SU439514A1 - Способ получени литических ферментов - Google Patents

Description

1

Изобретение относитс  к микробиологической промышленности, точнее к способу получени  литических ферментов, используемых в пищевой промышленности, медицине, сельском хоз йстве.

Известен способ получени  литических ферментов путем культивировани  Actinomyces на питате тьной среде, содержащей источники углерода, азота и минеральные соли .

С целью увеличени  активности литических ферментов по предлагаемому способу культивирование осуществл ют Actinomyces, относ щихс  к виду cinerosus. При этом из Actinomyces , cinerosus. используют щтамм За.

Предлагаемый штамм Actinomyces cinerosus шт. 3 а. выделен в 1971 г. из торф поболотной почвы. Выделение провод на среде СР-1 (г/л) с дрожжами рода Candida в качестве единственного источника углерода при рН 7,0 и при 28-ЗОС. Выделенную культуру подвергают многократной очистке путем рассева на среде СР-1, хран т выделенный штамм на среде СР-1.

Штамм имеет следующую характеристику. Морфологи .

Воздушный мицелий беловато-серый. Культура бесцветна , в среду пигмент не выдел ет . Спороносцы спиральные, раст нутые

с 3-5 завитками. Споры овальные с гладкой

поверхностью.

Культуральные и физиологические свойства.

Среды СР-1, Чапека, на картофеле - рост хороший, воздушный мицелий беловато-серый. На крахмал-аммиачном агаре рост хороший, воздушный мицелий беловато-серый. Желатину разжижает быстро, молоко пентонизирует, на клетчатке растет умеренно, нитратов не восстанавливает, крахмал гидролизует умеренно .

Ассимилирует глюкозу, маннозу, сахарозу, галактозу, крахмал. Не усваивает арабинозу, мальтозу, фруктозу, инозит, лактозу, рамнозу, маннит, цитрат натри , ацетат натри .

На предлагаемой питательной среде следующего состава, %:

Соева  мука1

Пекарские дрожжи0,25

NH4C10,06

К2НРО40,25

Mg-S040,01

Дрожжевой автолизат0,01

образует литические ферменты, лизирующие кормовые дрожжи Candida utilis на 60-65% при разведении культуральной жидкости в 3 раза.

Способ осуществл ют следующим образом. В водопроводную воду внос т следующие компоненты, %:

Соевую муку1

Пекарские дрожжи0,25

Двузамещенный фосфорнокислый калий0,25

Хлористый аммоний0,06

Сернокислый магний0,01

Дрожжевой автолизат0,01.

Полученную питательную среду стерилизуют и в качестве посевного материала используют четырехсуточную культуру Actinomyces cinerosus штамм За, выращенную на агаризованной среде СР-1, г/л:

СаСОз0,7

KNOs0,7

MgSO40,35

NaCl0,35

FeSO4Следы

Агар18,00

Культивирование антиномицета ведут глубинным способом при 28-30°С в течение 30-42 час. При этом среда аэрируетс  6-7-ю объемами воздуха на 1 объем питательной среды. После культивировани  мицелий отдел ют центрифугированием при 3000 об/мин. Литическую активность ферментов определ ют следующим образом.

К 1 мл суспензии дрожжей прибавл ют 1 мл трис-буфера 0,067 М при рН 7,0 и 2 мл культуральной жидкости или ферментного раствора . Исходную оптическую плотность реакционной смеси довод т до экстинции 0,7-0,8 и определ ют ее изменение на ФЭК-56, при л 537 мм в кювете с рассто нием между стенками 1 мм после инкубации при 40°С в течение 1 час.

Активность литических ферментов выражают в процентах снижени  оптической плотности (ОД) по формуле:

ОД нач- ОД кон

од

-X 100

од „ач

Предмет изобретени 

Claims (2)

1.Способ получени  литических ферментов путем культивировани  Actinomyces на питательной среде, содержащей источники углерода , азота и минеральные соли, отличающийс  тем, что, с целью увеличени  активности ферментов, культивирование осуществл ют Actinomyces, относ щихс  к виду cinerosus.

2.Способ по п. I, отличающийс  тем, что из Atinomyces cinerosus используют штамм За.