WO2005067970A1

WO2005067970A1 - 鉄補給剤及びその利用

Info

Publication number: WO2005067970A1
Application number: PCT/JP2005/000313
Authority: WO
Inventors: Sachiko Suzuki; Katsuharu Fukuda; Motoko Irie; Yoji Hata; Akitsugu Kawato; Yasuhisa Abe
Original assignee: Gekkeikan Sake Co., Ltd.
Priority date: 2004-01-14
Filing date: 2005-01-13
Publication date: 2005-07-28
Also published as: EP1704871A4; EP1704871A1; CA2552889A1; US20080113899A1

Abstract

　本発明者らは、シデロフォアと３価鉄イオンとのキレート錯体が生体内への吸収率が高いこと、生体内に吸収されて、血中ヘモグロビン濃度、血清中鉄濃度、及び肝臓における貯蔵鉄濃度を有意に増加させること、及び生体機能に悪影響を及ぼさないことを見出した。この知見に基づき、本発明は、シデロフォアと３価鉄イオンとを、好ましくはキレート錯体の形態で含む鉄補給剤、鉄欠乏性貧血の予防又は治療剤、食品添加剤、及び食品組成物を提供するものである。

Description

明細書

鉄補給剤及びその利用

技術分野

[0001] 本発明は、シデロフォアを利用した鉄補給剤、鉄欠乏性貧血の予防又は治療剤、食品添加剤、及び食品組成物に関する。

背景技術

[0002] 近年、日本人の食生活及び健康に対する意識は高くなり、食品に安全性及び機能性が求められるようになつてきた。通常の食事で不足する成分を補うため栄養補助食品などを摂取する人の割合もますます増えてきている。一方、国民栄養調査によると、鉄の平均摂取量は性別や年代に関係なぐ所要量を下回る状態が続いている。また、鉄は吸収率が低ぐ摂取した量のほとんど力***されてしまうことが知られている。このことから、鉄は積極的に摂取する必要がある栄養素のひとつである。

[0003] 鉄が不足した状態が長く続くと鉄欠乏性貧血になるば力りでなぐ運動及び学習能力が低下したり、免疫力が低下したりするなど、人体に様々な悪影響を及ぼす。鉄欠乏性貧血を改善するには、一般に、ヒトが吸収し易いヘム鉄を多く含む畜肉又は魚類を摂取することが有効といわれている。しかし、畜肉又は魚類を多量に摂取するには食習慣を大きく変える必要があり、またこれらを過剰に摂取すると栄養のバランスが悪くなる。一方、野菜などの植物に含まれる鉄は非ヘム鉄であり、非ヘム鉄の吸収率はヘム鉄の吸収率の 1Z2から 1Z5程度である。さらに非ヘム鉄は食物繊維や緑茶に含まれるカテキン等によって吸収が阻害され易い。従って、植物から充分量の鉄を摂ることは現実的でない。

従来、鉄の補給により貧血を予防又は治療するために、ピロリン酸鉄、クェン酸鉄、硫酸鉄等の各種鉄剤が用いられている。しかし、これらの鉄剤に含まれる鉄は一般に生体内で利用率が低いため、貧血の予防又は治療効果を得るためには、多量を摂取する必要がある。しかし、これらの鉄塩は多量の摂取により胃腸粘膜障害又は嘔吐などを引き起こす恐れがあるため、短期間に多量を摂取することは難しい。従って、貧血予防又は治療効果を得るためには、これらの鉄塩を長期間に亘り摂取する必要がある。

[0004] 従来使用されているその他の鉄補給剤としては、乳汁に含まれるラタトフヱリンが挙げられる。ラタトフエリンは鉄結合能を持つ糖タンパクであることが知られている。特許文献 1は、鉄ラタトフエリン複合体の増血効果及びその製造方法を開示している。しかし、鉄ラタトフエリン複合体は、溶解性が悪ぐまた鉄の所要量に対し多量のラクトフェリンを摂取する必要があることから、鉄剤としては実用化するには多くの課題が残されている。

[0005] また非特許文献 1は、 EDTA— FeNaを有効成分とする鉄強化剤の吸収の検討結果を開示している。しかし、 EDTAは生体内の多くの微量金属に対し強いキレートイ匕作用を有するため、生体内の必要金属をキレート化により不活性ィ匕する可能性があることから、 EDTA— FeNaを有効成分とする鉄強化剤の長期継続摂取は健康面で懸念される。

[0006] 一方、清酒の醸造においては、カビの一種である麹菌（ァスペルギルス 'ォリゼ; As pergillus oryzae)を蒸米上に生育させて「麹」を作製し、清酒醸造の副原料として利用している。この麹造りにおいて、麹菌が大量のフェリクローム類、主にデフエリフエリタリシンを生産し、このフェリクローム類が酒造用水由来の鉄イオンをキレートイ匕することにより清酒が着色することが古くから知られている。このように、麹菌は多量のフエリクローム類を生産することが知られて、るが、清酒醸造にお、てはフェリクローム類は清酒の品質劣化の原因であることから、その有効利用は全く考えられて、な、。特許文献 1 :日本国特許第 2884045号

非特許文献 1 :「微量栄養素研究」、第 18集、第 25— 28頁 (2001)

発明の開示

発明が解決しょうとする課題

[0007] 本発明は、生体内への鉄の吸収率が高い鉄補給剤、鉄欠乏性貧血の予防又は治療剤、食品添加剤、及び食品組成物を提供することを課題とする。

課題を解決するための手段

[0008] 上記課題を解決するために本発明者は研究を重ね、以下の知見を得た。

(1) 鉄欠乏による貧血は、肝臓の貯蔵鉄が欠乏する第 1段階、血清中の鉄が欠乏する第 2段階、及び、ヘモグロビン合成能が低下して貧血症状が現れる第 3段階を経て進行する。また鉄欠乏性貧血はこの逆の段階を経て快復する。

[0009] シデロフォアの 3価鉄キレート錯体は、鉄欠乏性貧血ラットに摂取させた場合、生体内に効率的に吸収されて血清中の鉄濃度及び血中ヘモグロビン濃度を増加させ、さらに肝臓の貯蔵鉄も増カロさせる。従って、シデロフォアの 3価鉄キレート錯体は、鉄欠乏による各種症状、特に鉄欠乏性貧血の予防、改善又は治療剤として有用である。

(2) シデロフォアの 3価鉄キレート錯体は、ラットに摂取させた場合、体重増加量、摂食量、肝機能及び腎機能に悪影響を与えないため、安全な鉄補給剤である。

(3) シデロフォアの 3価鉄キレート錯体は、水に対する溶解性が高ぐ鉄化合物が沈殿することがある酸性条件下でも高、水溶性を示すため、液状食品への添加剤として使用し易い。

(4) シデロフォアの 3価鉄キレート錯体は、広い pH範囲の下での加熱加圧に対して極めて安定であり、変性しない。従って、医薬組成物又は食品組成物の成分として使用する場合に、これらの組成物を加熱加圧滅菌できる。

(5) シデロフォアの 3価鉄キレート錯体を 0. 05— lOmgZml含む液体状食品組成物は、無理のな!、摂取スケジュールで鉄欠乏性貧血を効果的に予防又は改善できるとともに、副作用が生じない。

(6) シデロフォアの 3価鉄キレート錯体を 0. 1— 5mg/g含む固体状食品組成物は、無理のな、摂取スケジュールで鉄欠乏性貧血を効果的に予防又は改善できるとともに、副作用が生じない。

[0010] 本発明は上記知見に基づき完成されたものであり、以下の鉄補給剤などを提供する。

[0011] 項 1. シデロフォアと 3価鉄イオンとを含む鉄補給剤。

[0012] 項 2. シデロフォアと 3価鉄イオンとがキレート錯体の形態で含まれている項 1に記載の鉄補給剤。

[0013] 項 3. シデロフォアがヒドロキサム酸を含むものである項 1又は 2に記載の鉄補給剤 [0014] 項 4. 上記キレート錯体力フェリクローム類である項 3に記載の鉄補給剤。 [0015] 項 5. フェリクローム類がフエリクリシンである項 4に記載の鉄補給剤。

[0016] 項 6. シデロフォアと 3価鉄イオンとを含む鉄欠乏性貧血の予防又は治療剤。

[0017] 項 7. シデロフォアと 3価鉄イオンとがキレート錯体の形態で含まれている項 6に記載の鉄欠乏性貧血の予防又は治療剤。

[0018] 項 8. シデロフォアがヒドロキサム酸を含むものである項 6又は 7に記載の鉄欠乏性貧血の予防又は治療剤。

[0019] 項 9. 上記キレート錯体がフェリクローム類である項 8に記載の鉄欠乏性貧血の予防又は治療剤。

[0020] 項 10. フェリクローム類がフエリクリシンである項 9に記載の鉄欠乏性貧血の予防又は治療剤。

[0021] 項 11. シデロフォアと 3価鉄イオンとを含む鉄補給用食品添加剤。

[0022] 項 12. シデロフォアと 3価鉄イオンとを含む鉄欠乏性貧血の予防又は改善用食品添加剤。

[0023] 項 13. シデロフォアと 3価鉄イオンとを含む食品組成物。

[0024] 項 14. シデロフォアと 3価鉄イオンとがキレート錯体の形態で含まれている項 13に記載の食品組成物。

[0025] 項 15. 固形状の食品組成物中に、シデロフォアと 3価鉄イオンとがキレート錯体に換算して 0. 1— 5mg/g含まれている項 13又は 14に記載の食品組成物。

[0026] 項 16. 液体状の食品組成物中に、シデロフォアと 3価鉄イオンとがキレート錯体に換算して 0. 05— lOmgZml含まれている項 13又は 14に記載の食品組成物。

[0027] 項 17. 食品が、酒類、茶類、コーヒー類、スポーツドリンク類、清涼飲料水、乳飲料、及びスープ力もなる群より選ばれる飲料である項 16に記載の食品組成物。

[0028] 項 18. 鉄補給用の項 13— 17のいずれかに記載の食品組成物。

[0029] 項 19. 鉄欠乏性貧血の予防又は改善用の項 13— 17のいずれかに記載の食品組成物。

[0030] 項 20. シデロフォアと 3価鉄イオンとを含む、以下の (0— (vi)のいずれかの食品組成物。

(0 鉄を補給する作用を有することを特徴とし、鉄を補給するために用いられる旨の表示を付した食品組成物

GO 鉄を補助する作用を有することを特徴とし、鉄を補助するために用いられる旨の表示を付した食品組成物

(iii) 鉄を強化する作用を有することを特徴とし、鉄を強化するために用いられる旨の表示を付した食品組成物

(iv) 鉄を付加する作用を有することを特徴とし、鉄を付加するために用いられる旨の表示を付した食品組成物

(v) 体内の鉄含量を正常に保つ作用を有することを特徴とし、体内の鉄含量を正常に保っために用いられる旨の表示を付した食品組成物

(vi) 体内の鉄不足を解消又は軽減する作用を有することを特徴とし、体内の鉄不足を解消又は軽減するために用いられる旨の表示を付した食品組成物

項 21. シデロフォアと 3価鉄イオンとを含む組成物をヒトに投与する鉄補給方法。

[0031] 項 22. シデロフォアと 3価鉄イオンとを、キレート錯体に換算して 1日当たり 20— 1

70mg投与する項 21に記載の鉄補給方法。

[0032] 項 23. シデロフォアと 3価鉄イオンとを含む組成物をヒトに投与する鉄欠乏性貧血の予防又は治療方法。

[0033] 項 24. シデロフォアと 3価鉄イオンとを、キレート錯体に換算して 1日当たり 20— 1

70mg投与する項 23に記載の鉄欠乏性貧血の予防又は治療方法。

[0034] 項 25. シデロフォアと 3価鉄イオンとを含む組成物を食品に添加する方法。

[0035] 項 26. シデロフォアと 3価鉄イオンとを含む組成物の鉄補給剤としての使用。

[0036] 項 27. シデロフォアと 3価鉄イオンとを含む組成物の鉄欠乏性貧血の予防又は治療剤としての使用。

[0037] 項 28. シデロフォアと 3価鉄イオンとを含む組成物の鉄補給用食品添加剤としての使用。

[0038] 項 29. シデロフォアと 3価鉄イオンとを含む組成物の鉄欠乏性貧血の予防又は改善用食品添加剤としての使用。

[0039] 項 30. シデロフォアと 3価鉄イオンと食品とを含む組成物の鉄補給用食品組成物としての使用。 [0040] 項 31. シデロフォアと 3価鉄イオンと食品とを含む組成物の鉄欠乏性貧血の予防又は改善用食品糸且成物としての使用。

発明の効果

[0041] 従来 2価鉄イオンの方が生体内への吸収率が高、と、われて、るが、本発明者により、シデロフォアの 3価鉄キレート錯体は、生体内に効率的に吸収されて、血清中の鉄濃度、血中ヘモグロビン濃度、及び肝臓中の貯蔵鉄濃度を増加させることが始めて見出された。

[0042] 従って、シデロフォアと 3価鉄イオンとを含む組成物は、鉄補給剤、又は鉄欠乏性貧血の予防若しくは治療剤のような医薬製剤として好適に使用できる。また、シデロフォアと 3価鉄イオンとを含む食品組成物は、鉄を補給し、鉄欠乏性貧血を予防又は改善することができる。また、シデロフォアと 3価鉄イオンとを含む組成物は、食品に添加することにより、食品に、鉄補給作用や鉄欠乏性貧血の予防又は改善作用を与えることができる。

[0043] この鉄キレート錯体は、清酒や酒粕のような麹を用いた食品に元来含まれていることから、その安全性は歴史的に証明されている。また後述するように、肝機能'腎機能、体重増加量、摂食量などを低下させず、生体に悪影響を及ぼさないことが判明した。従って、鉄欠乏による各種症状の改善又は治療のためのみならず、予防のために継続的に使用するのに適している。同様に、健常人が摂取する機能性食品又は特定保健用食品などとしても好適である。

[0044] また、シデロフォアの 3価鉄キレート錯体は、麹を用いた食品に元来含まれていることからも分力るように、強い味や臭いを有さないため、医薬品や食品の成分、特に食品添加物として使用し易い。

[0045] また、水に溶解し易、ため、シロップ剤のような剤型に成型し易ぐまた液状食品の添加物として使用し易い。また低 pHの溶液にも溶解し易いため、ドレッシングのような酸性液状食品にも添加できる。特に、鉄化合物のいくつかは pH=4以下の溶液中で沈殿を生じることがあるが、シデロフォアはこのような酸性溶液中でも高い水溶性を示すことが特長の一つである。

[0046] また、高温高圧処理に対して耐性を示し、高温高圧滅菌によっても変性しない又は変性し難いため、医薬品又は食品の成分として使用する場合に、加熱加圧滅菌できる。特に加圧処理に耐性を示すことから、殺菌条件の厳しいレトルト食品への添加剤としても利用できる。さらに、広い pH範囲で熱及び圧力に耐性を示すことから、医薬又は食品に添加する場合に、医薬又は食品の製造工程を制限せず、多様な製造ェ程が可能になる。

[0047] さらに、一般に配位子と金属イオンとが別個に存在するより錯体を形成する方が低エネルギー状態、即ち化学的に安定な状態になる。このことから、シデロフォアには鉄イオンが示す過酸化物生成反応の促進作用が見られない。 (Metal. Lons Biol . Syst. , Vol35, p37)このように、生体に有害な過酸ィ匕物生成を促進しない点でも、シデロフォアは食品や医薬品として利用価値が高、。

[0048] さらに、シデロフォアと 3価鉄イオンとのキレート錯体は、一般に鉄を不溶ィ匕させる食品成分として知られているフィチン酸やタンニン酸のような物質の存在下でも不溶ィ匕され難いことから、シデロフォア及び 3価鉄イオンはどのような食品に含まれる場合にも、鉄補給効果や鉄欠乏性貧血の予防又は治療効果が効率的に得られる。

発明を実施するための最良の形態

[0049] 以下、本発明を詳細に説明する。

(I)鉄補給剤'鉄欠乏件昝血の予防又は治療剤

本発明の鉄補給剤及び鉄欠乏性貧血の予防又は治療剤は、シデロフォアと 3価鉄イオンとを含み、特にこれを有効成分として含む。シデロフォアと 3価鉄イオンとは別々に含まれていてもよぐ又は、キレート錯体として含まれていてもよい。

シデロフォア

「シデ口フォア」には、 3価鉄イオンをキレート化できる化合物が含まれる。

[0050] シデロフォアの由来は特に限定されず、どのような生物に由来するものであってもよい。多くの微生物は、外界の鉄濃度が低いときに必須成分である鉄を効率的に取り込むためにシデロフォアを生産する。微生物は容易に増殖させることができるため、微生物を用いることによりシデロフォアを容易に大量生産することができる。この点で微生物に由来するシデロフォアが好ましい。さらに、シデロフォア合成酵素群をコードする遺伝子の組換えによりシデロフォアを多量に生産する宿主を容易に作製できる点でも、微生物に由来するシデ口フォアが好まし、。

[0051] 微生物由来のシデロフォアの種類は特に限定されない。例えば、シデロフォアと 3 価鉄イオンとのキレート錯体として、ェンテロバクチン、ビブリオバクチン、ァグロバタチン、アングイバタチンのようなカテコール類；コプロゲン、フェリクローム類、フエリオキサミン、 N, Ν' , Ν，，—トリァセチルフザリニン Cのようなヒドロキサメート類；及びリゾフェリンのようなポリカルボキシレート類などが挙げられる。

[0052] 特に、鉄キレート力の点で、ヒドロキサメート類 (ヒドロキサム酸を含むシデロフォア）が好ましい。その中でも安定性の点で、環状であるフェリクローム類がより好ましい。

[0053] フェリクローム類は、 3個のヒドロキサム酸を含む環状ペプチド化合物の総称であり、下記一般式 (1)で表される化合物を含む。

[0054] [化 1]

(^{1 )}

[0055] (式中、 R¹は水素原子、又はヒドロキシメチル基を示し; R²は水素原子、メチル基又はヒドロキシメチル基を示し; R³、 R⁴、 R⁵は、同一又は異なって、メチル基、 N⁵- (トランス —5—ヒドロキシー3—メチルペント— 2—エノィル）基、 N⁵—(シス— 5—ヒドロキシー3—メチルペント— 2 エノィル）基、又は N⁵ （トランス 4 カルボキシー 3—メチルペント— 2—ェノィル)基を示す。）

一般式（1)の化合物の中では、フェリクローム、ジグリシルフエリクローム、フェリタリシン、フェリクローム C、フェリクロシン、ァスペルクローム Dl、ァスペルクローム Bl、フエリブリン、フェリロジン、フェリクローム A、デス（ジセリルグリシル）フェリロジン（フェリロジンにおいて = Ser~Ser— Gly を除いた化合物）が好ましぐフエリクリシンが最も好ましい。

[0056] これらの化合物の一般式 (1)における官能基である R¹— R⁵を以下の表 1にまとめて 005

0057 あるァスペルギルス 'ォリゼは、清酒、味噌、醤油などの生産において使用されてきたため、ヒトは古く力もフェリクローム類を摂取してきた。従って、フェリクロームは、その安全性が歴史的に確認されている点で好ましい。麹菌が生産するフェリクローム類の中でもフエリクリシンは、ァスペルギルス 'ォリゼが比較的多量に生産するため、生産 '性がよい点で好ましい。

[0059] 本発明において、シデロフォアは、天然型シデロフォアの他、第二鉄のキレートイ匕作用を有する天然型シデロフォアの誘導体も使用できる。天然型シデロフォアの誘導体としては、ァセチル化、ニトロ化したものや、アミノ酸の一部が置換されたもの等が挙げられる。

[0060] シデロフォアは、生物から回収することにより製造できる。生物を鉄制限下で生育させると、鉄を含まないデフエリ体 (シデ口フォア）が生成される。このデフエリ体に鉄を加えることにより通常 3価鉄イオンをキレートイ匕した錯体となる。生物から回収されたシデロフォアは粗標品のままであってもよぐ精製されたものであってもよい。

[0061] シデロフォアの精製は、公知の精製方法、例えばイオン交換、疎水、ゲルろ過、ァフィ-ティのような各種クロマトグラフィー等により行えばよい。例えば、糸状菌からシデロフォアを回収する場合は、液体培養して上清中に生産されたものを回収してもよく、固体培養して固体培養物力水又は緩衝液を用いて抽出した抽出液から回収してもよ!ヽ。 Vヽずれにしても本発明の鉄補給剤及び鉄欠乏性貧血の予防又は治療剤には、例えば生物由来の夾雑物が含まれる場合がある。

[0062] またシデロフォアは、市販品を購入することもできる。また、これらのシデロフォアの混合物であってもよい。

フリクリシン

フエリクリシンを構成する配位子であるデフエリフエリクリシンは、麹造り (固体培養）においてァスペルギルス.ォリゼが多量に生産することが知られているフェリクローム類の 1種である。ァスペルギルス 'ォリゼが生産するフェリクローム類の殆どがデフエリフエリクリシンである。デフエリフエリクリシンは 3価鉄イオンをキレートイ匕してフエリクリシンになる。

[0063] デフエリフエリクリシンは、例えば以下の方法でァスペルギルス 'ォリゼから回収することができる。即ち、ァスペルギルス 'ォリゼを培養する培地として、例えばポテトデキストロース培地（二ッスィ社)または最少培地（2%グルコース（又はスターチ）、 0. 3% NaNO、 0. 2%KC1、 0. 1%K HPO、 0. 05%MgSO、 pH6. 0)等を使用できる

3 2 4 4

。培地は、固体培地でも液体培地でもよいが、デフエリフエリクリシンを回収し易い点で、液体培地を使用することが好ましい。また、米麹のような固体培地も、そこからデフェリフエリクリシンを回収、精製することなぐそのまま食品糸且成物に使用できる点で好ましい。

[0064] 培養温度は、ァスペルギルス *ォリゼの生育可能温度範囲であればよぐ例えば 25 一 42°C程度が挙げられる。培養時間は、その他の条件によって異なる力通常 2— 7 日間程度とすればよい。

[0065] 培養終了後、菌体をろ過後、培養液力もフエリクリシンを回収する。さらに、この培養上清を、公知のタンパク質精製方法、例えばイオン交換、疎水、ゲルろ過、了フィニティなどの各種クロマトグラフィーに供することにより精製デフエリフエリクリシンが得られる。

3 鉄イオン

シデロフォア (デフエリ体）と 3価鉄イオンとが混合されることにより、通常、速やかにキレート錯体が生成する。本発明の鉄補給剤又は鉄欠乏性貧血の予防若しくは治療剤が投与されると、 3価鉄イオンは、シデロフォアとのキレート錯体の形態で、血中ヘモグロビン濃度、血清中鉄濃度、及び肝臓中鉄濃度を効果的に向上させる。

[0066] 鉄補給剤及び鉄欠乏性貧血の予防又は治療剤中に含まれるシデロフォアと 3価鉄イオンとの比率は、モル比で、通常 1一 5 : 1程度が好ましぐ 1一 2 : 1程度がより好ましい。シデロフォアと 3価鉄イオンとは同モル程度含まれることが通常最も好ましい。

告去

本発明の鉄補給剤及び鉄欠乏性貧血の予防又は治療剤は、シデロフォアと 3価鉄イオンとを混合すること、又は、組み合わせることにより製造できる。

腿

本発明の鉄補給剤及び鉄欠乏性貧血の予防又は治療剤において、シデロフォア及び 3価鉄イオン、好ましくはこれらのキレート錯体は、薬学的に許容される各種担体 (賦形剤、結合剤、崩壊剤、潤沢剤、付湿剤等が含まれる）と配合して、適当な製剤とされる。また、この製剤には慣用の添加剤が含まれていてよい。

[0067] 製剤形態は、特に限定されず、例えば錠剤、丸剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、シ口ップ剤等の経口投与剤；注射剤、点滴剤、外用剤、座剤等の非経口投与剤などの各種製剤形態を挙げることができる。経口投与剤の方が、非経口投与剤に比べて患者への負担が小さいために、使用し易い。この点、シデロフォア及び 3価鉄イオンは、これらを組み合わせて経口投与する場合に、効果的に血清中鉄濃度、血中鉄濃度、及び肝臓中貯蔵鉄濃度などを増カロさせることができるため、経口投与剤の形態で好適に使用できる。

[0068] 賦形剤としては、公知のものを広く使用でき、例えば、乳糖、ショ糖、ブドウ糖等の各種の糖類、バレイショデンプン、コムギデンプン、トウモロコシデンプン等の各種デンプン類、結晶セルロース等の各種セルロース類、無水リン酸水素カルシウム、炭酸カルシウム等の各種無機塩類等が挙げられる。

[0069] 結合剤としては、公知のものを広く使用でき、例えば、結晶セルロース、プルラン、アラビアゴム、アルギン酸ナトリウム、ポリビュルピロリドン、マクロゴール等が挙げられる。

[0070] 崩壊剤としては、公知のものを広く使用でき、例えば、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルスターチ、デンプン、アルギン酸ナトリウム等が挙げられる。

[0071] 潤沢剤としては、ステアリン酸マグネシウム、タルク、硬化油などが挙げられる。

[0072] 付湿剤としては、公知のものを広く使用でき、例えば、ココナッツ油、ォリーブ油、ゴマ油、落花生油、大豆リン脂質、グリセリン、ソルビトールなどが挙げられる。

[0073] 製剤中のシデロフォア及び 3価鉄イオンの含有量は、シデロフォアの種類、投与経路、投与対象又は患者の年齢、体重、症状等によって異なり一概に規定できないが、 3価鉄キレート錯体の形態での 1日投与量が通常 20— 170mg程度、より好ましくは 40— 80mg程度になる量とすればよい。 1日 1回投与する場合は、 1製剤中にこの量が含まれていればよぐ 1日 3回投与する場合は、 1製剤中にこの 3分の 1量が含まれていればよい。 [0074] また、錠剤、丸剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤のような固形製剤の場合は、製剤中にシデロフォアと 3価鉄とがキレート錯体に換算して 5— 30重量％程度含まれていればよい。また、シロップ剤のような液体製剤の場合は、シデロフォアと 3価鉄とがキレート錯体に換算して 0. 2— 1重量％程度含まれていればよい。また、注射剤、点滴剤の場合は、シデロフォアと 3価鉄とがキレート錯体に換算して 0. 4— 2重量％程度含まれていればよい。外用剤の場合は、シデロフォアと 3価鉄とがキレート錯体に換算して 1一 10重量％程度含まれていればよい。座剤の場合は、シデロフォアと 3価鉄とがキレート錯体に換算して 2— 20重量⁰ /₀程度含まれていればよい。上記の含有量の範囲であれば、鉄補給効果、又は鉄欠乏性貧血の予防又は治療効果が十分に得られるとともに、副作用が現れることがない。

[0075] シデロフォアは高温 (例えば 120°C程度）高圧 (例えば 200kPa程度)処理によっても変性しない又は変性し難いことから、医薬組成物の成分として用いる場合に、加熱加圧滅菌できるという利点を有する。またシデロフォアは、従来麹を用いた食品に含まれていることから、その安全性が歴史的に確認されており、医薬組成物の成分として使用する場合に副作用が生じない又は適性用量では副作用が生じない。本発明の食品添加剤は、シデロフォアと 3価鉄イオンとを含む添加剤である。これらはキレート錯体の形態で含まれていてもよい。この添加剤は、食品に、鉄補給作用、又は鉄欠乏性貧血の予防若しくは改善作用を与えるための添加剤として好適に使用できる。

[0076] 食品添加剤には、シデロフォア及び 3価鉄イオンの他に、糖類、デンプン類、セル口ース、ステアリン酸マグネシウム、植物油などの担体や、添加剤が含まれていてもよい。食品添加剤中に担体や添加剤が含まれる場合のシデロフォア及び 3価鉄イオンの含有量は、キレート錯体に換算して、固形製剤の場合は 0. 4— 4重量％程度とすることができ、液体製剤の場合は 0. 04-0. 4重量％程度とすることができる。シデロフォァと 3価鉄イオンとの好ましい比率は、医薬製剤について説明した通りである。

[0077] 食品添加剤の剤形は、特に限定されな!、が、例えば、粉状、顆粒状、液体状のような剤形とすることができる。 n) 糸且

本発明の食品組成物は、シデロフォアと 3価鉄イオンとを、好ましくはキレート錯体として含む組成物である。

[0078] この食品組成物は、鉄補給 (言、換えれば、鉄補助、鉄強化、鉄付加、体内鉄含量を正常に保つこと、体内の鉄不足の解消又は軽減)作用や、鉄欠乏性貧血の予防又は改善作用を有することから、これらの目的で用いられる旨の表示を付した食品組成物とすることができる。この食品組成物は、機能性食品、又は特定保健用食品などとして好適に使用できる。この場合、上記錯体は有効成分として含まれている。

[0079] シデロフォアの 3価鉄錯体は従来清酒に含まれている成分であり、食品の風味を損ねるような味や匂いを有さない。従って、食品の種類は特に限定されない。例えば、飴、ガム、ケーキ、パイ、クッキー、クラッカー、ゼリー、チョコレート、プディング、アイスクリーム、ポテトチップス、羊羹、煎餅、饅頭、中華饅頭のような菓子;酒類、茶類、コ一ヒー類、スポーツドリンク類、清涼飲料水、スープ、乳飲料のような飲料;ヨーグルト、バター、チーズのような乳製品；ノヽム、ソーセージ、蒲鋅、竹輪のような練り物；ソース、ドレッシング、マヨネーズ、醤油、味噌、酢、味醒、トマト力卩ェ品（ケチャップ、トマトペースト、トマトピューレ）、カレールゥ、酒粕、顆粒だしのような調味料;ふりかけ、漬物、佃煮、塩昆布のような常備惣菜類;惣菜;麵、米飯、粥のような主食類などが挙げられる。

[0080] シデロフォアは、高、水溶性を有して!/、るため、飲料や、ソース、ドレッシング、醤油、酢、味 »のような液状調味料のような液状食品が好ましぐ酒類、茶類、コーヒー類、スポーツドリンク類、清涼飲料水、乳飲料、及びスープのような飲料がより好ましい。最も好ましいのは、酒類、茶類、コーヒー類、スポーツドリンク類、及び清涼飲料水である。また、鉄化合物の水溶性が低くなることがある低 ρΗ条件下でも高い水溶性を示すため、マヨネーズやドレッシングのような液状酸性食品の添加剤としても好適に使用できるという利点がある。また前述したように高温高圧処理に耐えるため、本発明の鉄補給剤を添加した食品の加熱加圧滅菌を行えるとともに、レトルト処理のような特殊な製造工程を経ることもできる。さらにシデロフォアは、従来麹を用いた食品に含まれていることから、その安全性が歴史的に確認されている点でも、食品添加物として好適である。

[0081] 食品組成物中のシデロフォア及び 3価鉄イオンの含有量は、シデロフォアの種類、投与対象又は患者の年齢、体重、症状等によって異なり一概に規定できないが、キレート錯体の形態での 1日摂取量力 20— 170mg程度、特に 40— 80mg程度になる量とすればよい。

[0082] また、食品中のシデロフォア及び 3価鉄イオンの濃度は、食品の種類などによって異なるが、固体状食品の場合は、キレート錯体に換算して 0. 1— 5mgZg程度が好ましく、 0. 2— 3mgZg程度がより好ましぐ 0. 25- 1. 5mgZg程度がさらにより好ましい。液状食品の場合は、キレート錯体に換算して 0. 05— 10mg/ml程度が好ましぐ 0. 1— 5mgZml程度がより好ましぐ 0. 2— lmgZml程度がさらに好ましい。食品の形態によって異なる力一般的な固形状食品の 1回の摂取量は 10— 50g程度であり、液体形状の食品の 1回摂取量は 50ml— 500ml程度であることから、上記の摂取量で 1日に必要な鉄イオンを補給することができる。上記範囲であれば、十分な鉄補給効果、又は鉄欠乏性貧血の予防若しくは改善効果が得られるとともに、鉄過剰症になる恐れがない。

[0083] 液体状食品の中でも、酒類、特に日本酒にシデロフォア及び 3価鉄イオンが上記比率で含まれることにより、鉄欠乏性貧血に有効であり、かつ副作用を生じず、さらに飲むときに不快感を抱かせることがない。

[0084] 本発明の食品組成物には、食品組成物の調製に当たり慣用されている各種添カロ剤を添加配合することができる。添加剤としては、例えば、安定化剤、 pH調整剤、糖類、甘味料、香料、各種ビタミン類、ミネラル類、抗酸化剤、賦形剤、可溶化剤、結合剤、滑沢剤、懸濁剤、湿潤剤、皮膜形成物質、矯味剤、矯臭剤、着色料、保存剤等を f列示することができる。

[0085] また、本発明の食品組成物は、鉄補給のため、又は、鉄欠乏性貧血の予防若しくは改善のための栄養補助食品、即ちサプリメントとしても好適に使用できる。この場合の食品組成物中には、シデロフォア及び 3価鉄イオンの他に、サプリメントの担体として公知の成分が含まれていればよい。このような担体として、例えば糖類、デンプン類、セルロース、ステアリン酸マグネシウム、植物油が挙げられる。 [0086] サプリメント中のシデロフォア及び 3価鉄イオンの含有量は、キレート錯体に換算して、 30mg— 300mg程度であることが好ましぐ 60mg— 200mg程度であることがより好ましい。上記範囲であれば、十分に鉄補給効果や鉄欠乏性貧血の予防若しくは改善効果が得られるとともに、多すぎて副作用が現れることがない。

[0087] サプリメントの形状は特に限定されないが、例えば、錠剤状、粉状、顆粒状などの形状が挙げられる。

ν) ネ合去 '鉄昝血のチ防、己 Xは'冶去

シデロフォアの 3価鉄キレート錯体は、生体内への鉄の吸収率が高いため、シデロフォアと 3価鉄イオンとをヒトに投与することにより、鉄を補給し、鉄の欠乏による、貧血

、運動'学習能力低下、免疫力低下等を効果的に予防、改善又は治療することができる。特に、鉄欠乏性貧血を効果的に予防、改善又は治療できる。

[0088] 鉄補給剤及び鉄補給用組成物の投与対象は、鉄欠乏による症状が現れているヒト又は健常人のいずれであってもよい。また、鉄が欠乏し易い成長期の子供や成人女性も好適な投与対象である。

[0089] 投与量は、シデロフォアの種類、投与対象の症状、年齢、体重などによって異なる力キレート錯体の形態での 1日投与量が 20— 170mg程度、特に 40— 80mg程度となる量を 1日 1回又は数回に分けて投与すればよい。

[0090] 投与経路は、経口又は非経口の、ずれであってもよ!/、が、経口投与する場合にも効果的に血清中鉄濃度を向上させることができることから、簡便な経口投与が好ましい。

実施例

以下、本発明を実施例及び試験例を示してより詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されない。

フエリクリシンの調製

米麹を水で抽出した抽出液 (デフエリフエリクリシン含有）に、デフエリフエリクリシンと等モルの塩ィ匕第二鉄を加えてフエリクリシン溶液を作製した後、限外濾過膜を用いて分子量 5000以上のタンパク質などの高分子を除去し、ろ液をカラムクロマトにより濃縮した。フエリクリシンは 430nmに極大吸収を示す性質が知られている (Agr. Biol. Chem. , Vol. 31, No. 12, pl482)ため、上記の手法で調製された溶液を HPLC 分析し、 430nmの吸収を示す物質の大半がフエリクリシンであることを確認した。

[0091] ラットに与えた飼料の鉄濃度はフエリクリシン、水溶性ヘム鉄、クェン酸第二鉄すベて HPLCでなく原子吸光により 35ppmに調製した。フエリクリシンの HPLC分析は、 4 30nmに吸収を示す物質がほとんどフエリクリシンであったことを示す定性分析である

実施例 1

[0092] 4週齢の SD系雄ラット 15匹に、鉄欠乏飼料を 35日間自由摂取させて、血液中の平均ヘモグロビン値が 6. 5g/dほで低下した鉄欠乏性貧血ラットを作製した。また、対照群の 4週齢の SD系雄ラット 5匹には鉄含有飼料 1を与えた。対照群に与えた鉄含有飼料 1の鉄源は通常ラットの飼育飼料に使用されているクェン酸第二鉄であり、その鉄含量はラットの生育に最適とされている 35ppmである。

[0093] [表 2] 含有成分鉄欠乏飼料（%) 鉄含有飼料 1 )

コーンスターチ 33 33

カゼイン 22 22

セルロースパウダー - 5 5

シユークロ一ス 30 30

コーンオイル 5 5

塩類混合 1 4 0

塩類比口 2 0 4

ビタミン混合 1 1

鉄含量 lppm 35ppm

[0094] 上記の表 2における塩類混合 1及び塩類混合 2は、ハーパーミネラル混合に準じて調製したものであり、以下の表 3に組成を示す混合物である。

[0095] [表 3] 含有成分塩類混合 1 塩類; 2

aoog中含量 (g)) (lOOg中含量 (g))

CaHP0₄ · 2H₂0 0.43 0.43

H₂P0₄ 34.31 34.31

NaCl 25.06 25.06

Fe - citrate (Fel7%) 0 0.45

MgS0₄ 4.876 4.876

ZnCl₂ 0.02 0.02

MnS0₄ · 4 5H₂0 0.121 0.121

CuS0₄ · 5H₂0 0.156 0.156

KI 0.0005 0.0005

[0096] また表 2におけるビタミン混合は、 AIN-76ビタミン (コリン添加)に準じて調製したものであり、下記の表 4の組成を有する混合物である。

[0097] [表 4] 含有成分 100g中含量

ビタミン Α·アセテート 40,000 IU

ビタミン D₃ 10,000 IU

ビタミン Ε·ァセテ一卜 500 mg

ビタミン Κ₃ 0.5 mg

ビタミン Β,·塩酸塩 60 mg

ビタミン Β₂ 60 mg

ビタミン Β₆·塩酸塩 70 mg

ビタミン Β₁₂ 0.1 mg

D -ピオチン 2 mg

葉酸 20 mg

パントテン酸カルシウム 160 mg

ニコチン酸 300 mg

重酒石酸コリン 20 g

セルロースパウダーで 100gに：整る

[0098] 次いで、 15匹の鉄欠乏性貧血のラットを 3群に分け、それぞれ、以下の鉄含有飼料 1 2及び 3を 3週間自由摂食させた。鉄含有飼料 1は鉄源としてクェン酸第二鉄を含み、鉄含有飼料 2は鉄源として水溶性ヘム鉄を含み、鉄含有飼料 3は鉄源としてフエリクリシンを含む。鉄含有飼料 1 2及び 3の組成を以下の表 5に示す。なお、鉄含有飼料 1は表 2に示したものと同じである [0099] [表 5] 含有成分鉄含有飼料 1 (« 鉄含有飼料 2 (%) 鉄含有飼料 3 (%) コーンスターチ 33 33 カゼイン 22 22 セルロースパウダ' 5 5 シュ一クロース 30 30 コーンオイル 5 5 塩類混合 2 0 0 塩類混合 3 4 0 塩類混合 4 0 4 ビタミン混合

35ρρπι 35ppm 35ppm

[0100] 表 5における塩類混合 2 3及び 4は以下の表 6に組成を示す混合物である。また表

5におけるビタミン混合は上記表 4に組成を示す混合物である。

[0101] [表 6] 含有成分塩類口 2 塩類混合 3 塩^ kil 1

(lOOg中含量 (g)) (lOOg中含量 (g)) (lOOg中含： (g))

Ca则 ₄.2H₂0 0.43 0. 43 0. 43

H₂P0₄ 34.31 34. 31 34. 31

NaCl 25.06 25. 06 25. 06

Fe - citrate (Fe 17¾) 0.45 0 0

Heme (Fe 1¾) 0 10. 1 0

Ferrichrysin(Fe 1%) 0 0 11. 5

MgS0₄ 4.876 4. 876 4. 876

ZnCl₂ 0.02 0. 02 0. 02

MnSO, .4 5H₂0 0.121 0. 121 0. 121

CuS0₍ · 5¾0 0.156 0. 156 0. 156

KI 0.0005 0. 0005 0. 0005

CaC0₃ 29.29 29. 29 29. 29

(NH₄)₆Mo0₂₄ · 4H₂0 0.0025 0. 0025 0. 0025

セルロースパウダーで 100gに調整する

[0102] 血中ヘモグロビン濃度の測定

鉄欠乏性貧血にした後に、それぞれ鉄含有飼料 1 (タエン酸第二鉄）、鉄含有飼料 2 (ヘム鉄)及び鉄含有飼料 3 (フエリクリシン）を投与した各群のラットにつ、て、飼料の投与前と投与 3週間後に採血をそれぞれ行い、常法により血液中のヘモグロビン濃度を測定した。また、当初から鉄含有飼料 1(クェン酸第二鉄)を投与した対照群ラットについては、鉄含有飼料 1を投与した。結果を以下の表 7に示す。表 7中の値は、各群 5匹のヘモグロビン濃度の平均値士標準偏差値を示す。

[0103] [表 7] 鉄含有飼料投与前鉄含有飼料投与後

(g/dl) (g/dl) クェン酸第二鉄摂取群 5.7±0.7 13.3±2.3 水溶性ヘム鉄摂取群 6.1±1.0 8.0±0.9 フエリクリシン摂取群 6.4±0.9 14.3±0·3 対照群 14.8±0.6 14.2±0.1

[0104] 表 7から明らかなように、鉄源としてクェン酸第二鉄又はフエリクリシンを含む飼料を摂食した群では、対照群と同じレベルにまでヘモグロビン値が増加した。これに対して、水溶性ヘム鉄を摂取した群では血中ヘモグロビン濃度の回復は認められず、鉄含有飼料摂取後には、ヘム鉄摂取群とフエリクリシン摂取群の間には危険率 5%の水準で有意差が認められた。このように、鉄欠乏性貧血症の第 3ステップであるへモグロビン合成能の低下に対して、フエリクリシンを摂取した群ではクェン酸第二鉄と同等の改善効果が認められ、またヘム鉄に較べて有意に優れた改善効果が認められた。

Φ ^§ の沏 I

また、鉄含有飼料投与後に各群ラットから全採血した血液より血清を調整し、常法に従い血清鉄濃度を測定した。結果を以下の表 8に示す。表 8中の値は、各群 5匹の血清鉄濃度の平均値士標準偏差値である。

[0105] [表 8] 鉄含有飼料投与後

g/dl)

クェン酸第二鉄摂取群 131.5±25.7

水溶性ヘム鉄摂取群 50.4±6.6

フエリクリシン摂取群 116.7土 24.1

対照群 106.2±4.7 表 8から明らかなように、鉄源としてクェン酸第二鉄またはフエリクリシンを含む飼料を摂取した群では、対照群と同じレベルにまで血清鉄濃度が増加した。これに対して、水溶性ヘム鉄を摂取した群では著しく血清鉄が減少しており対照群と比較して危険率 1%の水準で有意差が認められた。このように、鉄欠乏性貧血症の第 2ステップである循環鉄濃度の低下に対して、フエリクリシンを摂取した群ではクェン酸第二鉄と同等の改善効果が認められ、またヘム鉄に較べて有意に優れた改善効果が認められた。

月刊蔵 φ ^§ の沏 I

鉄欠乏性貧血にした後に、それぞれ鉄含有飼料 1 (タエン酸第二鉄）、鉄含有飼料 2 (ヘム鉄)及び鉄含有飼料 3 (フエリクリシン）を投与した群のラット、及び、当初から鉄含有飼料 1 (クェン酸第二鉄)を摂食させた対照群ラットについて、鉄含有飼料の 3 週間の摂食終了後時に肝臓を脱血灌流して摘出し、重量を測定した後、凍結乾燥を行った。また、乾燥肝臓を灰化し原子吸光に供して鉄濃度を測定した。さらに、肝臓の水分含量を計算し、乾燥肝臓における鉄濃度と肝臓の水分含量とから生体内の肝臓に貯蔵されている鉄濃度を求めた。結果を以下の表 9に示す。表 9中の値は、各群 5匹のラットについての肝臓鉄濃度の平均値士標準偏差である。

[0107] [表 9] 肝臓鉄濃度 (卯 m)

クェン酸第二鉄摂取群 21. 6 ± 3. 1

水溶性ヘム鉄摂取群 6. 2士 1. 3

フエリクリシン摂取群 39. 3 ± 7. 6

対照群 63. 3 ± 10. 1

[0108] 表 9から明らかなように、鉄欠乏飼料を摂食させた群では重度の鉄欠乏性貧血を発症させたため、どの鉄摂取群も対照群と比較して肝臓に貯蔵されて！ヽる鉄量は減少していた。しかし、各群間に危険率 1%の有意差が認められ、鉄源の違いによる貯蔵鉄改善効果の優劣が明らかとなった。即ち、貧血症の第 3ステップである貯蔵鉄濃度の低下に対して、フエリクリシンを摂取した群はクェン酸第二鉄摂取群および水溶性ヘム鉄摂取群と比較して有意に優れた改善効果が認められた。

肝臓機能'腎臓機能に与える影響の枪討

鉄欠乏性貧血にした後に、それぞれ鉄含有飼料 1 (タエン酸第二鉄）、鉄含有飼料 2 (ヘム鉄)及び鉄含有飼料 3 (フエリクリシン）を投与した各群のラット、及び、当初から鉄含有飼料 1 (クェン酸第二鉄)を摂食させた対照群ラットについて、常法に従い血清中のタンパク質濃度、 ALT (ァラニンアミノトランスフェラーゼ)濃度、 AST (ァスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ)濃度、クレアチュン濃度を測定した。結果を以下の表 10に示す。表 10中の値は、各群 5匹のラットについての平均値士標準偏差である。 aを付した数値と bを付した数値との間には有意差があることを示す。

[0109] [表 10] 血清タンパク質 ALT(Karmen) AST(Karmen) クレアチニン ung/ml) (mg/dl) クェン酸第二鉄摂取群 69·5±3·9 22.0±3.5 96.0±14.0 ^; ³ 0.57±0.00 水溶性ヘム鉄摂取群 67·0±1· 8 23·7±3.2 90·3±8.5 0.75±0.11 フエリクリシン摂取群 67.6±4.1 17.7±2.3^a 72.3±3.2 ^b 0.63±0.06 対照群 72·8±5.8 29.3±4.2^b 69.0±5.2 ^b 0.71±0.09

[0110] 表 10から明らかなように、いずれの群においても、血清分析値は正常範囲内にあり

、肝機能および腎機能の異常を示唆する結果は認められなかった。このことから、鉄源の違いによる臓器機能への影響はな力つたものと考えられる。鉄源としてフェリタリシンを摂取した群は全ての検査項目において良好な値を示し、フエリクリシンを摂取することで生体に有害な副作用が生じないことが明らかとなった。

体重増加量 ·摂食量に及ぼす影響の枪討

鉄欠乏性貧血にした後に、それぞれ鉄含有飼料 1 (タエン酸第二鉄）、鉄含有飼料 2 (ヘム鉄)及び鉄含有飼料 3 (フエリクリシン）を投与した各群のラット、及び、当初から鉄含有飼料 1(クェン酸第二鉄)を摂食させた対照群ラットについて、 1匹あたりの体重増加量および摂餌量を以下の表 11に示す。体重増加量は各群 5匹の平均値士標準偏差である。

[0111] [表 11] 体重増加量平均摂餌量

_ — (g/3週間）（g/3週間)

クェン酸第二鉄摂取群 79.8±9.2 384.8

水溶性ヘム鉄摂取群 55.3±14.9 328.3

フエリクリシン摂取群 70.1 ±8.3 366.3

対照群 65.3±19.2 336.2

[0112] 表 11から明らかなように、水溶性ヘム鉄を摂取した群は体重増加量が低下したが、対照群に対して有意差は認められな力つた。水溶性ヘム鉄摂取群では、貧血による体重増加量の抑制および摂餌量の減少が発生したと考えられる。一方、クェン酸第二鉄摂取群およびフエリクリシン摂取群では、対照群よりも体重増加量および摂餌量が増大していた。このことから、フエリクリシン摂取により、体重増加の抑制および摂食障害などの生体の生育に及ぼす有害な副作用は発生しな、と考えられる。

実施例 2

[0113] フエリクリシンの水への溶解件の枪討

フエリクリシンの溶解性を他の鉄化合物と比較した。鉄化合物としては実施例 1で用いた水溶性ヘム鉄、クェン酸第二鉄及びフエリクリシンを用いた。これらの鉄化合物の各 0. lgをそれぞれ pH = 2および pH = 7の緩衝液 lmlに溶解し 37°Cで 90分間保温した。 pH = 2の緩衝液としてはグリシン-塩酸緩衝液を使用し、 pH = 7の緩衝液としてはリン酸緩衝液を使用した。各緩衝液中の緩衝剤の濃度は 0. 1モル ZLとした。各緩衝液を保温後、遠心分離し、沈殿の有無を目視で確認した。また、上清の鉄濃なななあああ

度を原子吸光法により測定した。結果を以下の表 12に示しししりりりす。

[0114] [表 12]

~ 鉄濃度（ppm) ~~沈殿の有無

水溶性ヘム鉄 P H2. 0 N. D.

P H7. 0 468

クェン酸第二鉄 P H2. 0 600

P H7. 0 400

フエリクリシン ρ Η2· 0 3800

Ρ Η7. 0 _ 3750

[0115] 表 12から明らかなように、フエリクリシンは極めて水溶性が高力つた。鉄化合物の中には酸性条件下で沈殿を生じるものがあることが知られて、る。また上記の結果から明らかなように、塩ィ匕第二鉄及びヘム鉄も酸性条件下で沈殿を生じている。これに対して、フエリクリシンは、酸性条件下でも高い水溶性を示した。フエリクリシンの鉄は 3 価である力錯体となることにより高い水溶性を獲得したと考えられる。これにより、生体内で利用しやすい性質となった。

実施例 3

[0116] フエリクリシンの熱安定件 ·_ΏΗ安定件の檢討フエリクリシンは 430nmに吸収極大を示すことが知られている。この特徴を利用してフエリクリシンの _PHおよび熱安定性を試験した。

[0117] 上述したようにして米麹抽出液力も調製したフエリクリシンを 2.5mgZmlとなるように超純水に溶解した。さらに以下の各緩衝液を用いてフエリクリシン濃度が 0. 25mg/ mlとなるように希釈した。 pH = 2及び 3の各緩衝液としてはグリシン-塩酸緩衝液を使用し、 pH= 4及び 5の各緩衝液は酢酸緩衝液を使用し、 pH = 6及び 7の緩衝液としてはリン酸緩衝液を使用し、 pH = 8の緩衝液としてはトリス-塩酸緩衝液を使用し、 p H = 9及び 10の緩衝液としてはグリシン-水酸ィ匕ナトリウム緩衝液を使用した。各緩衝液中の緩衝剤の濃度は 0. 1モル ZLとした。

[0118] 各フエリクリシン溶液をネジ付き試験管に入れて試験管を密閉した後、温度 120°C 、圧力 200kPaの条件で 20分間加圧加熱殺菌した。加熱加圧殺菌の前後で、各溶液の 430nmにおける吸光度を測定した。結果を以下の表 13に示す。

[0119] [表 13] H 430nmにおける吸光度

加熱加圧前加熱加圧後

2. 0 0. 709 0. 366

3. 0 0. 742 0. 721

4. 0 0. 738 0. 743

5. 0 0. 732 0. 748

6. 0 0. 743 0. 746

7. 0 0. 764 0. 774

8. 0 0. 758 0. 747

9. 0 0. 765 0. 767

10. 0 0. 769 0. 772

[0120] 表 13から明らかなように、フエリクリシン溶液中のフエリクリシン濃度は pH = 3. 0-1 0. 0の広い pH範囲において高圧加熱殺菌後も低下しな力つた。このことから、フェリクリシンは、 pH = 3. 0— 10. 0の広い pH範囲において高い熱安定性を有することが分かる。

実施例 4

[0121] フエリクリシンの食品成分の反件の枪討鉄化合物は食品中のさまざまな成分と結合して不溶化される性質を持ち、これが鉄の吸収率を低下させる原因のひとつといわれている。代表的な鉄吸収阻害成分として知られているタンニン酸、及びフィチン酸とフエリクリシンとの反応性を試験し、これらの鉄吸収阻害成分と他の鉄化合物との反応性と比較した。

[0122] 上述の方法で調製したフエリクリシン、クェン酸第 2鉄およびクェン酸第 1鉄ナトリウムをそれぞれ鉄として lOmgZmlとなるように超純水に溶解した。一方、タンニン酸、及びフィチン酸の 0.6%水溶液を作成した。この水溶液の pHを塩酸あるいは水酸ィ匕ナトリウムで 2.0、 4.0、 6.0、及び 8.0に調整したものをそれぞれ調製した。

[0123] 上記鉄化合物溶液とタンニン酸水溶液ある、はフィチン酸水溶液とを 1： 9の体積比で混合し 37°Cで 3時間保温することにより、鉄化合物とこれらの鉄吸収阻害成分とを反応させた。この液を 15000rpmで 5分間、遠心分離し、その上清を分画分子量 1 0000の膜を用いて限外ろ過した。ろ過液の鉄濃度を原子吸光法で測定した。反応液中の最初の鉄濃度（lmgZml)に対する、反応後の鉄濃度の割合を％で表示したものを以下の表 14に示す。

[0124] [表 14]

フィチン酸

pH 2.0 pH 4.0 pH 6.0 pH 8.0 クェン酸第 2鉄 10.8 22.6 31.2 16.2 クェン酸第 1鉄ナトリウム 15.5 55.3 23.7 33.1 フエリクリシン 85.7 100.6 101.8 100.3 タンニン酸

pH 2.0 pH 4.0 pH 6.0 pH 8.0 クェン酸第 2鉄 35.7 10.9 10.9 11.1 クェン酸第 1鉄ナトリウム 50.3 52.8 39.7 36.0 フエリクリシン 80.5 71.8 76.1 81.9 表 14から分力るように、鉄の不溶ィ匕に関係する上記 2成分とフエリクリシンンとの反応性は低ぐ鉄の高い溶解性が維持された。この現象は pH2.0から 8.0においてほぼ一定であり、他の鉄化合物と比較して有意に高い値であった。これはフエリクリシンが鉄を含む錯体であるため化学的安定性が非常に高ぐ他の食品成分と反応し難いことが寄与していると思われる。この結果は、フエリクリシンを鉄不溶ィ匕作用を持つ食品とともに摂取した場合においても、鉄が効率よく吸収されることを示唆するものである。

実施例 5

[0126] 洒街 (液体状食品)への ffi合量の檢討

清酒 100mlに、フエリク!；シンを、それぞれ lmg、 5mg、 10mg、 20mg、 50mg、 10 Omg、 200mg、 500mg、 lOOOmg添カ卩して鉄強化清酒を調製した。得られた鉄強ィ匕清酒中のフエリクリシン濃度は、 0. 01mg/ml、 0. 05mg/ml、 0. lmg/ml、 0 . 2mg/ ml、 0. 5mg/ ml、 lmg/ ml、 2mg/ ml、 5mgz ml、 lOmg/ mlで & >o。

[0127] 各鉄補強清酒について、 25人のパネラーにより官能試験を行った。結果を以下の表 15に示す。表 15中、 + + +は 20人以上のパネラーが美味しいと感じたことを示し、 + +は 7— 19人のパネラーが美味しいと感じたことを示し、 +は 1一 6人のパネラーが美味し、と感じたことを示し、—は美味し、と感じたパネラーカ^、な力つたことを示す。

[0128] [表 15]

[0129] 表 15から明らかなように、酒類にフリクリシンを lmgZml (0. 1重量％)以下、特に 0. 5mg/ml(0. 05重量⁰ /₀)以下、さらに特に 0. 2mgZml(0. 02重量⁰ /₀)以下の範囲で添加した場合に官能評価が良好であった。

実施例 6

[0130] 革早 (困形状食品)への西 R合量の檢討

クッキー 100gに、フエリク!;シンを、それぞれ 5mg、 10mg、 20mg、 50mg、 150mg 、 300mg、 500mg、 1000mg、 2000mg添加して鉄強ィ匕クッキーを調製した。得られた鉄強化クッキー中のフエリクリシン濃度は、 0. 05mgZg、 0. lmg/g, 0. 2mg Z g、 0. 5mgZ g、 1. 5mgZ g、 3. OmgZ g、 5. OmgZ g、 10mg/ g、 20mg/ gである。

[0131] 各鉄補強クッキーについて、 25人のパネラーにより官能試験を行った。結果を以下の表 16に示す。表 16中、 + + +は 20人以上のパネラーが美味しいと感じたことを示し、 + +は 7— 19人のパネラーが美味しいと感じたことを示し、 +は 1一 6人のパネラ一が美味し、と感じたことを示し、—は美味し、と感じたパネラーカ^、な力つたことを示す。

[0132] [表 16]

[0133] 表 16から明らかなように、クッキーにフエリクリシンを 3mg/g (0. 3重量％)以下、特に 1. 5mg/g (0. 15重量％)以下、さらに特に 0. 5mgZg (0.05重量％)以下の範囲で添加した場合に官能評価が良好であった。

^

以下に、本発明の食品組成物の処方例を示す。

<処方例 1 クッキー >

小麦粉 (薄力粉） 100g、ベーキングパウダー 2. 5g、食塩 1. 5g、フエリクリシン 200 mgを混合し、これにノター 40gとミルク 50gを加え、これをオーブンで 180°C、 10分間焼き上げ、鉄強化クッキーを得た。得られたクッキーには、フエリクリシンが 1. 5mg Zg含まれていた。

< 例 2 ゼリー >

ゼラチン 5g、ショ糖 20g、水 50gから膨潤ゼラチンを作る。プレーンヨーグルト 140g にフエリクリシン 160mgを加え、上記膨潤ゼラチンをカ卩えて冷やす。これを固めて鉄強化ゼリーを得た。得られたゼリーには、フエリクリシンが 0. 75mgZg含まれていた。

< 例 3 台 >

上白糖 500g、水飴 440gを少量の水に溶解し、さらにフエリクリシン 4gを添加して減圧下 130°Cで煮詰めた。その後、クェン酸 3. 5g、酒石酸 1. 5g、脱脂卵黄蛋白分解物 lgを添加した。これを冷却して鉄強化飴を得た。得られた飴には、フエリクリシンが

5mg/g含まれていた。

<処方例 4 アイスクリーム〉

牛乳 1200g、生クリーム 310g、上白糖 300g、脱脂粉乳 60g、脱脂卵黄蛋白分解物 lg、増粘安定剤 6g、フエリクリシン 800mgに水をカ卩えて全量 2000mlにして溶解した。これを 80°Cまで加熱した後、ホモミキサーで予備乳化し、引き続きホモゲナイズした。冷却し熟成させた後バニラエッセンス 2gを加えフリージングを行った。その後— 40°Cまで急冷して鉄強化アイスクリームを得た。得られたアイスクリームには、フエリクリシンが 0. 4mg/g含まれていた。糸寒天 7. 5gを溶力し、これに/ J、豆滴し館 660g、グラニュー糖 300g、水 550ml、フリクリシン 2gを混ぜて溶カゝして煮詰め、冷やして鉄強化羊羹を得た。得られた羊羹には、フエリクリシンが 2mg/g含まれていた。

<処方例 6 ヨーグルト >

20%脱脂乳を 120°Cで、 3秒間殺菌した後、ストレプトコッカス'サーモフィルス及びラクトバチルス 'カゼィの種菌を培養してヨーグルトベース 400gを得た。さら〖こ、砂糖 70g、ぺクチン 3g、フエリクリシン 800mgを水に溶解させ、水を加え全量を 600gとした。この溶液を 120°Cで、 3秒間殺菌してシロップを得た。上記のヨーグルトベースとシロップを混合し、香料を lg添加した後、均質ィ匕して、鉄強化ヨーグルトを得た。得られたヨーグルトには、フエリクリシンが 0. 8mg/g含まれていた。

<処方例 7 牛 , >

牛乳 100mlにフエリクリシン 40mgを入れてよく撹拌し、鉄強化牛乳を得た。得られた牛乳には、フエリクリシンが 0. 4mg/ml含まれていた。

<処方例 8 チョコレート >

カカオマス 25g、カカオバター 15g、全脂粉乳 15g、粉砂糖 30g、粉ミルク 15gとフエリクリシン 250mgを混和し、 45°Cで暖めた後に冷却し、鉄強化チョコレートを得た。得られたチョコレートには、フエリクリシンが 2. 5mgZg含まれていた。

<処方例 9 マヨネーズ > 卵黄 20gに食塩 2. 5g、蔗糖 1. 5g、マスタード 1. 5g、胡椒 0. lg、レモン汁 5g、フェリクリシン 3. 2gをカ卩え、これに酢 10gとサラダ油 160gとを加えてよく攪拌して鉄強化マヨネーズを得た。得られたマヨネーズには、フエリクリシンが 16mgZg含まれていた。

<処方例 10 ケチャップ >

トマト lkgを皮をむいてミキサーにかけ、加熱して煮詰めた後、すりおろしたタマネギ 10g、ニン-ク 3gを加え、さらに砂糖 10g、塩 2g、フエリクリシン 4. 8gを加える。弱火にして香辛料 (シナモンスティック、クローブ、胡椒、唐辛子） lg、酢を 30gカ卩え、一度加熱した後、冷まして鉄強化ケチャップを得た。得られたケチャップには、フエリクリシンが 16mgZg含まれていた。

く処方例 11 力レールゥ>

小麦粉 (薄力粉） 125g、バター 100g、カレー粉 20gとフエリクリシン 1. Ogに、少量の水をカ卩えて混和し、固めて鉄強化カレールゥを得た。得られたカレールゥには、フェリクリシン力 mg/g含まれて、た。

< 2 >

魚のすり身 100g、粉末マッシュポテト 10g、小麦粉 5g、卵白 50g、塩 2g、砂糖 0. 2 g、みりん 10g、フエリクリシン 1. 3gをカ卩え、これらを混ぜてペースト状にし、蒸し器で蒸して鉄強化蒲鋅を得た。得られた蒲鋅には、フエリクリシンが 7mgZg含まれていた

<処方例 13 佃煮 >

戻した昆布 25g、かつおだし 150ml、砂糖 15g、醤油 15g、酢 10g、フエリクリシン 4 OOmgを混合し、沸騰させてカゝら中火で煮詰めて鉄強化佃煮を得た。得られた佃煮には、フエリクリシンが 5mg/g含まれていた。

<処方例 14 ふりかけ >

いりごま 15g、味付けごま 20g、味付け削り節 10g、味付けかつお塩顆粒 10g、味付けのり顆粒 10g、フリクリシン 1. 6gをよく混合して、鉄強化ふりかけを得た。得られたふりかけには、フエリクリシンが 25mg/g含まれていた。

<処方例 15 来飯 > 白米 150g、水 220gとフエリクリシン 160mgを混合し、炊飯器で炊き上げ、鉄強化米飯を得た。得られた米飯には、フエリクリシンが 0. 5mg/g含まれていた。

<処方例 16 うどん ¾?>

水 400g、塩 50gを混合して塩を溶かし、これに小麦粉（中力粉） 1000g、フェリタリシン 1. 6gを混ぜ、よくこねた。固まつたらこれをよく伸ばし、 5mm幅に切った。これを 10分茹でて、その後冷やして鉄強化うどん麵を得た。得られたうどん麵にはフェリタリシンが 3mg/g含まれて!/、た。

<処方例 17 m>

清酒 100mlにフリクリシン 20mgを加え、よく撹拌して鉄強化清酒を得た。得られた清酒には、フエリクリシンが 0. 2mgZml含まれていた。

< 8 舗 >

焼酎 100mlにフエリクリシン 40mgを加え、よく撹拌して鉄強化焼酎を得た。得られた焼酎には、フエリクリシンが 0. 4mgZml含まれていた。

く処方例 19 ワイン >

ワイン 100mlにフエリクリシン 20mgを加え、よく撹拌して鉄強化ワインを得た。得られたワインには、フエリクリシンが 0. 2mg/ml含まれていた。

<処方例 20 ビール >

ビール 100mlにフエリクリシン 12mgをカ卩え、撹拌して鉄強化ビールを得た。得られたビールには、フエリクリシンが 0. 12mgZml含まれていた。

<処方例 21 ウィスキー >

ウィスキー 100mlにフエリクリシン lOOmgをカ卩え、よく撹拌して鉄強化ウィスキーを得た。得られたウィスキーには、フエリクリシンが lmgZml含まれていた。

<処方例 22 ブランデー >

ブランデー 100mlにフエリクリシン lOOmgをカ卩え、よく撹拌して鉄強化ブランデーを得た。得られたブランデーには、フエリクリシンが lmgZml含まれていた。

<処方例 23 スピリッツ >

スピリッツ 100mlにフエリクリシン lOOmgを加え、よく撹拌して鉄強ィ匕スピリッツを得た。得られたスピリッツには、フエリクリシンが lmg/ml含まれていた。 <処方例 24 リキュール >

リキュール 100mlにフエリクリシン lOOmgを加え、よく撹拌して鉄強化リキュールを得た。得られたリキュールには、フエリクリシンが lmgZml含まれていた。

<処方例 25 みりん >

みりん 100mlにフエリクリシン 400mgをカ卩え、よく撹拌して鉄強化みりんを得た。得られたみりんには、フエリクリシンが 4mgZml含まれていた。

<処方例 26 茶 >

お茶 100mlにフエリクリシン 40mgをカ卩え、よく撹拌して鉄強化茶を得た。得られた茶には、フエリクリシンが 0. 4mg/ml含まれていた。

<処方例 27 コーヒー >

コーヒー 100mlにフエリクリシン 40mgを加え、よく撹拌して鉄強化コーヒーを得た。得られたコーヒーには、フエリクリシンが 0. 4mg/ml含まれていた。

<処方 {列 28 スポーツドリンク〉

水 100ml、果糖 5g、ショ糖 2g、クェン酸 0. 3g、ナトリウム 20mg、カルシウム 2mg、カリウム 20mg、ァノレギ-ン 20mg、イソロイシン 10mg、ノリン 10mg、ロイシン 10mg 、ビタミン C100mg、 j8—力ロチン lmgにフエリクリシン 15mgをカロえ、よく撹拌して鉄強ィ匕スポーツドリンクを得た。得られたスポーツドリンクには、フエリクリシンが 0. 15m g/ml含まれていた。

<処例 29 清涼飲料 7k >

バレンシアオレンジ果汁 30ml、レモン果汁 3ml、果糖 1. 5g、クェン酸 0. 5g、ビタミン CO. lgにフエリクリシン 15mgをカ卩え、これに水をカ卩えて 100mlとし、よく撹拌した後に炭酸ガスを封入し、鉄強化清涼飲料水を得た。得られた清涼飲料水には、フェリクリシンが 0. 15mgZml含まれていた。

<処方例 30 スープ >

ポタージュスープ 100mlにフエリクリシン 40mgをカ卩え、よく撹拌して鉄強化スープを得た。得られたスープには、フエリクリシンが 0. 4mg/ml含まれていた。

産業上の利用可能性

本発明の鉄補給剤は、鉄欠乏性貧血を始めとする鉄欠乏による症状の予防、改善又は治療のために好適に使用できる。また、本発明の食品添加剤は、鉄補給のため、又は鉄欠乏性貧血の予防又は改善のための機能性食品、又は特定保健用食品への添加剤として好適に使用できる。

Claims

請求の範囲

[I] シデロフォアと 3価鉄イオンとを含む鉄補給剤。

[2] シデロフォアと 3価鉄イオンとがキレート錯体の形態で含まれて、る請求項 1に記載の鉄補給剤。

[3] シデロフォアがヒドロキサム酸を含むものである請求項 1又は 2に記載の鉄補給剤。

[4] 上記キレート錯体がフェリクローム類である請求項 3に記載の鉄補給剤。

[5] フェリクローム類がフエリクリシンである請求項 4に記載の鉄補給剤。

[6] シデロフォアと 3価鉄イオンとを含む鉄欠乏性貧血の予防又は治療剤。

[7] シデロフォアと 3価鉄イオンとがキレート錯体の形態で含まれて、る請求項 6に記載の鉄欠乏性貧血の予防又は治療剤。

[8] シデロフォアがヒドロキサム酸を含むものである請求項 6又は 7に記載の鉄欠乏性貧血の予防又は治療剤。

[9] 上記キレート錯体がフェリクローム類である請求項 8に記載の鉄欠乏性貧血の予防又は治療剤。

[10] フェリクローム類がフエリクリシンである請求項 9に記載の鉄欠乏性貧血の予防又は治療剤。

[II] シデロフォアと 3価鉄イオンとを含む鉄補給用食品添加剤。

[12] シデロフォアと 3価鉄イオンとを含む鉄欠乏性貧血の予防又は改善用食品添加剤。

[13] シデロフォアと 3価鉄イオンとを含む食品組成物。

[14] シデロフォアと 3価鉄イオンとがキレート錯体の形態で含まれて、る請求項 13に記載の食品組成物。

[15] 固形状の食品組成物中に、シデロフォアと 3価鉄イオンとがキレート錯体に換算して 0 . 1一 5mg/g含まれている請求項 13又は 14に記載の食品組成物。

[16] 液体状の食品組成物中に、シデロフォアと 3価鉄イオンとがキレート錯体に換算して 0 . 05— lOmgZml含まれている請求項 13又は 14に記載の食品組成物。

[17] 食品が、酒類、茶類、コーヒー類、スポーツドリンク類、清涼飲料水、乳飲料、及びスープカもなる群より選ばれる飲料である請求項 16に記載の食品組成物。

[18] 鉄補給用の請求項 13— 17のいずれかに記載の食品組成物。

[19] 鉄欠乏性貧血の予防又は改善用の請求項 13— 17のいずれかに記載の食品組成物。

[20] シデロフォアと 3価鉄イオンとを含む、以下の (0— (vi)のいずれかの食品組成物。

[21] シデロフォアと 3価鉄イオンとを含む組成物をヒトに投与する鉄補給方法。

[22] シデロフォアと 3価鉄イオンとを、キレート錯体に換算して 1日当たり 20— 170mg投与する請求項 21に記載の鉄補給方法。

[23] シデロフォアと 3価鉄イオンとを含む組成物をヒトに投与する鉄欠乏性貧血の予防又は治療方法。

[24] シデロフォアと 3価鉄イオンとを、キレート錯体に換算して 1日当たり 20— 170mg投与する請求項 23に記載の鉄欠乏性貧血の予防又は治療方法。

[25] シデロフォアと 3価鉄イオンとを含む組成物を食品に添加する方法。

[26] シデロフォアと 3価鉄イオンとを含む組成物の鉄補給剤としての使用。

[27] シデロフォアと 3価鉄イオンとを含む組成物の鉄欠乏性貧血の予防又は治療剤としての使用。

[28] シデロフォアと 3価鉄イオンとを含む組成物の鉄補給用食品添加剤としての使用。

[29] シデロフォアと 3価鉄イオンとを含む組成物の鉄欠乏性貧血の予防又は改善用食品添加剤としての使用。

[30] シデロフォアと 3価鉄イオンと食品とを含む組成物の鉄補給用食品組成物としての使用。

[31] シデロフォアと 3価鉄イオンと食品とを含む組成物の鉄欠乏性貧血の予防又は改善用食品糸且成物としての使用。