SU344734A1 - METHOD OF OBTAINING L-LYSIN - Google Patents

Description

Изобретение относитс  к микробиологии.This invention relates to microbiology.

Известен .снособ получени  L-лизина путем глубинного выращивани  его продуцента Brevibacterium sp. 22 на питательной среде , содержащей сахар, азотные, фосфорные соли и стимул торы роста, стабилизации культуральиой жидкости нетоксичной кислотой , например серной или сол ной, упаривани  стабилизированной жидкости и высушивани  до порошкообразного состо ни .A known method for producing L-lysine by deep growing it, its producer Brevibacterium sp. 22 on a nutrient medium containing sugar, nitrogenous, phosphoric salts and growth stimulants, stabilization of the culture fluid with a non-toxic acid, such as sulfuric or hydrochloric, evaporation of the stabilized fluid, and drying to a powder.

Полученный концентрат лизина содержит 12-20% кристаллической аминокислоты.The resulting lysine concentrate contains 12-20% crystalline amino acid.

Однако кормовой концентрат лизина, полученный по известному способу, гигроскопичен , что затрудн ет его дозирование.However, the lysine feed concentrate obtained by a known method is hygroscopic, which makes it difficult to dose it.

Основной причиной гигроскопичности концентрата  вл ютс  остаточные сахара, где концентраци  достигает 5-10%.The main reason for the hygroscopicity of the concentrate is the residual sugars, where the concentration reaches 5-10%.

Прн обезвоживании, а также в сухом кормовом концентрате лизина происход т сахаро-аминные реакции, которые снижают концентрацию лизина и других аминокислот, присутствующих в небольших количествах.In dehydration, as well as in the dry lysine feed concentrate, sugar-amine reactions occur which reduce the concentration of lysine and other amino acids that are present in small quantities.

Цель изобретени  - интенсификаци  процесса биосиитеза, снижение гигроскопичности полученного концентрата лизина, а также снижение потерь лизина в процессе выращивани  после ассимил ции продуцентом Сахаров до получени  остаточной концентрации их, преимущественно равной 3%.The purpose of the invention is to intensify the process of biosiitis, reduce the hygroscopicity of the lysine concentrate obtained, as well as reduce the loss of lysine in the process of cultivation after the assimilation by the sugar producer to a residual concentration of 3%.

Это достигаетс  тем, что в культуральную жидкость ввод т в стерильных услови х культуру микроорганизмов Trichosporon М-19, не ассимилирующую лизин, в количестве 4-12% по объему культуральной жидкости .This is achieved by introducing a Trichosporon M-19 microorganism culture that does not assimilate lysine in an amount of 4-12% by volume of the culture fluid into the culture fluid under sterile conditions.

Далее провод т совместное культивирование этих культур до полного усвоени  ими остаточных Сахаров.Further, these crops are co-cultivated until they fully assimilate the residual sugars.

Совместное культивирование Trichosporon cutaneum М-19 и Brevibacterium .sp. 22 производитс  до полного исчезновени  в культуральной жидкости остаточных Сахаров.Co-cultivation of Trichosporon cutaneum M-19 and Brevibacterium .sp. 22 is produced until complete disappearance of residual sugars in the culture fluid.

Дл  повышени  выхода и концентрацииTo increase yield and concentration

L-лпзина в пичательиую среду можно добавить а- -диаминопимелиновую кислоту. Полученную на этой среде культуральную жидкость , содержащую Z-лизин, стабилизируют нетоксичной кислотой, например сол ной илиL-lpzina in pichatelnuyu medium you can add a-diaminopimelic acid. The culture fluid obtained on this medium containing Z-lysine is stabilized with a non-toxic acid, for example hydrochloric or

серной. Кроме того, в нее ввод т соли сернистой кислоты, например бисульфат натри  (0,1-0,2% от всего количества жидкости).sulfuric. In addition, salts of sulfurous acid, for example sodium bisulfate (0.1-0.2% of the total amount of the liquid) are introduced into it.

После этого стабилизированную жидкость (рН 3-5) упаривают в выпарной установкеAfter that, the stabilized liquid (pH 3-5) is evaporated in an evaporator

до содержани  сухих веществ 30-40%, а затем высушивают па распылительпой сушилке до порошкообразного состо ни  или после добавлени  наполнител  (пшеничных отрубей ) на конвективных сушилках, напримерto a solids content of 30–40%, and then dried on a spray dryer to a powdered state or after adding filler (wheat bran) on convective dryers, for example

Высушенный последним способом материал измельчают на микромельнице и расфасовывают в герметичную упаковку, например в полиэтиленовые мешки.The material that is dried by the latter method is ground in a micromill and packaged in an airtight package, for example, in plastic bags.

Дл  получени  кристаллического Z-лизина , пригодного дл  пищевых и лечебных целей , культуральную жидкость центрифугируют и фильтруют. После этого ее обрабатывают на колонке монообмениыми смолами, например сульфокатиониюм СДВ-3 или КУ-2 Е-, аммонийной форме при рН культуральной жидкости 7.To obtain crystalline Z-lysine suitable for nutritional and therapeutic purposes, the culture fluid is centrifuged and filtered. After that, it is treated on a column with mono-exchange resins, for example, sulfonic cations SDV-3 or KU-2 E-, ammonium form at pH of the culture fluid 7.

Дл  удалени  неадсорбированных аминокислот и примесей среды колонку после адсорбции промывают водой, L-лизин элюируют 2N раствором аммиака .Затем элюат упаривают в вакууме до сиропообразного состо ни  и нейтрализуют сол ной кислотой до рН 4,9.To remove unabsorbed amino acids and medium impurities, the adsorption column is washed with water, L-lysine is eluted with 2N ammonia solution. Then the eluate is evaporated in vacuo to a syrup and neutralized with hydrochloric acid to pH 4.9.

Полученный L-лизин-сол ную кислоту кристаллизируют из раствора при добавлении трех объемо1В спирта. После этого L-лизин-сол ную кислоту отдел ют от маточника, перераствор ют в малом объеме воды, обрабатывают небольшим количеством угл  и перекристаллизовывают . Кормовой концентрат лизина, полученный предлагаемым способом содержит L-лизина 16-22%, причем его гигроскопичность уменьшилась более чем в два раза поThe resulting L-lysine-hydrochloric acid is crystallized from the solution upon the addition of three volumes of alcohol. Thereafter, L-lysine hydrochloric acid is separated from the mother liquor, redissolved in a small volume of water, treated with a small amount of charcoal and recrystallized. The feed concentrate of lysine obtained by the proposed method contains L-lysine 16-22%, and its hygroscopicity has decreased more than twice

сравнению с концентратом, полученным известным способом.compared with the concentrate obtained in a known manner.

Предмет изобретени  Subject invention

Claims (2)

1.Способ получени  L-дизина путем глубинного выращивани  его продуцента Вгеvibacterium sp. 22 на питательной среде, содержащей сахар, азотные, фосфорные соли и стимул торы роста, стабилизации культуральной жидкости нетоксичной кислотой, например серной, сол ной, упаривани  стабилизированной жидкости и высушивани  до порошкообразного состо ни , отличающийс  тем, что, с1. A method for producing L-disin by deep growing it with the producer Вgevibacterium sp. 22 on a nutrient medium containing sugar, nitric, phosphoric salts and growth promoters, stabilizing the culture fluid with a non-toxic acid, such as sulfuric, hydrochloric, evaporating the stabilized fluid and drying to a powder, characterized in that целью интенсификации процесса биосинтеза, снижени  гигроскопичности полученного концентрата лизина, а также снижени  потерь лизина в процессе выращивани  после ассимил ции продуцентом Сахаров до получени  остаточной концентрации их, преимущественно равной 3%, в культуральную жидкость ввод т в стерильных услови х культуру микроорганизма , не ассимилирующую лизин, и провод т совместное культивирование этих культур доthe purpose of intensifying the process of biosynthesis, reducing the hygroscopicity of the lysine concentrate obtained, as well as reducing the loss of lysine during the cultivation process after assimilation by the sugar producer to obtain a residual concentration of mostly 3%, culture of the microorganism that does not assimilate lysine is injected into the culture fluid under sterile conditions , and these crops are co-cultivated until полного усвоени  ими остаточных Сахаров.full assimilation of residual sugars. 2.Способ по п. 1, отличающийс  тем, что в качестве культуры микроорганизмов, не ассимилирующей лизин, примен ют Trichosporon cutaneum М-19 в количестве 4-12% по объему2. The method according to claim 1, characterized in that Trichosporon cutaneum M-19 in an amount of 4-12% by volume is used as a culture of microorganisms that do not assimilate lysine. культуральной жидкости.culture fluid.