本揭示內容提供了以下證據：包括MMP-3、SAA、鐵調素、CXCL13、sICAM-1和CRP的幾種生物標記與薩瑞魯單抗治療的臨床功效和對所述薩瑞魯單抗治療的單獨預測的反應相關。例如，與低三分位(tertile)組患者相比，接受過薩瑞魯單抗治療的SAA基線濃度最高的患者更有可能達到ACR20/50/70或DAS28-CRP ＜ 3.2反應：ACR20（OR [95%CI] 5.5 [2.1，14.5]）；ACR50（5.4 [2.2，13.2]）； ACR70（5.7 [1.8，18.4]）；DAS28-CRP ＜ 3.2（6.1 [2.3，15.7]）。與高MMP-3和CRP相比，SAA始終是可預測的，高MMP-3和CRP僅可預測ACR20和DAS28-CRP ＜ 3.2反應（表5）。與骨重建、滑膜淋巴樣細胞和髓樣細胞浸潤以及發炎性貧血相關的生物標記的基線水平不能預測在24週的功效，與ACR20反應相關的鐵調素和CXCL13除外。
對於對循環生物標記的治療藥效學作用的分析發現，與阿達木單抗相比，薩瑞魯單抗治療減少了急性期反應、骨吸收、滑膜發炎和CV風險的生物標記。這些作用通常在早期觀察到並且持續直到第24週。對於CRP，這一點特別明顯並且與以前的觀察結果一致。另外，與用阿達木單抗單一療法相比，用薩瑞魯單抗單一療法治療的患者中有更大比例的患者在第24週時表現出血清生物標記標準化，這對於急性期反應的生物標記（CRP和SAA）最大。
如本文所提供的，SAA和CRP在基線處均與DAS28-CRP高度相關（標稱P ＜ 0.0001）。然而，在基線生物標記與PRO之間未觀察到相關性。在阿達木單抗治療的患者中，幾種生物標記的減少與第24週的臨床功效相關；然而，這些相關沒有在薩瑞魯單抗組中觀察到。此結果表明，與TNF抑制劑相比，IL-6受體阻斷可對這些生物標記的產生具有直接作用，而與其對疾病活性的影響無關。
高水平的CRP、SAA、MMP-3、CXCL13和sICAM-1預測了對薩瑞魯單抗的ACR20反應。這些標記物與一些患者報告結局（PRO）的變化相關。SAA和MMP-3的高基線水平還與幾種PRO（包括患者全面VAS、HAQ-DI、疼痛VAS、SF-36 PCS和MCS評分、晨僵VAS和RAID評分）的改善相關。
C 反應蛋白（ CRP ）（ GenBank 參考： NP_001315986.1 ）
此基因編碼的蛋白屬於正五聚蛋白家族。基於其識別外來病原體和宿主受損細胞以及藉由與血液中的體液效應系統和細胞效應系統相互作用來開始消除所述外來病原體和宿主受損細胞的能力，它參與了幾種與宿主防禦相關的功能。因此，在對組織損傷、感染或其他發炎刺激的急性期反應期間，此蛋白在血漿中的水平大大升高。
在某些實施例中，CRP血清濃度在低三分位組患者中趨於在1.0-3.4 mg/l的範圍內，在中三分位組患者中趨於在6.9-13.1 mg/l的範圍內，並且在高三分位組患者中趨於在27.9-65.1 mg/l的範圍內。在某些實施例中，用IL-6受體抗體治療24週後，血清CRP濃度在高三分位組中的患者可以達到ACR20，可以達到小於3.2的DAS28-CRP評分，或者可以在患者全面VAS、HAQ-DI、疼痛VAS、SF-36 - PCS評分或晨僵VAS方面得到改善。在某些實施例中，用IL-6受體抗體治療24週後，血清CRP在中三分位組中的患者可以在患者全面VAS、HAQ-DI、疼痛VAS、SF-36 - PCS評分、SF-36 - PF域、晨僵VAS或RAID評分方面得到改善。
在某些實施例中，下文提供了CRP的核酸序列和胺基酸序列。
CRP轉錄本變異體2 cDNA序列（GenBank參考：NP_001315986.1）：
ATGGAGAAGCTGTTGTGTTTCTTGGTCTTGACCAGCCTCTCTCATGCTTTTGGCCAGACAGACATGTCGAGGAAGGCTTTTGTGTTTCCCAAAGAGTCGGATACTTCCTATGTATCCCTCAAAGCACCGTTAACGAAGCCTCTCAAAGCCTTCACTGTGTGCCTCCACTTCTACACGGAACTGTCCTCGACCCGTGGGTACAGTATTTTCTCGTATGCCACCAAGAGACAAGACAATGAGATTCTCATATTTTGGTCTAAGGATATAGGATACAGTTTTACAGTGGGTGGGTCTGAAATATTATTCGAGGTTCCTGAAGTCACAGTAGCTCCAGTACACATTTGTACAAGCTGGGAGTCCGCCTCAGGGATCGTGGAGTTCTGGGTAGATGGGAAGCCCAGGGTGAGGAAGAGTCTGAAGAAGGGATACACTGTGGGGGCAGAAGCAAGCATCATCTTGGGGCAGGAGCAGGATTCCTTCGGTGGGAACTTTGAAGGAAGCCAGTCCCTGGTGGGAGACATTGGAAATGTGAACATGTGGGACTTTGTGCTGTCACCAGATGAGATTAACACCATCTATCTTGGCGGGCCCTTCAGTCCTAATGTCCTGAACTGGCGGGCACTGAAGTATGAAGTGCAAGGCGAAGTGTTCACCAAACCCCAGCTGTGGCCCTGA (SEQ ID NO: 11)
注意：與變異體1相比，CRP轉錄本變異體2在3'UTR中保留內含子。變異體1和變異體2二者編碼相同的亞型。
CRP肽序列：
MEKLLCFLVLTSLSHAFGQTDMSRKAFVFPKESDTSYVSLKAPLTKPLKAFTVCLHFYTELSSTRGYSIFSYATKRQDNEILIFWSKDIGYSFTVGGSEILFEVPEVTVAPVHICTSWESASGIVEFWVDGKPRVRKSLKKGYTVGAEASIILGQEQDSFGGNFEGSQSLVGDIGNVNMWDFVLSPDEINTIYLGGPFSPNVLNWRALKYEVQGEVFTKPQLWP (SEQ ID NO: 12)
CRP基因組DNA序列（GenBank參考：NG_013007.1）：
GACTGGATTCAGAGACTCAAACAATGTTATTGAGGCATGGTCTATCTCTCAGCTCTACTCGTGAGTCAAGGATGGTGTATTAGTTGGTTTTCACACTGCTGTAAAGAACTACCTGAGTATGGGTAATTTATAAACAAAAGAAATTTTAAATGAACTTACAGTTCCACATGTTTGGGGAGGACTCATGAAACTTACAATCATGGTGGAAGGTGAAGGGGAAGCAGGCATTTTCTTCACAAGGCAGCAGGAGAGAGACAGTGTGAGTGGGGGACTGCCAAGCACTTTTATTTAAATCATCAGACCTAGTGAGAACTCATTATCATGAGCACAGCATGGGCAAAACTACCTCCACGATCCAATCTTCTCCCACCATGTCCCTCCCTCAACTCATGGGGATTACAATTTGAGATGACATTTGGGTGGGAACACAGAACCAAACCATATCATTCCACCTCTGGCTCCTCCAAAATATCATGTTCTTTTCACATTTCAAAACCAATCATACCTTCCCAACAGTCACCCAAACTTAACTCATTTCAGCATTAACTCAAAAGTCCAAGTCTAAAGTTCCATCTGAGAAAAGGCAAGTCACTTCTGCCTATTAGCCTAGTAAAATAAAAAACAAGTTAGTTACTTCCAAGATACAGTGGGGGTATAGGCATTGGGTAAATGGTCCTGTTTGAAATGGGAGAAATTGGCCAAAACAAAGGGGCCACAGGCCCCATGTAAATCCAAAATCTGGCAGGACACTCATGAAATCTTAAAGCTCCAAAATAATCTCCTTTGATTCTTTGTCTCACATCCAGGGCATGCTGATGCAAGCGGTAGGCTTCCATGGCCTTGGGTAGCTCCATACTTGTGGCTCTTCAGGGTACAGCCCCTGTGGCTGCTTTCACAGGCTGGCATTGAACACTTGCAAGCTTTTCTAAGCACAAGGTGCAAACTGTCAGTGGTTCTACCATTCTGGGATCTGGAGGACAGTGGCCCTCTTCTCACAGATCCACTAGGCAGTGCCCCAGTGGGGACTCTGTGTGGAGACTCCAACCCCACATTTCCCTGCTGCATTGCCCTAGTAGAGGTTTTCTGTGAGGGCTCCATGCCTGCAGAAGACTTCTGCCTGAACATCCAGGTGTTTCCATACATCTTCTGAAATCTAGACAGAAACTCCCAAAGCTCAACTCTTGTCTTCTGTGCATCTGCACCCTCAACACTACTTGGAAGCCACCAAGGCTTGGGGCTTGTGCCCTCTGAAGCAATGGCCTGAGCTATATACATTGCCCCCTTTTAGCCATGGCTGGAGCCGCAGCAGCTGGCACACAGGGTGCCATGTTCCTGGGCTGCACAGAGCAGCGGGGCCCTGGGCCTGGCCCATGATACCATTTTTTCCTCCTAGGCTTTTGGACCTCTGATGGGAGGGGCTGCCATGAAGATCTTCTGAAATGACCTGAAGACATTTTCCTCATTGTTTTGGCTATCAACATTCATCTCCTCATTACTTATGCAAATTTCTGCAGCCAGCTTGAATTTTTCCCCAGAAAATGGGTTTTTCTTTTCTACCACATGGTCAGGCTGCACATTTTCCAAACTTTTATGCTCCCTTTCCCTTTTAAACATAAGTTCCAATTTCAGATCATCTCTTTGTGAACACATATGATTGTATGTTTTCAGAAAAAGCCAGGTCACTTCTTGAATGCTTTGGTGCTTAGAAATTTCTTAAGCACCAAAGCATTCAAGAAATCATGTCTCTTAAGTTAAAAGTTCCACAGATCTCTAGGGCATGGGCAAAATGCCACCATTGTCTTTGCTAAAACATAGAAAGAGTGACCTTTACTCCCGTTTCCAATAAGTTCCTCATCTCCATCTAAGGACACCTCTGCATGAACTTCATTTTCCATATCACTATCAGCATTTTGGTCAAAACCATTCAACAAAACTCAGGAAGTTCCAAGCTTTTCCACATCTTCCTGTCTTCTCCTGAGCCCTCCAAACTCTTCCAGCCTCTGCCCCTAGTTGGTTCCAA (SEQ ID NO: 13)
基質金屬肽酶 3 （ MMP-3 ）（ Genbank 參考： EAW67032.1 ）
基質金屬蛋白酶（MMP）家族的蛋白參與正常生理過程（如胚胎發育、繁殖和組織重建）以及疾病過程（如關節炎和轉移）中的細胞外基質的分解。大多數MMP被分泌為在由細胞外蛋白酶切割時被啟動的不活躍的前蛋白。此基因對降解纖連蛋白、層粘連蛋白、膠原蛋白III、IV、IX和X、以及軟骨蛋白聚糖的酶進行編碼。所述酶被認為參與了傷口修復、動脈粥樣硬化的進展以及腫瘤啟動。所述基因是位於11q22.3號染色體上的MMP基因簇的一部分。
在某些實施例中，MMP-3血清濃度在低三分位組患者中趨於在10.3-20.8 ng/ml的範圍內，在中三分位組患者中趨於在35.5-54.1 ng/ml的範圍內，並且在高三分位組患者中趨於在77.0-154.3 ng/ml的範圍內。在某些實施例中，用IL-6受體抗體治療24週後，血清MMP-3濃度在高三分位組中的患者可以達到ACR20，可以達到小於3.2的DAS28-CRP評分，或者可以在患者全面VAS、HAQ-DI、疼痛VAS、SF-36 - PCS評分或晨僵VAS方面得到改善。在某些實施例中，用IL-6受體抗體治療24週後，血清MMP-3濃度在中三分位組中的患者可以在疼痛VAS方面得到改善。
在某些實施例中，下文提供了MMP-3的核酸序列和胺基酸序列。
MMP-3肽序列：
MKSLPILLLLCVAVCSAYPLDGAARGEDTSMNLVQKYLENYYDLKKDVKQFVRRKDSGPVVKKIREMQKFLGLEVTGKLDSDTLEVMRKPRCGVPDVGHFRTFPGIPKWRKTHLTYRIVNYTPDLPKDAVDSAVEKALKVWEEVTPLTFSRLYEGEADIMISFAVREHGDFYPFDGPGNVLAHAYAPGPGINGDAHFDDDEQWTKDTTGTNLFLVAAHEIGHSLGLFHSANTEALMYPLYHSLTDLTRFRLSQDDINGIQSLYGPPPDSPETPLVPTEPVPPEPGTPANCDPALSFDAVSTLRGEILIFKDRHFWRKSLRKLEPELHLISSFWPSLPSGVDAAYEVTSKDLVFIFKGNQFWAIRGNEVRAGYPRGIHTLGFPPTVRKIDAAISDKEKNKTYFFVEDKYWRFDEKRNSMEPGFPKQIAEDFPGIDSKIDAVFEEFGFFYFFTGSSQLEFDPNAKKVTHTLKSNSWLNC (SEQ ID NO: 14)
MMP-3 cDNA序列：
ATGAAGAGTCTTCCAATCCTACTGTTGCTGTGCGTGGCAGTTTGCTCAGCCTATCCATTGGATGGAGCTGCAAGGGGTGAGGACACCAGCATGAACCTTGTTCAGAAATATCTAGAAAACTACTACGACCTCAAAAAAGATGTGAAACAGTTTGTTAGGAGAAAGGACAGTGGTCCTGTTGTTAAAAAAATCCGAGAAATGCAGAAGTTCCTTGGATTGGAGGTGACGGGGAAGCTGGACTCCGACACTCTGGAGGTGATGCGCAAGCCCAGGTGTGGAGTTCCTGATGTTGGTCACTTCAGAACCTTTCCTGGCATCCCGAAGTGGAGGAAAACCCACCTTACATACAGGATTGTGAATTATACACCAGATTTGCCAAAAGATGCTGTTGATTCTGCTGTTGAGAAAGCTCTGAAAGTCTGGGAAGAGGTGACTCCACTCACATTCTCCAGGCTGTATGAAGGAGAGGCTGATATAATGATCTCTTTTGCAGTTAGAGAACATGGAGACTTTTACCCTTTTGATGGACCTGGAAATGTTTTGGCCCATGCCTATGCCCCTGGGCCAGGGATTAATGGAGATGCCCACTTTGATGATGATGAACAATGGACAAAGGATACAACAGGGACCAATTTATTTCTCGTTGCTGCTCATGAAATTGGCCACTCCCTGGGTCTCTTTCACTCAGCCAACACTGAAGCTTTGATGTACCCACTCTATCACTCACTCACAGACCTGACTCGGTTCCGCCTGTCTCAAGATGATATAAATGGCATTCAGTCCCTCTATGGACCTCCCCCTGACTCCCCTGAGACCCCCCTGGTACCCACGGAACCTGTCCCTCCAGAACCTGGGACGCCAGCCAACTGTGATCCTGCTTTGTCCTTTGATGCTGTCAGCACTCTGAGGGGAGAAATCCTGATCTTTAAAGACAGGCACTTTTGGCGCAAATCCCTCAGGAAGCTTGAACCTGAATTGCATTTGATCTCTTCATTTTGGCCATCTCTTCCTTCAGGCGTGGATGCCGCATATGAAGTTACTAGCAAGGACCTCGTTTTCATTTTTAAAGGAAATCAATTCTGGGCTATCAGAGGAAATGAGGTACGAGCTGGATACCCAAGAGGCATCCACACCCTAGGTTTCCCTCCAACCGTGAGGAAAATCGATGCAGCCATTTCTGATAAGGAAAAGAACAAAACATATTTCTTTGTAGAGGACAAATACTGGAGATTTGATGAGAAGAGAAATTCCATGGAGCCAGGCTTTCCCAAGCAAATAGCTGAAGACTTTCCAGGGATTGACTCAAAGATTGATGCTGTTTTTGAAGAATTTGGGTTCTTTTATTTCTTTACTGGATCTTCACAGTTGGAGTTTGACCCAAATGCAAAGAAAGTGACACACACTTTGAAGAGTAACAGCTGGCTTAATTGTTGA (SEQ ID NO: 15)
MMP-3 mRNA序列（GenBank參考：NM_002422.5）：
ACAAGGAGGCAGGCAAGACAGCAAGGCATAGAGACAACATAGAGCTAAGTAAAGCCAGTGGAAATGAAGAGTCTTCCAATCCTACTGTTGCTGTGCGTGGCAGTTTGCTCAGCCTATCCATTGGATGGAGCTGCAAGGGGTGAGGACACCAGCATGAACCTTGTTCAGAAATATCTAGAAAACTACTACGACCTCAAAAAAGATGTGAAACAGTTTGTTAGGAGAAAGGACAGTGGTCCTGTTGTTAAAAAAATCCGAGAAATGCAGAAGTTCCTTGGATTGGAGGTGACGGGGAAGCTGGACTCCGACACTCTGGAGGTGATGCGCAAGCCCAGGTGTGGAGTTCCTGATGTTGGTCACTTCAGAACCTTTCCTGGCATCCCGAAGTGGAGGAAAACCCACCTTACATACAGGATTGTGAATTATACACCAGATTTGCCAAAAGATGCTGTTGATTCTGCTGTTGAGAAAGCTCTGAAAGTCTGGGAAGAGGTGACTCCACTCACATTCTCCAGGCTGTATGAAGGAGAGGCTGATATAATGATCTCTTTTGCAGTTAGAGAACATGGAGACTTTTACCCTTTTGATGGACCTGGAAATGTTTTGGCCCATGCCTATGCCCCTGGGCCAGGGATTAATGGAGATGCCCACTTTGATGATGATGAACAATGGACAAAGGATACAACAGGGACCAATTTATTTCTCGTTGCTGCTCATGAAATTGGCCACTCCCTGGGTCTCTTTCACTCAGCCAACACTGAAGCTTTGATGTACCCACTCTATCACTCACTCACAGACCTGACTCGGTTCCGCCTGTCTCAAGATGATATAAATGGCATTCAGTCCCTCTATGGACCTCCCCCTGACTCCCCTGAGACCCCCCTGGTACCCACGGAACCTGTCCCTCCAGAACCTGGGACGCCAGCCAACTGTGATCCTGCTTTGTCCTTTGATGCTGTCAGCACTCTGAGGGGAGAAATCCTGATCTTTAAAGACAGGCACTTTTGGCGCAAATCCCTCAGGAAGCTTGAACCTGAATTGCATTTGATCTCTTCATTTTGGCCATCTCTTCCTTCAGGCGTGGATGCCGCATATGAAGTTACTAGCAAGGACCTCGTTTTCATTTTTAAAGGAAATCAATTCTGGGCTATCAGAGGAAATGAGGTACGAGCTGGATACCCAAGAGGCATCCACACCCTAGGTTTCCCTCCAACCGTGAGGAAAATCGATGCAGCCATTTCTGATAAGGAAAAGAACAAAACATATTTCTTTGTAGAGGACAAATACTGGAGATTTGATGAGAAGAGAAATTCCATGGAGCCAGGCTTTCCCAAGCAAATAGCTGAAGACTTTCCAGGGATTGACTCAAAGATTGATGCTGTTTTTGAAGAATTTGGGTTCTTTTATTTCTTTACTGGATCTTCACAGTTGGAGTTTGACCCAAATGCAAAGAAAGTGACACACACTTTGAAGAGTAACAGCTGGCTTAATTGTTGAAAGAGATATGTAGAAGGCACAATATGGGCACTTTAAATGAAGCTAATAATTCTTCACCTAAGTCTCTGTGAATTGAAATGTTCGTTTTCTCCTGCCTGTGCTGTGACTCGAGTCACACTCAAGGGAACTTGAGCGTGAATCTGTATCTTGCCGGTCATTTTTATGTTATTACAGGGCATTCAAATGGGCTGCTGCTTAGCTTGCACCTTGTCACATAGAGTGATCTTTCCCAAGAGAAGGGGAAGCACTCGTGTGCAACAGACAAGTGACTGTATCTGTGTAGACTATTTGCTTATTTAATAAAGACGATTTGTCAGTTATTTTA (SEQ ID NO: 16)
C-X-C 基序趨化因子配體 13 （ CXCL13 ）（ GenBank 參考： NP_006410.1 ）
獨立選殖並且名為Angie的B淋巴細胞趨化因子是在脾濾泡、淋巴結和派爾斑中強烈表現的抗微生物肽和CXC趨化因子。它顯然藉由刺激鈣流入表現伯基特淋巴瘤受體1（BLR-1）的細胞和所述細胞的趨化性，優先促進B淋巴細胞（與T細胞和巨噬細胞相比）的遷移。因此，它可以在將B淋巴細胞歸巢至濾泡中起作用。
在某些實施例中，CXCL13血清濃度在低三分位組患者中趨於在52.4-72.0 pg/ml的範圍內，在中三分位組患者中趨於在98.2-130.6 pg/ml的範圍內，並且在高三分位組患者中趨於在180.8-323.9 pg/ml的範圍內。
在某些實施例中，用抗體治療24週後，血清CXCL13濃度在高三分位組中的患者可以達到ACR20或者在HAQ-DI、SF-36 - PCS評分或SF-36 - PF域方面得到改善。
在某些實施例中，下文提供了CXCL13的核酸序列和胺基酸序列。
CXCL13肽序列（GenBank參考：NP_006410.1）：
MKFISTSLLLMLLVSSLSPVQGVLEVYYTSLRCRCVQESSVFIPRRFIDRIQILPRGNGCPRKEIIVWKKNKSIVCVDPQAEWIQRMMEVLRKRSSSTLPVPVFKRKIP (SEQ ID NO: 17)
CXCL13 cDNA序列（GenBank參考：NP_006410.1）：
ATGAAGTTCATCTCGACATCTCTGCTTCTCATGCTGCTGGTCAGCAGCCTCTCTCCAGTCCAAGGTGTTCTGGAGGTCTATTACACAAGCTTGAGGTGTAGATGTGTCCAAGAGAGCTCAGTCTTTATCCCTAGACGCTTCATTGATCGAATTCAAATCTTGCCCCGTGGGAATGGTTGTCCAAGAAAAGAAATCATAGTCTGGAAGAAGAACAAGTCAATTGTGTGTGTGGACCCTCAAGCTGAATGGATACAAAGAATGATGGAAGTATTGAGAAAAAGAAGTTCTTCAACTCTACCAGTTCCAGTGTTTAAGAGAAAGATTCCCTGA (SEQ ID NO: 18)
CXCL13基因組DNA序列（GenBank參考：NM_006419.2）：
GAGAAGATGTTTGAAAAAACTGACTCTGCTAATGAGCCTGGACTCAGAGCTCAAGTCTGAACTCTACCTCCAGACAGAATGAAGTTCATCTCGACATCTCTGCTTCTCATGCTGCTGGTCAGCAGCCTCTCTCCAGTCCAAGGTGTTCTGGAGGTCTATTACACAAGCTTGAGGTGTAGATGTGTCCAAGAGAGCTCAGTCTTTATCCCTAGACGCTTCATTGATCGAATTCAAATCTTGCCCCGTGGGAATGGTTGTCCAAGAAAAGAAATCATAGTCTGGAAGAAGAACAAGTCAATTGTGTGTGTGGACCCTCAAGCTGAATGGATACAAAGAATGATGGAAGTATTGAGAAAAAGAAGTTCTTCAACTCTACCAGTTCCAGTGTTTAAGAGAAAGATTCCCTGATGCTGATATTTCCACTAAGAACACCTGCATTCTTCCCTTATCCCTGCTCTGGATTTTAGTTTTGTGCTTAGTTAAATCTTTTCCAGGAAAAAGAACTTCCCCATACAAATAAGCATGAGACTATGTAAAAATAACCTTGCAGAAGCTGATGGGGCAAACTCAAGCTTCTTCACTCACAGCACCCTATATACACTTGGAGTTTGCATTCTTATTCATCAGGGAGGAAAGTTTCTTTGAAAATAGTTATTCAGTTATAAGTAATACAGGATTATTTTGATTATATACTTGTTGTTTAATGTTTAAAATTTCTTAGAAAACAATGGAATGAGAATTTAAGCCTCAAATTTGAACATGTGGCTTGAATTAAGAAGAAAATTATGGCATATATTAAAAGCAGGCTTCTATGAAAGACTCAAAAAGCTGCCTGGGAGGCAGATGGAACTTGAGCCTGTCAAGAGGCAAAGGAATCCATGTAGTAGATATCCTCTGCTTAAAAACTCACTACGGAGGAGAATTAAGTCCTACTTTTAAAGAATTTCTTTATAAAATTTACTGTCTAAGATTAATAGCATTCGAAGATCCCCAGACTTCATAGAATACTCAGGGAAAGCATTTAAAGGGTGATGTACACATGTATCCTTTCACACATTTGCCTTGACAAACTTCTTTCACTCACATCTTTTTCACTGACTTTTTTTGTGGGGGGCGGGGCCGGGGGGACTCTGGTATCTAATTCTTTAATGATTCCTATAAATCTAATGACATTCAATAAAGTTGAGCAAACATTTTACTTAAAAAAAAAAAAAAAAAA (SEQ ID NO: 19)
血清澱粉樣蛋白 A （ SAA ）（ GenBank 參考： AAB24060.1 ）
此基因編碼脂蛋白元(apolipoprotein)的血清澱粉樣蛋白A家族的成員。經編碼的前蛋白原經過蛋白水解處理以生成成熟蛋白。此蛋白是反應於發炎和組織損傷而高度表現的主要急性期蛋白。此蛋白在HDL代謝和膽固醇活體內平衡中也起著重要作用。高水平的這種蛋白與慢性發炎疾病（包括動脈粥樣硬化、類風溼性關節炎、阿茲海默症和克羅恩氏病）有關。此蛋白也可以是某些腫瘤的潛在生物標記。選擇性剪接產生多個編碼相同蛋白的轉錄本變異體。此基因的假基因被發現位於11號染色體上。
在某些實施例中，SAA血清濃度在低三分位組患者中趨於在2192.7-5346.4 ng/l的範圍內，在中三分位組患者中趨於在11832.0-30082.0 ng/l的範圍內，並且在高三分位組患者中趨於在105200.0-256000.0 ng/l的範圍內。在某些實施例中，用抗體治療24週後，血清SAA濃度在高三分位組中的患者可以達到ACR20、ACR50或ACR70，可以達到小於3.2的DAS28-CRP評分，或者可以在患者全面VAS、HAQ-DI、疼痛VAS、SF-36 - PCS評分、SF-36 – PF域、晨僵VAS或RAID評分方面得到改善。在某些實施例中，用所述抗體治療24週後，血清SAA濃度在中三分位組中的患者可以在HAQ-DI方面得到改善。
在某些實施例中，下文提供了SAA的核酸序列和胺基酸序列。
血清澱粉樣蛋白A肽序列（GenBank參考：AAB24060.1）：
MRLFTGIVFCSLVMGVTSESWRSFFKEALQGVGDMGRAYWDIMISNHQNSNRYLYARGNYDAAQRGPGGVWAAKLISRSRVYLQGLIDYYLFGNSSTVLEDSKSNEKAEEWGRSGKDPDRFRPDGLPKKY (SEQ ID NO: 20)
血清澱粉樣蛋白A cDNA序列（GenBank參考：AAB24060.1）：
ATGAGGCTTTTCACAGGCATTGTTTTCTGCTCCTTGGTCATGGGAGTCACCAGTGAAAGCTGGCGTTCGTTTTTCAAGGAGGCTCTCCAAGGGGTTGGGGACATGGGCAGAGCCTATTGGGACATAATGATATCCAATCACCAAAATTCAAACAGATATCTCTATGCTCGGGGAAACTATGATGCTGCCCAAAGAGGACCTGGGGGTGTCTGGGCTGCTAAACTCATCAGCCGTTCCAGGGTCTATCTTCAGGGATTAATAGACTACTATTTATTTGGAAACAGCAGCACTGTATTGGAGGACTCGAAGTCCAACGAGAAAGCTGAGGAATGGGGCCGGAGTGGCAAAGACCCCGACCGCTTCAGACCTGACGGCCTGCCTAAGAAATACTGA (SEQ ID NO: 21)
血清澱粉樣蛋白A mRNA序列（GenBank參考：M81349.1）：
TATAGCTCCACGGCCAGAAGATACCAGCAGCTCTGCCTTTACTGAAATTTCAGCTGGAGAAAGGTCCACAGCACAATGAGGCTTTTCACAGGCATTGTTTTCTGCTCCTTGGT
CATGGGAGTCACCAGTGAAAGCTGGCGT
TCGTTTTTCAAGGAGGCTCTCCAAGGGGTTGGGGACATGGGCAGAGCCTATTGGGACATAATGATATCCAATCACCAAAATTCAAACAGATATCTCTATGCTCGGGGAAACTATGATGCTGCCCAAAGAGGACCTGGGGGTGTCTGGGCTGCTAAACTCATCAGCCGTTCCAGGGTCTATCTTCAGGGATTAATAGACTACTATTTATTTGGAAACAGCAGCACTGTATTGGAGGACTCGAAGTCCAACGAGAAAGCTGAGGAATGGGGCCGGAGTGGCAAAGACCCCGACCGCTTCAGACCTGACGGCCTGCCTAAGAAATACTGAGCTTCCTGCTCCTCTGCTCTCAGGGAAACTGGGCTGTGAGCCACACACTTCTCCCCCCAGACAGGGACACAGGGTCACTGAGCTTTGTGTCCCCAGGAACTGGTATAGGGCACCTAGAGGTGTTCAATAAATGTTTGTCAAATTGA (SEQ ID NO: 22)
可溶性細胞間粘附分子 -1 （ sICAM-1 ）（ GenBank 參考： NP_000192.2 ）：
所有ICAM蛋白均為I型跨膜糖蛋白，含有2-9個免疫球蛋白樣C2型結構域，並且結合至白細胞粘附LFA-1蛋白。此蛋白可藉由阻斷LFA-1依賴性細胞粘附而在淋巴細胞再循環中發揮作用。它介導對於抗原特異性免疫反應、NK細胞介導的清除、淋巴細胞再循環重要的粘附相互作用，以及對於免疫反應和監視重要的其他細胞相互作用。已發現此基因的幾種編碼相同蛋白的轉錄本變異體。
sICAM-1血清濃度在低三分位組患者中趨於在179.7-212.1 ng/ml的範圍內，在中三分位組患者中趨於在239.7-272.3 ng/ml的範圍內，並且在高三分位組患者中趨於在313.7-380.0 ng/ml的範圍內。在某些實施例中，用抗體治療24週後，血清CXCL13濃度在低三分位組中且sICAM-1濃度在低三分位組中的患者可以達到ACR50。在某些實施例中，用抗體治療24週後，血清CXCL13濃度在高三分位組中且sICAM-1濃度在高三分位組中的患者可以達到ACR50。
在某些實施例中，下文提供了sICAM-1的核酸序列和胺基酸序列。
sICAM-1肽序列（GenBank參考：NP_000192.2）：
MAPSSPRPALPALLVLLGALFPGPGNAQTSVSPSKVILPRGGSVLVTCSTSCDQPKLLGIETPLPKKELLLPGNNRKVYELSNVQEDSQPMCYSNCPDGQSTAKTFLTVYWTPERVELAPLPSWQPVGKNLTLRCQVEGGAPRANLTVVLLRGEKELKREPAVGEPAEVTTTVLVRRDHHGANFSCRTELDLRPQGLELFENTSAPYQLQTFVLPATPPQLVSPRVLEVDTQGTVVCSLDGLFPVSEAQVHLALGDQRLNPTVTYGNDSFSAKASVSVTAEDEGTQRLTCAVILGNQSQETLQTVTIYSFPAPNVILTKPEVSEGTEVTVKCEAHPRAKVTLNGVPAQPLGPRAQLLLKATPEDNGRSFSCSATLEVAGQLIHKNQTRELRVLYGPRLDERDCPGNWTWPENSQQTPMCQAWGNPLPELKCLKDGTFPLPIGESVTVTRDLEGTYLCRARSTQGEVTRKVTVNVLSPRYEIVIITVVAAAVIMGTAGLSTYLYNRQRKIKKYRLQQAQKGTPMKPNTQATPP (SEQ ID NO: 23)
sICAM-1 cDNA序列（GenBank參考：NP_000192.2）：
ATGGCTCCCAGCAGCCCCCGGCCCGCGCTGCCCGCACTCCTGGTCCTGCTCGGGGCTCTGTTCCCAGGACCTGGCAATGCCCAGACATCTGTGTCCCCCTCAAAAGTCATCCTGCCCCGGGGAGGCTCCGTGCTGGTGACTGCAGCACCTCCTGTGACCAGCCCAAGTTGTTGGGCATAGAGACCCCGTTGCCTAAAAAGGAGTTGCTC
CTGCCTGGGAACAACCGGAAGGTGTATGAACTGAGCAATGTGCAAGAAGATAGCCAACCAATGTGCTATTCAAACTGCCCTGATGGGCAGTCAACAGCTAAAACCTTCCTCACCGTGTACTGGACTCCAGAACGGGTGGAACTGGCACCCCTCCCCTCTTGGCAGCCAGTGGGCAAGAACCTTACCCTACGCTGCCAGGTGGAGGGTGGGGCACCCCGGGCCAACCTCACCGTGGTGCTGCTCCGTGGGGAGAAGGAGCTGAAACGGGAGCCAGCTGTGGGGGAGCCCGCTGAGGTCACGACCACGGTGCTGGTGAGGAGAGATCACCATGGAGCCAATTTCTCGTGCCGCACTGAACTGGACCTGCGGCCCCAAGGGCTGGAGCTGTTTGAGAACACCTCGGCCCCCTACCAGCTCCAGACCTTTGTCCTGCCAGCGACTCCCCCACAACTTGTCAGCCCCCGGGTCCTAGAGGTGGACACGCAGGGGACCGTGGTCTGTTCCCTGGACGGGCTGTTCCCAGTCTCGGAGGCCCAGGTCCACCTGGCACTGGGGGACCAGAGGTTGAACCCCACAGTCACCTATGGCAACGACTCCTTCTCGGCCAAGGCCTCAGTCAGTGTGACCGCAGAGGACGAGGGCACCCAGCGGCTGACGTGTGCAGTAATACTGGGGAACCAGAGCCAGGAGACACTGCAGACAGTGACCATCTACAGCTTTCCGGCGCCCAACGTGATTCTGACGAAGCCAGAGGTCTCAGAAGGGACCGAGGTGACAGTGAAGTGTGAGGCCCACCCTAGAGCCAAGGTGACGCTGAATGGGGTTCCAGCCCAGCCACTGGGCCCGAGGGCCCAGCTCCTGCTGAAGGCCACCCCAGAGGACAACGGGCGCAGCTTCTCCTGCTCTGCAACCCTGGAGGTGGCCGGCCAGCTTATACACAAGAACCAGACCCGGGAGCTTCGTGTCCTGTATGGCCCCCGACTGGACGAGAGGGATTGTCCGGGAAACTGGACGTGGCCAGAAAATTCCCAGCAGACTCCAATGTGCCAGGCTTGGGGGAACCCATTGCCCGAGCTCAAGTGTCTAAAGGATGGCACTTTCCCACTGCCCATCGGGGAATCAGTGACTGTCACTCGAGATCTTGAGGGCACCTACCTCTGTCGGGCCAGGAGCACTCAAGGGGAGGTCACCCGCAAGGTGACCGTGAATGTGCTCTCCCCCCGGTATGAGATTGTCATCATCACTGTGGTAGCAGCCGCAGTCATAATGGGCACTGCAGGCCTCAGCACGTACCTCTATAACCGCCAGCGGAAGATCAAGAAATACAGACTACAACAGGCCCAAAAAGGGACCCCCATGAAACCGAACACACAAGCCACGCCTCCCTGA (SEQ ID NO: 24)
sICAM-1 mRNA序列（GenBank參考：NM_000201.3）
GAGCTCCTCTGCTACTCAGAGTTGCAACCTCAGCCTCGCTATGGCTCCCAGCAGCCCCCGGCCCGCGCTGCCCGCACTCCTGGTCCTGCTCGGGGCTCTGTTCCCAGGACCTGGCAATGCCCAGACATCTGTGTCCCCCTCAAAAGTCATCCTGCCCCGGGGAGGCTCCGTGCTGGTGACATGCAGCACCTCCTGTGACCAGCCCAAGTTGTTGGGCATAGAGACCCCGTTGCCTAAAAAGGAGTTGCTCCTGCCTGGGAACAACCGGAAGGTGTATGAACTGAGCAATGTGCAAGAAGATAGCCAACCAATGTGCTATTCAAACTGCCCTGATGGGCAGTCAACAGCTAAAACCTTCCTCACCGTGTACTGGACTCCAGAACGGGTGGAACTGGCACCCCTCCCCTCTTGGCAGCCAGTGGGCAAGAACCTTACCCTACGCTGCCAGGTGGAGGGTGGGGCACCCCGGGCCAACCTCACCGTGGTGCTGCTCCGTGGGGAGAAGGAGCTGAAACGGGAGCCAGCTGTGGGGGAGCCCGCTGAGGTCACGACCACGGTGCTGGTGAGGAGAGATCACCATGGAGCCAATTTCTCGTGCCGCACTGAACTGGACCTGCGGCCCCAAGGGCTGGAGCTGTTTGAGAACACCTCGGCCCCCTACCAGCTCCAGACCTTTGTCCTGCCAGCGACTCCCCCACAACTTGTCAGCCCCCGGGTCCTAGAGGTGGACACGCAGGGGACCGTGGTCTGTTCCCTGGACGGGCTGTTCCCAGTCTCGGAGGCCCAGGTCCACCTGGCACTGGGGGACCAGAGGTTGAACCCCACAGTCACCTATGGCAACGACTCCTTCTCGGCCAAGGCCTCAGTCAGTGTGACCGCAGAGGACGAGGGCACCCAGCGGCTGACGTGTGCAGTAATACTGGGGAACCAGAGCCAGGAGACACTGCAGACAGTGACCATCTACAGCTTTCCGGCGCCCAACGTGATTCTGACGAAGCCAGAGGTCTCAGAAGGGACCGAGGTGACAGTGAAGTGTGAGGCCCACCCTAGAGCCAAGGTGACGCTGAATGGGGTTCCAGCCCAGCCACTGGGCCCGAGGGCCCAGCTCCTGCTGAAGGCCACCCCAGAGGACAACGGGCGCAGCTTCTCCTGCTCTGCAACCCTGGAGGTGGCCGGCCAGCTTATACACAAGAACCAGACCCGGGAGCTTCGTGTCCTGTATGGCCCCCGACTGGACGAGAGGGATTGTCCGGGAAACTGGACGTGGCCAGAAAATTCCCAGCAGACTCCAATGTGCCAGGCTTGGGGGAACCCATTGCCCGAGCTCAAGTGTCTAAAGGATGGCACTTTCCCACTGCCCATCGGGGAATCAGTGACTGTCACTCGAGATCTTGAGGGCACCTACCTCTGTCGGGCCAGGAGCACTCAAGGGGAGGTCACCCGCAAGGTGACCGTGAATGTGCTCTCCCCCCGGTATGAGATTGTCATCATCACTGTGGTAGCAGCCGCAGTCATAATGGGCACTGCAGGCCTCAGCACGTACCTCTATAACCGCCAGCGGAAGATCAAGAAATACAGACTACAACAGGCCCAAAAAGGGACCCCCATGAAACCGAACACACAAGCCACGCCTCCCTGAACCTATCCCGGGACAGGGCCTCTTCCTCGGCCTTCCCATATTGGTGGCAGTGGTGCCACACTGAACAGAGTGGAAGACATATGCCATGCAGCTACACCTACCGGCCCTGGGACGCCGGAGGACAGGGCATTGTCCTCAGTCAGATACAACAGCATTTGGGGCCATGGTACCTGCACACCTAAAACACTAGGCCACGCATCTGATCTGTAGTCACATGACTAAGCCAAGAGGAAGGAGCAAGACTCAAGACATGATTGATGGATGTTAAAGTCTAGCCTGATGAGAGGGGAAGTGGTGGGGGAGACATAGCCCCACCATGAGGACATACAACTGGGAAATACTGAAACTTGCTGCCTATTGGGTATGCTGAGGCCCCACAGACTTACAGAAGAAGTGGCCCTCCATAGACATGTGTAGCATCAAAACACAAAGGCCCACACTTCCTGACGGATGCCAGCTTGGGCACTGCTGTCTACTGACCCCAACCCTTGATGATATGTATTTATTCATTTGTTATTTTACCAGCTATTTATTGAGTGTCTTTTATGTAGGCTAAATGAACATAGGTCTCTGGCCTCACGGAGCTCCCAGTCCTAATCACATTCAAGGTCACCAGGTACAGTTGTACAGGTTGTACACTGCAGGAGAGTGCCTGGCAAAAAGATCAAATGGGGCTGGGACTTCTCATTGGCCAACCTGCCTTTCCCCAGAAGGAGTGATTTTTCTATCGGCACAAAAGCACTATATGGACTGGTAATGGTTACAGGTTCAGAGATTACCCAGTGAGGCCTTATTCCTCCCTTCCCCCCAAAACTGACACCTTTGTTAGCCACCTCCCCACCCACATACATTTCTGCCAGTGTTCACAATGACACTCAGCGGTCATGTCTGGACATGAGTGCCCAGGGAATATGCCCAAGCTATGCCTTGTCCTCTTGTCCTGTTTGCATTTCACTGGGAGCTTGCACTATGCAGCTCCAGTTTCCTGCAGTGATCAGGGTCCTGCAAGCAGTGGGGAAGGGGGCCAAGGTATTGGAGGACTCCCTCCCAGCTTTGGAAGCCTCATCCGCGTGTGTGTGTGTGTGTATGTGTAGACAAGCTCTCGCTCTGTCACCCAGGCTGGAGTGCAGTGGTGCAATCATGGTTCACTGCAGTCTTGACCTTTTGGGCTCAAGTGATCCTCCCACCTCAGCCTCCTGAGTAGCTGGGACCATAGGCTCACAACACCACACCTGGCAAATTTGATTTTTTTTTTTTTTCCAGAGACGGGGTCTCGCAACATTGCCCAGACTTCCTTTGTGTTAGTTAATAAAGCTTTCTCAACTGCC (SEQ ID NO: 25)
疼痛VAS
疼痛視覺類比量表（VAS）是疼痛強度的一維量度，已廣泛用於各種成人族群（包括風濕性疾病族群）中。疼痛VAS是由水平線（HVAS）或垂直線（VVAS）組成的連續量表，其長度通常為10 cm（100 mm），由2個詞語描述錨定，每個症狀極限一個。對於疼痛強度，所述量表最常以「沒有疼痛」（0分）和「疼痛可能達到的糟糕程度」或「可想像的最嚴重疼痛」（100分[100-mm量表]）錨定。為避免評分聚集在首選數值附近，建議不使用在中間點的數位或語言描述。
患者全面VAS
患者全面疾病活動性評估是類風溼性關節炎（RA）中各種疾病活動性量度的關鍵組分。我們的目的是使用定量性多變數資料簡化方法來鑑別推進患者全面評估的潛在潛特質。在某些實施例中，患者藉由回答「考慮到疾病影響您的所有方式，您在過去一周做得如何？」的問題，對其對於視覺類比量表（VAS）的全面評估進行評級。因此，患者全面不僅從患者的角度評估疾病，而且還涵蓋除RA外影響患者的各種因素。
晨僵VAS
患者被詢問醒來時是否有關節僵硬（是或否）；回答「是」的患者被要求藉由在嚴重程度量表（100-mm視覺類比量表[VAS]，其中0 = 一點都不嚴重，並且100 = 極其嚴重）上劃豎直線來指示晨僵的嚴重程度。這些患者還被要求記錄關節中晨僵消退的時間；晨僵的持續時間藉由從醒來時間中減去該時間進行計算。患者還被要求藉由在100-mm VAS（其中0 = 沒有疼痛並且100 = 非常嚴重的疼痛）上劃線來記錄醒來時的疼痛強度。
抗 IL-6R 抗體
本揭示內容包括向患者投予特異性結合hIL-6R的抗體或其抗原結合片段的方法。如本文所用，術語「hIL-6R」意指特異性結合人介白素6（IL-6）的人細胞激素受體。在某些實施例中，向患者投予的抗體特異性結合hIL-6R的細胞外結構域。
如本文所用，術語「抗體」旨在指包含藉由二硫鍵相互連接的四條多肽鏈、兩條重（H）鏈和兩條輕（L）鏈的免疫球蛋白分子，以及其多聚體（例如，IgM）。每條重鏈包含重鏈可變區（本文縮寫為HCVR或VH）和重鏈恒定區。重鏈恒定區包含三個結構域，CH1、CH2和CH3。每條輕鏈包含輕鏈可變區（在本文中縮寫為LCVR或VL）和輕鏈恒定區。輕鏈恒定區包含一個結構域（CL1）。VH和VL區可以進一步細分為具有高變性的區域，稱為互補決定區（CDR），散佈有更保守的區域，稱為框架區（FR）。每個VH和VL由三個CDR和四個FR構成，按照以下順序從氨基末端到羧基末端排列：FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。在一些實施例中，抗體（或其抗原結合部分）的FR可以與人種系序列相同，或者可以是天然的或人工修飾的。可以基於兩個或更多個CDR的並排分析來定義胺基酸共有序列。
如本文所用，術語「抗體」還包括完整抗體分子的抗原結合片段。如本文所用，術語抗體的「抗原結合部分」、抗體的「抗原結合片段」等包括特異性結合抗原以形成複合物的任何天然存在的、可酶促獲得的、合成的或基因工程化的多肽或糖蛋白。抗體的抗原結合片段可以使用任何合適的標準技術，如蛋白水解消化或係關於操縱和表現編碼抗體可變結構域和任選恒定結構域的DNA的重組基因工程技術，例如從完整抗體分子衍生。這種DNA是已知的和/或容易從例如商業來源、DNA文庫（包括例如噬菌體-抗體文庫）獲得，或可以合成。DNA可以按化學方式或藉由使用分子生物學技術進行測序和操縱，例如，以將一個或多個可變結構域和/或恒定結構域排列成合適的組態，或引入密碼子，產生半胱胺酸殘基，修飾、添加胺基酸或使之缺失等。
抗原結合片段的非限制性例子包括：(i) Fab片段；(ii) F(ab')2片段；(iii) Fd片段；(iv) Fv片段；(v) 單鏈Fv（scFv）分子；(vi) dAb片段；(vii) 由模擬抗體高變區的胺基酸殘基組成的最小識別單位（例如，分離的互補決定區（CDR），如CDR3肽），或受限FR3-CDR3-FR4肽。如本文所用，其他工程化分子，如結構域特異性抗體、單結構域抗體、結構域缺失抗體、嵌合抗體、CDR嫁接抗體、雙抗體、三抗體、四抗體、微抗體、奈米抗體（例如單價奈米抗體和二價奈米抗體）、小的模組化免疫藥物（SMIP）和鯊魚可變IgNAR結構域也涵蓋在表述「抗原結合片段」內。
抗體的抗原結合片段通常將包含至少一個可變結構域。可變結構域可以具有任何大小或胺基酸組成，並且通常將包含與一個或多個框架序列相鄰或同框的至少一個CDR。在其中VH結構域與VL結構域相締合的抗原結合片段中，VH結構域和VL結構域可以按任何適合的排列相對彼此定位。例如，可變區可以是二聚體並含有VH-VH、VH-VL或VL-VL二聚體。可替代地，抗體的抗原結合片段可以含有單體VH或VL結構域。
在某些實施例中，抗體的抗原結合片段可以含有與至少一個恒定結構域共價連接的至少一個可變結構域。可以在抗體的抗原結合片段內發現的可變結構域和恒定結構域的非限制性示例性組態包括：(i) VH-CH1；(ii) VH-CH2；(iii) VH-CH3；(iv) VH-CH1-CH2；(v) VH-CH1-CH2-CH3；(vi) VH-CH2-CH3；(vii) VH-CL；(viii) VL-CH1；(ix) VL-CH2；(x) VL-CH3；(xi) VL-CH1-CH2；(xii) VL-CH1-CH2-CH3；(xiii) VL-CH2-CH3；和(xiv) VL-CL。在可變結構域和恒定結構域的任何組態中，包括上文列出的任何示例性組態，可變結構域和恒定結構域可以彼此直接連接或可以藉由完整或部分鉸鏈或連接子連接。在各種實施例中，鉸鏈區可以由至少2個（例如，5、10、15、20、40、60或更多個）胺基酸組成，其導致單個多肽分子中相鄰可變結構域和/或恒定結構域之間的柔韌性或半柔韌性連接。此外，在各種實施例中，抗體的抗原結合片段可以包含上文列出的任何可變結構域和恒定結構域組態的同型二聚體或異型二聚體（或其他多聚體），彼此非共價締合和/或與一個或多個單體VH或VL結構域非共價締合（例如，藉由一個或多個二硫鍵）。
與完整的抗體分子一樣，抗原結合片段可以是單特異性或多特異性的（例如，雙特異性的）。抗體的多特異性抗原結合片段典型地包含至少兩個不同的可變結構域，其中每個可變結構域能夠特異性結合單獨的抗原或同一抗原上的不同表位。在各種實施例中，任何多特異性抗體形式，包括本文揭示的示例性雙特異性抗體形式，可以使用業內可利用的習知技術來改編，使其適用於抗IL-6R抗體的抗原結合片段情形。
抗體的恒定區在抗體固定補體和介導細胞依賴性細胞毒性的能力上是重要的。因此，可以基於對於抗體來說介導細胞毒性是否是希望的來選擇抗體的同種型。
如本文所用，術語「人抗體」旨在包括具有來源於人種系免疫球蛋白序列的可變區和恒定區的抗體。儘管如此，在各種實施例中，本揭示內容中表徵的人抗體（例如在CDR中，並且在一些實施例中是在CDR3中）包括不由人種系免疫球蛋白序列編碼的胺基酸殘基（例如，藉由體外隨機或位點特異性誘變或藉由活體內體細胞突變引入的突變）。然而，如本文所用，術語「人抗體」不旨在包括其中衍生自另一種哺乳動物物種（如小鼠）的種系的CDR序列已經被移植到人框架序列上的抗體。
如本文所用，術語「重組人抗體」旨在包括藉由重組方式製備、表現、產生或分離的所有人抗體，如使用轉染到宿主細胞中的重組表現載體表現的抗體（下文進一步描述），從重組的組合人抗體文庫（下文進一步描述）分離的抗體，從針對人免疫球蛋白基因為轉基因的動物（例如小鼠）分離的抗體（參見例如，Taylor等人 (1992) Nucl. Acids Res. 20:6287-6295，藉由引用以其整體併入本文）或藉由係關於將人免疫球蛋白基因序列剪接到其他DNA序列的任何其他方式製備、表現、產生或分離的抗體。此類重組人抗體具有來源於人種系免疫球蛋白序列的可變區和恒定區。然而，在某些實施例中，對此類重組人抗體進行體外誘變（或者，當使用針對人Ig序列轉基因的動物時，進行活體內體細胞誘變），從而儘管重組抗體的VH和VL區的胺基酸序列源自人種系VH和VL序列且與其相關，但是重組抗體的VH和VL區的胺基酸序列為可能不是天然存在於活體內人抗體種系庫內的序列。
人抗體可以以與鉸鏈異質性相關的兩種形式存在。在一個實施例中，免疫球蛋白分子包含大約150-160 kDa的穩定四鏈構建體，其中二聚體藉由鏈間重鏈二硫鍵保持在一起。在某些實施例中，二聚體不經由鏈間二硫鍵連接，並且形成約75-80 kDa的分子，其由共價偶聯的輕鏈和重鏈（半抗體）構成。這些實施例/形式極難以分離，即使在親和純化後也是如此。
在各完整IgG同種型中第二種形式出現的頻率是歸因於但不限於與抗體的鉸鏈區同種型相關的結構差異。人IgG4鉸鏈的鉸鏈區中的單個胺基酸取代可以將第二種形式的出現率（Angal等人, (1993) Molecular Immunology 30:105，將其藉由引用以其整體併入）顯著降低至通常使用人IgG1鉸鏈觀察到的水平。在各種實施例中，本揭示內容涵蓋在鉸鏈區、CH2區或CH3區中具有一個或多個突變的抗體，所述突變例如在製造上可能是希望的，以改善所希望抗體形式的產率。
如本文所用，「分離的抗體」意指已被鑑別並從它的天然環境的至少一種組分分離和/或回收的抗體。例如，已從生物體的至少一種組分或從其中天然存在或天然產生抗體的組織或細胞中分離或除去的抗體是「分離的抗體」。在各種實施例中，分離的抗體還包括重組細胞內的原位抗體。在其他實施例中，分離的抗體是已經受至少一個純化或分離步驟的抗體。在各種實施例中，分離的抗體可以基本上不含其他細胞材料和/或化學品。
術語「特異性結合」等意指抗體或其抗原結合片段與抗原形成在生理條件下相對穩定的複合物。用於測定抗體是否特異性結合抗原的方法是業內熟知的，並且包括例如平衡透析、表面等離子體共振等。例如，如本文所用，「特異性結合」IL-6R的抗體包括結合IL-6R的抗體或其部分，其KD小於約1000 nM、小於約500 nM、小於約300 nM、小於約200 nM、小於約100 nM、小於約90 nM、小於約80 nM、小於約70 nM、小於約60 nM、小於約50 nM、小於約40 nM、小於約30 nM、小於約20 nM、小於約10 nM、小於約5 nM、小於約4 nM、小於約3 nM、小於約2 nM、小於約1 nM或約0.5 nM，如在表面等離子體共振測定中所量測。然而，特異性結合人IL-6R的分離的抗體可以具有與其他抗原如來自其他（非人）物種的IL-6R分子的交叉反應性。
如本文所用，術語「表面等離子體共振」是指一種光學現象，它允許藉由例如使用BIAcore™系統（Biacore Life Sciences division of GE Healthcare, 皮斯卡塔韋, 新澤西州）檢測生物感測器矩陣內蛋白質濃度的改變來分析即時相互作用。
如本文所用，術語「KD」旨在是指抗體-抗原相互作用的平衡解離常數。
術語「表位」是指與抗體分子可變區中稱為互補位（paratope）的特異性抗原結合位點相互作用的抗原決定區。單一抗原可以具有多於一個表位。因此，不同的抗體可以結合抗原上的不同區域並且可以具有不同的生物效應。表位可以是構形的或線性的。藉由來自線性多肽鏈的不同區段的空間並列胺基酸產生構形表位。線性表位是由多肽鏈中的相鄰胺基酸殘基產生的表位。在某些情況下，表位可包括抗原上的糖、磷醯基基團或磺醯基基團的部分。
在各種實施例中，與衍生所述抗體的對應種系序列相比，可用於本文所表徵方法的抗IL-6R抗體可以在重鏈和輕鏈可變結構域的框架和/或CDR區中包含一個或多個胺基酸取代、***和/或缺失。藉由將本文揭示的胺基酸序列與可從例如公共抗體序列資料庫獲得的種系序列相比較，可以容易地測定此類突變。在各種實施例中，本揭示內容包括係關於使用抗體及其抗原結合片段的方法，所述抗體及其抗原結合片段衍生自本文揭示的任何胺基酸序列，其中一個或多個框架和/或CDR區內的一個或多個胺基酸突變為衍生所述抗體的種系序列的一個或多個對應殘基，或另一個人種系序列的一個或多個對應殘基，或所述一個或多個對應種系殘基的保守胺基酸取代（此類序列變化在本文中統稱為「種系突變」）。可以構建許多抗體和抗原結合片段，其包含一個或多個單獨種系突變或其組合。在某些實施例中，VH和/或VL結構域內的所有框架殘基和/或CDR殘基回復突變到衍生所述抗體的原始種系序列中發現的殘基。在其他實施例中，僅將某些殘基突變回原始種系序列，例如，僅在FR1的前8個胺基酸內或在FR4的最後8個胺基酸內發現的突變殘基，或僅在CDR1、CDR2或CDR3中發現的突變殘基。在其他實施例中，一個或多個框架和/或CDR殘基中的一個或多個突變成不同種系序列（即與最初衍生所述抗體的種系序列不同的種系序列）的一個或多個對應殘基。此外，抗體可以含有所述框架和/或CDR區內的兩個或更多個種系突變的任何組合，例如，其中某些單獨殘基突變為特定種系序列的對應殘基，同時保留不同於原始種系序列的某些其他殘基或使之突變為不同種系序列的對應殘基。一旦獲得，則可以容易地測試含有一個或多個種系突變的抗體和抗原結合片段的一種或多種所希望特性，如改善的結合特異性、增加的結合親和力、改進或增強的拮抗或激動生物學特性（視情況而定）、降低的免疫原性等。本揭示內容涵蓋使用以這種一般方式獲得的抗體和抗原結合片段。
本揭示內容還包括係關於使用抗IL-6R抗體的方法，所述抗IL-6R抗體包含具有一個或多個保守取代的本文揭示的任何HCVR、LCVR和/或CDR胺基酸序列的變異體。例如，本發明方法包括使用具有HCVR、LCVR和/或CDR胺基酸序列的抗IL-6R抗體，其具有例如相對於本文揭示的任何HCVR、LCVR和/或CDR胺基酸序列的10個或更少、8個或更少、6個或更少、4個或更少等保守胺基酸取代。
根據本揭示內容，在各種實施例中，抗IL-6R抗體或其抗原結合片段包含重鏈可變區（HCVR）、輕鏈可變區（LCVR）和/或互補決定區（CDR），所述HCVR、LCVR和/或CDR包含美國專利號7,582,298（將其藉由引用以其整體併入本文）中所要求保護的抗IL-6R抗體的任何胺基酸序列。可以在本揭示內容的方法的情形中使用的抗IL-6R抗體或其抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 1的胺基酸序列的HCVR的重鏈互補決定區（HCDR）和含有SEQ ID NO: 2的胺基酸序列的LCVR的輕鏈互補決定區（LCDR）。根據某些實施例，抗IL-6R抗體或其抗原結合片段包含三個HCDR（即HCDR1、HCDR2和HCDR3）和三個LCDR（即LCDR1、LCDR2和LCDR3），其中HCDR1包含SEQ ID NO: 3的胺基酸序列；HCDR2包含SEQ ID NO: 4的胺基酸序列；HCDR3包含SEQ ID NO: 5的胺基酸序列；LCDR1包含SEQ ID NO: 6的胺基酸序列；LCDR2包含SEQ ID NO: 7的胺基酸序列；並且LCDR3包含SEQ ID NO: 8的胺基酸序列。在又其他實施例中，抗IL-6R抗體或其抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 1的HCVR和含有SEQ ID NO: 2的LCVR。
在某些實施例中，抗IL-6R抗體或其抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 9的重鏈和含有SEQ ID NO: 10的輕鏈。根據某些示例性實施例，本揭示內容的方法包括使用業內稱作和已知為薩瑞魯單抗的抗IL-6R抗體或其生物等效物。
SEQ ID NO: 1的胺基酸序列是
EVQLVESGGGLVQPGRSLRLSCAASRFTFDDYAMHWVRQAPGKGLEWVSGISWNSGRIGYADSVKGRFTISRDNAENSLFLQMNGLRAEDTALYYCAKGRDSFDIWGQGTMVTVSS
SEQ ID NO: 2的胺基酸序列是
DIQMTQSPSSVSASVGDRVTITCRASQGISSWLAWYQQKPGKAPKLLIYGASSLESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFASYYCQQANSFPYTFGQGTKLEIK.
SEQ ID NO: 3的胺基酸序列是RFTFDDYA。
SEQ ID NO: 4的胺基酸序列是ISWNSGRI。
SEQ ID NO: 5的胺基酸序列是AKGRDSFDI。
SEQ ID NO: 6的胺基酸序列是QGISSW。
SEQ ID NO: 7的胺基酸序列是GAS。
SEQ ID NO: 8的胺基酸序列是QQANSFPYT。
SEQ ID NO: 9的胺基酸序列是
EVQLVESGGGLVQPGRSLRLSCAAS
RFTFDDYA
MHWVRQAPGKGLEWVSG
ISWNSGRI
GYADSVKGRFTISRDNAENSLFLQMNGLRAEDTALYYC
AKGRDSFDI
WGQGTMVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK.
SEQ ID NO: 10的胺基酸序列是
DIQMTQSPSSVSASVGDRVTITCRAS
QGISSW
LAWYQQKPGKAPKLLIY
GAS
SLESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFASYYC
QQANSFPYT
FGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC.
如本文所用，術語「生物等效物」是指在相同莫耳劑量和相似條件下（例如，相同的投予途徑）投予後具有相似生物可用性（可用性的速率和程度），使得可以預期在功效和安全性兩個方面的效果與對比分子本質上相同的分子。如果包含抗IL-6R抗體的兩種醫藥組合物在醫藥上等效，則它們是生物等效的，這意味著它們含有相同量的活性成分（例如IL-6R抗體），以相同的劑型，用於相同的投予途徑，並滿足相同或相當的標準。生物等效性可以例如藉由比較兩種組合物的藥動學參數的活體內研究來測定。生物等效性研究中常用的參數包括峰值血漿濃度（Cmax）和血漿藥物濃度時間曲線下面積（AUC）。
在某些實施例中，本揭示內容係關於包括向個體投予抗體的方法，所述抗體包含含有序列SEQ ID NO: 1的重鏈可變區和含有序列SEQ ID NO: 2的輕鏈可變區。
本揭示內容提供了包含這種抗體的醫藥組合物，以及使用這些組合物的方法。
包含含有序列SEQ ID NO: 1的重鏈可變區和含有序列SEQ ID NO: 2的輕鏈可變區的抗體是特異性結合人介白素6受體（hIL-6R）的抗體。參見國際公開號WO 2007/143168，將其藉由引用以其整體併入本文。
在某些實施例中，包含含有序列SEQ ID NO: 1的重鏈可變區和含有序列SEQ ID NO: 2的輕鏈可變區的抗體是薩瑞魯單抗。
DMARD
DMARD是藉由其在類風溼性關節炎中使用來減慢疾病進展定義的藥物。
DMARD已被分為合成（sDMARD）和生物（bDMARD）兩類。合成性DMARD非詳盡地包括甲胺蝶呤、柳氮磺胺吡啶(sulfasalazine)、來氟米特(leflunomide)和羥氯喹(hydroxychloroquine)。生物性DMARD非詳盡地包括阿達木單抗、戈利木單抗(golimumab)、依那西普(etanercept)、阿巴西普(abatacept)、英利昔單抗(infliximab)、利妥昔單抗(rituximab)、和托珠單抗(tocilizumab)。
投予方法和配製物
本文所述的方法包括單獨向患者投予治療有效量的抗hIL-6R抗體，以及任選地，向患者投予治療有效量的抗hIL-6R抗體與DMARD的組合。如本文所用，短語「治療有效量」是指引起與抑鬱症或抑鬱障礙相關的一種或多種症狀的可檢測的改善，或導致與產生抑鬱症或抑鬱障礙病症或者一種或多種症狀的一個或多個潛在病理機制相關的生物效應（例如，特定生物標記水平的降低）的治療劑量。例如，將引起以下任何症狀或病症改善的抗hIL-6R抗體的劑量視為「治療有效量」：喪失信心和自尊心，不適當的負罪感，死亡和自殺的想法，注意力降低，睡眠和食欲的紊亂，以及在大多數情況下感到悲傷和失去興趣。
在各種實施例中，將所述抗體投予至個體。在各種實施例中，將所述抗體每兩週投予一次。「每兩週一次」具有與「q2w」或「兩週一次」相同的含義，即，抗體在兩周的時間段內被投予一次。根據某些實施例，將所述抗體皮下投予。
在某些實施例中，將所述抗體每兩週一次投予約150 mg或約200 mg。在這種場景中，「約」是指所述量的5%以內的量。例如，「約150 mg」是142 mg至158 mg之間的範圍，並且「約200 mg」是90 mg至210 mg之間的範圍。根據某些實施例，將所述抗體皮下投予。
在各種實施例中，將抗體以包含提供改善的轉移、遞送、耐受性等且適合於皮下注射的合適的載劑、賦形劑和其他試劑的配製物投予個體。
所述可注射製劑可以藉由公共已知的方法來製備。例如，可以藉由例如將上述抗體或其鹽溶解、懸浮或乳化在習知用於注射的無菌水性介質或油性介質中來製備可注射製劑。作為注射用水性介質，有例如生理鹽水，一種含有葡萄糖和其他助劑等的等滲溶液，其可以與適當的增溶劑如醇（例如，乙醇）、多元醇（例如，丙二醇、聚乙二醇）、非離子表面活性劑 [例如，聚山梨醇酯20或80，HCO-50（氫化蓖麻油的聚氧乙烯（50 mol）加合物）] 等組合使用。作為油性介質，採用例如芝麻油、大豆油等，其可以與增溶劑如苯甲酸苄酯、苯甲醇等組合使用。這樣製備的可注射製劑可以填充在適當的安瓿中。
所述抗體通常是如本文和國際公開號WO 2011/085158（將其藉由引用以其整體併入本文）中所述進行配製的。
在各種實施例中，所述抗體被作為約pH 6.0的水性緩衝溶液投予，其含有
- 約21 mM組胺酸，
- 約45 mM精胺酸，
- 約0.2%（w/v）聚山梨醇酯20，
- 約5%（w/v）蔗糖，以及
- 約100 mg/mL與約200 mg/mL之間的所述抗體。
在某些實施例中，所述抗體被作為pH 6.0的水性緩衝溶液投予，其含有
- 約21 mM組胺酸，
- 約45 mM精胺酸，
- 約0.2%（w/v）聚山梨醇酯20，
- 約5%（w/v）蔗糖，以及
- 至少約130 mg/mL的所述抗體。
在某些實施例中，所述抗體被作為約pH 6.0的水性緩衝溶液投予，其含有
- 約21 mM組胺酸，
- 約45 mM精胺酸，
- 約0.2%（w/v）聚山梨醇酯20，
- 約5%（w/v）蔗糖，以及
- 約131.6 mg/mL的所述抗體。
在某些實施例中，所述抗體被作為約pH 6.0的水性緩衝溶液投予，其含有
- 約21 mM組胺酸，
- 約45 mM精胺酸，
- 約0.2%（w/v）聚山梨醇酯20，
- 約5%（w/v）蔗糖；以及
- 約175 mg/mL的所述抗體。
在某些實施例中，所述抗體被作為pH 6.0的水性緩衝溶液投予，其含有
- 21 mM組胺酸，
- 45 mM精胺酸，
- 0.2%（w/v）聚山梨醇酯20，
- 5%（w/v）蔗糖，以及
- 100 mg/mL與200 mg/mL之間的所述抗體。
在某些實施例中，所述抗體被作為pH 6.0的水性緩衝溶液投予，其含有
- 21 mM組胺酸，
- 45 mM精胺酸，
- 0.2%（w/v）聚山梨醇酯20，
- 5%（w/v）蔗糖，以及
- 至少130 mg/mL的所述抗體。
在某些實施例中，所述抗體被作為pH 6.0的水性緩衝溶液投予，其含有
- 21 mM組胺酸，
- 45 mM精胺酸，
- 0.2%（w/v）聚山梨醇酯20，
- 5%（w/v）蔗糖，以及
- 131.6 mg/mL的所述抗體。
在某些實施例中，所述抗體被作為pH 6.0的水性緩衝溶液投予，其含有
- 21 mM組胺酸，
- 45 mM精胺酸，
- 0.2%（w/v）聚山梨醇酯20，
- 5%（w/v）蔗糖；以及
- 175 mg/mL的所述抗體。
可以使用任何可接受的裝置或機構將根據本揭示內容的抗體投予至個體。例如，所述投予可以使用注射筒和針或者使用可重複使用的筆和/或自動注射器遞送裝置來完成。本揭示內容的方法包括使用許多可重複使用的筆和/或自動注射器遞送裝置來投予抗體（或包含所述抗體的醫藥配製物）。此類裝置的例子包括但不限於AUTOPEN™（Owen Mumford, Inc., Woodstock, UK），DISETRONIC™筆（Disetronic Medical Systems, Bergdorf, Switzerland），HUMALOG MIX 75/25™筆，HUMALOG™筆，HUMALIN 70/30™筆（Eli Lilly and Co., Indianapolis, IN），NOVOPEN™ I、II和III（Novo Nordisk, Copenhagen, Denmark），NOVOPEN JUNIOR™（Novo Nordisk, Copenhagen, Denmark），BD™筆（Becton Dickinson, Franklin Lakes, NJ），OPTIPEN™，OPTIPEN PRO™，OPTIPEN STARLET™，以及OPTICLIK™（Sanofi-Aventis, Frankfurt, Germany），僅舉幾例。用於皮下遞送本文所述醫藥組合物的一次性筆和/或自動注射器遞送裝置的例子包括但不限於SOLOSTAR™筆（Sanofi-Aventis）、FLEXPEN™（Novo Nordisk）和KWIKPEN™（Eli Lilly）、SURECLICK™自動注射器（Amgen, 千橡市, 加利福尼亞州）、PENLET™（Haselmeier, Stuttgart, 德國）、EPIPEN（Dey, L.P.）、HUMIRA™筆（Abbott Labs, 雅培科技園, 伊利諾州）、DAI®自動注射器（SHL Group）和採用PUSHCLICK™技術（SHL Group）的任何自動注射器，僅舉幾例。
在某些實施例中，將所述抗體用預填充注射筒投予。
在某些實施例中，將所述抗體用含有安全系統的預填充注射筒投予。例如，安全系統防止意外針刺損傷。在各種實施例中，將所述抗體用含有ÈRIS
TM
安全系統（West Pharmaceutical Services Inc.）的預填充注射筒投予。還參見美國專利號5,215,534和9,248,242，將其藉由引用以其整體併入本文。
在某些實施例中，將所述抗體用自動注射器投予。在各種實施例中，將所述抗體用特徵為PUSHCLICK™技術的自動注射器（SHL Group）投予。在各種實施例中，自動注射器是包括注射筒的裝置，所述注射筒允許向個體投予一定劑量的組合物和/或抗體。還參見美國專利號9,427,531和9,566,395，將其藉由引用以其整體併入本文。
患者族群
根據本揭示內容，「個體」是指人個體或人患者。
在各種實施例中，將根據本揭示內容的抗體投予至具有如上所述的血清生物標記濃度的個體。
根據本揭示內容，被其醫師視為「無效治療」的個體是在各種實施例中已顯示出對醫師測試的一種或多種DMARD不耐受的個體，和/或已顯示出對醫師測試的一種或多種DMARD的反應不足的個體，典型地是儘管先前投予了一種或多種DMARD但仍被醫師認為呈現出或具有活動性類風溼性關節炎的個體。「活動性類風溼性關節炎」通常被定義為：
-由醫師在典型定量腫脹和壓痛關節計數檢查中所計數的，66個關節中至少有6個腫脹關節並且68個關節中至少有8個壓痛關節，
-高敏C反應蛋白（hs-CRP）≥ 8mg/L或ESR≥ 28mm/H
- DAS28ESR ＞ 5.1。
在某些實施例中，個體中的「中度活動性RA」被定義為：個體中68個關節中至少有8個壓痛關節且至多有26個壓痛關節，以及66個關節中至少有6個腫脹關節和/或至多有16個腫脹關節。在某些實施例中，個體中的「重度活動性RA」被定義為：(i) 個體中68個關節中有多於27個壓痛關節和/或66個關節中至少有17個腫脹關節。
在一些實施例中，先前藉由投予至少一種不同於抗體的DMARD而無效治療類風溼性關節炎的個體為先前藉由投予DMARD而無效治療類風溼性關節炎的個體。在一些實施例中，所述DMARD選自甲胺蝶呤、柳氮磺胺吡啶、來氟米特和羥氯喹。在各種實施例中，所述DMARD是甲胺蝶呤。
在一些實施例中，先前藉由投予一種或多種不同於抗體的DMARD而無效治療類風溼性關節炎的個體為對甲胺蝶呤的反應或耐受性不充分的個體。
根據本揭示內容，對於先前藉由投予一種或多種不同於抗體的DMARD而無效治療類風溼性關節炎的那些個體，不再向所述個體投予一種或多種DMARD，並且在各種實施例中，以單一療法向個體單獨投予所述抗體。參見國際公開號WO 2017155990，將其藉由引用以其整體併入本文。
在一些實施例中，個體由於用DMARD治療引起的一種或多種身體反應、病症或症狀而對DMARD不耐受。身體反應、病症或症狀可以包括過敏、疼痛、噁心、腹瀉、氮血症、胃出血、腸出血、口腔潰瘍、血小板減少、腸穿孔、細菌感染、牙齦或口腔發炎、胃襯裡或腸襯裡發炎、細菌性敗血症、胃潰瘍、腸潰瘍、對陽光敏感的皮膚、頭暈、食欲不振、低能量和嘔吐。在某些實施例中，不耐受可以由個體或由醫學專業人員在檢查個體時測定。在各種實施例中，所述DMARD選自甲胺蝶呤、柳氮磺胺吡啶、來氟米特和羥氯喹。在一些實施例中，所述DMARD是甲胺蝶呤。
在一些實施例中，本揭示內容包括將一種或多種另外的治療劑與IL-6R抗體組合投予至個體。如本文所用，表述「與……組合」是指在包含IL-6R抗體的醫藥組合物之前、之後或同時投予另外的治療劑。在某些實施例中，將抗體與DMARD和/或TNF-α拮抗劑一起投予至個體。
在本文中提到的所有出版物出於所有目的藉由引用以其整體併入本文。
實例 實例 1 – 薩瑞魯單抗和阿達木單抗對骨吸收和心血管風險生物標記的差異作用，以及治療結果的預測。 方法
先前已全面描述了此III期活性藥物-比較物隨機對照試驗（Burmester GR,
Ann Rheum Dis
2017; 76:840-7.）。簡言之，MTX-INT/IR患者被隨機分配到每2週（q2w）200 mg薩瑞魯單抗或每2週40 mg阿達木單抗，持續24週。在第16週，對於那些壓痛關節和腫脹關節計數未達到≥ 20%改善的患者，允許將劑量提高至每週阿達木單抗。所述試驗是根據《良好臨床實踐》和《赫爾辛基宣言》的原則進行的；所有方案和患者資訊材料都由相應的倫理審查委員會批准，並且所有患者都提供了書面知情同意書。
功效和 PRO 終點
功效終點包括：根據美國風濕病學會標準達到≥ 20/50/70%改善（ACR20/50/70）的患者比例，臨床疾病活動性指標（CDAI）≤ 2.8，CDAI ≤ 10，使用CRP的DAS28（DAS28-CRP）或DAS28-ESR ＜ 2.6和DAS28-CRP或DAS28-ESR ＜ 3.2。
先前已針對整個ITT族群描述了研究中評價的PRO（Strand V,
Arthritis Res Ther
2018; 20:129），並且（以第24週自基線的變化的形式進行評價）所述PRO包括患者全面疾病活動性評估視覺類比量表（VAS）、健康評估問卷-殘疾指數（HAQ-DI）、疼痛VAS、慢性病療法的功能評估（FACIT）-疲勞、晨僵VAS、類風溼性關節炎疾病影響（RAID）評分以及醫療結局研究簡表（36項）健康調查（SF-36）身體部分總評（PCS）和精神部分總評（MCS）評分（包括身體功能、身體職能、身體疼痛、總體健康、活力、社會職能、情感職能和精神健康域）。
血清收集和生物標記分析
如果患者在雙盲期間被隨機分配並用薩瑞魯單抗或阿達木單抗治療，已經提供書面知情同意書以供將來使用樣本，並抽取投予前（基線）且可評估（生物標記族群）的血清樣本，則選擇這些患者進行該生物標記分析。在基線時以及治療後到第24週，從意圖治療族群中的307名患者（薩瑞魯單抗：n = 153；阿達木單抗：n = 154）中收集血清樣本並將其冷凍保存。基線結果提供於表1中。
表 1
生物標記族群中基線生物標記血清濃度
| 生物標記 | 阿達木單抗 40 mg q2w(n
= 154) | 薩瑞魯單抗 200 mg q2w （n
= 153 ） | 低三分位組 | 中三分位組 | 高三分位組 | 參考範圍a |
| SAA，ng/l | 22 806.0
(5817.2, 115 200.0) | 16 089.0
(4997.5, 85 918.0) | 3734.7
(2192.7, 5346.4) | 18549.5
(11 832.0, 30 082.0) | 174 900.0
(105 200.0, 256 000.0) | 1000.0–9249.3 |
| CRP，mg/l | 9.4 (3.8, 33.5) | 7.8 (2.8, 24.7) | 1.9 (1.0, 3.4) | 8.5 (6.9, 13.1) | 37.6 (27.9, 65.1) | |
| Lp(a)，mg/l | 235.5 (111.0, 559.0) | 179.0 (78.0, 402.0)* | 48.5
(17.5, 100.0) | 192.0
(157.0, 236.0) | 689.5
(450.0, 1116.0) | 19.0–1028.0 |
| MMP-3，ng/ml | 44.0 (25.2, 80.9) | 40.8 (19.3, 74.4) | 16.0 (10.3, 20.8) | 42.8 (35.5, 54.1) | 99.9 (77.0, 154.3) | 6.0–15.8 |
| 總RANKL，pmol/l | 484.5
(254.7, 1423.1) | 547.6
(268.5, 1361.3) | 200.1
(136.7, 258.5) | 515.0
(424.3, 674.0) | 2252.8
(1417.6, 3657.6) | 35.1–639.7 |
| P1NP，ng/ml | 45.9 (34.9, 63.9) | 44.7 (30.3, 59.9) | 27.6 (21.4, 32.9) | 45.6 (41.6, 50.1) | 73.2 (63.0, 87.6) | 47.9–204.1 |
| OPG，pmol/l | 5.9 (5.0, 8.0) | 6.0 (4.7, 7.5) | 4.3 (3.9, 5.0) | 5.9 (5.6, 6.5) | 8.8 (7.7, 10.5) | 3.6–7.9 |
| OC，ng/ml | 19.0 (13.8, 26.0) | 18.0 (13.9, 25.8) | 12.0 (9.6, 13.8) | 18.6 (16.8, 21.1) | 28.9 (26.0, 35.6) | 13.9–30.6 |
| CXCL13，pg/ml | 120.1 (72.4, 184.7) | 112.8 (70.8, 180.8) | 61.8 (52.4, 72.0) | 116.4 (98.2, 130.6) | 236.8 (180.8, 323.9) | 37.8–153.6 |
| sICAM-1，ng/ml | 258.6 (212.1, 324.8) | 257.3 (212.7, 304.0) | 199.3 (179.7, 212.1) | 257.7 (239.7, 272.3) | 339.4 (313.7, 380.0) | 186.0–331.0 |
| 鐵μmol/l | 10.5 (7.0, 14.9) | 11.3 (7.2, 16.0) | 6.1 (4.2, 7.0) | 10.9 (9.8, 12.2) | 17.2 (15.5, 20.3) | 10.8–28.9 |
| 鐵蛋白，ng/ml | 80.0 (41.1, 174.0) | 74.9 (35.1, 130.6) | 24.9 (13.9, 35.5) | 76.7 (60.5, 93.5) | 204.3 (154.9, 283.4) | 18.6–148.3 |
| TIBC，μg/dl | 321.5 (293.5, 350.5) | 324.0 (303.0, 361.0) | 286.0 (267.0, 297.0) | 322.0 (313.0, 332.0) | 373.0 (357.0, 397.0) | 247.2–363.0 |
| 鐵調素，ng/ml | 24.8 (9.7, 48.9) | 20.9 (9.2, 39.3) | 6.0 (3.7, 9.3) | 23.0 (17.0, 28.9) | 62.4 (43.9, 77.0) | 0.6–46.4 |
資料以基線中值（Q1，Q3）表示。CRP的參考範圍是基於健康的男性和女性族群（參考範圍由Covance提供）；對於所有其他生物標記，參考範圍是基於健康的絕經後女性（5%-95%；參考範圍由Bioclinica提供）。*未經調整的威爾科克森（Wilcoxon）檢定P值＜ 5%。CRP：C反應蛋白；CXCL13：趨化因子（C-X-C基序）配體13；Lp(a)：脂蛋白（a）；MMP 3：基質金屬蛋白酶-3；OC：骨鈣素；OPG：骨保護素；P1NP：1型前膠原N末端前肽；Q：四分位組；q2w：每2週；RANKL：核因子κB受體活化因子配體；SAA：血清澱粉樣蛋白A；sICAM-1：可溶性細胞間粘附分子-1；TIBC：總鐵結合能力。
到第24週在一個或兩個基線後時間點對生物標記進行回顧性分析（CRP除外）（表2）。選擇進行分析的時間點是基於薩瑞魯單抗治療後的先前資料，或基於表明RA療法對特異性標記物有急性或潛在影響的文獻。先前已經描述了大多數生物標記的測定特徵（Gabay C, 2018）。
表 2
個體血清生物標記評估時間表
| 功能 | 生物標記 | 基線 | 第2 週 | 第4 周 | 第8 周 | 第12 週 | 第16 週 | 第20 周 | 第24 週 |
| 急性期反應 | SAA | X | | | | X | | | X |
| CRP | X | | X | X | X | X | X | X |
| 動脈粥樣化血栓形成 | Lp(a) | X | | | | X | | | X |
| 滑膜發炎 | MMP-3 | X | | | | | | | X |
| 骨重建 | 總RANKL | X | X | | | | | | X |
| P1NP | X | | | | | | | X |
| OPG | X | X | | | | | | X |
| 骨鈣素 | X | | | | | | | X |
| 反映滑膜淋巴樣細胞浸潤的標記物
反映滑膜髓樣細胞浸潤的標記物 | CXCL13 | X | X | | | | | | X |
| sICAM-1 | X | X | | | | | | X |
| 慢性疾病性貧血 | 鐵 | X | X | | | | | | |
| 鐵蛋白 | X | X | | | | | | |
| TIBC | X | X | | | | | | |
| 鐵調素 | X | X | | | | | | |
CRP：C反應蛋白；CXCL13：趨化因子（C-X-C基序）配體13；Lp(a)：脂蛋白（a）；MMP-3：基質金屬蛋白酶-3；OPG：骨保護素；P1NP：1型前膠原N末端前肽；RANKL：核因子κB受體活化因子配體；SAA：血清澱粉樣蛋白A；sICAM-1：可溶性細胞間粘附分子-1；TIBC：總鐵結合能力
統計分析
使用威爾科克森檢定比較治療組之間的基線生物標記水平。計算總體生物標記族群中基線時的Spearman秩相關。
為了評價每個時間點各治療組之間循環生物標記濃度的藥效學變化，描述了自基線的絕對變化和百分比變化。另外，由於非正態分佈，使用非參數方法分析生物標記濃度的百分比變化。對於基線後量測一次的生物標記，實施針對基線值調整的基於秩的協方差分析（ANCOVA）。對於基線後量測兩次的生物標記，對秩變換的資料（方差分析[ANOVA]型方法）進行重複量測的混合效應模型，其中將治療、訪視和治療-訪視相互作用作為固定效應，基線生物標記值按秩變換，基線生物標記值按秩-訪視相互作用變換為固定協變數（假定非結構協方差結構）。針對假髮現率調整P值（Benjamini-Hochberg 5%閾值）。使用χ2檢定比較各組之間基線生物標記水平異常（根據測試實驗室提供的參考範圍）且經治療標準化的患者數量；報告未調整的P值。
使用相似的非參數方法，在每個治療組內的同一次訪視時，比較臨床反應者和臨床無反應者之間在第24週的生物標記濃度的百分比變化。還針對假髮現率調整P值。
對於二元功效終點，用作為固定效應的治療組和治療區、作為連續協變數的基線生物標記值、以及基線生物標記-治療組相互作用，使用Logistic回歸測試基線生物標記值對薩瑞魯單抗功效與阿達木單抗功效的預測效果。對於連續的PRO，使用具有與以上相同效果的線性回歸，並將基線PRO值作為協變數。報告相互作用的未經調整的P值以評估生物標記的預測值。在基線處使用生物標記族群中的三分位組值將患者分為高、中和低生物標記水平後，進行了相似的分析。另外，在具有高、中和低生物標記水平的患者中在薩瑞魯單抗和阿達木單抗之間單獨進行反應的成對比較，並且得出按區域分層的曼特爾-亨塞爾（Mantel-Haenszel）優勢比（OR）估計值和95%置信區間（CI），並使用森林圖進行圖形表示。對於連續的PRO，單獨在每個生物標記三分位組中進行線性回歸，並提供兩種治療之間CI為95%的最小二乘均值（LSM）變化的差異。
評估循環CXCL13和sICAM-1（相對於基線中值水平而言定義低水平或高水平）的差異組合，以預測對薩瑞魯單抗的反應，對每種組合得出的OR使用曼特爾-亨塞爾估計。
所有分析全部使用SAS 9.2版或更高版本（SAS Institute Inc.，美國北卡羅來納州卡裡）進行。
生物標記分析
使用Bioclinica Lab（法國里昂）經過驗證的專有酶聯免疫吸附測定（ELISA）對除C反應蛋白（CRP）外的所有生物標記血清濃度進行回顧性分析。使用西門子高靈敏度CRP比濁測定在Covance實驗室（美國印第安那州印弟安納波里斯、瑞士日內瓦或新加坡）對CRP進行評估。測定內精度＜ 3%，測定間精度＜ 5.4%，並且健康對照的參考範圍≤ 2.87 mg/l。使用ELISA（Quantikine®ELISA套組，R＆D Systems，美國明尼蘇達州明尼阿波利斯）評估趨化因子（C-X-C基序）配體13和可溶性細胞間粘附分子-1的血清水平，其中測定間變異係數（CV）＜ 8 %且測定內CV ＜ 15%。使用Roche模組化S P1NP測定法量測血清1型前膠原N末端前肽（P1NP），其中測定內和測定間CV ＜ 7%。使用ELISA（Anogen）量測血清澱粉樣蛋白A，其中測定內和測定間CV ＜ 7%。使用Roche模組化血清鐵蛋白測定法量測鐵蛋白，其中測定內和測定間CV ＜ 3%。使用Kone 20分析儀Konelab（總鐵結合能力[RANDOX]）量測總鐵結合能力，其中測定內CV和測定間CV分別＜ 5.5%和＜ 4.7%。使用Kone 20分析儀Konelab（鐵[Thermo Scientific]）量測鐵的血清水平，其中測定內CV和測定間CV分別＜ 7.8%和＜ 6%。使用ELISA（人鐵調素25（生物活性）HS ELISA [DRG]）量測鐵調素水平，其中測定內CV和測定間CV分別＜ 9.6%和＜ 8.1%。在所有分析中，小於定量下限（LLOQ）的生物標記水平由LLOQ/2代替，並且高於定量上限（ULOQ）的生物標記水平由ULOQ代替。
基線人口統計資料、疾病特徵、功效和生物標記水平
生物標記族群的基線人口統計特徵和疾病特徵總體上與總體意圖治療（ITT）族群相似（表2）。總體而言，ITT族群與生物標記族群之間的功效和PRO總體上也相似（表3）。
表 3
第24週生物標記和ITT族群中的功效和PRO
| | ITT 族群 | 生物標記族群 |
| | 阿達木單抗 40 mg q2w (n
= 185) | 薩瑞魯單抗 200 mg q2w (n
= 184) | 阿達木單抗 40 mg q2w (n
= 154) | 薩瑞魯單抗 200 mg q2w (n
= 153) |
| 第 24 週功效結果 a |
| ACR20反應者，% | 58.4 | 71.7 | 59.1 | 73.9 |
| ACR50反應者，% | 29.7 | 45.7 | 29.2 | 49.7 |
| ACR70反應者，% | 11.9 | 23.4 | 12.3 | 25.5 |
| ΔDAS28-ESR | –2.2 (1.4) | –3.4 (1.4) | –2.3 (1.3) | –3.4 (1.3) |
| DAS28-ESR ＜2.6，% | 7.0 | 26.6 | 8.4 | 27.5 |
| DAS28-ESR ＜3.2，% | 14.1 | 42.9 | 15.6 | 43.8 |
| ΔDAS28-CRP | –2.1 (1.2) | –2.9 (1.3) | –2.1 (1.3) | –3.0 (1.2) |
| DAS28-CRP＜2.6，% | 13.5 | 34.2 | 13.0 | 34.6 |
| DAS28-CRP ＜3.2，% | 24.3 | 51.6 | 24.0 | 52.3 |
| ΔTJC | –16.4 (12.0) | –19.0 (13.3) | –16.6 (12.3) | –19.4 (12.5) |
| ΔSJC | –12.2 (9.1) | –14.3 (9.6) | –12.1 (8.9) | –14.6 (9.8) |
| ΔCDAI | –25.5 (12.9) | –29.7 (12.7) | –25.9 (13.3) | –30.2 (12.0) |
| CDAI ≤2.8，% | 2.7 | 7.1 | 3.2 | 7.2 |
| CDAI ≤10，% | 24.9 | 41.8 | 24.7 | 43.1 |
| Δ醫師全面
VAS (0–100 mm) | –37.3 (22.5) | –45.3 (21.4) | –37.6 (22.8) | –45.7 (20.5) |
| 第 24 週 PROa |
| ΔHAQ-DI | –0.4 (0.6) | –0.6 (0.7) | –0.4 (0.6) | –0.7 (0.7) |
| ΔFACIT-疲勞
(0–52) | 8.2 (10.4) | 10.4 (10.2) | 8.4 (10.3) | 11.3 (10.0) |
| Δ患者全面
VAS (0–100 mm) | –25.0 (25.2) | –33.5 (26.2) | –25.5 (24.9) | –33.8 (26.3) |
| Δ疼痛VAS
(0–100 mm) | –27.9 (24.7) | –36.4 (26.9) | –28.0 (24.4) | –36.9 (27.0) |
| ΔSF-36 PCS | 5.5 (7.1) | 8.6 (7.7) | 5.3 (7.1) | 9.0 (7.6) |
| ΔSF-36 MCS | 7.0 (11.3) | 8.2 (10.8) | 6.9 (11.0) | 8.5 (11.3) |
| Δ晨僵VAS
(0–100 mm) | –27.0 (27.4) | –36.1 (27.9) | –26.7 (27.8) | –36.7 (27.3) |
| ΔRAID (0–10) | –2.1 (2.4) | –3.2 (2.4) | –2.1 (2.4) | –3.3 (2.4) |
除非另有說明，否則為均值（標準差）。△：自基線的絕對變化；ACR20/50/70：美國風濕病學會20/50/70%改善標準；CDAI：臨床疾病活動性指數；DAS28-CRP：使用C反應蛋白的疾病活動性評分（28個關節）；DAS28-ESR：使用紅細胞沈降率的疾病活動性評分（28個關節）；FACIT：慢性病療法的功能評估；HAQ-DI：健康評估問卷-殘疾指數；ITT：意圖治療；MCS：精神部分總評；PCS：身體部分總評；PRO：患者報告結局；q2w：每2週；RAID：類風溼性關節炎疾病影響；SJC：腫脹關節計數；TJC：壓痛關節計數；VAS：視覺類比量表。
除Lp(a)外治療組之間大多數生物標記的基線血清水平相似，阿達木單抗組中的Lp(a)高於薩瑞魯單抗組中的Lp(a)（Lp[a]：中值分別為235.5 mg/l和179.0 mg/l；威爾科克森檢定P值：0.039；表1）。
在基線處單獨生物標記之間的相關性總體上較低或中等（ρ ＜ 0.5；圖1A）。正如預期，觀察到發炎標記物（CRP和SAA；ρ = 0.81）、骨形成標記物（P1NP和OC；ρ = 0.82）和慢性疾病性貧血標記物（鐵蛋白和鐵調素；ρ = 0.74）的相關係數高於0.7。在基線CRP、SAA或MMP-3與不同的血細胞計數（白細胞和嗜中性粒細胞；ρ從0.4至0.5）之間，並且正如預期，在鐵與血紅蛋白之間（ρ = 0.57；圖1B）之間，觀察到中度相關。
治療對生物標記的藥效學作用
為了比較薩瑞魯單抗和阿達木單抗治療隨時間對生物標記的作用，分析生物標記濃度自基線的絕對變化（表4）和百分比變化直至第24週。在用薩瑞魯單抗（相比於阿達木單抗）治療後的第12週和第24週，觀察到與急性期反應相關的生物標記的更大減少（調整後的P ＜ 0.0001；圖2A和圖2B）。薩瑞魯單抗與阿達木單抗早在第4周就觀察到CRP減少，並且在整個治療期間一直持續（圖2A）。
表 4
到第24週生物標記濃度自基線的絕對變化
| 自基線（ Q1 ， Q3 ）的中值絕對變化 | 第 2 週 | 第 12 週 | 第 24 週 |
| SAA，ng/ml | 阿達木單抗40 mg q2w | — | –2442.7
(–22330.7, 1930.9) | –476.4
(–19654.3, 3342.1) |
| 薩瑞魯單抗
200 mg q2w | — | –9066.5
(–80132.7, –1902.8) | –9604.7
(–79255.8, –1398.0) |
| CRP，mg/l | 阿達木單抗40 mg q2w | — | –1.3
(–13.7, 1.3) | –1.3
(–13.7, 3.5) |
| 薩瑞魯單抗
200 mg q2w | — | –6.8
(–22.9, –1.6) | –6.6
(–22.8, –1.3) |
| Lp(a)，mg/l | 阿達木單抗40 mg q2w | — | –2.0
(–54.0, 28.0) | –4.5
(–40.0, 28.0) |
| 薩瑞魯單抗
200 mg q2w | — | –59.0
(–134.0, –13.0) | –60.3
(–157.0, –21.0) |
| MMP-3，ng/ml | 阿達木單抗40 mg q2w | — | — | –5.6
(–23.6, 6.3) |
| 薩瑞魯單抗
200 mg q2w | — | — | –6.8
(–33.1, 1.4) |
| 總RANKL，pmol/l | 阿達木單抗40 mg q2w | 15.9
(–7.2, 129.1) | — | 31.5
(–93.5, 223.2) |
| 薩瑞魯單抗
200 mg q2w | –10.5
(–69.5, 31.0) | — | –76.8
(–438.5, 20.4) |
| P1NP，ng/ml | 阿達木單抗40 mg q2w | — | — | 2.0
(–5.5, 13.5) |
| 薩瑞魯單抗
200 mg q2w | — | — | 8.6
(–0.8, 18.7) |
| OPG，pmol/l | 阿達木單抗40 mg q2w | –0.2
(–0.7, 0.3) | — | 0.2
(–0.6, 0.9) |
| 薩瑞魯單抗
200 mg q2w | 0.1
(–0.5, 0.7) | — | 0.1
(–0.7, 0.7) |
| OC，ng/ml | 阿達木單抗40 mg q2w | — | — | 0.9
(–1.7, 5.1) |
| 薩瑞魯單抗
200 mg q2w | — | — | 2.4
(–1.4, 5.7) |
| CXCL13，pg/ml | 阿達木單抗40 mg q2w | –45.4
(–81.7, –22.9) | — | –30.5
(–65.7, –1.5) |
| 薩瑞魯單抗
200 mg q2w | –12.8
(–41.0, 5.6) | — | –35.7
(–80.5, –4.5) |
| sICAM-1 | 阿達木單抗40 mg q2w | –23.2
(–37.8, –9.3) | — | –10.8
(–41.7, 14.4) |
| 薩瑞魯單抗
200 mg q2w | –0.7
(–15.6, 12.8) | — | –11.0
(–36.7, 1.9) |
| 鐵，µmol/l | 阿達木單抗40 mg q2w | 1.4
(–0.6, 4.5) | — | — |
| 薩瑞魯單抗
200 mg q2w | 3.7
(0.5, 8.3) | — | — |
| 鐵蛋白，ng/ml | 阿達木單抗40 mg q2w | –8.5
(–31.7, 0.5) | — | — |
| 薩瑞魯單抗
200 mg q2w | –7.7
(–26.4, 0.1) | — | — |
| TIBC，µg/dl | 阿達木單抗40 mg q2w | 9.0
(–2.0, 22.0) | — | — |
| 薩瑞魯單抗
200 mg q2w | 20.0
(5.0, 35.0) | — | — |
| 鐵調素，ng/ml | 阿達木單抗40 mg q2w | –5.8
(–19.1, –0.1) | — | — |
| 薩瑞魯單抗
200 mg q2w | –3.3
(–16.3, 0.4) | — | — |
總體生物標記族群的樣本量：阿達木單抗40 mg q2w：n = 154；薩瑞魯單抗 200 mg q2w：n = 153。CRP：C反應蛋白；CXCL13：趨化因子（C-X-C基序）配體13；Lp(a)：脂蛋白（a）；MMP 3：基質金屬蛋白酶-3；OC：骨鈣素；OPG：骨保護素；P1NP：1型前膠原N末端前肽；Q：四分位組；q2w：每2週；RANKL：核因子κB受體活化因子配體；SAA：血清澱粉樣蛋白A；sICAM-1：可溶性細胞間粘附分子-1；TIBC：總鐵結合能力
與阿達木單抗相比，薩瑞魯單抗治療在第24週提高了成骨細胞啟動標記物P1NP的濃度（調整後的P = 0.027；圖2C）。在薩瑞魯單抗與阿達木單抗治療的患者中還觀察到OC（成骨細胞活性的另一個標記物）的數值增加（圖3A）。此外，與阿達木單抗相比，用薩瑞魯單抗早在第2週就觀察到總RANKL（骨吸收的標記物）減少，並且一直持續到第24週（調整後的P ＜ 0.0001；圖3B）；另外，在阿達木單抗治療後觀察到總RANKL的數值增加。阿達木單抗治療後第2週觀察到OPG（RANKL的誘餌）短暫減少，但沒有持續到第24週（圖3C）。另外，在第24週，用薩瑞魯單抗觀察到MMP-3的更大減少（調整後的P = 0.020；圖3D）。
還檢查了薩瑞魯單抗和阿達木單抗對與據稱分別反映滑膜淋巴樣細胞浸潤和髓樣細胞浸潤的標記物CXCL13和sICAM-1相關的生物標記的作用。雖然在用阿達木單抗（相比於薩瑞魯單抗）治療後2週觀察到這些生物標記的更大減少，但這些作用沒有持續到第24週（圖4）。
我們還檢查了治療對與慢性疾病性貧血相關的參數的影響。在ITT族群中（Burmester GR,
Arthritis Rheumatol
2018;70），薩瑞魯單抗（相比於阿達木單抗）導致血紅蛋白水平在第24週時升高更大（LSM自基線的變化：0.59 g/dl與0.08 g/dl；LSM差異0.52 g/dl [95%CI：0.32，0.71；標稱P ＜ 0.001]）。在此分析中，採用薩瑞魯單抗和阿達木單抗的情況下，在第2週均觀察到鐵調素和鐵蛋白的減少。相反，在治療後第2週，相對於阿達木單抗，採用薩瑞魯單抗的情況下觀察到鐵和TIBC的增加（圖5）。在第24週，使用薩瑞魯單抗（相比於阿達木單抗）觀察到脂質顆粒Lp(a)的減少（調整後的P ＜ 0.0001；圖6A）。
相對於參考範圍，一部分患者具有異常的基線生物標記水平。在這些患者中，在第24週，與阿達木單抗治療相比，用薩瑞魯單抗治療的CRP和SAA的標準化的百分比明顯更高（未調整的P ＜ 0.0001）。在第24週，用薩瑞魯單抗（相比於阿達木單抗）治療的患者中，總RANKL、OPG和Lp(a)的標準化發生的數字百分比更大（圖6B）。
生物標記水平變化與臨床反應之間的關係
為了測定第24週治療後生物標記水平的變化是否與臨床功效相關，比較了經薩瑞魯單抗和阿達木單抗治療的反應者與無反應者之間的變化。在反應者和無反應者之間，第24週在總RANKL、OPG、P1NP、OC和Lp(a)中的中值變化百分比沒有太大差異（資料未示出）。然而，與無反應者相比，在第24週阿達木單抗ACR20和DAS28-CRP ＜ 3.2的反應者的SAA自基線的降低更大（分別為-33.3%和0.0%；分別為標稱
P
= 0.0038並且-39.2%與0.0%；分別為標稱
P
= 0.0061）。在阿達木單抗ACR20反應者（相比於無反應者）中還觀察到MMP-3的更大降低（分別為-23.6%和17.1%；標稱
P
＜ 0.0001）。在薩瑞魯單抗治療的患者中，沒有觀察到臨床功效與SAA和MMP-3自基線的變化之間的關聯，並且儘管反應者和無反應者二者的CRP降低≥ 90%，但用於比較反應者和無反應者的
P
值在幾個參數（包括ACR20/50、DAS28-CRP ＜ 3.2和DAS28-CRP ＜ 2.6）中均＜ 0.05（數據未示出）。
在基線處生物標記與疾病活動性和 PRO 之間的相關性
對於SAA和CRP與DAS28-ESR（分別為ρ = 0.26和0.31），並且對於CRP、SAA、MMP-3、鐵調素和CXCL13與DAS28-CRP（ρ從0.36至0.58），觀察到在基線生物標記與基線疾病活動性之間的最強相關性。生物標記全都與基線PRO不相關（所有ρ ＜ 0.3）。
對臨床反應和 PRO 的基線生物標記水平的預測分析
因為目前沒有建立與臨床功效相關的閾值，所以藉由三分位組（低、中和高）將基線生物標記水平作為連續的分類量度進行分析，並且計算治療-生物標記相互作用
P
值以評估生物標記的可預測性。圖7A和表5示出了藉由三分位組中的基線生物標記分析的第24週功效終點的治療-三分位組生物標記相互作用。與低三分位組患者相比，接受過薩瑞魯單抗的且SAA基線濃度最高的患者更有可能達到ACR20/50/70或DAS28-CRP ＜ 3.2反應：ACR20（OR [95%CI] 5.5 [2.1，14.5]）；ACR50（5.4 [2.2，13.2]）； ACR70（5.7 [1.8，18.4]）；DAS28-CRP ＜ 3.2（6.1 [2.3，15.7]）（圖7A和表5）。與高MMP-3和CRP相比，SAA始終是可預測的，高MMP-3和CRP僅可預測ACR20和DAS28-CRP ＜ 3.2反應（表5）。與骨重建、滑膜淋巴樣細胞和髓樣細胞浸潤以及發炎性貧血相關的生物標記的基線水平不能預測在24週的功效，與ACR20反應相關的鐵調素和CXCL13除外。
表 5
藉由三分位組中的基線生物標記分析的第24週功效終點的治療-三分位組生物標記相互作用
| 第 24 週功效終點 | 基線處的生物標記 |
| | SAA | CRP | MMP-3 | OPG | OC | CXCL13 | 鐵調素 |
| M/L | H/L | M/L | H/L | M/L | H/L | M/L | H/L | M/L | H/L | M/L | H/L | M/L | H/L | |
| ACR20 | NS | 0.015 | NS | 0.039 | NS | 0.013 | NS | NS | 0.031 | NS | NS | 0.003 | NS | 0.021 | |
| ACR50 | NS | 0.004 | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | |
| ACR70 | NS | 0.008 | NS | NS | NS | NS | 0.032 | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | |
| DAS28-ESR ＜2.6 | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | |
| DAS28-ESR ＜3.2 | 0.004 | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | |
| DAS28-CRP ＜2.6 | NS | 0.041 | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | |
| DAS28-CRP ＜3.2 | NS | 0.044 | NS | 0.049 | NS | 0.014 | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | |
M/L：中三分位組相比於低三分位組的標稱治療-生物標記相互作用
P
值；H/L：高三分位組相比於低三分位組的標稱治療-生物標記相互作用
P
值。ACR20/50/70：美國風濕病學會20/50/70%反應；CRP：C反應蛋白；CXCL13：趨化因子（C-X-C基序）配體13；DAS28 CRP：疾病活動性評分（28個關節）C反應蛋白；DAS28-ESR：疾病活動性評分（28個關節）紅細胞沈降率；MMP-3：基質金屬蛋白酶3；NS：5%時不顯著；OC：骨鈣素；OPG：骨保護素；SAA：血清澱粉樣蛋白A。
基線生物標記水平預測PRO反應的能力還藉由其各自的三分位組進行分析，並且表明具有更高SAA、MMP-3和鐵調素水平的經薩瑞魯單抗治療的患者被報告改善了PRO反應，包括HAQ-DI（圖7B上圖）和疼痛VAS（圖7B下圖）評分（與經阿達木單抗治療的患者相比），以及患者全面VAS、晨僵VAS、SF-36 PCS和身體功能域和RAID。這些相互作用的
P
值包括在圖7B和表6中，證明與低水平的這些生物標記相比，高水平的這些生物標記所預測的差異功效。與慢性疾病性貧血有關的標記物（鐵調素、鐵蛋白和鐵）的基線水平在第24週也與PRO改善有關（表6）。生物標記作為連續量度的分析還揭示在第24週SAA、MMP-3、CRP和P1NP與HAQ-DI的相互作用（相互作用標稱
P
值＜ 0.01）。
表 6
藉由三分位組中的基線生物標記分析的第24週PRO的治療-三分位組生物標記相互作用
| | 基線處的生物標記 |
| | SAA | CRP | MMP-3 | OC | CXCL13 | 鐵調素 | s-ICAM1 | 鐵 | 鐵蛋白 |
| M/L | H/L | M/L | H/L | M/L | H/L | M/L | H/L | M/L | H/L | M/L | H/L | M/L | H/L | M/L | H/L | M/L | H/L | |
| 患者全面VAS | NS | 0.011 | 0.002 | 0.040 | NS | 0.010 | NS | NS | NS | NS | NS | 0.009 | NS | NS | NS | NS | NS | NS | |
| HAQ-DI | 0.035 | ＜0.001 | NS | 0.005 | NS | ＜0.001 | NS | NS | 0.032 | 0.004 | NS | NS | NS | NS | NS | 0.032 | NS | NS | |
| 疼痛VAS | NS | 0.002 | 0.021 | 0.029 | 0.047 | 0.002 | NS | NS | NS | NS | 0.010 | 0.002 | NS | NS | NS | NS | NS | NS | |
| SF-36 – PCS評分 | NS | ＜0.001 | 0.009 | 0.016 | NS | 0.026 | NS | NS | NS | 0.031 | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | |
| SF-36 – MCS評分 | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | 0.030 | 0.023 | NS | NS | NS | NS | NS | 0.050 | |
| SF-36 – PF域 | NS | 0.003 | NS | NS | NS | 0.036 | NS | NS | NS | 0.003 | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | |
| SF-36 – BP域 | NS | NS | NS | NS | NS | NS | 0.037 | NS | NS | NS | 0.002 | 0.016 | NS | NS | NS | NS | NS | NS | |
| SF-36 – VT域 | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | 0.043 | 0.005 | NS | NS | NS | NS | NS | NS | |
| SF-36 – RE域 | NS | NS | 0.049 | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | 0.030 | NS | NS | NS | NS | |
| SF-36 – MH域 | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | NS | 0.004 | 0.004 | NS | NS | NS | NS | 0.047 | NS | |
| 晨僵VAS | NS | 0.004 | 0.002 | 0.017 | NS | ＜0.001 | NS | NS | NS | NS | 0.029 | ＜0.001 | NS | NS | NS | NS | NS | NS | |
| RAID評分 | NS | 0.017 | 0.045 | NS | NS | 0.020 | NS | NS | NS | NS | NS | 0.009 | 0.032 | NS | NS | NS | NS | NS | |
| | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | |
M/L：中三分位組相比於低三分位組的標稱治療-生物標記相互作用
P
值；H/L：高三分位組相比於低三分位組的標稱治療-生物標記相互作用
P
值。BP：軀體疼痛；CRP：C反應蛋白；CXCL13：趨化因子（C-X-C基序）配體13；FACIT：慢性病療法的功能評估；HAQ-DI：健康評估問卷-殘疾指數；Lp(a)：脂蛋白（a）；MCS：精神部分總評；MH：精神健康；MMP-3：基質金屬蛋白酶-3；NS：5%時不顯著；OC：骨鈣素；OPG：骨保護素；P1NP：1型前膠原
N
末端前肽；PCS：身體部分總評；PF：身體功能；RAID：類風溼性關節炎疾病影響；RANKL：核因子κB受體活化因子配體；RE：情感職能；SAA：血清澱粉樣蛋白A；SF-36：醫療結局研究量表（36項）健康調查；sICAM-1：可溶性細胞間粘附分子-1；TIBC：總鐵結合能力；VAS：視覺類比量表；VT：活力。
對用於預測臨床反應的髓樣和淋巴樣啟動相關標記物的差異組合的評價
分析CXCL13和sICAM-1的基線水平，以測定這些生物標記的差異比率（高/高、高/低、低/高和低/低；使用總族群中值作為截止值）是否可以預測第24週對薩瑞魯單抗或阿達木單抗治療的臨床反應。雖然CXCL13高/sICAM-1高和CXCL13低/sICAM-1低的患者對薩瑞魯單抗的ACR50反應比對阿達木單抗的ACR50反應更高，但其他組合不能預測（標稱
P
＞ 0.05；圖8）。另外，CXCL13高/sICAM-1高的患者對薩瑞魯單抗的ACR20反應比對阿達木單抗的ACR20反應更高（OR 3.8 [95%CI 1.5，9.8]；標稱
P
= 0.004），但其他組合不能預測（標稱
P
＞ 0.05）。
參考文獻
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