WO2000071425A1 - Method and device for opening containers that have been sealed with a sealing film - Google Patents

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WO2000071425A1
WO2000071425A1 PCT/EP2000/004513 EP0004513W WO0071425A1 WO 2000071425 A1 WO2000071425 A1 WO 2000071425A1 EP 0004513 W EP0004513 W EP 0004513W WO 0071425 A1 WO0071425 A1 WO 0071425A1
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WO
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film
chamber
heat source
heating
sealed
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PCT/EP2000/004513
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German (de)
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Inventor
Igor Ivanov
Original Assignee
Gpc Biotech Ag
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Publication date
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    • BPERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01LCHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L3/00Containers or dishes for laboratory use, e.g. laboratory glassware; Droppers
    • B01L3/50Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes
    • B01L3/508Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes rigid containers not provided for above
    • B01L3/5085Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes rigid containers not provided for above for multiple samples, e.g. microtitration plates
    • B01L3/50853Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes rigid containers not provided for above for multiple samples, e.g. microtitration plates with covers or lids
    • BPERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B65CONVEYING; PACKING; STORING; HANDLING THIN OR FILAMENTARY MATERIAL
    • B65BMACHINES, APPARATUS OR DEVICES FOR, OR METHODS OF, PACKAGING ARTICLES OR MATERIALS; UNPACKING
    • B65B69/00Unpacking of articles or materials, not otherwise provided for

Definitions

  • the present invention relates to a method and a device for opening containers sealed with a sealing film.
  • thermoplastic material usually in the form of a thin film, with which the object to be sealed is sealed or closed so that two surfaces made of thermoplastic material come into contact at all remaining openings. These are then briefly heated above the melting point of the thermoplastic material in such a way that the surfaces fuse at the heated points and a sealed, continuous container or a hermetic seal results (see, for example, US 3765990, US 3648428, US 3792567, US 4001075).
  • Thermoplastic sealing is also used, for example, in micro- and molecular biology or genetics on microtiter plates, partly for storing samples at low temperatures or for preventing water ingress when polymerase chain reactions (PCR) are carried out in parallel on a large scale which the microplates are immersed in water baths.
  • Devices for heat sealing microtiter plates are offered, for example, by Advanced Biotechnologies, Epsom, UK or Genetix Ltd., Wales, UK.
  • a permanent seal is not always the goal.
  • the seal is intended to protect the goods, for example, from damage during transport or from the entry or exit of water, oxygen or microorganisms during transport and storage or sterilization (cf. US 5679392), but must be removed before the goods are used again become. While the seal can be removed from insensitive goods by tearing or cutting the thermoplastic material (eg WO 98/52861, US 5613346), such methods cannot be used in all cases.
  • Another proposal is to briefly reheat the plates sealed with polypropylene film after use in the same device used for the sealing (temperature approx. 170 ° C.) and then to remove the film.
  • the microtiter plates need to be sealed at 170 ° C for approx. 3-4 s (Q-Sealer Heat Sealing Machine: Users Guide, Genetix Ltd.).
  • Q-Sealer Heat Sealing Machine Users Guide, Genetix Ltd.
  • the hot seal must be removed from the microtiter plate after heating within such a short time that many users tend to tear quickly. This in turn can lead to sample loss and cross-contamination.
  • microtapes TW Astle; MicroTape - A 384-Well Ultra High Throughput Screening System; LabAutomation '99, Final Conference Program, p. 122; Association for Laboratory Automation, Charlottesville, USA; 1999.
  • These are strips of an elastic film which have been embossed in such a way that cavities similar to a microtiter plate are made available, but which, after filling and sealing, can be rolled up for storage. They are particularly suitable for space-saving storage of a large number of samples as well as for a continuous working procedure when sampling by unrolling the tape. Especially with a continuous way of working but the problem, the seal as shortly before the
  • microtapes originally came from the electronics industry, where they were used for packaging components.
  • Badarf provides an inexpensive, fast method for unpacking the components, which does not endanger the packaged goods, and a device for carrying it out.
  • the method according to the invention and the device according to the invention can also be used here.
  • the present invention has for its object to provide a method and an apparatus for opening containers closed with a film.
  • the invention provides a method for removing seals which have been produced in particular using thermoplastic materials by means of the method of heat sealing, the seal being burst open and / or at least partially by means of a heat source which is arranged at a distance from the seal burns, making the sealed goods accessible. Furthermore, the invention relates to a device which is suitable for carrying out such a method.
  • the invention enables simple and gentle opening or removal of seals.
  • the film and an underlying gas layer in the container by briefly approaching a heat source strongly heated.
  • the temperature of the heat source and the duration of the action are preferably chosen so that
  • the duration of exposure and the temperature of the heat source must also be matched to the thermoplastic material of the seal.
  • the gases generated during the partial combustion of the thermoplastic material can be removed in a gas stream. It is advantageous if the temperature of the heat source is above the ignition point of the thermoplastic material, so that the residues remaining after the seal has burst open at least partially burn off or melt away and expose the cavity.
  • Films with particularly good absorption properties for the emitted energy are preferably used.
  • a dark-colored polypropylene film absorbs energy in the frequency spectrum of the visible light better than a non-colored film.
  • the container and preferably the material contained therein is cooled. It becomes the bottom of the container or the container is completely cooled.
  • the cooling takes place with a cooling device or in which the container is placed on dry ice.
  • the invention has several advantages over the previously used methods.
  • seals can be removed much faster and more reliably than with the methods previously used.
  • the sealed material is further heated significantly less in the embodiment according to the invention and is therefore protected. Since no further manual removal of the seal is necessary, this process is simpler and more user-friendly, while at the same time minimizing the risk of loss of sealed goods and the undesired entry of foreign bodies or substances.
  • it offers the possibility of working under sterile conditions, especially in the described applications in microbiology and molecular biology or genetics.
  • the invention enables a new method for storing biological material. Above all, it avoids cross-contamination of the samples contained in a microtiter plate or microtape.
  • the high temperature of the top layer when heat sealed leads to sterilization.
  • the time when sealing and opening the film is so short that the samples contained are not heated.
  • the microtiter plate or microtape is cooled, only the top layer of the microtiter plate or microtape is heated by the hot gas stream. It opens in a few seconds.
  • the heat transfer that occurs both from plastic and from water-based solutions is low.
  • the three factors mentioned above open up the possibility of using polypropylene plates for storing biological material such as bacteria, viruses, cells, compounds, etc.
  • Another possible application is to use heat-sealed microtiter plates or microtapes for the lysis of bacteria or yeast by heating.
  • An advantageous use is for further analysis, e.g. B. by PCR.
  • the method can also be used to open plates in which banks of connections are stored. So far, the main problem of contamination has been that which can be avoided with the present invention.
  • An additional advantage is the use of DMSO (dimethyl sulfoxide), a chemical compound that is used to store biological material.
  • DMSO dimethyl sulfoxide
  • the melting point of DMSO is about 12 ° C. This facilitates the handling of solutions and mixtures that are to be kept frozen or liquid.
  • Microtiter plates with 96 wells are usually used to store connections.
  • the present invention enables the handling of microtiter plates that have a higher number of wells.
  • the method of opening microtiter plates using a gas burner opens up the possibility of storing compounds in microtiter plates which have 384 or more wells up to 1536 wells.
  • the method is also suitable for opening the seal in microtapes for transport, storage and use of biological samples as well as electronic components.
  • a device according to the invention can be integrated into the process in such a way that exactly the number of sample chambers / component chambers are opened which are sampled in the next sampling cycle. This, and the high speed when removing the seal, in particular Especially with biological and chemical samples, material losses due to evaporation are minimized and variances between samples due to different times between removal of the seal and sampling avoided. Electronic components can be removed quickly and without endangering the components, for example due to the edges of cutting tools.
  • the method according to the invention is also particularly suitable for discontinuous work with microtapes, since it makes it possible to remove the sealing of those sample chambers / component chambers from which material is to be removed, specifically and individually, regardless of their position on the belt.
  • the method is carried out as follows.
  • samples are placed in the wells of a microtiter plate or microtape.
  • the wells in the microtiter plate or microtape are sealed with a sealing film, for example by heat sealing.
  • the microtiter plate or microtape with the samples is transported to another location and stored there, for example at cool temperatures.
  • one or more of the plurality of wells in the microtiter plate or microtape are exposed by opening the corresponding seal using the method described above.
  • one or two or more rows of the rows on one of the microtiter plates or on a microtape can be opened in this fourth step.
  • a fifth step the samples are taken from the exposed wells, for example for a subsequent examination. Then steps 3 - 5 can be repeated one or more times. This means that the remaining samples can be stored again and, in a further step, some or more of the samples exposed from individual wells or from one or more rows for a subsequent examination. For example, two rows of a microtiter plate, which has a total of 12 rows, can be opened in six successive processes.
  • the system which can be sealed with a sealing film and has a large number of recesses, enables the use of automated systems.
  • Heat sealing herein can also be understood to mean the contactless heating of the sealing film by radiation.
  • a sealing film can be applied to seal a recess in a microtiter plate or a microtape by gluing.
  • the opening or exposure of the recess is carried out in the same way as described above.
  • the present system is not restricted to a specific material, in particular the microtiter plates or microtapes can consist of plastic such as polypropylene, polycarbonate and polystyrene.
  • the sealing films can be made of plastic, e.g. B. made of polypropylene, polystyrene or polyethylene or EVA. Multi-layer films and laminates can also be used, e.g. metal coated foils, e.g. foils coated with aluminum.
  • the present invention enables the use of systems in which the recess is closed with a film, e.g. Polypropylene sheets for storing biological and chemical samples.
  • the biological samples can be eukaryotic or procariotic cells, viruses, proteins or nucleic acids (genomes, RNA, cDNA, PCR fragments).
  • the present invention has the particular advantage that the individual samples can be safely stored in a microtiter plate or microtape and when individual contamination of the samples with one another is reliably avoided.
  • FIGS 1A, B and C plan views of microtiter plates after the
  • FIGS. 2A, B, C and D are top views of microtiter plates from which the sealing film has been at least partially removed, the sealing being carried out according to a known method by heating by means of a heating plate after different heating times, and
  • FIGS. 3A and B show the top view of a microtiter plate with a seal or after the seals have been opened using the method according to the invention
  • Figure 4 is a side view of a preferred embodiment of a device according to the invention for opening seals and
  • Figure 5 is a front view of the embodiment of Figure 4.
  • Polypropylene PP microtiter plates with 384 wells (Cat. # X5005, Genetix) and polypropylene film (Heat Seal Film, cat # X5151, Genetix) were made using a heat sealing device from Genetix (Cat. # X5161), consisting of a heat-dissipating base plate and a electrically heated top plate, to which a handle is attached for exerting pressure on the surface to be sealed, sealed with a film.
  • the heat sealing device was preheated for at least 15 minutes and at a temperature of
  • the plates sealed in this way were immersed three times in a water bath at 85 ° C. for 10 minutes and immediately cooled in an ice bath for 5 minutes. Finally, the plates were washed under running water, transferred to a transilluminator and evaluated using a Herolab E.A.S.Y system.
  • Cresol red is a pH indicator and changes color from an intense red at pH> 8.8 to pale yellow at pH ⁇ 7.2.
  • the quality of the seal could therefore be recognized by the disappearance of the red color in the wells of the microtiter plate.
  • intactly sealed depressions can be recognized as dark points, while light or colorless points represent depressions whose contents could be washed out due to an incomplete seal or a breach of the seal.
  • FIGS. 1A, B and C show typical results for the sealing periods of 2x1 s, 2x2 s and 2x4 s used. As Figure IC shows, only the plates heated for 2x4 s gave a reliably tight seal sealing. After heating for 2x1 s, 15 + 8 wells per plate and after 2x2 s 5 ⁇ 6 wells remained unsealed.
  • the plates were placed in the sealing device, three plates were heated under pressure as described above for 10, 20, 40 or 80 s each, and the seal was then removed in one go. After removing the seal, the plates were washed under running water, transferred to a transilluminator and evaluated using a Herolab E.A.S.Y system.
  • FIGS. 2A, B, C and D show typical examples of the results obtained with the heating times examined. Only when the plates are 40 s (Fig. 2C) or preferably 80 s (Fig. 2D) were heated, the seal was reliably removed.
  • the seals were removed using a Bunsen burner.
  • the plates were placed on a flat surface and a Bunsen burner was moved over the plate in a uniform movement at a distance of 5-10 cm so that the flame did not sweep over any point on the plate for more than 1 s.
  • the opening of the seal could be observed as bursting and rapid melting and burning of the polypropylene film.
  • the plates were washed under running water, transferred to a transilluminator and evaluated using a Herolab E.A.S.Y system.
  • Figure 3 shows a typical example of the results obtained: Figure 3A shows a microtiter plate after sealing and washing, Figure 3B the same plate after treatment with the Bunsen burner. All wells were reliably opened in less than 3 s.
  • FIGS. 4 and 5 show a basic illustration of a device according to the invention for opening seals on microtiter plates.
  • a microtiter plate 1 is arranged on a conveyor belt 2 and is transported through a housing 5 with the aid of the conveyor belt.
  • a gas burner device 3 is arranged above the conveyor belt and serves as a heat source in this preferred embodiment.
  • a plurality of gas and air supply connections 4 are provided. In the example shown, a total of five gas flames are shown, which are arranged transversely to the transport direction of the conveyor belt and point in the direction of the microtiter plate 1.
  • the heat source 3 is arranged pivotably, as a result of which the direction of the gas flames pointing to the microtiter plate can be adjusted.
  • the angle relative to the perpendicular to the conveyor belt can preferably be pivoted by an angle within a range of +/- 45 °.
  • a hot air gun can be used to direct a hot air stream onto the microtiter plate or microtape using the device 3.
  • the temperature and the rate of heating of the sealing film can be achieved by regulating the gas / air supply accordingly.
  • the distance and / or the angle of the gas burner device to the position of the microtiter plate or the conveyor belt can be set become.
  • the duration of exposure of the heat source to the microtiter plate can be determined by adjusting the transport speed. Another possibility is to set the duration of the heat supply, for example by only supplying the gas / air during a certain heating period.
  • the invention is not limited to the prescribed exemplary embodiment, rather the method and the device according to the invention can be used in a variety of ways for opening containers sealed with foils, wherein different foils or seals can be opened and removed.
  • a hot air gun can also be used, in particular a hot air gun that works at temperatures up to 600 ° C.
  • not all seals are opened at the same time by a microtiter plate or a microtape, but only certain desired depressions are uncovered in each case.
  • the wells of a single row or several rows of such a microtiter plate can be opened in a first process.
  • the samples of the exposed wells can be examined, for example with the aid of an automatic system.
  • the microtiter plate or microtape with the samples remaining therein can then be stored again, for example overnight or for a week or for a long time.
  • storage can take place at low temperatures, for example - 20 ° C to - 70 ° C.
  • the seals are removed from further wells, for example the next or more of the next rows are opened by a microtiter plate or a microtape.
  • the samples can be taken again and transferred to agar, for example.
  • the process, ie storing the remaining Samples and subsequent opening of certain of the existing wells can be repeated several times if necessary.

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Abstract

The invention relates to a method for opening at least one chamber which has been sealed by a film. The inventive method is characterized by the heating of said film and/or a gas inside said chamber during a short period, whereby the film is torn apart and/or at least partially melted or burnt.

Description

Verfahren und Vorrichtung zum Öffnen von mit einer Siegelfolie verschlossenen BehälternMethod and device for opening containers sealed with a sealing film
Die vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahren und eine Vorrichtung zum Öffnen von mit einer Siegelfolie verschlossenen Behältern.The present invention relates to a method and a device for opening containers sealed with a sealing film.
Das gas- und/oder flüssigkeitsdichte Versiegeln von Hohlräumen und Oberflächen ist eine Aufgabe die sich in vielen Bereichen der Technik stellt. Es gibt verschiedene Verfahren und Vorrichtungen, die diese Aufgabe erfüllen. Eine der am häufigsten eingesetzten Methoden besteht in der Verwendung von thermoplastischem Material, meist in Form eines dünnen Films, mit dem das zu versiegelnde Objekt so um- oder abgeschlossen wird, daß an allen verbleibenden Öffnungen zwei Oberflächen aus thermoplastischem Material in Berührung stehen. Diese werden anschließend kurzzeitig dergestalt über den Schmelzpunkt des thermoplastischen Materials erhitzt, daß die Oberflächen an den erhitzten Stellen verschmelzen und sich ein abgeschlossener, kontinuierlicher Behälter bzw. eine hermetische Versiegelung ergibt (siehe z.B. US 3765990, US 3648428, US 3792567, US 4001075) . Das thermoplastische Versiegeln wird beispielsweise auch in der Mikro- und Molekularbiologie bzw. -genetik auf Mikrotiterplatten angewendet, teils für die Lagerung von Proben bei tiefen Temperaturen oder zur Verhinderung des Wasserzutritts bei der parallelen Durchführung von Polymerase- Kettenreaktionen (PCR) im großen Maßstab, bei der die Mikrotiterplatten in Wasserbäder getaucht werden. Vorrichtungen zum Heiß-Versiegeln von Microtiterplatten werden z.B. von Advanced Biotechnologies, Epsom, UK oder Genetix Ltd., Christchurch, UK angeboten. Nicht immer ist eine permanente Versiegelung das Ziel. In vielen Fällen soll die Versiegelung das Gut z.B. vor Beschädigung beim Transport oder vor dem Zutritt oder Austritt von Wasser, Sauerstoff oder Mikroorganismen während Transport und Lagerung oder der Sterilisation (vgl. US 5679392) schützen, sie muß jedoch vor einer weiteren Nutzung des Gutes entfernt werden. Während bei unempfindlichen Gütern die Versiegelung durch Zerreißen oder Zerschneiden des thermoplastischen Materials entfernt werden kann (z.B. WO 98/52861, US 5613346), sind solche Methoden nicht in allen Fällen anwendbar.The gas- and / or liquid-tight sealing of cavities and surfaces is a task that arises in many areas of technology. There are various methods and devices that accomplish this task. One of the most frequently used methods is the use of thermoplastic material, usually in the form of a thin film, with which the object to be sealed is sealed or closed so that two surfaces made of thermoplastic material come into contact at all remaining openings. These are then briefly heated above the melting point of the thermoplastic material in such a way that the surfaces fuse at the heated points and a sealed, continuous container or a hermetic seal results (see, for example, US 3765990, US 3648428, US 3792567, US 4001075). Thermoplastic sealing is also used, for example, in micro- and molecular biology or genetics on microtiter plates, partly for storing samples at low temperatures or for preventing water ingress when polymerase chain reactions (PCR) are carried out in parallel on a large scale which the microplates are immersed in water baths. Devices for heat sealing microtiter plates are offered, for example, by Advanced Biotechnologies, Epsom, UK or Genetix Ltd., Christchurch, UK. A permanent seal is not always the goal. In many cases, the seal is intended to protect the goods, for example, from damage during transport or from the entry or exit of water, oxygen or microorganisms during transport and storage or sterilization (cf. US 5679392), but must be removed before the goods are used again become. While the seal can be removed from insensitive goods by tearing or cutting the thermoplastic material (eg WO 98/52861, US 5613346), such methods cannot be used in all cases.
Insbesondere bei den beschriebenen Anwendungen in der Mikro- und Molekularbiologie bzw. -genetik wird das Entfernen der Versiegelung zwar in der Literatur als leicht durchführbar beschrieben (E. Maier, Robotic technology in library screening, Laboratory Robotics and Automation 7 (1995), 123-132), es stellt sich jedoch in der Praxis als problematisch heraus. Wenn zur Probenentnahme die Versiegelung durch Aufreißen entfernt wird, besteht die Gefahr von umfangreichen Probenverlusten und/oder Kreuzkontaminationen. Für die Rückgewinnung von Proben aus mit Polypropylen-film versiegelten Mikrotiterplat- ten ist ein Werkzeug mit der Bezeichnung „Pierce Plate" bei Advanced Technologies erhältlich, das mittels in eine Kunststoffplatte eingelassenen Dornen den thermoplastischen Film perforieren soll, um den Zugang zu den Proben zu ermöglichen. Hierbei besteht stets die Gefahr, die Proben zu kreuzkontaminieren oder Fremdstoffe einzutragen.In particular in the described applications in micro- and molecular biology or genetics, the removal of the seal is described in the literature as being easy to carry out (E. Maier, Robotic technology in library screening, Laboratory Robotics and Automation 7 (1995), 123- 132), but it turns out to be problematic in practice. If the seal is removed by tearing for sampling, there is a risk of extensive sample loss and / or cross-contamination. For the recovery of samples from microtiter plates sealed with polypropylene film, a tool called "Pierce Plate" is available from Advanced Technologies, which is supposed to perforate the thermoplastic film by means of thorns embedded in a plastic plate in order to allow access to the samples There is always the risk of cross-contaminating the samples or entering foreign substances.
Als Alternative hierzu wurde vorgeschlagen, anstelle der Polypropylenfolie eine Kunststoff/Aluminium-laminierte Folie zu verwenden. Dieses Folienlaminat wird mit einem dafür entwik- kelten Werkzeug („Foil Stripper" ) entfernt, indem an einer Seite beginnend die Folie auf einen Stab aufgewickelt und dabei vom Träger gelöst wird. Aufgrund der unterschiedlichen thermischen Ausdehnungskoeffizienten von Aluminium und Kunststoff ist jedoch die Versiegelung bei dieser Methode nicht immer flüssigkeits- und gasdicht, und löst sich insbesondere unter den Bedingungen der PCR, bei der das Probengut zyklischen Temperaturveränderungen ausgesetzt ist, oft ab.As an alternative to this, it has been proposed to use a plastic / aluminum-laminated film instead of the polypropylene film. This foil laminate is removed with a specially developed tool ("Foil Stripper"), starting from one side by winding the foil on a rod and thereby detaching it from the carrier. Due to the different However, the thermal expansion coefficient of aluminum and plastic is not always liquid- and gas-tight with this method, and often comes off, especially under the conditions of PCR, in which the sample is exposed to cyclical temperature changes.
Ein weiterer Vorschlag besteht darin, die mit Polypropylen- Film versiegelten Platten nach Gebrauch in derselben Vorrichtung, die für das Versiegeln benützt wird (Temperatur ca. 170 °C) , erneut kurz zu erhitzen und anschließend die Folie abzulösen. Das Versiegeln der Mikrotiterplatten benötigt nach Angabe des Herstellers bei 170 °C ca. 3-4 s (Q-Sealer Heat Sealing Machine: Users Guide, Genetix Ltd.). Um ein Wiederablösen der Folie zu erreichen, muß man häufig deutlich länger erhitzen. Dies führt oft dazu, daß die Proben zum Sieden gelangen, was unter anderem zu Probenverlusten führen kann oder Mikroorganismen abtöten würde. Zudem muß man die noch heiße Versiegelung nach dem Erhitzen von der Mikrotiterplatte innerhalb so kurzer Zeit ablösen, daß viele Anwender zu schnellem Reißen neigen. Dies kann wiederum zu Probenverlusten und Kreuzkontaminationen führen.Another proposal is to briefly reheat the plates sealed with polypropylene film after use in the same device used for the sealing (temperature approx. 170 ° C.) and then to remove the film. According to the manufacturer, the microtiter plates need to be sealed at 170 ° C for approx. 3-4 s (Q-Sealer Heat Sealing Machine: Users Guide, Genetix Ltd.). In order to achieve a redetachment of the film, one often has to heat up significantly longer. This often causes the samples to boil, which among other things can lead to sample loss or would kill microorganisms. In addition, the hot seal must be removed from the microtiter plate after heating within such a short time that many users tend to tear quickly. This in turn can lead to sample loss and cross-contamination.
Eine der neuesten Entwicklungen auf dem Gebiet des Ultra High Throughput Screening stellen Microtapes dar (TW Astle; Micro- Tape - A 384-Well Ultra High Throughput Screening System; LabAutomation' 99, Final Conference Program, S. 122; Associa- tion for Laboratory Automation, Charlottesville, USA; 1999) . Dies sind Bänder einer elastischen Folie die dergestalt mit einer Prägung versehen wurden, daß Hohlräume ähnlich einer Mikrotiterplatte zur Verfügung gestellt werden, die sich aber, nach Befüllen und Versiegeln, zur Aufbewahrung aufrollen lassen. Sie sind damit besonders zur platzsparenden Aufbewahrung einer großen Zahl von Proben wie auch zu einer kontinuierlichen Arbeitsweise beim Beproben durch Abrollen des Bandes geeignet. Gerade bei einer kontinuierlichen Arbeitsweise stellt sich aber das Problem, die Versiegelung möglichst kurz vor derOne of the latest developments in the field of ultra high throughput screening is microtapes (TW Astle; MicroTape - A 384-Well Ultra High Throughput Screening System; LabAutomation '99, Final Conference Program, p. 122; Association for Laboratory Automation, Charlottesville, USA; 1999). These are strips of an elastic film which have been embossed in such a way that cavities similar to a microtiter plate are made available, but which, after filling and sealing, can be rolled up for storage. They are particularly suitable for space-saving storage of a large number of samples as well as for a continuous working procedure when sampling by unrolling the tape. Especially with a continuous way of working but the problem, the seal as shortly before the
Beprobung und in ebenfalls kontinuierlicher Weise zu entfernen. Hierfür zeigen sich die oben beschriebenen Lösungsvorschläge als wenig geeignet.Sampling and also to remove in a continuous manner. The proposed solutions described above are not very suitable for this.
Das Prinzip der Microtapes stammt ursprünglich aus der Elektronikindustrie, wo sie für die Verpackung von Bauelementen Verwendung fanden. Auch hier besteht Badarf für ein kostengünstiges, schnelles, und ein das verpackte Gut nicht gefährdendes Verfahren zum Entpacken der Bauteile, sowie eine Vorrichtung zu seiner Durchführung. Das erfindungsgemäße Verfahren sowie die erfindungsgemäße Vorrichtung können auch hier eingesetzt werden.The principle of microtapes originally came from the electronics industry, where they were used for packaging components. Here too, Badarf provides an inexpensive, fast method for unpacking the components, which does not endanger the packaged goods, and a device for carrying it out. The method according to the invention and the device according to the invention can also be used here.
Der vorliegenden Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, ein Verfahren und eine Vorrichtung zum Öffnen von mit einer Folie verschlossenen Behältern bereitzustellen.The present invention has for its object to provide a method and an apparatus for opening containers closed with a film.
Diese Aufgabe wird mit den Merkmalen der Patentansprüche gelöst .This object is achieved with the features of the claims.
Die Erfindung stellt ein Verfahren bereit zum Entfernen von Versiegelungen, welche insbesondere unter Verwendung thermoplastischer Materialien mittels des Verfahrens der Hitzeversiegelung hergestellt wurden, wobei die Versiegelung mittels einer Hitzequelle, die im Abstand von der Versiegelung angeordnet ist, zum Aufplatzen gebracht wird und/oder mindestens teilweise verbrennt, wodurch das versiegelte Gut zugänglich wird. Weiterhin betrifft die Erfindung eine Vorrichtung die zur Durchführung eines solchen Verfahrens geeignet ist.The invention provides a method for removing seals which have been produced in particular using thermoplastic materials by means of the method of heat sealing, the seal being burst open and / or at least partially by means of a heat source which is arranged at a distance from the seal burns, making the sealed goods accessible. Furthermore, the invention relates to a device which is suitable for carrying out such a method.
Die Erfindung ermöglicht insbesondere ein einfaches und schonendes Öffnen bzw. Entfernen von Versiegelungen. Erfindungsgemäß wird die Folie und eine darunterliegende Gasschicht in dem Behälter durch Annähern an eine Hitzequelle für kurze Zeit stark erhitzt. Vorzugsweise wird die Temperatur der Hitzequelle und die Dauer der Einwirkung dabei so gewählt, daß sichIn particular, the invention enables simple and gentle opening or removal of seals. According to the invention, the film and an underlying gas layer in the container by briefly approaching a heat source strongly heated. The temperature of the heat source and the duration of the action are preferably chosen so that
a) die Gaschicht unter der Versiegelung an der Grenzfläche zum thermoplastischen Material soweit ausdehnt und das thermoplastische Material soweit erweicht, daß es zu einem Aufplatzen der Versiegelung kommt; unda) the gas layer under the seal at the interface with the thermoplastic material expands so far and the thermoplastic material softens to such an extent that the seal breaks open; and
b) die Erwärmung so schnell geschieht, daß das darunter liegende Gut nicht oder nur geringfügig erwärmt wird.b) the heating happens so quickly that the underlying material is not or only slightly warmed.
Dies läßt sich vorzugsweise durch Erhitzen mit einer Gasflamme für 0,5 - 5 s erreichen. Die Dauer der Einwirkung und die Temperatur der Hitzequelle müssen dabei auch auf das thermoplastische Material der Versiegelung abgestimmt werden. Die bei der teilweisen Verbrennung des thermoplastischen Materials entstehenden Gase können dabei in einem Gasstrom abgeführt werden. Es ist dabei von Vorteil, wenn die Temperatur der Hitzequelle über dem Entzündungspunkt des thermoplastischen Materials liegt, so daß die nach dem Aufplatzen der Versiegelung verbleibenden Reste zumindest teilweise abbrennen oder einschmelzen und den Hohlraum freigeben.This can preferably be achieved by heating with a gas flame for 0.5 - 5 s. The duration of exposure and the temperature of the heat source must also be matched to the thermoplastic material of the seal. The gases generated during the partial combustion of the thermoplastic material can be removed in a gas stream. It is advantageous if the temperature of the heat source is above the ignition point of the thermoplastic material, so that the residues remaining after the seal has burst open at least partially burn off or melt away and expose the cavity.
Als Hitzequelle eignet sich eine offene Flamme, ein Wärmestrahler, z.B. eine Infrarotlampe, eine Heißgaserzeugungseinrichtung oder ein Laser. Vorzugsweise werden Folien mit besonders guten Absorptionseigenschaften für die ausgestrahlte Energie verwendet. Beispielsweise absorbiert eine dunkel eingefärbte Polypropylenfolie Energie im Frequenzspektrum des sichtbaren Lichtes besser als eine nichteingefärbte Folie.An open flame, a heat radiator, e.g. an infrared lamp, a hot gas generator or a laser. Films with particularly good absorption properties for the emitted energy are preferably used. For example, a dark-colored polypropylene film absorbs energy in the frequency spectrum of the visible light better than a non-colored film.
Nach einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung wird beim Entfernen der Versiegelung der Behälter und vorzugsweise das darin enthaltene Gut gekühlt. Es wird der Boden des Behälters oder der Behälter vollständig gekühlt. Die Kühlung erfolgt mit einer Kühleinrichtung oder in dem der Behälter auf Trockeneis gestellt wird.According to a preferred embodiment of the invention, when the seal is removed, the container and preferably the material contained therein is cooled. It becomes the bottom of the container or the container is completely cooled. The cooling takes place with a cooling device or in which the container is placed on dry ice.
Die Erfindung hat mehrere Vorteile gegenüber den bisher verwendeten Verfahren. Zum Ersten lassen sich Versiegelungen wesentlich schneller und zuverlässiger entfernen als mit den bisher verwendeten Methoden. Das versiegelte Gut wird weiterhin bei erfindungsgemäßer Ausführung deutlich weniger erwärmt und damit geschont. Da kein weiteres manuelles Entfernen der Versiegelung mehr nötig ist, ist dieses Verfahren einfacher und anwenderfreundlicher, während gleichzeitig die Gefahr von Verlusten an versiegeltem Gut und der unerwünschte Eintrag von Fremdkörpern oder -Substanzen minimiert werden. Weiterhin bietet sie gerade bei den beschriebenen Anwendungen in Mikro- und Molekularbiologie bzw. -genetik die Möglichkeit, unter sterilen Bedingungen zu arbeiten.The invention has several advantages over the previously used methods. First, seals can be removed much faster and more reliably than with the methods previously used. The sealed material is further heated significantly less in the embodiment according to the invention and is therefore protected. Since no further manual removal of the seal is necessary, this process is simpler and more user-friendly, while at the same time minimizing the risk of loss of sealed goods and the undesired entry of foreign bodies or substances. Furthermore, it offers the possibility of working under sterile conditions, especially in the described applications in microbiology and molecular biology or genetics.
Die Erfindung ermöglicht insbesondere ein neues Verfahren zum Lagern von biologischem Material. Vor allem vermeidet sie eine Kreuzkontamination der in einer Mikrotiterplatte bzw. einem Microtape enthaltenen Proben. Die hohe Temperatur der oberen Schicht beim Hitzeversiegeln führt zu einer Sterilisation. Weiterhin ist die Zeit beim Versiegeln und beim Öffnen der Folie so kurz, daß die enthaltenen Proben nicht aufgeheizt werden. Wenn die Mikrotiterplatte bzw. das Microtape gekühlt wird, wird nur die oberste Schicht der Mikrotiterplatte bzw. des Microtapes durch den Heißgasstrom aufgeheizt. Das Öffnen erfolgt in wenigen Sekunden. Der dabei auftretende Wärmetransport sowohl von Kunststoff als auch von wasserbasierenden Lösungen ist gering. Die drei vorstehend genannten Faktoren eröffnen die Möglichkeit Polypropylenplatten zum Lagern von biologischem Material, wie Bakterien, Viren, Zellen, Verbindungen etc. einzusetzen. Eine weitere Anwendungsmöglichkeit besteht darin, hitzeversiegelte Mikrotiterplatten bzw. Microtapes zur Lyse von Bakterien oder Hefe durch Erhitzen zu verwenden. Eine vorteilhafte Verwendungsmöglichkeit besteht zur weiteren Analyse, z. B. durch PCR.In particular, the invention enables a new method for storing biological material. Above all, it avoids cross-contamination of the samples contained in a microtiter plate or microtape. The high temperature of the top layer when heat sealed leads to sterilization. Furthermore, the time when sealing and opening the film is so short that the samples contained are not heated. When the microtiter plate or microtape is cooled, only the top layer of the microtiter plate or microtape is heated by the hot gas stream. It opens in a few seconds. The heat transfer that occurs both from plastic and from water-based solutions is low. The three factors mentioned above open up the possibility of using polypropylene plates for storing biological material such as bacteria, viruses, cells, compounds, etc. Another possible application is to use heat-sealed microtiter plates or microtapes for the lysis of bacteria or yeast by heating. An advantageous use is for further analysis, e.g. B. by PCR.
Das Verfahren kann ebenso zum Öffnen von Platten eingesetzt werden, in welchen Banken von Verbindungen gelagert werden. Hierbei ist bisher das Hauptproblem der Kontamination, das mit der vorliegenden Erfindung vermieden werden kann. Ein zusätzlicher Vorteil besteht beim Einsatz von DMSO (Dimethyl- sulfoxid) , eine chemische Verbindung, die zum- Lagern von biologischem Material eingesetzt wird. Der Schmelzpunkt von DMSO beträgt etwa 12 °C. Dies erleichtert die Handhabung von Lösungen und Gemischen, welche gefroren oder flüssig gehalten werden sollen.The method can also be used to open plates in which banks of connections are stored. So far, the main problem of contamination has been that which can be avoided with the present invention. An additional advantage is the use of DMSO (dimethyl sulfoxide), a chemical compound that is used to store biological material. The melting point of DMSO is about 12 ° C. This facilitates the handling of solutions and mixtures that are to be kept frozen or liquid.
Üblicherweise werden zum Lagern von Verbindungen Miktrotiter- platten mit 96 Vertiefungen (Kammern oder Aufnahmebehältern) eingesetzt. Die vorliegende Erfindung ermöglicht die Handhabung von Mikrotiterplatten, die eine höhere Anzahl von Vertiefungen aufweisen. Das Verfahren zum Öffnen von Mikrotiterplatten unter Verwendung eines Gasbrenners eröffnet die Möglichkeit, Verbindungen in Mikrotiterplatten zu lagern, die 384 oder mehr Vertiefungen bis zu 1536 Vertiefungen aufweisen.Microtiter plates with 96 wells (chambers or receptacles) are usually used to store connections. The present invention enables the handling of microtiter plates that have a higher number of wells. The method of opening microtiter plates using a gas burner opens up the possibility of storing compounds in microtiter plates which have 384 or more wells up to 1536 wells.
Das Verfahren eignet sich weiterhin zum Öffnen der Versiegelung bei Microtapes for Transport, Lagerung und Einsatz von biologischen Proben wie auch elektronischen Bauteilen. Hier kann insbesondere beim kontinuierlichen Arbeiten durch Abrollen des Bandes eine erfindungsgemäße Vorrichtung so in den Prozeß eingegliedert werden, daß genau die Anzahl Probenkammern/Bauteilkammern geöffnet werden, die im nächsten Bepro- bungszyklus beprobt werden. Hierdurch, und durch die hohe Geschwindigkeit beim Entfernen der Versiegelung, werden insbe- sondere bei biologischen und chemischen Proben Materialverluste durch Verdunstung minimiert und Varianzen zwischen Proben aufgrund unterschiedlicher Zeiten zwischen Entfernen der Versiegelung und Beprobung vermieden. Die Entnahme von elektronischen Bauteilen gelingt schnell und ohne Gefährdung der Bauteile, beispielsweise durch Kanten von Schneidwerkzeugen. Besonders eignet sich das erfindungsgemäße Verfahren aber auch bei diskontinuierlichem Arbeiten mit Mikrotapes, da es ermöglicht, gezielt und einzeln nur die Versiegelung derjenigen Probenkammern/Bauteilkammern zu entfernen, denen Material entnommen werden sollen, unabhängig von ihrer Position auf dem Band.The method is also suitable for opening the seal in microtapes for transport, storage and use of biological samples as well as electronic components. Here, in particular during continuous work by unrolling the strip, a device according to the invention can be integrated into the process in such a way that exactly the number of sample chambers / component chambers are opened which are sampled in the next sampling cycle. This, and the high speed when removing the seal, in particular Especially with biological and chemical samples, material losses due to evaporation are minimized and variances between samples due to different times between removal of the seal and sampling avoided. Electronic components can be removed quickly and without endangering the components, for example due to the edges of cutting tools. However, the method according to the invention is also particularly suitable for discontinuous work with microtapes, since it makes it possible to remove the sealing of those sample chambers / component chambers from which material is to be removed, specifically and individually, regardless of their position on the belt.
Gemäß einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung wird das Verfahren wie folgt durchgeführt. In einem ersten Schritt werden in die Vertiefungen einer Mikrotiterplatte bzw. eines Microtapes jeweils Proben abgelegt. In einem zweiten Schritt werden die Vertiefungen in der Mikrotiterplatte bzw. dem Microtape mit einer Versiegelungsfolie beispielsweise durch Heißversiegeln verschlossen. In einem dritten Schritt wird die Mikrotiterplatte bzw. das Microtape mit den Proben an einen anderen Ort transportiert und dort gelagert, z.B. bei kühlen Temperaturen. In einem vierten Schritt werden eine oder mehrere beliebige der Vielzahl von Vertiefungen in der Mikrotiterplatte bzw. dem Microtape freigelegt, indem die entsprechende Versiegelung mit dem vorstehend beschriebenen Verfahren geöffnet wird. Optional kann eine oder auch zwei und mehrere Reihen der auf einer der Mikrotiterplatte bzw. auf einem Microtape vorhandenen Reihen in diesem vierten Schritt geöffnet werden. In einem fünften Schritt werden die Proben aus den freigelegten Vertiefungen z.B. für eine nachfolgende Untersuchung entnommen. Anschließend können die Schritte 3 - 5 einmal oder mehrmals wiederholt werden. Das heißt die verbleibenden Proben können wieder gelagert werden und in einem weiteren Schritt einige oder mehrere der Proben durch freilegen von einzelnen Vertiefungen oder von einer oder mehreren Reihen für eine nachfolgende Untersuchung entnommen werden. Beispielsweise können in sechs aufeinanderfolgenden Vorgängen jeweils zwei Reihen einer Mikrotiterplatte geöffnet werden, die insgesamt 12 Reihen aufweist.According to a preferred embodiment of the invention, the method is carried out as follows. In a first step, samples are placed in the wells of a microtiter plate or microtape. In a second step, the wells in the microtiter plate or microtape are sealed with a sealing film, for example by heat sealing. In a third step, the microtiter plate or microtape with the samples is transported to another location and stored there, for example at cool temperatures. In a fourth step, one or more of the plurality of wells in the microtiter plate or microtape are exposed by opening the corresponding seal using the method described above. Optionally, one or two or more rows of the rows on one of the microtiter plates or on a microtape can be opened in this fourth step. In a fifth step, the samples are taken from the exposed wells, for example for a subsequent examination. Then steps 3 - 5 can be repeated one or more times. This means that the remaining samples can be stored again and, in a further step, some or more of the samples exposed from individual wells or from one or more rows for a subsequent examination. For example, two rows of a microtiter plate, which has a total of 12 rows, can be opened in six successive processes.
Das mit einer Versiegelungsfolie verschließbare System mit einer Vielzahl von Vertiefungen ermöglicht den Einsatz von automatisierten Systemen.The system, which can be sealed with a sealing film and has a large number of recesses, enables the use of automated systems.
Unter Heißversiegeln hierin kann auch das berührungsfreie Erhitzen der Versiegelungsfolie durch Strahlung verstanden werden. Anstelle von Heißversiegeln kann eine Versiegelungsfolie zum Verschließen einer Vertiefung in einer Mikrotiterplatte bzw. einem Microtape durch Kleben aufgebracht werden. Das Öffnen oder Freilegen der Vertiefung erfolgt in der gleichen Weise wie zuvor beschrieben. Das vorliegende System ist nicht auf ein bestimmtes Material beschränkt, insbesondere können die Mikrotiterplatten bzw. Microtapes aus Kunststoff wie Polypropylen, Polycarbonat und Polystyrol bestehen. Die Versiegelungsfolien können aus Kunststoff bestehen, z. B. aus Polypropylen, Polystyrol oder Polyethylen oder EVA. Außerdem können Mehrschichtfolien und Laminate Verwendung finden, z.B. metallbeschichtete Folien, z.B. mit Aluminium beschichtete Folien.Heat sealing herein can also be understood to mean the contactless heating of the sealing film by radiation. Instead of heat sealing, a sealing film can be applied to seal a recess in a microtiter plate or a microtape by gluing. The opening or exposure of the recess is carried out in the same way as described above. The present system is not restricted to a specific material, in particular the microtiter plates or microtapes can consist of plastic such as polypropylene, polycarbonate and polystyrene. The sealing films can be made of plastic, e.g. B. made of polypropylene, polystyrene or polyethylene or EVA. Multi-layer films and laminates can also be used, e.g. metal coated foils, e.g. foils coated with aluminum.
Die vorliegende Erfindung ermöglicht den Einsatz von Systemen, bei denen die Vertiefung mit einer Folie verschlossen wird, z.B. Polypropylenplatten zum Lagern von biologischen und chemischen Proben. Die biologischen Proben können eukariotische oder prokariotische Zellen, Viren, Proteine oder Nukleinsäuren (Genome, RNA, cDNA, PCR-Fragmente) sein.The present invention enables the use of systems in which the recess is closed with a film, e.g. Polypropylene sheets for storing biological and chemical samples. The biological samples can be eukaryotic or procariotic cells, viruses, proteins or nucleic acids (genomes, RNA, cDNA, PCR fragments).
Die vorliegende Erfindung hat vor allem den Vorteil, daß die einzelnen Proben in einer Mikrotiterplatte bzw. einem Microtape sicher gelagert werden können und beim Öffnen von einzel- nen oder mehreren der Vertiefungen eine Kontamination der Proben untereinander sicher vermieden wird.The present invention has the particular advantage that the individual samples can be safely stored in a microtiter plate or microtape and when individual contamination of the samples with one another is reliably avoided.
Die Erfindung wird nachstehend anhand von Ausführungsbeispielen und der Zeichnungen näher erläutert.The invention is explained in more detail below with the aid of exemplary embodiments and the drawings.
Es zeigen:Show it:
Figuren 1A, B und C Aufsichten von Mikrotiterplatten nach demFigures 1A, B and C plan views of microtiter plates after the
Heißversiegeln mit unterschiedlichen VersiegelungszeitenHeat sealing with different sealing times
Figuren 2A, B, C und D Aufsichten von Mikrotiterplatten, von denen die Versiegelungsfolie zumindest teilweise entfernt worden ist, wobei die Versiegelung nach einem bekannten Verfahren durch Erhitzen mittels einer Heizplatte nach unterschiedlichen Aufheizzeiten erfolgte, undFIGS. 2A, B, C and D are top views of microtiter plates from which the sealing film has been at least partially removed, the sealing being carried out according to a known method by heating by means of a heating plate after different heating times, and
Figuren 3A und B die Aufsicht einer Mikrotiterplatte mit Versiegelung bzw. nachdem die Versiegelungen mit Hilfe des erfindungsgemäßen Verfahrens geöffnet worden sind,FIGS. 3A and B show the top view of a microtiter plate with a seal or after the seals have been opened using the method according to the invention,
Figur 4 eine Seitenansicht einer bevorzugten Ausführungsform einer erfindungsgemäßen Vorrichtung zum Öffnen von Versiegelungen undFigure 4 is a side view of a preferred embodiment of a device according to the invention for opening seals and
Figur 5 eine Vorderansicht der Ausführungsform von Figur 4.Figure 5 is a front view of the embodiment of Figure 4.
Polypropylen PP Mikrotiterplatten mit 384 Vertiefungen (Kat.# X5005, Genetix) und Polypropylen-Film (Heat Seal Film, cat# X5151, Genetix) wurden mit Hilfe einer Hitzeversiegelungsvorrichtung von Genetix (Kat . #X5161) , bestehend aus einer hitzeableitenden Basisplatte und einer elektrisch beheizten oberen Platte, an der ein Griff zum Ausüben von Druck auf die zu versiegelnde Oberfläche befestigt ist, mit einer Folie versiegelt. Die Hitzeversiegelungsvorrichtung wurde jeweils für min- destens 15 Minuten vorgewärmt und bei einer Temperatur vonPolypropylene PP microtiter plates with 384 wells (Cat. # X5005, Genetix) and polypropylene film (Heat Seal Film, cat # X5151, Genetix) were made using a heat sealing device from Genetix (Cat. # X5161), consisting of a heat-dissipating base plate and a electrically heated top plate, to which a handle is attached for exerting pressure on the surface to be sealed, sealed with a film. The heat sealing device was preheated for at least 15 minutes and at a temperature of
170 °C betrieben.170 ° C operated.
Zur Optimierung der Bedingungen beim Versiegeln von Mikrotiterplatten wurden folgende Versuche durchgeführt:The following tests were carried out to optimize the conditions when sealing microtiter plates:
40μl einer 1 mM Lösung von Kresolrot (C-9877, Sigma) in 0.1 mM TrisHCl, pH 8.8, wurden in die Vertiefungen von neun Mikrotiterplatten bzw. Microtapes pipettiert. Die Platten wurden mit Heat Seal Film bedeckt und je drei Platten durch Absenken und Andrücken der vorgewärmten oberen Platte für 1, 2, oder 4 s versiegelt. Um ungleichmäßiges Erhitzen weitgehendst auszuschließen wurden die Mikrotiterplatten anschließend um 180 ° gedreht und erneut für denselben Zeitraum erhitzt. Zwei mal 4 s entspricht den Empfehlungen des Herstellers.40 μl of a 1 mM solution of cresol red (C-9877, Sigma) in 0.1 mM TrisHCl, pH 8.8, were pipetted into the wells of nine microtiter plates or microtapes. The plates were covered with heat seal film and three plates were sealed by lowering and pressing the preheated upper plate for 1, 2 or 4 s. In order to largely rule out uneven heating, the microtiter plates were then rotated through 180 ° and heated again for the same period. Two times 4 s corresponds to the manufacturer's recommendations.
Um die Güte der Versiegelung festzustellen wurden die so versiegelten Platten drei mal für 10 min in ein Wasserbad bei 85 °C getaucht und unmittelbar anschließend für 5 min in einem Eisbad abgekühlt. Abschließend wurden die Platten unter fließendem Wasser gewaschen, auf einen Transilluminator überführt und mittels eines Herolab E.A.S.Y System ausgewertet.In order to determine the quality of the seal, the plates sealed in this way were immersed three times in a water bath at 85 ° C. for 10 minutes and immediately cooled in an ice bath for 5 minutes. Finally, the plates were washed under running water, transferred to a transilluminator and evaluated using a Herolab E.A.S.Y system.
Kresolrot ist ein pH-Indikator, und wechselt seine Farbe von einem intensiven Rot bei pH > 8.8 zu blaßgelb bei pH < 7.2. Die Güte der Versiegelung war daher an dem Verschwinden der roten Farbe in den Vertiefungen der Mikrotiterplatte zu erkennen. Im Transilluminator-Bild sind intakt versiegelte Vertiefungen als dunkle Punkte zu erkennen, während helle oder farblose Punkte Vertiefungen darstellen, deren Inhalt wegen einer unvollständigen Versiegelung oder einer Verletzung der Versiegelung ausgewaschen werden konnte. Figuren 1A, B und C zeigen typische Ergebnisse für die verwendeten Versiegelungsdauern von 2x1 s, 2x2 s und 2x4 s. Wie Figur IC zeigt, ergaben nur die für 2x4 s erhitzten Platten eine zuverlässig dichte Ver- siegelung. Nach Erhitzen für 2x1 s blieben 15 + 8 Vertiefungen je Platte und nach je 2x2 s 5 ± 6 Vertiefungen unversiegelt.Cresol red is a pH indicator and changes color from an intense red at pH> 8.8 to pale yellow at pH <7.2. The quality of the seal could therefore be recognized by the disappearance of the red color in the wells of the microtiter plate. In the transilluminator image, intactly sealed depressions can be recognized as dark points, while light or colorless points represent depressions whose contents could be washed out due to an incomplete seal or a breach of the seal. FIGS. 1A, B and C show typical results for the sealing periods of 2x1 s, 2x2 s and 2x4 s used. As Figure IC shows, only the plates heated for 2x4 s gave a reliably tight seal sealing. After heating for 2x1 s, 15 + 8 wells per plate and after 2x2 s 5 ± 6 wells remained unsealed.
Zum Entfernen der Versiegelung nach einem bekannten Verfahren unter Verwendung einer Versiegelungsvorrichtung wurden folgende Versuche durchgeführt:The following experiments were carried out to remove the seal by a known method using a sealing device:
40μl einer 1 mM Lösung von Kresolrot (C-9877, Sigma) in 0.1 mM TrisHCl, pH 8.8, wurden in die Vertiefungen von zwölf Mikrotiterplatten pipettiert. Die Platten wurden mit Heat Seal Film bedeckt und durch Absenken und Andrücken der vorgewärmten oberen Platte für 4 s versiegelt, die Platten um 180° gedreht und erneut für 4 s erhitzt. Um die Versiegelung aller Vertiefungen sicherzustellen, wurden die so versiegelten Platten drei mal für 10 min in ein Wasserbad bei 85°C getaucht, unmittelbar anschließend für 5 min in einem Eisbad abgekühlt und abschließend auf einem Transilluminator auf entfärbte Vertiefungen überprüft .40 μl of a 1 mM solution of cresol red (C-9877, Sigma) in 0.1 mM TrisHCl, pH 8.8 were pipetted into the wells of twelve microtiter plates. The plates were covered with heat seal film and sealed by lowering and pressing the preheated upper plate for 4 s, the plates rotated by 180 ° and heated again for 4 s. In order to ensure the sealing of all wells, the plates sealed in this way were immersed three times in a water bath at 85 ° C. for 10 min, immediately afterwards cooled in an ice bath for 5 min and finally checked for discolored wells on a transilluminator.
Zum Entfernen der Versiegelung wurden die Platten in die Versiegelungsvorrichtung eingebracht, je drei Platten unter Andrücken wie oben beschrieben für jeweils 10, 20, 40 oder 80 s erhitzt und anschließend die Versiegelung in einem Ruck abgezogen. Nach dem Entfernen der Versiegelung wurden die Platten unter fließendem Wasser gewaschen, auf einen Transilluminator überführt und mittels eines Herolab E.A.S.Y System ausgewertet.To remove the seal, the plates were placed in the sealing device, three plates were heated under pressure as described above for 10, 20, 40 or 80 s each, and the seal was then removed in one go. After removing the seal, the plates were washed under running water, transferred to a transilluminator and evaluated using a Herolab E.A.S.Y system.
Zur Bestimmung der Effizienz der Entfernung des Polypropylenfilms wurde das Vorliegen von im Transilluminator als dunkle Punkte erscheinenden, mit Kresolrotlösung gefüllten Vertiefungen bewertet. Figuren 2A, B, C und D zeigt typische Beispiele für die mit den untersuchten Heizzeiten erhaltenen Ergebnisse. Nur wenn die Platten 40 s (Fig. 2C) oder vorzugsweise 80 s (Fig. 2D) erhitzt wurden, wurde die Versiegelung zuverlässig entfernt.To determine the efficiency of the removal of the polypropylene film, the presence of depressions which appeared in the transilluminator as dark spots and were filled with cresol red solution was assessed. FIGS. 2A, B, C and D show typical examples of the results obtained with the heating times examined. Only when the plates are 40 s (Fig. 2C) or preferably 80 s (Fig. 2D) were heated, the seal was reliably removed.
Die folgenden Beobachtungen wurden bei Anwendung dieser Methode gemacht: a) Erhitzen der Platte für 40 s reichte aus, um die gesamte Platte auf über 50°C zu erhitzen; b) Beim Abreißen des Films waren Kreuzkontaminationen häufig.The following observations were made using this method: a) heating the plate for 40 s was sufficient to heat the entire plate to above 50 ° C; b) Cross contamination was common when the film was torn off.
Gemäß einem bevorzugten Ausführungsbeispiel der Erfindung wurden die Versiegelungen unter Verwendung eines Bunsenbrenners entfernt.According to a preferred embodiment of the invention, the seals were removed using a Bunsen burner.
40μl einer 1 mM Lösung von Kresolrot (C-9877, Sigma) in 0.1 mM TrisHCl, pH 8.8, wurden in die Vertiefungen von drei Mikrotiterplatten pipettiert. Die Platten wurden mit Heat Seal Film bedeckt und durch Absenken und Andrücken der vorgewärmten oberen Platte für 4 s versiegelt, die Platten um 180° gedreht und erneut für 4 s erhitzt. Um die Versiegelung aller Vertiefungen zu prüfen, wurden die so versiegelten Platten drei mal für 10 min in ein Wasserbad bei 85 °C getaucht, unmittelbar anschließend für 5 min in einem Eisbad abgekühlt und abschließend auf einem Transilluminator auf entfärbte Vertiefungen überprüft.40 μl of a 1 mM solution of cresol red (C-9877, Sigma) in 0.1 mM TrisHCl, pH 8.8 were pipetted into the wells of three microtiter plates. The plates were covered with heat seal film and sealed by lowering and pressing the preheated upper plate for 4 s, the plates rotated by 180 ° and heated again for 4 s. In order to test the sealing of all wells, the plates sealed in this way were immersed three times in a water bath at 85 ° C. for 10 min, immediately afterwards cooled in an ice bath for 5 min and finally checked for discolored wells on a transilluminator.
Die Platten wurden auf eine flache Oberfläche gelegt und ein Bunsenbrenner in einer gleichförmigen Bewegung in 5 - 10 cm Abstand so über die Platte geführt, daß die Flamme jede Stelle der Platte für nicht länger als 1 s bestrich. Das Öffnen der Versiegelung konnte als Aufplatzen und schnelles Schmelzen und Abbrennen des Polypropylenfilms beobachtet werden. Nach dem Entfernen der Versiegelung wurden die Platten unter fließendem Wasser gewaschen, auf einen Transilluminator überführt und mittels eines Herolab E.A.S.Y System ausgewertet.The plates were placed on a flat surface and a Bunsen burner was moved over the plate in a uniform movement at a distance of 5-10 cm so that the flame did not sweep over any point on the plate for more than 1 s. The opening of the seal could be observed as bursting and rapid melting and burning of the polypropylene film. After removing the seal, the plates were washed under running water, transferred to a transilluminator and evaluated using a Herolab E.A.S.Y system.
Zur Bestimmung der Effizienz der Entfernung des Polypropylenfilms wurde das Vorliegen von im Transilluminator als dunkle Punkte erscheinenden, mit Kresolrotlösung gefüllten Vertiefungen bewertet. Fig. 3 zeigt ein typisches Beispiel für die erhaltenen Ergebnisse: Figur 3A zeigt eine Mikrotiterplatte nach Versiegeln und Waschen, Abbildung 3B dieselbe Platte nach Behandlung mit dem Bunsenbrenner. Alle Vertiefungen wurden jeweils zuverlässig in weniger als 3 s eröffnet.To determine the efficiency of removal of the polypropylene film, the presence of in the transilluminator was considered dark Dots appearing, filled with cresol red solution. Figure 3 shows a typical example of the results obtained: Figure 3A shows a microtiter plate after sealing and washing, Figure 3B the same plate after treatment with the Bunsen burner. All wells were reliably opened in less than 3 s.
In den Figuren 4 und 5 ist eine Prinzipdarstellung einer erfindungsgemäßen Vorrichtung zum Öffnen von Versiegelungen an Mikrotiterplatten gezeigt. Eine Mikrotiterplatte 1 ist auf einem Förderband 2 angeordnet und wird mit Hilfe des Förderbands durch ein Gehäuse 5 hindurch transportiert. Oberhalb des Förderbands ist eine Gasbrennereinrichtung 3 angeordnet, die in dieser bevorzugten Ausführungsform als Hitzequelle dient. Wie in der Vorderansicht von Figur 5 gezeigt, sind mehrere Gas- und Luftzufuhranschlüsse 4 vorgesehen. In dem gezeigten Beispiel sind insgesamt fünf Gasflammen dargestellt, die quer zur Transportrichtung des Förderbands angeordnet sind und in Richtung auf die Mikrotiterplatte 1 weisen. In einer besonders bevorzugten Ausführungsform ist die Hitzequelle 3 schwenkbar angeordnet, wodurch die Richtung der auf die Mikrotiterplatte weisenden Gasflammen einstellbar ist. Bevorzugt ist der Winkel gegenüber der Senkrechten zum Förderband um einen Winkel innerhalb eines Bereichs von +/-45 ° verschwenkbar.FIGS. 4 and 5 show a basic illustration of a device according to the invention for opening seals on microtiter plates. A microtiter plate 1 is arranged on a conveyor belt 2 and is transported through a housing 5 with the aid of the conveyor belt. A gas burner device 3 is arranged above the conveyor belt and serves as a heat source in this preferred embodiment. As shown in the front view of FIG. 5, a plurality of gas and air supply connections 4 are provided. In the example shown, a total of five gas flames are shown, which are arranged transversely to the transport direction of the conveyor belt and point in the direction of the microtiter plate 1. In a particularly preferred embodiment, the heat source 3 is arranged pivotably, as a result of which the direction of the gas flames pointing to the microtiter plate can be adjusted. The angle relative to the perpendicular to the conveyor belt can preferably be pivoted by an angle within a range of +/- 45 °.
Anstelle eines Gasbrenners kann mit Hilfe einer Heißluftpistole über die Einrichtung 3 ein Heißluftstrom auf die Mikrotiterplatte bzw. das Microtape gerichtet werden.Instead of a gas burner, a hot air gun can be used to direct a hot air stream onto the microtiter plate or microtape using the device 3.
Mit Hilfe der Vorrichtung sind unterschiedliche Parameter einstellbar. Die Temperatur sowie die Geschwindigkeit der Erwärmung der Siegelfolie kann durch eine entsprechende Regelung der Gas/Luftzufuhr erfolgen. Alternativ oder zusätzlich kann der Abstand und/oder der Winkel der Gasbrennereinrichtung zur Lage der Mikrotiterplatte bzw. des Förderbandes eingestellt werden. Weiterhin kann durch Einstellen der Transportgeschwindigkeit die Einwirkdauer der Hitzequelle auf die Mikrotiterplatte bestimmt werden. Eine weitere Möglichkeit besteht darin, die Dauer der Wärmezufuhr einzustellen, indem z.B. die Gas/Luftzufuhr nur während einer bestimmten Heizdauer erfolgt.Different parameters can be set using the device. The temperature and the rate of heating of the sealing film can be achieved by regulating the gas / air supply accordingly. Alternatively or additionally, the distance and / or the angle of the gas burner device to the position of the microtiter plate or the conveyor belt can be set become. Furthermore, the duration of exposure of the heat source to the microtiter plate can be determined by adjusting the transport speed. Another possibility is to set the duration of the heat supply, for example by only supplying the gas / air during a certain heating period.
Die Erfindung ist nicht auf das vorgeschriebenen Ausführungsbeispiel beschränkt, vielmehr kann das erfindungsgemäße Verfahren und die Vorrichtung vielseitig eingesetzt werden zum Öffnen von mit Folien verschlossenen Behältern, wobei unterschiedliche Folien oder Versiegelungen geöffnet und entfernt werden können. Alternativ zu einer offenen Flamme ist auch eine Heißluftpistole einsetzbar, insbesondere eine Heißluftpistole, die mit Temperaturen bis 600°C arbeitet.The invention is not limited to the prescribed exemplary embodiment, rather the method and the device according to the invention can be used in a variety of ways for opening containers sealed with foils, wherein different foils or seals can be opened and removed. As an alternative to an open flame, a hot air gun can also be used, in particular a hot air gun that works at temperatures up to 600 ° C.
Gemäß einer bevorzugten Ausführungsform des erfindungsgemäßen Verfahrens werden von einer Mikrotiterplatte bzw. eines Microtape nicht gleichzeitig alle Versiegelungen geöffnet, sondern nur jeweils bestimmte gewünschte Vertiefungen freigelegt. Beispielsweise können die Vertiefungen einer einzelnen Reihe oder mehrerer Reihen von einer solchen Mirkotiterplatte in einem ersten Vorgang geöffnet werden. Die Proben der freigelegten Vertiefungen können untersucht werden, beispielsweise mit Hilfe eines automatischen Systems entnommen werden. Anschließend kann die Mikrotiterplatte bzw. das Microtape mit den darin verbliebenen Proben wieder gelagert werden, z.B. über Nacht oder eine Woche oder für längere Zeit. Die Lagerung kann abhängig von den in der Mikrotiterplatte bzw. dem Microtape vorhandenen Proben bei tiefen Temperaturen, z.B. - 20 °C bis zu - 70°C erfolgen. In einem nächsten Vorgang werden die Versiegelungen von weiteren Vertiefungen entfernt, z.B. wird die nächste oder mehrere der nächstfolgenden Reihen von einer Mikrotiterplatte bzw. einem Microtape geöffnet. Die Proben können wieder entnommen werden und beispielsweise auf Agar übertragen werden. Der Vorgang, d. h. Lagern der verbleibenden Proben und anschließendes Öffnen von bestimmten der vorhandenen Vertiefungen kann gegebenenfalls mehrfach wiederholt werden. According to a preferred embodiment of the method according to the invention, not all seals are opened at the same time by a microtiter plate or a microtape, but only certain desired depressions are uncovered in each case. For example, the wells of a single row or several rows of such a microtiter plate can be opened in a first process. The samples of the exposed wells can be examined, for example with the aid of an automatic system. The microtiter plate or microtape with the samples remaining therein can then be stored again, for example overnight or for a week or for a long time. Depending on the samples in the microtiter plate or microtape, storage can take place at low temperatures, for example - 20 ° C to - 70 ° C. In a next process, the seals are removed from further wells, for example the next or more of the next rows are opened by a microtiter plate or a microtape. The samples can be taken again and transferred to agar, for example. The process, ie storing the remaining Samples and subsequent opening of certain of the existing wells can be repeated several times if necessary.

Claims

Patentansprüche claims
1. Verfahren zum Öffnen von mindestens einer mit einer Folie verschlossenen Kammer, gekennzeichnet durch kurzzeitiges Erhitzen der Folie und/oder eines in der Kammer vorhandenen Gases, wobei die Folie zum Aufreißen gebracht wird und/oder mindestens teilweise einschmilzt oder verbrennt.1. A method for opening at least one chamber sealed with a film, characterized by briefly heating the film and / or a gas present in the chamber, the film being torn open and / or at least partially melting or burning.
2. Verfahren nach Anspruch 1, wobei in der Kammer ein Gut mit einer darüber angeordneten Gasschicht enthalten ist und beim Erhitzen des Gases das in der Kammer vorhandene Gut nicht oder nur geringfügig erwärmt wird.2. The method according to claim 1, wherein a good with a gas layer arranged above it is contained in the chamber and when the gas is heated, the good present in the chamber is not or only slightly warmed.
3. Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, wobei die Ausdehnung des Gasvolumens mindestens so groß ist, daß die Folie aufreißt .3. The method according to claim 1 or 2, wherein the expansion of the gas volume is at least so large that the film tears.
4. Verfahren nach Anspruch 3, wobei durch das Erhitzen das Folienmaterial erweicht.4. The method according to claim 3, wherein the heating softens the film material.
5. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 4, wobei durch das Erhitzen die Entzündungstemperatur des Folienmaterials erreicht wird und die Folie mindestens teilweise einschmilzt oder verbrennt.5. The method according to any one of claims 1 to 4, wherein the ignition temperature of the film material is reached by the heating and the film at least partially melts or burns.
6. Verfahren nach einem der vorstehenden Ansprüche, wobei beim Erhitzen der Folie ein Träger, in dem die Kammer ausgebildet ist, und vorzugsweise das darin enthaltene Gut gekühlt werden.6. The method according to any one of the preceding claims, wherein when heating the film, a carrier in which the chamber is formed, and preferably the material contained therein are cooled.
7. Verfahren nach einem der vorstehenden Ansprüche, wobei das Erhitzen innerhalb einer Zeit von 0,5 s bis 5 s durchgeführt wird. 7. The method according to any one of the preceding claims, wherein the heating is carried out within a time of 0.5 s to 5 s.
8. Verfahren nach einem der vorstehenden Ansprüche, wobei das Erhitzen durch relatives Annähern des Trägers an eine Hitzequelle erfolgt.8. The method according to any one of the preceding claims, wherein the heating is carried out by relatively approaching the carrier to a heat source.
9. Verfahren nach einem der vorstehenden Ansprüche, wobei das Erhitzen mit einer offenen Flamme erfolgt, vorzugsweise unter Verwendung eines Gasbrenners.9. The method according to any one of the preceding claims, wherein the heating is carried out with an open flame, preferably using a gas burner.
10. Verfahren nach einem der vorstehenden Ansprüche, wobei das Erhitzen mit Hilfe eines Heißluftstromes erfolgt, vorzugsweise unter Verwendung einer Heißluftpistole.10. The method according to any one of the preceding claims, wherein the heating is carried out with the aid of a hot air stream, preferably using a hot air gun.
11. Verfahren nach einem der vorstehenden Ansprüche, wobei die Folie ein thermoplastisches Material aufweist und der Träger eine mehrere Kammern aufweisende Mikrotiterplatte oder Microtape ist, die mit der Folie heißversiegelt worden sind.11. The method according to any one of the preceding claims, wherein the film has a thermoplastic material and the carrier is a multi-chamber microtiter plate or microtape, which have been heat-sealed with the film.
12. Verfahren nach einem der vorstehenden Ansprüche, wobei die entstehenden Gase, insbesondere die durch eine Verbrennung der Folie entstehenden Gase in einem Gasstrom abgeführt werden.12. The method according to any one of the preceding claims, wherein the resulting gases, in particular the gases generated by combustion of the film are removed in a gas stream.
13. Vorrichtung zum Öffnen von mindestens einer mit einer Folie verschlossenen Kammer, gekennzeichnet durch eine Hitzequelle zum kurzzeitigen Erhitzen der Folie und/oder eines in der Kammer vorhandenen Gases, wobei die Hitzequelle im Abstand von der Folie angeordnet ist und wobei die Folie zum Aufreißen gebracht wird und/oder mindestens teilweise verbrennt.13. Device for opening at least one chamber sealed with a film, characterized by a heat source for briefly heating the film and / or a gas present in the chamber, the heat source being arranged at a distance from the film and wherein the film is torn open is and / or at least partially burned.
14. Vorrichtung nach Anspruch 13, wobei in der Kammer ein Gut mit einer darüber angeordneten Gasschicht enthalten ist und die Hitzequelle das in der Kammer vorhandene Gut nicht oder nur geringfügig erwärmt wird. 14. The apparatus of claim 13, wherein the chamber contains a good with a gas layer arranged above it and the heat source does not heat the material present in the chamber or only slightly.
15. Vorrichtung nach Anspruch 13 oder 14, wobei durch die Hitzequelle das Gasvolumen so weit ausgedehnt wird, daß die Folie aufreißt.15. The apparatus of claim 13 or 14, wherein the gas volume is expanded by the heat source so far that the film tears.
16. Vorrichtung nach Anspruch 15, wobei die Temperatur der Hitzequelle und der Abstand so eingestellt sind, daß das Folienmaterial erweicht.16. The apparatus of claim 15, wherein the temperature of the heat source and the distance are set so that the film material softens.
17. Vorrichtung nach einem der Ansprüche 13 bis 16, wobei die Hitzequelle das Folienmaterial auf die Entzündungstemperatur erwärmt und die Folie mindestens teilweise einschmilzt oder verbrennt.17. The device according to any one of claims 13 to 16, wherein the heat source heats the film material to the ignition temperature and at least partially melts or burns the film.
18. Vorrichtung nach einem der vorstehenden Ansprüche, mit einer Einrichtung, die die Kammer und vorzugsweise das darin enthaltene Gut kühlt.18. Device according to one of the preceding claims, with a device that cools the chamber and preferably the material contained therein.
19. Vorrichtung nach Anspruch 18, wobei Eis oder Trockeneis oder eine Kühleinrichtung die Kammer und/oder einen Träger, in dem die Kammer ausgebildet ist, kühlt.19. The apparatus of claim 18, wherein ice or dry ice or a cooling device cools the chamber and / or a carrier in which the chamber is formed.
20. Vorrichtung nach einem der vorstehenden Ansprüche, wobei eine Einrichtung die Hitzequelle für eine Zeit von 0,5 s bis 5 s aktiviert.20. Device according to one of the preceding claims, wherein a device activates the heat source for a time of 0.5 s to 5 s.
21. Vorrichtung nach einem der vorstehenden Ansprüche mit einer Einrichtung zum relativen Annähern der Hitzequelle an die Folie.21. Device according to one of the preceding claims with a device for the relative approximation of the heat source to the film.
22. Vorrichtung nach einem der vorstehenden Ansprüche, wobei die Hitzequelle eine offene Flamme aufweist und vorzugsweise ein Gasbrenner ist. 22. Device according to one of the preceding claims, wherein the heat source has an open flame and is preferably a gas burner.
23. Vorrichtung nach einem der vorstehenden Ansprüche, wobei die Hitzequelle einen Heißluftstrom bereitstellt und vorzugsweise eine Heißluftpistole ist.23. The device according to any one of the preceding claims, wherein the heat source provides a hot air stream and is preferably a hot air gun.
24. Vorrichtung nach einem der vorstehenden Ansprüche, wobei die Folie ein thermoplastisches Material aufweist und der Träger eine mehrere Kammern aufweisende Mikrotiterplatte oder Microtape ist, die mit der Folie heißversiegelt worden sind.24. Device according to one of the preceding claims, wherein the film has a thermoplastic material and the carrier is a multi-chamber microtiter plate or microtape, which have been heat-sealed with the film.
25. Vorrichtung nach einem der vorstehenden Ansprüche mit einer Einrichtung zum Ableiten von entstehenden Gasen, insbesondere der durch eine Verbrennung der Folie entstehenden Gase.25. Device according to one of the preceding claims with a device for discharging gases formed, in particular the gases produced by combustion of the film.
26. Verwendung einer mit einer Folie verschlossenen Kammer, die gemäß einem Verfahren nach einem der Ansprüche 1 - 12 oder mit einer Vorrichtung nach einem der Ansprüche 13 - 25 geöffnet werden kann zum Lagern von chemischen oder biologischen Proben.26. Use of a chamber closed with a film, which can be opened according to a method according to one of claims 1-12 or with a device according to one of claims 13-25 for storing chemical or biological samples.
27. Verwendung von Anspruch 26, wobei mehrere Kammern in einer Mikrotiterplatte bzw. einem Microtape angeordnet sind.27. Use of claim 26, wherein a plurality of chambers are arranged in a microtiter plate or a microtape.
28. Verwendung nach Anspruch 26 oder 27, wobei als biologische Proben eukariotische oder prokariotische Zellen, Viren, Proteine oder Nukleinsäuren gelagert werden.28. Use according to claim 26 or 27, wherein eukariotic or prokariotic cells, viruses, proteins or nucleic acids are stored as biological samples.
29. Verwendung nach einem der Ansprüche 26 bis 28, wobei das Lagern bei einer Temperatur von - 20°C bis - 70°C erfolgt.29. Use according to one of claims 26 to 28, wherein the storage is carried out at a temperature of from -20 ° C to - 70 ° C.
30. Verwendung nach einem der Ansprüche 26 bis 29, wobei in einem ersten Schritt Proben in den Vertiefungen einer Mikrotiterplatte oder einem Microtape angeordnet werden, in einem zweiten Schritt die Vertiefungen der Mikrotiterplatte oder dem Microtape mit einer Folie vorzugsweise durch Heißversiegeln verschlossen werden, in einem dritten Schritt die Mikrotiterplatte oder das Microtape gelagert wird, in einem vierten Schritt eine oder mehrere der Vertiefung, vorzugsweise eine oder mehrere Reihen der Vertiefungen einer Mikrotiterplatte oder einem Microtape geöffnet werden, und in einem fünften Schritt die Proben der freigelegten Vertiefungen untersucht bzw. für eine anschließende Untersuchung entnommen werden, wobei die Schritte 3 bis 5 einmal oder mehrmals wiederholt werden.30. Use according to one of claims 26 to 29, wherein in a first step samples are arranged in the wells of a microtiter plate or a microtape, in a second step the wells of the microtiter plate or the microtape are sealed with a film, preferably by heat sealing, in a third step the microtiter plate or the microtape is stored, in a fourth step one or more of the wells, preferably one or more rows of the wells of one Microtiter plate or a microtape are opened, and in a fifth step the samples of the uncovered wells are examined or removed for a subsequent examination, steps 3 to 5 being repeated once or several times.
31. Verwendung nach Anspruch 30, wobei Proben und/oder Vertiefungen bei dem zweiten Schritt und/oder dem vierten Schritt gekühlt werden.31. Use according to claim 30, wherein samples and / or wells are cooled in the second step and / or the fourth step.
32. Verwendung einer mit einer Folie verschlossenen Kammer, die gemäß einem Verfahren nach einem der Ansprüche 1 - 12 oder mit einer Vorrichtung nach einem der Ansprüche 13 - 25 geöffnet werden kann zum Lagern von Bauteilen in der Elektronikindustrie . 32. Use of a chamber closed with a film which can be opened according to a method according to one of claims 1-12 or with a device according to one of claims 13-25 for storing components in the electronics industry.
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