UA80469C2 - Method for the production of albumin - Google Patents
Method for the production of albumin Download PDFInfo
- Publication number
- UA80469C2 UA80469C2 UAA200508678A UA2005008678A UA80469C2 UA 80469 C2 UA80469 C2 UA 80469C2 UA A200508678 A UAA200508678 A UA A200508678A UA 2005008678 A UA2005008678 A UA 2005008678A UA 80469 C2 UA80469 C2 UA 80469C2
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- albumin
- fact
- solution
- stabilizer
- matrix
- Prior art date
Links
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 title claims abstract description 97
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 title claims abstract description 97
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 56
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title abstract 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 claims abstract description 23
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 claims abstract description 18
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 claims abstract description 11
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims abstract description 8
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims abstract description 8
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 claims abstract description 7
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 6
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 claims abstract description 5
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 claims abstract description 5
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims abstract description 4
- 125000001165 hydrophobic group Chemical group 0.000 claims abstract description 4
- 238000004191 hydrophobic interaction chromatography Methods 0.000 claims abstract description 4
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims abstract description 3
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 claims abstract description 3
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 claims abstract description 3
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 claims abstract description 3
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 claims abstract description 3
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 3
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 38
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 6
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims description 6
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 claims description 6
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 claims description 6
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 claims description 5
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 claims description 5
- 239000003921 oil Substances 0.000 claims description 5
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 4
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 4
- 229920003053 polystyrene-divinylbenzene Polymers 0.000 claims description 4
- 238000011146 sterile filtration Methods 0.000 claims description 4
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 claims description 3
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 claims description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 3
- 239000004359 castor oil Substances 0.000 claims description 3
- 235000019438 castor oil Nutrition 0.000 claims description 3
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 claims description 3
- 238000007710 freezing Methods 0.000 claims description 3
- 230000008014 freezing Effects 0.000 claims description 3
- ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N glycerol triricinoleate Natural products CCCCCC[C@@H](O)CC=CCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](COC(=O)CCCCCCCC=CC[C@@H](O)CCCCCC)OC(=O)CCCCCCCC=CC[C@H](O)CCCCCC ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N 0.000 claims description 3
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 claims description 2
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 claims description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 claims description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 claims description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 claims description 2
- CERQOIWHTDAKMF-UHFFFAOYSA-M Methacrylate Chemical compound CC(=C)C([O-])=O CERQOIWHTDAKMF-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 claims description 2
- 125000005909 ethyl alcohol group Chemical group 0.000 claims description 2
- 238000011049 filling Methods 0.000 claims description 2
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 claims description 2
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 claims description 2
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 claims description 2
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 claims description 2
- 108010071241 Factor XIIa Proteins 0.000 claims 3
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 claims 1
- 230000008569 process Effects 0.000 abstract description 12
- 238000001914 filtration Methods 0.000 abstract description 3
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 abstract 1
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 21
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 17
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 8
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 8
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 8
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 6
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 6
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 5
- 238000009928 pasteurization Methods 0.000 description 5
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 5
- 229960002895 phenylbutazone Drugs 0.000 description 5
- VYMDGNCVAMGZFE-UHFFFAOYSA-N phenylbutazonum Chemical compound O=C1C(CCCC)C(=O)N(C=2C=CC=CC=2)N1C1=CC=CC=C1 VYMDGNCVAMGZFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- PJVWKTKQMONHTI-UHFFFAOYSA-N warfarin Chemical compound OC=1C2=CC=CC=C2OC(=O)C=1C(CC(=O)C)C1=CC=CC=C1 PJVWKTKQMONHTI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229960005080 warfarin Drugs 0.000 description 4
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000003139 buffering effect Effects 0.000 description 3
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 3
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 3
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 3
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 3
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 3
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- BYKRNSHANADUFY-UHFFFAOYSA-M sodium octanoate Chemical compound [Na+].CCCCCCCC([O-])=O BYKRNSHANADUFY-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- BPYKTIZUTYGOLE-IFADSCNNSA-N Bilirubin Chemical compound N1C(=O)C(C)=C(C=C)\C1=C\C1=C(C)C(CCC(O)=O)=C(CC2=C(C(C)=C(\C=C/3C(=C(C=C)C(=O)N\3)C)N2)CCC(O)=O)N1 BPYKTIZUTYGOLE-IFADSCNNSA-N 0.000 description 2
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- 102100035792 Kininogen-1 Human genes 0.000 description 2
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 2
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 2
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 2
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 2
- 229920000915 polyvinyl chloride Polymers 0.000 description 2
- 239000004800 polyvinyl chloride Substances 0.000 description 2
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 2
- 230000001698 pyrogenic effect Effects 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 229960005480 sodium caprylate Drugs 0.000 description 2
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 2
- 101800004538 Bradykinin Proteins 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- XUIIKFGFIJCVMT-GFCCVEGCSA-N D-thyroxine Chemical compound IC1=CC(C[C@@H](N)C(O)=O)=CC(I)=C1OC1=CC(I)=C(O)C(I)=C1 XUIIKFGFIJCVMT-GFCCVEGCSA-N 0.000 description 1
- WDJUZGPOPHTGOT-OAXVISGBSA-N Digitoxin Natural products O([C@H]1[C@@H](C)O[C@@H](O[C@@H]2C[C@@H]3[C@@](C)([C@@H]4[C@H]([C@]5(O)[C@@](C)([C@H](C6=CC(=O)OC6)CC5)CC4)CC3)CC2)C[C@H]1O)[C@H]1O[C@@H](C)[C@H](O[C@H]2O[C@@H](C)[C@@H](O)[C@@H](O)C2)[C@@H](O)C1 WDJUZGPOPHTGOT-OAXVISGBSA-N 0.000 description 1
- 102000010911 Enzyme Precursors Human genes 0.000 description 1
- 108010062466 Enzyme Precursors Proteins 0.000 description 1
- QXZGBUJJYSLZLT-UHFFFAOYSA-N H-Arg-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-Pro-Phe-Arg-OH Natural products NC(N)=NCCCC(N)C(=O)N1CCCC1C(=O)N1C(C(=O)NCC(=O)NC(CC=2C=CC=CC=2)C(=O)NC(CO)C(=O)N2C(CCC2)C(=O)NC(CC=2C=CC=CC=2)C(=O)NC(CCCN=C(N)N)C(O)=O)CCC1 QXZGBUJJYSLZLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010000487 High-Molecular-Weight Kininogen Proteins 0.000 description 1
- 102000001399 Kallikrein Human genes 0.000 description 1
- 108060005987 Kallikrein Proteins 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- DZTHIGRZJZPRDV-LBPRGKRZSA-N N-acetyl-L-tryptophan Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)C)C(O)=O)=CNC2=C1 DZTHIGRZJZPRDV-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- CMWTZPSULFXXJA-UHFFFAOYSA-N Naproxen Natural products C1=C(C(C)C(O)=O)C=CC2=CC(OC)=CC=C21 CMWTZPSULFXXJA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N Silicon Chemical compound [Si] XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101001059734 Thermococcus litoralis (strain ATCC 51850 / DSM 5473 / JCM 8560 / NS-C) Trehalose/maltose-binding protein MalE Proteins 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000005844 autocatalytic reaction Methods 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 1
- QXZGBUJJYSLZLT-FDISYFBBSA-N bradykinin Chemical compound NC(=N)NCCC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N1[C@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)CCC1 QXZGBUJJYSLZLT-FDISYFBBSA-N 0.000 description 1
- 238000013375 chromatographic separation Methods 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 229960000633 dextran sulfate Drugs 0.000 description 1
- 238000011026 diafiltration Methods 0.000 description 1
- WDJUZGPOPHTGOT-XUDUSOBPSA-N digitoxin Chemical compound C1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](C)O[C@@H](O[C@@H]2[C@H](O[C@@H](O[C@@H]3C[C@@H]4[C@]([C@@H]5[C@H]([C@]6(CC[C@@H]([C@@]6(C)CC5)C=5COC(=O)C=5)O)CC4)(C)CC3)C[C@@H]2O)C)C[C@@H]1O WDJUZGPOPHTGOT-XUDUSOBPSA-N 0.000 description 1
- 229960000648 digitoxin Drugs 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 239000006167 equilibration buffer Substances 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- -1 for example Substances 0.000 description 1
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 238000011141 high resolution liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 125000001041 indolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000009434 installation Methods 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 239000006193 liquid solution Substances 0.000 description 1
- 150000004668 long chain fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 229960002009 naproxen Drugs 0.000 description 1
- CMWTZPSULFXXJA-VIFPVBQESA-N naproxen Chemical compound C1=C([C@H](C)C(O)=O)C=CC2=CC(OC)=CC=C21 CMWTZPSULFXXJA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-M octanoate Chemical compound CCCCCCCC([O-])=O WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 239000008057 potassium phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010703 silicon Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
- 229940034208 thyroxine Drugs 0.000 description 1
- XUIIKFGFIJCVMT-UHFFFAOYSA-N thyroxine-binding globulin Natural products IC1=CC(CC([NH3+])C([O-])=O)=CC(I)=C1OC1=CC(I)=C(O)C(I)=C1 XUIIKFGFIJCVMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 1
- 238000002211 ultraviolet spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000002550 vasoactive agent Substances 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/38—Albumins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/08—Plasma substitutes; Perfusion solutions; Dialytics or haemodialytics; Drugs for electrolytic or acid-base disorders, e.g. hypovolemic shock
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Hematology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
Description
Опис винаходуDescription of the invention
Даний винахід стосується способу одержання терапевтично придатного альбуміну, який пройшов вірусну 2 інактивацію.The present invention relates to a method of obtaining therapeutically suitable albumin that has undergone viral 2 inactivation.
Альбумін є білком плазми з найбільшою масовою часткою. Молекула альбуміну може зв'язуватися з багатьма ендогенними і екзогенними речовинами. Така зв'язувальна здатність альбуміну є основою однієї із його основних функцій: транспорту речовин, зв'язаних з альбуміном.Albumin is the plasma protein with the largest mass fraction. The albumin molecule can bind to many endogenous and exogenous substances. This binding ability of albumin is the basis of one of its main functions: transport of substances bound to albumin.
Завдяки такій зв'язувальній здатності альбумін є важливим депо для великої різноманітності складів, 70 наприклад, жирних кислот з довгим ланцюгом, білірубіну, триптофану, тироксину або іонів металів.Due to this binding capacity, albumin is an important depot for a wide variety of compounds, such as long-chain fatty acids, bilirubin, tryptophan, thyroxine, or metal ions.
Фармацевтично активні речовини, що уводяться, типу варфарину, дигітоксину або напроксену, також зв'язуються з альбуміном і транспортуються.Pharmaceutically active substances administered, such as warfarin, digitoxin, or naproxen, also bind to albumin and are transported.
Однак у зв'язку з цим дуже важливо знати, що тільки вільна фракція відповідної фармацевтично активної речовини, а саме фракція, яка не зв'язана з альбуміном, є фракцією, яка виявляє фармакологічну дію. 72 Зменшення ділянки, зв'язаної з альбуміном, збільшує вільну фракцію і таким чином сприяє підвищенню вказаної фармакологічної активності.However, in connection with this, it is very important to know that only the free fraction of the corresponding pharmaceutically active substance, namely the fraction that is not bound to albumin, is the fraction that exhibits a pharmacological effect. 72 Reduction of the area bound to albumin increases the free fraction and thus contributes to the increase of the indicated pharmacological activity.
Всі відомі на комерційному ринку препарати альбуміну одержують методом модифікованого фракціонування за Коном (Сопп), який звичайно включає декілька стадій фракціонування. Десятиріччями використовувалась пастеризація (протягом 10 годин при 60 С) концентрату альбуміну як вірус-інактивуюча стадія. З метою виключення денатурації альбуміну під час вказаної вище стадії були використані стабілізатори. Згідно зAll albumin preparations known on the commercial market are obtained by the method of modified fractionation according to Kohn (Sopp), which usually includes several stages of fractionation. Pasteurization (for 10 hours at 60 C) of albumin concentrate has been used for decades as a virus-inactivating stage. In order to exclude albumin denaturation during the above stage, stabilizers were used. According to
Європейською Фармакопеєю, як стабілізатори були використані каприлат натрію (октаноат натрію) абоAccording to the European Pharmacopoeia, sodium caprylate (sodium octanoate) or sodium caprylate were used as stabilizers
М-ацетилтриптофан, або комбінація обох речовин.M-acetyltryptophan, or a combination of both substances.
З метою одержання препаратів фактора МІ або інших білків плазми, які пройшли вірусну інактивацію, використовують так званий 5ЮО-метод, описаний, наприклад, у (патентному документі ЕР-А- 0 131740). Цей с 29 опублікований опис включений у даний документ як посилання. Ге)In order to obtain preparations of the MI factor or other plasma proteins that have undergone viral inactivation, the so-called 5YOO-method is used, described, for example, in (patent document EP-A-0 131740). This p 29 published description is incorporated herein by reference. Gee)
На підставі власних досліджень заявника відомо, що зв'язувальна здатність комерційного придатного альбуміну значно понижена порівняно з натуральним альбуміном. Це пояснюється тим, що стабілізатори, які використовуються при пастеризації, зв'язуються з альбуміном і тому займають важливі транспортувальні сайта.Based on the applicant's own research, it is known that the binding capacity of commercially available albumin is significantly reduced compared to natural albumin. This is explained by the fact that the stabilizers used in pasteurization bind to albumin and therefore occupy important transport sites.
Останнє призводить до зниження зв'язувальної здатності. Це означає, що пацієнти, які одержують подібні б препарати альбуміну, піддаються дії значно підвищених концентрацій вільної активної речовини, тобто такої (Се) речовини, яка не зв'язана з альбуміном, у момент приймання фармакологічно активних речовин, що, природно, означає появу підвищеного ризику підвищення фармакологічних ефектів у пацієнта. тThe latter leads to a decrease in binding capacity. This means that patients who receive similar preparations of albumin are exposed to significantly increased concentrations of the free active substance, that is, such (Ce) a substance that is not bound to albumin, at the time of taking pharmacologically active substances, which naturally means the appearance increased risk of increased pharmacological effects in the patient. t
Метою даного винаходу є створення препарату альбуміну, який позбавлений зазначеного вище недоліку. ав)The purpose of this invention is to create an albumin preparation that is devoid of the above-mentioned drawback. av)
На фіг.1 показане поглинання альбуміном ультрафіолетового випромінювання від різних джерел залежно відFigure 1 shows the absorption by albumin of ultraviolet radiation from various sources depending on
Зо часу елюювання у процесі хроматографічного поділу. соFrom the time of elution in the process of chromatographic separation. co
На фіг.2 показана зв'язувальна активність альбуміну від різних джерел за присутності різних концентрацій фенілбутазону.Figure 2 shows the binding activity of albumin from different sources in the presence of different concentrations of phenylbutazone.
На фіг.3 показана зв'язувальна активність альбуміну від різних джерел за присутності різних концентрацій « варфарину. З7З 70 Дана технічна задача вирішується створенням терапевтично застосовного вірус-інактивованого альбуміну, с що має підвищену зв'язувальну здатність стосовно речовин, порівняно з альбуміном, вірус-інактивованим "з методом пастеризації. Зокрема, альбумін, відповідно до даного винаходу, має зв'язувальну здатність, що зросла, щонайменше, на 1095 у порівнянні із зв'язувальною здатністю альбуміну, вірус-інактивованого методом пастеризації. Звичайно зв'язувальна здатність зростає у межах від 20 до 50095, зокрема, від 100 до 50095. У виняткових випадках можливі навіть більш високі значення залежно від підлягаючої скріпленню речовини. со Речовинами, які зв'язуються або переносяться нативним (природним) альбуміном, зокрема, є (ав) низькомолекулярні активні речовини. Прикладами таких низькомолекулярних активних речовин є органічні або неорганічні речовини, нуклеїнові кислоти, поліпептиди, що мають, як правило, молекулярну вагу «10 000 ть дальтонів (Юа). (22) 20 З метою лікування, як було згадане вище, альбумін за даним винаходом може бути використаний у вигляді с рідкого розчину або у вигляді твердого тіла, зокрема, у ліофілізованій формі.Figure 3 shows the binding activity of albumin from different sources in the presence of different concentrations of warfarin. З7З 70 This technical problem is solved by the creation of a therapeutically applicable virus-inactivated albumin, which has an increased binding capacity for substances, compared to albumin, virus-inactivated "with the pasteurization method. In particular, albumin, according to this invention, has a binding capacity capacity increased by at least 1095 compared to the binding capacity of virus-inactivated albumin by the pasteurization method. Usually, the binding capacity increases in the range of 20 to 50095, in particular, from 100 to 50095. In exceptional cases, even more are possible high values depending on the substance to be bound. с Substances that are bound or transferred by native (natural) albumin, in particular, are (а) low molecular weight active substances. Examples of such low molecular weight active substances are organic or inorganic substances, nucleic acids, polypeptides that have, as a rule, a molecular weight of "10,000 t daltons (Da). (22) 20 For the purpose of treatment, as mentioned not higher, albumin according to the present invention can be used in the form of a liquid solution or in the form of a solid body, in particular, in a lyophilized form.
Відповідно до винаходу альбумін може бути одержаний з використанням способу, який характеризується поєднанням наступних операцій, при яких: (а) для інактивації вірусу перший водний розчин альбуміну піддають обробці методом 5О шляхом забезпечення його контакту з реагентами ЗО при температурі нижче 459; (Ф) (Б) видаляють, принаймні, суттєву кількість реагентів ЗО шляхом масляної екстракції з подальшоюAccording to the invention, albumin can be obtained using a method that is characterized by a combination of the following operations, in which: (a) to inactivate the virus, the first aqueous solution of albumin is treated by the 5O method by ensuring its contact with ZO reagents at a temperature below 459; (F) (B) remove, at least, a significant amount of ZO reagents by oil extraction followed by
Ге хроматографією гідрофобної взаємодії, при якій для забезпечення проходження згаданого процесу хроматографії використовують гідрофобну матрицю, зокрема матрицю, з якою довільно можуть зв'язуватися во гідрофобні групи, за умови, що як зазначені групи використовуються аліфатичні групи більш ніж з 24 атомами вуглецю, для одержання другого розчину альбуміну, до якого (с) довільно додають один або декілька стабілізаторів, обраних з групи цукрів, амінокислот, цукрових етилових спиртів, за умови, що не використовують індол як стабілізатор, а також як такий стабілізатор не застосовують жирну кислоту С 8-С4о, після чого в5 (4) другий розчин альбуміну, до якого вже довільно був доданий стабілізатор, піддають остаточному пакуванню та стерильній фільтрації і довільно завантажують у контейнери.He by hydrophobic interaction chromatography, in which to ensure the passage of the mentioned chromatography process, a hydrophobic matrix is used, in particular a matrix with which hydrophobic groups can be arbitrarily connected, provided that aliphatic groups with more than 24 carbon atoms are used as the specified groups, to obtain the second albumin solution, to which (c) one or more stabilizers selected from the group of sugars, amino acids, sugar ethyl alcohols are arbitrarily added, provided that indole is not used as a stabilizer, and fatty acid С8-С4о is not used as such stabilizer , after which in5 (4) the second albumin solution, to which the stabilizer was already arbitrarily added, is subjected to final packaging and sterile filtration and arbitrarily loaded into containers.
Термін "стабілізатор типу індол" стосується всіх стабілізаторів, що мають скелет індолу, наприклад, ацетилтриптофан.The term "indole-type stabilizer" refers to all stabilizers having an indole skeleton, for example, acetyltryptophan.
Метод 50 (- розчинник/детергент), що застосовується для інактивації вірусів, відомий з (|патентного документа ЕР-А-0 131 740). В описі до даного документа серед інших протеїнів згадувався також й альбумін.Method 50 (- solvent/detergent), which is used to inactivate viruses, is known from patent document EP-A-0 131 740. In the description of this document, among other proteins, albumin was also mentioned.
Крім того, з |патентного документа ЕР-А-0 366 946| відомо, що реагенти ЗО можуть бути видалені за допомогою рослинних олій, наприклад, соєвої олії з подальшою хроматографією гідрофобної взаємодії. Таким чином, порівняно з суттєвими ознаками способу, розкритого у |патентному документі ЕР-А-О 366 946), спосіб, поданий у п. 8 формули, слід було б розглядати як аналог способу приготування альбуміну, відповідного одному /о З аспектів даного винаходу. Проте зазначений вище патент для процесу хроматографії, переважно, як матрицю пропонує, наприклад, матрицю кремнію, з якою зв'язуються гідрофобні бічні ланцюги, тобто відгалужені або не відгалужені ланцюги алкілу Св-Соу.In addition, from |patent document EP-A-0 366 946| it is known that ZO reagents can be removed using vegetable oils, for example, soybean oil, followed by hydrophobic interaction chromatography. Thus, compared to the essential features of the method disclosed in patent document EP-A-O 366 946), the method presented in item 8 of the formula should be considered as an analogue of the method for preparing albumin corresponding to one of the aspects of this invention . However, the above-mentioned patent for the chromatography process, preferably, as a matrix offers, for example, a silicon matrix, to which the hydrophobic side chains, that is, branched or unbranched chains of C-S-O alkyl, are bound.
Несподівано було виявлено, що використання гідрофобної матриці замість матриці, яка несе в собі ланцюги алкілу Сів, наприклад, як гідрофобні бічні ланцюги, призводить до більш високої зв'язувальної здатності щодо /5 поглинання детергентів. Отже, відпадає будь-яка потреба у додаткових гідрофобних групах, призначених для зв'язування з матрицею, що використовується згідно з даним винаходом. Тому даний винахід стосується також способу використання такої матриці.Unexpectedly, it was found that the use of a hydrophobic matrix instead of a matrix that carries C 8 alkyl chains, for example, as hydrophobic side chains, leads to a higher binding capacity with respect to /5 absorption of detergents. Therefore, there is no need for additional hydrophobic groups intended for binding to the matrix used according to the present invention. Therefore, the present invention also relates to the method of using such a matrix.
Інактивація вірусу успішно проходить при температурі в діапазоні від 25 до 4096.Inactivation of the virus is successful at a temperature in the range from 25 to 4096.
У переважному прикладі здійснення даного винаходу інактивація зірусу здійснюється протягом періоду часу в діапазоні від 4 до 6 годин.In a preferred embodiment of the present invention, the inactivation of the virus is carried out over a period of time ranging from 4 to 6 hours.
Гліцин виявив себе дуже добрим стабілізатором.Glycine proved to be a very good stabilizer.
Рицинова олія виявилася дуже підхожою для здійснення процесу масляної екстракції.Castor oil turned out to be very suitable for the oil extraction process.
Було виявлено, що використання полістиролдивінілбензол-полімеру або полімеру на основі метакрилату як гідрофобної матриці надає процесу очищення особливої ефективності. сIt has been found that the use of a polystyrene-divinylbenzene polymer or a methacrylate-based polymer as a hydrophobic matrix provides a particularly effective cleaning process. with
Гідрофобні матриці, що застосовуються відповідно до даного винаходу, можуть нести розгалужені або лінійні аліфатичні групи більш ніж з 24 атомами вуглецю. оHydrophobic matrices used in accordance with this invention can carry branched or linear aliphatic groups with more than 24 carbon atoms. at
Залежно від застосовуваного вихідного матеріалу може виявитися необхідною операція виснаження активності так званого активатора прокалікрейну (РКА). РКА відомий своєю здатністю понижувати кров'яний тиск після приймання РКА-вмісних препаратів за рахунок виділення вазоактивної речовини брадикініну із Ге») ввісокомолекулярного кініногену (НМУУК).Depending on the source material used, an operation to deplete the activity of the so-called prokallikrein activator (PKA) may be necessary. RKA is known for its ability to lower blood pressure after taking RKA-containing drugs due to the release of the vasoactive substance bradykinin from the high-molecular-weight kininogen (HMUUK).
РКА звичайно інактивується під час пастеризації протеїнових препаратів. Як відомо з рівня техніки, о теплова обробка, у процесі якої РКА, щонайменше, частково інактивується, чинить несприятливу дію на «І альбумін, приготовлений відповідно до винаходу. Якщо виникне потреба, із згаданих вище причин РКА може бути видалений завдяки використанню спеціальних методів. Вони включають інкубацію (витримування у оRKA is usually inactivated during pasteurization of protein preparations. As is known from the state of the art, heat treatment, in the process of which RKA is at least partially inactivated, has an adverse effect on "Albumin prepared according to the invention. If necessary, for the reasons mentioned above, the RKA can be removed using special methods. They include incubation (keeping in o
Зз5 термостаті) з активованим вугіллям, після чого здійснюється фільтрація переважно за допомогою глибоких Ге) фільтрів або пряма фільтрація через фільтри, що містять активоване вугілля.35 thermostats) with activated carbon, after which filtration is carried out mainly with the help of deep Ge) filters or direct filtration through filters containing activated carbon.
Крім того, для видалення РКА дуже зручні іонообмінники, наприклад, катіонообмінники або аніонообмінники.In addition, ion exchangers, such as cation exchangers or anion exchangers, are very convenient for removing PKA.
Дана операція може бути успішно здійснена шляхом забезпечення контакту розчину, що містить альбумін, з матрицею в колонках або з використанням групової технології, відомої кваліфікованому фахівцю у даній галузі « техніки. Як альтернатива, з метою зниження вмісту РКА можуть бути використані матриця декстрансульфатуабо Ще с гепарину. й В одержаному розчині, що містить альбумін, вміст РКА зменшений і вже не піддається виявленню у кожному «» оптимальному випадку. Відповідно до даного стану рівня техніки РКА ідентичний активізованому (в результаті коагуляції) фактору Хі! (ЕХІЇ), який проведений від його проферментної форми (ЕХІ!). Це явище можеThis operation can be successfully carried out by contacting the solution containing albumin with the matrix in the columns or by using batch technology known to one of skill in the art. As an alternative, in order to reduce the content of PKA, a matrix of dextran sulfate or even with heparin can be used. y In the resulting solution containing albumin, the content of PKA is reduced and is no longer detectable in every "optimal" case. According to this condition, the level of the RKA technique is identical to the activated (as a result of coagulation) factor Chi! (EHII), which is derived from its pro-enzymatic form (EHI!). This phenomenon can
Відбуватися на поверхнях як результат автокаталізу або ферментативної дії, наприклад, калікрейну. Відповідно, о виснаження ЕХІ! (проферменту), який є попередником РКА, також може бути рекомендоване, але не є обов'язковим. Однак щоб запобігти появі оновленого покоління РКА із проферментної форми, остання також о може бути видалена у процесі іонообмінної хроматографії. Виснаження ЕХІЇ може бути довільно здійснене з ї» метою забезпечення довгострокового зберігання альбуміну у рідкому стані. Це може виявитися доцільним після 5ор розморожування розчину альбуміну, який, можливо, зберігався у замороженому стані. Отже, розчин альбумінуOccur on surfaces as a result of autocatalysis or enzymatic action, for example, kallikrein. Accordingly, about the exhaustion of EHI! (proenzyme), which is a precursor to RKA, may also be recommended, but is not mandatory. However, to prevent the appearance of an updated generation of PCA from the pro-enzymatic form, the latter can also be removed in the process of ion exchange chromatography. Depletion of EHIA can be carried out arbitrarily with the aim of ensuring long-term storage of albumin in a liquid state. This may be appropriate after 5 hours of thawing albumin solution, which may have been stored in a frozen state. So, albumin solution
Фо після заповнення контейнерів для зберігання може бути підданий глибокому заморожуванню. Крім того, він можеPho can be deep-frozen after filling storage containers. Besides, he can
Ге) бути охолоджений, і в рідкому або сухому замороженому стані зберігатися при температурі до 4026.Ge) to be cooled, and in liquid or dry frozen state to be stored at a temperature of up to 4026.
Таким чином, для видалення РКА або речовин-попередників РКА активність будь-якого активатора прокалікрейну (РКА), яка може бути присутня до та після операцій (а), (Б) або (с), може бути ліквідованаThus, to remove PCA or PCA precursors, any prokallikrein activator (PCA) activity that may be present before and after operations (a), (B), or (c) can be eliminated
Відомим способом, зокрема, при якому розчин альбуміну:In a known way, in particular, in which albumin solution:
А) вводять у контакт з активованим вугіллям з наступним видаленням активованого вугілля з розчину о альбуміну; або ко В) піддають іонообмінній хроматографії.A) put in contact with activated carbon followed by removal of activated carbon from the albumin solution; or ko B) are subjected to ion exchange chromatography.
Операцію (А) здійснюють при концентрації альбуміну від 1 до 2595 за вагою, переважно, від 5 до 1095 за бо вагою.Operation (A) is carried out at an albumin concentration of 1 to 2595 by weight, preferably from 5 to 1095 by weight.
Операцію (В) здійснюють, зокрема, при концентрації альбуміну від 5 до 1095 за вагою.Operation (B) is carried out, in particular, at an albumin concentration of 5 to 1095 by weight.
Ще в одному прикладі здійснення винаходу іонообмінник поданий у вигляді аніонообмінника, і буферну дію на розчин альбуміну чинить ацетат натрію у кількості від 100 до 15О0ммол/л, при значенні водневого показника рн від 5,0 до 6,0, переважно «5,5. 65 Ще в одному прикладі здійснення винаходу описаний спосіб, який характеризується тим, що іонообмінник поданий у вигляді катіонообмінника, і буферну дію на розчин альбуміну чинить ацетат натрію у кількості від 20 до ЗОммол/л, при значенні водневого показника рН від 4,8 до 6,0, переважно, від 4,8 до 5,2.In another example of the implementation of the invention, the ion exchanger is provided in the form of an anion exchanger, and the buffering effect on the albumin solution is exerted by sodium acetate in the amount of 100 to 1500 mmol/l, with a hydrogen index value of pH from 5.0 to 6.0, preferably "5.5. 65 In yet another example of the implementation of the invention, a method is described, which is characterized by the fact that the ion exchanger is presented in the form of a cation exchanger, and the buffering effect on the albumin solution is exerted by sodium acetate in an amount from 20 to ZOmmol/l, with a pH value of the hydrogen indicator from 4.8 to 6 ,0, mostly from 4.8 to 5.2.
Крім того, даний винахід стосується розчину альбуміну, який може бути одержаний при використанні способу за даним винаходом. Даний спосіб може бути застосований для одержання розчинів альбуміну з різних джерел.In addition, the present invention relates to albumin solution, which can be obtained using the method according to the present invention. This method can be used to obtain albumin solutions from various sources.
Наприклад, з плазми крові або сироватки, з фракцій процесу фракціонування плазми, що містять альбумін, з альбуміну, відновленого із супернатанту (спливаючого шару) культури після приготування рекомбінанта, або з альбуміну, приготовленого за трансгенною технологією, або з будь-якого середовища, що містить альбумін, наприклад, з молока.For example, from blood plasma or serum, from fractions of the plasma fractionation process containing albumin, from albumin recovered from the supernatant (floating layer) of the culture after preparation of the recombinant, or from albumin prepared by transgenic technology, or from any medium that contains albumin, for example from milk.
Далі переважний приклад здійснення винаходу описується за допомогою наступного конкретного процесу. 70 ПрикладNext, a preferred embodiment of the invention is described by the following specific process. 70 Example
До 1000г водного розчину альбуміну одержаного методом Коена (після діафільтрації/ультрафільтрації), з вмістом протеїну біля 2395 додавали Топ Х-100 та три-п-бутилфосфат (ТМВР) до одержання 19б5-ї концентрації кожного. Після цього розчин альбуміну перемішували при температурі 302С протягом 4 годин.Top X-100 and tri-p-butyl phosphate (TMBP) were added to 1000g of an aqueous solution of albumin obtained by Cohen's method (after diafiltration/ultrafiltration), with a protein content of about 2395, to obtain a 19b5th concentration of each. After that, the albumin solution was stirred at a temperature of 302C for 4 hours.
З метою видалення реагентів ЗО спочатку додавали при перемішуванні рицинову олію до одержання 5905-ї 75 Концентрації, причому одночасно розчин доводили до температури в діапазоні від 20 до 2590. Після цього суміш перемішували протягом ЗО хвилин. Після перемішування суміші давали можливість відстоятися протягом 60 хвилин з метою формування водної важкої та легкої фаз. Важка фаза відділялася і фільтрувалася через фільтр, обладнаний мембранами з розміром пор «Трм та «0,45ум. Легка фаза (масляна фаза) містить ТМВР і відділяється.In order to remove ZO reagents, castor oil was first added while stirring to obtain 5905th 75 Concentration, and at the same time the solution was brought to a temperature in the range from 20 to 2590. After that, the mixture was stirred for 30 minutes. After mixing, the mixture was allowed to settle for 60 minutes in order to form aqueous heavy and light phases. The heavy phase was separated and filtered through a filter equipped with membranes with a pore size of "Trm" and "0.45 µm. The light phase (oil phase) contains TMVR and is separated.
З метою відділення Ттйоп Х-100 відфільтрований розчин пропускають через екстракційну колонку для вилучення твердої фази. Полістиролдивінілбензол-полімер (Атрегспготе Со 161) без гідрофобних бічних ланцюгів використовують як гідрофобну матрицю. Воду для ін'єкцій використовують для промивки колонки, при цьому моніторинг даного процесу здійснюють вимірюванням ультрафіолетового поглинання при 28Онм. Після використання колонку відновлюють. Ге!In order to separate Ttyop X-100, the filtered solution is passed through an extraction column to extract the solid phase. Polystyrenedivinylbenzene polymer (Atregspgote Co 161) without hydrophobic side chains is used as a hydrophobic matrix. Water for injections is used to wash the column, while the monitoring of this process is carried out by measuring ultraviolet absorption at 28 Ohm. After use, the column is restored. Gee!
Як стабілізатори можуть бути додані наступні речовини: гліцин, глутамат, аргінін, мальтоза, сорбітол або о суміші названих речовин:The following substances can be added as stabilizers: glycine, glutamate, arginine, maltose, sorbitol or a mixture of these substances:
Одержаний розчин доводять до досягнення водневого показника рН 7,0; вміст протеїну доводять до 200г/л, а вміст натрію - до ВОммол/л Ма". Після цього розчин піддають стерильній фільтрації через мембранний фільтр з розміром пор «0,2им. (о)The resulting solution is brought to a pH of 7.0; the protein content is brought up to 200 g/l, and the sodium content is brought up to VOmmol/l Ma". After that, the solution is subjected to sterile filtration through a membrane filter with a pore size of "0.2 um. (o)
Стерильним відфільтрованим розчином заповнюють стерильні апірогенні мішки з полівінілхлориду в «о асептичних умовах, а самі мішки маркують.Sterile non-pyrogenic bags made of polyvinyl chloride are filled with a sterile filtered solution under aseptic conditions, and the bags themselves are labeled.
Марковані мішки піддають глибокому заморожуванню при температурі «-602С, причому температура « всередині мішка досягає «-302С. Мішки зберігають при цій температурі («-302С). оMarked bags are subjected to deep freezing at a temperature of -602C, and the temperature inside the bag reaches -302C. The bags are stored at this temperature ("-302С). at
Виснаження прокалікрейну 3о У той час, коли повинне відбуватися виснаження РКА, можуть бути використані варіанти наступних процедур: со а) розчин альбуміну, що має концентрацію протеїну від 1 до 2595 за вагою, переважно, від 5 до 1095 за вагою, перемішується протягом однієї години з 3-1090 за вагою, переважно, 595 за вагою активованого вугілля при рН - 5. Згодом активоване вугілля відфільтровують; « - Б) розчин альбуміну, що має концентрацію протешу від 5 до 1095 за вагою, піддають іонообмінній хроматографії (серароза ОЕАЕ, сефароза 0) при рН 5-6, переважно «5,5, у системі з буферною дією, яка не) с забезпечується 100-150мМ ацетату натрію. Завдяки високій іонній силі (буфера) у фільтраті одержують розчин з» альбуміну, звільнений від РКА; (с) розчин альбуміну, що має концентрацію протеїну від 5 до 1095 за вагою, піддають іонообмінній хроматографії (Тоуореагі 5Р, сефароза СМ) при рН 5-6, переважно, 4,8-5,2, у системі з буферною дією, яка забезпечується 20-3Оммол/л ацетату натрію. У фільтраті одержують розчин альбуміну, звільнений від РКА. бо Висновок о Одержані розчини доводяться до стану, що характеризується водневим показником рН - 7,0 кожний, вмістом протешу 200 г/л і вмістом натрію до 8Оммол/л Ма". Потім розчин піддають стерильній фільтрації через те мембранний фільтр з розміром пор «0,2ум. (о) 20 Стерильними відфільтрованими розчинами заповнюють стерильні апірогенні мішки з полівінілхлориду в с асептичних умовах, а самі мішки маркують.Depletion of prokallikrein 3o At the time when depletion of PKA should occur, variants of the following procedures can be used: a) albumin solution having a protein concentration of 1 to 2595 by weight, preferably from 5 to 1095 by weight, is stirred for one hour with 3-1090 by weight, preferably 595 by weight of activated carbon at pH - 5. Subsequently, the activated carbon is filtered; " - B) an albumin solution with a protein concentration of 5 to 1095 by weight is subjected to ion exchange chromatography (serose OEAE, Sepharose 0) at pH 5-6, preferably "5.5, in a system with a buffer effect, which does not) c 100-150 mM sodium acetate is provided. Thanks to the high ionic strength (buffer), a solution of albumin freed from PKA is obtained in the filtrate; (c) an albumin solution having a protein concentration of 5 to 1095 by weight is subjected to ion exchange chromatography (Toworeagy 5R, Sepharose CM) at pH 5-6, preferably 4.8-5.2, in a system with a buffering effect, which 20-3Omol/l of sodium acetate is provided. In the filtrate, a solution of albumin freed from PKA is obtained. The resulting solutions are brought to a state characterized by a hydrogen pH of 7.0 each, a protein content of 200 g/l and a sodium content of up to 8 mol/l Ma". Then the solution is subjected to sterile filtration through a membrane filter with a pore size of "0 ,2um. (o) 20 Sterile pyrogenic bags made of polyvinyl chloride are filled with sterile filtered solutions under aseptic conditions, and the bags themselves are labeled.
Марковані мішки піддають глибокому заморожуванню при температурі «-60 «С, при цьому температура всередині мішка досягає «-302С. Мішки зберігають при цій самій температурі (5-30 2С).Marked bags are subjected to deep freezing at a temperature of -60 °C, while the temperature inside the bag reaches -302 °C. The bags are stored at the same temperature (5-30 2C).
Вимірювання приєднувальної здатності речовин стосовно різних препаратів з вмістом альбумінуMeasurement of the binding ability of substances in relation to various preparations containing albumin
Безпосереднім методом визначення приєднувальних властивостей речовин стосовно альбуміну є (Ф) гель-хроматографія (5ЕС), якщо наслідувати Ниттеї! 8. Огеуег (Віоспіт Віорпуз Асіа 1962; 63:530-5321. ко Отже, колонка ЗЕС зрівноважується буферним розчином, що містить зв'язувальний ліганд (наприклад, феншбутазон або варфарин). Процес поглинання в ультрафіолетовому спектрі піддається безперервному во моніторингу. Протеїн надходить у колонку і елююється у зрівноважувальному буферному розчині. Зв'язаний ліганд починає піддаватися елююванню разом з альбуміном, тоді як не зв'язаний ліганд, який у більшості випадків є меншим, починає піддаватися елююванню, відповідно, пізніше. Як правило, поглинання зв'язаного ліганду перешкоджає поглинанню альбуміну та супровідних речовин, якщо вони є, наприклад, стабілізаторів.A direct method for determining the binding properties of substances in relation to albumin is (F) gel chromatography (5ES), if you follow Nittei! 8. Ogeueg (Viospit Viorpuz Asia 1962; 63:530-5321. ko Therefore, the ZES column is equilibrated with a buffer solution containing a binding ligand (for example, fensbutazone or warfarin). The absorption process in the ultraviolet spectrum is continuously monitored. The protein enters into the column and eluted in the equilibration buffer solution. The bound ligand begins to elute with albumin, while the unbound ligand, which in most cases is smaller, begins to elute accordingly later. Generally, the absorption of bound the ligand prevents the absorption of albumin and accompanying substances, if they are present, for example, stabilizers.
Чим пізніше з'являється "негативний" або так званий "вільний (масапсу)" пік елюювання, що є результатом д5 Виснаження ліганду у наступному буферному розчині, який займає більшу частину поверхні, тим більше виявляється здійснених зв'язків із попередньо елюйбваним альбуміном. Коігиті та інші (Віотей Снгітайсаг 1998;The later the "negative" or so-called "free (Masapsu)" elution peak appears, which is the result of d5 Depletion of the ligand in the next buffer solution, which occupies most of the surface, the more connections with previously eluted albumin are detected. Koigiti and others (Viotei Sngitaisag 1998;
12: 203-210) використали даний спосіб в дещо видозміненій формі для дослідження зв'язувальної здатності речовин стосовно альбуміну або їх схожості, наприклад, шляхом додання збільшеної кількості ліганду до постійних концентрацій альбуміну в окремих серіях дослідів, в результаті чого зв'язувальна здатність могла бути встановлена у вигляді відношень "альбумін-речовина".12: 203-210) used this method in a slightly modified form to study the binding capacity of substances in relation to albumin or their similarity, for example, by adding an increased amount of ligand to constant concentrations of albumin in separate series of experiments, as a result of which the binding capacity could be established in the form of "albumin-substance" relations.
В даних дослідженнях була використана колонка Віозер-5ЗЕС-з, 300х4,б6мм мікронів (Рперотепех) на установці Зпітадг2и НРІ 5. Витрата буферного розчину склала О0,Збмл/хв, колонка була зрівноважена 50ММ буферного розчину фосфату калію, рН 7,4. Концентрація протеїну склала 5ОММ, обсяг уприскування склав 8Оуцл. Фенілбутазон піддавався моніторингу при 263Знм, а фарфарин - при ЗО8нм. Спектри лінійного поглинання 70 були позначені наперед.In these studies, a Vioser-5ZES-z column, 300x4.b6mm microns (Rperotepekh) was used on the Zpitadg2y NRI 5 installation. The consumption of the buffer solution was O0.Zbml/min, the column was equilibrated with 50 mm of potassium phosphate buffer solution, pH 7.4. The protein concentration was 5 OMM, the volume of injection was 8 Oucl. Phenylbutazone was monitored at 263 nm, and farfarin - at 38 nm. The linear absorption spectra of 70 were prelabeled.
В даних дослідженнях були використані: альбумін, відповідно до даної заявки (1), а також наявні на комерційному ринку (стабілізовані) препарати з вмістом альбуміну (2,3). Вони були використані у вигляді 2096-их розчинів альбуміну.In these studies, the following were used: albumin, according to this application (1), as well as available on the commercial market (stabilized) preparations containing albumin (2,3). They were used in the form of 2096 solutions of albumin.
На фіг.1 показане розташування чотирьох різних хроматограм. Колонка була зрівноважена у 50ММ 75 фенілбутазону (у буферному розчині фосфату). Із затримкою у часі 11 хвилин спочатку приступили до елююванню альбуміну. Пік вказує на загальну кількість поглиненого протешу та зв'язаної речовини. На 14,5хв. з'являється пік М-ацетилтриптофану (стабілізатора), у випадку використання комерційного альбуміну. По закінченні 18,5хв. з'являється "вільний (масапсу)" пік у вигляді "негативного" зображення процесу поглинання по відношенню до рівня зрівноважувального буферного розчину, що включає зазначену речовину. Чим вище (мається на увазі негативне зображення) зазначений пік або ширше зона піку, тим більша кількість речовини була зв'язана із попередньо елюйованим альбуміном.Figure 1 shows the arrangement of four different chromatograms. The column was equilibrated in 50 mM 75 phenylbutazone (in phosphate buffer solution). With a time delay of 11 minutes, the elution of albumin was first started. The peak indicates the total amount of absorbed protein and bound matter. For 14.5 min. a peak of M-acetyltryptophan (stabilizer) appears, in the case of using commercial albumin. At the end of 18.5 min. a "free (masapsu)" peak appears in the form of a "negative" image of the absorption process in relation to the level of the balancing buffer solution, which includes the specified substance. The higher (referring to the negative image) the specified peak or the wider the peak area, the greater the amount of substance was bound to the previously eluted albumin.
На фіг.2 показане схематичне зображення ультрафіолетового поглинання трьох концентрацій фенілбутазону, зв'язаного з альбуміном (після віднімання піку буферного розчину). Таким чином, два комерційних альбуміна (що містять каприлат та М-ацетилтриптофан) і альбумін, приготовлений відповідно до способу за даним винаходом, с були піддані хроматографічному дослідженню і порівнянню зв'язувальних властивостей. При порівнянні молярних концентрацій фенілбутазону по відношенню до альбуміну було виявлено, що піки значно ширше як о щодо висоти, так і щодо площі у випадку з новим альбуміном. Такий саме висновок напрошується і при аналізі другого прикладу, тобто у випадку використання варфарину, показаного на фіг.3.Figure 2 shows a schematic representation of the ultraviolet absorption of three concentrations of phenylbutazone bound to albumin (after subtraction of the peak of the buffer solution). Thus, two commercial albumins (containing caprylate and M-acetyltryptophan) and albumin prepared according to the method of the present invention were subjected to chromatographic investigation and comparison of binding properties. When comparing the molar concentrations of phenylbutazone in relation to albumin, it was found that the peaks are significantly wider both in terms of height and area in the case of new albumin. The same conclusion is suggested when analyzing the second example, that is, in the case of using warfarin, shown in Fig.3.
Результати досліджень підкреслюють, що відомий на ринку збуту комерційний альбумін поступається Ге») альбуміну, описаному у даній заявці на винахід, стосовно зв'язувальних властивостей.The results of the research emphasize that commercial albumin, known on the market, is inferior to Ge») albumin, described in this application for the invention, in terms of binding properties.
Зв'язувальна здатність колонок КР-18 у порівнянні з полістиролдивінілбензол-полімерами (Атрегспготе іш 161М) «ІThe binding capacity of KR-18 columns in comparison with polystyrenedivinylbenzene polymers (Atregspgote ish 161M) "I
Система досліджень: колонка об'ємом 44 мл. Витрата: 4мл/хв.Research system: a column with a volume of 44 ml. Consumption: 4 ml/min.
Колонку завантажували 195-им розчином ТІйоп Х-100. Вміст Ттійоп Х-100 в елюаті виміряли після кожного о об'єму колонки за допомогою обернено-фазової рідинної хроматографії високого розділення. Як тільки Топ ее можна було виявити в елюаті, зв'язувальна здатність гелю виснажувалася.The column was loaded with a 195% Tiop X-100 solution. The content of Ttiop X-100 in the eluate was measured after each volume of the column using reversed-phase high-resolution liquid chromatography. As soon as Topee could be detected in the eluate, the binding capacity of the gel was exhausted.
Результат:Result:
Гель КР-18 зв'язує 140мг гелю Ттйоп Х-100/мл, а гель Атрегспготе зв'язує 160мг гелю Тгйоп Х-100/мл. « с тоKR-18 gel binds 140 mg of Tgyop X-100 gel/ml, and Atregspgote gel binds 160 mg of Tgyop X-100 gel/ml. " with that
Claims (18)
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
AT2182003 | 2003-02-13 | ||
PCT/EP2004/001397 WO2004071524A1 (en) | 2003-02-13 | 2004-02-13 | Albumin solution and method for the production thereof |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
UA80469C2 true UA80469C2 (en) | 2007-09-25 |
Family
ID=32854882
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
UAA200508678A UA80469C2 (en) | 2003-02-13 | 2004-02-13 | Method for the production of albumin |
Country Status (22)
Country | Link |
---|---|
EP (1) | EP1592439B1 (en) |
JP (1) | JP2006517938A (en) |
KR (1) | KR20050103292A (en) |
CN (1) | CN100384471C (en) |
AT (1) | ATE362376T1 (en) |
AU (1) | AU2004212324B2 (en) |
BR (1) | BRPI0407458A (en) |
CA (1) | CA2514163A1 (en) |
CY (1) | CY1106793T1 (en) |
DE (1) | DE502004003834D1 (en) |
DK (1) | DK1592439T3 (en) |
ES (1) | ES2285427T3 (en) |
IL (1) | IL169828A0 (en) |
MX (1) | MXPA05008276A (en) |
NO (1) | NO20053677L (en) |
PL (1) | PL376644A1 (en) |
PT (1) | PT1592439E (en) |
RS (1) | RS50891B (en) |
RU (1) | RU2305556C2 (en) |
UA (1) | UA80469C2 (en) |
WO (1) | WO2004071524A1 (en) |
ZA (1) | ZA200506452B (en) |
Families Citing this family (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE102005023155A1 (en) * | 2005-05-13 | 2006-11-16 | Albutec Gmbh | albumin solution |
EP1966239A1 (en) * | 2005-12-22 | 2008-09-10 | CSL Behring GmbH | Octanoate-reduced human albumin |
ES2332846B1 (en) | 2007-10-26 | 2010-07-08 | Grifols, S.A. | USE OF THERAPEUTIC HUMAN ALBUMIN FOR THE PREPARATION OF A MEDICINAL PRODUCT FOR THE TREATMENT OF PATIENTS AFFECTED BY COGNITIVE DISORDERS. |
ES2294976B1 (en) | 2007-11-12 | 2008-12-16 | Grifols, S.A. | "HIGH EFFECTIVE HUMAN ALBUMIN OBTAINING PROCEDURE FOR USE IN DETOXIFICATION THERAPY". |
EP2382993A1 (en) | 2010-04-19 | 2011-11-02 | KTB Tumorforschungsgesellschaft mbH | Combination of drugs with protein-binding prodrugs |
CN111195351A (en) * | 2020-01-20 | 2020-05-26 | 华兰生物工程重庆有限公司 | Preparation method of 5% low-concentration human serum albumin |
Family Cites Families (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH0669961B2 (en) * | 1984-09-25 | 1994-09-07 | 株式会社ミドリ十字 | Immunoglobulin heat treatment method |
US5094960A (en) * | 1988-10-07 | 1992-03-10 | New York Blood Center, Inc. | Removal of process chemicals from labile biological mixtures by hydrophobic interaction chromatography |
US5250662A (en) * | 1989-10-05 | 1993-10-05 | Alpha Therapeutic Corporation | Albumin purification |
DE19729778A1 (en) * | 1997-07-11 | 1999-01-21 | Blutspendedienst Der Drk Lande | Process for the preparation of virus-inactivated biological fluids |
US5919907A (en) * | 1997-12-22 | 1999-07-06 | Shanbrom Technologies Llc | Preparation and utilization of a novel sterile albumin |
IL136552A (en) * | 2000-06-05 | 2005-05-17 | Omrix Biopharmaceuticals Ltd | Method for the inactivation of viruses by a solvent - detergent combination and by nanofiltration |
-
2004
- 2004-02-13 DE DE502004003834T patent/DE502004003834D1/en not_active Expired - Lifetime
- 2004-02-13 CN CNB2004800038643A patent/CN100384471C/en not_active Expired - Fee Related
- 2004-02-13 AU AU2004212324A patent/AU2004212324B2/en not_active Ceased
- 2004-02-13 EP EP04710818A patent/EP1592439B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2004-02-13 JP JP2006501841A patent/JP2006517938A/en active Pending
- 2004-02-13 UA UAA200508678A patent/UA80469C2/en unknown
- 2004-02-13 MX MXPA05008276A patent/MXPA05008276A/en active IP Right Grant
- 2004-02-13 RS YUP-2005/0624A patent/RS50891B/en unknown
- 2004-02-13 RU RU2005128507/15A patent/RU2305556C2/en not_active IP Right Cessation
- 2004-02-13 CA CA002514163A patent/CA2514163A1/en not_active Abandoned
- 2004-02-13 PT PT04710818T patent/PT1592439E/en unknown
- 2004-02-13 KR KR1020057014946A patent/KR20050103292A/en not_active Application Discontinuation
- 2004-02-13 WO PCT/EP2004/001397 patent/WO2004071524A1/en active IP Right Grant
- 2004-02-13 DK DK04710818T patent/DK1592439T3/en active
- 2004-02-13 PL PL376644A patent/PL376644A1/en unknown
- 2004-02-13 ES ES04710818T patent/ES2285427T3/en not_active Expired - Lifetime
- 2004-02-13 AT AT04710818T patent/ATE362376T1/en not_active IP Right Cessation
- 2004-02-13 BR BR0407458-0A patent/BRPI0407458A/en not_active IP Right Cessation
-
2005
- 2005-07-21 IL IL169828A patent/IL169828A0/en unknown
- 2005-07-29 NO NO20053677A patent/NO20053677L/en not_active Application Discontinuation
- 2005-08-12 ZA ZA200506452A patent/ZA200506452B/en unknown
-
2007
- 2007-08-07 CY CY20071101052T patent/CY1106793T1/en unknown
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
ES2285427T3 (en) | 2007-11-16 |
CN100384471C (en) | 2008-04-30 |
RS50891B (en) | 2010-08-31 |
EP1592439B1 (en) | 2007-05-16 |
DE502004003834D1 (en) | 2007-06-28 |
DK1592439T3 (en) | 2007-09-10 |
NO20053677L (en) | 2005-10-31 |
ATE362376T1 (en) | 2007-06-15 |
CA2514163A1 (en) | 2004-08-26 |
KR20050103292A (en) | 2005-10-28 |
CN1798573A (en) | 2006-07-05 |
AU2004212324B2 (en) | 2009-05-07 |
RU2005128507A (en) | 2006-01-20 |
EP1592439A1 (en) | 2005-11-09 |
AU2004212324A1 (en) | 2004-08-26 |
ZA200506452B (en) | 2007-01-31 |
IL169828A0 (en) | 2011-08-01 |
MXPA05008276A (en) | 2006-03-21 |
JP2006517938A (en) | 2006-08-03 |
WO2004071524A1 (en) | 2004-08-26 |
RS20050624A (en) | 2007-06-04 |
PT1592439E (en) | 2007-06-22 |
CY1106793T1 (en) | 2012-05-23 |
NO20053677D0 (en) | 2005-07-29 |
BRPI0407458A (en) | 2006-01-31 |
PL376644A1 (en) | 2006-01-09 |
RU2305556C2 (en) | 2007-09-10 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CA2201714C (en) | Method for isolation of highly pure von willebrand factor | |
AU621148B2 (en) | Removal of process chemicals from labile biological mixtures by hydrophobic interaction chromatography | |
Schwartz et al. | Tryptase from human pulmonary mast cells. Purification and characterization. | |
RU2088590C1 (en) | Method of preparing the standardized concentration of human villebrand factor and concentrate obtained by this method | |
US6921808B2 (en) | Purification process for large scale production of Gc-globulin, the Gc-globulin produced hereby, a use of Gc-globulin and a Gc-globulin medicinal product | |
KR100201195B1 (en) | Albumin preparation and process for preparing the same | |
AU2003244850B2 (en) | Processes for the preparation of fibrinogen | |
US5097019A (en) | Pharmaceutical containing tissue protein pp4, a process for the preparation of pp4 and for the pasteurization thereof, and the use of pp4 | |
ZA200506452B (en) | Albumin solution and method for the production thereof | |
JPH11514920A (en) | Use of hydrophobic zeolites to remove preservatives from polypeptide solutions, syringes and methods | |
JP6713479B2 (en) | Method for purification and quantification of thrombin and its degraded polypeptides | |
TW201618798A (en) | Process for the preparation of universal plasma | |
CN107880112A (en) | A kind of human blood coagulation factor VII I preparation method and human blood coagulation factor VII I products | |
EP1419177B1 (en) | A purification process for large scale production of gc-globulin, product obtained thereby and their use in medicine | |
Bertolini | The purification of plasma proteins for therapeutic use | |
US20060234907A1 (en) | Albumin solution and process for the production thereof | |
AU2002321012A1 (en) | A purification process for large scale production of Gc-globulin, product obtained thereby and their use in medicine | |
JP6900553B2 (en) | Methods for Purifying and Quantifying Thrombin and its Degrading Polypeptides | |
RU2155069C1 (en) | Method of preparing immunoglobulin for intravenous administration and its variants | |
Lee | Joergensen et al. | |
EP4341393A1 (en) | Process for isolating plasminogen from a blood plasma fraction | |
CN108178791A (en) | A kind of eluent and the preparation method of human blood coagulation factor VII I and human blood coagulation factor VII I products | |
CN108059668A (en) | A kind of equilibrium liquid and the preparation method of human blood coagulation factor VII I and human blood coagulation factor VII I products | |
de Lille | Burnouf-Radosevich et a1. | |
JPS59500812A (en) | Thermostabilization of plasma proteins |