TWI395813B - 牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體之製備方法 - Google Patents

牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體之製備方法 Download PDF

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Description

牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體之製備方法
本發明係關於一種粗多醣體之製備方法，特別係關於一種萃取自牛樟芝(Antrodia camphorata )菌絲體固態醱酵產物之粗多醣體之製備方法。
牛樟芝(Antrodia camphorata )，又稱樟芝或牛樟菇等，於分類學上屬於真菌界(Fungi)、擔子菌門(Basidiomycota)、擔子菌亞門(Basidiomycotina)、同擔子菌綱(Homobasidiomycetes)、無褶菌目(Aphyllophorales)、多孔菌科(Polyporaceae)、薄孔菌屬(Antrodia)，牛樟芝子實體生長於台灣保育類牛樟樹(Cinnamoum kanehirai Hay)之心材內壁，週邊向內彎曲，能分解木材之纖維素而造成木頭腐朽，為木頭腐朽菌。野生牛樟芝生長環境均屬於幽暗、潮濕且溫度較低之中海拔地區，特別是野生牛樟芝生長緩慢，因此產生子實體需要相當長的時間。由於牛樟樹為保育類樹種且分布數量極為稀少，再加上人為的盜採使得野生牛樟芝數量相當稀少，使得牛樟芝價格昂貴，所以具有「森林中的紅寶石」之美稱。
牛樟芝子實體為多年生，無柄且為木栓質至木質，具有濃厚的樟樹香氣，形態多變，有板狀、鐘狀、馬蹄狀或塔狀，緊貼於木材表面，菇體表面孔狀，初生時鮮紅色，隨著生長逐變為乳白色、淡紅褐色、淡褐色或淡黃褐色，週邊常呈放射狀，並往四週擴展生長，呈半圓狀或不規則形。
有些牛樟芝的種類被發現具有藥理活性，在台灣民俗醫學療法上，牛樟芝子實體被認為具有某些醫藥功效，將該子實體細磨成乾燥粉末或以熬煮方式口服，為民間流傳具療效的食藥菇類，具有解毒、抗發炎、抗腫瘤、抑制血管增生及治療肝臟疾病等活性。
由於上述得知牛樟芝具藥理活性，市面上已不乏牛樟芝系列之保健產品。目前市面上販售的牛樟芝相關保健產品，製程係由牛樟芝子實體得一菌絲體進行醱酵，主要以食用該菌絲體達保健功效。但是，牛樟芝係為一成份複雜之腐朽菌，有研究指出在人工培養篩選牛樟芝菌絲體時，會篩選到致癌的菌株，表示牛樟芝並非所有成份食用後皆有益於人體健康，也有可能含有某些毒素，若貿然食用反而會影響健康，產生無法預期的副作用，而喪失保健的功效。再者，若要破壞牛樟芝內非藥理活性物質對健康的危害，會選擇經一高溫加熱步驟以確保食用上的安全，然而該高溫加熱步驟亦可能使牛樟芝內有效成份之活性喪失，而失去牛樟芝藥理活性的價值，故找出且分離一具功效且安全的牛樟芝菌絲體菌株(分離株)是為一重要課題。
目前從許多關於牛樟芝的研究中，已知牛樟芝成份非常複雜，發現牛樟芝子實體中含有獨特且不同骨架形成之三萜類化合物，也有研究發現牛樟芝成份含有多醣體。關於多醣體與調節免疫反應的機制研究指出，多醣體之結構會快速活化T淋巴抗原呈現細胞(antigen-presenting cells)，而具有提升免疫力、抗腫瘤、抗發炎及抑菌等活性。若能從牛樟芝萃取物中找到具藥理活性的多醣體來促成提升免疫力，且能將該多醣體以人工培養方式大量培養獲得，能應用於提升人類免疫系統，將為人類健康帶來莫大的幫助。
本發明之主要目的係提供一牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體之製備方法，分離出兼具安全性及藥理活性之牛樟芝菌絲體，進而生產牛樟芝菌絲體固態醱酵產物之粗多醣體。
本發明的次一目的，係提供一種牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體之製備方法，該製備方法係可經由人工培養一牛樟芝菌絲體固態醱酵物，經萃取及分離純化大量獲得一粗多醣體。
本發明的再一目的，係提供一種牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體之製備方法，該粗多醣體能有效活化免疫細胞。
根據本發明的一種牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體之製備方法，係關於建立一種適合從一牛樟芝菌絲體固態醱酵培養物中大規模地萃取出具藥理活性之粗多醣體的製備方法，特定言之，該製備方法係藉由培養期間的溫度調節、時間控制、培養基的選擇及粗多醣體的分離來建立，以獲得牛樟芝菌絲體固態醱酵產物的粗多醣體。
為讓本發明之上述及其他目的、特徵及優點能更明顯易懂，下文特舉本發明之較佳實施例，並配合所附圖式，作詳細說明如下：以下介紹為本發明較佳實施例，牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體係取自於一NPU-50菌株之固態醱酵物，首先介紹如何以人工培養篩選出該NPU-50菌株，進行鑑定該NPU-50菌株為一牛樟芝菌絲體菌株，再者，經萃取該牛樟芝菌絲體NPU-50菌株之固態醱酵物得一粗多醣體(ACP)，並利用免疫測試發現該粗多醣體具免疫活性，可增殖免疫細胞。
一、牛樟芝菌絲體NPU-50菌株製備
首先取野生牛樟芝子實體磨碎成一子實體粉末，本發明較佳實施例係選擇將該子實體粉末懸浮於0.1%蛋白腖稀釋成一懸浮液，再取該懸浮液塗抹於一含有抗生素之MEA平板培養基上，該MEA平板培養基係包含一基材、一碳源及一氮源，該基材係選擇為洋菜，該碳源係選自由葡萄糖(glucose)、果糖(fructose)、半乳糖(galactose)、乳糖(lactose)、澱粉(starch)、纖維素(cellulose)及蔗糖(sucrose)所組成之族群，該氮源係選由蛋白腖(peptone)、麥芽抽出物(malt extract)、酵母抽出物(yeast extract)及三蛋白腖(tripeptone)所組成之族群，本發明之MEA平板培養基較佳係選擇洋菜作為基材，葡萄糖作為碳源，蛋白腖及麥芽抽出物作為氮源，該MEA平板培養基培養條件較佳係選擇為27℃，2-3天。於培養的過程中，見單一菌落即將該單一菌落接種至新MEA平板培養基，藉此方法分離出不同性狀之牛樟芝菌絲體菌株。本發明係依上述方法分離出一菌株具較鮮紅之外觀顏色、特殊香氣及生長速率較快之特性，該菌株命名為NPU-50。
二、牛樟芝菌絲體NPU-50菌株鑑定
取得該NPU-50菌株後，需進行鑑定該菌株是否確為一牛樟芝菌絲體。本發明較佳實施例係選擇將該NPU-50菌株接種至一MEB液態培養基，該MEB液態培養基係包含一碳源及一氮源，該碳源係選自由葡萄糖(glucose)、果糖(fructose)、半乳糖(galactose)、乳糖(lactose)、澱粉(starch)、纖維素(cellulose)及蔗糖(sucrose)所組成之族群，該氮源係選由蛋白腖(peptone)、麥芽抽出物(malt extract)、酵母抽出物(yeast extract)及三蛋白腖(tripeptone)所組成之族群。本發明之MEB液態培養基較佳係選擇葡萄糖作為碳源，蛋白腖及麥芽抽出物作為氮源，該MEB液態培養基培養條件為震盪培養於25-30℃，5-12天，本發明較佳實施例係選擇為震盪培養27℃，7天，該震盪係設定在約 300 rpm，較佳係選擇為120 rpm之速率下，再將培養好的菌液係選擇利用超高速冷凍離心機進行離心10,000 rpm離心20分鐘，再以布氏漏斗過濾取得該NPU-50菌絲體，進行菌株鑑定。
判斷牛樟芝的真偽方法主要有三種：(1)顏色外觀上的判斷，(2)型態學上可觀察是否有斷生孢子(arthrospores)的存在，(3)分子生物鑑定系統，則使用於物種分類鑑定上最常用之18S核醣體DNA基因序列，該18S核醣體DNA(18 rDNA)基因序列被作為真菌中屬之間的分類依據，具有高倍複製(high copy number)及演化中高保留性的特點。本發明係選擇分子生物鑑定系統，將該NPU-50之菌絲體利用液態氮冷凍磨碎，進行該NPU-50之DNA萃取，將該NPU-50 DNA做為模版，再加入用來鑑定18S rDNA基因序列之引子NS3(5’-GCAAGTCTGGTGCCAGCAGCC-3’)及NS6(5’-GCATCACAGACCTGTTATTGCCTC-3’)，進行聚合酶連鎖反應(Polymerase Chain Reaction，PCR)得一聚合酶連鎖反應產物，該反應條件為起始於93℃至99℃變性3至5分鐘後，再於93℃至99℃的變性溫度反應30至60秒、於50℃至57℃之煉合反應溫度反應30至60秒及於70℃至75℃的延展溫度反應1至3分鐘，且DNA變性、煉合及延展之循環數為10至50循環，再以70℃至75℃之延展溫度反應7至12分鐘，最後保存於4℃下；本發明較佳聚合酶連鎖反應條件係選擇為起始變性溫度98℃，2分鐘，變性溫度95℃，45秒，煉合溫度52℃，45秒，延展溫度72℃，2分鐘，共進行35個循環，最後延展溫度72℃，10分鐘。之後再以電泳分析判斷是否有該聚合酶連鎖反應產物，若於電泳分析中有見該聚合酶連鎖反應產物，再定序該聚合酶連鎖反應產物，最後將該定序結果與NCBI的資料庫比對，比對結果為牛樟芝(Antrodia camphorata )菌株且比對相似度達100%，確認本發明之該NPU-50菌株確為牛樟芝菌絲體，以下稱為牛樟芝菌絲體NPU-50，於是本發明將該牛樟芝菌絲體NPU-50菌株於中華民國99年3月19日將此菌株寄存於中華民國食品工業研究所之菌種保存及研究中心(BCRC)，該菌株寄存編號為BCRC 930127，命名為牛樟芝菌絲體NPU-50。
由以上所述，得知該NPU-50菌株為一牛樟芝菌絲體，以下稱為一牛樟芝菌絲體NPU-50菌株，接下來係取該牛樟芝菌絲體NPU-50菌株進行液態培養及固態醱酵成一固態醱酵物，再取該固態醱酵物進行萃取獲得牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體(ACP)，並研究該牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體的功效。
三、本發明之牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體(ACP)之製備方法
接下來係研究該牛樟芝菌絲體NPU-50菌株之固態醱酵物內，是否具有藥理活性之成份，首先要液態培養及固態醱酵該牛樟芝菌絲體NPU-50菌株成一固態醱酵物，再進行萃取該固態醱酵物，以進一步研究該固態醱酵物。
該液態培養及固態醱酵步驟，係可取該牛樟芝菌絲體NPU-50菌株於液態培養基及固態培養基上進行液態培養及固態醱酵，本發明較佳實施例，係選擇將該牛樟芝菌絲體NPU-50菌株於液態培養基做初步醱酵，以形成一醱酵液，再將該醱酵液接種至固態培養基，完成一固態醱酵物。該固態培養基含有較佳生長成份，供給營養長成為該固態醱酵物，該固態醱酵物具有強烈的牛樟芝香氣，且該固態醱酵物內部形成類似海綿狀的結構，該類似海綿狀的結構係如野生牛樟芝生長時之結構，且該固態醱酵物內係含有一粗多醣體。
首先取上述該牛樟芝菌絲體NPU-50菌株於該MEB液態培養基進行震盪培養於27℃，培養7天之醱酵液，利用均質機均質該醱酵液，再將該均質過後之醱酵液接種至一固態培養基上。該固態培養基係包含一基材、一碳源及一氮源，該基材為米，係選自於糙米、胚芽米、糯米、蓬萊米、在來米或茭白之一，該碳源係選自由葡萄糖(glucose)、果糖(fructose)、半乳糖(galactose)、乳糖(lactose)、澱粉(starch)、纖維素(cellulose)及蔗糖(sucrose)所組成之族群，該氮源係選由蛋白腖(peptone)、麥芽抽出物(malt extract)、酵母抽出物(yeast extract)及三蛋白腖(tripeptone)所組成之族群。本發明之固態培養基較佳係選擇胚芽米作為基材，葡萄糖作為碳源，蛋白腖及麥芽抽出物作為氮源，該固態培養醱酵條件為培養於25℃至30℃，2至6個月，本發明較佳係選擇於27℃醱酵3個月形成一固態醱酵物。
接著，將該固態醱酵物以水或有機溶劑進行萃取，藉以取得牛樟芝菌絲體固態醱酵產物水萃取物或有機溶劑萃取物，並從該萃取物中獲得該粗多醣體，其中該有機溶劑係選自醇類、酯類、烷類或鹵烷所組成之族群，但並不受此限制。本發明較佳實施例係選擇使用水萃取法，首先將該固態醱酵物係選擇加入蒸餾水，利用均質機均質後，再於75℃至90℃之環境下以超音波震盪，本發明係選擇於80℃震盪2小時，待冷卻後，選擇以超高速冷凍離心機10,000 rpm離心20分鐘得一上清液，選擇以布氏漏斗過濾該上清液，將該過濾後之上清液以95%酒精於4℃沉澱一個晚上得一沉澱物，利用抽氣過濾收集該沉澱物，並利用70%酒精清洗該沉澱物兩次，該沉澱物係為該牛樟芝菌絲體NPU-50固態醱酵物之粗多醣體，稱為牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體(Antrodia camphorata polysaccharides，ACP)，以下簡稱為ACP，請參照第1圖所示，其係該牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣ACP在HPLC-RI色層層析所產生波鋒滯留時間圖譜。
目前關於多醣體的研究指出與調節免疫反應的機制有關，可能為多醣體上的結構活化抗原呈現細胞(antigen-presenting cells，APC)的TLR-4、Denctin 1、MR或MRL的接受器，使APC快速將訊息傳給未活化的T淋巴細胞，活化後的T淋巴細胞會透過特殊途徑進行免疫力的提升、抗腫瘤、抗發炎及抑菌等活性，以下將進行測試，以證明利用本發明之方法所醱酵萃取出的牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體(ACP)具有刺激免疫細胞增殖的能力。
四、本發明牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體之增殖免疫細胞效果
有關食用真菌研究中，已知靈芝多醣體可抑制腫瘤生長及刺激T淋巴細胞及B淋巴細胞活化，以及巴西蘑菇多醣體可抗腫瘤及提升免疫力活性，於是本發明較佳實施例係取本發明之牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體(ACP)進行免疫細胞增殖試驗。
首先分離SD大鼠的周邊血液單核球細胞及脾臟中的免疫細胞，本發明較佳實施例係選擇於分離出大鼠之周邊血液單核球細胞及脾臟中的免疫細胞分別加入96孔盤中，每孔係選擇加入50 μL 2×106 cells/mL細胞，再分別加入劑量為1 μg/mL lipopolysaccharides(LPS)、10 μg/mL concanalin A(ConA)、ACP含1 μg/mL LPS及ACP含10 μg/mL ConA，係選擇置於5% CO2 的培養箱37℃，培養細胞72小時後，再於每孔加入細胞增殖檢測試劑Alamar BlueTM 10 μL，於5% CO2 37℃之培養箱中反應四小時後，選擇利用ELISA reader於570 nm及600 nm分別測吸光值，再經計算公式得到免疫細胞之增值百分比。在老鼠周邊血液單核球細胞增殖結果如第2圖所示，該ACP與LPS共同刺激增值效果約為控制組的2倍，該ACP與ConA共同刺激增值效果約為控制組的5.8倍；在老鼠脾臟中的免疫細胞增殖結果，如第3圖所示，該ACP與LPS或ConA共同刺激增殖效果皆可達約為控制組的2倍。
由上述免疫試驗結果得知，該牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體ACP與LPS混合，或者將該牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體ACP與ConA混合，以共同刺激誘導週邊血液單核球細胞及脾臟免疫細胞增殖的效果佳，可藉由多醣體上的結構活化抗原呈現細胞，快速將訊息傳給未活化的T淋巴細胞，進而活化T淋巴細胞提升免疫力；由於加入ACP會加強LPS或ConA的功效，而達到共同提升免疫細胞增殖，因此能有效引發產生免疫反應，且可達到刺激免疫細胞增殖及活化者。可驗證經由本發明較佳實施例之製備方法所篩選到該牛樟芝菌絲體NPU-50菌株，為一富含藥理功效且安全的牛樟芝菌絲體菌株，且將該牛樟芝菌絲體NPU-50菌株經培養固態醱酵成一固態醱酵物，再經由分離純化獲得一粗多醣體，該粗多醣體具有藥理活性，能有效增殖免疫細胞。
本發明分離出一安全且具藥理活性之牛樟芝菌絲體NPU-50菌株，使用牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體之製備方法，從該牛樟芝菌絲體NPU-50菌株固態醱酵物經萃取可取得一具藥理活性之粗多醣體。
本發明之牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體之製備方法，利用人工大量的培養出該牛樟芝菌絲體NPU-50成一固態醱酵物取代野生牛樟芝，且該固態醱酵物直接經萃取及分離純化，就可大量地取得該牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體。
本發明之牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體之製備方法，該牛樟芝菌絲體固態醱酵產品粗多醣體誘導週邊血液單核球細胞及脾臟免疫細胞增殖的效果佳，與能刺激免疫細胞活化的LPS或ConA共同刺激，能有效提升免疫細胞活化，有效引發免疫反應，且達到刺激免疫系統細胞增殖的功效。
雖然本發明已利用上述較佳實施例揭示，然其並非用以限定本發明，任何熟習此技藝者在不脫離本發明之精神和範圍之內，相對上述實施例進行各種更動與修改仍屬本發明所保護之技術範疇，因此本發明之保護範圍當視後附之申請專利範圍所界定者為準。
第1圖：本發明之牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體ACP萃取後之HPLC-RI圖譜。
第2圖：本發明之牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體ACP與LPS或與ConA共同刺激大鼠的周邊血液單核球細胞增殖反應圖。
第3圖：本發明之牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體ACP與LPS或與ConA共同刺激大鼠的脾臟免疫細胞增殖反應圖。

Claims (23)

  1. 一種牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體之製備方法，係包含：將牛樟芝菌絲體NPU-50菌株進行液態培養及固態醱酵以獲得一固態醱酵物，且該牛樟芝菌絲體NPU-50菌株係以寄存編號BCRC 930127寄存於中華民國食品工業發展研究所菌種保存及研究中心(BCRC)；及取該菌株之固態醱酵物進行分離純化以獲得一牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體。
  2. 依申請專利範圍第1項所述之一種牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體之製備方法，其中，係將該牛樟芝菌絲體NPU-50菌株培養於一液態培養基中，進行液態培養成一菌液，再將該菌液於一固態培養基上，進行固態醱酵以獲得一固態醱酵物。
  3. 依申請專利範圍第2項所述之一種牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體之製備方法，其中，該固態培養基包括一基材、一碳源及一氮源。
  4. 依申請專利範圍第3項所述之一種牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體之製備方法，其中，該基材為米。
  5. 依申請專利範圍第4項所述之一種牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體之製備方法，其中，該基材之米品種係選自於糙米、胚芽米、糯米、蓬萊米、在來米及茭白之一。
  6. 依申請專利範圍第3項所述之一種牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體之製備方法，其中，該碳源係選自由葡萄糖(glucose)、果糖(fructose)、半乳糖(galactose)、乳糖(lactose)、澱粉(starch)、纖維素(cellulose)及蔗糖(sucrose)所組成之族群。
  7. 依申請專利範圍第3項所述之一種牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體之製備方法，其中，該氮源係選由蛋白腖(peptone)、麥芽抽出物(malt extract)、酵母抽出物(yeast extract)及三蛋白腖(tripeptone)所組成之族群。
  8. 依申請專利範圍第3項所述之一種牛樟芝粗菌絲體固態醱酵產物多醣體之製備方法，其中，該碳源與該氮源之比例為1:1至5:1。
  9. 依申請專利範圍第3項所述之一種牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體之製備方法，其中，該碳源的重量百分比是0.7%至5%，其係以該固態培養基之總重量為100%而言。
  10. 依申請專利範圍第3項所述之一種牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體之製備方法，其中，該氮源的重量百分比是1%至10%，其係以該固態培養基之總重量為100%而言。
  11. 依申請專利範圍第2項所述之一種牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體之製備方法，其中，該菌液於固態培養基上進行固態醱酵時之溫度為25℃至30℃。
  12. 依申請專利範圍第2項所述之一種牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體之製備方法，其中，該菌液於固態培養基上進行固態醱酵時之時間為2至6個月。
  13. 依申請專利範圍第2項所述之一種牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體之製備方法，其中，該液態培養基包括一碳源及一氮源。
  14. 依申請專利範圍第13項所述之一種牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體之製備方法，其中，該碳源係選自由葡萄糖(glucose)、果糖(fructose)、半乳糖(galactose)、乳糖(lactose)、澱粉(starch)、纖維素(cellulose)及蔗糖(sucrose)所組成之族群。
  15. 依申請專利範圍第13項所述之一種牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體之製備方法，其中，該氮源係選由蛋白腖(peptone)、麥芽抽出物(malt extract)、酵母抽出物(yeast extract)及三蛋白腖(tripeptone)所組成之族群。
  16. 依申請專利範圍第2項所述之一種牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體之製備方法，其中，該牛樟芝NPU-50菌株於液態培養基進行液態培養之溫度為25℃至30℃。
  17. 依申請專利範圍第2項所述之一種牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體之製備方法，其中，該牛樟芝NPU-50菌株於液態培養基進行液態培養之時間為5至12天。
  18. 依申請專利範圍第2項所述之一種牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體之製備方法，其中，該牛樟芝NPU-50菌株於液態培養基進行液態培養時為震盪培養。
  19. 依申請專利範圍第1項所述之一種牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體之製備方法，其中，該牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體係由牛樟芝菌絲體固態醱酵產物萃取物所分離製得。
  20. 依申請專利範圍第19項所述之一種牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體之製備方法，其中，該牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體係由牛樟芝菌絲體固態醱酵產物之水萃取物所分離製得。
  21. 依申請專利範圍第20項所述之一種牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體之製備方法，其中，該水萃取溫度為75℃至90℃。
  22. 依申請專利範圍第19項所述之一種牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體之製備方法，其中，該牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體係由牛樟芝菌絲體固態醱酵產物之有機溶劑萃取物所分離製得。
  23. 依申請專利範圍第22項所述之一種牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體之製備方法，其中，該有機溶劑係選自由酯類、醇類、烷類及鹵烷所組成之族群。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109984293B (zh) * 2017-12-29 2022-08-30 康建生物科技股份有限公司 牛樟芝酦酵糙米，其制法及其组合物

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TWI236480B (en) * 2000-09-25 2005-07-21 Grape King Inc A method for producing biological active material with antrodia camphorata and composition thereof
TW200638867A (en) * 2005-05-06 2006-11-16 Golden Biotechnology Corp Incubation and application methods for the culture of antrodia camphorata
TW200835791A (en) * 2007-02-26 2008-09-01 Pei-Jung Li Method for artificially propagating fruit body stroma of Antrodia Camphorate
TW200944120A (en) * 2008-04-23 2009-11-01 Qi-Xi Lian Artificial cultivation method for antrodia camphorata

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TWI236480B (en) * 2000-09-25 2005-07-21 Grape King Inc A method for producing biological active material with antrodia camphorata and composition thereof
TW200638867A (en) * 2005-05-06 2006-11-16 Golden Biotechnology Corp Incubation and application methods for the culture of antrodia camphorata
TW200835791A (en) * 2007-02-26 2008-09-01 Pei-Jung Li Method for artificially propagating fruit body stroma of Antrodia Camphorate
TW200944120A (en) * 2008-04-23 2009-11-01 Qi-Xi Lian Artificial cultivation method for antrodia camphorata

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* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Kuo MC et al, "Immunomodulatory effect of Antrodia camphorata mycelia and culture filtrate.", J Ethnopharmacol. 2008 Nov 20;120(2):196-203, Epub 2008 Aug 19. *
Liu JJ et al, "Antitumor effects of the partially purified polysaccharides from Antrodia camphorata and the mechanism of itsaction.", Toxicol Appl Pharmacol. 2004 Dec 1 201(2):186-93. *

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