TW201400123A - 加氏乳酸桿菌PM-A0005菌株用於製備增進PPARγ表現之組合物之用途 - Google Patents
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Abstract
本發明係提供一種加氏乳酸桿菌(Lactobacillus gasseri)PM-A0005菌株(台灣新竹食品工業發展研究所寄存編號BCRC 910304)用於製備增進PPARγ表現之組合物之用途。本發明亦提供一種用於增進PPARγ表現之組合物,其係包含增進PPARγ表現有效量的加氏乳酸桿菌(Lactobacillus gasseri)PM-A0005菌株(台灣新竹食品工業發展研究所寄存編號BCRC 910304)。
Description
本發明係關於加氏乳酸桿菌(Lactobacillus gasseri)菌株用於製備增進PPARγ表現之組合物之用途。
過氧化物酶體增殖激活受體(peroxisome proliferator-activated receptor;PPAR)是核內受體超級家族成員之一,也是受荷爾蒙調控轉錄因子,與其他典型的賀爾蒙活化受體不同,PPAR受體原本位於細胞質中,當受體與活化的配體結合時會一起移至核內,並與核內DNA反應位(response elements)結合啟動下游基因表現(Glass et al.,Genes Dev(2000)14,121-141)。位於核內的PPAR是典型的代謝物激活的受體。PPAR共有三型,α、β/δ及γ,此三型PPAR必須與視黃素X受體(retinoid-X-receptor;RXR)形成異質雙倍受體。PPARβ/δ主要為調控腸道細胞增殖與分化。PPARα與PPARγ的功能相似,PPARγ表現於脂肪細胞、骨骼肌細胞、破骨細胞、成骨細胞以及一些免疫細胞中,若將PPARγ基因剔除則會造成致命的影響。人體中PPARγ具有四種基因型,但在正常細胞只表現PPARG-1、PPARG-2兩種蛋白。PPARG-1蛋白主要廣泛表達於細胞中,而PPARG-2表現主要侷限於脂肪細胞。
PPARγ不只可由配體來活化也藉磷酸化來增加配體無關的轉錄活性(Diradourian et al.,Biochimie(2005)87,33-38)。PPARγ研究發現除了本身具有轉錄因子的功能外,也可藉由配體活化進行小泛素化(sumoylation)去抑制發炎的基因表現,其機制為蛋白質的小泛素化的PPARγ與DNA抑制子複合物結合在發炎基因上進而防止19S蛋白水解體將抑制子的
降解,達到抑制發炎基因的表現(Pascual et al.,Nature(2005)437,759-763)。PPARγ不只可由配體來活化也藉磷酸化來增加配體無關的轉錄活性(Diradourian et al.,Biochimie(2005)87,33-38)。PPARγ研究發現除了本身具有轉錄因子的功能外,也可藉由配體活化進行小泛素化(sumoylation)去抑制發炎的基因表現,其機制為蛋白質的小泛素化的PPARγ與DNA抑制子複合物結合在發炎基因上進而防止19S蛋白水解體將抑制子的
於動物及人體試驗發現PPARγ活化藥物可用於治療糖尿病且亦有潛力發展為抗發炎藥物。PPARγ促進劑吡格列酮(pioglitazone)為一種皮質類固醇,在氣喘的小鼠模式或人體試驗中,發現可有效治療氣喘症狀(Narala et al.,Respir Res(2007)8,90)。人體的PPARγ顯性負突變將導致局部脂質營養不良(partial lipodystrophy)及胰島素抗性(insulin resistance)(Semple et al.,J.Clin.Invest.(2006)116,581-589)。PPARγ促進劑也常用於治療第二型糖尿病,例如:吡格列酮及羅格列酮(rosiglitazone),且其在類風濕關節炎大鼠模式中發現可減少骨質流失和骨質流失引起的發炎症狀(Koufany et al.,Arthritis Res Ther(2008)10,R6;Doshi et al.,Expert Opin.Investig.Drugs(2010)19(4),489-512)。羅格列酮於臨床試驗結果發現亦有助於治療脂質營養不良(lipodystrophy)(Anghel et al.,Cell Res(2007)17,486-511)。
因此,仍需要增進PPARγ表現之組合物,其可用於治療多種疾病,包括代謝疾病,例如,糖尿病。
本發明非預期性地發現特定的加氏乳酸桿菌菌株PM-A0005(台灣新竹食品工業發展研究所寄存編號BCRC 910304)具有增加PPARγ表現之活性。
因此,在一方面,本發明提供一種加氏乳酸桿菌
(Lactobacillus gasseri)PM-A0005菌株用於製備增進PPARγ表現之組合物之用途。
另一方面,本發明提供一種用於增進PPARγ表現之組合物,其係包含增進PPARγ表現有效量的加氏乳酸桿菌PM-A0005菌株。
本發明之組合物可用於治療脂肪疾病、代謝疾病、心血管疾病或高血壓。
本文所用冠詞「一」或「該」意指該冠詞之文法上受詞為一或一以上(即至少為一),除非另闡明該冠詞特別用於單數文義。
在一方面,本發明提供一種加氏乳酸桿菌(Lactobacillus gasseri)PM-A0005菌株(台灣新竹食品工業發展研究所寄存編號BCRC 910304)用於製備增進PPARγ表現之組合物之用途。
根據本發明之較佳具體實施例,該組合物係含有增進PPARγ表現之有效量的加氏乳酸桿菌PM-A0005菌株,且用於口服投予至一個體以增進該個體體內之過氧化物酶體增殖激活受體γ(PPARγ)表現。
本文所使用的「個體」乙詞係指動物或人類。
本文所使用的「有效量」乙詞係指可增進一個體體內PPARγ表現的量,不論是單獨投予或是與其他有相同活性之物質共同投予。如同本領域具有通常知識的技術人員所知,有效量會隨著投予途徑、賦形劑使用量以及與其他有相同活性之物質共同給予的變化而改變。
根據本發明,該組合物以口服投予至一個體之有效量以該個體之體重(kg)計較佳為1×108 CFU/kg/天~1×109 CFU/kg/天,更佳為5×108 CFU/kg/天~6×108 CFU/kg/天。
在本發明之一具體實施例中,該有效量以該個體之體重
(kg)計約為5.5×108 CFU/kg/天。
另一方面,本發明提供一種用於增進PPARγ表現之組合物,其係包含增進PPARγ表現有效量的加氏乳酸桿菌(Lactobacillus gasseri)PM-A0005菌株(台灣新竹食品工業發展研究所寄存編號BCRC 910304)。
根據本發明之較佳具體實施例,該組合物係以口服投予至一個體以增進該個體體內之過氧化物酶體增殖激活受體γ(PPARγ)表現。
根據本發明,該有效量以該個體之體重(kg)計較佳為1×108 CFU/kg/天~1×109 CFU/kg/天,更佳為5×108 CFU/kg/天~6×108 CFU/kg/天。在本發明之特定具體實施例中,該有效量以該個體之體重(kg)計約為5.5×108 CFU/kg/天。
根據本發明之一具體實施例,本發明之組合物係為一種醫藥組合物。
本發明之組合物可以製備為任何適當之形式。舉例來說,適合口服投與的固體形式,如:丸狀、膠囊、顆粒、錠劑和粉末,或是液體形式,如:飲料、糖漿、溶液、以及懸浮液。本發明之組合物可添加一種或多種常用於口服配方之載體或賦形劑做成組合物,或視需要添加例如表面活性劑、溶解劑、穩定劑、乳化劑、濃縮劑、色素、甜味劑、風味添加劑以及防腐劑等。
根據本發明之另一具體實施例,本發明之組合物係為一種食品組合物。該食品包括但不限於乳品、發酵乳製品、飲料、運動飲料、營養添加物或保健食品、糖果或是膠質。
根據本發明之部分具體實施例,本發明之含有增進PPARγ表現有效量的加氏乳酸桿菌PM-A0005菌株之組合物投予至一個體,可增進該個體肺部之PPARγ表現。
在本發明之一具體實施例中,其可增進該個體肺部淋巴結之PPARγ表現。
根據本發明,該組合物係以口服投予至一個體以增進該個體肺部淋巴結之PPARγ表現,其中該有效量以該個體之體重(kg)計較佳為1×108 CFU/kg/天~1×109 CFU/kg/天,更佳為5×108 CFU/kg/天~6×108 CFU/kg/天。
根據本發明之部分具體實施例,本發明之組合物投予至一個體,可增進該個體腸部之PPARγ表現。
在本發明之一具體實施例中,其可增進該個體腸繫黏膜淋巴結之PPARγ表現。
根據本發明,該組合物係以口服投予至一個體以增進該個體腸繫黏膜淋巴結之PPARγ表現,其中該有效量以該個體之體重(kg)計較佳為1×108 CFU/kg/天~1×109 CFU/kg/天,更佳為5×108 CFU/kg/天~6×108 CFU/kg/天。
相關研究指出,PPARγ功能不良將造成脂肪代謝異常引起脂肪疾病,例如,Anghel et al.,Cell Res(2007)17,486-511及Semple et al.,J.Clin.Invest.(2006)116,581-589。
因此,根據本發明,含有增進PPARγ表現有效量的加氏乳酸桿菌PM-A0005菌株之組合物可用於治療脂肪疾病。
本文所使用之「脂肪疾病」係指因脂肪代謝異常引起之疾病,包括但不限於白色脂肪組織細胞過少(WAT hypocellularity)、高血脂症、脂質營養不良、胰島素抗性及脂肪肝。
另一方面,文獻亦指出PPARγ促效劑(agonist)對於患有代謝疾病(例如,糖尿病、高血壓及心血管疾病)之病人有益,例如,Doshi et al.,Expert Opin Investig Drugs.2010 Apr;19(4):489-512,Ketsawatsomkron et al.,J Biol Chem.2010 Mar 26;285(13):9311-6及Morrison A,LiJ,Biochem Pharmacol.2011 Aug 1;82(3):195-200。其中,就心血管疾病而言,文獻指出PPARγ促效劑具心血管保護作用。
因此,本發明之組合物亦可用於治療代謝疾病,且具新血管保護作用。本發明之組合物可用於治療糖尿病、高血壓
或心血管疾病。
本文所使用的「代謝疾病」乙詞包括但不限於糖尿病、高血壓及心血管疾病。
再一方面,本發明提供一種用於增進PPARγ表現之組合物,其係包含增進PPARγ表現有效量的加氏乳酸桿菌(Lactobacillus gasseri)PM-A0005菌株,其中該組合物用於治療過敏性氣喘。
本文所使用之「過敏性氣喘」乙詞係指因吸入具有誘發性的過敏原引起無法控制的氣道過度反應,並伴隨呼吸道結構的改變,包括但不限於上皮之增生、黏膜組織之變形、呼吸道平滑肌之增生、以及細胞外基質之增生。
在本發明之一具體實施例中,本發明之組合物投予至一個體,可增進該個體PPARγ之表現且改善過敏性氣喘個體之呼吸道高度反應。然而在一比較例中,本發明之組合物投予至PPARγ突變之個體,則無法觀察到呼吸道高度反應之改善。
另一方面,文獻亦指出PPARγ促效劑可有效治療氣喘症狀,例如Narala,V.R.,et al.Respir Res 8,90(2007)。
因此,根據本發明,含有增進PPARγ表現有效量的加氏乳酸桿菌PM-A0005菌株之組合物可用於治療過敏性氣喘。本發明由下列實施例做進一步的說明,但實際發明並不受限於該用於展示之實施例。
BALB/cBYJ品系小鼠來自於國立成功大學動物中心、C57BL/6JNarl小鼠來自於國家動物中心、以及PPARγ表現量為一半的小鼠PPAR-γ P465L突變鼠(Tsai,Y.S.,et al.J Clin Invest(2004)114,240-249)皆採用6~8週齡雌性小鼠,並以標準飼料及飲水繁殖於國立成功大學動物中心。塵螨蟲體(Dermatophagoides pteronyssinus)購自Allergon
(Angelholm,Sweden)。
將原始菌數為1.04×1011 CFU/g的加氏乳酸桿菌PM-A0005菌粉溶於無菌生理食鹽水中,將菌數調至5×107 CFU/ml及5×109 CFU/ml,儲存於-80℃冰箱備用。
於實驗開始前兩週每天利用餵食方式分別給予老鼠200μl生理食鹽水(控制組)、200μl 5×107 CFU/ml(低劑量組)以及200μl 5×109 CFU/ml(高劑量組)加氏乳酸桿菌PM-A0005,直至第十三天(在第零天、第七天及第十四天給予塵螨時不餵食),實驗第零天和第七天將濃度1.6 mg/ml的塵螨萃取物以等體積混合不完全弗氏佐劑,利用尾根部注射方式注射塵螨致敏,第十四天時,腹腔注射麻藥,待老鼠麻醉後將老鼠舌頭拉出,以微量滴管將濃度1.0mg/ml塵螨,以50μg/50μl氣管注射方式注入老鼠肺部。第16天測量呼吸道阻力,第17天犧牲。
老鼠致敏模式與上述相同但在實驗第12天至第15天給予PPARγ促進劑或是抑制劑,羅格列酮(PPARγ促進劑)先以DMSO溶解再以生理食鹽水稀釋至5 mg/ml,再以餵食方式給予小鼠5 mg/kg的羅格列酮,而GW9662(PPARγ抑制劑)也是先以DMSO溶解再以生理食鹽水稀釋至0.5 mg/ml以氣管注射方式給予小鼠0.5 mg/kg的GW9662,於第16天測量呼吸道阻力,第17天犧牲。
PPARγ突變鼠或是正常小鼠(C57BL/6JNarl)連續11天以鼻腔給予10 μg塵螨蛋白質萃取物,給予塵螨蛋白質萃取物之前小鼠先以腹腔注射約50 μl(Zoletil 50+Rompom,體積比5:1,5倍稀釋)麻藥,待老鼠麻醉後,再於小鼠鼻孔
左右兩邊各滴入12.5 mg/ml的塵螨蛋白質萃取液,小鼠於第13天測呼吸道阻力,第14天犧牲。
此小鼠的致敏模式與上述相同,但是在致敏之前2週連續每天給予L.gasseri PM-A0005 107 CFU直到致敏最後一天,小鼠於第13天測呼吸道阻力,第14天犧牲。
於小鼠犧牲前一天利用小動物無創呼吸道高反應系統(Unrestrained Whole Body Plethysmography)(BUXCO)進行呼吸道阻力(enhance pulsed)測量,以噴霧的方式給予老鼠0 mg/ml,6.25 mg/ml,12.5 mg/ml,25 mg/ml,50 mg/ml溶於PBS的甲基膽鹼後,收集並利用呼吸道阻力值(Penh value)做為評估標準。
對小鼠之肺部周邊淋巴結及腸繫黏膜淋巴結進行RNA萃取以及RNA微陣列實驗。首先將純化好的RNA先以ND-1000分光光度計OD 260nm進行量化及以Bioanalyzer 2100進行RNA品質確認。將0.5μg的總RNA利用套組進行放大,並以在體外轉錄過程中以Cy3標記。將2μg Cy-標記的cRNA置於碎裂緩衝液(fragmentation buffer)中以60℃三十分鐘作用後,得到平均大小約為50至100核苷酸片段,再將此cRNA置於寡核酸微陣列晶片中以60℃、17小時進行雜交反應。反應結束後清洗並以氮吹槍使之乾燥,再利用安捷倫微陣列掃描儀535 nm進行掃描,將掃描影像以軟體進行結果分析。將RNA基因晶片原始數據以正控制組為基準將數據正規化,再扣除前景值及背景值並根據控制組進行篩選,留下高劑量組或低劑量組差異性大於兩倍的基因,並將具有差異性的基因送至生物反應路徑資料庫暨分析平台進行基因分類分析。此外也挑選出低劑量組別表現量高於控制
組兩倍以上和高劑量組別比控制組表現低的共同基因,以及高劑量組別表現量高於控制組兩倍以上和低劑量組別比控制組表現低的共同基因,送至生物反應路徑資料庫暨分析平台進行基因分類分析。
觀察以餵食方式給予低劑量(1×107 CFU)和高劑量(1×109 CFU)的加氏乳酸桿菌PM-A0005以及控制組(生理食鹽水),對於老鼠是否會有生理健康的影響。結果如圖1所示。根據每天測量小鼠體重發現開始餵食一個禮拜後體重有些微下降,直至給予第一次尾巴注射混和佐劑的塵螨時,體重皆有逐漸上升趨勢。觀察發現在高劑量組別和正控制組之小鼠有因第一次尾巴注射使小鼠誘導產生發炎而影響其體重下降,然而在給予低劑量的組別並未發現體重有下降的趨勢,反而穩定的增加成長。在整個動物實驗過程中並無發現小鼠有毛髮脫落或感染死亡情形,證明了餵食不同劑量的加氏乳酸桿菌PM-A0005並不會影響小鼠健康。
在肺部周邊淋巴結基因晶片結果顯示低劑量組別基因變化高於正控制組兩倍以上共有682個,將此682基因以生物反應路徑資料庫暨分析平台分析(ingenuity pathway analysis,IPA)進行基因分類,結果發現基因涉及了脂質代謝及分子傳送路徑(Molecular transport)等,而高劑量組別基因變化高於控制組兩倍以上共有643個,與組織型態和骨
骼與肌肉系統發育及功能等相關,而兩組別共有349個基因重複。在低劑量組別基因變化低於控制組兩倍以下共有202個,高劑量組別基因變化低於控制組兩倍以下共有249個,重複基因148個。由此結果發現在肺部周邊淋巴結基因具有變化的數量在低劑量組和高劑量組差異不大且基因重複性高達一半以上。
在腸繫黏膜淋巴結基因晶片結果顯示低劑量組別基因變化高於控制組兩倍以上共有765個,IPA分析結果與肺部周邊淋巴結結果類似,主要涉及脂質代謝及分子傳送路徑等,而高劑量組別基因變化高於控制組兩倍以上共有391個,涉及細胞凋亡及細胞週期等,兩組別共有58個基因重複。在低劑量組別基因變化低於控制組兩倍以下共有1275個,高劑量組別基因變化低於控制組兩倍以下共有449個,重複基因共52個。
於RNA基因晶片分析結果發現,給予小鼠加氏乳酸桿菌PM-A0005影響許多與脂質代謝基因的變化,並於其中挑選出潛力基因PPARγ,先以RT-PCR確認PPARγ於肺部周邊淋巴結和腸繫黏膜淋巴結基因變化是否與RNA基因晶片分析結果一致。從結果發現於肺部淋巴結不論給予高劑量或低劑量的加氏乳酸桿菌PM-A0005皆可使PPARγ表現量高於控制組(參見圖2(a))。在腸繫黏膜淋巴結分析結果,與制組相比,若給予小鼠低劑量加氏乳酸桿菌PM-A0005可增加PPARγ表現,但給予高劑量加氏乳酸桿菌PM-A0005則抑制PPARγ表現(參見圖2(b))。
為探討給予過敏氣喘小鼠加氏乳酸桿菌PM-A0005可促
進肺部PPARγ表現,故將未處理的小鼠、控制組小鼠及餵食加氏乳酸桿菌PM-A0005低劑量組小鼠之肺部切片進行PPARγ的組織化學免疫染色,並將經染色之切片以全景組織體細胞定量分析儀進行表現PPARγ細胞之定量分析,結果發現以塵螨致敏的控制組小鼠其肺部PPARγ表現較未處理組小鼠明顯下降,但每天餵食1×107 CFU加氏乳酸桿菌PM-A0005可促進PPARγ表現提升,並較未處理組別高(參見圖3)。
在本實驗所採用的動物模式,於第14天由氣管給予大量的塵螨後會引發呼吸道高度反應性(Airway hyperresponse,AHR),故利用非侵入性方式測量老鼠呼吸道對氣管收縮劑甲基膽鹼的抵抗力,以呼吸道阻力值(Penh value)來評估小鼠的肺部功能是否良好,Penh value越高代表小鼠呼吸道阻力大,其肺部狀態差。由實驗結果發現,正控制組隨著給予甲基膽鹼濃度的提升,而其Penh value也隨之增加,但給予不同劑量加氏乳酸桿菌PM-A0005組別其Penh value與正控制組相比反而有顯著性的下降(參見圖4)。
由實驗結果發現,正控制組與給予GW9662組隨著給予甲基膽鹼濃度的提升,而其呼吸道阻力值(Penh value)也隨之增加,但給予羅格列酮之組則Penh value增加緩慢,且其值明顯比正控制組來的低,代表給予小鼠羅格列酮可改善肺部功能(參見圖5)。
由實驗結果發現,經餵食加氏乳酸桿菌PM-A0005後,可減緩野生型小鼠之呼吸道高度反應,但PPARγ P465L突變小鼠則隨著甲基膽鹼濃度之提升,其呼吸道阻力值(Penh value)也隨之增加,顯示加氏乳酸桿菌無法改善PPARγ P465L突變小鼠之呼吸道高度反應(參見圖6)。
前文之所述以及實施方式可藉由附加之圖式達到更好的說明效果。為了加強本發明之說明,將適當的實施例之圖式列舉於此。
圖1係為餵食加氏乳酸桿菌PM-A0005小鼠之體重變化圖(測試小鼠數目各為5)。
圖2係為以基因晶片及RT-PCR分析之餵食加氏乳酸桿菌PM-A0005小鼠之肺部周邊淋巴結及腸繫黏膜淋巴結之PPARγ表現比較圖。圖2(a)為肺部周邊淋巴結之PPARγ表現比較圖。圖2(b)為腸繫黏膜淋巴結之PPARγ表現比較圖。
圖3係為以組織化學免疫染色分析之小鼠肺部細胞之PPARγ表現比較圖。
圖4係為在給予小鼠不同劑量之加氏乳酸桿菌PM-A0005後,以甲基膽鹼誘發氣管收縮而測量小鼠呼吸道阻力之結果圖,其中呼吸道阻力係以Penh value表示。
圖5係為在給予小鼠PPARγ促進劑羅格列酮與PPARγ抑制劑(GW9662)之後,以甲基膽鹼誘發氣管收縮而測量小鼠呼吸道阻力之結果圖,其中呼吸道阻力係以Penh value表示。
圖6係為在給予PPARγ P465L突變小鼠及野生小鼠加氏乳酸桿菌PM-A0005後,以甲基膽鹼誘發氣管收縮而測量小
鼠呼吸道阻力之結果圖,其中呼吸道阻力係以Penh value表示。
Claims (22)
- 一種加氏乳酸桿菌(Lactobacillus gasseri)PM-A0005菌株(台灣新竹食品工業發展研究所寄存編號BCRC 910304)用於製備增進PPARγ表現之組合物之用途。
- 如申請專利範圍第1項之用途,其中該組合物係含有增進PPARγ表現之有效量的加氏乳酸桿菌PM-A0005菌株,且該組合物係經由口服投予至一個體。
- 如申請專利範圍第2項之用途,其中該有效量以該個體之體重(kg)計為1×108 CFU/kg/天~1×109 CFU/kg/天。
- 如申請專利範圍第3項之用途,其中該有效量以該個體之體重(kg)計為5×108 CFU/kg/天~6×108 CFU/kg/天。
- 如申請專利範圍第4項之用途,其中該有效量以該個體之體重(kg)計約為5.5×108 CFU/kg/天。
- 一種用於增進PPARγ表現之組合物,其係包含增進PPARγ表現有效量的加氏乳酸桿菌(Lactobacillus gasseri)PM-A0005菌株(台灣新竹食品工業發展研究所寄存編號BCRC 910304)。
- 如申請專利範圍第6項之組合物,其係以口服投予至一個體。
- 如申請專利範圍第6或7項之組合物,其係為一種醫藥組合物。
- 如申請專利範圍第6或7項之組合物,其係為一種食品組合物。
- 如申請專利範圍第7項之組合物,其中該有效量以該個體之體重(kg)計為1×108 CFU/kg/天~1×109 CFU/kg/天。
- 如申請專利範圍第10項之組合物,其中該有效量以該個體之體重(kg)計為5×108 CFU/kg/天~6×108 CFU/kg/天。
- 如申請專利範圍第11項之組合物,其中該有效量以 該個體之體重(kg)計約為5.5×108 CFU/kg/天。
- 如申請專利範圍第6或7項之組合物,其係可增進該個體肺部之PPARγ表現。
- 如申請專利範圍第13項之組合物,其係可增進該個體肺部淋巴結之PPARγ表現。
- 如申請專利範圍第6或7項之組合物,其係可增進該個體腸部之PPARγ表現。
- 如申請專利範圍第15項之組合物,其係可增進該個體腸繫黏膜淋巴結之PPARγ表現。
- 如申請專利範圍第7項之組合物,其中該組合物用於治療脂肪疾病。
- 如申請專利範圍第7項之組合物,其中該組合物用於治療代謝疾病。
- 如申請專利範圍第18項之組合物,其中該組合物用於治療糖尿病。
- 如申請專利範圍第18項之組合物,其中該組合物用於治療心血管疾病。
- 如申請專利範圍第18項之組合物,其中該組合物用於治療高血壓。
- 如申請專利範圍第7項之組合物,其中該組合物用於治療過敏性氣喘。
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