WO1998005358A1

WO1998005358A1 - Sustained release preparations for injection containing gabexate mesylate

Info

Publication number: WO1998005358A1
Application number: PCT/JP1997/002636
Authority: WO
Inventors: Shunji Nagata; Kazuo Takeshima; Horonao Kobayashi
Original assignee: Shionogi & Co., Ltd.
Priority date: 1996-08-02
Filing date: 1997-07-30
Publication date: 1998-02-12
Also published as: AU3706897A

Abstract

Sustained release preparations for injection characterized by containing medicinally active ingredients, fibrinogen, blood-coagulation factor 13 thrombin and gabexate mesylate; and kits for preparing the same at the time of use. When processed into aqueous solutions for injection, these preparations do not immediately coagulate at room temperature. After injection, they rapidly gel or solidify in vivo and thus form fibrin clots followed by the sustained release of the drugs encapsulated therein. Thus, these preparations are fibrin clot forming agents which can be easily injected without requiring any special technique.

Description

明細書 Specification

メシル酸ガべキサートを含有する注射用徐放性製剤技術分野 Injectable sustained-release preparations containing gabexate mesylate

本発明は、種々の医薬活性成分の薬効持続化に有用な注射用徐放性製剤に関する。更に詳しくは本発明は、医薬活性成分、フイブリノ一ゲン、血液凝固第 1 3 因子、トロンビン及びメシル酸ガべキサートを含む注射用徐放性製剤、並びにその用時調製用キットに関し、これらは、特にタンパク性医薬品を皮下又は筋肉内投与するのに好適である。 The present invention relates to a sustained-release preparation for injection, which is useful for sustaining the efficacy of various pharmaceutically active ingredients. More specifically, the present invention relates to a sustained-release preparation for injection containing a pharmaceutically active ingredient, fibrinogen, blood coagulation factor 13, thrombin and gabexate mesylate, and a kit for preparing the same at the time of use. They are particularly suitable for administering proteinaceous drugs subcutaneously or intramuscularly.

背景技術 Background art

医薬活性成分の薬効持続化を目的とする製剤として、既にフイブリノ一ゲンの凝固によるフイブリン塊（以下、フイブリンクロット又は単にクロットという）形成の機構を利用した製剤がいくつか報告されている。 As preparations for maintaining the efficacy of pharmaceutically active ingredients, there are already some preparations that utilize the mechanism of fibrin clot formation (hereinafter referred to as fibrin clot or simply clot) by coagulation of fibrinogen. It has been reported.

文献（BIOTHERAPY, 5 ( 6 ), 1086 - 1090, 1991, 高橋ら）には、 I L- 2 ' Fibrin 製剤の徐放効果及びマウス Co i οπ26皮下移植腫癟に対する抗腫瘍効果が報告されている。ここでは、 in vitro試験として、 A液（Iい 2、フイブリノ一ゲン、血液凝固第 1 3因子を含むァプロチニン溶液）と B液（トロンビンを含む塩化カルシゥム溶液）を当量混合して作成した I L- 2· Fibrin製剤を固化させて徐放性を検討しており、用いるフイブリノ一ゲンとトロンビンとの配合比率は、フイブリノ一ゲン 8 0 m gに対してトロンビンが 2 5 0単位である。更に、 in vivo試験においては、該 A液及び B液を 2本の注射器で別々にマウスへ皮下投与している。特開平 6— 3 3 6 4 4 4号には、フイブリノ一ゲン及びノ又はフイブリンを含有する徐放性医薬品組成物が開示されている。その適用薬物は脂溶性薬物であり、また添加剤としてァニオン性界面活性剤を必須とする。更に、フイブリンを調製する際のフィプリノーゲンとトロンビンとの配合比率は，フィプリノーゲン 8 0 mgに対してトロンビンが 3 0〜 5 0 0単位である„ 特開平 7— 4 1 4 3 2号には、薬物を封入したリボソーム又はリピッドマイクロスフェアーがフィプリノーゲン又はフィプリン中に均一に分散した徐放性医薬品組成物が開示されている。フイブりンを調製する際のフィプリノーゲンとトロンビンとの配合比率は、フイブりノ一ゲン 8 O m gに対してトロンビンが 1 2 0 〜 2 0 0 0単位である。 In the literature (BIOTHERAPY, 5 (6), 1086-1090, 1991, Takahashi et al.), A sustained release effect of IL-2 'Fibrin preparation and an antitumor effect against mouse Co i οπ26 subcutaneous transplant tumor were reported. . Here, as an in vitro test, an equal amount of solution A (aprotinin solution containing fibrinogen, blood coagulation factor 13) and solution B (calcium chloride solution containing thrombin) were mixed. The IL-2 Fibrin preparation prepared above was solidified to study sustained release.The ratio of fibrinogen to thrombin used was 80 mg of fibrinogen and 2 for thrombin. 50 units. In the in vivo test, the solution A and the solution B were separately administered subcutaneously to mice using two syringes. Japanese Patent Application Laid-Open No. Hei 6-333644 discloses a sustained-release pharmaceutical composition containing fibrinogen and fibrin or fibrin. The applied drug is a fat-soluble drug, and an anionic surfactant is essential as an additive. Furthermore, the blending ratio of fibrinogen and thrombin when preparing fibrin is such that thrombin is 30 to 500 units per 80 mg of fibrinogen. Japanese Patent Application Laid-Open No. 7-41432 discloses a sustained-release pharmaceutical composition in which drug-encapsulated ribosomes or lipid microspheres are uniformly dispersed in fiprinogen or fiprin. . The blending ratio of fibrinogen to thrombin in preparing fibrin is such that thrombin is 120 to 2000 units per 8 O mg of fibrinogen.

このように、フイブリンクロット形成機構を利用した従来の徐放化製剤では、フィプリノーゲンに対するトロンビンの配合比率が相対的に高く、典型的には、例えばフイブリノ一ゲン 8 0 m gに対してトロンビンが約 2 5 0単位の割合である。そのため両成分を混合すると比較的短時間でフイブリンクロッ卜が形成されて注射液が凝固してしまうので、溶液状態のままで投与するのが不可能になる恐れがある。そのため、注射剤として投与する場合には、薬物、フイブリノ一ゲン及びトロンビンを含有する混合液を調製した後、注射器へ速やかにセットしかつ瞬時に投与するか、もしくはフイブリノ一ゲンを含有する溶液とトロンビンを含有する溶液とを別々に注射する必要があった。又，該両液を、 W O 94/ 1 227号等に記載の 2液混合型の注射器にセットしたとしても、混合後にはやはり速やかに投与されなければならない。即ちこのような現状は、臨床上の投与操作としては満足のいくものではなかった。よって、特別な技法を要することなく容易に注射可能な徐放性製剤またはそれを用時調製するためのキッ卜の開発が要望されている。 As described above, in the conventional sustained-release preparation utilizing the fibrin clot formation mechanism, the mixing ratio of thrombin to fibrinogen is relatively high, and typically, for example, 80 mg of fibrinogen is used. On the other hand, thrombin accounts for about 250 units. Therefore, when the two components are mixed, a fibrin clot is formed in a relatively short time and the injection solution solidifies, so that it may be impossible to administer the solution in a solution state. Therefore, when administering as an injection, a mixed solution containing the drug, fibrinogen and thrombin is prepared, and then immediately set in a syringe and administered immediately, or the fibrinogen is used. And the solution containing thrombin had to be injected separately. Also, even if the two solutions are set in a two-component syringe described in WO 94/1227, etc., they must still be administered immediately after mixing. That is, this situation was not satisfactory as a clinical administration operation. Therefore, there is a demand for the development of a sustained-release preparation which can be easily injected without requiring any special technique, or a kit for preparing the same at the time of use.

尚、文献（ J ouna l o f Pharmaceu t i c a 1 Sc i ence s/75 ( 1 2) , 1 1 7 1 - 1 1 74, E . Menega t t i , e t aに）には、メシル酸ガべキサ一トが牛トロンビンの酵素活性を抑制することが報告されているが、メシル酸ガべキサートが 8莘臓炎や汎発性血管内凝固症候群 ( D I C ) 等の治療に有用であることを記載しているに過ぎず、薬物の徐放化については何ら示唆していない。 In the literature (Jouna lof Pharmaceuticals 1 Sciences / 75 (1 2), 1 17 1-1 174, E. Menega tti, eta), Gabexate mesylate was used for cattle. Although it has been reported to inhibit the enzymatic activity of thrombin, it describes that gabexate mesylate is useful for the treatment of octitis inflammation and general intravascular coagulation (DIC). No suggestion is made regarding the sustained release of the drug.

発明を実施するための最良の形態 BEST MODE FOR CARRYING OUT THE INVENTION

本発明者らは上記課題に鑑み鋭意検討した結果、フイブリンクロット形成制御のための添加剤としてメシル酸ガべキサートを使用すれば、使用時に特段の技法を要しない注射用徐放性製剤が得られることを見出し本発明を完成した。即ち、本発明は、医薬活性成分、フイブリノ一ゲン、血液凝固第 1 3因子、トロンビン及びメシル酸ガべキサートを含むことを特徴とする注射用徐放性製剤（以下、本発明製剤という）を提供する。 The present inventors have conducted intensive studies in view of the above problems, and as a result, have found that the control of fibrin clot formation is The present inventors have found that the use of gabexate mesylate as an additive for the drug provides a sustained-release preparation for injection that does not require any special technique at the time of use. That is, the present invention provides a sustained-release preparation for injection, which comprises a pharmaceutically active ingredient, fibrinogen, blood coagulation factor 13, thrombin, and gabexate mesylate (hereinafter referred to as the present preparation). ) Is provided.

本発明製剤は、注射液として調製された後、室温ではすぐには凝固しないが、生体内投与後には，薬物が放出される前にフィブリンクロットを速やかに形成して薬物をクロット内に取込み、その後、徐々に薬物を放出することが可能な注射用の組成物である。 The preparation of the present invention does not immediately coagulate at room temperature after being prepared as an injection solution, but after in vivo administration, a fibrin clot is rapidly formed before the drug is released, and the drug is placed in the clot. It is an injectable composition that can take up and then slowly release the drug.

本発明製剤の好ましい形態としては、例えば、（ 1 ) フイブリノ一ゲンとメシル酸ガベキサー卜との配合比率が、フイブリノ一ゲンが 8 0 m gに対してメシル酸ガべキサートが 0. 0 5〜 3 0 m gに相当する比率である、（ 2 ) フイブリノ一ゲンとメシル酸ガべキサートとの配合比率が，フイブリノ一ゲンが 8 0 m gに対してメシル酸ガべキサ一卜が 0. 5〜： L Omgに相当する比率である、（ 3) フイブリノーゲンとトロンビンとの配合比率力フイブりノ一ゲンが 8 Omgに対してトロンビンが 1 ~ 3 0 0単位に相当する比率である、（4 ) フイブリノ一ゲンとトロンビンとの配合比率が、フイブリノ一ゲンが 8 0 m gに対して卜ロンビンが 1〜 3 0単位に相当する比率である、（ 5 ) 各添加剤の配合比率が、フィブリノ一ゲン 8 0 m gに対して、メシル酸ガべキサートが 0. 0 5〜 3 0 mg、好ましくは 0. 5〜 1 0 m gに相当する比率であり、トロンビンが 1〜3 0 0単位、好ましくは 1〜 3 0単位に相当する比率である、（ 6 ) 本発明製剤が更に力ルシゥムイオン又はカルシウム塩を含有する > ( 7 ) 本発明製剤が更にヒアルロン酸を含有する、（ 8 ) 医薬活性成分がタンパク性医薬品である、（ 9 ) 医薬活性成分がィン夕ーロイキン一 2またはインターフェロン— 7"である、（ 1 0 ) 本発明製剤が水溶液である、（ 1 1 ) 本発明製剤が凍結乾燥製剤である場合等が例示される。さらに本発明は、医薬活性成分，フイブリノ一ゲン、血液凝固第 1 3因子、卜ロンビン及びシル酸ガべキサートを含むことを特徴とする、上記本発明製剤を用時調製するためのキット（以下、本発明キットという）を提供する。本発明キッ卜の好ましい形態としては、例えば（ 1 ) フイブリノ一ゲンとトロンビンとが別々の容器に収納されている場合，（ 2 ) 以下の容器：（A) フイブリノ一ゲン及び血液凝固第 1 3因子を含む容器、および（B ) トロンビンを含む容器、を含む場合（但し、医薬活性成分及びメシル酸ガべキサ一トは、それぞれいずれの容器に含まれていてもよい）、（ 3 ) 医薬活性成分を上記 Aの容器、メシル酸ガべキサ一トを上記 Bの容器に含む場合、（ 4 ) 少なくともいずれかの成分を凍結乾燥品として含む場合、（ 5〉更にカルシウム塩を含有する場合等が例示される。以下、本発明について更に詳しく説明する。 Preferred forms of the preparation of the present invention include, for example, (1) the mixing ratio of fibrinogen to gabexate mesilate is such that the ratio of gabexate mesylate is 0 to 80 mg of fibrinogen; (2) The mixing ratio of fibrinogen and gabexate mesylate is equivalent to 80 to 30 mg of fibrinogen. 0.5-: The ratio is equivalent to L Omg. (3) Mixing ratio of fibrinogen and thrombin 1--30 thrombin for 8 Omg of fibrinogen. (4) The mixing ratio of fibrinogen to thrombin is 80 mg of fibrinogen and 1 to 30 units of thrombin for 80 mg of fibrinogen. (5) The mixing ratio of each additive is 80 mg of fibrinogen, The ratio of gabexate is 0.05 to 30 mg, preferably 0.5 to 10 mg, and thrombin is 1 to 300 units, preferably 1 to 30 units. (6) the preparation of the present invention further contains calcium ion or a calcium salt> (7) the preparation of the present invention further contains hyaluronic acid, (8) the pharmaceutically active ingredient is a proteinaceous drug (9) the pharmaceutically active ingredient is inulin-leukin-12 or interferon-7 "; (10) the preparation of the present invention is an aqueous solution; and (11) the preparation of the present invention is a lyophilized preparation. Cases are shown. Furthermore, the present invention provides a method for preparing the above-mentioned preparation of the present invention, which comprises a pharmaceutically active ingredient, fibrinogen, blood coagulation factor 13, trombin, and gabexyl sylate. A kit (hereinafter, referred to as a kit of the present invention) is provided. Preferred forms of the kit of the present invention include, for example, (1) when fibrinogen and thrombin are housed in separate containers, (2) the following containers: (A) fibrinogen and A container containing blood coagulation factor 13 and (B) a container containing thrombin (provided that the pharmaceutically active ingredient and gabexate mesylate are contained in either container, respectively) (3) When the pharmaceutically active ingredient is contained in the container (A) and the gabexate mesylate is contained in the container (B), (4) When at least one of the components is contained as a freeze-dried product, 5> Examples further include the case of further containing a calcium salt, etc. Hereinafter, the present invention will be described in more detail.

本発明に適用可能な医薬活性成分としては、薬効の持統化が望まれて、かつ注射により皮下または筋肉内に投与されてその近傍で局所的にまたは血中に移行して全身的に作用し得る薬物が幅広く適用できる。具体的には骨関連ペプチドとしてカルシトニン、エルシトニン、骨形成因子（B M P ) , 副甲状腺ホルモン等、ナトリウム利尿ペプチドとして心房性ナトリウム利尿ペプチド（AN P ) 、 AN P分解酵素阻害剤、 B型ナトリウム利尿ペプチド（ B N P ) 、 C型ナトリウム利尿ペプチド等（C N P ) 、エンドセリン関連物質としてエンドセリン受容体拮抗剤、エンドセリン変換酵素等、血小板増殖因子としてトロンボポェチン（T P O) 等、リンフォカイン類として腫'傷壊死因子（T N F ) 、各種インタ一ロイキン（ I L - 1 , 2 , 3， 4 , 5 , 6 , 7 , 8 , 9 , 1 0 , 1 1 , 1 2 , 1 3 , 1 5等）、各種インタ一フエロン（ I F N— α . β , r ) 、コロニー刺激因子（C S F) 、マクロファージ活性化因子（MA F ) 等，各種成長因子類として神経成長 · 栄¾ 因子、上皮細胞成長因子（ E G F ) 、繊維芽細胞成長因子（ F G F ) 、インスリン様成長因子 I ( I G F I ) 、血管形成因子、血小板由来成長因子（ P D G F ) 、血液幹細胞成長因子（ S C F ) 、肝細胞成長因子（H G F ) , トランスフォーミング成長因子等、消化管ホルモンとしてガストリン、グルカゴン、セクレチン、ボンべシン、モチリン、コレシストキニン等、癌関連物質としてメチォネ一ス、ネオカルチノスタチン等、その他としてインスリンおよびその誘導体、エリス口ボェチン（E P O) 、ヒト成長ホルモン、アンチセンス医薬品、ワクチン、免疫抑制剤、下垂体性腺刺激ホルモン放出ホルモン（L H R H) のアン夕ゴニストとしてセトロレリイクス（ce orel ix) 等が例示される。その中でも好ましくはィンターロイキンやインターフェロン等のタンパク性医薬品である。 Pharmaceutical active ingredients applicable to the present invention are desired to have prolonged drug efficacy, and are administered subcutaneously or intramuscularly by injection, and locally or locally in the vicinity thereof or migrate to the blood and systemically. A wide variety of drugs that can act are applicable. Specifically, calcitonin, elcitonin, bone morphogenetic factor (BMP), parathyroid hormone, etc. as bone-related peptides, and atrial sodium diuretic peptide (ANP), ANP degrading enzyme inhibitor, Sodium-type diuretic peptide (BNP), C-type sodium diuretic peptide (CNP), endothelin-related substances such as endothelin receptor antagonists, endoselin converting enzyme, etc., thrombopoietin (TPO) as platelet growth factor, etc. Tumor wound necrosis factor (TNF) and various interleukins (IL-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,1,1) 3, 15), various interferons (IFN-α.β, r), colony stimulating factor (CSF), macrophage activating factor (MAF), etc. Epithelial cell growth factor (EGF), fibroblast growth factor (FGF), insulin-like growth factor I (IGFI), angiogenesis factor, platelet-derived growth factor (PDGF), blood stem cell growth factor (SCF), hepatocyte growth factor (HGF ), Transformi Gastrointestinal hormones such as gastrin, glucagon, secretin, bombesin, motilin, cholecystokinin, etc .; cancer-related substances such as methionase and neocarzinostatin; and insulin and other substances. Cetrorelix (ceorelix) as a derivative of its derivative, Eris mouth boetin (EPO), human growth hormone, antisense drugs, vaccines, immunosuppressants, and pituitary gonadotropin-releasing hormone (LHRH) ) And the like. Among them, preferred are protein drugs such as interleukin and interferon.

該医薬活性成分の配合量は、その種類、対象疾患、患者の状態、投与回数等を考慮の上、適宜設定すればよい。 The amount of the pharmaceutically active ingredient may be appropriately set in consideration of the type, target disease, patient condition, number of administrations, and the like.

本発明製剤は生体内に投与されると、活性化されたトロンビンがフィプリノ一ゲンに作用してフイブリンモノマー. 次いでフイブリンポリマーを形成し、それがカルシウムイオン存在下、血液凝固第 1 3因子により架橋（cross- 1 inking) されて最終的に医薬活性成分を一部又は全部取込んだ形でフィブリンクロッ卜が形成される。その後、薬物がクロット内から徐放出されることにより、薬効の持統化が達成される。 When the preparation of the present invention is administered to a living body, the activated thrombin acts on fibrinogen to form a fibrin monomer. Then, a fibrin polymer is formed. The agent is cross-linked by a factor, and finally a fibrin clot is formed in a form incorporating a part or all of the pharmaceutically active ingredient. Thereafter, sustained release of the drug from the clot achieves sustained efficacy.

メシル酸ガべキサートは、本発明製剤が水溶液として調製された後、生体内に投与されるまでの間にフイブリンクロットを形成し凝固してしまうのを防止する。その添加量は、内包する医薬活性成分の種類や目的とする徐放化の度合い、トロンビンの配合量等により異なり一概には規定しにくいが、本発明製剤においては通常、フイブリノ一ゲンが 8 0 m gに対してメシル酸ガべキサートが約 0. 0 5 〜3 0 mg、好ましくは約 0. 5〜1 0mg、更に好ましくは約 l ~ 1 0mg、とりわけ約 1 ~ 5 mgに相当する比率である。メシル酸ガべキサー卜の添加量が多すぎる場合には、トロンビン配合量を比較的少なく設定した本発明製剤において、生体内投与後のフイブリンクロット形成が遅延し，その結果、内包薬物の大部分がクロッ卜が形成される前に投与部位から急激に拡散、放出されてしまうので、薬効の持続化を達成するのが困難となる。一方、メシル酸ガべキサートの添加量が少なすぎると、トロンビン配合量を比較的多く設定した本発明製剤において、水溶液中におけるトロンビンの作用を抑制するのが不十分となり、その結果、該水溶液を注射器にセッ卜して生体内に投与するまでに十分な時間が確保されない。よって、慎重な薬物投与が出来ないばかり力、、場合によっては注射液が投与前に注射器内で凝固してしまい投与不可能な事態に陥る。 Gabexate mesylate prevents the formation and coagulation of fibrin clot between the time when the preparation of the present invention is prepared as an aqueous solution and the time when the preparation is administered in vivo. The amount added depends on the type of the contained pharmaceutically active ingredient, the intended degree of sustained release, the amount of thrombin, and the like, and is generally difficult to define. However, in the preparation of the present invention, fibrino is usually used. Gabexate mesylate is used in an amount of about 0.05 to 30 mg, preferably about 0.5 to 10 mg, more preferably about 1 to 10 mg, and particularly about 1 to 5 mg per 80 mg of a gene. Is the ratio corresponding to When the amount of gabexate mesylate added is too large, fibrin clot formation after in vivo administration is delayed in the preparation of the present invention in which the amount of thrombin is set to a relatively small amount. Most of these are rapidly diffused and released from the site of administration before the clot is formed, making it difficult to achieve sustained efficacy. On the other hand, the addition of gabexate mesylate If the addition amount is too small, it becomes insufficient to suppress the action of thrombin in the aqueous solution in the preparation of the present invention in which the blending amount of thrombin is set relatively large, and as a result, the aqueous solution is set in a syringe and produced. Insufficient time to administer to the body. As a result, careful administration of the drug is not possible, and in some cases, the injection solution solidifies in the syringe before administration and the injection becomes impossible.

またトロンビンの配合量との関係でメシル酸ガべキサートの好ましい添加量を規定するならば、例えばトロンビン 3単位に対し約 0 . 1〜 3 m g、トロンビン 3 0単位に対し約 2 ~ 8 m gである。 If the preferred amount of gabexate mesylate is specified in relation to the amount of thrombin, for example, about 0.1 to 3 mg for 3 units of thrombin and about 2 to 8 mg for 30 units of thrombin It is.

フイブリノ一ゲンに対するトロンピンの配合比率は、内包する医薬活性成分の種類、目的とする徐放化の度合い、メシル酸ガべキサートの配合量等に応じて適宜設定すればよいが、通常、フイブリノ一ゲンが 8 0 m gに対してトロンビンが約 1 〜 3 0 0単位、好ましくは約 1 〜 3 0単位、より好ましくは約 1 から 1 0単位、例えば 3単位である。トロンビンの配合量が多すぎるとメシル酸ガべキサー卜の効きが鈍くなつて、投与前の注射溶液がクロットを形成するのを制御できなくなる恐れがある。一方、トロンビンの配合量が少なすぎると、生体内投与後のクロッ卜形成が遅くなり、十分な徐放化が達成されない恐れがある。 The mixing ratio of thrompine to fibrinogen may be appropriately set according to the type of the contained pharmaceutically active ingredient, the intended degree of sustained release, the amount of gabexate mesylate, and the like. Usually, thrombin is used in an amount of about 1 to 300 units, preferably about 1 to 30 units, more preferably about 1 to 10 units, for example, 3 units per 80 mg of fibrinogen. If the amount of thrombin is too large, the effectiveness of gabexart mesylate may be reduced, and it may be impossible to control the clot formation of the injection solution before administration. On the other hand, if the amount of thrombin is too small, the clot formation after in vivo administration may be delayed, and sufficient sustained release may not be achieved.

血液凝固第 1 3因子の配合比率は、通常、フイブリノ一ゲンが 8 0 m gに対して約 0 . 0 5〜 1 0 0単位、好ましくは約 0 . 1 〜 8 0単位、更に好ましくは約 0 . 2 5〜 6 0単位である。血液凝固第 1 3因子の配合量が多い分には特に支障はないと考えられる力少なすぎるとフイブリンクロットが軟らかくなり、薬物の徐放出性に悪影響を及ぼすので好ましくない。 Usually, the mixing ratio of blood coagulation factor 13 is about 0.05 to 100 units, preferably about 0.1 to 80 units, more preferably about 0.1 to 80 units per 80 mg of fibrinogen. Approximately 0.25 to 60 units. It is considered that there is no particular problem with a large amount of the blood coagulation factor 13 if the amount is too small, the fibrin clot becomes too soft and adversely affects the sustained release of the drug.

本発明製剤においては、任意にカルシウムイオンが含有され得る。本発明製剤が生体内に投与された後、フイブリンクロットが形成されるためには、カルシゥムイオンの存在が必須であるが、該カルシウムイオンは生体内にも存在するのであらかじめ製剤成分として含有しない場合でも、フイブリンクロッ卜は形成され得る。あらかじめ製剤成分としてカルシウムイオンを含有しておく場合のカルシウムイオンの配合比率は、通常、フイブリノ一ゲン 8 O m gに対して約 5〜 2 0 0 m m 0 1 , 好ましくは約 1 0〜1 0 0 01111 0 1 、より好ましくは約 3 0〜 7 0 m m o 1 に相当する比率である。該カルシウムイオンは、例えば塩化カルシウム等の製薬上許容されるカルシウム塩として配合され得る。 The preparation of the present invention may optionally contain calcium ions. In order for fibrin clots to be formed after the preparation of the present invention is administered in vivo, the presence of calcium ions is essential. If not, a fibrin clot can be formed. When calcium ions are contained in advance as a formulation component, the mixing ratio of calcium ions is usually about 5 to 200 mm 01, preferably about 10 to 10 mm for 8 O mg of fibrinogen. 0 01111 0 1, more preferably a ratio corresponding to about 30 to 70 mmo 1. The calcium ion can be formulated as a pharmaceutically acceptable calcium salt such as calcium chloride.

本発明製剤は更に、製剤の安定化剤、 p H調節剤、等張化剤、保存剤等の添加剤を任意に含有し得る。安定化剤としては、例えば、人血清アルブミン、ァプロチニン、 Lーァスコルビン酸、ピロ亜硫酸ナトリウム、 α — トコフエロール等が例示される。 p ii調節剤としては、例えば、塩酸、クェン酸塩、酢酸塩、リン酸塩、各種アミノ酸塩等が例示される。等張化剤としては、例えば、食塩、ブドウ糖、マンニトール等が例示される。保存剤としては、例えば、ベンジルアルコール、安息香酸またはそのエステル類、塩化ベンザルコニゥム等が例示される。また本発明製剤はメシル酸ガべキサ一ト以外にも、薬物徐放化のための調節剤を含有していてもよく、例えば，グァニジン安息香酸誘導体（例：メシル酸カモスタツ卜、メシル酸ナファモスタツト、メシル酸パ夕モスタツト等）、アルガトロバン、ヒルジン等、メシル酸ガべキサートと同様にトロンビンの酵素活性を抑制する物質やヒアルロン酸、リン脂質、？し酸/グルコール酸系のポリマーの微粒子（マイクロスフェアー）等が例示される。 The preparation of the present invention may further optionally contain additives such as a preparation stabilizer, a pH regulator, an isotonic agent, a preservative and the like. Examples of the stabilizer include human serum albumin, aprotinin, L-ascorbic acid, sodium pyrosulfite, α-tocopherol and the like. Examples of the pii regulator include hydrochloric acid, citrate, acetate, phosphate, and various amino acid salts. Examples of the tonicity agent include salt, glucose, mannitol and the like. Examples of the preservative include benzyl alcohol, benzoic acid or its esters, and benzalkonium chloride. The preparation of the present invention may contain, in addition to gabexate mesylate, a regulator for sustained release of the drug. For example, guanidine benzoic acid derivatives (eg, camostat, mesylate, mesylate) Similar to gabexate mesylate, substances that inhibit thrombin enzyme activity, hyaluronic acid, phospholipids, etc. Examples thereof include fine particles (microspheres) of a citric acid / glycolic acid polymer.

上記の添加剤の種類、配合量は、その添加目的、医薬活性成分の種類 ■ 量、併用する他の添加剤の種類等を考慮して適宜設定すればよい。 The type and amount of the above-mentioned additives may be appropriately set in consideration of the purpose of addition, the type of the pharmaceutically active ingredient, the amount thereof, the type of other additives used together, and the like.

本発明製剤は、上記の各成分、任意の添加剤を含有する限りにおいて、粉末混合物、または注射可能な程度の粘性である水溶液、凍結乾燥品等、いずれの形態であってもよい。本発明製剤を注射用の水溶液として調製するには、好ましくは、以下に説明する本発明キットを用いればよい。 The preparation of the present invention may be in any form, such as a powder mixture, an aqueous solution having a viscosity such that it can be injected, or a lyophilized product, as long as it contains the above-mentioned components and optional additives. In order to prepare the preparation of the present invention as an aqueous solution for injection, the kit of the present invention described below may be preferably used.

次に本発明キットについて説明する。本発明キットは，上記本発明製剤を用時調製するためのものであり、医薬活性成分、フイブリノ一ゲン、血液凝固第 1 3 因子、トロンビン及びメシル酸ガべキサ一トを含むことを特徴とする。基本的には、本発明キットは、本発明製剤に含有され得る前記各成分を本発明製剤の場合と同量含有する。キット中の各成分の収納形態については、例えば本発明キットを凍結乾燥品として製造する場合の取扱い易さ等の点から、少なくともフィプリノ一ゲンとトロンビンとが別々の容器に収納されている方が好ましい。代表的には，本発明キットは、以下の容器：（A ) フイブリノ一ゲン及び血液凝固第 1 3 因子を含む容器，および（B ) トロンビンを含む容器、から構成される。この場合、医薬活性成分及びメシル酸ガべキサートは、それぞれ A、 Bのいずれの容器に含まれていてもよいが、より好ましくは、医薬活性成分を Aの容器、メシル酸ガべキサー卜を Bの容器に含む。また本発明キットは好ましくは、少なくともいずれかの成分を凍結乾燥品として含む。また本発明キットは更にカルシウム塩を含有していてもよく、好ましくは、上記 A、 B等のクロット形成成分を含む容器とは別の容器に，例えば塩化カルシウム水溶液等として存在し得る。本発明キットを用いた本発明製剤の調製方法を以下に例示する。 Next, the kit of the present invention will be described. The kit of the present invention is for preparing the above preparation of the present invention at the time of use, and comprises a pharmaceutically active ingredient, fibrinogen, blood coagulation 13. It is characterized by containing factor, thrombin and gabexate mesylate. Basically, the kit of the present invention contains the same amount of each of the components that can be contained in the preparation of the present invention as in the case of the preparation of the present invention. Regarding the storage form of each component in the kit, at least fibrinogen and thrombin are stored in separate containers, for example, in terms of ease of handling when the kit of the present invention is manufactured as a freeze-dried product. Is preferred. Typically, the kit of the present invention comprises the following containers: (A) a container containing fibrinogen and blood coagulation factor 13, and (B) a container containing thrombin. In this case, the pharmaceutically active ingredient and gabexate mesylate may be contained in any of the containers A and B, respectively. More preferably, the pharmaceutically active ingredient is contained in the container of A and gabexate mesylate. In the container of B. Further, the kit of the present invention preferably contains at least one of the components as a freeze-dried product. The kit of the present invention may further contain a calcium salt. Preferably, the kit may be present in a container different from the container containing the above-described clot-forming components such as A and B, for example, as an aqueous solution of calcium chloride. The method for preparing the preparation of the present invention using the kit of the present invention is exemplified below.

(調製法 1 ) (Preparation method 1)

医薬活性成分、フィプリノーゲン及び血液凝固第 1 3因子を含む凍結乾燥品 ( A ) , 及びトロンビン及びメシル酸ガべキサートを含む凍結乾燥品（B ) を製造する。それぞれを塩化カルシウムを含むかまたは含まない注射用精製水に溶解した後、両液を混合する。該混合は注射器内又は外のいずれで行ってもよい。 (調製法 2 ) A lyophilized product containing a pharmaceutically active ingredient, fibrinogen and blood coagulation factor 13 (A), and a lyophilized product containing thrombin and gabexate mesylate (B) are produced. After dissolving each in purified water for injection with or without calcium chloride, mix both solutions. The mixing may be performed inside or outside the syringe. (Preparation method 2)

医薬活性成分、フイブリノ一ゲン、血液凝固第 1 3因子、及びメシル酸ガべキサ一トを含む凍結乾燥品（A ) 、及びトロンビンを含む凍結乾燥品（B ) を製造する。それぞれを塩化カルシウムを含むかまた.は含まない注射用水に溶解した後、両液を混合する。該混合は注射器内又は外のいずれで行ってもよい。 A freeze-dried product (A) containing a pharmaceutically active ingredient, fibrinogen, blood coagulation factor 13 and gabexate mesylate, and a freeze-dried product (B) containing thrombin are produced. Dissolve each in water for injection with or without calcium chloride and mix both solutions. The mixing may be performed inside or outside the syringe.

(調製法 3 ) (Preparation method 3)

医薬活性成分，フイブリノ一ゲン、血液凝固第 1 3因子、メシル酸ガべキサ一ト、及びトロンビンを含む凍結乾燥品を製造する。該凍結乾燥品を塩化カルシゥムを含むかまたは含まない注射用水に溶解した後、注射器にセッ卜する。 Pharmaceutical active ingredient, fibrinogen, blood coagulation factor 1-3, gabexa mesylate To produce freeze-dried products containing thrombin and thrombin. The lyophilized product is dissolved in water for injection containing or not containing calcium chloride, and then set in a syringe.

凍結乾燥は、含有成分の品質に悪影響を及ぼさない限りにおいて特に制限されるものではなく、周知の凍結乾燥方法を適用し得る。又、本発明製剤を投与する際の注射器としては、通常の注射器または例えば W O 9 4 / 1 2 2 2 7号、 W O 9 5 / 1 7 9 1 6等に記載のキット式注射器等が使用可能である。 Freeze-drying is not particularly limited as long as it does not adversely affect the quality of the ingredients, and well-known freeze-drying methods can be applied. As the syringe for administering the preparation of the present invention, an ordinary syringe or a kit-type syringe described in, for example, WO94 / 122,27, WO95 / 179916, etc. may be used. It is possible.

実施例 Example

以下に本発明の実施例を示すがこれらは本発明をなんら制限するものではない。尚， r I L- 2 にはィムネース（シオノギ）， I F N - rにはィムノマックス〈シオノギ）を用いて試験を行った。 Examples of the present invention will be described below, but these do not limit the present invention at all. The test was performed using Imnas (Shionogi) for rIL-2 and Imnomax <Shionogi> for IFN-r.

実施例 1 ；トロンビンおよびメシル酸ガべキサ一卜の量とクロッ卜の形成時間フイブリノ一ゲン、血液凝固第 1 3因子、トロンビン、カルシウムイオンおよびメシル酸ガべキサートを含有する本発明製剤で、トロンビンまたはメシル酸ガべキサー卜の添加量を変えた時のク口ッ卜の形成時間を測定した。 Example 1 Amount of Thrombin and Gabexate Mesilate and Time of Clot Formation The preparation of the present invention containing fibrinogen, blood coagulation factor 13, thrombin, calcium ions and gabexate mesylate Then, the formation time of cutout was measured when the amount of added thrombin or gabexate mesylate was changed.

(試験方法） (Test method)

( 1 )フイブリノ一ゲン 80 mgと血液凝固第 1 3因子 60単位を緩衝液（pH7. 5) 1 m l に溶解し、氷冷した。 (1) 80 mg of fibrinogen and 60 units of blood coagulation factor III were dissolved in 1 ml of buffer solution (pH 7.5) and cooled on ice.

(2) トロンビンとメシル酸ガべキサートを塩化カルシウム溶液（5. 88 mg/m l )に溶解し、氷冷した。 (2) Thrombin and gabexate mesylate were dissolved in a calcium chloride solution (5.88 mg / ml) and cooled on ice.

(3)上記（1 )と（2)の溶液をそれぞれ 0. 1 m l ずつ、室温（約 2 0で）または 3 7 "C に調整した容器にとり，軽く混合後、容器を転倒した時に流動性が消失した時間をクロット形成時間とした。 3 7でにおけるクロット形成時間は、容器を 37でに調節した水槽中に保温して測定した。 (3) Transfer 0.1 ml of each of the above solutions (1) and (2) to a container adjusted to room temperature (about 20) or 37 "C. The clot formation time at 37 was measured by keeping the vessel warm in a water tank adjusted at 37.

(結果） (Result)

結果を表 1 に示す。 (表 1 ) Table 1 shows the results. (table 1 )

クロッ卜の形成時間（分） Clot formation time (min)

卜ロンビンメシル酸ガべキサ一卜 (mg) Trombin gabexyl mesylate (mg)

温度 (単位） 1 2 4 6 8 10 Temperature (unit) 1 2 4 6 8 10

3 48.3 74.7 90. 2 3 48.3 74.7 90. 2

室温 30 17.3 25.2 32. 8 39. 3 Room temperature 30 17.3 25.2 32.8 39.3

300 2.3 4.2 7.5 9. 7 12. 8 18.0 300 2.3 4.2 7.5 9. 7 12.8 18.0

3 22.2 26.7 41. 0 3 22.2 26.7 41.0

37X: 30 8.0 12.0 14. 2 21. 37X: 30 8.0 12.0 14. 2 21.

300 1.7 2.5 4.5 7 7. 0 7.0 メシル酸ガべキサー卜の添加はク口ッ卜の形成時間を延長した。またトロンビンとメシル酸ガべキサー卜の添加量を適宜調節することによりクロッ卜の形成時問を制御できた。 300 1.7 2.5 4.5 7 7.0 0 7.0 Addition of gabexate mesylate prolonged the time for cutout formation. The clot formation time could be controlled by appropriately adjusting the amounts of thrombin and gabexate mesylate.

実施例 2 ；トロンビンおよびメシル酸ガべキサー卜の内包物質の放出に及ぼす影響 Example 2 Influence of thrombin and gabexate mesilate on the release of encapsulated substances

高分子薬物のモデルとして分子量約 1万の蛍光標識デキストラン（FITC- DEX) を本発明製剤により形成されるクロッ卜に内包させ、 FITC-DEXの放出性に及ぼすトロンビンまたはメシル酸ガべキサ一卜の影響を調べた。 As a model of a high molecular weight drug, fluorescently labeled dextran (FITC-DEX) having a molecular weight of about 10,000 is encapsulated in the clot formed by the preparation of the present invention, and the effect of thrombin or gabexate on the release of FITC-DEX is reduced. The influence of the bird was investigated.

(試験方法） (Test method)

(1)フイブりノーゲン 80 mgと血液凝固第 13因子 60単位を緩衝液（pH7.5) 1 ml に溶解し、それに HTC- DEX (4 mgを燐酸緩衝生理食塩液 1 ml) を 0.165 ml添加した。 (1) Dissolve 80 mg of fibrinogen and 60 units of blood coagulation factor 13 in 1 ml of buffer (pH 7.5), and add 0.165 ml of HTC-DEX (4 mg of phosphate buffered saline 1 ml) Was added.

(2) トロンビンとメシル酸ガべキサートを塩化カルシウム溶液（5.88 ing/ml) 1 si! に溶解した。 (2) Thrombin and gabexate mesylate were dissolved in 1 si! Of a calcium chloride solution (5.88 ing / ml).

(3)上記の（1)と（2)のそれぞれ 0.35 oil と 0.3 ml を透析チューブ中に取り、 37でに保温した憐酸緩衝生理食塩液 30 ml中で 18時間透析した。 (4)憐酸緩衝生理食塩液中の FITC-DEX濃度を蛍光光度計（励起波長 494 nm、蛍光波長 517 nm) で定量した。 (3) 0.35 oil and 0.3 ml of each of the above (1) and (2) were taken in a dialysis tube, and dialyzed against 30 ml of a phosphate buffered saline solution kept at 37 ° C for 18 hours. (4) The concentration of FITC-DEX in the phosphate buffered saline was quantified using a fluorometer (excitation wavelength 494 nm, emission wavelength 517 nm).

(結果） (Result)

結果を表 2 に示す。 Table 2 shows the results.

(表 2 ) (Table 2)

FITC-DE の放出に及ぼすトロンビンまたはメシル酸ガべキサ一卜の影響トロンビン（単位） 3 3 30 300 300 Effect of thrombin or gabexate mesilate on FITC-DE release Thrombin (unit) 3 3 30 300 300

メシル酸ガべキサート（mg) 2 4 4 4 0 Gabexate mesilate (mg) 2 4 4 4 0

相対放出率（％) 89.6 90.4 83.5 81.8 69. 1 Relative release rate (%) 89.6 90.4 83.5 81.8 69.1

(相対放出率：透析チューブ内に FITC-DEXの水溶液を入れた時の燐酸緩衝生理食塩液中の FITC-DEXの濃度を 1 0 0 とした値。 ) (Relative release rate: the value when the concentration of FITC-DEX in the phosphate buffered saline when the aqueous solution of FITC-DEX was placed in the dialysis tube was 100)

トロンビンとメシル酸ガべキサートの配合量を調節することにより FITC- DEXの放出量が制御でき、卜ロンビンの量が少ないかまたはメシル酸ガべキサー卜の量が多い程， FITC-DEXの放出量が多くなる傾向にあった。 The release of FITC-DEX can be controlled by adjusting the amount of thrombin and gabexate mesylate. The lower the amount of thrombin or the more gabexate mesylate, the greater the amount of FITC-DEX. The release amount tended to increase.

実施例 3 ；カルシウムイオンのクロット形成時間及び rIL- 2 の i n v i v o放出に及ぼす影響 Example 3 Influence of calcium ion on clot formation time and rIL-2 on invivo release

フイブリノ一ゲン、血液凝固第 13因子，トロンビン、 rIL-2含量などは同一組成の 2種類の（メシル酸ガベキサー卜量が異なる）本発明製剤について，カルシゥムイオン濃度の rIL-2の放出性に及ぼす影響をマウスで調べた。 Release of calcium ion rIL-2 from two preparations of the present invention (different gabexate mesylate) of the same composition with the same composition of fibrinogen, blood coagulation factor 13, thrombin, rIL-2, etc. The effect on sex was examined in mice.

(試験方法） (Test method)

(1)フィプリノーゲン 24 mg、血液凝固第 13因子 18単位，トロンビン 0.9 単位と rIL- 2 を 10500 〗RU内包し、塩化カルシウムとメシル酸ガぺキサ一トの添加量を調節した 2種類の本発明製剤（ I 型、 Π型）を調製した。 (1) Fibrinogen 24 mg, blood coagulation factor 13 18 units, thrombin 0.9 units and rIL-2 are included in 10500〗 RU, and two kinds of books with adjusted amounts of calcium chloride and gadoxide mesylate are adjusted. Inventive formulations (Types I and II) were prepared.

(2)実施例 1 と同一の評価方法で、 i n v i t r o 3 7 X：におけるクロット形成時間を測定した。 (2) The clot formation time at invitro7X: was measured by the same evaluation method as in Example 1.

(3)上記の本発明製剤（約 0.6 ml) を C3H/HeNマウスの背部皮下に投与した。 (4)投与 1、2、4時間後に大静脈から採血し，血漿中の rIL- 2濃度を ELlSA(Amersham 製定量キット）で定量した。 (3) The above-mentioned preparation of the present invention (about 0.6 ml) was subcutaneously administered to the back of C3H / HeN mice. (4) Blood was collected from the vena cava at 1, 2, and 4 hours after administration, and rIL-2 concentration in plasma was quantified using ELlSA (Amersham quantification kit).

(結果） (Result)

結果を表 3及び表 4に示す。 The results are shown in Tables 3 and 4.

(表 3 ) (Table 3)

塩化カルシウム量と i n V i t r oのクロット形成時間一 ― Clot formation time of calcium chloride and i n V i t ro

製剤組成クロット形成時間（分） Formulation Composition Clot formation time (min)

GA(mg) CA(mg) —室温 37で ― GA (mg) CA (mg)

I 0.03 0 90< 90く I 0.03 0 90 <90

II 0.6 一 0.441 87 27 II 0.6 one 0.441 87 27

(GA；メシル酸ガべキサート， CA；塩化カルシウム） (GA; Gabexate mesylate, CA; Calcium chloride)

(表 4 ) (Table 4)

マウス皮下投与時の血漿中 rIL- 2濂度及びクロット中残存率 RIL-2 concentration in plasma and subcutaneous rate in clot at subcutaneous administration in mice

製剤血漿中濃度 ORU/rol) クロット中残存率（ ) Formulation Plasma concentration ORU / rol) Percentage remaining in clot ()

1時間 2時間 4時間 1時間 2時間 4時間 1 hour 2 hours 4 hours 1 hour 2 hours 4 hours

I 23.4 19.8 〗 5.5 88.0 69.0 43.8 I 23.4 19.8〗 5.5 88.0 69.0 43.8

I I 2—4.6一 21.2 1—5. 1 91.3 67.6 52.9 I I 2—4.6-1 21.2 1—5. 1 91.3 67.6 52.9

表 3の結果は、カルシウムイオン濃度を滅らすと， 3 7 X:における i n v i t r oのクロット形成時間が大幅に延長したことを示す。しかし、表 4の結果から、カルシウムイオンを含有しない I 型製剤でも、マウスに投与した時の内包する rIL-2の血漿中濃度は十分持続していたことが分かる。 The results in Table 3 show that when the calcium ion concentration was reduced, the clot formation time of invitro in 37 X: was significantly prolonged. However, the results in Table 4 indicate that even in the Type I preparations containing no calcium ions, the plasma levels of the encapsulated rIL-2 when administered to mice were sufficiently sustained.

実施例 4 ；ヒアルロン酸を添加した場合の rlい 2の i n v i v o放出 Example 4; release of inv ivo of rl-2 when hyaluronic acid was added

(試験方法） (Test method)

(1)フイブリノ一ゲン 24 mg、血液凝固第 13因子 18単位、トロンビン 0.9 単位、塩化カルシウム 1.76 nig. rIL-2 を 28000 JRU. メシル酸ガべキサ一トを 1.2 mg 含有する本発明製剤（ I ) 及び該製剤に更にヒアルロン酸ナトリウムを 2 mg含有する本発明製剤（II) を調製した。 (1) Fibrinogen 24 mg, blood coagulation factor 13 18 units, thrombin 0.9 units, calcium chloride 1.76 nig.rIL-2 28000 JRU.Gabexate mesylate 1.2 mg The present preparation (I) containing the present invention and the preparation (II) of the present invention further containing 2 mg of sodium hyaluronate were prepared.

(2)上記各製剤（約 0.6 ml) を C 3 H/HeNマウスの背部皮下に投与した。 (2) Each of the above preparations (about 0.6 ml) was subcutaneously administered to the back of C 3 H / HeN mice.

(3)投与後 2 及び 4 時間後に大静脈から採血し、血漿中の rlL- 2 濃度を ELISA (Amersham製定量キット）で定量した。 (3) Blood was collected from the vena cava 2 and 4 hours after administration, and the rlL-2 concentration in the plasma was quantified by ELISA (quantitative kit from Amersham).

(結果） (Result)

結果を表 5に示す。 Table 5 shows the results.

(表 5 ) (Table 5)

組成血漿中濃度（： FRU/Dil) Composition Plasma concentration (FRU / Dil)

製剤ヒアレロン酸 2時間 4時間 Formulation Hyaleronic acid 2 hours 4 hours

I 212 110 I 212 110

II 有 106 168 II Yes 106 168

ヒアルロン酸の添加により、 2時間目の血漿中濃度は低くなり、 4時間目は逆に高くなつた。すなわちクロットからの rlL- 2の初期放出が抑制され、薬効の持続化が達成された。 Addition of hyaluronic acid reduced plasma concentrations at 2 hours and increased it at 4 hours. That is, the initial release of rlL-2 from the clot was suppressed, and sustained efficacy was achieved.

実施例 5 Example 5

以下の組合わせから構成される rlL- 2を含む本発明キットを作成する。 The kit of the present invention including rlL-2 composed of the following combinations is prepared.

A ：フィプリノ一ゲン 8 0 m g、血液凝固第 1 3因子 6 0単位、ヒト血清アルブミン 1 9 m g、及び rlL- 2を約 1万〜 3 6万 J R U含有する凍結乾燥バイアル。 B ：トロンビン 3単位及びメシル酸ガべキサ一トを 2 m g含有する凍結乾燥バイアル。 A: Lyophilized vial containing 80 mg of fibrinogen, 60 units of blood coagulation factor 13 and 19 mg of human serum albumin, and about 10,000 to 360,000 JRU of rlL-2. B: Lyophilized vial containing 3 units of thrombin and 2 mg of gabexyl mesylate.

C ：塩化カルシウム水溶液 1 m 1 (塩化カルシウムとして 1. 4 7 mg含有）実施例 6 C: Calcium chloride aqueous solution 1 ml (containing 1.47 mg as calcium chloride)

以下の組合わせから構成される I F N- rを含む本発明キットを作成する。 A : フイブリノ一ゲン 8 0mg、血液凝固第 1 3因子 6 0単位、ヒト血清アルブミン 1 9 mg、及び I F N-？ "を約 1 0 0万〜 3 0 0万 J R U含有する凍結乾燥バィアル。 The kit of the present invention including IFN-r composed of the following combinations is created. A: 80 mg of fibrinogen, 60 units of blood coagulation factor 3 factor, 19 mg of human serum albumin, and IFN-? Lyophilized bath containing approximately 100,000 to 300,000 JRU Dial.

B ：トロンビンを 3単位及びメシル酸ガべキサートを 2 m g含有する凍結乾燥バィアル。 B: Lyophilized vial containing 3 units of thrombin and 2 mg of gabexate mesylate.

C ：塩化カルシウム水溶液 1 m 1 (塩化カルシウムとして 1 . 4 7 m g含有）実施例 7 C: Calcium chloride aqueous solution 1 ml (containing 1.47 mg as calcium chloride)

1バイアル中に、フイブリノ一ゲン 8 0 m g、血液凝固第 1 3因子 6 0単位、ヒト血清アルブミン 1 9 m g、 r I L-2 を約 1万〜 3 6万 J R U、トロンビン 3単位、及びメシル酸ガぺキサートを 0 . 2 m g含有する凍結乾燥品を調製し、これを注射用水 2 m 1 に溶解する。 In one vial, 80 mg of fibrinogen, 60 units of blood coagulation factor 13 and 19 mg of human serum albumin, rIL-2 about 10,000 to 360,000 JRU, and 3 units of thrombin Prepare a freeze-dried product containing 0.2 mg of dexamethasyl acid and gadoxate mesylate, and dissolve it in 2 ml of water for injection.

産業上の利用可能性 Industrial applicability

本発明製剤は、水溶液に調製しても室温ではすぐには凝固しないが、注射投与後には、体内で速やかにゲルまたは固体状態になってフィブリンクロットを形成する。フイブリンクロット中に内包された医薬品は、クロットの分解に伴って体内で徐々に放出される。徐放出は頻回投与を削減でき、又組織中で薬物濃度を一定の水準に維持することも可能である。即ち、本発明製剤を用いることによって注射投与の操作自体が容易になる上、医薬品の薬効作用の増強も期待できる。また、急激な組織中濃度の上昇を抑制することにより副作用の低減も期待できる。また、本発明キットを用いることにより、本発明製剤を容易に用時調製できる。 The formulation of the present invention does not immediately coagulate at room temperature even when prepared into an aqueous solution, but after injection administration, it rapidly becomes a gel or solid state in the body to form a fibrin clot. Drugs contained in the fibrin clot are gradually released in the body as the clot decomposes. Slow release can reduce frequent dosing and can also maintain a constant drug concentration in the tissue. That is, the use of the preparation of the present invention facilitates the injection administration itself, and can be expected to enhance the pharmacological effect of the drug. In addition, reduction of side effects can be expected by suppressing the rapid increase in tissue concentration. Further, by using the kit of the present invention, the preparation of the present invention can be easily prepared at the time of use.

Claims

請求の範囲 The scope of the claims

1 . 医薬活性成分、フィプリノーゲン、血液凝固第 1 3因子、トロンビン及びメシル酸ガべキサ一トを含むことを特徴とする注射用徐放性製剤。 1. A sustained-release preparation for injection, comprising a pharmaceutically active ingredient, fipurinogen, blood coagulation factor III, thrombin and gabexate mesylate.

2 . フイブリノ一ゲンとメシル酸ガべキサ一卜との配合比率が、フイブリノーゲンが 8 0 m gに対してメシル酸ガべキサー卜力 ί 0 . 0 5 ~ 3 0 m gに相当する比率である、請求の範囲第 1項記載の製剤。 2. The mixing ratio of fibrinogen to gabexant mesylate is equivalent to 80 g of fibrinogen to gabexant mesylate ί 0.05 to 30 mg. 2. The preparation according to claim 1, which is a ratio.

3 . フイブリノ一ゲンとメシル酸ガべキサートとの配合比率が、フイブリノーゲンが 8 0 m gに対してメシル酸ガべキサー卜が 0 . 5〜 1 0 m gに相当する比率である、請求の範囲第 1項記載の製剤。 3. The mixing ratio of fibrinogen to gabexate mesylate is a ratio equivalent to 0.5 to 10 mg of gabexate mesylate to 80 mg of fibrinogen. The formulation according to claim 1.

4 . フィプリノーゲンとト口ンビンとの配合比率が、フイブリノーゲンが 8 0 m gに対してトロンビンが 1 ~ 3 0 0単位に相当する比率である、請求の範囲第 1 項に記載の製剤。 4. The preparation according to claim 1, wherein the blending ratio of fibrinogen to tombin is 80 to 100 mg of fibrinogen and 1 to 300 units of thrombin.

5 - フイブリノ一ゲンとトロンビンとの配合比率が、フイブリノ一ゲンが 8 0 m gに対してトロンビンが 1〜 3 0単位に相当する比率である、請求の範囲第 1項に記載の製剤。 The formulation according to claim 1, wherein the blending ratio of 5-fibrinogen and thrombin is a ratio corresponding to 80 to 30 mg of fibrinogen and 1 to 30 units of thrombin. .

6 . 各添加剤の配合比率が、フイブリノ一ゲン 8 0 m gに対して、メシル酸ガべキサ一トは 0 . 0 5〜3 0 m g、好ましくは 0 . 5 ~ 1 0 m gに相当する比率であり、卜ロンビンは 1 ~ 3 0 0単位、好ましくは 1〜 3 0単位に相当する比率である、請求の範囲第 1項に記載の製剤。 6. The mixing ratio of each additive is equivalent to 0.5 to 30 mg, preferably 0.5 to 10 mg, of gabelate mesylate with respect to 80 mg of fibrinogen. 2. The preparation according to claim 1, wherein the ratio of thrombin is 1 to 300 units, preferably 1 to 30 units.

7 . 更にカルシウムイオン又はカルシウム塩を含有する、請求の範囲第 1項記載の製剤。 7. The preparation according to claim 1, further comprising a calcium ion or a calcium salt.

8 . 更にヒアルロン酸を含有する、請求の範囲第 1項記載の製剤。 8. The preparation according to claim 1, further comprising hyaluronic acid.

9 . 医薬活性成分がタンパク性医薬品である、請求の範囲第 1項記載の製剤。 9. The preparation according to claim 1, wherein the pharmaceutically active ingredient is a protein drug.

1 0 . 医薬活性成分がィン夕一ロイキン— 2またはインタ一フエロン—ァである、請求の範囲第 9項記載の製剤。 10. The formulation according to claim 9, wherein the pharmaceutically active ingredient is Inleu-leukin-2 or interferoner.

1 1. 水溶液である請求の範囲第 1項記載の製剤。 1 1. The preparation according to claim 1, which is an aqueous solution.

1 2. 凍結乾燥製剤である請求の範囲第 1項記載の製剤。 1 2. The preparation according to claim 1, which is a lyophilized preparation.

1 3. 医薬活性成分、フイブリノ一ゲン、血液凝固第 1 3因子、トロンビン及びメシル酸ガべキサートを含むことを特徴とする、請求の範囲第 1〜1 1項のいずれかに記載の製剤を用時調製するためのキット。 13. The method according to any one of claims 1 to 11, characterized in that it comprises a pharmaceutically active ingredient, fibrinogen, blood coagulation factor 13, thrombin and gabexate mesylate. A kit for preparing the formulation at the point of use.

1 4. フイブリノ一ゲンとトロンビンとが別々の容器に収納されている、請求の範囲第 1 3項記載のキット。 14. The kit according to claim 13, wherein the fibrinogen and thrombin are housed in separate containers.

1 5. 以下の容器を含む、請求の範囲第 1 3項記載のキット（但し、医薬活性成分及びメシル酸ガべキサートは、それぞれいずれの容器に含まれていてもよい）。 1 5. The kit according to claim 13 including the following containers (provided that the pharmaceutically active ingredient and gabexate mesylate may be contained in any of the containers).

(A) フィプリノ一ゲン及び血液凝固第 1 3因子を含む容器 (A) Container containing fiprinogen and blood coagulation factor 13

( B) トロンビンを含む容器 (B) Container containing thrombin

1 6. 医薬活性成分を Aの容器、メシル酸ガぺキサ一トを Bの容器に含む、請求の範囲第 1 5項記載のキッ卜。 16. The kit according to claim 15, wherein the pharmaceutically active ingredient is contained in the container of A and the gasket mesylate is contained in the container of B.

1 7. 少なくともいずれかの成分を凍結乾燥品として含む、請求の範囲第 1 3項に記載のキット。 1 7. The kit according to claim 13, comprising at least one component as a lyophilized product.

1 8. 更にカルシウム塩を含有する、請求の範囲第 1 3項に記載のキット。 1 8. The kit according to claim 13, further comprising a calcium salt.