TW201912160A - 外顯子18及/或外顯子21突變型egfr之選擇性抑制劑 - Google Patents

外顯子18及/或外顯子21突變型egfr之選擇性抑制劑 Download PDF

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Abstract

一種用以治療惡性腫瘤患者之抗腫瘤劑，含有(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲

Description

外顯子18及/或外顯子21突變型EGFR之選擇性抑制劑
本發明有關一種針對具外顯子18及/或外顯子21突變型表皮生長因子受體(Epidermal Growth Factor Receptor，以下亦稱「EGFR」)之癌的抗腫瘤劑。
背景技術 EGFR為受體酪胺酸激酶，於正常組織中透過與配位子之表皮生長因子(Epidermal Growth Factor，以下亦稱為「EGF」)結合來發揮生理機能，且在表皮組織中有助於增殖及抑制細胞自戕(非專利文獻1)。此外，已知EGFR基因之體細胞突變為癌之原因基因，例如，缺失EGFR外顯子19之密碼子746~750(以下亦稱為「外顯子19缺失突變」)、及外顯子21中密碼子858所編碼之白胺酸突變成精胺酸(以下亦稱為「L858R突變」)會恆常地誘發EGF非相依性之激酶活性而有助於癌細胞增殖及生存(非專利文獻2)。有報告指出，該等突變以東亞而言，例如可在30~50%之非小細胞肺癌中觀察到，此外，以歐美而言，亦可在約10%之非小細胞肺癌中觀察到，而被認為是癌之原因因子之1(非專利文獻3)。
因此，將EGFR抑制劑用作抗腫瘤劑之研究開發從以往即活躍進行，且已導入各種EGFR突變陽性肺癌之治療中(非專利文獻2、4)。吉非替尼、厄洛替尼及阿法替尼被用作針對佔EGFR突變90%之外顯子19缺失突變型及L858R突變型EGFR陽性肺癌的治療藥。此外，已知此等於持續治療過程中會產生後天抗藥性，其原因有50%是外顯子20之密碼子790從蘇胺酸突變為甲硫胺酸(以下亦稱「T790M突變」)抗藥性突變型EGFR。對於具此種突變之肺癌，目前奧希替尼被用作治療藥。因此，對於具有主要EGFR突變之肺癌患者使用EGFR抑制劑之治療方式正逐漸確立。
然而，另一方面，對於外顯子18之點突變或缺失突變以及外顯子21之點突變等數種較稀少之EGFR突變，尚未確立利用EGFR抑制劑之治療方式，已有報告指出，此等突變型EGFR之藥劑感受性視突變型而不同(非專利文獻4)。舉例來說，具有外顯子18中密碼子719所編碼之甘胺酸已取代為任意胺基酸之點突變(以下亦稱「G719X突變」)的肺癌、及具有外顯子21中密碼子861所編碼之白胺酸已取代為麩醯胺酸之點突變(以下亦稱「L861Q突變」)之肺癌對於吉非替尼、厄洛替尼及阿法替尼之感受性較屬藥劑感受性突變之外顯子19缺失突變及L858R突變為低。此外，已有報告指出，阿法替尼、吉非替尼及厄洛替尼於治療用量上具共通表現之副作用有皮膚異常及消化道失調。此等副作用被廣泛認為肇因於，表現於皮膚及消化道等正常組織之野生型EGFR的機能受到治療藥抑制(非專利文獻1)，從減輕副作用之觀點出發，乃期望開發出具下述特徵之抑制劑：與對表現於腫瘤組織之突變型EGFR的抑制活性相較，對正常組織之野生型EGFR的抑制活性較低。
因此，期待開發出對外顯子18及外顯子21之突變型EGFR具高抑制活性且對突變型EGFR具有高於野生型EGFR之選擇性的藥劑，設想其可在低於皮膚及消化道表現副作用之投予量下抑制具突變型EGFR之肺癌細胞增殖，而對尚未確立治療法之突變型EGFR陽性癌患者的延命及QOL提升作出貢獻。再者，若是對於對EGFR抑制劑治療具後天抗藥性之T790M突變也具有高抑制活性之藥劑，則設想對新生突變(de novo mutation)之外顯子18及外顯子21之突變型EGFR施行EGFR抑制劑治療時，有使後天抗藥性之表現頻率減少的可能性，而期待可對癌患者之延命作出貢獻。 先行技術文獻 專利文獻
[專利文獻1]WO2015/175632A1號公報 [專利文獻2]WO2015/025936A1號公報 非專利文獻
[非專利文獻1]Nat. Rev. Cancer, vol.6, pp803-812(2006) [非專利文獻2]Nature Medicine, vol.19, pp1389- 1400(2013) [非專利文獻3]Nat. Rev. Cancer, vol.7, pp169-181 (2007) [非專利文獻4]Lancet Oncol.vol.13,e23-31(2012)
發明概要 發明欲解決之課題 本發明之課題在於提供一種抗腫瘤劑，其係一對於以習知EGFR抑制劑無法獲得充分治療效果之外顯子18及/或外顯子21突變型EGFR具高選擇性的抑制劑，其因不抑制野生型EGFR而減輕了副作用。 用以解決課題之手段
本案發明人等經精心研究，結果發現外顯子18及/或外顯子21突變型EGFR作為癌治療標的甚為妥適，且一併發現了習知治療方式所導入之EGFR抑制劑缺乏外顯子18及/或外顯子21突變型EGFR間之選擇性。此外，確認了本發明之化合物對於外顯子18及/或外顯子21突變型EGFR顯示出優異選擇性及腫瘤增殖抑制效果，而終至完成本發明。
本發明包含以下態樣。
第1項 一種用以治療惡性腫瘤患者之抗腫瘤劑，含有(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲-8-基)丙烯醯胺或其鹽，該惡性腫瘤患者表現出具突變之EGFR，且該突變係選自於由外顯子18之G719X突變、外顯子18之E709X突變及外顯子21之L861X突變所構成群組中之至少一種突變(X表示任意之胺基酸殘基)。
第2項 如第1項之抗腫瘤劑，其中外顯子18之突變係選自於由G719A、G719S、G719C、E709K及E709A所構成群組中之至少一種突變。
第3項 如第1或2項之抗腫瘤劑，其中外顯子21之突變為L861Q。
第4項 如第1至3項中任一項之抗腫瘤劑，其中EGFR更具有T790M突變。
第5項 一種惡性腫瘤患者之治療方法，包含：對表現出具突變之EGFR的惡性腫瘤患者投予(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲-8-基)丙烯醯胺或其鹽之步驟；且，該突變係選自於由外顯子18之G719X突變、外顯子18之E709X突變及外顯子21之L861X突變所構成群組中之至少一種突變(X表示任意之胺基酸殘基)。
第6項 如第5項之治療方法，其中外顯子18之突變係選自於由G719A、G719S、G719C、E709K及E709A所構成群組中之至少一種突變。
第7項 如第5或6項之治療方法，其中外顯子21之突變為L861Q。
第8項 如第5至7項中任一項之治療方法，其中EGFR更具有T790M突變。
第9項 一種(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲-8-基)丙烯醯胺或其鹽，係用以治療表現出具突變之EGFR的惡性腫瘤患者，且該突變係選自於由外顯子18之G719X突變、外顯子18之E709X突變及外顯子21之L861X突變所構成群組中之至少一種突變(X表示任意之胺基酸殘基)。
第10項 如第9項之(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲-8-基)丙烯醯胺或其鹽，其中外顯子18之突變係選自於由G719A、G719S、G719C、E709K及E709A所構成群組中之至少一種突變。
第11項 如第9或10項之(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲-8-基)丙烯醯胺或其鹽，其中外顯子21之突變為L861Q。
第12項 如第9至11項中任一項之(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲-8-基)丙烯醯胺或其鹽，其中EGFR更具有T790M突變。
第13項 一種(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲-8-基)丙烯醯胺或其鹽之用途，係用以治療表現出具突變之EGFR的惡性腫瘤患者，且該突變係選自於由外顯子18之G719X突變、外顯子18之E709X突變及外顯子21之L861X突變所構成群組中之至少一種突變(X表示任意之胺基酸殘基)。
第14項 如第13項之用途，其中外顯子18之突變係選自於由G719A、G719S、G719C、E709K及E709A所構成群組中之至少一種。
第15項 如第13或14項之用途，其中外顯子21之突變為L861Q。
第16項 如第13至15項中任一項之用途，其中EGFR更具有T790M突變。
第17項 一種(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲-8-基)丙烯醯胺或其鹽於製造醫藥上之用途，該醫藥係用以治療表現出具突變之EGFR的惡性腫瘤患者，且該突變係選自於由外顯子18之G719X突變、外顯子18之E709X突變及外顯子21之L861X突變所構成群組中之至少一種突變(X表示任意之胺基酸殘基)。
第18項 如第17項之用途，其中外顯子18之突變係選自於由G719A、G719S、G719C、E709K及E709A所構成群組中之至少一種突變。
第19項 如第17或18項之用途，其中外顯子21之突變為L861Q。
第20項 如第17至19項中任一項之用途，其中EGFR更具有T790M突變。
第21項 一種醫藥組成物，包含(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲-8-基)丙烯醯胺或其鹽及藥學上可接受之載體，該組成物係用以治療表現出具突變之EGFR的惡性腫瘤患者，且該突變係選自於由外顯子18之G719X突變、外顯子18之E709X突變及外顯子21之L861X突變所構成群組中之至少一種突變(X表示任意之胺基酸殘基)。
第22項 如第21項之醫藥組成物，其中外顯子18之突變係選自於由G719A、G719S、G719C、E709K及E709A所構成群組中之至少一種突變。
第23項 如第21或22項之醫藥組成物，其中外顯子21之突變為L861Q。
第24項 如第21至23項中任一項之醫藥組成物，其中EGFR更具有T790M突變。
第25項 一種預測化學療法之治療效果的方法，該化學療法係對惡性腫瘤患者使用有效成分為(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲-8-基)丙烯醯胺或其鹽之抗腫瘤劑； 該方法包含下列步驟(1)~(2)： 步驟(1)，其檢測採取自該患者之生物試料所含EGFR基因有無突變；及 步驟(2)，其係於上述步驟(1)之檢測結果為EGFR基因具有選自於由外顯子18之G719X突變、外顯子18之E709X突變及外顯子21之L861X突變所構成群組中之至少一種突變時(X表示任意之胺基酸殘基)，即預測該化學療法對該患者顯示出充分治療效果之可能性高。
第26項 如第25項之方法，其中外顯子18之突變係選自於由G719A、G719S、G719C、E709K及E709A所構成群組中之至少一種突變。
第27項 如第25或26項之方法，其中外顯子21之突變為L861Q。
第28項 如第25至27項中任一項之方法，其中EGFR更具有T790M突變。
第29項 一種惡性腫瘤患者之治療方法，包含下列步驟(1)~(3)： 步驟(1)，其檢測採取自該患者之生物試料所含EGFR基因有無突變； 步驟(2)，其係於上述步驟(1)之檢測結果為EGFR基因具有選自於由外顯子18之G719X突變、外顯子18之E709X突變及外顯子21之L861X突變所構成群組中之至少一種突變時(X表示任意之胺基酸殘基)，即預測使用有效成分為(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲-8-基)丙烯醯胺或其鹽之抗腫瘤劑的化學療法對該患者顯示出充分治療效果之可能性高；及 步驟(3)，其係對已於上述步驟(2)中預測使用有效成分為(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲-8-基)丙烯醯胺或其鹽之抗腫瘤劑的化學療法會顯示出充分治療效果的可能性高之惡性腫瘤患者，投予(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲-8-基)丙烯醯胺或其鹽。
第30項 如第29項之方法，其中外顯子18之突變係選自於由G719A、G719S、G719C、E709K及E709A所構成群組中之至少一種突變。
第31項 如第29或30項之方法，其中外顯子21之突變為L861Q。
第32項 如第29至31項中任一項之方法，其中EGFR更具有T790M突變。 發明效果
本發明之抗腫瘤劑對外顯子18及/或外顯子21突變型EGFR顯示出高選擇性。因此，可對以習知EGFR抑制劑無法顯示充分治療效果且表現出具外顯子18及/或外顯子21突變之EGFR的惡性腫瘤患者提供發揮優異治療效果之抗腫瘤劑而甚有用。
又，本發明可提供一種表現出具外顯子18及/或外顯子21突變之EGFR的惡性腫瘤患者之治療方法而甚有用。
由於習知EGFR抑制劑對於外顯子18及外顯子21突變型EGFR之選擇性低於野生型EGFR，發揮抗腫瘤效果之投予量與發生肇因於野生型EGFR之副作用(皮膚異常及消化道失調等)的投予量相差不大，而難以發揮充分之治療效果。另一方面，本發明之抗腫瘤劑對外顯子18及外顯子21突變型EGFR之選擇性高，可以想見，可增加投予量而不使肇因於野生型EGFR之副作用發生，而可對顯示出具外顯子18及/或外顯子21突變之EGFR的惡性腫瘤患者發揮優異之治療效果。
除此之外，本發明之抗腫瘤劑於屬外顯子20區域之後天抗藥性突變的T790M突變存在下，對外顯子18及外顯子21突變型EGFR顯示出高度抑制活性。因此，即使對於因使用既有抗腫瘤劑而產生後天抗藥性突變導致既有藥劑效果降低之惡性腫瘤患者，仍能發揮優異之治療效果。
再者，由於本發明之抗腫瘤劑即使於屬外顯子20區域之後天抗藥性突變的T790M突變存在下，仍對外顯子18及外顯子21突變型EGFR具有高度抑制活性，在對屬新生突變之外顯子18及外顯子21之突變型EGFR施行EGFR抑制劑治療之際，可使後天抗藥性之表現頻率降低，在此觀點上甚是有用。
用以實施發明之形態 茲將本說明書上述或下述記載中包含於本發明範圍內之各種定義的較佳例詳細說明如下。
本說明書中，「EGFR」表示人類表皮生長因子受體(Epidermal Growth Factor Receptor)蛋白質。EGFR也被稱為ErbB-1或HER1。
本說明書中，「野生型EGFR」表示不具體細胞突變之EGFR，具體來說則是由序列編號1所示胺基酸序列構成之蛋白質(GenBank登錄編號：NP＿005219.2)。
本說明書中「外顯子18」表示野生型EGFR之胺基酸序列(序列編號1)中688-728之區域。
本說明書中「外顯子18之突變」表示野生型EGFR(序列編號1)外顯子18區域之胺基酸中之點突變。外顯子18突變宜為：外顯子18區域之1個胺基酸經取代之點突變或缺失突變，更宜為外顯子18中密碼子709所編碼之麩醯胺酸已取代為任意胺基酸之點突變(即E709X)，以及外顯子18中密碼子719所編碼之甘胺酸已取代為任意胺基酸之點突變(即G719X)。具體來說，E709X可舉如：外顯子18區域中密碼子709所編碼之麩醯胺酸已取代為離胺酸之點突變(即E709K)、及外顯子18區域中密碼子709所編碼之麩醯胺酸已取代為丙胺酸之點突變(即E709A)，且以此等為佳。G719X可舉如：外顯子18區域中密碼子719所編碼之甘胺酸已取代為丙胺酸之點突變(即G719A)、及外顯子18區域中密碼子719所編碼之甘胺酸已取代為絲胺酸之點突變(即G719S)、或外顯子18區域中密碼子719所編碼之甘胺酸已取代為半胱胺酸之點突變(即G719C)，且以此等為宜，其中以G719A尤佳。
本發明中「外顯子21」表示野生型EGFR之胺基酸序列(序列編號1)中824-875之區域。
本說明書中「外顯子21之突變」表示野生型EGFR(序列編號1)外顯子21區域之胺基酸中之點突變。外顯子21突變宜為外顯子21區域中1個胺基酸經取代之點突變，更宜為外顯子21區域中密碼子861所編碼之白胺酸已取代為任意胺基酸之點突變(即L861X)。具體來說，可舉如外顯子21區域中以密碼子861編碼之白胺酸已取代為麩醯胺酸之點突變(即L861Q)，且以L861Q為佳。
本發明中「外顯子18及/或外顯子21之突變」包含「外顯子18之突變」「外顯子21之突變」、「外顯子18及外顯子21之突變」。
本發明中「點突變」表示招致1或多數(例如1~10個左右，且宜1~5個左右，更宜1、2或3個左右)胺基酸殘基之取代、挿入或缺失之突變，且可包含核酸形式之框內挿入及/或缺失突變。
「具外顯子18及/或外顯子21突變之EGFR」包含「具外顯子18突變之EGFR」、「具外顯子21突變之EGFR」及「具外顯子18及外顯子21突變之EGFR」。
本說明書中「具外顯子18突變之EGFR」表示具有至少1個外顯子18之突變的EGFR，該EGFR可具有2個以上相異之外顯子18之突變，且以具有1個外顯子18之突變者為宜。此外，該EGFR也可具有外顯子18之突變以外的突變(例如外顯子19之缺失突變、L858R突變及L790M突變等)。
本說明書中「具外顯子21突變之EGFR」表示具有至少1個外顯子21之突變的EGFR，該EGFR可具有2個以上相異之外顯子21之突變，且以具有1個外顯子21之突變者為宜。該EGFR也可具有外顯子21之突變以外的突變(例如外顯子19之缺失突變、L858R突變及L790M突變等)。
此外，具外顯子18及/或外顯子21突變之EGFR可更具有T790M突變。已知T790M為外顯子20區域之後天抗藥性突變，且其係因使用既有EGFR抑制劑而發生。因T790M之後天抗藥性，而多有既有藥劑對惡性腫瘤患者之效果降低的情況。
具體而言，本發明中更具有T790M突變且具外顯子18及/或外顯子21突變之EGFR宜為下列中任一者：更具有T790M突變且具外顯子18區域E709X及/或G719X突變之EGFR；及，更具有T790M突變且具外顯子21區域L861X突變之EGFR。更具體來說則宜為下列中任一者：更具有T790M突變且具E709K或E709A突變之EGFR、更具有T790M突變且具G719A、G719S或G719C突變之EGFR以及更具有T790M突變且具L861Q突變之EGFR。其中，更具有T790M突變且具G719A突變之EGFR及更具有T790M突變且具L861Q突變之EGFR尤佳。
本發明中，惡性腫瘤患者所表現之EGFR具有外顯子18及/或外顯子21突變之檢測方法只要可檢測出上述突變即不特別受限，可使用習知之檢測方法。
供檢測外顯子18及/或外顯子21突變之試料只要是源自惡性腫瘤患者之生物試料，尤其是採取自惡性腫瘤患者且包含惡性腫瘤細胞之試料，即不特別受限。生物試料可例示如體液(血液、尿等)、組織、其萃取物及採取所得組織之培養物等。此外，生物試料之採取方法可視生物試料種類來適當選擇。
生物試料可視測定方法，藉由施行適切之處理來調製。此外，用於檢測之包含引子或探針之試藥可視此等測定方法而藉慣用方法進行調整。
本發明之1種態樣中，可在將抗腫瘤劑投予惡性腫瘤患者前，進行下列步驟：檢測惡性腫瘤患者所表現EGFR是否具有外顯子18及/或外顯子21之突變。
另，惡性腫瘤有時會包含2種以上不同之惡性腫瘤細胞。此外，有時會在1位患者身上發生2以上之多數惡性腫瘤。因此，會有1位患者在EGFR之相同胺基酸位置上同時具有不同突變(例如外顯子18之突變為G719A、G719S及G719C之外顯子18之突變；E709K及E709A之外顯子18突變)的情況。
本發明之抗腫瘤劑含有(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲-8-基)丙烯醯胺(化合物A)或其鹽作為有效成分。化合物A係以下列化學式表示。
[化學式1]
接著，就本發明化合物之製造法進行說明。 舉例來說，本發明之化合物A可藉WO2015/025936 A1號公報所載製造法或實施例所示方法等來製造。但本發明化合物之製造法並不限於此等反應例。
化合物A具有光學異構物、立體異構物、互突變構物等異構物時，只要未特別敘明，無論是任何異構物及混合物，皆包含於本發明之化合物中。例如，本發明化合物A有光學異構物存在時，只要未特別敘明，外消旋物及自外消旋物分割出之光學異構物皆包含在本發明之化合物中。
化合物A之鹽意指藥學上可接受之鹽，可舉如鹼加成鹽或酸加成鹽。
該鹼加成鹽可舉例如：諸如鈉鹽、鉀鹽等鹼金屬鹽；諸如鈣鹽、鎂鹽等鹼土族金屬鹽；諸如銨鹽；諸如三甲胺鹽、三乙胺鹽、二環己胺鹽、乙醇胺鹽、二乙醇胺鹽、三乙醇胺鹽、普羅卡因鹽、N,N’-二苄基乙二胺鹽等有機胺鹽等。
該酸加成鹽可舉例如：鹽酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽、磷酸鹽、過氯酸鹽等無機酸鹽；諸如醋酸鹽、甲酸鹽、順丁烯二酸鹽、反丁烯二酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、抗壞血酸鹽、三氟乙酸鹽等有機酸鹽；諸如甲磺酸鹽、2-羥乙磺酸鹽、苯磺酸酸鹽、對甲苯磺酸鹽等磺酸鹽等。
本發明之化合物或其鹽亦包含其前藥。所謂前藥是指，在活體內之生理條件下透過利用酵素及胃酸等之反應而轉換成本發明化合物或其鹽的化合物，亦即，指發生酵素性氧化、還原、水解等而轉變成本發明化合物或其鹽之化合物，以及因胃酸等引發水解等而轉變成本發明化合物或其鹽的化合物。又，亦可是在諸如廣川書店1990年刊行「醫藥品之開發」第7卷分子設計163頁至198頁所記載之生理條件下轉變為化合物或其鹽者。
[疾病載述] 本發明之對象腫瘤並未特別受限，但可舉例如：頭頸部癌、消化器官癌(食道癌、胃癌、十二指腸癌、肝癌及膽道癌(膽囊/膽管癌等)、胰癌、結腸直腸癌(結腸癌及直腸癌等)等)、肺癌(非小細胞肺癌、小細胞肺癌及間皮瘤等)、乳癌、生殖器官癌(卵巢癌及子宮癌(子宮頸癌、子宮體癌等)等)、泌尿器官癌(腎癌、膀胱癌、***癌及睪丸腫瘤等)、造血器官腫瘤(白血病、惡性淋巴瘤及多發性骨髓瘤等)、骨/軟組織腫瘤、皮膚癌及腦腫瘤等。宜為肺癌、乳癌、頭頸部癌、腦腫瘤、子宮癌、消化器官癌、造血器官腫瘤或皮膚癌，尤宜為肺癌。
將上述化合物A或其鹽用作醫藥時，可視需要摻合藥學載體，並可因應預防或治療目的來採用各種投予形態。該形態例如可為口服劑、注射劑、栓劑、軟膏劑及貼片劑等中任一者，且宜採用口服劑。該等投予形態可各自藉業界人士所周知慣用之製劑方法來製造。
本發明之抗腫瘤劑於某一態樣下可作為包含化合物A或其鹽以及藥學上可接受之載體的醫藥組成物來提供。
藥學上可接受之載體可使用製劑素材所慣用之各種有機或無機載體物質，並可作為固態製劑之賦形劑、結合劑、崩解劑、潤滑劑及著色劑以及液狀製劑之溶劑、助溶劑、懸浮化劑、等張化劑、緩衝劑及無痛劑等來摻合。此外，亦可視需要使用防腐劑、抗氧化劑、著色劑、甜味劑、穩定劑等製劑添加物。
調製口服用固態製劑時，可對本發明化合物添加賦形劑及視需要而定之結合劑、崩解劑、潤滑劑、著色劑、矯味矯臭劑等，之後依常法製造錠劑、膜衣錠劑、顆粒劑、粉劑及膠囊劑等。
賦形劑可舉如乳糖、白糖、D-甘露糖醇、葡萄糖、澱粉、碳酸鈣、高嶺土、微結晶纖維素及矽酸酐等。結合劑可舉如水、乙醇、1-丙醇、2-丙醇、單糖漿、葡萄糖液、α-澱粉液、明膠液、D-甘露糖醇、羧甲基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙基澱粉、甲基纖維素、乙基纖維素、蟲膠、磷酸鈣及聚乙烯吡咯啶酮等。崩解劑可舉如乾燥澱粉、海藻酸鈉、寒天碎末、碳酸氫鈉、碳酸鈣、月桂基硫酸鈉、硬脂酸單甘油酯及乳糖等。潤滑劑可舉如純化滑石、硬脂酸鈉鹽、硬脂酸鎂、硼砂及聚乙二醇等。著色劑可舉如氧化鈦及氧化鐵等。矯味矯臭劑可舉如白糖、橙皮、檸檬酸及酒石酸等。
調製口服用液體製劑時，可對本發明化合物添加矯味劑、緩衝劑、穩定劑及矯臭劑等，再依常法製造內服液劑、糖漿劑及酏劑等。
調製注射劑時，可對本發明化合物添加pH調節劑、緩衝劑、穩定劑、等張化劑及局部麻醉劑等，再依常法製造皮下、肌肉內及靜脈內用注射劑。
pH調節劑及緩衝劑可舉如檸檬酸鈉、乙酸鈉及磷酸鈉等。穩定劑可舉如焦亞硫酸鈉、EDTA、硫乙二醇酸及硫代乳酸等。局部麻醉劑可舉如鹽酸普魯卡因、鹽酸利多卡因等。等張化劑可舉如氯化鈉、葡萄糖、D-甘露糖醇及甘油等。
調製栓劑時，可對化合物A添加業界人士所周知的製劑用載體，例如聚乙二醇、羊毛脂、可可脂及脂肪酸三甘油酯等，再視需要進一步添加如Tween80(註冊商標)之類的界面活性劑等後，利用常法來製造。
調製軟膏劑時，可視需要對化合物A摻合一般使用之基劑、安定劑、濕潤劑及保存劑等，再依常法混合並製劑化。
基劑可舉如流動石蠟、白凡士林、白蜂蠟、辛基十二烷醇及石蠟等。
保存劑可舉如對羥苯甲酸甲酯、對羥苯甲酸乙酯及對羥苯甲酸丙酯等。
調製貼片劑時，將前述軟膏、乳霜(cream)、凝膠(gel)及膏(paste)等以常法塗佈在一般的支持體上即可。
就支持體而言，以綿、短纖維、由化學纖維構成之織布或不織布及軟質氯乙烯、聚乙烯、聚胺基甲酸酯等之薄膜或發泡體片為合適。
上述各投予單位形態中所應摻合之上述化合物A之量，視需應用其之患者症狀或劑形等而非固定。但一般來說，每投予單位形態以口服劑而言宜設為0.05~1000mg，以注射劑而言宜設為0.01~500mg，以栓劑而言宜設成1~1000mg。
此外，具有上述投予形態之藥劑的每日投予量視患者之症狀、體重、年齡及性別等而異，無法一概決定且不受限。一般來說，以化合物A而言，通常成人(體重50kg)設成每日0.05~5000mg(宜0.1~1000mg)即可，且宜將其以1日1次或分成2~3次左右來投予。
本發明還提供一種惡性腫瘤患者之治療方法，包含：對表現出具外顯子18及/或外顯子21突變之EGFR的惡性腫瘤患者投予化合物A或其鹽。
本發明還提供一種用以治療惡性腫瘤患者之化合物A或其鹽，該惡性腫瘤患者表現出具外顯子18及/或外顯子21突變之EGFR。
本發明還提供一種化合物A或其鹽之用途，其係用以治療表現出具外顯子18及/或外顯子21突變之EGFR的惡性腫瘤患者。
本發明還提供一種化合物A或其鹽在製造醫藥上之用途，該醫藥係用以治療表現出具外顯子18及/或外顯子21突變之EGFR的惡性腫瘤患者。
本發明還提供一種用以治療惡性腫瘤患者之醫藥組成物，其包含化合物A或其鹽以及藥學上可接受之載體，且該惡性腫瘤患者表現出具外顯子18及/或外顯子21突變之EGFR。
本發明還提供一種對惡性腫瘤患者預測化學療法之治療效果的方法，該化學療法使用有效成分為化合物A或其鹽之抗腫瘤劑，該方法包含下列步驟(1)~(2)： 步驟(1)，其檢測採取自該患者之生物試料所含EGFR基因有無突變；及 步驟(2)，其係於上述步驟(1)之檢測結果為EGFR基因具有外顯子18及/或外顯子21之突變時，預測該化學療法對該患者顯示出充分治療效果之可能性。
本發明還提供一種惡性腫瘤患者之治療方法，包含下列步驟(1)~(3)。 步驟(1)，其檢測採取自該患者之生物試料所含EGFR基因有無突變； 步驟(2)，其係於上述步驟(1)之檢測結果為EGFR基因具有外顯子18及/或外顯子21之突變時，預測對該患者使用有效成分為(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲-8-基)丙烯醯胺或其鹽之抗腫瘤劑的化學療法會顯示充分治療效果之可能性高；及 步驟(3)，其係對已於上述步驟(2)中預測使用有效成分為(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲-8-基)丙烯醯胺或其鹽之抗腫瘤劑的化學療法會顯示出充分治療效果的可能性高之惡性腫瘤患者，投予(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲-8-基)丙烯醯胺或其鹽。
EGFR基因之鹼基序列已是習知。cDNA之鹼基序列的GenBank登錄編號為NM＿005228.4。
另，「治療效果」可藉腫瘤縮小效果、再發抑制效果及延命效果等來評價，再發抑制效果可藉無再發生存期間之延長及再發率之改善程度來表示，延命效果可藉全生存期間及無惡化生存期間之中位數的延長程度等來表示。使用有效成分為化合物A或其鹽之抗腫瘤劑的化學療法會「顯示出充分治療效果」意指：透過投予含有化合物A或其鹽來作為有效成分之抗腫瘤劑，與非投予之情況相較，可使生存期間延長或抑制再發之優異治療效果。 實施例
以下顯示試驗例以更詳盡地說明本發明，但本發明不受此等實施例(試驗例)所限制。
試驗例1 活體外(In vitro)藥效試驗 使用HEK293細胞之強制表現突變型EGFR系統中之細胞內磷酸化評價結果(抑制活性) 化合物於細胞內之標的抑制活性係以使用Jump-In(商標)Grip(商標)HEK293細胞(Thermo Fisher Scientific Inc.)(以下亦稱「HEK293細胞」)之強制表現突變型EGFR系統中之細胞內EGFR磷酸化作為指標來進行評價。HEK293細胞係以含10%透析牛胎兒血清(dialyzed FBS)及100U/mL盤尼西林/100μg/mL鏈黴素(Thermo Fisher Scientific Inc.)之D-MEM with GlutaMAX(商標)-I(High glucose)(Thermo Fisher Scientific Inc.)來維持，使用ViaFect(商標) Transfection Reagent(Promega Corporation)，將編碼有人類EGFR基因(G719A、G719S、G719C、E709K、E709A、L861Q、G719A+T790M(+表示具有雙方之突變)、L861Q+T790M)之pJTITM R4 DEST CMV pA載體與Opti-MEM(商標) I(Thermo Fisher Scientific Inc.)一起導入。將表現突變型人類EGFR之HEK293細胞以每孔細胞數10,000萬的方式播種於384孔平底微量盤之各孔中，再於37℃下於含5%二氧化碳氣體之培養器中培養1天。使化合物A、厄洛替尼、阿法替尼及奧希替尼(以下亦稱「比較化合物」)溶解於DMSO中，使用DMSO或用於懸浮各細胞之培養基稀釋，再將其加入細胞培養盤之各孔中，於37℃下在含5%二氧化碳氣體之培養器中培養6小時。培養後，使用20%中性緩衝福馬林液(和光純藥工業股份有限公司)將細胞固定，藉ODYSSEY(商標) Blocking Buffer(PBS)(M&S TechnoSystems Inc.)將細胞封閉後，使其與已使用ODYSSEY(商標) Blocking Buffer(PBS)稀釋至200分之1的一次抗體(EGFR Monoclonal Antibody(R19/48MIX)＃AHR5062 (Thermo Fisher Scientific Inc.)及Phospho-EGFR Receptor(Tyr1068) Antibody＃2234L(CST))發生反應並於4℃下浸透一晩。翌日，使其與已用ODYSSEY(商標) Blocking Buffer(PBS)稀釋至800分之1的二次抗體(IRDye 800CW Goat aRabbit＃926-32211及IRDye 680RD Goat aMouse＃926-68070(M&S TechnoSystems Inc.))發生反應，於室溫下浸透1小時。螢光強度(Fluorescence intensity：以下亦稱「FI」)之檢測係使用Odyssay Infrared Imaging System(LI-COR Bioscience)並於螢光波長800nm及700nm下測定。
從螢光波長800nm及700nm下測出之FI值扣除不含細胞之孔的FI值，分別令所得數值為FI(800,EGFR)-Blank、FI(700,p-EGFR)-Blank。令各孔之FI(700,p-EGFR)-Blank除以FI(800,EGFR)-Blank之值為FI(p-EGFR/EGFR)值。以下式算出磷酸化EGFR抑制率，求出可抑制50%磷酸化EGFR之受測化合物的濃度(IC50 (μM))。茲將結果示於表1。
磷酸化EGFR抑制率(%)=T/C×100 T：添加有受測化合物之孔的FI(p-EGFR/EGFR)。 C：未添加受測化合物之孔的FI(p-EGFR/EGFR)。
從表1可明顯看出，化合物A對於外顯子18或外顯子21突變型EGFR顯示出高度之細胞內磷酸化抑制活性，其活性較厄洛替尼、奧希替尼更高，且與阿法替尼同等。於後天抗藥性突變之T790M突變存在下，化合物A對外顯子18或外顯子21突變型EGFR之抑制活性較阿法替尼更高。
[表1]
試驗例2 對表現野生型及突變型EGFR細胞株之細胞增殖抑制效果的評價(in vitro) 化合物對野生型EGFR及突變型EGFR之抑制活性係使用導入有人類EGFR基因之小鼠B淋巴球前驅細胞株Ba/F3細胞來進行。Ba/F3細胞係以包含10%牛胎兒血清(FBS)、100U/mL盤尼西林/100μg/mL鏈黴素(Thermo Fisher Scientific Inc.)及1ng/mL小鼠介白素-3(mIL-3)(CST)之RPMI-1640培養基(Thermo Fisher Scientific Inc.)來維持，將編碼有人類EGFR基因(野生型(WT)、G719A、L861Q)之PB-CMV-MCS-EF1-GFP+ Puro載體或PB-CMV-MCS-EF1-RFP+Puro載體與Super PiggyBacTransposase表現載體一起以利用Amaxa(商標) Cell Line Nucleofector(商標) Kit V之電穿孔法導入後，藉嘌黴素(SIGMA)作選擇。表現野生型EGFR之Ba/F3細胞(以下亦稱「Ba/F3-EGFR＿WT」)在50ng/mL EGF(R&D Systems)存在下顯示出非mIL-3相依性之增殖，此外，表現外顯子18及外顯子21活性突變型EGFR之Ba/F3細胞(以下亦稱「Ba/F3-EGFR G719A」、「Ba/F3-EGFR L861Q」)則在EGF非存在下顯示出非mIL-3相依性之增殖。
評價細胞增殖抑制效果之際，使Ba/F3-EGFR＿WT細胞懸浮於含10% FBS、100U/mL盤尼西林、100μg/mL鏈黴素及50ng/mL EGF之RPMI-1640培養基中，再將細胞懸浮液以每孔細胞數為30,000個的方式播種到96孔平底微量盤之各孔中。另一方面，Ba/F3-EGFR G719A細胞及Ba/F3-EGFR L861Q細胞則懸浮於含10% FBS、100U/mL盤尼西林、100μg/mL鏈黴素之RPMI-1640培養基中，再將細胞懸濁液以每孔細胞數為15,000個的方式播種到96孔平底微量盤之各孔中。接著，使化合物A、吉非替尼、厄洛替尼、阿法替尼及奧希替尼(以下亦稱「比較化合物」)溶解於DMSO，使用DMSO或用於懸浮各細胞之培養基來稀釋，將其加入細胞培養盤之各孔中，於37℃下在含5%二氧化碳氣體之培養器中培養3天。培養後之細胞數計測係使用Cell Titer-Glo(商標) Luminescent Cell Viability Assay(Promega)，按廠商推薦之程序進行。以下式算出增殖抑制率，再求出抑制50%之受測化合物濃度(IC50 (μM))。
增殖抑制率(%)=T/C×100 T：添加有受測化合物之孔的發光強度。 C：未添加受測化合物之孔的發光強度。
此外，由下式算出野生型EGFR與G719A突變型EGFR或L861Q突變型EGFR之IC50 值之比。茲將結果示於表2。
IC50 ratio=IC50 (WT)/IC50 (G719A或L861Q)。
由表2可明顯看出，化合物A對G719A或L861Q突變顯示出選擇性抑制活性。
[表2]
試驗例3 活體內(In vivo)藥效試驗 使用皮下移植表現G719A突變型EGFR細胞株之小鼠模式的抗腫瘤效果評價 使用已皮下移植表現G719A突變型EGFR細胞株之小鼠模式的評價中，使用已導入EGFR基因之小鼠纖維母細胞株NIH-3T3細胞來進行。NIH-3T3細胞係以含10%牛新生兒血清(NBCS)、1,500mg/L碳酸氫鈉、100U/mL盤尼西林/100μg/mL鏈黴素(Thermo Fisher Scientific Inc.)之D-MEM(高葡萄糖)培養基(和光純藥)來維持，將編碼有人類EGFR基因(G719A)之PB-CMV-MCS- EF1-RFP+Puro載體與Super PiggyBacTransposase表現載體一起藉利用Amaxa(商標)Cell Line Nucleofector(商標)Kit R之電穿孔法導入後，以嘌黴素(SIGMA)來選擇。表現出外顯子18突變型EGFR之NIH-3T3細胞(以下亦稱「NIH3T3-EGFR G719A」)在1%NBCS條件下且EGF非存在下顯示出增殖。
使用皮下移植表現G719A突變型EGFR細胞株之小鼠模式來評價時，將已導入人類突變型EGFR之NIH3T3-EGFR G719A細胞移植至裸小鼠皮下，在附生腫瘤之裸小鼠的腫瘤體積達100-200mm3 左右的時間點，為了使各組之平均腫瘤體積能夠平均，而透過隨機分層化將5~6隻分為1組，再連日口服投予化合物A、阿法替尼及奧希替尼14天，1天1次。
就投予用量而言，阿法替尼使用本試驗之投予期間14天之最大耐藥用量(投予期間中之體重減少變得小於20%之最大投予用量)的20mg/kg/day，奧希替尼使用相當於臨床藥效用量之25mg/kg/day，化合物A則是從最大耐藥用量之200mg/kg/day設定3個劑量(dose)而使用200、100、50mg/kg/day。另，最大耐藥用量遵照美國國立癌症研究所(NCI)之「Guidelines Involving Experimental Neoplasia Proposals in Mice and Rats」，從人道觀點進行設定。
對了比較各受測化合物投予時之腫瘤經時增殖推移，而令腫瘤體積(tumor volume，以下亦稱「TV」)為指標。就毒性指標而言，經時地測定體重並依下式算出相對於分組日之平均體重變化率(Body weight change，以下亦稱「BWC(%)」)。
BWC(%)=(體重測定日之體重)/(分組時之體重)。
最終評價日之控制(control)組與藥劑投予組之平均TV差在統計學上為顯著(Dunnett檢定，P＜0.05)且使用下式算出之treatment/control(T/C)值小於100時，則判斷為有效，並於圖中以＊記號表示。
T/C(%)=(藥劑投予組之平均TV)/(Control組之平均TV)×100。
從圖1所示結果可清楚看出，本發明化合物A對於移植到裸小鼠皮下之表現G719A突變型EGFR細胞株顯示出伴隨腫瘤退縮之顯著抗腫瘤效果。此外，其效果較阿法替尼及奧希替尼更高。如圖2所示，並未發現小鼠之體重嚴重減少、排便異常及皮膚異常等症狀。
試驗例4 In vitro藥效試驗 對顯示T790M突變型EGFR細胞株之細胞增殖抑制效果的評價(in vitro) 化合物對T790M突變型EGFR之抑制活性係使用已導入人類EGFR基因之小鼠B淋巴球前驅細胞株Ba/F3細胞來進行。Ba/F3細胞係以含10%牛胎兒血清(FBS)、100U/mL盤尼西林/100μg/mL鏈黴素(Thermo Fisher Scientific Inc.)及1ng/mL小鼠介白素-3(mIL-3) (CST)之RPMI-1640培養基(Thermo Fisher Scientific Inc.)來維持，將已編碼人類EGFR基因(野生型(WT)、G719A+T790M、L861Q+T790M)之PB-CMV-MCS- EF1-GFP+Puro載體或PB-CMV-MCS-EF1-RFP+Puro載體與Super PiggyBacTransposase表現載體一起藉利用Amaxa(商標) Cell Line Nucleofector(商標)Kit V之電穿孔法導入後，以嘌黴素(SIGMA)來選擇。表現G719A+T790M及L861Q+T790M突變型EGFR之Ba/F3細胞(以下亦稱「Ba/F3-EGFR G719A+T790M」、「Ba/F3-EGFR L861Q+T790M」)在EGF非存在下顯示非mIL-3相依性之增殖。
評價細胞增殖抑制效果之際，Ba/F3-EGFR G719A+T790M細胞及Ba/F3-EGFR L861Q+T790M細胞係懸浮於含10% FBS、100U/mL盤尼西林及100μg/mL鏈黴素之RPMI-1640培養基中，再將細胞懸濁液以每孔細胞數為15,000個的方式播種到96孔平底微量盤之各孔中。接著，使化合物A、吉非替尼、厄洛替尼、阿法替尼及奧希替尼(以下亦稱「比較化合物」)溶解於DMSO，再使用DMSO或懸浮各細胞所用培養基來稀釋，將其加入細胞培養盤之各孔中，於37℃下在含5%二氧化碳氣體之培養器中培養3天。培養後之細胞數計測係使用Cell Titer-Glo(商標) Luminescent Cell Viability Assay(Promega)，按廠商推薦之程序進行。以下式算出增殖抑制率，再求出抑制50%之受測化合物濃度(IC50 (μM))。
增殖抑制率(%)=T/C×100 T：添加有受測化合物之孔的發光強度 C：未添加受測化合物之孔的發光強度
此外，以下式算出野生型EGFR與G719A+T790M突變型EGFR或L861Q+T790M突變型EGFR之IC50 值之比。茲將結果示於表3。
IC50 比=IC50 (WT)/IC50 (G719A+T790M或L861Q+T790M)。
從表3可明顯看出，化合物A對G719A+T790M或L861Q+T790M突變顯示出選擇性抑制活性。
[表3]
試驗例5 In vivo 藥效試驗 使用皮下移植表現G719A+T790M突變型EGFR細胞株之小鼠模式的抗腫瘤效果評價 使用皮下移植表現G719A+T790M突變型EGFR細胞株之小鼠模式的評價係使用已導入人類EGFR基因之小鼠纖維母細胞株NIH-3T3細胞來進行。NIH-3T3細胞係以含10%牛新生兒血清(NBCS)、1,500mg/L碳酸氫鈉、100U/mL盤尼西林/100μg/mL鏈黴素(Thermo Fisher Scientific Inc.)之D-MEM(高葡萄糖)培養基(和光純藥)來維持，將已編碼人類EGFR基因(G719A+T790M)之PB-CMV-MCS-EF1-RFP+Puro載體與Super PiggyBacTransposase表現載體一起藉利用Amaxa(商標)Cell Line Nucleofector(商標)Kit R之電穿孔法導入後，以嘌黴素(SIGMA)來選擇。表現出外顯子18突變型EGFR之NIH-3T3細胞(以下亦稱「NIH3T3-EGFR G719A+T790M」)於1%NBCS條件下且EGF非存在下顯示出增殖。
使用皮下移植表現G719A+T790M突變型EGFR細胞株之小鼠模式進行評價時，將已導入人類突變型EGFR之NIH3T3-EGFR G719A+T790M細胞移植到裸小鼠之皮下，再附生腫瘤之裸小鼠的腫瘤體積達100-300mm3 左右的時間點，未使各組之平均腫瘤體積能夠平均，而利用隨機分層化將5隻分為1組，連日投予本發明化合物A及阿法替尼1天，1天1次。
就投予用量而言，阿法替尼使用本試驗之投予期間14天之最大耐藥用量(投予期間中之體重減少變得小於20%之最大投予用量)的20mg/kg/day，本發明化合物A則是從最大耐藥用量之200mg/kg/day設定3個劑量(dose)而使用200、100、50mg/kg/day。另，最大耐藥用量遵照美國國立癌症研究所(NCI)之「Guidelines Involving Experimental Neoplasia Proposals in Mice and Rats」，從人道觀點進行設定。
對了比較各受測化合物投予時之腫瘤經時增殖推移，而令腫瘤體積(tumor volume，以下亦稱「TV」)為指標。茲將TV之經時推移示於圖3。此外，就毒性指標而言，經時地測定體重並依下式算出相對於分組日之平均體重變化率(Body weight change，以下亦稱「BWC(%)」)，將經時推移顯示於圖4。 BWC(%)=(體重測定日之體重)/(分組時之體重)。
以最終評價日之平均TV為指標進行Dunnett檢定，控制(control)組與藥劑投予組之平均TV差在統計學上為顯著(P＜0.05)且使用下式算出之treatment/control(T/C)值小於100時，則判斷為有效，並於圖3、4中以＊記號表示(＊：P＜0.05，＊＊：P＜0.01，＊＊＊：P＜0.001)。此外，發明化合物A投予組與阿法替尼投予組之平均TV差在統計學上為明顯(P＜0.05)且發明化合物A投予組之T/C值低於阿法替尼投予組之T/C值時，則判定具有高於阿法替尼之抗腫瘤效果，並於圖3及表4中以＃表示(＃：P＜0.05，＃＃：P＜0.01，＃＃＃：P＜0.001)。
T/C(%)=(藥劑投予組之平均TV)/(Control組之平均TV)×100
由圖3所示結果可以明顯看出，本發明化合物A對於移植到裸小鼠皮下之表現G719A+T790M突變型EGFR細胞株顯示出明顯抗腫瘤效果。此外，如表4所示，其效果較阿法替尼更高，此時，如圖4所示，未發現小鼠之體重嚴重減少、排便異常及皮膚異常等症狀。
[表4]
圖1顯示皮下移植表現G719A突變型EGFR細胞株之模式小鼠的腫瘤體積(以下亦稱「TV」)，其用以測定化合物A之抗腫瘤效果。 圖2顯示皮下移植表現G719A突變型EGFR細胞株之模式小鼠於化合物投予期間內之體重，其用以測定化合物A之毒性。 圖3顯示皮下移植表現G719A+T790M突變型EGFR細胞株之模式小鼠的腫瘤體積，其用以測定化合物A之抗腫瘤效果。 圖4顯示顯示皮下移植表現G719A+T790M突變型EGFR細胞株之模式小鼠於化合物投予期間內之體重，其用以測定化合物A之毒性。

Claims (32)

  1. 一種用以治療惡性腫瘤患者之抗腫瘤劑，含有(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲-8-基)丙烯醯胺或其鹽，該惡性腫瘤患者表現出具突變之EGFR，且該突變係選自於由外顯子18之G719X突變、外顯子18之E709X突變及外顯子21之L861X突變所構成群組中之至少一種突變(X表示任意之胺基酸殘基)。
  2. 如請求項1之抗腫瘤劑，其中外顯子18之突變係選自於由G719A、G719S、G719C、E709K及E709A所構成群組中之至少一種突變。
  3. 如請求項1或2之抗腫瘤劑，其中外顯子21之突變為L861Q。
  4. 如請求項1至3中任一項之抗腫瘤劑，其中EGFR更具有T790M突變。
  5. 一種惡性腫瘤患者之治療方法，包含：對表現出具突變之EGFR的惡性腫瘤患者投予(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲-8-基)丙烯醯胺或其鹽之步驟；且，該突變係選自於由外顯子18之G719X突變、外顯子18之E709X突變及外顯子21之L861X突變所構成群組中之至少一種突變(X表示任意之胺基酸殘基)。
  6. 如請求項5之治療方法，其中外顯子18之突變係選自於由G719A、G719S、G719C、E709K及E709A所構成群組中之至少一種突變。
  7. 如請求項5或6之治療方法，其中外顯子21之突變為L861Q。
  8. 如請求項5至7中任一項之治療方法，其中EGFR更具有T790M突變。
  9. 一種(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲-8-基)丙烯醯胺或其鹽，係用以治療表現出具突變之EGFR的惡性腫瘤患者，且該突變係選自於由外顯子18之G719X突變、外顯子18之E709X突變及外顯子21之L861X突變所構成群組中之至少一種突變(X表示任意之胺基酸殘基)。
  10. 如請求項9之(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲-8-基)丙烯醯胺或其鹽，其中外顯子18之突變係選自於由G719A、G719S、G719C、E709K及E709A所構成群組中之至少一種突變。
  11. 如請求項9或10之(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲-8-基)丙烯醯胺或其鹽，其中外顯子21之突變為L861Q。
  12. 如請求項9至11中任一項之(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲-8-基)丙烯醯胺或其鹽，其中EGFR更具有T790M突變。
  13. 一種(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲-8-基)丙烯醯胺或其鹽之用途，係用以治療表現出具突變之EGFR的惡性腫瘤患者，且該突變係選自於由外顯子18之G719X突變、外顯子18之E709X突變及外顯子21之L861X突變所構成群組中之至少一種突變(X表示任意之胺基酸殘基)。
  14. 如請求項13之用途，其中外顯子18之突變係選自於由G719A、G719S、G719C、E709K及E709A所構成群組中之至少一種。
  15. 如請求項13或14之用途，其中外顯子21之突變為L861Q。
  16. 如請求項13至15中任一項之用途，其中EGFR更具有T790M突變。
  17. 一種(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲-8-基)丙烯醯胺或其鹽於製造醫藥上之用途，該醫藥係用以治療表現出具突變之EGFR的惡性腫瘤患者，且該突變係選自於由外顯子18之G719X突變、外顯子18之E709X突變及外顯子21之L861X突變所構成群組中之至少一種突變(X表示任意之胺基酸殘基)。
  18. 如請求項17之用途，其中外顯子18之突變係選自G719A、G719S、G719C、E709K及E709A所構成群組中之至少一種突變。
  19. 如請求項17或18之用途，其中外顯子21之突變為L861Q。
  20. 如請求項17至19中任一項之用途，其中EGFR更具有T790M突變。
  21. 一種醫藥組成物，包含(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲-8-基)丙烯醯胺或其鹽及藥學上可接受之載體，該組成物係用以治療表現出具突變之EGFR的惡性腫瘤患者，且該突變係選自於由外顯子18之G719X突變、外顯子18之E709X突變及外顯子21之L861X突變所構成群組中之至少一種突變(X表示任意之胺基酸殘基)。
  22. 如請求項21之醫藥組成物，其中外顯子18之突變係選自於由G719A、G719S、G719C、E709K及E709A所構成群組中之至少一種突變。
  23. 如請求項21或22之醫藥組成物，其中外顯子21之突變為L861Q。
  24. 如請求項21至23中任一項之醫藥組成物，其中EGFR更具有T790M突變。
  25. 一種預測化學療法之治療效果的方法，該化學療法係對惡性腫瘤患者使用有效成分為(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲-8-基)丙烯醯胺或其鹽之抗腫瘤劑； 該方法包含下列步驟(1)~(2)： 步驟(1)，其檢測採取自該患者之生物試料所含EGFR基因有無突變；及 步驟(2)，其係於上述步驟(1)之檢測結果為EGFR基因具有選自於由外顯子18之G719X突變、外顯子18之E709X突變及外顯子21之L861X突變所構成群組中之至少一種突變時(X表示任意之胺基酸殘基)，即預測該化學療法對該患者顯示出充分治療效果之可能性高。
  26. 如請求項25之方法，其中外顯子18之突變係選自於由G719A、G719S、G719C、E709K及E709A所構成群組中之至少一種突變。
  27. 如請求項25或26之方法，其中外顯子21之突變為L861Q。
  28. 如請求項25至27中任一項之方法，其中EGFR更具有T790M突變。
  29. 一種惡性腫瘤患者之治療方法，包含下列步驟(1)~(3)： 步驟(1)，其檢測採取自該患者之生物試料所含EGFR基因有無突變； 步驟(2)，其係於上述步驟(1)之檢測結果為EGFR基因具有選自於由外顯子18之G719X突變、外顯子18之E709X突變及外顯子21之L861X突變所構成群組中之至少一種突變時(X表示任意之胺基酸殘基)，即預測使用有效成分為(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲-8-基)丙烯醯胺或其鹽之抗腫瘤劑的化學療法對該患者顯示出充分治療效果之可能性高；及 步驟(3)，其係對已於上述步驟(2)中預測使用有效成分為(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲-8-基)丙烯醯胺或其鹽之抗腫瘤劑的化學療法會顯示出充分治療效果的可能性高之惡性腫瘤患者，投予(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲-8-基)丙烯醯胺或其鹽。
  30. 如請求項29之方法，其中外顯子18之突變係選自G719A、G719S、G719C、E709K及E709A所構成群組中之至少一種突變。
  31. 如請求項29或30之方法，其中外顯子21之突變為L861Q。
  32. 如請求項29至31中任一項之方法，其中EGFR更具有T790M突變。
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