TW490462B - 2-Phenyl-4-quinazolinones compounds, 2-phenyl-4-alkoxy-quinazoline compounds and their pharmaceutical compositions - Google Patents

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經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 490462 A7 __ B7 五、發明說明（） 發明背景 微小管是維持細胞型態的重要骨架之一，同時在細胞 ***及染色質的傳遞上也扮演著重要角色，因此，微小管 成爲開發抗癌藥物的重要靶的。目前臨床上使用的有絲分 裂抑制劑包括長舂花生物鹼\上標數字代表列於說明書末 尾的參考文獻）及類紫杉醇2，分別抑制微小管聚合及促進 微小管聚合。秋水仙鹼3,4也是一著名的有絲***抑制劑’ 然而毒性太強不適用於抗癌之臨床用途，臨床上只用作痛 風之治療。 近年來發明人所屬的硏究室設計、合成了如下所示的 三大類的雜環酮：2-苯基-4-口查啉酮（PQ)4·7、2,3-雙氫-2-苯基-4-口2唑啉酮（DHPQ) 8及2-苯基-1，8-二嘹啶-4-酮（PN) 8-1Q，作爲新型的有絲***抑制劑並建立了初步的結構與活 性關係。

綜觀這三類的雜環酮，在結構上都持有A、C兩個芳香 環，且在兩環之間係以***另一8環或碳氫鍵橋相連接， 但仍有少許結構差異存在其間。 在PQ類化合物中，若在A環的6 —位及C環的3’-位上有未 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公爱） ------------------<—tr--------- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 490462 A7 B7 五、發明說明（ 鍵結電子對的官能基存在，如：-〇CH3、-0CH20-、-NRR’、 Cl、FiPQr,)等，具有優越之細胞致毒活性，這兩個官能基 之間的距離約爲10〜ΠΑ，且可能是作爲質子受體而與微管 鍵結，因此，這兩個官能基在PQ類化合物的活性上具有顯 著之貢獻。在DHPQ類化合物中8，6-位及3’-位取代基 (DHPQO同樣也扮演著決定性的角色。然而，在PN類化合 物中，當3’-位取代基固定（如：〇CH3)，6-位取代基對其 活性的重要性似乎就不那麼明顯了，例如：Η (PN-1)、CH3 (PN-2)及 Cl (PN-3)。PQ1 至 PQ6，ΟΗΡ(^&ΡΝ-1 至 PN-3等化 合物被示於下：

Ry Ο

經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

PQ 1 R6 = OCH3, R3 = 〇CH3 PQ2 R6,R7=OCH3，R3，= 〇CH3 PQ 3 R6 = F，R3. = OCH3 PQ4 R6 = Cl,R3，= 〇CH3 PQ 5 R6，R7= 0CH20，Ry = NRR· PQ 6 ^ , R7= 0CH20 , R3 = F PN PN1 匕=H PN2 匕=013 PN 3 匕=Cl ------------^ >. —I— i--------. (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 490462 A7 __ B7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 五、發明說明（

0CH3 2,3-雙氫-2-苯基-4-战唑啉酮（DHPQZ)的抗癌活性在 1970年左右已有報導1μ2。最近又以NCI之人類腫瘤細胞重 新評估，發現其作用機轉類似秋水仙鹼，也是有效的微管 聚合抑制劑13。同時，2-苯乙烯唑啉-4-酮（SQZ) m5也被 證實是有效的微管聚合抑制劑。DHPQZ及SQZ化合物的結 構被示於下：

R3,

SQZ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -裝 丨 I I 訂 ί- I------ ·#_

DHPQZ 6 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 490462 A7 B7 五、發明說明（） 發明要旨 本發明合成了一系列具下式⑴至（IV)的化合物： (I) (II) (III)

------------•裝------1 丨訂·--------- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 (IV)

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經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 式中： R2，，R3，，R4,及 R5,獨立地爲 H，（CH2)nCH3，OH， 〇(CH2)nCH3, X，或 NR8R9，其中 n = 〇 〜4 的整數，x爲 ρ，ci， 或Br*，及118及119獨立地爲η或（CH2)nCH3，其中n =〇〜4的整 數； R 爲（CH2)nCHj(CH2)nCOO(CH2)nCH3,其中n的定義同 上；及 R6及 R7 獨立地爲 H，（CH2)nCH3, OH，0(CH2)nCH3, X， NR8R9，n；^]，:或心及心一起爲 _OCH2〇·，其 中η，X，118及119的定義同上。 本發明所合成的式（I)至（IV)化合物中的部分化合物在 經對抗人類腫瘤細胞之致毒活性及做爲微管聚合抑制劑的 評估後，發現具有相當優異的活性，因此有很高的潛能被 開發作爲用於治療癌症的醫藥組合物。 本發明所合成的式（I)至（IV)化合物中的部分化合物也 被發現具有明顯之血小板凝集抑制作用。 發明之詳細說明 本發明的一方案合成了一系列如下式（I)的 6,7,2，，3，，4，，5，-取代2-苯基-4-口$唑啉酮類衍生物： 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） ^------^--------- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 490462 A7 B7 五、發明說明（

⑴ 其中R2，，R3，，R4’，、RjR7的定義同上。 本發明的另〜方案合成了-系列如下式（II)的 6’7’2 ’3 ’4，5 -取代2,3_雙氫_2·苯基-4· 口查唑啉酮類衍生 物··

經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 (Π) 其中R2’，R3，，r4，，R5，，心及心的定義同上。 本發明的另〜方案合成了 一系列如下式（III)的 3,6,7,2’，3’，4’，5、取代2-苯基-4-口±唑啉酮類衍生物及 6,7,2，3，4，5 ·取代-2_苯基-4_院氧基坐啉類衍生物 (IV): -9 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） ------------•裝------1 訂--------- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 490462 A7 B7 五、發明說明（）

(III) (IV) 其中 R2，，R3，，R4，，R5，，R3, R，R6 及 R7 的定義同上。 本發明的又一方案提供一種用於治療癌症的醫藥組合 物，包含有效治療量的上述之式（1)或式（π)化合物或其藥 學上可接受的鹽作爲活性成份，和與之混合的用於該活性 成份的藥學上可接受的載體或稀釋劑。 - 本發明的又一方案提供一種用於抑制血小板凝集的醫 藥組合物，包含有效治療量的上述之式（111)或式（IV)化合 物或其藥學上可接受的鹽作爲活性成份，和與之混合的用 於該活性成份的藥學上可接受的載體或稀釋劑。 ------------裝丨 I--I J--訂 t-------- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐）

、發明說明（ 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 依照流程1 _4的合成方法，合成了J，5-取代:2ϋ苯甲 醯胺（3, 10-11，16, 25-29)。如流程1所示，將5-氟胺基苯 甲酸（1)依次與氯化亞磺醯基及氨反應，即可得到5_·_2-胺基苯甲醯胺（3)。在流程2中，以4,5-取代-2-硝基苯甲酸 (4, 5)爲起始原料，將-COOH官能基仿照流程1之合成方法 先變成-CONH2，接著再將2-Ν02還原爲-Νη2，即可得到心 甲氧基及4,5-二甲氧基-2-胺基苯甲醯胺（10,11)。4,5-亞甲 二氧二基-2-胺基苯甲醯胺（16)則是以4,5-亞甲二氧二基-2-硝基苯甲醛（12)爲起始原料，先將-CHO取代基氧化爲-COOH (13)，再以相同的方法合成之（流程3)。在流程4中， 將5 -氯-2 -硝基苯甲酸（17)的-C Ο Ο Η官能基仿照流程1之合 成方法先變成-CONH2 (19)，接著以各種不同的二級胺在 5-C1取代基上進行親核性的取代反應，最後再進行氫化反 應將2-N02還原爲-NH2，即可得到6-烷基胺基-2-胺基苯甲 醯胺（25-29)。 如流程5所示，將上述化合物（3, 10_11，16, 2 5-2 9)分別 與甲氧苯甲醛（32-40)在N，N-二甲基乙醯胺（DM Ac)溶媒中 及亞硫酸氫鈉的存在下，經過熱脫水環化反應/去氫反應， 即可得到產率頗高的一系列取代-2-苯基-4- Π查唑啉酮類衍 生物（41-59)。 依照流程6的合成方法’合成一系列2，3 -雙氫-2 -苯基-4-崆唑啉酮類衍生物（60-68)，以2,3-雙氫-2-(3’-甲氧基苯 基）-4-咬唑啉酮（61)爲例說明如下·· 當2-胺基苯甲醯胺（30)與3-甲氧基苯甲醛（34)在N，N- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） ^------11 -------- (請先閱讀背面之注音？事項再填寫本頁) 490462 A7 B7 五、發明說明（） 9 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 二甲基乙醯胺溶媒中，溫度80°C下反應1小時，經管柱層析 分離後，可得到化合物61(融點：148-15CTC)及43(融點： 177-179°(：)，產率分別爲75%及15°/(>。 化合物43的結構經紅外線光譜、核磁共振光譜及質譜 等光譜分析的結果可以確認爲2-(3甲氧基苯基）-4-适唑 啉酮。而化合物61依其質譜（m/z 254, M + )及元素分析的結 果，可將其分子式定爲C15H14N202，與預期的2,3-雙氫-2-(3’-甲氧基苯基）-4-遗唑啉酮相吻合。在化合物61的核磁共 振氫譜中，出現（5 5.73 (H-2)、7·15 (NrH)及 8.34 (N3-H) 的訊號，在2D HMBC光譜中，也出現H-2與C-4 ( (5 1 63.77)、 C-8a (δ 147.98)、C-2’（<5 119.11)、C-6,（5 112.75)間的長 距離偶合，因此，這些光譜分析的結果可以將化合物61確 定爲2,3-雙氫·2-(3’-甲氧基苯基）-4-咬唑啉酮。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 爲了提高化合物61的產率，將反應條件做調整以減少 化合物61變成化合物43的去氫化反應（dehydrogenation)。 首先，我們將反應溫度降至25 土 ，並延長反應時間爲4 小時，但經薄層層析檢查，其反應性不佳，仍有可觀量的 原料（30, 34)殘留反應液中。因此，我們再次於25土 2°C的 溫度下並加入催化劑對甲苯磺酸進行反應，結果反應於30 分鐘內完成，得到較高產率（89.0%)的61及較低產率（4.0%) 的43。於是，便以此反應條件合成化合物60及62-68，均得 到較高產率的預期化合物。 化合物60-68合成後是以外消旋混合物的狀態存在， 目前尙未進行其單離工作，一旦有特別優越的生物活性被 • 12 - 本紙張尺I適用中國國家標準（CNS)A4規格(21G X 297公爱) "一 一 490462 A7 B7___ 五、發明說明（1Q ) 發現時，我們將進一步單離出具有光學活性的異構物。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 我們同時也以在苯環上具有未鍵結電子對的取代基 (如：-OCH3、-0CH20-、-NRR’）的苯甲醯胺（10-11，16, 25-29) 爲起始原料，但最終卻未能如預期的得到2,3-雙氫產物， 在此反應過程中，由薄層層析的檢查顯示有預期的2,3-雙 氫產物存在，但在後續處理過程中（如··管柱層析、再結晶） 即自發性的進行去氫化反應而變成相對應的化合物（52_ 59) 〇 最後，我們以5-氟苯甲醯胺（3)爲起始原料，嘗試合成 2,3-雙氫-6-氟-2-苯基-4-α^唑啉酮，雖然F與C1是屬於同一 族的具拉電子能力的元素，但其安定性比2,3-雙氫-6-氯-2-苯基-4-唑啉酮差了許多，最終還是自發性的進行去氫化 反應而變成相對應的化合物51。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 綜合以上結果，我們可以得到一個結論：在2,3-雙氫 -2-苯基-4-Π查唑啉酮的6-或7-位上有給電子基團或氟原 子存在時，很容易進行自發性的去氫化反應，因此，合成 這些化合物並測定其細胞致毒活性幾乎是不可能的，因爲 即使在做活性評估時，其在使用的溶媒中的安定性也是一 大問題。 依流程7的合成方法合成了取代2-苯基-4-烷氧基-口查 唑啉類衍生物（69-76)及取代2-苯基-4- π查唑啉類衍生物 (77-81)。 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 490462 A7 B7

11

F^^/COCl nh2 sochM^^ , I reflux 2 NH3，benzene· R.T.

流程2· XOC1

.COOH s〇C|2 9 benzene 、N02 reflux 6,7 NH3 , benzene -----------裝--------—訂 *-------- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 、N〇2 8,9 H2 / Pd-C, methanol

4.6.8.10 R6 = 〇CH3 ^R7 = H 5.7.9.11 R6 = R7 = 〇CH3 -14 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 x 297公釐） 490462 A7 B7 五、發明說明（i2 ) 流程3.

Cr〇3 -pyridine-water reflux 13

.COOH N〇2 .COC1 SOCI2 , benzene -^ reflux 0 一 ^ 、no2 14 NH3 , benzene R.T.

〇、^\^CONH2/ I I

H2/Pd-C p^^\^CONH2 methanol N〇2 nh2 15 16 -----------裝------1—訂-------- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -15 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 x 297公釐） 490462 A7 B7 五、發明說明（13 ) 流程4. CK^/C〇〇H s〇ci25benzene C^^COCl 、N〇2 reflux 17 18 N02 NH3，benzene R.T. CK^x.CONH2

19 HNRR' NO2 DMF, 110° R，RN、^t\^CONH2 20-24 H2/Pd-C methanol ---- ^^nh2 25 - 29

20,25 NRR1 = =n：CH3 ch3 22,27 NRR 丨= 21，26 NRR， =nO 23,28 NRR 丨= N〔 24,29 NRR，= / N

C (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)H3 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -16 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 490462 A7B7 五、發明說明（i4 ) 流程 5.

CONH2

3,10,11,16,25-31 30 R6 = R7 = H 31 R6 = C1，R7 = H

32 33 34 35 36 37 38 R2, = R3 R2* = R4 R2' = R3 R3' = R4 R4' — R5 R3, = R5 R3，= R4 =R4· = R5 = H =R5- = H, R2 =R5· = H, R3 =R5. = H，R4 =H, R2 =R3 = H,R2—R4 = H，R2=R5 39 r2, = r5. = H, R3· = R4 Afi = P-. = T4 P-». = R^ = och3 = och3 = och3 = och3 = och3 = och3 = och3 =APU,

NaHS03

N,N-dimethylacetamide 150°C

41 42 43 44 45 46 47 48 49 50

Rg = R7 = 1^2 R6 = R7 R6 = R7 R6= R7 R6 = R7 r6=r7 R6=R7 R6= R*7 = R7 =R2 :R3 :R4 :r3 :r3R，R， :R3, = R4,= R5, = H :R4·= R5,= H，R2, = OCH3 :r3. = r5. = h，r3，= och3 :R4, = R5,= H，R4, = OCH3 :R5. = H, R2. = R3·: :R5' = H, R2' = R4': :R4. = H，R]，= R5,: :R5.= H, R3. == R4,: :R4.= H，R3,= R5,: =OCH3 :och3 = och3 = och3 :och3 R6 R7 = R2,= R4'= R5,= H, R3, = OCH3 51 R6 =\F, R7 = R2· = R4* = R5' = H, R3· = OCH3 52 R6 = 〇CH3, R7 = Rr = R4· = Rs· = H, R3- = 〇CH3 53 〜=R·/ = OCH3, R2, = R4, = R5, = H, R3, = OCH3 54 R6，R7 = 0CH20, R2-= R4-= = H, R3« = OCH3 ，R7 = R2'= R4,= R5,= H, R3, = OCH3 ,R7 = R2'= R41 = R5'= H, R3'= OCH3 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 55 R6 = NCCH3, ch3 56 R6 = 0 ’ 57 r6= o， 58 R6 = 59 Κβ= N~^0, ,R7 — R2' ~ R4' ~ ί^5'= H, R3'= OCH3 -17 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 490462 A7 B7 五、發明說日月（i5 ) 流程6 · R2，\ R3f

30,31 CONH2 + h4- nh2 I 4-toluenesulfonic acid "^4' i N,N-dimethylacetamide l R.T. ^ 33-40 R5’

R5

42-50 R5' 606162636465666768 R6 二 Ry = R4 = R2'= R4 R6 = Rr = 1¾¾ R6 = R4 = R5 R5 == R3'= R5 R5 = R3'= R4 R6 = R2,=尺5 R6 = R2' = R4 R6 = C1，R2，= =R5'= H, R2'= OCH3 =R5,= H，R3, = OCH3 = R5, = H，R4，=OCH3 = H，R2，= R3，=〇CH3 = H，R2.= R4，=〇CH3 = h，r2，=r5=och3 = H，R3，= R4- = 〇CH3 = h,r3.=r5，=och3 R4· = R5,= H，R3,= OCH3 ------------,·裝------1 丨tT--------- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -18 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 五、 發明說明（i6 ) 流程

69 R2· = R3. = R4. = Η，R = CH3 70 R2. = R3. = R4· = Η，R = CH2CH3 A7 B7

請先閱 讀背 之 注 71 Rr = Rr = R4· = H , R = CH2COOEt ~~~~~~~— — — .— .——————— ............——* 72 R]· = R3’ = R4· = H，R = (CH2)3COOEt 73 R2· = R3· = R4· = H , R = (CH2)4COOEt 74 R2· = OCH3 , % = R4· = H , R = C2H5 75 R3- = OCH3 , Rr = R4« - H , R = C2H5 76 R4. = OCH3，Rz· = Ry = H，R = C2H5 77 Rt = R3* = R4. = H , R = CH3 78 R2· = Rt = R4· = H , R = CH2CH3 80 Ry = OCH3 , Rr = - H , R = C2h7 81 R4· = OCH3, R2.= R^. = H , R = C2H5 1 I 訂 實例 2-胺基-5-氟苯甲醯胺（3). 以2-胺基-5-氟苯甲酸（1.0 g，6.3 mmol)爲原料，懸浮於 苯（3 0 ml)中，加熱至迴流並慢慢滴加氯化亞磺醯基（1.5 g， 1 2·6 mmol)，繼續迴流4小時後，減壓濃縮除去溶媒及過量 之氯化亞磺醯基；再度以苯（200 ml)爲溶媒，於室溫下通 入氨氣，待反應完成，減壓濃縮除去溶媒，即可得到化合 物 3 (0.9 g);棕色粉末；MS m/z 154 (M + )。 2-胺基_5-甲氧基苯甲醯胺（10). -19 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） # 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 17 B7 17 B7 五 、發明說明（ 以5-甲氧基-2-硝基苯甲酸（4) (ι·〇 g, 5 .1 mmol)爲原 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 料，參照3之合成方法，即可得到％甲氧基硝基苯甲醯 胺（8)。將化合物8溶於甲醇中，在;i 〇%鈀/活性碳的催化下 通入氫氣約6小時，過濾除去鈀/活性碳，濃縮後即可得到 10 (0.8 g);棕色粉末；MS m/z 166 (M + )。 胺基-4,5-二甲氧基苯甲醯胺（U)· 以4,5-二甲氧基-2-硝基苯甲酸（5) (1 .0 g, 4.4 mmol) 爲原料，參照10之合成方法，即可得到11 (0.8 g);棕色粉 末；MS m/z 196 (M + )。 2-胺基-4,5-亞甲二氧二基苯甲醯胺（16). 以4,5-亞甲二氧二基-2-硝基苯甲醛（1.0 g, 5.1 mmol) 爲原料，加入康弗斯試劑（Cr03-吡D定-水）（40 ml)，加熱迴 流4小時，將濃縮後的固體溶於水中，以1 〇%鹽酸酸化之， 並以乙酸乙酯抽取，經無水硫酸鎂脫水及濃縮後，接著參 照10的合成方法，即可得到16 (0.7 g);棕色粉末；MS m/z 180 (M + )。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 2-胺基-5-(Ν,Ν·二甲胺基）苯甲醯胺（25). 以5-氯-2-硝基苯甲酸（17) (1.0 g，4.9 mmol)爲原料， 參照3之合成方法，即可得到5-氯-2-硝基苯甲醯胺（19)。 將19溶於二甲基醯胺（DMF)(10ml)中，於110°C下與二 甲胺反應3小時，再將反應液倒入冰水（200 ml)並收集沈 -20 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） A7 B7 五、發明說明（） 18 澱物，沈澱物用水洗滌，乾燥後仿照10的方法進行氫化反 應，即可得到25 (0.6 g):棕色粉末；MS m/z 179 (M + )。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 2-胺基-5-%咯啶基苯甲醯胺（26). 參照25之合成方法，以吡咯啶替換二甲胺，即可得到 26 (0.7 g);棕色粉末；MS m/z 205 (M + )。 2-胺基-5-六氫吡啶基苯甲醯胺（27). 參照25之合成方法，以六氫吡啶替換二甲胺，即可得 到 27 (0.8 g):棕色粉末；MS m/z 219 (M + )。 2-胺基-5-(4-甲六氫吡啶）苯甲醯胺（28). 參照25之合成方法，以4-甲六氫吡啶替換二甲胺，即 可得到 28 (0.8 g);棕色液體；MS m/z 233 (M + )。 2-胺基-5-嗎林基苯甲醯胺（29). 參照25之合成方法，以嗎林替換二甲胺，即可得到29 (0.8 g):棕色粉末；MS m/z 221 (M + )。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 2-苯基-4-口 S唑啉酮（41). 以2-胺基苯甲醯胺（30) (1.0 g，7.3 mmol)及苯甲醛 (32) (0.8 g，7.3 mmol)爲原料，溶解於N，N-二甲基乙醯胺 (DMAC) (20 ml)中，力0 入亞硫酸氫鈉(0.8 g, 7.5 mmol)， 150°C之溫度下加熱攪拌2小時，倒入冰水（200 ml)並收集沈 -21 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公爱) " ---- 490462 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 B7 _ 五、發明說明（） 19 澱物，沈澱物用水洗滌，乾燥後再以乙醇再結晶，即可得 到41 (1.5 g，92.6%);淡黃色針狀結晶；產率、融點及光譜 資料列於表1。 2-(2’-甲氧苯基）-4-硿唑啉酮（42). 以2-胺基苯甲醯胺（30) (1.0 g，7.3 mmol)及2 -甲氧苯 甲醒（33) (1.0 g，7.3 mmol)爲原料，參照41之合成方法， 即可得到42 (1.6 g，89.1%);淡黃色針狀結晶。 2-(3、甲氧苯基唑啉酮（43). 以2-胺基苯甲醯胺（30) (1.0 g，7.3 mmol)及3-甲氧苯 甲醛（34) (1.0 g，7.3 mmol)爲原料，參照41之合成方法， 即可得到43 (1.7 g，95.0%);淡黃色針狀結晶。 2-(4’-甲氧苯基）-4-口查唑啉酮（々ΜΗ]-胺基苯甲醯胺 （30)(1.0g，7.3mmol) 及 4-甲氧苯 甲Si (35)(1.0g，7.3mmol)爲原料，參照41之合成方法， 即可得到44 (1.8 g，96.4%);淡黃色針狀結晶。 2-(2’，3，-二甲氧苯基）-4-°2唑啉酮（45)· 以2-胺基苯甲醯胺（30) (1.0 g, 7.3 mmol)及2,3-二甲 氧苯甲醛（36)(1.2 g，7.3 mmol)爲原料，參照41之合成方 法，即可得到45 (1.8 g，86.0%);淡黃色針狀結晶。 -22 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） ------ — — — — 111 ^ ·111111! (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) A7

五、發明說明（） 20 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 h(2’，4’-二甲氧苯基）_4_硿唑啉酮（46). 以2·胺基苯甲醯胺（30) (1.0 g，7.3 mmol)及2,4-二甲 氧苯甲醛（37)(1.2 g，7.3 mmol)爲原料，參照41之合成方 法’即可得到46 (1.7 g，84.3%);淡黃色針狀結晶。 2-(2’，5’-二甲氧苯基）-4-口2唑啉酮（47). 以2-胺基苯甲醯胺（30) (1.0 g，7.3 mmol)及2,5-二甲 氧苯甲醛（38)(1.2 g，7.3 mmol)爲原料，參照41之合成方 法，即可得到47 (1.8 g，88.6%);淡黃色柱狀結晶。 2-(3’，4’-二甲氧苯基）-4-口查唑啉酮（48)· 以2-胺基苯甲醯胺（30) (1.0 g，7.3 mmol)及3,4-二甲 氧苯甲醛（39) (1.2 g，7.3 mmol)爲原料，參照41之合成方 法，即可得到48 (1.8 g，89.0%);淡黃色柱狀結晶。 2-(3’，5’-二甲氧苯基）-4-疃唑啉酮（49). 以2-胺基苯甲醯胺（30) (1.0 g, 7.3 mmol)及3,5-二甲氧苯 甲醛（40) (1.2 g，7.3 mmol)爲原料，參照41之合成方法， 即可得到49 (1.7 84.0%);淡黃色針狀結晶。 2-(3，-二甲氧苯基）·6-氯-4-口2唑啉酮（50)· 以2·胺基-5-氯苯甲醯胺（31) (1·〇 g，5.9 mmol)及3-甲氧苯 甲醒（34) (0.8 g，5.9 mmol)爲原料’參照41之合成方法’ 即可得到5 〇 (1.6 g，9 4 · 3 %);淡黃色針狀結晶。 -23 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐) ------------裝—·—訂---------- (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 490462 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明說明（2i ) 2-(3，-甲氧苯基）-6-氟-4-口查唑啉酮（51)· 以 3 (1.0 g，6.5 mmol)及 3-甲氧苯甲醛（34) (0.9 g，6.5 mmol)爲原料，參照41之合成方法，即可得到51 (0.8 g， 4 6.8 %);淡黃色針狀結晶。 2-(3，-甲氧苯基）-6-甲氧基-4-口 2唑啉酮（52). 以 10 (1.0 g，6.0 mmol)及 3·甲氧苯甲醛（34) (0.8 g， 6.0 mmol)爲原料，參照41之合成方法，即可得到52 (0.7 g, 42.4%);淡黃色針狀結晶。 2-(3’-甲氧苯基）-6,7-二甲氧基-4-口垄唑啉酮（53). 以 11 (1.0 g，5.1 mmol)及 3-甲氧苯甲醛（34) (0.7 g， 5.1 mmol)爲原料，參照41之合成方法，即可得到53 (0.5 g, 30.8%);淡黃色柱狀結晶。 2-(3甲氧苯基）-6,7-(亞甲二氧二基）-4-口$唑啉酮（54). 以 16 (1.0 g，5.5 mmol)及 3-甲氧苯甲醒(34) (0.7 g, 5.5 mmol)爲原料，參照41之合成方法，即可得到54 (0.1 g， 8.8%);淡黃色針狀結晶。 2-(3’-甲氧苯基）-6-(N，N-二甲胺基）-4-口查唑啉酮（55). 以 25 (1.0 g，5.6 mmol)及 3-甲氧苯甲醛（34) (0.8 g， 5.6 mmol)爲原料，參照41之合成方法，即可得到55 (0.8 g， _____ 24 _ 本紙張尺度適用巾國國冢標準（CNS)A4規格（210 X 297公爱） -----------裝--------訂---------- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 490462 A7 __ B7__ 五、發明說明（） 22 51.2%);淡黃色針狀結晶。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁} 2-(3’-甲氧苯基比咯啶基）-4-口查唑啉酮（56). 以 26 (1.0 g，4.9 mmol)及 3-甲氧苯甲醛（34) (0.7 g， 4.9 mmol)爲原料，參照41之合成方法，即可得到56 (0.6 g， 40.0%);淡黃色柱狀結晶。 2-(3’-甲氧苯基）-6-(六氫吡啶基）-4-岐唑啉酮（57). 以 27 (1.0 g，4.6 mmol)及 3-甲氧苯甲醛（34) (0.6 g， 4.6 mmol)爲原料，參照41之合成方法，即可得到57 (0.8 g， 55·0%);淡黃色柱狀結晶。 2-(3’-甲氧苯基）-6-(4·甲六氫吡啶基）-4-咬唑啉酮（58). 以 2 8(1.0 g，4.3 mmol)及 3 -甲氧苯甲酸(34) (0.6 g, 4·3 mmol)爲原料，參照41之合成方法，即可得到58 (0.9 g， 57.6%);淡黃色柱狀結晶。 2-(3’·甲氧苯基）-6-(嗎林基）-4-技唑啉酮（59). 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 以 29 (1.0 g，4.5 mmol)及 3-甲氧苯甲醛（34) (0.6 g， 4.5 mmol)爲原料，參照41之合成方法，即可得到59 (0.7 g， 48.3%);淡黃色針狀結晶。 2,3-雙氫-2-(3，-甲氧苯基）-4-口 S唑啉酮（61)·

方法A ··以2-胺基苯甲醯胺（30) (1.0 g，7.3 mmol)及3-甲氧苯甲醒（34) (1·〇 g, 7.3 mmol)爲原料，溶解於DMAC _- 25 - 本紙張尺度適财國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297 公釐） -- 490462 A7 B7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 Π縣日月（23 ) (20 ml)中，於80°C下反應2小時，倒入冰水（200 ml)並收集 沈澱物，沈澱物用水洗滌，乾燥後再經管柱層析法分離（矽 膠一乙酸乙酯/正己烷）即可得到43 (0.3 g，15.0%)及61 (1.4 g，75.2%);淡黃色粉末；產率、融點及光譜資料列於 表 1 〇 方法B ··以2-胺基苯甲酿胺（30) (1 ·0 g，7.3 mmol)及3-甲氧苯甲醛（34) (1.0 g，7.3 mmol)爲原料，溶解於DM AC (20 ml)中，加入對甲苯磺酸（0.1 g，0.3 mmol)，室溫下攪 拌2小時，倒入冰水（200 ml)並收集沈澱物，沈澱物用水洗 滌，乾燥後再經管柱層析法分離（矽膠一乙酸乙酯/正己烷） 即可得到 43 (70.0 mg，4.0%)及 61 (1.7 g，89.0%);淡黃色粉 末。 2.3- 雙氫-2-(2，-甲氧苯基）-4-口2唑啉酮（60). 以2-胺基苯甲醯胺（30) (1.0 g，7.3 mmol)及2-甲氧苯甲 醒（33) (1.0 g，7.3 mmol)爲原料，參照61 (方法B)之合成 方法，即可得到 42 (90.0 mg，5.0%)及 60 (1.7 g，90.1%);淡 黃色粉末。 2.3- 雙氫-2-(4，-甲氧苯基）-4-口查唑啉酮（62). 以2-胺基苯甲醯胺（30) (1.0 g，7.3 mmol)及4·甲氧苯甲 醛（35) (1.0 g，7.3 mmol)爲原料，參照61 (方法B)之合成 方法，即可得到 44 (40.0 mg，2.0%)及 62 (1·7 g，93.3%);淡 黃色粉末。 -26 私紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） --------I I ------1 I --------- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 490462

24 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 2.3- 雙氫-2-(2’，3，-二甲氧苯基）-4-口$唑啉酮（63). 以2-胺基苯甲驢胺（3〇) (1 ·〇 g，7·3 mmol)及2,3-二甲氧 本甲醒（36) (1.2 g，7.3 mmol)爲原料，參照61 (方法B)之 合成方法’即可得到45 (80.1 mg, 4.0%)及63 (1.6 g， 78.1%);淡黃色粉末。 2.3- 雙氫·2-(2，，4，-二甲氧苯基）-4-口查唑啉酮（64). 以2-胺基苯甲醯胺（3〇) (i_〇 g，7.3 mmol)及2，4-二甲氧 苯甲醛（37) (1.2 g，7.3 mmol)爲原料，參照61 (方法B)之 合成方法，即可得到46 (99.9 mg，5.0%)及64 (1.8 g， 8 6 · 5 %);淡黃色粉末。 2.3- 雙氫-2-(2’，5，-二甲氧苯基）-4-口查唑啉酮（65). 以2-胺基苯甲醯胺（3〇) (1.0 g，7.3 mmol)及2,5-二甲氧 苯甲醛（38) (1.2 g，7·3 mmol)爲原料，參照61 (方法B)之 合成方法，即可得到47 (80.1 mg，4.0%)及65 (1.7 g， 80.3%);淡黃色粉末。 2,3·雙氫-2-(3’，4、二甲氧苯基）-4-口2唑啉酮（66). 以2-胺基苯甲醯胺（30) (1 ·0 g，7·3 mmol)及3,4-二甲氧 苯甲醛（39) (1.2 g，7.3 mmol)爲原料，參照61 (方法B)之 合成方法，即可得到48 (60.2 mg，3.1%)及66 (1.6 g， 80.2%);淡黃色粉末。 _ - 27 - 本紙張尺k適用巾國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公爱) """ - - I I *1 I I Ί I — — — — — —--' (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) A7

五、發明說明（） 25 2.3- 雙氫-2-(3’，5，-二甲氧苯基）-4-口莹唑啉酮（67)· (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 以2-胺基苯甲醯胺（3〇) (1〇 g，7.3 mmol)及3,5-二甲氧 苯甲醒（40) (1.2 g，7.3 mmol)爲原料，參照61 (方法B)之 合成方法’即可得到49 (40.2 mg，2.0%)及67 (1.9 g， 93.3%);淡黃色粉末。 2.3- 雙氫-2-(3，-甲氧苯基）-6-氯-4-口查唑啉酮（68). 以2·胺基-5-氯苯甲醯胺（31) (1·0 g，5.9 mmol)及3-甲氧 苯甲醛（34) (〇·8 g，5.9 mmol)爲原料，參照61 (方法B)之 合成方法’即可得到50 (20.0 mg，1.1%)及68 (1.6 g， 95.0%);淡黃色粉末。 4-甲氧基-2-苯基口2唑啉（69) and N3-甲基-2-苯基-4-口窆唑 啉酮（77). 將化合物41 (1.00 g，4.50 mmol)懸浮於四氫口夫喃（50 ml)中，加熱至50°C並分次慢慢加入氫化鈉（80%，0.15 g， 5.00 mmol)，繼續攪拌60分鐘後，加入碘甲烷（1.28 g， 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 9.00 mmol)並繼續反應60分鐘。將反應物溶於氯仿中， 過濾除去不溶之鹽類，氯仿抽取液經濃縮後以管柱層析法 分離（矽膠一氯仿/正己烷）得到69 (0.32 g，30.1%)及77 (0.70 g, 66.0%);白色粉末；產率、融點及光譜資料列於 表2。 -28 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 490462 A7 __ B7 五、發明說明（） 26 4-乙氧基-2-苯基口$唑啉（70) and N3-乙基-2-苯基-4-口窆唑 啉酮（78). 參照69及77之合成方法，將41 (1.00 g，4.50 mmol)與 碘乙烷（1.40 g，9.00 mmol)反應，即可得到70 (0,90 g， 80.0%)及 78 (0.12 g，11.0%);白色粉末。 4-乙氧羰基甲氧基-2-苯基碎唑啉（71) and N3-乙氧甲醯基 甲氧基-2-苯基-4-口 2唑啉酮（79). 參照69及77之合成方法，將41 (1.00 g，4.50 mmol)與 溴乙酸乙酯（1·50 g，9.00 mmol)反應，即可得到71 (1.25 g， 90.2%)及 79 (0.02 g，1.3%);白色粉末。 4-乙氧羰基丙氧基-2-苯基咬唑啉（72). 參照69之合成方法，將41 (1.00 g，4.50 mmol)與4-氯 丁酸乙酯（1.36 g，9.00 mmol)反應，即可得到72 (1.34 g， 88.6%);白色粉末。 4-乙氧羰基丁氧基-2-苯基硿唑啉（73). 參照69之合成方法，將41 (1.00 g，4.50 mm〇l)與5-溴 戊酸乙酯（1.88 g，9.00 mmol)反應，即可得到73 (1.25 g， 79.4%);白色粉末。 4-乙氧基-2-(2*-甲氧苯基）挖唑啉（74). 參照69之合成方法，將42 (1.13 g，4·5〇 mm〇i)與碘乙院 -29 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） ------------裝---- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂.--------禮. 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 MU462 A7 "------B7__ 五、發明說明（） 27 (!·4〇 g，9.00 mmol)反應，即可得到 74 (1.06 g，84.1%);白 色粉末。 4_乙氧基-2-(3匕甲氧苯基）口查唑啉（75) and N3-乙基_2-(3*-甲氧苯基）-4-。2唑啉酮（80). 參照69及77之合成方法，將43 (1.13 g，4.50 mmol)與 碘:乙院（1.40 g，9.00 mmol)反應，即可得到75 (1.04 g， 82.5%)及 80 (0.14 g，11.1%);白色粉末。 4-乙氧基-2-(4·-甲氧苯基）口2唑啉（76) and N3-乙基-2-(4·-甲氧苯基）-4-口查唑啉酮（81). 參照69及77之合成方法，將44 (1.13 g，4.50 mmol)與硤 乙烷（1.40 g，9.00 mmol)反應，即可得到 76(1.07 g，85.0%) 及 81 (0.11 g，8.8%);白色粉末。 表1列出了化合物41至68的物理及光譜數據；表2列出 了化合物69至81的物理及光譜數據。 細胞致毒活性試驗 所合成的化合物42-68於美國Chapel Hill之北卡羅來納 大學藥學院以人類及老鼠腫瘤細胞依照已發表論文中相同 方法進行體外細胞致毒活性試驗17。這些腫瘤細胞包括人 類卵巢癌（1A9)、迴盲腸癌（HCT-8)、肺癌（A-549)、神經膠 母細胞瘤（U-87-MG)、骨癌（HOS)、鼻咽表皮樣癌（KB)、P- -30 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公爱） -----------裝------%—訂---------- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) A7

五、發明說明（） 28 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) gp-表現之鼻咽表皮樣癌（KB-VIN)、***癌（PC3)、乳癌 (MCF-7)及黑色瘤（SKMEL-2)，其結果以抑制半數腫瘤細胞 生長所需之藥物莫耳濃度（ED5(3)表示。 抗微小管試驗19,2() 電泳（Electrophoretically)均質化的胎牛腦部微管依照 已發表論文中相同方法純化處理，Combretastatin A-4由亞 利桑那州立大學的G. R. Pettit博士所提供。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 此項微管聚合試驗乃依照已發表論文中相同方法進行 測試21。將1.2 mg/ml ( 12 μΜ)微管放入0.8 Μ麩酸鈉0.24 ml (pH 6.6 )中，與各種不同濃度的藥物於26t中預先培養15 分鐘。而藥物的儲備溶液是以二甲亞碉（DMS0)爲溶媒，且 最後溶媒濃度是4 % (V/V)。所有的濃度均是用最後的反應 體積0·25 ml來換算。反應混合物以冰塊冷卻後，加入1〇 mM 鳥糞44嘌呤核苷三磷酸（GTP) 10 μΐ。將檢品移入藉由 Gilford光譜光度計的電動溫度控制器調控在〇°c之測試管 中。基線設定在350 nm，約50秒後溫度將躍升到26°C，此 時開始進行聚合反應。20分鐘後，會出現混濁的情形，再 將溫度控制器設定在0°C。當去聚合反應完成時，會再度出 現混濁的情形。通常，約90%之混濁情形是對冷溫具有可 逆性（cold-reversible)，且這冷溫可逆性的混濁情形表示每 一個反應混合物聚集之程度。從不同濃度的藥物抑制聚合 反應的圖形中可得到IC5Q値。 每個實驗均用到4個光譜光度計，而每一組則有2個對 -31 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（21G X 297公釐) 490462 A7 __—B7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 五、發明說明（） 29 照反應。一般而言，對照反應的誤差在其平均値的5%內 時’此聚合反應分析所得到的IC5〇値通常有很高的再現 性。一般來說，標準誤差爲平均値的20%內，但在某些例 子，標準誤差則是平均値的30-35%。因此，我們可保守地 估計，若IC5()値中有50%的差異則表示2個化合物的相對活 性有所不同。 抑制血小板凝集的試驗 從兔子耳朵動脈所收集到的血被與EDTA混合而獲得 一濃度爲6mM的溶液，再於室溫下以90g離心10分鐘而獲得 一富於血小板的血漿。再繼續以500g離心該富於血小板的 血漿10分鐘，所收集到血小板以Tyrode’s溶液（不含EDTA) 加以淸洗。在以相同條件下加予離心後，將血小板懸浮於 一 Tyrode’s 溶液並具有下列組成（mM): NaCl (136.8)，KC1 (2.8)，NaHC03 (11·9)，MgCl2 (1.1)，NaH2P04 (0.3 3)，CaCl (l.o)及葡萄糖（11.2)。血小板的數目以一 Coulter計數器 (Model ZM)加予計算並調整至4·5 X 108血小板/m卜 血小板凝集係使用一雙通道Lumi凝集計（Model 1020, Payton,力Π 拿大）依 turbidimetric方法[0’1314611，】.11.*1.(^1111· Pathol. 1962, 15,452]加予測量。所有玻璃器具均被矽酮 化。待測化合物在加入凝集引導劑之前的一分鐘被加入， 其中血小板懸浮液以900rpm速度加予攪拌。凝集百分比的 If C. M.; Chen, W. Y.; Ko, W. C.; Ouyang, C. Biochem. Biophys. Acta. 1987, 924, 375的論文中所載的方 -32 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 χ 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝 訂*--- #· 490462 A7

經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 五、發明說明（3〇 ) 法進行。 本發明實施例之結果與討論 (1). PQZ及DHPQZ之細胞致毒活性評估： 6,7,2’，3’，4’，5’-取代-2-苯基-4-口2唑啉酮類化合物（42-59)及6,2’，3’，4’，5’-取代-2,3-雙氫-2-苯基-4-口±唑啉酮類化 合物（60-68)以10種人類及老鼠腫瘤細胞進行體外細胞致毒 活性試驗，這些腫瘤細胞包括人類卵巢癌（1A9)、迴盲腸癌 (HCT-8)、肺癌（A-549)、神經膠母細胞瘤（U-87-MG)、骨癌 (HOS)、鼻咽表皮樣癌（KB)、P-gp-表現之鼻咽表皮樣癌 (KB-VIN)、***癌（PC3)、乳癌（MCF-7)及黑色瘤 (SKMEL-2)。結果如表3所示，化合物55-58對多種腫瘤細胞 具有顯著之細胞致毒活性（ED5Q < 1.0 gg/ml)，但其中55對 於神經膠母細胞瘤（U-87-MG)及骨癌（HOS)並不具活性。値 得注意的是55-58對於卵巢癌（1A9)具有高度選擇性的細胞 致毒活性，例如，55對於1A9的ED5Q爲0.49 pg/ml，這個濃 度比抑制其他較不敏感腫瘤細胞（如：A-549、KB、PC3及 SKMEL-2)所需的濃度約低了 20-3 0倍。56-59同樣地也對卵 巢癌（1A9)具有高度選擇性的細胞致毒活性。此外，55-58 對P-gp-表現之腫瘤細胞（KB-VIN)之活性優於對其母細胞 (KB)之活性，55和57對於敏感腫瘤細胞之活性分別爲抗藥 腫瘤細胞活性的25倍及15倍。 雖然55和56在結構上的差異性很小，56的細胞致毒活 性卻明顯地強了許多，同時對KB-VIN的選擇性明顯降低， -33 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -------------------— ^--------- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 490462 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明說明（） 31 原因目前尙不淸楚，可能其作用機轉不盡相同，因此我們 將進一步做深入的硏究。 探討其結構與活性之關係，發現當PQZ衍生物（42-49) 的6-位上沒有取代基時，不具細胞致毒活性·，而在比較6-位上給電子基與拉電子基的效應時，顯示有6-OCH3給電子 基的化合物（52)比6-C1 (50)、6-F (51)拉電子基的化合物更 具活性。雖然（亞甲二氧二基）苯常在普多非倫毒、五加前 胡素及combretastatin A-2等多種天然有絲***抑制劑的結 構中出現，但6,7-(亞甲二氧二基）取代的PQZ (54)與其他6-位上沒有取代基的PQZ (43)、6-甲氧基PQZ (52)或6,7-二甲 氧基PQZ (53)比較，其活性並沒有增加。在6-位上導入單一 取代基對提升其抗癌活性頗有助益，例如6-甲氧基PQZ (52) 對所有腫瘤細胞的致毒活性約爲6,7-二甲氧基PQZ (53)的5 倍。因此，在6-位上具有雜環或N(CH3)2的化合物（55-59)均 呈現非常優越之活性，其中以6-吡略啶基PQZ (56)之活性最 爲優異，具有微毫莫耳（nM)濃度的ED50。 PQZ (42-50)和DHPQZ (60-68)兩系列化合物在活性的表 現上呈現極大的差異，前者對多種腫瘤細胞呈現微弱之致 毒活性，但後者對1A9及KB-VIN則呈現高度選擇性的致毒 活性，一般說來，若以相同取代基的化合物做比較時，發 現DHPQZ比PQZ更具活性。只是在此DHPQZ化合物均以外 消旋混合物進行活性測試，理論上相信其中一個光學異構 物應提供較高之活性。若在DHPQZ的3’-位上導入一個0CH3 官能基（61)，其活性約爲2’- 0CH3 (60)及4’-OCH3 (62)的15- -34 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） ------------裝--------丨訂·--- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) #· 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 490462 A7 _____B7__ 五、發明說明（） 32 20倍，此外，61也比其他具多個甲氧基取代的化合物（63-67)更具活性。這些情形與其他作爲有絲***抑制劑的雜環 酮（PQ、DHPQ、PN等）的結果是一致的。另外，6-C1-3’-甲氧基DHPQZ (68)的活性比61又明顯增力0 ，其ED50&61小 了約5倍。 如表3所示，PQZ及DHPQZ特別對卵巢癌具有顯著的細胞 致毒活性，對抗藥的KB腫瘤細胞具有選擇性的細胞致毒活 性。這個結果不同於其他類似結構的雜環酮，因爲其他的 雜環酮幾乎對所有的腫瘤細胞都有活性，而不具特殊的選 擇性。原因目前尙不淸楚，我們將進一步探討其作用機轉。 (2).PQZ 、DHPQZ與微管間作用之評估： 在稍早的硏究中發現PQ、DHPQ和PN可抑制微管聚合 反應以及以同位素標誌的秋水仙鹼對微管的結合反應5_ 10。新合成的PQZ、DHPQZ系列與稍早的PQ、DHPQ系列在 結構上主要不同之處即在於B環上多了一個氮原子；而新 合成的PQZ 、DHPQZ之間的結構差異則在於B環的C(2)和 C(3)間化學鍵的氧化或還原狀態，而造成芳香A環和C環相 對位置的組態及構形改變。許多的硏究報告指出秋水仙鹼 和微管之間的結合是具有立體選擇性，且與三甲氧苯基A 環及草酚酮C環所構成的雙環系統之組態和構形均有極大 關連。因此，評估新合成的PQZ 、DHPQZ和微管之間的結 合反應將可進一步提供與秋水仙鹼的結合機轉。在先前的 報告指出16，PQZ系列中的某些化合物可抑制微管聚合反應 -35 - 本紙張尺度適用中ΐ國家標準（CNS)A4規格(210 X 297公釐） ' —I-------------- 訂 **--I----- f請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁} 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 490462 A7 ____Β7 _ 五、發明說明（） 33 而作爲有絲***抑制劑。爲了進一步歸納其結構與活性之 關係，將所合成的PQZ及DHPQZ評估其作爲微管聚合抑制 劑之活性，並與傳統的有絲***抑制劑（如：秋水仙鹼、 普多非倫毒、combretastatin A-4等）做比較。結果如表4所 示，其對微管的抑制活性與細胞致毒活性的結果具有一致 性。具有細胞致毒活性的化合物（52, 55-57, 59, 68)同時也 是微管聚合抑制劑，其中細胞致毒活性最強的化合物（56, 68)也是活性最強的微管聚合抑制劑，且其活性幾乎與天然 的有絲***抑制劑相當。相反地，細胞致毒活性微弱的化 合物（42-51)幾乎不具抑制微管聚合的活性。 與PQ、PN和DHPQ相同的情形，在A環上沒有取代的 PQZ、DHPQZ之活性遠小於6-取代的PQZ、DHPQZ。3’-甲氧 基衍生物（43, 61)的活性比2’-甲氧基（42, 60)、4’·甲氧基 (44, 62)衍生物顯著，多個甲氧基取代的衍生物（45-49)則出 現活性降低的情形，化合物63-67甚至完全失去活性。 除了 6-位上是1-甲六氫吡啶取代基的58之外（IC5。= 10-20// Μ)，其餘在6-位上具有雜環的化合物（56，57，59)均呈 現顯著之活性，造成58失去活性的原因尙不淸楚，或許58 的1-甲六氫吡啶取代基的體積較之於其他雜環（如：吡咯η定 基）龐大也是其中一個因素。6-吡咯啶基DHPQZ (56)是這 些化合物中最強的微管聚合抑制劑（IC5Q < 1 // Μ)，其活性 幾乎與秋水仙鹼相當。而非環狀的6-(N，N-二甲胺基）取代的 化合物55也具有顯著之活性（IC5{) = 1-4/i M)。 化合物62-66對於微管聚合幾乎不具抑制活性（IC5() > -36 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（21G X 297公爱) '-— ----------I· I I---I 訂·--— — — — — — — (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) ^0462 A7

經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 五、發明說明（） 34 40 " M)，推測可能與DHPQZ是以外消旋混合物進行測試有 關。在稍早的硏究中，DHPQ經過單離後的光學異構物比單 離前的外消旋混合物更具活性，因此我們有理由相信 DHPQZ經過單離後的光學異構物應呈現較強之活性，其細 胞致毒活性與抑制微管聚合活性間的關係就與其他雜環酮 一樣地具有一致性。同時，6-雜環DHPQZ經過單離後的光 學異構物也具有較強的及高選擇性的抗癌活性。 表5列出了化合物69及70對由凝血酶（thrombin)、花生 四嫌酸（arach id onic acid，AA)、膠原蛋白（collagen)及血小 板活化因子（platelet-activating factor，PAF)所引導的血小 板凝集的抑制活性。從其中可看出化合物69及70對由AA及 膠原蛋白所引導的血小板凝集具有較強的抑制活性，而對 凝血酶及PAF所引導的血小板凝集則具較差的抑制活性。 表6進一步列出了化合物69至79對由AA所引導的血 小板凝集的抑制活性。 參考文獻： 1. Rowinsky，E. K.; Donehower, R. C. The clinical pharmacology and use of antimicrotubule agents in cancer chemotherapeutics. Pharmacol. Ther. 1992，52， 35-84. 2. Verweij, J.; Clavel, M.; Chevalier, B. Paclitaxel (Taxol) and docetaxel (Taxotere): not simply two of a kind. Ann. Oncol. 1 994, 5, 495-505. -37 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 裝·------ 訂-—------- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 490462 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明說明（） 35 3. Hastie，S. B. Interactions of colchicine with tubulin. Pharmacol. Ther. 1991, 51, 377-401. 4. 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Med. Chem. 1994, 37 (20), 3400-3407. 8. Xia，Y·; Yang，Ζ· Y·; Xia，P·; Bastow，K· F·; Tachibana， -38 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 x 297公釐） ------------^-------1 ^---------' (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 490462 A7 —____B7_ 五、發明說明（） 36 Y.; Kuo, S. C.; Hamel, E.; Hackl, T.; Lee, K. Η. Synthesis and biological evaluation of 6,7,2,,3r54,-substituted -1,2,3,4-tetrahydro-2-phenyl-4-quinolones as a new class of antimitotic agents. J. Med· Chem. 1998, 41 (7), 1155-1162. 9. Chen, K.; Kuo, S. C.; Hsih, M.C.; Mauger, A.; Lin, C. M.; Hamel, E·; Lee，K. H. 2’，3’，4’，5,6,7-Substituted 2-phenyl-1，8-naphthyridin-4-ones: their synthesis， cytotoxicity, and inhibition of tubulin polymerization. J. Med. Chem. 1996, 40 (14), 2266-2275. 10. Chen, K.; Kuo, S. C.; Hsih, M.C.; Mauger, A.; Lin, C. M.; Hamel, E.; Lee, K. H. Synthesis and biological evaluation of substituted 2-aryl-1,8-naphthyridin-4(lH)-ones as antimitotic antitumor agents that inhibit tubulin polymerization. J. Med. 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Chem. 1990, 33, 1721-1728. 15. Lin, C. M.; Kang, G. J.; Roach, M. C.; Jiang, J. B.; Hesson, D. P.; Luduena, R. F.; Hamel, E. Investigation of the mechanism of the interaction of tubulin with derivatives of 2-styrylquinazolin-4(3H)-one. Mol· Pharmacol. 1991, 40, 827-832. 16. Xia, Y.; Yang, Z. Y.; Hour, M. J.; Kuo, S. C.; Xia, P.; Bastow, K. F.; Nakanishi, Y.; Nampoothiri, P.; Hackl, T.; Hamel, E.; Lee, K. H. Synthesis and biological evaluation of substituted 2-arylquinazolinones. Bioorg. Med. Chem. Lett, (submitted) 17. Lee, K. H.; Lin, Y. M.; Wu5 T. S.; Zhang, D. C.; Yamagishi, T.; Hayashi, T.; Hall, I. H.; Chang, J. J.; Wu, R. Y.; Yang, T. H. The cytotoxic principles of Prunella vulgaris, Psychotria serpens, and Hyptis captitata: Ursolic acid and related derivatives. Planta Med. 1988, -40 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 x 297公釐） ~~ -----------裝--------訂--------- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 490462 A7 B7_ 五、發明說明（38 ) 54, 308-312. 18. Boyd, M. R. Status oh the NCI preclinical antitumor drug disovery screen. In Cancer: Principles and Practice of Oncology Updates^ De Vita, V. T., Heilman, S., Rosenberg, S. A., Eds; J. B. Lippincoft: Philadelphia, 1989; pp 1-12. 19. Monks, A.; Scudiero, D.; Skehan, P.; Shoemaker, R.; Pauli, K.; Vistica, D.; Hose, C.; Langley, J.; Cronise, P.; Vaigro-Woiff, A.; Gray-Goodrich, M.; Campbell, H.; Mayo, J.; Boyd, M. Feasibility of a high-flux anticancer drug screen utilizing a derived panel of human tumor cell lines in culture. J. Natl. Cancer Inst. 199 1, 83, 757-766. 20. Hamel, E.; Lin, C. M. Separation of active tubulin and microtubule-associated proteins by ultracentrifugation and isolation of a component causing the formation of microtubule bundles. Biochemistry 1984, 23, 4173-4184. 21. D9Amato, R. J.; Lin, C. M.; Flynn, E.; Folkman, J.; Hamel, E. 2-Methoxyestradiol, an endogenous mammalian metabolite, inhibits tubulin polymerization by interacting at the colchicine site. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A· 1994, 91, 3964-3968. -41 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 x 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 一裝---- ·11111111 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 MU462 五、 A7 _B7__ 發明說明（39 )表1·6-院基胺基- 3··甲氧基-2-苯基-4· α宏哩琳嗣、2,3-雙氫 -3’-甲氧基_2-苯基-4-Π查唑啉酮及相關化合物之物理 及光譜數據 R6 R?

化合產率 mp UV，入随 IR，MS(M+) lH-NMR (DMS〇-,/6) δ 理論値，％ 物（。/。) (°C) (MeOH) (cm*1) 忉么 （計算値） .〜_ (log ε) C Η Ν 41 93 232- 237 233 (4.47) 42 89 198- 211 202 (4.50) 43 95 177- 218 179 (4.41) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 一裝----- 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 44 96 215- 207 219 (4.38) 45 86 179- 223 181 (4.52) 1671 222 7.48-7.59 (4 H，m，H-6, H-3，，75.66 Η·4，，H-5，)，7.71-7.84 (2 H，（75·60) m, H-7, H-8), 8.13-8.20 (3 H, m，H-5, H-2’，H-6，)，12.56 (1 H，brs，NH) 1678 252 3.86 (3 H, s，OCH3)，7.05- 71.42 7.21 (2 H，m，H-3’，H-5’)，（71.40) 7.49-7.58 (2 H, m, H-41, H-6)，7.69-7.73 (2 H，m，H-6·， H-8), 7.83(1 H, ddd,J= 1.2, 8.0, 8.0 Hz, H-7), 8.15 (1 H, dd, J = 1.2, 8.0 Hz, H-5), 12.13(1 H, brs,NH) 1672 252 3.86 (3 H, s, OCH3), 7.14 (1 71.42 H, dd, J = 2.2, 8.0 Hz, H-4f), (71.44) 7.41-7.56 (2 H, m, H-5f, H-6), 7.74-7.88 (4 H, m, H-2', Η-ό^, H-7, H-8), 8.15 (1 H, dd, J = 1.2, 8.0 Hz, H-5), 12.55(1 H, brs, NH) 1678 252 3.83 (3 H, s, OCH3), 7.08 (2 71.42 H, d, J = 8.0 Hz, H-3f, H-5'), (71.39) 7.47 (1 H, ddd, J = 1.2, 8.0, 8.0 Hz, H-6), 7.67-7.85 (2 H, m, H-7, H-8), 8.10-8.20 (3 H, m，H-2’，H-6’，H-5)，12.42 (1 H，brs，NH) 1678 282 3.76 (3 H，s，2’-OCH3 or 3，- 68.08 OCH3)，3.87 (3 H，s，2，- (6805) OCH3 or 3'-OCH3), 7.18-7.28 4.54 12.61 (4.46) (12.52) 4.80 11.10 (4.83) (11.12) 4.80 11.10 (4.78) (11.07) 4.80 11.10 (4.81) (11.13) 5.00 9.92 (5.06) (9.88) 訂 % -42- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 490462 A7 B7 五、發明說明（40 ) 46 84 184- 207 186 (4.27) 1678 282 47 88 143- 220 1698 144 (4.70) 282 48 89 240- 226 242 (4.44) 1671 282 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 49 84 200- 221 203 (4.57) 1674 282 (3 H，m，H-4，，H-5，，H-6，)， 7.54 (1 H, ddd, J = 1.2, 8.0, 8.0 Hz, H-6), 7.70(1 H, dd, J =1.2, 8.0 Hz, H-8), 7.84 (1 H, ddd, J = 1.2, 8.0, 8.0 Hz, H-7), 8.16(1 H, dd, J= 1.2, 8.0 Hz, H-5), 12.23 (1 H, br s, NH) 3.85(3 H, s, 2f-OCH3 or 4f-OCH3)，3.89 (3 H，s，2，-OCH3 or 4，-OCH3)，6.65-6.72 (2 H，m，H-3丨，H-5，)， 7.49 (1 H, ddd, J = 1.2, 8.0, 8.0 Hz, H-6), 7.67 (1 H, dd, J =1.2, 8.0 Hz, H-8), 7.76-7.85 (2 H, m, H-6f, H-7), 8.12 (1 H, dd, J = 1.2, 8.0 Hz, H-5), 11.82 (1 H, br s, NH) 3.77(3 H，s，2，-OCH3 or 5，-OCH3), 3.81 (3 H, s, 2f-OCH3 or 5’-OCH3)，7.10-7.12 (2H，m，H-3’，H-4，)，7.29-7.31 (1 H, m, H-6'), 7.53 (1 H, ddd, J = 1.2, 8.0, 8.0 Hz, H-6), 7.71 (1 H, dd, J = 1.2, 8.0 Hz, H-8), 7.83(1 H, ddd, J = 1.2, 8.0, 8.0 Hz, H-7), 8.14 (1 H, dd, J = 1.2, 8.0 Hz, H-5), 12.10 (1 H, br s, NH) 3.84(3 H，s，3，-OCH3 or 4，-OCH3), 3.88 (3 H，s，3’-OCH3 or 4?-OCH3), 7.10 (1 H, d, J = 8.0 Hz, H-5f), 7.48 (1 H, ddd, J = 1.2, 8.0, 8.0 Hz, H-6), 7.69-7.89 (4 H, m, H-2', H-6', H-7, H-8), 8.13(1 H, dd, J = 1.2, 8.0 Hz, H-5), 12.44(1 H, brs, NH) 3.83 (6 H, s, 3'-OCH3 , 5f-OCH3), 6.69 (1 H, dd, J = 2.2, 2.2 Hz, H-4f), 7. 38 (2 H, d, J = 2.2 Hz, H-2f, H-6'), 7.52 (1 H, ddd, J = 1.2, 8.0, 8.0 Hz, H-6), 7.74(1 H, dd, J =1.2, 8.0 Hz, H-8), 7.83 (1 H, ddd, J = 1.2, 8.0, 8.0 Hz, H-7), 8.15 (1 H, dd, J = 1.2, 8.0 Hz, H-5), 12.52 (1 H, br s, NH) 68.08 (68.13) 5.00 9.92 (4.96) (9.86) -43- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 x 297公釐） 68.08 (68.00) 68.08 (67.99) 68.08 (68.11) 5.00 9.92 (4.95) (9.97) 5.00 9.92 (5.03) (9.89) 5.00 9.92 (5.06) (9.85) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝---- ·11111111 490462 A7 B7 五、發明說明（ 50 94 245- 218 248 (4.60) 1678 286.5 51 46.8 246- 217 247 (4.70) 1680 270 52 42 216- 218 218 (4.69) 1659 282 53 30 266- 253 267 (4.55) 1658 312 54 8.8 269- 249 270 (4.48) 1665 296 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 55 51 239- 224 241 (4.79) 1659 295 3.86 (3 H，s，3，-OCH3)，7.16 (1 H, dd, J = 2.5, 8.0 Hz, H-4'), 7. 46 (1 H, dd, J = 8.0, 8.0 Hz, H-5f), 7.73-7.80 (3 H，m，H-2’，Η·6’，H-8)，7.87 (1 H, dd, J = 2.5, 8.0 Hz, H-7), 8.09 (1 H, d, J = 2.5 Hz, H-5), 12.70(1 H, brs, NH) 3.84 (3 H，s，3，-OCH3), 7.13 (1 H, dd, J = 2.5, 8.0 Hz, H-4f),7.44(lH, dd, J = 8.0, 8.0 Hz, H-5f), 7.68-7.84 (5 H, m, H-2f, H-6f} H-5, H-7, H-8), 12.61 (1 H, brs, NH) 3.86 (3 H, s, 3'-OCH3 or 6-OCH3), 3.96 (3 H，s，3·-OCH3 or6-OCH3), 7.11 (1 H, dd, J = 2.5, 8.0 Hz, H-4'), 7. 29-7.49 (2H, m, H-5', H-7), 7.53 (1 H, d, J = 2.5 Hz, H-5), 7.67-7.82 (3 H, m, H-21, H-61, H-8), 12.48 (1 H, br s, NH) 3.86 (3 H, s, 3,-OCH3 or 6-OCH3 or 7-OCH3), 3.89 (3 H，s，3，-OCH3 or 6-OCH3 or 7-OCH3), 3.94 (3 H, s, 3'-OCH3 or 6-OCH3 or 7-OCH3), 7.11 (1 H, dd, J = 1.2, 8.0 Hz，H-4’)，7.21 (1 H， s, H-8), 7. 43 (1 H, dd, J = 8.0, 8.0 Hz, H-5'),7.48(l H, s, H-5), 7.73-7.78 (2 H, m, H-2', H-6'), 12.40 (1 H, br s, NH) 3.85 (3 H, s, 3,-OCH3), 6.20 (2 H, s, OCH20), 7.11 (1 H, dd, J = 2.2, 8.0 Hz, H-4'), 7. 18 (1 H, s, H-8), 7.43 (1H, dd, J = 8.0, 8.0 Hz, H-5'), 7.44 (1 H, s, H-5), 7.68-7.75 (2 H，m，H-2’，H-6’)，12.46(1 H, br s, NH) 3.01 (s, 6 H, N(CH3)2), 3.85 (3 H, s, 3f-OCH3), 7.07 (1 H, dd, J = 2.5, 8.0 Hz, H-4'), 7. 21 (1H, d, J = 2.5 Hz, H-5), 7.33 (1 H, dd, J = 2.5, 8.0 Hz, H-7), 7.41 (1 H, dd, J = 8.0, 8.0 Hz, H-5'), 7.61 (1 H, 62.84 (62.78) 3.87 9.77 (3.80) (9.81) 66.66 (66.68) 68.08 (68.04) 65.38 (65.30) 64.86 (64.89) 69.14 (69.10) 4.10 10.37 (4.08) (10.41) 5.00 9.92 (5.06) (9.86) 5.16 8.97 (5.20) (8.91) 4.08 9.46 (4.03) (9.50) 5.80 14.23 (5.77) (14.20) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 一裝---- 訂--------- -44- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 x 297公釐） 490462 A7 B7 五、發明說明（42 56 40 261- 227 263 (4.54) 1653 57 55 222- 223 1668 225 (4.71) 58 57 212- 224 1663 215 (4.61) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 59 48 254- 225 1673 257 (4.66) d, J = 8.0 Hz, H-8), 7.70-7.76 (2H，m，H-2’，H-6’)，12.26(1 H，brs，NH) 321 1.96-2.03 (4 H, m, 71.01 5.96 13.08 CH2CH2NCH2CH2), 3.30- (71.05) (5.90) (13.02) 3.34 (4 H, m, CH2NCH2), 3.85 (3 H, s, 3,-OCH3), 7.03-7.17 (3 H, m, H-4f, H-5, H-7), 7.41 (1 H, dd,J = 8.0, 8.0 Hz, H-51), 7.60 (1H, d, J = 8.0 Hz, H-8), 7.68-7.75 (2 H, m，H-2’，H-6’)，12.22(1 H，br s，NH) 335 1.55-1.60 (6 H, m, 71.62 6.31 12.53 (CH2)2CH,NCH2CH2), 3.25- (71.59) (6.28) (12.50) 3.30 (4 H, m, CH2NCH2), 3.85 (3 H，s，3，-OCH3)，7.09 (1 H, dd, J = 2.2, 8.0 Hz, H-41), 7.38-7.46 (2 H, m, U-5\ H-5), 7.53 (1 H, dd, J = 2.2, 8.0 Hz, H-7), 7.60 (1 H, d, J ==8.0 Hz, H-8), 7.70 -7.76 (2 H, m, H-2*, H-6f), 12.33 (1 H, br s, NH) 349 0.93 (3 H, d, J = 6.2 Hz, 72.18 6.63 12.03 CH3CH(CH,) 2N(CH2) 2)，（72.15) (6.60) (12.09) I. 20-1.26，1.68-1.74 (2 H each, both m, (NCH2CH2)X 2), 1.48-1.58 (1 H, m, CH3CH(CH2) 2N(CH2) 2), 2.71-2.82, 3.75-3.83 (2 H each, both m, (NCH2) X 2), 3.85 (3 H, s, 3,-OCH3), 7.09 (1 H, dd, J = 2.2, 8.0 Hz, H-4’)，7.38-7.46 (2 H，m，H-5，， H-5), 7.54 (1 H, dd, J = 2.2, 8.0 Hz, H-7), 7.61 (1 H, d, J = 8.0 Hz, H-8), 7.71 -7.77 (2 H, m, H-2f, H-6f), 12.34 (1 H, br s, NH) 337 3.23 (4 H, t, J = 4.7 Hz, 67.64 5.68 12.46 CH2NCH2), 3.75 (4 H, t, J = (67.61) (5.70) (12.50) 4.7 Hz, CH2OCH2), 3.85 (3 H, s, 3'-OCH3), 7.10 (1 H, dd, J = 2.5, 8.0 Hz, H-41), 7.43 (1 H, dd, J = 8.0, 8.0 Hz, H-5f), 7.45 (1 H, d, J = 2.5 Hz, H-5), 7.57 (1 H, dd, J =2.5, 8.0 Hz, H-7), 7.65 (1 H, d, J = 8.0 Hz, H-8), 7.71-7.77 (2 H, m, H-2’，H-6’)， 12.39(1 H, brs, NH) -45- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 一裝--------訂------ MU462

五、 發明說明（ 43 60 90 163- 222 1668 165 (4.54) 61 89 148- 222 150 (4.50) 1647 62 93 188- 225 190 (4.64) 1655 63 78 232- 224 233 (4.54) 1651 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 64 86 182- 225 183 (4.45) 1663 254 3.83 (3 H，s，OCH3)，6.02 (1 H, s, H-2), 6.66 (1 H, dd, J = 7.5, 7.5 Hz, H-6), 6.74-6.80 (2 H, m, H-8, N,H), 6.94 (1 H, dd, J = 7.5, 7.5 Hz, H-5f), 7.04 (1 H, d, J = 8.0 Hz, H-3f), 7.18-7.41 (3 H, m, H-4f, H-6f, H-7), 7.62 (1 H, dd, J = I. 0, 1.0 Hz, H-5), 8.02 (1 H, br s, N3H) 254 3.73 (3 H, s, OCH3), 5.73 (1 H, s, H-2), 6.68 (1 H, dd, J = 7.5, 7.5 Hz, H-6), 6.77 (1 H, d, J = 8.0 Hz, H-8), 6.90 (1 H, dd, J = 8.0, 2.5 Hz, H-4'), 7.04-7.07 (2 H, m, H-2f, H-6f), 7.15 (1 H, br s, N,H), 7.21-7.33 (2 H, m, H-5f, H-7), 8.15(1 H, dd,J= 1.0, 7.5 Hz, H-5), 8.34 (1 H, br s, N3H) 254 3.73 (3 H，s，OCH3), 5.70 (1 H, s, H-2), 6.67-6.75 (2 H, m, H-6, H-8), 6.91-6.95 (2 H, m, H-3，，Η·5’)，7.00 (1 H，br s, N,H), 7.24 (1 H, ddd, J = 1.5, 8.0, 8.0 Hz, H-7), 7.36-7.62 (2 H, m, H-2', H-6f), 7.60 (1 H, dd, J = 1.2, 7.5 Hz, H-5), 8.19 (1 H, br s, N3H) 284 3.78 (3 H, s, 2,-OCH3 or 3f- OCH3), 3.81 (3 H, s, 2f-OCH3 or 3,-OCH3), 6.03 (1 H, s, H-2), 6.63-6.75 (2 H, m, H-6, H-8), 6.79(1 H, br s, N,H), 7.04-7.10 (3 H, m, H-4\ H-5', H-6f), 7.23 (1 H, ddd, J = 1.0, 8.0, 8.0 Hz, H-7), 7.62(1 H, dd, J= 1.0, 8.0 Hz, H-5), 8.02 (1 H, br s, N3H) 284 3.75 (3 H, s, 2f-OCH3 or 4f- OCH3), 3.81 (3H，s，2’-OCH3 or 4'-OCH3), 5.94 (1 H, s, H-2), 6.49-6.77 (5 H, m, H-3’，H-5’，H-6，H-8, N,H ), 7.21 (1 H, ddd, J = I. 0, 8.0, 8.0 Hz, H-7), 7.31 (1 H, d, J = 8.0, H-6'), 7.61 (1 H, dd, J = 1.0, 7.5 Hz, H-5), 7.94(1 H, brs, N3H) 70.85 (70.91) 70.85 (70.81) 70.85 (70.79) 67.59 (67.55) 67.59 (67.53) 5.55 (5.53) 5.55 (5.49) 5.55 (5.59) 5.67 (5.71) 5.67 (5.63) 11.02 (11.10) 11.02 (11.08) 11.02 (10.95) 9.85 (9.80) 9.85 (9.81) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝--------訂---------这 -46 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 〜462五、 發明說明（44 ) 65 75 163- 223 165 (4.53) 1653 A7 B7 284 66 80 210- 223 213 (4.61) 1655 284 67 93 89- 223 92 (4.54) 1658 284 68 95 193- 223 195 (4.57) 1658 288.5 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 3.66 (3 H，s，2，-OCH3 or 5，- 67.59 5.67 9.85 OCH3)，3·78 (3 H, s，2，- (67·54) (5.70) (9 88) OCH3 or 5’-OCH3)，5·98 (1 H, s, H-2), 6.68 (1 H, dd, J = 7.5, 7.5 Hz, H-6), 6.77 (1 H, d, J = 8.0 Hz, H-8), 6.84-7.00 (4 H, m, Η-3',Η-4', H-6', N^), 7.23(1 H, ddd, J= 1.0, 8.0, 8.0 Hz, H-7), 7.63 (1 H, dd, J = 1.0, 7.5 Hz, H-5), 8.02(1 H, brs,N3H) 3.73 (3 H, s, 3、OCH3 or 4，- 67.59 5.67 9.85 OCH3), 3.74 (3 H, s, 3f- (67·51) (5·70) (9·78) OCH3 or 4,-OCH3), 5.70 (1 H, s, H-2), 6.66 (1 H, dd, J = 7.5, 7.5 Hz, H-6), 6.75 (1 H, d, J = 7.5 Hz, H-8), 6.91-7.02 (3 H，m, H-2，，H-5，，H-6，)， 7.12(1 H，brs，N丨H)，7.25(1 H, ddd, J = 1.0, 7.5, 7.5 Hz, H-7), 7.61 (1 H, dd, J = 1.0, 7.5 Hz, H-5), 8.19(1 H,brs, n3h) 3.72 (6 H，s，3，-OCH3, 5，· 67.59 5.67 9.85 OCH3)，5.67 (1 H，s，H-2)，（67.63) (5.66) (9.88) 6.46 (1 H, s, H-4f), 6.64-6.77 (4 H, m, H-2f, H-6\ H-6, H-8), 7.13 (1 H, br s, N,H), 7.24 (1 H, ddd, J = 1.0, 7.5, 7.5 Hz, H-7), 7.60(1 H, dd, J =1.0, 7.5 Hz, H-5), 8.30 (1 H, br s, N3H) 3.74 (3 H, s, OCH3), 5.75 (1 62.40 4.54 9.70 H, s, H-2), 6.79 (1 H, d, J = (62.48) (4.50) (9.78) 8.0 Hz, H-8), 6.92(1 H, dd, J =2.5, 8.0 Hz, H-4f), 7.02- 7.05 (2 H, m, H-2’，H-6’)， 7.25-7.36 (3 H, m, H-5f, H-7, N.H), 7.53 (1 H, d, J = 2.5 Hz, H-5), 8.50 (1 H, br s, N,H) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) · n 1 n H ·1 >1 ϋ^OJ· n 1 «I ·1 n ϋ I ·

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 x 297公釐） 490462 A7 B7 五、發明說明（ 45 表2· 4-烷氧基-2-苯基硿唑啉及NM完基-2-苯基-4-Π查唑 啉酮之物理及光譜數據

化合產率 mp UV，Amax IR，yc=0 MS(M+) !H-NMR (DMS〇-^6) δ 物（％) (°C) (MeOH) (cm'1) rnlz (log e)_^_

理論値，％ (計算値） C Η N 69 30 50-51 254 (4.50) 80 54-56 255 (4.53) 71 90 64-65 256 (4.52) 1763 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 72 89 63-66 254 (4.46) 1728 236 4.26 (3 Η, s, CH3), 7.45- 7.54 (4 H, m, H-6, H-3', H-4', H-5f), 7.79 (1 H, ddd, J =1.2, 8.0, 8.0 Hz, H-7), 7.98 (1 H, dd, J = 1.2, 8.0 Hz, H-8), 8.13 (1 H, dd, J =1.2, 8.0 Hz, H-5), 8.57-8·62 (2 H, m，H-2，，H-6’） 250 1.56 (3 H, t, J = 7.0 Hz, CH3)，4.76 (2 H，q，J = 7.0 Hz, CH2), 7.45-7.53 (4 H, m, H-6, H-3f, H-4\ H-5'), 7.79 (1 H, ddd, J = 1.2, 8.0, 8.0 Hz, H-7), 7.97 (1 H, dd, J = 1.2, 8.0 Hz, H-8), 8.16 (1 H, dd, J = 1.2, 8.0 Hz, H-5), 8.54-8.59 (2 H，m，H-2，，H-6，） 308 1.26 (3 H, t, J = 7.0 Hz, CH3), 4.26 (2 H, q, J = 7.0 Hz, CH2CH3), 5.16 (2 H, s, OCH2CO), 7.46-7.57 (4 H, m, H-6, H-3', H-4', H-5f), 7.82 (1 H, ddd, J = 1.2, 8.0, 8.0 Hz, H-7), 8.00 (1 H, dd, J = 1.2, 8.0 Hz, H-8), 8.23 (1 H, dd, J = 1.2, 8.0 Hz, H-5), 8.48-8.53 (2 H, m, H-2', H-61) 336 1.22 (3 H, t, J = 7.0 Hz, CH3), 2.25-2.32 (2 H, m, O CH2CH2CH2CO), 2.62 (2 H, t, J = 7.0 Hz, O CH2CH2CH2CO), 4.12 (2 H, q, J = 7.0 Hz, CH2CH3), 4.75 (2 H, t, J = 7.0 Hz, 76.25 5.12 11.86 (76.33) (4.99) (11.72) 76.78 5.64 11.19 (76.64) (5.68) (11.09) 70.12 5.23 9.09 (70.29) (5.31) (9.13) 71.41 5.99 8.33 (71.35) (5.86) (8.28) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) ’裝—— 訂-------- •48- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 x 297公釐） 490462 A7 B7 五、發明說明（ 46 73 79 62-63 254 (4.62) 1728 350 74 84 154- 210 155 (4.54) 280 75 83 85-86 213 (4.53) 280 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 76 85 65-66 211 (4.54) 280 OCH2CH2CH2CO), 7.43- 7.55 (4 H, m, H-6, H-3f, H-4’，H-5’)，7.79 (1 H, ddd，J =1.2, 8.0, 8.0 Hz, H-7), 7.97 (1 H, dd, J = 1.2, 8.0 Hz, H-8), 8.13 (1 H, dd, J =1.2, 8.0 Hz, H-5), 8.51- 8.58 (2 H, m, H-2f, H-6f) 1.24 (3 H, t, J = 7.0 Hz, 71.98 6.33 7.99 CH3), 1.90-1.99 (4 H, m, O (71.86) (6.39) (7.92) CH2(CH2)2CH7CO), 2.44 (2 H, t, J = 7.0 Hz, O (CH〇3CHX〇), 4.12 (2 H, q, J = 7.0 Hz, CH2CH3), 4.72 (2 H, t, J = 7.0 Hz, OCH2(CH2)3CO), 7.45- 7.53 (4 H, m, H-6, H-3', H-4\ H-5f), 7.79 (1 H, ddd, J =1.2, 8.0, 8.0 Hz, H-7), 7.97 (1 H, dd, J = 1.2, 8.0 Hz, H-8), 8.15 (1 H, dd, J =1.2, 8.0 Hz, H-5), 8.53- 8.58 (2 H, m, H-2', H-6') l. 11 (3 H, t, J = 7.0 Hz, 72.84 5.75 9.99 CHXH3), 3 63 (i H, m, J (72.80) (5.82) (9.97) =7.0 Hz, CH2), 3.79 (3 H, s, OCHj), 4.22 (1 H, m, J = 7.0 Hz, CH2X 6.99(1 H, d, J 二 8.0 Hz, H-3丨)，7.08 (1 H，ddd，J = 1.2, 8.0, 8.0 Hz, H-6)，7.44-7.54 (3 H， m, H-7, H-8, H-51), 7.73 (2 H, m, H-4，，H-6，)，8.32 (1 H, dd, J = 1.2, 8.0 Hz, H-5) 1.55 (3 H, t, J = 7.0 Hz, 72.84 5.75 9.99 CH2CH3), 3.92 (3 H, s, (72.78) (5.89) (9.91) OCH3), 4.75 (2 H, q, J = 7.0 Hz, CH:), 7.03 (1 H, ddd, J - 1.2, 1.2, 8.0 Hz, H-6f), 7.40 (1 H, dd, J = 8.0, 8.0 Hz, H-5丨)，7.49 (1 H, ddd, J = 1.2, 8.0, 8.0 Hz, H-6), 7.79(1 H, ddd, J =1.2, 8.0, 8.0 Hz, H-7), 7.97 (1 H, dd, J = 1.0, 8.0 Hz, H-8), 8.13-8.20 (3 H, m, H-5, H-2’，H-4’） 1.54 (3 H, t, J = 7.0 Hz, 72.84 5.75 9.99 CH2CH3), 3.87 (3 H, s, (72.89) (5.67) (9.87) OCH3), 4.74 (2 H, q, J == 7.0 Hz, CH2), 7.00 (2 H, d, J = 8·0 Hz，H-3，，H-5，)， -49- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注咅？事項再填寫本頁) 490462 A7 B7 五、發明說明（47 77 66 125- 229 127 (4.52) 78 11 111- 207 113 (4.43) 79 1.3 130- 226 1682 132 (4.67) 80 11 79-82 223 (4.51) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 81 8.8 131- 226 134 (4.55) 7.44 (1 H, ddd, J = 1.2, 8.0, 8.0 Hz, H-6), 7.76 (1 H, ddd, J = 1.2, 8.0, 8.0 Hz, H-7), 7.92 (1 H, dd, J = 1.2,8.0 Hz, H-8), 8.12(1 H, dd, J = 1.2, 8.0 Hz, H-5), 8.53 (2 H, d, J = 8.0 Hz，H-2，, H-4，） 1682 236 3.47 (3 H, s, CH3), 7.47- 76.25 5.12 11.86 7.56 (6 H, m, H-6, H-2f, H- (76.10) (5.20) (11.72) 3f, H-41, H-5', H-6'), 7.71-7.74 (2 H, m, H-7, H-8), 8.30(1 H, dd, J= 1.2, 8.0 Hz, H-5) 1675 250 1.19 (3 H, t, J = 7.0 Hz, 76.78 5.64 11.19 CH3), 4.01 (2H, q, J = 7.0 (76.89) (5.70) (11.23) Hz, CH2), 7.47-7.51 (6 H, m，H-6, H-2，，H-3’，H-4，， H-5f，H-6’)，7.70-7.74 (2 H, m, H-7, H-8), 8.31 (1 H, dd, J = 1.2, 8.0 Hz, H-5) 308 1.23 (3 H, t, J = 7.0 Hz, 70.12 5.23 9.09 CH3), 4.19 (2 H, q, J = 7.0 (70.04) (5.33) (9.00) Hz, CH，CH3), 4.62 (2 H, s, NCH2), 7.46-7.57 (6 H, m, H-6, H-2f, H-3', H-4', H-5,，H-6，)，7.75-7.78 (2 H， m, H-7, H-8), 8.30 (1 H, dd,J= 1.2, 8.0 Hz, H-5) 1686 280 1.21 (3 H, t, J = 7.0 Hz, 72.84 5.75 9.99 CH2CH3), 3.84 (3 H, s, (72.79) (5.86) (9.87) OCH3), 4.02 (2 H, q, J = 7.0 Hz, CH2), 7.00-7.10 (3 H, m, H-2，，H-4’，H-6，)， 7.37-7.52 (2 H, m, H-6, H-5'), 7.68-7.74 (2 H, m, H-7, H-8), 8.31 (1 H, dd, J = I. 2, 8.0 Hz, H-5) 1674 280 1.19 (3 H, t, J = 7.0 Hz, 72.84 5.75 9.99 CH2CH3), 3.85 (3 H, s, (72.80) (5.77) (9.92) OCH3), 4.05 (2 H, q, J = 7.0 Hz, CH2), 7.00 (2 H, J =8.0 Hz, H-31, H-5f), 7.42-7.51 (3 H, m, H-6, H-2', H-6’)，7.66-7_77(2H，m，H-7, H-8), 8.29 (1 H, dd, J = 1.2, 8.0 Hz，H-5)_ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝---1 訂--------- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -50- 490462 A7 B7 五、發明說明（48 ) 表 3· 6,7,2’，3’，4\5、取代-2-苯基-4-岐唑啉酮（42-59)及 6,2’，3·，4\5·-取代-2,3-雙氫-2-苯基-4-口2 唑啉酮（60-68) 之體外細胞致毒活性 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 化合物 lA9b HCT-8b A-549b ED50("g/ml)a U-87- HOS KBb MGb ΚΒ- VINb PC3b MCF-7b SKMEL-2 請 先 閱 I 1 1 1 42 > 20(8)( ΝΑ >20(15) ΝΑ >20(5) >20(6) >20(9) ΝΑ >20(23) ΝΑ 背 1 43 >20(27) >20(8) >20(21) ΝΑ >20(6) ΝΑ >20(12) >20(16) 26 >20(12) S 1 44 >20(22) >20(29) >20(42) ΝΑ >20(21) >20(23) >20(40) >20(32) >20(42) >20(24) 之 1 I 45 ΝΑ ΝΑ >20(19) ΝΑ ΝΑ ΝΑ >20(11) >20(17) >20(24) ΝΑ 注 1 I 46 ΝΑ >20(14) >20(31) >20(16) >20(7) >20(5) >20(8) >20(16) >20(15) >20(5) 畫 | 47 >20(19) >20(21) >20(33) ΝΑ >20(20) >20(10) >20(21) >20(30) >20(20) >20(9) 爭 項 1 48 >20(34) >20(15) >20(29) ΝΑ >20(11) >20(12) >20(22) >20(26) >20(48) >20(15) 7\ 再 49 ΝΑ ΝΑ >20(29) ΝΑ ΝΑ ΝΑ >20(12] 1 >20(8) >20(28) >20(5) 填 50 >20(29) 6.0 3.2 10.0 17.0 11.5 6.5 4.5 17.8 4.8 裝 51 ΝΑ >20(31) 16.5 >20(30) ΝΑ >20(39) 18.0 20.0 >20(40) >20(41) | 52 3.4 16.5 12.5 >20(11) >20(43) 17.5 3.5 >20(37) 8.0 >20(49) 貝 1 I 53 16.5 >20(37) >20(49) >20(28) >20(27) >20(45) 19.8 15.0 12.0 18.0 層 | 54 >20(26) ΝΑ >20(11) ΝΑ >20(6) >20(16) >20(19) >20(12) >20(40) >20(14) 1 55 0.49 1.05 14.0 >20(17) >20(46) 10.0 0.42 15.0 0.85 19.0 1 56 0.09 0.06 0.50 13.8 7.0 0.23 0.10 15.0 0.22 0.09 1 ， 57 0.90 4.3 2,8 9.0 15.4 10 0.60 10.0 8.5 4.5 1 58 0.80 4.0 6.0 15.5 14.4 10.8 2.5 12.4 10.0 7.5 訂 59 3.8 10.4 10.9 20 12.5 8.2 3.7 13.4 4.5 4.8 w 4 • » 60 14.7 >20(21) >20(44) ΝΑ >20(38) >20(32) 10.2 >20(30) >20(48) <20(52)d 1 61 1.0 1.5 3.0 >20(35) >20(42) 3.0 1.20 >20(43) >20(48) >20(49) 1 | 62 20 >20(19) >20(34) ΝΑ >20(13) >20(14) >20(39) >20(14) >20(44) >20(23) 1 I 63 11.4 >20(39) >20(39) ΝΑ >20(34) >20(41) 8.6 >20(20) >20(40) <20(53) 屢 I 64 12.5 >20(29) >20(43) ΝΑ >20(40) >20(43) 7.6 >20(28) >20(44) >20(37) 1 65 10.0 >20(32) >20(42) >20(5) >20(40) >20(40) 8.4 >20(22) >20(42) >20(44) 1 66 14.6 >20(25) >20(41) ΝΑ >20(24) >20(28) 16.0 >20(30) 20 >20(24) 1 λΑ 67 1.92 3.0 5.0 >20(37) >20(41) 4.7 1.6 >20(44) >20(49) 4.4 % 68 0.27 0.48 0.6 >20(37) 20.0 0.95 0.42 2.5 16.0 <2.5(56) a ED5。爲可使細胞數在培養3至4天後減少50%的化合物濃度。· b人類卵巢 癌(1A9)、迴盲腸癌(HCT-8)、肺癌(A-549)、神經膠母細胞瘤(U-87-MG)、骨癌 (HOS)、鼻咽表皮樣癌(KB)、P-gp-表現之鼻咽表皮樣癌(KB-VIN)、***癌 (PC3)、乳癌（MCF-7)及黑色瘤(SKMEL-2)等細胞株，在最高測試濃度下，進 行ED5()測定之抑制情形(括號內爲所觀察到的百分比）。d高原期之劑量呈現 明顯的最大作用。雖然以低劑量可達50%之抑制效果’但是高原期涵蓋廣泛 之劑量範圍(括號內爲抑制値範圍）。 -51 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 490462 A7 _B7_ 五、發明說明（49 ) 表 4. 6,7,2^，4'，5，-取代-2-苯基-4_口查唑啉酮（42-59)及 6,2’，3\4’，5^取代-2,3-雙氫-2·苯基-4-p查唑啉酮（60-68) 之抗微管聚合活性

化合物 Re R7 r2. r3. r4, r5. ITPa ic50("m) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 42 Η Η 43 Η Η 44 Η Η 45 Η Η 46 Η Η 47 Η Η 48 Η Η 49 Η Η 50 C1 Η 51 F Η 52 och3 Η 53 och3 och3 54 OCH.O 55 Η 56 Ο Η 57 ο Η 58 〇-ch3 Η 59 /~\ nw° Η 60 Η Η 61 Η Η 62 Η Η 63 Η Η 64 Η Η 65 Η Η 66 Η Η 67 Η Η 68 秋水仙鹼 C1 Η Η II η Η Η H »1 II i n n η η T1 chhccchhhhhhhho ooo rrp rp Η Η Η Hchhhchchchhhho ooo 3 3 33333333 3 TIHiHlrlHHHHHHHH H hchchhcccccccc co o oooooooo o 3 3 3 3 3 3 3 3 Η Η Η ίΗΠΗΙΙΗΗΗ c c c hchchhccco o o o o ooo hhochochochhhhhhh η η η h hhochhochhochhh Η 17± 1 Η 12 ± 1 Η 12±2 Η 15 士 0.07 Η 10 ±0.4 och3 11 ±0·9 Η 15 土 2 och3 11 ±2 Η 12 ±0.9 Η 14±2 Η 6.7 士 0.08 Η 9·1 土 0.9 Η 9·6 土 0·6 Η 3.5 土 0.3 Η 1.1 土 0.02 Η 9.3 土 2 Η 12 ±0.3 Η 4.4 士 0.1 Η >40 Η 5·6± 1 Η >40 Η >40 Η >40 och3 32 士 4 Η >40 och3 12 士 3 Η 1.5 ±0.01 0.8 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝—— 訂---------繞 %, a ITP =微管聚合反應的抑制. -52- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 490462 ΚΙ _Β7___ 五、發明說明（5〇 ) 表5化合物69及70對由凝血酶（thrombm)、花生四烯酸 (arachidonic acid，AA)、膠原蛋白（collagen)及血小板活 化因子（platelet-activating factor，PAF)所引導的血小板 凝集的抑制活性a) 化合物^g/ml) 凝集百分比 凝血酶 AA 膠原蛋白 PAF 广''對照 92.9±0.7(4) 89.2±0.9(5) 90.3±0.8(4) 91·9±0·6(4) 』9,00 2.8 土 2.3(3)*** 0.0±0.0(4)*** 0.0±0.0(4)*** 2·1±1.8(4)*** 〜/ 50 13.3±5.3(3)*** 38.1±8.3(4)*** 20 88.1±0.8(3)*** 0.0±0.0(4)*** 87·9±1·8(4)*** 10 0.0±0.0(4)*** 1.1 土 0.9(4)*** 5 15.0±11.8(4)*** 31.5±6.4(4)*** 2 35.3 土 14.9(4)*** 43.0±6.4(4)*** 1 65.0±8.1(4)*** 52.6±7.5(4)*** 0.5 86.0±1.2(4)*** 76.2±3.7(4)*** 0.2 88.4±1.9(4)*** ic5〇 7.20//Μ 8.47Μ 照 92.9±0.7(4) 89.2±0.9(5) 90·3±0·8(4) 91.9±0.6(4) (79^00 11.7±6.5(4)*** 0.0±0.0(5)*** 0·0±0·0(4)*** 2.1±1·8(4)… 〆50 75.1±7.3(4)* 0.0±0.0(4)*** 19.8±7.0(4)*** 20 91.5±1.2(4) 10.3±6.0(4)*** 88.8 土 1·0(4)* 10 19.3±9.8(4)*** 5 30.1±9.0(4)*** 2 35.0±10.3(4)** * 1 0.0±0.0(5)*** 47.1±6.6(4)*** 0.5 33.8 土 13.4(5)*** 63.9±7.4(4)** 0.2 76.9 土 5.4(5)* 78.5±4.7(4)* 0.1 85.5±2.0(5) 86.4±2.9(4) ic5〇 1.60//Μ 9.20//Μ a)血小板懸浮液與待測化合物或0.5% DMSO在37°C培養一分鐘，接著凝血酶 (0.1 U/ml)，AA(100//M)，膠原蛋白(10/ig/ml)或 PAF (2 ng/ml)被加入以起 始凝集。表中的値以平均値±S· E表示，n=3-6。*·· ρ<0·05, Ρ<0·01，***·· Ρ0.001。 -53- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 χ 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

490462

7 7 A B IV. 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 五、發明說明（51 ) 表6化合物69至79對由AA所引導的血小板凝集的抑制 活性a) 化合物 Rr R2， r4， R Ι〇50(μΜ) 69 Η Η Η ch3 7.20 70 Η Η Η c2h5 1.60 71 Η Η Η CH2C〇〇Et 26.95 72 Η Η Η (CH2)3C〇〇Et 30.65 73 Η Η Η (CH2)4C〇〇Et 173.43 74 〇ch3 Η Η c2h5 214.35 75 Η 〇ch3 Η c2h5 69.29 76 Η Η 〇ch3 c2h5 5.36 77 Η Η Η ch3 182.63 78 Η Η Η c2h5 184.00 79 Η Η Η CH2C〇〇Et >270 Indomethacin 0.25 阿斯匹靈 20.00 a)血小板懸浮液與待測化合物或0.5°/。DMSO在37°C培養一分鐘，接著AA (100 //M)被力[[入以起始凝集。Indomethacin及阿斯匹靈爲正對照。表中的値以平均 値土S. E.表示，n=3-6。 -54- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) ’裝------- —訂---------, 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐）

Claims (1)

1. 490462 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

   式中： R2，，R3’，R4,及 R5,獨立地爲 H，（CH2)nCH3, OH， 0(CH2)nCH3, X，或 NR8R9，其中n = 〇~4的整數，X爲F，Cl， 或Br，及仏8及119獨立地爲H或（CH2)nCH3，其中n =0〜4的整 數；及 反6 及 R7 獨立地爲 H，（CH2)nCH3, OH，0(CH2)nCH3, X， nr8r9, nQ , {^，或 Ν〇";或116及一起爲-〇ch2o-， 其中η，X，118及119的定義同上。 2. 如申請專利範圍第1項的化合物，其中R2，，R3，，R4, 及R5,獨立地爲Η或0(CH2)nCH3，且其中至少有一個爲 0(CH2)nCH3，其中η = 0〜4的整數。 3. 如申請專利範圍第2項的化合物，其中R2，，R4,及R5, 爲Η，及R3,爲甲氧基。 4. 如申請專利範圍第2項的化合物，其中R6及R?獨立 地爲 H，0(CH2)nCH3, X，NR8R9，nQ，Q，或 ;或 • 55 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 490462 Α8 Β8 C8 (2002年3月修正） ______ D8 六、申請專利範圍 R6及R7 —'起爲- OCH2O-’其中η，X’ R8及R9的定義同申請 專利範圍第1項。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 5·如申請專利範圍第3項的化合物，其中：^6及117獨立 地爲 H，0(CH2)nCH3, X，NR8R9，NQ，〇，或 >Q0 ;或 R6及R7—起爲-0CH20-，其中η，X，118及119的定義同申請 專利範圍第1項。 6.如申請專利範圍第4項的化合物，其中R7爲Η，及116 爲NR8R9，N^]，0,或nQd;其中118及119的定義同申請 專利範圍第1項。 7. 如申請專利範圍第6項的化合物，其中、及化9爲甲 基。 8. 如申請專利範圍第5項的化合物，其中R7爲H，及化6 爲NR8R9，N^=，^，或\);其中R8及R9的定義同申請 專利範圍第1項。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 9. 如申請專利範圍第8項的化合物，其中118及化9爲甲 基。 10. 如申請專利範圍第5項的化合物，其中R6及R7獨立 地爲Η，甲氧基或X，其中X的定義同申請專利範圍第1項。 -56 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 490462 Α8 Β8 C8 D8 (2002年3月修正） 六、申請專利範圍 11 · 一種用於治療癌症的醫藥組合物，該癌症係選自 人類卵巢癌（1A9)、P-gp-表現之鼻咽表皮樣癌（KB-VIN)、鼻 咽表皮樣癌（KB)、黑色瘤（SKMEL-2)、迴盲腸癌（HCT-8)、 乳癌（MCF-7)及肺癌（A-549)所組成之族群，該醫藥組合物 包含有效治療量的申請專利範圍第1項至第10項中任一項 的化合物或其藥學上可接受的鹽作爲活性成份，和與之混 合的用於該活性成份的藥學上可接受的載體或稀釋劑。 12. —種具下式（II)的化合物： (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

   經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 式中： R2，，R3，，R4,及 R5,獨立地爲 H，（CH2)nCH3, OH， 0(CH2)nCH3, X，或 NR8R9，其中 η = 0〜4 的整數，X爲 F，C1， 或Br，及118及119獨立地爲Η或（CH2)nCH3，其中η =0〜4的整 數；及 R6 及 R7 獨立地爲 H，（CH2)nCH3, OH，0(CH2)nCH3, X， NR8R9, nQ , (3，或"Ο ;或仏6 及 R7 一起爲-〇CH20-， 其中η，X，118及119的定義同上。 -57 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 490462 A8 B8 C8 (2002年3月修正) D8 六 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 申請專利範圍 * 13. 如申請專利範圍第u項的化合物，其中]^7爲η。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 14. 如申請專利範圍第I3項的化合物，其中r2，，r3，， R4’及Rv獨立地爲Η或0(CH2)nCH3，且其中至少有一個爲 〇(CH2)nCH3，其中n = 〇〜4的整數。 15·如申請專利範圍第14項的化合物，其中r2，，r4，及 Rs’爲Η，及R3,爲甲氧基。 16·如申請專利範圍第15項的化合物，其中116爲乂，其 中X的定義同申請專利範圍第1項。 17. 如申請專利範圍第16項的化合物，其中X爲C1。 18. —種用於治療癌症的醫藥組合物，該癌症係選自 人類卵巢癌（1A9)、P-gp-表現之鼻咽表皮樣癌（KB-VIN)、鼻 咽表皮樣癌（KB)、黑色瘤（SKMEL-2)、迴盲腸癌（HCT-8)、 乳癌（MCF-7)及肺癌（A-549)所組成之族群，該醫藥組合物 包含有效治療量的申請專利範圍第12項至第1 7項中任一項 的化合物或其藥學上可接受的鹽作爲活性成份，和與之混 合的用於該活性成份的藥學上可接受的載體或稀釋劑。 19. 一種具下式（III)或（IV)的化合物： -58 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 490462 六 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A8 B8 C8 (2002年3月修正） D8 申請專利範圍

   (III) (IV) 式中： R2’，R3，，R4’及 R5’獨立地爲 H，（CH2)nCH3, OH， 〇(CH2)nCH3, X，或 NR8R9，其中 n = 〇〜4 的整數，X爲 F，C1， 或Br，及Rs及R9獨立地爲Η或（CH2)nCH3，其中η =0〜4的整 數； R 爲（CH2)nCH3 或（CH2)nCOO(CH2)nCH3，其中 η 的定義 同上；及 R6 及 R7 獨立地爲 H，（CH2)nCH3, OH, 0(CH2)nCH3, X， nr8r9, nQ , (3,或 NG。；或以及尺7一起爲_0CH20-，其 中η，X，R8及R9的定義同上。 20. 如申請專利範圍第19項的化合物，其中Rv，R6及 R7均爲Η。 21. 如申請專利範圍第20項的化合物，其中η爲0或1。 22. 如申請專利範圍第21項的化合物，其具有式（ΠΙ) 的結構。 -59 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） --------------^^衣-------•—訂---------線 j (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 490462 A8 § (2002年3月修正) D8 六、申請專利範圍 23·如申請專利範圍第22項的化合物，其中R爲 (CH2)nCH3，其中 η爲 0或 1。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 24. 如申請專利範圍第23項的化合物，其中R2，，R3，， 及R4,獨立地爲Η或OCH3。 25. 如申請專利範圍第24項的化合物，其中R2，，R3,及 R4,均爲Η。 26. 如申請專利範圍第24項的化合物，其中R2,及R3， 均爲 Η，R4,爲 〇CH3。 27. 如申請專利範圍第26項的化合物，其中R爲 CH2CH3 〇 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 28. —種用於抑制血小板凝集的醫藥組合物，包含有 效治療量的申請專利範圍第1 9項至第27項中任一項中的化 合物或其藥學上可接受的鹽作爲活性成份，和與之混合的 用於該活性成份的藥學上可接受的載體或稀釋劑。 -60 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐）