TW202308692A

TW202308692A - 包含帕博利珠單抗（ｐｅｍｂｒｏｌｉｚｕｍａｂ）的藥學組成物及其用途

Info

Publication number: TW202308692A
Application number: TW111115864A
Authority: TW
Inventors: 艾麗娜科斯迪安; 納塔西亞安卓瓦; 葉卡琳娜洛姆科娃; 亞歷山大伊科列夫; 狄密崔摩羅佐
Original assignee: ***聯邦商拜奧卡德聯合股份公司
Priority date: 2021-04-27
Filing date: 2022-04-26
Publication date: 2023-03-01
Also published as: CL2023003209A1; ECSP23081880A; CO2023014166A2; MX2023012745A; WO2022231481A1; MA62939A1; CN117835965A; CR20230527A; AR125470A1; EP4329729A1

Abstract

本發明涉及藥學和醫學領域，特別地涉及抗PD-1抗體帕博利珠單抗(pembrolizumab)的藥學組成物，其可以是水性或凍幹的組成物。本發明進一步涉及所述組成物用於治療惡性瘤或感染性疾病的用途，以及所述組成物用於生產旨在用於治療惡性瘤或感染性疾病的醫藥產品的用途。

Description

包含帕博利珠單抗（ＰＥＭＢＲＯＬＩＺＵＭＡＢ）的藥學組成物及其用途

本發明涉及藥學和醫學領域，特別地涉及抗PD-1抗體帕博利珠單抗(pembrolizumab)的藥學組成物，其可以用於治療惡性瘤或感染性疾病。

程式性細胞死亡蛋白1 (PD-1)是CD28受體家族的抑制成員，並且位於T淋巴細胞、B細胞、單核細胞、NK細胞和樹突細胞的細胞表面上(Jin H.T., Ahmed R., Okazaki T. Role of PD-1 in regulating T-cell immunity. Curr Top Microbiol Immunol. 2011; 350: 17-37)。PD-1是來自免疫球蛋白家族的跨膜受體，並且由288個胺基酸組成。蛋白質結構包括細胞外IgV結構域、間隔臂、跨膜結構域和胞質結構域。後者包括參與細胞中信號傳導的2個含酪胺酸的序列(ITIM和ITSM) (Francisco LM, Sage PT, Sharpe AH. The PD-1 pathway in tolerance and autoimmunity. Immunol Rev. 2010; 236: 219-242. doi: 10.1111/j.1600-065X. 2010. 00923. x)。 PD-1具有2個抑制配體PD-L1和PD-L2，它們也是跨膜受體並在免疫穩態中起重要作用。PD-L1在T細胞和B細胞、樹突細胞、巨噬細胞、內皮細胞、造血細胞和上皮細胞上表達。此外，在許多類型的惡性腫瘤的細胞上已檢測到PD-L1表達，所述惡性腫瘤例如黑素瘤、腎細胞癌、非小細胞肺癌、頭頸腫瘤、胃腸道腫瘤、卵巢癌、淋巴瘤、白血病(Han Y., Liu D., Li L. PD-1/PD-L1 pathway: current researches in cancer. Am J Cancer Res. 2020; 10(3): 727-742)。PD-L2在活化的巨噬細胞和樹突細胞上具有有限的表達，並主要結合PD-1受體。增加PD-L1和PD-L2表達的主要因素是抗炎細胞因數IFNγ。 PD-1受體及其PD-L1配體在惡性瘤的存活和進展中發揮重要作用。如上所述，PD-L1受體表達在許多類型的惡性細胞的表面上增加。PD-L1/PD-1相互作用刺激腫瘤微環境中免疫抑制的發展，並因此保護腫瘤細胞免受細胞毒性CD8+T細胞的活性。PD-1/PD-L1系統是有希望的治療靶(Wu Y., Chen W., Xu Z.P., Gu W. PD-L1 Distribution and Perspective for Cancer Immunotherapy-Blockade, Knockdown, or Inhibition. Front Immunol. 2019; 10: 2022, Ju X., Zhang H., Zhou Z., Wang Q. Regulation of PD-L1 expression in cancer and clinical implications in immunotherapy. Am J Cancer Res. 2020; 10(1): 1-11)。已知抗PD-1抗體帕博利珠單抗，其是人PD-1受體的人源化單克隆G4 (IgG4)抗體(PCT/US2008/007463)。其通過將鼠的PD-1受體的高親和力抗體的可變序列與Fc片段中含有穩定化S228P突變的人IgG4 κ框架組合而產生。其選擇性阻斷PD-1受體與其配體的結合，重新啟動抗腫瘤免疫。免疫應答的啟動刺激腫瘤細胞的消除。帕博利珠單抗在治療各種類型的惡性腫瘤中顯示高功效：黑素瘤、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、頭頸癌、經典霍奇金淋巴瘤、尿路上皮癌、胃癌、高微衛星不穩定性惡性瘤、肝細胞癌、食管癌、宮頸癌、默克爾細胞癌、腎細胞癌、子宮內膜癌等。還已知帕博利珠單抗用於治療感染性疾病。目前，正在進行在治療其中可能期望抑制PD-1活性的其它疾病或病症中的帕博利珠單抗研究。現有技術提供了可瑞達，一種治療產品，其包括帕博利珠單抗、蔗糖、聚山梨醇酯80和組胺酸緩衝液(PCT/US2012/031063)。儘管如此，仍然需要新的改進的穩定的帕博利珠單抗的藥學組成物。

定義除非本文另有定義，否則與本發明結合使用的所有技術和科學術語將具有與本領域技術人員通常理解的相同的含義。此外，除非上下文另有要求，否則單數術語應包括複數術語，並且複數術語應包括單數術語。如本說明書和所附申請專利範圍書中所用，除非上下文另有規定，否則詞語“具有”、“包括”和“包含”或其變型，例如“具有(has)”、“具有(having)”、“包括(includes)”、 “包括(including)”、“包含(comprises)”或“包含(包含)”將被理解為暗示包括所述的整體或整體的組，但不排除任何其它整體或整體的組。術語“藥學組成物”是指包含治療有效量的帕博利珠單抗和賦形劑或輔助物質(載體、稀釋劑、填料、溶劑等)的組成物和/或製劑，其選擇和比例取決於給予類型和途徑以及劑量。如本文所用，術語“水性組成物”是指水基組成物，組成物中的水可以是：水、注射用水、生理鹽水(0.9%-1.0%氯化鈉的水性溶液)。本文所用的術語“冷凍乾燥的”是指已經經受本領域稱為冷凍乾燥的方法的製劑，所述方法包括冷凍製劑，隨後從冷凍的內容物中去除冰。如果活性劑在規定的儲存期限期間，在儲存溫度(例如2-8℃)下保持其物理穩定性和/或化學穩定性和/或生物活性，則藥學組成物是“穩定的”。另外，活性劑可以保持物理穩定性和化學穩定性兩者，以及生物活性。基於在加速老化或自然老化條件下的穩定性測試的結果來調節儲存期。術語“長期儲存”或“長期穩定性”應理解為是指藥學組成物可以儲存三個月或更多、六個月或更多、一年或更多，並且組成物的最小穩定儲存期限也可以是至少兩年。一般而言，術語“長期儲存”和“長期穩定性”進一步包括穩定的儲存持續時間，比起抗PD-1抗體帕博利珠單抗的當前可用的商品製劑通常所需的穩定的儲存期限，其至少相當或更好，而沒有損失使得製劑不適合其預期藥物應用的穩定性。術語“緩衝劑”是指緩衝液或緩衝溶液的酸或鹼組分(通常為弱酸或弱鹼)。緩衝劑有助於將給定的溶液的pH值保持在預定的值或接近預定的值，並且通常選擇緩衝劑以補充預定的值。緩衝劑可以是產生期望的緩衝作用的單一化合物，尤其是當所述緩衝劑與適量(取決於期望的預定的值)的其相應的“酸/鹼共軛物”混合(並適當地能夠進行質子交換)時。術語“緩衝液”或“緩衝溶液”是指包含酸(通常為弱酸，例如乙酸、檸檬酸)及其共軛鹼(例如乙酸鹽或檸檬酸鹽，例如乙酸鈉、檸檬酸鈉，以及所述鹽的水合物，例如三水合乙酸鈉)的混合物或鹼(通常為弱鹼，例如組胺酸)及其共軛酸(例如組胺酸鹽酸鹽或一水合組胺酸鹽酸鹽或一水合(m/h)L-組胺酸鹽酸鹽(h/c)或L-組胺酸h/c m/h或組胺酸h/c m/h)的混合物的水性溶液。“緩衝溶液”的pH值在向其中加入少量強鹼或強酸時，以及在稀釋或濃縮時由於“緩衝劑”所賦予的“緩衝作用”而僅輕微變化。在本申請中，“緩衝系統”包含一種或多種緩衝劑和/或其一種或多種酸/鹼共軛物，並且更適宜地包含一種或多種緩衝劑及其一種或多種酸/鹼共軛物，並且最適宜地包含一種緩衝劑及其酸/鹼共軛物。除非另有說明，否則本文提及“緩衝系統”的任何濃度(緩衝液濃度)可以適宜地指一種或多種緩衝劑和/或其一種或多種酸/鹼共軛物的合併濃度。換句話說，本文提及“緩衝系統”的濃度可以指所有相關緩衝物類(即，彼此動態平衡的物類，例如，檸檬酸鹽/檸檬酸)的合併濃度。包含相關緩衝系統的組成物的總體pH反映每種相關緩衝物類(即，一種或多種緩衝劑與其一種或多種酸/鹼共軛物的餘量)的平衡濃度。緩衝溶液可以是例如乙酸鹽、磷酸鹽、檸檬酸鹽、組胺酸、琥珀酸鹽和其它緩衝溶液。通常，藥學組成物優選pH在4.0-8.0範圍內。 “穩定劑”是指提供活性劑的物理和/或化學穩定性的賦形劑或兩種或更多種賦形劑的混合物。穩定劑可以是胺基酸，例如但不限於精胺酸、組胺酸、甘胺酸、賴胺酸、穀胺醯胺、脯胺酸；表面活性劑，例如但不限於聚山梨醇酯20 (商品名：吐溫20)、聚山梨醇酯80 (商品名：吐溫80)、聚乙二醇-聚丙二醇及其共聚物(商品名：泊洛沙姆、普郎尼克、十二烷基硫酸鈉(SDS)；抗氧化劑，例如但不限於甲硫胺酸、乙醯半胱胺酸、抗壞血酸、一硫代甘油、亞硫酸鹽等；螯合劑，例如但不限於乙二胺四乙酸(EDTA)、二亞乙基三胺五乙酸(DTPA)、檸檬酸鈉等。如本文所用，術語“滲透劑(osmotic agent)”或“張力調節劑”以及“滲透劑(osmolyte)”是指可以提供液體抗體溶液的所需滲透壓的賦形劑。在一些實施方案中，張力調節劑可以將液體抗體製劑的滲透壓增加至等滲壓，使得所述液體抗體製劑與受試者的生物體組織的細胞生理相容。在另一個實施方案中，張力調節劑可以有助於增加抗體的穩定性。“等滲”製劑是具有與人血液相等的滲透壓的製劑。等滲製劑的滲透壓通常為約239-376 mOsm/kg。張力劑可以是對映體(例如L-或D-對映體)或外消旋形式；異構體形式，例如α或β，包括α,α；或β,β；或α,β；或β,α；遊離酸或遊離鹼形式；鹽形式；水合形式(例如一水合物或二水合物)或無水形式存在。示例性滲透劑為但不限於糖(海藻糖、二水合海藻糖、蔗糖、葡萄糖)、多元醇(甘露醇、山梨醇)、胺基酸(脯胺酸或L-脯胺酸、精胺酸、甘胺酸)或鹽(氯化鈉、氯化鉀、氯化鎂)。如本文所用，術語“增溶劑”是指藥學上可接受的非離子表面活性劑。可以使用一種增溶劑和多種增溶劑的組合兩者。示例性增溶劑為但不限於聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80、泊洛沙姆184或泊洛沙姆188或PLURONIC®。通常，胺基酸是L-胺基酸。例如，如果使用組胺酸和一水合組胺酸鹽酸鹽，則其通常是L-組胺酸和一水合L-組胺酸鹽酸鹽。例如，如果使用脯胺酸，則其通常是L-脯胺酸。也可使用胺基酸等價物，例如，藥學上可接受的脯胺酸鹽(例如，脯胺酸鹽酸鹽)。術語“藥物”或“製劑”是片劑、膠囊、溶液、軟膏和旨在用於恢復、改進或改變人類和動物的生理功能，以及用於治療和預防疾病，用於診斷、麻醉、避孕、美容及其它的其它現成形式的物質(或藥學組成物形式的物質的混合物)。術語“用途”適用於使用根據本發明的帕博利珠單抗的藥學組成物治療、緩解疾病進程、加速疾病或病症的緩解、降低疾病或病症的復發率的可能性。術語“治療方法”適用於使用根據本發明的帕博利珠單抗的藥學組成物治療、緩解疾病進程、加速疾病或病症的緩解、降低疾病或病症的復發率的可能性。“治療(treat)”或“治療(treatment)”、“預防”疾病、病症或病況可以包括預防或延遲在人中發展的疾病、病症或病況的臨床症狀的發作、抑制疾病、病症或病況，即，停止、降低或延遲疾病的發展或其復發(在維持療法的情況下)或其至少一個臨床或亞臨床症狀、或減輕或緩和疾病，即，引起疾病、病症或病況退化。術語“腸胃外給藥”是指給予方案，通常通過注射(輸注)進行，並且特別包括靜脈內、肌內、動脈內、氣管內、囊內、眶內、心內、皮內、腹膜內、經氣管、皮下、關節內、囊下、蛛網膜下、脊柱內、硬膜外和胸骨內注射或輸注。縮寫 IC-來料控制 FT-凍融 k _D-擴散相互作用參數 Rh-流體動力學半徑， SH-振動 T-溫度， T ons-熔化起始溫度 T1-第一熔化溫度， T2-第二熔化溫度， T agr-聚集溫度， TS-熱應力 TS50 96H-在50℃下熱應力96小時後的品質參數 Δ TS50 96H-應力(在50℃下熱應力96小時)後品質參數的變化 TS50-在50℃下熱應力10天后的品質參數， Δ TS50-應力(在50℃下熱應力10天)後品質參數的變化， Δ abs-通過方法21確定的帶電荷的變體特性的絕對變化， SH800 96H-攪拌(振動) 96小時後的品質參數， Δ SH800 96H-應力(攪拌(振動) 96小時)後品質參數的變化， SH800-攪拌(振動) 14天后的品質參數， Δ SH800-應力(攪拌(振動) 14天)後品質參數的變化， FT(-20)*5-5次冷凍迴圈後的品質參數， FT(-20)*3-3次冷凍迴圈後的品質參數， Δ FT(-20)*5-應力(5次冷凍迴圈)後品質參數的變化， Δ FT(-20)*3-應力(3次冷凍迴圈)後品質參數的變化， Acid 3.5 1H-酸水解至pH 3.5並老化1小時後的品質參數， Acid 4.0-酸水解至pH 4.0並老化10天后的品質參數， Δ Acid 3.5 1H-應力(酸水解至pH 3.5並老化1小時)後品質參數的變化， Δ Acid 4.0-應力(酸水解至pH 4.0並老化10天)後品質參數的變化， Basic 8.5 1H-鹼水解至pH 8.5並老化1小時後的品質參數， Basic 8.0-鹼水解至pH 8.0並老化10天后的品質參數， Δ Basic 8.5 1H-應力(鹼水解至pH 8.5並老化1小時)後品質參數的變化， Δ Basic 8.0-應力(鹼水解至pH 8.0並老化10天)後品質參數的變化， Ox 0.1%-用過氧化氫氧化4小時後的品質參數， Δ Ox 0.1%-應力(用過氧化氫氧化4小時)後品質參數的變化， UV-光應力，劑量ICH×1後的品質參數， Δ UV-應力(光應力，劑量ICH×1)後品質參數的變化， n/a-未測定， UV-UV暴露， IE HPLC-離子交換高效液相色譜法， CE-毛細管電泳， Non-red.-非還原條件， SW-軟體， Red.-還原條件 SA-比活性(效力)， SE HPLC-尺寸排阻高效液相色譜法。本發明公開了抗PD-1抗體帕博利珠單抗的藥學組成物，其可以用作用於治療惡性瘤或感染性疾病的醫藥產品。在製劑選擇期間，我們考慮藥物產品的目的、給予路線和耐受(例如，在給予期間減少不適)，以及製劑內的蛋白質分子的穩定性和活性保持。一方面，本發明涉及藥學組成物，其中該組成物包含： (i)帕博利珠單抗； (ii)組胺酸 (iii)一水合組胺酸鹽酸鹽； (iv)甘胺酸； (v)海藻糖和泊洛沙姆188，或脯胺酸；和 (vi)注射用水。在本發明的一些實施方案中，藥學組成物包含： (i)帕博利珠單抗； (ii)組胺酸 (iii)一水合組胺酸鹽酸鹽； (iv)甘胺酸； (v)海藻糖和泊洛沙姆188；和 (vi)注射用水。在本發明的一些實施方案中，藥學組成物包含： (i)帕博利珠單抗； (ii)組胺酸 (iii)一水合組胺酸鹽酸鹽； (iv)甘胺酸； (v)脯胺酸；和 (vi)注射用水。包含在本發明的藥學組成物中的帕博利珠單抗的濃度可以根據組成物的期望的性質以及藥學組成物的特定條件、方法和使用目的而變化。在本發明的一些實施方案中，帕博利珠單抗以5-50 mg/ml的濃度存在。在本發明的一些實施方案中，組胺酸以0.087-0.432 mg/ml的濃度存在。在本發明的一些實施方案中，一水合組胺酸鹽酸鹽以0.464-0.931 mg/ml的濃度存在。在本發明的一些實施方案中，甘胺酸以1-2 mg/ml的濃度存在。在本發明的一些實施方案中，海藻糖以70-130 mg/ml的濃度存在。在本發明的一些實施方案中，泊洛沙姆188以0.8-1.2 mg/ml的濃度存在。在本發明的一些實施方案中，脯胺酸以20-34 mg/ml的濃度存在。在本發明的一些實施方案中，藥學組成物包含： (i) 5-50 mg/ml帕博利珠單抗； (ii) 0.087-0.432 mg/ml組胺酸； (iii) 0.464-0.931 mg/ml一水合組胺酸鹽酸鹽； (iv) 1-2 mg/ml甘胺酸； (v) 70-130 mg/ml海藻糖和0.8-1.2 mg/ml泊洛沙姆188，或 20-34 mg/ml脯胺酸；和 (vi) 注射用水至1 ml。在本發明的一些實施方案中，藥學組成物包含： (i) 5-50 mg/ml帕博利珠單抗； (ii) 0.087-0.432 mg/ml組胺酸； (iii) 0.464-0.931 mg/ml一水合組胺酸鹽酸鹽； (iv) 1-2 mg/ml甘胺酸； (v) 70-130 mg/ml海藻糖和0.8-1.2 mg/ml泊洛沙姆188；和 (vi) 注射用水至1 ml。在本發明的一些實施方案中，藥學組成物包含： (i) 5-50 mg/ml帕博利珠單抗； (ii) 0.087-0.432 mg/ml組胺酸； (iii) 0.464-0.931 mg/ml一水合組胺酸鹽酸鹽； (iv) 1-2 mg/ml甘胺酸； (v) 20-34 mg/ml脯胺酸；和 (vi) 注射用水至1 ml。在本發明的一些實施方案中，帕博利珠單抗以15-35 mg/ml、或20-30 mg/ml、或25 mg/ml的濃度存在。在本發明的一些實施方案中，組胺酸以0.200-0.319 mg/ml、或0.200-0.250 mg/ml、或0.210-0.240 mg/ml、或0.210-230 mg/ml、或0.215-0.230 mg/ml、或0.215-0.225 mg/ml、或0.220-0.225 mg/ml、或0.221 mg/ml的濃度存在。在本發明的一些實施方案中，組胺酸是L-組胺酸。在本發明的一些實施方案中，一水合組胺酸鹽酸鹽以0.600-0.900 mg/ml、或0.650-0.850 mg/ml、或0.700-0.800 mg/ml、或0.730-0.770 mg/ml、或0.750 mg/ml的濃度存在。在本發明的一些實施方案中，一水合組胺酸鹽酸鹽是一水合L-組胺酸鹽酸鹽。在本發明的一些實施方案中，甘胺酸以1.3-1.7 mg/ml、1.4-1.6 mg/ml、或1.5 mg/ml的濃度存在。在本發明的一些實施方案中，海藻糖以70-100 mg/ml、或70-90 mg/ml、或70-85 mg/ml、或75-85 mg/ml、或80 mg/ml的濃度存在。在本發明的一些實施方案中，海藻糖是二水合海藻糖。在本發明的一些實施方案中，泊洛沙姆188以0.9-1.1 mg/ml、或0.95-1.05 mg/ml、或1.0 mg/ml的濃度存在。在本發明的一些實施方案中，脯胺酸以22-32 mg/ml、或24-30 mg/ml、或27 mg/ml的濃度存在。在本發明的一些實施方案中，脯胺酸是L-脯胺酸。在本發明的一些實施方案中，組成物的pH為5.1-6.1、5.2-6.0、5.3-5.9、5.4-5.8或5.5-5.7。在本發明的一些實施方案中，組成物的pH為5.6。在本發明的一些實施方案中，藥學組成物包含： (i) 25 mg/ml帕博利珠單抗； (ii) 0.221 mg/ml組胺酸； (iii) 0.750 mg/ml一水合組胺酸鹽酸鹽； (iv) 1.5 mg/ml甘胺酸； (v) 80 mg/ml海藻糖和1.0 mg/ml泊洛沙姆188，或 27 mg/ml脯胺酸； (vi) 注射用水至1 ml；和其中組成物的pH為5.5-5.7。在本發明的一些實施方案中，藥學組成物包含： (i) 25 mg/ml帕博利珠單抗； (ii) 0.221 mg/ml組胺酸； (iii) 0.750 mg/ml一水合組胺酸鹽酸鹽； (iv) 1.5 mg/ml甘胺酸； (v) 80 mg/ml海藻糖和1.0 mg/ml泊洛沙姆188； (vi) 注射用水至1 ml；和其中組成物的pH為5.5-5.7。在本發明的一些實施方案中，藥學組成物包含： (i) 25 mg/ml帕博利珠單抗； (ii) 0.221 mg/ml組胺酸； (iii) 0.750 mg/ml一水合組胺酸鹽酸鹽； (iv) 1.5 mg/ml甘胺酸； (v) 80 mg/ml二水合海藻糖和1.0 mg/ml泊洛沙姆188； (vi) 注射用水至1 ml；和其中組成物的pH為5.5-5.7。在本發明的一些實施方案中，藥學組成物包含： (i) 25 mg/ml帕博利珠單抗； (ii) 0.221 mg/ml組胺酸； (iii) 0.750 mg/ml一水合組胺酸鹽酸鹽； (iv) 1.5 mg/ml甘胺酸； (v) 27 mg/ml脯胺酸； (vi) 注射用水至1 ml；和其中組成物的pH為5.5-5.7。在本發明的一些實施方案中，藥學組成物的pH為5.6。一方面，本發明涉及帕博利珠單抗的藥學組成物，其以乾燥(即，粉末或顆粒)形式提供，用於在給予前在合適的溶劑(例如，水)中重構。這樣的製劑可以通過例如凍乾(即，本領域稱為冷凍乾燥的方法)來製備，並且其包括冷凍產品，隨後從冷凍的材料中去除溶劑。一方面，本發明涉及通過凍乾任何上述帕博利珠單抗的藥學組成物生產的帕博利珠單抗的藥學組成物。因此，根據本發明的藥學組成物可以是水性藥學組成物或凍乾的藥學組成物(凍乾物)。凍乾物用於生產其它劑型。例如，用於生產可注射溶液的凍乾物，用於生產濃縮物的凍乾物，所述濃縮物用於生產可注射溶液。通過將凍乾物溶解在合適的溶劑中(最典型地，在注射用水中)而重構凍乾物。此外，凍乾的組成物首先在所需體積的溶劑中(最典型地，在水中)重構，並隨後在合適的溶劑(例如5%葡萄糖溶液、0.9%氯化鈉溶液)中進一步稀釋。在本發明的一些實施方案中，通過凍乾根據本發明的帕博利珠單抗的藥學組成物來生產帕博利珠單抗的藥學組成物。在本發明的一些實施方案中，通過凍乾帕博利珠單抗的藥學組成物來生產帕博利珠單抗的藥學組成物，該組成物包含： (i) 5-50 mg/ml帕博利珠單抗； (ii) 0.087-0.432 mg/ml組胺酸； (iii) 0.464-0.931 mg/ml一水合組胺酸鹽酸鹽； (iv) 1-2 mg/ml甘胺酸； (v) 70-130 mg/ml海藻糖和0.8-1.2 mg/ml泊洛沙姆188，或 20-34 mg/ml脯胺酸；和 (vi) 注射用水至1 ml。在本發明的一些實施方案中，通過凍乾帕博利珠單抗的藥學組成物來生產帕博利珠單抗的藥學組成物，該組成物包含： (i) 25 mg/ml帕博利珠單抗； (ii) 0.221 mg/ml組胺酸； (iii) 0.750 mg/ml一水合組胺酸鹽酸鹽； (iv) 1.5 mg/ml甘胺酸； (v) 80 mg/ml海藻糖和1.0 mg/ml泊洛沙姆188； (vi) 注射用水至1 ml；和其中組成物的pH為5.5-5.7。在本發明的一些實施方案中，通過凍乾帕博利珠單抗的藥學組成物來生產帕博利珠單抗的藥學組成物，該組成物包含： (i) 25 mg/ml帕博利珠單抗； (ii) 0.221 mg/ml組胺酸； (iii) 0.750 mg/ml一水合組胺酸鹽酸鹽； (iv) 1.5 mg/ml甘胺酸； (v) 80 mg/ml二水合海藻糖和1.0 mg/ml泊洛沙姆188； (vi) 注射用水至1 ml；和其中組成物的pH為5.5-5.7。在本發明的一些實施方案中，通過凍乾帕博利珠單抗的藥學組成物來生產帕博利珠單抗的藥學組成物，該組成物包含： (i) 25 mg/ml帕博利珠單抗； (ii) 0.221 mg/ml組胺酸； (iii) 0.750 mg/ml一水合組胺酸鹽酸鹽； (iv) 1.5 mg/ml甘胺酸； (v) 27 mg/ml脯胺酸； (vi) 注射用水至1 ml；和其中組成物的pH為5.5-5.7。在本發明的一些實施方案中，由其生產凍乾的組成物的帕博利珠單抗的藥學組成物的pH為5.6。一方面，本發明涉及上述帕博利珠單抗的藥學組成物用於治療惡性瘤或感染性疾病的用途。在一些實施方案中，本發明涉及帕博利珠單抗的藥學組成物用於治療惡性瘤或感染性疾病的用途，該組成物包含： (i) 25 mg/ml帕博利珠單抗； (ii) 0.221 mg/ml組胺酸； (iii) 0.750 mg/ml一水合組胺酸鹽酸鹽； (iv) 1.5 mg/ml甘胺酸； (v) 80 mg/ml海藻糖和1.0 mg/ml泊洛沙姆188； (vi) 注射用水至1 ml；和其中組成物的pH為5.5-5.7。在一些實施方案中，本發明涉及帕博利珠單抗的藥學組成物用於治療惡性瘤或感染性疾病的用途，該組成物包含： (i) 25 mg/ml帕博利珠單抗； (ii) 0.221 mg/ml組胺酸； (iii) 0.750 mg/ml一水合組胺酸鹽酸鹽； (iv) 1.5 mg/ml甘胺酸； (v) 80 mg/ml二水合海藻糖和1.0 mg/ml泊洛沙姆188； (vi) 注射用水至1 ml；和其中組成物的pH為5.5-5.7。在一些實施方案中，本發明涉及帕博利珠單抗的藥學組成物用於治療惡性瘤或感染性疾病的用途，該組成物包含： (i) 25 mg/ml帕博利珠單抗； (ii) 0.221 mg/ml組胺酸； (iii) 0.750 mg/ml一水合組胺酸鹽酸鹽； (iv) 1.5 mg/ml甘胺酸； (v) 27 mg/ml脯胺酸； (vi) 注射用水至1 ml；和其中組成物的pH為5.5-5.7。在本發明的一些實施方案中，帕博利珠單抗的藥學組成物的pH為5.6。在一些實施方案中，本發明涉及通過凍乾上述帕博利珠單抗的藥學組成物生產的帕博利珠單抗的藥學組成物用於治療惡性瘤或感染性疾病的用途。在一些實施方案中，本發明涉及通過凍乾帕博利珠單抗的藥學組成物生產的帕博利珠單抗的藥學組成物用於治療惡性瘤或感染性疾病的用途，該組成物包含： (i) 25 mg/ml帕博利珠單抗； (ii) 0.221 mg/ml組胺酸； (iii) 0.750 mg/ml一水合組胺酸鹽酸鹽； (iv) 1.5 mg/ml甘胺酸； (v) 80 mg/ml海藻糖和1.0 mg/ml泊洛沙姆188； (vi) 注射用水至1 ml；和其中組成物的pH為5.5-5.7。在一些實施方案中，本發明涉及通過凍乾帕博利珠單抗的藥學組成物生產的帕博利珠單抗的藥學組成物用於治療惡性瘤或感染性疾病的用途，該組成物包含： (i) 25 mg/ml帕博利珠單抗； (ii) 0.221 mg/ml組胺酸； (iii) 0.750 mg/ml一水合組胺酸鹽酸鹽； (iv) 1.5 mg/ml甘胺酸； (v) 80 mg/ml二水合海藻糖和1.0 mg/ml泊洛沙姆188； (vi) 注射用水至1 ml；和其中組成物的pH為5.5-5.7。在一些實施方案中，本發明涉及通過凍乾帕博利珠單抗的藥學組成物生產的帕博利珠單抗的藥學組成物用於治療惡性瘤或感染性疾病的用途，該組成物包含： (i) 25 mg/ml帕博利珠單抗； (ii) 0.221 mg/ml組胺酸； (iii) 0.750 mg/ml一水合組胺酸鹽酸鹽； (iv) 1.5 mg/ml甘胺酸； (v) 27 mg/ml脯胺酸； (vi) 注射用水至1 ml；和其中組成物的pH為5.5-5.7。在本發明的一些實施方案中，由其生產凍乾的組成物的帕博利珠單抗的藥學組成物的pH為5.6。一方面，本發明涉及上述帕博利珠單抗的藥學組成物用於生產用於治療惡性瘤或感染性疾病的醫藥產品的用途。在本發明的一些實施方案中，惡性瘤選自：黑素瘤、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、頭頸癌、原發性縱隔大B細胞淋巴瘤、尿路上皮癌、胃癌、高微衛星不穩定性/DNA錯配修復缺陷(MMR)惡性瘤、肝細胞癌、宮頸癌、默克爾細胞癌、腎細胞癌、子宮內膜癌、食管癌、鱗狀細胞皮膚癌、基底細胞癌、乳腺癌、結腸直腸癌、***癌、甲狀腺癌、膀胱癌、非霍奇金淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、胰腺癌、卵巢癌、膽囊癌、惡性腦腫瘤、成膠質細胞瘤、具有高突變負擔的腫瘤。感染性疾病可以由病毒、細菌或真菌感染引起。在本發明的一些實施方案中，感染性疾病可以例如由人免疫缺陷病毒、甲肝病毒、乙肝病毒、丙肝病毒、人乳頭瘤病毒、EB病毒、人巨細胞病毒和皰疹病毒引起。許多所述疾病可以是慢性疾病。在本發明的一些實施方案中，所述本發明的帕博利珠單抗的藥學組成物旨在用於腸胃外給藥。在本發明的一些實施方案中，所述本發明的帕博利珠單抗的藥學組成物旨在用於肌內、靜脈內或皮下給予。在本發明的一些實施方案中，所述本發明的帕博利珠單抗的藥學組成物可以作為輸注靜脈內給予。根據本發明的帕博利珠單抗的藥學組成物可以在稀釋後使用。為此，將所需體積的組成物從小瓶轉移至包含無菌0.9%氯化鈉溶液或無菌5%葡萄糖溶液的輸注容器中。通過輕輕地翻轉輸注容器來攪拌所得溶液。根據本發明的帕博利珠單抗的藥學組成物的治療有效量取決於受試者的病況、病況的嚴重性、先前的療法和患者的病史和對治療劑的反應。合適的劑量可以由主治醫師決定來調節，使得它可以一次或通過幾次注射給予患者。在本發明的一些實施方案中，治療的受試者或患者是哺乳動物，優選人受試者。所述受試者可以是任何年齡的雄性或雌性。根據本發明的藥學組成物可以儲存在任何合適的容器中。例如玻璃或塑膠容器、小瓶、安瓿、注射器、藥筒或期望體積的瓶子。容器可以提供有用於給予的另外的裝置，例如滴管、自動注射器。根據本發明的藥學組成物可以以單一單位劑量或多個單一單位劑量的形式以現成製劑的形式製造、包裝或廣泛銷售。如本文所用，術語“單一單位劑量”是指含有預定量的活性成分的藥學組成物的離散量。活性成分的量通常等於待給予受試者的活性成分的劑量，或這樣的劑量的適宜部分，例如這樣的劑量的一半或三分之一。藥學組成物可以作為單一治療劑或按需與另外的治療劑組合來給予。因此，在一個實施方案中，用於治療和/或預防的本方法與給予治療有效量的另一種活性劑組合使用。其它活性劑可以在給予根據本發明的藥學組成物之前、期間或之後給予。其它活性劑可以作為本組成物的一部分或作為單獨的製劑給予。

方法 1. 製備帕博利珠單抗樣品。在應力下在攪拌室(Millipore)中製備濃度為5-50 mg/ml的抗體樣品。為此，將初始抗體製劑放置在室中，在連續攪拌下在壓縮空氣流中將蛋白質濃縮至期望的濃度，隨後逐步向室中加入至少10倍體積的具有包含緩衝劑、滲透劑和(如果需要)另外的水溶性穩定劑的目標製劑的水性溶液。抗體滲濾後，我們繼續濃縮至超過目標濃度的濃度，將其從室中卸載，並通過UV光譜法測量精確的蛋白質濃度。隨後向樣品中加入泊洛沙姆188的濃縮物和賦形劑的適當溶液，以製備具有目標濃度的蛋白質的溶液。以切向流模式在Pellicon盒(Millipore)中製備濃度為20 mg/ml或更高的蛋白質樣品。為此，將初始抗體製劑放置在滲濾槽中，將蛋白質濃縮至期望的濃度，隨後將至少10倍體積的具有包含緩衝劑和(如果需要)另外的水溶性穩定劑的目標製劑的溶液供應至系統。滲濾後，我們繼續濃縮至超過目標濃度的濃度，將其從系統中卸載，並測量精確的蛋白質濃度。隨後向樣品中加入泊洛沙姆188和賦形劑的適當溶液的濃縮物，以製備具有目標濃度的蛋白質的溶液。當獲得包含增溶劑(例如泊洛沙姆188)的製劑時，在滲濾和濃縮後將表面活性劑濃縮物加入到抗體中，其中用賦形劑的溶液將抗體最終稀釋至目標濃度。在無菌填充至最終容器(例如，無菌玻璃/塑膠容器、小瓶或注射器)期間，使用0.22 µm滅菌膜過濾抗體溶液。 2. 確定測試樣品中的蛋白質濃度通過UV光譜法，在280 nm波長下在UV透明板中測量蛋白質濃度。用賦形劑的適當溶液將每個樣品稀釋至約0.5 mg/ml的濃度。將150 µl稀釋的樣品放置在UV分光光度計板的孔中。使用板分光光度計在280 nm波長下測量板孔中溶液的光密度。賦形劑的適當溶液用作參考溶液。使用下式計算蛋白質的濃度(C) (mg/ml)：

，其中 А ₂₈₀是在280 nm波長下的光密度值； ε為測試蛋白質的消光係數； b是樣品的總稀釋因子； l是板孔中的層厚度；對於175 µl，l=0.42 cm。 3. 通過動態光散射確定蛋白質聚集溫度。使用DynaPro Plate Reader II確定測試蛋白質(濃度為1-5 mg/ml)的聚集點。為此，將35 µl溶液放置在具有光學透明底部的黑色聚合物板的孔中，在儀器中逐漸加熱，同時恆定測量散射光強度。測量設置： •初始測量溫度-25℃。 •θ=158°處的散射光強度。 •每次重複的測量次數為3。 •每次測量的時間為5秒。 •加熱速率為0.15℃/分鐘。 •最終溫度為80℃。使用Dynamics V7軟體確定溫度趨勢和聚集點。 4. 通過差示掃描螢光測定法確定蛋白質熔點。將Sypro Orange螢光染色劑加入到蛋白質樣品中。在CFX96 C1000 Touch Thermal Cycler放大器中以實時模式分析樣品。從25℃加熱至85℃，檢測通道為ROX。使用CFX Manager (Bio-Rad)軟體來處理結果。 5. 通過動態光散射確定溶液中顆粒的流體動力學半徑為了分析，將35 μl各濃度的樣品放置在具有光學透明底部的黑色聚合物板的孔中。使用DynaPro Plate Reader II儀器進行分析。每個孔分析10次。在Dynamics V7軟體中處理所得資料。 6. 通過動態光散射確定擴散相互作用參數(k _D) 通過逐步稀釋生產30 mg/ml至0.94 mg/ml的許多蛋白質溶液。賦形劑的適當溶液用作溶劑。為了分析，將35 μl各濃度的樣品放置在具有光學透明底部的黑色聚合物板的孔中。使用DynaPro Plate Reader II儀器進行分析。每個孔分析10次。在Dynamics V7軟體中處理所得資料，其中繪製擴散係數對溶液中蛋白質濃度的依賴性，並確定所得依賴性的線傾角。 7. 確定在50℃熱應力(TS50)下的熱穩定性。將測試樣品分成2個等分試樣，每個150 μl，並放置在單獨的玻璃小瓶中：將每種組成物1個小瓶儲存在5±3℃的冰箱中，將其餘小瓶放置在恆溫器中並在50℃下孵育96小時。當選擇對照點或隨後的加熱時，從恆溫器中去除小瓶，在室溫下保持約15分鐘並轉移用於分析。 8. 確定在振動(SH800)下的膠體穩定性。將測試樣品分成2個等分試樣，每個150 μl，並放置在玻璃小瓶中，將每種製劑1個小瓶儲存在5±3℃的冰箱中，將其餘小瓶放置在熱振動器中並在800 rpm下在5±3℃下振動96小時。在選擇對照點或隨後的應力期間，從熱振動器中去除小瓶並轉移用於分析。 9. 確定在凍融(FT(-20))下的膠體穩定性。將測試樣品分成2個等分試樣並放置在塑膠小瓶中：將每種製劑1個小瓶儲存在5±3℃的冰箱中，將其餘小瓶儲存在不高於-18℃的冷凍機中，直到完全冷凍。此後，從冷凍機中去除小瓶，保持在室溫下直到內容物完全解凍；使用渦旋混合溶液並放回到冷凍機中。重複至少三次。應力後，從冷凍機中去除小瓶，保持在室溫下直到內容物完全解凍；使用渦旋混合溶液並轉移用於分析。 10. 確定在酸水解(Acid)下的穩定性。將測試樣品分成2個等分試樣並放置在聚合物小瓶中：將每種製劑1個小瓶儲存在5±3℃的冰箱中(對於所有研究，在儲存開始時，輸入對照可以轉移用於分析一次)，攪拌下用鹽酸溶液將其餘小瓶的pH調節至3.5±0.1，此後，將它們轉移至冰箱中用於在5±3℃下儲存。1小時後，通過加入氫氧化鈉溶液至初始pH值，在攪拌下猝滅水解。隨後轉移溶液用於分析。 11. 確定在鹼性水解(Basic)下的穩定性。將測試樣品分成2個等分試樣並放置在聚合物小瓶中：將每種製劑1個小瓶儲存在5±3℃的冰箱中(對於所有研究，在儲存開始時，輸入對照可以轉移用於分析一次)，攪拌下用氫氧化鈉溶液將其餘小瓶的pH調節至8.5±0.1，此後，將它們轉移至冰箱中用於在5±3℃下儲存。1小時後，通過加入鹽酸溶液至初始pH值，在攪拌下猝滅水解。隨後轉移溶液用於分析。 12. 加速老化。將測試樣品分成單獨的等分試樣(一個等分試樣用於輸入對照，對於所有研究，在儲存開始時，允許轉移用於分析一次)並放置在單獨的無菌玻璃小瓶中：將每種製劑的小瓶的一部分放置在冰箱中用於在5±3℃下儲存(輸入對照)，將其餘小瓶放置在恆溫器中並在25±2℃下孵育6個月，根據計畫定期選擇對照點。當選擇對照點和隨後的儲存時，從恆溫器中去除小瓶並轉移用於分析。 13. 通過尺寸排阻高效液相色譜法(SE HPLC)確定樣品純度。柱：Tosoh TSK-GelG3000SWXL 7.8 mm ID×30 cm，5 μm。預柱：TSK-Gel Guard SW _XL，6.0 mm ID×4.0 cm，7 μm，300Å。柱溫：25℃。流動相流速：0.5 ml/min。注射體積：25 μl。樣品濃度：0.5 mg/ml。檢測器波長：214和360 nm。洗脫時間：30分鐘。流動相：無水磷酸氫二鈉14.2 mg/ml。氯化鈉11.7 mg/ml。用正磷酸將流動相pH調節至6.9。 14. 在Caliper LabChip GX II儀器上評價毛細管中的帶電荷的變體特性根據HT蛋白質電荷變體試劑盒的說明書進行分析。通過在0.5 ml Amicon Ultra 10 kDa離心篩檢程式(Millipore)中稀釋或濃縮(取決於樣品的初始濃度)將測試樣品調節至1 mg/ml的蛋白質濃度。在280 nm波長下通過UV分光光度法確定蛋白質含量。將2 µl羧肽酶溶液加入到每個所得樣品中，並將樣品在37±2℃的溫度下孵育2小時。在規定時間後，將樣品在Amicon Ultra離心管中對水透析，並濃縮至2 mg/ml。 96孔板負載如在說明書中規定量的標記緩衝溶液、染料混合物溶液和25 μl測試樣品，將板放置在暗處10分鐘，隨後每個孔負載60 µl水並混合。使用板離心機轉子離心具有溶液的板，並放置在Caliper LabChip GX II儀器中。分析使用特殊晶片，該晶片充滿根據說明書的pH的運行緩衝溶液。用LabChip GX軟體處理結果。 15. 通過離子交換高效液相色譜法(iE HPLC)確定電荷變體特性。柱：ProPac WCX-10，4×250 mm，細微性：10 μm (Thermo Scientific, USA)。預柱：ProPac WCX-10G，4×50 mm，細微性：10 μm (Thermo Scientific, USA)。洗脫液A：20 mM 2-(N-嗎啉代)-乙磺酸，4%乙腈的溶液，pH=7.0。洗脫液B：20 mM磷酸鈉緩衝液，95 mM NaCl溶液，4%乙腈的溶液，pH=8.0。流速：0.6 ml/min-1.0 ml/min。柱溫：45℃。自動取樣器溫度：5℃。檢測器：UV，280 nm。參考波長：360 nm，100 nm頻寬樣品體積：80 µl。色譜時間：43分鐘。將測試樣品稀釋至濃度為1.0 mg/ml，並在37±2℃的溫度下用羧肽酶B以100:1的比率處理20分鐘。洗脫模式：洗脫液A為從100%至80%，洗脫液B為從0%至20%。 16. 在十二烷基硫酸鈉存在/不存在下通過毛細管聚丙烯醯胺凝膠電泳(CE red.和non-red.)確定純度和相關的雜質。將樣品稀釋至4.0 mg/ml的濃度。將23 μL所得溶液放置在1.5 mL微管中；向其中加入70 μl SDS-MW樣品緩衝液、2 μl分子量為10 kDa的內標、5 μl 0.5M碘乙醯胺溶液(CE non-red.)或5 μl 2-巰基乙醇(CE red.)。將所得溶液攪拌15秒，以2800 rpm的速度離心5秒，並放置在70℃的固態恆溫器中30分鐘。將溶液冷卻至室溫。 SDS MW分離-PA 800 plus.met分析方法用於32Karat軟體。毛細管凝膠電泳的條件：毛細管：50 μm×30.2 cm 毛細管的有效長度：20.0 cm 極性：相反，進口在左側(-)，出口在右側(+) 毛細管溫度：25℃ 分析時間和分離電壓：35分鐘，15 kV 檢測波長：220 nm。 17. 確定相對比活性。使用生物學測試確定比活性，該測試是針對阻斷PD-L1依賴性抑制基於T細胞的Jurkat-PD1-NFAT報導細胞系的活化的能力。使用機器人平臺液體處理臂(LiHa)處理樣品；使用具有25 mM HEPES、24 mM碳酸氫鈉、含有2 mM L-穀胺醯胺、10% FBS、50 μg/ml慶大黴素的RPMI-1640作為測定培養基(用於定量確定的培養基)。使用測定培養基(用於定量確定的培養基)將抗體的測試樣品稀釋至1 mg/ml的濃度，並且放置在機器人平臺中。機器人平臺液體操作臂(LiHa)用於使用測定培養基製備濃度為1 000、50、10、1、0.5、0.25、0.1、0.025、0.01、0.001 μg/ml的標準樣品和測試樣品的三種獨立稀釋液。我們將稀釋液和測定培養基轉移到培養板中，加入以(1.00±0.1)×10 ⁶個細胞/ml的濃度穩定表達PDL-1的Raji-PDL1 cl.3細胞懸浮液、以(1.67±0.1)×10 ⁶個細胞/ml的濃度的Jurkat-NFAT-PD1 cl.1報導細胞系懸浮液和抗CD3/CD20的雙特異性抗體。將培養板放置在CO ₂培養箱中，在(37±1)℃的溫度下，在具有5%二氧化碳含量的加濕空氣中培養22-24小時。孵育期之後，將培養板在室溫下保持至少15分鐘，並加入BioGlo螢光素酶底物。使用微板讀數器和Magellan 7.2軟體，以相對發光單位(RLU)測量發光水準。使用發光測量的結果，我們為每個板建立了使用Levenberg-Marquardt演算法對標準樣品和測試樣品優化的四參數曲線，確定測試樣品相對於標準樣品的相對比活性。 18. 通過疏水相互作用的高效液相色譜(疏水相互作用HPLC)確定氧化產物。柱：TSKgel Phenyl-5PW 7.5×75 mm，細微性：10μm (Tosoh Booscience, Japan)。洗脫液A：5 mM磷酸鈉緩衝液，2%乙腈的溶液，pH=7.0。洗脫液B：5 mM磷酸鈉緩衝液，400 mM硫酸銨，4%乙腈的溶液，pH=6.9。流速：0.5 ml/min。柱溫：30℃。自動取樣器溫度：5℃。檢測器：UV，280 nm，頻寬：16 nm。參考波長：360 nm，100 nm頻寬樣品體積：25μL。色譜時間：82分鐘。將測試樣品稀釋至濃度為3.0 mg/ml，並在37±2℃的溫度下用羧肽酶B以100:1的比率處理20分鐘。洗脫方式：洗脫液A為0%-100%，洗脫液B為100%-0%。 19. 確定在氧化下的穩定性。將測試樣品分成2個等分試樣，每個150 μl，並放置在單獨的玻璃小瓶中：將每種製劑1個小瓶儲存在5±3℃的冰箱中，將過氧化氫加入到剩餘的樣品中至樣品中過氧化氫的最終濃度為0.1%，將樣品在(5±3)℃下老化4小時。通過加入等量的L-甲硫胺酸來猝滅氧化。 20. 確定光穩定性。將測試樣品分成兩個等分試樣，並放置在單獨的玻璃小瓶中。作為深色對照，我們在第二個包裝中使用用鋁箔緊密包裹的產品。將所有樣品放置在具有光源的氣候室中，並在1,200,000 lux•h和200 W•h/m ²(劑量ICH×1)下發射光應力程式。在達到期望的應力水準後，將所有樣品從室中去除並轉移用於分析。 21. 結果的處理。通過下式計算當在應力下時品質指標的絕對變化： Δ=(應力後的值-應力前的值) 通過下式計算電荷變體特性的絕對變化(abs)： Δ = | 應力前酸性級分含量 - 應力後酸性級分含量 | +| 應力前鹼性級分含量 - 應力後鹼性級分含量 | +| 應力前主要級分含量 - 應力後主要級分含量 |實施例1. 緩衝系統的選擇。在本研究中，選擇2種適合腸胃外給藥的典型的緩衝體系(乙酸鹽和組胺酸緩衝體系)作為藥學組成物的基礎。在具有兩個水準和中心點的完全雙因素實驗設計中進行研究。研究pH水準(5.0-6.5)和緩沖劑的濃度(5-50 mM)作為定量因素。為了評估緩衝系統的適用性，我們研究了緩衝溶液的性質對蛋白質的膠體和構象穩定性的作用。確定聚集溫度、熔點、擴散相互作用參數、熱應力後的純度變化和酸-鹼特性作為回應。測試藥學組成物示於表1中。

穩定性預測指標的研究。擴散相互作用參數(k _D)反映作為分子濃度函數的樣品擴散係數。如果擴散係數隨濃度的增加而降低(k _D＜0)，則給定溶液的多分散性增加，並且在其中形成較大的顆粒。這樣的樣品具有低溶解度並且傾向於聚集，並且不推薦使用其製劑。聚集溫度和熔點使得可以評估蛋白質的聚集趨勢。最穩定的樣品是其中顆粒聚集在較高溫度下開始並且其中在加熱下形成較小顆粒那些。通過方法3的聚集溫度、通過方法4的熔點和通過方法6的擴散相互作用參數的研究結果示於表2中。最佳結果的顏色色調較淺。

確定熱穩定性。通過方法7評估熱穩定性。在熱應力之前和之後，我們通過方法13通過SE HPLC確定純度，通過方法14在毛細管中確定電荷變體特性，通過方法5確定流體動力學半徑。結果示於表3中。最佳結果的顏色色調較淺。

在Minitab軟體中處理所得資料，並建立模型以選擇具有最穩定化作用的製劑。只有那些受到因素(pH和緩衝溶液的品質摩爾濃度)的顯著作用的反應(品質指標)用於建立模型。對於優化模型中沒有考慮的其它反應，假定在研究的因素範圍內沒有統計學顯著差異。基於優化結果，選擇pH為5.6的5 mM組胺酸緩衝溶液，其用以下製備：

L-組胺酸	0.221 mg/ml
一水合L-組胺酸鹽酸鹽	0.750 mg/ml

當製備具有特定含量的L-組胺酸和一水合L-組胺酸鹽酸鹽的溶液時，pH可能稍微偏離期望值，並且在5.5-5.7 (pH 5.6±0.1)的pH範圍內變化。該製劑在所有測試樣品中顯示最佳的穩定化性質。根據模型的結果，在熱暴露下的組胺酸緩衝溶液中預期單體(蛋白質)和聚集體含量的最小變化，並且還預期聚集溫度和擴散相互作用參數的高值。與可瑞達緩衝溶液相比，最佳的組成表現出在熱暴露下單體含量的較小變化，聚集物含量的較小變化，並且擴散相互作用參數增加，這指示膠體穩定性較高。實施例2. 滲透劑的選擇。測試製劑。研究了適合腸胃外給藥的賦形劑用作滲透劑。測試製劑示於表4中。

穩定性預測指標的研究。對於滲透劑的選擇，通過方法3的聚集溫度、通過方法4的熔點和通過方法6的擴散相互作用參數的研究結果示於表5中。最佳結果的顏色色調較淺。

確定熱穩定性。通過方法7評估熱穩定性。在熱應力之前和之後，我們通過方法13通過SE HPLC確定純度，通過方法14在毛細管中確定電荷變體特性，通過方法6確定流體動力學半徑。結果示於表6中。最佳結果的顏色色調較淺。

確定在振動下的穩定性。通過方法8評估在振動下的穩定性。在振動之前和之後，我們通過方法13通過SE HPLC確定純度，通過方法14在毛細管中確定電荷變體特性，通過方法6確定流體動力學半徑。結果示於表7中。最佳結果的顏色色調較淺。

確定在冷凍和融化期間的穩定性。通過方法9評估在凍融下的穩定性。在應力之前和之後，我們通過方法13通過SE HPLC確定純度，通過方法14在毛細管中確定電荷變體特性，通過方法6確定流體動力學半徑。結果示於表8中。最佳結果的顏色色調較淺。

包含二水合海藻糖和L-脯胺酸的製劑在所有測試樣品中顯示最佳的穩定化性質。包含二水合海藻糖的樣品在聚集溫度和熔點方面顯示最佳結果。此外，該樣品在熱暴露下顯示品質指標的最小變化，觀察到在振動下的微小變化。包含L-脯胺酸的樣品也顯示聚集溫度的最佳結果之一和熔點的平均結果。具有L-脯胺酸的組成物在熱暴露下顯示平均結果，在振動下品質指標的小變化，和在凍融下的最佳結果。引入為下一步驟選擇的二水合海藻糖或L-脯胺酸減少在凍融和熱應力下聚集體的形成。而且，所選製劑在振動下表現出輕微的品質變化。當與含有蔗糖的製劑相比時，所選的滲透劑提供增加的熱穩定性；特別地，我們觀察到熔點/聚集溫度升高，在熱暴露下聚集體的形成速率較低，單體含量的較小變化，並且我們還觀察到酸-鹼特性的較小的絕對變化。在賦形劑中含有二水合海藻糖的樣品在擴散相互作用參數方面顯示更好的結果，這指示在濃縮和滲濾期間增加的穩定性和更小的聚集傾向。與含有蔗糖的製劑相比，含有二水合海藻糖、山梨醇或L-脯胺酸的所研究的製劑在振動和冷凍下顯示明顯更小的顆粒流體動力學半徑增加，這指示形成了大的高分子顆粒。為下一步驟選擇的賦形劑製劑：

His+Tre 100 mg/ml:	L-組胺酸	0.221 mg/ml
	一水合L-組胺酸鹽酸鹽	0.750 mg/ml
	二水合海藻糖	100 mg/ml

His+Prol 30 mg/ml:	L-組胺酸	0.221 mg/ml
	一水合L-組胺酸鹽酸鹽	0.750 mg/ml
	L-脯胺酸	30 mg/ml

實施例3. 滲透劑和穩定劑的篩選。為了篩選滲透劑和穩定劑，使用適於腸胃外給藥的賦形劑。測試製劑示於表9中。根據方法2製備在測試製劑中含有帕博利珠單抗的藥學組成物。

穩定性預測指標的研究。對於滲透劑的選擇，通過方法3的聚集溫度、通過方法4的熔點和通過方法6的擴散相互作用參數的研究結果示於表10中。最佳結果的顏色色調較淺。

確定熱穩定性。通過方法7評估熱穩定性。在熱應力之前和之後，我們通過方法13通過SE HPLC確定純度，通過方法14在毛細管中確定電荷變體特性，通過方法6確定流體動力學半徑。結果示於表11中。最佳結果的顏色色調較淺。

確定在酸水解下的穩定性。對於不含泊洛沙姆188的製劑，通過方法10 (其中調節至pH 3.5並老化1小時)評估在酸水解下的穩定性。在水解之前和之後，我們通過方法13通過SE HPLC確定純度，通過方法14在毛細管中確定電荷變體特性，通過方法6確定流體動力學半徑。結果示於表12中。最佳結果的顏色色調較淺。

確定在鹼水解下的穩定性。對於不含泊洛沙姆188的製劑，通過方法11 (其中調節至pH 8.5並老化1小時)評估在鹼水解下的穩定性。在水解之前和之後，我們通過方法13通過SE HPLC確定純度，通過方法14在毛細管中確定電荷變體特性，通過方法6確定流體動力學半徑。結果示於表13中。最佳結果的顏色色調較淺。

確定在振動下的穩定性。通過方法8評估在振動下的穩定性。在應力之前和之後，我們通過方法13通過SE HPLC確定純度，通過方法14在毛細管中確定電荷變體特性，通過方法6確定流體動力學半徑。結果示於表14中。最佳結果的顏色色調較淺。

確定在冷凍和融化期間的穩定性。通過方法9評估在凍融下的穩定性。在應力之前和之後，我們通過方法13通過SE HPLC確定純度，通過方法14在毛細管中確定電荷變體特性，通過方法6確定流體動力學半徑。結果示於表15中。最佳結果的顏色色調較淺。

在測試樣品中，以下製劑在穩定性方面可能是卓越的：

1. His+Tre+甘胺酸100 mM	帕博利珠單抗	1.5-30 mg/ml
L-組胺酸	0.221 mg/ml
一水合L-組胺酸鹽酸鹽	0.750 mg/ml
二水合海藻糖	100 mg/ml
甘胺酸	7.51 mg/ml

2. His+Tre+泊洛沙姆188 0.5 mg/ml	帕博利珠單抗	1.5-30 mg/ml
L-組胺酸	0.221 mg/ml
一水合L-組胺酸鹽酸鹽	0.750 mg/ml
二水合海藻糖	100 mg/ml
泊洛沙姆188	0.5 mg/ml

3. His+Prol	帕博利珠單抗	1.5-30 mg/ml
L-組胺酸	0.221 mg/ml
一水合L-組胺酸鹽酸鹽	0.750 mg/ml
L-脯胺酸	30 mg/ml

4. His+Prol+甘胺酸100 mM	帕博利珠單抗	1.5-30 mg/ml
L-組胺酸	0.221 mg/ml
一水合L-組胺酸鹽酸鹽	0.750 mg/ml
L-脯胺酸	30 mg/ml
甘胺酸	7.51 mg/ml

5. His+Prol+甘胺酸100 mM+ 泊洛沙姆188 0.5 mg/ml	帕博利珠單抗	1.5-30 mg/ml
L-組胺酸	0.221 mg/ml
一水合L-組胺酸鹽酸鹽	0.750 mg/ml
L-脯胺酸	30 mg/ml
甘胺酸	7.51 mg/ml
泊洛沙姆188	0.5 mg/ml

選擇含有二水合海藻糖的製劑、二水合海藻糖與甘胺酸的組合的組成物、以及具有L-脯胺酸的組成物、以及具有L-脯胺酸與甘胺酸或甲硫胺酸的組合的組成物用於進一步開發，因為它們在應力下顯示積極穩定性結果。與具有L-脯胺酸的製劑相比，具有二水合海藻糖的所有制劑表現出更高含量的鹼性級分。在含有二水合海藻糖的製劑中，具有甘胺酸的製劑顯示最佳結果。我們觀察到甘胺酸對聚集溫度和熔點以及對擴散相互作用參數的積極影響。當在熱應力下時，向製劑中加入甘胺酸顯示輕微的改進。向製劑中加入甘胺酸顯示在應力之前和之後純度和酸-鹼特性的改進。與沒有加入表面活性劑的可瑞達賦形劑的製劑中的樣品相比，我們觀察到熔點和聚集溫度的顯著增加，以及在酸和鹼水解下純度和酸-鹼特性的顯著較小的變化。在含有表面活性劑的製劑中，觀察到泊洛沙姆188的積極作用。這些組成物在振動和冷凍下在純度和帶電荷的變體特性方面表現出較小的變化。因此，選擇泊洛沙姆188用作下一步驟中的表面活性劑。實施例4. 確定賦形劑製劑的關鍵定量因素。在具有兩個水準和中心點的階乘四因數實驗設計中進行研究。蛋白質濃度(10-40 mg/ml)、pH (5.1-6.1)、滲透劑濃度(70-130 mg/ml)、L-甘胺酸濃度(1.5-15 mg/ml)和泊洛沙姆188濃度(0.10-1.0 mg/ml)作為定量因素進行研究。測試製劑列於表16中。

在表16中，緩衝溶液是指在表17中描述的以下製劑。

穩定性預測指標的研究。對於滲透劑的選擇，通過方法3的聚集溫度、通過方法4的熔點和通過方法6的擴散相互作用參數的研究結果示於表18中。最佳結果的顏色色調較淺。

確定熱穩定性。通過方法7評估熱穩定性。在熱應力之前和之後，我們通過方法13通過SE HPLC確定純度，通過方法14在毛細管中確定電荷變體特性，通過方法6確定流體動力學半徑。結果示於表19中。最佳結果的顏色色調較淺。

通過方法8評估在振動下的穩定性。在應力之前和之後，我們通過方法13通過SE HPLC確定純度，通過方法14在毛細管中確定電荷變體特性，通過方法6確定流體動力學半徑。結果示於表20中。最佳結果的顏色色調較淺。

確定在冷凍和融化期間的穩定性。通過方法9評估在凍融下的穩定性。在應力之前和之後，我們通過方法13通過SE HPLC確定純度，通過方法14在毛細管中確定電荷變體特性，通過方法6確定流體動力學半徑。結果示於表21中。最佳結果的顏色色調較淺。

結果用於在Minitab軟體中建立模型。L-甘胺酸/泊洛沙姆188的濃度對帕博利珠單抗的穩定性沒有統計學顯著作用。根據優化結果，L-甘胺酸的推薦濃度為15 mg/ml，泊洛沙姆188的推薦濃度為1.0 mg/ml，二水合海藻糖的推薦濃度為84.5 mg/ml。然而，為了確保組成物的生理同滲品質摩爾濃度，將L-甘胺酸的含量降低到1.5 mg/ml，並且將二水合海藻糖的含量降低到80 mg/ml。較早選擇緩衝溶液、其濃度和pH，結果如實施例1所示。本實施例證實它們對帕博利珠單抗的穩定性的統計學顯著作用。在熱應力下，表面活性劑可能引起人工高分子量雜質的形成。如果熱應力不包括在模型中，可以推斷泊洛沙姆188濃度的增加對帕博利珠單抗的穩定性具有積極作用。根據結果，泊洛沙姆188的最佳濃度為1.0 mg/ml。因此，最終選擇的製劑如下：

帕博利珠單抗	1.5-40 mg/ml
L-組胺酸	0.221 mg/ml
一水合L-組胺酸鹽酸鹽	0.750 mg/ml
二水合海藻糖	80 mg/ml
甘胺酸	1.5 mg/ml
泊洛沙姆188	1.0 mg/ml

實施例5. 確定在應力條件下最終製劑的穩定性對於應力穩定性測試，選擇帕博利珠單抗的最終製劑和可瑞達賦形劑的製劑。測試製劑示於表22中。根據方法2製備在測試製劑中含有帕博利珠單抗的藥學組成物。

確定熱穩定性。通過方法7評估熱穩定性持續10天。在熱應力之前和之後，我們通過SE HPLC方法(方法13)確定純度，通過IE HPLC方法(方法15)確定帶電荷的變體特性，通過疏水相互作用HPLC方法(方法18)確定氧化產物的含量，通過方法5確定流體動力學半徑。結果示於表23中。最佳結果的顏色色調較淺。

確定在振動下的穩定性。通過方法8評估在振動下的穩定性。在振動之前和之後，我們通過SE HPLC方法13確定純度，通過IE HPLC方法(方法15)確定帶電荷的變體特性，通過疏水相互作用HPLC方法(方法18)確定氧化產物的含量，通過方法6確定流體動力學半徑。結果示於表24中。最佳結果的顏色色調較淺。

確定在冷凍和融化期間的穩定性。通過方法9評估在凍融下的穩定性。在應力之前和之後，我們通過SE HPLC方法13確定純度，通過IE HPLC方法(方法15)確定帶電荷的變體特性，通過疏水相互作用HPLC方法(方法18)確定氧化產物的含量，通過方法6確定流體動力學半徑。結果示於表25中。最佳結果的顏色色調較淺。

確定在酸水解下的穩定性。通過方法9評估在酸水解下的穩定性。在應力之前和之後，我們通過SE HPLC方法13確定純度，通過IE HPLC方法(方法15)確定帶電荷的變體特性，通過疏水相互作用HPLC方法(方法18)確定氧化產物的含量，通過方法6確定流體動力學半徑。結果示於表26中。最佳結果的顏色色調較淺。

確定在鹼水解下的穩定性。通過方法9評估在鹼水解下的穩定性。在應力之前和之後，我們通過SE HPLC方法13確定純度，通過IE HPLC方法(方法15)確定帶電荷的變體特性，通過疏水相互作用HPLC方法(方法18)確定氧化產物的含量，通過方法6確定流體動力學半徑。結果示於表27中。最佳結果的顏色色調較淺。

確定在氧化下的穩定性。通過方法9評估在氧化下的穩定性。在應力之前和之後，我們通過SE HPLC方法13確定純度，通過IE HPLC方法(方法15)確定帶電荷的變體特性，通過疏水相互作用HPLC方法(方法18)確定氧化產物的含量，通過方法6確定流體動力學半徑。結果示於表28中。最佳結果的顏色色調較淺。

確定光穩定性。通過方法9評估在氧化下的穩定性。在應力之前和之後，我們通過SE HPLC方法13確定純度，通過IE HPLC方法(方法15)確定帶電荷的變體特性，通過疏水相互作用HPLC方法(方法18)確定氧化產物的含量，通過方法6確定流體動力學半徑。結果示於表29中。最佳結果的顏色色調較淺。

根據應力穩定性測試的結果，與可瑞達的賦形劑製劑相比，帕博利珠單抗的賦形劑製劑在熱應力下表現出品質指標的較小變化，特別是流體動力學半徑的較小變化、聚集體的較小增加和單體含量的變化、形成氧化形式的顯著較低的趨勢和帶電荷的變體特性的較小變化。當在振動和冷凍下時，觀察到應力後帶電荷的變體特性的較小變化。進而，當在酸水解下時，觀察到聚集體的較小增加和單體含量的變化，以及鹼性級分含量的較小變化。當在鹼性水解下時，帕博利珠單抗製劑內的蛋白質形成聚集體、改變單體含量和改變帶電荷的變體特性的傾向較小。當在光應力下時，與可瑞達賦形劑的製劑相比，觀察到明顯較低的氧化傾向，以及單體含量的較小變化、聚集體的較小增加和帶電荷的變體特性的較小變化。實施例6. 確定在37±2℃的溫度下加速老化下的穩定性。為了預先證實所選製劑的穩定性，在37±2℃的溫度下使其經受加速老化。通過方法1製備蛋白質濃度(25-50 mg/ml)、pH (5.1-6.1)、二水合海藻糖濃度(70-90 mg/ml)、甘胺酸濃度(1.0-2.0 mg/ml)和泊洛沙姆188濃度(0.8-1.2 mg/ml)範圍內的藥學組成物，並在37±2℃的溫度下儲存用於穩定性測試。測試製劑示於表30中。

加速老化。根據技術1通過滲濾製備包含濃度為25、50和37.5 mg/ml的蛋白質的藥學組成物，並根據技術8放置在37±2℃的溫度下用於加速儲存。研究結果示於表31中。

所有測試製劑均表現出可接受的品質參數變化(通過SE HPLC確定的純度，在還原和非還原條件下的CE，帶電荷的變體特性和比活性)，這通過使用MODDE軟體的設計空間證實。根據反映因素(緩衝溶液pH和賦形劑組分含量)對回應(品質參數)的作用的實驗空間的結果，在37±2℃下加速老化4周，藥學組成物在提供的濃度、pH和賦形劑範圍內是穩定的。實施例7. 確定在長期加速老化下的穩定性。為了證實所選製劑的穩定性，在25±2℃的溫度下使其經受加速老化。通過方法1製備蛋白質濃度(25-50 mg/ml)、pH (5.1-6.1)、二水合海藻糖濃度(70-90 mg/ml)、甘胺酸濃度(1.0-2.0 mg/ml)和泊洛沙姆188濃度(0.8-1.2 mg/ml)範圍內的藥學組成物，並在25±2℃的溫度下儲存用於穩定性測試。此外，我們在所有組成物中選擇最關鍵的情況，具有最低和最高賦形劑含量和最高蛋白質含量，以及具有賦形劑含量在該範圍的中心點的製劑。測試製劑示於表32中。

加速老化。根據技術1通過滲濾製備包含濃度為25、50和37.5 mg/ml的蛋白質的藥學組成物，並根據技術8放置在25±2℃的溫度下用於加速儲存。研究結果示於表33和圖1、2、3、4、5和6中。

在加速儲存期間所有藥學組成物證明可接受水準的變化。含有pH範圍為5.1-6.1的組胺酸緩衝溶液、70-90 mg/ml的二水合海藻糖、1.0-2.0 mg/ml的L-甘胺酸和0.8-1.2 mg/ml的泊洛沙姆188的藥學組成物證明可接受水準的聚集(在25±2℃下6個月內聚集體的增加不超過0.32%)，以及在25 mg/ml濃度和至多50 mg/ml的增加的濃度的單克隆抗體帕博利珠單抗下酸-鹼特性的小變化(鹼性級分含量變化不超過13.0%)和在加速老化下比活性的輕微變化。加入二水合海藻糖有助於增加帕博利珠單抗的聚集溫度和熔點。我們還觀察到在熱應力下品質參數的最小變化，在振動和冷凍後品質參數的輕微變化。此外，甘胺酸對聚集溫度和熔點以及對擴散相互作用參數具有積極影響。觀察到在酸和鹼水解下甘胺酸對蛋白質品質參數的積極影響。向製劑中加入泊洛沙姆188有助於測試蛋白質在振動和冷凍下的穩定化。根據應力穩定性測試的結果，帕博利珠單抗賦形劑的開發製劑在熱應力、酸和鹼水解下顯示優於可瑞達製劑的顯著優點；此外，我們觀察到在光應力下顯著更低的氧化傾向，其對蛋白質的結構和比活性具有顯著作用，並且具有增加的聚集傾向。我們提供了使用帕博利珠單抗的水性藥學組成物的研究的實例。用於進一步研究的水性藥學組成物描述於表34中。

實驗揭示，可瑞達產品的製劑具有以下幾個缺點：1)抗體的膠體穩定性不足，2)在熱應力下穩定性不足，3)在機械應力和冷凍下帶電荷的變體特性的穩定性低。在本發明的框架內，已經生產了具有足夠的膠體穩定性和熱穩定性以及在機械應力和冷凍下帶電荷的變體特性的高穩定性的藥學組成物。此外，在其製劑(例如表34中指示的製劑)中含有海藻糖和泊洛沙姆188的藥學組成物的進一步特徵在於在長期儲存下形成高分子量雜質的低傾向，以及在光應力和長期儲存下氧化、比活性損失和雜質增加的低傾向。與藥學組成物的穩定性有關的所得資料指示賦形劑彼此之間以及與活性物質之間的相容性。

[圖1]是對於測試製劑中的單克隆抗體帕博利珠單抗，通過SE HPLC確定的聚集體含量(%)相對於在25±2℃的溫度下的儲存時間的圖。 [圖2]是對於測試製劑中的單克隆抗體帕博利珠單抗，通過SE HPLC確定的單體含量(%)相對於在25±2℃的溫度下的儲存時間的圖。 [圖3]是對於測試製劑中的單克隆抗體帕博利珠單抗，通過IE HPLC確定的鹼性級分含量(%)相對於在25±2℃的溫度下的儲存時間的圖。 [圖4]是對於測試製劑中的單克隆抗體帕博利珠單抗，在非還原性條件下通過CE確定的單體含量(%)相對於在25±2℃的溫度下的儲存時間的圖。 [圖5]是對於測試製劑中的單克隆抗體帕博利珠單抗，在還原性條件下通過CE確定的重鏈和輕鏈的總和的含量(%)相對於在25±2℃的溫度下的儲存時間的圖。 [圖6]是對於測試製劑中的單克隆抗體帕博利珠單抗，相對比活性(%)相對於在25±2℃的溫度下的儲存時間的圖。

Claims

一種帕博利珠單抗(pembrolizumab)的藥學組成物，其中該組成物包含： (i) 帕博利珠單抗； (ii) 組胺酸； (iii) 一水合組胺酸鹽酸鹽； (iv) 甘胺酸； (v) 海藻糖和泊洛沙姆188，或脯胺酸；和 (vi) 注射用水。
根據請求項1之藥學組成物，其中帕博利珠單抗以5-50 mg/ml的濃度存在。
根據請求項1之藥學組成物，其中組胺酸以0.087-0.432 mg/ml的濃度存在。
根據請求項1之藥學組成物，其中一水合組胺酸鹽酸鹽以0.464-0.931 mg/ml的濃度存在。
根據請求項1之藥學組成物，其中甘胺酸以1-2 mg/ml的濃度存在。
根據請求項1之藥學組成物，其中海藻糖以70-130 mg/ml的濃度存在。
根據請求項1之藥學組成物，其中泊洛沙姆188以0.8-1.2 mg/ml的濃度存在。
根據請求項1之藥學組成物，其中脯胺酸以20-34 mg/ml的濃度存在。
根據請求項1之藥學組成物，其中該組成物包含： (i) 5-50 mg/ml帕博利珠單抗； (ii) 0.087-0.432 mg/ml組胺酸； (iii) 0.464-0.931 mg/ml一水合組胺酸鹽酸鹽； (iv) 1-2 mg/ml甘胺酸； (v) 70-130 mg/ml海藻糖和0.8-1.2 mg/ml泊洛沙姆188，或 20-34 mg/ml脯胺酸；和 (vi) 注射用水至1 ml。
根據請求項9之藥學組成物，其中帕博利珠單抗以20-30 mg/ml的濃度存在。
根據請求項10之藥學組成物，其中帕博利珠單抗以25 mg/ml的濃度存在。
根據請求項9之藥學組成物，其中組胺酸以0.200-0.319 mg/ml的濃度存在。
根據請求項12之藥學組成物，其中組胺酸以0.221 mg/ml的濃度存在。
根據請求項9之藥學組成物，其中一水合組胺酸鹽酸鹽以0.650-0.850 mg/ml的濃度存在。
根據請求項14之藥學組成物，其中一水合組胺酸鹽酸鹽以0.750 mg/ml的濃度存在。
根據請求項9之藥學組成物，其中甘胺酸以1.5 mg/ml的濃度存在。
根據請求項9之藥學組成物，其中海藻糖以70-100 mg/ml的濃度存在。
根據請求項17之藥學組成物，其中海藻糖以75-85 mg/ml的濃度存在。
根據請求項18之藥學組成物，其中海藻糖以80 mg/ml的濃度存在。
根據請求項1之藥學組成物，其中海藻糖是二水合海藻糖。
根據請求項9之藥學組成物，其中泊洛沙姆188以1.0 mg/ml的濃度存在。
根據請求項9之藥學組成物，其中脯胺酸以24-30 mg/ml的濃度存在。
根據請求項22之藥學組成物，其中脯胺酸以27 mg/ml的濃度存在。
根據請求項1之藥學組成物，其中該組成物的pH為5.1-6.1。
根據請求項24之藥學組成物，其中該組成物的pH為5.6。
根據請求項1之藥學組成物，其中該組成物包含： (i) 25 mg/ml帕博利珠單抗； (ii) 0.221 mg/ml組胺酸； (iii) 0.750 mg/ml一水合組胺酸鹽酸鹽； (iv) 1.5 mg/ml甘胺酸； (v) 80 mg/ml海藻糖和1.0 mg/ml泊洛沙姆188； (vi) 注射用水至1 ml；和其中該組成物的pH為5.5-5.7。
根據請求項20之藥學組成物，其中該組成物包含： (i) 25 mg/ml帕博利珠單抗； (ii) 0.221 mg/ml組胺酸； (iii) 0.750 mg/ml一水合組胺酸鹽酸鹽； (iv) 1.5 mg/ml甘胺酸； (v) 80 mg/ml二水合海藻糖和1.0 mg/ml泊洛沙姆188； (vi) 注射用水至1 ml；和其中該組成物的pH為5.5-5.7。
根據請求項1之藥學組成物，其中該組成物包含： (i) 25 mg/ml帕博利珠單抗； (ii) 0.221 mg/ml組胺酸； (iii) 0.750 mg/ml一水合組胺酸鹽酸鹽； (iv) 1.5 mg/ml甘胺酸； (v) 27 mg/ml脯胺酸； (vi) 注射用水至1 ml；和其中該組成物的pH為5.5-5.7。
根據請求項26-28中任一項之藥學組成物，其中該組成物的pH為5.6。
一種帕博利珠單抗的藥學組成物，其通過凍乾根據請求項1-29中任一項之帕博利珠單抗的藥學組成物而生產。
一種根據請求項1-30中任一項之帕博利珠單抗的藥學組成物用於治療惡性瘤或感染性疾病的用途。
根據請求項31之用途，其中該惡性瘤選自：黑素瘤、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、頭頸癌、原發性縱隔大B細胞淋巴瘤、尿路上皮癌、胃癌、高微衛星不穩定性/DNA錯配修復缺陷(MMR)惡性瘤、肝細胞癌、宮頸癌、默克爾細胞癌、腎細胞癌、子宮內膜癌、食管癌、鱗狀細胞皮膚癌、基底細胞癌、乳腺癌、結腸直腸癌、***癌、甲狀腺癌、膀胱癌、非霍奇金淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、胰腺癌、卵巢癌、膽囊癌、惡性腦腫瘤、成膠質細胞瘤、具有高突變負擔的腫瘤。
一種根據請求項1-30中任一項之帕博利珠單抗的藥學組成物用於生產旨在用於治療惡性瘤或感染性疾病的醫藥產品中的用途。
根據請求項33之用途，其中該惡性瘤選自：黑素瘤、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、頭頸癌、原發性縱隔大B細胞淋巴瘤、尿路上皮癌、胃癌、高微衛星不穩定性/DNA錯配修復缺陷(MMR)惡性瘤、肝細胞癌、宮頸癌、默克爾細胞癌、腎細胞癌、子宮內膜癌、食管癌、鱗狀細胞皮膚癌、基底細胞癌、乳腺癌、結腸直腸癌、***癌、甲狀腺癌、膀胱癌、非霍奇金淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、胰腺癌、卵巢癌、膽囊癌、惡性腦腫瘤、成膠質細胞瘤、具有高突變負擔的腫瘤。