 것을 특징으로 하는 비만질환의 예방 또는 개선용 건강식품 조성물.
【청구항 33】
당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 중량비가 1:4-6 또는 2-4:1로 조성된 복합 생약 추출물을 이를 필요로 하는 대상에게 유효량으로 투여하는 단계를 포함하는 당뇨병 또는 당뇨 합병증의 치료방법.
【청구항 34]
당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 중량비가 1:4-6 또는 2-4:1로 조성된 복합 생약 추출물을 이를 필요로 하는 대상에게 유효량으로 투여하는 단계를 포함하는 비만 질환의 치료방법 .
PCT/KR2011/005914 2010-08-11 2011-08-11 당귀 추출물 및 산마늘 추출물의 복합조성물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병 또는 당뇨 합병증 예방 또는 치료용 조성물 WO2012021014A2 (ko)

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Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
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KR20010081514A (ko) * 2000-02-15 2001-08-29 복성해 참당귀에서 분리한 다당류의 당뇨병 예방 및 치료용 조성물
KR20050043092A (ko) * 2003-11-05 2005-05-11 학교법인 상지학원 산마늘 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨성 질환의예방 및 치료용 조성물
KR20050111657A (ko) * 2004-05-21 2005-11-28 주식회사 엠디바이오알파 당귀 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병치료제제조성물
KR20050111658A (ko) * 2004-05-21 2005-11-28 주식회사 엠디바이오알파 당귀 추출물을 유효성분으로 함유하는 비만 치료제

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20010081514A (ko) * 2000-02-15 2001-08-29 복성해 참당귀에서 분리한 다당류의 당뇨병 예방 및 치료용 조성물
KR20050043092A (ko) * 2003-11-05 2005-05-11 학교법인 상지학원 산마늘 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨성 질환의예방 및 치료용 조성물
KR20050111657A (ko) * 2004-05-21 2005-11-28 주식회사 엠디바이오알파 당귀 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병치료제제조성물
KR20050111658A (ko) * 2004-05-21 2005-11-28 주식회사 엠디바이오알파 당귀 추출물을 유효성분으로 함유하는 비만 치료제

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CHOE, JONG WON ET AL.: 'Effect of Allium Victorialis Var. platyphyllum Leaves on Triton WR-1339-Induced and Poloxamer-407-Induced Hyperlipidemic Rats and on Diet-Induced Obesity Rats' JOURNAL OF KSP vol. 36, no. 2, 2005, pages 109 - 115 *

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