(54) СПОСОБ ВЫРАЩИВАНИЯ ДРОЖЖЕЙ CANDIDA UTILIS Предлагаемый способ заключаетс в следующем . К питательной среде, содержащей 2,5- 7,0% сахара, добавл ют вещества, образованные в процессе лимоннокислого брожени на мелассе с участием гриба Aspergillus niger. Высокие выходы дрожжей можно получить, добавл к питательной среде с сахаром 40- 60 об. % культуральной жидкости после удалени лимонной кислоты осаждением или мицелий гриба, полученный в процессе брожени или после его окончани . Мицелий можно нспользовать как в необработанном виде, так и предварительно высущив его в токе воздухе при 60°С. Целесообразно добавл ть 5-15% мицели гриба Aspergillus niger в расчете на мицелий, содержащий 25% сухого вещества. Удобно комбинировать культуральную жидкость после осаждени лимонной кислоты с мицелием Aspergillus niger причем добавки обоих этих веществ вл ютс сравнительно низкими. Соотношение культуральной жидкости и грибного мицели можно меп ть по усмотрению . Предлагаемый способ по сн етс примерами его выполнени . Пример 1. Питательную среду готов т следующим образом. В 2 л воды раствор ют 200 г сахара-рафинада , 32 г хлористого аммони , 8,4 г кали сернокислого, 1,8 г магни сернокислого и 17 г натри фосфорнокислого. К раствору добавл ют 2 л культуральной жидкости, полученной после лимоннокислого брожени . Довод т рН до 4,5. Дл поддержани рН на оптимальном уровне в процессе выращивани дрожжей добавл ют аммиачную воду. Затем полученную питательную среду кип т т в течение 20 минут. В среду добавл ют 32 г прессованных дрожжей Candida utilis (или 8 г в расчете на сухой вес). Выращивание осуществл ют приточным способом, в аппарате Финка в течение 8- 9 час. После окончани процесса выращивани дрожжи удал ют центрифугированием, промывают их, отфильтровывают при пониженном давлении (до получени 25% сухого вещества ) и взвешивают. Выход сухого вещества составл ет 115 г. Пример 2. Состав питательного раствора и услови выращивани те же, что в примере 1. Пачина с 8-го час и далее процесс ведут непрерывно, причем удаление среды с дрожжами и добавлением свежего питательного раствора составл ет каждый час 17% общего объема (4 л), т. е. 0,68 л. Врем генерации дрожжей составл ет 2,8 час. Каждые 6 час происходит замена всего объема среды в ферментере, а так как длитель5 10 15 0 25 39 35 40 45 50 55 60 65 ность опыта составл ет 74 час, то, следовательно , субстрат заменен 10 раз. Общий выход дрожжей составл ет 1270 г в расчете на сухое вещество. П р и м ер 3. К 2,8 л воды добавл ют 1,2 л культуральной жидкости носле осаждени лимонной кислоты, 200 г сахара-рафинада, все минеральные соли, указанные в примере 1, и 0,4% кукурузного экстракта (60% сухого веса). Процесс выращивани провод т таким же способом, как в примере 1. Выход дрожжей составл ет 105 г по сухому весу. Если к тому же питательному раствору добавл ют 1 л культуральной жидкости после лимоннокислого брожени и 1,75% дрожжевого автолизата (25% сухого вещества), то выход сухих дрожжей составл ет 117 г. Пример 4. К4л минеральной питательной среды (состав см. пример 1) добавл ют 400 г влажного или 100 г высушенного мицели гриба Aspergillus niger. Питательную среду кип т т 20 мин. МицеЛИЙ после охлаждени среды удал ют. В такой среде выращивают Candida utilis как это описано в примере 1. Выход сухих дрожжей составл ет 105 г. Пример 5. К4л минеральной среды (см. пример 4) добавл ют 50 г сухого грибного мицели и 40 г соевой муки. Раствор кип т т как обычно 20 мин. После охлаждени раствор фильтруют. Па фильтрате выращивают дрожжи Candida utilis как это описано в примере 1. Выход сухих дрожжей составл ет 106 г. Пример 6. Готов т 4 л раствора мелассы , который содержит 5% сахара, добавл ют необходимые минеральные соли, т. е. 32 г хлористого аммоии (или 40 г сернокислого аммони ), 3,6 г сернокислого магни , 6 г фосфорной кислоты (80%). рП довод т серной или сол ной кислотой до 4,5. К раствору добавл ют 50 г сухого грибного мицели после лимоннокислого брожени . Смесь кип т т 20 мин- и после охлаждени фильтруют. После выращивани дрожжей получают 108 г сухой биомассы. В опыте, проведенном тем же способом, но без добавлени грибного мицели , выход сухих дрожжей составл ет 73 г. Пример 7. Питательную среду готов т из культуральной жидкости, полученной после первого сепарировани дрожжей, которые выращивали в минеральной среде с добавлением культуральной жидкости после лимоннокислого брожени . К 4 л этого )аствора добавл ют 200 г са .хара-рафииада и минеральные соли (см. пример 6). Получают 64 г сухих дрожжей, тогда как при использовании чистой воды выход сухих дрожжей составл ет только 26 г. Это означает, что в культуральной жидкости после выращивани дрожжей содержитс такое количество стимул торов роста, которого достаточно дл стимулировани биосинтеза биомассы с 26 г (в чистой воде) до 64 г.(54) METHOD FOR CREATING YEARS CANDIDA UTILIS The proposed method is as follows. To the nutrient medium containing 2.5-7.0% of sugar, substances formed during citrate fermentation in molasses with the participation of the fungus Aspergillus niger are added. High yields of yeast can be obtained by adding to the nutrient medium with sugar 40- 60 vol. % culture liquid after citric acid removal by precipitation or fungal mycelium obtained during the fermentation process or after its completion. Mycelium can be used both in its raw form and after having previously dried it in a stream of air at 60 ° C. It is advisable to add 5-15% of the mycelium of the fungus Aspergillus niger based on the mycelium containing 25% of dry matter. It is convenient to combine the culture fluid after precipitating citric acid with Aspergillus niger mycelium, the additives of both of which are relatively low. The ratio of the culture fluid to the fungal mycelium can be discretionary. The proposed method is illustrated by examples of its implementation. Example 1. The nutrient medium is prepared as follows. 200 g of refined sugar, 32 g of ammonium chloride, 8.4 g of potassium sulphate, 1.8 g of magnesium sulphate and 17 g of sodium phosphate are dissolved in 2 l of water. To the solution was added 2 L of culture liquid obtained after citric acid fermentation. Adjust pH to 4.5. To maintain the pH at an optimum level, ammonia water is added during the growth of the yeast. The resulting nutrient medium is then boiled for 20 minutes. 32 g of pressed Candida utilis yeast (or 8 g per dry weight) is added to the medium. The cultivation is carried out by the input method, in the Fink apparatus for 8-9 hours. After the end of the growing process, the yeast is removed by centrifugation, washed with it, filtered off under reduced pressure (to obtain 25% dry matter) and weighed. The dry matter yield is 115 g. Example 2. The composition of the nutrient solution and the growing conditions are the same as in Example 1. From the 8th hour onwards, the process is carried out continuously, with the medium being removed with yeast and adding fresh nutrient solution each hour 17% of the total volume (4 l), i.e. 0.68 l. Yeast generation time is 2.8 hours. Every 6 hours, the whole medium in the fermenter is replaced, and since the duration 5 10 15 0 25 39 35 40 45 50 55 60 65 of the experiment is 74 hours, therefore, the substrate is replaced 10 times. The total yeast yield is 1270 g per dry matter. Example 3. To 2.8 liters of water was added 1.2 liters of culture liquid, including precipitation of citric acid, 200 g of refined sugar, all mineral salts indicated in Example 1, and 0.4% of corn extract (60 % of dry weight). The growing process is carried out in the same manner as in Example 1. The yield of yeast is 105 grams by dry weight. If, to the same nutrient solution, 1 l of culture liquid is added after citric acid fermentation and 1.75% yeast autolysate (25% dry matter), the yield of dry yeast is 117 g. Example 4. K4l of mineral nutrient medium (for composition see example 1) 400 g wet or 100 g dried mycelium of Aspergillus niger fungus is added. The nutrient medium is boiled for 20 minutes. Mycelium is removed after cooling. Candida utilis is grown in such an environment as described in Example 1. The yield of dry yeast is 105 g. Example 5. K4 of mineral medium (see Example 4) is added 50 g of dry mushroom mycelium and 40 g of soy flour. The solution is boiled as usual for 20 minutes. After cooling, the solution is filtered. Candida utilis yeast is grown in the filtrate as described in Example 1. The yield of dry yeast is 106 g. Example 6. Prepare 4 liters of molasses solution, which contains 5% sugar, add the necessary mineral salts, i.e. 32 g of chloride ammonium (or 40 g of ammonium sulphate), 3.6 g of magnesium sulphate, 6 g of phosphoric acid (80%). SAR is adjusted to 4.5 with sulfuric or hydrochloric acid. 50 g of dry fungal mycelium are added to the solution after citric acid fermentation. The mixture was boiled for 20 minutes and, after cooling, filtered. After growing the yeast, 108 g of dry biomass is obtained. In the experiment conducted in the same way, but without the addition of the fungal mycelium, the yield of dry yeast is 73 g. Example 7. A nutrient medium is prepared from the culture fluid obtained after the first separation of the yeast that was grown in mineral medium with the addition of the culture fluid after citric acid fermentation. To 4 liters of this solution, 200 g of sarafatiad ca. and mineral salts are added (see Example 6). 64 g of dry yeast are obtained, whereas when using pure water, the yield of dry yeast is only 26 g. This means that the culture fluid after growing the yeast contains such an amount of growth stimulants that is sufficient to stimulate the biosynthesis of biomass from 26 g water) to 64 g