TWI358292B - Composition with effects of decline prevention, im - Google Patents

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1358292 玖、發明說明： 【發明所屬之技術領域3 發明領域 本發明係有關含有花生四烯酸及/或具有花生四烯酸 5 作為組成脂肪酸之化合物作為活性成分之食品及飲料，該 等食品及飲料具有預防健康人認知能力的低下，改善或加 強認知能力正常反應之功效，及其製造方法。特別本發明 提供食品及飲料，該等食品及飲料具有預防健康人認知能 力的低下，改善或加強認知能力正常反應之功效，改善或 10 加強有關選自聽覺刺激、視覺刺激、味覺刺激、嗅覺刺激 以及身體感覺刺激組成的組群相關事件之覺察程度及/或 分辨能力之功效，該食品或飲料含有一或多種選自由花生 四烯酸、花生四烯酸醇酯及三酸甘油酯、含有花生四烯酸 作為部分或全部組成脂肪酸之磷脂質或糖脂質組成的組群 15 之物種作為活性成分，及其製造方法。 【先前技術3 發明背景 認知是一種由外在環境選擇資訊且明白辨識該資訊之 過程，特別認知係有關傳遞外在刺激例如視、聽、嗅、味 20 及身體感覺刺激，經由感覺器官傳遞至大腦，以及經由腦 部多重器官的協調功能而處理資訊且準確辨識資訊之過 程。認知能力係由資訊處理速度(轉換外部刺激速度）以及資 訊處理資源量（對外部刺激資訊處理之資源配置程度）兩項 因素組成，因此須了解根據本發明之預防健康人認知能力 5 1358292 的低下，改善或加強認知能力正常反應之功效表示預防正 常功能之低下，改善或加強正常功能，正常功能例如為注 意力、記憶力、感知能力、語言、計算等，而與改善受損 的功能有別。 5 有關認知功能受損已經研究及開發多種治療劑。但不 幸尚未發現任何有效藥物可預防健康人認知能力的低下， 改善或加強認知能力正常反應之功效。換言之，雖然已知 測定認知功能受損以及評估改善功效之方法（例如參考 Nishimura, T.，Takeda，M.，「阿兹海默氏痴呆之診斷造影」， 10 27-36頁，醫景出版公司（2001年10月2日）），但此等方法無 法評估正常反應的預防低下、改善或加強。因此需要有一 種有效手段可客觀評估健康人認知能力的正常反應，俾客 觀發展及研究可預防健康人認知能力的低下，改善或加強 認知能力正常反應之藥劑。 15 晚近注意力焦點集中在有關腦電位作為客觀評估認知 能力的生理指標。經由接在人頭皮上的電極，可記錄神經 元所呈現的電活性。背景腦波一般已知為連續電活動而其 隨刺激程度而改變。也存在有一過性微小的活動電位，該 活動電位係關聯特定事件而改變。此種活動電位目前稱作 20 為「腦部之事件相關電位」，被解譯為經由内部刺激或外部 刺激所誘生的電位。腦部之事件相關電位，亦即約0.1微伏 特至數十微伏特之微小電位變化，係由一連串正波與負波 組成。於此一系列電位變化中正波對刺激事件出現近300毫 秒，且與認知功能相關，定名為P300。對一刺激事件而言， 6 1358292 P300的出現時間稱做p3〇〇延遲，表示資訊的處理速度(轉化 外部刺激的速度），而尖峰距離基準線的高度稱作為P300振 幅，表示資訊處理資源量（對外部刺激之資訊處理之資源配 置程度)(例如參考Mitamura, S.，「流行治療」，第18卷第4 5 期’ 618-621頁，生命醫藥商業公司，（2001年10月2日））。 如此經由測量腦部之事件相關電位，可客觀測定人類之認 .知反應》 外部刺激係經由感.覺器官而傳遞至腦，腦是一種類似 脂肪物質的組織，約1/3白質以及約1/4灰質係由填脂質組 10 成。由於大部分組成的腦細胞膜之鱗脂質之多元不飽和脂 肪酸為花生四烯酸以及廿二碳六烯酸，提示此等多元不飽 和脂肪酸於加強學習能力及記憶能力以及預防或改善老年 痴呆可能扮演某種角色。花生四烯酸及廿二碳六烯酸無法 於動物體内合成，因此必需直接或間接由食物攝取（呈花生 15四烯酸之亞油酸前驅物、或呈廿二碳六烯酸之α-亞油酸前 驅物攝取八如此注意力焦點集中在藉由外部供給花生四稀 酸及廿二碳六烯酸來加強學習與記憶功效、以及預防或改 善老年痴呆功效。發現廿二碳六烯酸於魚油來源中含量豐 .富，對於廿二碳六烯酸之腦部功能效果的改善進行大量研 20究’有多個發明揭示有關其用作為學習能力加強劑、記憶 力加強劑、疾呆預防及痴呆治療劑、抗痴呆劑或具有腦部 功能改善效果之機能性實務（例如參考曰本專利公開案第 7-82146號 '日本專利公開案第5-117147號及日本專利公開 案第2-49723號）。此外，晚近由本發明發明人顯示，花生四 7 烯酸及/或含花生四烯酸作為組成脂肪酸之化合物可改善 老化相關的學習能力低下，此項報告係基於將花生四烯酸 及/或含花生四烯酸作為組成脂肪酸之化合物投予老年動 物，進行摩里斯水迷宮試驗所得試驗結果，述於日本專利 5 公開案第2003-48831號，公開日期2003年2月21日，名稱「具 有預防或改善腦功能低下引發的情況或疾病之組成物」。但 該發明係針對腦功能的低下，並未揭示任何有關健康人認 知能力正常反應的效果。 曾經嘗試基於腦部之事件相關電位，來測定若干化合 10 物對認知反應之改善功效。Miyanaga，K.檢驗DHA對腦功能 的藥理作用，測定口服投予含有2400毫克DHA膠囊劑給26 位健康個體之前及之後’腦之事件相關腦電位，結果發現 P300延遲顯著縮短’ P300振幅顯著放大（參考Miyanaga， ’「食品科學」’ 84-96頁（柯林書社)(1999年)）。但由於缺 15乏與安慰劑樣本的比較結果，故無法建立起血中DHA濃度 與P300結果間的交互關聯。97位健康老人每日投予含9〇〇 毫克DHA之膠囊劑經歷6個月，此種長期投藥試驗中，未觀 察得P300之變化，因而無法確定DHA之功效。 因此雖然廿二碳六烯酸被視為對學習能力有改進功 2〇效，但事實上並無事件相關腦電位而言，未見任何有效結 果可作為認知能力的指標，表示尚未明白了解花生四烯酸 及/或含花生四稀酸作為組成脂肪酸之化合物是否可有效 用以預防健康人3忍知flb力的低下，改善或加強認知能力之 正常反應。 8 1358292 【發明内容】 欲藉本發明解決之問題 迫切希望開發化合物，其可預防低下、改善或提升作 為認知能力之兩項因素之資訊處理速度（轉變外來刺激速 5 度）以及資訊處理資源量（對外部刺激之資訊處理資源配置 程度）之正常反應，以及該等化合物高度適合用作為藥物及 /或食品而極少副作用。 解決問題的手段 因此，本發明係有關含有花生四烯酸及/或具有花生四 10 烯酸作為組成脂肪酸之化合物作為活性成分之食品及飲 料，該等食品及飲料具有預防健康人認知能力的低下，改 善或加強認知能力正常反應之功效，及其製造方法。特別 本發明提供食品及飲料，該等食品及飲料具有預防健康人 認知能力的低下，改善或加強認知能力正常反應之功效， 15 改善或加強有關（聽覺刺激、視覺刺激、味覺刺激、嗅覺刺 激、身體感覺刺激)相關事件之覺察程度及/或分辨能力之功 效，該食品或飲料含有一或多種選自由花生四稀酸、花生 四烯酸醇酯及三酸甘油酯、含有花生四烯酸作為部分或全 部組成脂肪酸之磷脂質或糖脂質組成的組群之物種作為活 20 性成分，及其製造方法。 經由積極從事研究目的為求闡明花生四烯酸及/或含 花生四烯酸作為組成脂肪酸之化合物用於預防健康人認知 能力的低下，改善或加強認知能力正常反應之功效，出乎 意外地，發明人發現花生四烯酸及/或含花生四烯酸作為組 9 1358292 成脂肪酸化合物之功效’該功效係基於使用事件相關腦電 位作為指標進行評比。 ， 發明人成功地達成微生物產業製造含至少10 wt%花生 四烯酸之三酸甘油醋，且闡明該等三酸甘油醋用於根據本 5 發明之功效試驗之功效。 發明人進一步成功地達成以酵素方式製造油及脂肪其 含有三酸甘油酯’具有中鏈脂肪酸結合於u-位置以及花生 四烯酸結合於2-位置，且闡明該等三酸甘油酯用於根據本 發明之功效試驗之效果。 · 10 因此，本發明係有關含有花生四烯酸及/或具有花生四 烯酸作為組成脂肪酸之化合物作為活性成分之食品及飲 料，該等食品及飲料具有預防健康人認知能力的低下，改 善或加強認知能力正常反應之功效，及其製造方法。特別 本發明提供食品及飲料，該等食品及飲料具有預防健康人 15 認知能力的低下，改善或加強認知能力正常反應之功效， 改善或加強有關（聽覺刺激、視覺刺激、味覺刺激、嗅覺刺 激、身體感覺刺激)相關事件之覺察程度及/或分辨能力之功 · 效’該食品或飲料含有一或多種選自由花生四烯酸、花生 四烯酸醇酯及三酸甘油酯、含有花生四烯酸作為部分或全 20 部組成脂肪酸之磷脂質或糖脂質組成的組群之物種作為活 性成分’及其製造方法。 根據本發明，提供具有預防健康人認知能力的低下’ 改善或力〇強認知能力正常反應之功效之食品及飲料，該食 品及飲料含有花生四烯酸及/或含花生四烯酸作為組成脂 10 肪酸之化合物作為活性成分，及其製造方法，因此本發明 用於近代杜會特別有用。 圖式簡單說明 第1圖為柱狀圖，顯示於服用含花生四稀酸之食用油膠 囊劑以及含撖欖油之膠囊劑（安慰劑膠囊）之前與之後，血清 磷脂質中之花生四烯酸濃度之變化。 第2圖為線圖，顯示於服用含花生四稀酸之食用油膠囊 劑以及含橄欖油之膠囊劑（安慰劑膠囊）之前與之後，血清磷 脂質中之P300延遲之變化。 第3圖為線圖’顯示於服用含化生四稀酸之食用油膠囊 劑以及含橄欖油之膠囊劑（安慰劑膠囊）之前與之後，也清碟 脂質中之P300振幅之變化。 第4圖為一對點狀圖’顯示P300(P300延遲及P300振幅) 與血清磷脂質之花生四烯酸濃度間之交互關係。 【實施方式3 較佳實施例之詳細說明 本發明係關於含有花生四烯酸及/或具有花生四烯酸 作為組成脂肪酸之化合物作為活性成分之食品及飲料，該 等食品及飲料具有預防健康人認知能力的低下，改善或加 強認知能力正常反應之功效’及其製造方法。 本發明組成物具有預防健康人認知能力的低下’改善 或加強認知能力正常反應之功效’換言之’本發明組成物 具有預防健康人覺察程度的低下’改善或加強覺察程度正 常反應之功效以及具有預防健康人認知能力的低下，改善 1358292 或加強對事件的分辨能力正常犮應之功效（事件包括聽覺 刺激視覺刺激、味覺刺激、嗅覺刺激、身體感覺刺激），可 於食品或飲料、藥品、準藥品等發揮效果。預防健康人認 知能力的低下，改善或加強認知能力正常反應之功效也可 5 有效用作為設計用於預防正常功能例如（注意力、記憶力、 知覺、語言、計算等）防止低下、改善或加強目的用之食品 或飲料、藥品及準藥品等，也可用作為設計用於維持或促 進注意力集中、維持注意力、讓大腦清明、或刺激大腦、 重獲青春等用之食品或飲料、健康食品、機能性食品、特 10 殊醫療照護食品、嬰兒食品、老年食品等。 根據本發明之活性成分可含有任一種具有花生四烯酸 作為組成脂肪酸之化合物來替代自由態花生四烯酸。具有 花生四烯酸作為組成脂肪酸之化合物包括花生四烯酸鹽如 鈣鹽或鈉鹽、或花生四烯酸醇酯如花生四烯酸甲酯、花生 15 四烯酸乙酯等。也可使用含有花生四烯酸作為部分或全部 組成脂肪酸之三酸甘油酯類、或三甘油酯類、一三甘油酯 類、磷脂質或糖脂質。 應用於食品，花生四烯酸較佳係呈三酸甘油酯或磷脂 質形式，特佳係呈三酸甘油酯形式。雖然最終未知任何含 20 花生四烯酸之三酸甘油酯（或三酸甘油酯其包括含花生四 烯酸作為部分或全部組成脂肪酸之三酸甘油酯）之天然來 源，但發明人成功地將含花生四烯酸作為組成脂肪酸之三 酸甘油酯付諸產業應用，以及首次闡明本發明之活性成分 用於長時間投予人類，以及分析事件相關腦電位，允許客 12 1358292 觀S平比逐知能力，以及證實含花生四稀酸之三酸甘油g旨且 有預防健康人認知能力的低下，改善或加強認知能力正常 . 反應之功效。 因此根據本發明’可使用三酸甘油酯，其包括三酸甘 5油酯其中部分或全部組成脂肪酸為花生四烯酸作為本發明 之活性成分（含花生四烯酸之三酸甘油酯用於食品，含花 生四細酸之二酸甘油醋較佳係呈油脂（三酸甘油醋），其中花 生四烯酸之比例至少為20 wt%(W/W)，較佳為30 wt%及更 佳為占三酸甘油酯總脂肪酸之至少40 wt%。因此根據本發 鲁 10明’可使用經由培養具有製造能力之微生物所得之任何含 花生四烯酸之油脂（三酸甘油酯）。 可製造含花生四烯酸之油脂（三酸甘油酯）之微生物例 如值得一提者有屬於被抱霉（Mortierella)、耳霉 (Conidiobolus)、腐霉(Pythium)、疫霉(Phytophthora)、青霉 15 (Penicillium)、枝抱霉（Cladosporium)、毛霉（Mucor)、鐮孢 (Fusarium)、曲霉（Aspergillus)、紅酵母（Rhodotorula)、蟲霉

A (Entomophthora)、刺抱囊霉（Echinosporangium)或水霉 (Saprolegnia)種屬之微生物。至於屬於被孢霉種屬、被孢霉 亞屬之微生物，值得一提者有長孢被孢霉（Mortierella 20 elongata)、微小被抱霉（Mortierella exigua)、喜濕被孢霉 (Mortierella hygrophila)、高山被抱霉（Mortierella alpina) 等。特別值得一提之菌株為長孢被孢霉IFO8570、微小被孢 霉IF08571、喜濕被孢霉IF05941、高山被孢霉IF08568、 ATCC16266、ATCC32221、ATCC42430、CBS219.35、 13 1358292 CBS224.37、CBS250.53、CBS343.66、CBS527.72、 CBS529.72、CBS608.70、（3β§754·68# 0 此等菌株可由各處獲得而非限於得自大阪發酵協會 (IFO)、美國種型培養收集會（ATCC)以及Centralbureau voor 5 Schimmelcultures(CBS)。此外可使用由本發明研究小組由 土壤中分離出之長孢被孢霉SAM0219(FERM P-8703) (FERMBP-1239)。 為了培養本發明使用之菌株，經由前培養所得孢子、 菌絲體或種子培養溶液細胞經接種至液體或固體介質主要 10

供培養。以液體介質為例，使用之碳來源可為任一種常用 碳來源例如葡萄糖、果糖、木糖、嚴糖、麥芽糖、溶解激 粉、糖蜜、甘油或甘露糖醇，但非僅限於此。至於氮來源 可使用有機氮來源包括天然氮來源如蛋白腺、酵母殿粉、 麥芽萃取物、肉萃取物、卡斯胺基酸(⑽min〇add)、玉米 15 穗#蛋白 '脫脂大豆 '棉籽粉等以及尿素及無機 氮來源例如硝酸鈉、硝酸銨或硫酸銨。若有所需也可使用 微量營養來源例如無機鹽如磷酸鹽、 硫酸鎂、硫酸鐵及硫

酸鋼或維生素。此等培養基成分並無特殊限制，只要其含 量濃度不會抑制微生物之生長即可 實際上，碳來源之添 20

Wt〇/〇(w/v)〇 子初添加量為0.1-H) Wt%(W/V)且較细a_6 wt%(w/v)，此 外若有所需可於培養期間添加氮來源。 含有至少45Wt%(W/W)花生四稀酸之油類或脂肪類(三 酸甘油㈣）可㈣控制培養基之碳料度而製備作為本 14 1358292 發明之主要成分。至培養之第2-4日產生生長期的細胞，培 養第2-4日後產生油/脂積聚期細胞。初碳源濃度為i_8 wt〇/。 且較佳1 - 4 wt % ’於細胞生長期的初期以及油/脂積聚期的初 期之連續添加碳源，直到總碳源連續添加2-20 wt%且較佳 5 5-15 Wt%。細胞生長期初期以及油脂積聚期初期連續添加 碳源係基於初氮源濃度，由培養的第7日，較佳培養的第6 曰或更佳培養的第4日開始碳源濃度為零’俾獲得包含至少 45 wt%花生四烯酸之油脂（三酸甘油酯）作為根據本發明之 活性成分。花生四烯酸產生性微生物之培養溫度依據微生 10物各有不同，但可為5-4CTC且較佳20-3(TC ;或細胞於20·3〇 艽培養生長，繼續於5_2〇。(：連續培養來製造不飽和脂肪 酸。此項溫度管理也可用來於多種製造的脂肪酸中提高多 兀不飽和脂肪酸的比例。培養基之PH可為4_10且較佳為 5-9，培養方法可為浸沒式培養、振搖式培養或固定式培 15養。培養通常進行2-30日，較佳5-20日及更佳5_15日。 除了控制培養基的碳源濃度之外，作為提高花生四烯 酸於含花生四烯酸之油脂（三酸甘油酯）之比例之手段，含花 生四烯酸之油脂可選擇性經水解而獲得富含花生四烯酸之 油脂。用於選擇性水解之脂肪酶對三酸甘油酯位置並無特 20異性，因水解活性係隨雙鍵數目成比例地下降，故多元不 飽和脂肪酸之脂肪酸酯鍵以外的脂肪酸酯鍵被水解。此 外，製造的PUFA三酸甘油酯間發生轉移酯化反應，結果獲 得含較高多元不飽和脂肪酸之三酸甘油酯（參考例如，花生 四烯酸的提升：使用圓柱假絲酵母(Candida cylindracea)脂 15 1358292 肪酶選擇性水解得自被孢霉的單細胞油，美國油化學會期 刊，72期，1323-1327頁，AOCS出版社（1998年)）。如此， 經由選擇性水解含花生四烯酸之油脂所得的富含花生四烯 酸之油脂（三酸甘油酯）可用作為根據本發明之活性成分。相 5對於本發明之含花生四烯酸之油脂（三酸甘油酯）之總脂肪 酸，以高比例花生四烯酸為佳，俾降低其它脂肪酸的影響， 但對高比例並無特殊限制，實際上花生四烯酸的絕對含量 可能對食品用途造成問題，但實際可使用含1〇 wt%或以上 花生四烯酸之油脂（三酸甘油酯）。 麵 10 作為根據本發明之包含花生四烯酸作為部分或全部組 成脂肪酸之二酸甘油酯，可使用包含鍵結於丨，3_位置之中鏈 脂肪酸以及鍵結於2-位置之花生四烯酸之三酸甘油酯。也 可使用包含至少5莫耳％，較佳至少1〇莫耳％，更佳至少2〇 莫耳％及最佳至少30莫耳％包含鍵結於丨，3_位置之中鏈脂肪 15酸以及鍵結於2 _位置之花生四烯酸之三酸甘油酯之油脂（三 酸甘油醋）。三酸甘油酯之鍵結於丨，3位置之中鏈脂肪酸可 選自含6至12個碳之脂肪酸。至於6至12個碳之脂肪酸例如 鲁 值得一提者有辛酸及癸酸，以1>3_辛醯基_2_花生四烯醯基— 甘油（後文稱做「8A8」）為佳。 2〇 以包含鍵結於丨，3-位置之中鏈脂肪酸以及鍵結於2-位 置之化生四烯酸之三酸甘油酯最適合用作為嬰兒或老人的 油脂（三酸甘油酯）。攝食油脂（三酸甘油酯）通常於進入小腸 時由胰脂肪酶水解，因胰脂肪峰為丨，3_位置特異性脂肪酶， 故二酸甘油酯的1,3-位置被裂解而產生兩個自由態脂肪酸 16 1358292 分子，同時產生一個2-單醯基甘油酯(MG)分子。因2-MG具 有極高膽酸溶解度且具高度吸收性，故2-位置脂肪酸通常 被考慮為吸收性較佳。此外2-MG當溶解於膽酸時具有界面 活性劑活性，如此用來提高自由態脂肪酸的吸收。自由態 5 脂肪酸以及2-MG隨後與膽固醇或磷脂質形成膽酸錯合物 膠束，由腸道上皮細胞吸收，結果導致三酸甘油酯的再合 成，最終釋放如淋巴呈乳糜微粒。但胰脂肪酶之脂肪酸性 質對飽和脂肪酸為最高，花生四烯酸的裂解較為無效。另 一問題為胰脂肪酶活性於嬰兒及老人較低，故理想油脂（三 10 酸甘油酯）為包含鍵結於1,3-位置之中鏈脂肪酸以及鍵結於 2-位置之花生四烯酸之三酸甘油酯。 包含鍵結於1，3-位置之中鏈脂肪酸以及鍵結於2-位置 之花生四烯酸之三酸甘油酯之特定製造方法是一種製造方 法，允許脂肪酶於含花生四烯酸之油脂（三酸甘油酯）以及中 15 鏈脂肪酸存在下，酯作用於三酸甘油酯的1，3-酯鍵結。 用作為起始物料之油脂（三酸甘油酯）係由含花生四烯 酸作為組成脂肪酸之三酸甘油酯組成，當花生四烯酸相對 於三酸甘油酯之總脂肪酸之比例高時，採用30-50°C，且較 佳40-50°C溫度，該溫度係高於尋常酶反應溫度20-30°C，以 20 防止反應產量因未反應的油脂（三酸甘油酯起始物料，以及 其中1,3-位置脂肪酸中只有一者為中鏈脂肪酸之三酸甘油 酉旨）而降低。 至於特異性作用於三酸甘油酯之1,3-位置酯鍵結之脂 肪酶，值得一提者有屬於根霉（Rhizopus)、根毛霉 17 1358292 (Rhizomucor)、曲霉等之微生物製造的脂肪酶，以及豬胰脂 肪酶。此種脂肪酶為市面上可得。例如包括德里摩根霉 (Rhizopus delemar)脂肪酶[塔里佩斯(Tanpase)，田邊試藥公 司產品]、米亥根毛霉（Rhizomucor miehei)脂肪酶[根霉 (Rib〇Zyme)IM諾維納帝克(Nov〇 N〇rdisk)公司出品]以及黑 曲霉（Aspergillus niger)脂肪酶[脂肪酶a，亞瑪諾(Amano)酶 公司產品]’對此等酶並無特殊限制，任一種丨，弘位置特異 型脂肪酶皆可使用。 10 15 20 脂肪酶之使用形式較佳為於制動撐體上的制動脂助 崎’俾當反應溫度為3G〇C或以上且較佳赋或以上以提高 反應效率時提供熱穩定性。使用高度多孔樹脂作為 制動樓體’值得—提者有具有至少約1GG埃之孔洞之離子交 、Μ月曰例如杜威馬拉松⑽則乂 ⑽) A(陶氏仆 學公司商品名）。 才對於制動樓體，〇5倍至2〇倍重量I〉位置特異型堆 如-“液懸子於其中，相對於懸浮液2至$倍量冷丙，(仿 80 C丙峨慢添加至其中，同時獅而形成沈激 制下脫水而製備制動酶。至於更簡單的方法，相對方 最小倍至G 4倍量之u_位置特異型脂肪酶溶解方 …丨後岭液混合制動撐體，同時攪拌，混合物方 ㈣水來製備軸酶。此種料結果導致約9〇%脂用 '體但絕對不具有轉移酯化活性，因此制動a 水L由於含1至1G wt%(w/v)水，且較佳含1至3 wt? 、（原料,由月曰及中鏈脂肪酸)前處理而最有效用方

18 1358292 生產。 添加至反應系統之水量依據崎類別而定，該水量極為 重要，原因在於無水存在下，將不會進行轉移醋化而過 量水將造成水解以及甘油酸酯產率降低（水解時將產生二 5酸甘油酯及一酸甘油酯）。但於此種情況下，藉前處理活化 之制動酶可用來減低添加至反應系統之水量的重要性’即 使系統不含水，仍然允許有效進行轉移酯化反應。此外酶 反應劑之類別可經選擇，俾允許刪除前處理。 如此經由使用耐熱制動酶、以及提高酶反應溫度，可 10有效製造包含鍵結於1,3-位置之中鏈脂肪酸以及鍵結於2_ 位置之花生四稀酸之三酸甘油酯，即使含花生四稀酸之油 脂（三酸甘油酯）對1，3-位置特異型脂肪酶之反應性低之情 況下，仍然不會造成反應效率的降低。 具有預防健康人認知能力的低下，改善或加強認知能 15 力正常反應之功效之食品或飲料之製法採用花生四烯酸及 /或含花生四烯酸作為組成脂肪酸之化合物，可單獨使用， 或混合大致不含或只含微量花生四烯酸之食品或飲料使 用。此處「微量」一詞表示花生四烯酸存在於食品或飲料， 但若食品組成物由個體攝食時，該含量無法達成根據本發 20 明之花生四烯酸的每日攝取量，容後詳述。 含花生四烯酸作為部分或全部組成脂肪酸之油脂（三 酸甘油酯）具有用作為食品、飲料、藥品及準藥品的原料及 添加劑的無限可能。此外，對其使用目的或用量並無特殊 限制。 19 1358292 嬰兒食品、孕婦食品或老人食品。 作為食品組成物範例，值得一提者有常用食品以及機 能性食品、營養補充物、早產嬰兒的改性乳、嬰兒改性乳、 至於含有油脂之食品例 如值得—提者為原先含有油脂之天然食品例如肉類、魚類 5以及核果類；製造過程令添加油脂的食品例如湯類；使用 油脂作為加熱媒介的食品例如圈餅·油脂食品如奶油·加 工期間添加油脂的加功品如餅乾；或最終加卫期間喷壤° 或塗覆油脂的食品如硬餅乾。含有油脂的食品也可呈機能

式艮品、藥品或準藥品形式，例如呈腸道營養劑、散劑、 粒劑、***鍵、口服溶液劑、懸浮液劑、乳液劑^ 等劑型。 削

除了本發明之活性成分外，本發明組成物可含有多種 食品及飲料藥品或準藥品常用之載劑及添加劑。特別較佳 含有抗氧化劑以防本發明之活性成分氧化。至於抗氧化劑 15值得一提者有天然抗氧化劑如生育酚類、黃酮衍生物、甜 菜内醋 ''趟酸、沒食子酸衍生物、兒茶素類、蜂斗菜酸、 棉紛、范4衍生物、芝麻盼、癒創木齡、癒創木酸、對香 丑酸H賴木酸、轉類1制、核麟基類、 類胡羅g素、木質素等；以及合成抗氧化劑例如抗壞血酸 2〇棕櫚酸酯、抗壞血酸硬脂酸酯、丁基羥基茴香醚(BHA)' 丁 基搜基曱苯(BHT)、一-第三丁基氫醌(TBHq)以及4_羥基甲 基·2,6-二-第三丁基酚(HMBP)。至於生育酚值得一提者有α_ 生月酚、泠·生育酚、γ_生育酚、生育酚、£_生育酚、ξ· 生育酚、η-生育酚以及生育酚酯（乙酸生育酚酯等）。至於類 20 1358292 胡蘿蔔素例如值得一提者有万-胡蘿蔔素、康塔黃素 (cantaxanthin)、阿斯塔黃素（astaxanthin)等。 除了本發明之活性成分外，用於本發明組成物作為撐 體，值得一提者有各種類型之載劑撐體、增量劑、稀釋劑、 5填充劑、分散劑、賦形劑、黏結劑溶劑（例如水、乙醇或植 物油類）、增溶助劑、緩衝劑、溶解加速劑、膠凝劑、懸浮 劑、麵粉、米粉、澱粉、玉米澱粉、多醣類、乳蛋白、膠 原、米油、卵磷脂等。至於添加劑例如值得一提者有維生 素、甜味劑、有機酸、著色劑、矯味劑、除濕劑、纖維、 10電解質、礦物質、營養素、抗氧化劑、保藏劑、芳香劑、 濕潤劑、天然食用萃取物、植物萃取物等，但非限制性。 花生四烯酸或含花生四烯酸作為組成脂肪酸之化合物 之主要醫藥成分為花生四烯酸。每日由食物攝取的花生四 烯酸攝取量據報告曰本關東地區為0.14克，曰本關西地區 15為〇.19-〇.2〇克(參考「脂質營養」第4期，曰本脂質營養編輯 委員會編輯，73-82頁（1995年）ISN 1343-4594 CODEN: SHEIFG)，因此必需攝取對應量或更大量的花生四烯酸。 如此根據本發明，成人(例如60公斤體重）之花生四晞酸或含 花生四烯酸作為組成脂肪酸之化合物之每日攝取量，以花 20 生四稀酸表示為0.001-20克，較佳0.01-10克，更佳0.05-5 克，及最佳0.1-2克。 當本發明之活性成分實際用於食品或飲料時，花生四 烯酸於食品的絕對含量也相當重要《但因食品或飲料的絕 對含量係根據食品或飲料的攝食量改變，故食品較佳含有 21 1358292 包括含化生四稀酸作為部分或全部組成脂肪酸之三酸甘油 酯之含量，以花生四烯酸表示至少為〇〇〇〇3 wt%，較佳至 >'0.003 wt。/。’及更佳至少〇 〇3 wt%。當包含鍵結於13_位 置之中鏈脂肪酸以及鍵結於2_位置之花生四稀酸之三酸甘 5油酯添加至食品或飲料時，包含鍵結於1，3-位置之中鏈脂肪 酸以及鍵結於2-位置之花生四烯酸之三酸甘油酯之含量至 少為0.001 wt%，較佳至少〇 〇1 wt%及更佳至少〇〗wt%。 當本發明組成物用作為藥品時，可藉常用藥物製法製 造’例如日本藥典所述方法或基於該等方法之方法。 鲁 10 當本發明組成物用作為藥品時，組成物之活性成分含 量並無特殊限制，只要可達成本發明之目的且混合比例可 視為適當即可。 當本發明組成物用作為藥品時，較佳係以單位劑型投 藥，以口服投藥為特佳。本發明組成物之劑量因病人年齡、 15體重及症狀以及投藥次數改變，例如根據本發明之花生四 烯酸及/或含花生四烯酸作為組成脂肪酸之化合物通常以 花生四烯酸表示，係以約0.001_2〇克，較佳約〇 〇11〇克更 鲁 佳約0.05-5克及最佳約〇.ι·2克之每日劑量投予成人（約的公 斤體重），平分為每曰1至3次。 20 腦部磷脂質膜的主要脂肪酸為花生四烯酸以及廿二碳 六烯酸，因此考慮維持平衡，本發明組成物較佳為花生四 烯酸與廿二碳六烯酸的組合。概略言之，花生四烯酸(n_6 不飽和脂肪酸）及廿二碳六烯酸(n-3不飽和脂肪酸）藉相同 酶而分別由亞油酸及α-亞麻酸生物合成。但當花生四烯酸 22 單獨投藥時，廿二碳六烯酸的生物合成受到抑制。相反地， 备廿一碳六稀酸單獨投藥時，花生四稀酸的生物合成受到 抑制。為了防止此種不平衡，較佳係組合投予花生四烯酸 及廿二碳六烯酸。此外，因廿碳五烯酸於腦磷脂質膜之含 1比例極低，故組合較佳實質不含廿碳五稀酸。因此較佳 不含廿碳五烯酸或只含1%。組成物更佳實質未含廿碳五烯 酸與花生四烯酸及廿二碳六烯酸。花生四烯酸與廿二碳六 稀酸的級合也較佳具有花生四稀酸/廿二碳六稀酸比（重量 比）係於0.M5且較佳0.25-10之範圍。最佳為食品或飲料含 有廿二碳六稀酸不大於花生四烯酸之1/5(重量比）。 本發明食品組成物用於食品或飲料、健康食品、機能 食品、特殊醫療照護食品、嬰兒食品、老人食品等包括使 用包裝容器出售及/或食品組成物之推銷工具（例如小冊子 等）其中陳述或指示組成物及/或組成物内之成分具有預防 低下、改善或加強認知能力功效；換言之，本發明組成物 具有預防健康人覺察程度的低下，改善或加強覺察程度正 常反應之功效以及具有預防健康人認知能力的低下，改善 或加強對事件的分辨能力正常反應之功效（事件包括聽覺 刺激視覺刺激、味覺刺激、嗅覺刺激、身體感覺刺激”以 及具有正常功能例如注意力、記憶力、覺察能力、語言、 計算等之預防低下、改善或加強功效；以及具有維持或提 升注意力集中、維持注意力、讓頭腦清明、或刺激心智、 重獲青春等功效。 實施例 1358292 現在將透過下列實施例說明本發明之進一步細節，但 須了解此等實施例絕非囿限本發明。 實施例1 含花生四稀酸作為組成脂肪酸之三酸甘油酯之製造方法 5 高山被孢霉(Mortierella alpina)用作為花生四烯酸生產 菌株。於10千升培養容器内準備一份6千升培養基，培養基 含有1.8%葡萄糖’ 3.1%脫脂大豆粉，01%大豆油，〇.3〇/〇 ΚΗ2Ρ04、0.1% Na2S04、0.05% CaCl2.H20 及 0.05%

MgCl2‘6H2〇 ’初pH調整至pH 6.0 »於播種3〇升培養液後， 10於26 C溫度，360立方米/小時通風以及2〇0千帕内部壓力條 件下進行浸沒式培養8日。調整旋轉速度來維持溶氧濃度於 10-15 ppm。此外，培養基之葡萄糖濃度至第4曰為止藉饋 料而調整至1-2.5%之範圍，隨後調整至〇5_1%之範圍（此處 百分比係以重量(W/V)為基準）。完成培養後，接著過滤及 15乾燥，收集含有含花生四烯酸作為組成脂肪酸之三酸甘油 醋之細胞，藉己院萃取而由所得細胞獲得油脂，使用油脂 接受純化步驟(除膠、去酸、水蒸氣蒸餾、脫色），獲得15〇 千克含花生讀酸之三酸甘油0旨（花生四烯酸結合於三酸 甘油醋的任何位置）。所得油腊（三酸甘油酷）經過甲基醋 20化，所得脂肪酸甲醋藉氣相層析術分析，顯示花生四稀酸 占總脂肪酸之40.84%比例。棕櫚酸、硬脂酸、油酸、亞油 酸、γ-亞麻酸及二漠·γ·亞麻酸含量分別為u 63%、7 45%、 7幾、9.14%、2.23%及3.27%。含花生四稀酸的油脂（三酸 甘油醋）經過乙基醋化，藉尋常高效液相層析術而由含4〇% 24 1358292 花生四烯酸乙酯之脂肪酸乙酯分離及純化99%花生四烯醆 乙酯。 實施例2 含至少5%包含鍵結於1，3·位置之中鏈脂肪酸以及鍵結 5於2_位置之花生四烯酸之三酸甘油酯（8A8)之三酸甘油酯之 製造。 100%離子交換樹脂撐體(杜威馬拉松WBA:陶氏化學 公司）懸浮於8 0毫升12.5 %德里摩根霉脂肪酶水溶液（塔里 佩斯粉末，田邊試藥公司製造)後，懸浮液於減壓下乾燥獲 隹 10 得制動脂肪酶》 其.次，80克貫％例1所得含4〇 wt%花生四稀酸之三酸甘 油酯（TGA40S)，160克辛酸，12克前述制動脂肪酶及4 8毫 升水於30 C反應48小時同時授拌（丨3〇 rpm)。反應完成後， 去除反應混合物，獲得經活化之制動脂肪酶。 15 一份10克制動酶(德里摩根霉脂肪酶，撐體：杜威馬拉 松WBA)填充於有夹套的玻璃管柱（1 8 X 12 5厘米，31 8毫 升容積），含實施例1所得TGA40S以及辛酸比例1 : 2之混合 鲁 油以固定流速(4毫升/小時)流過管柱，進行連續反應來獲得 400克反應後之油脂。管柱溫度為4〇-41°C。未反應之辛酸 20及自由態脂肪酸藉分子蒸餾而由經反應之油脂中去除，使 用油脂接受純化步驟(去膠、脫酸、水蒸氣蒸餾、脫色）來獲 得含8A8之油脂（三酸甘油酯）。所得含8a8油脂（三酸甘油酯） 之8A8含量藉氣相層析術以及高效液相層析術測得為 31.6%(8P8、808、8L8、8G8及8D8之比例分別為0.6、7·9、 25 1358292 15.1、5.2及4.8%。結合於三酸甘油酯2-位置的脂肪酸P、〇、 L、G及D分別表示棕櫊酸、油酸、亞油酸、Γ亞麻酸及二 漠-γ-亞麻酸，8Ρ8為1,3-辛醢基-2-標摘醒基-甘油、808為ι，3-辛酿基-2-亞油酿基-甘油、8L8為1，3-辛酿基-2-亞麻酿基-甘 5 油、8G8為1,3-辛醯基-2个亞麻醯基-甘油、以及8D8為l，3-辛醯基-2-二溴-γ-亞麻醯基-甘油）。根據已經確立的方案藉 高效液相層析術分離及純化，由所得含8Α8油脂（三酸甘油 酯）獲得96莫耳％ 8Α8。 實施例3 10 試驗膠囊劑之製造 水添加至1〇〇份重量比凝膠及35份重量比食品級甘 油，於50-60°C溶解來製備黏度2000 cp的明膠包衣。其次， 〇. 0 5 wt%維生素E油混合實施例1所得含花生四烯酸之油脂 (三酸甘油酯）來準備填充内容物1。另外’ 〇.〇5 wt°/〇維生素e 15 油混合實施例2所得含32莫耳％ 8A8之油脂（三酸甘油酯）， 來製備填充内容物2 °填充内容物1用來藉常用方法成形於 乾燥膠囊劑’而製造每顆膠囊含有2〇〇毫克填充劑的軟膠囊 (含花生四烯酸食用油膠囊）；而填充内容物2也用來藉常用 方法成形及乾燥膠囊劑’來製造每顆膠囊含2〇〇毫克填充劑 20 之軟膠囊(含8A8食用油膠囊）。含撖欖油作為填充内容物的 軟膠囊也製造作為安慰劑膠囊進行人類試驗。 實施例4 含花生四烯酸食用油膠囊攝食試驗來決定對健康人認知反 應的影響 26 1358292 事件相關腦電位(ERP)係根據日本臨床神經生理學會 激發電位檢查標準委員會建立的激發電位測量指南，利用 聽覺（或聽覺分辨）測定。特別，聽覺古怪範例用於ERp測 1 ’試驗個體的兩耳以兩種不同純聲調，頻率分別為1〇〇〇 5 赫兹及2000赫兹以1 : 4比例以及隨機順序經由耳機刺激雙 耳’指示個體於聽到2000赫茲聲調時按下按鈕，且計算聽 到的次數。聲調強度為90分貝，持續時間為1〇〇毫秒，刺激 中間間隔隨機介於1000-3000毫秒。實際試驗的刺激數目約 為每個試驗200次，試驗持續時間約1〇分鐘。共進行兩次試 馨 10驗，測定事件相關腦電位。記錄腦電圖（eeGs)，使用銀·氣 化銀電極，其電阻不大於5千歐姆，放置於順著頭皮中線的. 二點（根據國際10-20位移點，Fz、Cz及Pz),參考電極置於 兩耳垂。 開始接收到低頻聽覺刺激（本實驗為2 〇 〇 〇赫茲聲調）的 15 250-600毫秒間之最大正電位，識別作為特性成分，p_， P300IW著選擇注意力或認知反應的評比而改變；由刺激開 始的時間記錄為延遲(刺激傳輸速度）；電位距離基準線 · 的高度記錄作為P300振幅（資訊處理資源量）。 本發明之人體試驗係遵照赫爾辛基宣言的精神而進 20 行。 經過說明參與試驗内容’ 12位同意接受試驗的健康人 (未服藥’血液试驗結果沒有不正常，脑電腦斷層掃描沒 有梗塞)分成A及B兩組(A:n=7，B:n=5)。於一個月時間，a 組投予三顆實施例3準備之含花生四稀酸使用油膠囊劑⑽ 27 1358292 宅克/膝囊化生四稀酸）’每曰花生四烯酸攝取量為24〇毫 克；B組投予3顆安慰劑膠囊。服藥勝囊劑的前後測量事# . 相關腦電位，分析P300延遲及P3〇〇振幅。然後八及8兩組的 參與者不服用膠囊經歷維持一個月的清除期。經過清除期 5後，A組投予安慰劑膠囊，而B組投予含花生四烯酸之使用 ， 油膠囊維持一個月，於服用膠囊前後，以相同方式測量事 件相關腦電位(雙盲式交又試驗）。 事件相關腦電位測量之同時採血，藉佛契（F〇lch)方法 由各個參與者的丘清萃取總脂質。脂質藉薄層層析術分 鲁 10選，收集磷脂質部分，經由以乙醇共沸蒸餾去除水，當以 10%鹽酸醇轉成脂肪酸曱酯時，藉氣相層析術進行分 析’來測定血清碌脂質的花生四稀酸含量。 第1圖顯示於膠囊服用前後血清鱗脂質的花生四烯酸 含量變化。服用含花生四烯酸之食用油膠囊劑的個體之血 15清磷脂質之花生四烯酸含量，於服用含花生四烯酸之食用 /由勝囊劑後顯者增南，而服用安慰劑膠囊的個體血清碌脂 質之花生四烯酸含量於服用安慰劑膠囊前後的含量不變。 · 第2圖及第3圖顯示服用膠囊前後之P3〇〇延遲及p3〇〇振 幅變化。服用含花生四烯酸之食用油之膠囊比服用安慰劑 20 膠囊，P300延遲顯著縮短12·3毫秒，P300振幅顯著增加丨9 · 微伏特。已知Ρ300延遲正常縮短1_8毫秒/年，Ρ3〇〇振幅正常 · 降低0.2微伏特/年(Goodin DS等人，1978)，故本試驗結果 指示個體的認知反應平均恢復年輕程度，基於P3〇〇延遲為 6.8年，以及基於P300振幅為9.5年。 28 1358292 其次，使用測量十二位個體四次獲得的48個資料（第4 圖），藉第一次幂曲線，基於最小平方方法’測定P300(P300 延遲及P300振幅）與血清花生四烯酸濃度(磷脂質）間之交互 關係。對P300延遲，花生四烯酸濃度間發現顯著交互關係 5 (交互關係係數R=-0.27)，由花生四烯酸濃度增高所得延遲 < 縮短。對P300振幅，花生四烯酸濃度間也發現顯著交互關 係（交互關係係數R=-0.49)，花生四烯酸濃度增高獲得較大 P300振幅。如此構成藉服用含花生四烯酸之食用油首次驗 證認知反應的改善，且首次證實花生四稀酸為該效果的起 隹 10 因。 實施例5 含8A8之食用油膠囊服用試驗來測定對健康個體的認知反 應的效果 以實施例4之相同方式，經過說明參與試驗内容，16 15 位同意接受試驗的健康人(未服藥，血液試驗結果沒有不正 常’藉顱電腦斷層掃描沒有梗塞）分成A及B兩組（每組 n=8)。一個月時間，A組投予3顆實施例3製備之含8A8食用 _ 油膠囊（72毫克/膠囊花生四烯酸），B組投予3顆安慰劑膠 囊；於服用膠囊前後測定事件相關腦電位以及記錄延遲及 20 振幅（雙盲試驗）時，發現因服用含8A8之食用油膠囊，p3〇〇 延遲顯著縮短16.3毫秒，以及P300振幅顯著增加24微伏 特。此等結果指示個體的認知反應基於P3〇〇延遲平均年# 化9.1年’以及基於p3〇0振幅平均年輕化12〇年。 實施例6 29 1358292 含有以花生四烯酸作為組成脂肪酸之油脂（三酸甘油酯）之 勝囊劑之製備 水添加至1 〇〇份重量比凝膠及35份重量比食品級甘 油，於50-60°C溶解來製備黏度2000 cp的明膠包衣。其次5〇 5 wt %實施例1所得含花生四烯酸油脂（三酸甘油酯）混合5 〇 wt%魚油（鮪魚油包含廿碳五烯酸及廿二碳六烯酸占總脂肪 酸的比例分別為5.1%及26.5%)，組合0.05 wt%維生素E油來 製備填充内容物3。另外，80 wt%含花生四烯酸油脂（三酸 甘油酯）混合20 wt%魚油，組合〇.〇5 wt%維生素E油來製倩 10 填充内容物4。實施例1所得99%花生四烯酸乙酯也組合〇.〇5 wt%維生素E油來獲得填充内容物5。填充内容物3-5用來藉 一般方法成形及乾燥膠囊，而製備每顆膠囊含200毫克填充 物的軟膠囊劑。 實施例7 15 用於油輸注溶液劑 組合400克實施例2所得含96% 8A8之油脂（三酸甘油 酯）’ 48克純卵黃卵磷脂’ 20克油酸，100克甘油及40毫升 0.1 N苛性蘇打，混合物以均化器分散後，添加注射用蒸餾 水至4升》使用高壓喷霧型乳化器乳化而製備脂質乳液。脂 20質乳液以每份2〇〇毫升分配於塑膠袋内，於i2i°c經歷20分 鐘接受高壓水蒸氣滅菌處理而製備油輸注溶液劑。 實施例8 用於果汁 —份2克0 -環糊精添加至20毫升20%乙醇水溶液，然後 30 1358292 100毫克實施例1所得含花生四烯酸之三酸甘油酯（包含 0.05%維生素E)添加至其中，同時以攪拌器攪拌，混合物於 50°C培養2小時。冷卻至室溫（約1小時)後，於連續攪拌下於 4°C持續培養10小時。藉離心分離回收生成的沈澱，以正己 5 烷洗滌後，經凍乾獲得1.8克含有含花生四烯酸之三酸甘油 酯之環糊精籠合化合物。此粉末1克均勻混合10升果汁來製 備含有含花生四烯酸之三酸甘油酯的果汁。 I；圖式簡單說明3 第1圖為柱狀圖，顯示於服用含花生四烯酸之食用油膠 10 囊劑以及含橄欖油之膠囊劑（安慰劑膠囊）之前與之後，血清 磷脂質中之花生四烯酸濃度之變化。 第2圖為線圖，顯示於服用含花生四烯酸之食用油膠囊 . 劑以及含橄欖油之膠囊劑（安慰劑膠囊）之前與之後，血清磷 脂質中之P300延遲之變化。 15 第3圖為線圖，顯示於服用含花生四烯酸之食用油膠囊 劑以及含橄欖油之膠囊劑（安慰劑膠囊）之前與之後，血清磷 脂質中之P300振幅之變化。 第4圖為一對點狀圖，顯示P300(P300延遲及P300振幅) 與血清磷脂質之花生四烯酸濃度間之交互關係。 20 【圖式之主要元件代表符號表】 (無） 31

Claims (1)

1358292 ^092126198號專利申請案申請專利範圍1 认山f. ! 拾、申請專利範圍：

一種具有預防健康人認知能力正常反應的低下，改善或 加強認知能力正常反應之功效之組成物，其具有預防低 下、改善或加強健康人作為認知能力之對選自於由以下 5 事件所組成的組群之處理速度或反應速度之正常反應 的功效：聽覺刺激、視覺刺激、.嗅覺刺激、味覺刺激及 身體感覺刺激，該組成物含有花生四烯酸及/或含花生 四烯酸作為組成脂肪酸之化合物，其含量為以花生四烯 酸表示，成人每曰攝食量為0.1-2克。 10 2·如申請專利範圍第1項之組成物，其中該含有花生四烯 酸作為組成脂肪酸之化合物為花生四烯酸醇酯或一種 含有花生四烯酸作為部分或全部組成脂肪酸之三酸甘 油酯、磷脂質或糖脂質。 3. 如申請專利範圍第2項之組成物，其中該含有花生四烯 15 酸作為部分或全部組成脂肪酸之三酸甘油酯為一種具 有中鏈脂肪酸鍵結於1，3 -位置以及花生四烯酸鍵結於2 -位置之三酸甘油醋。 4. 如申請專利範圍第3項之組成物，其中該中鏈脂肪酸係 選自含6至12個碳原子之脂肪酸。 20 5.如申請專利範圍第4項之組成物，其中該中鏈脂肪酸係 選自含8個碳原子之脂肪酸。 6.—種具有預防健康人認知能力玉$反應的低下，改善或 加強認知能力正常反應之功效之組成物，其具有預防低 下、改善或加強健康人作為認知能力之對選自於由以下 32 第092126198號專利申請案申請專利範圍修正本 100.9.22 事件所組成的組群之處理速度或反應速度之正常反應 的功效··聽覺刺激、視覺刺激、嗅覺刺激、味覺刺激及 身體感覺刺激，該組成物含有三酸甘油酯其包括花生四 烯酸作為部分或全部組成脂肪酸，該三酸甘油酯之含量 為以花生四稀酸表示，成人每日攝食量為0.1-2克。 7. 如申請專利範圍第6項之組成物，其特徵在於該三酸甘 油酯（其包括花生四烯酸作為部分或全部組成脂肪酸）之 花生四烯酸含量係占該三酸甘油酯之總脂肪酸至少10 wt%。 8. 如申請專利範圍第6項之組成物，其中該三酸甘油酯其 包括花生四烯酸作為部分或全部組成脂肪酸係萃取自 属於被孢霉(Mortierella)屬之微生物。 9. 如申請專利範圍第7項之組成物，其中該三酸甘油酯其 包括花生四烯酸作為部分或全部組成脂肪酸係萃取自 屬於被抱霉(Mortierella)屬之微生物。 10. 如申請專利範圍第6項之組成物，其中該三酸甘油酯其 包括花生四烯酸作為部分或全部組成脂肪酸為不含廿 碳五烯酸或含不超過1%廿碳五烯酸之三酸甘油酯。 11. 如申請專利範圍第7項之組成物，其中該彡酸甘油酯其 包括花生四烯酸作為部分或全部組成脂肪酸為不含廿 碳五烯酸或含不超過1%廿碳五稀酸之三酸甘油酯。 12. 如申請專利範圍第8項之組成物，其中該三酸甘油§旨其 包括花生四烯酸作為部分或全部組成脂肪酸為不含廿 碳五稀酸或含不超過1%廿碳五稀酸之三酸甘油酯。 ^358292 第092126198號專利申請案申請專利範圍修正本 100.9.22 13. 如申請專利範圍第9項之組成物，其中該三酸甘油酯其 包括花生四稀酸作為部分或全部組成脂肪酸為不含廿 碳五烯酸或含不超過1%廿碳五烯酸之三酸甘油酯。 14. 一種具有預防健康人認知能力正常反應的低下，改善或 加強認知能力正常反應之功效之組成物’其具有預防低 下、改善或加強健康人作為認知能力之對選自於由以下 事件所組成的組群之處理速度或反應速度之正常反應 的功效：聽覺刺激、視覺刺激、嗅覺刺激、味覺刺激及 身體感覺刺激，該組成物含有三酸甘油酯其包含至少5 莫耳％具有中鏈脂肪酸鍵結於丨,3_位置、以及花生四烯 酸鍵結於2位置之三酸甘油醋，且該組成物含有三酸甘 油酯其含量為以花生四烯酸表示，成人每曰攝食量為 〇‘1_2 克。 15. 如申请專利範圍第14項之組成物，其中該中鏈脂肪酸係 選自含6至12個碳原子之脂肪酸。 16. 如申請專利範圍第15項之組成物，其中該中鏈脂肪酸係 選自含8個碳原子之脂肪酸。 17. 如申請專利範圍第1至16項中任一項之組成物，具有縮 短作為認知能力的反應指標之事件相關腦電位(p 3 〇 〇)之 P300延遲之功效。 18. 如申請專利範圍第1至16項中任一項之組成物，具有擴 大作為認知能力的反應指標之事件相關腦電位(P 3 〇 〇)之 P300振幅功效作為認知能力的反應指標。 19. 如申請專利範圍第1至16項中任一項之組成物，其中該 34 第092126198號專利申請案申請專利範圍修正本 100.9.22 組成物為食品組成物或藥品組成物。 20. —種具有預防健康人認知能力正常反應的低下，改善或 加強認知能力正常反應之功效之食品組成物，其具有預 防低下、改善或加強健康人作為認知能力之對選自於由 以下事件所組成的組群之處理速度或反應速度之正常 反應的功效：聽覺刺激、視覺刺激、嗅覺刺激、味覺刺 激及身體感覺刺激，該組成物含有花生四烯酸及/或含 花生四稀酸作為組成脂肪酸之化合物，其含量為以花生 四烯酸表示，成人每曰攝食量為0.1-2克。 21. 如申請專利範圍第20項之食品組成物，其中該含有花生 四烯酸作為組成脂肪酸之化合物為花生四烯酸醇酯或 一種含有花生四烯酸作為部分或全部組成脂肪酸之三 酸甘油酯、磷脂質或糖脂質。 22·如申請專利範圍第21項之食品組成物，其中該含有花生 四烯酸作為部分或全部組成脂肪酸之三酸甘油酯為— 種具有中鏈脂肪酸鍵結於1，3-位置以及花生四烯酸鍵結 於2-位置之三酸甘油醋。 23. 如申請專利範圍第22項之食品組成物，其中該中鏈脂肪 酸係選自含6至12個碳原子之脂肪酸。 24. 如申請專利範圍第23項之食品組成物，其中該中鏈脂肪 酸係選自含8個碳原子之脂肪酸。 25♦一種食品組成物，其具有預防低下、改善或加強健康人 作為認知能力之對選自於由以下事件所組成的組群之 處理速度或反應速度之正常反應的功效‘·聽覺刺激、視 1358292 第092126198號專利申請案申請專利範圍修正本 100.9.22 覺刺激、嗅覺刺激、味覺刺激及身體感覺刺激，該組成 物之特徵在於該組成物含有至少0.001 wt%具中鏈脂肪 酸鍵結於1，3-位置以及花生四稀酸鍵結於2-位置之三酸 甘油酯，且該三酸甘油酯之含量為以花生四烯酸表示， 5 成人每日攝食量為0.1-2克。。 26. 如申請專利範圍第25項之食品組成物，其中該中鏈脂肪 酸係選自含6至12個碳原子之脂肪酸。 27. 如申請專利範圍第26項之食品組成物，其中該中鏈脂肪 酸係選自含8個碳原子之脂肪酸。 10 28.如申請專利範圍第20至27項中任一項之組成物，其中該 食品組成物為一種機能性食品、營養補充食品、特殊醫 療照護食品或老人食品。 29. 如申請專利範圍第1至16及20至27項中任一項之組成 物，進一步包含廿二碳六烯酸及/或含廿二碳六稀酸作 15 為組成脂肪酸之化合物。 30. 如申請專利範圍第29項之組成物，其中該含廿二碳六烯 酸作為組成脂肪酸之化合物為一種廿二碳六烯酸醇酯 或一種包含廿二碳六烯酸作為部分或全部組成脂肪酸 之三酸甘油酯、磷脂質或糖脂質。 20 31.如申請專利範圍第29項之組成物，其特徵在於於花生四 烯酸與廿二碳六烯酸之組合中，該花生四烯酸/廿二碳 六烯酸之比（重量比）係於0.1-15之範圍。 32.如申請專利範圍第30項之組成物，其特徵在於於花生四 烯酸與廿二碳六烯酸之組合中，該花生四烯酸/廿二碳 36 1358292 5

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20 第092126198號專利申請案申請專利範圍修正本 1〇〇.9.22 六烯酸之比（重量比)係於0.M5之範圍。 33_如申請專利範圍第1至16及2〇至27項中任一項之組成 物’其特徵在於廿二碳六稀酸也以不超過組成物之花生 四烯酸之1/5的含量存在於該組成物。 34. —種製造一種食品組成物之方法，該組成物具有預防健 康人認知能力之正常反應低下、改善或加強健康人認知 能力之正常反應之功效，且該組成物具有預防低下、改 善或加強健康人作為認知能力之對選自於由以下事件 所組成的組群之處理速度或反應速度之正常反應的功 效：聽覺刺激、視覺刺激、嗅覺刺激、味覺刺激及身體 感覺刺激，該組成物之特徵在於將花生四烯酸及/或含 花生四烯酸作為組成脂肪酸之化合物單獨使用，或組合 大致不含或只含微量花生四烯酸之食品材料使用，且該 花生四烯酸及/或含花生四烯酸作為組成脂肪酸之化合 物之含量為以花生四烯酸表示，成人每日攝食量為Oj-2 克。 35. —種具有預防健康人認知能力正常反應的低下，改善或 加強認知能力正常反應之功效之組成物，且該組成物具 有預防低下、改善或加強健康人作為認知能力之對選自 於由以下事件所組成的組群之處理速度或反應速度之 正常反應的功效··聽覺刺激、視覺刺激、嗅覺刺激、味 覺刺激及身體感覺刺激，該組成物之特徵在於該組成物 為一種含有花生四烯酸及/或含花生四烯酸作為組成脂 肪酸之化合物之組成物，該組成物係使用該組成物之包 37 1358292 第092126198號專利申請案申請專利範圍修正本 100.9.22 裝容器及/或銷售工具上市，其指示該組成物及/或組成 物成分具有預防健康人認知能力正常反應的低下，改善 或加強認知能力正常反應之功效，且該花生四烯酸及/ 或含花生四烯酸作為組成脂肪酸之化合物之含量為以 5 花生四烯酸表示，成人每曰攝食量為0.1-2克。

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