【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は安定なカルシトニン医薬組成物及びその製造法に関する。
【０００２】
【従来の技術及び発明が解決すべき課題】
カルシトニンは、骨粗鬆症における疼痛改善、高カルシウム血症、ページェット病等の治療に用いられる、種々の薬理活性を有するポリペプチドホルモンである。カルシトニンは、通常は注射による投与が行われているが、疾患によっては長期間の連続投与が必要であり、注射以外の簡便な投与製剤が望まれている。経鼻投与もその方法のひとつであるが、その場合、一回の投与量は０．２ないし０．３ｍｌ以下が望ましく、液量が多いと鼻腔から漏出して有効に投与できない。
【０００３】
従って、有効な治療量を投与するためには、比較的高濃度の薬液が必要である。例えば、ヒトカルシトニンでは、望ましくは０．５ｍｇ／ｍｌ以上の薬液を調製する必要がある。しかし、カルシトニンは溶液中では凝集し易く、特に振盪のようなメカニカルストレスにより容易に凝集がおこる。また、濃度が高いほど不安定であり、治療に望ましいカルシトニン濃度の溶液を安定に調製することは困難である。
【０００４】
薬液が凝集により白濁沈澱を生じると均一な投与を不可能にし、また、鼻粘膜からの吸収は著しく阻害される。一般に蛋白質、ペプチドの凝集防止にはゼラチン、アルブミン、一部の界面活性剤等が報告されているが、局所刺激性が少なく、実用的でかつ安定なカルシトニン医薬組成物及びカルシトニン溶液を調製することは不可能であった。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、医用への使用に許容される各種添加剤によるカルシトニン溶液の安定化を鋭意検討した結果、ある種の添加剤を配合することによって、治療に望ましい濃度の、安定でかつ吸収の良好なカルシトニン医薬組成物及びカルシトニン溶液を調製できることを見出し、本発明に至ったものである。
【０００６】
即ち、本発明は、安定なカルシトニン医薬組成物及びカルシトニン溶液の製造法に関するものであり、安定化剤としてクエン酸、ポリビニルアルコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、を一種又は複数含有することを特徴とする。
【０００７】
これらの安定化剤（特にクエン酸）は単独で使用しても効果が認められるが、好ましくは、（１）クエン酸、並びに（２）ポリビニルアルコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル及び、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油の何れか一種又は複数を含有することが望ましく、更に好ましくはこれらの組み合わせのうち、例えば、クエン酸とポリビニルアルコール、クエン酸とポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、又はクエン酸とポリオキシエチレン硬化ヒマシ油をそれぞれ組み合わせること等が望ましい。これらの安定化剤をカルシトニン医薬組成物又はカルシトニン溶液に加えることにより更に安定化の効果が認められる。
【０００８】
本発明で用いるクエン酸は、薬液に対して、通常０．０５〜５％（Ｗ／Ｖ）、好ましくは０．１〜２％（Ｗ／Ｖ）となるように添加混合する。
ポリビニルアルコールは、酢酸ビニルをラジカル重合して得られる合成高分子であり、薬液に対して、通常０．００１〜１０％（Ｗ／Ｖ）、好ましくは０．０１〜５％（Ｗ／Ｖ）となるように添加混合する。
ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルは、ソルビタン脂肪酸エステルに酸化エチレンを付加重合させた非イオン性界面活性剤であり、例えばポリソルベート−４０、ポリソルベート−６０、ポリソルベート−８０等が挙げられる。
【０００９】
ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルは、薬液に対して、通常０．００１〜１％（Ｗ／Ｖ）、好ましくは０．００５〜０．５％（Ｗ／Ｖ）となるように添加混合する。
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油は、ヒマシ油に水素を添加して得た硬化油に、酸化エチレンを付加重合させた非イオン性界面活性剤であり、例えばニッコールＨＣＯ−１０、ニッコール ＨＣＯ−４０、ニッコール ＨＣＯ−５０、ニッコール ＨＣＯ−６０等が挙げられる。
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油は、薬液に対して、通常０．００１〜１％（Ｗ／Ｖ）、好ましくは０．００５〜０．５％（Ｗ／Ｖ）となるように添加混合する。
【００１０】
本発明の医薬組成物は、溶液の形態もしくは特定の溶解液で用時溶解して用いる粉末の形態とすることができる。溶解液に用時溶解して用いる粉末の場合は、クエン酸、ポリビニルアルコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル及び／又はポリオキシエチレン硬化ヒマシ油は、粉末あるいは溶解液の一方に添加してもよく、又、粉末及び溶解液の両方に添加してもよい。
【００１１】
添加剤としてはｐＨ調節剤、殺菌・防腐剤、粘度調整剤、凍結乾燥助剤、吸収促進剤等を必要に応じて加えることができる。
ｐＨ調節剤としては塩酸、酢酸等が用いられる。
殺菌・防腐剤としては医薬組成物に通常用いられるものであればよく、パラオキシ安息香酸エステル、塩化ベンザルコニウム等が挙げられる。
粘度調整剤としてはポリビニルピロリドン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース等が挙げられる。
【００１２】
凍結乾燥助剤としてはアミノ酢酸、マンニトール、白糖、ブドウ糖、デキストラン等が挙げられる。
吸収促進剤としてはカプリン酸ナトリウム、ベスタチン、アマスタチン、メシル酸ナファモスタット、メシル酸カモスタット、アプロチニン等が挙げられる。
【００１３】
本発明の医薬組成物の投与形態としては、液剤あるいは用時溶解して得た薬液を点鼻用滴下容器、スプレー容器または鼻用エアゾールアプリケーター等を用いて、滴下あるいは噴霧により投与することができる。
本発明において用いることができるカルシトニンは、ヒト、ブタ、ウシ、サケ、ウナギ、ラット由来等のものを用いることができるので特に限定されないが、以下の実施例においてはヒトカルシトニンを用いた例について示す。
【００１４】
【実施例】
以下に実施例および試験例を挙げて本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
実施例１．
ヒトカルシトニン ２０ｍｇ
精製白糖 １０００ｍｇ
塩化ベンザルコニウム ２ｍｇ
クエン酸 １５ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
【００１５】
実施例２．
ヒトカルシトニン ２０ｍｇ
精製白糖 １０００ｍｇ
塩化ベンザルコニウム ２ｍｇ
ポリビニルアルコール １００ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
【００１６】
実施例３．
ヒトカルシトニン ２０ｍｇ
精製白糖 １０００ｍｇ
塩化ベンザルコニウム ２ｍｇ
ポリソルベート８０ １０ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
【００１７】
実施例４．
ヒトカルシトニン ２０ｍｇ
マンニトール ５００ｍｇ
塩化ベンザルコニウム ２ｍｇ
クエン酸 １５ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
【００１８】
実施例５．
ヒトカルシトニン ２０ｍｇ
マンニトール ５００ｍｇ
塩化ベンザルコニウム ２ｍｇ
ポリビニルアルコール １００ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
【００１９】
実施例６．
ヒトカルシトニン ２０ｍｇ
マンニトール ５００ｍｇ
塩化ベンザルコニウム ２ｍｇ
ポリソルベート８０ １０ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
【００２０】
実施例７．
ヒトカルシトニン ２０ｍｇ
精製白糖 １０００ｍｇ
塩化ベンザルコニウム ２ｍｇ
クエン酸 ６０ｍｇ
ポリビニルアルコール １００ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
【００２１】
実施例８．
ヒトカルシトニン ２０ｍｇ
精製白糖 １０００ｍｇ
塩化ベンザルコニウム ２ｍｇ
クエン酸 ６０ｍｇ
ポリソルベート８０ １ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
【００２２】
実施例９．
ヒトカルシトニン ２０ｍｇ
精製白糖 １０００ｍｇ
塩化ベンザルコニウム ２ｍｇ
クエン酸 ６０ｍｇ
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油＊１ １ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
＊１：ニッコールＨＣＯ−６０（日光ケミカルズ株）
【００２３】
実施例１０．
ヒトカルシトニン ２０ｍｇ
精製白糖 １０００ｍｇ
塩化ベンザルコニウム ２ｍｇ
クエン酸 ６０ｍｇ
ポリビニルアルコール １００ｍｇ
アプロチニン １ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
【００２４】
実施例１１．
ヒトカルシトニン ２０ｍｇ
精製白糖 １０００ｍｇ
塩化ベンザルコニウム ２ｍｇ
クエン酸 ６０ｍｇ
ポリソルベート８０ １ｍｇ
メシル酸ナファモスタット １ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
【００２５】
実施例１２．
ヒトカルシトニン２０ｍｇ、精製白糖１０００ｍｇを１０ｍｌの精製水に溶解し、無菌濾過した。濾液をバイアル瓶に無菌的に充填して凍結乾燥した。添付溶解液として、塩化ベンザルコニウム２ｍｇ、クエン酸１５ｍｇを１０ｍｌの精製水に溶解し、無菌濾過した液を調製した。
【００２６】
対照例１．
ヒトカルシトニン ２０ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
【００２７】
対照例２．
ヒトカルシトニン ２０ｍｇ
精製白糖 １０００ｍｇ
塩化ベンザルコニウム ２ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
【００２８】
対照例３．
ヒトカルシトニン ２０ｍｇ
マンニトール ５００ｍｇ
塩化ベンザルコニウム ２ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
【００２９】
比較例１．
ヒトカルシトニン ２０ｍｇ
精製白糖 １０００ｍｇ
塩化ベンザルコニウム ２ｍｇ
タウロコール酸 １００ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
【００３０】
比較例２．
ヒトカルシトニン ２０ｍｇ
精製白糖 １０００ｍｇ
塩化ベンザルコニウム ２ｍｇ
デオキシコール酸 １００ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
【００３１】
比較例３．
ヒトカルシトニン ２０ｍｇ
精製白糖 １０００ｍｇ
塩化ベンザルコニウム ２ｍｇ
ショ糖脂肪酸エステル＊２ １２５ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
＊２：リョートーシュガーエステルＳ１６７０（三菱化成食品）
【００３２】
比較例４．
ヒトカルシトニン ２０ｍｇ
精製白糖 １０００ｍｇ
塩化ベンザルコニウム ２ｍｇ
ショ糖脂肪酸エステル＊３ １２５ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
＊３：リョートーシュガーエステルＰ１６７０（三菱化成食品）
【００３３】
比較例５．
ヒトカルシトニン ２０ｍｇ
マンニトール ５００ｍｇ
塩化ベンザルコニウム ２ｍｇ
タウロコール酸 １００ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
【００３４】
比較例６．
ヒトカルシトニン ２０ｍｇ
マンニトール ５００ｍｇ
塩化ベンザルコニウム ２ｍｇ
デオキシコール酸 １００ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
【００３５】
比較例７．
ヒトカルシトニン ２０ｍｇ
マンニトール ５００ｍｇ
塩化ベンザルコニウム ２ｍｇ
ショ糖脂肪酸エステル＊２ １２５ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
＊２：リョートーシュガーエステルＳ１６７０（三菱化成食品）
【００３６】
比較例８．
ヒトカルシトニン ２０ｍｇ
マンニトール ５００ｍｇ
塩化ベンザルコニウム ２ｍｇ
ショ糖脂肪酸エステル＊３ １２５ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
＊３：リョートーシュガーエステルＰ１６７０（三菱化成食品）
【００３７】
比較例９．
ヒトカルシトニン ２０ｍｇ
精製白糖 １０００ｍｇ
塩化ベンザルコニウム ２ｍｇ
クエン酸 ６０ｍｇ
ヒト血清アルブミン ２００ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
【００３８】
比較例１０．
ヒトカルシトニン ２０ｍｇ
精製白糖 １０００ｍｇ
塩化ベンザルコニウム ２ｍｇ
クエン酸 ６０ｍｇ
ゼラチン １００ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
本発明における上記カルシトニン医薬組成物は、以下の試験例１〜３に示すように非常に安定である。
【００３９】
試験例１．
実施例１〜６、比較例１〜８、及び対照例１〜３で調製した試料溶液を、室温で振幅３ｃｍ、１００回／分の振盪回数で振盪し、外観（溶状）を観察した。その結果を表１に示す。
【００４０】
表１に示すごとく、実施例では比較例及び対照例と比べて安定であった。
【００４１】
試験例２．
実施例７〜１１及び比較例９、１０で調製した試料溶液を、室温で振幅３ｃｍ、１００回／分の振盪回数で振盪し、外観（溶状）を観察した。また、溶液のヒトカルシトニン濃度を液体クロマトグラフィーで定量し、ヒトカルシトニンの残存率を求めた。その結果を表２に示す。
【００４２】
表２に示すごとく、実施例では比較例及び対照例と比べて安定であった。
【００４３】
試験例３．
実施例７〜９で調製した試料溶液を、室温で振幅３ｃｍ、１００回／分の振盪回数で７日間振盪し、その後の溶液の生物活性を以下のように検討した。即ち、２４時間絶食後、引き続き２４時間低カルシウム食で飼育したＳ．Ｄ．系雄性ラット（６週齢）を、ペントバルビタール麻酔下、背位固定し、大腿動脈カニューレ及び気管カニューレを施した。試料溶液５μｌ（ヒトカルシトニン５０μｇ／ｋｇ）を鼻腔内に投与し、経時的に大腿動脈より採血し、血清カルシウム濃度をカルシウム測定用試薬（サンアッセイＣａ：三光純薬社製）で定量した。結果を表３に示す。
【００４４】
表３に示すごとく、７日間振盪させた溶液においても血清カルシウム濃度の低下が認められた。
【００４５】
【発明の効果】
以上、本発明により、局所刺激性が少なく、実用的でかつ溶液で安定なカルシトニン溶液を提供するカルシトニン医薬組成物を製造することができる。[0001]
[Industrial application fields]
The present invention relates to a stable calcitonin pharmaceutical composition and a method for producing the same.
[0002]
[Prior Art and Problems to be Solved by the Invention]
Calcitonin is a polypeptide hormone having various pharmacological activities used for the treatment of pain improvement, hypercalcemia, Paget's disease and the like in osteoporosis. Although calcitonin is usually administered by injection, depending on the disease, long-term continuous administration is required, and a simple administration formulation other than injection is desired. Nasal administration is one of the methods, but in this case, it is desirable that a single dose is 0.2 to 0.3 ml or less, and if the liquid volume is large, it leaks from the nasal cavity and cannot be effectively administered.
[0003]
Therefore, in order to administer an effective therapeutic amount, a relatively high concentration of drug solution is required. For example, for human calcitonin, it is desirable to prepare a drug solution of 0.5 mg / ml or more. However, calcitonin easily aggregates in a solution, and easily aggregates due to mechanical stress such as shaking. Moreover, the higher the concentration, the more unstable, and it is difficult to stably prepare a solution having a calcitonin concentration desirable for treatment.
[0004]
If the drug solution causes a cloudy precipitate due to aggregation, uniform administration is impossible, and absorption from the nasal mucosa is significantly inhibited. In general, gelatin, albumin, some surfactants, etc. have been reported to prevent aggregation of proteins and peptides. However, a practical and stable calcitonin pharmaceutical composition and calcitonin solution should be prepared with little local irritation. Was impossible.
[0005]
[Means for Solving the Problems]
As a result of intensive studies on the stabilization of calcitonin solutions by various additives that are acceptable for medical use, the present inventors have formulated a certain kind of additive to provide a stable and absorption at a concentration desired for treatment. The present inventors have found that a good calcitonin pharmaceutical composition and a calcitonin solution can be prepared.
[0006]
That is, the present invention relates to a stable calcitonin pharmaceutical composition and a method for producing a calcitonin solution, and as a stabilizer, citric acid, polyvinyl alcohol, polyoxyethylene sorbitan fatty acid ester, polyoxyethylene hydrogenated castor oil, It is characterized by containing a plurality.
[0007]
These stabilizers (especially citric acid) are effective even when used alone, but preferably (1) citric acid, and (2) polyvinyl alcohol, polyoxyethylene sorbitan fatty acid ester and polyoxyethylene It is desirable to contain any one or more of hydrogenated castor oil, and more preferably, among these combinations, for example, citric acid and polyvinyl alcohol, citric acid and polyoxyethylene sorbitan fatty acid ester, or citric acid and polyoxyethylene It is desirable to combine hardened castor oil. By adding these stabilizers to the calcitonin pharmaceutical composition or calcitonin solution, a further stabilizing effect is recognized.
[0008]
The citric acid used in the present invention is added and mixed so as to be usually 0.05 to 5% (W / V), preferably 0.1 to 2% (W / V) with respect to the chemical solution.
Polyvinyl alcohol is a synthetic polymer obtained by radical polymerization of vinyl acetate, and is usually 0.001 to 10% (W / V), preferably 0.01 to 5% (W / V) with respect to the chemical solution. Add and mix so that
Polyoxyethylene sorbitan fatty acid ester is a nonionic surfactant obtained by addition polymerization of ethylene oxide to sorbitan fatty acid ester, and examples thereof include polysorbate-40, polysorbate-60, and polysorbate-80.
[0009]
The polyoxyethylene sorbitan fatty acid ester is added and mixed so as to be usually 0.001 to 1% (W / V), preferably 0.005 to 0.5% (W / V) with respect to the chemical solution.
Polyoxyethylene hydrogenated castor oil is a nonionic surfactant obtained by addition polymerization of ethylene oxide to a hydrogenated oil obtained by adding hydrogen to castor oil. For example, Nikkor HCO-10, Nikkor HCO-40, Nikkor HCO-50, Nikkor HCO-60, etc. are mentioned.
The polyoxyethylene hydrogenated castor oil is added to and mixed with the chemical solution so that it is usually 0.001 to 1% (W / V), preferably 0.005 to 0.5% (W / V).
[0010]
The pharmaceutical composition of the present invention can be in the form of a solution or in the form of a powder to be used after being dissolved in a specific solution. In the case of a powder used by dissolving in a solution at the time of use, citric acid, polyvinyl alcohol, polyoxyethylene sorbitan fatty acid ester and / or polyoxyethylene hydrogenated castor oil may be added to either the powder or the solution, Moreover, you may add to both a powder and a solution.
[0011]
As additives, pH adjusters, bactericides / preservatives, viscosity modifiers, freeze-drying aids, absorption accelerators and the like can be added as necessary.
As the pH adjuster, hydrochloric acid, acetic acid or the like is used.
Any bactericidal / preservative may be used as long as it is usually used in pharmaceutical compositions, and examples thereof include paraoxybenzoic acid esters and benzalkonium chloride.
Examples of the viscosity modifier include polyvinyl pyrrolidone and hydroxypropyl methylcellulose.
[0012]
Examples of the lyophilization aid include aminoacetic acid, mannitol, sucrose, glucose, dextran and the like.
Examples of absorption promoters include sodium caprate, bestatin, amastatin, nafamostat mesylate, camostat mesylate, aprotinin and the like.
[0013]
As a dosage form of the pharmaceutical composition of the present invention, a solution or a drug solution obtained by dissolution at the time of use can be administered by dripping or spraying using a drop container for nasal drop, a spray container or a nasal aerosol applicator. .
The calcitonin that can be used in the present invention is not particularly limited since those derived from humans, pigs, cows, salmon, eels, rats and the like can be used, but in the following examples, examples using human calcitonin are shown. .
[0014]
【Example】
EXAMPLES The present invention will be specifically described below with reference to examples and test examples, but the present invention is not limited to these.
Example 1.
Human calcitonin 20mg
Refined white sugar 1000mg
Benzalkonium chloride 2mg
Citric acid 15mg
Purified water was added to a final volume of 10 ml.
[0015]
Example 2
Human calcitonin 20mg
Refined white sugar 1000mg
Benzalkonium chloride 2mg
Polyvinyl alcohol 100mg
Purified water was added to a final volume of 10 ml.
[0016]
Example 3
Human calcitonin 20mg
Refined white sugar 1000mg
Benzalkonium chloride 2mg
Polysorbate 80 10mg
Purified water was added to a final volume of 10 ml.
[0017]
Example 4
Human calcitonin 20mg
Mannitol 500mg
Benzalkonium chloride 2mg
Citric acid 15mg
Purified water was added to a final volume of 10 ml.
[0018]
Example 5 FIG.
Human calcitonin 20mg
Mannitol 500mg
Benzalkonium chloride 2mg
Polyvinyl alcohol 100mg
Purified water was added to a final volume of 10 ml.
[0019]
Example 6
Human calcitonin 20mg
Mannitol 500mg
Benzalkonium chloride 2mg
Polysorbate 80 10mg
Purified water was added to a final volume of 10 ml.
[0020]
Example 7
Human calcitonin 20mg
Refined white sugar 1000mg
Benzalkonium chloride 2mg
Citric acid 60mg
Polyvinyl alcohol 100mg
Purified water was added to a final volume of 10 ml.
[0021]
Example 8 FIG.
Human calcitonin 20mg
Refined white sugar 1000mg
Benzalkonium chloride 2mg
Citric acid 60mg
Polysorbate 80 1mg
Purified water was added to a final volume of 10 ml.
[0022]
Example 9
Human calcitonin 20mg
Refined white sugar 1000mg
Benzalkonium chloride 2mg
Citric acid 60mg
Polyoxyethylene hydrogenated castor oil * 1 1mg
Purified water was added to a final volume of 10 ml.
* 1: Nikkor HCO-60 (Nikko Chemicals Corporation)
[0023]
Example 10
Human calcitonin 20mg
Refined white sugar 1000mg
Benzalkonium chloride 2mg
Citric acid 60mg
Polyvinyl alcohol 100mg
Aprotinin 1mg
Purified water was added to a final volume of 10 ml.
[0024]
Example 11
Human calcitonin 20mg
Refined white sugar 1000mg
Benzalkonium chloride 2mg
Citric acid 60mg
Polysorbate 80 1mg
Nafamostat mesylate 1mg
Purified water was added to a final volume of 10 ml.
[0025]
Example 12
20 mg of human calcitonin and 1000 mg of purified sucrose were dissolved in 10 ml of purified water and filtered aseptically. The filtrate was aseptically filled into vials and lyophilized. As an attached solution, 2 mg of benzalkonium chloride and 15 mg of citric acid were dissolved in 10 ml of purified water, and a sterile filtered solution was prepared.
[0026]
Control Example 1
Human calcitonin 20mg
Purified water was added to a final volume of 10 ml.
[0027]
Control Example 2.
Human calcitonin 20mg
Refined white sugar 1000mg
Benzalkonium chloride 2mg
Purified water was added to a final volume of 10 ml.
[0028]
Control Example 3.
Human calcitonin 20mg
Mannitol 500mg
Benzalkonium chloride 2mg
Purified water was added to a final volume of 10 ml.
[0029]
Comparative Example 1
Human calcitonin 20mg
Refined white sugar 1000mg
Benzalkonium chloride 2mg
Taurocholic acid 100mg
Purified water was added to a final volume of 10 ml.
[0030]
Comparative Example 2
Human calcitonin 20mg
Refined white sugar 1000mg
Benzalkonium chloride 2mg
Deoxycholic acid 100mg
Purified water was added to a final volume of 10 ml.
[0031]
Comparative Example 3
Human calcitonin 20mg
Refined white sugar 1000mg
Benzalkonium chloride 2mg
Sucrose fatty acid ester * 2 125mg
Purified water was added to a final volume of 10 ml.
* 2: Ryoto Sugar Ester S1670 (Mitsubishi Kasei Foods)
[0032]
Comparative Example 4
Human calcitonin 20mg
Refined white sugar 1000mg
Benzalkonium chloride 2mg
Sucrose fatty acid ester * 3 125mg
Purified water was added to a final volume of 10 ml.
* 3: Ryoto sugar ester P1670 (Mitsubishi Kasei Foods)
[0033]
Comparative Example 5
Human calcitonin 20mg
Mannitol 500mg
Benzalkonium chloride 2mg
Taurocholic acid 100mg
Purified water was added to a final volume of 10 ml.
[0034]
Comparative Example 6
Human calcitonin 20mg
Mannitol 500mg
Benzalkonium chloride 2mg
Deoxycholic acid 100mg
Purified water was added to a final volume of 10 ml.
[0035]
Comparative Example 7
Human calcitonin 20mg
Mannitol 500mg
Benzalkonium chloride 2mg
Sucrose fatty acid ester * 2 125mg
Purified water was added to a final volume of 10 ml.
* 2: Ryoto Sugar Ester S1670 (Mitsubishi Kasei Foods)
[0036]
Comparative Example 8
Human calcitonin 20mg
Mannitol 500mg
Benzalkonium chloride 2mg
Sucrose fatty acid ester * 3 125mg
Purified water was added to a final volume of 10 ml.
* 3: Ryoto sugar ester P1670 (Mitsubishi Kasei Foods)
[0037]
Comparative Example 9
Human calcitonin 20mg
Refined white sugar 1000mg
Benzalkonium chloride 2mg
Citric acid 60mg
Human serum albumin 200mg
Purified water was added to a final volume of 10 ml.
[0038]
Comparative Example 10
Human calcitonin 20mg
Refined white sugar 1000mg
Benzalkonium chloride 2mg
Citric acid 60mg
Gelatin 100mg
Purified water was added to a final volume of 10 ml.
The said calcitonin pharmaceutical composition in this invention is very stable as shown in the following test examples 1-3.
[0039]
Test Example 1
The sample solutions prepared in Examples 1 to 6, Comparative Examples 1 to 8, and Control Examples 1 to 3 were shaken at room temperature with an amplitude of 3 cm and a shaking frequency of 100 times / minute, and the appearance (solution state) was observed. The results are shown in Table 1.
[0040]
As shown in Table 1, the examples were more stable than the comparative examples and the control examples.
[0041]
Test Example 2
The sample solutions prepared in Examples 7 to 11 and Comparative Examples 9 and 10 were shaken at room temperature with an amplitude of 3 cm and a shaking frequency of 100 times / minute, and the appearance (solution state) was observed. Further, the concentration of human calcitonin in the solution was quantified by liquid chromatography, and the residual ratio of human calcitonin was determined. The results are shown in Table 2.
[0042]
As shown in Table 2, the example was more stable than the comparative example and the control example.
[0043]
Test Example 3
The sample solutions prepared in Examples 7 to 9 were shaken at room temperature with an amplitude of 3 cm and a shaking frequency of 100 times / minute for 7 days, and then the biological activity of the solutions was examined as follows. That is, after 24 hours fasting, S. bred was kept on a low calcium diet for 24 hours. D. Strain male rats (6 weeks old) were fixed in the dorsal position under pentobarbital anesthesia and subjected to femoral artery cannula and tracheal cannula. 5 μl of sample solution (human calcitonin 50 μg / kg) was administered intranasally, blood was collected from the femoral artery over time, and the serum calcium concentration was quantified with a calcium measurement reagent (Sun Assay Ca: manufactured by Sanko Junyaku Co., Ltd.). The results are shown in Table 3.
[0044]
As shown in Table 3, a decrease in serum calcium concentration was also observed in the solution shaken for 7 days.
[0045]
【The invention's effect】
As described above, according to the present invention, it is possible to produce a calcitonin pharmaceutical composition that provides a calcitonin solution that is practical and stable with little local irritation.
